CN104211701B - 一种制备莫西沙星杂质b和杂质d的方法 - Google Patents

Abstract

本发明报道了一种莫西沙星杂质B以及杂质D的制备方法，具体是将2,3,4-三氟-5-甲氧基苯甲酸为起始原料，经过一系列反应制得莫西沙星杂质D，再将其转化为莫西沙星杂质B，最后经由一次重结晶操作，即可得到高纯度的莫西沙星杂质B纯品固体。本发明方案具有合成路线简短，操作简单，所得杂质产物纯度较高（HPLC纯度99.6%～99.7%），可应用于对照品研究等特点。

Description

一种制备莫西沙星杂质B和杂质D的方法

技术领域

本发明属于药物化学领域，具体涉及一种莫西沙星杂质B以及杂质D的制备方法。

背景技术

盐酸莫西沙星（Moxifloxacinhydrochloride）化学名为：1-环丙基-6-氟-1,4-二氢-8-甲氧基-7-[（4αS,7αS）-八氢-6H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-基]-4-氧代-3-喹啉羧酸盐酸盐，CasNo.:151096-09-2，具有下式所示的化学结构：

。

盐酸莫西沙星是德国拜耳医药公司研制的超广谱喹诺酮类抗生素，于1999年9月首次在德国上市，同年12月获FDA批准在美国上市。盐酸莫西沙星具有广谱的抗菌活性，尤其是对革兰氏阳性、支原体、衣原体、军团菌等活性远优于环丙沙星，并且对厌氧菌有效。它在人体半衰期长，每日给药1次400mg。临床主要用于治疗急性窦腺炎、慢性支气管炎的急性发作、社区获得性肺炎，以及无并发症的皮肤感染和皮肤软组织感染。本品具有广谱，高效，低毒，呈低水平耐药，几乎没有光敏反应等优点，被认为是“治疗呼吸道感染接近理想的药物”。

盐酸莫西沙星的质量标准在英国药典、欧洲药典和美国药典中已有收载，其中明确指出可能含有的A、B、C、D、E这5种杂质，此5种杂质的结构如下：

在上述标准中，该5种杂质采用混合对照的方式进行系统适应性试验以控制杂质，但是并未采用杂质对照品法进行定量控制。现有文献中未见有关于制备莫西沙星杂质B以及杂质D的高效合成方法。

《化学药物杂质研究的技术指导原则》（【H】GPH3-1，第6～7页）指出：有机杂质的检测一般多采用HPLC法。如采用HPLC法，须采用峰面积法，具体定量方法采用外标法（杂质对照品法），外标法定量比较准确。

莫西沙星杂质B以及杂质D是莫西沙星质量标准中所须重点关注的两个杂质，其对于莫西沙星杂质的相关研究意义非常重大。因此，提供一种简便高效制备高纯度的莫西沙星杂质B以及杂质D的方法，对于莫西沙星杂质的相关研究意义重大。它可以用于莫西沙星生产中的杂质定性和定量的分析，从而可以提高莫西沙星的质量标准，为人民群众安全用药提供重要的指导意义。

发明内容

为了提高盐酸莫西沙星的质量，降低临床用药的风险，本发明的目的是提供一种莫西沙星杂质B的制备方法，该技术方案在合成莫西沙星杂质D的基础上，通过一步转化反应，方便地制得莫西沙星杂质B，并由重结晶法制得高纯度的杂质对照品。本发明方案能够快速、简便、高效地得到杂质对照品，对采用外标法（即杂质对照品法）严格控制盐酸莫西沙星的质量等方面做出贡献。

本发明提供一种莫西沙星杂质B（式I化合物）的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

（1）以2,3,4-三氟-5-甲氧基苯甲酸为起始原料，合成莫西沙星杂质D，即式II化合物；

（2）将莫西沙星杂质D（式II）在二甲亚砜溶液中与甲醇钠进行反应，得到莫西沙星杂质B，即式I化合物。

具体地，本发明总方案的步骤（1）可以细分为：

（a）将2,3,4-三氟-5-甲氧基苯甲酸和氯化亚砜的混合物搅拌加热，滴加催化量的二甲基甲酰胺DMF，90～95℃回流2.5～3h，浓缩反应液至干，加入适量无水甲苯溶解，得到酰氯（式III）溶液；

（b）在镁屑和无水乙醇的混合物中，加入四氯化碳，搅拌均匀；当混合液中有气泡冒出时，缓慢滴加丙二酸二乙酯的甲苯/无水乙醇混合溶液，控制温度55～65℃反应2～3h，降温至0～5℃，缓慢滴加步骤（a）所得酰氯（式III）溶液，滴毕，升温至30～35℃反应1.5～2.5h，反应完毕，缓慢滴加稀盐酸，搅拌0.5h，静置分层，取甲苯层，干燥后除去甲苯，得到油状物（式IV化合物）；

（c）将式IV化合物溶解于DMF中，加入1.5%～2%的对甲苯磺酸水溶液，100～110℃搅拌10～12h，反应完毕，降至室温，加入乙酸乙酯搅拌0.5h，静置分层，取乙酸乙酯层，干燥后除去乙酸乙酯，得到油状物（式V化合物）；

（d）将式V化合物、醋酐和原甲酸三乙酯的混合物在110～120℃回流反应2.5～3h，反应完毕，减压浓缩至少量剩余物时，加入无水甲苯溶解，进一步浓缩至干，得油状物（式VI化合物）；

（e）将式VI化合物溶解于无水二氯甲烷中，降温至0～5℃，缓慢滴加环丙基胺的无水二氯甲烷溶液，滴毕，升温至35～40℃搅拌反应4～5h，反应完毕，浓缩得到式VII化合物；

（f）将式VII化合物溶解于DMF中，加入无水碳酸钾，75～80℃搅拌反应3～4h，反应完毕，将反应液缓慢倒入饱和食盐水中，收集析出的白色固体，即式VIII化合物；

（g）将醋酐、硼酸和少量氯化锌的混合物在110～115℃搅拌反应2h，降温至85～90℃，加入式VIII化合物，继续升温至110～115℃，搅拌反应2～3h，反应完毕，将反应液缓慢倒入冰水中，收集析出的淡黄色的螯合物固体（式IX化合物）；

（h）将式IX化合物溶解于乙腈中，加入三乙胺，室温下缓慢加入(S,S)-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷，加毕，90～95℃回流反应3h，反应完毕浓缩至干，得式X化合物，直接投入下步反应；

（i）将式X化合物粗品加入8～9%氢氧化钠溶液中，80～85℃反应2～3h，反应完毕，加入体积比1：3的正己烷/甲苯混合溶剂，搅拌洗涤0.5h，静置分层，取水层，降温至3～6℃，用4mol/L盐酸调节pH至7～8，收集析出的淡黄色固体，即式II化合物；采用体积比3：1的异丙醇/水混合溶剂进行重结晶，静置析晶温度4～8℃，可制得莫西沙星杂质D的精制品（式II化合物）。

具体地，步骤（2）可以细致表述为：

将莫西沙星杂质D溶解于二甲亚砜中，加入前部分的甲醇钠，135～145℃搅拌反应1.5h，补加后部分的甲醇钠，维持温度105～110℃继续反应4～5h，反应完毕，将上述反应液加入乙酸乙酯中，收集析出的粗品固体；将粗品溶解于7%氢氧化钠溶液中，80～85℃搅拌2h，降温至5℃，用稀盐酸调节pH至7～8，收集析出的淡黄色固体，即莫西沙星杂质B（式I化合物）。

进一步地，步骤（b）中酰氯（式III）：丙二酸二乙酯的摩尔比为1：1.2～1.4；并且，式III化合物：镁屑：四氯化碳的重量比为6：1：0.5。

进一步地，步骤（c）中DMF体积是式IV化合物重量的0.8～1.4倍（mL/g）；并且，对甲苯磺酸溶液的体积是DMF体积的6～9倍。

进一步地，步骤中，步骤（d）中，式V化合物：醋酐：原甲酸三乙酯的摩尔比为1：4.5～5：2.5～3。

进一步地，步骤（e）中，式VI化合物：环丙基胺的重量比为4：1。

进一步地，在由杂质D转化制备杂质B的过程中，二甲亚砜体积是式II化合物重量的7～9倍（mL/g）；并且，前部分的甲醇钠：式II化合物的摩尔比为1.5～2：1；后部分的甲醇钠：式II化合物的摩尔比为3.5～4：1。此外，莫西沙星杂质B可进一步重结晶精制，即采用体积比3：2的甲醇/甲基叔丁基醚的混合溶剂进行重结晶，在温度-10～-5℃静置析晶6～7h，得到莫西沙星杂质B的高纯度精制品。

本发明方案公开了一种简捷的制备莫西沙星杂质B以及杂质D的方法。从化学结构角度分析，杂质D、杂质B以及莫西沙星同属于一种喹诺酮甲酸的化学母核，区别仅在于母核上6位和8位的取代基不同。莫西沙星6位是氟，8位是甲氧基；杂质D的6位是甲氧基，8位是氟；杂质B的6位和8位都是甲氧基。仔细比较这些官能团之间的相互变化，发现难以通过使用莫西沙星或其简单衍生物作为起始原料进行基团转化来制备杂质D和B；鉴于两者在母环6位、8位官能团上的限制，发明人考虑选择合适的起始原料，重新构建喹诺酮母核才是可行之法。

为了实现使用一条合成路线同时制备杂质B和D这两个目标物的便利，发明人研究了相应的起始原料2,3,4-三氟-5-甲氧基苯甲酸，或者2,4-三氟-3,5-甲氧基苯甲酸的易得程度，氟原子和甲氧基相互转化反应的难易程度，配以选用合适的试剂和步骤，最终解决了相关问题，实现了本发明目的。本发明方案具备的技术优势及取得的有益的技术进步，详述如下：

（1）选用合适的起始原料2,3,4-三氟-5-甲氧基苯甲酸，一步步地构建相应的喹诺酮母核，通过链接壬烷侧链，率先制得莫西沙星杂质D，再通过一步氟原子转化为甲氧基的反应，方便高效地制得莫西沙星杂质B，实现了一举两得的杂质制备目的。杂质B和杂质D都可以经由重结晶操作，得到高纯度的莫西沙星杂质对照品。

（2）在莫西沙星杂质D转化为杂质B的过程中，母核8位氟原子转变为甲氧基，难以避免经历高温和强碱的化学环境，因此须关注所选反应条件和方法，是否有助于减少副产物的生成。本发明方案在该步转化反应中，先后变化了两个反应条件，前部分是1.5～2摩尔量的甲醇钠，温度135～145℃；后部分是3.5～4摩尔量的甲醇钠，温度105～110℃；通过这两种条件的组合，能够避免使用超大过量的甲醇钠在高温下长时间加热反应，可以极大降低该转化反应的副产物的生成。

（3）在莫西沙星杂质B的重结晶研究中，经过溶剂筛选和纯度比对，发明人最终确定采用甲醇：甲基叔丁基醚=3：2（v/v），并且低温（-10～-5℃）静置析晶的方式，可以将精制品的HPLC的纯度达到99.6～99.7%，重现性良好。

综上所述，本发明报道的莫西沙星杂质B以及杂质D的制备方法，是将2,3,4-三氟-5-甲氧基苯甲酸为起始原料，经过一系列反应制得莫西沙星杂质D，再转化为莫西沙星杂质B，最后经由一次重结晶操作，即可得到高纯度的莫西沙星杂质B纯品固体。本发明方案具有合成路线简短，操作简便，所得杂质产物纯度较高（HPLC纯度99.6%～99.7%），可应用于对照品研究等特点。

具体实施方式

下面结合具体的优选实施例，对本发明的技术方案做进一步的说明。

实施例1式III化合物的制备

将2,3,4-三氟-5-甲氧基苯甲酸（82.5g，0.4mol）和氯化亚砜350mL的混合物搅拌加热，滴加催化量的二甲基甲酰胺DMF约1mL，温度90～95℃，回流反应2.5h，浓缩反应液至干，得黄色油状物（式III）86.6g，加入无水甲苯约80mL溶解，得到酰氯溶液，待用于下步反应。

实施例2式IV化合物的制备

在镁屑（14.4g，0.6mol）和无水乙醇56mL的混合物中，加入四氯化碳7.2g，搅拌均匀；当混合液中有气泡冒出时，缓慢滴加丙二酸二乙酯（76.8g，0.48mol）与甲苯180mL和无水乙醇50mL的混合液，控制温度55～60℃反应2～3h，降温至0～5℃，缓慢滴加上步中的酰氯（式III）液，滴毕，升温至30～35℃反应2h，反应完毕，缓慢滴加1mol/L稀盐酸100mL，搅拌0.5h，静置分层，取甲苯层，干燥后除去甲苯，得到油状物123g（式IV化合物）。MS（ESI+）：349.3[M+H]⁺

实施例3式V化合物的制备

将式IV化合物123g溶解于DMF100mL中，加入1.5%对甲苯磺酸水溶液600mL，100～110℃搅拌10h，反应完毕，降至室温，加入乙酸乙酯300mL搅拌0.5h，静置分层，取乙酸乙酯层，干燥后除去乙酸乙酯，得到油状物107g（式V化合物）。

实施例4式VI化合物的制备

将式V化合物(107g，0.38mol)、醋酐(175g，1.72mol)和原甲酸三乙酯(135g，0.95mol)的混合物在110～120℃回流反应2.5～3h，反应完毕，减压浓缩至少量剩余物时，加入无水甲苯100mL溶解后，进一步浓缩至干，得油状物120g(式VI化合物)。

实施例5式VII化合物的制备

将式VI化合物(120g，0.36mol)溶解于无水二氯甲烷550mL中，降温至0～5℃，缓慢滴加环丙基胺(30g，0.52mol)的无水二氯甲烷30mL溶液，滴毕，升温至35～40℃搅拌反应4～5h，反应完毕，浓缩得到油状物121g（式VII化合物）。

实施例6式VIII化合物的制备

将式VII化合物（121g，0.35mol）溶解于DMF200mL中，加入无水碳酸钾（152g，1.1mol），75～80℃搅拌反应3h，反应完毕，将反应液缓慢倒入饱和食盐水500mL中，收集析出的白色固体，干燥后得到式VIII化合物83g。MS（ESI+）：296.4[M+H]⁺。

实施例7式IX化合物的制备

将醋酐（130.5g，1.28mol）、硼酸（24.1g，0.39mol）以及少量氯化锌约3g的混合物搅拌均匀，在110～115℃搅拌2h，降温至85～90℃，加入式VIII化合物（83g，0.28mol），继续升温至110～115℃，搅拌反应2～3h，反应完毕，将反应液缓慢倒入冰水1000mL中，收集析出的淡黄色的螯合物固体，干燥后得式IX化合物95g。

实施例8式X化合物的制备

将式IX化合物（95g，0.22mol）溶解于乙腈500mL中，加入三乙胺30mL，室温下缓慢加入(S,S)-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷（40g，0.32mol），加毕，90～95℃回流反应3h，反应完毕，浓缩至干，得到式X化合物127g，直接投入下步反应。

实施例9莫西沙星杂质D（式II化合物）的制备

将式X化合物粗品约127g，加入8%氢氧化钠溶液600mL中，80～85℃反应2～3h，反应完毕，加入体积比1：3的正己烷/甲苯混合溶剂400mL，搅拌洗涤0.5h，静置分层，取水层，降温至3～6℃，用1mol/L盐酸调节pH至7～8，收集析出的淡黄色固体，即式II化合物66g；随即采用体积比3：1的异丙醇/水混合溶剂720mL，进行重结晶，在温度4～8℃静置析晶3～4h，可制得莫西沙星杂质D的精制品58g，HPLC纯度为99.6%。

实施例10式I化合物的制备

将莫西沙星杂质D（式II，58g，0.14mol）溶解于二甲亚砜180mL中，加入前部分的甲醇钠（11.3g，0.21mol），135～145℃搅拌反应1.5h，补加后部分的甲醇钠（26.5g，0.49mol），维持温度105～110℃下继续反应4～5h，反应完毕，将上述反应液加入乙酸乙酯800mL中，收集析出的粗品固体；将该粗品溶解于7%氢氧化钠溶液约200mL中，80～85℃反应2h，降温至5℃，用0.5mol/L稀盐酸调节pH至7～8，收集析出的淡黄色固体，干燥得莫西沙星杂质B（式I）的粗品32.5g，收率54%。将上述粗品32.5g采用体积比3：2的甲醇/甲基叔丁基醚混合溶剂350mL进行重结晶，在温度-10～-5℃静置析晶6～7h，过滤干燥后，可制得莫西沙星杂质B的精制品约26g，收率81%，HPLC纯度为99.7%。

实施例11莫西沙星杂质B向杂质D的转化反应

将莫西沙星杂质D（约10g，0.025mol）溶解于二甲亚砜50mL中，一次性加入全部的甲醇钠（6.75g，0.125mol），135～145℃搅拌反应5.5h，反应完毕，将上述反应液加入乙酸乙酯400mL中，收集析出的粗品固体；将粗品溶解于7%氢氧化钠溶液中，80～85℃反应2h，降温至5℃，用0.5mol/L稀盐酸调节pH至7～8，收集析出的淡黄色固体，干燥得式I化合物3.8g，收率37%，HPLC纯度为95.6%。

实施例12莫西沙星杂质B的重结晶

将杂质B粗品10g加入到无水乙醇80mL中，回流加热溶解，再加入活性炭0.8g，继续回流0.5h，趁热过滤，滤液在0～5℃静止析晶6～7h，得到莫西沙星杂质B的精制品6.5g，收率65%，HPLC纯度98.3%。

将杂质B粗品10g，加入体积比3:1的无水甲醇/水混合溶剂100mL中，回流加热溶解，再加入活性炭0.8g，继续回流0.5h，过滤，滤液在0～5℃静止析晶6～7h，得到莫西沙星杂质B的精制品7g，收率70%，HPLC纯度97.9%。

实施例13莫西沙星杂质D的结构确证

质谱(AGILENT1100LC/MS质谱仪，溶剂甲醇，ESI(+)，70V)

MS（ESI）：402.2[M+H]⁺

核磁氢谱（¹H-NMR）数据

δ1.18-1.21（m，4H），仲碳氢，在COSY中与一叔碳氢相关，归属为H13，H14；与之相关的仲碳氢δ4.09-4.11（d，1H）归属为H12；δ1.68-1.82（m，4H），仲碳氢，在COSY中与之相关的有一仲碳氢和一叔碳氢，归属为H18,19，在COSY相关的叔碳氢δ2.61（s，1H）归属为H17，仲碳氢δ2.91（s，1H），δ3.15-3.17（d，1H）归属为H20;在COSY谱中与H17相关的仲碳氢δ3.67-3.71（t，1H），δ3.88-3.97（m，1H）归属为H16，而与H17相关的叔碳氢δ2.61（s，1H）归属为H21；δ4.09-4.10（d，1H），δ3.71-3.73（d，1H）仲碳氢，在COSY中与H21相关，归属为H22.δ7.47(s，1H)归属为H5，δ8.61(s,1H)归属为H2，δ10.01(s，1H)，活泼氢归属为NH，δ15.27(s，1H)，活泼氢，归属为羧酸氢，重水交换后消失。

核磁碳谱（¹³C-NMR）数据

根据HMQCδ8.38，仲碳，归属为C13，δ8.73，仲碳，归属为C14，δ17.42，仲碳，归属为C19，δ20.53，仲碳，归属为C18，δ34.09，叔碳，归属为C17，δ3869-40.35，m，DMSO，δ40.44，叔碳，归属为C12，δ41.55，仲碳，归属为C20，δ52.31，仲碳，归属为C16，δ54.34，叔碳，归属为C21，δ54.42，仲碳，归属为C22，δ56.29，伯碳，归属为C11，δ100.77，叔碳，归属为C5，δ148.36，叔碳，归属为C2；δ175.26，季碳，羰基碳，HMBC谱图中与H2，H5相关，归属为C4；δ165.91，季碳，羰基碳，HMBC谱图中与H2相关，归属为C15；δ150.94，季碳，在HMBC谱中与H5，H11相关，归属为C8；δ148.02，季碳，HMBC中与H11相关，归属为C6；δ132.53，季碳，HMBC中与H5相关，归属为C7；δ127.10，季碳，HMBC中与H2，H5相关，归属为C9；δ117.75，季碳，HMBC中与H2，H5相关，归属为C10。

实施例14莫西沙星杂质B的结构确证数据

质谱(AGILENT1100LC/MS质谱仪，溶剂甲醇，ESI(+)，70V)

MS（ESI）：414.6[M+H]⁺

核磁氢谱（¹H-NMR）数据

δ0.9780-1.0325（m，2H），δ1.1113-1.1263（m，2H）这两组峰対映的是仲碳上的氢，且只与一叔碳氢有相关归属为H13，H12；在COSY谱与之相关的δ4.1363-4.1775（t，1H）归属为H11；δ1.6953-1.7057（d，2H），δ1.8056-1.8228（d，2H），仲碳氢，归属为H18，H17；在COSY谱中与之相关的叔碳氢δ2.5987-2.6067（d1H）归属为H19，仲碳氢δ2.9345（s，1H），δ3.1180-3.1416(d，1H)，归属为H16；δ3.3240(s)，H2O；δ3.5885（s，3H），δ3.9375（s，3H）甲氧基上的氢，归属为H21，H23；在COSY谱中与H19相关的叔碳氢δ3.8438-3.8940（m，2H），有H15；与H19相关的仲碳氢δ3.6067-3.6439（m，1H）；δ3.7110-3.7796(m，2H),为H20；δ3.7110-3.7796(m，2H)，δ3.8438-3.8940（m，2H）中分别有一个H14；δ7.4585(s，1H)，芳香环上的氢，归属为H5，δ8.6311(s，1H),叔碳氢，归属为H2；δ（8.6639）NH；δ15.5073（s，1H）归属为羧基氢，因为在HMBC中该氢与C2相关。

核磁碳谱（¹³C-NMR）数据

根据HSQC数据，与氢相关的碳归属如下：δ8.71，仲碳，归属为C13；δ9.00，仲碳，归属为C12；δ17.94，仲碳，归属为C17；δ21.15，仲碳，归属为C18；δ34.38，叔碳，归属为C19；δ38.66-40.33，DMSO；δ40.70，叔碳，归属为C11；δ40.95，仲碳，归属为C16，δ52.35，仲碳，归属为C20；δ52.47，仲碳，归属为C14；δ53.84，叔碳，归属为C15；δ55.93，伯碳，归属为C23；δ61.75，伯碳，归属为C21；δ100.50，叔碳，归属为C5；148.51，叔碳，归属为C2。δ175.74，季碳，羰基碳，在HMBC中与H2，H5都相关，归属为C4；δ166.12，羰基碳，在HMBC中与H2相关，归属为C22；δ152.53，季碳，在HMBC中与H2，H23相关，归属为C6；δ142.44，季碳，在HMBC中与H2，H5，H21相关，归属为C8；δ137.30，季碳，在HMBC中与H5相关，归属为C7；δ132.06，δ119.53，在HMBC中与H2,H5相关，归属为C9，C10；δ106.20，季碳，在HMBC谱中与羧基氢H23，H2相关，归属为C3。

实施例15有关莫西沙星杂质B或D的HPLC纯度测定方法：

取莫西沙星杂质适量，加缓冲溶液（配置方法：0.5g四丁基硫酸氢铵，1.0g磷酸二氢钾，加水500ml溶解后，加2ml磷酸，用水稀释至1000ml，摇匀，即得）制得供试品液。采用Agilent苯基柱（5μm，4.6×250mm），调整流动相比例为缓冲溶液-甲醇（76：24），控制流速1.5ml/min,检测波长为293nm，柱温为45℃，分别精密量取10μl的供试品溶液注入液相色谱仪（岛津LC-20A高效液相色谱仪），记录色谱图和结果。

应当说明的是，以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用于限制本发明的范围，凡在本发明的精神和原则之内所作出的任何修改、等同的替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种制备莫西沙星杂质B的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

（1）以2,3,4-三氟-5-甲氧基苯甲酸为起始原料，合成莫西沙星杂质D，即式II化合物；

（2）将莫西沙星杂质D（式II）在二甲亚砜溶液中与甲醇钠进行反应，得到莫西沙星杂质B，即式I化合物。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中莫西沙星杂质D的合成操作具体包含如下步骤：

（a）将2,3,4-三氟-5-甲氧基苯甲酸和氯化亚砜的混合物搅拌加热，滴加催化量的二甲基甲酰胺DMF，90～95℃回流2.5～3h，浓缩反应液至干，加入适量无水甲苯溶解，得到酰氯（式III）溶液；

（b）在镁屑和无水乙醇的混合物中，加入四氯化碳，搅拌均匀；当混合液中有气泡冒出时，缓慢滴加丙二酸二乙酯的甲苯/无水乙醇混合溶液，控制温度55～65℃反应2～3h，降温至0～5℃，缓慢滴加步骤（a）所得酰氯（式III）溶液，滴毕，升温至30～35℃反应1.5～2.5h，反应完毕，缓慢滴加稀盐酸，搅拌0.5h，静置分层，取甲苯层，干燥后除去甲苯，得到油状物（式IV化合物）；

（c）将式IV化合物溶解于DMF中，加入1.5%～2%的对甲苯磺酸水溶液，100～110℃搅拌10～12h，反应完毕，降至室温，加入乙酸乙酯搅拌0.5h，静置分层，取乙酸乙酯层，干燥后除去乙酸乙酯，得到油状物（式V化合物）；

（d）将式V化合物、醋酐和原甲酸三乙酯的混合物在110～120℃回流反应2.5～3h，反应完毕，减压浓缩至少量剩余物时，加入无水甲苯溶解，进一步浓缩至干，得油状物（式VI化合物）；

（e）将式VI化合物溶解于无水二氯甲烷中，降温至0～5℃，缓慢滴加环丙基胺的无水二氯甲烷溶液，滴毕，升温至35～40℃搅拌反应4～5h，反应完毕，浓缩得到式VII化合物；

（f）将式VII化合物溶解于DMF中，加入无水碳酸钾，75～80℃搅拌反应3～4h，反应完毕，将反应液缓慢倒入饱和食盐水中，收集析出的白色固体，即式VIII化合物；

（g）将醋酐、硼酸和氯化锌的混合物在110～115℃搅拌反应2h，降温至85～90℃，加入式VIII化合物，继续升温至110～115℃，搅拌反应2～3h，反应完毕，将反应液缓慢倒入冰水中，收集析出的淡黄色的螯合物固体（式IX化合物）；

（h）将式IX化合物溶解于乙腈中，加入三乙胺，室温下缓慢加入(S,S)-2,8-二氮杂双环[4.3.0]壬烷，加毕，90～95℃回流反应3h，反应完毕浓缩至干，得式X化合物，直接投入下步反应；

（i）将式X化合物粗品加入8～9%氢氧化钠溶液中，80～85℃反应2～3h，反应完毕，加入体积比1：3的正己烷/甲苯混合溶剂，搅拌洗涤0.5h，静置分层，取水层，降温至3～6℃，用4mol/L盐酸调节pH至7～8，收集析出的淡黄色固体，即式II化合物；采用体积比3：1的异丙醇/水混合溶剂进行重结晶，静置析晶温度4～8℃，可制得莫西沙星杂质D的精制品（式II化合物）。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）的具体实施如下：将莫西沙星杂质D溶解于二甲亚砜中，加入前部分的甲醇钠，135～145℃搅拌反应1.5h，补加后部分的甲醇钠，维持在105～110℃继续反应4～5h，反应完毕，将上述反应液加入乙酸乙酯中，收集析出的粗品固体；将粗品溶解于7%氢氧化钠溶液中，80～85℃搅拌2h，降温至5℃，用稀盐酸调节pH至7～8，收集析出的淡黄色固体，即莫西沙星杂质B（式I）。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（b）中酰氯（式III）：丙二酸二乙酯的摩尔比为1：1.2～1.4；并且，式III化合物：镁屑：四氯化碳的重量比为6：1：0.5。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（c）中DMF体积是式IV化合物重量的0.8～1.4倍（mL/g）；并且，对甲苯磺酸溶液的体积是DMF体积的6～9倍。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（d）中，式V化合物：醋酐：原甲酸三乙酯的摩尔比为1：4.5～5：2.5～3。

7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（e）中，式VI化合物：环丙基胺的重量比为4：1。

8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，二甲亚砜体积是式II化合物重量的7～9倍（mL/g），并且，前部分的甲醇钠：式II化合物的摩尔比为1.5～2:1，后部分的甲醇钠：式II化合物的摩尔比为3.5～4：1。

9.根据权利要求1或3所述的制备方法，其特征在于，莫西沙星杂质B可进一步重结晶精制，即采用体积比3：2的甲醇/甲基叔丁基醚的混合溶剂进行重结晶，在温度-10～-5℃静置析晶6～7h，得到莫西沙星杂质B的高纯度精制品。