CN104237444B - 一种参葛舒心方hplc指纹图谱的构建方法 - Google Patents
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Abstract
一种参葛舒心方HPLC指纹图谱的构建方法，包括：供试品溶液制备、对照品溶液制备、高效液相色谱条件、及测定，得到参葛舒心方HPLC指纹图谱。所述参葛舒心方HPLC指纹图谱共检测出17个特征峰，其中归属于葛根的特征峰共有14个；归属于丹参的特征峰共有3个；本发明采用HPLC‑DAD‑TOF/MS串联技术，对参葛舒心方HPLC标准指纹图谱各色谱峰进行指认；同时采用一测多评法对参葛舒心方中主要有效成分进行含量测定，制定含量限度标准。因此，本发明提供的参葛舒心方HPLC指纹图谱的构建方法，定性定量相结合，建立了一种谱图清晰，成分明确，含量可控的多息指纹图谱，更全面地反映参葛舒心方的质量，有效完善了参葛舒心方的质量控制方法。
Description
技术领域
本发明涉及药物分析技术领域，尤其涉及一种参葛舒心方HPLC（高效液相色谱）指纹图谱的构建方法。
背景技术
中药指纹图谱是目前能够为国内外广泛接受的全面评价中药质量模式的一种方法，是多维组分复杂样品的整体性评价中药质量的有效控制手段，美国FDA在植物药制品指导原则中允许申报者提供产品的色谱指纹图谱资料，德国药用植物学会、英国草药典、印度草药典以及加拿大药用级芳香植物协会也都把指纹图谱作为质量控制标准的内容之一。
参葛舒心方是由人参、麦冬、三七、川芎、丹参和葛根6味药材提取物组成的中药复方，具有抗心肌缺血的作用，临床上主要用于心肌缺血所致疾病的辅助治疗，是治疗冠心病患者疗效显著的药物，具有广阔的应用前景。
申请人前期已针对该复方及其有效化学组分的制备方法和制剂进行了专利保护（一种治疗冠心病中药及其有效化学组分的制备方法和制剂，专利号201110330186.3），由于该复方的质量控制方法不够完善，难以全面的控制复方质量及药物疗效，单纯用其中一味药的活性来说明参葛舒心方的质量具有一定的片面性。
要控制参葛舒心方的功效，必须对它的物质群整体予以控制，特别是参葛舒心方中对冠心病具有较好疗效的有效成分，因此亟需开发一种全面、合理、有效控制参葛舒心方质量的方法。
发明内容
针对上述问题，本发明提供一种参葛舒心方HPLC指纹图谱的构建方法，通过该方法可建立一种谱图清晰、成分明确、含量可控的多息指纹图谱，进而可以多成分控制参葛舒心方的质量，保证临床用药的安全性和有效性。
为实现本发明的上述目的，本发明采用如下技术方案。
本发明提供一种参葛舒心方HPLC指纹图谱的构建方法，具体步骤为。
（1）供试品溶液制备：取参葛舒心方，研细过40目筛，精密称取参葛舒心方0.1g-10g，精确至0.0001g，用30%-100%甲醇溶液10-100mL，超声处理10-100min，补足重量至称取时的重量，过0.22µm微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液。
（2）对照品溶液制备：精密称取葛根素、大豆苷、大豆苷元、葛根素-7-木糖苷、葛根素木糖苷、丹参酮ⅡA对照品8.72mg、8.39mg、8.30mg、8.24mg、8.33mg、7.08mg，分别加甲醇10mL制成浓度分别为0.872mg/mL、0.839mg/mL、0.830mg/mL、0.824mg/mL、0.833mg/mL、0.708mg/mL的对照品溶液，摇匀，即得。
（3）高效液相色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充相；采用HPLC-DAD-TOF/MS串联的方式进行图谱采集，以乙腈为流动相A，以水为流动相B，进行梯度洗脱，时间：0-70min；检测波长为271nm；柱温：10-30℃；流速为1.0mL/min，分流比1:3，梯度洗脱程序如下：
时间：0-30min，乙腈8%-15%，水92%-85%；
时间：30-45min，乙腈15%-35%，水85%-65%；
时间：45-55min，乙腈35%-55%，水65%-45%；
时间：55-70min，乙腈55%-60%，水45%-40%；
塔板理论数按葛根素峰计算，应不低于4000。
（4）测定：分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液各5μL，进样，用高效液相色谱仪测定，以对照品的色谱峰相对保留时间和峰面积为1，计算相对保留时间和相对峰面积，即得参葛舒心方HPLC指纹图谱。
所述参葛舒心方HPLC指纹图谱共检测出17个特征峰，特征峰峰号分别记为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17；其中，归属于葛根的特征峰峰号为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、13、14、15，共有14个；归属于丹参的特征峰峰号为11、16、17，共有3个。
利用HPLC-DAD-TOF/MS技术手段对特征峰进行色谱峰归属，并通过质谱中分子离子峰、碎片离子峰的分子量匹配、保留时间匹配等信息的比较指证：1号峰为葛根素-4ˊ-O-D-葡萄糖苷；2号峰为大豆苷元-4ˊ，7-二葡萄糖苷；3号峰为3ˊ-羟基葛根素；4号峰为葛根素；5号峰为3ˊ-甲氧基葛根素；6号峰为葛根素-7-木糖苷；7号峰为葛根素-木糖苷；8号峰为大豆苷；9号峰为4ˊ-甲氧基葛根素；10号峰为染料木素；11号峰为丹酚酸B；12号峰为刺芒柄花素；13号峰为kakkonein；14号峰香豆雌酚；15号为大豆苷元；16号新隐丹参酮；17号为丹参酮ⅡA。
采用一测多评的研究方法，以葛根素为参照，计算得到葛根素-7-木糖苷、葛根素-木糖苷、大豆苷、大豆苷元、丹参酮ⅡA的相对校正因子分别为f葛根素-7-木糖苷/葛根素：0.0363，f葛根素-木糖苷/葛根素：0.1840，f大豆苷/葛根素：0.3999，f大豆苷元/葛根素：0.0834，f丹参酮ⅡA /葛根素：0.0921，检测各成分含量，以此规定参葛舒心方中各主要成分的含量限度为：葛根素不得少于0.24%，葛根素-7-木糖苷不得少于0.004%，葛根素木糖苷不得少于0.02%，大豆苷不得少于0.14%，大豆苷元不得少于0.01%，丹参酮ⅡA不得少于0.014%。
与现有技术相比本发明的有益效果。
（1）本发明利用高效液相色谱技术，梯度洗脱，得到参葛舒心方HPLC指纹图谱，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件（2004A版）对10批样品的指纹图谱进行了匹配，进一步得到参葛舒心方HPLC标准指纹图谱，采用HPLC-DAD-TOF/MS串联技术，对参葛舒心方HPLC标准指纹图谱各色谱峰进行指认；同时采用一测多评法对参葛舒心方中主要有效成分进行含量测定，制定含量限度标准。本发明定性定量相结合，建立了一种谱图清晰，成分明确，含量可控的多息指纹图谱，更全面地反映参葛舒心方的质量，有效完善了参葛舒心方的质量控制方法，丰富了指纹图谱的科学内涵，为合理的控制药材质量提供了更为全面的信息。
（2）本发明在化学成分明确的基础上，结合一测多评方法，针对多种主要化学成分进行含量限度控制，在节省对照品的条件下，定量控制药材质量，具有良好的稳定性。
（3）以参葛舒心方中所含有效成分指纹图谱作为一个整体看待，为完整、准确评价参葛舒心方的质量提供了依照标准，避免了因只测定一个药材或单一成分而判定参葛舒心方整体质量的片面性。
附图说明
图1为本发明参葛舒心方标准指纹图谱。
图2为丹参药材对照色谱图。
图3为葛根药材对照色谱图。
具体实施方式
1、仪器与试药。
1.1仪器：电子天平（AB135-S，双量程，可读性0.01/0.1mg，瑞士Mettler-Toledo公司）；高效液相色谱仪（安捷伦1100，美国安捷伦科技有限公司）；分析色谱柱（Agilent Poroshell 120 SB-C18（4.6mm×100mm，2.7m），美国Agilent公司）；超纯水处理装置（Milli-Q，美国Millipore公司）；超声波清洗器（KQ5200型，昆山市超声仪器有限公司）；DAD检测器（G1313A，美国Agilent公司）。
1.2试药：参葛舒心方（由辽宁中医药大学提供，批号20120108、20120124、20120201、20120210、20120225、20120302、20120314、20120401、20120412、20120426）；乙腈（质谱纯，Fisher公司）；超纯水（18.2MΩ）；葛根素（110752-200511，购自中国药品生物制品验定所）；大豆苷（MUST-11121201，购自成都曼思特生物科技有限公司）；大豆苷元（MUST-12020708，购自成都曼思特生物科技有限公司）；葛根素-7-木糖苷（130916，购自成都普菲德生物技术有限公司）；葛根素木糖苷（130913，购自成都普菲德生物技术有限公司)；丹参酮ⅡA(110766-200417，购自中国药品生物制品验定所)。
2、方法与结果。
2.1指纹图谱制备及指认。
（1）供试品溶液制备：取参葛舒心方10g，研细，精密称定0.0001g，加20mL 50%甲醇溶液，称重，超声处理（功率250W，频率25kHz）30min，补足重量至称取时的重量，用0.22µm微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液。
（2）对照品溶液制备：精密称取葛根素、大豆苷、大豆苷元、葛根素-7-木糖苷、葛根素木糖苷、丹参酮ⅡA对照品8.72mg、8.39mg、8.30mg、8.24mg、8.33mg、7.08mg，分别加甲醇10mL制成浓度分别为0.872mg/mL、0.839mg/mL、0.830mg/mL、0.824mg/mL、0.833mg/mL、0.708mg/mL的对照品溶液，摇匀，即得。
（3）高效液相色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充相；采用HPLC-DAD-TOF/MS串联的方式进行图谱采集，以乙腈为流动相A，以水为流动相B，进行梯度洗脱，时间：0-70min；检测波长为271nm；柱温25℃；流速为1.0mL/min，分流比1:3，梯度洗脱程序如下：
时间：0-30min，乙腈8%-15%，水92%-85%；
时间：30-45min，乙腈15%-35%，水85%-65%；
时间：45-55min，乙腈35%-55%，水65%-45%；
时间：55-70min，乙腈55%-60%，水45%-40%。
塔板理论数按葛根素峰计算，应不低于4000。
（4）测定：分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液各5μL，进样，用高效液相色谱仪测定，以对照品的色谱峰相对保留时间和峰面积为1，计算相对保留时间和相对峰面积，即得参葛舒心方HPLC指纹图谱。
所述参葛舒心方HPLC指纹图谱，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版)对10批样品的指纹图谱进行匹配，得到如图1所示的本发明参葛舒心方HPLC标准指纹图谱，采用HPLC-DAD-TOF/MS串联的方式进行图谱指证。
特征峰确定：对参葛舒心方HPLC指纹图谱进行分析，并与丹参、葛根两味药材指纹图谱相比较，得到与丹参、葛根指纹图谱色谱峰相同的特征峰共17个，如表1所示，该17个特征峰峰号分别记为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17。
表1：本发明色谱峰指认表。
| 峰号 | 保留时间（min） | 归属药材 | 色谱峰指认名称 |
| 1 | 4.92 | 葛根 | 葛根素-4ˊ-O-D-葡萄糖苷 |
| 2 | 7.42 | 葛根 | 大豆苷元-4ˊ，7-二葡萄糖苷 |
| 3 | 7.99 | 葛根 | 3ˊ-羟基葛根素 |
| 4 | 12.88 | 葛根 | 葛根素 |
| 5 | 14.65 | 葛根 | 3ˊ-甲氧基葛根素 |
| 6 | 15.53 | 葛根 | 葛根素-7-木糖苷 |
| 7 | 16.76 | 葛根 | 葛根素-木糖苷 |
| 8 | 19.10 | 葛根 | 大豆苷 |
| 9 | 22.21 | 葛根 | 4ˊ-甲氧基葛根素 |
| 10 | 30.33 | 葛根 | 染料木素 |
| 11 | 33.45 | 丹参 | 丹酚酸B |
| 12 | 34.34 | 葛根 | 刺芒柄花素 |
| 13 | 37.78 | 葛根 | kakkonein |
| 14 | 38.55 | 葛根 | 香豆雌酚 |
| 15 | 39.72 | 葛根 | 大豆苷元 |
| 16 | 60.30 | 丹参 | 新隐丹参酮 |
| 17 | 67.26 | 丹参 | 丹参酮ⅡA |
由表1可知，所述参葛舒心方HPLC指纹图谱共检测出17个特征峰，其中归属于葛根的特征峰峰号分别为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、13、14、15，共有14个；归属于丹参的特征峰峰号分别为11、16、17，共有3个。以参葛舒心方中主要成分丹参、葛根为主建立起来的HPLC指纹图谱，代表着参葛舒心方中大部分有效成分的药理活性，能有效地表征参葛舒心方的质量，从而实现对参葛舒心方化学成分的检测，有利于对中药质量的全方面监控。
请参阅图1并结合图2、图3，其中，图2为丹参药材色谱图，峰号1为丹酚酸B，峰号2为新隐丹参酮，峰号3为丹参酮ⅡA；图3为葛根药材色谱图，峰号1为葛根素-4ˊ-O-D-葡萄糖苷，峰号2为大豆苷元-4ˊ，7-二葡萄糖苷，峰号3为3ˊ-羟基葛根素，峰号4为葛根素，峰号5为3ˊ-甲氧基葛根素，峰号6为葛根素-7-木糖苷，峰号7为葛根素-木糖苷，峰号8为大豆苷，峰号9为4ˊ-甲氧基葛根素，峰号10为染料木素，峰号11为刺芒柄花素，峰号12为kakkonein，峰号13为香豆雌酚，峰号14为大豆苷元。
利用HPLC-DAD-TOF/MS技术手段对本发明特征峰进行色谱峰归属及紫外吸收曲线的比较，并通过质谱中分子离子峰的精确分子量匹配、保留时间匹配等信息的比较指证：1号峰为葛根素-4ˊ-O-D-葡萄糖苷，2号峰为大豆苷元-4ˊ，7-二葡萄糖苷，3号峰为3ˊ-羟基葛根素，4号峰为葛根素，5号峰为3ˊ-甲氧基葛根素，6号峰为葛根素-7-木糖苷，7号峰为葛根素-木糖苷，8号峰为大豆苷，9号峰为4ˊ-甲氧基葛根素，10号峰为染料木素，11号峰为丹酚酸B，12号峰为刺芒柄花素，13号峰为kakkonein，14号峰香豆雌酚，15号峰为大豆苷元，16号峰为新隐丹参酮，17号峰为丹参酮ⅡA。以上色谱峰构成了本发明参葛舒心方的指纹图谱，可以对参葛舒心方中所含药材做出色谱鉴定，该指纹图谱所提供的化学信息丰富，17个特征峰均做了药材归属，并得到了全部指认，具有良好的专属性。
相对校正因子的确定：fi /s= fi/fs=（A内×C测）/（A测×C内）。其中，i为待测定成分，s为内标成分，A内为内标成分色谱峰面积，A测为待测定成分色谱峰面积，C内为内标成分浓度，C测为待测定成分浓度。以葛根素为参照，考察了2μL、4μL、6μL、8μL、10μL、16μL、18μL、20μL不同进样量下葛根素-7-木糖苷、葛根素-木糖苷、大豆苷、大豆苷元、丹参酮ⅡA这5种成分的相对校正因子，即f葛根素-7-木糖苷/葛根素、f葛根素-木糖苷/葛根素、f大豆苷/葛根素、f大豆苷元/葛根素、f丹参酮ⅡA /葛根素，并计算求出平均相对校正因子，结果如表2所示。
表2：相对校正因子及平均值表。
| 进样量（μL） | f葛根素-7-木糖苷/葛根素 | f葛根素-木糖苷/葛根素 | f大豆苷/葛根素 | f大豆苷元/葛根素 | f丹参酮ⅡA / 葛根素 |
| 2 | 0.0365 | 0.1840 | 0.4004 | 0.0837 | 0.0922 |
| 4 | 0.0362 | 0.1828 | 0.3996 | 0.0833 | 0.0917 |
| 6 | 0.0366 | 0.1846 | 0.4007 | 0.0824 | 0.0920 |
| 8 | 0.0359 | 0.1837 | 0.3987 | 0.0836 | 0.0915 |
| 10 | 0.0361 | 0.1844 | 0.4002 | 0.0842 | 0.0932 |
| 16 | 0.0360 | 0.1839 | 0.3994 | 0.0829 | 0.0911 |
| 18 | 0.0358 | 0.1826 | 0.3988 | 0.0821 | 0.0914 |
| 20 | 0.0375 | 0.1858 | 0.4012 | 0.0850 | 0.0932 |
| 平均值 | 0.0363 | 0.1840 | 0.3999 | 0.0834 | 0.0921 |
| RSD（%） | 1.51 | 0.55 | 0.23 | 1.14 | 0.87 |
根据各成分相对校正因子，按以上色谱条件，测定10批次参葛舒心方样品，得葛根素、葛根素-7-木糖苷、葛根素木糖苷、大豆苷、大豆苷元、丹参酮ⅡA这6种成分含量分别为：0.403%-0.442%，0.007%-0.008%，0.038%-0.042%，0.236%-0.252%，0.016%-0.019%，0.024%-0.027%。由此可见，本发明采用一测多评法对参葛舒心方中主要有效成分进行含量测定，制定含量限度标准，更全面地反映参葛舒心方的质量。
2.2精密度试验：取同一供试品溶液5μL，重复进样6次，记录指纹图谱，计算各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的相对标准偏差RSD（RSD=标准偏差S/计算结果的平均值×100%）。
结果表明，本发明参葛舒心方HPLC指纹图谱构建方法精密度良好，各色谱峰相对保留时间RSD在0.10%-0.38%之间，相对峰面积的RSD在1.68%-2.97%之间，RSD均小于5%，说明仪器性能良好，符合指纹图谱的要求。
2.3稳定性试验：取同一供试品溶液20mL在室温下放置，按上述色谱条件，每隔2h测定一次，连续测定6次，记录指纹图谱，计算各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的RSD。
结果表明，样品制备方法重复性较好，各色谱峰的相对保留时间的RSD在0.14-1.49之间，相对峰面积的RSD在2.89-3.39之间，RSD均小于5%，符合符合指纹图谱的要求。
2.4重复性试验：同一批号参葛舒心方粉末6份，每份5g，按照上述方法制备供试品溶液，按上述色谱条件进样测定，进样量为5μL，记录指纹图谱，计算各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的RSD。
结果表明，样品制备方法重复性较好，各色谱峰的相对保留时间的RSD在0.13%-1.81%之间，相对峰面积的RSD在2.34%-4.08%之间，RSD均小于5%，符合符合指纹图谱的要求。
综上所述，本发明提供一种参葛舒心方HPLC指纹图谱的构建方法，利用高效液相色谱技术，梯度洗脱，得到参葛舒心方HPLC指纹图谱，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版)对10批样品的指纹图谱进行了匹配，进一步得到参葛舒心方HPLC标准指纹图谱，采用HPLC-DAD-TOF/MS串联技术，对参葛舒心方HPLC标准指纹图谱各色谱峰进行指认，共指证出17个色谱峰的化学成分，属于丹参的指纹图谱具有3个峰，属于葛根的指纹图谱具有14个峰。同时采用一测多评法对参葛舒心方中主要有效成分进行含量测定，制定含量限度标准，本发明定性定量相结合，建立了一种谱图清晰，成分明确，含量可控的多息指纹图谱，更全面地反映参葛舒心方的质量，有效完善了参葛舒心方的质量控制方法，丰富了指纹图谱的科学内涵，为更加合理地控制药材质量提供了更为全面的信息。
Claims (1)
1.一种参葛舒心方HPLC指纹图谱的构建方法，包括：
（1）供试品溶液制备：取参葛舒心方，研细过40目筛，精密称取参葛舒心方0.1g-10g，精确至0.0001g，用30%-100%甲醇溶液10-100mL，超声处理10-100min，补足重量，过0.22µm微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液；
（2）对照品溶液制备：精密称取葛根素、大豆苷、大豆苷元、葛根素-7-木糖苷、葛根素木糖苷、丹参酮ⅡA对照品8.72mg、8.39mg、8.30mg、8.24mg、8.33mg、7.08mg，分别加甲醇10mL制成浓度分别为0.872mg/mL、0.839mg/mL、0.830mg/mL、0.824mg/mL、0.833mg/mL、0.708mg/mL的对照品溶液，摇匀，即得；
（3）高效液相色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充相；采用HPLC-DAD-TOF/MS串联的方式进行图谱采集，以乙腈为流动相A，以水为流动相B，进行梯度洗脱，检测波长为271nm；柱温25度；流速为1.0mL/min，分流比1:3，梯度洗脱程序如下：
时间：0-30min，乙腈8%-15%，水92%-85%；
时间：30-45min，乙腈15%-35%，水85%-65%；
时间：45-55min，乙腈35%-55%，水65%-45%；
时间：55-70min，乙腈55%-60%，水45%-40%；
塔板理论数按葛根素峰计算，应不低于4000；
（4）测定：分别精密吸取溶液各5μL，进样，用高效液相色谱仪测定，以对照品的色谱峰相对保留时间和峰面积为1，计算相对保留时间和相对峰面积，即得参葛舒心方HPLC指纹图谱；
所述参葛舒心方HPLC指纹图谱共检测出17个特征峰，其中归属于葛根的特征峰共有14个；归属于丹参的特征峰共有3个；
利用HPLC-DAD-TOF/MS技术手段对本发明特征峰进行色谱峰归属及紫外吸收曲线的比较，并通过质谱中分子离子峰的精确分子量匹配、保留时间匹配信息的比较指证：1号峰为葛根素-4ˊ-O-D-葡萄糖苷，2号峰为大豆苷元-4ˊ，7-二葡萄糖苷，3号峰为3ˊ-羟基葛根素，4号峰为葛根素，5号峰为3ˊ-甲氧基葛根素，6号峰为葛根素-7-木糖苷，7号峰为葛根素-木糖苷，8号峰为大豆苷，9号峰为4ˊ-甲氧基葛根素，10号峰为染料木素，11号峰为丹酚酸B，12号峰为刺芒柄花素，13号峰为kakkonein，14号峰香豆雌酚，15号峰为大豆苷元，16号峰为新隐丹参酮，17号峰为丹参酮；
以葛根素为参照，计算得到葛根素-7-木糖苷、葛根素-木糖苷、大豆苷、大豆苷元、丹参酮ⅡA的相对校正因子，分别为f葛根素 -7- 木糖苷 / 葛根素：0.0363，f葛根素 - 木糖苷 / 葛根素：0.1840，f大豆苷 / 葛根素：0.3999，f大豆苷元 / 葛根素：0.0834，f丹参酮Ⅱ A / 葛根素：0.0921，检测各成分含量，得参葛舒心方中葛根素、葛根素-7-木糖苷、葛根素木糖苷、大豆苷、大豆苷元、丹参酮ⅡA的成分含量分别为：0.403%-0.442%，0.007%-0.008%，0.038%-0.042%，0.236%-0.252%，0.016%-0.019%，0.024%-0.027%。
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| Characterization and identification of multiple constituents in Yinhuang granules by high-performance liquid chromatography with diode-array and time-of-flight mass spectrometry detection;E-Hu Liu等;《Journal of Separation Science》;20111231;第34卷;第2566～2575页 * |
| Chromatographic fingerprinting and quantitative analysis for the quality evaluation of Xinkeshu tablet;Pei Wang等;《Journal of Pharmaceutical Analysis》;20120617;第2卷(第6期);第422～430页 * |
| 应用高效液相色谱-质谱联用技术研究通脉颗粒的指纹图谱;李蓓佳等;《药学学报》;20101231;第45卷(第11期);摘要，第1410页左栏第4行,第3节，第4节 * |
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