CN103966124A

CN103966124A - 一种复合微生态制剂、添加剂及其预混料

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Publication number: CN103966124A
Application number: CN201410167179.XA
Authority: CN
Inventors: 陆黎明; 张立彬; 黄梅丹; 戴佳佳; 温灿权; 谢燕婷; 贠桂玲; 韩科厅
Original assignee: Zhangzhou Dabeinong Agriculture & Pasture Technology Co Ltd; Beijing Dabeinong Technology Group Co Ltd
Current assignee: Zhangzhou Dabeinong Agriculture & Pasture Technology Co Ltd; Beijing Dabeinong Biotechnology Co Ltd
Priority date: 2014-04-23
Filing date: 2014-04-23
Publication date: 2014-08-06

Abstract

本发明涉及一种复合微生态制剂，具体涉及含枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌的复合微生态制剂及其在猪日粮中的应用，属于微生态制剂技术领域。本发明复合微生态制剂包含枯草芽孢杆菌CGMCC No.8148菌粉和植物乳杆菌CGMCC No.8150菌粉。本发明的复合微生态制剂可应用于仔猪、母猪、种公猪、育肥猪，能提高饲料利用效率，改善肠道微生态区系，促进猪生长，提高其免疫力和抗病力，替代抗生素，从而改善猪肉品质。

Description

一种复合微生态制剂、添加剂及其预混料

技术领域

本发明涉及一种复合微生态制剂，主要涉及含枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌的复合微生态制剂及其在猪日粮中的应用，属于微生态制剂技术领域。

背景技术

目前，对动物疾病的预防和治疗药物基本仍采用抗生素，但由于长期、大量使用抗生素，致病菌耐药性增强、菌群失调、免疫力下降、疾病复发率高、药物残留等种种弊端日益严重，同时也严重危害动物机体及人类健康。在此形势下，改变养殖观念、预防重于治疗，并开发应用无毒、无药残的新型绿色饲料添加剂是必然趋势。

微生态制剂是目前常用和研究较多的一种绿色、安全的饲料添加剂，此类制剂是用动物有益菌经工业化高密度发酵生产得到的，包含有很多的有益微生物及其代谢产物构成的活菌制剂，可以直接饲喂动物。微生态制剂通过维持肠道内微生态平衡而发挥作用，具有防病、增强机体免疫力、促进生长、增加体重等多种功能，且无污染，无残留，不产生抗药性，是一种绿色、安全的饲料添加剂。

市场上的微生态产品种类繁多，质量参差不齐，主要存在以下几个问题：(1) 活菌含量低，而研究表明，如果一种菌在盲肠内容物中的浓度少于10⁷cfu/g，则该菌产生的酶及其代谢产物不足以影响宿主，难以满足治疗需要；(2) 水分含量偏高，这样使得微生态制剂的保质期大大缩短，也是影响微生态制剂质量不好的重要原因之一；(3) 不耐抗生素；(4)对胃酸和胆盐不稳定，致使只有少数菌株进入肠道后仍具有活性，达不到发挥作用所需的活菌数量。由于微生态制剂存在的这些质量问题，从而影响了其在动物饲喂中的应用效果，限制了微生态制剂的广泛应用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种活菌含量高、水分含量低、具有耐胃酸、耐肠液、耐胆盐、耐高温等抗逆性能和产酸、产酶及抑制病原菌等益生功能的含枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌益生菌的复合微生态制剂。

首先，本发明提供一种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)新菌株，其保藏号为CGMCC No.8148。

其次，本发明提供一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum) 新菌株，其保藏号为CGMCC No.8150。

本发明还提供一种复合微生态制剂，该制剂包含枯草芽孢杆菌CGMCC No.8148菌粉和植物乳杆菌CGMCC No.8150菌粉。

其中，制剂中总活菌数为3~6×10^8-11cfu/g。

其中，枯草芽孢杆菌CGMCC No.8148菌粉、植物乳杆菌CGMCC No.8150菌粉的重量配比为1：0.8~1.2。

本发明的复合微生态制剂还可进一步包含载体，载体为石粉、葡萄糖、麸皮、玉米芯粉、米糠粕中的任一种或几种。

在本发明具体实施方案中，本发明的复合微生态制剂包含枯草芽孢杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉，载体为石粉，上述各成分的重量配比为1：0.8~1.2：4~6，即可制成猪通用型复合微生态制剂，总有益菌数达3~6×10⁹cfu/g；

复合微生态制剂包含：枯草芽孢杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉和葡萄糖，上述各成分的重量配比为：1：0.8~1.2：2~3，即制成仔猪专用型复合微生态制剂，总有益菌含量3~6×10⁹cfu/g；

复合微生态制剂包含：枯草芽孢杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉和麸皮，上述各成分的重量配比为：1：0.8~1.2：2~3，即制成母猪专用型复合微生态制剂，总有益菌含量3~6×10⁹cfu/g；

复合微生态制剂包含：枯草芽孢杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉和玉米芯粉，上述各成分的重量配比为1：0.8~1.2：2~3，即制成种公猪专用型复合微生态制剂，益生菌总菌含量可达3~6×10⁹cfu/g。

复合微生态制剂包含：枯草芽孢杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉和米糠粕，上述各成分的重量配比为1：0.8~1.2：2~3，即制成育肥猪专用型复合微生态制剂，益生菌总菌含量可达3~6×10⁹cfu/g。

本发明还提供含有所述微生态制剂的饲料添加剂。

其中，所述的添加剂还可含有本领域常规使用的饲料添加剂类型，如现有已经添加到饲料中的中草药添加剂、多糖，如香菇多糖、灵芝多糖等。

本发明还提供了包含该复合微生态制剂的预混料，其中，预混料中复合微生态制剂添加的质量体积比为0.5-10‰。

本发明的另一目的在于提供该复合微生态制剂在猪日粮中应用。

其中，所述的枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌具有良好的耐胃酸、耐肠液、耐胆盐（芽孢杆菌耐高温）等抗逆性能和产酸、产酶、抑制病原菌等益生功能，为申请人从健康动物肠道中分离、选育得到，并于2013年9月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号分别为：CGMCC No.8148、CGMCC No.8150。

本发明所选育的枯草芽孢杆菌CGMCC No.8148在人工模拟胃液（pH2.0~4.0）中处理3h，存活率在65.8%以上；在人工模拟肠液中处理3h，存活率在74.7%；在猪胆盐溶液（浓度0.3~3g/kg）处理24h，存活率为51.2%以上；85~100℃处理3min，存活率为11.2%以上；对链霉素、多粘菌素B、林可霉素3种抗生素有耐药性；可以产生一定量的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶、木聚糖酶，且效果均优于申请号201110116641.X中所用的枯草芽孢杆菌CGMCC No.4628。

本发明所选育的植物乳杆菌CGMCC No.8150在人工模拟胃液（pH2.0~4.0）中处理3h，存活率在31.3%以上；在人工模拟肠液中处理3h，存活率在33.0%；在猪胆盐溶液（浓度0.3~3g/kg）处理24h，存活率为3.7%以上；对头孢吡肟、庆大霉素、大观霉素、链霉素、多粘菌素B、环丙沙星、万古霉素7种抗生素有耐药性；对大肠杆菌K88、K99均有很好的抑制作用，抑菌圈直径分别为18.60mm、15.43mm。

本发明中所选育的枯草芽孢杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉在制备中采用液体深层高密度发酵技术和喷雾干燥或者冷冻干燥一系列的后处理加工工艺技术制成菌粉，制剂中的活菌含量高、水分含量低，具有耐胃液、耐肠液、耐胆盐、耐高温等抗逆性能和产酸、产酶及抑制病原菌等益生功能。

本发明的复合微生态制剂可应用于仔猪、母猪、种公猪、育肥猪，能提高饲料利用效率，改善肠道微生态区系，促进猪生长，提高其免疫力和抗病力，替代抗生素，从而改善猪肉品质。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1优良菌种的的分离、筛选、选育及鉴定

1）增菌培养：将健康猪的新鲜肠道内容物样品接种于LB液体培养基中，在37℃恒温培养增殖48h；

2）枯草芽孢杆菌的分离纯化：对步骤1）增菌培养物80℃水浴20min，然后取处理液倍比稀释、涂布于LB培养基中37℃培养24h，从中挑取各个具有特征形态的菌落，再划线培养和分离，直至为纯菌落为止，革兰氏染色镜检，将分离的疑似纯菌落接种试管斜面中增殖，然后保存于4℃冰箱中，待用；

菌落形态：菌落圆整，表面光滑，呈乳白色，大小1~3mm；细胞圆形或卵圆形，直径0.5~1.0um，大多数成短链或对，革兰氏染色阳性。

经鉴定，分离出的菌株为枯草芽孢杆菌，并于2013年9月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏号为CGMCC No.8148。

3）植物乳杆菌的分离纯化：对步骤1）增菌培养基倍比稀释、涂布于MRS培养基中37℃培养36~48h，从中挑取各个具有特征形态的菌落再划线培养和分离，直至为纯菌落为止，革兰氏染色镜检，将分离的疑似纯菌落接种试管斜面中增殖，然后保存于4℃冰箱中，待用；

菌落形态：菌落为软而湿润，乳酪色、有光泽、平坦或稍凸起、边缘整齐；细胞为球形或卵形，直径5~10μm，繁殖方式芽殖。

经鉴定，分离出的菌株为植物乳杆菌，并于2013年9月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏号为CGMCC No.8150。

实施例2 2株优良菌种的抗逆性和生物学性能测定

2株菌种：枯草芽孢杆菌CGMCC No.8148和植物乳杆菌CGMCC No.8150的生物学性能和抗逆性能测定：

1）枯草芽孢杆菌CGMCC No.8148和地衣芽孢杆菌CGMCC No.2383培养物的制备：将冰箱保藏的斜面菌种接种到LB种子培养基中活化，35℃、100rpm培养16h，即得；

2）植物乳杆菌CGMCC No.8150培养物的制备：将冰箱保藏的斜面菌种接种到MRS种子培养基中活化，30℃、150rpm培养16h，即得；

3）耐酸性测定：将上述制备的培养物按10%接种量分别接种于pH值2.0、3.0、4.0的人工模拟胃液中，重新调pH值为2.0、3.0、4.0，0h计数作对照，3h取样用0.85%生理盐水按10倍系列稀释，进行平板活菌计数，计算存活率。

本发明选育的2株菌种：枯草芽孢杆菌CGMCC No.8148和植物乳杆菌CGMCC No.8150在胃酸中存活率结果见表1。

人工模拟胃液的制备：量取9.5%~10.5%浓盐酸16.4毫升，加蒸馏水至1000毫升，做基础人工胃液，用盐酸或氢氧化钠调pH值2.0、3.0、4.0，121℃下蒸汽灭菌15分钟，按1%添加量添加胃蛋白酶，通过0.22μm无菌滤膜，制成人工胃液，取5mL（4.5mL）分装于试管中。

表1　2株菌种在人工模拟胃液中的存活率

4）耐肠液测定：将上述制备的培养物按5%接种量分别接种于人工模拟肠液中，0h计数作对照，3h取样用0.85%的生理盐水按10倍系列稀释，进行平板活菌计数，计算存活率。

本发明选育的2株菌种：枯草芽孢杆菌CGMCC No.8148、植物乳杆菌CGMCC No.8150，及实验室保存的地衣芽孢杆菌CGMCC No.2383在肠液中存活率结果见表2。

人工模拟肠液的制备：称取6.8g，加蒸馏水至1000毫升，做基础人工肠液， 121℃下蒸汽灭菌15分钟，按1%添加量添加胰蛋白酶，通过0.22μm无菌滤膜，制成人工胃液，取5mL（4.5mL）分装于试管中。

表2　2株菌种在人工模拟肠液中的存活率

	存活率/%
		处理时间	3h
枯草芽孢杆菌CGMCC No.8148	74.7
		植物乳杆菌CGMCC No.8150	33.0

5）耐胆盐测定：将上述制备的3株菌种的培养物，按10%接种量分别接种于0.03%、0.1%、0.2%、0.3%不同浓度猪胆盐的LB溶液中，0h计数作对照，24 h取样用0.85%生理盐水按10倍系列稀释计数，进行平板活菌计数，计算存活率。

本发明所选育的2株菌种：枯草芽孢杆菌CGMCC No.8148、植物乳杆菌CGMCC No.8150，及实验室保存的地衣芽孢杆菌CGMCC No.2383在胆盐中存活率结果见表3。

胆盐的制备：在配好的LB液体培养基中添加0.03%、0.1%、0.2%、0.3%不同浓度的猪胆盐，121℃下蒸汽灭菌30分钟，在无菌条件下，分别取5mL 0.03%、0.1%、0.2%、0.3%不同浓度的猪胆盐溶液分装于试管中。

表3　2株菌种在不同浓度猪胆盐中处理24h的存活率

6）芽孢杆菌耐高温测定：将上述制备的2株芽孢杆菌菌种的培养物，分别于85℃、90℃、95℃、100℃水浴处理3min，计算存活率。

表4　枯草芽孢杆菌在不同高温处理3min的存活率/%

7）耐药性测定：采用药敏纸片法。

表5　2株菌种的耐药性测定结果

8）芽孢杆菌的产酶测定：

采用平板透明圈法。分别在纤维素酶培养基、蛋白酶培养基、淀粉酶培养基、木聚糖酶培养基和脂肪酶培养基上点种分离的芽孢杆菌，每种处理设3个重复, 37℃培养36h, 观察平板透明圈的有无及大小，若在菌落周围形成透明的菌落或者模糊圈，则证明芽孢杆菌可以产生相应的酶，用游标卡尺分别测量透明圈直径（H）和菌落直径（C），计算两者比值（H/C）。将申请号201110116641.X中所用的枯草芽孢杆菌CGMCC No.4628作为对照，同时检测以上这5个酶的H/C比值。

表6　枯草芽孢杆菌菌种的产酶测定结果

	枯草芽孢杆菌CGMCC No.8148比值 (H/C)	枯草芽孢杆菌CGMCC No.4628比值 (H/C)
			蛋白酶	2.21	1.76
淀粉酶	2.86	2.09
			脂肪酶	1.30	0.87
纤维素酶	3.40	2.98
			木聚糖酶	7.13	5.25

9）产酸测定：

采用碳酸钙平板对植物乳杆菌CGMCC No.8150进行有机酸产量测定；

表7　植物乳杆菌菌种的产酸测定结果

	植物乳杆菌CGMCC No.8150比值(H/C)
		产酸试验	1.88

10）抑菌试验：采用牛津杯法对常见致病菌进行抑菌测定。

a、在装有10mL营养肉汁培养基的试管中活化两株致病菌：K88、K99，37℃恒温培养20h；

b、双层平板的制备：取直径90 mm的平板，注入灭菌的营养琼脂15~20mL，水平放置使之凝固，作为底层，另取营养琼脂(冷至50℃左右)与37℃24h培养的指示菌液适量(50 mL培养基加8mL左右)混匀，吸取10 mL浇在底层培养基上，水平放置使之凝固，作为菌层；

c、加样品：用无菌镊子夹取已灭菌的牛津杯，打开皿盖，放在培养基上。在牛津杯中加满相同量的发酵液上清液(约200uL)，每个样品2个重复。将加完样的双碟小心放入37℃恒温箱内，培养16~18h后，取出测量抑菌圈大小。

表8　植物乳杆菌对常见致病菌的抑菌结果

实施例3 植物乳杆菌菌粉的制备

1) 平板培养复壮：将植物乳杆菌菌种接种于MRS 平板培养基上，于37℃培养16h，使植物乳杆菌菌复壮，并形成单菌落，挑取单菌落于接种培养基上，37℃培养14h ；

2) 一级种子的制备：将步骤1) 培养的植物乳杆菌菌种转接装有300ml MRS 液态培养基2L 摇瓶里，37℃静置培养18h，至对数后期，得一级种子；

3) 二级种子的制备：将步骤2) 制备的一级种子转接到装有75LMRS 种子培养基的100L 种子罐中，温度37℃，转速80rpm，培养18h，得二级种子液。

4) 植物乳杆菌发酵液的制备：将步骤3) 制备的二级种子液按照1.5％的接种量接种到0.75m³ 发酵培养基的发酵罐中，温度37℃，转速80rpm，罐压0.05Mpa，通风比：1 ：0.2，培养18h，得到活菌数为4.67×10⁹cfu/ml 植物乳杆菌发酵液。

所述的发酵培养基为：葡萄糖2％，大豆蛋白胨1.8％，酵母膏1.5％，硫酸铵0.75％，磷酸氢二钾0.4％、氯化钠0.6％，硫酸镁0.04％；

植物乳杆菌菌粉的制备：将步骤4) 制备的发酵液，4000rpm 离心，得到菌泥，加入与菌泥的质量/ 体积百分比为20％的冻干保护剂，混匀，于-40℃冷冻干燥，得到水分含量为4.5％的植物乳杆菌菌粉。

冻干保护剂的组成为：脱脂奶粉、甘油、乳糖、玉米淀粉和谷氨酸钠的混合物，按照脱脂奶粉：甘油∶乳糖∶玉米淀粉∶谷氨酸钠＝ 2：1：1：0.8 的比例混合而成。

实施例4 枯草芽孢杆菌菌粉的制备

1) 平板培养复壮：将枯草芽孢杆菌菌种接种于BPY 平板培养基上，于37℃培养18h，使枯草芽孢杆菌复壮，并形成单菌落，挑取单菌落于接种培养基上，37℃培养30h ；

2) 一级种子的制备：将步骤1) 培养的枯草芽孢杆菌菌种转接茄子瓶BPY 斜面培养基上，36℃培养14h，使处于对数后期，得一级种子；

3) 二级种子的制备：将步骤2) 制备的一级种子用无菌水制成菌悬液，接种到装有60L BPY 种子培养基的100L 种子罐中，温度37℃，转速300rpm，罐压0.05MPa，通风比：1 ∶ 0.8，培养12h，得二级种子液。

4) 枯草芽孢杆菌发酵液的制备：将步骤3) 制备的二级种子液按照1％的接种量接种到6m³ 发酵培养基的发酵罐中，温度30-40℃，转速280rpm，罐压0.05Mpa，通风比：1 ∶ 0.8，培养24h，得到芽孢生成率90％以上，活菌数为5.48×109cfu/ml 的枯草芽孢杆菌发酵液；

所述的发酵培养基为：葡萄糖1.5％，大豆蛋白胨1.5％，豆粕1.5％，硫酸铵0.75％，氯化钠0.6％，硫酸镁0.05％；pH 自然。

5) 枯草芽孢杆菌菌粉的制备：在步骤4) 制备的发酵液中加入25％的填充物玉米淀粉，混匀，进行喷雾干燥，进风温度165℃，排风温度60℃，雾化器转速16000rpm，得到水分含量3.85％的枯草芽孢杆菌菌粉。

实施例5复合微生态制剂的制备

表9　复合微生态制剂的制备

实施例6仔猪专用型复合微生态制剂对仔猪的功效试验

试验材料：断奶仔猪（漳州长泰晋祥和猪场）；实施例5制取的仔猪专用型复合微生态制剂

试验动物分组：选择同品种、同胎次、出生日期接近（3天内）、体重相近的仔猪72头，按照随机的原则分为4组，即：空白对照组、抗生素组、仔猪专用型复合微生态制剂组和微生态制剂（申请号201110116641.X中所用的枯草芽孢杆菌）对照组。每组36头断奶仔猪，设3个重复（每栏6头）。

试验周期：试验阶段为断奶后30日龄-50日龄，试验期20天。

试验方法

空白对照组：本场常规仔猪日粮。

抗生素组：本场常规仔猪日粮的基础上，另外添加100g/T阿散酸。

试验组：本场常规仔猪日粮的基础上，另外添加0.2%仔猪专用型复合微生态制剂。

微生态制剂（申请号201110116641.X中所用的枯草芽孢杆菌）对照组：本场常规仔猪日粮的基础上，另外添加10⁸CFU/Kg申请号201110116641.X中所用的枯草芽孢杆菌复合微生态制剂。

测定指标与方法

试验称重：试验前和试验结束时按每栏猪进行空腹称重，并记录，试验结束后计算日增重、料肉比、腹泻率等。

试验结果

本发明复方中草药饲料添加剂对断奶仔猪生产性能的影响。见表10。

表10 仔猪专用型复合微生态制剂对断奶仔猪生产性能的影响

组别	初始重（kg）	终末重（kg）	日增重（g）	料肉比	腹泻率（%）
						空白对照组	12.1 ± 0.35	20.39±0.60	414.5±32.7	1.80	27.2
抗生素组	11.8±0.41	21.47±0.34	483.5±37.2	1.73	8.9
						试验组	11.7 ± 0.29	21.86 ± 0.44	508 ±28.1	1.71	8.3
微生态对照组	12.2±0.30	20.96±0.51	438.0±27.6	1.76	16.4

以上的试验结果表明，使用本发明技术生产的仔猪专用型复合微生态制剂能够有效大幅度减少仔猪断奶后腹泻的发生率，提高仔猪生长速度，改善饲料转化利用效率。且效果要优于微生态制剂（申请号201110116641.X中所用的枯草芽孢杆菌）对照组，能够部分替代抗生素。

实施例7 母猪专用型复合微生态制剂对哺乳母猪的功效试验

1、试验方法

试验猪的选择：从漳州长泰晋祥和猪场选择临产前1周左右分娩的母猪，选取健康无病、年龄、胎次、体重基本一致的猪96头随机分成两组，空白对照组、试验组和微生态对照组各32头。

饲料组成：

空白对照组：本场常规哺乳母猪日粮。

试验组：本场常规哺乳母猪日粮的基础上，另外添加0.2%母猪专用型复合微生态制剂。

微生态制剂（申请号201110116641.X中所用的枯草芽孢杆菌）对照组：本场常规哺乳母猪日粮的基础上，另外添加10⁸CFU/Kg申请号201110116641.X中所用的枯草芽孢杆菌复合微生态制剂。

饲养管理：试验在本场的同一产房内进行，由同一饲养人员饲喂，饲养管理条件一致，饲料采取干料加水拌湿后饲喂，在试验母猪转入产床时开始饲喂试验料，日喂3次，自由采食，以吃饱不剩料为原则。试验组和对照组分别统计仔猪出生重、出生健仔数、断奶仔猪头数、21天断奶体重、死淘数和产房成活率，采取全天供水的办法，任猪自由饮水。每日由饲养员清理粪便，打扫圈舍一次，随时观察试验组的生长和健康情况，不论是哺乳母猪还是仔猪，发生疾病，及时治疗。

2、试验结果及分析

在试验期内，添加饲喂0.2%母猪专用型复合微生态制剂的试验组21天断奶均重为6.4kg，添加微生态制剂的对照组21天断奶均重为6.25kg，而未添加母猪专用型复合微生态制剂的对照组21天断奶均重为5.81kg，且试验组的成活率要高于微生态制剂对照组，且明显高于对照组，其成活率分别为96.26%、94.72%和90.37%。结果见表11。

表11 母猪专用型复合微生态制剂对哺乳母猪生产性能的影响

组别	小猪出生平均体重（kg）	断奶小猪平均体重（kg）	出生健仔数（头）	断奶仔猪头数（头）	死淘数（头）	产房成活率（%）
							空白对照组	1.62	5.81	301	272	29	90.37
试验组	1.51	6.40	294	283	11	96.26
							微生态对照组	1.58	6.25	303	287	16	94.72

采食与健康情况：整个试验过程中，添加本发明的母猪专用型复合微生态制剂的哺乳母猪表现喜食、采食速度快、采食量比对照组略有增加，且毛色红润光亮。试验组母猪在产仔8天后出现明显的溢乳现象，表明母猪专用型复合微生态制剂能够提高母猪的泌乳量。试验后期，试验组和对照组均有仔猪拉稀现象，肌注恩诺沙星和口服乳酶生治疗后排粪正常，且试验仔猪毛较稀，皮肤红润，粪便减少且干燥，臭味也减少，说明饲喂母猪专用型复合微生态制剂对于调节哺乳母猪肠道内微生物菌群平衡，防止仔猪腹泻增强母猪的抗病能力，有一定作用。微生态制剂对照组的临床效果要略弱于试验组。

3、结论

母猪专用型复合微生态制剂作为饲料添加剂可以提高哺乳母猪乳汁的分泌，解决母猪乳汁不足的问题；在饲料中添加0.2%母猪专用型复合微生态制剂可提高仔猪断奶重和成活率，经济效益显著。

实施例8 种公猪专用型复合微生态制剂对种公猪生产性能的影响试验

试验方法：

漳州长泰晋祥和猪场中，选择对照组种公猪3头，杜洛克、长白和大约克各1头；试验组种公猪4头，杜洛克和长白各1头，大约克2头。所用公猪年龄均在2-3岁之间，全部为生产中正常利用的繁殖群种公猪，基础饲料相同，试验组种公猪饲料中添加实施例5中制备的0.2%种公猪专用型复合微生态制，管理条件相同。试验期90天，日喂2次，自由饮水，每天上午和下午各清理一次猪舍。试验结束后进行采精，检测试验组和对照组（未添加微生态组）的公猪精液的采精量、密度、活率和畸形率。

试验结果。

表12 种公猪专用型复合微生态制剂对种公猪生产性能的影响试验

组别	采精量（mL）	密度（10⁸个/mL）	活率（%）	畸形率（%）
					试验组	226±18	6.0±0.1	94±1.1	3±0.9
对照组	198±21	3.4±0.1	81±0.9	10±1.2

以上的试验结果表明，使用本发明技术生产的种公猪专用型复合微生态制剂能够有效提高种公猪的精液质量，增强种公猪的使用效率。

实施例9 育肥猪专用型复合微生态制剂对育肥猪的功效试验

试验方法：

漳州长泰晋祥和猪场中，选用180头平均体重相当的杜长大生长肥育猪，公母各半，随机分成3个处理组，每个处理2个重复，每个重复30头生长肥育猪。

日粮组成：

空白对照组：本场常规育肥猪日粮。

试验组：本场常规育肥猪日粮的基础上，另外添加0.2%育肥猪专用型复合微生态制剂。

微生态制剂（申请号201110116641.X中所用的枯草芽孢杆菌）对照组：本场常规育肥猪日粮的基础上，另外添加10⁸CFU/Kg申请号201110116641.X中所用的枯草芽孢杆菌复合微生态制剂。

实验方法与检测指标：

猪场管理条件相同，试验期间自由采食，自由饮水，试验周期60天。记录初重、末重、日采食量，计算日增重和料肉比。

试验结果：

表13 育肥猪专用型复合微生态制剂对育肥猪的功效试验

组别	初重（kg）	末重（kg）	日增重（g）	日采食量（kg）	料肉比
						空白对照组	47.6±0.62	103.0±0.62	923.4±35.6	3.036±0.406	3.28±0.15
试验组	47.7±0.67	105.6±0.62	964.6±25.3	3.043±0.035	3.15±0.06
						微生态对照组	48.4±0.48	104.8±0.91	940.0±31.4	3.066±0.278	3.26±0.11

以上的试验结果表明，使用本发明技术生产的育肥猪专用型复合微生态制剂能够有效提高生长肥育猪的日增重和降低料肉比，同时效果也优于微生态制剂对照组。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)新菌株，其保藏号为CGMCC No.8148。

2.一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum) 新菌株，其保藏号为CGMCC No.8150。

3.一种复合微生态制剂，该制剂包含枯草芽孢杆菌CGMCC No.8148菌粉和植物乳杆菌CGMCC No.8150菌粉。

4.如权利要求3所述的复合微生态制剂，其特征在于，制剂中总活菌数为3~6×10^8-11cfu/g。

5.如权利要求3或4所述的复合微生态制剂，其特征在于，枯草芽孢杆菌CGMCC No.8148菌粉、植物乳杆菌CGMCC No.8150菌粉的重量配比为1：0.8~1.2。

6.如权利要求3或4所述的复合微生态制剂，其特征在于，还进一步包含载体，载体为石粉、葡萄糖、麸皮、玉米芯粉、米糠粕中的任一种或几种。

7.如权利要求6所述的复合微生态制剂，其特征在于，包含枯草芽孢杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉，载体为石粉，上述各成分的重量配比为1：0.8~1.2：4~6，总有益菌数为3~6×10⁹cfu/g。

8.如权利要求6所述的复合微生态制剂，其特征在于，包含枯草芽孢杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉和葡萄糖，上述各成分的重量配比为：1：0.8~1.2：2~3，总有益菌含量为3~6×10⁹cfu/g。

9.如权利要求6所述的复合微生态制剂，其特征在于，包含枯草芽孢杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉和麸皮，上述各成分的重量配比为：1：0.8~1.2：2~3，总有益菌含量为3~6×10⁹cfu/g。

10.如权利要求6所述的复合微生态制剂，其特征在于，包含枯草芽孢杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉和玉米芯粉，上述各成分的重量配比为1：0.8~1.2：2~3，益生菌总菌含量为3~6×10⁹cfu/g。

11.如权利要求6所述的复合微生态制剂，其特征在于，包含枯草芽孢杆菌菌粉、植物乳杆菌菌粉和米糠粕，上述各成分的重量配比为1：0.8~1.2：2~3，益生菌总菌含量为3~6×10⁹cfu/g。

12.含有权利要求3-11任一项所述的复合微生态制剂的饲料添加剂。

13.含有权利要求3-11任一项所述的复合微生态制剂的预混料，其特征在于，预混料中复合微生态制剂添加的质量体积比为0.5-10‰。