CN104098587A - 2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了通式(I)所示的2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物，其中，R和X的定义详见说明书。此外，还公开了上述化合物的制备方法、其药用组合物。该通式(I)所示的化合物对人肺癌(A549)、人宫颈癌(HeLa)和人结肠癌(HCT-116)细胞的增殖具有抑制作用，可用作抗肿瘤药物。
Description
技术领域
本发明涉及药物化学领域，更具体地说涉及2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物，及其制备方法和它们在抗肿瘤药物中的应用。
背景技术
本发明人研究组曾将2-甲基-4(3H)-喹唑啉酮作为酯基组分，合成了具有氨基二硫代甲酸酯侧链的4(3H)-喹唑啉酮衍生物，其中含苄氨基或吡啶-3-甲氨基二硫代甲酸酯的衍生物(如下式1)，对几种人的肿瘤细胞表现出显著的细胞毒活性[Cao,S.L.；Feng,Y.P.；Jiang,Y.Y.；Liu,S.Y.；Ding,G.Y.；Li,R.T.Synthesis and in vitro antitumor activity of4(3H)-quinazlinonederivatives with dithiocarbamate side chains.Bioorg.Med.Chem.Lett.2005,15(7),1915-1917；曹胜利，蒋宇扬，冯玉萍，刘世英，张玫，万荣，4(3H)-喹唑啉酮衍生物的合成及体外抗肿瘤活性，药学学报，2007,42(7),741-746.；Cao,S.L.；Feng,Y.P.；Zheng,X.L.；Jiang,Y.Y.；Zhang,M.；Wang,Y.；Xu,M.Synthesis of substituted benzylamino and heterocyclylmethylaminocarbodithioate derivatives of 4(3H)-quinazlinone and their cytotoxic activity.Arch.Pharm.2006,339(5),250-254]。
此外，本发明人还合成了2-甲基-4(3H)-喹唑啉酮作为氨基组分的化合物(如下式)，其中部分化合物具有强细胞毒活性，优于阳性对照药物5-氟尿嘧啶[Cao,S.L.；Wang,Y.；Zhu,L.；Liao,J.；Guo,Y.W.；Chen,L.L.；Liu,H.Q.；Xu,X.Z.Synthesis and cytotoxic activity of N-((2-methyl-4(3H)-quinazolinone-6-yl)methyl)dithiocarbamates.Eur.J.Med.Chem.2010,45,3850-3857]。
发明内容
本发明人提供了一种全新结构的2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物，该化合物对人肺癌A549、宫颈癌HeLa和结肠癌HCT-116细胞的增殖具有抑制作用。
本发明的目的是提供一种2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物。
本发明的另一个目的是提供上述2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物的制备方法。
本发明的第三个目的是提供包含上述2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物的药用组合物。
本发明的第四个目的是提供上述2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物或上述药用组合物在制备抗癌药物中的用途。
具体地说，本发明提供了一种2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物，如通式(I)所示：
其中，式(I)中X为卤素，可选自氟、氯、溴或碘，优选地为氯或溴；
Y和Z其中一个为硫，而另一个为亚氨基即-N(H)-；
R为未取代的芳烃基或取代的芳烃基、或者未取代的杂环基或取代的杂环基；
这里，所述未取代的芳烃基为苯基，所述取代的芳烃基为取代的苯基；所述取代的苯基是指苯环被一个或两个以上的C1-4烷基、任意个卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧羰酰基、羟基、卤素(例如氟、氯、溴、或碘)、硝基或氰基所取代，而且在苯环上取代的位置没有限定，任选地苯环上的取代基可彼此相连，更优选地，所述取代的苯基选自4-甲基苯基、4-甲氧基苯基、2-甲氧基苯基、4-硝基苯基、4-氰基苯基、4-溴代苯基、4-氯代苯基、4-氟代苯基、2-氟代苯基、4-乙氧酰苯基、4-羧基-苯基、2,4-二氯代苯基、2,4-二氟代苯基、2,3,4,5,6-五氟苯基、4-三氟甲基苯基、2,4-二甲氧基苯基、3,4,5-三甲氧基苯基、或3,4-亚甲基二氧苯基；
所述未取代的杂环基选自呋喃基、四氢呋喃基、吡喃基、四氢吡喃基、噻吩基、四氢噻吩基、噻唑基、咪唑基、吡啶基、或嘧啶基；所述取代的杂环基是指杂环被一个或两个以上的C1-4烷基、任意个卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷酰基、羟基、卤素(例如氟、氯、溴、或碘)、硝基或氰基所取代，而且在杂环上取代的位置没有限定；优选地，所述的杂环基选自噻吩基、呋喃基、四氢呋喃基、或吡啶基，更优选地为噻吩-2-基、呋喃-2-基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、或吡啶-4-基；所述取代的杂环基优选地为4-三氟甲基-吡啶-3-基。
作为一种优选地实施方案，本发明提供的式(I)为下列式(II)化合物：
其中，式(II)中R的定义如式(I)化合物。
作为一种优选地实施方案，本发明提供的式(I)为下列式(III)化合物：
其中，式(III)中R的定义如式(I)化合物。
在本发明的一种实施方案中，本发明提供的一种上述通式(I)化合物，其选自下列化合物：
苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物1)；
2-甲氧基苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物2)；
4-甲氧基苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物3)；
2,4-二甲氧基苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物4)；
3,4,5-三甲氧基苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物5)；
3,4-亚甲基二氧基苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物6)；
4-溴苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物7)；
4-氯苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物8)；
2,4-二氯苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物9)；
4-氟苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物10)；
2,4-二氟苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物11)；
4-羧基苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物12)；
(吡啶-2-基)甲基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物13)；
(吡啶-3-基)甲基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物14)；
(6-(三氟甲基)-吡啶-3-基)甲基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物15)；
(呋喃-2-基)甲基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物16)；
(噻吩-2-基)甲基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物17)；
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸4-甲基苄酯(化合物18)；
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸4-溴苄酯(化合物19)；
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸4-氯苄酯(化合物20)；
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸4-氟苄酯(化合物21)；
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基二硫代甲酸2,3,4,5,6-五氟苄酯(化合物22)；
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸4-硝基苄酯(化合物23)；或
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸4-(乙氧基羰基)苄酯(化合物24)。
另一方面，本发明提供了如通式(I)所示2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物的制备方法，包括如下步骤：
式(IV)化合物与式(V)、CS2，在磷酸钾存在下反应，得到式(I)化合物
式(IV)化合物中的取代基Q为卤素或氨基；
式(IV)化合物中的取代基X的定义如式(I)化合物；
式(V)化合物中T为氨基或卤素，并规定，当式(IV)化合物中的取代基Q为卤素时，T为氨基；当式(IV)化合物中的取代基Q为氨基时，T为卤素；
式(V)化合物中R的定义如式(I)化合物。
本发明提供的如通式(I)所示2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物的制备方法，其中，式(I)化合物为式(II)化合物，而且，当式(IV)化合物中X和Q为溴、式(V)化合物中T为氨基时，可以通过下列工艺来制备：
按照文献[Hallas G,Choi J H.Synthesis and spectral properties of azodyes derived from 2-aminothiophenes and 2-aminothiazoles,Dyes andPigments,1999,42,249-265]报道的方法，将二聚巯基丙酮(VI)与丙二腈在甲醇中加热反应，得到2-氨基-3-氰基-4-甲基噻吩(VII)。参考文献[Roth B,Laube R,Tidwell M Y,Rauckman B S.Extrusion of sulfur from[(acylmethyl)thio]pyrimidinones.J.Org.Chem.1980,45,3651-3657]的方法，将VII与盐酸胍在无溶剂的条件下发生合环反应，得到2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶(VIII)。VIII与三甲基乙酰氯在干燥的1,4-二氧六环中回流反应，得到2,4-二(三甲基乙酰氨基)-6-甲基噻吩并[2,3-d]嘧啶(IX)。以三氯甲烷为溶剂，IX与过量的N-溴代丁二酰亚胺室温反应7天，得到2,4-二(三甲基乙酰氨基)-5-溴甲基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶(X)[Rosowsky,A.；Papoulis,A.T.；Queener,S.F.2,4-Diaminothieno[2,3-d]pyrimidine lipophilic antifolates asinhibitors pneumocystis carinii and toxoplasma gondii dihydrofolate reductase.J.Med.Chem.1997,40(22),3694-3699]。X在氯化氢的甲醇溶液中回流，脱除三甲基乙酰基得到2,4-二氨基-5-溴甲基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶(XI)。最后，以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂，在无水磷酸钾的存在下，XI与二硫化碳以及不同的胺(RCH2NH2)反应，得到目标化合物1-17。
试剂和反应条件:a.丙二睛,二乙胺,甲醇，35℃反应2小时；b.盐酸胍,175℃反应6小时；c.三甲基乙酰氯,三乙胺,1,4-二氧六环，回流反应1小时；d.N-溴代丁二酰亚胺,过氧化苯甲酰,三氯甲烷,室温搅拌7天；e.氯化氢/甲醇,四氢呋喃,回流3小时；f.二硫化碳,无水磷酸钾,胺(RCH2NH2),N,N-二甲基甲酰胺,室温搅拌3-9小时
本发明提供的如通式(I)所示2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物的制备方法，其中，式(I)化合物为式(III)化合物，而且，当式(IV)化合物中X为溴和Q为氨基、式(V)化合物中T为溴时，可以通过下列工艺来制备：
如上所述的方法，在得到中间体XI后，将中间体XI在饱和的氨的甲醇溶液中，室温搅拌过夜得到2,4-二氨基-5-氨甲基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶(XII)。然后以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂，在无水磷酸钾存在下，XII与二硫化碳以及不同的苄溴(R'CH2Br)反应，得到目标化合物18-24。
试剂和反应条件:a.丙二睛,二乙胺,甲醇，35℃反应2小时；b.盐酸胍,175℃反应6小时；c.三甲基乙酰氯,三乙胺,1,4-二氧六环，回流反应1小时；d.N-溴代丁二酰亚胺,过氧化苯甲酰,三氯甲烷,室温搅拌6天；e.氯化氢，甲醇,四氢呋喃,回流3小时；g.氨气,甲醇；室温搅拌过夜；h.二硫化碳,无水磷酸钾,不同的苄溴(R'CH2Br),N,N-二甲基甲酰胺,室温搅拌3-10小时。
第三方面，本发明提供了一种包含上述2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物的药用组合物。该药用组合物包括药理学上有效量的式(I)化合物和药学上可接受的辅料。对于本领域技术人员而言，这些辅料都是已知的，例如，生理盐水，明胶，阿拉伯树胶，乳糖，微晶纤维素，淀粉，改性淀粉，纤维素，改性纤维素，羟乙酸钠，磷酸氢钙，硬脂酸镁，滑石，胶体二氧化硅等。此外，这些组合物还可进一步地包含：稳定剂，润湿剂，乳化剂，甜味剂，香味剂，缓冲剂等。
本发明提供的包含上述2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物的药用组合物，根据需要，能够配制成用于口服给药的固体或液体形式，如片剂、丸剂、口服液等；用于非肠道给药的无菌溶液、悬浮液或乳液形式，喷雾剂等。
例如，片剂配方：
制备方法为：将原辅料过100目筛，然后混合均匀；用90％的乙醇制软材，制粒，整粒，加入硬脂酸镁混匀，压片即得。
注射剂配方：
制备方法：
将甘露醇加入1600mL注射用水中，搅拌溶解；将本发明实施例化合物加入上述溶液，搅拌溶解；4％的磷酸氢二钠溶液调pH值为4.15；加注射用水至2000mL，加入活性炭，50℃保温搅拌20min，过滤脱炭；用0.22μm的微孔滤膜过滤，灌封。121℃，15min高温湿热灭菌。
另一方面，本发明提供了式(I)化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明的化合物可用于治疗肺癌，结肠癌，肝癌，胃癌，卵巢癌，宫颈癌，口腔癌，白血病等。
实验证明，本发明的式(I)的化合物具有抗肿瘤活性，对人肺癌(A549)、宫颈癌(HeLa)和结肠癌(HCT-116)细胞的增殖具有抑制作用，可作为抗肿瘤药物或作为抗肿瘤活性成分用于抗肿瘤药物组合物。用药的参考剂量为0.1-10mg/kg体重，使用方法为口服或静脉注射。
另一方面，现有技术中公开了2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物对二氢叶酸还原酶(DHFR)具有抑制活性，本申请的发明人意外地发现，本发明的2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物对DHFR无明显抑制活性，但是却具有抗肿瘤活性。
具体实施方式
以下通过实施例来示例性说明本发明的实施方案，对于本领域的普通技术人员而言，在本发明的教导下，根据现有技术，对本发明实施方案进行的改进，仍属于本发明的保护范围内。
实施例中使用的化合物原料的来源是：2-甲氧基苄基胺、2,4-二甲氧基苄基胺、3,4,5-三甲氧基苄基胺、3,4-亚甲基二氧苄基胺、4-溴苄基胺、4-氟苄基胺、2,4-二氟苄基胺购自ACROS公司；4-甲氧基苄基胺购自Fluka公司；2,4-二氯苄基胺购自TCI公司；4-氯苄基胺、2-甲氨基吡啶购自J&K公司；3-甲氨基吡啶购自Alfa Aesar公司；4-三氟甲基-3-甲氨基吡啶购自Aldrich公司；2-甲氨基呋喃、2-甲氨基噻吩购自AVOCADO公司；4-氟苄基溴、2,3,4,5,6-五氟苄基溴购自Alfa Aesar公司；4-甲基苄基溴、4-溴苄基溴、4-硝基苄基溴购自ABCR公司；4-氯苄基溴、4-溴甲基苯甲酸乙酯购自J&K公司。其它原料均为市售化学试剂。
实施例中使用的人肺癌(A549)、宫颈癌(HeLa)和结肠癌(HCT-116)细胞来自首都师范大学DNA损伤应答北京市重点实验室。
准备例1
2-氨基-4-甲基噻吩-3-甲腈(III)的合成
将二聚巯基丙酮(II)(4.0g,22.0mmol)溶于无水甲醇(40mL)中，冰浴冷却到5℃。在10min内，滴入丙二腈(2.9g,43.9mmol)和无水甲醇(4mL)的混合液。再于20min内滴加二乙胺(3.54g,48.4mmol)和无水甲醇(4mL)的混合液，滴加过程中温度保持在5℃。滴加完毕，加热使温度升到35-40℃，继续反应1.5h。将反应液倾入到水(300mL)中，滤集析出的固体，室温干燥，经甲醇重结晶，得类白色固体4.79g，收率79％，m.p.118-120℃(文献值:m.p.119-120℃).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:2.19(s,3H,CH3),4.18(br,2H,NH2),5.97(s,1H,噻吩-H).EI-MS m/z:138[M]+.
2,4-氨基-5-甲基噻吩并[2,3-d]嘧啶(IV)的合成
将切碎的金属钠(0.8g,34.8mmol)和盐酸胍(3.28g,34.8mmol)分别溶于乙二醇单乙醚(10mL)中，冷却后将两种溶液混合，室温搅拌10min。滤除生成的白色固体，在滤液中加入2-氨基-4-甲基噻吩-3-甲腈(III)(3.64g,26.4mmol)，室温搅拌片刻，使固体溶解。旋转蒸发除去溶剂，将得到的粘稠状物质加热到170-175℃，搅拌反应5h。冷却至室温，用甲醇重结晶(活性炭脱色)，得到类白色固体3.04g，收率64％，m.p.211-214℃(文献值:m.p.210-212℃),1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:2.51(s,3H,CH3),5.98(s,2H,NH2),6.40(s,2H,NH2),6.50(s,1H,噻吩-H).EI-MS m/z:180[M]+.
2,4-二(三甲基乙酰胺基)-5-甲基噻吩并[2,3-d]嘧啶(V)的合成
将2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶(3)(1.8g,10mmol)和三乙胺(4mL)依次加入到1,4-二氧六环(16mL)中，搅拌加热至沸腾。向反应混合物中缓慢滴加三甲基乙酰氯(3.6g,60mmol)和1,4-二氧六环(5mL)的混合液，滴加完毕，搅拌加热回流40min。冷却至室温，过滤，用1,4-二氧六环洗涤固体，直到洗液为无色，合并滤液和洗液，旋转蒸发除去溶剂，残余物用丙酮重结晶，得白色固体2.44g，收率70％,m.p.174.8-175.5℃(文献值:m.p.179.5℃),1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:1.36(s,9H,(CH3)3),1.38(s,9H,(CH3)3),2.64(s,3H,CH3),6.83(s,1H,NH),7.27(s,1H,NH),8.50(s,1H,噻吩-H).EI-MS m/z:348[M]+.
2,4-二(三甲基乙酰胺基)-5-溴甲基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶(VI)的合成
依次将2,4-二(三甲基乙酰氨基)-6-甲基噻吩并[2,3-d]嘧啶(V)(2.61g,7.49mmol)、N-溴代丁二酰亚胺(1.62g,9.08mmol)和过氧化苯甲酰(0.209g,0.825mmol)加入到干燥的三氯甲烷(400mL)，室温搅拌过夜。补加N-溴代丁二酰亚胺(9.1g,51mmol)和过氧化苯甲酰(1.16g,4.6mmol)，继续室温反应6天，旋转蒸发除去大部分溶剂，滤去不溶物，滤液旋转蒸发除尽溶剂，残余物用乙酸乙酯重结晶，得类白色固体2.84g，收率75％，m.p.225-232.3℃(文献值:m.p.228-243℃),1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:1.33(s,18H,(CH3)3),5.18(s,2H,CH2),7.16(s,1H,NH).ESI-MS m/z:504,506,508[M+H]+.
2,4-二氨基-5-溴甲基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶(VII)的合成
在2,4-二(三甲基乙酰氨基)-5-溴甲基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶(5)(0.25g,0.5mmol)与四氢呋喃(4mL)的混合液中，滴加饱和氯化氢的甲醇溶液(3mL)，搅拌10min。加入蒸馏水(0.5mL)，加热回流反应4h。冷却后，滤集析出固体，用甲醇重结晶，得类白色固体0.40g，收率61％，m.p.228-243℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.18(t,J＝10.8Hz,2H,CH2S),6.20(s,2H,NH2),6.55(s,2H,NH2).EI-MS m/z:336,338,340[M]+.
化合物1-17的合成通法
在RCH2NH2(例如苄胺)(1.0mmol)与N,N-二甲基甲酰胺(5mL)的混合液中，加入二硫化碳(0.30mL,5.0mmol)和研细的无水磷酸钾(0.21g,1.0mmol)，室温下搅拌30min。加入2,4-二氨基-5-溴甲基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶(VII)(0.34g,1.0mmol)，室温继续搅拌3-9h(TLC监测)。将反应液倾入到80mL冰水中，滤集析出的固体，室温晾干，硅胶柱色谱法提纯(洗脱液:二氯甲烷/甲醇＝95:5或98:2)，得到化合物1-17。
实施例1.
苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物1)
收率:40％,白色固体,m.p.184-186℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.72(s,2H,CH2S),4.87(d,J＝5.4Hz,2H,NHCH2),6.29(s,2H,NH2),6.50(s,2H,NH2),7.28(t,J＝7.2Hz,1H,苯基4′-H),7.31(d,J＝7.2Hz,2H,苯基2′,6′-H),7.36(t,J＝7.2Hz,2H,苯基3′,5′-H),10.64(t,J＝5.4Hz,1H,NHCH2).ESI-HRMS m/z:C15H15BrN5S3([M+H]+)计算值:439.9673,441.9652；实测值:439.9667,441.9640.
实施例2.
2-甲氧基苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物2)
收率:67％,黄色固体,m.p.184.2-186.6℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:3.81(s,1.2H,OCH3),3.84(s,1.8H,OCH3),4.71(s,0.8H,CH2S),4.78(d,J＝4.8Hz,2H,NHCH2),4.81(s,1.2H,CH2S),6.29(s,2H,NH2),6.51(s,2H,NH2),6.93(t,J＝7.8Hz,0.4H,苯基5′-H),6.98(d,J＝7.8Hz,0.4H,苯基3′-H),7.01(t,J＝7.8Hz,0.6H,苯基5′-H),7.08(d,J＝7.8Hz,0.6H,苯基3′-H),7.18(d,J＝7.2Hz,0.4H,苯基6′-H),7.28(t,J＝7.8Hz,0.4H,苯基4′-H),7.34(d,J＝7.2Hz,0.6H,苯基6′-H),7.38(t,J＝7.8Hz,0.6H,苯基4′-H),10.51(t,J＝4.8Hz,1H,NHCH2).ESI-HRMS m/z:C16H17BrN5OS3([M+H]+)计算值:469.9779,471.9758；实测值:469.9775,471.9750.
实施例3.
4-甲氧基苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物3)
收率:66％,黄色固体,m.p.188.0-189.7℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:3.74(s,3H,OCH3),4.70(s,1.4H,CH2S),4.74(s,0.6H,CH2S),4.78(d,J＝5.4Hz,2H,NHCH2),6.28(s,2H,NH2),6.48(s,2H,NH2),6.91(d,J＝8.4Hz,2H,苯基3′,5′-H),7.26(d,J＝8.4Hz,2H,苯基2′,6′-H),10.58(t,J＝5.4Hz,1H,NHCH2).ESI-HRMS m/z:C16H17BrN5OS3([M+H]+)计算值:469.9779,471.9758；实测值:469.9773,471.9748.
实施例4.
2,4-二甲氧基苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物4)
收率:54％,白色固体,m.p.159.1-161.2℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:3.75(s,2.4H,OCH3),3.78(s,0.6H,OCH3),3.79(s,2.4H,OCH3),3.83(s,0.6H,OCH3),4.68(d,J＝5.4Hz,1.6H,NHCH2),4.69(s,1.6H,CH2S),4.70(s,0.4H,CH2S),4.72(d,J＝5.4Hz,0.4H,NHCH2),6.28(s,2H,NH2),6.48(br s,2H,NH2),6.51(dd,J＝8.4,1.8Hz,0.8H,苯基5′-H),6.55(dd,J＝8.4,1.8Hz,0.2H,苯基5′-H),6.57(d,J＝1.8Hz,0.8H,苯基3′-H),6.63(d,J＝1.8Hz,0.2H,苯基3′-H),7.12(d,J＝8.4Hz,0.8H,苯基6′-H),7.25(d,J＝8.4Hz,0.2H,苯基6′-H),10.36(t,J＝5.4Hz,1H,NHCH2).ESI-HRMS m/z:C17H19BrN5O2S3([M+H]+)计算值:499.9884,501.9864；实测值:499.9879,501.9853
实施例5.
3,4,5-三甲氧基苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物5)
收率:69％,白色固体,m.p.196.4-198.2℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:3.64(s,3H,OCH3),3.75(s,6H,OCH3),4.72,4.75(2s,2H,CH2S),4.78(d,J＝4.8Hz,2H,NHCH2),6.28(s,2H,NH2),6.49(s,2H,NH2),6.64(d,J＝2.4Hz,2H,苯基2′,6′-H),10.54(t,J＝4.8Hz,1H,NHCH2).ESI-HRMS m/z:C18H21BrN5O3S3([M+H]+)计算值:529.9990,531.9969；实测值:529.9961,531.9933.
实施例6.
3,4-亚甲基二氧基苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物6)
收率:57％,黄色固体,m.p.213.3-215.5℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.71,4.74(2s,2H,CH2S),4.76(d,J＝5.4Hz,2H,NHCH2),6.00(s,2H,OCH2O),6.30(br s,2H,NH2),6.51(br s,2H,NH2),6.80(d,J＝7.8Hz,1H,苯基5′-H),6.88(d,J＝7.8Hz,1H,苯基6′-H),6.90(s,1H,苯基2′-H),10.56(t,J＝5.4Hz,1H,NHCH2).ESI-HRMS m/z:C16H15BrN5O2S3([M+H]+)计算值:483.9571,485.9551；实测值:483.9543,485.9521.
实施例7.
4-溴苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物7)
收率:88％,白色固体,m.p.201.5-203.9℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.76,4.78(2s,2H,CH2S),4.82(d,J＝4.8Hz,2H,NHCH2),6.90(br s,2H,NH2),7.11(br s,2H,NH2),7.27(d,J＝8.4Hz,2H,苯基2′,6′-H),7.55(d,J＝8.4Hz,2H,苯基3′,5′-H),10.5(t,J＝4.8Hz,1H,NHCH2).ESI-HRMS m/z:C15H14Br2N5S3([M+H]+)计算值:517.8778,519.8758,521.8737；实测值:517.8757,519.8723,521.8697.
实施例8.
4-氯苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物8)
收率:74％,黄色固体,m.p.264.6-265.8℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.72,4.75(2s,2H,CH2S),4.84(d,J＝5.4Hz,2H,NHCH2),6.30(br s,2H,NH2),6.51(br s,2H,NH2),7.33(d,J＝8.4Hz,2H,苯基2′,6′-H),7.42(d,J＝8.4Hz,2H,苯基3′,5′-H),10.6(t,J＝5.4Hz,1H,NHCH2).ESI-HRMS m/z:C15H14BrClN5S3([M+H]+)计算值:473.9283,475.9263；实测值:473.9257,475.9230.
实施例9.
2,4-二氯苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物9)
收率:48％,黄色固体,m.p.205.5-209.6℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.73,4.76(2s,2H,CH2S),4.86(d,J＝4.8Hz,2H,NHCH2),6.29(br s,2H,NH2),6.49(br s,2H,NH2),7.34(d,J＝8.4Hz,1H,苯基6′-H),7.46(d,J＝8.4Hz,1H,苯基5′-H),7.65(s,1H,苯基3′-H),10.62(t,J＝4.8Hz,1H,NHCH2).ESI-HRMS m/z:C15H13BrCl2N5S3([M+H]+)计算值:507.8894,509.8873；实测值:507.8876,509.8798.
实施例10.
4-氟苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物10)
收率:65％,白色固体,m.p.189.8-192.3℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.72,4.75(2s,2H,CH2S),4.84(d,J＝4.8Hz,2H,NHCH2),6.29(br s,2H,NH2),6.50(br s,2H,NH2),7.16(t,J＝8.4Hz,2H,苯基3′,5′-H),7.34(m,2H,苯基2′,6′-H),10.63(t,J＝4.8Hz,1H,NHCH2).ESI-HRMSm/z:C15H14BrFN5S3([M+H]+)计算值:457.9579,459.9558；实测值:457.9569,459.9548.
实施例11.
2,4-二氟苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物11)
收率:89％,白色固体,m.p.246.8-248.5℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.71,4.74(2s,2H,CH2S),4.81(d,J＝4.8Hz,2H,NHCH2),6.34(br s,2H,NH2),6.54(br s,2H,NH2),7.10(t,J＝8.4Hz,1H,苯基3′-H),7.26(t,J＝8.4Hz,1H,苯基5′-H),7.43(m,1H,苯基6′-H),10.59(t,J＝4.8Hz,1H,NHCH2).ESI-HRMS m/z:C15H13BrF2N5S3([M+H]+)计算值:475.9485,477.9464；实测值:475.9473,477.9418.
实施例12.
4-羧基苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物12)
收率:89％,白色固体,m.p.214.6-216.7℃,1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.73,4.76(2s,2H,CH2S),4.94(d,J＝5.4Hz,2H,NHCH2),6.29(br s,2H,NH2),6.51(br s,2H,NH2),7.41(d,J＝7.8Hz,2H,苯基2′,6′-H),7.92(d,J＝7.8Hz,2H,苯基3′,5′-H),10.70(t,J＝5.4Hz,1H,NHCH2),12.91(s,1H,COOH).ESI-HRMS m/z:C16H15BrN5O2S([M+H]+)计算值:483.9571,485.9551；实测值:483.9549,485.9530.
实施例13.
(吡啶-2-基)甲基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物13)
收率:57％,白色固体,m.p.182.6-184.4℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.72,4.75(2s,2H,CH2S),4.94(d,J＝4.8Hz,2H,NHCH2),6.29(br s,2H,NH2),6.50(br s,2H,NH2),7.30(t,J＝7.8Hz,1H,吡啶5′-H),7.31(d,J＝7.8Hz,1H,吡啶3′-H),7.79(t,J＝7.8Hz,1H,吡啶4′-H),8.53(d,J＝7.8Hz,1H,吡啶6′-H),10.71(t,J＝4.8Hz,1H,NHCH2).ESI-HRMS m/z:C14H14BrN6S3([M+H]+)计算值:440.9625,442.9605；实测值:440.9606,442.9586.
实施例14.
(吡啶-3-基)甲基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物14)
收率:68％,白色固体,m.p.269.7-271.1℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.72,4.75(2s,2H,CH2S),4.88(d,J＝5.4Hz,2H,NHCH2),6.28(br s,2H,NH2),6.50(br s,2H,NH2),7.39(t,J＝7.2Hz,1H,吡啶5′-H),7.72(d,J＝7.2Hz,1H,吡啶4′-H),8.49(d,J＝7.2Hz,1H,吡啶6′-H),8.55(s,1H,吡啶2′-H),10.66(t,J＝5.4Hz,1H,NHCH2).ESI-HRMS m/z:C14H14BrN6S3([M+H]+)计算值:440.9625,442.9605；实测值:440.9609,442.9583.
实施例15.
(6-(三氟甲基)-吡啶-3-基)甲基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物15)
收率:89％,白色固体,m.p.196.8-200.9℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.71,4.74(2s,2H,CH2S),5.02(d,J＝4.8Hz,2H,NHCH2),6.27(br s,2H,NH2),6.47(br s,2H,NH2),6.99(d,J＝4.8Hz,1H,吡啶5′-H),7.08(s,1H,吡啶2′-H),7.44(d,J＝4.8Hz,1H,吡啶4′-H),10.67(t,J＝4.8Hz,1H,NHCH2).ESI-HRMS m/z:C15H13BrF3N6S3([M+H]+)计算值:508.9499,510.9479；实测值:508.9494,510.9465.
实施例16.
(呋喃-2-基)甲基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物16)
收率:76％,白色固体,m.p.187.9-190.2℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.69,4.73(2s,2H,CH2S),4.82(d,J＝5.4Hz,2H,NHCH2),6.29(br s,2H,NH2),6.36(s,1H,呋喃3′-H),6.41(m,1H,呋喃4′-H),6.48(br s,2H,NH2),7.61(s,1H,呋喃5′-H),10.6(t,J＝5.4Hz,1H,NHCH2).ESI-HRMS m/z:C13H13BrN5OS3([M+H]+)计算值:429.9465,431.9445；实测值:429.9466,431.9434.
实施例17.
(噻吩-2-基)甲基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯(化合物17)
收率:82％,白色固体,m.p.199.6-201.7℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.72,4.75(2s,2H,CH2S),4.97(d,J＝4.8Hz,2H,NHCH2),6.26(s,2H,NH2),6.28(br s,2H,NH2),6.50(br s,2H,NH2),7.92(d,J＝7.8Hz,1H,噻吩3′-H),7.98(m,1H,噻吩4′-H),8.73(s,1H,噻吩5′-H),10.7(t,J＝4.8Hz,1H,NHCH2).ESI-HRMS m/z:C13H13BrN5OS3([M+H]+)计算值:429.9466,431.9445；实测值:429.9438,431.9411.
准备例2.
2,4-二氨基-5-氨甲基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶(VIII)的合成
在冰盐浴下将饱和氨气的甲醇溶液冷却到0℃，搅拌下分批加入2,4-二氨基-5-溴甲基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶(0.36g,1mmol)，加完后撤去冰盐浴，室温搅拌过夜。反应液在减压条件下旋干，粗品用甲醇和水的混合溶剂重结晶，得白色固体0.18g，收率为65％。m.p.269.4-272.0℃,1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.25(d,J＝6.6Hz,2H,CH2S),6.37(s,2H,NH2),6.85(s,2H,NH2),8.40(s,2H,NH2).ESI-MS m/z:274,276[M+H]+.
化合物18-24的合成通法
在2,4-二氨基-5-氨甲基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶(0.5mmol)与N,N-二甲基甲酰胺(5mL)的混合液中，加入二硫化碳(0.15mL,2.5mmol)和研细的无水磷酸钾(0.13g,0.6mmol)，室温下搅拌2h。加入RCH2Br(例如连有不同取代基的苄溴)(0.5mmol)，室温继续搅拌3-10h(TLC监测)。将反应液倾入到80mL冰水中，滤集析出固体，室温晾干，硅胶柱色谱法提纯(洗脱液:二氯甲烷/甲醇＝95:5或98:2)，得到化合物18-24。
实施例18.
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸4-甲基苄酯(化合物18)
收率:70％,白色固体,m.p.210.9-211.3℃,1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:2.26(s,3H,CH3),4.44(s,2H,CH2S),4.91(d,J＝10.2Hz,2H,NHCH2),6.24(s,2H,NH2),7.11(d,J＝7.8Hz,2H,苯基2′,6′-H),7.23(d,J＝7.8Hz,2H,苯基3′,5′-H),10.3(br s,1H,NH),ESI-HRMS m/z:C16H17BrN5S3([M+H]+)计算值:453.9829,455.9809；实测值:453.9827,455.9802.
实施例19.
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸4-溴苄酯(化合物19)
收率:56％,白色固体,m.p.198.2-200.4℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.52(s,2H,CH2S),4.93(d,J＝15.6Hz,7.8Hz,2H,NHCH2),6.26(br s,4H,2NH2),7.33(d,J＝7.8Hz,2H,苯基2′,6′-H),7.51(d,J＝7.8Hz,2H,苯基3′,5′-H),10.38(br s,1H,NH).ESI-HRMS m/z:C15H14Br2N5S3([M+H]+)计算值:517.8778,519.8758,521.8737；实测值:517.8778,519.8756,512.8731.
实施例20.
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸4-氯苄酯(化合物20)
收率:49％,白色固体,m.p.204.2-206.1℃,1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.49(s,2H,CH2S),4.50(d,J＝12.0Hz,4.8Hz,2H,NHCH2),6.75(br s,4H,2NH2),7.36(d,J＝8.4Hz,2H,苯基2′,6′-H),7.39(d,J＝8.4Hz,2H,苯基3′,5′-H),10.06(t,J＝1H,NH).ESI-HRMS m/z:C15H14BrClN5S3([M+H]+)计算值:473.9283,475.9263；实测值:473.9283,475.9273.
实施例21.
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸4-氟苄酯(化合物21)
收率:56％,白色固体,m.p.191.3-192.9℃,1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.53(s,2H,CH2S),4.94(d,J＝12.0Hz,4.8Hz,2H,NHCH2),6.23(br s,4H,2NH2),7.14(t,J＝9.0Hz,2H,苯基3′,5′-H),7.41(dd,J＝7.2Hz,6.6Hz,2H,苯基2′,6′-H),10.35(br s,1H,NH).ESI-HRMS m/z:C15H14BrFN5S3([M+H]+)计算值:457.9579,459.9558；实测值:457.9574,459.9546.
实施例22.
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸2,3,4,5,6-五氟苄酯(化合物22)
收率:46％,白色固体,m.p.205.3-207.6℃,1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.32(s,2H,CH2S),4.81(d,J＝4.2Hz,2H,NHCH2),6.21(s,1.3H,NH2),6.38(s,0.7H,NH2),6.70(s,1.2H,NH2),6.83(s,0.8H,NH2),9.64(s,0.5H,NH),10.1(s,0.5H,NH).ESI-HRMS m/z:C15H10BrF5N5S3计算值:529.9202,531.9181；实测值:529.9194,531.9170.
实施例23.
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸4-硝基苄酯(化合物23)
收率:62％,白色固体,m.p.222.4-224.0℃,1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:4.28(d,J＝4.2Hz,1.6H,CH2S),4.32(d,0.4H,J＝4.2Hz,CH2S),4.58(d,J＝5.4Hz,1H,NHCH2),4.80(d,J＝5.4Hz,1H,NHCH2),6.22(s,0.6H,NH2),6.85(s,1.4H,NH2),7.40(q,J＝8.4Hz,1H,苯基2′,6′-H),7.63(t,J＝8.4Hz,1H,苯基2′,6′-H),7.97(t,J＝8.4Hz,1H,苯基3′,5′-H),8.14(q,J＝8.4Hz,1H,苯基3′,5′-H),9.64(s,0.5H,NH),10.1(d,J＝7.8Hz,0.5H,NH).ESI-HRMS m/z:C15H14BrN6O2S([M+H]+)计算值:484.9524,486.9503；实测值:484.9503,486.9442.
实施例24.
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸4-(乙氧基羰基)苄酯(化合物24)
收率:47％,白色固体,m.p.239.2-241.7℃,1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:1.31(t,J＝7.2Hz,3H,CH2CH3),4.31(q,J＝7.2Hz,2H,CH2CH3),4.63(s,2H,CH2S),4.94(dd,J＝12,3.6Hz,2H,NHCH2),6.26(br s,4H,NH2),7.51(d,J＝7.8Hz,2H,苯基2′,6′-H),7.91(d,J＝7.8Hz,1H,苯基3′,5′-H),10.41(br s,1H,NH),ESI-MS m/z:430,432[M+H]+.ESI-HRMS m/z:C18H19BrN5O2S3([M+H]+)计算值:511.9884,513.9864；实测值:511.9855,513.9833.
试验例
抗增殖活性
采用下列的MTT法测定了式I化合物对人肺癌A549、宫颈癌HeLa和结肠癌HCT-116细胞增殖的半抑制浓度(IC50)，用5-氟尿嘧啶(5-FU)做为阳性对照。
选用指数生长期的贴壁肿瘤细胞，经胰蛋白酶消化后，用含10％小牛血清的RPMI1640培养液配成5×104～10×104个细胞/mL的细胞悬液，接种在96孔培养板所设的实验孔中，每孔加入90μL，同时设置本底孔(即加入90μL培养液)。于37℃，5％CO2环境下培养24h。配制样品溶液时，将各化合物用培养液配制为不同浓度的溶液，对照组为含2％DMSO的培养液。于样品孔中加入10μL样品溶液，对照孔中加入10μL含2％DMSO的培养液，本底孔中加入10μL培养液，每孔设置3个复孔，于37℃，5％CO2下培养72h。向各孔中加入20μL MTT溶液(Promega公司的 AQueous单溶液细胞增殖检测试剂盒)，37℃继续培养2h。用酶联免疫检测仪测定各孔在波长492nm处的光密度(OD)值。按如下公式计算细胞增殖抑制率(Inhibition Rate，IR％)，然后用SPSS数理统计软件求出半数抑制浓度(IC50值)，结果见表1和表2。以同样方法获得5-氟尿嘧啶的IC50值，数值列在表1中。
IR％＝[1－(OD样品组－OD本底组)/(OD对照组－OD本底组)]×100％
表1.本发明化合物1-24对A549、HeLa和HCT-116细胞的抗增殖活性(IC50,μM)
上述的抗增殖试验结果表明，本发明的式I化合物具有抗人肺癌A549、宫颈癌HeLa和结肠癌HCT-116细胞增殖的活性。
Claims (10)
1.2,4-二氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物，如通式(I)所示：
其中：
式(I)中X为卤素；
Y和Z中一个为硫，而另一个为亚氨基即-N(H)-；
R为未取代的芳烃基或取代的芳烃基、或者未取代的杂环基或取代的杂环基。
2.根据权利要求1所述的衍生物，其中，式(I)中X为氟、氯、溴、或碘，优选地X为溴。
3.根据权利要求1所述的衍生物，其中，R为未取代芳烃基或取代的芳烃基，所述未取代的芳烃基为苯基，所述取代的芳烃基为取代的苯基；所述取代的苯基是指苯环被一个或两个以上的C1-4烷基、任意个卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧羰酰基、羟基、卤素、硝基或氰基所取代，而且在苯环上取代的位置没有限定，任选地苯环上的取代基可彼此相连；或者
R为杂环基或取代的杂环基，所述未取代的杂环基选自呋喃基、四氢呋喃基、吡喃基、四氢吡喃基、噻吩基、四氢噻吩基、噻唑基、咪唑基、吡啶基、或嘧啶基；所述取代的杂环基是指杂环被一个或两个以上的C1-4烷基、任意个卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷酰基、羟基、卤素、硝基或氰基所取代，而且在杂环上取代的位置没有限定。
4.根据权利要求3所述的衍生物，其中，R为苯基、4-甲基苯基、4-甲氧基苯基、2-甲氧基苯基、4-硝基苯基、4-氰基苯基、4-溴代苯基、4-氯代苯基、4-氟代苯基、2-氟代苯基、4-乙氧酰苯基、4-羧基-苯基、2,4-二氯代苯基、2,4-二氟代苯基、2,3,4,5,6-五氟苯基、4-三氟甲基苯基、2,4-二甲氧基苯基、3,4,5-三甲氧基苯基、或3,4-亚甲基二氧苯基，或者
噻吩基、呋喃基、或吡啶基，更优选地为噻吩-2-基、呋喃-2-基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、或吡啶-4-基，或4-三氟甲基-吡啶-3基。
5.根据权利要求1所述的衍生物，其中，式(I)为下列式(II)化合物：
其中，式(II)中R的定义如权利要求1式(I)化合物。
6.根据权利要求1所述的衍生物，其中，式(I)为下列式(III)化合物：
其中，式(III)中R的定义如权利要求1式(I)化合物。
7.如权利要求1所述的衍生物，选自下列化合物中的一种：
苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯；
2-甲氧基苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯；
4-甲氧基苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯；
2,4-二甲氧基苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯；
3,4,5-三甲氧基苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯；
3,4-亚甲基二氧基苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯；
4-溴苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯；
4-氯苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯；
2,4-二氯苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯；
4-氟苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯；
2,4-二氟苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯；
4-羧基苄基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯；
(吡啶-2-基)甲基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯；
(吡啶-3-基)甲基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯；
(6-(三氟甲基)-吡啶-3-基)甲基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯；
(呋喃-2-基)甲基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯；
(噻吩-2-基)甲基氨基二硫代甲酸(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲酯；
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸4-甲基苄酯；
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸4-溴苄酯；
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸4-氯苄酯；
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸4-氟苄酯；
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸2,3,4,5,6-五氟苄酯；
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸4-硝基苄酯；或
(2,4-二氨基-6-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-5-基)甲基氨基二硫代甲酸4-(乙氧基羰基)苄酯。
8.权利要求1至7中任一权利要求所述衍生物的制备方法，包括如下步骤：
式(IV)化合物与式(V)、CS2在磷酸钾存在下反应，得到式(I)化合物
式(IV)化合物中的取代基Q为卤素或氨基；
式(IV)化合物中的取代基X的定义如在权利要求1的式(I)化合物所定义的；
式(V)化合物中T为氨基或卤素，条件为当式(IV)化合物中的取代基Q为卤素时，T为氨基；或者，当式(IV)化合物中的取代基Q为氨基时，T为卤素；
式(V)化合物中R的定义如在权利要求1的式(I)化合物所定义的。
9.一种包含权利要求1至7中任一权利要求所述衍生物的药用组合物。
10.权利要求1至7中任一权利要求所述衍生物或权利要求9所述的组合物在制备抗癌药物中的应用。
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