CN104388505A - 一种利用活跃链霉菌发酵生产那西肽的方法 - Google Patents

一种利用活跃链霉菌发酵生产那西肽的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104388505A
CN104388505A CN201410681670.4A CN201410681670A CN104388505A CN 104388505 A CN104388505 A CN 104388505A CN 201410681670 A CN201410681670 A CN 201410681670A CN 104388505 A CN104388505 A CN 104388505A
Authority
CN
China
Prior art keywords
nosiheptide
culture
fermentation
actuosus
tank
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201410681670.4A
Other languages
English (en)
Inventor
金京勋
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
SOOCHOW KH BIO SCIENCE&TECHNOLOGY Co Ltd (KHB)
Original Assignee
SOOCHOW KH BIO SCIENCE&TECHNOLOGY Co Ltd (KHB)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by SOOCHOW KH BIO SCIENCE&TECHNOLOGY Co Ltd (KHB) filed Critical SOOCHOW KH BIO SCIENCE&TECHNOLOGY Co Ltd (KHB)
Priority to CN201410681670.4A priority Critical patent/CN104388505A/zh
Publication of CN104388505A publication Critical patent/CN104388505A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开一种利用活跃链霉菌发酵生产那西肽的方法，包括在斜面培养基上进行孢子培养、在种子罐培养基上进行菌种培养和在发酵罐培养基上进行发酵三个步骤，并对各步骤培养或发酵参数进行了优化。与现有技术相比，本发明优化了活跃链霉菌的活化，通过不同阶段培养活跃链霉菌，提高其生物活性。那西肽收率提高60％以上。

Description

一种利用活跃链霉菌发酵生产那西肽的方法
技术领域
本发明属于微生物发酵领域，涉及一种利用活跃链霉菌发酵生产那西肽的方法。
背景技术
那西肽是一种带有5个座哇环的多肽类抗生素，其分子式为C51H43N13O12S6，分子量为1222，那西肽为黄绿色物质，呈粉末状或细针状结晶，熔点为310～320℃(伴随分解)。那西肽可溶于氯仿、毗陡、二甲基酸胺、二甲基亚矾，微溶于甲醇，乙醇、乙酸乙酯和苯，不溶于水。那西肽以其相对安全性及良好的应用效果符合当前人们对饲料添加剂的要求，是一种比较理想的饲用抗生素换代品。目前，欧盟和日本已批准并广泛使用。
那西肽是用微生物培养方法生产的，那西肽产生菌主要有活跃链霉菌(streptomyesactuosus)、抗生素链霉菌(S.antibiotics)和青灰色链霉菌(S.glaucogriseus)，其中以活跃链霉菌为最好。
但是，现有的微生物发酵方法生产那西肽，生产成本高、产率低。
发明内容
鉴于此，本发明目的在于提供一种产率高的利用活跃链霉菌发酵生产那西肽的方法。
为解决以上技术问题，本发明提供的技术方案是，提供一种利用活跃链霉菌发酵生产那西肽的方法，包括以下步骤：
1)使用无菌接种针挖取适量砂土接种至斜面培养基上培养数天，向培养成熟的孢子斜面加入无菌水，使用无菌接种针轻轻刮下孢子；培养温度为28℃，湿度40-60％；
2)向种子罐培养基上接种步骤1)制备得到的孢子繁殖菌体，接种量22亿，通气比0.9，罐压0.04Mp，溶氧控制在30％，当菌浓达到30％进行移种，移种周期25h，移种pH值为6.8；培养温度30℃，
3)向发酵罐培养基上接种步骤2)繁殖的菌体，接种量10％，通气比0.8，罐压0.04Mp，全程流加氨水来调节pH值并补充氮源，通过调节搅拌转速和通气比来控制溶氧，放罐周期为180-220h，发酵结束，即得到那西肽混悬液。
进一步地，所述斜面培养基的组分为：可溶性淀粉2.1g/100mL，K2HPO40.08g/100mL，MgSO40.06g/100mL，FeSO40.003g/100mL，NaCl0.03g/100mL，KNO30.02g/100mL，琼脂2.0g/100mL。
进一步地，所述发酵罐培养基的组分为：可溶性淀粉6.0g/100mL，黄豆饼粉3.5g/100mL，(NH4)2SO41.0g/100mL，CaCO31.0g/100mL，K2HPO40.08g/100mL，NaCl0.10g/100mL，豆油0.8g/100mL，消沫剂0.05g/100mL。
进一步地，所述种子罐培养基的组分为：葡萄糖2g/100mL，黄豆饼粉2.5g/100mL，(NH4)2SO40.2g/100mL，MgSO40.03g/100mL，碳酸钙CaCO30.4g/100mL，K2HPO40.02g/100mL，豆油0.3g/100mL，消沫剂0.02g/100mL。
与现有技术相比，上述技术方案中的一个技术方案具有如下优点：
1、本发明优化了活跃链霉菌的活化，通过不同阶段培养活跃链霉菌，提高其生物活性。
2、本发明针对不同阶段，配置了更加专一的培养基，为活跃链霉菌的生长提供更加合理的碳源、氮源、以及金属离子，充分保障菌体的正常生产和代谢。
3、本发明方法那西肽收率提高60％以上。
具体实施方式
实施例1
本实施例所用活跃链霉菌来源为市购。
按照以下配方制作培养基：斜面培养基、种子罐培养基和发酵罐培养基。
斜面培养基：可溶性淀粉2.1g/100mL，K2HPO40.08g/100mL，MgSO40.06g/100mL，FeSO40.003g/100mL，NaCl0.03g/100mL，KNO30.02g/100mL，琼脂2.0g/100mL；
种子罐培养基：葡萄糖2g/100mL，黄豆饼粉2.5g/100mL，(NH4)2SO40.2g/100mL，MgSO40.03g/100mL，碳酸钙CaCO30.4g/100mL，K2HPO40.02g/100mL，豆油0.3g/100mL，消沫剂0.02g/100mL；
发酵罐培养基：可溶性淀粉6.0g/100mL，黄豆饼粉3.5g/100mL，(NH4)2SO41.0g/100mL，CaCO31.0g/100mL，K2HPO40.08g/100mL，NaCl0.10g/100mL，豆油0.8g/100mL，消沫剂0.05g/100mL。
使用无菌接种针挖取适量砂土接种至斜面培养基上培养8天，向培养成熟的孢子斜面加入无菌水，使用无菌接种针轻轻刮下孢子；培养温度为28℃，湿度40-60％。
向种子罐培养基上接种步骤1)制备得到的孢子繁殖菌体，接种量22亿，通气比0.9，罐压0.04Mp，溶氧控制在30％，当菌浓达到30％进行移种，移种周期25h，移种pH值为6.8；培养温度30℃。
向发酵罐培养基上接种步骤2)繁殖的菌体，接种量10％，通气比0.8，罐压0.04Mp，全程流加氨水来调节pH值并补充氮源，通过调节搅拌转速和通气比来控制溶氧，放罐周期为180-220h，发酵结束，即得到那西肽混悬液。检测那西肽效价为2600U/mL，相比与现有技术1620U/mL提高60.5％。

Claims (4)

1.一种利用活跃链霉菌发酵生产那西肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)使用无菌接种针挖取砂土接种至斜面培养基上培养，向培养成熟的孢子斜面加入无菌水，使用无菌接种针刮下孢子；培养温度为28℃，湿度40-60％；
2)向种子罐培养基上接种步骤1)制备得到的孢子繁殖菌体，接种量22亿，通气比0.9，罐压0.04Mp，溶氧控制在30％，当菌浓达到30％进行移种，移种周期25h，移种pH值为6.8；培养温度30℃，
3)向发酵罐培养基上接种步骤2)繁殖的菌体，接种量10％，通气比0.8，罐压0.04Mp，全程流加氨水来调节pH值并补充氮源，通过调节搅拌转速和通气比来控制溶氧，放罐周期为180-220h，发酵结束，得到那西肽混悬液。
2.根据权利要求1所述的利用活跃链霉菌发酵生产那西肽的方法，其特征在于，所述斜面培养基的组分为：可溶性淀粉2.1g/100mL，K2HPO40.08g/100mL，MgSO40.06g/100mL，
FeSO40.003g/100mL，NaCl0.03g/100mL，KNO30.02g/100mL，琼脂2.0g/100mL。
3.根据权利要求1所述的利用活跃链霉菌发酵生产那西肽的方法，其特征在于，所述发酵罐培养基的组分为：可溶性淀粉6.0g/100mL，黄豆饼粉3.5g/100mL，(NH4)2SO41.0g/100mL，CaCO31.0g/100mL，K2HPO40.08g/100mL，NaCl0.10g/100mL，豆油0.8g/100mL，消沫剂0.05g/100mL。
4.根据权利要求1所述的利用活跃链霉菌发酵生产那西肽的方法，其特征在于，所述种子罐培养基的组分为：葡萄糖2g/100mL，黄豆饼粉2.5g/100mL，(NH4)2SO40.2g/100mL，MgSO40.03g/100mL，碳酸钙CaCO30.4g/100mL，K2HPO40.02g/100mL，豆油0.3g/100mL，消沫剂0.02g/100mL。
CN201410681670.4A 2014-11-24 2014-11-24 一种利用活跃链霉菌发酵生产那西肽的方法 Pending CN104388505A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410681670.4A CN104388505A (zh) 2014-11-24 2014-11-24 一种利用活跃链霉菌发酵生产那西肽的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410681670.4A CN104388505A (zh) 2014-11-24 2014-11-24 一种利用活跃链霉菌发酵生产那西肽的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN104388505A true CN104388505A (zh) 2015-03-04

Family

ID=52606462

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410681670.4A Pending CN104388505A (zh) 2014-11-24 2014-11-24 一种利用活跃链霉菌发酵生产那西肽的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104388505A (zh)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104826091A (zh) * 2015-05-07 2015-08-12 新疆天富阳光生物科技有限公司 一种那西肽含量为12%的那西肽预混剂的制备方法
CN105695351A (zh) * 2015-12-29 2016-06-22 西藏天虹科技股份有限责任公司 活跃链霉菌lb-16及利用其制备那西肽的方法
CN106319005A (zh) * 2015-07-09 2017-01-11 牡丹江佰佳信生物科技有限公司 一种可提高那西肽产量的发酵培养基及培养方法
CN106319004A (zh) * 2015-07-09 2017-01-11 牡丹江佰佳信生物科技有限公司 一种可提高那西肽产量的发酵培养基及培养方法
CN107868809A (zh) * 2016-09-28 2018-04-03 牡丹江佰佳信生物科技有限公司 一种发酵生产那西肽的方法及发酵培养基
CN108949871A (zh) * 2018-08-07 2018-12-07 河北圣雪大成制药有限责任公司 一种发酵生产硫肽类抗生素那西肽的发酵培养基及其培养方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102965420A (zh) * 2012-11-20 2013-03-13 江西兴鼎科技有限公司 一种发酵生产多肽类抗生素那西肽的方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102965420A (zh) * 2012-11-20 2013-03-13 江西兴鼎科技有限公司 一种发酵生产多肽类抗生素那西肽的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
夏俊等: ""培养条件对活跃链霉菌合成那西肽的影响"", 《安徽工程大学学报》 *

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104826091A (zh) * 2015-05-07 2015-08-12 新疆天富阳光生物科技有限公司 一种那西肽含量为12%的那西肽预混剂的制备方法
CN104826091B (zh) * 2015-05-07 2017-11-24 新疆天富阳光生物科技有限公司 一种那西肽含量为12%的那西肽预混剂的制备方法
CN106319005A (zh) * 2015-07-09 2017-01-11 牡丹江佰佳信生物科技有限公司 一种可提高那西肽产量的发酵培养基及培养方法
CN106319004A (zh) * 2015-07-09 2017-01-11 牡丹江佰佳信生物科技有限公司 一种可提高那西肽产量的发酵培养基及培养方法
CN105695351A (zh) * 2015-12-29 2016-06-22 西藏天虹科技股份有限责任公司 活跃链霉菌lb-16及利用其制备那西肽的方法
CN105695351B (zh) * 2015-12-29 2019-04-09 西藏天虹科技股份有限责任公司 活跃链霉菌lb-16及利用其制备那西肽的方法
CN107868809A (zh) * 2016-09-28 2018-04-03 牡丹江佰佳信生物科技有限公司 一种发酵生产那西肽的方法及发酵培养基
CN107868809B (zh) * 2016-09-28 2021-07-13 牡丹江佰佳信生物科技有限公司 一种发酵生产那西肽的方法及发酵培养基
CN108949871A (zh) * 2018-08-07 2018-12-07 河北圣雪大成制药有限责任公司 一种发酵生产硫肽类抗生素那西肽的发酵培养基及其培养方法
CN108949871B (zh) * 2018-08-07 2021-12-03 河北圣雪大成制药有限责任公司 一种发酵生产硫肽类抗生素那西肽的发酵培养基及其培养方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104388505A (zh) 一种利用活跃链霉菌发酵生产那西肽的方法
CN104388506A (zh) 一种利用活跃链霉菌发酵生产那西肽的方法
JPWO2018066688A1 (ja) バチルス属細菌の培養方法および有用物質の製造方法
UA112783C2 (uk) СПОСІБ ОДЕРЖАННЯ ЦЕЛЮЛАЗ З ВИКОРИСТАННЯМ МІЦЕЛІАЛЬНОГО ГРИБА, ПРИДАТНОГО ДЛЯ БІОРЕАКТОРА, ЩО МАЄ НИЗЬКИЙ ОБ'ЄМНИЙ КОЕФІЦІЕНТ ПЕРЕНЕСЕННЯ КИСНЮ kLa
KR20130131022A (ko) 탄소원 기질과 염기의 유가식 공급에 의한 유기산 제조 방법
CN103898181B (zh) 一种发酵生产那西肽的方法
JP2009011315A (ja) ヒアルロン酸の製造方法
WO2014059275A3 (en) Process for producing gougerotin employing streptomyces microflavus strains
CN104232709A (zh) 一种发酵生产安普霉素的方法
CN103882081B (zh) 一种连续流加补料分批发酵提高杆菌肽效价的方法
US20090197305A1 (en) Process for the preparation of polymyxin b employing (paeni) bacillus polymyxa
CN102943101B (zh) 一种发酵生产恩拉霉素的方法
CN108018324B (zh) 一种生产多拉菌素的发酵培养基及其制备方法与应用
CN104651427A (zh) 一种制备多拉菌素的方法
CN109679944B (zh) 一株高产细菌素乳酸菌的选育方法及其应用
CN105296571A (zh) 一种提高红霉素发酵效价的方法
JP6931879B2 (ja) 酸化型コエンザイムｑ１０の発酵生産方法、及びそれにより製造された酸化型高含有コエンザイムｑ１０
Kant Sharma et al. Up scaling strategies to improve the industrial production of bacitracin at largescale
WO2007110592A3 (en) Fermentation process for the production of ethanol
CN110387387A (zh) 一种重组大肠杆菌产l-色氨酸的发酵工艺
CN106636262B (zh) 一种控制发酵培养体系pH值以提高乳酸链球菌素产量的方法
CN105671110B (zh) 一种生产达巴万星前体a40926的方法
CN106995830A (zh) 一种微生物发酵高产阿维拉霉素的方法
AU2016288656A8 (en) Process for producing lactic acid or its salts from fermentation using thermotolerance bacillus bacteria
CN107723326A (zh) 一种利用活跃链霉菌发酵生产那西肽的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20150304

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication