CN104073569A - 用于诊断手足口病极重症的分子标记物及其检测方法与试剂盒 - Google Patents
用于诊断手足口病极重症的分子标记物及其检测方法与试剂盒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104073569A CN104073569A CN201410348808.9A CN201410348808A CN104073569A CN 104073569 A CN104073569 A CN 104073569A CN 201410348808 A CN201410348808 A CN 201410348808A CN 104073569 A CN104073569 A CN 104073569A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- mir
- mouth disease
- disease
- hand foot
- foot mouth
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/158—Expression markers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/178—Oligonucleotides characterized by their use miRNA, siRNA or ncRNA
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pathology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种用于诊断手足口病极重症的生物标记物,包括有miR-671-5p、miR-16-5p及miR-150-3p。本发明涉及的用于诊断手足口病极重症的生物标记物具有特异性区分能力,稳定性好及效率高的特点,具有较好诊断指标的特性,且本发明涉及的用于诊断手足口病极重症的生物标记物的检测试剂盒成本较低,便于大规模的推广。
Description
技术领域
本发明涉及生物检测技术和医学诊断领域,特别是涉及一种用于诊断手足口病极重症的分子标记物及其检测方法与试剂盒。
背景技术
手足口病(Hand,foot,and mouth disease,HFMD)是一种常见传染病,以婴幼儿发病为主。引起手足口病的病原主要为肠道病毒属的柯萨奇病毒(Coxasckie virus)A组16、4、5、7、9、10型,B组2、5、13型;埃可病毒(ECHO viruses)和肠道病毒71型(EV71),其中以EV71及CAl6型最为常见,EV71感染引起重症病例的比例较大。手足口病大多数患者症状轻微,表现为发热和手、足、口腔等部位的皮疹或疱疹。疾病进程为自限性,一般预后良好,但少数极重症患者可并发无菌性脑膜炎、脑炎、急性弛缓性麻痹、呼吸道感染和心肌炎等,个别极重症患儿病情进展快,易发生死亡;因此该疾病迫切需要寻找极重症手足口病的特异的生物标记分子,指导医生诊断和临床治疗,从而使极重症手足口病患者达到早发现、早诊断、早治疗的目标,为临床控制和预防极重症手足口病的发生、发展提供科学依据。
MicroRNA(miRNA)是一类生物体内自然形成的小分子非编码RNA,参与调节其特异靶基因的表达,从而达到调控蛋白的目的,具有调节发育时序,细胞增殖,分化,代谢,凋亡与应激以及参与脊椎动物心脏、肌肉以及神经系统的形成,同时具有调控疾病发生、发展的功能。约50%的已知人类miRNA基因定位于和肿瘤及疾病相关的染色体区域,而不断累积的研究成果也已充分证实miRNA的异常表达与疾病的发生,发展密切相关。基因芯片技术近些年来发展迅速,被广泛的应用于各个生命科学领域,包括疾病预测与诊断、基因突变检测、遗传学产前诊断等临床应用中,目前microRNA芯片已经成为筛选miRNA生物标志物的重要手段之一。
生物标记物是指能将机体的生理和疾病状态区分开来的生物分子,筛选到可用于疾病早期发现、早期诊断的生物标志物可大大提高患者的临床治疗效果。最新数据显示肿瘤组织普遍具有特征性的miRNA表达谱,即指肿瘤细胞中某些miRNA的表达水平异常,而这种异常的特征性miRNA可以成为用于肿瘤或疾病的诊断,病理分级,临床分期,治疗与预后的生物标志物,显示了较好的临床应用前景。
目前,由于手足口病对于婴幼儿具有很强的传染性,一般是通过临床症状和病毒鉴定来诊断手足口病,但没有明确的分子标记物来区别手足口病轻症和重症,造成许多小孩预后不良的结果。
发明内容
本发明的目的之一提供一种具有特异性区分能力,稳定性好,效率高及成本低的用于诊断手足口病极重症的生物标记物及其应用。
实现上述目的的技术方案如下。
血清中exosome里的miR-671-5p作为快速诊断手足口病极重症分子标记物的应用。
或者,血清中exosome里的miR-671-5p,以及选自miR-16-5p和miR-150-3p中的至少一种作为快速诊断手足口病极重症分子标记物的应用。
快速诊断手足口病极重症的分子标记物,该分子标记物包括有血清中exosome里的miR-671-5p。
进一步地,还包括有miR-16-5p和/或miR-150-3p。
本发明的另一目的,在于提供一种快速诊断手足口病极重症的试剂盒。
实现该目的的技术方案如下。
一种快速诊断手足口病极重症的试剂盒,包括有检测血清中exosome里的miR-671-5p的表达量的试剂。
在其中一个实施例中,进一步还包括有检测血清中exosome里的miR-16-5p和/或miR-150-3p的表达量的试剂。
在其中一个实施例中,进一步还包括有检测内参miR-642a-3p的表达量的试剂。
更进一步地,本发明还提供了一种快速诊断手足口病极重症的荧光定量PCR试剂盒。
一种快速诊断手足口病极重症的荧光定量PCR试剂盒,包括有
(A)针对血清中exosome里的miR-671-5p的反转录引物SEQ ID NO:5、以及荧光定量PCR检测引物对SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10,以及检测内参miR-642a-3p的表达量的试剂。
在其中一个实施例中,还包括有
(B)针对miR-150-3p的反转录引物SEQ ID NO:6、以及荧光定量PCR检测引物对SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:10,和/或(C)针对miR-16-5p的反转录引物SEQ ID NO:7、以及荧光定量PCR检测引物对SEQ ID NO:12和SEQ ID NO:10。
本发明的另一目的是提供一种快速诊断手足口病极重症的方法。
实现该目的的技术方案如下。
一种快速诊断手足口病极重症的方法,包括以下步骤:
(1)检测待检测者血清中exosome里的miR-671-5p的表达量,检测内参miR-642a-3p的表达量;
或者包括以下步骤:
(1)检测待检测者血清中exosome里的miR-671-5p的表达量,检测内参miR-642a-3p的表达量;和
(2)检测血清中exosome里的miR-16-5p和/或miR-150-3p的表达量。
本发明通过microRNA Microarray分析和荧光定量PCR验证等技术,结果均表明:与健康孩子和手足口病轻症患儿相比,手足口病极重症患儿血清中exosome中miR-671-5p,miR-16-5p和miR-150-3p的表达量发生了明显改变,尤其miR-671-5p在正常孩子和手足口病轻症患儿的血清exosome中表达,而在手足口病极重症患儿血清exosome中几乎不表达,因此,miR-671-5p可以单独作为手足口病极重症的分子标记物。此外,miR-16-5p的表达与健康孩子相比、在手足口病轻症和极重症患儿中依次显著上调,miR-150-3p的表达与健康孩子相比,在手足口病轻症和极重症患儿都发生下调,而手足口病极重症患儿与手足口病轻症患儿相比,发生了显著上调,因此,miR-16-5p和miR-150-3p可作为辅助诊断手足口病极重症的分子标记物,根据血清中exosome里的miR-671-5p,miR-16-5p和miR-150-3p表达量的变化,能快速准确诊断手足口病极重症患儿,及时制定治疗方案,避免预后不良的情况的发生。本发明为快速准确的诊断手足口病极重症患儿,提供了一种客观、准确的评价标准,避免耽误治疗或疾病的暂时性潜伏,这也对于临床诊断试剂盒的研制具有极大的应用价值。
附图说明
图1:健康孩子(control)与手足口病轻症(MHFMD)及手足口病极重症患儿(ESHFMD)血清中exosome的特征:(A)透射电镜下健康孩子与手足口病轻症(MHFMD)及手足口病极重症患儿(ESHFMD)血清中exosome的形态特征;(B)与血清(serum,S)相比,exosome(Ex)中两个biomarker蛋白CD63和TSG101的表达量的检测。
图2:5个健康孩子等量血清混合与5个手足口病轻症(MHFMD)及5个手足口病极重症患儿(ESHFMD)等量混合血清中exosome里microRNA Microarray结果分析。
图3:18个健康孩子(control)与18个手足口病轻症(MHFMD)及18个手足口病极重症患儿(ESHFMD)血清中exosome的miR-671-5p,miR-16-5p和miR-150-3p的荧光定量PCR结果分析。
图4:18个健康孩子(control)与18个手足口病轻症(MHFMD)及18个手足口病极重症患儿(ESHFMD)血清中exosome的miR-671-5p,miR-16-5p和miR-150-3p的ROC曲线图,其中(A)手足口病轻症患儿与正常孩子相比,(B)手足口病极重症患儿与正常孩子相比,(C)手足口病轻症患儿与手足口病极重症患儿相比。
具体实施方式
为了能够更清楚地理解本发明的技术内容,特举以下实施例结合附图详细说明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件,例如Sambrook等人,分子克隆:实验室手册(New York:Cold Spring Harbor Laboratory Press,1989)中所述的条件,或按照制造厂商所建议的条件。实施例中所用到的各种常用化学试剂,均为市售产品。
除非另有定义,本发明所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的,不用于限制本发明。本发明所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
临床中,手足口病极重症样本非常难收集。本发明的发明人经过多年的临床经验,结合对儿童血清中的exsome中的miRNA分别进行扫描分析,并进行临床样本验证,最后从众多的miRNAs确定3个表达差异的miRNAs。与健康孩子和手足口病轻症患儿相比,手足口病极重症患儿血清中exosome中miR-671-5p,miR-16-5p和miR-150-3p的表达量发生了明显改变,尤其miR-671-5p在正常孩子和手足口病轻症患儿的血清exosome中表达,而在手足口病极重症患儿血清exosome中几乎不表达,因此,miR-671-5p可以单独作为手足口病极重症的分子标记物。miR-16-5p的表达与健康孩子相比、在手足口病轻症和极重症患儿中依次显著上调;miR-150-3p的表达与健康孩子相比,在手足口病轻症和极重症患儿都发生下调,而手足口病极重症患儿与手足口病轻症患儿相比,发生了显著上调,miR-16-5p和miR-150-3p作为辅助诊断手足口病极重症的分子标记物,说明这三个miRNAs(miR-671-5p、miR-16-5p和miR-150-3p)是手足口病极重症的分子标记物,本领域的技术人员通过分析这三个miR-671-5p、miR-16-5p和miR-150-3p在血清中exosome里的表达量的变化,能快速准确诊断手足口病极重症患儿。
(1)实验样本收集
按照2008年手足口病预防控制指南收集手足口病轻症和极重症患儿临床样本各23个(实施例1和实施例2中各分析了5个和18个对应的不同样本),同时经EV71诊断试剂盒检测均是EV71感染的手足口病,同时收集了23个正常孩子作为对照,手足口病极重症病例除满足手足口病预防控制指南外,还都需要机械通气,并出现脑炎和肺出血等临床症状,此外,这些样本经过临床检查证明没有感染其他疾病。把收集到的血液样本按照1000×g4℃离心10min,收集血清。
(2)实验试剂
RNA提取及qRT-PCR检测过程中所用到的试剂,如TRIZOL,氯仿,异丙醇,75%乙醇等常规生化试剂,miRNA茎环结构反转录引物、PCR正向引物、PCR反向引物。PCR扩增试剂盒(10Xbuffer、dNTPs mixture、Taq)及反转录反应试剂(RNase抑制剂、M-MuLV反转录酶、5×M-MuLV缓冲液以及反转录用dNTP混合物)均购买于TaKaRa公司,基于DNA染料法的荧光定量PCR检测试剂SYBRGreen PCR Master Mix为AB公司产品。exosome提取试剂盒为SBI公司产品。
实施例1
快速准确诊断手足口病极重症患儿的方法,包括以下步骤:
1.分别采集5个健康孩子,5个手足口病轻症和5个手足口病极重症患儿血液,1000×g离心10min后,取出血清;
2.按照exosome提取试剂盒说明,提取血清中的exosome;
3.在透射电镜下观察exosome的形态,呈近圆形,直径在30-100nm之间。此外,用western Blot检测exosome的两个biomarker蛋白CD63和TSG101的表达。结果显示,exosome中的CD63和TSG101比血清中的要明显富集,以上结果说明我们提取exosome成功,参见图1。
4.用Trizol试剂提取exosome里的RNA,并对其进行浓度和纯度的测定;
5.进行microRNA Microarray分析;按照上调或下调>1.5倍的标准,进行了microRNA的初筛;
6.对于筛选出来的microRNAs,进行荧光定量PCR的验证(按常规方法逆转录获取cDNA,然后进行荧光定量PCR反应)。
MiRNA的序列
特异性引物如下表
二.逆转录
1)在去RNase的PCR管中配置以下溶液.
2)将上述溶液混匀,85℃孵育5min,以打开RNA二级结构。随后立即置于冰上,以防止RNA复性再次恢复二级结构;
3)在另一去RNase的PCR管中配置以下溶液
4)将3)溶液加入到1)溶液中,混匀后42℃孵育60min;
5)85℃孵育10min灭活逆转录酶。
荧光定量PCR引物
荧光定量PCR反应体系
荧光定量PCR反应条件:50℃2min;95℃2min;95℃15s,60℃32s读板40cycles;融解曲线分析:温度60℃-95℃。
通过microRNA Microarray分析得到差异明显的miRNAs(>1.5倍),其中包括了miR-671-5p、miR-16-5p和miR-150-3p,请参见图2。
图2的(A)根据microRNA Microarray结果,按照1.5倍筛选到的差异miRNAs,(B)维恩图显示了健康孩子与手足口病轻症患儿,健康孩子与手足口病极重症患儿,手足口病轻症患儿与手足口病极重症患儿两两比对筛选出来的差异miRNAs,(C)与健康孩子相比,在手足口病轻症患儿,手足口病极重症患儿都发生变化的差异miRNAs。即miR-671-5p在正常孩子和手足口病轻症患儿的血清exosome中表达,而在手足口病极重症患儿血清exosome中几乎不表达,miR-16-5p的表达与健康孩子相比、在手足口病轻症和极重症患儿中依次显著上调,miR-150-3p的表达与健康孩子相比,在手足口病轻症和极重症患儿都发生下调,而手足口病极重症患儿与手足口病轻症患儿相比,发生了显著上调。
实施例2
为了进一步确认这些差异性miRNAs(miR-671-5p、miR-16-5p和miR-150-3p)是否与手足口病极重症的快速准确诊断密切相关,分别提取了18个健康孩子、18个手足口病轻症患儿、18个手足口病极重症患儿血清中exosome的RNA,这几组血清中exosome的RNA通过实施例1所述的荧光定量PCR评估方法进行验证,以健康儿童血清exosome的RNA做对照,结果如图3和图4所示,实验结果显示手足口病极重症患儿miR-671-5p、miR-16-5p和miR-150-3p与健康孩子及手足口病轻症患儿相比,发生了明显的变化,尤其miR-671-5p在正常孩子和手足口病轻症患儿的血清exosome中表达,而在手足口病极重症患儿血清exosome中几乎不表达,miR-671-5p可以单独用来对极重症手足口病患者进行临床筛查和诊断。miR-16-5p的表达与健康孩子相比、在手足口病轻症和极重症患儿中依次显著上调;miR-150-3p的表达与健康孩子相比,在手足口病轻症和极重症患儿都发生下调,而手足口病极重症患儿与手足口病轻症患儿相比,发生了显著上调,miR-16-5p和miR-150-3p作为辅助诊断手足口病极重症的分子标记物。通过统计可以得知(表1-3),miR-671-5p可以单独作为极重症患者的血清中exosome的标记物,miR-16-5p和miR-150-3p可以对极重症患者辅助诊断。
即miR-671-5p,或miR-671-5p与选自miR-16-5p和miR-150-3p中的至少一种可作为快速诊断手足口病极重症分子标记物的应用。
表1手足口病轻症患者与正常者miR-671-5p,miR-16-5p和miR-150-3p统计参数
miRNA的名称 | 95%CI | specificity | sensitivity | AUC |
miR-671-5p | 62.0%-90.9% | 72.22% | 82.35% | 0.791 |
miR-16-5p | 62.9%-91.2% | 72.22% | 83.33% | 0.796 |
miR-150-3p | 73.9%-96.9% | 100% | 77.78% | 0.889 |
表2手足口病极重症患者和正常者miR-671-5p,miR-16-5p和miR-150-3p统计参数
miRNA的名称 | 95%CI | specificity | sensitivity | AUC |
miR-671-5p | 90.3%-100% | 100% | 100% | 1.000 |
miR-16-5p | 86.0%-100% | 100% | 88.89% | 0.975 |
miR-150-3p | 66.5%-93.2% | 100% | 77.78% | 0.827 |
表3手足口病极重症患者和轻症患者miR-671-5p,miR-16-5p和miR-150-3p统计参数
miRNA的名称 | 95%CI | specificity | sensitivity | AUC |
miR-671-5p | 65.0%-92.4% | 83.33% | 77.78% | 0.815 |
miR-16-5p | 58.5%-88.3% | 77.78% | 88.89% | 0.756 |
miR-150-3p | 58.1%-88.4% | 77.78% | 88.24% | 0.755 |
本发明提供的分子标记物miR-671-5p、miR-16-5p和miR-150-3p在用于快速准确诊断手足口病极重症患儿与目前所使用的各种临床诊断方法相比,它是一种客观的评价方法,具有取材方便、操作简单、稳定性好等优点,因此本发明具有极大的临床应用的可能。本发明涉及的用于诊断手足口病极重症的生物标记物的试剂盒具有特异性区分能力,稳定性好及效率高的特点,具有较好诊断指标的特性,且本发明涉及的用于诊断手足口病极重症的生物标记物的检测试剂盒成本较低,便于大规模的推广。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (10)
1.血清中exosome里的miR-671-5p作为快速诊断手足口病极重症分子标记物的应用。
2.血清中exosome里的miR-671-5p,以及选自miR-16-5p和miR-150-3p中的至少一种作为快速诊断手足口病极重症分子标记物的应用。
3.快速诊断手足口病极重症的分子标记物,其特征在于,该分子标记物包括有血清中exosome里的miR-671-5p。
4.根据权利要求3所述的分子标记物,其特征在于,还包括有miR-16-5p和/或miR-150-3p。
5.一种快速诊断手足口病极重症的试剂盒,其特征在于,包括有检测血清中exosome里的miR-671-5p的表达量的试剂。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,还包括有检测血清中exosome里的miR-16-5p和/或miR-150-3p的表达量的试剂。
7.根据权利要求5或6所述的试剂盒,其特征在于,还包括有检测内参miR-642a-3p的表达量的试剂。
8.一种快速诊断手足口病极重症的荧光定量PCR试剂盒,其特征在于,包括有(A)针对血清中exosome里的miR-671-5p的反转录引物SEQ ID NO:5、以及荧光定量PCR检测引物对SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10;以及检测内参miR-642a-3p的表达量的试剂。
9.根据权利要求8所述的荧光定量PCR试剂盒,其特征在于,还包括有(B)针对miR-150-3p的反转录引物SEQ ID NO:6、以及荧光定量PCR检测引物对SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:10,和/或(C)针对miR-16-5p的反转录引物SEQID NO:7、以及荧光定量PCR检测引物对SEQ ID NO:12和SEQ ID NO:10。
10.一种快速诊断手足口病极重症的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)检测待检测者血清中exosome里的miR-671-5p的表达量,和检测内参miR-642a-3p的表达量;
或者包括以下步骤:
(1)检测待检测者血清中exosome里的miR-671-5p的表达量,检测内参miR-642a-3p的表达量;和
(2)检测待检测者血清中exosome里的miR-16-5p和/或miR-150-3p的表达量。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410348808.9A CN104073569B (zh) | 2014-07-21 | 2014-07-21 | 用于诊断手足口病极重症的分子标记物及其检测方法与试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410348808.9A CN104073569B (zh) | 2014-07-21 | 2014-07-21 | 用于诊断手足口病极重症的分子标记物及其检测方法与试剂盒 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN104073569A true CN104073569A (zh) | 2014-10-01 |
CN104073569B CN104073569B (zh) | 2016-06-22 |
Family
ID=51595172
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201410348808.9A Active CN104073569B (zh) | 2014-07-21 | 2014-07-21 | 用于诊断手足口病极重症的分子标记物及其检测方法与试剂盒 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN104073569B (zh) |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105274226A (zh) * | 2015-10-26 | 2016-01-27 | 上海交通大学 | 基于AgNCs/HpDNA探针的microRNA SDA检测法 |
CN105274227A (zh) * | 2015-10-26 | 2016-01-27 | 上海交通大学 | 基于AgNCs/HpDNA探针的microRNA SDA检测法 |
WO2018174830A1 (en) * | 2017-03-24 | 2018-09-27 | Agency For Science, Technology And Research | A detection method |
CN110045105A (zh) * | 2018-11-09 | 2019-07-23 | 广州市妇女儿童医疗中心 | 柯萨奇A16病毒IgA抗体量子点免疫荧光层析试纸条及试剂盒 |
CN111554347A (zh) * | 2020-04-20 | 2020-08-18 | 深圳华大因源医药科技有限公司 | 构建用于手足口样本归类的模型的方法及其应用 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101550457A (zh) * | 2009-05-14 | 2009-10-07 | 江苏省疾病预防控制中心 | 一种检测手足口病病原的液相芯片及其制备方法和应用 |
CN101629214A (zh) * | 2009-04-21 | 2010-01-20 | 山东省疾病预防控制中心 | 手足口病相关病毒平行检测液相芯片及其制备方法与应用 |
CN101956021A (zh) * | 2010-08-05 | 2011-01-26 | 成都新基因格生物科技有限公司 | 一种用于检测致手足口病肠道病毒的组合物、试剂盒及方法 |
-
2014
- 2014-07-21 CN CN201410348808.9A patent/CN104073569B/zh active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101629214A (zh) * | 2009-04-21 | 2010-01-20 | 山东省疾病预防控制中心 | 手足口病相关病毒平行检测液相芯片及其制备方法与应用 |
CN101550457A (zh) * | 2009-05-14 | 2009-10-07 | 江苏省疾病预防控制中心 | 一种检测手足口病病原的液相芯片及其制备方法和应用 |
CN101956021A (zh) * | 2010-08-05 | 2011-01-26 | 成都新基因格生物科技有限公司 | 一种用于检测致手足口病肠道病毒的组合物、试剂盒及方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
HONG-LING JIA,ET AL: "MicroRNA expression profile in exosome discriminates extremely severe infections from mild infections for hand, foot and mouth disease", 《BMC INFECTIOUS DISEASES》 * |
KARIN EKSTROM,ET AL: "Characterization of mRNA and microRNA in human mast cell-derived exosomes and their transfer to other mast cells and blood CD34 progenitor cells", 《JOURNAL OF EXTRACELLULAR VESICLES》 * |
LUNBIAO CUI ET AL: "Serum MicroRNA Expression Profile Distinguishes Enterovirus 71 and Coxsackievirus 16 Infections in Patients with Hand-Foot-and-Mouth Disease", 《PLOS ONE》 * |
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105274226A (zh) * | 2015-10-26 | 2016-01-27 | 上海交通大学 | 基于AgNCs/HpDNA探针的microRNA SDA检测法 |
CN105274227A (zh) * | 2015-10-26 | 2016-01-27 | 上海交通大学 | 基于AgNCs/HpDNA探针的microRNA SDA检测法 |
CN105274227B (zh) * | 2015-10-26 | 2018-12-18 | 上海交通大学 | 基于AgNCs/HpDNA探针的microRNA SDA检测用SDA反应液 |
CN105274226B (zh) * | 2015-10-26 | 2019-01-11 | 上海交通大学 | 基于AgNCs/HpDNA探针的microRNA SDA检测用SDA反应液 |
WO2018174830A1 (en) * | 2017-03-24 | 2018-09-27 | Agency For Science, Technology And Research | A detection method |
CN110045105A (zh) * | 2018-11-09 | 2019-07-23 | 广州市妇女儿童医疗中心 | 柯萨奇A16病毒IgA抗体量子点免疫荧光层析试纸条及试剂盒 |
CN110045105B (zh) * | 2018-11-09 | 2022-04-26 | 广州市妇女儿童医疗中心 | 柯萨奇A16病毒IgA抗体量子点免疫荧光层析试纸条及试剂盒 |
CN111554347A (zh) * | 2020-04-20 | 2020-08-18 | 深圳华大因源医药科技有限公司 | 构建用于手足口样本归类的模型的方法及其应用 |
CN111554347B (zh) * | 2020-04-20 | 2023-10-31 | 深圳华大因源医药科技有限公司 | 构建用于手足口样本归类的模型的方法及其应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN104073569B (zh) | 2016-06-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN107406885A (zh) | 使用血浆dna的尺寸和数目畸变检测癌症 | |
CN105132407B (zh) | 一种脱落细胞dna低频突变富集测序方法 | |
CN103805696B (zh) | 一种诊断类风湿关节炎的microRNA分子标志物及其检测试剂盒 | |
CN104073569A (zh) | 用于诊断手足口病极重症的分子标记物及其检测方法与试剂盒 | |
CN105067822B (zh) | 用于食管癌诊断的标志物 | |
CN105486866B (zh) | microRNA在制备诊断宫颈癌或其癌前病变的试剂盒中的应用 | |
CN102649977B (zh) | 用于检测白血病BCR/ABL(m-bcr)融合基因相对表达量的试剂盒 | |
CN101921864A (zh) | 一种肝癌外周血基因诊断模型及诊断试剂盒 | |
CN105671179B (zh) | 血清microRNA在肝癌诊断中的应用及诊断试剂盒 | |
CN103667453B (zh) | 检测11q23/MLL融合基因相对表达量的方法、引物和探针 | |
CN111424085B (zh) | tRNA来源片段在制备乳腺癌诊断试剂中的应用 | |
CN110724743B (zh) | 人血液中结直肠癌诊断相关的甲基化生物标记物及其应用 | |
CN109536502B (zh) | 一种适用于妊娠滋养细胞肿瘤患者血浆外泌体miRNA的PCR内参 | |
CN104450702B (zh) | 一种血清miRNA生物标志物组合物与应用 | |
CN108300788A (zh) | 一种用于检测轻型脑外伤的微小核糖核酸组合及其应用 | |
EP3408409A1 (en) | Chronic kidney disease diagnostic | |
WO2020134950A1 (zh) | 用于肺结节良恶性鉴别的基因突变/融合组合及试剂盒 | |
CN105907875A (zh) | 一种筛选肾癌外周血miRNA标志物的方法及肾癌标志物miR-378 | |
CN107460256A (zh) | 一种lncRNA作为生物标志物在检测肠道病毒EV71中的应用 | |
Zhao et al. | Serum microRNA-155 as a potential biomarker for breast cancer screening | |
CN114015765B (zh) | 一种用于IgA肾病检测的系统、方法及方法的建立 | |
CN104651492A (zh) | miRNA410-在制备前列腺癌诊断试剂盒中的应用 | |
CN114032297B (zh) | 一种与ICP辅助诊断相关的血清/血浆外泌体miRNA标志物及其应用 | |
CN117802243A (zh) | 用于肝癌诊断的miRNA标志物、试剂、试剂盒及诊断系统 | |
KR102602134B1 (ko) | 자궁경부암의 전이 진단을 위한 정보 제공 방법 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |