CN105384522A

CN105384522A - 一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法

Info

Publication number: CN105384522A
Application number: CN201510813531.7A
Authority: CN
Inventors: 陈林; 其他发明人请求不公开姓名
Original assignee: Chongqing 303 Science and Technology Co Ltd
Current assignee: Chongqing 303 Science and Technology Co Ltd
Priority date: 2015-11-23
Filing date: 2015-11-23
Publication date: 2016-03-09

Abstract

本发明涉及一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法，步骤如下：（1）蛋白肽酶解液的制备，采用新鲜猪血为原料，经溶血、酶解、脱色、超滤而得；（2）将壳聚糖、硒化合物和柠檬酸按一定比例混合，水相中制备纳米硒溶液；（3）将纳米硒溶液加入温度为55~65℃的蛋白肽酶解液中，得到混合液，将混合液加热至45~60℃反应1~2h，得到成液；（4）将所述成液浓缩、干燥得到成品。本发明得到的叶面肥富含高活性的寡肽和游离氨基酸，以及硒和壳聚糖，溶解迅速彻底，作物易吸收、并能快速的在作物体内运输，解决了叶面肥难吸收的问题，大大提高作物的生长速度和抗病性，改善作物品质。

Description

一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法

技术领域

本发明涉及膳食营养领域，具体涉及一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法。

背景技术

叶面肥在农业上常用来快速补充植物所需营养，因其方便、快捷，而且相对根部施肥的吸收效果好，浪费少，近年来各种营养型或功能型的叶面肥逐步进入市场。但是，近年来国内生产的多数叶面肥有效含量低、作用单一，多数是为作物补充微量元素，营养成分单一。专利号为CN101891520的中国专利于2012年8月29日公开了一种氨基酸叶面肥，由按质量百分比计的以下物料制得：30％-50％植物氨基酸、1％-5％复硝酚钠、15％-25％尿素、5％-10％硫酸亚铁、5％-10％硼砂、3％-5％硫酸铜、0.5％-1％钼酸铵、1％-2％硫酸锰、4％-8％硫酸锌、10％-20％有机硅和余量水，该叶面肥激发了作物中酶的活力、提高了作物的光合效率、加速其内部养分吸收和运转、增加叶绿素含量，提高茎干物质积累和糖份含量、改善作物品质、增强作物抗旱、抗病、抗逆和免疫力等均有明显效果，但也存在不足，例如，单一将多种元素混合制成浓缩液，兑水使用，元素利用率不高、效果不够稳定；吸收后在作物体内运输效率低等。

猪血蛋白肽是以猪血为原料，经溶血、酶解、脱色、超滤及干燥而得。猪血蛋白肽是一种高品质蛋白质原料，含有生长因子和小分子肽等多种功能性蛋白质，具有溶解性好、蛋白质含量高、氨基酸平衡、生物吸收利用率高、附加值高等特点。目前猪血蛋白肽的应用鲜见报道。

发明内容

本发明的目的是公开一种可将猪血的蛋白利用发挥到最佳的酶解富硒蛋白肽叶面肥的制备方法。为了达到上述目的，本发明采用如下的技术方案：一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法，步骤如下：（1）蛋白肽酶解液的制备，以猪血为原料，经溶血、酶解、脱色、超滤而得；（2）将壳聚糖、硒化合物和柠檬酸按一定比例混合，水相中制备纳米硒溶液；（3）将所述纳米硒溶液加入温度为55~65℃的所述酶解液中，得到混合液，将混合液加热至45~60℃反应1~2h，得到成液；（4）将所述成液浓缩、干燥得到成品。

通过本发明的制备工艺：

1.硒可以促进作物体内过氧化物酶活性的提高，增强作物的抗氧化能力，提高其

抗逆性与抗衰老能力，提高作物产量，改善作物的品质。土壤中的硒是作物主要来源，但是作物对硒的吸收受多因素的影响，吸收效果差，常用的硒酸盐和亚硒酸盐由于与硫酸盐、亚硫酸盐的相似性，硫对硒的吸收有竞争作用。本发明采用壳聚糖和氨基酸作为软介质，可以解决其在作物体内吸收和运输难的问题。

2.壳聚糖是一种直链型高分子聚合物,具有良好的生物兼容性,将具有生物学意义的纳米硒与壳聚糖结合起来，纳米态的硒被壳聚糖吸附包裹成稳定的粒子，在与高生物活性的氨基酸螯合，具有良好的悬浮、乳化、稳定作用，可以很好的稳定纳米硒的作用，其活性高、易吸收，对作物的品质有显著功效。壳聚糖还是一个很好的缓释载体，可以逐步将硒释放出来，起到持久供硒作用。壳聚糖与氨基酸作用稳定，使得叶面肥更易于吸收以及在作物体内的运输。

3.猪血蛋白肽是一种高品质蛋白质原料，含有生长因子和小分子肽等多种功能性蛋白质，具有溶解性好、蛋白质含量高、氨基酸平衡、生物吸收利用率高、附加值高等特点；利用酶解获得的该活性肽与由壳聚糖、硒化合物混合，由于壳聚糖大分子中有活泼的羟基和氨基，活性肽可以很好的反应结合在壳聚糖上，从而制得纳米硒并螯合成富硒蛋白肽，螯合的温度过高或过低，影响活性肽的活性，而且溶液的粘度减弱，壳聚糖对纳米硒以及活性肽的包裹吸附作用减弱，通过本发明的具体条件控制得到高活性、易吸收，富含纳米硒和短肽链以及平衡氨基酸的活性肽蛋白粉，易于吸收。

4.柠檬酸可以促成纳米硒的形成，同时还为反应体系提供一个酸性环境；壳聚糖分子上的氨基性质活泼，具有很好的吸附能力，而且壳聚糖在酸性环境中所构成的微环境具有良好的悬浮、乳化、稳定作用，可以很好的稳定纳米硒的作用，壳聚糖还是一个很好的缓释载体，可以逐步将硒释放出来，起到持久补硒作用。

作为优选，所述壳聚糖、硒化合物和柠檬酸的质量比为80~100:1:10~15。

作为优选，步骤（2）中纳米硒溶液中所述壳聚糖质量分数为2×10^-4~5×10^-4，所述硒化合物的浓度为2~3mmol/L，所述柠檬酸或柠檬酸的浓度为5~7g/L。

作为优选，所述壳聚糖为羧甲基壳聚糖、水溶性壳聚糖和壳寡糖中的一种或多种混合物。

作为优选，步骤（2）中将得到的所述纳米硒溶液进行超声波处理30~60min。

超声波处理有利于粒子分散，使其粒度减小，降低聚合度，易于下一步的吸附。

作为优选，所述超声波功率为100~150w、频率为15~20kHz，连续处理5~10min后间歇5min。

超声波可以一定程度上降低壳聚糖的分子量，而低分子量壳聚糖同超高分子量壳聚糖相比具有很强的杀菌和优越的生物活性，但是超声波功率过大、频率过快则会导致壳聚糖降解，间歇性的使用超声波处理，效果更显著。

作为优选，所述硒化合物为亚硒酸钠。

作为优选，步骤（4）中所述干燥方式为喷雾干燥，所述喷雾干燥进风口温度为200~230℃，出风口温度为80~100℃。

通过实施上述的技术方案，本发明具有如下的有益效果：

1.本发明利用猪血为原料，充分利用蛋白资源，同时还避免了对环境的污染，工艺中以酶解的方式得到多肽，其酶解彻底，得到的生物活性多肽含量高，同时以壳聚糖作为介质，吸附纳米硒与多肽，形成一个多功能的富含纳米硒和短肽链以及平衡氨基酸的活性肽蛋白粉，营养价值高、易吸收，亦能预防多种生物体疾病。

2.通过本发明得到的叶面肥富含高活性的寡肽和游离氨基酸，以及硒和糖醇，溶解迅速彻底，作物易吸收、并能快速的在作物体内运输，解决了叶面肥，尤其是含氨基酸等有机物的叶面肥难吸收的问题，大大提高作物的生长速度，提高施肥作物的抗病性，改善作物品质。

具体实施方式

实施例1：

一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法，步骤如下：（1）蛋白肽酶解液的制备：a）采集新鲜猪血，以5g／L的柠檬酸钠抗凝，在4℃、8000r／min离心10min，收集下层沉淀，以获得红血球；将红血球加入同等体积的生理盐水冲洗并离心两次后加入2倍体积的蒸馏水，超声波细胞破碎辅助溶血20min，然后在4℃、4000r／min离心10min，得到血红蛋白溶液，于4℃保存备用；b）取血红蛋白溶液，加入适量的胰蛋白酶酶解，搅拌，2mol/LNaoH溶液维持体系pH8.0，45~50℃，6~10h；将酶解反应产物迅速升温至85℃并保持此温度10~15分钟，再迅速冷却至50℃以下，调节pH值至7.0左右，8000r／min离心15min，获得上清酶解液，4℃冷藏备用；c）活性炭用量为酶解液总重的5~30％，温度55℃，搅拌脱色20~30min；再进行粗滤处理后得粗滤酶解液；将粗滤酶解液在0.1~0.2Mpa的工作压力和0~45℃的工作温度下，采用截留分子质量为1kD超滤膜进行超滤处理，收集1kD以下蛋白肽酶解液。

（2）将羧甲基壳聚糖、亚硒酸钠和柠檬酸按质量比为80:1:10混合，在水相中制备纳米硒溶液，温度控制在60℃，溶液中壳聚糖质量分数为2×10^-4，硒化合物的浓度为2mmol/L，柠檬酸的浓度为5g/L；（3）将纳米硒溶液加入温度为60℃的酶解液中，得到混合液，混合液在60℃螯合2h，得到成液；（4）将所述成液浓缩、喷雾干燥得到成品，其中喷雾干燥时进风口温度为200℃、出风口温度为80℃。

实施例2：

一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法，步骤如下：（1）蛋白肽酶解液的制备同实施例1；（2）将羧甲基壳聚糖、亚硒酸钠和柠檬酸按质量比为100:1:15混合，在水相中制备纳米硒溶液，温度控制在60℃，溶液中壳聚糖质量分数为5×10^-4，硒化合物的浓度为3mmol/L，柠檬酸的浓度为7g/L；（3）将纳米硒溶液加入温度为55℃的酶解液中螯合2h，得到成液；（4）将所述成液浓缩、喷雾干燥得到成品，其中喷雾干燥时进风口温度为220℃、出风口温度为90℃。

实施例3：

一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法，步骤如下：（1）蛋白肽酶解液的制备同实施例1；（2）将羧甲基壳聚糖、亚硒酸钠和维生素C按质量比为90:1:12混合，在水相中制备纳米硒溶液，温度控制在65℃保温2小时，再超声波100W、15kHz处理30分钟，处理6分钟间歇7分钟，溶液中壳聚糖质量分数为5×10-4，硒化合物的浓度为3mmol/L，柠檬酸的浓度为6g/L；（3）将纳米硒溶液加入温度为60℃的酶解液中，螯合1.5h，得到成液；（4）将所述成液浓缩、喷雾干燥得到成品，其中喷雾干燥时进风口温度为230℃、出风口温度为100℃。

实施例4：

一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法，步骤如下：（1）蛋白肽酶解液的制备同实施例1；（2）将羧甲基壳聚糖、亚硒酸钠和柠檬酸按质量比为90:1:12混合，在水相中制备纳米硒溶液，温度控制在65℃保温2小时，再超声波150W、20kHz处理60分钟，处理10分钟间歇10分钟，溶液中壳聚糖质量分数为5×10^-4，硒化合物的浓度为3mmol/L，柠檬酸的浓度为6g/L；（3）将纳米硒溶液加入温度为60℃的酶解液中，混合，在45℃螯合1.5h，得到成液；（4）将所述成液浓缩、喷雾干燥得到成品，其中喷雾干燥时进风口温度为230℃、出风口温度为100℃。

实施例5：

一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法，步骤如下：（1）蛋白肽酶解液的制备同实施例1；（2）将羧甲基壳聚糖、亚硒酸钠和柠檬酸按质量比为90:1:12混合，在水相中制备纳米硒溶液，温度控制在65℃保温2小时，再超声波120W、18kHz处理50分钟，处理5分钟间歇5分钟，溶液中壳聚糖质量分数为5×10^-4，硒化合物的浓度为3mmol/L，柠檬酸的浓度为7g/L；（3）将纳米硒溶液加入温度为60℃的酶解液中，混合，在45℃螯合1.5h，得到成液；（4）将所述成液浓缩、喷雾干燥得到成品，其中喷雾干燥时进风口温度为220℃、出风口温度为90℃。

通过对实施例所得到的叶面肥经较对照比较试验，本发明的叶面肥更利于硒的吸收及在作物体内的运输，大大提高了作物的含硒量，有利于食用者补充硒元素。

Claims

1.一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法，步骤如下：（1）蛋白肽酶解液的制备，以猪血为原料，经溶血、酶解、脱色、超滤而得；（2）将壳聚糖、硒化合物和柠檬酸按一定比例混合，水相中制备纳米硒溶液；（3）将所述纳米硒溶液加入温度为55~65℃的所述酶解液中，得到混合液，将混合液加热至45~60℃反应1~2h，得到成液；（4）将所述成液浓缩、干燥得到成品。

2.根据权利要求1所述一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法，其特征在于：所述蛋白肽酶解液的制备步骤如下：

a)采集新鲜猪血，以5g／L的柠檬酸钠抗凝，在4℃、8000r／min离心10min，收集下层沉淀，以获得红血球；将红血球加入同等体积的生理盐水冲洗并离心两次后加入2倍体积的蒸馏水，超声波细胞破碎辅助溶血20min，然后在4℃、4000r／min离心10min，得到血红蛋白溶液，于4℃保存备用；

b）取血红蛋白溶液，加入适量的胰蛋白酶酶解，搅拌，2mol/LNaoH溶液维持体系pH8.0，45~50℃，6~10h；将酶解反应产物迅速升温至85℃并保持此温度10~15分钟，再迅速冷却至50℃以下，调节pH值至7.0左右，8000r／min离心15min，获得上清酶解液，4℃冷藏备用；

c）活性炭用量为酶解液总重的5~30％，温度55℃，搅拌脱色20~30min；再进行粗滤处理后得粗滤酶解液；将粗滤酶解液在0.1~0.2Mpa的工作压力和0~45℃的工作温度下，采用截留分子质量为1kD超滤膜进行超滤处理，收集1kD以下蛋白肽酶解液。

3.根据权利要求1所述一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法，其特征在于：所述壳聚糖、硒化合物和柠檬酸的质量比为80~100:1:10~15。

4.根据权利要求3所述一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法，其特征在于：步骤（2）中纳米硒溶液中所述壳聚糖质量分数为2×10^-4~5×10^-4，所述硒化合物的浓度为2~3mmol/L，所述柠檬酸的浓度为5~7g/L。

5.根据权利要求3所述一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法，其特征在于：所述壳聚糖为羧甲基壳聚糖、水溶性壳聚糖和壳寡糖中的一种或多种混合物。

6.根据权利要求1所述一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法，其特征在于：步骤（2）中将得到的所述纳米硒溶液进行超声波处理30~60min。

7.根据权利要求6所述一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法，其特征在于：所述超声波功率为100~150w、频率为15~20kHz，连续处理5~10min后间歇5min。

8.根据权利要求1所述一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法，其特征在于：所述硒化合物为亚硒酸钠。

9.根据权利要求1所述一种富硒蛋白肽叶面肥的制备方法，其特征在于：步骤（4）中所述干燥方式为喷雾干燥，所述喷雾干燥进风口温度为200~230℃，出风口温度为80~100℃。