CN104017038A - 一种柚皮苷的制备纯化方法 - Google Patents

Abstract

一种柚皮苷的制备纯化方法，即一种采用热水提取-冷却结晶工艺从芸香科植物柚的幼果中提取制备柚皮苷及纯化的方法。其特点是：收集直径小于5cm柚子幼果，粉碎，用热水浸提；浸提液过滤后冷却，加入晶种结晶；去除母液后，粗晶体再次用热水溶解、冷却重结晶，得到类白色结晶性粉末，经HPLC检测，柚皮苷含量大于96%。与目前柚皮苷生产方法相比，该方法不但工艺简单、生产成本低，而且将废弃幼果综合利用，创造经济价值。

Description

一种柚皮苷的制备纯化方法

技术领域

 本发明涉及一种柚皮苷的制备纯化方法，特别是一种采用热水提取-冷却结晶工艺从芸香科植物柚的幼果中提取制备柚皮苷及纯化的方法。

背景技术

柚皮苷（Naringin, Cas 10236-47-2）是一种广泛存在于芸香科植物柚、葡萄柚、酸橙等果实及果皮中的黄烷酮糖苷类化合物。柚皮苷具有降血脂、抗氧化、抗肿瘤、抗真菌、抗动脉粥样硬化等生物活性，可用于生产心血管疾病、消炎治疮的药物或保健品，亦可作为口腔护理品的添加物。此外，以柚皮苷为原料，经碱化开环、加氢，可合成口感清凉、高甜、低能量的新型甜味剂柚皮苷二氢查耳酮。

成熟柚子果皮的柚皮苷含量为1%~3%，是目前工业提取制备柚皮苷的主要原料。由于成熟柚子含有大量果胶，导致生产过程中过滤困难，不但产品柚皮苷得率低，且纯度也不高。现有技术中，柚皮苷的提取方法主要采用有机溶剂法，以一定比例的乙醇-水居多；为了提高柚皮苷的纯度，提取液回收有机溶剂后，需用大孔树脂进一步精制。该生产工艺流程较长，且成本较高。

福建平和县是我国蜜柚主要种植基地之一，也是国内最大的柚子出口产地。在柚子生产管理中，为了保证柚子果实的质量，每年要疏剪95%以上的花苞和幼果，再加上生理落果，每年产生大量的废弃幼果。经HPLC分析，该幼果中柚皮苷含量高达10%左右，是宝贵的自然资源。以该幼果为原料，采用热水提取-冷却结晶工艺制备柚皮苷，不但工艺简单、生产成本低，而且将废弃幼果综合利用，创造经济价值。

发明内容

 本发明的目的是提出一种柚皮苷的制备纯化方法，即一种采用热水提取-冷却结晶工艺从芸香科植物柚的幼果中提取制备柚皮苷及纯化的方法。 

本发明的方法具体内容如下

（1）收集直径小于5cm柚子幼果，粉碎或粉碎后烘干。

（2）取适量粉碎后的柚子幼果，加入1-5倍质量的水（干果用2-10倍质量的水），70-100℃浸泡1.5h，放出浸提液；用同样方法再次浸提1-2次。

（3）将浸提液趁热过滤，过滤液应无肉眼可见颗粒。

（4）将滤液搅拌冷却，当温度降至30-50℃时加入少量柚皮苷晶种，继续搅拌冷却；当温度低于25℃时，停止冷却，继续搅拌0.5-3h。

（5）停止搅拌，待晶体颗粒沉降完全，倒弃上层清液，底部结晶物离心脱水，并用适量冷水洗淋。

（6）往所得粗晶体中加入3-20倍水或30%以下的乙醇溶液，并加热至50-100℃使粗晶体溶解。

（7）将溶液趁热过滤。

（8）所得滤液搅拌冷却，当温度降至30-50℃时加入0.01%-0.1%柚皮苷晶种，继续搅拌冷却，使柚皮苷结晶；当温度低于25℃时，停止冷却，继续搅拌0.5-3h。

（9）将结晶液过滤或离心脱水、干燥即得类白色结晶性柚皮苷。 

采用本发明一种柚皮苷的制备纯化方法的有益效果是：与目前柚皮苷生产方法相比，该方法不但工艺简单、生产成本低，而且将废弃幼果综合利用，创造经济价值。

具体实施方式

实例1

柚皮苷分析色谱条件：色谱柱（XDB-C18, 4.6 mm×150 mm, 5 μm）；流动相（甲醇:水:磷酸=35:65:0.2）；流速1.0 ml/min；柱温箱（30℃）；进样量20 μl；检测波长（λ=283 nm）。

对照品溶液配制：精密称取柚皮苷对照品25.0 mg于100 ml容量瓶中，加1 ml甲醇溶解，再补水至刻度，摇匀后取1-2ml用0.45μm微孔滤膜过滤，做为柚皮苷对照品溶液。

原料溶液配制：精密称取约0.5 g原料三份置于250 ml具塞三角瓶中，精密加入100.0 ml 50%乙醇（体积分数），密塞，称定重量。将三角瓶置于60℃水浴中浸泡30 min，摇匀，室温超声波震荡30 min，取出擦干瓶壁，冷却至室温，称重，用50%乙醇补足重量，摇匀，取上清液稀释10倍，用0.45 μm微孔滤膜过滤，即原料样品溶液。

产品溶液配制：精密称取产品样品25.0 mg于100 ml容量瓶中，加1 ml甲醇溶解，再补水至刻度，摇匀后取1-2ml用0.45μm微孔滤膜过滤，即产品溶液。

分析方法：将上述样品注入液相色谱仪分析，按单点外标法计算柚皮苷含量。

                   表1 原料和产品中柚皮苷的含量

实例2

将柚子幼果粉碎至10目左右，称取40g于250 ml具塞三角瓶中，加入100 ml水，密塞，95 ℃水浴60 min，过滤，滤渣再次用100 ml水提取一次；合并滤液于500ml烧杯中，用自来水浴冷却至30℃，加入少量柚皮苷晶体及磁转子，于磁力搅拌器上以100r/min搅拌2h，出现大量晶体析出，过滤，干燥，得2.43g淡黄色粉末状固体，经HPLC分析纯度为94%。

实例3

取柚子幼果200kg，粉碎，倒入提取釜内，注入400kg水，蒸汽加热至90℃，保温1h，放出浸提液，滤渣再次用400kg水提取2次；用硅藻土过滤机将浸提液趁热过滤，滤液再次转移至提取釜中，通冷却水冷却至35℃，加入2g柚皮苷晶体，搅拌结晶4h，停止搅拌使晶体沉降，从侧孔放出上清液，下层结晶液放入三足式离心机中，脱水，并用少量水洗淋，得到潮湿浅黄色固体约20kg，再次用100kg90℃热水溶解，趁热用硅藻土过滤机过滤，不断搅拌下通冷却水冷却至30℃，有大量白色晶体析出，继续搅拌1h后将结晶液倒入三足式离心机脱水，潮湿固体用烘箱105℃干燥，得类白色结晶性固体11kg，柚皮苷含量为96.5%。

实例4

取干燥柚子幼果粉末10.00 g于250 ml具塞三角瓶中，加入100 ml水，密塞，90 ℃水浴30 min，过滤，滤渣再次用100 ml水提取一次；合并滤液，用1mol/L盐酸调节pH为4~5，将滤液用自来水冷却并不断搅拌，有大量浅黄色固体析出，过滤，105 ℃真空干燥，得到浅黄色的固体粉末2.26 g，柚皮苷含量为94%。

Claims (5)

1.一种柚皮苷的制备纯化方法，其特征在于所述的方法包括下列步骤：收集直径小于5cm柚子幼果，粉碎或粉碎后烘干；取适量粉碎后的柚子幼果，加入1-5倍质量的水（干果用2-10倍质量的水），70-100℃浸泡1.5h，放出浸提液；用同样方法再次浸提1-2次；将浸提液趁热过滤，过滤液应无肉眼可见颗粒；将滤液搅拌冷却，当温度降至30-50℃时加入少量柚皮苷晶种，继续搅拌冷却；当温度低于25℃时，停止冷却，继续搅拌0.5-3h；停止搅拌，待晶体颗粒沉降完全，倒弃上层清液，底部结晶物离心脱水，并用适量冷水洗淋；往所得粗晶体中加入3-20倍水或30%以下的乙醇溶液，并加热至50-100℃使粗晶体溶解；将溶液趁热过滤；所得滤液搅拌冷却，当温度降至30-50℃时加入0.01%-0.1%柚皮苷晶种，继续搅拌冷却，使柚皮苷结晶；当温度低于25℃时，停止冷却，继续搅拌0.5-3h；将结晶液过滤或离心脱水、干燥即得类白色结晶性柚皮苷。

2. 根据权利要求1所述的一种柚皮苷的制备纯化方法，其特征在于所述所用原料为直径小于5cm新鲜柚子幼果或干燥的柚子幼果。

3. 根据权利要求1所述的一种柚皮苷的制备纯化方法，其特征在于所述提取采用的溶剂为水，用量为原料的1-10倍，提取温度为70-100℃，提取时间为1-6h。

4. 根据权利要求1所述的一种柚皮苷的制备纯化方法，其特征在于所述提取液过滤后冷却至30-50℃时，加入晶种（柚皮苷），添加量为0.01%-1%，不断搅拌，促进结晶。

5. 根据权利要求1所述的一种柚皮苷的制备纯化方法，其特征在于所述粗结晶用3-20倍水或0%-30%的乙醇在50-100℃条件下溶解，过滤，冷却，加入晶种重结晶。