CN104095243A - 一种酶解活性肽纳米硒的制备工艺 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种酶解活性肽纳米硒的制备工艺,步骤如下:(1)酶解动物肠粘膜提取肝素后的副产品,灭酶,得到酶解液;所加复合酶与所述猪肠粘膜液的质量比为5~7:100;(2)将壳聚糖、硒化合物和维生素C或柠檬酸按一定比例混合,水相中制备纳米硒溶液;(3)将纳米硒溶液加入温度为55~65℃的酶解液中,得到混合液,将混合液加热至45~60℃反应1~2h,得到成液;(4)将所述成液浓缩、干燥得到成品。本发明充分利用蛋白资源,同时还避免了对环境的污染,同时以壳聚糖作为介质,吸附纳米硒与多肽,形成一个多功能的富含纳米硒和短肽链以及平衡氨基酸的活性肽蛋白粉,营养价值高、易吸收,亦能预防多种疾病。

Description

一种酶解活性肽纳米硒的制备工艺
技术领域
本发明涉及一种生产蛋白粉的方法,具体涉及一种酶解活性肽纳米硒的制备工艺。
背景技术
肠粘膜含有很丰富的蛋白资源,但却没有被充分开发利用,国内肠粘膜主要用于提取肝素,而后被当做废弃物,造成污染与浪费。专利号为CN101209082的中国专利于2011年8月31日公开了一种功能性饲料蛋白肠膜蛋白粉的制备方法,以猪肠粘膜或其提取肝素后的下脚料为原料,利用中性蛋白酶、木瓜蛋白酶分步酶解后,加入大豆皮或小麦麸皮等载体最后干燥而制得所述蛋白粉。该方法能有效利用废弃的肠粘膜,降低了污染与浪费,同时也解决了我国蛋白饲料短缺的现状。但是该方法由于要分步酶解,工艺复杂,操作难度大,成本高,制得的蛋白粉口感不佳,仅能作为饲料,没有将肠粘膜内的蛋白的利用发挥到最佳。而且所得蛋白粉的功能性单一。
发明内容
本发明的目的是公开一种可将肠粘膜内的蛋白利用发挥到最佳的酶解活性肽纳米硒的制备工艺。为了达到上述目的,本发明采用如下的技术方案:一种酶解活性肽纳米硒的制备工艺,步骤如下:(1)选用复合酶酶解动物肠粘膜提取肝素后的副产品,然后灭酶,得到酶解液;所加复合酶与所述猪肠粘膜液的质量比为5~7:100;所述复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和风味酶的混合物;(2)将壳聚糖、硒化合物和维生素C或柠檬酸按一定比例混合,水相中制备纳米硒溶液;(3)将纳米硒溶液加入温度为55~65℃的酶解液中,得到混合液,将混合液加热至45~60℃反应1~2h,得到成液;(4)将所述成液浓缩、干燥得到成品。
通过本发明的制备工艺:
1.硒是人体生命活动中必需的微量元素之一,是人体内的抗氧化剂,能提高人体免疫力,具有多种生物功能。与无机硒相比,有机硒的利用价值好、易于吸收、毒性小等优势,逐渐代替无机硒,纳米硒则在许多方面更优于有机硒,低毒高效:其体外清除自由基效率为有机硒的2.5倍,为无机硒的5倍;而且纳米硒在是它在人体内的营养计量和毒性计量之间的范围较无机硒和有机硒要宽很多。壳聚糖是一种直链型高分子聚合物, 具有良好的生物兼容性, 在药用载体、医药等方面有广泛的应用,在人体内吸收率近100%,具有提高免疫,抑制癌肿细胞生长,促进肝脾抗体形成,促进钙及矿物质的吸收,增殖双岐杆菌、乳酸菌等人体有益菌群,能预防多种疾病。将具有生物学意义的纳米硒与壳聚糖结合起来,纳米态的硒被壳聚糖吸附包裹成稳定的粒子,在与高生物活性的氨基酸螯合,产物兼有纳米硒和壳聚糖免疫调节,养颜抗衰,预防癌症及心血管疾病等功效,结合生物体极易消化利用的蛋白质,用于人们营养保健或者疾病治疗或辅助治疗,具有广泛的应用前景。
2.利用动物肠粘膜提取肝素后的副产品酶解制备高性能的生物活性肽,其免疫球蛋白的含量高,仅次于血浆蛋白;然后利用酶解获得的该活性肽与由壳聚糖、硒化合物混合,由于壳聚糖大分子中有活泼的羟基和氨基,活性肽可以很好的反应结合在壳聚糖上,从而制得纳米硒并螯合成活性肽纳米硒,螯合的温度过高或过低,影响活性肽的活性,而且溶液的粘度减弱,壳聚糖对纳米硒以及活性肽的包裹吸附作用减弱,通过本发明的具体条件控制得到高活性、易吸收,富含纳米硒和短肽链以及平衡氨基酸的活性肽蛋白粉,易于消化吸收,提高机体免疫力,预防多种疾病,改善健康状况。
3.木瓜蛋白酶和中性蛋白酶都是多功能蛋白酶,其特异性低,可以水解大部分蛋白质,木瓜蛋白酶对pH的要求低,在酸性、中性、碱性环境下均能分解蛋白质,对工艺要求低,中性蛋白酶水解度高,同时能够优化所得多肽的口感,再结合用于出去多肽苦味的风味酶,如此,在保证活性肽的活性和长度以及量的同时,所得产品的口感更好;本发明利用三种酶的协同增效作用从而可以有效提取动物肠粘膜提取肝素后的副产品中的活性肽;
4.维生素C可以促成纳米硒的形成,同时还为反应体系提供一个酸性环境;壳聚糖分子上的氨基性质活泼,具有很好的吸附能力,而且壳聚糖在酸性环境中所构成的微环境具有良好的悬浮、乳化、稳定作用,可以很好的稳定纳米硒的作用,壳聚糖还是一个很好的缓释载体,可以逐步将硒释放出来,起到持久补硒作用。
作为优选,所述木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和风味酶的质量混合比为100~150:50~100:10。
作为优选,所述壳聚糖、硒化合物和维生素C或柠檬酸的质量比为80~100:1:10~15。
作为优选,步骤(2)中所述壳聚糖质量分数为2×10-4~5×10-4,所述硒化合物的浓度为2~3mmol/L,所述维生素C或柠檬酸的浓度为5~7 g/L。
作为优选,所述壳聚糖为羧甲基壳聚糖、水溶性壳聚糖和壳寡糖中的一种或多种混合物。
作为优选,步骤(2)中将得到的所述纳米硒溶液进行超声波处理30~60min。
超声波处理有利于粒子分散,使其粒度减小,降低聚合度,易于下一步的吸附。
作为优选,所述超声波功率为100~150w、频率为15~20kHz,连续处理5~10min后间歇5min。
超声波可以一定程度上降低壳聚糖的分子量,而低分子量壳聚糖同超高分子量壳聚糖相比具有很强的杀菌和优越的生物活性,但是超声波功率过大、频率过快则会导致壳聚糖降解,间歇性的使用超声波处理,效果更显著。
作为优选,步骤(3)中向所述酶解液中再加入所述酶解液质量0.1~0.3%的半胱氨酸或甲硫氨酸。
纳米硒可以跟半胱氨酸或甲硫氨酸中的巯基相互作用,半胱氨酸或甲硫氨酸作为软介质,更加稳定了壳聚糖、氨基酸和纳米硒之间的吸附效果。
作为优选,所述动物肠粘膜为猪肠粘膜,所述硒化合物为亚硒酸钠。
作为优选,步骤(4)中所述干燥方式为喷雾干燥,所述喷雾干燥进风口温度为190~210℃,出风口温度为70~80℃。
通过实施上述的技术方案,本发明具有如下的有益效果:本发明利用猪肠粘膜提取肝素后的副产品,充分利用蛋白资源,同时还避免了对环境的污染,工艺中以酶解的方式得到多肽,其酶解彻底,得到的生物活性多肽含量高,而且免疫蛋白含量高,利于提高机体的免疫力,同时以壳聚糖作为介质,吸附纳米硒与多肽,形成一个多功能的富含纳米硒和短肽链以及平衡氨基酸的活性肽蛋白粉,营养价值高、易吸收,亦能预防多种疾病。
具体实施方式
实施例1:
一种酶解活性肽纳米硒的制备工艺,步骤如下:(1)在酶解灌中将猪肠粘膜提取肝素后的副产品的粉末以其5倍质量的水溶解得到溶解液,温度升至65℃,加入复合酶,用小苏打调pH至7.0,酶解猪肠粘膜6小时后,将酶解灌温度升至90℃灭酶半小时,得到酶解液,保温在60℃;复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和风味酶以质量比为100:50:10的混合物,其总质量与所述溶解液的质量比为6:100;(2)将羧甲基壳聚糖、亚硒酸钠和维生素C按质量比为80:1:10混合,在水相中制备纳米硒溶液,温度控制在60℃,溶液中壳聚糖质量分数为2×10-4,硒化合物的浓度为2mmol/L,维生素C的浓度为5 g/L;(3)将纳米硒溶液加入温度为60℃的酶解液中,得到混合液,混合液在60℃螯合2h,得到成液;(4)将所述成液浓缩、喷雾干燥得到成品,其中喷雾干燥时进风口温度为200℃、出风口温度为80℃。
实施例2:
一种酶解活性肽纳米硒的制备工艺,步骤如下:(1)在酶解灌中将猪肠粘膜提取肝素后的副产品的粉末以其6倍质量的水溶解得到溶解液,温度升至60℃,加入复合酶,用小苏打调pH至7.8,酶解猪肠粘膜6小时后,将酶解灌温度升至90℃灭酶半小时,得到酶解液,保温在55℃;复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和风味酶以质量比为150:100:10的混合物,其总质量与所述溶解液的质量比为7:100;(2)将羧甲基壳聚糖、亚硒酸钠和维生素C按质量比为100:1:15混合,在水相中制备纳米硒溶液,温度控制在60℃,溶液中壳聚糖质量分数为5×10-4,硒化合物的浓度为3mmol/L,维生素C的浓度为7g/L;(3)将纳米硒溶液加入温度为55℃的酶解液中,再加入酶解液质量0.1%的半胱氨酸或甲硫氨酸,得到混合液,混合液在60℃螯合2h,得到成液;(4)将所述成液浓缩、喷雾干燥得到成品,其中喷雾干燥时进风口温度为190℃、出风口温度为75℃。
实施例3:
一种酶解活性肽纳米硒的制备工艺,步骤如下:(1)在酶解灌中将猪肠粘膜提取肝素后的副产品的粉末以其5倍质量的水溶解得到溶解液,温度升至60℃,加入复合酶,用小苏打调pH至6.5,酶解猪肠粘膜6小时后,将酶解灌温度升至95℃灭酶20分钟,得到酶解液,保温在55℃;复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和风味酶以质量比为120:80:10的混合物,其总质量与所述溶解液的质量比为5:100;(2)将羧甲基壳聚糖、亚硒酸钠和维生素C按质量比为90:1:12混合,在水相中制备纳米硒溶液,温度控制在65℃保温2小时,再超声波100W、15kHz处理30分钟,处理6分钟间歇7分钟,溶液中壳聚糖质量分数为5×10-4,硒化合物的浓度为3mmol/L,维生素C的浓度为6g/L;(3)将纳米硒溶液加入温度为60℃的酶解液中,再加入酶解液质量0.1%的半胱氨酸,得到混合液,混合液在45℃螯合1.5h,得到成液;(4)将所述成液浓缩、喷雾干燥得到成品,其中喷雾干燥时进风口温度为210℃、出风口温度为70℃。
实施例4:
一种酶解活性肽纳米硒的制备工艺,步骤如下:(1)在酶解灌中将猪肠粘膜提取肝素后的副产品的粉末以其5倍质量的水溶解得到溶解液,温度升至60℃,加入复合酶,用小苏打调pH至6.5,酶解猪肠粘膜6小时后,将酶解灌温度升至95℃灭酶20分钟,得到酶解液,保温在55℃;复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和风味酶以质量比为120:80:10的混合物,其总质量与所述溶解液的质量比为5:100;(2)将羧甲基壳聚糖、亚硒酸钠和柠檬酸按质量比为90:1:12混合,在水相中制备纳米硒溶液,温度控制在65℃保温2小时,再超声波150W、20kHz处理60分钟,处理10分钟间歇10分钟,溶液中壳聚糖质量分数为5×10-4,硒化合物的浓度为3mmol/L,柠檬酸的浓度为6g/L;(3)将纳米硒溶液加入温度为60℃的酶解液中,再加入酶解液质量0.3%的半胱氨酸,得到混合液,混合液在45℃螯合1.5h,得到成液;(4)将所述成液浓缩、喷雾干燥得到成品,其中喷雾干燥时进风口温度为210℃、出风口温度为70℃。
实施例5:
一种酶解活性肽纳米硒的制备工艺,步骤如下:(1)在酶解灌中将猪肠粘膜提取肝素后的副产品的粉末以其5倍质量的水溶解得到溶解液,温度升至60℃,加入复合酶,用小苏打调pH至6.5,酶解猪肠粘膜6小时后,将酶解灌温度升至95℃灭酶20分钟,得到酶解液,保温在55℃;复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和风味酶以质量比为120:80:10的混合物,其总质量与所述溶解液的质量比为5:100;(2)将羧甲基壳聚糖、亚硒酸钠和柠檬酸按质量比为90:1:12混合,在水相中制备纳米硒溶液,温度控制在65℃保温2小时,再超声波120W、18kHz处理50分钟,处理5分钟间歇5分钟,溶液中壳聚糖质量分数为5×10-4,硒化合物的浓度为3mmol/L,柠檬酸的浓度为7g/L;(3)将纳米硒溶液加入温度为60℃的酶解液中,再加入酶解液质量0.2%的甲硫氨酸,得到混合液,混合液在45℃螯合1.5h,得到成液;(4)将所述成液浓缩、喷雾干燥得到成品,其中喷雾干燥时进风口温度为210℃、出风口温度为70℃。
实施例6:
同实施例3,不同之处在于步骤(2)中没有进行超声波处理。
实施例7:
同实施例3,不同之处在于步骤(3)中没有加入半胱氨酸或甲硫氨酸。
实施例8:
同实施例3,不同之处在于步骤(3)中加入1%的半胱氨酸或甲硫氨酸。
对比例1:
一种酶解活性肽纳米硒的制备工艺,步骤如下:(1)在酶解灌中将猪肠粘膜提取肝素后的副产品的粉末以其5倍质量的水溶解得到溶解液,温度升至65℃,加入复合酶,用小苏打调pH至7.0,酶解猪肠粘膜6小时后,将酶解灌温度升至90℃灭酶半小时,得到酶解液,保温在60℃;复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和风味酶以质量比为50:150:10的混合物,其总质量与所述溶解液的质量比为6:100;(2)将羧甲基壳聚糖、亚硒酸钠和维生素C按质量比为80:1:10混合,在水相中制备纳米硒溶液,温度控制在60℃,溶液中壳聚糖质量分数为2×10-4,硒化合物的浓度为2mmol/L,维生素C的浓度为5 g/L;(3)将纳米硒溶液加入温度为60℃的酶解液中,得到混合液,混合液在60℃螯合2h,得到成液;(4)将所述成液浓缩、喷雾干燥得到成品,其中喷雾干燥时进风口温度为200℃、出风口温度为80℃。
对比例2:
一种酶解活性肽纳米硒的制备工艺,步骤如下:(1)在酶解灌中将猪肠粘膜提取肝素后的副产品的粉末以其5倍质量的水溶解得到溶解液,温度升至65℃,加入复合酶,用小苏打调pH至7.0,酶解猪肠粘膜6小时后,将酶解灌温度升至90℃灭酶半小时,得到酶解液,保温在60℃;复合酶为木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和风味酶以质量比为100:50:10的混合物,其总质量与所述溶解液的质量比为6:100;(2)将羧甲基壳聚糖、亚硒酸钠和维生素C按质量比为80:1:10混合,在水相中制备纳米硒溶液,温度控制在60℃,溶液中壳聚糖质量分数为2×10-4,硒化合物的浓度为2mmol/L,维生素C的浓度为5 g/L;(3)将纳米硒溶液加入温度为60℃的酶解液中,得到混合液,混合液在60℃螯合2h,得到成液;(4)将所述成液浓缩、喷雾干燥得到成品,其中喷雾干燥时进风口温度为200℃、出风口温度为80℃。
对比例3:
一种酶解活性肽纳米硒的制备工艺,步骤如下:(1)在酶解灌中将猪肠粘膜提取肝素后的副产品的粉末以其5倍质量的水溶解得到溶解液,温度升至65℃,加入复合酶,用小苏打调pH至7.0,酶解猪肠粘膜6小时后,将酶解灌温度升至90℃灭酶半小时,得到酶解液,保温在60℃;复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和风味酶以质量比为100:50:10的混合物,其总质量与所述溶解液的质量比为6:100;(2)将羧甲基壳聚糖、亚硒酸钠和维生素C按质量比为60:1:30混合,在水相中制备纳米硒溶液,温度控制在60℃,溶液中壳聚糖质量分数为1×10-4,硒化合物的浓度为4mmol/L,维生素C的浓度为8g/L;(3)将纳米硒溶液加入温度为60℃的酶解液中,得到混合液,混合液在60℃螯合2h,得到成液;(4)将所述成液浓缩、喷雾干燥得到成品,其中喷雾干燥时进风口温度为200℃、出风口温度为80℃。
对比例4:
一种酶解活性肽纳米硒的制备工艺,步骤如下:(1)在酶解灌中将猪肠粘膜提取肝素后的副产品的粉末以其5倍质量的水溶解得到溶解液,温度升至45℃,加入复合酶,调pH至5.0,酶解猪肠粘膜6小时后,将酶解灌温度升至90℃灭酶半小时,得到酶解液,保温在60℃;复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和风味酶以质量比为100:50:10的混合物,其总质量与所述溶解液的质量比为4:100;(2)将羧甲基壳聚糖、亚硒酸钠和维生素C按质量比为80:1:10混合,在水相中制备纳米硒溶液,温度控制在60℃,溶液中壳聚糖质量分数为5×10-4,硒化合物的浓度为1mmol/L,维生素C的浓度为2g/L;(3)将纳米硒溶液加入温度为70℃的酶解液中,得到混合液,混合液在40℃螯合半小时,得到成液;(4)将所述成液浓缩、喷雾干燥得到成品,其中喷雾干燥时进风口温度为250℃、出风口温度为100℃。
对比例5:
一种酶解活性肽纳米硒的制备工艺,步骤如下:(1)在酶解灌中将猪肠粘膜提取肝素后的副产品的粉末以其5倍质量的水溶解得到溶解液,温度升至65℃,加入复合酶,用小苏打调pH至7.0,酶解猪肠粘膜6小时后,将酶解灌温度升至90℃灭酶半小时,得到酶解液,保温在60℃;复合酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和风味酶以质量比为100:50:10的混合物,其总质量与所述溶解液的质量比为6:100;(2)将所述酶解液过滤浓缩、喷雾干燥得到成品,其中喷雾干燥时进风口温度为200℃、出风口温度为80℃。
对上述实施例和对比例的工艺将等量的肠粘膜提取肝素后的副产品制备所得到的成品进行活性肽含量以及大小的检测以及功效检测。
活性寡肽含量:取等量的成品溶于等量的水中,得到检测液进行检测;其中活性肽含量检测所用仪器为日立L-8800型氨基酸自动分析仪,活性肽的大小检测仪器为高效液相色谱仪;功效检测是对抵抗力差的人进行临床试验。 
结果如表1:
表1:
  活性寡肽含量 活性肽分子量  ﹤1000Da≥ 活性肽分子量   ≥1000Da
实施例1 85% 93% 7%
实施例2 82% 93% 7%
实施例3 95% 98% 2%
实施例4 91% 96% 4%
实施例5 90% 95% 5%
实施例6 89% 96% 4%
实施例7 90% 94% 6%
实施例8 80% 89% 11%
对比例1 62% 53% 47%
对比例2 65% 72% 28%
对比例3 75% 90% 10%
对比例4 41% 32% 68%
对比例5 72% 89% 11%
从上表中可以看出,酶解过程中的酶种类、酶比例以及酶解条件都极大的印象成品中寡肽的含量以及大小,实施例所得到的寡肽分子量集中在1000Da以下,更加利于吸收消化;纳米硒与所得活性肽螯合的条件以及喷雾干燥的温度控制,影响着其螯合效果,直接影响产品中活性肽的含量和质量;半胱氨酸或甲硫氨酸适量的加入,提高了成品中活性寡肽的含量,使寡肽的分子量更小,更利于吸收消化,两者同时处理,效果更佳。
功效检测:
以体质弱、经常感冒、头晕、疲劳乏力者270人为临床试验对象,对照组1、对照组2和试验组各90人,
其年龄分布如表2:
表2:
  30岁以下 30-50岁 50岁以上
试验组 24 32 34
对照组1 25 30 35
对照组2 31 29 30
其中,试验组服用实施例1所得到的成品,对照组1服用对比例5所得到的成品,对照组2不服用任何蛋白粉,服用方法和剂量为:每餐饭后1小时温水送服,一天3次,每次5g,连续服用6个月。
结果:根据显效、有效和无效三个标准来评判,经观察1年:显效为头晕、疲劳乏力症状消失,无感冒;有效为偶有头晕、乏力症状,基本无感冒;无效为症状无改善,仍表现为头晕、疲劳乏力,经常感冒。
结果见表3: 
表3:
  显效 有效 无效 总有效率
试验组 85 4 1 98.9%
对照组1 1 10 79 12.2%
对照组2 0 2 88 2.2%
结果显示:服用活性肽纳米硒产品(试验组)可以提高机体的免疫力,极大地改善其健康状况,服用单一的活性肽产品(对照组1)可以一定程度上改善机体的健康,但效果不明显。
本发明得到的产品也同样适用于动物食用,同样具有提高免疫力、改善健康状况的功效。

Claims (8)

1.一种复合氨基酸螯合纳米硒叶面肥的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)将血球蛋白粉用复合酶酶解得到酶解液;(2)向所述酶解液中加入重量比为3-5%的糖醇,在50~70℃条件下反应1~2h,得到反应液;所述糖醇为甘露糖醇、山梨糖醇、木糖醇和丙三糖醇混合所得到的混合糖醇;(3)向所述反应液中加入纳米硒,在45~65℃下反应1~2h,得到初液;(4)向所述初液中加入所述初液重量5-6%的纳米二氧化钛,在45~55℃下反应0.5~1h,然后升温至90~95℃保温10~20min,形成终产品。
2.根据权利要求1所述一种复合氨基酸螯合纳米硒叶面肥的制备方法,其特征在于:所述甘露糖醇、山梨糖醇、木糖醇和丙三糖醇的混合比为1~3:2~5:1~3:1~3。
3.根据权利要求1所述一种复合氨基酸螯合纳米硒叶面肥的制备方法,其特征在于:所述纳米硒为将亚硒酸钠和柠檬酸混合制备所得;所述亚硒酸钠和柠檬酸的混合重量比为5~10:10~20。
4.根据权利要求1所述一种复合氨基酸螯合纳米硒叶面肥的制备方法,其特征在于:所述复合酶为胰酶、木瓜蛋白酶和风味酶,酶解条件为50-58℃,pH8.0-8.5,酶解4.5-5.5小时。
5.根据权利要求4所述一种复合氨基酸螯合纳米硒叶面肥的制备方法,其特征在于:所述胰酶、木瓜蛋白酶和风味酶的质量混合比为1-3:1-2:0.5-1。
6.根据权利要求1所述一种复合氨基酸螯合纳米硒叶面肥的制备方法,其特征在于:步骤(4)所述中向所述初液中还加入了占所述初液重量0.01-0.06%的生物表面活性剂,所述生物表面活性剂为糖脂类表面活性剂或脂肽类表面活性剂。
7.根据权利要求6所述一种复合氨基酸螯合纳米硒叶面肥的制备方法,其特征在于:所述生物表面活性剂为脂肽类表面活性剂,所述脂肽类表面活性剂为表面活性素类或伊枯草菌素或杆菌霉素。
8.根据权利要求1所述一种复合氨基酸螯合纳米硒叶面肥的制备方法,其特征在于:步骤(3)中所述反应中还加入了螯合剂,所述螯合剂为柠檬酸、苹果酸和乳酸中的一种或多种。
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