CN104068140A

CN104068140A - 一种提高菊花花序中绿原酸含量的方法

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Publication number: CN104068140A
Application number: CN201410281154.2A
Authority: CN
Inventors: 姚晓芹; 楚建周; 司超; 贺学礼; 马春辉
Original assignee: Hebei University
Current assignee: Hebei University
Priority date: 2014-06-20
Filing date: 2014-06-20
Publication date: 2014-10-01
Anticipated expiration: 2034-06-20
Also published as: CN104068140B

Abstract

本发明公开了一种提高菊花花序中绿原酸含量的方法，包括以下步骤：（a）将采摘的新鲜菊花花序置于培养室内，在温度为20-25℃、湿度为50-80%的条件下，用紫外光UV-B照射，照射强度为50-600μW/cm²，照射时间为15-120min；（b）将照射后的花序转入培养箱内，在箱内温度为20-25℃、湿度50-80%的条件下，暗培养12h；（c）将步骤（b）处理后的花序置于烘干机中，在100-105℃下杀青8-10min，然后置于50-55℃下烘干至恒重即可。本发明工艺简单、绿色环保、安全系数高、生产周期短、成本低、效益高、操作控制性好，适于工业化大规模生产。

Description

一种提高菊花花序中绿原酸含量的方法

技术领域

本发明涉及提高植物中药用成分含量的方法，具体地说是一种提高菊花花序中绿原酸含量的方法。

背景技术

菊花（Chrysanthemum）系菊科多年生草本植物，其茎直立，叶卵形至披针形，羽状浅裂或半裂，头状花序，总苞片为多层，大小不一。菊花为药食同源植物，其干燥的头状花序为中国常用中药，具有治疗冠心病、降低血压、预防高血脂、抗菌、抗病毒、抗炎、抗衰老等多种功效。其花序的化学成分有氨基酸、微量元素、三萜类化合物、绿原酸、挥发油等，其中绿原酸是2000版、2005版和2010版《中国药典》中明确指定的作为菊花质量控制的指标成分。而且通过现代药理研究表明，绿原酸具有利胆、抗菌、抗病毒、降压、消炎及升高白细胞、止血、缩短血凝和出血时间、调高中枢神经系统的兴奋性以及防癌、抗癌等生理功能。

然而，菊花花序中绿原酸含量相对较低，这严重制约了该药用成分的开发和利用。为提高菊花花序中绿原酸的含量，目前行业内研究应用较多的方法有调节环境因子、基因工程、AM真菌侵染以及细胞和组织培养等。其中调节环境因子方法主要是在菊花自然生长过程中通过改变环境中的温度、光照、养分、水分等因子来调节药用植物次生代谢，从而使有效成分得到形成和积累。该方法在行业内应用较为广泛，并已取得一定成效，但是菊花在生长过程受到多种环境因子的影响，所以存在可控性、预见性较差的问题。基因工程方法是把控制高含量绿原酸药效成分的目标基因切割下来，并通过载体使外来基因整合进选育植物的基因组中，从而使高含量药用物质的特性得以表达。该方法克服了作物育种中的盲目性，能够较好地按人们的需要操纵作物的遗传及变异，培育优良的品种。但该方法技术性较强，操作成本昂贵，研究周期长，推广应用缓慢。AM真菌侵染法是指将特定AM真菌接种到选育盆栽的土壤中，通过共生关系扩大盆栽植物根系的吸收范围，增加植物对土壤中特定营养成分的吸收，从而促进植物在生长发育过程中其药用成分得到形成及积累。但是，该方法需要在大范围的真菌种属中选择适当的AM真菌，所以存在步骤繁琐，预见性较差的缺陷。可见，能够研发一种步骤简单、效率高、费用低的提高药用植物中有效成分的方法是行业内积极探索的课题。

发明内容

本发明的目的就是提供一种可有效提高菊花花序中绿原酸含量的方法，以解决现有方法存在步骤繁琐、可控性差、效率低、推广使用周期长、成本高的问题。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种提高菊花花序中绿原酸含量的方法，它包括以下步骤：

（a）将采摘的新鲜菊花花序置于培养室内，在温度为20-25℃、湿度为50-80%的条件下，用紫外光UV-B照射，照射强度为50-600 μw/cm²，照射时间为15-120 min；

（b）将照射后的花序转入培养箱内，在箱内温度为20-25℃、湿度为50-80%的条件下，暗培养12 h；其中暗培养是指在避光条件下静置；

（c）将照射处理后的花序置于烘干机中，在100-105℃下杀青8-10 min，然后置于50-55℃下烘干至恒重即可。

本发明中步骤（a）所述用紫外光UV-B照射，当照射时间到总照射时间的50%时，将菊花花序的照射面和背光面翻转一次，这样可以使整个花序更加充分和均匀地接受紫外光UV-B照射。

本发明步骤（a）所述紫外光UV-B照射强度优选为200-600 μw/cm²，在此条件下，照射15-120 min，所得菊花花序中绿原酸含量较对照组增加了约33.23-39.68%。

本发明步骤（a）所述紫外光UV-B照射强度优选为200-400 μw/cm²，在此条件下，照射15-120 min，所得菊花花序中绿原酸含量较对照组增加了约34.84-39.68%。

本发明步骤（a）所述紫外光UV-B照射强度更优选为200 μw/cm²，在此条件下，照射15-120 min，所得菊花花序中绿原酸含量较对照组增加了约37.10-39.68%。

本发明步骤（a）所述紫外光UV-B照射强度优选为200 μw/cm²，照射时间更优选为15-30 min，在此条件下，所得菊花花序中绿原酸含量较对照组增加了约38.39-39.68%。

本发明步骤（a）所述菊花花序在紫外光UV-B照射的最佳条件下：强度为200 μw/cm²，时间为30 min，其所得菊花花序中绿原酸含量较对照组增加率达到最高为39.68%。

本发明步骤（b）的暗培养是指将照射后的花序在培养箱内温度20-25℃、湿度50-80%、避光条件下静置培养12 h。本发明将照射后的菊花花序结合暗培养处理，可进一步有效提高菊花花序中绿原酸，同时还可促使已被转化的绿原酸处于稳定状态。

本发明步骤（c）所述杀青是指将花序置于烘干机中在100-105℃下烘干8-12 min。本发明通过杀青过程可破坏和钝化菊花花序中的有害活性酶，从而防止已被转化的绿原酸又被水解、氧化或发生逆反应。

本发明中的菊花花序选自于普通种植的药用菊花祁白菊的花序，其最佳采摘时间为10月下旬到11月上旬，采摘状态以菊花花序的外层舌状花全开，呈白色，内层管状花开10%-40%为最佳。本发明的处理方法亦可广泛应用于其他药用菊花花序的处理。

本发明人在实现本发明的过程中发现，在一定温度和湿度条件下，单纯采用紫外光对新鲜菊花花序进行照射处理，虽然可在一定程度上提高菊花花序中绿原酸含量，但其效果并非很理想，尤其是干燥菊花花序中绿原酸的含量水平随存储时间的增加，其含量的稳定性较差。经对比试验研究发现，菊花花序经处理后即时测试其绿原酸含量水平较高，但放置储存一段时间后，其含量水平会明显发生衰减。

为此，本发明采用紫外照射技术，用特定照射强度和照射时间对新鲜药用菊花花序进行照射处理，首先促进新鲜菊花花序中的绿原酸前体物质转化为绿原酸，然后再通过特定条件下的培养箱内暗培养，使其一方面进一步促进绿原酸前体物质转化为绿原酸，另一方面使已转化的绿原酸固化为稳定态绿原酸；最后通过杀青工序，防止了已转化的绿原酸被氧化或发生逆反应。

本发明采用紫外照射技术，用特定照射强度和照射时间对新鲜药用菊花花序进行照射处理，照射之后并结合在培养箱内长时间暗培养以及杀青处理，最终使菊花花序中的绿原酸含量提高了约20-40%。

本发明提供的方法步骤简单、所有工序及工艺条件都适于工业化操作。

本发明方法仅需在较短时间内就可显著提高菊花花序中的绿原酸含量，同时还有效避免了被处理菊花花序在存储过程中产生的绿原酸含量衰减现象。

本发明方法解决了现有方法为获得此目的而存在步骤繁琐复杂、耗时较长、操作控制性差、成本高、效益低的问题。

本发明方法简单、绿色环保、安全系数高、生产周期短、成本低、效益高、操作控制性好，适于工业化大规模生产。

具体实施方式

下面实施例用于进一步详细说明本发明，但不以任何形式限制本发明。

本发明中的菊花花序选自于河北省安国市普通种植的药用菊花祁白菊的花序，其采摘时间为10月下旬，采摘状态为菊花花序的外层舌状花全开，呈白色，内层管状花开10%-40%。

实施例1

（1）将采摘的新鲜菊花花序置于培养室内，在室内温度为25℃、湿度为60%的条件下，用紫外光UV-B照射，照射强度为200 μw/cm²，照射时间为30 min；

（2）将步骤（1）照射后的花序转入培养箱内，在培养箱内温度为25℃，湿度为60%的条件下，无光条件下静置暗培养12 h；

（3）将步骤（2）处理后的花序置于烘干机中，在105℃下杀青10 min，然后置于55℃下烘干至恒重。

实施例2

（1）将采摘的新鲜菊花花序置于培养室内，在室内温度为20℃、湿度为70%的条件下，用紫外光UV-B照射，照射强度为200 μw/cm²，照射时间为120 min；照射期间到60 min时，将花序的照射面和背光面进行翻转；

（2）将步骤（1）照射后的花序转入培养箱内，在培养箱内温度为20℃，湿度为70%的条件下，无光条件下静置暗培养12 h；

（3）将步骤（2）处理后的花序置于烘干机中，在100℃下杀青8 min，然后置于50℃下烘干至恒重。

实施例3：

（1）将采摘的新鲜菊花花序置于培养室内，在室内温度为22℃、湿度为80%的条件下，用紫外光UV-B照射，照射强度为200 μw/cm²，照射时间为15 min；

（2）将步骤（1）照射后的花序转入培养箱内，在培养箱内温度为22℃，湿度为80%的条件下，无光条件下静置暗培养12 h；

（3）将步骤（2）处理后的花序置于烘干机中，在102℃下杀青9 min，然后置于53℃下烘干至恒重。

实施例4：

（1）将采摘的新鲜菊花花序置于培养室内，在室内温度为25℃、湿度为50%的条件下，用紫外光UV-B照射，照射强度为600 μw/cm²，照射时间为120 min；照射期间到60 min时，将花序的照射面和背光面进行翻转；

（2）将步骤（1）照射后的花序转入培养箱内，在培养箱内温度为25℃，湿度为50%的条件下，无光条件下静置暗培养12 h；

实施例5：

（1）将采摘的新鲜菊花花序置于培养室内，在室内温度为20℃、湿度为75%的条件下，用紫外光UV-B照射，照射强度为400 μw/cm²，照射时间为120 min；照射期间到60 min时，将花序的照射面和背光面进行翻转；

（2）将步骤（1）照射后的花序转入培养箱内，在培养箱内温度为20℃，湿度为75%的条件下，无光条件下静置暗培养12 h；

实施例6：

（1）将采摘的新鲜菊花花序置于培养室内，在室内温度为25℃、湿度为75%的条件下，用紫外光UV-B照射，照射强度为50 μw/cm²，照射时间为120 min；照射期间到60 min时，将花序的照射面和背光面进行翻转；

（2）将步骤（1）照射后的花序转入培养箱内，在培养箱内温度为25℃，湿度为75%的条件下，无光条件下静置暗培养12 h；

（3）将步骤（2）处理后的花序置于烘干机中，在100℃下杀青10 min，然后置于55℃下烘干至恒重。

实施例7：

（1）将采摘的新鲜菊花花序置于培养室内，在室内温度为20℃、湿度为65%的条件下，用紫外光UV-B照射，照射强度为50 μw/cm²，照射时间为15 min；

（2）将步骤（1）照射后的花序转入培养箱内，在培养箱内温度为20℃，湿度为65%的条件下，无光条件下静置暗培养12 h；

实施例8

（1）将采摘的新鲜菊花花序置于培养室内，在室内温度为23℃、湿度为75%的条件下，用紫外光UV-B照射，照射强度为50 μw/cm²，照射时间为30 min；

（2）将步骤（1）照射后的花序转入培养箱内，在培养箱内温度为23℃，湿度为75%的条件下，无光条件下静置暗培养12 h；

对比例1

菊花采摘后置于烘箱内，在55℃下烘干，检测其绿原酸含量，见表1；本发明以该对比例为对照组。

对比例2

在处理中取消暗培养，即去掉实施例1中的第（2）步处理，其他同实施例1。

对比例3

在处理中取消杀青的步骤，即实施例1中的第（3）的前半部分工艺，直接在55℃下烘干，其他同实施例1。

实施例9 本发明处理后的菊花花序中绿原酸含量的测定

实验方法：

按照实施例及对比例所述的方法得到干燥花序，进行粉碎，过40目筛，测定方法按照《中国药典》2010版第一部中菊花中绿原酸含量的测定方法。称取样品0.3000 g，放置于具有玻璃塞的玻璃瓶中，加入70%甲醇25 ml，称定重量，超声处理40分钟（功率240瓦），冷却后再称定重量，用70%甲醇补足减少的重量，摇匀，过滤。取供试液5微升注入液相色谱仪进行测定。

其中：

绿原酸含量以每100克菊花花序干样中含有绿原酸克数的百分比（单位：%）。

绿原酸含量的增加率 =（实施例绿原酸含量-对照组绿原酸含量）/对照组绿原酸含量×100%。

同时跟踪检测上述实施例及对比例所得干燥菊花花序在常温干燥条件下保存5天、10天、30天及60天后菊花花序中绿原酸的含量，并计算其较对照组的增加率。

每个实施例及对比例均设计了6次平行实验，其绿原酸的含量是其6次平行试验检测结果的平均值。

检测结果：见表1。

由表1数据显示证明：①经过本发明处理的菊花花序所含绿原酸较未经照射等相关处理的普通干燥菊花花序提高了约20-40%，②从本发明实施例与对比例2和3的对比可以看出，紫外照射结合暗培养和杀青处理也可以显著提高菊花花序中绿原酸的含量；③从对比例2和3可以看出，对比例2和3中菊花花序经处理后即时测试其绿原酸含量水平较高，但放置储存一段时间后，其含量水平会明显发生下降；④从本发明制备的菊花花序随存储时间延长，其绿原酸的含量基本保持恒定，不会有衰减现象。可见，本发明提供的方法不仅工艺操作简单，而且在低成本的前提下能够达到较好的经济效益。

Claims

1.一种提高菊花花序中绿原酸含量的方法，其特征在于，它包括以下步骤：

（a）将采摘的新鲜菊花花序置于培养室内，在室内温度为20-25℃、湿度为50-80%的条件下，用紫外光UV-B照射，照射强度为50-600 μw/cm²，照射时间为15-120 min；

（b）将照射后的花序转入培养箱内，在箱内温度为20-25℃、湿度为50-80%的条件下，暗培养12 h；

（c）将步骤（b）处理后的花序置于烘干机中，在100-105℃下杀青8-10 min，然后置于50-55℃下烘干至恒重即可。

2.根据权利要求1所述的提高菊花花序中绿原酸含量的方法，其特征在于，步骤（a）所述用紫外光UV-B照射，当照射时间到总照射时间的50%时，将菊花花序的照射面和背光面翻转。

3.根据权利要求1或2所述的提高菊花花序中绿原酸含量的方法，其特征在于，步骤（a）所述紫外光UV-B的照射强度为200-600 μw/cm²。

4.根据权利要求3所述的提高菊花花序中绿原酸含量的方法，其特征在于，步骤（a）所述紫外光UV-B的照射强度为200-400 μw/cm²。

5.根据权利要求4所述的提高菊花花序中绿原酸含量的方法，其特征在于，步骤（a）所述紫外光UV-B的照射强度为200 μw/cm²。

6.根据权利要求5所述的提高菊花花序中绿原酸含量的方法，其特征在于，步骤（a）所述紫外光UV-B的照射时间为15-30 min。

7.根据权利要求6所述的提高菊花花序中绿原酸含量的方法，其特征在于，步骤（a）所述紫外光UV-B的照射时间为30 min。

8.根据权利要求1所述的提高菊花花序中绿原酸含量的方法，其特征在于，步骤（b）所述暗培养是指将花序在培养箱内温度20-25℃、湿度50-80%的避光条件下静置12 h。

9.根据权利要求1或8所述的提高菊花花序中绿原酸含量的方法，其特征在于，步骤（a）所述菊花花序的采摘状态为花序的外层舌状花全开，呈白色，内层管状花开10%-40%。