CN103881725A - 一种林蛙皮冻干粉的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种提取制备林蛙皮冻干粉的方法。主要步骤包括，将干燥林蛙皮依次放入蒸馏水、NaCl水溶液、丙酮中浸泡，烘干后研磨制成粗粉；将粗粉加入到乙酸水溶液中进行提取，离心后取上清液进行冷冻干燥。本发明方法简便易行，成本低，适用于工业化生产；采用本发明制备的林蛙皮冻干粉，其粒径达到微米级别，可溶于水，蛋白质含量高，因此可作为一种性能优良的添加剂，在纸张、包装品、纺织卫生用品制造等方面有着良好的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种林蛙皮冻干粉的制备方法，尤其涉及一种从林蛙皮中提取制备具有生物活性、能溶于水的林蛙皮冻干粉的方法。
背景技术
林蛙是一种药、食兼用的珍贵经济动物，林蛙皮作为林蛙的表皮组织，即使在林蛙死亡后，林蛙皮也不霉烂、不变质。现有实验研究证实，林蛙皮中含有较多的胶原蛋白、多肽、透明质酸等物质，其中胶原蛋白含量高达48%。胶原蛋白是一种纤维蛋白，广泛存在于肌腱、韧带、软骨、皮肤等结缔组织中，其基本单元是原胶原分子，胶原蛋白所特有的三重螺旋的氨基酸结构使它具有许多很有用的特性，如高拉伸强度、生物降解性能、低抗原活性、低刺激性和低细胞毒性。
由于林蛙肉可食用，市场中每年都有大量的林蛙皮被废弃，不仅是一种资源浪费，还会造成环境污染，由此迫切需要对废弃林蛙皮进行回收利用。以现有常规技术而言，林蛙皮粉的制备大多采用单一的物理研磨法、超声波破碎技术，但由此获得的粉体颗粒较大，混合杂质较多，不溶于水，使其应用受到很大限制。
关于以蛙皮为原料制备胶原蛋白的方法，查得现有技术如：在“林蛙皮胶原蛋白的提取及抗氧化性”（作者吕玲玲等，食品研究与开发，2013,34（10）:20～22）一文中记载，通过木瓜蛋白酶在乙酸溶液中从林蛙皮中提取制得胶原蛋白，检测得到胶原蛋白提取率为24.71%，纯度为72.03%,其胶原蛋白对羟自由基具有一定的清除能力，并且随着浓度的增加抗氧化活性逐渐增强。目前，从林蛙皮中提取高纯度胶原蛋白的方法正在进一步研究中，其缺点是制备方法复杂、成本较高。
因此，如何提取制备颗粒小、可溶于水、蛋白质含量高的林蛙皮粉，同时尽可能降低提取成本，成为亟待解决的课题。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明提供一种提取制备林蛙皮冻干粉的方法，该方法简便易行、成本低，且由此制备的冻干粉粒径小，可溶于水，蛋白质含量高。
本发明为解决技术问题而采用如下技术方案：
一种林蛙皮冻干粉的制备方法，包括如下步骤：
（1）取干燥林蛙皮放入蒸馏水中浸没静置6～12小时，再放入NaCl 水溶液中浸没静置6～12小时，用蒸馏水冲洗，最后放入丙酮中浸没静置，且每隔6～12小时更换一次丙酮，共更换2～3次，用蒸馏水冲洗，烘干，研磨制成林蛙皮粗粉；
（2）取上述林蛙皮粗粉加入到乙酸水溶液中提取2.5～3.5天，林蛙皮粗粉与乙酸水溶液的质量体积比为1:30～50（g/ml），得提取液；
（3）对上述提取液进行离心处理，取上清液进行冷冻干燥，得林蛙皮冻干粉。
作为优选，所述NaCl水溶液的浓度为0.1～0.15mol/L。
作为优选，所述乙酸水溶液的体积百分浓度为3～5%。
作为优选，所述研磨，使用球形研磨仪，且球形研磨仪的工作频率为30Hz～40Hz。
本发明与现有技术相比具有如下有益效果：
本发明所述林蛙皮冻干粉提取制备方法简便，成本低，适用于工业化生产，易于实现对废弃林蛙皮的有效回收利用，变废为宝。采用本发明制备的林蛙皮冻干粉的颗粒达到微米级别，经电镜扫描测得粒径范围为40μm～80μm，可溶于水，且经检测得到其中蛋白质的含量为72.14%～74.40%，因此克服了现有技术制备的林蛙皮粉颗粒大、不溶于水，杂质含量高的缺点。本发明制备的林蛙皮冻干粉可作为一种性能优良的添加剂，在纸张、包装品、纺织卫生用品制造等方面有着良好的应用前景。
附图说明
图1是采用本申请实施例1制备的林蛙皮冻干粉照片；
图2是采用本申请实施例1制备的林蛙皮冻干粉电镜扫描照片；
图3是采用本申请实施例1制备的林蛙皮冻干粉220nm-360nm紫外吸收光谱图；
图4是采用本申请实施例2制备的林蛙皮冻干粉照片；
图5是采用本申请实施例2制备的林蛙皮冻干粉的电镜扫描照片；
图6是采用本申请实施例2制备的林蛙皮冻干粉220nm-360nm紫外吸收光谱图；
图7是采用本申请实施例3制备的林蛙皮冻干粉照片；
图8是采用本申请实施例3制备的林蛙皮冻干粉电镜扫描照片；
图9是采用本申请实施例3制备的林蛙皮冻干粉220nm-360nm紫外吸收光谱图
具体实施方式
下面结合附图给出的实施例，对本发明作进一步的描述；但这些实施例仅用于解释本发明，对本发明的范围并不构成限制。
实施例1
称取干燥林蛙皮20g，在蒸馏水中浸没静置8小时至完全舒展，然后将林蛙皮放入0.12mol/LNaCl水溶液中浸没静置8小时，用蒸馏水反复冲洗5次后，再放入丙酮中浸没静置，每隔8小时更换一次丙酮，共更换3次，随后用蒸馏水反复冲洗5次，置于烘箱中烘干。将烘干后的林蛙皮装入行星式球磨仪（QM—3SP2）研磨罐中，将研磨频率设定为35Hz，研磨时间设定为1h，研磨得到林蛙皮粗粉。
取10g上述研磨好的林蛙皮粗粉，放入500ml5%v/v的乙酸水溶液中，置于常温状态下3天，同时低速搅拌。将上述混合液置于离心机中离心，设定转速为5000r/min，离心时间为30min。
取离心后的上清液置于冷冻干燥机中，冷冻干燥24h，得到如图1所示的淡黄色林蛙皮冻干粉；其电镜扫描结果如图2所示，粒径约为40μm。
使用微量紫外分光光度计（Quawell Q5000,US）测定林蛙皮冻干粉中蛋白质的含量。具体测定方法为：精密称取上述制备的林蛙皮冻干粉，以体积比5%的乙酸水溶液为溶剂，配置成浓度为50mg/ml的冻干粉溶液。设置检测波长范围为220nm至360nm，精密吸取冻干粉溶液2μl，滴加在微量紫外分光光度计的测试孔上，测得溶液中蛋白质的含量为37.20mg/ml,如图3所示，再依据公式(37.20/50)×100%，计算出林蛙皮冻干粉中蛋白质的质量百分含量为74.40%。
实施例2
称取干燥林蛙皮20g，在蒸馏水中浸没静置6小时，然后将林蛙皮再放入0.1mol/LNaCl溶液中浸没静置6小时，用蒸馏水反复冲洗5次后，再放入丙酮中浸没静置，每隔6小时更换一次丙酮，共更换2次，然后将浸泡后的林蛙皮用蒸馏水冲洗5次，置于烘箱中烘干。将烘干后的林蛙皮装入行星式球磨仪（QM—3SP2）研磨罐中，将研磨频率设定为30Hz，研磨时间设定为1h，研磨得到林蛙皮粗粉。
取10g上述研磨好的林蛙皮粗粉，放入300ml3%v/v的乙酸水溶液中，置于常温状态下2.5天，同时低速搅拌。将上述混合液置于离心机中离心，设定转速为5000r/min，离心时间为30min。
取离心后的上清液置于冷冻干燥机中，冷冻干燥24h，得到如图4所示的林蛙皮冻干粉；其电镜扫描结果如图5所示，粒径约为80μm。
使用微量紫外分光光度计（Quawell Q5000,US）测定林蛙皮冻干粉中蛋白质的含量。具体测定方法为：精密称取上述制备的林蛙皮冻干粉，以体积比5%的乙酸水溶液为溶剂，配置成浓度为50mg/ml的冻干粉溶液。设置检测波长范围为220nm至360nm，精密吸取冻干粉溶液2μl， 滴加在微量紫外分光光度计的测试孔上，测得溶液中蛋白质的含量为36.07mg/ml,如图6所示，再依据公式(36.07/50)×100%，计算出林蛙皮冻干粉中蛋白质的质量百分含量为72.14%。
实施例3
称取干燥林蛙皮20g，在蒸馏水中浸没静置12小时至完全舒展，然后将林蛙皮放入0.15mol/LNaCl水溶液中浸没静置12小时，用蒸馏水反复冲洗5次后，再放入丙酮中浸没静置，每隔12小时更换一次丙酮，共更换3次，用蒸馏水冲洗5次，置于烘箱中烘干。将烘干后的林蛙皮装入行星式球磨仪（QM—3SP2）研磨罐中，将研磨频率设定为40Hz，研磨时间设定为1h，研磨得到林蛙皮粗粉。
取10g上述研磨好的林蛙皮粗粉，放入400ml4%v/v的乙酸水溶液中，置于常温状态下3.5天，同时低速搅拌。将上述混合液置于离心机中离心，设定转速为5000r/min，离心时间为30min。
取离心后的上清液置于冷冻干燥机中，冷冻干燥24h，得到如图7所示的淡黄色林蛙皮冻干粉；其电镜扫描结果如图6所示，粒径约为60μm。
使用微量紫外分光光度计（Quawell Q5000,US）测定林蛙皮冻干粉中蛋白质的含量。具体测定方法为：精密称取上述制备的林蛙皮冻干粉，以体积比5%的乙酸水溶液为溶剂，配置成浓度为50mg/ml的冻干粉溶液。设置检测波长范围为220nm至360nm，精密吸取冻干粉溶液2μl，滴加在微量紫外分光光度计的测试孔上，测得溶液中蛋白质的含量为36.57mg/ml,如图6所示，再依据公式(36.57/50)×100%，计算出林蛙皮冻干粉中蛋白质的质量百分含量为73.14%。
Claims (4)
1.一种林蛙皮冻干粉的制备方法，其特征为包括如下步骤：
（1）取干燥林蛙皮放入蒸馏水中浸没静置6～12小时，再放入NaCl水溶液中浸没静置6～12小时，用蒸馏水冲洗，最后放入丙酮中浸没静置，且每隔6～12小时更换一次丙酮，共更换2～3次，用蒸馏水冲洗，烘干，研磨制成林蛙皮粗粉；
（2）取上述林蛙皮粗粉加入到乙酸水溶液中提取2.5～3.5天，林蛙皮粗粉与乙酸水溶液的质量体积比为1:30～50（g/ml），得提取液；
（3）对上述提取液进行离心处理，取上清液进行冷冻干燥，得林蛙皮冻干粉。
2.根据权利要求1所述的一种林蛙皮冻干粉的制备方法，其特征为，所述NaCl水溶液的浓度为0.1～0.15mol/L。
3.根据权利要求1所述的一种林蛙皮冻干粉的制备方法，其特征为，所述乙酸水溶液的体积百分浓度为3～5%。
4.根据权利要求1、2、3任一所述的一种林蛙皮冻干粉的制备方法，其特征为，所述研磨，使用球形研磨仪，且球形研磨仪的工作频率为30Hz～40Hz。
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110438185A (zh) * | 2019-07-31 | 2019-11-12 | 杭州妇帮医疗科技有限公司 | 一种提取林蛙卵中的多肽成分的方法 |
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Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62179587A (ja) * | 1986-01-31 | 1987-08-06 | Horiuchi:Kk | タマネギを主原料とする抗酸化剤 |
| CN102276716A (zh) * | 2011-08-08 | 2011-12-14 | 四川大学 | 一种从牛蛙皮中提取未变性天然胶原的方法 |
| CN102816818A (zh) * | 2012-08-14 | 2012-12-12 | 吉林大学 | 一种胃蛋白酶酶解提取制备林蛙皮胶原肽鳌合锌的工艺方法 |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62179587A (ja) * | 1986-01-31 | 1987-08-06 | Horiuchi:Kk | タマネギを主原料とする抗酸化剤 |
| CN102276716A (zh) * | 2011-08-08 | 2011-12-14 | 四川大学 | 一种从牛蛙皮中提取未变性天然胶原的方法 |
| CN102816818A (zh) * | 2012-08-14 | 2012-12-12 | 吉林大学 | 一种胃蛋白酶酶解提取制备林蛙皮胶原肽鳌合锌的工艺方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 周涌等: "林蛙皮活性肽抗氧化活性研究", 《安徽农业科学》, vol. 40, no. 14, 31 December 2012 (2012-12-31) * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110438185A (zh) * | 2019-07-31 | 2019-11-12 | 杭州妇帮医疗科技有限公司 | 一种提取林蛙卵中的多肽成分的方法 |
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