CN104023793A - 用于治疗癌症的联合脂质体组合物 - Google Patents

用于治疗癌症的联合脂质体组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN104023793A
CN104023793A CN201280064482.6A CN201280064482A CN104023793A CN 104023793 A CN104023793 A CN 104023793A CN 201280064482 A CN201280064482 A CN 201280064482A CN 104023793 A CN104023793 A CN 104023793A
Authority
CN
China
Prior art keywords
liposome
lipid
agent
experimenter
methods
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201280064482.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104023793B (zh
Inventor
J.杨
S.H.吴
C.J.赫曼
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Mallinckrodt Inc
Mallinckrodt LLC
Original Assignee
Mallinckrodt Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Mallinckrodt Inc filed Critical Mallinckrodt Inc
Publication of CN104023793A publication Critical patent/CN104023793A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104023793B publication Critical patent/CN104023793B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers
    • A61K9/1273—Polymersomes; Liposomes with polymerisable or polymerised bilayer-forming substances
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/243—Platinum; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/28—Compounds containing heavy metals
    • A61K31/282—Platinum compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/513—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cytosine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/555—Heterocyclic compounds containing heavy metals, e.g. hemin, hematin, melarsoprol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers
    • A61K9/1272—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers with substantial amounts of non-phosphatidyl, i.e. non-acylglycerophosphate, surfactants as bilayer-forming substances, e.g. cationic lipids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明提供使用多组分脂质体系统向受试者递送治疗剂的方法。该方法包括给予含有活性剂的治疗脂质体，接着给予诱导药物从治疗脂质体释放的攻击脂质体。

Description

用于治疗癌症的联合脂质体组合物
相关申请的交叉引用
本申请要求2011年10月31日提交的美国临时申请61/553786的优先权，该申请的全部内容在此引入作为参考。
关于联邦政府资助的研究与开发所作出的发明其权利声明
不适用。
序列表、表格或计算机程序列表光盘附件的引用
不适用。
背景技术
脂质体可用作有效的药物递送媒介物，并已经开发了用于治疗疾病包括癌症的市售脂质体产品(Barenholz,Y.,Curr.Opin.in Colloid&Interface Sci.6(1):66-77(2001))。脂质体是一种囊泡，包括至少一个使内部水相与外部水环境相分离的磷脂双分子层。脂质体能够同时携带在脂质双层的疏水部分(cargo)和/或在水性核心的亲水部分。脂质体的大小，通常是在50至250纳米范围内，这特别适合于化疗药物通过在癌组织中增强的渗透性和保留性而向实体瘤部位靶向递送(EPR效应)(Maeda,H.,et al.,J.Controlled Release.65(1-2):271(2000))。载药脂质体通过EPR而在肿瘤部位的优先积累提供一种使药物局部集中、改善药物效能并减少对正常的细胞或组织的药物毒性的方法。例如，DoxilTM，即一种FDA批准的含多柔比星的脂质体产品，其与游离药物相比已显示出具有降低的毒性(Martin,F.J.,et al.,“Clinicalpharmacology and antitumor efficacy of DOXIL.”Medical Applications ofLiposomes.Ed.D.D.Lasic.Amsterdam:Elsevier,1998,pp635-688)。
然而，上述脂质体药物递送载体的益处也是受以下缺陷限制的，包括脂质体代谢和由体内的排泄，以及由于全身分布和递送所引起的一定程度的固有毒性和副作用。特别地，优化脂质体药物的释放速率在体内半衰期和释放之间的平衡存在难题。一般情况下，易漏的脂质体使被封装的药物更容易得到，但会引起类似于游离药物的毒性风险。另一方面，少漏的脂质体可以减少毒性，但它们可能无法提供针对如在顺铂制剂(SPI-077)中所示的效能所希望的药物释放(Kim,E.S.et al.,Lung Cancer.34(3):427-432(2001))。因此，平衡效能和安全性在脂质体药物产品的研发和给药中构成了显著的挑战。
因此，有必要制定配方和递送方法以克服基于单一脂质体制剂治疗的局限性。本发明解决上述和其它需求，提供了改善药物安全性和效能的方法。
发明概述
一个方面，本发明提供了一种递送治疗剂至受试者的方法，所述方法包括：
a)向受试者给予包含治疗剂的脂质体；和
b)向受试者给予包含触发剂的脂质纳米颗粒；
由此，相比于未给予脂质纳米颗粒时所述治疗剂从脂质体的释放，在给予脂质纳米颗粒后所述治疗剂从脂质体的释放增加。
另一方面，本发明提供用于递送治疗剂至受试者的试剂盒，所述试剂盒包括：
a)第一组合物，包含含有治疗剂的脂质体；和
b)第二组合物，包含含有非离子型触发剂的脂质纳米粒；
其中，在向受试者给药前，所述第一和第二组合物分开存储。
附图的简要说明
图1显示通过攻击脂质体4460-075在(a)pH＝5.0及(b)pH＝7.4触发的奥沙利铂从治疗脂质体的释放。
图2显示通过不同量的攻击脂质体4460-075在(a)pH＝7.4及(b)pH＝5.0触发的顺铂从治疗脂质体的释放。
图3显示通过在pH＝7.4加入攻击脂质体B部分(4460-075)，5-羧基荧光素(5-CF)从治疗脂质体A部分(4460-090)的释放。
图4显示通过混合脂质体B部分(4460-075)，5-CF从治疗脂质体A部分(4460-077)的释放。
图5显示通过在pH＝7.4混合脂质体B部分(4460-075)，5-CF从脂质A部分(4386-143)的释放。
图6显示通过在pH＝7.4混合脂质体B部分(4460-084)，5-CF从脂质A部分(4460-090)的释放。
图7显示通过在pH＝7.4混合脂质体B部分(4460-084)，5-CF从脂质A部分(4460-077)的释放。
图8显示通过在pH＝7.4混合脂质体B部分(4384-086)，5-CF从脂质A部分(4460-090)的释放。
图9显示通过在pH＝7.4混合脂质体B部分(4384-086)，5-CF从脂质A部分(4460-077)的释放。
图10显示通过在pH＝5.0混合脂质体B部分(4460-075)，5-CF从脂质A部分(4460-090)的释放。
图11显示通过在pH＝7.4和pH＝5.0加入攻击脂质体4460-104，奥沙利铂从脂质体(NLICOV003F-02)的释放。
图12显示通过在(a)pH＝5.0及(b)pH＝7.4加入攻击脂质体(4460-104)，顺铂从治疗脂质体(NLI4481101)的释放。
发明详细说明
I.概述
本发明涉及多种脂质组合物用于向受试者递送药物或其它药剂的用途。本发明的方法包括给予分开的脂质成分，其包含治疗脂质体和攻击剂。治疗脂质体是一种含有治疗剂和/或其它药物(例如，诊断剂)的脂质体成分。攻击剂是包含可以增加药物从治疗脂质体释放的触发剂的脂质纳米颗粒(脂质体、胶束或它们的混合物)。在本发明的上下文中，术语“攻击剂”和“含有触发剂的脂质纳米颗粒”可互换使用。在一些实施方案中，所述治疗脂质体和攻击剂统称为“dualsome”。这两种组分可分开存储，并且为了实现治疗脂质体药物的稳定递送，攻击剂可以在治疗脂质体给药后给予。本发明的方法包括两个步骤：1)给予治疗脂质体，和2)给予攻击剂，其相对于在没有攻击剂的情况下药物从治疗脂质体的释放，可触发药物从治疗脂质体的释放增加。本发明的方法可以防止药物在到达受试者的靶点部位前从治疗脂质体提前释放。该方法克服了目前单一脂质体制剂用于药物递送的窘境，从而改善治疗的效能和安全性，以及患者依从性。
II.定义
如本文所用，术语“递送”是指使用本发明的方法治疗剂传送到受试者。递送可以将其局部集中到受试者的特定位置中，如组织、器官或特定类型的细胞。
如本文所用，术语“治疗剂”是指一种化合物或分子，其以有效量存在时，对有需要的受试者产生期望的治疗效果。本发明涵盖了各种治疗剂及其与脂质体组合物的结合使用，如本文进一步所述。
如本文所用，术语“受试者”是指在生命的任何阶段的任何哺乳动物，特别是人类。
如本文所用，术语“给予”是指给予本发明的脂质体组合物的方法。本发明的脂质体组合物可以以各种不同的方式给予，包括局部、肠胃外、静脉内、皮内、肌内、结肠、直肠或腹膜内。该脂质体组合物也可作为组合物或制剂的一部分给予。
如本文所用，术语“脂质体”涵盖由脂质双层包围的任何囊泡。术语脂质体包括单层脂质体，它是由单一的脂质双层构成，且直径通常在约20至约400nm范围内。脂质体也可以是多层的，它的直径通常在1-10μm范围内。在一些实施方案中，脂质体可包括多层脂质体(MLV)、大单层脂质体(LUV)和小单层脂质体(SUV)。
如本文所用，术语“胶束”是指两亲性分子如脂类的聚集体，其聚集从而形成具有疏水性内部和亲水性外部的颗粒。胶束一般是球形聚集体，直径小于100纳米，尽管各种胶束直径和不同的胶束形状如盘状胶束是本领域已知的。
如本文所用，术语“非离子型触发剂”是指缺乏带电官能团的物质，包括阴离子官能团和阳离子官能团，其在给予至受试者时，引起药物从本发明治疗脂质体中的释放的增加。非离子型触发剂的例子包括TPGS和聚氧乙烯40硬脂酸酯。
如本文所用，术语“累积”指的是在给药后在受试者中给定部位累积的脂质体不再在受试者内全身循环。在某些情况下，累积可能是由于在靶点部位通过包含识别生物标志物的配体的脂质体而与特定生物标志物结合。在某些情况下，脂质体累积可能是由于某些组织如癌组织的渗透和保留特性的增强。脂质体累积可通过任何合适的手段评估，例如测试受试者的代谢区分析或非侵入性技术，例如单光子发射计算机断层显像(SPECT)、正电子发射断层扫描(PET)或核磁共振成像(NMR/MRI)。然而，本领域技术人员可以规划特定受试者的脂质体给药时间，以允许在靶部位足够的积累而不用在受试者体内直接测量累积。
如本文所用，术语“靶点部位”是指期望脂质体累积和活性剂递送的部位。在某些情况下，靶点部位可以是特定的组织或细胞，并且可以与特定疾病状态相关。
如本文所用，术语“接触”是指第一脂质体与第二脂质体的相互作用由此破坏第一脂质体或以其他方式影响包封剂从第一脂质体释放。
如本文所用，术语“释放”是指脂质体中的活性剂从脂质体芯或脂质双层到外部环境中的移动。
如本文所用，术语“脂质”是指脂质分子，它们可以包括脂肪、蜡、类固醇、胆固醇、脂溶性维生素、甘油单酯、甘油二酯、磷脂、鞘脂、糖脂、阳离子或阴离子脂质、衍生脂质等，如下面详细描述。脂类可以形成胶束、单层和双层膜。脂类可以自组装成脂质体。
如本文所用，术语“摩尔百分数”和“摩尔％”指的是脂质体中特定脂质或表面活性剂成分的摩尔数除以所有的脂质或表面活性剂成分的总摩尔数。除非另有明确规定，当计算脂质体的脂质或表面活性剂组分的摩尔％时，不包含活性剂、稀释剂或其它组分的量。
如本文所用，术语“试剂盒”是指使用本发明的方法所必需的两个或多个组分的组合。试剂盒组分可以包括但不限于，本发明的脂质体、试剂、缓冲液、容器和/或装置。
如本文所用，术语“分开存储”指的是脂质体存储的方式，其防止一种脂质体接触另一种脂质体。
III.本发明的实施方案
在一个方面，本发明提供了一种递送治疗剂至受试者的方法。该方法包括：a)向受试者给予包含治疗剂的脂质体；和b)向受试者给予含有非离子型触发剂的脂质纳米颗粒；由此，相比未给予触发剂的情况下所述治疗剂从脂质体的释放，在触发剂给药后所述治疗剂从脂质体中的释放增加。包含治疗剂的脂质体被称为“治疗脂质体”。
本发明的脂质体包括由至少一个脂质双层包围的含水室。当包括亲水头部的脂质分散在水中时，它们可以自发地形成被称为片层的双层膜。片层是由两个脂质分子单层片组成，它们的非极性(疏水性)表面彼此面对并且它们的极性(亲水性)表面朝向所述水性介质中。术语脂质体包括由单一脂质双层组成的单层脂质体，且一般具有在约20至约400nm、约50至约300nm或约100至200nm的直径。脂质体也可以是多层的，它的直径通常在1-10μm，含有从2到数百与水相层交替的同心脂质双层。在一些实施方案中，脂质体可包括多层脂质体(MLV)、大单层脂质体(LUV)和小单层脂质体(SUV)。脂质体的脂质可以是阳离子型、两性离子型、中性或阴离子的或它们的任意混合物。
脂质纳米颗粒构成了本发明方法中的“攻击剂”。在一些实施方案中，所述脂质纳米颗粒选自脂质体、胶束或它们的混合物。所述纳米颗粒包含一种非离子型触发剂，它可以是一种非离子型表面活性剂。适用于本发明方法的非表面活性剂实例包括但不限于，乙氧基化的烷基酚、乙氧基化脂肪酯、山梨聚糖衍生物、生育酚衍生物等。
可以在任何足以增加所述治疗剂从所述治疗脂质体释放的时间向受试者给予攻击剂。在一些实施方案中，在治疗脂质体给药之后向受试者给予攻击剂。攻击剂的给予可在例如治疗脂质体给药后几分钟或几小时后发生。在一些实施方案中，在治疗脂质体已经在受试者体内期望靶点部位累积后(通常在给药后约72小时内)向受试者给予攻击剂。脂质体在靶点部位的累积通过任何合适的手段评估，例如测试受试者代谢区分析或者非侵入性技术，例如单光子发射计算机断层显像(SPECT)、正电子发射断层扫描(PET)或核磁共振成像(NMR/MRI)。如下所述诊断剂，例如，可以针对渗入治疗脂质体进行选择从而对脂质体累积进行评估。然而，本领域技术人员将认识到可对特定受试者的给药进行定时，以允许治疗脂质体在靶部位足够的积累，而不用在受试者体内直接测量累积。
在一些实施方案中，在治疗脂质体接触攻击剂后治疗剂被诱导释放。相比不给予攻击剂，给予任意量的攻击剂可增加治疗剂从脂质体中的释放量。在一些实施方案中，相比给予脂质体而不给予攻击剂，给予攻击剂使治疗剂从脂质体中的释放增加至少3倍。在一些实施方案中，相比给予脂质体而不给予攻击剂，给予攻击剂使治疗剂从脂质体中的释放增加至少10倍。在一些实施方案中，相比给予脂质体而不给予攻击剂，给予攻击剂使治疗剂从脂质体中的释放增加至少25倍。
在本发明中，受试者可以是任何哺乳动物。在一些实施方案中，受试者是人。在一些实施方案中，脂质体和脂质纳米颗粒通过腹膜内注射递送。本领域技术人员将意识到，其他给予方式可以在本发明中使用。
脂质体和脂质纳米颗粒
本发明的脂质体和脂质纳米颗粒可以包含任何合适的脂质，包括阳离子脂质、两性离子脂质、中性脂质或如上所述的阴离子脂质。合适的脂质可包括脂肪、蜡、类固醇、胆固醇、脂溶性维生素、甘油单酯、甘油二酯、磷脂、鞘脂、糖脂、阳离子或阴离子脂质、衍生脂质等等。
合适的磷脂包括但不限于磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酸(PA)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰丝氨酸(PS)以及磷脂酰肌醇(PI)、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱(DMPC)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)、二油酰磷脂酰胆碱(DOPC)、二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油(DMPG)、二硬脂酰磷脂酰甘油(DSPG)、二油酰磷脂酰甘油(DOPG)、二棕榈酰磷脂酰甘油(DPPG)、二肉豆蔻酰磷脂酰丝氨酸(DMPS)、二硬脂酰磷脂酰丝氨酸(DSPS)、二油酰磷脂酰丝氨酸(DOPS)、二棕榈酰磷脂酰丝氨酸(DPPS)、二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、棕榈酰油酰磷脂酰胆碱(POPC)、棕榈酰油酰-磷脂酰乙醇胺(POPE)和二油酰基磷脂酰乙醇胺4-(N-马来酰亚胺甲基)-环己烷-1-羧酸酯(DOPE-MAL)、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)、二肉豆蔻酰基磷酸乙醇胺(DMPE)、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)、16-O-单甲基PE、16-O-二甲基PE、18-1-反式PE、1-硬脂酰-2-油酰基-磷脂酰乙醇胺(SOPE)、1,2-二反油酰基(didaidoyl)-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(反式DOPE)和心磷脂。脂质提取物，如卵PC、心脏提取液、脑提取物、肝脏提取物和大豆PC，也可用于本发明中。在一些实施方案中，大豆PC可包括Hydro大豆PC(HSPC)。在某些实施方案中，脂质可以包括衍生化的脂质，例如聚乙二醇化脂质。衍生化的脂质可以包括，例如，DSPE-PEG2000、胆固醇-PEG2000、DSPE-聚甘油或本领域公知的其他衍生物。
本发明的脂质体和脂质纳米颗粒可含有类固醇，其特征在于存在稠合、四环甾烷环系。类固醇的实例包括但不限于，胆固醇、胆酸、黄体激素、可的松、醛固酮、雌二醇、睾酮、脱氢表雄酮。也可考虑将合成的类固醇和它们的衍生物用于本发明中。
阳离子脂质包含在生理条件下带正电荷的官能团。阳离子脂质包括但不限于，N,N-二油基-N,N-二甲基氯化铵(DODAC)、N,N-二硬脂酰-N,N-二甲基溴化铵(DDAB)、N-(1-2,3-二油酰氧基)丙基)-N,N,N-三甲基氯化铵(DOTAP)、N-(1-(2,3-二油酰氧基)丙基)-N,N,N-三甲基氯化铵(DOTMA)、N-[1-(2,3-二十四烷基氧基)丙基]-N,N-二甲基-N-羟乙基溴化铵(DMRIE)、N-[1-(2,3二油酰氧基)丙基]-N,N-二甲基-N-羟基乙基溴化铵(DORIE)、3β-[N-(N',N'-二甲基氨基乙烷)氨基甲酰基]胆固醇(DC-CHOL)、二甲基二十八烷基铵(DDAB)和N,N-二甲基-2,3-二油酰氧基)丙胺(DODMA)。
在一些实施方案中，治疗脂质体包含一种或多种脂质，其可以是磷脂、类固醇和/或阳离子脂质的脂质。在一些实施方案中，所述磷脂是磷脂酰胆碱、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇或磷脂酸。在一些实施方式中，磷脂酰胆碱是DSPC。在一些实施方式中，磷脂酰甘油是DSPG。在一些实施方式中，磷脂酰乙醇胺是DSPE-PEG(2000)。在一些实施方案中，所述类固醇为胆固醇。
如上所述，构成“攻击剂”的脂质纳米颗粒选自第二脂质体、胶束或它们的混合物。在一些实施方案中，所述脂质纳米颗粒是第二脂质体。第二脂质体被称为“攻击脂质体”。在某些实施方案中，攻击脂质体包含选自磷脂、类固醇和阳离子性脂质的一种或多种脂质。在一些实施方案中，所述磷脂是磷脂酰胆碱、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇或磷脂酸。在一些实施方案中，磷脂酰胆碱是DPPC。在一些实施方案中，所述类固醇为胆固醇。在一些实施方案中，阳离子脂质是DOTAP。在一些实施方案中，所述非离子型触发剂是TPGS。
任何合适的脂类组合物可用来制备本发明脂质体与脂质纳米颗粒。脂质成分可根据影响特征调整，如泄漏率、稳定性、粒径、ζ电位、蛋白结合、体内循环和/或在组织或器官的累积。例如，DSPC和/或胆固醇可用于降低由脂质体的泄露。负电或正电脂质，如DSPG和/或DOTAP，可以影响脂质体或脂质纳米颗粒的表面电荷。在一些实施方案中，所述脂质组合物可包括约10个或更少类型的脂质，或约5个或更少类型的脂质，或约3个或更少类型的脂质。在一些实施方案中，所存在的特定类型脂质的摩尔百分比(mol％)通常占存在于脂质体或脂质纳米颗粒的总脂质的约0％至约10％、约10％至约30％、约30％至约50％、约50％至约70％、约70％至约90％、约90％至约100％。在一些实施方案中，所述治疗脂质体包含40-80(mol)％的DSPC、5-50(mol)％的胆固醇、0-30(mol)％的DSPG和0-10(mol)％的DSPE-PEG(2000)。在一些实施例中，攻击脂质体包含40-70(mol)％的DPPC、5-20(mol)％的胆固醇、0-20(mol)％的DOTAP和20-40(mol)％的TPGS。
本发明的脂质纳米颗粒可以含有表面活性剂包括非离子表面活性剂，其中一些可以作为触发剂，以促进治疗脂质体药物的释放。非离子表面活性剂的例子包括，但不限于，乙氧基化的烷基酚类、乙氧基化的脂肪酯、山梨糖醇衍生物和生育酚衍生物。在本发明中使用的表面活性剂可考虑包括D-α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)，其可具有不同的聚乙二醇聚合度。在一些实施方案中，在TPGS中聚乙二醇分子量范围在400-5000。在其它实施方案中，在TPGS中聚乙二醇分子量范围在800-2000。在其它实施方案中，在TPGS中聚乙二醇分子量范围在800-1500。一个特别有用的TPGS是TPGS(1000)，在其中的D-α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯的总分子量为约1543。如本文所用，术语“TPGS”指的是TPGS(1000)，除非提供不同的尺寸/重量。其他有用的非离子表面活性剂包括：聚乙二醇对-(1,1,3,3-四甲基丁基)-苯基醚、聚氧乙烯(2)异辛基苯基醚、聚氧乙烯(150)二壬基苯基醚、十二烷酸2,3-二羟基丙基酯、聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单月桂酸酯、聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单棕榈酸酯、聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单硬脂酸酯、聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单油酸酯等。
本领域技术人员可意识到，通过调整脂质组合物从而调节释放特性或给定应用所需的脂质体的其他特征。
治疗剂
本发明的治疗脂质体包括一种或多种在纳米载体内、上或周围的治疗剂。例如，治疗剂可以嵌入脂质体的脂质双分子层，包封在脂质体的水性核或系连于脂质体的外部。本发明使用的所述治疗剂或药物可包括治疗受试者病症的任何药物。在一般情况下，可以使用本领域已知的任何治疗剂，包括但不限于如下所列的药物：美国药典(USP)，Goodman and Gilman’s ThePharmacological Basis of Therapeutics,10th Ed.,McGraw Hill,2001；Katzung,Ed.,Basic and Clinical Pharmacology,McGraw-Hill/Appleton&Lange,8th ed.,September21,2000；Physician’s Desk Reference(Thomson Publishing；和/或The Merck Manual of Diagnosis and Therapy,18th ed.,2006,Beers and Berkow,Eds.,Merck Publishing Group；或者，在动物的情况下，The Merck VeterinaryManual,9th ed.,Kahn Ed.,Merck Publishing Group,2005；所有这些都通过引用并入本文。
治疗剂可以根据所需要治疗的疾病类型来选择。例如，某些类型的癌症或肿瘤，例如癌、肉瘤、白血病、淋巴瘤、骨髓瘤和中枢神经系统癌症以及实体瘤和混合瘤，可涉及给予相同或者可能不同的治疗剂。在某些实施方案中，可以递送治疗剂来治疗或影响受试者癌性病症，并且治疗剂可以包括化学治疗剂，如烷化剂、抗代谢物、蒽环类抗生素、生物碱、拓扑异构酶抑制剂和其它抗癌剂。在一些实施方案中，药物可以包括反义药物、microRNA、siRNA和/或shRNA药物。
治疗剂可包括抗癌剂或细胞毒素剂，包括但不限于阿瓦斯丁、多柔比星、顺铂、奥沙利铂、卡铂、5-氟尿嘧啶、吉西他滨或紫杉烷，如紫杉醇和多西紫杉醇。另外的抗癌剂可包括但不限于20-epi-1,25-二羟基维生素D3,4-甘薯苦醇、5-乙炔基尿嘧啶、9-二氢紫杉醇、阿比特龙、阿西维辛、阿柔比星、盐酸阿考达唑、阿克罗宁、酰基富烯(acylfulvene)、腺环戊醇、阿多来新、阿地白介素、all-tk拮抗剂、六甲蜜胺、氨莫司汀、安波霉素、醋酸阿美蒽醌、艾美多(amidox)、氨磷汀、氨鲁米特、氨基乙酰丙酸、氨柔比星、安吖啶、阿那格雷、阿那曲唑、穿心莲内酯、血管发生抑制剂、拮抗剂D、拮抗剂G、安雷利克斯、安曲霉素、抗背侧化形态形成蛋白-1(anti-dorsalizingmorphogenetic protein-1)、抗雌激素药、抗瘤酮、反义寡核苷酸、阿非迪霉素甘氨酸盐、凋亡基因调节剂、凋亡调节剂、脱嘌呤核酸、ARA-CDP-DL-PTBA、精氨酸脱氨基酶、门冬酰胺酶、曲林菌素、奥沙那宁(asulacrine)、阿他美坦、阿莫司汀、海洋环肽1、海洋环肽2、海洋环肽3、阿扎胞苷、阿扎司琼、阿扎毒素、重氮酪氨酸、阿扎替派、阿佐霉素、浆果赤霉素III衍生物、班兰诺(balanol)、巴马司他、苯并二氢卟酚、苯佐替派、苯甲酰基十字孢碱、β内酰胺衍生物、β-阿立辛(beta-alethine)、贝拉霉素B(betaclamycin B)、桦木酸、BFGF抑制剂、比卡鲁胺、比生群、盐酸比生群、双吖丙啶基精胺、双奈法德、甲碘酸双奈法德、双曲群A(bistratene A)、比折来新、博来霉素、硫酸博来霉素、BRC/ABL拮抗剂、breflate、布喹那钠、溴匹立明、布度钛、白消安、丁硫氨酸亚矾胺、放线菌素C、卡泊三醇、卡弗他丁C、卡普睾酮、喜树碱衍生物、金丝雀痘IL-2(canarypox IL-2)、卡培他滨、卡醋胺、卡贝替姆、卡铂、甲酰胺-氨基-三唑、羧基酰胺基三唑、carestM3、卡莫司汀、cam700、软骨衍生的抑制剂(cartilage derived inhibitor)、盐酸卡柔比星、卡折来新、酪蛋白激酶抑制剂、澳粟精胺、杀菌肽B、西地芬戈、西曲瑞克、苯丁酸氮芥、绿素类、氯喹喔啉磺酰胺、西卡前列素、西罗霉素、顺铂、顺-卟啉、克拉屈滨、氯米芬类似物、克霉唑、克里霉素(collismycin)A、克里霉素B、考布他汀A4、考布他汀类似物、conagenin、crambescidin816、克立那托、甲磺酸克立那托、念珠藻素8、念珠藻素A衍生物、curacin A、环戊蒽醌、环磷酰胺、cycloplatam、cypemycin、阿糖胞苷、阿糖胞苷烷磷酯(cytarabine ocfosfate)、溶细胞因子、磷酸己烷雌酚、达卡巴嗪、达昔单抗、放线菌素D、盐酸柔红霉素、地西他滨、脱氢膜海鞘素B(dehydrodidemnin B)、地洛瑞林、右异环磷酰胺、右奥马铂(dexormaplatin)、右雷佐生、右维拉帕米、地扎呱宁、甲磺酸地扎呱宁、地吖醌、代代宁B、didox、二乙基去甲精胺、二氢-5-氮胞苷、dioxamycin、二苯基螺莫司汀、多西紫杉醇、二十二烷醇、多拉司琼、去氧氟尿苷、多柔比星、盐酸多柔比星、屈洛昔芬、柠檬酸屈洛昔芬、丙酸屈他雄酮、屈大麻酚、达佐霉素、duocarmycinSA、依布硒、依考莫司汀、依达曲沙、依地福新、依决洛单抗、依氟鸟氨酸、盐酸依氟鸟氨酸、榄香烯、依沙芦星、乙嘧替氟、恩洛铂、恩普氨酯、依匹哌啶、表柔比星、盐酸表柔比星、爱普列特、厄布洛唑、红细胞基因治疗载体体系、盐酸依索比星、雌莫司汀、雌莫司汀类似物、雌莫司汀磷酸酯钠、雌激素激动剂、雌激素拮抗剂、依他硝唑、依托泊苷、磷酸依托泊苷、氯苯乙嘧胺、依西美坦、法倔唑、盐酸法倔唑、法扎拉滨、芬维A胺、非格司亭、非那雄胺、夫拉平度、氟卓斯汀、氟尿苷、fluasterone、氟达拉滨、磷酸氟达拉滨、fluorodaunorunicin盐酸盐、氟尿嘧啶、fluorocitabine、福酚美克、福美坦、磷喹酮、福司曲星、福司曲星钠、福莫司汀、钆替沙林、硝酸镓、加洛他滨、加尼瑞克、明胶酶抑制剂、吉西他滨、盐酸吉西他滨、谷胱甘肽抑制剂、hepsulfam、heregulin、六亚甲基双乙酰胺、羟基脲、金丝桃素、伊班膦酸、伊达比星、盐酸伊达比星、吲哚昔酚、伊决孟酮、异环磷酰胺、ilmofosine、伊洛马司他、咪唑并吖啶酮、咪喹莫特、免疫刺激剂肽、胰岛素样生长因子-1受体抑制剂、干扰素激动剂、干扰素α-2A、干扰素α-2B、干扰素α-N1、干扰素α-N3、干扰素β-IA、干扰素γ-IB、干扰素、白介素、碘苄胍、碘阿霉素、异丙铂、伊立替康、盐酸伊立替康、伊罗普拉、伊索拉定、isobengazole、isohomohalicondrin B、伊他司琼、jasplakinolide、kahalalideF、lamellarin-N triacetate、兰瑞肽、醋酸兰瑞肽、leinamycin、来格司亭、硫酸蘑菇多糖、leptolstatin、来曲唑、白血病抑制因子、白细胞α干扰素、醋酸亮丙瑞林、亮丙瑞林/雌激素/孕酮、亮丙瑞林、左旋咪唑、利阿唑、盐酸利阿唑、线性多胺类似物、亲脂二糖肽、亲脂铂化合物、lissoclinamide7、洛铂、胍乙基磷酸丝氨酸、洛美曲索、洛美曲索钠、洛莫司汀、氯尼达明、洛索蒽醌、盐酸洛索蒽醌、洛伐他汀、洛索立宾、勒托替康、lutetiumtexaphyrin、lysofylline、裂解肽、美坦新、mannostatin A、马立马司他、马索罗酚、maspin、基质溶解因子抑制剂、基质金属蛋白酶抑制剂、美登素、氮芥盐酸盐、乙酸甲地孕酮、醋酸美仑孕酮、美法仑、美诺立尔、merbarone、疏基嘌呤、美替瑞林、蛋氨酸酶、甲氨蝶呤、甲氨蝶呤钠、甲氧氯普胺、氯苯氨啶、美妥替哌、微藻蛋白激酶C抑制剂、MIF抑制剂、米非司酮、米替福新、米立司亭、错配双链RNA、米丁度胺、米托卡星、丝裂红素、米托洁林、米托胍腙、二溴卫矛醇、米托马星、丝裂霉素、丝裂霉素类似物、米托萘胺、米托司培、米托坦、迈托毒素成纤维细胞生长因子-皂草素、米托蒽醌、盐酸米托蒽醌、莫法罗汀、莫拉司亭、单克隆抗体、人绒毛膜促性腺激素、单磷酰脂质A/分支杆菌细胞壁SK、莫哌达醇、多重抗药性基因抑制剂、基于多重肿瘤抑制因子1的治疗、芥子抗癌剂、印度洋海绵(mycaperoxide)B、分枝杆菌细胞壁提取物、麦考酚酸、myriaporone、正乙酰基地那林、那法瑞林、nagrestip、纳洛酮/喷他佐辛、napavin、萘萜二醇、那托司亭、奈达铂、奈莫柔比星、奈立膦酸、中性肽链内切酶、尼鲁米特、nisamycin、一氧化氮调节剂、硝基氧抗氧化剂(nitroxide antioxidant)、nitrullyn、诺考达唑、诺拉霉素、n-取代的苯甲酰胺、06-苄基鸟嘌呤、奥曲肽、okicenone、寡核苷酸、奥那司酮、昂丹司琼、oracin、口腔细胞因子诱导剂、奥马铂、奥沙特隆、奥沙利铂、oxaunomycin、奥昔舒仑、紫杉醇、紫杉醇类似物、紫杉醇衍生物、palauamine、棕榈酰基根霉素、帕米磷酸、人参炔三醇、帕诺米芬、parabactin、帕折普汀、培门冬酶、培得星、培利霉素、戊氮芥、戊聚硫钠、喷司他丁、pentrozole、硫酸培洛霉素、全氟溴烷、培磷酰胺、紫苏醇、phenazinomycin、乙酸苯酯、磷酸酶抑制剂、溶链菌素、盐酸毛果云香碱、哌泊溴烷、哌泊舒凡、吡柔比星、吡曲克辛、盐酸吡罗蒽醌、placetin A、placetinB、纤溶酶原激活物抑制剂、铂络合物、铂化合物、铂-三胺络合物、普卡霉素、普洛美坦、卟吩姆钠、泊非霉素、泼尼莫司汀、盐酸丙卡巴肼、丙基双吖啶酮、前列腺素J2、前列腺癌抗雄激素、蛋白酶体抑制剂、基于蛋白质A的免疫调节剂、蛋白质激酶C抑制剂、蛋白质酪氨酸磷酸酶抑制剂、嘌呤核苷磷酸化酶抑制剂、嘌呤霉素、嘌呤霉素盐酸盐、红紫素、吡唑呋喃菌素、吡唑并吖啶、吡哆醛化血红蛋白聚氧乙烯缀合物、RAF拮抗剂、雷替曲塞、雷莫司琼、RAS法呢基蛋白质转移酶抑制剂、RAS抑制剂、RAS-GAP抑制剂、脱甲基瑞替普汀、铼RE186依替膦酸盐、根霉素、利波腺苷、核酶、RII维甲酰胺(retinamide)、RNAi、罗谷亚胺、罗希吐碱、罗莫肽、罗喹美克、rubiginone B1、ruboxyl、沙芬戈、盐酸沙芬戈、saintopin、sarcnu、sarcophytolA、沙格司亭、SDI1模拟物、司莫司汀、老化衍生的抑制剂1、正义寡核苷酸、信号转导抑制剂、信号转导调节剂、辛曲秦、单链抗原结合蛋白质、sizofuran、索布佐生、硼卡钠、苯基乙酸钠、solverol、生长调节素结合蛋白质、索纳明、磷乙酰天冬氨酸钠、膦门冬酸、司帕霉素、spicamycin D、盐酸螺旋锗、螺莫司汀、螺铂、脾脏五肽、海绵抑制素1、角鲨胺、干细胞抑制剂、干细胞分裂抑制剂、stipiamide、链黑菌素、链佐星、基质分解素抑制剂、sulfinosine、磺氯苯脲、强效血管活性肠肽拮抗剂、suradista、苏拉明、苦马豆碱、合成糖胺聚糖、他利霉素、他莫司汀、他莫昔芬甲碘化物、牛磺莫司汀、他扎罗汀、替可加兰钠、替加氟、tellurapyrylium、端粒酶抑制剂、替洛蒽醌盐酸盐、替莫泊芬、替莫唑胺、替尼泊苷、替罗昔隆、睾内酪、四氯十氧化物、tetrazomine、thaliblastine、沙利度胺、硫咪嘌呤、噻可拉林、硫鸟嘌呤、塞替派、血小板生成素、血小板生成素模拟物、胸腺法新、胸腺喷丁受体激动剂、胸腺曲南、甲状腺刺激激素、噻唑羧胺核苷、本紫红素乙酯锡、替拉扎明、二氯环戊二烯钛、盐酸拓扑替康、topsentin、托瑞米芬、柠檬酸托瑞米芬、全能干细胞因子、翻译抑制剂、醋酸曲托龙、维甲酸、三乙酰基尿苷、曲西立滨、磷酸曲西立滨、三甲曲沙、葡萄糖醛酸三甲曲沙、曲普瑞林、托烷司琼、盐酸妥布氯唑、妥罗雄脲、酪氨酸激酶抑制剂、酪氨酸磷酸化抑制剂、UBC抑制剂、乌苯美司、尿嘧啶芥子、乌瑞替派、泌尿生殖窦衍生的生长抑制因子、尿激酶受体拮抗剂、伐普肽、variolin B、维拉雷琐、藜芦明、verdins、维替泊芬、硫酸长春碱、硫酸长春新碱、长春地辛、硫酸长春地辛、硫酸长春匹定、硫酸长春甘酯、硫酸长春罗新、长春瑞滨、酒石酸长春瑞滨、硫酸长春罗定、vinxaltine、硫酸长春利定、vitaxin、伏氯唑、扎诺特隆、折尼铂、亚苄维C、净司他丁、净司他丁斯酯，或盐酸佐柔比星。
在一些实施方案中，该治疗剂可为药物混合物的部分，其包括给药两种或更多种治疗剂。例如，可给药具有顺铂和奥沙利铂两者的脂质体。此外，该治疗剂可在免疫刺激性辅料之前、之后或同时递送，所述辅料如铝凝胶或盐辅料(例如，磷酸铝或氢氧化铝)、磷酸钙、内毒素、Toll样受体辅料等。
本发明的治疗剂也可包括用于治疗应用的放射性核素。例如，Auger电子的发射体，如111In，可与螯合剂，如二乙烯三胺五乙酸(DTPA)或1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)结合，且包含在用于治疗的脂质体中。其它合适的放射性核素和/或放射性核素-螯合剂组合可包括但不限于β放射性核素(177Lu、153Sm、88/90Y)与DOTA、64Cu-TETA、188/186Re(CO)3-IDA；188/186Re(CO)三胺(环状或线状)、188/186Re(CO)3–Enpy2和188/186Re(CO)3-DTPA。
在本发明的一些实施方案中，所述治疗剂可以是顺铂、奥沙利铂、卡铂、吉西他滨、5-氟尿嘧啶、多柔比星和紫杉烷。在一些实施方案中，所述治疗剂是顺铂或奥沙利铂。
治疗剂的负载可通过本领域已知的多种方式实现，例如以下文献中公开的：de Villiers，M.M.等人，Eds.，Nanotechnology in Drug Delivery，Springer(2009)；Gregoriadis，G.，Ed.，LiposomeTechnology:Entrapment of drugs andother materials into liposomes，CRC Press(2006)。在一些实施方案中，一种或多种治疗剂可负载至脂质体中。脂质体的负载可通过例如主动或被动方式进行。例如，治疗剂可在溶液中脂质体的自组装过程中包含在其中，使得治疗剂包囊在脂质体中。在某些实施方案中，该治疗剂也可嵌入脂质体双层或多层脂质体的多层中。在替代性实施方案中，该治疗剂可主动负载至脂质体中。例如，该脂质体可暴露于条件，如电穿孔，其中使双层膜对包含治疗剂的溶液可渗透，从而使得治疗剂进入脂质体的内部体积。
诊断剂
本发明的治疗脂质体还可以包含诊断剂。用于本发明的诊断剂可包括本领域已知的任何诊断剂，例如以下文献所提供的：Armstrong et al.,DiagnosticImaging,5th Ed.,Blackwell Publishing(2004)；Torchilin,V.P.,Ed.,TargetedDelivery of Imaging Agents,CRC Press(1995)；Vallabhajosula,S.,MolecularImaging:Radiopharmaceuticals for PET and SPECT,Springer(2009)。诊断剂可通过多种方式检测，包括提供和/或增强可检测信号的试剂，该信号包括，但不限于，γ-发射、放射性、回声、光学、萤光、吸收、磁性或断层摄影信号。用于成像诊断剂的技术可包括，但不限于，单光子发射计算体层摄影术(SPECT)、磁共振成像(MRI)、光学成像、正电子发射断层摄影术(PET)、计算机断层摄影术(CT)、X-射线成像、γ射线成像等。
在一些实施方案中，诊断剂可包括螯合剂，该螯合剂结合至金属离子以用于多种诊断成像技术。示例性螯合剂包括但不限于乙二胺四乙酸(EDTA)、[4-(1,4,8,11-四氮杂环十四烷-1-基)甲基]苯甲酸(CPTA)、环己烷二胺四乙酸(CDTA)、乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA)、二乙烯三胺五乙酸(DTPA)、柠檬酸、羟基乙基乙二胺三乙酸(HEDTA)、亚氨基二乙酸(IDA)、三亚乙基四胺六乙酸(TTHA)、1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四(亚甲基膦酸)(DOTP)、1,4,8,11-四氮杂环十二烷-1,4,8,11-四乙酸(TETA)、1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)，及其衍生物。
放射性同位素可掺入本文所述的一些诊断剂中，且可包括发射γ射线、正电子、β和α颗粒和X-射线的放射性核素。合适的放射性核素包括但不限于225Ac、72As、211At、11B、128Ba、212Bi、75Br、77Br、14C、109Cd、62Cu、64Cu、67Cu、18F、67Ga、68Ga、3H、123I、125I、130I、131I、111In、177Lu、13N、15O、32P、33P、212Pb、103Pd、186Re、188Re、47Sc、153Sm、89Sr、99mTc、88Y和90Y。在某些实施方案中，放射性试剂可包括111In-DTPA、99mTc(CO)3-DTPA、99mTc(CO)3-ENPy2、62/64/67Cu-TETA、99mTc(CO)3-IDA、和99mTc(CO)3三胺(环状或线状)。在其它实施方案中，该试剂可包括DOTA及其具有111In、177Lu、153Sm、88/90Y、62/64/67Cu、或6w/68Ga的多种类似物。在一些实施方案中，该脂质体可被放射标记，例如，通过掺入连接至螯合剂的脂质，如DTPA-脂质，如以下文献提供：Phillips等人，Wiley Interdisciplinary Reviews:Nanomedicineand Nanobiotechnology，1(1):69-83(2008)；Torchilin，V.P.&Weissig，V.，Eds.Liposomes2nd Ed.:Oxford Univ.Press(2003)；Elbayoumi，T.A.&Torchilin，V.P.，Eur.J.Nucl.Med.Mol.Imaging33:1196–1205(2006)；Mougin-Degraef，M.等人，Int’l J.Pharmaceutics344:110-117(2007)。
在其它实施方案中，该诊断剂可包括光学试剂如荧光剂、磷光试剂、化学发光试剂等。多种试剂(例如染料、探针、标记或指示剂)是本领域已知的且可在本发明使用。(参见，例如，Invitrogen，The Handbook—A Guide toFluorescent Probes and Labeling Technologies，Tenth Edition(2005))。荧光剂可包括多种有机和/或无机小分子或多种荧光蛋白质及其衍生物。例如，荧光剂可包括但不限于花青、酞菁、卟啉、靛青、罗丹明、吩嗪、苯基呫吨、吩噻嗪、吩硒嗪、荧光素、苯并卟啉、方酸菁、二吡咯并嘧啶酮、并四苯(tetracenes)、喹啉、吡嗪、咕啉、克酮酸(croconiums)、吖啶酮、菲啶、罗丹明、吖啶、蒽醌、chalcogenopyrylium类似物、二氢卟酚、萘酞菁、甲川染料(methine dyes)、吲哚染料(indolenium dyes)、偶氮化合物、甘菊蓝、氮杂甘菊蓝、三苯基甲烷染料、吲哚、苯并吲哚、吲哚碳菁、苯并吲哚碳菁，和具有4,4-二氟-4-硼-3a,4a-二氮杂-s-二环戊二烯并苯的通用结构的BODIPYTM衍生物，和/或任意这些的缀合物和/或衍生物。可使用的其它试剂包括，但不限于，例如，荧光素、荧光素-多天冬氨酸缀合物、荧光素-多谷氨酸缀合物、荧光素-多精氨酸缀合物、靛青绿、靛青-十二天冬氨酸缀合物、靛青-多天冬氨酸缀合物、异舒泛蓝、吲哚二磺酸盐(indole disulfonates)、苯并吲哚二磺酸盐、二(乙基羧基甲基)靛青、二(戊基羧基甲基)靛青、多羟基吲哚磺酸盐、多羟基苯并吲哚磺酸盐、刚性杂原子吲哚磺酸盐、靛青双丙酸、靛青双己酸、3,6-二氰基-2,5-[(N,N,N’,N’-四(羧基甲基)氨基]吡嗪、3,6-[(N,N,N’,N’-四(2-羟基乙基)氨基]吡嗪-2,5-二羧酸、3,6-二(N-氮杂环丁烷子基(azatedino))吡嗪-2,5-二羧酸、3,6-二(N-吗啉代)吡嗪-2,5-二羧酸、3,6-二(N-哌嗪子基)吡嗪-2,5-二羧酸、3,6-二(N-硫吗啉代)吡嗪-2,5-二羧酸、3,6-二(N-硫吗啉代)吡嗪-2,5-二羧酸S-氧化物、2,5-二氰基-3,6-二(N-硫吗啉代)吡嗪S,S-二氧化物、吲哚碳菁四磺酸盐(indocarbocyaninetetrasulfonate)、氯吲哚碳菁，和3,6-二氨基吡嗪-2,5-二羧酸。
本领域技术人员将理解使用的具体光学试剂可取决于用于激发的波长、皮肤组织下面的深度，和本领域通常众所周知的其它因素。例如，光学试剂的最佳的吸收或激发最大量可根据使用的试剂的而改变，但通常，本发明的光学试剂将吸收以下光或被以下光激发：电磁波谱的紫外(UV)、可见或红外(IR)范围的光。对于成像，在近红外吸收和发射的染料(～700-900nm，例如，靛青)是优选的。对于使用内窥镜方法的局部可视化，在可见范围吸收的任何染料是合适的。
在一些实施方案中，本发明的方法中使用的非电离辐射的波长范围可为约350nm至约1200nm。在一个示例性实施方案中，该荧光剂可被波长在电磁波谱的可见部分的蓝色范围的光激发(约430nm至约500nm)且以在电磁波谱的可见部分的绿色范围的波长(约520nm至约565nm)发射。例如，
荧光素染料可被波长约488nm的光激发且具有约520nm的发射波长。作为另一实例，3,6-二氨基吡嗪-2,5-二羧酸可被波长约470nm的光激发且在波长约532nm发荧光。在另一实施方案中，光学试剂的激发和发射波长可落在电磁波谱的近红外范围。例如，靛青染料，如靛青绿，可被波长约780nm的光激发且具有约830nm发射波长。
在其它实施方案中，该诊断剂可包括但不限于本领域通常已知的磁共振(MR)和X-射线造影剂，包括，例如，基于碘的X-射线造影剂、超顺磁氧化铁(SPIO)、钆或锰的复合物，等。(参见，例如，Armstrong等人，DiagnosticImaging，5th Ed.，Blackwell Publishing(2004))。在一些实施方案中，诊断剂可包括磁共振(MR)显像剂。示例性磁共振试剂包括但不限于顺磁剂、超顺磁剂，等。示例性顺磁剂可包括但不限于钆喷酸、钆特酸、钆双胺、钆、钆特醇、锰福地吡、钆弗塞胺、柠檬酸铁铵、钆贝酸、钆布醇或钆塞酸。超顺磁剂可包括但不限于超顺磁氧化铁以及氧化铁和氧化亚铁复合物(Ferristene)。在某些实施方案中，该诊断剂可包括X-射线造影剂，例如，在以下文献提供：H.S Thomsen，R.N.Muller and R.F.Mattrey，Eds.，Trends inContrast Media，(Berlin:Springer-Verlag，1999)；P.Dawson，D.Cosgrove andR.Grainger，Eds.，Textbook of Contrast Media(ISIS Medical Media1999)；Torchilin，V.P.，Curr.Pharm.Biotech.1:183-215(2000)；Bogdanov，A.A.等人，Adv.Drug Del.Rev.37:279-293(1999)；Sachse，A.等人，InvestigativeRadiology32(1):44-50(1997)。X-射线造影剂的实例包括包括，但不限于，碘帕醇、碘美普尔、碘海醇、碘喷托、碘普胺、碘西胺、碘佛醇、碘曲仑、碘酞硫、碘克沙醇、碘西醇、碘葡糖酰胺、碘葡苯胺、iogulamide、碘沙考、碘昔兰、碘帕醇、甲泛葡胺、碘比醇和碘美醇。在某些实施方案中，该X-射线造影剂可包括碘帕醇、碘美普尔、碘普胺、碘海醇、碘喷托、碘佛醇、碘比醇、碘克沙醇、碘曲仑和碘美醇。
对于上述治疗剂，该诊断剂可以多种方式与治疗脂质体结合，包括例如嵌入或包封入脂质体。类似的，诊断剂的负载可通过本领域已知的多种方式进行，例如以下文献公开的：de Villiers，M.M.等人，Eds.，Nanotechnologyin Drug Delivery，Springer(2009)；Gregoriadis，G.，Ed.，Liposome Technology:Entrapment of drugs and other materials into Liposomes，CRC Press(2006)。
制剂和给药
在一些实施方案中，本发明可包括脂质体组合物和生理学上(即，药学上)可接受的载体。如本文所述，术语"载体"是指通常的用作药物如治疗剂的稀释剂或媒介物的惰性物质。该术语也包括赋予组合物粘聚性的通常的惰性物质。通常，生理学上可接受的载体以液体形式存在。液体载体的实例包括生理盐水、磷酸盐缓冲液、生理缓冲盐水(135-150mM NaCl)、水、缓冲水溶液、0.4％盐水、0.3％甘氨酸、糖蛋白以提供增强的稳定性(例如，白蛋白、脂蛋白、球蛋白等)，等。因为生理学上可接受的载体部分通过给予的具体组合物以及通过用于给予组合物的具体方法而决定，因此有很多种本发明的药物组合物的合适制剂(参见，例如，Remington's Pharmaceutical Sciences，17th ed.，1989)。
本发明的组合物可通过常规、众所周知的灭菌技术灭菌或可在无菌条件下制备。水溶液可被包装使用或在无菌条件过滤且冻干，该冻干制剂在给药前与无菌水溶液合并。该组合物可按需要包含药物可接受的辅助物质以接近生理条件，如pH调节和缓冲剂、张度调节剂、湿润剂，等，例如，乙酸钠、乳酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙、脱水山梨醇单月桂酸酯和三乙醇胺油酸盐。可包含糖以稳定该组合物，如用于冻干的脂质体组合物的稳定剂。
所选择的脂质体组合物，当单独或与其它合适的组分组合时，可制备成气溶胶制剂(即，它们可被"雾化")以通过吸入给药。气溶胶制剂可置于加压可接受的推进剂中，如二氯二氟甲烷、丙烷、氮气，等。
用于直肠给药的合适的制剂包括，例如，栓剂，其包含有效量的包装的脂质体组合物以及栓剂基质。合适的栓剂基质包括天然或合成的甘油三酯或石蜡烃。此外，也可使用明胶直肠胶囊，其包含选择的脂质体组合物与基质的组合，基质包括，例如，液体甘油三酯、聚乙二醇，和石蜡烃。
适合肠胃外给药的制剂，例如，通过关节内(关节中)、静脉内、肌内、瘤内、皮内、腹腔内、和皮下途径，包括水性和非水性、等渗无菌注射溶液，其可包含抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使得制剂与预期接受者的血液等渗的溶质，和水性和非水性无菌悬浮液，其可包括助悬剂、增溶剂、增稠剂、稳定剂和防腐剂。注射溶液和悬浮液也可由无菌粉末、颗粒和片剂制备。在本发明的实践中，组合物可通过，例如，静脉内输注、局部、向腹膜内、膀胱内或鞘内给药。肠胃外给药和静脉内给药是优选给药方法。脂质体组合物的制剂可存在于单元剂量或多剂量密封容器，如安瓿和小瓶中。
该药物制剂优选以单位剂型形式。以该形式，制剂细分为包含合适的量的活性成分的单位剂量，例如，脂质体组合物。该单位剂型可为包装的制剂，包含离散量的制剂的包装。如果需要的话，该组合也可包含其它相容的治疗剂。
在治疗癌症的治疗用途中，本发明的药物组合物中使用的包含治疗和/或诊断剂的脂质体组合物可以初始剂量为每日约0.001mg/kg至约1000mg/kg给药。可使用日剂量范围约0.01mg/kg至约500mg/kg，或约0.1mg/kg至约200mg/kg，或约1mg/kg至约100mg/kg，或约10mg/kg至约50mg/kg。然而，该剂量可根据患者的需求、治疗病症的严重性和使用的脂质体组合物而改变。例如，剂量可考虑具体患者中诊断的癌症的类型和阶段而凭经验地确定。给药于患者的剂量，在本发明的上下文，应足以随时间在患者中实现有益治疗响应。剂量大小也将通过在具体患者中伴随给药具体脂质体组合物的任何不利副作用的存在、性质和程度而确定。对具体情形的适当剂量的确定是医生技能范围内的。通常，治疗起始于较小剂量，其小于脂质体组合物的最佳剂量。之后，剂量通过小增量增加直到达到情况下的最佳效果。为方便起见，总日剂量可分开且在一天过程中分部分给药，如果需要的话。
靶向剂
在某些情况下，脂质体在靶点部位累积，可能是由于某些组织如癌组织的渗透性和保留特性的增强。以该方式累积可能部分由于脂质体的大小，并且可能并不需要特殊的靶向功能。在其他情况下，本发明的脂质体还可以含有靶向剂。一般地，本发明的靶向剂可以与任何感兴趣的靶点相关联，如与器官、组织、细胞、细胞外基质、细胞内或区域相关联。在某些实施方案中，靶点可以与特定的疾病状态相关联，如癌性病症。在一些实施方案中，靶向组分可仅对一个靶点如受体具有特异性。合适的靶点可包括但不限于核酸，如DNA、RNA或其修饰的衍生物。合适的靶点还可以包括但不限于蛋白质，如细胞外蛋白、受体、细胞表面受体、肿瘤标志物、跨膜蛋白、酶或抗体。合适的靶点可包括糖类，例如可以是存在于细胞表面上的单糖、二糖或多糖。
在某些实施方案中，靶向剂可以包括靶向配体(例如含RGD的肽)、靶向配体的小分子模拟物(例如肽模拟物的配体)或特定靶点的特异性抗体或抗体片段。在一些实施方案中，靶向剂可以进一步包括叶酸衍生物、B-12衍生物、整联蛋白RGD肽、NGR衍生物、结合到促生长素抑制素受体的生长抑素衍生物或肽，例如，奥曲肽和octreotate，等等。本发明的靶向剂也可包括适体。适体可以设计成与感兴趣靶点相关联或相结合。适体可包括，例如，DNA、RNA和/或肽，和现有技术公知的某些适体(参见，例如，Klussman,S.,Ed.,The Aptamer Handbook,Wiley-VCH(2006)；Nissenbaum,E.T.,Trends inBiotech.26(8):442-449(2008))。
用于给予活性剂的试剂盒
在另一个方面，本发明还提供向受试者给予脂质体和脂质纳米颗粒从而治疗疾病状态的试剂盒。在一些实施方案中，本发明提供了用于将治疗剂递送至受试者的试剂盒，该试剂盒包括：a)第一组合物，其包含含有治疗剂的脂质体；和b)第二组合物，其包含含有一种非离子型触发剂的脂质纳米颗粒；其中所述第一和第二组合物在受试者给药前被分开存储。
这样的试剂盒通常包括用于治疗疾病状态(如癌性病症)所必要的两种或多种组分。所述组分可包括本发明的脂质组合物、试剂、缓冲液、容器和/或装置。脂质体和脂质纳米颗粒可以是冻干形式，其在给药前进行重新配制。在某些实施方案中，本发明的试剂盒可以包括包装组件，其可以包括用于治疗患者疾病状态的一个或多个组件。例如，包装组件可包括分开的容器，其容纳如本文所述的治疗脂质体和攻击剂。分开的容器可包括在患者给药前可与该组合物混合的其他赋形剂或药物。在一些实施方案中，医生可以根据特定患者所需的治疗或诊断选择和搭配某些组件和/或包装组件。
IV.实施例
本发明的实施如表A实施例所示，但其并不旨在被其所限定。通过这些实施例，清楚地显示体外攻击脂质体可用于触发药物从具有差的释放特性的治疗脂质体释放。在实施例1、2和11-12中，治疗脂质体包含细胞毒性剂，包括顺铂或奥沙利铂。在实施例3-10中，5-羧基荧光素(5-CF)用作治疗脂质体组合物的标记物。这些样品的特性汇总于下表A中。实施例1-5和10表明，相同的攻击脂质体(B部分)用于触发和/或增强多种具有隐形功能(stealth functionality)或不具有隐形功能的治疗脂质体组合物(A部分)的释放。实施例6-9显示触发剂在攻击脂质体中的关键作用。在实施例8和9中，攻击脂质体的表面电荷基本上是中性的。
表A.治疗和攻击脂质体的实施例
实施例1
如表1示出含有奥沙利铂的治疗脂质体(NLICOV003F-02)和攻击脂质体(4460-075DPPC/Chol/DOTAP/TPGS)的组合物。治疗脂质体(Northern LipidInc.)中含有2.9mg/mL的奥沙利铂和71.8mg/mL的总脂质。攻击脂质体的制备方法见以下步骤：
1.称量所有脂质，并放入圆底烧瓶中。
2.向烧瓶中加入3:1(v/v)的氯仿/甲醇，溶解所有脂质；脂质浓度为约2.5wt％。
3.用旋转蒸发器于40℃由脂质混合物除去溶剂，并用旋转蒸发器于40℃施用0.5小时真空，除去残留的溶剂。
4.于室温真空持续干燥过夜，除去痕量溶剂。
5.将1X磷酸盐缓冲液(PBS)(0.0067M)加入到围绕在烧瓶底部的干燥的脂质膜上，并且于70℃搅拌分散液1小时。
6.于70℃在～200psi压力在10-mL挤压机中，通过双层包装的200nm聚碳酸酯薄膜挤出脂质分散体(多层脂质体分散液)5次。
7.于70℃在～300psi压力，通过双层包装的100nm聚碳酸酯薄膜持续挤出10次。
8.收集挤出的脂质体样品，使用Malvern Zetasizer Nano ZS测定粒径和ζ电位。
在1X PBS(pH＝7.4和5.0)中，通过混合等分量的攻击脂质体与治疗脂质体，进行奥沙利铂由NLICOV003F-02的体外释放。将第一个样品立即在室温收集(小于3分钟)并配制以用于测量所述奥沙利铂的释放。通过Amicon50K MWCO离心式过滤器于16500rpm过滤样品5分钟，测定释放。采用ICP-OES分析在无脂质体水相中释放的奥沙利铂。立即取样后，将混合物在37℃孵育48小时。随后在1、6、24和48小时收集样品以用于奥沙利铂的释放分析。其结果示于表1和2中。表2所示数据和图1所绘数据表明，通过加入等量的攻击脂质体(4460-075)，治疗脂质体(NLICOV003F-02)的总释放从零时的～5％增加至6小时的～40％。该结果还表明，在两个pH条件下，治疗脂质体内容物的总释放随着攻击脂质体量的增加而增加。治疗脂质体是含有10mol％胆固醇的非隐形带电脂质体。攻击脂质体带相反电荷并含有32mol％TPGS。
表1.Dualsome组成
表2.Dualsome在1X PBS(pH＝7.4和pH＝5.0)的体外释放
实施例2
本实施例说明加入不同量的攻击脂质体后顺铂从治疗脂质体的增强的释放。含2.5mg/mL顺铂和77.5mg/mL总脂质的治疗脂质体(NLICOV00AR-02，Northern Lipids Inc.)通过被动载药法制备。包含DPPC、胆固醇、DOTAP和TPGS的攻击脂质体(4460-075)如实施例1所述方法制备。
在1X PBS(pH＝7.4和5.0)中，添加等分量的攻击脂质体(4460-075)到治疗脂质体，进行顺铂由NLICOV00AR-02的体外释放。将样品立即在室温收集，并于37℃孵化后在1、6、24和48小时时收集样品。通过Amicon50KMWCO离心式过滤器于16500rpm过滤样品5分钟。采用ICP-OES分析释放在不含脂质体水相的顺铂。结果示于表3和4中。对表4所示数据进行作图，并在图2中展示。结果显示，治疗脂质体(NLICOV00AR-02)在48小时的总释放，从无攻击脂质体的～1％，增加到加入等量攻击脂质体的～27％。该结果还表明，在两个pH条件下，治疗脂质体的总释放随着攻击脂质体量的增加而增加。在此实施例中，治疗脂质体是一种含有10mol％胆固醇的非隐形带电脂质体。攻击脂质体带相反电荷并含有32mol％TPGS。
表3.Dualsome组成
表4.Dualsome在1X PBS(pH＝7.4和pH＝5.0)的体外释放
实施例3
在这个实施例中，攻击脂质体(B部分，4460-075)由如表5中给出的DPPC、胆固醇、DOTAP和TPGS组成；制备方法与实施例1中描述的相同。治疗脂质体(部分A，4460-090)含有5-羧基荧光素(5-CF)作为标记物。含有5-CF的脂质体由如下描述的被动载药法制备：
1.称量脂质组分，并放入圆底烧瓶中。
2.加入3:1(v/v)氯仿/甲醇溶解所有脂质；脂质浓度为约2.5wt％。
3.用旋转蒸发器于40℃由脂质混合物除去溶剂，并用旋转蒸发器于40℃施用真空0.5小时除去残留的溶剂。
4.于室温真空持续干燥过夜除去痕量溶剂。
5.将1X磷酸盐缓冲液(PBS)(0.0067M)加入到围绕在烧瓶底部的干燥的脂质膜上，并且于70℃搅拌所得的分散液1小时。在此步骤中，将5-羧基荧光素(5-CF)加入到PBS使其浓度为2.0mg/mL。将该分散液的pH值调节至7.1。
6.于70℃在～200psi压力的10-mL挤压机中，通过双层包装的200nm聚碳酸酯薄膜挤出脂质分散体5次。
7.于70℃在～300psi压力，通过双层包装的100nm聚碳酸酯薄膜持续挤出10次。
8.将最终的脂质体制剂注入到3.0-12.0ml20,000MWCO盒中进行透析。
9.将该脂质体制剂以1000ml1X PBS溶液透析24小时。
10.透析过程用1000ml新鲜1X PBS缓冲液再重复2次。
11.收集透析的脂质体，使用Malvern Zetasizer Nano ZS测定粒径和ζ电位。
将脂质体A部分与B部分混合，并由带有Waters2475多波长荧光检测器(S/N608975406M)的Agilent1200HPLC测定5-CF向不含脂质体的水相的的释放。色谱柱是BDS Hypersil C18色谱柱(150mmX3.0μm,ThermoScientific,S/N:0908389T,Lot#10770)。流动相的组成为5％(wt)IPA/5％(wt)ACN/90％(wt)水及50mM醋酸铵。未应用梯度洗脱。流速为在40℃的0.8mL/min。进样量为5.0μL。运行时间设置为5分钟，并且CF-5洗脱时间在～1.0min。荧光检测应用的激发波长为492nm和发射波长为514nm。在检测器上，EUFS设置为50,000和增益设置为1.0。在1X PBS的CF-5外标用于曲线校正。线性校正范围从0.05μg/mL至2.0μg/mL，结果R2值大于0.99。
表6所示结果及图3所绘结果表明，在pH＝7.4的1X PBS中，加入等量的攻击脂质体(4460-075)，治疗脂质体(4460-090)在48小时的总释放由～4％增加到～16％。该结果还表明，治疗脂质体的释放随着攻击脂质体起始量的增加而增加。在这个实施例中，脂质体A部分是一种含有40mol％胆固醇的非隐形带电脂质体。攻击脂质体，即B部分，带相反电荷并含有TPGS。
表5.Dualsome组成
表6.Dualsome在PBS1X(pH＝7.4)的体外释放
实施例4
在本实施例中，治疗脂质体A部分(4460-077)含有5-CF(5-羧基荧光素)作为标记物，并且所述脂质体组合物与实施例1和2的治疗脂质体组合物相同。攻击脂质体组合物，即B部分，与实施例1和2(见表7)相同。
表8所示结果及图4所绘结果表明，在pH7.4的1X PBS中，加入等量的攻击脂质体B部分(4460-075)，5-CF在48小时从治疗脂质体A部分(4460-077)的总释放由～5％增加到～32％。结果还表明，5-CF从治疗脂质体A部分的释放随着攻击脂质体B部分初始量的增加而增加。这些结果与实施例1和2所述的相一致。在本实施例中，脂质体A部分是一种含有10mol％胆固醇的非隐形带电脂质体。攻击脂质体，即B部分，带相反电荷并含有TPGS。
表7.Dualsome组成
表8.Dualsome在1X PBS(pH＝7.4)的体外释放
实施例5
在本实施例中，在内部水相中脂质体A部分(4386-143)含有如实施例3和4的5-CF(5-羧基荧光素)。脂质体A和B部分(4460-075)的组成见表9。
表10所示结果及图5所绘结果表明，在pH＝7.4的1X PBS中，加入等量的攻击脂质体B部分(4460-075)，5-CF在48小时从治疗脂质体A部分(4386-143)的总释放由～2％增加到～20％。结果还表明，脂质体A部分的释放随着攻击脂质体初始量的增加而增加。在本实施例中，治疗脂质体是含有40mol％胆固醇的隐形脂质体。攻击脂质体带相反电荷并含有TPGS。
表9.Dualsome组成
表10.Dualsome在1X PBS(pH＝7.4)的体外释放
实施例6
在本实施例中，脂质体A部分和脂质体B部分组成见表11。治疗脂质体A部分(4460-090)含有5-CF。应当指出的是，攻击脂质体B部分(4460-084)在组成中不包含触发剂TPGS。表12所示结果及图6所绘结果表明，在pH＝7.4的1X PBS中，治疗脂质体A部分(4460-090)的48小时的总释放并不受加入攻击脂质体B部分(4460-084)的影响。在本实施例中，治疗脂质体是含有40mol％胆固醇的非隐形脂质体。攻击脂质体带相反电荷但不含有TPGS。
本实施例清楚地说明，为了触发脂质体A部分的释放，攻击脂质体组成中触发剂(如TPGS)的必要性。基本上，在没有TPGS的情况下，在本实施例没有观察到增强的释放。
表11.Dualsome组成
表12.Dualsome在1X PBS(pH＝7.4)的体外释放
实施例7
在本实施例中，脂质体A部分和B部分的组成列于表13中。治疗脂质体A部分(4460-077)中含有5-CF。应当指出的是，在组合物中，攻击脂质体B部分(4460-084)不包含触发剂TPGS。表14所示结果及图7所绘结果表明，在pH＝7.4的1X PBS中，治疗脂质体A部分(4460-077)的总释放并不受加入攻击脂质体B部分(4460-084)的影响。在本实施例中，治疗脂质体是含有10mol％胆固醇的非隐形脂质体。攻击脂质体带相反电荷但不含有TPGS。在B部分没有TPGS的情况下，在本实施例没有观察到A部分增强的释放。
表13.Dualsome组成
表14.Dualsome在1X PBS(pH＝7.4)的体外释放
实施例8
在本实施例中，脂质体A部分和B部分的组成列于表15中。治疗脂质体A部分(4460-090)含有与实施例6相同的5-CF。攻击脂质体B部分(4384-086)不包含带正电荷的脂质DOTAP，但含有30mol％TPGS。表16所示结果及图8所绘结果表明，在pH7.4的1X PBS中，通过加入等量的攻击脂质体，5-CF在48小时从治疗脂质体A部分(4460-090)的总释放由～4％增加到～20％。结果还表明，5-CF从治疗脂质体的释放随着攻击脂质体初始量的增加而增加。治疗脂质体是含有40mol％胆固醇的隐形脂质体。
表15.Dualsome组成
表16.Dualsome在1X PBS(pH＝7.4)的体外释放
实施例9
在本实施例中，脂质体A部分和B部分的组成列于表17中。治疗脂质体A部分(4460-077)含有与实施例4相同的5-CF。攻击脂质体是含有10mol％胆固醇的隐形脂质体。在组成上，攻击脂质体B部分(4460-086)含有30摩尔％TPGS，但不像实施例5一样含有带电脂质DOTAP。表18所示结果及图9所绘结果表明，在pH7.4的1X PBS中，通过加入等量的攻击脂质体(4384-086)，5-CF在48小时从脂质体(4460-077)的总释放由～5％增加到～34％。结果还表明，5-CF从脂质体(4460-077)的释放随着攻击脂质体初始量的增加而增加。
表17.Dualsome组成
表18.Dualsome在1X PBS(pH＝7.4)的体外释放
实施例10
在本实施例中，脂质体A部分和B部分的组成列于表19中。治疗脂质体A部分(4460-090)含有与实施例6相同的5-CF。治疗脂质体是含有40mol％胆固醇的非隐形脂质体。攻击脂质体B部分(4460-075)含有32摩尔％TPGS和16摩尔％DOTAP(提供正电荷至攻击脂质体)。表20所示结果及图10所绘结果表明，即便PH由7.4变为5.0，加入攻击脂质体(4460-075)，5-CF在48小时从治疗脂质体(4460-090)的总释放由～5％增加到～26％。结果清晰地表明，脂质体(4460-090)的总释放随着攻击脂质体初始量的增加而增加。
表19.Dualsome组成
表20.Dualsome在1X PBS(pH＝5.0)的体外释放
实施例11
在本实施例中，脂质体A部分和B部分的组成列于表21中。如同实施例1一样，治疗脂质体(NLICOV003F-02)含有奥沙利铂。治疗脂质体是含有10mol％胆固醇的非隐形脂质体。攻击脂质体(4460-104)含有32摩尔％TPGS和16摩尔％DOTAP(提供正电荷至攻击脂质体)。表22所示结果及图11所绘结果表明，在PH7.4和5.0的1X PBS中，通过加入20％的攻击脂质体(4460-104)，治疗脂质体(COV003F-02)在48小时的总释放由～5％增加到～25％。
表21.Dualsome组成
表22.Dualsome在1X PBS(pH＝5.0)的体外释放
实施例12
在本实施例中，脂质体A部分和B部分的组成列于表23中。治疗脂质体(NLI4481101)含有顺铂。治疗脂质体是含有40mol％胆固醇的隐形脂质体。攻击脂质体(4460-104)含有32摩尔％TPGS和16摩尔％DOTAP(提供正电荷至攻击脂质体)。表23所示结果及图12所绘结果表明，在PH7.4和5.0的1X PBS中，通过加入攻击脂质体(4460-104)，治疗脂质体(NLI4481101)在48小时后的释放由～1％增加到～5％。结果还表明，治疗脂质体的顺铂释放随着攻击脂质体量的增加而增加。治疗脂质体是含有40mol％胆固醇的隐形脂质体。攻击脂质体含有相反电荷并含有32摩尔％TPGS。
表23.Dualsome组成
表24.Dualsome在1X PBS(pH＝7.4和pH＝5.0)的体外释放
为了清楚的理解的目的，虽然上述发明以示例说明和实施例的方式进行了相当详细地描述，但是本领域技术人员将会认识到可在所附权利要求的范围内实施某些变化和修改。此外，本文提供的每个参考文献以其全文并入参考，并且达到如下程度：每个参考文献通过引用单独包含于此。当本申请和提供的参考文献之间存在冲突，应以本申请为主。

Claims (24)

1.一种递送治疗剂至受试者的方法，所述方法包括：
a)向所述受试者给予包含治疗剂的脂质体；和
b)向所述受试者给予含有非离子型触发剂的脂质纳米颗粒；
从而相对于不给予脂质纳米颗粒时所述治疗剂从脂质体中的释放，在脂质纳米颗粒给予后所述治疗剂从脂质体中的释放增加。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述脂质体包含选自磷脂、类固醇和阳离子脂质的一种或多种脂质。
3.如权利要求2所述的的方法，其中所述磷脂选自磷脂酰胆碱、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇和磷脂酸。
4.如权利要求3所述的方法，其中所述磷脂酰胆碱是DSPC。
5.如权利要求3所述的方法，其中所述磷脂酰甘油是DSPG。
6.如权利要求3所述的方法，其中所述磷脂酰乙醇胺是DSPE-PEG(2000)。
7.如权利要求2所述的方法，其中所述类固醇为胆固醇。
8.如权利要求1所述的方法，其中所述脂质纳米颗粒选自第二脂质体、胶束以及它们的混合物。
9.如权利要求8所述的方法，其中所述脂质纳米颗粒是第二脂质体。
10.如权利要求9所述的方法，其中所述第二脂质体包含选自磷脂、类固醇和阳离子脂质的一种或多种脂质。
11.如权利要求10所述的方法，其中所述磷脂选自磷脂酰胆碱、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇和磷脂酸。
12.如权利要求11所述的方法，其中所述磷脂酰胆碱是DPPC。
13.如权利要求10所述的方法，其中所述类固醇为胆固醇。
14.如权利要求10所述的方法，其中所述阳离子脂质是DOTAP。
15.如权利要求1所述的方法，其中所述非离子型触发剂是TPGS。
16.如权利要求1所述的方法，其中所述脂质体包含40-80摩尔％的DSPC、5-50摩尔％的胆固醇、0-30摩尔％的DSPG和0-10摩尔％的DSPE-PEG(2000)。
17.如权利要求1所述的方法，其中所述脂质纳米颗粒是包含40-70摩尔％的DPPC、5-20摩尔％的胆固醇、0-20摩尔％的DOTAP和20-40摩尔％的TPGS的第二脂质体。
18.如上述任何权利要求所述的方法，其中所述治疗剂选自顺铂、奥沙利铂、卡铂、吉西他滨、5-氟尿嘧啶、多柔比星和紫杉烷。
19.如权利要求18所述的方法，其中所述治疗剂选自顺铂和奥沙利铂。
20.如上述任何权利要求所述的方法，其中所述第一脂质体和脂质纳米颗粒通过腹膜内注射递送。
21.如上述任何权利要求所述的方法，其中所述受试者是人。
22.如上述任何权利要求所述的方法，其中在给予所述脂质体之后向所述受试者给予所述脂质纳米颗粒。
23.如权利要求22所述的方法，其中在所述脂质体已经在受试者体内的靶点部位累积后，向所述受试者给予所述脂质纳米颗粒。
24.用于递送治疗剂至受试者的试剂盒，所述试剂盒包括：
a)第一组合物，包含含有治疗剂的脂质体；和
b)第二组合物，包含含有非离子型触发剂的脂质纳米颗粒；
其中，在向受试者给予前，所述第一和第二组合物分开存储。
CN201280064482.6A 2011-10-31 2012-10-31 用于治疗癌症的联合脂质体组合物 Expired - Fee Related CN104023793B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161553786P 2011-10-31 2011-10-31
US61/553,786 2011-10-31
PCT/US2012/062635 WO2013066903A1 (en) 2011-10-31 2012-10-31 Combinational liposome compositions for cancer therapy

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104023793A true CN104023793A (zh) 2014-09-03
CN104023793B CN104023793B (zh) 2017-11-24

Family

ID=47146747

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201280064482.6A Expired - Fee Related CN104023793B (zh) 2011-10-31 2012-10-31 用于治疗癌症的联合脂质体组合物

Country Status (12)

Country Link
US (4) US9370489B2 (zh)
EP (2) EP3424564A1 (zh)
JP (4) JP6143767B2 (zh)
KR (1) KR20140097215A (zh)
CN (1) CN104023793B (zh)
BR (1) BR112014010291A2 (zh)
CA (1) CA2852564A1 (zh)
ES (1) ES2694154T3 (zh)
IL (2) IL232344B (zh)
MX (1) MX360391B (zh)
RU (1) RU2640934C2 (zh)
WO (1) WO2013066903A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110571005A (zh) * 2019-09-27 2019-12-13 广西科技大学 一种固定化金属离子-磁性脂质体及其制备方法和应用

Families Citing this family (56)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8920775B2 (en) * 2009-07-17 2014-12-30 Technical University Of Denmark Loading technique for preparing radionuclide containing nanoparticles
EP2600901B1 (en) 2010-08-06 2019-03-27 ModernaTX, Inc. A pharmaceutical formulation comprising engineered nucleic acids and medical use thereof
HRP20220796T1 (hr) 2010-10-01 2022-10-14 ModernaTX, Inc. Ribonukleinske kiseline koje sadrže n1-metil-pseudouracil i njihove uporabe
CA2831613A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Moderna Therapeutics, Inc. Delivery and formulation of engineered nucleic acids
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
EP3492109B1 (en) 2011-10-03 2020-03-04 ModernaTX, Inc. Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
RS63244B1 (sr) 2011-12-16 2022-06-30 Modernatx Inc Kompozicije modifikovane mrna
WO2013151664A1 (en) 2012-04-02 2013-10-10 modeRNA Therapeutics Modified polynucleotides for the production of proteins
US9283287B2 (en) 2012-04-02 2016-03-15 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
US9303079B2 (en) 2012-04-02 2016-04-05 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
US9572897B2 (en) 2012-04-02 2017-02-21 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
PL2922554T3 (pl) 2012-11-26 2022-06-20 Modernatx, Inc. Na zmodyfikowany na końcach
EP2972360B1 (en) * 2013-03-15 2018-03-07 Translate Bio, Inc. Synergistic enhancement of the delivery of nucleic acids via blended formulations
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
JP2014227338A (ja) * 2013-05-17 2014-12-08 キヤノン株式会社 インドシアニングリーン含有粒子およびその製造方法
CA2938626A1 (en) 2013-07-26 2015-01-29 John Rothman Compositions to improve the therapeutic benefit of bisantrene
EP3052106A4 (en) 2013-09-30 2017-07-19 ModernaTX, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
SG11201602503TA (en) 2013-10-03 2016-04-28 Moderna Therapeutics Inc Polynucleotides encoding low density lipoprotein receptor
RS61273B1 (sr) 2014-04-30 2021-01-29 Fujifilm Corp Lipozomska kompozicija i postupak za njeno dobijanje
EP3256110A4 (en) * 2015-02-13 2018-11-21 Op Nano Co., Ltd. Compositions and methods of tumor treatment utilizing nanoparticles
WO2016141167A1 (en) 2015-03-03 2016-09-09 Cureport, Inc. Combination liposomal pharmaceutical formulations
EP3265063A4 (en) 2015-03-03 2018-11-07 Cureport, Inc. Dual loaded liposomal pharmaceutical formulations
EP3270891A1 (en) * 2015-03-17 2018-01-24 Leon-Nanodrugs GmbH Nanoparticles comprising a stabilized boronic acid compound
EP3277264A4 (en) * 2015-04-02 2018-07-18 The Research Foundation for the State University of New York Serum-stable compositions and methods for light-triggered release of materials
RS63030B1 (sr) 2015-09-17 2022-04-29 Modernatx Inc Jedinjenja i kompozicije za intracelularno isporučivanje terapeutskih sredstava
CN111632030B (zh) 2015-11-02 2023-01-17 富士胶片株式会社 包含吉西他滨或其盐的脂质体组合物的制造方法
US20180318216A1 (en) * 2015-11-20 2018-11-08 The Regents Of The University Of California Deformable nano-scale vehicles (dnvs) for trans-blood brain barrier, trans-mucosal, and transdermal drug delivery
EP3964200A1 (en) 2015-12-10 2022-03-09 ModernaTX, Inc. Compositions and methods for delivery of therapeutic agents
EP3391906A4 (en) * 2015-12-18 2019-08-28 Medigear International Corporation BIODEGRADABLE TUMOR SEALANT
LT3394030T (lt) 2015-12-22 2022-04-11 Modernatx, Inc. Junginiai ir kompozicijos terapinei medžiagai teikti intraceliuliniu būdu
KR101630397B1 (ko) * 2015-12-31 2016-06-24 한국과학기술원 항암제-인도시아닌 그린-리포좀 복합체를 포함하는 암 치료용 조성물
WO2017142876A1 (en) 2016-02-15 2017-08-24 University Of Georgia Research Foundation, Inc. lPA-3-LOADED LIPOSOMES AND METHODS OF USE THEREOF
CN109562057A (zh) 2016-05-16 2019-04-02 传染病研究所 聚乙二醇化脂质体和使用方法
US11583504B2 (en) 2016-11-08 2023-02-21 Modernatx, Inc. Stabilized formulations of lipid nanoparticles
CN106474057A (zh) * 2016-12-02 2017-03-08 中国药科大学 一种奥沙利铂热敏长循环脂质体的蔗糖溶液制剂及其制备方法
RU2765736C2 (ru) * 2017-01-18 2022-02-02 Темасек Лайф Сайенсиз Лаборатори Лимитед Гиперстабилизированные липосомы, повышающие направленное таргетирование митотических клеток
MX2019011004A (es) 2017-03-15 2020-08-10 Modernatx Inc Compuestos y composiciones para la administracion intracelular de agentes terapeuticos.
DK3596042T3 (da) 2017-03-15 2022-04-11 Modernatx Inc Krystalformer af aminolipider
WO2018170336A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticle formulation
US12077501B2 (en) 2017-06-14 2024-09-03 Modernatx, Inc. Compounds and compositions for intracellular delivery of agents
EP3638215A4 (en) 2017-06-15 2021-03-24 Modernatx, Inc. RNA FORMULATIONS
US10925831B2 (en) * 2017-08-28 2021-02-23 Wake Forest University Liposomal formulations of platinum-acridine anticancer agents and methods thereof
AU2018326799A1 (en) 2017-08-31 2020-02-27 Modernatx, Inc. Methods of making lipid nanoparticles
WO2019084290A1 (en) * 2017-10-25 2019-05-02 Arizona Board Of Regents On Behalf Of The University Of Arizona COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE ADMINISTRATION OF PHARMACEUTICAL AGENTS
US10606661B2 (en) * 2017-12-15 2020-03-31 Rubrik, Inc. On-demand provisioning of customized developer environments
CN113271926A (zh) 2018-09-20 2021-08-17 摩登纳特斯有限公司 脂质纳米颗粒的制备及其施用方法
WO2020115171A1 (en) * 2018-12-06 2020-06-11 Glaxosmithkline Biologicals Sa Immunogenic compositions
RU2706427C1 (ru) * 2018-12-27 2019-11-19 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский технологический университет "МИСиС" Способ лечения онкологических заболеваний с помощью инъекций лекарственного препарата
JP7253735B2 (ja) 2019-07-02 2023-04-07 パナソニックＩｐマネジメント株式会社 通過可否判定装置、通過管理システム、通過可否判定方法、及び、コンピュータプログラム
KR20220101077A (ko) 2019-09-19 2022-07-19 모더나티엑스, 인크. 치료제의 세포내 전달을 위한 분지형 꼬리 지질 화합물 및 조성물
US20220364139A1 (en) * 2019-09-24 2022-11-17 Pataigin, Llc Methods for determining growth and response
EP4199906A1 (en) * 2020-08-20 2023-06-28 Bionanosim (BNS) Ltd Lipid delivery systems for delivery of oxaliplatin palmitate acetate
KR102560135B1 (ko) 2020-12-04 2023-07-27 가톨릭대학교 산학협력단 표적 치료제의 효과적인 전달을 위한 다기능성 리포좀 조성물
WO2022171777A1 (en) 2021-02-12 2022-08-18 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Method for prognosis and treating a patient suffering from cancer
US11524023B2 (en) 2021-02-19 2022-12-13 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticle compositions and methods of formulating the same
JP2024509938A (ja) 2021-03-08 2024-03-05 アイジーン インコーポレイテッド ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２予防用ワクチン組成物

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7273620B1 (en) * 2002-05-20 2007-09-25 University Of British Columbia Triggered release of liposomal drugs following mixing of cationic and anionic liposomes

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5023087A (en) 1986-02-10 1991-06-11 Liposome Technology, Inc. Efficient method for preparation of prolonged release liposome-based drug delivery system
AU2284697A (en) 1996-04-11 1997-10-29 University Of British Columbia, The Fusogenic liposomes
US6897196B1 (en) 2001-02-07 2005-05-24 The Regents Of The University Of California pH sensitive lipids based on ortho ester linkers, composition and method
US7149468B2 (en) 2002-07-25 2006-12-12 The Mcgraw-Hill Companies, Inc. Methods for improving certainty of test-taker performance determinations for assessments with open-ended items
AU2002350719A1 (en) * 2002-11-29 2004-06-23 Janssen Pharmaceutica N.V. Pharmaceutical compositions comprising a basic respectively acidic drug compound, a surfactant and a physiologically tolerable water-soluble acid respectively base
EP1663153A4 (en) * 2003-05-20 2011-01-05 Aronex Pharmaceuticals Inc COMBINATION SCHEMOTHERAPY WITH A LIPOSOMAL PLATINUM COMPLEX
US20070248541A1 (en) * 2003-12-01 2007-10-25 Mitsubishi Pharma Corporation Liposome
TWI262798B (en) * 2003-12-31 2006-10-01 Ind Tech Res Inst Liposome and drug deliver system
US20110020434A1 (en) 2005-09-02 2011-01-27 O'halloran Thomas V Nanoparticle arsenic-platinum compositions
WO2007049279A2 (en) * 2005-10-26 2007-05-03 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem A liposomal combination and uses thereof

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7273620B1 (en) * 2002-05-20 2007-09-25 University Of British Columbia Triggered release of liposomal drugs following mixing of cationic and anionic liposomes

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110571005A (zh) * 2019-09-27 2019-12-13 广西科技大学 一种固定化金属离子-磁性脂质体及其制备方法和应用
CN110571005B (zh) * 2019-09-27 2021-01-01 广西科技大学 一种固定化金属离子-磁性脂质体及其制备方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
US10213385B2 (en) 2019-02-26
JP2014532665A (ja) 2014-12-08
EP3424564A1 (en) 2019-01-09
EP2773426A1 (en) 2014-09-10
IL258740B (en) 2019-01-14
CN104023793B (zh) 2017-11-24
IL258740A (en) 2018-06-28
JP2017101085A (ja) 2017-06-08
ES2694154T3 (es) 2018-12-18
MX2014004960A (es) 2014-06-05
IL232344A0 (en) 2014-06-30
EP2773426B1 (en) 2018-08-22
US20130115273A1 (en) 2013-05-09
IL232344B (en) 2018-05-31
JP2019023243A (ja) 2019-02-14
JP2019123753A (ja) 2019-07-25
US9370489B2 (en) 2016-06-21
CA2852564A1 (en) 2013-05-10
RU2014120216A (ru) 2015-12-10
US20180015039A1 (en) 2018-01-18
US20160338958A1 (en) 2016-11-24
RU2640934C2 (ru) 2018-01-12
US9717686B2 (en) 2017-08-01
JP6549172B2 (ja) 2019-07-24
BR112014010291A2 (pt) 2017-04-18
MX360391B (es) 2018-10-31
WO2013066903A1 (en) 2013-05-10
US20190175505A1 (en) 2019-06-13
JP6143767B2 (ja) 2017-06-07
KR20140097215A (ko) 2014-08-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104023793A (zh) 用于治疗癌症的联合脂质体组合物
JP5927194B2 (ja) 治療ナノキャリアおよび／または診断ナノキャリアのターゲティングのためのアプタマーコンジュゲート
JP6294456B2 (ja) 修飾されたドセタキセルリポソーム製剤
CN104039355A (zh) 使用互补性寡核苷酸连接子进行的靶向纳米颗粒的远程组装
JP2014527071A (ja) Ｈ−ホスホネートによるナノ粒子ｐｅｇの改変
CN104080729A (zh) Mmp-靶向的治疗性和/或诊断性纳米载体
CA2845851A1 (en) Remote assembly of targeted nanoparticles using h-phosphonate-ene/-yne hydrophosphonylation reactions
US20210290537A1 (en) Liposomal elinafide formulations and uses thereof

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20171124

Termination date: 20191031

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee