CN103877456B - 一种治疗器官纤维化的药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种治疗器官纤维化的药物组合物,它是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂:白果10‑15份,麻黄10‑15份,桑白皮10‑15份,苏梗8‑12份,黄芩8‑12份,三棱8‑12份,水蛭3‑7份,赤芍8‑12份,丹参10‑15份,当归8‑12份,人参6‑10份,黄芪15‑18份,沙参15‑18份,麦冬15‑18份,甘草4‑8份。本发明还提供了该类药物组合物的制备方法和用途。本发明药物组合物能有效治疗器官纤维化特别是肺组织的纤维化,能改善其肺系数值及肺组织形态学状况、缓解其症状、提高其生存质量,且避免了西医化学药物的严重毒副作用,为临床用药提供了一种新的选择。
Description
技术领域
本发明涉及一种治疗器官纤维化的药物组合物及其制备方法和用途。
背景技术
肺纤维化(Pulmonary fibrosis/PF)疾病是多种原因引起肺部炎症和肺泡持续性损伤及细胞外基质的反复破坏、修复、重建和过度沉积从而导致正常的肺组织结构改变和功能丧失的一类疾病谱,是多种原因引起慢性肺疾病的共同结局,是呼吸衰竭的主要病理基础,其病因和发病机制复杂,其确切的发病机制虽然目前尚未彻底阐明,但多种细胞因子及其网络的调控是其发生发展病理机制的极重要因素。
肺纤维化属于国际关注度极高的一类难治性重大病种,国内外研究认为:纤维化是慢性病久治不愈的根本原因,也是其致残、致死的主因,有近50%的死亡与纤维化有关,而各种慢性肺病久治不愈的根本原因即在于其有纤维化病变。肺纤维化(PF)是器官纤维化中最具代表性、最典型最常发者,其病因复杂,除非典型肺炎可致PF外,很多肺系疾病均可导致PF,至少有150种以上病因与之相关。治疗上,目前尚仅限于非特异性抗炎、免疫抑制剂及糖皮质激素等方法,其共同特点是缺少特异性治疗,且大量使用抗生素和激素,这本身就是导致纤维化和加重纤维化的重要原因。随着其发病率、死亡率的不断上升,PF研究已成为世界关注热点,故寻求中医药等其他疗法已成当务之急。
过去认为器官的纤维化一旦形成,就不能逆转。然而,上世纪九十年代以来,大量实验研究结果表明,包括肺纤维化在内的器官纤维化是可以逆转的。各种器官纤维化之所以都可以经过正确的治疗和调理发生过程相似的逆转,是因为在细胞水平和分子水平上各种纤维化形成的过程就非常相似,具有殊途同归的特点。这些相似的发生过程提示,一种器官纤维化发生机制的研究结果,也适用于其他各种器官纤维化;对一种器官纤维化的有效治疗方法,对阻止、减轻其他各种组织器官纤维化也是有益的(Border WA.Evidencethat TGF-βshould be a therapeutic target in diabetic nephropathy.Kidney Int,1998,54:1390-1391.)。有鉴于此,国内外许多学者集中力量从一种器官纤维化的逆转开始,逐渐扩展到多种器官纤维化逆转的研究,获得了器官纤维化可以逆转的大量证据,其中包括肺纤维化。
虽然肺纤维化具有治疗可逆性,但目前尚缺乏满意的西医药防治手段,这可能与肺纤维化发病的多因素、病变的多靶点、病理进程的多样性等相关。作为一种典型的复杂性疾病,以单靶点为主的西医化学药物经常显得无能为力,中医药等传统医学在器官纤维化的治疗方面拥有很大的潜力和优势,基于疗效确切的中医药开发抗器官纤维化的药物,特别是开发抗肺纤维化、肝纤维化、肾纤维化的药物,前景日益广阔。
中医认为肺纤维化属于典型的“本虚标实”病证,其病机为“病已久→本已虚”、“虚、阻相夹”,可归属中医络病范畴(李戎.论艾灸肺俞膏肓俞治疗肺纤维化的中医理论基础与施治依据.辽宁中医杂志,2004,31(4):291-293.)。杨珂等报道了一种扶正化瘀方,主要成分为绞股蓝、丹参、冬虫夏草,用于抗大鼠肺纤维化,效果明显;常继亭报道了一种抗纤汤,主要成分为太子参、黄芪、沙参、麦冬、丹参、当归、蛤蚧等10味中药组成,临床上用于治疗特发性肺纤维化,疗效显著。
发明内容
本发明的目的在于提供一种治疗器官纤维化的药物组合物及其制备方法和用途。
本发明提供了一种治疗器官纤维化的药物组合物,它是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂:
白果10-15份,麻黄10-15份,桑白皮10-15份,苏梗8-12份,黄芩8-12份,三棱8-12份,水蛭3-7份,赤芍8-12份,丹参10-15份,当归8-12份,人参6-10份,黄芪15-18份,沙参15-18份,麦冬15-18份,甘草4-8份。
进一步地,它是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂:
白果10份,麻黄10份,桑白皮15份,苏梗12份,黄芩12份,三棱12份,水蛭5份,赤芍12份,丹参15份,当归12份,人参10份,黄芪18份,沙参18份,麦冬18份,甘草6份。
更进一步地,所述麻黄为炙麻黄,所述水蛭为吸血水蛭。
其中,所述药物组合物是由所述重量配比的原料药的水或有机溶剂提取物为活性成分,加上药学上常用的辅料或者辅助性成分制备而成的制剂。
进一步地,所述制剂为经胃肠道吸收制剂。
所述制剂包括口服给药途径所用制剂,如胶囊剂、颗粒剂、散剂、片剂、口服液、丸剂等剂型。
本发明还提供了上述药物组合物的制备方法,它包括如下步骤:
(1)按所述重量配比称取原料药;
(2)加水或有机溶剂提取,合并提取液,浓缩后,加上药学上可用的辅料或辅助性成分制备成常规制剂。
本发明进一步提供了上述药物组合物在制备治疗器官纤维化的药物中的用途。
进一步地,所述药物是治疗肺纤维化的药物。
更进一步地,所述药物是治疗气血凝结、络道壅塞、热熏肺腑、阴亏喘促证型的肺纤维化的药物。
目前已公认“整体观念”、“辨证施治”、“复方使用”、“复方配伍用药如用兵”是中医最科学最有效的几大优势,其中“复方配伍用药如用兵”是非常科学的中医药原创理论。中医组方中各药如行兵布阵那样环环相扣的严密配伍,是其优于西医化学药配方的有效手段。中医方剂理论认为,每一方剂,不仅需要根据病因病机选择合适的药物妥善配伍,同时也应符合组方的基本结构,即“君、臣、佐、使”的组方配伍理论,所谓“君、臣、佐、使”的组方配伍,就是其建立在对疾病病机的全方位判断基础上的科学配比。中医用方通过多环节、多靶点整合调节的生物学机制,对肺纤维化这样具有发病多因素、病变多靶点、病理进程多样性(“三多”)等复杂特点、治疗困难的疾病或其症状进行调控,可以取得比西医化学药更好、更持久的治疗效果,且避免了西医化学药的毒副作用,而这种疗效是建立在上述中医传统原创理论的正确指导之上的,本发明组方正遵循了这一原则。
本发明药物组合物中,白果、麻黄乃千百年来定喘之首选,故本组方选白果、麻黄同为君药。桑白皮清降平喘、苏梗宽胸平喘、甘草缓急平喘,故任之为臣药,增强白果、麻黄的定喘功效;且桑白皮、甘草还可减缓麻黄的燥烈,可“助其优点抑其缺点”。肺纤维化乃属络病,久病入络,必须活血化瘀通络,加之本证型较为深重,已气血凝结、络道壅塞,非动用三棱、水蛭这样的猛药不能破其结、疏其塞,故调破气之三棱、逐瘀之水蛭,合率赤芍、丹参、当归同作左路之佐药,共奏破气逐瘀通络之功,从一个侧面辅佐君臣增效。为防麻黄、三棱、水蛭猛烈伤正,且本就应顾护正气,故以黄芪、人参补阳气匡正;当归、丹参、沙参、麦冬补阴血扶正;又为消除病机中的“热熏肺腑阴亏”之患,同时也为防麻黄等助热为虐,于是派遣清热降火育阴的黄芩、沙参、麦冬协防清解;以上七味一起作为右路之佐药,从另一侧面襄助君臣收工。一味甘草,既可清热缓急,又可调和诸药,因引以为使药,协调全方,甚为妥贴。
以上君臣佐使各组药味职司分明,相辅相成,充分发挥了中医学所独有的复方配伍用药如排军布阵般的思辨性科学研究方法论精髓,可共奏平喘清热育阴、破气逐瘀通络而不伤正气之功效,对于本发明组方所针对的肺纤维化之较为深重的证型有着良好的治疗效果,为临床用药提供了一种新的选择。
具体实施方式
实施例1本发明药物组合物的制备
取白果10克,炙麻黄10克,桑白皮15克,苏梗12克,黄芩12克,三棱12克,水蛭5克,赤芍12克,丹参15克,当归12克,人参10克,黄芪18克,沙参18克,麦冬18克,甘草6克。各药味按量称取,掺以足量的净水,武火煎沸后改文火再煎煮15分钟,收集水煎液后,再加水煎煮2次,合并各次水煎液,即得汤剂。
本方中,水蛭为吸血水蛭。
实施例2本发明药物组合物的制备
取白果10克,炙麻黄15克,桑白皮15克,苏梗12克,黄芩12克,三棱12克,水蛭7克,赤芍12克,丹参15克,当归12克,人参10克,黄芪18克,沙参18克,麦冬18克,甘草8克。先以70%v/v乙醇提取2次后,合并醇提液,药渣再以水煎煮2次,合并水煎液。分别将醇提液、水煎液浓缩后,混合,再加入适当糊精、可溶性淀粉,制粒,即得颗粒剂。
实施例3本发明药物组合物的制备
取白果15克,炙麻黄10克,桑白皮10克,苏梗8克,黄芩8克,三棱8克,水蛭3克,赤芍8克,丹参10克,当归8克,人参6克,黄芪15克,沙参15克,麦冬15克,甘草4克。先以70%v/v乙醇提取2次后,合并醇提液,药渣再以水煎煮2次,合并水煎液。分别将醇提液、水煎液浓缩后,混合,再加入适量糊精、可溶性淀粉,制粒,压片,即得片剂。
实施例4本发明药物组合物的制备
取白果10克,炙麻黄10克,桑白皮15克,苏梗12克,黄芩12克,三棱12克,水蛭5克,赤芍12克,丹参15克,当归12克,人参10克,黄芪18克,沙参18克,麦冬18克,甘草6克。各药味按量称取,掺以足量的净水,武火煎沸后改文火再煎煮10分钟至15分钟,收集水煎液,再加水煎煮2次,合并滤液,浓缩,加入适量微晶纤维素,混匀后,装胶囊,即得胶囊剂。
实施例5本发明药物组合物的制备
取实施例1制备的汤剂,静置,取上清液,浓缩后,干燥,粉碎,备用;取适量聚乙二醇4000,熔融后,将上述药粉加入熔融基质中,75-85℃下保温;采用各型滴丸机,滴口内/外径及滴速适度,将其滴入二甲基硅油中,收集滴丸,即得滴丸剂。
以下通过试验例具体说明本发明的有益效果。
试验例1本发明药物对大鼠实验性肺纤维化的治疗作用
1、材料与方法
1.1材料
1.1.1动物
实验用健康SD大鼠60只,体重200±20g,雌雄各半。
1.1.2药品
本发明药物组合物:实施例1制备的汤剂,临用前配成1.5g生药/ml的药液。
泼尼松:南通制药厂生产,用时研成粉末,以蒸馏水溶解配成50%的混悬液。
博莱霉素A5(BLMA5):天津河北制药厂,8mg/支,用时以无菌生理盐水稀释成2.5mg/ml的溶液。
1.1.3主要仪器
CH型光学显微镜(OLYMPUS,日本)、H-600IV型透射电镜,1/10000电子分析天平(德国BP61)。
1.2动物分组、造模及治疗
将前述实验用SD大鼠随机分为4组:空白组、模型组、本发明药物治疗组(以下简称“本方组”)、泼尼松(激素)对照组,每组15只。造模采用国际上通用的博莱霉素(BLM A5)制作大鼠肺纤维化模型。具体方法为,除空白组外,其余3组室温调高5℃,即达到30℃,饮水中兑入适量“造火生热”的制附片、干姜煎液,并减少喂饲物水分,先造成其“肺热阴虚”体征;再通过纤维化病变造成其气血凝、络道阻、气喘促的体征(喘促,即呼吸困难是肺纤维化的主要症状之一)。然后,气管内注入博莱霉素制作大鼠肺纤维化模型:在乙醚麻醉下,将大鼠固定于手术板上,消毒后切开颈部皮肤,逐层分离,充分暴露气管,用1ml注射器抽取定量的博莱霉素稀释液(5mg/kg),一次性注入其气管内,立即旋转大鼠,使药物充分均匀散布于双肺,消毒,缝合,几分钟后大鼠醒来即可自由觅食。造模后,模型组、本方组、泼尼松对照组的室温、喂食均恢复与空白组相同。
造模后第7天开始治疗,本方组按人剂量的10倍,即5g生药/kg给大鼠灌胃本发明药物组合物,泼尼松组胃内灌入泼尼松5mg/kg体重,空白组和模型组按等容量生理盐水灌胃作为对照,连续治疗30天。各组动物在实验过程中均有不同程度的死亡。治疗结束后处死动物,每组随机取8个标本,开胸取出全肺称重,左肺中部标本立即固定,以备作病理切片进行光镜、电镜检测。
1.3观察指标
1.3.1肺系数=肺重量(g)/身体重量(kg)×100%
1.3.2普通光镜观察
将实验动物的肺组织进行常规包埋、固定、HE染色、Masson染色,并根据Szapiel等的方法确定肺泡炎和肺纤维化的程度,用HE染色之病理切片将肺泡炎分为四级:无肺泡炎(-);轻度肺泡炎(+):肺泡隔因细胞浸润增宽,病变范围局限在全肺的20%以下;中度肺泡炎(++):病变范围占全肺的20%~50%;重度肺泡炎(+++):呈弥漫性分布,病变范围大于50%。以Mssson氏三色染色的切片将肺间质纤维化分为四级:无纤维化(-);轻度纤维化(+):受累范围小于20%;中度纤维化(++):受累范围占全肺的20%~50%,肺泡结构紊乱;重度肺纤维化(+++):受累范围大于50%,肺泡融合,肺实质结构紊乱。
1.3.3透射电镜观察
取其左肺中叶组织1mm3,经3%戊二醛预固定,1%四氧化锇再固定,丙酮逐级脱水,Epon812包埋,半薄片光学定位,超薄切片,醋酸铀及枸橼酸铅双重染色,以H-600IV型透射电镜观察。
1.4数据处理
结果以均数±标准差(x±s)表示,采用SPSS10.0统计软件包进行单因素方差分析,Q检验。等级资料结果采用Ridit分析。
2、结果
2.1各组肺系数比较(见表1)
由下表1可见,模型组肺系数明显高于空白组(P<0.01),本方组和泼尼松组均低于模型组(P均<0.05),但两组间比较无统计学意义(P>0.05)。
表1各试验组大鼠肺系数比较(x±s)
与空白组比较ΔP<0.01,与模型组比较,▲P<0.05,与泼尼松组比较,★P>0.05
2.2肺组织形态学观察
2.2.1肉眼观察
空白组双肺呈淡粉色,表面光滑弹性好。模型组肺颜色暗红,肺叶轮廓不清,质地变硬,肺体积略缩小,可见小片状、凹凸不平的苍白灶。本方组和泼尼松组肺颜色略显暗,表面稍粗糙,触之弹性尚可,体积无明显缩小。
2.2.2光镜观察
空白组无肺纤维化改变(无间质纤维组织增生),偶有炎性细胞,但肺泡结构完整。模型组肺泡结构紊乱,肺泡腔由胶原纤维、成纤维细胞及淋巴细胞占据;肺泡壁破坏,肺大泡形成,部分实变,肺泡隔显著增厚,有纤维结缔组织增生,呈中重度肺纤维化改变,淋巴细胞浸润,病损范围广泛。泼尼松组肺泡隔轻度增宽,可见间质水肿,部分大鼠肺内可见片状坏死,灶性脓肿,部分肺泡实变和炎性细胞浸润,但其肺泡炎及肺纤维化程度均较模型组减轻,部分大鼠只有轻中度纤维化形成。本方组呈轻度或轻中度肺纤维化改变,但病损范围局限,少量淋巴细胞浸润,肺泡间隔轻度增宽,其肺泡炎及肺纤维化程度均较模型组减轻。各组肺泡炎及纤维化程度见表2。
表2各试验组肺泡炎及肺间质纤维化程度比较
由表2可知,模型组肺泡炎及纤维化程度明显重于空白组,存在极显著性差异(P<0.01),提示动物模型复制成功。本方组、泼尼松组肺泡炎及纤维化程度与模型组比较有显著性差异(P<0.05),但两组间比较无统计学意义(P>0.05),提示本发明组方在一定程度上有减轻损伤性肺泡炎及阻抑器官纤维化的作用,且不会带来泼尼松所难避免的毒副作用。
2.2.3电镜观察
空白组可见I型细胞、II型细胞连接紧密,气血屏障正常,细胞间仅见少量基质和胶原纤维存在。模型组见Ⅰ型肺泡上皮细胞水肿,甚者剥脱,连接松散,并见上皮细胞外基膜区域性折叠、扭曲或缺损,Ⅱ型细胞增生,其内板层小体减少,呈空泡样变,纤维母细胞增生,胶原纤维明显增多,纵横交错排列。泼尼松组和本方治疗组之肺组织结构与模型组相较相对完整,大部分上皮细胞基膜完好,成纤维细胞增生和间质胶原纤维沉积之范围与程度均较模型组有所减轻。
3、讨论
包括肺间质纤维化在内的器官纤维化目前西医尚无治疗良策,现有化学药物不能在避免毒副作用的前提下有效改善患者的生活质量和显著延长其存活时间,而近两千年的历史文献记载和大量的实验研究及临床探索运用中医组方治疗却显示出了明显的优势。
本试验结果表明,模型组以肺纤维化病变为主,说明国际上通行的以BLMA5制作的大鼠肺纤维化模型是成功的。治疗组大鼠肺纤维化的程度和范围也较同期模型组减轻,肺系数值降低,提示本发明组方对肺纤维化具有明显阻抑作用(且并无化学药物所难避免的毒副作用)。
透射电镜观察的结果发现,模型组上皮细胞基膜完整性遭到破坏,成纤维细胞大量增生,功能活跃,粗面内质网扩张,前胶原增多,间质原胶原大量堆积。而本发明组方则具有保护肺泡上皮细胞基膜或减轻上皮细胞及其基膜损伤的作用,从而限制成纤维细胞增生及原胶原的合成,产生阻抑器官纤维化的治疗效应。
综上,本发明药物组合物能有效治疗器官纤维化特别是肺组织的纤维化,能改善其肺系数值及肺组织形态学状况、缓解其症状、提高其生存质量,且避免了西医化学药物的严重毒副作用,为临床用药提供了一种新的选择。
Claims (7)
1.一种治疗肺纤维化的药物组合物,其特征在于:它是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂:
白果10份,麻黄10份,桑白皮15份,苏梗12份,黄芩12份,三棱12份,水蛭5份,赤芍12份,丹参15份,当归12份,人参10份,黄芪18份,沙参18份,麦冬18份,甘草6份。
2.根据权利要求1所述的药物组合物,其特征在于:所述麻黄为炙麻黄,所述水蛭为吸血水蛭。
3.根据权利要求1或2所述的药物组合物,其特征在于:所述药物组合物是由所述重量配比的原料药的水或有机溶剂提取物为活性成分,加上药学上常用的辅料或者辅助性成分制备而成的制剂。
4.根据权利要求3所述的药物组合物,其特征在于:所述制剂为经胃肠道吸收制剂。
5.权利要求1~4任意一项所述药物组合物的制备方法,其特征在于:它包括如下步骤:
(1)按所述重量配比称取原料药;
(2)加水或有机溶剂提取,合并提取液,浓缩后,加上药学上可用的辅料或辅助性成分制备成常规制剂。
6.权利要求1~4任意一项所述药物组合物在制备治疗器官纤维化的药物中的用途;所述药物是治疗肺纤维化的药物。
7.根据权利要求6所述的用途,其特征在于:所述药物是治疗气血凝结、络道壅塞、热熏肺腑、阴亏喘促证型的肺纤维化的药物。
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