CN104293715B - 利用白玉米面为原料制备饲用沼泽红假单胞菌的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种利用白玉米面为原料制备饲用沼泽红假单胞菌的方法，可有效解决饲用沼泽红假单胞菌的制备，以满足饲料养殖业对饲料生产的需要，技术方案是，包括以下步骤：制备菌种、种子培殖、制备液体发酵培养基、接种、发酵培养、载体吸附、烘干，本发明具有以下优点：1.发酵培养基原料主要为白玉米面等资源丰富，价格低、简单易得；2.发酵培养基配方简单，自动液体发酵罐发酵生产，操作简单，培养方便，生长速度快，发酵周期大大缩短，只有72～96h；3.能制备饲用沼泽红假单胞菌；4.饲用沼泽红假单胞菌，应用效果好，经济社会效益显著；5.采用我国农业部许可微生物菌株沼泽红假单胞菌AS1.2352进行发酵生产，安全性高，是绿色饲用添加剂。

Description

利用白玉米面为原料制备饲用沼泽红假单胞菌的方法

技术领域

本发明涉及生物发酵技术领域，特别是一种利用白玉米面为原料制备饲用沼泽红假单胞菌的方法。

背景技术

按照东秀珠(2001)《常见细菌系统鉴定手册》分类，沼泽红假单胞菌Rhodopseudomonas palustris属于紫色非硫细菌、红假单胞菌属，在自然界的碳素、氮素、硫素转化循环中起重要作用，是所在环境物质循环及能量流动的主要参加者之一，具有富集多种微量元素的能力，菌体营养丰富，蛋白质含量高，且富含多种生物活性物质，并且活性菌株含有某些抗病抗逆性物质，并具有适应性强，能耐受高浓度的有机废水和较强的分解转化能力，对酚、氰等毒物也有一定的耐受和分解能力等特点。沼泽红假单胞菌的用途很多，被广泛应用于农业、渔业、环保等领域，可用于水质净化、污水处理、饲料级微生物添加剂等。关于饲用微生物方面，沼泽红假单胞菌是我国农业部允许在饲料中直接添加的活性微生物之一，是优质的饲料添加剂，在畜禽养殖方面，沼泽红假单胞菌可作为一种饲料蛋白补充，还可以起到益生素的作用，它作为益生菌对有害菌起到抑制和排斥作用，能保持正常的菌群，促进营养物质的消化吸收，参与消化酶生成及B族维生素的合成，减少氨及有害物质的产生，提高局部免疫力和抗病力；在水产养殖方面，具有改善水质，促进生长，预防鱼病的作用，对产量和成活率均有明显的提高，是优质的饲料添加剂。

沼泽红假单胞菌生长方式是利用各种有机化合物作碳源和电子供体进行光照厌氧生长，也可好氧黑暗条件下进行化能异养生长。国内生产沼泽红假单胞菌一般采用塑料桶等，利用沼泽红假单胞菌在光照厌氧条件下生长的特性生产，生产周期长，一般7天以上，沼泽红假单胞菌的发酵培养基配方成分的配搭较复杂，一般需要碳源、氮源、磷源、微量元素、维生素等几种或十几种营养成分，调节酸碱度，实际配制操作过程繁琐，因此，难以有效推广应用，满足不了饲料养殖业对饲料生产上的需要，其创新势在必行。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用白玉米面为原料制备饲用沼泽红假单胞菌的方法，可有效解决饲用沼泽红假单胞菌的制备，以满足饲料养殖业对饲料生产的需要。

为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是提供一种利用白玉米面为原料制备饲用沼泽红假单胞菌的方法，包括以下步骤：

A.制备菌种，方法是：

(1)菌种活化，采用沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)AS1.2352，将沼泽红假单胞菌AS1.2352菌株接入玻璃培养皿内的ATYP琼脂液体培养基中，培养基液面上滴加液体石蜡封注液面，在28～30℃下，用40W白炽灯距灯最下端距离15-25cm处照射，厌氧静置培养5d～7d，得活化菌种；

(2)种子培殖，方法是：首先配制种子用培养基，将甘油1.0g、酵母膏1.0g、磷酸氢二钾0.3g，微量元素溶液0.05mL，维生素溶液0.15mL，水1000mL混合配制成培养基，将培养基装入培养皿中，每250ml的容积内装入培养基100mL，在0.1Mpa灭菌30min，灭菌后冷却至30℃备用；然后，将步骤(1)得到的活化菌种接种于已灭菌冷却后的培养基中，接种量为每250mL的容积内接入培养基重量的3～5％，在转速80r/min，28～30℃条件下培养60～72h，得到种子，革兰氏染色阴性，镜检无杂菌，种子液OD₆₆₀值达到0.5以上，沼泽红假单胞菌菌数达到0.5×10⁸个/mL以上；

B.制备饲用沼泽红假单胞菌，方法是：

(1)制备液体发酵培养基：白玉米面2.0g、酵母膏1.0g和水1000mL，其中，白玉米面过0.42mm孔径筛，用部分水润湿，酵母膏再取部分水溶解成酵母膏溶液，然后润湿的白玉米面及酵母膏溶液混合均匀加入10L发酵罐内，并补加入剩余的水，罐压控制在0.1～0.11Mpa之内，在位灭菌30min得灭菌后的液体发酵培养基；

(2)接种，将液体发酵培养基冷却至30℃，罐内压力减至0.01Mpa以下，接入步骤A中得到的种子，接种比例为液体发酵培养基重量的3～5％；

(3)发酵培养，将已冷却接种的液体发酵培养基装入10L发酵罐中，液体发酵培养基的装液量为7L，使罐压保持在0.03～0.05Mpa之间，控制调节发酵温度28～30℃，搅拌转速100r/min，通入发酵罐的无菌空气流量为1.5NL/min，发酵时间72～96h，得沼泽红假单胞菌发酵液，镜检无杂菌，发酵液OD₆₆₀值达到1.5以上，沼泽红假单胞菌菌数达到5×10⁸个/mL以上；

(4)载体吸附，用麸皮为载体，吸附沼泽红假单胞菌发酵液，得固体饲用沼泽红假单胞菌；

(5)烘干，在温度35-50℃下将固体饲用沼泽红假单胞菌烘干，粉碎：过0.42mm孔径筛，分装即可。

所述的步骤A第(1)步中的ATYP琼脂液体培养基是由磷酸氢二钾K₂HPO₄ 1.0g，氯化钙CaCl₂ 0.1g，碳酸氢钠NaHCO₃ 3.0g，乙酸钠CH₃COONa 1.0g，氯化镁MgCl₂ 0.5g，氯化铵NH₄Cl 1.0g，氯化钠NaCl 1.0g，微量元素溶液1.0mL，维生素溶液1.0mL，琥珀酸钠1.0g，酵母提取物0.5g，蛋白胨0.5g和蒸馏水1000mL混合均匀制成的；所述的微量元素溶液是由四水合氯化亚铁FeCl₂·4H₂O 1.8g，六水合氯化钴CoCl₂·6H₂O 0.25g，六水合二氯化镍NiCl₂·6H₂O 0.01g，二水合氯化铜CuCl₂·2H₂O 0.01g，四水合氯化锰MnCl₂·4H₂O 0.70g，氯化锌ZnCl₂ 0.1g，硼酸H₃BO₃ 0.5g，二水合钼酸钠Na₂MoO₄·2H₂O 0.03g，五水亚硒酸钠Na₂SeO₃·5H₂O 0.01g和蒸馏水1000mL混合均匀制成的；所述的维生素溶液是由生物素0.1g，烟酸0.35g，盐酸硫胺素0.3g，对氨基苯甲酸0.2g，盐酸吡多胺0.1g，泛酸钙0.1g、维生素B120.05g和蒸馏水1000mL混合均匀制成的。

所述的步骤A第(2)步中的微量元素溶液是由四水合氯化亚铁FeCl₂·4H₂O 1.8g，六水合氯化钴CoCl₂·6H₂O 0.25g，六水合二氯化镍NiCl₂·6H₂O 0.01g，二水合氯化铜CuCl₂·2H₂O0.01g，四水合氯化锰MnCl₂·4H₂O 0.70g，氯化锌ZnCl₂ 0.1g，硼酸H₃BO₃ 0.5g，二水合钼酸钠Na₂MoO₄·2H₂O 0.03g，五水亚硒酸钠Na₂SeO₃·5H₂O 0.01g和蒸馏水1000mL混合均匀制成的。

所述的步骤A第(2)步中的维生素溶液是由生物素0.1g，烟酸0.35g，盐酸硫胺素0.3g，对氨基苯甲酸0.2g，盐酸吡多胺0.1g，泛酸钙0.1g、维生素B120.05g和蒸馏水1000mL混合均匀制成的。

所述的沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)AS1.2352来自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，为公知技术。

所述的酵母膏又称酵母浸膏，酵母提取物，为市售产品。

所述的白玉米面为公知技术，玉米面没有等级之分，只有粗细之别。玉米面含有丰富的营养素，按颜色区分有黄玉米面和白玉米面；本发明使用的是过0.42mm孔径筛的白玉米面；我国玉米资源非常丰富，粗磨的白玉米面中含有丰富的营养素，其蛋白质、氨基酸、维生素含量高，还含有丰富的微量元素等，作为发酵培养基能够满足沼泽红假单胞菌生长的需要。每100克白玉米面的营养成分：蛋白质8克；脂肪4.5克；碳水化合物73.1克；膳食纤维6.2克；硫胺素0.34毫克；核黄素0.06毫克；烟酸3毫克；维生素E6.89毫克；钙12毫克；磷187毫克；钾276毫克；钠0.5毫克；镁111毫克；铁1.3毫克；锌1.22毫克；硒1.58微克；铜0.23毫克；锰0.4毫克。

本发明具有以下优点：1.发酵培养基原料主要为白玉米面等资源丰富，价格低、简单易得；2.发酵培养基配方简单，自动液体发酵罐发酵生产，操作简单，培养方便，生长速度快，发酵周期大大缩短，只有72～96h；3.能制备饲用沼泽红假单胞菌；4.饲用沼泽红假单胞菌，应用效果好，经济社会效益显著；5.采用我国农业部许可微生物菌株沼泽红假单胞菌AS1.2352进行发酵生产，安全性高，是绿色饲用添加剂。

附图说明

图1为本发明的工艺流程图。

具体实施方式

以下结合附图和实施例对本发明的具体实施方式作详细说明。

由附图给出，本发明在具体实施中是由以下步骤实现的：

A.制备菌种，方法是：

(1)菌种活化，采用沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)AS1.2352，将沼泽红假单胞菌AS1.2352菌株接入玻璃培养皿内的ATYP琼脂液体培养基中，培养基液面上滴加灭菌的液体石蜡封注液面，在29℃下，用40W白炽灯距灯最下端距离20cm处照射，厌氧静置培养6d，得活化菌种；所述的ATYP琼脂液体培养基的配方为磷酸氢二钾K₂HPO₄ 1.0g，氯化钙CaCl₂ 0.1g，碳酸氢钠NaHCO₃ 3.0g，乙酸钠CH₃COONa 1.0g，氯化镁MgCl₂ 0.5g，氯化铵NH₄Cl 1.0g，氯化钠NaCl 1.0g，微量元素溶液1.0mL，维生素溶液1.0mL，琥珀酸钠1.0g，酵母提取物0.5g，蛋白胨0.5g和蒸馏水1000mL混合均匀制成的，混合均匀后将pH调至6.8即得；

(2)种子培殖，方法是：首先配制种子用培养基，将甘油1.0g、酵母膏1.0g、磷酸氢二钾0.3g，微量元素溶液0.05mL，维生素溶液0.15mL，水1000mL混合配制成培养基，混合均匀后将pH调至6.8即得，将培养基装入培养皿中，每250ml的容积内装入培养基100mL，在0.1Mpa灭菌30min，灭菌后冷却至30℃备用；然后，将步骤(1)得到的活化菌种接种于已灭菌冷却后的培养基中，接种量为每250mL的容积内接入培养基重量的3～5％，在转速为80r/min旋转式全温培养摇床上，28～30℃条件下培养66h，得到种子，革兰氏染色阴性，镜检无杂菌，种子液OD₆₆₀值达到0.5以上，沼泽红假单胞菌菌数达到0.5×10⁸个/mL以上；

所述的微量元素溶液是由四水合氯化亚铁FeCl₂·4H₂O 1.8g，六水合氯化钴CoCl₂·6H₂O0.25g，六水合二氯化镍NiCl₂·6H₂O 0.01g，二水合氯化铜CuCl₂·2H₂O 0.01g，四水合氯化锰MnCl₂·4H₂O 0.70g，氯化锌ZnCl₂ 0.1g，硼酸H₃BO₃ 0.5g，二水合钼酸钠Na₂MoO₄·2H₂O 0.03g，五水亚硒酸钠Na₂SeO₃·5H₂O 0.01g和蒸馏水1000mL混合均匀制成的；

所述的维生素溶液是由生物素0.1g，烟酸0.35g，盐酸硫胺素0.3g，对氨基苯甲酸0.2g，盐酸吡多胺0.1g，泛酸钙0.1g、维生素B120.05g和蒸馏水1000mL混合均匀制成的；

B.制备饲用沼泽红假单胞菌，方法是：

(1)制备液体发酵培养基：白玉米面2.0g、酵母膏1.0g和水1000mL，其中，白玉米面过0.42mm孔径筛，用部分水润湿，酵母膏再取部分水溶解成酵母膏溶液，然后润湿的白玉米面及酵母膏溶液混合均匀加入10L发酵罐内，并补加入剩余的水，罐压控制在0.1～0.11Mpa之内，在位灭菌30min得灭菌后的液体发酵培养基；

(2)接种，将液体发酵培养基冷却至30℃，罐内压力减至0.01Mpa以下，接入步骤A中的种子，接种比例为液体发酵培养基重量的4％；

(3)发酵培养，将已冷却接种的液体发酵培养基装入10L发酵罐中，液体发酵培养基的装液量为7L，使罐压保持在0.03～0.05Mpa之间，控制调节发酵温度28～30℃，搅拌转速100r/min，无菌空气通入发酵罐，调控无菌空气流量使转子流量计指示1.5NL/min，发酵时间84h，得沼泽红假单胞菌发酵液，镜检无杂菌，发酵液OD₆₆₀值达到1.5以上，沼泽红假单胞菌菌数达到5×10⁸个/mL以上；

(4)载体吸附，用麸皮为载体，吸附沼泽红假单胞菌发酵液，得固体饲用沼泽红假单胞菌；

(5)烘干，在温度50℃下将固体饲用沼泽红假单胞菌烘干，粉碎：过0.42mm孔径筛，经检测合格后分装即可。

所述的发酵罐为镇江东方生物工程设备技术有限责任公司GUJS-10C自动液体发酵罐。

本发明采用以下分析方法对所得沼泽红假单胞菌As1.2352的菌数进行测定：

A.采用紫外可见光分光光度计对沼泽红假单胞菌AS1.2352发酵液OD₆₆₀值的测定：

发酵培养液经充分震荡摇匀后，采用紫外可见光分光光度计，以培养初期刚接入菌种的液体培养基为空白对照，于660nm处测定的发酵培养液OD₆₆₀值。

B.采用双层平板计数方法对沼泽红假单胞菌AS1.2352菌数含量的测定：

采用双层平板计数方法进行。双层平板计数培养基配制，底层固体平板培养基：NH₄Cl 1.0g、K₂HPO₄ 0.2g、CH₃COONa 3.0g、NaHCO₃ 1.0g、酵母膏0.2g、NaCl 1.0g、MgCl₂0.20g、T.M储液1.5mL，8.0g琼脂，蒸馏水1000mL，pH 6.8；上层固体平板培养基：NH₄Cl1.0g、K₂HPO₄ 0.2g、CH₃COONa 3.0g、NaHCO₃ 1.0g、酵母膏0.2g、NaCl 1.0g、MgCl₂ 0.20g、T.M储液1.5mL，10.0g琼脂，蒸馏水1000mL，pH 6.8；其中T.M储液：FeCl₃ 5.0mg、CuSO₄·5H₂O0.05mg、H₃BO₃ 1.0mg、MnCl₂·5H₂O 0.05mg、ZnSO₄·7H₂O 1.0mg、Co(NO₃)₂·6H₂O0.5mg、蒸馏水1000mL；

称取沼泽红假单胞菌菌剂1.0g(mL)，无菌条件下用无菌水采用常规方法将其稀释至10^-6、10^-7、10^-8，分别吸取0.1mL不同稀释度的沼泽红假单胞菌菌液均匀涂布于已倒入培养皿凝固后的底层固体平板培养基上，置50℃下0.5h烘去水分后，加入冷却至50℃的上层固体平板培养基15mL，凝固后置28～30℃,40瓦白炽灯照射，距灯泡12cm处，光照下培养5d，选取菌落数在30～300的培养皿计算测定菌落数。

与国内外同类技术比较：沼泽红假单胞菌是一种兼性光合厌氧细菌，国内外生产沼泽红假单胞菌制剂一般采用塑料桶或生物反应器，利用沼泽红假单胞菌在光照厌氧条件下生长的特性生产，生产周期长，一般7天以上，菌体得率低，较难规模化生产，未见大规模化生产的报道。本发明发酵培养基配比简单，自动液体发酵罐发酵生产，方法简单，易于生产，费用低，生产周期短，应用效果好，是绿色的饲用添加剂，并经试验取得了满意的效果，有关试验资料如下：

1.在畜禽水产养殖业中的应用

(1)在鲤成鱼水产养殖上的应用

试验材料：选择相邻的两口池塘，面积分别为7.10亩和7.16亩，相同水源，池深均为2.0米，水深1.5米。鱼种采用上年夏花当年养成鱼为大商品规格的大规格二龄建鲤鱼种，投放密度和投放平均规格分别为1300尾/亩和275g。

试验结果：(1)经过59天养殖，在投饵率相同的情况下，试验组饲料中按0.5％添加本发明沼泽红假单胞菌制剂，共添加15.25Kg(11元/Kg)，增加成本167.75元，总增产量479.9Kg，增加产值3119.36元；对照组未添加。(2)成活率：试验组比对照组高4.1个百分点。(3)生长速度：试验组比对照组高3.6个百分比。

表1投放和收获情况

表2经济效益情况 单位：Kg、万元

说明：1、鲤鱼售价平均为6.50元/Kg；

2、试验组和对照组池塘面积均按7.0亩计算。

(2)在蛋鸡生产中的应用

以30周龄海兰褐壳蛋鸡为试验鸡，选择健康无病的产蛋鸡2000只，随机平均分为两组，在试验组饲料中添加0.5％河南省科学院生物研究所有限责任公司研制的本发明饲用沼泽红假单胞菌，在对照组饲喂原配合饲料，其它管理程序一致，试验期100d，记录结果如下：

表3试验日粮组成和营养指标

表4产蛋性能与耗料

从试验全程看试验组鸡表现喜食，采食速度较快，排粪正常，味小。试验组比对照组提高产蛋率4.89％，平均蛋重试验组比对照组提高1.03％，试验组比对照组提高饲料报酬8.8％，经检验，差异显著(P<0.05)。

表5经济效益分析

由表5可知试验组平均每只鸡盈利13.8元，对照组11.0元，试验组比对照组多盈利2.80元，增收效益十分明显。

试验结果表明，在产蛋鸡日粮中添加沼泽红假单胞菌制剂生物活性成分，能够显著提高其产蛋性能，促进饲料的消化吸收，提高饲料利用率，增加经济效益，并能增强鸡抗病能力，是一种理想的饲料添加剂。

2.发酵周期，目前，我国大部分厂家沼泽红假单胞菌制剂光照厌氧液态发酵周期控制在7天以上，最短的也需要7天左右，我们利用白玉米面为原料制备饲用沼泽红假单胞菌发酵培养只有72～96h，培养时间大大缩短。

3.饲用沼泽红假单胞菌主要技术指标，本发明经河南省饲料产品质量监督检验站检测达到河南省科学院生物研究所有限责任公司的标准、自检测试完全达到或超过了企业规定的技术指标，具体情况如下：

沼泽红假单胞菌数≥0.6×10⁸cfu/g，水分≤9.0％。

表6饲用沼泽红假单胞菌主要技术指标

项目	指标
		水分含量，％ ≤	9.0
成品粒度	全部通过0.42mm编织筛
		沼泽红假单胞菌数，cfu/g
铅，mg/kg ≤	30
		砷，mg/kg ≤	10

沼泽红假单胞菌其菌体有很高的蛋白质含量，维生素、类胡萝卜素等营养物质和对动物生长发育起促进作用的生理活性物质如辅酶Q、生长素等营养成分高；可用于微生物饲料添加剂，水产畜禽养殖，作为绿色饲料添加剂应用于畜禽养殖可以有效的提高饲料效率，促进生长。沼泽红假单胞菌是对畜、禽、鱼有益的微生物，是现代生物技术与动物微生态学、动物营养学相结合的产物，被欧美等国家在养殖上应用，是符合饲料安全的绿色饲料添加剂作为饲用微生态制剂的研究应用，将推动我国养殖业向着高效、绿色、生态、健康的方向发展具有重要意义，市场需求量需求大，其应用前景十分广阔。

每吨沼泽红假单胞菌制剂售价11000元，年产100吨沼泽红假单胞菌制剂，将实现销售收入110万元，应用于水产养殖，畜禽生产将产生间接效益数千万元，沼泽红假单胞菌可大大提高畜、禽、水产养殖业的水平，对促进粮食转化，生产高附加值的绿色肉、蛋、奶，增加农民收入，提高人们生活水平必将产生较大影响，沼泽红假单胞菌制剂的开发对改善水产养殖环境、畜禽生存环境、污水处理、减少大气污染将具有重大意义，经济社会效益显著。

Claims (5)

1.一种利用白玉米面为原料制备饲用沼泽红假单胞菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：

A.制备菌种，方法是：

(1)菌种活化，采用沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)AS1.2352，将沼泽红假单胞菌AS1.2352菌株接入玻璃培养皿内的ATYP琼脂液体培养基中，培养基液面上滴加液体石蜡封注液面，在28～30℃下，用40W白炽灯距灯最下端距离15-25cm处照射，厌氧静置培养5d～7d，得活化菌种；

(2)种子培殖，方法是：首先配制种子用培养基，将甘油1.0g、酵母膏1.0g、磷酸氢二钾0.3g，微量元素溶液0.05mL，维生素溶液0.15mL，水1000mL混合配制成培养基，将培养基装入培养皿中，每250ml的容积内装入培养基100mL，在0.1Mpa灭菌30min，灭菌后冷却至30℃备用；然后，将步骤(1)得到的活化菌种接种于已灭菌冷却后的培养基中，接种量为每250mL的容积内接入培养基重量的3～5％，在转速80r/min，28～30℃条件下培养60～72h，得到种子，革兰氏染色阴性，镜检无杂菌，种子液OD₆₆₀值达到0.5以上，沼泽红假单胞菌菌数达到0.5×10⁸个/mL以上；

B.制备饲用沼泽红假单胞菌，方法是：

(1)制备液体发酵培养基：白玉米面2.0g、酵母膏1.0g和水1000mL，其中，白玉米面过0.42mm孔径筛，用部分水润湿，酵母膏再取部分水溶解成酵母膏溶液，然后润湿的白玉米面及酵母膏溶液混合均匀加入10L发酵罐内，并补加入剩余的水，罐压控制在0.1～0.11Mpa之内，在位灭菌30min得灭菌后的液体发酵培养基；

(2)接种，将液体发酵培养基冷却至30℃，罐内压力减至0.01Mpa以下，接入步骤A中得到的种子，接种比例为液体发酵培养基重量的3～5％；

(3)发酵培养，将已冷却接种的液体发酵培养基装入10L发酵罐中，液体发酵培养基的装液量为7L，使罐压保持在0.03～0.05Mpa之间，控制调节发酵温度28～30℃，搅拌转速100r/min，通入发酵罐的无菌空气流量为1.5NL/min，发酵时间72～96h，得沼泽红假单胞菌发酵液，镜检无杂菌，发酵液OD₆₆₀值达到1.5以上，沼泽红假单胞菌菌数达到5×10⁸个/mL以上；

(4)载体吸附，用麸皮为载体，吸附沼泽红假单胞菌发酵液，得固体饲用沼泽红假单胞菌；

(5)烘干，在温度35-50℃下将固体饲用沼泽红假单胞菌烘干，粉碎：过0.42mm孔径筛，分装即可。

2.根据权利要求1所述的利用白玉米面为原料制备饲用沼泽红假单胞菌的方法，其特征在于，所述的步骤A第(1)步中的ATYP琼脂液体培养基是由磷酸氢二钾K₂HP0₄ 1.0g，氯化钙CaCl₂ 0.1g，碳酸氢钠NaHC0₃ 3.0g，乙酸钠CH₃COONa 1.0g，氯化镁MgCl₂ 0.5g，氯化铵NH₄Cl 1.0g，氯化钠NaCl 1.0g，微量元素溶液1.0mL，维生素溶液1.0mL，琥珀酸钠1.0g，酵母提取物0.5g，蛋白胨0.5g和蒸馏水1000mL混合均匀制成的；

所述的微量元素溶液是由四水合氯化亚铁FeCl₂·4H₂O 1.8g，六水合氯化钴CoCl₂·6H₂O 0.25g，六水合二氯化镍NiCl₂·6H₂O 0.01g，二水合氯化铜CuCl₂·2H₂O 0.01g，四水合氯化锰MnCl₂·4H₂O 0.70g，氯化锌ZnCl₂ 0.1g，硼酸H₃BO₃ 0.5g，二水合钼酸钠Na₂MoO₄·2H₂O 0.03g，五水亚硒酸钠Na₂SeO₃·5H₂O 0.01g和蒸馏水1000mL混合均匀制成的；

所述的维生素溶液是由生物素0.1g，烟酸0.35g，盐酸硫胺素0.3g，对氨基苯甲酸0.2g，盐酸吡多胺0.1g，泛酸钙0.1g、维生素B12 0.05g和蒸馏水1000mL混合均匀制成的。

3.根据权利要求1所述的利用白玉米面为原料制备饲用沼泽红假单胞菌的方法，其特征在于，所述的步骤A第(2)步中的微量元素溶液是由四水合氯化亚铁FeCl₂·4H₂O 1.8g，六水合氯化钴CoCl₂·6H₂O 0.25g，六水合二氯化镍NiCl₂·6H₂O 0.01g，二水合氯化铜CuCl₂·2H₂O 0.01g，四水合氯化锰MnCl₂·4H₂O 0.70g，氯化锌ZnCl₂ 0.1g，硼酸H₃BO₃ 0.5g，二水合钼酸钠Na₂MoO₄·2H₂O 0.03g，五水亚硒酸钠Na₂SeO₃·5H₂O 0.01g和蒸馏水1000mL混合均匀制成的。

4.根据权利要求1所述的利用白玉米面为原料制备饲用沼泽红假单胞菌的方法，其特征在于，所述的步骤A第(2)步中的维生素溶液是由生物素0.1g，烟酸0.35g，盐酸硫胺素0.3g，对氨基苯甲酸0.2g，盐酸吡多胺0.1g，泛酸钙0.1g、维生素B12 0.05g和蒸馏水1000mL混合均匀制成的。

5.根据权利要求1所述的利用白玉米面为原料制备饲用沼泽红假单胞菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：

A.制备菌种，方法是：

(1)菌种活化，采用沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)AS1.2352，将沼泽红假单胞菌AS1.2352菌株接入玻璃培养皿内灭菌后的ATYP琼脂液体培养基中，培养基液面上滴加灭菌的液体石蜡封注液面，在29℃下，用40W白炽灯距灯最下端距离20cm处照射，厌氧静置培养6d，得活化菌种；所述的ATYP琼脂液体培养基的配方为磷酸氢二钾K₂HP0₄ 1.0g，氯化钙CaCl₂ 0.1g，碳酸氢钠NaHC0₃ 3.0g，乙酸钠CH₃COONa 1.0g，氯化镁MgCl₂ 0.5g，氯化铵NH₄Cl 1.0g，氯化钠NaCl 1.0g，微量元素溶液1.0mL，维生素溶液1.0mL，琥珀酸钠1.0g，酵母提取物0.5g，蛋白胨0.5g和蒸馏水1000mL混合均匀制成的，混合均匀后将pH调至6.8即得；

(2)种子培殖，方法是：首先配制种子用培养基，将甘油1.0g、酵母膏1.0g、磷酸氢二钾0.3g，微量元素溶液0.05mL，维生素溶液0.15mL，水1000mL混合配制成培养基，混合均匀后将pH调至6.8即得，将培养基装入培养皿中，每250ml的容积内装入培养基100mL，在0.1Mpa灭菌30min，灭菌后冷却至30℃备用；然后，将步骤(1)得到的活化菌种接种于已灭菌冷却后的培养基中，接种量为每250mL的容积内接入培养基重量的3～5％，在转速为80r/min旋转式全温培养摇床上，28～30℃条件下培养66h，得到种子，革兰氏染色阴性，镜检无杂菌，种子液OD₆₆₀值达到0.5以上，沼泽红假单胞菌菌数达到0.5×10⁸个/mL以上；

所述的微量元素溶液是由四水合氯化亚铁FeCl₂·4H₂O 1.8g，六水合氯化钴CoCl₂·6H₂O 0.25g，六水合二氯化镍NiCl₂·6H₂O 0.01g，二水合氯化铜CuCl₂·2H₂O 0.01g，四水合氯化锰MnCl₂·4H₂O 0.70g，氯化锌ZnCl₂ 0.1g，硼酸H₃BO₃ 0.5g，二水合钼酸钠Na₂MoO₄·2H₂O 0.03g，五水亚硒酸钠Na₂SeO₃·5H₂O 0.01g和蒸馏水1000mL混合均匀制成的；

所述的维生素溶液是由生物素0.1g，烟酸0.35g，盐酸硫胺素0.3g，对氨基苯甲酸0.2g，盐酸吡多胺0.1g，泛酸钙0.1g、维生素B12 0.05g和蒸馏水1000mL混合均匀制成的；

B.制备饲用沼泽红假单胞菌，方法是：

(1)制备液体发酵培养基：白玉米面2.0g、酵母膏1.0g和水1000mL，其中，白玉米面过0.42mm孔径筛，用部分水润湿，酵母膏再取部分水溶解成酵母膏溶液，然后润湿的白玉米面及酵母膏溶液混合均匀加入10L发酵罐内，并补加入剩余的水，罐压控制在0.1～0.11Mpa之内，在位灭菌30min得灭菌后的液体发酵培养基；

(2)接种，将液体发酵培养基冷却至30℃，罐内压力减至0.01Mpa以下，接入步骤A中的种子，接种比例为液体发酵培养基重量的4％；

(3)发酵培养，将已冷却接种的液体发酵培养基装入10L发酵罐中，液体发酵培养基的装液量为7L，使罐压保持在0.03～0.05Mpa之间，控制调节发酵温度28～30℃，搅拌转速100r/min，无菌空气通入发酵罐，调控无菌空气流量使转子流量计指示1.5NL/min，发酵时间84h，得沼泽红假单胞菌发酵液，镜检无杂菌，发酵液OD₆₆₀值达到1.5以上，沼泽红假单胞菌菌数达到5×10⁸个/mL以上；

(4)载体吸附，用麸皮为载体，吸附沼泽红假单胞菌发酵液，得固体饲用沼泽红假单胞菌；

(5)烘干，在温度50℃下将固体饲用沼泽红假单胞菌烘干，粉碎：过0.42mm孔径筛，经检测合格后分装即可。