CN103960463A

CN103960463A - 青贮橘粕饲料及其制备工艺

Info

Publication number: CN103960463A
Application number: CN201410239760.8A
Authority: CN
Inventors: 黄玲玲
Original assignee: Qingdao Ke Naier Feed Corp ltd
Current assignee: Qingdao Ke Naier Feed Corp ltd
Priority date: 2014-05-30
Filing date: 2014-05-30
Publication date: 2014-08-06
Anticipated expiration: 2034-05-30
Also published as: CN103960463B

Abstract

本发明的提供了一种青贮橘粕饲料及其制备工艺。所述制备工艺包括菌种扩繁工艺和果渣发酵两个步骤。所述菌种扩繁工艺为将嗜酸乳杆菌冻干粉依次进行活化、培养、液体培养和接种扩大培养，得到嗜酸乳杆菌菌种。所述果渣发酵步骤为新鲜橘粕和稻壳粉加入青贮池中混合均匀，使水分的质量分数降至50～60％。然后向橘粕和稻壳粉的混合物上喷洒步骤①得到的嗜酸乳杆菌，加压使物料被压实；重复多次，将青贮池密封，密闭发酵后得到青贮橘粕饲料。本发明制备的青贮橘粕饲料，不但保证橘粕本身含有的营养物质和微量元素，嗜酸乳杆菌发酵过程产生的代谢产物能刺激瘤胃纤维素菌和乳酸菌繁殖，提高瘤胃微生物蛋白产量和饲料消化率等作用，在奶牛增乳上有显著效果。

Description

青贮橘粕饲料及其制备工艺

技术领域

本发明属于饲料生产领域，具体涉及一种果渣发酵饲料，尤其涉及一种青贮橘粕饲料及其制备工艺。

背景技术

柑橘是世界第一大宗水果，其分布和产量均居世界各类水果之首，中国的柑橘种植面积和产量均居世界第一。橘粕是柑橘果实加工制汁或制罐后的下脚料，约占果实重量的25～50％。近年来，非冷冻浓缩汁(NFC)越来越受到青睐，随之而来产生了大量橘粕。橘粕中富含类黄酮、类柠檬烯、Vc、类胡萝卜素等生理活性成分，还含有大量果胶、纤维素、可溶性糖及矿物质元素。在国内，目前基本上都是以填埋处理，很少进行再利用或深加工，严重造成环境污染和资源的浪费。目前，饲料及养殖行业存在着市场动荡幅度大、人畜争粮的矛盾突出、畜禽产品的化学投入高和食品安全潜在威胁程度大等突出问题。在这种现状下，开发橘粕青贮的研究可以变废为宝，降低饲料成本，增加养殖效益。然而，橘粕青贮存在以下几个技术问题：(1)鲜橘粕含水量太高，无氮浸出物多，极易变质，不适宜青贮；(2)柑橘渣的苦味限制了它直接用作饲料的用量；(3)烘干干燥会损失大量营养成分如维生素，人工干燥成本高，自然晾晒费工费时且易被病菌污染。

发明专利CN102106456A公开了一种柑橘渣青贮饲料及其制备方法和使用方法。所述柑橘渣青贮饲料由新鲜柑橘渣、1～5％的柑橘渣饲料添加剂、10～20％酒糟和10～20％麦麸制得，均以占所述柑橘渣青贮饲料总重量的百分含量计；所述柑橘渣饲料添加剂，是由以下重量配比的原料组成：尿素10～40％、曲药10～40％、山梨酸钾2～8％和余量的载体。该发明制备的柑橘渣青贮饲料，适口性好，营养价值高，易贮存，生产成本低，改善了我国柑橘渣用作猪或奶牛饲料的饲用价值，节约了粮食，提高了经济效益。然而，单纯发酵技术无法克服橙粕本身水分含量太高，且橙粕原料中有部分有害菌尤其是霉菌毒素导致的病变，不适宜用作饲料。

发明内容

本发明提供了一种青贮橘粕饲料及其制备工艺。

本发明的技术方案：青贮橘粕饲料的制备工艺，包括以下步骤：

①菌种扩繁：(a)固体培养：将嗜酸乳杆菌菌种接入MRS固体培养基的平板上，用保鲜膜包好，放置到温度为37±0.5℃的恒温培养箱中培养2～3天；(b)液体培养：将平板中的长好的嗜酸乳杆菌用无菌水冲下，使嗜酸乳杆菌和无菌水混合均匀，按3％的接种量接入装有适量MRS液体培养基的容器中，在温度为37±0.5℃的恒温培养箱静置培养48小时，得到嗜酸乳杆菌菌液；(c)扩大培养：将嗜酸乳杆菌菌液添加到装有灭菌处理发酵液的发酵罐中，在35±2℃的温度条件下发酵24～36小时，直至pH降到4.0；发酵结束后，嗜酸乳杆菌活菌数为4.0×10⁹个/mL；所述的发酵液按质量份数计，由以下组分组成：5份糖蜜(购买自烟台味丹生物科技有限公司)，3份大豆蛋白胨(购买自北京双旋微生物培养基制品厂，企业标号02-19)，2份酵母浸粉(购买自北京双旋微生物培养基制品厂，企业标号02-12B)，1份牛肉浸膏(购买自北京双旋微生物培养基制品厂，企业标号02-05A)，0.5份复合微量元素液(购买自北京双旋微生物培养基制品厂)，89.5份水。

②将压榨果汁后的新鲜橘粕和稻壳粉加入青贮池中混合均匀，所述橘粕和稻壳粉的质量比为0.75:1～2.5:1，使水分的质量分数降至40～60％。加压使橘粕和稻壳粉的混合物料被压实至5-10cm，然后向混合物料上喷洒步骤①得到的嗜酸乳杆菌，所述嗜酸乳杆菌的质量分数为1～2％。再次加入橘粕和稻壳粉，压实至5-10cm并喷洒步骤①得到的嗜酸乳杆菌；重复多次，将青贮池密封，密闭发酵10-15天后，得到青贮橘粕饲料。橙粕是甜橙榨汁后的副产品，稻壳粉为水稻加工大米的副产品，处理这些副产品，有利于缓解环境压力，增加农民受益，拉动经济。

其中，所述MRS液体培养基按质量分数计，由以下组分组成：蛋白胨1％(购买自北京双旋微生物培养基制品厂，企业标号02-31A)，酵母浸粉0.5％(购买自北京双旋微生物培养基制品厂，企业标号02-12B)，牛肉浸膏1％(购买自北京双旋微生物培养基制品厂，企业标号02-05A)，葡萄糖2％，无水醋酸钠0.3％，柠檬酸二铵0.2％，吐温800.1％，磷酸氢二钾0.2％，MgSO4·7H2O0.02％，MnSO4·4H2O0.005％，盐酸半胱氨酸0.05％，将上述组分混合均匀，在121℃的温度条件下灭菌20min，得到MRS液体培养基。若另外加入2.0％的琼脂粉，然后在121℃的温度条件下灭菌20min，则得到MRS固体培养基。

嗜酸乳杆菌具有非常高的耐酸力，可以在pH2.5左右的环境下存活，是能在胃和小肠中大量存在的益生菌；能分泌抗生物素类物质(如嗜酸乳菌素、嗜酸杆菌素、乳酸菌素)，对肠道致病菌产生的拮抗作用，减少了体内毒素的生成，减轻了肝脏解毒负担；同时，还可产生乳酸和醋酸，在动物体内能提高钙、磷、铁的利用率，促进铁和维生素D的吸收，产生维生素K及维生素B，还可以减少胆固醇的吸收，并能降低辐射伤害。

本发明的有益效果：

(1)本发明制备的青贮橘粕饲料，经过微生物发酵后，不仅不会破坏橘粕本身含有的营养物质和微量元素，同时嗜酸乳杆菌发酵过程产生的代谢产物能刺激瘤胃纤维素菌和乳酸菌繁殖，改变瘤胃发酵方式，降低瘤胃氨浓度，提高瘤胃微生物蛋白产量和饲料消化率等作用，在奶牛增乳上有显著效果。

(2)本发明采用的嗜酸乳杆菌能分泌抗生物素类物质(如嗜酸乳菌素、嗜酸杆菌素、乳酸菌素)，对肠道致病菌产生的拮抗作用，减少了体内毒素的生成，减轻了肝脏解毒负担；因此本发明制备的青贮橘粕饲料可以载不添加任何抗生素类药物的前提下具有抗霉杀菌功效，尤其对反刍动物常见疾病——沙门氏菌和出血型大肠杆菌，杀菌效果很好。

(3)本发明向橘粕中加入南方农村普遍存在的稻壳粉，使水分降至40～60％，不仅避免了烘干干燥导致的营养物质损失，而且合理利用农副产品，不仅绿色环保，而且增加了农民的收益，促进了经济的发展。

具体实施方式

下面结合实施例对发明做进一步的说明。

实施例1：

青贮橘粕饲料的制备工艺，包括菌种扩繁和橘粕发酵。

①菌种扩繁：嗜酸乳杆菌→固体培养→液体培养→接种扩大培养→培养完成，具体步骤如下：(a)固体培养：将保藏菌种接入固体改良的MRS培养基的平板上，用保鲜膜包好，放置到37℃恒温培养箱中培养2～3天；所述的改良的MRS培养基配方如下：按质量分数计，蛋白胨1％(购买自北京双旋微生物培养基制品厂，企业标号02-31A)，酵母浸粉0.5％(购买自北京双旋微生物培养基制品厂，企业标号02-12B)，牛肉浸膏1％(购买自北京双旋微生物培养基制品厂，企业标号02-05A)，葡萄糖2％，无水醋酸钠0.3％，柠檬酸二铵0.2％，吐温800.1％，磷酸氢二钾0.2％，MgSO₄·7H₂O0.02％，MnSO₄·4H₂O0.005％，盐酸半胱氨酸0.05％，调节培养基pH值至6.8，加入2.0％的琼脂粉，121℃灭菌20min。

(b)液体培养：将平板中长好的嗜酸乳杆用无菌水冲下，并反复吹吸使菌和无菌水混合均匀，按3％的接种量接入装有450ml MRS液体培养基的500ml三角瓶中，37℃恒温培养箱静置培养48h；所述MRS液体培养基配方如下，按质量分数计：蛋白胨1％(购买自北京双旋微生物培养基制品厂，企业标号02-31A)，酵母浸粉0.5％(购买自北京双旋微生物培养基制品厂，企业标号02-12B)，牛肉浸膏1％(购买自北京双旋微生物培养基制品厂，企业标号02-05A)，葡萄糖2％，无水醋酸钠0.3％，柠檬酸二铵0.2％，吐温800.1％，磷酸氢二钾0.2％，MgSO₄·7H₂O0.02％，MnSO₄·4H₂O0.005％，盐酸半胱氨酸0.05％，调节培养基pH值至6.8，121℃灭菌20min。

(c)扩大培养：将嗜酸乳杆菌菌液添加到装有灭菌(采用蒸汽灭菌)处理的发酵液的发酵罐中，35±2℃的温度条件下发酵24～36小时，直至pH降到4.0。发酵结束后，经血球计数板测定，嗜酸乳杆菌活菌数为4.0×10⁹个/mL。所述的发酵液按质量分数计，由有以下组分组成：12.5kg糖蜜，0.06kg饲料级硫酸镁，0.06kg磷酸氢二钾和40kg水。

②将压榨果汁后新鲜橘渣收集到青贮池中，按质量比4:3的比例加入橘渣和稻壳粉，使水分含量降至40～60％，先压实后喷洒菌剂，每压实5-10cm高物料喷洒一遍步骤①得到嗜酸乳杆菌，所述嗜酸乳杆菌的质量份数为1～2％；再次加入橘粕和稻壳粉，喷洒嗜酸乳杆菌并压实；一层层压实(可用铲车压实)，每加一层物料就压实一次。用篷布将青贮池密封盖好，上压轮胎等重物，类似玉米青贮发酵模式，密闭发酵10～15天后，得到青贮橘粕饲料。

实施例2：与实施例1不同的是，步骤②中橘粕和稻壳粉的质量比为2.5:1。

实施例3：与实施例1不同的是，步骤②中橘粕和稻壳粉的质量比为1:1。

实施例4：与实施例1不同的是，步骤②中橘粕和稻壳粉的质量比为0.75:1。

表1青贮橘粕饲料的外观和理化性质

实施例5：动物饲养试验I

选取牛龄为8个月左右育成牛(一般18个月前的牛都不产奶)，牛龄比较接近、生长状况基本相同，体重为200kg左右的奶牛120头，随机分为6组，每组20头，以原有的TMR饲料饲喂为基础，采用自由采食的饲喂方式。在TMR饲料中分别添加饲料总质量5％的试验样品，其中，1～2组为对照组，对照I组为空白对照组，添加的是新鲜橘粕，对照II组为只饲喂TMR饲料；3～6组为实施例1～4制得的青贮橘粕饲料，饲喂观30天，测定饲喂前后的体重情况、饲喂期间的平均采食量和疾病发生率。

表2青贮橘粕饲料对育成牛生长的影响

序号	添加量(％)	平均采食量(kg/d)	平均增总量(kg)	疾病发生率(％)
					对照组I	5	25	51.6	5
对照组II	5	20	49.3	10
					实施例1	5	25	54.1	0
实施例2	5	23	51.6	0
					实施例3	5	23	51.8	0
实施例4	5	22	52.3	0

由表2可知，与对照II组相比，采用添加了5％新鲜橘粕的对照组I自由采食的量增加了25％，饲喂后的体重增重增加了2.3kg，疾病发生率降低了5％。然而，采用添加了5％实施例1～4制得的青贮橘粕饲料的实验组，自由采食的量增加了10-25％，饲喂后的体重增重增加了0-3.8kg，疾病发生率降低了10％，也就是几乎没有育成牛患病。这说明，本申请制得的青贮橘粕饲料，由于嗜酸乳杆菌能分泌抗生物素类物质(如嗜酸乳菌素、嗜酸杆菌素、乳酸菌素)，可以在不添加任何抗生素类药物的前提下具有抗霉杀菌功效，从而降低了育成牛疾病的发病率。

实施例6：动物饲养试验II

选取牛龄比较接近、生长状况基本相同，体重为200kg左右的奶牛160头，随机分为16组。其中，1-4组的喂食饲料添加了实施例1制备的高蛋白橙渣发酵饲料，5-8组的喂食饲料添加了实施例2制备的高蛋白橙渣发酵饲料，9-12组的喂食饲料添加了实施例3制备的高蛋白橙渣发酵饲料，13-16组的喂食饲料添加了实施例4制备的高蛋白橙渣发酵饲料。

表3青贮橘粕饲料的添加量对奶牛产奶量的影响

注：+表示奶生长状况一般，++表示较好，+++表示良好

由表3可知，青贮橘粕饲料的添加比例低于10％时，产奶增量随着添加比例的增加而增加；青贮橘粕饲料的添加比例大于10％时，产奶增量几乎维持不变。因此，青贮橘粕饲料添加的最佳比例为10％。

实施例7：动物饲养试验III

选取牛龄比较接近、生长状况基本相同，体重为200kg左右的高产奶牛、中产奶牛和低产奶牛各20头。每头高产奶牛每天添加2.5kg实施例1制备的高蛋白橙渣发酵饲料，检测1个月后，奶产量平均每天增加5kg/天；每头中产奶牛添加2kg实施例1制备的高蛋白橙渣发酵饲料，检测1个月后，奶产量平均每天增加2kg/天；每头低产奶牛添加2kg实施例1制备的高蛋白橙渣发酵饲料，检测1个月后，奶产量平均每天增加1kg/天。因此，本申请制备的高蛋白橙渣发酵饲料对高产奶牛的效果最佳。

Claims

1.青贮橘粕饲料的制备工艺，其特征在于：包括以下步骤：

①菌种扩繁：(a)固体培养：将嗜酸乳杆菌菌种接入MRS固体培养基的平板上，用保鲜膜包好，放置到温度为37±0.5℃的恒温培养箱中培养2～3天；(b)液体培养：将平板中的长好的嗜酸乳杆菌用无菌水冲下，使嗜酸乳杆菌和无菌水混合均匀，按3％的接种量接入装有适量MRS液体培养基的容器中，在温度为37±0.5℃的恒温培养箱静置培养48小时，得到嗜酸乳杆菌菌液；(c)扩大培养：将嗜酸乳杆菌菌液添加到装有灭菌处理发酵液的发酵罐中，在35±2℃的温度条件下发酵24～36小时，直至pH降到4.0发酵结束，此时，嗜酸乳杆菌活菌数为4.0×10⁹个/mL；

②将压榨果汁后的新鲜橘粕和稻壳粉加入青贮池中混合均匀，所述橘粕和稻壳粉的质量比为0.75:1～2.5:1，加压使物料被压实，然后喷洒步骤①得到的嗜酸乳杆菌，所述嗜酸乳杆菌的质量分数为1～2％；再次加入橘粕和稻壳粉，喷洒嗜酸乳杆菌并压实；重复多次，将青贮池密封，密闭发酵10～15天，得到青贮橘粕饲料。

2.根据权利要求1所述的青贮橘粕饲料的制备工艺，其特征在于：所述步骤②每压实5-10cm高度的物料，喷洒一遍嗜酸乳杆菌。

3.根据权利要求1所述的青贮橘粕饲料的制备工艺，其特征在于：所述MRS液体培养基按质量分数计，由以下组分组成：蛋白胨1％，酵母提取物0.5％，牛肉膏提取物1％，葡萄糖2％，无水醋酸钠0.3％，柠檬酸二铵0.2％，吐温800.1％，磷酸氢二钾0.2％，MgSO₄·7H₂O0.02％，MnSO₄·4H₂O0.005％，盐酸半胱氨酸0.05％，121℃灭菌20min，得到MRS液体培养基；调节培养基pH值至6.8后，加入质量分数为2.0％的琼脂粉，121℃灭菌20min则得到MRS固体培养基。

4.根据权利要求1所述的青贮橘粕饲料的制备工艺，其特征在于：所述发酵液按质量份数计，由以下组分组成：5份糖蜜，3份大豆蛋白胨，2份酵母浸粉，1份牛肉浸膏，0.5份复合微量元素液和89.5份水。

5.根据权利要求1-4中任意一项所述的青贮橘粕饲料的制备工艺所制得的青贮橘粕饲料。

6.根据权利要求5所述的青贮橘粕饲料，其特征在于，将其应用于牛的饲养。