CN104237060B - 一种金银花药材多指标快速检测方法 - Google Patents
一种金银花药材多指标快速检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104237060B CN104237060B CN201410518813.XA CN201410518813A CN104237060B CN 104237060 B CN104237060 B CN 104237060B CN 201410518813 A CN201410518813 A CN 201410518813A CN 104237060 B CN104237060 B CN 104237060B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- chinese medicine
- honeysuckle
- content
- medicine honeysuckle
- flos lonicerae
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000205585 Aquilegia canadensis Species 0.000 title claims abstract 18
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title abstract description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 40
- CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 3-O-Caffeoylquinic acid Natural products O[C@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 0.000 claims abstract description 26
- PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N Caffeoylquinic acid Natural products CC(CCC(=O)C(C)C1C(=O)CC2C3CC(O)C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(=O)O PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N Neochlorogenin-saeure Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N 0.000 claims abstract description 26
- CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N chlorogenic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 229940074393 chlorogenic acid Drugs 0.000 claims abstract description 26
- FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N chlorogenic acid Natural products O[C@@H]1C[C@](O)(C[C@@H](CC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 235000001368 chlorogenic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 26
- BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N cis-3-O-p-coumaroylquinic acid Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)cc2)[C@@H]1O)C(=O)O BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N 0.000 claims abstract description 26
- PEFNSGRTCBGNAN-QNDFHXLGSA-N luteolin 7-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=C2C(=O)C=C(C=3C=C(O)C(O)=CC=3)OC2=C1 PEFNSGRTCBGNAN-QNDFHXLGSA-N 0.000 claims abstract description 25
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 claims abstract description 21
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 claims abstract description 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 65
- 241000628997 Flos Species 0.000 claims description 25
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 claims description 25
- WJHSRFQBVYHKKL-UHFFFAOYSA-N Oroboside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC(O)=C2C(=O)C(C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=COC2=C1 WJHSRFQBVYHKKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 22
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 230000008030 elimination Effects 0.000 claims description 4
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 claims description 4
- 238000010606 normalization Methods 0.000 claims description 4
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 10
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 6
- KBGKQZVCLWKUDQ-UHFFFAOYSA-N luteolin-glucoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC(O)=CC2=C1C(=O)C=C(C=1C=C(O)C(O)=CC=1)O2 KBGKQZVCLWKUDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 abstract 1
- 238000007781 pre-processing Methods 0.000 abstract 1
- 238000013441 quality evaluation Methods 0.000 abstract 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 abstract 1
- 241001570521 Lonicera periclymenum Species 0.000 description 46
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000013210 evaluation model Methods 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 101150061025 rseP gene Proteins 0.000 description 5
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- 239000012567 medical material Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 238000002790 cross-validation Methods 0.000 description 2
- 238000013480 data collection Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 3,7-bis(dimethylamino)phenothiazin-5-ium Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000208828 Caprifoliaceae Species 0.000 description 1
- 206010007247 Carbuncle Diseases 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000000297 Erysipelas Diseases 0.000 description 1
- 206010017553 Furuncle Diseases 0.000 description 1
- -1 Ketone compounds Chemical class 0.000 description 1
- 244000167230 Lonicera japonica Species 0.000 description 1
- 235000017617 Lonicera japonica Nutrition 0.000 description 1
- 206010061307 Neck deformity Diseases 0.000 description 1
- 206010068319 Oropharyngeal pain Diseases 0.000 description 1
- 201000007100 Pharyngitis Diseases 0.000 description 1
- 229910021536 Zeolite Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000000205 computational method Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- HNPSIPDUKPIQMN-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O HNPSIPDUKPIQMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 208000003512 furunculosis Diseases 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 1
- 230000008676 import Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000012372 quality testing Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 238000007430 reference method Methods 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000010183 spectrum analysis Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 239000010457 zeolite Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明提供一种金银花药材多指标快速检测方法，通过金银花药材采集、测定其中水分、浸出物、绿原酸及木犀草苷的含量、收集近红外光谱数据并作预处理、各质控指标建模后快速检测模型。本发明引入近红外光谱技术作为金银花药材实时放行的检测方法，可用于快速测定药材中水分、浸出物、绿原酸及木犀草苷的含量，与传统方法相比，所建的分析方法和实时放行的定量标准能更快速判断出药材质量是否合格，确定药材是否能进入后续生产工艺环节，满足了实际生产中快速、高效的现场要求，具有生产药材筛选和质量全面评价的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于近红外分析检测领域，具体涉及一种金银花药材多指标快速检测方法。
背景技术
金银花为忍冬科植物忍冬（Lonicera japonica Thunb.）的干燥花蕾或带初开的花，是全国十大名贵药材之一，具有很高的保健和药用价值，深受国内外学者和企业家的重视。金银花性味甘寒，归肺、心、胃经，具有清热解毒、凉散风热的功能，用于痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热诸病。金银花含有多种药理活性成分，其中，绿原酸、黄酮类化合物是金银花中的主要药效成分，具有重要的抗氧化、抗癌、抗病作用。金银花是目前中药制剂生产中常用的原料药材，但是其来源广泛，品种繁多，同一品种药材因其生长条件、采收季节、加工方式及贮藏条件的不同而在质量上存在差异，从而使中药制剂成品存在一定的质量差异。故有必要在药材进入中药制剂生产前对其质量进行检测和评价。
近红外（NIR）光谱分析技术是一种间接分析技术，是目前发展最快和最具有前景的过程分析技术之一，具有样品处理简单、无损、分析快速、无试剂消耗、绿色环保等特点，已经陆续用于药效成分的含量测定、制药过程的在线检测和监控、天然药物鉴别、中药材的产地鉴别等。将近红外光谱技术应用于金银花药材的质量检测，可实现入库和投料前药材质量的现场快速检测，从金银花药材制剂生产的源头上控制其质量，保证最终产品的质量安全性、稳定性、均一性和有效性。
目前，针对于金银花药材多指标质控含量同时检测的相关文献报道较少，本方法在金银花原药材质量快速分析领域具有重要前景和意义。
发明内容
本发明目的在于提供一种金银花药材多指标快速检测方法，采用该方法能方便快速地测定金银花中水分含量、浸出物含量、绿原酸含量及木犀草苷含量，实现对金银花药材整体质量的快速无损评价。
本发明的目的是通过以下技术方案实现：
（1）采集不同产地和批次的金银花药材：
采集不同产地的金银花样本，药材经粉碎后，过80目筛，得到粒度较均匀的金银花药材粉末。
（2）金银花药材质控指标的测定：
选取水分含量、浸出物含量、绿原酸含量及木犀草苷含量作为金银花药材的关键质控指标；水分含量采用甲苯法测定，浸出物含量采用热浸法（水溶性浸出）测定，绿原酸和木犀草苷含量采用高效液相色谱法测定。
（3）金银花药材近红外光谱数据采集：
精密称取金银花药材粉末2 g，置于称量瓶中，保持粉末表面平整，采用漫反射法采集近红外光谱，以空气为参比，扫描次数为32，分辨率为8 cm-1，扫描光谱范围为4000~12000 cm-1。
（4）近红外原始光谱的预处理
对步骤（3）采集的近红外原始光谱进行预处理，以提取有效信息，减少噪音影响，采用一阶导数（1st）、二阶导数（2st）、多元散射校正（MSC）、Norris平滑、减去一条直线、消除常数偏移量、矢量归一化（SNV）中1种或2种方法的结合对剔除了异常光谱值的光谱样本进行预处理，具体如下：
1）金银花水分含量模型采用消除常数偏移量光谱预处理；
2）金银花浸出物含量模型采用一阶导数（1st）+矢量归一化（SNV）光谱预处理；
3）金银花绿原酸含量模型采用减去一条直线光谱预处理；
4）金银花木犀草苷含量模型采用一阶导数（1st）光谱预处理。
（5）选择金银花药材各质控指标的建模波段，建立近红外定量校正模型：
将金银花样品的近红外光谱经过光谱预处理后，其建模波段选择为：水分模型建模波段为4975.5-7428.6 cm-1；浸出物模型建模波段为4597.6-5453.8 cm-1和6097.9-9403.4 cm-1；绿原酸和木犀草苷模型建模波段均为4246.6-7501.9 cm-1，应用化学计量学计算方法将所得的近红外光谱信息与参比方法所测标准值进行关联，采用偏最小二乘（PLS）法建立近红外光谱与质控指标之间的定量校正模型。
所建立的校正模型采用相关系数（R）、相对分析误差（RPD）、交叉验证均方根（RMSECV）主成分数（Factor）四个参数考察模型性能，同时采用验证集均方根（RMSEP）和预测相对偏差（RSEP）来评价模型对未知样品的预测能力，当R值接近于1，当RPD值大于2.5且越大评价模型性能越好，预测准确度高，当RMSEP越小，RSEP值小于10%时评价模型具有较好的预测能力，能够满足金银花实时放行检测的要求。
（6）校正模型的验证：
用步骤（3）中所选的验证集样品对步骤（5）所述的定量校正模型进行验证，采用同校正集样品光谱相同的预处理方法后，导入到已建的定量校正模型中，快速测定金银花水分、浸出物、绿原酸及木犀草苷的含量，并验证模型的性能。
（7）建立金银花药材质量实时放行的定量标准：
使用上述所建立的4个近红外定量模型来测定未知金银花药材中各质控指标的含量，当水分含量≤12.0%，浸出物含量≥45.0%，绿原酸含量≥1.5%，木犀草苷含量≥0.05%时，则判断该金银花药材为合格样品，符合原药材质量要求，可以投入提取、浓缩等后续生产环节。
本发明的另一个目的是提供所述方法在金银花药材多指标快速检测中应用。
本发明将近红外分析技术引入到金银花药材检测中，实现对各质控指标（水分、浸出物、绿原酸及木犀草苷）的同时快速测定，在中药生产中从源头上控制了原材料的质量，缩短检测时间，节约生产成本，提高生产效率和经济效益，保正金银花药材制剂成品质量的安全性、有效性和均一性。采用本发明方法能方便快速地测定金银花中水分含量、浸出物含量、绿原酸含量及木犀草苷含量，实现对金银花药材整体质量的快速无损评价。本发明方法可同时快速、无损测定金银花药材中多种质控指标的含量。且对未知金银花药材经过近红外定量校正模型的分析，根据各质控指标含量，可判断其质量是否符合规定定量的实时放行标准，从而放行进入原药材投料及提取、浓缩等后续的生产工艺环节中。同时本发明还为金银花药材有效成分的实时放行检测在中药质量控制领域的推广和应用提供一种新的思路和参考。
附图说明
附图1是金银花药材粉末近红外原始吸收光谱图。
附图2是金银花药材粉末水分含量实测值与近红外预测值的相关图。
附图3是金银花药材粉末浸出物含量实测值与近红外预测值的相关图。
附图4是金银花药材粉末绿原酸含量实测值与近红外预测值的相关图。
附图5是金银花药材粉末木犀草苷含量实测值与近红外预测值的相关图。
附图6是金银花药材粉末水分含量实测值与近红外预测值的比较图。
附图7是金银花药材粉末浸出物含量实测值与近红外预测值的比较图。
附图8是金银花药材粉末绿原酸含量实测值与近红外预测值的比较图。
附图9是金银花药材粉末木犀草苷含量实测值与近红外预测值的比较图。
具体实施方式
本发明结合附图和实施例作进一步的说明。
实施例1：
（1）金银花药材近红外光谱数据采集
不同产地的金银花药材粉碎后，过80目筛，得到粒度较均匀的金银花药材粉末，将所得的金银花药材粉末精密称取2 g，置扁形瓶中，保持粉末表面平整，利用漫反射法采集近红外光谱。光谱采集条件：以空气为参比，扫描范围为4000-12000 cm-1，扫描次数为32次，分辨率为8 cm-1。每批样品扫描重复3次，取平均光谱。金银花药材粉末近红外原始吸收光谱图见附图1。
（2）金银花药材各质控指标的测定
①水分测定方法：取供试品约10 g（X），精密称定，置500 mL的短颈圆底烧瓶中，加甲苯约200 mL，加入干燥洁净的沸石或玻璃珠数粒，将仪器各部分连接，冷凝管上加一小漏斗，自冷凝管顶部加入甲苯，使甲苯充满水分测定管的狭细部分。将圆底烧瓶置电热套中缓缓加热，待甲苯开始沸腾时，调节温度，使每秒钟馏出2滴，待水分完全馏出（即水分测定管的狭细部分不再有水滴滴落现象或测定管的刻度部分的水量不再增加时），将冷凝管内部先用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷，将管壁上附着的甲苯推下，继续蒸馏5min，放冷至室温。拆卸装置，如有水黏附在水分测定管的管壁上，可用蘸甲苯的铜丝推下，放置，使水分与甲苯完全分离（加亚甲蓝粉末少量，使水染成蓝色,分离观察），检读水量(V)。
②浸出物测定方法：取供试品约4 g，精密称定（X1），置250 mL的锥形瓶中，精密加水100 mL，密塞，称定重量，静置1小时后，连接回流冷凝管，置电热套内，加热至沸腾，并保持微沸1小时。取下锥形瓶，密塞，放冷至室温，称重，用水补足减失的重量，摇匀，用滤纸滤过至烧杯中，精密量取滤液25 mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中（X0），水浴蒸干后，于105℃干燥3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量（X2）。以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量（％）。
③绿原酸采用高效液相色谱测定：a. 预处理方法为：取金银花药材粉末（过四号筛）约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加50 mL的50%甲醇，称定重量，超声处理（功率250W，频率50HZ）30 min，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5 mL，置25 mL棕色量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，置5 mL的离心管中离心10min，转速为8000r/min，取上清液，即得；b. 液相色谱条件：色谱柱：Agilent SB-C18分析柱（4.6×250 mm，5 μm）；流动相：乙腈-0.4%磷酸溶液（13:87）；检测波长327 nm；流速为1 mL/min；进样量为10 μL。理论塔板数应不低于1000。
③木犀草苷采用高效液相色谱测定：a. 预处理方法为：取金银花药材粉末（过四号筛）约2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加50 mL的70%乙醇，称定重量，超声处理（功率250W，频率50HZ）1h，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10 mL，回收溶剂至干，残渣用70%乙醇溶解，转移至5 mL量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀，置5 mL的离心管中离心10 min，转速为8000 r/min，取上清液，即得；b. 液相色谱条件：色谱柱：Agilent SB-C18分析柱（4.6×250 mm，5 μm）；流动相：以乙腈为流动相A，以0.5%冰醋酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱（按0～15 min，流动相（A）10→20%，15～30 min，流动相（A）20%，30～40 min，流动相（A）20→30%）；检测波长350 nm；流速为1 mL/min；进样量为10 μL。理论塔板数应不低于20000。
（3）建立金银花药材各质控指标的定量分析模型
运用偏最小二乘（PLS）法建立样品中4个指标的近红外定量分析模型。模型建立前对校正集光谱进行异常点判别，以提高模型精度，同时原始光谱在平滑、微分等适宜的光谱预处理方法下来消除仪器背景或漂移对信号的影响，选择合适的波段提取有效信息，减少计算量，缩短建模时间。选择合适的建模波段，以交互验证误差均方根（RMSECV）为指标，运用留一交互验证法确定最佳PLS主因子数。
199个金银花药材样品在剔除异常样本后，随机选择108-163个样本作为四个模型的校正集，19-59个样本作为模型的验证集用于预测。定量校正模型采用相关系数（R）、相对分析误差（RPD）、交叉验证均方根（RMSECV）和主成分数（Factor）四个参数考察模型性能，同时采用预测相对偏差（RSEP）来评价模型对未知样品的预测能力，当R值接近于1，当RPD值大于2.5且越大评价模型性能越好，预测准确度高，当RSEP值小于10%时评价模型具有较好的预测能力，能够满足鸡血藤快速检测的要求。
最终确定各质控指标的最优建模条件：水分含量模型采用消除常数偏移量进行预处理，建模波段为4975.5-7428.6 cm-1；浸出物含量模型采用一阶导数（1st）和矢量归一化（SNV）进行预处理，建模波段为4597.6-5453.8 cm-1和6097.9-9403.4 cm-1；绿原酸含量模型采用减去一直线进行预处理，建模波段为4246.6-7501.9 cm-1；木犀草苷含量模型采用一阶导数（1st）平滑进行预处理，建模波段为4246.6-7501.9 cm-1；
表1为4个指标的近红外模型的建模结果参数比较，从表1可以看出，4个指标的近红外模型的线性良好，相关系数均在0.95以上，RPD值在均2.5以上，除浸出物含量模型外RMSECV值均在1.50以下，说明所建立的近红外定量校正模型效果较优，适用性较好。水分含量的实测值和预测值之间的相关图见附图2，浸出物含量的实测值和预测值之间的相关图见附图3，绿原酸含量的实测值和预测值之间的相关图见附图4，木犀草苷含量的实测值和预测值之间的相关图见附图5。
（4）定量校正模型的验证
将4个定量校正模型分别用于预测对应模型随机挑选的19-59个验证集样品中水分、浸出物、绿原酸及木犀草苷的含量。水分含量的实测值和近红外预测值的比较见附图6，浸出物含量的实测值和近红外预测值的比较见附图7，绿原酸含量实测值和近红外预测值比较见附图8，木犀草苷含量实测值和近红外预测值比较见附图9，可以看出4个指标的含量实测值与近红外预测值十分接近。
表2为4个不同指标的近红外模型预测结果的参数汇总，从表2可看出除浸出物含量模型外，水分、绿原酸、木犀草苷含量模型预测相关系数均在0.90以上，RMSEP均在0.2左右或低于0.2，说明模型稳定性和适用性良好。4个指标定量模型RSEP均可控制在10%以内，说明所建立的4个质控指标的近红外分析模型具有较好的预测能力和预测精度。
（5）使用以上方法测得的未知金银花药材的水分含量≤12.0%，浸出物含量≥45.0%，绿原酸含量≥1.5%，木犀草苷含量≥0.05%时，则可以判断该金银花药材为合格样品，符合原药材质量要求，可以投入提取等后续生产环节。
本发明提出一种金银花药材多指标快递检测方法。结果表明，使用近红外光谱分析技术可以同时对金银花水分、浸出物、绿原酸及木犀草苷含量进行快速无损分析。本方法省时、无损，绿色环保，提高生产效率和经济效益，从金银花制剂的生产源头控制其质量水平，保证制剂成品的安全可靠，为金银花原药材的质量控制提供了新的方法。
Claims (2)
1.一种金银花药材快速检测方法，其特征在于，通过以下步骤实现：
（1）金银花药材采集：采集不同产地的金银花样本，样本经粉碎后，过80目筛，得到粒度均匀的金银花药材粉末；
（2）测定各质控指标的含量：选取水分含量、浸出物含量、绿原酸含量及木犀草苷含量作为金银花药材的关键质控指标；
（3）采集近红外光谱数据：称取金银花药材粉末，置于称量瓶中，保持粉末表面平整，采用漫反射法采集近红外光谱，以空气为参比，扫描次数为32，分辨率为8 cm-1，扫描光谱范围为4000~12000 cm-1；
（4）近红外原始光谱的预处理；对步骤（3）采集的近红外原始光谱进行预处理，以筛选有效信息，减小无关噪音的影响，具体如下：
1）金银花水分含量模型采用消除常数偏移量光谱预处理；
2）金银花浸出物含量模型采用一阶导数（1st）+矢量归一化（SNV）光谱预处理；
3）金银花绿原酸含量模型采用减去一条直线光谱预处理；
4）金银花木犀草苷含量模型采用一阶导数（1st）光谱预处理；
（5）建立近红外定量校正模型：金银花样本的近红外光谱经过光谱预处理后，选择其相应建模波段为：水分模型建模波段为4975.5-7428.6 cm-1；浸出物模型建模波段为4597.6-5453.8 cm-1和6097.9-9403.4 cm-1；绿原酸和木犀草苷模型建模波段均为4246.6-7501.9cm-1，采用偏最小二乘（PLS）法建立近红外光谱与上述各质控指标之间的定量校正模型；
（6）建立实时放行定量标准：使用上述所建立的4个近红外定量模型来测定金银花药材中的4个质控指标的含量，当预测未知金银花药材的水分含量≤12.0%，浸出物含量≥45.0%，绿原酸含量≥1.5%，木犀草苷含量≥0.05%时，判断金银花药材的质控指标含量符合质量要求。
2.根据权利要求1所述的一种金银花药材多指标快速检测方法在金银花药材多指标快速放行检测中应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410518813.XA CN104237060B (zh) | 2014-10-05 | 2014-10-05 | 一种金银花药材多指标快速检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410518813.XA CN104237060B (zh) | 2014-10-05 | 2014-10-05 | 一种金银花药材多指标快速检测方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104237060A CN104237060A (zh) | 2014-12-24 |
| CN104237060B true CN104237060B (zh) | 2017-01-18 |
Family
ID=52225573
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410518813.XA Active CN104237060B (zh) | 2014-10-05 | 2014-10-05 | 一种金银花药材多指标快速检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104237060B (zh) |
Families Citing this family (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104833651B (zh) * | 2015-04-15 | 2017-06-30 | 浙江大学 | 金银花浓缩过程在线实时放行检测方法 |
| CN105784539A (zh) * | 2016-05-20 | 2016-07-20 | 芜湖宝瓶智能化服务外包有限公司 | 一种三羟基二苯乙酮的检验方法 |
| CN106074806B (zh) * | 2016-06-20 | 2017-09-22 | 广东一方制药有限公司 | 一种黄柏颗粒及其中药制剂 |
| CN106442376B (zh) * | 2016-08-31 | 2020-01-31 | 聚光科技(杭州)股份有限公司 | 化验数据质量的评估方法 |
| CN107153057A (zh) * | 2017-06-14 | 2017-09-12 | 山东省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 | 一种基于矿物元素指纹技术的金银花产地鉴别方法 |
| CN109212095B (zh) * | 2018-10-31 | 2021-08-17 | 晨光生物科技集团股份有限公司 | 一种快速评价甜叶菊综合质量的方法 |
| CN109632702A (zh) * | 2019-01-22 | 2019-04-16 | 天津中医药大学 | 一种金银花含量的检测方法 |
| CN110609010A (zh) * | 2019-09-06 | 2019-12-24 | 华润三九医药股份有限公司 | 一种快速测定两面针中药用成分含量的方法 |
| CN112684023A (zh) * | 2020-12-02 | 2021-04-20 | 太极集团重庆涪陵制药厂有限公司 | 一种厚朴药材质量的快速检测方法和厚朴药材的筛选方法 |
| CN114011717A (zh) * | 2021-11-23 | 2022-02-08 | 怀化市四宝山生物科技有限公司 | 一种金银花深加工用分级筛选方法 |
| CN115128036A (zh) * | 2022-07-18 | 2022-09-30 | 山东大学 | 一种手持式近红外光谱检测方法及装置 |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050037374A1 (en) * | 1999-11-08 | 2005-02-17 | Melker Richard J. | Combined nanotechnology and sensor technologies for simultaneous diagnosis and treatment |
| CN101366849B (zh) * | 2007-08-15 | 2012-07-25 | 北京康仁堂药业有限公司 | 一种中药枳实的检测和含量测定方法 |
| CN101299022A (zh) * | 2008-06-20 | 2008-11-05 | 河南中医学院 | 利用近红外光谱技术评价中药药材综合质量的方法 |
| CN101303294B (zh) * | 2008-06-20 | 2010-08-18 | 河南中医学院 | 近红外在线检测技术在中药一清颗粒生产中的应用方法 |
| CN102038728A (zh) * | 2009-10-26 | 2011-05-04 | 贵阳医学院 | 灯盏细辛药材的质量控制方法 |
| CN102038757B (zh) * | 2010-10-12 | 2012-04-25 | 北京同仁堂科技发展股份有限公司 | 一种药物组合物的质量检测控制体系 |
| CN102288572A (zh) * | 2011-05-09 | 2011-12-21 | 河南中医学院 | 利用近红外光谱技术快速检测中药药材指标性成分含量的方法 |
| CN103478342A (zh) * | 2012-06-07 | 2014-01-01 | 杨俊杰 | 一种忍冬乌龙茶加工技术 |
| CN103478341A (zh) * | 2012-06-07 | 2014-01-01 | 杨俊杰 | 一种忍冬红茶加工技术 |
| CN103478343A (zh) * | 2012-06-07 | 2014-01-01 | 杨俊杰 | 忍冬苦丁茶 |
| CN103230453A (zh) * | 2013-04-19 | 2013-08-07 | 康美药业股份有限公司 | 一种茵陈蒿汤配方颗粒及其制备方法和检测方法 |
| CN103439288B (zh) * | 2013-08-24 | 2016-04-13 | 浙江大学 | 一种银杏叶药材实时放行检测方法 |
| CN103520250A (zh) * | 2013-10-24 | 2014-01-22 | 泰州仁济中药饮片有限公司 | 金银花精制细粉袋泡型产品gmp生产工艺及其应用方法 |
-
2014
- 2014-10-05 CN CN201410518813.XA patent/CN104237060B/zh active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104237060A (zh) | 2014-12-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104237060B (zh) | 一种金银花药材多指标快速检测方法 | |
| CN104568822B (zh) | 一种连翘药材多指标同时快速检测方法 | |
| CN104792652B (zh) | 一种黄芪药材多指标快速检测方法 | |
| CN103439288B (zh) | 一种银杏叶药材实时放行检测方法 | |
| CN104833651B (zh) | 金银花浓缩过程在线实时放行检测方法 | |
| CN102539566B (zh) | 运用近红外光谱技术快速测定盾叶薯蓣中薯蓣皂苷含量的方法 | |
| CN104062260B (zh) | 一种含有柚皮苷中药生产过程中的近红外在线检测方法 | |
| CN102621092B (zh) | 一种丹红注射液醇沉过程在线检测方法 | |
| CN104048941A (zh) | 采用近红外光谱快速测定麦冬中多指标性成分含量的方法 | |
| CN107024446A (zh) | 一种六味地黄丸小蜜丸生药粉多指标快速检测方法 | |
| CN104730030A (zh) | 基于近红外分析技术的党参真伪鉴别和产地判定的方法 | |
| CN104849364B (zh) | 参枝苓口服液指纹图谱的建立方法及其指纹图谱与应用 | |
| CN103033486A (zh) | 陈皮及广陈皮药材质量的近红外光谱监控方法 | |
| CN109856084A (zh) | 一种香砂养胃丸浓缩丸制备过程质量监测方法 | |
| CN104568813A (zh) | 一种山茱萸药材多指标快速检测方法 | |
| Lei et al. | Identification of different bran-fried Atractylodis Rhizoma and prediction of atractylodin content based on multivariate data mining combined with intelligent color recognition and near-infrared spectroscopy | |
| CN101791331A (zh) | 一种快速测定丹参提取液中鞣质含量的方法 | |
| Chen et al. | Trends in digital detection for the quality and safety of herbs using infrared and Raman spectroscopy | |
| Fan et al. | Quality assessment of Fritillariae cirrhosae using portable NIR spectrometer | |
| Ye et al. | Rapid determination of chemical components and antioxidant activity of the fruit of Crataegus pinnatifida Bunge by NIRS and chemometrics | |
| CN102507829A (zh) | 一种烟草hplc指纹图谱数据库的建立方法及应用 | |
| CN105784951A (zh) | 一种六味地黄丸浓缩丸生药粉多指标快速检测方法 | |
| CN117629935A (zh) | 基于太赫兹光谱分析的中药喷干粉关键组分检测方法 | |
| CN102106956B (zh) | 一种测定肾宝合剂渗漉液近红外光谱，比重及淫羊藿苷含量的方法 | |
| CN103335960A (zh) | 一种华蟾素提取浓缩过程关键指标的快速检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant |