CN103992963B - 一种巨大芽孢杆菌及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种巨大芽孢杆菌及其应用，属于微生物领域，该植物促生菌（Bacillus megaterium ZH5），于2014年1月22日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，分类名为巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium），保藏号CGMCC No.8802。该菌株在酸碱环境中均能保持较高活性，能高产吲哚乙酸并能利用难溶性磷酸盐为磷源进行生长，提高肥料的利用率，增加土壤有效磷含量，改善土壤尤其是红壤质量；高产的吲哚乙酸促进植物生长发育，提高植物根系发育和对肥料的吸收，土壤有效磷含量的提高也使植物对磷肥的利用率更高，因此本发明对植物尤其是花生具有良好的促生长效果。

Description

一种巨大芽孢杆菌及其应用

技术领域

本发明属于农业微生物领域，涉及一种巨大芽孢杆菌及其应用。

背景技术

红壤为发育于热带和亚热带雨林﹑季雨林或常绿阔叶林植被下的土壤。其主要特征是缺乏碱金属和碱土金属而富含铁﹑铝氧化物，呈酸性红色。在我国主要分布于长江以南的低山丘陵区，包括：江西、湖南两省的大部分，滇南、湖北的东南部，广东、福建北部及贵州、四川、浙江、安徽、江苏等的一部分，以及西藏南部等地。占全国土地总面积20％以上，人口占全国40％，耕地占全国的30％。红壤地区是我国主要粮食产区和热带-亚热带经济作物—橡胶、油棕、咖啡、可可、柑橘、茶叶、油桐、桑蚕的主要产区，历来在我国农业可持续发展和生态环境建设中发挥着重要作用。但是，由于红壤的主要肥力特征是酸、粘、瘦、旱，施入的磷肥非常容易被红壤中的活性铁、铝固定从而大大地降低了利用率，因此，改善红壤质量，提高磷肥利用率是提高红壤地区农业持续发展的重要课题。

在土壤中许多微生物能够溶解难溶态磷，促进植物对磷的吸收，增加作物产量和改善作物品质，将解磷微生物作为生物肥料，不但可以提高土壤中磷的利用效率，节肥增产，而且可改善土壤结构，提高土壤有机质含量。植物促生菌(PlantGrowthPromotingBacteria，简称PGPB)被界定为在一定条件下有利于植物生长的自由生活在土壤、根际、根表、叶际的细菌。这些细菌能够固氮、溶磷、溶铁，并产生植物激素，如生长素、赤霉素、细胞分裂素和乙烯。此外，它们还能提高植物的抗逆性，包括干旱、高盐、重金属毒害和农药。但现在大部分植物促生菌还未被驯化成可有效应用于促进植物生长并具有较好溶磷效果的菌种，未必适应红壤的土壤环境。因此从红壤中分离得到植物促生菌，和作物形成共生体系，利用生物修复改善红壤，成为当前研究的热点。由于红壤土呈弱酸性，从其他土壤中筛选出来的细菌由于受土壤酸碱度的限制，很难达到预期的溶磷、促生长的目的。如中国专利CN101643704A公开了一种溶磷的草酸青霉菌P8，经过试验证明，在红壤中该菌的存活数小于黑土和潮土中的数量。因此从红壤中分离得到植物促生菌，和作物形成共生体系，利用生物修复改善红壤，成为当前研究的热点。

申请人于2012年申请的专利号为ZL2012102458617的中国专利中虽公开了一株同样具有分泌吲哚乙酸和解磷能力的巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)JX15，但是该菌株无论是产吲哚乙酸的能力还是解磷能力均无法奇迹本发明的促生菌ZH5。更为关键的是，JX15筛选自潮土，其土壤的物化性质、肥力情况和微生物环境与红壤具有较大区别，实验发现，其在促进红壤中作物生长方面的效果并不理想。

发明内容

本发明的目的是提供一种巨大芽孢杆菌，可以有效地将土壤中难溶性磷酸盐转化为可被生物利用的可溶性磷酸盐，促进植物生长，尤其是改善红壤质量，促进植物在红壤中的生长。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：

一种植物促生菌ZH5，分类名为巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)，于2014年1月22日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号CGMCCNo.8802。

植物促生菌ZH5(CGMCCNo.8802)，呈革兰氏阳性，产芽孢，不规则杆状排列。菌落较小为白色、隆起，边缘整齐，表面光滑湿润，不透明(如图1)。严格好氧，化能异养，接触酶阳性，M.R和VP试验阴性，淀粉水解阳性，明胶水解阳性。最适生长温度为30℃,以难溶性磷酸盐为磷源进行生长，并将其转化为可溶性磷酸盐。

本发明的植物促生菌ZH5是从红壤中分离获得，促生菌适应发酵温度为28～32℃，适应酸碱度为pH5～11。

将从江西鹰潭红壤生态站采取的红壤挑根过筛后置于灭菌水中，通过在摇床中保温、振荡、静置，得到土壤悬浮液。该土壤悬浮液中含有若干种促生菌，采用稀释法稀释后涂于LB培养基，将平板倒置，于恒温箱中培养后，挑取不同类型典型单个菌落，经平板纯化后，低温保存在LB斜面待用。通过定性测定和定量测定筛选出可分泌吲哚乙酸的植物促生细菌。

将上述方法筛选分离出的菌株，经上海英俊生物工程有限公司测序，根据16SrDNA的测序结果，在http://www.ncbi.nlm.nih.gov在线查询分析，利用Blast软件在GenBank中与其它的16SrDNA序列进行同源性比较，选择相近的序列与ZH5的序列用MEGAversion3软件构建ZH5的16SrDNA系统进化树。根据该菌株的生理生化特征，鉴定为巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)，同源性为98％。

本发明所述的植物促生菌培养时使用的主要氮源包括但不限于蛋白胨、酵母粉、硝酸钾、硝酸铵、硫酸铵、尿素、丙氨酸；使用的主要碳源包括但不限于蔗糖、木糖、甘露醇、麦芽糖、乳糖、葡萄糖；使用的无机组分包括但不限于氯化钾、氯化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸三钙、二水氯化钙、七水合硫酸镁、七水和硫酸亚铁。

本发明的植物促生菌ZH5能高产吲哚乙酸并能利用难溶性磷酸盐为磷源进行生长。

吲哚乙酸是植物激素的一种，能够促进根的发育。产吲哚乙酸的菌种，往往附着在植物根系或叶表面，利用植物代谢产生分泌物的同时产生IAA和少量GA3等植物激素来影响植物的生理过程和形态变化。表现为直接促进根的伸长，从而增大了与土壤中营养物质的接触的机会；可提高植物体内原IAA的含量；诱导植物防卫基因的表达，提高植物体抗病，抗旱等抗逆性。本发明所述的植物促生菌分泌吲哚乙酸(IAA)的能力强，达43.18μg·mL^-1。所述促生菌的发酵在pH7～10下进行时产IAA量最高。

本发明所述的植物促生菌以难溶性磷酸盐为磷源进行生长，并将其转化为可溶性磷酸盐。在实验室摇瓶条件下，所述植物促生菌对磷酸三钙的转化量达186.15mg·L^-1。相对于采用接种灭活菌作为空白对照的结果，所述植物促生菌对磷酸三钙的转化量比空白对照高出164.72mg·L^-1(图6)。

作为本发明的进一步优化，所述植物促生菌采用的碳源为蔗糖，采用的氮源为酵母粉或蛋白胨或两者的组合。利用上述碳源和氮源制得的培养基，培育出的植物促生菌产IAA的量最高。

本发明的植物促生菌ZH5在促进植物生长中的应用，优选的是促进红壤中花生的生长。通过室内盆栽实验，将ZH5接种到盆栽中，能够很好的促进花生的生长，相对于对照与接种其它植物促生菌，花生株高分别高出10.48cm和9.18cm,花生植株重分别高出2.34g和1.83g。

本发明的植物促生菌ZH5在植物栽培中的应用，优选的是在红壤中花生栽培的应用。通过室内盆栽实验，将ZH5接种到盆栽中，与对照相比能够提高红壤的速效磷和IAA含量，促进花生的生长。

本发明的植物促生菌ZH5在植物促生剂的应用，优选的是生长于红壤中花生的促生剂。通过盆栽实验，接种ZH5不仅能够分泌IAA促进花生的生长而且能够促进红壤中难溶性磷的转化，因此可以将ZH5制备成促生剂尤其适应于红壤环境的促进剂，即含有本实验的巨大芽孢杆菌。

本发明的有益效果为：

本发明提供的植物促生菌即ZH5(CGMCCNo.8802)，高产吲哚乙酸并能将难溶性磷酸盐转化为可溶性磷酸盐，提高肥料的利用率，促进植物根系发育和对肥料的吸收，增加土壤有效磷含量，改善红壤栽培环境；本发明对植物尤其是花生具有良好的促生长效果，高产的吲哚乙酸促进花生的生长发育，土壤有效磷含量的提高也使得花生对磷肥的利用率更高。与根际促生菌JX15(CGMCCNo.5622)比较，产吲哚乙酸能力、解磷能力有极显著提高，在促进红壤中花生的生长方面更是产生了预料不到的技术效果。

附图说明

图1是本发明菌株ZH5的菌落图

图2表示不同装液量对菌株ZH5产IAA的影响

图3表示不同初始pH对ZH5菌株产IAA的影响

图4表示不同碳源对菌株ZH5产IAA的影响

图5表示不同氮源对ZH5菌株产IAA的影响

图6表示菌株ZH5对难溶性磷的利用情况

图7表示种植花生30天后接种ZH5菌株和JX15菌株对花生鲜重的影响

图8表示种植花生30天后接种ZH5菌株和JX15菌株对花生株高的影响

图9表示种植花生30天后接种ZH5菌株和JX15菌株对花生植株全P含量的影响

图10表示种植花生30天后接种ZH5菌株和JX15菌株对花生根总长的影响

图11表示种植花生30天后接种ZH5菌株和JX15菌株对花生根表面积的影响

图12表示种植花生30天后接种ZH5菌株和JX15菌株对花生根平均直径的影响

图13表示种植花生30天后接种ZH5菌株和JX15菌株对花生根尖数的影响

图14表示种植花生30天后接种ZH5菌株和JX15菌株对土壤IAA含量的影响

图15表示种植花生30天后接种ZH5菌株和JX15菌株对土壤有效P含量的影响

生物材料保藏信息

植物促生菌ZH5，分类命名为巨大芽孢杆菌(BacillusmegateriumZH5)，于2014年1月22日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏号CGMCCNo.8802。

根际促生菌JX15，分类命名为巨大芽孢杆菌(BacillusmegateriumJX15)，于2011年12月20日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏号CGMCCNo.5622。

具体实施方式

实施例1

1.培养基准备，包括以下四种类型的培养基：

LB培养基：蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠10g，琼脂20g，蒸馏水1000ml，pH7.0-7.2，121℃灭菌，20min。

LB液体培养基：不加琼脂，其它条件同上。

无机磷细菌培养基(PKO培养基)：磷酸三钙5g，葡萄糖10g，硫酸铵0.5g，氯化钠0.3g，七水合硫酸镁0.3g，氯化钾0.3g，硫酸锰0.03g，七水合硫酸亚铁0.03g，pH7.0琼脂20g，蒸馏水1000ml，pH7.0～7.2。121℃灭菌，20min。

无机盐培养基：硫酸铵2.0g；磷酸二氢钠0.5g；磷酸氢二钾0.5g；七水硫酸镁0.2g；二水氯化钙0.1g，蒸馏水1000mL，pH7.0，121℃灭菌，20min。

2.促生菌分离

将从江西鹰潭红壤生态站采取的红壤挑根过筛后称取l0g置于盛有100ml灭菌水的250ml的三角瓶中，在摇床中，30℃，150r·min^-1振荡20min，静置10min，得到土壤悬浮液。该土壤悬浮液中含有若干种促生菌，采用稀释法稀释后涂于LB培养基，将平板倒置，于30℃，恒温箱中培养24h后，挑取不同类型典型单个菌落，经平板纯化后，4℃保存在LB斜面待用。

3.促生菌筛选

1)产吲哚乙酸菌定性测定：将分离纯化后的细菌接种于采用含有L-色氨酸(100mg/L)的LB液体培养基，30℃，180r·min^-1摇床培养1d。取50μL菌悬液滴于白色陶瓷板上，同时加50μLSalkowski比色液(50mL35％HClO4+1mL0.5MFeCl3)。将加入50μL50mg/L吲哚乙酸的比色液作为阳性对照。白色陶瓷板于室温避光放置30min后观察，颜色变红者表示能够分泌吲哚乙酸。

2)产吲哚乙酸菌定量测定：对初筛获得的分泌IAA的细菌进行定量测定，培养条件同上。首先用分光光度法测定菌悬液的OD600值，然后将菌悬液以10000r·min^-1离心10min取上清液加入等体积Salkowski比色液，避光静置30min，测定其OD530值。计算菌浓度OD600值为1时，单位体积发酵液中吲哚乙酸的含量。标准曲线的绘制采用分析纯的吲哚乙酸梯度稀释制备。

3)溶磷菌筛选：将供试菌株接种于盛有30mL无机磷细菌液体培养基的150mL三角瓶，30℃，180r·min^-1培养4d后，将培养液装入离心管4℃下10000r·min^-1离心，15min。取上清液用钼蓝比色法测定有效磷含量。首先吸取离心后的上清液0.5ml于50ml容量瓶中，加水稀释至约30ml，加二硝基酚指示剂2滴，用氢氧化钠及稀硫酸溶液调节PH至溶液刚呈微黄色。然后加入钼锑抗显色剂5ml，摇匀，用水定容。在室温下放置30min后，在分光光度计上用波长700nm比色。读取吸收值，在工作曲线上查出显色液的Pmg/L数。

通过以上测定即可筛选出高产吲哚乙酸，并且溶磷能力强的菌株，株型命名为ZH5。

将上述方法筛选分离出的菌株，经上海英俊生物工程有限公司测序，根据16SrDNA的测序结果，在http://www.ncbi.nlm.nih.gov在线查询分析，利用Blast软件在GenBank中与其它的16SrDNA序列进行同源性比较，选择相近的序列与ZH5的序列用MEGAversion3软件构建ZH5的16SrDNA系统进化树。根据该菌株的生理生化特征，鉴定为巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)，同源性为98％。将该菌株送交中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCCNo.8802。

实施例2

好氧性试验

把灭过菌的LB培养基倒入3个已灭菌的试管中，大约在2/3处，在无菌操作台上，用接种针挑取斜面培养的所述菌，穿刺接种到上述培养基中(必须穿刺到管底)。30℃培养，分别在3天至7天观察结果。在琼脂柱表面上生长者为好氧菌，如沿穿刺线生长者为厌氧菌或兼性厌氧菌。试验结果表现，ZH5(CGMCCNo.8802)菌落沿琼脂柱表面生长，穿刺线内无菌落生长，为严格好氧。

过氧化氢酶的测定

在干净载玻片上滴1滴3％H2O2，取18～24h的LB斜面培养物1环，在H2O2中涂抹，若有气泡产生则为阳性，否则为阴性。试验结果显示ZH5(CGMCCNo.8802)为接触酶阳性。

甲基红试验(M.R试验)

a.培养基及试剂：蛋白胨5g，葡萄糖5g，氯化钠5g，蒸馏水1000mL，调节pH7.0～7.2，分装试管，每管装4～5mL，121℃灭菌20min。试剂：甲基红0.1g，95％酒精300mL，蒸馏水200mL。

b.菌种培养及结果观察接种菌株于上述培养液中，30℃培养l～2天。在培养液中加入几滴甲基红试剂，如培养液呈现红色，为甲基红阳性，黄色为阴性(甲基红变色范围4.4红色～6.0黄色)。

试验结果显示ZH5(CGMCCNo.8802)为M.R阴性。

乙酞甲基甲醇试验(VP试验)

a.培养基培养基同甲基红试验。

b.菌种培养及结果观察接种与培养同甲基红试验。做VP试验时，取培养液(约2mL)和等量的40％NaOH相混合，加少量肌酸，充分振荡2～5min后，如培养液出现红色，即为VP阳性。

试验结果显示ZH5(CGMCCNo.8802)为VP阴性。

淀粉水解试验

a.培养基及试剂在肉汤蛋白胨琼脂中添加0.2％的可溶性淀粉，分装三角瓶，121℃灭菌20min备用。路哥氏碘液：碘片1g，碘化钾2g，先用少量(3～5mL)蒸馏水溶解碘化钾，现加入碘片，待碘完全溶解后，加水稀释至300mL。

b.菌种培养及结果观察取菌种点接于平板上，30℃培养2～4天，形成菌落后，在平板上滴加路哥氏碘液，以铺满菌落周围为度，平板呈蓝色，而菌落周围如有无色透明圈出现，说明淀粉已被水解。透明圈的大小一般说明水解淀粉能力的大小。

试验结果显示ZH5(CGMCCNo.8802)为淀粉水解阳性。

明胶水解试验

a.培养基及试剂蛋白胨5g，明胶120g，蒸馏水1000mL。调节pH7.2～7.4，分装试管，培养基高度约为4～5cm，121℃灭菌20min。

b.菌种培养及结果观察用穿刺法接种在试管中央。在30℃温箱中培养一个月，观察明胶是否液化。

试验结果显示ZH5(CGMCCNo.8802)为明胶水解阳性。

实施例3

为了进一步验证实施例1得到的植物促生菌ZH5产吲哚乙酸的能力和最适条件，下面针对不同装液量、pH、不同碳源、不同氮源探索对吲哚乙酸产量的影响。

将含有L-色氨酸(100mg/L)LB液体培养基按25ml，50ml，75ml，100ml，150ml装于250mL的三角瓶中，按1％(v/v)接种量接种处于对数生长期的ZH5后，置于30℃，180r·min^-1摇床培养24h，按定量测定的方法测定产IAA的量。结果如图2所示，由于菌株ZH5(CGMCCNo.8802)是好养代谢，通气量影响菌株产IAA的效率，50mL装液量时，菌株产IAA量最多，之后随着装液量增大，产量越少。

将含有L-色氨酸(100mg/L)的LB培养基分别调节到不同的pH(4、5、6、7、8、9、10、11、12)，取50mL装于250mL的三角瓶中，按1％(v/v)接种量接种处于对数生长期的ZH5(CGMCCNo.8802)后，置于30℃，180r·min^-1摇床培养24h，按定量测定的方法测定产IAA的量，结果如图3所示，表明pH为4和12时不产IAA，在强酸强碱环境中，菌体无法进行生长代谢，菌种在微碱环境中产IAA多于酸性环境，该菌种高产IAA的最适pH为8～10。

在含有L-色氨酸(100mg/L)无机盐培养基中分别加入1％(w/v)的碳源，碳源有葡萄糖、木糖、蔗糖、甘露醇、乳糖、麦芽糖等，取50ml装于250ml的三角瓶中，按1％(v/v)接种量接种处于对数生长期的ZH5(CGMCCNo.8802)后，置于30℃，180r·min^-1摇床培养24h，按定量测定的方法测定产IAA的量。结果如图4所示，该菌株在供给蔗糖时，产IAA的能力最强，其次是甘露醇，木糖的利用率最低，几乎不产IAA。

在含有L-色氨酸(100mg/L)无机盐培养基(不包括硫酸铵)中分别加入0.1％(w/v)的氮源，氮源包括硝酸铵、硫酸铵、硝酸钾、蛋白胨、酵母粉、尿素、丙氨酸等，取50ml装于250ml的三角瓶中按1％(v/v)接种量接种处于对数生长期的ZH5(CGMCCNo.8802)后，置于30℃，180r·min^-1摇床培养24h，按定量测定的方法测定产IAA的量。结果如图5所示，说明取酵母粉为氮源时，产IAA的量最多。

实施例4

本发明对花生具有明显促生长作用，下面通过盆栽试验进行说明。

红壤获得和含磷测定：采集自然条件下0～20cm土层的新鲜红壤，过5mm筛，每盆装土200g，种植花生，调节含水量至田间最大持水量的60％，30天后采样，用根系扫描仪(LA1600+scanner，Canada)扫描获得根系图像后，用根系分析软件(Winrhizo2003b，Canada)进行相关根系指标分析，用HPLC法测定土壤IAA含量，用钼蓝比色法测定土壤有效磷含量。

花生种子处理：花生种子进行20％双氧水表面消毒20min，无菌水冲洗多次，催芽2d，选取发芽一致的种子备用。

接菌处理：将本发明的ZH5(CGMCCNo.8802)接种于LB液体培养基，30℃，180r·min^-1摇床培养，培养菌长至对数生长期，然后将菌悬液10000r·min^-1离心10min，再用无菌水重悬同样离心三次，接种量为108CFU·g^-1。

对照处理：作为对照1，土壤不喷洒ZH5(CGMCCNo.8802)菌液，加等量无菌水即对照CK。为对比ZH5(CGMCCNo.8802)的效果，增加其他植物促生菌作为对照2(保藏号CGMCCNo.5622的巨大芽孢杆菌JX15)。

结果如图7、图8、图9、图10、图11、图12、图13、图14、图15所示。从图7图8可以看出，与对照1(CK)相比，经接菌处理后，植株的株高及地上部鲜重增加了10.48cm和2.34g，促进了花生生长，与对照2(JX15)相比，接种巨大芽孢杆菌ZH5的植株的高及地上部鲜重分别增加了9.18cm和1.83g；从图9可以看出，经接种处理后，花生植株的全磷含量较对照组明显增加，与对照1(CK)相比，花生植株全磷含量增加了2.8g/kg，与对照2(JX15)相比，花生植株全磷含量增加了2.13g/kg；从图10、图11、图12、图13可以看出，接种ZH5处理与不接菌处理、接种ZH5处理与接种JX15进行对比，花生根系总长度，根表面积，根平均直径和根尖数都显著增加，促进了花生根系的发育，并且与JX15相比，ZH5对花生根系有更好的促进效果；从图14可以看出，经接菌处理后，土壤IAA含量显著增加，比对照组分别高出0.47mg/kg和0.29mg/kg；从图15可以看出，经接菌ZH5处理后，土壤有效磷含量有所提高，与对照1(CK)相比土壤速效磷含量增加了2.62mg/kg，与对照2(JX15)相比土壤速效磷含量增加了2.31mg/kg。

结合以上结果可以看出，本发明的植物促生菌ZH5对根基的生长、发育具有明显效果，解磷能力好，IAA产量高，可以有效促进作物生长发育。并且ZH5与植物促生菌JX15相比，对环境有更好的适应能力，能适应红壤土壤环境，改善红壤土壤质量，对植物生长尤其是红壤中花生的生长ZH5有更显著的促进效果。

结合本文以上所述，巨大芽孢杆菌ZH5与植物促生菌JX15相比，ZH5不仅在酸性环境中生存发挥对植物的促生效应，而且在碱性环境中也有更好的促生效应。所以巨大芽孢杆菌ZH5有更好的推广范围，对植物的生长环境比JX15适应范围更大。

可以知道，上述实施例仅为了说明发明原理而采用的示例性实施方式，然而本发明不仅限于此，本领域技术人员在不脱离本发明实质情况下，可以做出各种改进和变更，这些改进和变更也属于本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种植物促生菌巨大芽孢杆菌（Bacillusmegaterium）ZH5，于2014年1月22日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号CGMCCNo.8802。

2.权利要求1所述的巨大芽孢杆菌ZH5在促进红壤中植物生长中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于权利要求1所述的巨大芽孢杆菌ZH5在促进红壤中花生生长的应用。

4.权利要求1所述的巨大芽孢杆菌ZH5在红壤中植物栽培中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于权利要求1所述的巨大芽孢杆菌ZH5在红壤中花生栽培的应用。

6.权利要求1所述的巨大芽孢杆菌ZH5在制备红壤中植物促生剂中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于所述植物促生剂为花生促生剂。