CN104387440A - 一种白桦脂醇氨基酸酯化合物及其制备方法和用途 - Google Patents

一种白桦脂醇氨基酸酯化合物及其制备方法和用途 Download PDF

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张健
苏桂发
侴桂新
潘成学
刘志军
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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J63/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton has been modified by expansion of only one ring by one or two atoms
    • C07J63/008—Expansion of ring D by one atom, e.g. D homo steroids

Abstract

本发明一种白桦脂醇氨基酸酯化合物，其结构式如下所示：

Description

一种白桦脂醇氨基酸酯化合物及其制备方法和用途
技术领域
本发明属于药物化学领域，尤其涉及一种药物中间体，具体来说是一种白桦脂醇氨基酸酯化合物及其制备方法和用途。
 
背景技术
恶性肿瘤是危害人类健康的重大疾病，自从Pisha发现白桦脂酸的抗黑色素瘤活性后，白桦脂酸及其同系物的活性得到研究者的重视，相继报道了许多同系五环三萜类化合物的药理活性，包括抗炎、抗癌、抗病毒和抗HIV等多种药理作用，五环三萜被视为很有潜力的抗肿瘤先导化合物。但是白桦脂酸在植物中的含量很少，与之相对应，同为羽扇烷型骨架结构的五环三萜白桦脂醇则在自然界含量十分丰富，在白桦树皮中含有15-25%。以天然资源丰富的原料为先导化合物，开发高效低毒的抗肿瘤药物是创新药物的一个方向。
 
发明内容
针对现有技术中的上述技术问题，人们期待以白桦脂醇为原料开发更多的具有生物活性的化合物。本发明提供了一种白桦脂醇氨基酸酯化合物及其制备方法和用途，所述的这种白桦脂醇氨基酸酯化合物及其制备方法和用途要解决现有技术中抗肿瘤药物原料少、抗肿瘤药物品种不多，尚不能完全满足疗效需求的技术问题。
本发明提供了一种白桦脂醇氨基酸酯化合物，其结构式如下所示： 
                                                  
其中，R1为H、或脂肪胺基酰基、或脂环胺基酰基、或芳香胺基酰基；R2为脂肪胺基酰基、或脂环胺基酰基、或芳香胺基酰基。
进一步的，所述的芳香胺基酰基为3-氯-4-氟苯胺基酰基、或间甲苯胺基酰基、或2-噻吩基乙胺基酰基、或3，4-二氯苯胺基酰基、或N-甲基苯胺基酰基、或3-溴苯胺基酰基、或间氯苯胺基酰基、或邻氯苯胺基酰基、或2，5-二氯苯胺基酰基。
进一步的，所述的脂环胺基酰基为环己胺基酰基。
进一步的，所述的脂肪胺基酰基为叔丁胺基酰基、或N，N-二甲基乙二胺基酰基、或甲乙胺基酰基、或乙二胺基酰基。
本发明还提供了上述白桦脂醇氨基酸酯的制备方法，包括以下步骤：
1）一个制备白桦脂醇C-28位氯乙酸酯化的中间产物，或白桦脂醇C-3位和C-28位双氯乙酸酯化的中间产物的步骤，在所述的制备白桦脂醇C-28位氯乙酸酯化的中间产物，或白桦脂醇C-3位和C-28位双氯乙酸酯化的中间产物的步骤中，以白桦脂醇为原料，加入重蒸无水二氯甲烷为溶剂，搅拌使得白桦脂醇完全溶解，然后再加入氯乙酸酐和N，N-二异丙基乙胺，白桦脂醇、氯乙酸酐和N，N-二异丙基乙胺的摩尔比为1:1.5~2.5:0.8~1.5，使白桦脂醇和氯乙酸酐反应，得到白桦脂醇C-28位氯乙酸酯化的中间产物，或白桦脂醇C-3位和C-28位双氯乙酸酯化的中间产物；
2）用碘化钠作催化剂，将上述反应得到的白桦脂醇C-28位氯乙酸酯化的中间产物，或白桦脂醇C-3位和C-28位双氯乙酸酯化的中间产物完全溶解在N，N-二甲基甲酰胺中，再加入脂肪胺、脂环胺或者芳香胺，使得白桦脂醇C-28位氯乙酸酯化的中间产物，或白桦脂醇C-3位和C-28位双氯乙酸酯化的中间产物与脂肪胺、脂环胺或者芳香胺反应，所述的白桦脂醇C-28位氯乙酸酯化的中间产物，或白桦脂醇C-3位和C-28位双氯乙酸酯化的中间产物与脂肪胺、脂环胺或者芳香胺的摩尔比为1:2.0~2.5，得到白桦脂醇C-28位氨基乙酸酯化产物或白桦脂醇C-3位和C-28位氨基乙酸酯化的产物。
具体的反应如下描述：
反应式1
进一步的，所述的白桦脂醇和氯乙酸酐反应为常温条件，同时搅拌反应8-24小时。
进一步的，催化剂碘化钠的用量范围为所述原料的物质的量的50%-125%，反应温度为30-95 ℃，反应时间为4-16小时。
进一步的，还包括一个纯化的步骤，将白桦脂醇C-28位氨基乙酸酯化产物或白桦脂醇C-3位和C-28位氨基乙酸酯化的产物用乙酸乙酯萃取，有机层用水洗涤除去其中的N，N-二甲基甲酰胺，加入无水硫酸钠干燥，过滤，减压除去溶剂，再加入二氯甲烷及石油醚使其溶解，用硅胶柱层析纯化产物，所用洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯混合溶剂。
本发明的白桦脂醇氨基酸酯化合物的合成方法是以重蒸无水二氯甲烷做溶剂，在N，N-二异丙基乙胺存在下，白桦脂醇和氯乙酸酐反应，得到白桦脂醇C-28位氯乙酸酯化产物和白桦脂醇C-3和C-28位双氯乙酸酯化产物；再以N，N-二甲基甲酰胺(DMF)为溶剂，碘化钠作催化剂，第一步合成的白桦脂醇氯乙酸酯与取代胺反应得到最终产物。本发明的合成方法简单、操作方便。
本发明还提供了上述的白桦脂醇氨基酸酯在制备抗肿瘤药物中的用途。本发明合成的化合物可作为具有抗肿瘤细胞增殖作用的药物的原料、药物中间体及功能生物材料。
实验证明，通过测试合成化合物白桦脂醇氨基酸酯对HD-29、MDA-MB-231、MDA-MB-435和Du145癌细胞生长的抑制率及对MDA-231肿瘤细胞的IC50值，本发明合成化合物对四种癌细胞生长的抑制率测试显示他们有较强的抗肿瘤细胞生长活性，是开发抗肿瘤药物的潜在候选化合物。
 
具体实施方式
通过以下实例有助于进一步理解本发明，但是不能限制本发明的内容。
实施例1：
往250 mL干燥的单口烧瓶中加入白桦酯醇(3.6 g，8 mmol)、重蒸无水二氯甲烷(100 mL)，搅拌溶解后加入氯乙酸酐(2.8 g，16 mmol)，再用注射器加入N，N-二异丙基乙胺(1.4 mL，8 mmol)，常温搅拌反应24小时（h），TLC检查发现白桦酯醇已基本反应完全(反应如反应式1所示)。减压除去溶剂， 用少量二氯甲烷使其恰好溶解，再加入约相同体积的石油醚，用硅胶柱层析提纯(洗脱剂: PE:AcOEt=6:1)得2.20 g白桦脂醇氯乙酸单酯，产率53%，1.33 g白桦脂醇氯乙酸双酯，产率28%。
在氮气保护下，往50 mL干燥的单口烧瓶中加入白桦酯醇氯乙酸单酯(0.20 g， 0.38 mmol)， 再加入DMF (20 mL)， 搅拌溶解后， 加入叔丁胺(约0.76 mmol)和碘化钠(0.05 g， 0.33 mmol)，在搅拌下将油浴锅加热到70 ℃反应12 h， 用薄层层析（TLC）检查发现白桦酯醇氯乙酸单酯已基本反应完全(反应如反应式2所示)。
反应式2
产物纯化步骤：往烧瓶中加入约20 mL水， 之后将液体转移至分液漏斗， 用乙酸乙酯萃取(10×5 mL)，合并有机层，用水洗涤(5×8 mL)除去其中的DMF， 有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，减压除去溶剂。加入适量的干燥二氯甲烷使其恰好溶解，再加入相同体积的石油醚， 用硅胶柱层析提纯，洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯混合溶剂。
反应得到白桦脂醇叔丁胺基乙酸酯为淡黄色固体，产率59%，熔点：97-99 ℃， 1H NMR (500 MHz， CDCl3)主要特征峰如下: δ 4.65 (s， 1H)， 4.54 (s， 1H)， 4.50-4.48 (m， 1H)， 4.32 (d， 1H)， 3.86 (d， 1H)， 3.37(s， 2H)，3.34 (s， 2H)，2.40-2.38 (m， 3H)， 1.79-1.76 (m， 3H)， 1.70 (s， 3H)， 1.52-1.46 (m， 7H)， 1.39 (s， 3H)， 1.37-1.34 (m， 6H)， 1.29-1.28 (m， 6H)， 1.05 (s， 9H)， 0.95 (s， 3H)， 0.74 (s， 3H)， 0.64 (t， 3H×2)为角甲基特征峰。
合成化合物抑制肿瘤细胞生长活性测试选用以下肿瘤细胞:人肠癌细胞HT-29，人胃癌细胞DU145,人乳腺癌细胞MDA-MB-231和MDA-MB-435肿瘤细胞。经四次传代后，分别收获对数生长期的HT-29、MDA-MB-231、DA-MB-435和DU145肿瘤细胞。按照每孔1x104个细胞接种入96孔板分别培养在DMEM（dulbecco's modified eagle medium）培养液中。加入合成的化合物进行培养72h后试验，96孔细胞板置于37℃，5% CO2及饱和湿度条件培养箱中培养，每组分别设2个平行的细胞盘，每个浓度设3个重复孔，浓度的梯度分别为：200.00、100.00、50.00、25.00、12.50、6.25、3.12、1.56、0.78、0.39 μg/mL。培养培养72h后加20μL细胞反应显示剂MTS 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium)，根据细胞的不同，在以下一个推荐的范围培养一定时间后,然后进行测试：HT-29选30-60 分钟；MDA-MB-231选2-2.5 小时；DU145选30-60分钟；MDA-MB-435选2-2.5小时。用酶标仪在490 nm 测试得到原始数据。
得到原始数据后，计算给药组（实验组）相对于对照组细胞生存能力百分比，计算药物对肿瘤细胞的抑制率。细胞生长抑制率（%）=（1-实验孔OD值/对照孔OD值）×100%。测试合成化合物白桦脂醇氨基酸酯对HD-29、MDA-MB-231、MDA-MB-435和Du145癌细胞生长的抑制率及对MDA-231肿瘤细胞的IC50值。合成化合物对四种癌细胞生长的抑制率测试显示他们有较强的抗肿瘤细胞生长活性，是开发抗肿瘤药物的潜在候选化合物。
化合物白桦脂醇叔丁胺酯在0.05mg/mL浓度时对HD-29及Du145癌细胞生长的抑制率分别达到 72.1%，53.1%，对MDA-MB-231和MDA-MB-435两种癌细胞生长的抑制率分别达到89.7%，82.7%。白桦脂醇叔丁胺酯对MDA-231肿瘤细胞的IC50值是43.40μg/mL，显示该化合物有较强的抗肿瘤细胞生长活性。 
 
实施例2：
28-白桦酯醇氯乙酸单酯的制备方法如实施例1所述。如实施例1所述相同的合成方法，28-白桦酯醇氯乙酸单酯和N，N-二甲基乙二胺反应(如反应式3所示)：
 
反应式3
如实施例1相同的纯化步骤后，得到28-白桦脂醇N，N-二甲基乙二胺基乙酸酯的淡黄色固体，产率58%，熔点：139-143℃，1H NMR (500 MHz， CDCl3)主要特征峰如下：δ 4.68 (s， 1H)， 4.58 (s， 1H)， 4.32 (d， 1H)， 3.91 (d， 1H)， 3.43 (s， 2H)， 3.18-3.15 (m， 1H)， 2.71-2.68 (m， 2H)， 2.43-2.42 (m， 4H)， 2.23 (s， 6H)， 1.64-1.60 (m， 9H)， 1.52-1.50 (m， 9H)， 1.25-1.21 (m， 6H)， 1.72 (s， 3H)至0.75 (s， 3H)范围有6个角甲基特征峰。
参考实施例1的实验过程，化合物28-白桦脂醇N,N-二甲基乙二胺酯在0.05mg/mL浓度时对四种癌细胞均具有非常明显的活性，对四种癌细胞生长的抑制率分别达到96.6%， 95.4%，95.5%和96.7%。28-白桦脂醇N,N-二甲基乙二胺酯对MDA-231肿瘤细胞的IC50值是4.78μg/mL，显示该化合物具有很强的抗肿瘤细胞生长活性。
 
实施例3：
28-白桦酯醇氯乙酸单酯的制备方法如实施例1所述。如实施例1所述相同的合成方法，28-白桦酯醇氯乙酸单酯和环己胺反应(如反应式4所示)：
 
反应式4
如实施例1相同的纯化步骤后，得到28-白桦脂醇N-环己胺基乙酸酯的淡黄色固体，产率49%，熔点：111-114 ℃， 1H NMR (500 MHz， CDCl3)主要特征峰如下: δ 4.66 (s， 1H)， 4.56 (s，1H)， 4.34 (d， 1H)， 4.13 (m， 1H)， 3.88 (d， 1H)， 3.42 (s， 1H)，3.13 (d， 1H)， 2.40 (m， 4H)， 2.01 (s， 1H)， 1.82-1.48 (m， 17H)， 1.35-1.33 (m， 6H)， 1.21-1.08 (m， 10H)， 1.65 (s， 3H)至0.72 (s， 3H)范围有6个角甲基特征峰。
参考实施例1的实验过程，化合物28-白桦脂醇N-环己胺基乙酸酯在0.05mg/mL浓度时对MDA-MB-231癌细胞生长的抑制率达到62.3%，对DU145癌细胞生长的抑制率为43.3%。显示该化合物有较强的抗肿瘤细胞生长活性。
 
实施例4-11：
如实施例1相同的步骤获得28-白桦酯醇氯乙酸酯化产物。
往50 mL干燥的单口烧瓶中加入28-白桦酯醇氯乙酸单酯(0.20 g， 0.38 mmol)， 再加入DMF (20 mL)， 搅拌溶解后， 加入芳香胺(约0.76 mmol)和碘化钠(0.05 g， 0.33 mmol)， 装上空气冷凝管和三通装置， 通入干燥的氮气将瓶内的氧气排尽。在搅拌下将油浴锅加热到75℃反应11 h，用TLC检查发现白桦酯醇氯乙酸酯已基本反应完全。如实施例1相同的步骤纯化。所用的芳香胺包括：3-溴苯胺，间氯苯胺，间甲苯胺，邻氯苯胺，2，5-二氯苯胺， 3，4-二氯苯胺，3-氯-4-氟苯胺，N-甲基苯胺，2-噻吩乙胺。
实施例4的反应式及NMR数据：
经上述两步骤反应（反应如反应式1和反应式5所示），得到28-白桦脂醇3-氯-4-氟苯胺基乙酸酯的淡黄色固体，产率52%。
 
反应式5
28-白桦脂醇3-氯-4-氟苯胺基乙酸酯的熔点：178-179 ℃。1H NMR (500 MHz， CDCl3)主要特征峰如下: δ 6.98-6.95 (m， 1H)， 6.61 (d， 1H)，6.46-6.45（m， 1H）， 4.71 (s， 1H)， 4.61 (s， 1H)， 4.42-4.40 (d， 1H)， 3.98-3.96 (d， 1H)， 3.90 (s， 2H)， 3.21-3.18 (m， 1H)， 2.46-2.42 (m， 1H)， 1.98-1.94 (m， 1H)， 1.46- 1.40 (m， 6H)， 1.30-1.28 (m， 3H)， 1.68 (s， 3H)， 1.05 (s， 3H)， 0.99 (s， 3H)， 0.98 (s， 3H)， 0.84 (s， 3H)， 0.77 (s， 3H)有6个角甲基特征峰。
参考实施例1的实验过程，化合物28-白桦脂醇3-氯-4-氟苯胺基乙酸酯在0.05mg/mL浓度时对MDA-MB-231和MDA-MB-435两种癌细胞生长的抑制率分别为52.2%，50.4%，显示该化合物有一定的抗肿瘤细胞生长活性。 
实施例5的反应式及NMR数据：
经上述两步骤反应（反应如反应式1和反应式6所示），得到28-白桦脂醇间甲苯胺基乙酸酯的淡黄色固体， 产率51%。
 反应式6
28-白桦脂醇间甲苯胺基乙酸酯的熔点：166-168 ℃。1H NMR (500 MHz， CDCl3)主要特征峰如下: δ 7.10-7.06 (m， 1H)，  6.58 (d，1H)，6.43 (d， 2H)， 4.68 (s， 1H)， 4.59 (s， 1H)， 4.39 (d， 1H)， 3.95 (s，1H)， 3.92 (s， 2H)， 3.18 (d， 1H)，2.27 (s， 3H)， 1.68 (s， 3H)， 1.05 (s， 3H)， 1.00 (s， 3H)， 0.97 (s， 3H)， 0.82 (s， 3H)， 0.76 (s， 3H)有6个角甲基特征峰。
参考实施例1的实验过程，化合物28-白桦脂醇间甲苯胺基乙酸酯在0.05mg/mL浓度时对MDA-MB-231癌细胞生长的抑制率为49.2%，显示该化合物有一定的抗肿瘤细胞生长活性。
 
实施例6反应式及NMR数据：
经上述两步骤反应（反应如反应式1和反应式7所示），得到28-白桦脂醇2-噻吩基乙胺基乙酸酯的淡黄色固体， 产率47%。
 反应式7
28-白桦脂醇2-噻吩基乙胺基乙酸酯的熔点85-90 ℃。1H NMR (500 MHz， CDCl3)主要特征峰如下：δ 7.12 (d， 1H)， 6.92 (d， 1H)， 6.83 (d， 2H)， 4.67 (s， 1H)， 4.57 (s， 1H)， 4.32 (d， 1H)， 3.90 (d， 1H)， 3.43 (s， 2H)， 3.15 (d， 1H)， 3.03-3.01 (m， 2H)，2.92- 2.90 (m， 2H)， 2.42-2.41 (m， 1H)， 1.97-1.95 (m， 3H)， 1.41-1.39 (m， 6H)， 1.24-1.22 (m， 4H)， 1.69 (s， 3H)， 1.05 (s， 3H)， 1.01 (s， 3H)， 0.95 (s， 3H)， 0.82 (s， 3H)， 0.75 (s， 3H)有6个角甲基特征峰。
参考实施例1的实验过程，化合物28-白桦脂醇2-噻吩基乙胺基乙酸酯在0.05mg/mL浓度时对MDA-MB-231和HT-29两种癌细胞生长的抑制率分别为42.4%，35.8%，显示该化合物有一定的抗肿瘤细胞生长活性。 
实施例7反应式及NMR数据：
经上述两步骤反应（反应如反应式1和反应式8所示），得到28-白桦脂醇3，4-二氯苯胺基乙酸酯的淡黄色固体，产率51%。
 
反应式8
28-白桦脂醇3，4-二氯苯胺基乙酸酯的熔点：99-103 ℃， 1H NMR (500 MHz， CDCl3)主要特征峰如下：δ 7.21-7.20 (m， 1H)， 6.67 (d， 1H)，6.47-6.45 (m， 1H)， 4.70 (s， 1H)， 4.61 (s， 1H)， 4.39 (d， 1H)， 3.95 (s， 1H)， 3.90 (s， 2H)， 3.20-3.17 (m， 1H)， 2.44-2.43 (m， 1H)， 1.71-1.69 (m， 1H)， 1.67 (s， 3H)， 1.05 (s， 3H)， 1.02 (s， 3H)， 0.98 (s， 3H)， 0.82 (s， 3H)， 0.77 (s， 3H)。
参考实施例1的实验过程，化合物28-白桦脂醇3，4-二氯苯胺基乙酸酯在0.05mg/mL浓度时对HT-29癌细胞生长的抑制率为38.0%，显示该化合物有一定的抗肿瘤细胞生长活性。
 
实施例8反应式及NMR数据：
经上述两步骤反应（反应如反应式1和反应式9所示），得到28-白桦脂醇N-甲基苯氨基乙酸酯的淡黄色固体，产率61%。
 反应式9
28-白桦脂醇N-甲基苯氨基乙酸酯的熔点：116-119 ℃， 1H NMR (500 MHz， CDCl3)主要特征峰如下：δ 7.25-7.22 (m， 2H)， 6.77-6.74 (m， 1H)，6.70（d， 2H）， 4.69 (s， 1H)， 4.60 (s， 1H)， 4.30 (d， 1H)， 4.12-4.11 (m， 2H)， 3.89 (d， 1H)，3.20 (d， 1H)，3.09 (s， 3H)， 2.41-2.40 (m， 1H)， 1.71 (s， 3H)至0.78 (s， 3H)范围有6个角甲基特征峰。
参考实施例1的实验过程，化合物28-白桦脂醇N-甲基苯氨基乙酸酯在0.05mg/mL浓度时对HT-29和DU145两种癌细胞生长的抑制率分别为43.4%，40.4%，显示该化合物有一定的抗肿瘤细胞生长活性。
 
实施例9反应式及NMR数据：
经上述两步骤反应（反应如反应式1和反应式10所示），得到28-白桦脂醇3-溴苯胺基乙酸酯的淡黄色固体，产率52%。
 
反应式10
28-白桦脂醇3-溴苯胺基乙酸酯的熔点：161-162 ℃。1H  NMR (500 MHz， CDCl3)主要特征峰如下：δ 7.01-7.00 (m， 1H)， 6.98 (d， 1H)，6.83-6.81 (m， 1H)， 4.71 (d， 1H)， 4.68 (s， 1H)， 4.58 (s， 1H)， 4.39 (d， 1H)， 3.92 (d， 1H)， 3.87 (s， 2H)， 3.17 (d， 1H)， 2.42-2.40 (m， 1H)， 1.96-1.94 (m， 1H)， 1.69 (s， 3H)至0.74 (s， 3H)范围有6个角甲基特征峰。
参考实施例1的实验过程，化合物28-白桦脂醇3-溴苯胺基乙酸酯在0.05mg/mL浓度时对HT-29癌细胞生长的抑制率为37.8%，显示该化合物有一定的抗肿瘤细胞生长活性。
 
实施例10反应式及NMR数据：
经上述两步骤反应（反应如反应式1和反应式11所示），得到28-白桦脂醇间氯苯胺基乙酸酯的淡黄色固体， 产率60%。
反应式11
28-白桦脂醇间氯苯胺基乙酸酯的熔点：119-123℃， 1H NMR (500 MHz， CDCl3)主要特征峰如下: δ 7.08-7.04 (m， 1H)， 6.70-6.69 (m， 1H)， 6.55 (s， 1H)， 6.47 -6.46 (m， 1H)， 4.69 (s， 1H)， 4.59 (s， 1H)， 4.39 (d， 1H)， 3.95 (d， 1H)， 3.89 (s， 2H)， 3.16 (d， 1H)， 2.3-2.2 (m， 1H)， 1.68 (s， 3H)至0.75 (s， 3H)有6个角甲基特征峰。
参考实施例1的实验过程，化合物28-白桦脂醇间氯苯胺基乙酸酯在0.05mg/mL浓度时对MDA-MB-231和HT-29两种癌细胞生长的抑制率分别为48.8%，36.7%，显示该化合物有一定的抗肿瘤细胞生长活性。
 
实施例11反应式及NMR数据：
经上述两步骤反应（反应如反应式1和反应式12所示），得到28-白桦脂醇邻氯苯胺基乙酸酯的淡黄色固体， 产率57%。
反应式12
28-白桦脂醇邻氯苯胺基乙酸酯的熔点：131-134℃。1H NMR (500 MHz， CDCl3)主要特征峰如下：δ 7.29 (d，1H)， 7.28-7.27（m，1H），6.71-6.69（m，1H），6.67（d，1H），4.71 (s，1H)，4.61 (s，1H)，4.39 (d， 1H)， 4.01 (s， 2H)， 3.96 (d， 1H)，3.21-3.19 (m， 1H)， 2.45- 2.44 (m， 1H)， 1.79-1.77 (m， 2H)， 1.69 (s， 3H)至0.77 (s， 3H)有6个角甲基特征峰。
参考实施例1的实验过程，化合物28-白桦脂醇邻氯苯胺基乙酸酯在0.05mg/mL浓度时对MDA-MB-231和MDA-MB-435两种癌细胞生长的抑制率分别为50.9%，34.6%，显示该化合物有一定的抗肿瘤细胞生长活性。
 
实施例12:
往50 mL干燥的单口烧瓶中加入白桦酯醇C-3和C-28位双氯乙酸酯化产物(0.24 g， 0.4 mmol)， 再加入DMF (20 mL)， 搅拌溶解后， 加入间甲苯胺(约0.8 mmol)和碘化钠(0.06 g， 0.4mmol)， 装上空气冷凝管和三通装置， 通入干燥的氮气将瓶内的氧气排尽。在搅拌下将油浴锅加热到68 ℃反应14 h， 用TLC检查发现白桦酯醇双氯乙酸酯已基本反应完全（反应如反应式13所示）。
 
反应式13
 如实施例1相同的步骤纯化后，得到3，28-白桦酯醇双间甲苯氨基乙酸酯化产物，淡黄色固体， 熔点：112-120 ℃， 产率54%。 13C NMR (125 MHz， CDCl3)主要特征峰如下：δ 171.8，171.2，149.9，147.2，147.1，139.1，139.0，129.2，119.2，119.1，113.8，113.8，110.3，110.1，82.2，63.7，55.4，50.3，48.8，47.8，46.5，46.0，42.7，40.9，38.4，37.9，37.7，37.1，34.6，34.2，29.7，29.6，28.0，27.1，27.0， 25.2， 23.8， 21.6， 20.8， 19.2， 18.2， 16.5， 16.2， 14.7。1H NMR (500 MHz， CDCl3)主要特征峰如下: δ 7.10-7.06 (m， 1H)， 6.58 (d， 1H)，6.43 (d， 2H)，  4.68 (s， 1H)， 4.59 (s， 1H)， 4.39 (d， 1H)， 3.95 (s， 1H)， 3.92 (s， 2H)， 2.27 (s， 3H)， 1.69 (s， 3H)至0.75 (s， 3H)有6个角甲基特征峰。
参考实施例1的实验过程，化合物3，28-白桦酯醇双间甲苯氨基乙酸酯在0.05mg/mL浓度时对四种癌细胞抑制率在20%左右，可以根据化合物对癌细胞具有的抑制活性数值调整药物浓度。

Claims (9)

1.一种白桦脂醇氨基酸酯化合物，其结构式如下所示： 
其中，R1为H、或脂肪胺基酰基、或脂环胺基酰基、或芳香胺基酰基；R2为脂肪胺基酰基、或脂环胺基酰基、或芳香胺基酰基。
2.根据权利要求1所述的一种白桦脂醇氨基酸酯化合物，其特征在于：所述的芳香胺基酰基为3-氯-4-氟苯胺基酰基、或间甲苯胺基酰基、或2-噻吩基乙胺基酰基、或3，4-二氯苯胺基酰基、或2，5-二氯苯胺基酰基、或N-甲基苯胺基酰基、或3-溴苯胺基酰基、或间氯苯胺基酰基、或邻氯苯胺基酰基、或2，5-二氯苯胺基酰基。
3.根据权利要求1所述的一种白桦脂醇氨基酸酯化合物，其特征在于：所述的脂环胺基酰基为环己胺基酰基。
4.根据权利要求1所述的一种白桦脂醇氨基酸酯化合物，其特征在于：所述的脂肪胺基酰基为叔丁胺基酰基、或N，N-二甲基乙二胺基酰基、或甲乙胺基酰基、或乙二胺基酰基。
5.权利要求1所述的一种白桦脂醇氨基酸酯的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
一个制备白桦脂醇C-28位氯乙酸酯化的中间产物、或白桦脂醇C-3位和C-28位双氯乙酸酯化的中间产物的步骤，在所述的制备白桦脂醇C-28位氯乙酸酯化的中间产物、或白桦脂醇C-3位和C-28位双氯乙酸酯化的中间产物的步骤中，以白桦脂醇为原料，加入重蒸无水二氯甲烷为溶剂，搅拌使得白桦脂醇完全溶解，然后再加入氯乙酸酐和N，N-二异丙基乙胺，白桦脂醇、氯乙酸酐和N，N-二异丙基乙胺的摩尔比为1:1.5~2.5:0.8~1.5，使白桦脂醇和氯乙酸酐反应，得到白桦脂醇C-28位氯乙酸酯化的中间产物、或白桦脂醇C-3位和C-28位双氯乙酸酯化的中间产物；
用碘化钠作催化剂，将上述反应得到的白桦脂醇C-28位氯乙酸酯化的中间产物、或白桦脂醇C-3位和C-28位双氯乙酸酯化的中间产物完全溶解在N，N-二甲基甲酰胺中，再加入脂肪胺、脂环胺或芳香胺，使得白桦脂醇C-28位氯乙酸酯化的中间产物、或白桦脂醇C-3位和C-28位双氯乙酸酯化的中间产物与脂肪胺、脂环胺或者芳香胺反应，所述的白桦脂醇C-28位氯乙酸酯化的中间产物、或白桦脂醇C-3位和C-28位双氯乙酸酯化的中间产物与脂肪胺、脂环胺或者芳香胺的摩尔比为1:2.0~2.5，得到白桦脂醇C-28位氨基酸酯化产物或白桦脂醇C-3位和C-28位氨基酸酯化产物。
6.根据权利要求5所述的一种白桦脂醇氨基酸酯的制备方法，其特征在于：所述的白桦脂醇和氯乙酸酐反应条件为常温，同时搅拌反应8-24小时。
7.根据权利要求5所述的一种白桦脂醇氨基酸酯的制备方法，其特征在于：所述的催化剂碘化钠的用量范围为所述原料的物质的量的50%-125%，反应温度为30-95 ℃，反应时间为4-16小时。
8.根据权利要求5所述的一种白桦脂醇氨基酸酯的制备方法，其特征在于：还包括一个纯化的步骤，将白桦脂醇C-28位氨基酸酯化产物或同时在白桦脂醇C-3位和C-28位发生氨基酸酯化的产物用乙酸乙酯萃取，有机层用水洗涤除去其中的N，N-二甲基甲酰胺，加入无水硫酸钠干燥，过滤，减压除去溶剂，再加入二氯甲烷及石油醚使其溶解，用硅胶柱层析纯化产物，所用洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯混合溶剂。
9.权利要求1所述的白桦脂醇氨基酸酯在制备抗肿瘤药物中的用途。
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