CN104365482B - 一种微型月季组培的繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种微型月季组培的繁殖方法，它通过精选茎段外植体和优化培养基的配方，结合光照等技术，得到一种成活率高的微型月季，具体包括以下步骤：先从健壮的微型月季中取含完整鳞叶的茎段作为外植体，然后浸入培养基经日照后，生成腋芽，将腋芽取下浸入生根培养基，结合日照，待腋芽长成2‑3cm的苗后，将苗移至穴盘，配合覆膜、定期日照和杀菌的技术，得到组培的微型月季。该制备方法制得的微型月季成活率和增殖系数高，适合于工业化大量生产。
Description
技术领域：
本发明属于植物栽培方法技术领域，特别涉及一种微型月季组培的繁殖方法。
背景技术：
月季属我国十大名花之一，别名月月红、月月开、长春花、四季蔷薇等，属于蔷薇科的常绿或半常绿灌木。月季具有花色花型丰富、花期长、适应性强等优点，因此月季的品种较多，分为鲜切花月季、微型月季、树状月季、壮花月季、灌木月季、地被月季等。随着社会的进步，科技的发展和人们欣赏水平的日益提高，花季的品种花色也越来越多，二重色、肤色、斑条双绞色等也日益常见。
微型月季是月季市场上较畅销的类群，它的株型矮小紧凑，一般不超过30cm，茎细，其直径不超过0.4cm，且长有钩状皮刺，叶片花朵小巧玲珑，花径不超过3cm，通常数朵簇团生长成聚伞花序，花色丰富，有单色、双色、复色、混色、变色等，四季开花，自然花期为4月至11月。
微型月季适应性强，较耐寒耐热，喜暖喜光，对光周期不敏感，对土壤要求不高，以富含有机物质，且排水良好的酸性土壤为最佳。微型月季可以通过种子、扦插和组培技术进行繁殖，常采用扦插繁殖，但扦插繁殖成本高，成活率较低，难以大批量生产，而组培技术的繁殖效率高，周期性短，遗传形状稳定，便于管理，适合工业化生产。
发明内容：
本发明的目的是提供一种微型月季组培的繁殖方法，通过精选茎段外植体和优化培养基的配方，结合光照等技术，得到一种增值系数和成活率高的微型月季组培方法。
本发明的目的通过如下技术方案实现：
一种微型月季组培的繁殖方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)选取已经杀菌的健壮的微型月季的茎段作为外植体，进行去污杀菌消毒后，将外植体切成含1-2个完整鳞叶的待培养茎段；
(2)将KT、6-BA、NAA加入蒸馏水中，配制成KT含量为0.2mg/L,6-BA含量为0.5-2mg/L，NAA含量为0.005-0.2mg/L的混合溶液，调节PH值为5-6，形成培养基；
(3)将步骤(1)的待培养茎段浸入步骤(2)的培养基中，添加0.3-0.5％的活性炭，调节培养温度为25℃-27℃，在1200-1500Lux强度下光照10-15h，诱导茎段生腋芽；
(4)将步骤(3)得到的腋芽切下，浸入步骤(2)的培养基中，调节培养温度为27℃-30℃，在1200-1500Lux强度下光照10-15h，至腋芽长到2-3cm，生成正常的苗；
(5)将步骤(4)得到的苗浸入生根培养基中，生根培养基中1/2MS+IBA的含量为0.5-1mg/L，NAA的含量为0.2mg/L，调节培养温度为27℃-30℃，在1200-1500Lux强度下光照10-15h，光照25-30天，得到组培苗；
(6)将组培苗转移至泥炭、珍珠岩和蛭石重量比例为2:1:1的穴盘中，并用薄膜覆盖保持湿度为75％-85％和温度为15℃-25℃，经每天5-8h日照和每3-5天定期杀菌一次，待苗成活长出新叶，揭开薄膜，得到组培的微型月季。
本发明的有益效果在于：选取茎段作为外植体，因为其繁殖系数高于顶芽，有利于提高繁殖率。分别优化茎段的培养基和腋芽的培养基的配方，是培养基适合它们各阶段生长的需要，提高成活率。由于高浓度的BA和活性炭对微型月季的生根有一定的抑制作用，故选用低浓度的BA和活性炭，配合1/2MS对生根有利。
具体实施方式：
为了加深对本发明的理解，下面结合实施例对本发明作进一步详述，该实施例仅用于解释本发明，并不构成对本发明保护范围的限定。
实施例1：
选取健壮的已经提前杀菌的微型月季的茎段作为外植体，进行去污杀菌消毒后，将外植体切成含2个完整鳞叶的茎段，将茎段浸入培养基中，其中KT含量为0.2mg/L,6-BA含量为0.5mg/L，NAA含量为0.005mg/L，PH值为5，添加0.3％的活性炭，调节培养温度为25℃，1500Lux强度下光照10h，诱导茎段生腋芽。
将腋芽切下，浸入培养基中，其中KT含量为0.2mg/L,6-BA含量为2mg/L，NAA含量为0.2mg/L，PH值为6，调节培养温度为27℃，1500Lux强度下光照10h，至腋芽长到2-3cm，生成正常的苗，将苗浸入生根培养基中，其中1/2MS+IBA的含量为0.5mg/L和NAA的含量为0.2mg/L，调节培养温度为27℃，光照30天，得到组培苗。
将组培苗转移至含泥炭、珍珠岩和蛭石比例为2:1:1的基质穴盘中，并用薄膜覆盖保持75％的湿度和15℃的温度，每天日照8h，每5天杀菌一次，待苗成活长出新叶，揭开薄膜，得到组培的微型月季。
经观察测定，发现组培的微型月季的增值系数为10，成活率为95％。
实施例2：
选取健壮的已经提前杀菌的微型月季的茎段作为外植体，进行去污杀菌消毒后，将外植体切成含1个完整鳞叶的茎段，将茎段浸入培养基中，其中KT含量为0.2mg/L,6-BA含量为2mg/L，NAA含量为0.005mg/L，PH值为6，添加0.5％的活性炭，调节培养温度为25℃，1200Lux强度下光照15h，诱导茎段生腋芽。
将腋芽切下，浸入培养基中，其中KT含量为0.2mg/L,6-BA含量为0.5mg/L，NAA含量为0.005mg/L，PH值为5，调节培养温度为30℃，1200Lux强度下光照15h，至腋芽长到2-3cm，生成正常的苗，将苗浸入生根培养基中，其中1/2MS+IBA的含量为1mg/L和NAA的含量为0.2mg/L，调节培养温度为30℃，光照25天，得到组培苗。
将组培苗转移至含泥炭、珍珠岩和蛭石比例为2:1:1的基质穴盘中，并用薄膜覆盖保持85％的湿度和25℃的温度，每天日照5h，每3天杀菌一次，待苗成活长出新叶，揭开薄膜，得到组培的微型月季。
经观察测定，发现组培的微型月季的增值系数为9，成活率为93％。
实施例3：
选取健壮的已经提前杀菌的微型月季的茎段作为外植体，进行去污杀菌消毒后，将外植体切成含2个完整鳞叶的茎段，将茎段浸入培养基中，其中KT含量为0.2mg/L,6-BA含量为1mg/L，NAA含量为0.01mg/L，PH值为5.6，添加0.4％的活性炭，调节培养温度为26℃，1300Lux强度下光照12h，诱导茎段生腋芽。
将腋芽切下，浸入培养基中，其中KT含量为0.2mg/L,6-BA含量为0.1mg/L，NAA含量为0.1mg/L，PH值为6，调节培养温度为28℃，1300Lux强度下光照12h，至腋芽长到2-3cm，生成正常的苗，将苗浸入生根培养基中，其中1/2MS+IBA的含量为0.6mg/L和NAA的含量为0.2mg/L，调节培养温度为28℃，光照27天，得到组培苗。
将组培苗转移至含泥炭、珍珠岩和蛭石比例为2:1:1的基质穴盘中，并用薄膜覆盖保持80％的湿度和20℃的温度，每天日照6h，每4天杀菌一次，待苗成活长出新叶，揭开薄膜，得到组培的微型月季。
经观察测定，发现组培的微型月季的增值系数为11，成活率为97％。
实施例4：
选取健壮的已经提前杀菌的微型月季的茎段作为外植体，进行去污杀菌消毒后，将外植体切成含1-2个完整鳞叶的茎段，将茎段浸入培养基中，其中KT含量为0.2mg/L,6-BA含量为1.5mg/L，NAA含量为0.15mg/L，PH值为5.7，添加0.35％的活性炭，调节培养温度为26℃，1400Lux强度下光照13h，诱导茎段生腋芽。
将腋芽切下，浸入培养基中，其中KT含量为0.2mg/L,6-BA含量为1.0mg/L，NAA含量为0.15mg/L，PH值为5.2，调节培养温度为29℃，1400Lux强度下光照13h，至腋芽长到2-3cm，生成正常的苗，将苗浸入生根培养基中，其中1/2MS+IBA的含量为0.7mg/L和NAA的含量为0.2mg/L，调节培养温度为29℃，光照26天，得到组培苗。
将组培苗转移至含泥炭、珍珠岩和蛭石比例为2:1:1的基质穴盘中，并用薄膜覆盖保持80％的湿度和20℃的温度，每天日照7h，每5天杀菌一次，待苗成活长出新叶，揭开薄膜，得到组培的微型月季。
经观察测定，发现组培的微型月季的增值系数为9，成活率为93％。
实施例5：
选取健壮的已经提前杀菌的微型月季的茎段作为外植体，进行去污杀菌消毒后，将外植体切成含1-2个完整鳞叶的茎段，将茎段浸入培养基中，其中KT含量为0.2mg/L,6-BA含量为1.7mg/L，NAA含量为0.15mg/L，PH值为5-6，添加0.3％的活性炭，调节培养温度为25℃，1400Lux强度下光照10h，诱导茎段生腋芽。
将腋芽切下，浸入培养基中，其中KT含量为0.2mg/L,6-BA含量为0.8mg/L，NAA含量为0.13mg/L，PH值为5.6，调节培养温度为28℃，1500Lux强度下光照10h，至腋芽长到2-3cm，生成正常的苗，将苗浸入生根培养基中，其中1/2MS+IBA的含量为0.5mg/L和NAA的含量为0.2mg/L，调节培养温度为27℃，光照25天，得到组培苗。
将组培苗转移至含泥炭、珍珠岩和蛭石比例为2:1:1的基质穴盘中，并用薄膜覆盖保持75％的湿度和15℃的温度，每天日照5h，每5天杀菌一次，待苗成活长出新叶，揭开薄膜，得到组培的微型月季。
经观察测定，发现组培的微型月季的增值系数为12，成活率为93％。
通过上述实施例可知，本发明方法制备的组培的微型月季的增值系数为10左右，成活率高于90％，因此增值率和成活率均较高。
Claims (1)
1.一种微型月季组培的繁殖方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)选取已经杀菌的健壮的微型月季的茎段作为外植体，进行去污杀菌消毒后，将外植体切成含1-2个完整鳞叶的待培养茎段；
(2)将KT、6-BA、NAA加入蒸馏水中，配制成KT含量为0.2mg/L,6-BA含量为0.5-2mg/L，NAA含量为0.005-0.2mg/L的混合溶液，调节PH值为5-6，形成培养基；
(3)将步骤(1)的待培养茎段浸入步骤(2)的培养基中，添加0.3-0.5％的活性炭，调节培养温度为25℃-27℃，在1200-1500Lux强度下光照10-15h，诱导茎段生腋芽；
(4)将步骤(3)得到的腋芽切下，浸入步骤(2)的培养基中，调节培养温度为27℃-30℃，在1200-1500Lux强度下光照10-15h，至腋芽长到2-3cm，生成正常的苗；
(5)将步骤(4)得到的苗浸入生根培养基中，生根培养基中1/2MS+IBA的含量为0.5-1mg/L，NAA的含量为0.2mg/L，调节培养温度为27℃-30℃，在1200-1500Lux强度下光照10-15h，光照25-30天，得到组培苗；
(6)将组培苗转移至泥炭、珍珠岩和蛭石重量比例为2:1:1的穴盘中，并用薄膜覆盖保持湿度为75％-85％和温度为15℃-25℃，经每天5-8h日照和每3-5天定期杀菌一次，待苗成活长出新叶，揭开薄膜，得到组培的微型月季。
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