CN103857681A - 作为因子xia抑制剂的新的大环 - Google Patents

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Abstract

本发明提供式(Ia)化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中所有变量皆如本申请所定义。这些化合物为选择性因子XIa抑制剂或FXIa和血浆激肽释放酶的双重抑制剂。本发明也涉及包含这些化合物的药物组合物和使用其治疗血栓栓塞和/或炎性障碍的方法。

Description

作为因子XIA抑制剂的新的大环
技术领域
本发明大体涉及作为因子XIa和/或血浆激肽释放酶的抑制剂的新的大环化合物等，含有它们的组合物，和使用它们例如治疗或防治血栓栓塞障碍的方法。
背景技术
尽管可使用抗凝血剂(诸如华法林(warfarin)肝素、低分子量肝素(LMWH)和合成五糖)和抗血小板剂(诸如阿司匹林(aspirin)和氯吡格雷(clopidogrel)
Figure BDA0000487247700000011
但血栓栓塞疾病仍为发达国家的主要死亡原因。口服抗凝血剂华法林抑制凝血因子VII、IX、X和凝血酶原的转译后成熟，且被证明可有效用于静脉和动脉血栓形成。然而，其使用因其治疗指数较窄、治疗作用开始缓慢、许多膳食和药物相互作用以及需要监测和剂量调整而受限。因此，发现和研发用于预防和治疗广泛血栓栓塞障碍的安全且有效的口服抗凝血剂变得日益重要。
一种方法为通过以抑制凝血因子XIa(FXIa)为目标来抑制凝血酶产生。因子XIa为涉及凝血调节的血浆丝氨酸蛋白酶，所述凝血在体内由组织因子(TF)结合至因子VII(FVII)产生因子VIIa(FVIIa)而引发。所产生的TF:FVIIa复合物活化因子IX(FIX)和因子X(FX)，从而引起因子Xa(FXa)产生。在此路径由组织因子路径抑制因子(TFPI)阻断之前，所产生的FXa催化凝血酶原转化成少量凝血酶。凝血过程接着经由因子V、VIII和XI通过催化量的凝血酶的反馈活化而进一步扩展。(Gailani,D.等人，Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.,27:2507-2513(2007)。)所引起的凝血酶爆发会使纤维蛋白原转化成纤维蛋白，纤维蛋白聚合形成血液凝块的结构构架，且活化血小板，血小板为凝血的关键细胞组分(Hoffman,M.,BloodReviews,17:S1-S5(2003))。因此，因子XIa在扩展此放大回路中起关键作用且因此为有吸引力的用于抗血栓疗法的标靶。
发明内容
本发明提供适用作丝氨酸蛋白酶，尤其因子XIa和/或血浆激肽释放酶的选择性抑制剂的新的大环化合物、其类似物，包括其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物。
本发明也提供用于制备本发明化合物的方法和中间体。
本发明也提供药物组合物，其包含药学上可接受的载体和至少一种本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物。
本发明化合物可用于治疗和/或防治血栓栓塞障碍。
本发明化合物可用于疗法中。
本发明化合物可用于制备用于治疗和/或防治血栓栓塞障碍的药物。
本发明的化合物可单独使用，可与本发明的其它化合物组合使用，或与一种或多种，优选一种至两种其它药剂组合使用。
本发明的这些和其它特征将随着本发明继续而以展开形式阐述。
具体实施方式
I.本发明化合物
在第一方面中，本发明提供式(I)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(I)化合物为：
Figure BDA0000487247700000021
其中：
环A选自芳基和5元至6元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N、NH、N(C1-4烷基)、S(O)p和O的杂原子，其中所述芳基和杂环在价数允许的情况下任选被一个或多个R1取代；
环B为5元至6元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N、NH、S(O)p和O的杂原子，其中所述杂环在价数允许的情况下任选被一个或多个R10取代；
环C为4元至5元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N、NR9、S(O)p和O的杂原子，其中所述杂环在价数允许的情况下任选被一个或多个R2取代；
X1选自C1-4亚烷基和C2-4亚烯基；所述亚烷基和亚烯基的一个或多个碳原子可任选被O、S(O)p、NH和N(C1-4烷基)替代；
R1在每次出现时独立地选自H、卤素、NO2、C1-6烷基、OH、OMe和CN；
R2选自H、=O、OH、NH2、CF3、卤素和C1-4烷基(任选被OH取代)、C1-3烷氧基和C(O)C1-3烷基；
R3选自H和C1-4烷基；
或者，R2和R3连同它们直接或间接连接的原子一起形成环，其中所述环任选被=O取代；
R4选自H、C1-4烷基、羟基和C3-6环烷基；
R5选自H和C1-4烷基；
R6选自H、卤素、C(O)OH和C(O)O(C1-4烷基)；
R7选自H、C1-4烷基和CF3；
或者，R6连同R7一起为=O；
R8在每次出现时独立地选自H、卤素、NHC(O)O-C1-4烷基、CN、OH、O-C1-4烷基；CF3、CO2H、CO2(C1-4烷基)、-CH2CO2H、-(CH2)2CO2H、-CH2CO2(C1-4烷基)、-(CH2)2CO2(C1-4烷基)、NH2、-CH2NH2、-NHCO(C1-4烷基)、-NHCO2(CH2)1-2O(C1-4烷基)、-NHCO2(CH2)1-3O(C1-4烷基)、NHCO2CH2CH(C1-4烷基)O(C1-4烷基)、-NHCO2(CH2)1-2OH、-NHCO2CH2CO2H、-CH2NHCO2(C1-4烷基)、-NHC(O)NH(C1-4烷基)、-NHC(O)N(C1-4烷基)2、NHC(O)NH(C1-4烷基)N[5元至6元杂环)]、-NHSO2(C1-4烷基)、-CONH2、-CONH(C1-4烷基)、-CON(C1-4烷基)2和-CH2CONH2；
R9选自H和C1-4烷基；
R10在每次出现时独立地选自H、卤素、CN、OH、=O、NH2、C3-6环烷基、C1-4烷氧基、CF3、CH2OH、CO2H、CO2(C1-4烷基)和CONH；以及
p在每次出现时独立地选自0、1和2；
条件为不包括以下化合物：
Figure BDA0000487247700000041
在第二方面中，本发明提供式(II)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(II)化合物为：
Figure BDA0000487247700000042
其处于第一方面的范畴内，其中：
环A选自芳基和6元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至3个选自N、NH和N(C1-4烷基)的杂原子；
环B选自咪唑、吡啶、吡啶酮和哒嗪；
X1选自CH2和CH=CH；
W和Q各自独立地选自N、NR9、CR2和CHR2；以及
R2a选自H、NH2和C1-4烷基。
在第三方面中，本发明提供式(II)化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其处于第二方面的范畴内，其中：
环A选自苯基和哌啶；
Figure BDA0000487247700000051
独立地选自
Figure BDA0000487247700000052
以及
R10选自H、卤素和CN。
在第四方面中，本发明提供式(III)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(III)化合物为：
Figure BDA0000487247700000055
其处于第三方面的范畴内，其中：
Figure BDA0000487247700000056
独立地选自
Figure BDA0000487247700000057
Figure BDA0000487247700000058
W和Q各自独立地选自N和CR2；
R1a和R1b各自独立地选自H和卤素；
R2在每次出现时独立地选自H和任选被OH取代的C1-4烷基；
R2a选自H、NH2和Me；
R4选自H和C1-4烷基；
R5选自H和C1-4烷基；
R6独立地选自H、C(O)OH和C(O)O(C1-4烷基)；
R7选自H、C1-4烷基和CF3；
或者，R6连同R7一起为=O；以及
R10选自H、卤素和CN。
在第五方面中，本发明提供式(IV)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(IV)化合物为：
其处于第四方面的范畴内，其中：
W和Q各自独立地选自N和CH；
R1a和R1b各自独立地选自H、F和Cl；
R4选自H、甲基、乙基、丙基、异丙基和丁基；
R5为H；
R8为NHC(O)O-C1-4烷基；以及
R10选自H和CN。
在第六方面中，本发明提供式(V)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(V)化合物为：
其处于第五方面的范畴内，其中：
R1a选自H和F；
R1b为Cl；以及
R4选自H、甲基、乙基和异丙基。
在第七方面中，本发明提供式(VI)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述(VI)化合物为：
Figure BDA0000487247700000071
其处于第四方面的范畴内，其中：
Figure BDA0000487247700000072
独立地选自
Figure BDA0000487247700000073
Figure BDA0000487247700000074
W选自N和CH；
Q选自N和CH；
R1a和R1b各自独立地选自F和Cl；
R4选自H、甲基和乙基；以及
R8为NHC(O)OMe。
在另一方面中，本发明提供式(Ia)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(Ia)化合物为：
Figure BDA0000487247700000081
其中：
环A选自芳基和5元至6元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N、NH、N(C1-4烷基)、S(O)p和O的杂原子，其中所述芳基和杂环任选被R1取代；
环B为5元至6元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N、NH、S(O)p和O的杂原子，其中所述杂环任选被R10取代；
环C为4元至6元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N、NR9、S(O)p和O的杂原子，其中所述杂环任选被R2取代；
X选自C4-8亚烷基和C4-8亚烯基，其中所述亚烷基和亚烯基被R4和R5取代；或者，所述亚烷基和亚烯基的一个或多个碳原子可被O、C=O、S(O)p、NH和N(C1-4烷基)替代；
Y选自-CR6R7-NH-和-NH-CR6R7-；
R1选自H、卤素、NO2、C1-6烷基、OH、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、-C(=O)C1-3烷基和CN；
R2选自H、=O、OH、NH2、CF3、卤素、C1-4烷基(任选被OH取代)、C1-3烷氧基和C(O)C1-3烷基；
R3选自H和C1-4烷基；
或者，R2和R3连同它们直接或间接连接的原子一起形成环；
R4和R5独立地选自H、卤素、C1-6烷基、OH、NH2、-CH2NH2、C1-4卤代烷基、-OCH2F、-OCHF2、-OCF3、NH(C1-4烷基)、N(C1-4烷基)2、C1-4烷氧基、-CH2OH和-CH2O(C1-4烷基)；当R4与R5不连接至同一碳原子时，它们可连同它们所连接的碳原子一起形成碳环；
R6选自H、卤素、C(O)OH和C(O)O(C1-4烷基)；
R7选自H、C1-4烷基和CF3；
或者，R6连同R7一起为=O；
R8在每次出现时独立地选自H、卤素、卤代烷基、CN、-(CH2)nOH、NR12R12、-CH2NH2、C(O)OH、-(CH2)n-NHC(O)OR12、-NHC(O)R12、-NHC(O)C(O)R12、-NHC(N-CN)NHR12、-NHC(NH)NHR12、-N=CHNR12R12、-NHC(O)NR12R12、-NHS(O)2C1-4烷基、-(CH2)n-CONR12R12、-(CH2)nC(O)O(C1-4烷基)、-NHC(O)OCH2(C(CH2)2)O-(CH2)n-C3-10碳环、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代；
R9选自H和C1-4烷基；
R10选自H、卤素、CN、=O、OH、NH2、C3-6环烷基、C1-4烷基、C1-4烷氧基和C1-4卤代烷基；
R11选自H、卤素和甲基；
R12选自H、C1-4烷基(任选被卤素、羟基、烷氧基、羧基、烷氧羰基取代)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代；
R13选自OH、卤素、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(CH2)n-C(=O)OH、-(CH2)n-C(=O)OC1-4烷基、-(CH2)n-OC1-4烷基和=O；
n在每次出现时独立地选自0、1、2、3和4；
p在每次出现时独立地选自0、1和2；
条件为不包括以下化合物：
Figure BDA0000487247700000091
在另一方面中，本发明提供式(Ia)化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中：
环C为6元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N和NR9的杂原子，其中所述杂环任选被R2取代且其中所有变量具有如式(Ia)中所定义的含义。
在另一方面中，本发明提供式(Ia)化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中：
R8在每次出现时独立地选自卤代烷基、-CH2OH、NR12R12、-(CH2)n-NHC(O)OR12、-NHC(O)R12、-NHC(O)C(O)R12、-NHC(N-CN)NHR12、-NHC(NH)NHR12、-N=CHNR12R12、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代；
X选自-CR4R5-CR4R5-、-CR4R5-CR4R5-CR4R5-和-CR4=CR5CR4R5-，其中一个或多个-CR4R5-可被O或C=O替代；
R4选自H、F、Cl、OH和C1-4烷基；
R5选自H、F和C1-4烷基；当R4与R5不连接至同一碳原子时，它们可连同它们所连接的碳原子一起形成碳环；
R11为H；
R12选自H、C1-4烷基(任选被卤素、羟基、烷氧基、羧基、烷氧羰基取代)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代；
R13选自OH、卤素、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(CH2)n-C(=O)OH、-(CH2)n-C(=O)OC1-4烷基、-(CH2)n-OC1-4烷基和=O；以及
n在每次出现时独立地选自0、1、2和3，且
其中所有变量具有如式(Ia)中所定义的含义。
在另一方面中，本发明提供式(IIa)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(IIa)化合物为：
Figure BDA0000487247700000101
其中：
环A选自芳基和5元至6元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至3个选自N、NH和N(C1-4烷基)的杂原子；
环B选自咪唑、吡啶、吡啶酮、嘧啶和哒嗪；
X1a选自C2-4亚烷基和C2-4亚烯基，其中所述C2-4亚烷基和C2-4亚烯基任选被R4和R5取代；或者，所述亚烷基的一个或多个碳原子可被O和C=O替代；
U、V、W和Q各自独立地选自N、NR9、S、O、C、CR2和CHR2；
---为任选存在的键；
R1在每次出现时独立地选自H、卤素、NO2、C1-6烷基、OH、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基和CN；
R2选自H、=O、OH、NH2、CF3、卤素、任选被OH取代的C1-4烷基、C1-3烷氧基和C(O)C1-3烷基；
R3为H；
R4和R5独立地选自H、卤素、C1-6烷基、OH和NH2；当R4与R5不连接至同一碳原子时，它们可连同它们所连接的碳原子一起形成碳环；
R6选自H、卤素、C(O)OH和C(O)O(C1-4烷基)；
R7选自H、C1-4烷基和CF3；
或者，R6连同R7一起为=O；
R8在每次出现时独立地选自H、卤素、卤代烷基、CN、OH、NR12R12、C(O)OH、-(CH2)n-NHC(O)OR12、-NHC(O)R12、-NHC(O)NR12R12、-NHS(O)2C1-4烷基、-(CH2)n-CONR12R12、-(CH2)nC(O)O(C1-4烷基)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环(任选被R13取代)；
R9选自H和C1-4烷基；
R10在每次出现时独立地选自H、卤素、CN、=O、OH、NH2、C3-6环烷基、C1-4烷基、C1-4烷氧基和C1-4卤代烷基；
R11为H；
R12选自H、C1-4烷基(任选被卤素、羟基、烷氧基、羧基、烷氧羰基取代)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代；
R13选自OH、卤素、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(CH2)n-C(=O)OH、-(CH2)n-C(=O)OC1-4烷基、-(CH2)n-OC1-4烷基和=O；以及
n在每次出现时独立地选自0、1、2和3。
在另一方面中，本发明提供式(IIa)化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中：
环A选自苯基、哌啶和吡啶；
Figure BDA0000487247700000121
选自
Figure BDA0000487247700000122
Figure BDA0000487247700000123
以及
R10选自H、F、Cl、C1-4烷基、C1-4烷氧基和CN。
在另一方面中，本发明提供式(IIIa)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(IIIa)化合物为：
Figure BDA0000487247700000124
其中：
Figure BDA0000487247700000125
独立地选自
Figure BDA0000487247700000126
和
Figure BDA0000487247700000131
U、V、W和Q各自独立地选自N、NR9、S、C、CR2和CHR2；
X1a选自-CR4R5-CR4R5-、-CR4R5-CR4R5-CR4R5-和-CR4=CR5CR4R5-，其中一个或多个-CR4R5-可被O或C=O替代；
R1a和R1b各自独立地选自H、卤素、OH、CN、CH3、OCH3、CF3和OCHF2；
R2选自H、OH、NH2、CF3、卤素、C1-4烷基(任选被OH取代)、C1-3烷氧基和C(O)C1-3烷基；
R4选自H、F、Cl、OH和C1-4烷基；
R5选自H、F和C1-4烷基；
R6独立地选自H、C(O)OH和C(O)O(C1-4烷基)；
R7选自H、C1-4烷基和CF3；
或者，R6连同R7一起为=O；
R8在每次出现时独立地选自H、卤素、卤代烷基、CN、OH、NR12R12、-CH2NH2、C(O)OH和-NHC(O)OR12、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环(任选被R13取代)；
R9选自H和C1-4烷基；
R10选自H、卤素、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基和CN；
R12选自H、C1-4烷基(任选被F、OH、-O(C1-4烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4烷基)取代)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代；
R13选自OH、卤素、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(CH2)n-C(=O)OH、-(CH2)n-C(=O)OC1-4烷基、-(CH2)n-OC1-4烷基和=O；以及
n在每次出现时独立地选自0、1、2和3。
在另一方面中，本发明提供式(IVa)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(IVa)化合物为：
Figure BDA0000487247700000141
其中：
Figure BDA0000487247700000142
独立地选自
W和Q各自独立地选自N和CR2；
R1a选自H、F和Cl；
R1b选自H、F、Cl、OH、CN、CH3、OCH3、CF3和OCHF2；
R2选自H、OH、NH2、CF3、F、Cl和C1-4烷基；
R4选自H、F、甲基、乙基、丙基和异丙基；
R5为H和F；
R8在每次出现时独立地选自H、卤素、卤代烷基、CN、OH、NR12R12、C(O)OH和-NHC(O)OR12，和-(CH2)n-4元至10元杂环(任选被R13取代)；
R10选自H、卤素、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基和CN；
R12选自H、C1-4烷基(任选被F、OH、-O(C1-4烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4烷基)取代)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代；
R13选自OH、卤素、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(CH2)n-C(=O)OH、-(CH2)n-C(=O)OC1-4烷基、-(CH2)n-OC1-4烷基和=O；以及
n在每次出现时独立地选自0、1、2和3。
在另一方面中，本发明提供式(Va)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，：
Figure BDA0000487247700000151
其中：
Figure BDA0000487247700000152
独立地选自
Figure BDA0000487247700000153
Q选自N和CR2；
R1a选自H和F；
R1b为Cl；
R2选自H、OH、NH2、F、Cl和甲基；
R4选自H、OH、甲基、乙基和异丙基；
R5为H和F；
R8在每次出现时独立地选自H、NR12R12、C(O)OH、-NHC(O)OR12和-(CH2)n-4元至10元杂环(任选被R13取代)；
R10选自H、卤素、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基和CN；
R12选自H、C1-4烷基(任选被F、OH、-O(C1-4烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4烷基)取代)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代；
R13选自OH、卤素、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(CH2)n-C(=O)OH、-(CH2)n-C(=O)OC1-4烷基、-(CH2)n-OC1-4烷基和=O；以及
n在每次出现时独立地选自0、1、2和3。
在另一方面中，本发明提供式(Vab)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(Vab)化合物为：
Figure BDA0000487247700000161
其中R8选自C(O)OH和任选被R13取代的4元至10元杂环。
在另一方面中，本发明提供式(VIa)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(VIa)化合物为：
Figure BDA0000487247700000162
其中：
Figure BDA0000487247700000163
独立地选自
Figure BDA0000487247700000164
R1a选自H和F；
R1b为Cl；
R2选自H、OH、NH2、F、Cl和甲基；
R4选自H、OH、甲基、乙基和异丙基；
R5为H和F；
R8在每次出现时独立地选自H、NR12R12、C(O)OH和-NHC(O)OR12；
R10选自H、卤素、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基和CN；
R12选自H、C1-4烷基(任选被F、OH、-O(C1-4烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4烷基)取代)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代；
R13选自OH、卤素、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(CH2)n-C(=O)OH、-(CH2)n-C(=O)OC1-4烷基、-(CH2)n-OC1-4烷基和=O；以及
n在每次出现时独立地选自0、1、2和3。
在另一方面中，本发明提供式(VIIa)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(VIIa)化合物为：
其中：
Figure BDA0000487247700000172
独立地选自
W选自N和CR2；
Q选自N和CR2；
R1a选自H和F；
R1b为Cl；
R2选自H、Cl、NH2和甲基；
R4选自H、F、甲基、乙基、OH；
R5选自H和F；
R8选自H、NHR12、-(CH2)nOH、-NHC(N-CN)NHR12、-C(O)OH和-NHC(O)OR12，和-(CH2)n-4元至10元杂环(任选被R13取代)；
R10选自H、F、Cl、C1-2烷基、甲氧基、乙氧基和CN；
R12选自H、C1-4烷基(任选被F、OH、-OC1-4烷基、-C(O)OH、-C(O)OC1-4烷基、-O-芳基烷基取代)、-(CH2)n-C3-6环烷基和-(CH2)n-4元至6元杂环(包含碳原子和1至4个选自N、NH、N(C1-4烷基)和O的杂原子)，其中所述杂环任选被R13取代；
R13选自OH、OC1-4烷基、C1-6烷基(任选被烷氧基取代)、C3-6环烷基和=O；以及
n在每次出现时独立地选自0、1、2和3。
在另一方面中，本发明提供式(VIIa)化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物，其中：
Figure BDA0000487247700000181
独立地选自
Figure BDA0000487247700000182
W选自N和CR2；
Q选自N和CR2；
R1a选自H和F；
R1b为Cl；
R2选自H、Cl、NH2和甲基；
R4选自H、F、甲基、乙基、OH；
R5选自H和F；
R8选自H、NHR12、-C(O)OH和-NHC(O)OR12；
R10选自H、F、Cl、甲基、甲氧基、乙氧基和CN。
R12选自H、C1-4烷基(任选被F、OH、-OC1-4烷基、-C(O)OH、-C(O)OC1-4烷基取代)、-(CH2)n-C3-6环烷基和-(CH2)n-4元至6元杂环(包含碳原子和1至4个选自N、NH、N(C1-4烷基)和O的杂原子)，其中所述杂环任选被R13取代；
R13选自OH、OC1-4烷基、C1-6烷基(任选被烷氧基取代)、C3-6环烷基和=O；以及
n在每次出现时独立地选自0、1、2和3。
在另一方面中，本发明提供式(VIIIa)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(VIIIa)化合物为：
Figure BDA0000487247700000191
其中：
环B为5元至6元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N、NH、S(O)p和O的杂原子，其中所述杂环任选被R10取代；
环C为4元至6元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N、NR9、S(O)p和O的杂原子，其中所述杂环任选被R2取代；
X选自C4-8亚烷基和C4-8亚烯基，其中所述亚烷基和亚烯基被R4和R5取代；或者，所述亚烷基和亚烯基的一个或多个碳原子可被O、C=O、S(O)p、NH和N(C1-4烷基)替代；
Y选自-CR6R7-NH-和-NH-CR6R7-；
R1b选自H和Cl；
R2选自H、=O、OH、NH2、CF3、卤素、C1-4烷基(任选被OH取代)、C1-3烷氧基和C(O)C1-3烷基；
R3选自H和C1-4烷基；
R4和R5独立地选自H、卤素、C1-6烷基、OH、NH2、-CH2NH2、C1-4卤代烷基、-OCH2F、-OCHF2、-OCF3、NH(C1-4烷基)、N(C1-4烷基)2、C1-4烷氧基、-CH2OH和-CH2O(C1-4烷基)；当R4与R5不连接至同一碳原子时，它们可连同它们所连接的碳原子一起形成碳环；
R6选自H、卤素、C(O)OH和(O)O(C1-4烷基)；
R7选自H、C1-4烷基和CF3；
或者，R6连同R7一起为=O；
R8在每次出现时独立地选自H、卤素、卤代烷基、CN、-(CH2)nOH、NR12R12、-CH2NH2、C(O)OH、-(CH2)n-NHC(O)OR12、-NHC(O)R12、-NHC(O)C(O)R12、-NHC(=N-CN)NHR12、-NHC(=N-CN)NHR12、-N=CHNR12R12、-NHC(O)NR12R12、-NHS(O)2C1-4烷基、-(CH2)n-CONR12R12、-(CH2)nC(O)O(C1-4烷基)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代；
R9选自H和C1-4烷基；
R10选自H、卤素、CN、=O、OH、NH2、C3-6环烷基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷基、CH2OH、C(O)OH、C(O)O(C1-4烷基)和CONH；
R11选自H、卤素和甲基；
R12选自H、C1-4烷基(任选被卤素、羟基、烷氧基、羧基、烷氧羰基取代)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代；
R13选自OH、卤素、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(CH2)n-C(=O)OH、-(CH2)n-C(=O)OC1-4烷基、-(CH2)n-OC1-4烷基和=O；
n在每次出现时独立地选自0、1、2、3和4；
p在每次出现时独立地选自0、1和2。
在另一方面中，本发明提供式(IIa)化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中环A为
Figure BDA0000487247700000201
X1a选自-CR4R5-CR4R5-、-CR4R5-CR4R5-CR4R5-和-CR4=CR5CR4R5-，其中一个或多个-CR4R5-可被O或C=O替代。所有其它变量具有如式(IIa)中所定义的含义。
在另一方面中，本发明提供式(IXa)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，：
Figure BDA0000487247700000211
其中变量具有如式(IIa)中所定义的含义。
在一个实施方案中，本发明提供式(I)或(II)的化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中：
环A选自哌啶和苯基，所述基团任选被R1取代。
R1在每次出现时独立地选自H、卤素、卤代烷基、NO2、CO(C1-4烷基)、C1-6烷基、OH、OMe和CN。
在另一实施方案中，环A选自其中R1在每次出现时独立地选自H、卤素和C1-6烷基。
在另一实施方案中，环A为
Figure BDA0000487247700000213
且选自
Figure BDA0000487247700000214
在另一实施方案中，环A为
Figure BDA0000487247700000215
且选自
Figure BDA0000487247700000216
Figure BDA0000487247700000221
在另一实施方案中，环A为
Figure BDA0000487247700000222
在另一实施方案中，本发明提供式(I)、(II)或(III)的化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中环B选自咪唑、噁二唑、吡啶、吡啶酮、哒嗪、哒嗪酮和苯基。
在另一实施方案中，
Figure BDA0000487247700000223
选自
Figure BDA0000487247700000224
Figure BDA0000487247700000225
在另一实施方案中，
Figure BDA0000487247700000226
选自
Figure BDA0000487247700000227
Figure BDA0000487247700000228
在另一实施方案中，
Figure BDA0000487247700000231
选自
Figure BDA0000487247700000232
在另一实施方案中，
Figure BDA0000487247700000234
选自
Figure BDA0000487247700000235
在另一实施方案中，
Figure BDA0000487247700000237
为
Figure BDA0000487247700000238
在另一实施方案中，
Figure BDA0000487247700000239
为
Figure BDA00004872477000002310
在另一实施方案中，
Figure BDA00004872477000002311
为
Figure BDA00004872477000002312
在另一实施方案中，
Figure BDA00004872477000002313
为
Figure BDA00004872477000002314
在另一实施方案中，环C为4元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N、NR9、S(O)p和O的杂原子。
在另一实施方案中，环C为
Figure BDA0000487247700000241
其中氮杂环丁烷环中的氮连接至环A。
在另一实施方案中，环C为5元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N、NR9、S(O)p和O的杂原子。
在另一实施方案中，环C为
Figure BDA0000487247700000242
其中W和Q各自独立地选自C、N、O和S，其中碳为四价，氮为三价，且硫和氧为二价；以及
Figure BDA0000487247700000243
为单键或双键。
在另一实施方案中，环C为其中W和Q各自独立地选自N、NR9、CR2和CHR2。
在另一实施方案中，环C为5元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N、NR9、S(O)p和O的杂原子。
在另一实施方案中，环C为
Figure BDA0000487247700000245
其中U、V、W和Q各自独立地选自C、N、O和S，其中碳为四价，氮为三价，且硫和氧为二价；以及为单键或双键。
在另一实施方案中，其中U、V、W和Q各自独立地选自N、NR9、S、O、C、CR2和CHR2。
在另一实施方案中，环C为
在另一实施方案中，环C为
在另一实施方案中，环C为
在另一实施方案中，环C为
Figure BDA0000487247700000252
在另一实施方案中，环C为
Figure BDA0000487247700000253
在另一实施方案中，环C为
Figure BDA0000487247700000254
在另一实施方案中，环C为
在另一实施方案中，环C为
Figure BDA0000487247700000256
其中W和Q各自独立地选自N、NR9、CR2和CHR2；
R2a选自H、=O、OH、NH2、CF3、卤素和任选被OH取代的C1-4烷基。
在另一实施方案中，环C为
Figure BDA0000487247700000257
其中Q选自N和CR2；
R2选自H、NH2和被OH取代的C1-4烷基。
在另一实施方案中，环C为
Figure BDA0000487247700000261
在另一实施方案中，环C为
Figure BDA0000487247700000262
W选自N和CR2。
在另一实施方案中，环C为
Figure BDA0000487247700000263
在另一实施方案中，环C为
Figure BDA0000487247700000264
在另一实施方案中，环C为
Figure BDA0000487247700000265
在另一实施方案中，环C为6元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N、NR9、S(O)p和O的杂原子。
在另一实施方案中，环C为
Figure BDA0000487247700000266
在一个实施方案中，X1a选自C2-3亚烷基和C2-4亚烯基；其中所述亚烷基和亚烯基任选被F、OH和C1-4烷基取代；或者，所述亚烷基和亚烯基的一或两个碳原子可被O、NH和N(C1-4烷基)替代。
在另一实施方案中，X1a选自-CH2CH2-、-CHFCH2-、-CH2CHF-、-CH=CHCH2-、-CH=C(C1-4烷基)CH2-、-C(C1-4烷基)=CHCH2-、-CH2OCH2-、-CH2CH2O-、-OCH2CH2-、-CH2CF2-、-(CH2)4CH(CF3)-、-CH2CH2NHCO-、-CH2NHCH2-、-CH2N(C1-4烷基)CH2-、-CH2CONH-、-CH2-CONH-CH2-和-CH2-CON(C1-4烷基)。
在另一实施方案中，X1a选自-CH2CH2-、-CH=CHCH2-、-C(Me)=CHCH2-和-CH2NHCH2-。
在另一实施方案中，X1a选自-CH2CH2-、-CH=CHCH2-、-CHFCH2-和-CH2CHF-。
在另一实施方案中，X1a选自-CH2CH2-和-CH=CHCH2-。
在另一实施方案中，X1a为-CH2CH2-。
在一个实施方案中，X1选自C1-3亚烷基和C2-4亚烯基；其中所述亚烷基和亚烯基任选被OH和C1-4烷基取代；或者，所述亚烷基和亚烯基的一或两个碳原子可被O、S(O)p、NH、N(C1-4烷基)、CONH或CON(C1-4烷基)替代。
在另一实施方案中，X1选自-CH2-、-CH(C1-4烷基)、-CH2-CH2-、-CH=CH-、-CH=C(C1-4烷基)-、-C(C1-4烷基)=CH-、-OCH2-、-CH2O-、-CF2-、-(CH2)4CH(CF3)-、-CH2NHCO-、-CH2NHCH2-、-CH2N(C1-4烷基)CH2-、-CH2CONH-、-CH2-CONH-CH2-和-CH2-CON(C1-4烷基)。
在另一实施方案中，X1选自-CH2-、-CH=CH-、-C(Me)=CH-、-C≡C-和-CH2NH-。
在另一实施方案中，X1选自-CH2-、-CH=CH-和-C(Me)=CH-。
在另一实施方案中，X1选自-CH2-和-CH=CH-。
在另一实施方案中，X1为-CH2-。
在一个实施方案中，R1在每次出现时独立地选自H、卤素、NO2、C1-6烷基、C1-4烷氧基、CO(C1-4烷基)、C1-4烷硫基、OH、CH2F、CHF2、CF3、OCH2F、OCHF2、OCF3、CN和NH2。
在另一实施方案中，R1在每次出现时独立地选自H、卤素、NO2、C1-6烷基、OH、OMe和CN。
在另一实施方案中，R1在每次出现时独立地选自H和卤素。
在另一实施方案中，环A为其中R1a和R1b各自独立地选自H和卤素。
在另一实施方案中，R1a选自H、F和Cl。
在另一实施方案中，R1a选自H和F。
在另一实施方案中，R1a为F且R1b为Cl。
在另一实施方案中，R3选自H和C1-4烷基。
在另一实施方案中，R3为H。
在另一实施方案中，R4选自H、C1-4烷基和羟基。
在另一实施方案中，R4选自H和C1-4烷基。
在另一实施方案中，R4选自H和甲基、乙基、异丙基和C3-6环烷基。
在另一实施方案中，R5选自H和C1-4烷基。
在另一实施方案中，R5选自H和甲基。
在另一实施方案中，R6选自H、卤素、卤代烷基、C(O)OH、C(O)O-Ra、C(O)NRbRc，其中：
Ra选自C1-4烷基、C3-6环烷基、5元至6元杂芳基、4元至7元杂环和苯甲基，所述基团任选被OH、OMe和卤素取代；
Rb选自H和C1-6烷基；
Rc选自H和C1-6烷基；
或者，Rb和Rc连同它们所连接的氮原子一起形成4元至7元杂环，所述杂环任选被OH、OMe和卤素取代。
在另一实施方案中，R6选自H、卤素、C(O)OH和C(O)O(C1-4烷基)。
在另一实施方案中，R7选自H、C1-4烷基和CF3。
在另一实施方案中，R6连同R7一起为=O。
在另一实施方案中，R8选自H、卤素、卤代烷基、CN、OH、NR12R12、-CH2NH2、C(O)OH、-(CH2)n-NHC(O)OR12、-NHC(O)R12、-NHC(O)NR12R12、-NHS(O)2C1-4烷基、-(CH2)n-CONR12R12、-(CH2)nC(O)O(C1-4烷基)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代。
在另一实施方案中，R8选自H、CN、OH、NR12R12、C(O)OH、-(CH2)n-NHC(O)OR12、-NHS(O)2C1-4烷基、-(CH2)n-CONR12R12、-(CH2)nC(O)O(C1-4烷基)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环(任选被R13取代)。
在另一实施方案中，R8选自H、NR12R12、C(O)OH和NHC(O)O-C1-4烷基。
在另一实施方案中，R8为NH2、C(O)OH和NHC(O)OR12。
在另一实施方案中，R12选自H、C1-4烷基(任选被卤素、羟基、烷氧基、羧基、烷氧羰基取代)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代。
在另一实施方案中，R12选自H、C1-4烷基(任选被F、OH、-O(C1-4烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4烷基)取代)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代。
在另一实施方案中，R12选自甲基、-(CH2)n-OC1-4烷基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-C3-6环烷基和-(CH2)n-5元杂环，所述杂环任选被R13取代且选自
Figure BDA0000487247700000291
R13选自OH、卤素、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(CH2)n-C(=O)OH、-(CH2)n-C(=O)OC1-4烷基、-(CH2)n-OC1-4烷基和=O。
在另一实施方案中，R8选自H、卤素、NHC(O)O-C1-4烷基、CN、OH、O-C1-4烷基；CF3、CO2H、CO2(C1-4烷基)、-CH2CO2H、-(CH2)2CO2H、-CH2CO2(C1-4烷基)、-(CH2)2CO2(C1-4烷基)、NH2、-CH2NH2、-NHCO(C1-4烷基)、-NHCO2(CH2)1-2O(C1-4烷基)、-NHCO2(CH2)1-3O(C1-4烷基)、NHCO2CH2CH(C1-4烷基)O(C1-4烷基)、-NHCO2(CH2)1-2OH、-NHCO2CH2CO2H、-CH2NHCO2(C1-4烷基)、-NHC(O)NH(C1-4烷基)、-NHC(O)N(C1-4烷基)2、NHC(O)NH(C1-4烷基)N[5元至6元杂环)]、-NHSO2(C1-4烷基)、-CONH2、-CONH(C1-4烷基)、-CON(C1-4烷基)2和-CH2CONH2。
在另一实施方案中，R8选自H、卤素、NHC(O)O-C1-4烷基、NHC(O)(CH2)2OMe、CN、OH和O-C1-4烷基。
在另一实施方案中，R8为NHC(O)O-C1-4烷基。
在另一实施方案中，本发明提供式(I)化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中：
环A为6元芳基或哌啶，所述环部分任选被R1取代；
环B选自咪唑、噁二唑、吡啶、吡啶酮、哒嗪、哒嗪酮、嘧啶和苯基，所述环部分任选被R10取代；以及
环C选自咪唑、吡唑、吡咯和三唑，所述环部分任选被R2取代。
在一个实施方案中，本发明提供式(VII)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(VII)化合物为：
Figure BDA0000487247700000301
其中：
环B为5元至6元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N、NH、S(O)p和O的杂原子，其中所述杂环在价数允许的情况下任选被一个或多个R10取代；
环C为4元至5元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N、NR9、S(O)p和O的杂原子，其中所述杂环在价数允许的情况下任选被一个或多个R2取代；
X1选自C1-4亚烷基和C2-4亚烯基，其中所述亚烷基和亚烯基任选被OH和C1-4烷基取代；或者，所述亚烷基和亚烯基的一个或多个碳原子可被O、S(O)p、NH和N(C1-4烷基)替代；
R1a和R1b各自独立地选自H和卤素；
R2选自H、=O、OH、NH2、CF3、卤素和任选被OH取代的C1-4烷基；
R3选自H和C1-4烷基；
或者，R2和R3连同它们直接或间接连接的原子一起形成环，其中所述环任选被=O取代；
R4选自H、C1-4烷基、羟基和C3-6环烷基；
R5选自H和C1-4烷基；
R6选自H、卤素、卤代烷基、C(O)OH、C(O)O-R11和C(O)NR12R13；
R7选自H、C1-4烷基和CF3；
或者，R6连同R7一起为=O；
R8选自H、卤素、NHC(O)O-C1-4烷基、CN、OH、O-C1-4烷基；CF3、CO2H、CO2(C1-4烷基)、-CH2CO2H、-(CH2)2CO2H、-CH2CO2(C1-4烷基)、-(CH2)2CO2(C1-4烷基)、NH2、-CH2NH2、-NHCO(C1-4烷基)、-NHCO2(CH2)1-2O(C1-4烷基)、-NHCO2(CH2)1-3O(C1-4烷基)、NHCO2CH2CH(C1-4烷基)O(C1-4烷基)、-NHCO2(CH2)1-2OH、-NHCO2CH2CO2H、-CH2NHCO2(C1-4烷基)、-NHC(O)NH(C1-4烷基)、-NHC(O)N(C1-4烷基)2、NHC(O)NH(C1-4烷基)N[5元至6元杂环)]、-NHSO2(C1-4烷基)、-CONH2、-CONH(C1-4烷基)、-CON(C1-4烷基)2和-CH2CONH2；
R9选自H和C1-4烷基；
R10在每次出现时独立地选自H、卤素、CN、OH、=O、NH2、C3-6环烷基、C1-4烷氧基、CF3、CH2OH、CO2H、CO2(C1-4烷基)和CONH；
R11选自C1-4烷基、C3-6环烷基、5元至6元杂芳基、4元至7元杂环和苯甲基，所述基团任选被OH、OMe和卤素取代；
R12选自H和C1-6烷基；
R13选自H和C1-6烷基；
或者，R12和R13连同它们所连接的氮原子一起形成4元至7元杂环，所述杂环任选被OH、OMe和卤素取代；以及
p在每次出现时独立地选自0、1和2。
在另一实施方案中，本发明提供式(VII)化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中：
Figure BDA0000487247700000311
选自
Figure BDA0000487247700000312
Figure BDA0000487247700000313
环C为
Figure BDA0000487247700000314
R2选自H和NH2；以及
R4选自H、甲基和乙基；以及
R6连同R7一起为=O；以及
R8为NHC(O)O-C1-4烷基。
在另一实施方案中，本发明提供式(VII)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(VII)化合物为：
Figure BDA0000487247700000321
其中变量具有如式(VII)中所定义的含义。
在另一实施方案中，本发明提供式(IX)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，：
Figure BDA0000487247700000322
其中变量具有如式(VII)中所定义的含义。
在另一实施方案中，本发明提供式(IXa)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(IXa)化合物为：
Figure BDA0000487247700000331
其中变量具有如式(IVa)中所定义的含义。
在另一实施方案中，本发明提供式(X)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(X)化合物为：
Figure BDA0000487247700000332
其中变量具有如式(VII)中所定义的含义。
在另一实施方案中，本发明提供式(XI)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(XI)化合物为：
其中变量具有如式(VII)中所定义的含义。
在另一实施方案中，本发明提供式(XIa)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述式(XIa)化合物为：
Figure BDA0000487247700000341
其中变量具有如式(IVa)中所定义的含义。
在另一方面中，本发明提供选自本申请案中所例示的化合物的任何子集清单的化合物。
在另一实施方案中，本发明化合物对因子XIa的Ki值≤10μM。
在另一实施方案中，本发明化合物对因子XIa的Ki值≤1μM。
在另一实施方案中，本发明化合物对因子XIa的Ki值≤0.5μM。
在另一实施方案中，本发明化合物对因子XIa的Ki值≤0.1μM。
II.本发明的其它实施方案
在另一实施方案中，本发明提供一种组合物，其包含至少一种本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物。
在另一实施方案中，本发明提供一种药物组合物，其包含药学上可接受的载体和至少一种本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物。
在另一实施方案中，本发明提供一种药物组合物，其包含：药学上可接受的载体和治疗有效量的至少一种本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物。
在另一实施方案中，本发明提供一种用于制备本发明化合物的方法。
在另一实施方案中，本发明提供用于制备本发明化合物的中间体。
在另一实施方案中，本发明提供一种药物组合物，其进一步包含其它治疗剂。在一优选实施方案中，本发明提供药物组合物，其中其它治疗剂为抗血小板剂或其组合。优选地，抗血小板剂为氯吡格雷和/或阿司匹林或其组合。
在另一实施方案中，本发明提供一种治疗和/或防治血栓栓塞障碍的方法，其包含给予需要该治疗和/或防治的患者治疗有效量的至少一种本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物。
在另一实施方案中，本发明提供本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于疗法中。
在另一实施方案中，本发明提供本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗和/或防治血栓栓塞障碍的疗法中。
在另一实施方案中，本发明也提供本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物的用途，其用于制备用于治疗和/或防治血栓栓塞障碍的药物。
在另一实施方案中，本发明提供一种治疗和/或防治血栓栓塞障碍的方法，其包含：给予有需要的患者治疗有效量的第一和第二治疗剂，其中所述第一治疗剂为本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，且该第二治疗剂为至少一种选自以下的药剂：第二因子Xa抑制剂、抗凝血剂、抗血小板剂、凝血酶抑制剂、血栓溶解剂和纤维蛋白溶解剂。优选地，所述第二治疗剂为至少一种选自以下的药剂：华法林、未分离肝素、低分子量肝素、合成五糖、水蛭素(hirudin)、阿加曲班(argatroban)、阿司匹林、布洛芬(ibuprofen)、萘普生(naproxen)、舒林酸(sulindac)、吲哚美辛(indomethacin)、甲芬那酸酯(mefenamate)、屈噁昔康(droxicam)、双氯芬酸(diclofenac)、磺吡酮(sulfinpyrazone)、吡罗昔康(piroxicam)、噻氯匹定(ticlopidine)、氯吡格雷、替罗非班(tirofiban)、依替巴肽(eptifibatide)、阿昔单抗(abciximab)、美拉加群(melagatran)、去硫酸酯基水蛭素(desulfatohirudin)、组织纤维蛋白溶酶原活化剂、被修饰的组织纤维蛋白溶酶原活化剂、阿尼普酶(anistreplase)、尿激酶和链激酶。优选地，所述第二治疗剂为至少一种抗血小板剂。优选地，抗血小板剂为氯吡格雷和/或阿司匹林或其组合。
血栓栓塞障碍包括动脉心血管血栓栓塞障碍、静脉心血管血栓栓塞障碍、动脉脑血管血栓栓塞障碍和静脉脑血管血栓栓塞障碍。血栓栓塞障碍的实例包括(但不限于)不稳定型心绞痛、急性冠脉综合征、心房颤动、初发性心肌梗塞、复发性心肌梗塞、缺血性猝死、短暂性缺血性发作、中风、动脉粥样硬化、周围阻塞性动脉疾病、静脉血栓形成、深静脉血栓形成、血栓性静脉炎、动脉栓塞、冠状动脉血栓形成、脑动脉血栓形成、脑栓塞、肾栓塞、肺栓塞，和由使血液暴露于促进血栓形成的人工表面的医学植入物、设备或操作引起的血栓形成。
在另一实施方案中，本发明提供一种治疗和/或防治炎性障碍的方法，其包含：给予需要该治疗和/或防治的患者治疗有效量的至少一种本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物。炎性障碍的实例包括(但不限于)败血症、急性呼吸窘迫综合征和全身性炎性反应综合征。
在另一实施方案中，本发明提供本发明化合物与其它治疗剂的组合制剂，本发明化合物与其它治疗剂同时、单独或依序用于疗法中。
在另一实施方案中，本发明提供本发明化合物与其它治疗剂的组合制剂，本发明化合物与其它治疗剂同时、单独或依序用于治疗和/或防治血栓栓塞障碍。
本发明可在不背离本发明的精神或基本特性的情况下以其它特定形式具体化。本发明涵盖本申请所述的本发明优选方面的所有组合。应了解，本发明的任何和所有实施方案可连同任何其它实施方案一起来描述其它实施方案。也应了解，实施方案的每个单独的要素为其自身独立的实施方案。此外，一个实施方案的任何要素意图与任何实施方案的任何和所有其它要素组合来描述其它实施方案。
III.化学
在整个本说明书和随附权利要求中，既定化学式或名称应涵盖其所有立体异构体和光学异构体以及存在这种异构体的外消旋物。除非另外指示，否则所有手性(对映异构和非对映异构)和外消旋形式皆处于本发明的范畴内。化合物中也可存在C=C双键、C=N双键、环系统等的多种几何异构体，且所有这种稳定异构体皆涵盖于本发明中。本发明化合物的顺式和反式(或E型和Z型)几何异构体得以描述且其可分离成异构体混合物或分离的异构形式。本发明化合物可以光学活性或外消旋形式分离。光学活性形式可通过拆分外消旋形式或通过自光学活性起始物质合成来制备。所有用于制备本发明化合物的方法和其中制得的中间体是视作本发明的一部分。当制备对映异构或非对映异构产物时，其可通过例如色谱或分步结晶的常规方法来进行分离。视方法条件而定，以游离(中性)或盐形式获得本发明的最终产物。这些最终产物的游离形式和盐皆处于本发明的范畴内。必要时，可使化合物的一种形式转化为另一形式。可使游离碱或酸转化为盐；可使盐转化为游离化合物或另一盐；可将本发明异构化合物的混合物分离成个别异构体。本发明化合物、其游离形式和盐可以多种互变异构形式存在，其中氢原子移位至分子的其它部分且分子的原子之间的化学键因此重排。应了解，所有互变异构形式在可能存在的情况下皆包括于本发明内。
术语“立体异构体”是指构成相同而原子在空间上的排列不同的异构体。对映异构体和非对映异构体为立体异构体的实例。术语“对映异构体”是指一对彼此互为镜像且不可重叠的分子物质中的一个。术语“非对映异构体”是指不互为镜像的立体异构体。术语“外消旋物”或“外消旋混合物”是指由等摩尔量的两种对映异构物质构成的组合物，其中所述组合物无光学活性。
符号“R”和“S”表示围绕手性碳原子的取代基的构型。异构描述词“R”和“S”如本申请所述用于指示相对于核心分子的原子构型且意图如文献(IUPACRecommendations1996,PureandAppliedChemistry,68:2193-2222(1996))中所定义来使用。
术语“手性”是指分子的使其不可能重叠于其镜像上的结构特征。术语“纯手性”是指对映异构纯度的状态。术语“光学活性”是指纯手性分子或手性分子的非外消旋混合物使平面偏振光旋转的程度。
如本申请所用的术语“烷基”或“亚烷基”意图包括具有指定数目的碳原子的支链和直链饱和脂族烃基。例如，“C1至C10烷基”或“C1-10烷基”(或亚烷基)意图包括C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9和C10烷基。另外，例如，“C1至C6烷基”或“C1-C6烷基”表示具有1至6个碳原子的烷基。烷基可未被取代或因至少一个氢被另一化学基团替代而被取代。例示性烷基包括(但不限于)甲基(Me)、乙基(Et)、丙基(例如正丙基和异丙基)、丁基(例如正丁基、异丁基、叔丁基)和戊基(例如正戊基、异戊基、新戊基)。当使用“C0烷基”或“C0亚烷基”时，意图表示直接键。
“烯基”或“亚烯基”意图包括具有直链或支链构型的烃链，其具有指定数目的碳原子和一个或多个，优选一个至两个可沿该链存在于任何稳定点的碳-碳双键。例如，“C2至C6烯基”或“C2-6烯基”(或亚烯基)意图包括C2、C3、C4、C5和C6烯基。烯基的实例包括(但不限于)乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、5-己烯基、2-甲基-2-丙烯基和4-甲基-3-戊烯基。
“炔基”或“亚炔基”意图包括具有直链或支链构型的烃链，其具有一个或多个，优选一至三个可沿该链存在于任何稳定点的碳-碳参键。例如，“C2至C6炔基”或“C2-6炔基”(或亚炔基)意图包括C2、C3、C4、C5和C6炔基；诸如乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基和己炔基。
术语“烷氧基”或“烷基氧基”是指-O-烷基。“C1至C6烷氧基”或“C1-6烷氧基”(或烷基氧基)意图包括C1、C2、C3、C4、C5和C6烷氧基。例示性烷氧基包括(但不限于)甲氧基、乙氧基、丙氧基(例如正丙氧基和异丙氧基)和叔丁氧基。同样，“烷硫基”或“硫烷氧基”表示经由硫桥连接的具有所示数目的碳原子的如上文所定义的烷基；例如甲基-S-和乙基-S-。
“卤代”或“卤素”包括氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)和碘(I)。“卤代烷基”意图包括具有指定数目的碳原子且被1个或1个以上卤素取代的支链和直链饱和脂族烃基。卤代烷基的实例包括(但不限于)氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基、五氯乙基、2,2,2-三氟乙基、七氟丙基和七氯丙基。卤代烷基的实例也包括“氟烷基”，其意图包括具有指定数目的碳原子且被1个或1个以上氟原子取代的支链和直链饱和脂族烃基。
“卤代烷氧基”或“卤代烷基氧基”表示经由氧桥连接的具有所示数目的碳原子的如上文所定义的卤代烷基。例如，“C1至C6卤代烷氧基”或“C1-6卤代烷氧基”意图包括C1、C2、C3、C4、C5和C6卤代烷氧基。卤代烷氧基的实例包括(但不限于)三氟甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基和五氟乙氧基。同样，“卤代烷硫基”或“硫代卤代烷氧基”表示经由硫桥连接的具有所示数目的碳原子的如上文所定义的卤代烷基；例如三氟甲基-S-和五氟乙基-S-。
术语“羧基”是指基团-C(=O)OH。
术语“烷氧羰基”是指基团-C(=O)ORw，其中Rw为烷基、被取代的烷基、环烷基或被取代的环烷基。
术语“环烷基”是指环化的烷基，包括单环、二环或多环系统。“C3至C7环烷基”或“C3-7环烷基”意图包括C3、C4、C5、C6和C7环烷基。例示性环烷基包括(但不限于)环丙基、环丁基、环戊基、环己基和降冰片基。支链环烷基(诸如1-甲基环丙基和2-甲基环丙基)包括于“环烷基”的定义中。
如本申请所用的“碳环”或“碳环残基”意图表示任何稳定的3元、4元、5元、6元、7元或8元单环或二环或7元、8元、9元、10元、11元、12元或13元二环或三环，其中的任一个可为饱和、部分不饱和、不饱和环或芳环。这种碳环的实例包括(但不限于)环丙基、环丁基、环丁烯基、环戊基、环戊烯基、环己基、环庚烯基、环庚基、环庚烯基、金刚烷基、环辛基、环辛烯基、环辛二烯基、[3.3.0]二环辛烷、[4.3.0]二环壬烷、[4.4.0]二环癸烷(十氢萘)、[2.2.2]二环辛烷、芴基、苯基、萘基、二氢茚基、金刚烷基、蒽基和四氢萘基(萘满)。如上所示，桥连环也包括于碳环的定义中(例如[2.2.2]二环辛烷)。除非另外说明，否则优选碳环为环丙基、环丁基、环戊基、环己基、苯基和二氢茚基。当使用术语“碳环”时，意图包括“芳基”。当一个或多个碳原子连接两个不相邻碳原子时，存在桥连环。优选的桥为一或两个碳原子。应注意，桥始终使单环转化成三环。当环桥连时，对于该环所述的取代基也可存在于桥上。
如本申请所用的术语“二环碳环”或“二环碳环基”意图表示含有两个稠合环且由碳原子组成的稳定9元或10元碳环系统。在两个稠合环中，一个环为稠合至第二环的苯并环；以及第二环为饱和、部分不饱和或不饱和的5元或6元碳环。二环碳环基可在产生稳定结构的任何碳原子处连接至其侧基。本申请所述的二环碳环基可在任何碳上被取代，只要所产生的化合物为稳定的即可。二环碳环基的实例为(但不限于)萘基、1,2-二氢萘基、1,2,3,4-四氢萘基和二氢茚基。
“芳基”指单环或多环芳族烃，包括例如苯基、萘基和菲基。芳基部分为熟知的且描述于例如Hawley'sCondensedChemicalDictionary(第13版),Lewis,R.J.编，J.Wiley&Sons,Inc.,NewYork(1997)中。“C6或C10芳基”或“C6-10芳基”是指苯基和萘基。除非另外说明，否则“芳基”、“C6或C10芳基”或“C6-10芳基”或“芳族残基”可未被取代或被1至5个基团，优选1至3个基团(OH、OCH3、Cl、F、Br、I、CN、NO2、NH2、N(CH3)H、N(CH3)2、CF3、OCF3、C(=O)CH3、SCH3、S(=O)CH3、S(=O)2CH3、CH3、CH2CH3、CO2H和CO2CH3)取代。
术语“芳基烷基氧基”是指经由氧键键结的芳基烷基(-O-芳基烷基)。
如本申请所用的术语“苯甲基”是指一个氢原子被苯基替代的甲基，其中所述苯基可任选被1至5个基团，优选1至3个基团(OH、OCH3、Cl、F、Br、I、CN、NO2、NH2、N(CH3)H、N(CH3)2、CF3、OCF3、C(=O)CH3、SCH3、S(=O)CH3、S(=O)2CH3、CH3、CH2CH3、CO2H和CO2CH3)取代。
如本申请所用的术语“杂环”或“杂环基”意图表示稳定3元、4元、5元、6元或7元单环或二环或7元、8元、9元、10元、11元、12元、13元或14元多环杂环，其为饱和、部分不饱和或完全不饱和的且含有碳原子和1、2、3或4个独立地选自N、O和S的杂原子；以及包括上文所定义的任何杂环稠合至苯环的任何多环基团。氮和硫杂原子可任选被氧化(也即N→O和S(O)p，其中p为0、1或2)。氮原子可被取代或未被取代(也即N或NR，其中R为H或另一取代基，如果定义的话)。杂环可在产生稳定结构的任何杂原子或碳原子处连接至其侧基。本申请中所述的杂环可在碳或氮原子上被取代，只要所产生的化合物为稳定的即可。杂环中的氮可任选被季铵化。当杂环中S和O原子的总数超过1时，则这些杂原子优选彼此不相邻。杂环中S和O原子的总数优选不超过1。当使用术语“杂环”时，意图包括杂芳基。
杂环的实例包括(但不限于)吖啶基、氮杂环丁基、吖辛因基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并硫代呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噁唑啉基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并咪唑啉基、咔唑基、4aH-咔唑基、咔啉基、色满基、色烯基、噌啉基、十氢喹啉基、2H,6H-1,5,2-二噻嗪基、二氢呋喃并[2,3-b]四氢呋喃、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、1H-吲唑基、咪唑并吡啶基、吲哚烯基、吲哚啉基、吲嗪基、吲哚基、3H-吲哚基、靛红酰基、异苯并呋喃基、异色满基、异吲唑基、异吲哚啉基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异噻唑并吡啶基、异噁唑基、异噁唑并吡啶基、亚甲基二氧基苯基、吗啉基、萘啶基、八氢异喹啉基、噁二唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、噁唑烷基、噁唑基、噁唑并吡啶基、噁唑烷基、萘嵌间二氮杂苯基基、羟吲哚基、嘧啶基、菲啶基、菲咯啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁噻基、吩噁嗪基、酞嗪基、哌嗪基、哌啶基、哌啶酮基、4-哌啶酮基、胡椒基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑并吡啶基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并噁唑基、吡啶并咪唑基、吡啶并噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、2-吡咯烷酮基、2H-吡咯基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4H-喹嗪基、喹喔啉基、奎宁环基、四唑基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、6H-1,2,5-噻二嗪基、1,2,3-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、噻吩基、噻唑并吡啶基、噻吩并噻唑基、噻吩并噁唑基、噻吩并咪唑基、噻吩基、三嗪基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,5-三唑基、1,3,4-三唑基和呫吨基。也包括含有例如上述杂环的稠合环和螺环化合物。
5元至10元杂环的实例包括(但不限于)吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、吡嗪基、哌嗪基、哌啶基、咪唑基、咪唑烷基、吲哚基、四唑基、异噁唑基、吗啉基、噁唑基、噁二唑基、噁唑烷基、四氢呋喃基、噻二嗪基、噻二唑基、噻唑基、三嗪基、三唑基、苯并咪唑基、1H-吲唑基、苯并呋喃基、苯并硫代呋喃基、苯并四唑基、苯并三唑基、苯并异噁唑基、苯并噁唑基、羟吲哚基、苯并噁唑啉基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、靛红酰基、异喹啉基、八氢异喹啉基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、异噁唑并吡啶基、喹唑啉基、喹啉基、异噻唑并吡啶基、噻唑并吡啶基、噁唑并吡啶基、咪唑并吡啶基和吡唑并吡啶基。
5元至6元杂环的实例包括(但不限于)吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、吡嗪基、哌嗪基、哌啶基、咪唑基、咪唑烷基、吲哚基、四唑基、异噁唑基、吗啉基、噁唑基、噁二唑基、噁唑烷基、四氢呋喃基、噻二嗪基、噻二唑基、噻唑基、三嗪基和三唑基。也包括含有例如上述杂环的稠合环和螺环化合物。
如本申请所用的术语“二环杂环”或“二环杂环基”意图表示稳定的9元或10元杂环系统，其含有两个稠合环且由碳原子和1、2、3或4个独立地选自N、O和S的杂原子组成。在两个稠合环中，一个环为5元或6元单环芳环，包含各自稠合至第二环的5元杂芳环、6元杂芳环或苯并环。第二环为饱和、部分不饱和或不饱和5元或6元单环，且包含5元杂环、6元杂环或碳环(条件为当第二环为碳环时第一环不为苯并环)。
二环杂环基可在产生稳定结构的任何杂原子或碳原子处连接至其侧基。本申请中所述的二环杂环基可在碳或氮原子上被取代，只要所产生的化合物为稳定的即可。当杂环中S和O原子的总数超过1时，则这些杂原子优选彼此不相邻。杂环中S和O原子的总数优选不超过1。二环杂环基的实例为(但不限于)喹啉基、异喹啉基、酞嗪基、喹唑啉基、吲哚基、异吲哚基、吲哚啉基、1H-吲唑基、苯并咪唑基、1,2,3,4-四氢喹啉基、1,2,3,4-四氢异喹啉基、5,6,7,8-四氢-喹啉基、2,3-二氢-苯并呋喃基、色满基、1,2,3,4-四氢-喹喔啉基和1,2,3,4-四氢-喹唑啉基。
如本申请所用的术语“芳族杂环基”或“杂芳基”意图表示包括至少一个杂原子环成员(诸如硫、氧或氮)的稳定单环和多环芳族烃。杂芳基包括(不限于)吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、呋喃基、喹啉基、异喹啉基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、吲哚基、吡咯基、噁唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、异噁唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、吲唑基、1,2,4-噻二唑基、异噻唑基、嘌呤基、咔唑基、苯并咪唑基、吲哚啉基、苯并二氧杂环戊基和苯并二噁烷。杂芳基被取代或未被取代。氮原子被取代或未被取代(也即N或NR，其中R为H或另一取代基，如果定义的话)。氮和硫杂原子可任选被氧化(也即N→O和S(O)p，其中p为0、1或2)。
桥连环也包括于杂环的定义中。当一个或多个原子(也即C、O、N或S)连接两个不邻近碳或氮原子时存在桥连环。桥连环的实例包括(但不限于)一个碳原子、两个碳原子、一个氮原子、两个氮原子和碳-氮基团。应注意，桥始终使单环转化成三环。当环桥连时，对于该环所述的取代基也可存在于桥上。
术语“抗衡离子”用于表示带负电荷的物质，诸如氯离子、溴离子、氢氧根、乙酸根和硫酸根。
当在环结构内使用虚线环时，这表明该环结构可为饱和、部分饱和或不饱和的。
如本申请所提及的术语“被取代”表示至少一个氢原子被非氢基团替代，条件为维持正常原子价且该取代会产生稳定化合物。当取代基为酮基(也即=O)时，则替代原子上的2个氢。酮基取代基不存在于芳族部分上。当称环系统(例如碳环或杂环)被羰基或双键取代时，表示羰基或双键为该环的一部分(也即处于该环内)。如本申请所用的环双键为两个相邻环原子之间形成的双键(例如C=C、C=N或N=N)。
在氮原子(例如胺)存在于本发明化合物上的状况下，可通过用氧化剂(例如mCPBA和/或过氧化氢)处理来使这些氮原子转化成N-氧化物而得到其它本发明化合物。因此，将所示和所主张的氮原子视作涵盖所示的氮和其N-氧化物(N→O)衍生物。
当任何变量在化合物的任何组分或式中出现一次以上时，其在每次出现时的定义与其在所有其它处出现时的定义无关。因此，例如，若某一基团被展示被0至3个R基团取代，则该基团可任选被至多三个R基团取代且R在每次出现时独立地选自R的定义。并且，只有当取代基和/或变量的组合产生稳定化合物时，可容许这种组合存在。
当与取代基连接的键被展示与环中连接两个原子的键相交时，所述取代基可键结至环上任何原子。当列出取代基而未指示该取代基借以键结至既定式的化合物的其余部分的原子时，所述取代基可经由该取代基中的任何原子键结。只有当取代基和/或变量的组合产生稳定化合物时，可容许这种组合存在。
短语“药学上可接受”在本申请中用于指在合理医学判断范畴内适用于与人类和动物组织接触而无过度毒性、刺激性、过敏反应和/或其它问题或并发症且与合理效益/风险比率相称的那些化合物、物质、组合物和/或剂型。
如本申请所用的“药学上可接受的盐”是指所披露化合物的衍生物，其中母化合物通过制成其酸盐或碱盐而得以修饰。药学上可接受的盐的实例包括(但不限于)碱性基团(诸如胺)的无机酸盐或有机酸盐；和酸性基团(诸如羧酸)的碱金属盐或有机盐。药学上可接受的盐包括母化合物与例如无毒无机酸或有机酸形成的常规无毒盐或季铵盐。例如，所述常规无毒盐包括那些源自诸如以下的无机酸的盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸；和自诸如以下的有机酸制备的盐：乙酸、丙酸、丁二酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、双羟萘酸、顺丁烯二酸、羟基顺丁烯二酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、反丁烯二酸、甲苯磺酸、甲烷磺酸、乙烷二磺酸、草酸和羟乙基磺酸。
本发明的药学上可接受的盐可通过常规化学方法自含有碱性或酸性部分的母化合物合成。一般而言，所述盐可通过使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计量的适合碱或酸在水中或在有机溶剂中，或在两者的混合物中反应来制备；一般而言，非水性介质，如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈优选。适合盐的清单见于Remington'sPharmaceuticalSciences，第18版，MackPublishingCompany,Easton,PA(1990)中，其披露内容是以引用方式并入本申请中。
另外，式(I)化合物可具有前药形式。任何可体内转化以提供生物活性剂(也即式(I)化合物)的化合物为处于本发明的范畴和精神内的前药。前药的各种形式在本领域中为熟知的。对于这种前药衍生物的实例，参见：
a)Bundgaard,H.编，DesignofProdrugs,Elsevier(1985)；和Widder,K.等人编，MethodsinEnzymology,112:309-396,AcademicPress(1985)；
b)Bundgaard,H.，第5章，“DesignandApplicationofProdrugs”，ATextbookofDrugDesignandDevelopment，第113-191页，Krosgaard-Larsen,P.等人编，HarwoodAcademicPublishers(1991)；
c)Bundgaard,H.,Adv.DrugDeliv.Rev.,8:1-38(1992)；
d)Bundgaard,H.等人，J.Pharm.Sci.,77:285(1988)；和
e)Kakeya,N.等人，Chem.Pharm.Bull.,32:692(1984)。
含有羧基的化合物可形成生理学上可水解的酯，其可因在体内水解产生式I化合物本身而用作前药。这种前药优选经口给予，因为在许多情况下水解主要在消化酶影响下进行。在酯本身具有活性的情况下或在于血液中进行水解的情况下，可利用肠胃外给予。式I化合物的生理学上可水解的酯的实例包括C1-6烷基、C1-6烷基苯甲基、4-甲氧基苯甲基、二氢茚基、酞酰基、甲氧基甲基、C1-6烷酰基氧基-C1-6烷基(例如乙酰氧基甲基、特戊酰氧基甲基或丙酰氧基甲基)、C1-6烷氧羰氧基-C1-6烷基(例如甲氧羰基-氧基甲基或乙氧羰氧基甲基、甘氨酰氧基甲基、苯基甘氨酰氧基甲基、(5-甲基-2-氧代-1,3-二氧杂环戊烯-4-基)-甲基)，和例如在青霉素(penicillin)和头孢菌素(cephalosporin)技术中使用的其它熟知的生理学上可水解的酯。这种酯可通过本领域中已知的常规技术制备。
前药的制备在本领域中为熟知的且描述于例如King,F.D.编，MedicinalChemistry:PrinciplesandPractice,TheRoyalSocietyofChemistry,Cambridge,UK(1994)；Testa,B.等人，HydrolysisinDrugandProdrugMetabolism.Chemistry,BiochemistryandEnzymology,VCHA和Wiley-VCH,Zurich,Switzerland(2003)；Wermuth,C.G.编，ThePracticeofMedicinalChemistry,AcademicPress,SanDiego,CA(1999)中。
本发明意图包括本发明化合物中存在的原子的所有同位素。同位素包括原子序数相同但质量数不同的那些原子。举一般实例且不加以限制，氢同位素包括氘和氚。碳同位素包括13C和14C。被同位素标记的本发明化合物可一般通过为本领域技术人员所知的常规技术或通过类似于本申请所述的方法的方法，使用适当的被同位素标记的试剂替代另外使用的未被标记的试剂来制备。这种化合物具有多种潜在用途，例如在测定潜在药物化合物结合至目标蛋白质或受体的能力中用作标准品和试剂，或用于使在体内或体外结合至生物受体的本发明化合物成像。
“稳定化合物”和“稳定结构”意图指示足够稳固而能够自反应混合物中分离出达适用纯度且能够配制成有效治疗剂的化合物。本发明化合物优选不含N-卤代、S(O)2H或S(O)H基团。
术语“溶剂化物”表示本发明的化合物与一个或多个有机或无机溶剂分子的物理性缔合。此物理性缔合包括氢键键结。在某些情况下，例如当将一个或多个溶剂分子并入结晶固体的晶格中时，溶剂化物将能够分离。溶剂化物中的溶剂分子可以规则排列和/或非有序排列存在。溶剂化物可包含化学计量或非化学计量的溶剂分子。“溶剂化物”涵盖溶液相和可分离溶剂化物。例示性溶剂化物包括(但不限于)水合物、乙醇合物、甲醇合物和异丙醇合物。溶剂化的方法在本领域中一般为已知的。
如本申请所用的缩写定义如下：“1×”：一次；“2×”：两次；“3×”三次；“℃”：摄氏度；“eq”：当量；“g”：克；“mg”：毫克；“L”：升；“mL”：毫升；“μL”：微升；“N”：当量浓度；“M”：摩尔浓度；“mmol”：毫摩尔；“min”：分钟；“h”：小时；“rt”：室温；“RT”：保留时间；“atm”：大气压；“psi”：磅/平方英寸；“conc.”：浓；“sat”或“saturated”：饱和；“MW”：分子量；“mp”：熔点；“ee”：对映异构体过量；“MS”或“MassSpec”：质谱；“ESI”：电喷雾电离质谱；“HR”：高分辨；“HRMS”：高分辨质谱；“LCMS”：液相色谱质谱；“HPLC”：高压液相色谱；“RPHPLC”：反相HPLC；“TLC”或“tlc”：薄层色谱；“NMR”：核磁共振光谱；“nOe”：核欧豪斯效应分光光度法(nuclearOverhausereffectspectroscopy)；“1H”：质子；“δ”：希腊字母中的第四个字母；“s”：单峰；“d”：双峰；“t”：三重峰；“q”：四重峰；“m”：多重峰；“br”：宽峰；“Hz”：赫兹；以及“α”、“β”、“R”、“S”、“E”和“Z”为本领域技术人员所熟悉的立体化学名称。
Me             甲基
Et             乙基
Pr             丙基
i-Pr           异丙基
Bu             丁基
i-Bu           异丁基
t-Bu           叔丁基
Ph             苯基
Bn             苯甲基
Boc            叔丁氧基羰基
AcOH或HOAc     乙酸
AlCl3          氯化铝
AIBN           偶氮二异丁腈
BBr3           三溴化硼
BCl3           三氯化硼
BEMP           2-叔丁基亚氨基-2-二乙氨基-1,3-二甲基全
               氢-1,3,2-二氮杂磷杂苯
BOP试剂        六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨
               基)鏻
伯吉斯试剂     1-甲氧基-N-三乙基铵基磺酰基-亚氨代甲(Burgessreagent)酸酯
               (1-methoxy-N-triethylammoniosulfonyl-methanimidate)
CBz            苯甲氧羰基
CH2Cl2         二氯甲烷
CH3CN或ACN     乙腈
CDCl3          氘化氯仿
CHCl3          氯仿
mCPBA    或    间氯过苯甲酸
m-CPBA
Cs2CO3         碳酸铯
Cu(OAc)2       乙酸铜(II)
Cy2NMe         N-环己基-N-甲基环己胺
DBU            1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯
DCE            1,2-二氯乙烷
DCM            二氯甲烷
DEA              二乙胺
戴斯-马丁试剂    1,1,1-三(乙酰氧基)-1,1-二氢-1,2-苯并碘氧(Dess-Martin)           杂环戊-3-(1H)-酮
DIC或DIPCDI      二异丙基碳化二亚胺
DIEA、DIPEA或    二异丙基乙胺
许尼希碱(Hunig'sbase)
DMAP             4-二甲基氨基吡啶
DME              1,2-二甲氧基乙烷
DMF              二甲基甲酰胺
DMSO             二甲亚砜
cDNA             互补DNA
Dppp             (R)-(+)-1,2-二(二苯基膦基)丙烷
DuPhos           (+)-1,2-二((2S,5S)-2,5-二乙基磷杂环戊烷
                 子基)苯
                 ((+)-1,2-bis((2S,5S)-2,5-diethylphospholano)benzene)
EDC              N-(3-二甲氨基丙基)-N'-乙基碳化二亚胺
EDC              N-(3-二甲氨基丙基)-N'-乙基碳化二亚胺盐
                 酸盐
EDTA             乙二胺四乙酸
(S,S)-EtDuPhosRh 三氟甲烷磺酸(+)-1,2-二((2S,5S)-2,5-二乙(I)                     基磷杂环戊烷子基)苯(1,5-环辛二烯)铑(I)
Et3N或TEA        三乙胺
EtOAc            乙酸乙酯
Et2O             乙醚
EtOH             乙醇
GMF              玻璃微纤维过滤器
格拉布催化剂(II) (1,3-二(2,4,6-三甲苯基)-2-亚咪唑烷基)二(Grubbs(II))            氯(苯基亚甲基)(三环己基膦)钌
HCl              盐酸
HATU           六氟磷酸O-(7-氮杂苯并三唑-1-
               基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓
HEPES          4-(2-羟乙基)哌嗪-1-乙烷磺酸
Hex            己烷
HOBt或HOBT     1-羟基苯并三唑
H2SO4          硫酸
K2CO3          碳酸钾
KOAc           乙酸钾
K3PO4          磷酸钾
LAH            氢化锂铝
LG             离去基
LiOH           氢氧化锂
MeOH           甲醇
MgSO4          硫酸镁
MsOH或MSA      甲磺酸
NaCl           氯化钠
NaH            氢化钠
NaHCO3         碳酸氢钠
Na2CO3         碳酸钠
NaOH           氢氧化钠
Na2SO3         亚硫酸钠
Na2SO4         硫酸钠
NBS            N-溴代丁二酰亚胺
NCS            N-氯代丁二酰亚胺
NH3            氨
NH4Cl          氯化铵
NH4OH          氢氧化铵
OTf            三氟甲磺酸酯或三氟甲烷磺酸酯
Pd2(dba)3      三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)
Pd(OAc)2       乙酸钯(II)
Pd/C           钯/碳
Pd(dppf)Cl2    [1,1'-二(二苯基膦基)-二茂铁]二氯钯(II)
Ph3PCl2        二氯化三苯基膦
PG             保护基
POCl3          三氯氧磷
i-PrOH或IPA    异丙醇
PS             聚苯乙烯
SEM-Cl         2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯
SiO2           二氧化硅
SnCl2          氯化锡(II)
TBAI           碘化四正丁铵
TEA            三乙胺
TFA            三氟乙酸
THF            四氢呋喃
TMSCHN2        三甲基甲硅烷基重氮基甲烷
T3P            丙烷膦酸酐
TRIS           三(羟甲基)氨基甲烷
可以有机合成领域技术人员已知的多种方式制备本发明化合物。
IV.生物学
虽然凝血对于调节生物体止血而言必不可少，但其也涉及多种病理性病症。在血栓形成中，血液凝块或血栓可能形成且局部阻塞循环，引起缺血和器官损伤。或者，在称作栓塞的过程中，凝块可能移位且随后卡在远端血管中，在此处其再引起缺血和器官损伤。因病理性血栓形成而引起的疾病统称为血栓栓塞障碍且包括急性冠脉综合征、不稳定型心绞痛、心肌梗塞、心腔内血栓形成、缺血性中风、深静脉血栓形成、周围阻塞性动脉疾病、短暂性缺血性发作和肺栓塞。另外，血栓形成发生在与血液接触的人工表面(包括导管、支架、人工心脏瓣膜和血液透析膜)上。
某些情况会促进产生血栓形成的风险。例如，血管壁改变、血液流速改变和血管腔隙的组成改变。这些风险因素统称作魏克氏三联征(Virchow'striad)。(Colman,R.W.等人编，HemostasisandThrombosis,BasicPrinciplesandClinicalPractice，第5版，第853页，LippincottWilliams&Wilkins(2006))。
常给与因存在魏克氏三联征中的一个或多个易感性风险因素而有产生血栓栓塞疾病的风险的患者抗血栓剂以防止阻塞性血栓形成(初级预防)。例如，在矫形手术背景(例如髋和膝关节替代术)下，常在手术操作之前给予抗血栓剂。抗血栓剂可抗衡由因与手术有关的急性期反应所引起的血管流速改变(郁积)、潜在手术血管壁损伤以及血液组成改变所施加的促血栓刺激。使用抗血栓剂进行初级预防的另一实例为使用阿司匹林(一种血小板活化抑制剂)对有产生血栓性心血管疾病风险的患者进行给药。此背景下公认的风险因素包括年龄、男性性别、高血压、糖尿病、脂质改变和肥胖症。
抗血栓剂也适用于在初始血栓性发作后进行二级预防。例如，用抗凝血剂对具有因子V(也称为莱顿因子V(factorVLeiden))突变和其它风险因素(例如妊娠)的患者进行给药以防止静脉血栓形成复发。另一实例需要对有急性心肌梗塞或急性冠脉综合征病史的患者的心血管事件进行二级预防。在临床背景下，可使用阿司匹林与氯吡格雷(或其它噻吩并吡啶)的组合来预防继发性血栓性事件。
也在疾病病况已发作之后给与抗血栓剂以治疗该疾病病况(也即，通过阻止其发展)。例如，用抗凝血剂(也即肝素、华法林或LMWH)治疗表现有深静脉血栓形成的患者以防止静脉阻塞进一步发展。随时间推移，这些药剂也引起疾病病况消退，因为在促血栓因子与抗凝血/促纤维蛋白溶解路径之间的平衡改变而有利于后者。对动脉血管床起作用的实例包括用阿司匹林和氯吡格雷治疗患有急性心肌梗塞或急性冠脉综合征的患者以防止血管阻塞进一步发展且最终引起血栓性阻塞消退。
因此，抗血栓剂广泛用于对血栓栓塞障碍进行初级和二级预防(也即防治或降低风险)，以及治疗已存在的血栓性过程。抑制凝血的药物或抗凝血剂为“用于预防和治疗血栓栓塞障碍的关键性药剂”(Hirsh,J.等人，Blood,105:453-463(2005))。
引发凝血的替代方式在血液暴露于人工表面(例如，在血液透析期间、“体外循环(on-pump)”心血管手术、血管移植物、细菌性败血症)时对细胞表面、细胞受体、细胞碎片、DNA、RNA和细胞外基质起作用。此过程也称作接触活化作用。因子XII表面吸附引起因子XII分子的构形变化，从而促成活化成具蛋白水解活性的因子XII分子(因子XIIa和因子XIIf)。因子XIIa(或XIIf)具有多种目标蛋白，包括血浆前激肽释放酶和因子XI。活性血浆激肽释放酶进一步活化因子XII，引起接触活化作用放大。或者，丝氨酸蛋白酶脯氨酰羧肽酶可活化在细胞和基质表面上形成的多蛋白复合物中与高分子量激肽原复合的血浆激肽释放酶(Shariat-Madar等人，Blood,108:192-199(2006))。接触活化作用为部分地负责调节血栓形成和炎症的表面介导性过程，且至少部分地由纤维蛋白溶解路径、补体路径、激肽原/激肽路径和其它体液和细胞路径来介导(对于评述，Coleman,R.,“ContactActivationPathway”，HemostasisandThrombosis，第103-122页，LippincottWilliams&Wilkins(2001)；Schmaier,A.H.,“ContactActivation”，ThrombosisandHemorrhage，第105-128页(1998))。接触活化系统对于血栓栓塞疾病的生物学相关性是由因子XII缺乏型小鼠的表型所支持。更具体而言，在若干血栓形成模型以及中风模型中因子XII缺乏型小鼠免于患有血栓性血管阻塞，且XII缺乏型小鼠的表型与XI缺乏型小鼠相同(Renne等人，J.Exp.Med.,202:271-281(2005)；Kleinschmitz等人，J.Exp.Med.,203:513-518(2006))。因子XI处于因子XIIa下游的事实连同XII缺乏型小鼠与XI缺乏型小鼠的表型相同一起表明接触活化系统可能在体内因子XI活化中起主要作用。
因子XI为胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶的酶原且以相对较低的浓度存在于血浆中。在内部R369-I370键处的蛋白水解活化会产生重链(369个氨基酸)和轻链(238个氨基酸)。后者含有典型的胰蛋白酶样催化三联体(H413、D464和S557)。据信，由凝血酶导致的因子XI活化在带负电荷的表面上，很可能在活化的血小板的表面上进行。血小板含有对活化因子XI具有高亲和力(0.8nM)的特异性位点(130-500个/血小板)。活化后，因子XIa仍表面结合且识别作为其正常巨分子底物的因子IX。(Galiani,D.,TrendsCardiovasc.Med.,10:198-204(2000))。
除上文所述的反馈活化机制之外，凝血酶活化凝血酶活化型纤维蛋白溶解抑制因子(TAFI)，所述TAFI为一种血浆羧肽酶，其裂解纤维蛋白上的C端赖氨酸和精氨酸残基，降低纤维蛋白增强组织型纤维蛋白溶酶原活化剂(tPA)依赖性纤维蛋白溶酶原活化的能力。在FXIa的抗体存在下，凝块可更快速地进行溶解而与血浆TAFI浓度无关。(Bouma,B.N.等人，Thromb.Res.,101:329-354(2001)。)因此，因子XIa的抑制剂预期具抗凝血性和促纤维蛋白溶解性。
靶向因子XI的抗血栓栓塞作用的其它证据可由缺乏因子XI的小鼠获得。已表明，完全fXI缺乏可保护小鼠免于罹患氯化铁(FeCl3)诱发性颈动脉血栓形成(Rosen等人，Thromb.Haemost.,87:774-777(2002)；Wang等人，J.Thromb.Haemost.,3:695-702(2005))。并且，因子XI缺乏可挽救完全蛋白质C缺乏的产期致死表型(Chan等人，Amer.J.Pathology,158:469-479(2001))。此外，人类因子XI的狒狒交叉反应性功能阻断抗体可防止狒狒动静脉分流血栓形成(Gruber等人，Blood,102:953-955(2003))。在公开的美国专利申请2004/0180855A1中也揭露了因子XIa的小分子抑制剂的抗血栓作用的证据。这些研究共同表明靶向因子XI可减少血栓性和血栓栓塞疾病倾向。
遗传学证据指示因子XI不需要正常自稳态，表示因子XI机制的安全特征相较于竞争性抗血栓机制而言较好。与A型血友病(因子VIII缺乏)或B型血友病(因子IX缺乏)对比，引起因子XI缺乏(C型血友病)的因子XI基因突变仅引起轻度至中度出血素质，特征主要在于手术后或创伤后出血，但很少自发性出血。手术后出血主要出现于具有高浓度内源性纤维蛋白溶解活性的组织(例如口腔和泌尿生殖系统)中。大部分病例是偶然地在无任何先前出血病史的情况下由aPTT(固有系统)的手术前延长而鉴别出。
抑制XIa作为抗凝血疗法的增强的安全性是进一步由以下事实所支持：不可检测到因子XI蛋白质的因子XI基因敲除小鼠可进行正常发育且有正常的寿命。未指示自发性出血的迹象。aPTT(固有系统)以基因量依赖性方式延长。有趣的是，即使在强烈刺激凝血系统(尾部横切)后，出血时间相较于野生型和杂合子同窝仔也并未显著延长。(Gailani,D.,FrontiersinBioscience,6:201-207(2001)；Gailani,D.等人，BloodCoagulationandFibrinolysis,8:134-144(1997)。)这些观测结果共同表明对因子XIa进行高度抑制应可良好耐受。这与其它凝血因子(不包括因子XII)的基因靶向实验形成对比。
因子XI的体内活化可由与C1抑制因子或α1抗胰蛋白酶的复合物形成来测定。在对于50名患有急性心肌梗塞(AMI)的患者进行的研究中，约25%患者的值高于复合物ELISA的正常范围上限。此研究可视作证明以下的证据：至少在AMI患者的亚群中，因子XI活化会促成凝血酶形成(Minnema,M.C.等人，Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.,20:2489-2493(2000))。第二研究确定冠状动脉硬化程度与和α1抗胰蛋白酶形成复合物的因子XIa之间的正相关性(Murakami,T.等人，Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.,15:1107-1113(1995))。在另一研究中，患者的因子XI含量高于第90百分位与静脉血栓形成的风险增加到2.2倍有关(Meijers,J.C.M.等人，N.Engl.J.Med.,342:696-701(2000))。
血浆激肽释放酶为胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶的酶原且以35至50μg/mL存在于血浆中。基因结构类似于因子XI的基因结构。总体上，血浆激肽释放酶的氨基酸序列与因子XI具有58%同源性。在内部I389-R390键处由因子XIIa引起的蛋白水解活化会产生重链(371个氨基酸)和轻链(248个氨基酸)。在轻链中含有血浆激肽释放酶的活性位点。血浆激肽释放酶的轻链与蛋白酶抑制因子(包括α2巨球蛋白和C1-抑制因子)反应。有趣的是，肝素显著地加速在高分子量激肽原(HMWK)存在下抗凝血酶III对血浆激肽释放酶的抑制作用。在血液中，大部分血浆激肽释放酶以与HMWK形成的复合物形式循环。血浆激肽释放酶裂解HMWK以释放缓激肽。缓激肽释放会使得血管通透性增加和血管扩张(对于评述，Coleman,R.,“ContactActivationPathway”，HemostasisandThrombosis，第103-122页，LippincottWilliams&Wilkins(2001)；SchmaierA.H.,“ContactActivation”，ThrombosisandHemorrhage，第105-128页(1998))。
并且，优选的是，发现在体外凝血分析(诸如活化部分凝血活酶时间(aPTT)或凝血酶原时间(PT)分析)中相较于已知的丝氨酸蛋白酶抑制剂而言活性有所改良的新化合物。(对于aPTT和PT分析的描述，参见Goodnight,S.H.等人，“ScreeningTestsofHemostasis”，DisordersofThrombosisandHemostasis:AClinicalGuide，第2版，第41-51页，McGraw-Hill,NewYork(2001))。
也需要且优选的是，发现相较于已知丝氨酸蛋白酶抑制剂而言具有有利且改良的特征的化合物，所述特征为下列以实例形式给出且不意图具限制性的一个或多个类别方面的特征：(a)药物动力学特性，包括口服生物可用率、半衰期和清除率；(b)医药特性；(c)剂量需求；(d)减少血液浓度峰谷波动特征的因素；(e)增加活性药物在酶存在下的浓度的因素；(f)减少临床药物间相互作用的倾向性的因素；(g)减少不利副作用的可能性的因素，包括相较于其它生物学标靶的选择性；和(h)改良制造成本或可行性的因素。
临床前研究表明小分子因子XIa抑制剂在维持止血的剂量下对兔和大鼠动脉血栓形成模型具有显著抗血栓作用。(WongP.C.等人，AmericanHeartAssociationScientificSessions,摘要第6118号，2006年11月12-15日；Schumacher,W.等人，JournalofThrombosisandHaemostasis,3(增刊1):P1228(2005)；Schumacher,W.A.等人，EuropeanJournalofPharmacology，第167-174页(2007))。此外，在我们的血栓形成模型中观测到由特异性XIa抑制剂引起的aPTT体外延长为对功效的良好预示。因此，可使用体外aPTT测试作为体内功效的替代测试。
如本申请所用的术语“患者”涵盖所有哺乳动物物种。
如本申请所用的“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”涵盖治疗哺乳动物(尤其人类)的疾病病况，且包括：(a)抑制该疾病病况，也即阻止其发展；和/或(b)减轻该疾病病况，也即引起该疾病病况消退。
如本申请所用的“防治”或“预防”涵盖预防性治疗哺乳动物(尤其人类)的亚临床疾病病况，旨在降低临床疾病病况出现的机率。基于已知会相较于一般群体提高罹患临床疾病病况的风险的因素来选择患者进行预防性疗法。“防治”疗法可分成(a)初级预防和(b)二级预防。初级预防是定义为治疗尚未表现有临床疾病病况的个体，而二级预防是定义为防止相同或类似临床疾病病况再次出现。
如本申请所用的“降低风险”涵盖降低产生临床疾病病况的发病率的疗法。因而，初级和二级预防疗法皆为降低风险的实例。
“治疗有效量”意图包括本发明化合物在单独或组合给予时有效抑制因子XIa和/或血浆激肽释放酶和/或预防或治疗本申请所列障碍的量。当应用于组合时，所述术语指组合、连续或同时给予的活性成分产生预防性或治疗性作用的组合量。
如本申请所用的术语“血栓形成”是指形成或存在血栓；血管内可能引起由血管供给的组织缺血或梗塞的凝血。如本申请所用的术语“栓塞”是指由血流将凝块或外来物质带至其沉积部位所引起的动脉突然阻塞。如本申请所用的术语“血栓栓塞”是指由血流自起源部位所携带的血栓性物质堵塞另一血管所引起的血管阻塞。术语“血栓栓塞障碍”需要“血栓性”障碍和“栓塞性”障碍两者(上文所定义)。
如本申请所用的术语“血栓栓塞障碍”包括动脉心血管血栓栓塞障碍、静脉心血管或脑血管血栓栓塞障碍和心腔中或周围循环中的血栓栓塞障碍。如本申请所用的术语“血栓栓塞障碍”也包括选自(但不限于)以下的特定障碍：不稳定型心绞痛或其它急性冠脉综合征、心房颤动、初发性或复发性心肌梗塞、缺血性猝死、短暂性缺血性发作、中风、动脉粥样硬化、周围阻塞性动脉疾病、静脉血栓形成、深静脉血栓形成、血栓性静脉炎、动脉栓塞、冠状动脉血栓形成、脑动脉血栓形成、脑栓塞、肾栓塞、肺栓塞，和由使血液暴露于促进血栓形成的人工表面的医学植入物、设备或操作引起的血栓形成。医学植入物或设备包括(但不限于)：修复瓣膜(prostheticvalves)、人工瓣膜、留置导管、支架、血液充氧器、分流器、血管通路口(vascularaccessport)、心室辅助设备和人工心脏或心腔和血管移植物。操作包括(但不限于)：心肺转流术、经皮冠状动脉介入术和血液透析。在另一实施方案中，术语“血栓栓塞障碍”包括急性冠脉综合征、中风、深静脉血栓形成和肺栓塞。
在另一实施方案中，本发明提供一种治疗血栓栓塞障碍的方法，其中所述血栓栓塞障碍选自不稳定型心绞痛、急性冠脉综合征、心房颤动、心肌梗塞、短暂性缺血性发作、中风、动脉粥样硬化、周围阻塞性动脉疾病、静脉血栓形成、深静脉血栓形成、血栓性静脉炎、动脉栓塞、冠状动脉血栓形成、脑动脉血栓形成、脑栓塞、肾栓塞、肺栓塞，和由使血液暴露于促进血栓形成的人工表面的医学植入物、设备或操作引起的血栓形成。在另一实施方案中，本发明提供一种治疗血栓栓塞障碍的方法，其中所述血栓栓塞障碍选自急性冠脉综合征、中风、静脉血栓形成、心房颤动和由医学植入物和设备引起的血栓形成。
在另一实施方案中，本发明提供一种对血栓栓塞障碍进行初级防治的方法，其中所述血栓栓塞障碍选自不稳定型心绞痛、急性冠脉综合征、心房颤动、心肌梗塞、缺血性猝死、短暂性缺血性发作、中风、动脉粥样硬化、周围阻塞性动脉疾病、静脉血栓形成、深静脉血栓形成、血栓性静脉炎、动脉栓塞、冠状动脉血栓形成、脑动脉血栓形成、脑栓塞、肾栓塞、肺栓塞，和由使血液暴露于促进血栓形成的人工表面的医学植入物、设备或操作引起的血栓形成。在另一实施方案中，本发明提供一种对血栓栓塞障碍进行初级防治的方法，其中所述血栓栓塞障碍选自急性冠脉综合征、中风、静脉血栓形成和由医学植入物和设备引起的血栓形成。
在另一实施方案中，本发明提供一种对血栓栓塞障碍进行二级防治的方法，其中所述血栓栓塞障碍选自不稳定型心绞痛、急性冠脉综合征、心房颤动、复发性心肌梗塞、短暂性缺血性发作、中风、动脉粥样硬化、周围阻塞性动脉疾病、静脉血栓形成、深静脉血栓形成、血栓性静脉炎、动脉栓塞、冠状动脉血栓形成、脑动脉血栓形成、脑栓塞、肾栓塞、肺栓塞，和由使血液暴露于促进血栓形成的人工表面的医学植入物、设备或操作引起的血栓形成。在另一实施方案中，本发明提供一种对血栓栓塞障碍进行二级防治的方法，其中所述血栓栓塞障碍选自急性冠脉综合征、中风、心房颤动和静脉血栓形成。
如本申请所用的术语“中风”是指由颈总动脉、颈内动脉或脑内动脉中的阻塞性血栓形成引起的栓塞性中风或动脉粥样硬化血栓形成的中风。
应注意，血栓形成包括血管阻塞(例如在转流术后)和再阻塞(例如在经皮腔内冠状动脉成形术之中或之后)。血栓栓塞障碍可由包括(但不限于)以下的病症引起：动脉粥样硬化、手术或手术并发症、长期不活动、心房颤动、先天性血栓形成倾向、癌症、糖尿病、药物或激素影响和妊娠并发症。
血栓栓塞障碍常与动脉粥样硬化患者有关。动脉粥样硬化的风险因素包括(但不限于)男性性别、年龄、高血压、脂质失调和糖尿病。动脉粥样硬化的风险因素同时为动脉粥样硬化并发症(也即血栓栓塞障碍)的风险因素。
同样，心房颤动常与血栓栓塞障碍有关。心房颤动和继发性血栓栓塞障碍的风险因素包括心血管疾病、风湿性心脏病、非风湿性二尖瓣疾病、高血压性心血管疾病、慢性肺病和多种其它心脏异常以及甲状腺中毒症。
糖尿病常与动脉粥样硬化和血栓栓塞障碍有关。较常见的第2型糖尿病的风险因素包括(但不限于)家族史、肥胖症、身体活动不足、人种/种族、先前空腹葡萄糖或葡萄糖耐受性测试异常、妊娠期糖尿病病史或分娩“巨大儿(bigbaby)”、高血压、低HDL胆固醇和多囊性卵巢综合征。
先天性血栓形成倾向的风险因素包括获得凝血因子的功能性突变或丧失抗凝血或纤维蛋白溶解路径的功能性突变。
血栓形成与多种肿瘤类型有关，例如胰脏癌、乳癌、脑肿瘤、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、胃肠恶性病和霍奇金氏(Hodgkins)或非霍奇金氏(non-Hodgkins)淋巴瘤。新近研究表明血栓形成患者的癌症出现率反映一般群体中特定癌症类型的出现率(Levitan,N.等人，Medicine(Baltimore),78(5):285-291(1999)；LevineM.等人，N.Engl.J.Med.,334(11):677-681(1996)；Blom,J.W.等人，JAMA,293(6):715-722(2005))。因此，与血栓形成有关的最常见癌症对于男性而言为前列腺癌、结肠直肠癌、脑癌和肺癌，且对于女性而言为乳癌、卵巢癌和肺癌。在癌症患者中所观测到的静脉血栓栓塞(VTE)的比率为显著的。不同肿瘤类型之间VTE的比率不同很可能与对患者群体的选择有关。有血栓形成风险的癌症患者可能具有任何或所有以下风险因素：(i)癌症分期(也即存在转移)，(ii)存在中央静脉导管，(iii)手术和抗癌疗法(包括化学疗法)，和(iv)激素和抗血管生成药物。因此，常见临床惯例为使用肝素或低分子肝素对患有晚期肿瘤的患者进行给药以防止血栓栓塞障碍。多种低分子肝素制剂已被FDA批准用于这些适应症。
在考虑预防医学癌症患者的VTE时，存在三种主要的临床情况：(i)患者长期卧床不起；(ii)不卧床的患者接受化学疗法或辐射；和(iii)患者留置有中央静脉导管。未分离肝素(UFH)和低分子量肝素(LMWH)为有效用于进行手术的癌症患者的抗血栓剂。(Mismetti,P.等人，BritishJournalofSurgery,88:913-930(2001)。)
A.体外分析
本发明化合物作为凝血因子XIa、VIIa、IXa、Xa、XIIa、血浆激肽释放酶或凝血酶的抑制剂的有效性可分别使用相关纯化丝氨酸蛋白酶和适当的合成底物来测定。在不存在和存在本发明化合物的情况下量测由相关丝氨酸蛋白酶引起的产色性或荧光底物水解的速率。在室温或在37℃进行分析。底物水解会引起pNA(对硝基苯胺)释放，所述pNA释放可通过量测在405nm的吸光度增加而分光光度以分光光度法监测；或引起AMC(氨基甲基香豆素)释放，所述AMC释放可通过量测在380nm激发的情况下在460nm发射的增加而分光光度以分光光度法监测。在抑制剂存在下吸光度或荧光变化的速率降低指示酶抑制作用。这种方法为本领域技术人员所知。此分析的结果表示为抑制常数Ki。
在含有145mMNaCl、5mMKCl和0.1%PEG8000(聚乙二醇；JTBaker或FisherScientific)的50mMHEPES缓冲液(pH7.4)中进行因子XIa测定。使用最终浓度为25pM至200pM的纯化人类因子XIa(HaematologicTechnologies)和浓度为0.0002至0.001M的合成底物S-2366(pyroGlu-Pro-Arg-pNA；或AnaSpec)进行测定。
在0.005M氯化钙、0.15M氯化钠、0.05MHEPES缓冲液(含有0.1%PEG8000，pH值为7.5)中进行因子VIIa测定。使用最终分析浓度为0.5nM至10nM的纯化人类因子VIIa(HaematologicTechnologies)或重组人类因子VIIa(NovoNordisk)、浓度为10nM至40nM的重组可溶性组织因子和浓度为0.001M至0.0075M的合成底物H-D-Ile-Pro-Arg-pNA(S-2288；
Figure BDA0000487247700000572
或BMPM-2；AnaSpec)进行测定。
在0.005M氯化钙、0.1M氯化钠、0.0000001M来匹卢定(Refludan)(Berlex)、0.05MTRIS碱和0.5%PEG8000在7.4的pH值下进行因子IXa测定。添加来匹卢定以抑制市售的人类因子IXa制剂中的少量凝血酶。使用最终分析浓度为20nM至100nM的纯化人类因子IXa(HaematologicTechnologies)和浓度为0.0004M至0.0005M的合成底物PCIXA2100-B(CenterChem)或Pefafluor IXa3688(H-D-Leu-Ph′Gly-Arg-AMC；CenterChem)进行测定。
在含有0.2M氯化钠和0.5%PEG8000的0.1M磷酸钠缓冲液(pH7.5)中进行因子Xa测定。使用最终分析浓度为150pM至1000pM的纯化人类因子Xa(HaematologicTechnologies)和浓度为0.0002M至0.00035M的合成底物S-2222(Bz-Ile-Glu(γ-OMe，50%)-Gly-Arg-pNA；
Figure BDA0000487247700000584
)进行测定。
在含有145mMNaCl、5mMKCl和0.1%PEG8000的50mMHEPES缓冲液(pH7.4)中进行因子XIIa测定。使用最终浓度为4nM的纯化人类因子XIIa(AmericanDiagnostica)和浓度为0.00015M的合成底物
Figure BDA0000487247700000581
#312(H-D-CHT-Gly-L-Arg-pNA.2AcOH；AmericanDiagnostica)进行测定。
在含有0.1M至0.2M氯化钠和0.5%PEG8000的0.1M磷酸钠缓冲液(pH7.5)中进行血浆激肽释放酶测定。使用最终分析浓度为200pM的纯化人类激肽释放酶(EnzymeResearchLaboratories)和浓度为0.00008M至0.0004M的合成底物S-2302(H-(D)-Pro-Phe-Arg-pNA；
Figure BDA0000487247700000582
)进行测定。
在含有0.2M氯化钠和0.5%PEG8000的0.1M磷酸钠缓冲液(pH7.5)中进行凝血酶测定。使用最终分析浓度为200pM至250pM的纯化人类α凝血酶(HaematologicTechnologies或EnzymeResearchLaboratories)和浓度为0.0002M至0.0004M的合成底物S-2366(pyroGlu-Pro-Arg-pNA；
Figure BDA0000487247700000583
或AnaSpec)进行测定。
在25℃或37℃测定由各蛋白酶引起底物水解的米氏常数(Michaelisconstant)Km。Ki值是通过使蛋白酶与底物在抑制剂存在下反应来测定。使反应进行20分钟至180分钟的时段(视蛋白酶而定)且量测速度(吸光度或荧光随时间变化的速率)。使用以下关系式计算Ki值：
(vo-vs)/vs=I/(Ki(1+S/Km))(用于具有一个结合位点的竞争性抑制剂)；或
vs/vo=A+((B-A)/(1+((IC50/(I))n)))；和
Ki=IC50/(1+S/Km)(用于竞争性抑制剂)
其中：
vo为在不存在抑制剂下对照组的速度；
vs为在抑制剂存在下的速度；
I为抑制剂浓度；
A为残留的最小活性(通常锁定在零点)；
B为残留的最大活性(通常锁定在1.0)；
n为希尔系数(Hillcoefficient)，其为潜在抑制剂结合位点的数目和协同性的量度；
IC50为在分析条件下产生50%抑制作用的抑制剂的浓度；
Ki为酶:抑制剂复合物的解离常数；
S为底物浓度；以及
Km为底物的米氏常数。
化合物的选择性可通过获得对既定蛋白酶的Ki值与对相关蛋白酶的Ki值的比率(也即对FXIa相较于蛋白酶P的选择性=对蛋白酶P的Ki/对FXIa的Ki)来评定。选择比>20的化合物视作具选择性。选择比>100的化合物优选，且选择比>500的化合物更优选。
本发明化合物作为凝血抑制剂的有效性可使用标准或修改的凝血分析来确定。在抑制剂存在下血浆凝血时间延长则指示抗凝血作用。相对凝血时间为在抑制剂存在下的凝血时间除以在不存在抑制剂下的凝血时间。此分析的结果可表示为IC1.5×或IC2×，分别为使凝血时间延长50%或100%所需的抑制剂浓度。IC1.5×或IC2×是通过使用跨越IC1.5×或IC2×的抑制剂浓度获得的相对凝血时间对抑制剂浓度曲线的线性内插来发现。
凝血时间是使用含柠檬酸盐的正常人类血浆以及自多种实验室动物物种(例如大鼠或兔)获得的血浆来测定。自10mMDMSO储备溶液开始在血浆中稀释化合物。DMSO的最终浓度低于2%。在自动凝血分析仪(Sysmex,Dade-Behring,Illinois)中进行血浆凝血分析。同样，可由使用本发明化合物进行给药的实验室动物物种或人类来测定凝血时间。
使用
Figure BDA0000487247700000591
(TrinityBiotech,Ireland)或(Dade-Behring,Illinois)，遵循包装说明书中的指导来测定活化部分凝血活酶时间(aPTT)。使血浆(0.05mL)升温至37℃并持续1分钟。将
Figure BDA0000487247700000601
或
Figure BDA0000487247700000602
(0.05mL)添加至血浆中且再孵育2至5分钟。将氯化钙(25mM，0.05mL)添加至反应物中以引发凝血。凝血时间为自添加氯化钙的时刻直至检测到凝块的时间(以秒计)。
使用凝血活酶(凝血活酶C
Figure BDA0000487247700000604
或
Figure BDA0000487247700000603
Dade-Behring,Illinois)，遵循包装说明书中的指导来测定凝血酶原时间(PT)。使血浆(0.05mL)升温至37℃并持续1分钟。将凝血活酶(0.1mL)添加至血浆中以引发凝血。凝血时间为自添加凝血活酶的时刻直至检测到凝块的时间(以秒计)。
在上文所述的因子XIa分析中测试下文所披露的例示性实例且发现其具有因子XIa抑制活性。观测到≤10μM(10000nM)的因子XIa抑制活性(Ki值)范围。下表1列出对于以下实例所量测的因子XIaKi值。
表1
实例编号 因子XIaKi(nM)
3 <5.00
5 5.52
11 69.44
15 <5.00
18 98.71
21 9.08
24 <5.00
26 177.50
32 11.43
39 10.82
40 <5.00
41 12.77
52 216.90
58 934.60
71 32.83
72 10.38
75 36.48
78 <5.00
88 52.61
113 <5.00
120 <5.00
127 <5.00
131 <5.00
133 <5.00
134 <5.00
137 546.60
139 5.49
151 17.26
156 16.81
158 <5.00
159 9.94
实例编号 因子XIaKi(nM)
165 5079.00
177 54.93
190 6.65
193 2983.00
207 153.00
221 311.60
227 <5.00
232 4287.00
234 <5.00
246 <5.00
251 <5.00
256 <5.00
257 <5.00
262 13.61
263 33.25
B.体内分析
本发明化合物作为抗血栓剂的有效性可使用相关体内血栓形成模型来确定，包括体内电诱发性颈动脉血栓形成模型和体内兔动静脉分流血栓形成模型。
a.体内电诱发性颈动脉血栓形成(ECAT)模型
在此研究中可使用由Wong等人(J.Pharmacol.Exp.Ther.,295:212-218(2000))所述的兔ECAT模型。用氯胺酮(ketamine)(50mg/kg+50mg/kg/hIM)和甲苯噻嗪(xylazine)(10mg/kg+10mg/kg/hIM)使雄性新西兰白兔(NewZealandWhiterabbit)麻醉。必要时，补充这些麻醉剂。将电磁流量探针置于一段分离的颈动脉上以监测血流量。在引发血栓形成之前或之后给与(静脉内、腹膜内、皮下或经口)测试剂或媒介物。利用在引发血栓形成之前进行药物处理来模拟测试剂预防血栓形成和降低血栓形成的风险的能力，而利用在引发之后进行给药以模拟治疗已存在的血栓性疾病的能力。通过使用外部不锈钢双极电极以4mA电刺激颈动脉3分钟来诱发血栓形成。在90分钟时段内连续地量测颈动脉血流量以监测血栓诱发性阻塞。通过梯形法则计算在90分钟内的颈动脉总血流量。接着通过将90分钟内的颈动脉总血流量转换成占在连续地维持对照组血流量90分钟的情况下所得到的对照组颈动脉总血流量的百分比来确定90分钟内的平均颈动脉流量。通过使用希尔S形Emax方程式的非线性最小平方回归程序(DeltaGraph；SPSSInc.,Chicago,IL)来估算化合物的ED50(使90分钟内的平均颈动脉血流量增加至对照组的50%的剂量)。
b.体内兔动静脉(AV)分流血栓形成模型
在此研究中可使用由Wong等人(Wong,P.C.等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.292:351-357(2000))所述的兔AV分流模型。用氯胺酮(50mg/kg+50mg/kg/hIM)和甲苯噻嗪(10mg/kg+10mg/kg/hIM)使雄性新西兰白兔麻醉。必要时，补充这些麻醉剂。分离股动脉、颈静脉和股静脉且插入导管。将填充有生理盐水的AV分流设备连接于股动脉套管与股静脉套管之间。AV分流设备由外部聚乙烯(tygon)管件(长度=8cm；内径=7.9mm)和内部管件(长度=2.5cm；内径=4.8mm)组成。AV分流器也容纳8cm长的2-0丝线(Ethicon,Somerville,NJ)。血液自股动脉经由AV分流器流入股静脉中。流动的血液暴露于丝线会诱发显著的血栓形成。40分钟后，分离分流器且对覆盖有血栓的丝线进行称重。在开放AV分流器之前给与(静脉内、腹膜内、皮下或经口)测试剂或媒介物。确定各处理组的血栓形成抑制百分比。通过使用希尔S形Emax方程式的非线性最小平方回归程序(DeltaGraph；SPSSInc.,Chicago,IL)来估算ID50值(对血栓形成产生50%抑制作用的剂量)。
这些化合物的消炎作用可使用C1-酯酶抑制因子缺乏型小鼠在伊文思蓝(EvansBlue)染料外渗分析中加以证明。在此模型中，用本发明化合物对小鼠进行给药，经由尾静脉注射伊文思蓝染料，且通过分光光度构件自组织提取物测定蓝色染料的外渗。
本发明化合物减少或预防例如如在体外循环心血管操作期间所观测到的全身性炎性反应综合征的能力可在体外灌注系统中，或通过对大型哺乳动物(包括狗和狒狒)进行体外循环手术操作来测试。评定本发明化合物的益处的读出结果包括例如血小板丧失减少、血小板/白细胞复合物减少、血浆中嗜中性白细胞弹性蛋白酶含量降低、补体因子活化减少，和接触活化蛋白(血浆激肽释放酶、因子XII、因子XI、高分子量激肽原、C1-酯酶抑制因子)的活化和/或消耗减少。
本发明化合物也可适用作其它丝氨酸蛋白酶(尤其人类凝血酶、人类血浆激肽释放酶和人类纤维蛋白溶酶)的抑制剂。这些化合物因其抑制作用而适用于预防或治疗生理反应，包括凝血、纤维蛋白溶解、血压调节和炎症以及由上述类别的酶催化的伤口愈合。具体而言，所述化合物可用作治疗由上述丝氨酸蛋白酶的凝血酶活性升高所引起的疾病(诸如心肌梗塞)的药物，和在将血液加工成血浆以用于实现诊断和其它市售目的中用作抗凝血剂的试剂。
V.药物组合物、制剂和组合
本发明化合物可以诸如片剂、胶囊剂(其各包括持续释放或定时释放制剂)、丸剂、散剂、颗粒剂、酏剂、酊剂、混悬剂、糖浆剂和乳剂的口服剂型来给予。其也可以静脉内(推注或输注)、腹膜内、皮下或肌内形式，均使用药学领域的普通技术人员所熟知的剂型来给予。其可单独给予，但一般将连同基于所选的给药途径和标准医药实践所选择的医药载体一起给予。
术语“药物组合物”表示包含本发明化合物以及至少一种另外的药学上可接受的载体的组合物。“药学上可接受的载体”是指本领域中普遍接受的用于向动物(尤其为哺乳动物)递送生物活性剂的介质，也即辅料、赋形剂或媒介物，诸如稀释剂、防腐剂、填充剂、流量调节剂、崩解剂、湿润剂、乳化剂、悬浮剂、甜味剂、调味剂、香化剂、抗细菌剂、抗真菌剂、润滑剂和分配剂，视给药方式和剂型的性质而定。药学上可接受的载体是根据完全处于本领域普通技术人员的能力范围内的多种因素来配制。这些因素包括(不限于)：所配制的活性剂的类型和性质；欲给予含药剂的组合物的个体；组合物的预期给药途径；和所靶向的治疗适应症。药学上可接受的载体包括水性和非水性液体介质以及多种固体和半固体剂型。这种载体可包括除活性剂之外的多种不同成分和添加剂，所述其它成分由于为本领域普通技术人员所熟知的多种原因(例如使活性剂、粘合剂等稳定)而纳入制剂中。对适合的药学上可接受的载体以及涉及其选择的因素的描述参见多种容易得到的来源，诸如Remington'sPharmaceuticalSciences，第18版(1990)。
当然，本发明的化合物的给药方案将视已知因素而变，诸如特定药剂的药效学特征和其给药方式和途径；接受者的物种、年龄、性别、健康状况、医学病症和体重；症状的性质和程度；并行治疗的种类；治疗频率；给药途径；患者的肾和肝脏功能；和所需作用。医师或兽医可确定和开立预防、对抗或阻止血栓栓塞障碍进展所需的药物的有效量。
在一般指导下，当用于所示作用时，各活性成分的每日口服剂量将在每天每公斤体重约0.001至约1000mg范围内，优选在每天每公斤体重约0.01至约100mg范围内，且最优选在约0.1至约20毫克/公斤/天范围内。最优选静脉内剂量在恒定速率输注期间将处于约0.001至约10毫克/公斤/分钟范围内。本发明的化合物可以单次日剂量来给予，或总日剂量可以每天两次、三次或四次的分次剂量给予。
本发明化合物也可通过肠胃外给药(例如静脉内、动脉内、肌内或皮下)来给予。当静脉内或动脉内给予时，可连续或间歇地给与剂量。此外，可研制用于肌内和皮下递送的制剂以确保活性医药成分逐渐释放。
本发明的化合物可以鼻内形式经由局部使用适合的鼻内媒介物，或经由透皮途径使用透皮皮肤贴片来给予。当以透皮递送系统形式给药时，剂量给予在整个给药方案期间当然应为连续的而非间歇的。
化合物通常与针对预期给药形式(例如口服片剂、胶囊剂、酏剂和糖浆剂)适当选择且与常规医药实践相一致的适合医药稀释剂、赋形剂或载体(在本申请中统称为医药载体)混合给予。
例如，对于以片剂或胶囊剂形式经口给药，活性药物组分可与诸如以下的口服、无毒、药学上可接受的惰性载体组合：乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、甲基纤维素、硬脂酸镁、磷酸二钙、硫酸钙、甘露糖醇、山梨糖醇等；对于以液体形式经口给药，口服药物组分可与诸如以下的任何口服、无毒、药学上可接受的惰性载体组合：乙醇、甘油、水等。此外，必要或需要时，也可将适合的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂并入混合物中。适合的粘合剂包括淀粉；明胶；天然糖，诸如葡萄糖或β-乳糖；玉米甜味剂；天然和合成树胶，诸如阿拉伯胶(acacia)、黄蓍胶(tragacanth)或海藻酸钠；羧甲基纤维素；聚乙二醇；蜡等。这些剂型中所使用的润滑剂包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包括(但不限于)淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。
本发明化合物也可以脂质体递送系统(诸如小单层脂质体、大单层脂质体和多层脂质体)形式给予。脂质体可由多种磷脂(诸如胆固醇、硬脂酰胺或磷脂酰胆碱)形成。
本发明的化合物也可与作为可靶向的药物载体的可溶聚合物偶合。这种聚合物可包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟基丙基甲基丙烯酰胺-苯酚、聚羟基乙基天冬酰胺苯酚或聚氧化乙烯-聚赖氨酸(被棕榈酰基残基取代)。此外，本发明的化合物可偶合至例如以下的适用于实现药物的控制释放的一类生物可降解聚合物：聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸与聚乙醇酸的共聚物、聚ε已内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯，和水凝胶的交联或两亲性嵌段共聚物。
适于给予的剂型(药物组合物)每个剂量单位可含有约1毫克至约1000毫克的活性成分。在这些药物组合物中，活性成分通常基于组合物的总重量以约0.1重量%-95重量%的量存在。
明胶胶囊剂可含有活性成分和诸如乳糖、淀粉、纤维素衍生物、硬脂酸镁、硬脂酸等的粉末状载体。可使用类似稀释剂来制备压制片剂。片剂和胶囊剂可制成持续释放产品形式以使得药物在数小时的时段内连续释放。压制片剂可包覆糖衣或包覆膜衣以掩盖任何令人不快的味道且保护片剂免受大气影响，或包覆肠溶包衣以使其在胃肠道中选择性崩解。
经口给予的液体剂型可含有着色剂和调味剂以提高患者接受度。
一般而言，水、适合的油、生理盐水、右旋糖(葡萄糖)水溶液和相关糖溶液和二醇(诸如丙二醇或聚乙二醇)为适用于肠胃外溶液的载体。用于肠胃外给予的溶液优选含有活性成分的水溶性盐、适合的稳定剂，且必要时含有缓冲物质。单独或组合的诸如亚硫酸氢钠、亚硫酸钠或抗坏血酸的抗氧化剂为适合的稳定剂。也使用柠檬酸和其盐和乙二胺四乙酸钠。另外，肠胃外溶液可含有防腐剂，诸如苯扎氯铵、对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯和氯丁醇。
适合的医药载体描述于Remington'sPharmaceuticalSciences,MackPublishingCompany(此领域中的标准参考教科书)中。
在本发明化合物与其它抗凝血剂组合的情况下，例如，日剂量可为每公斤患者体重约0.1至约100毫克本发明化合物和约0.1至约100毫克。对于片剂剂型，本发明化合物一般可以每个剂量单位约5毫克至约100毫克的量存在，且第二抗凝血剂以每个剂量单位约1至约50毫克的量存在。
在本发明化合物与抗血小板剂组合给予的情况下，在一般指导下，日剂量通常可为每公斤患者体重约0.01至约25毫克本发明化合物和约50至约150毫克抗血小板剂，优选为约0.1至约1毫克本发明化合物和约1至约3毫克抗血小板剂。
在本发明化合物与血栓溶解剂组合给予的情况下，日剂量通常可为每公斤患者体重约0.1至约1毫克本发明化合物，且对于血栓溶解剂，当与本发明化合物一起给予时，可使血栓溶解剂在单独给予时的常用剂量减少约50%至80%。
尤其当以单一剂量单位提供时，在组合的活性成分之间有可能存在化学相互作用。出于此原因，当将本发明化合物与第二治疗剂组合于单一剂量单位中时，其被配制，以至于虽然活性成分组合于单一剂量单位中，但使活性成分之间的物理接触减至最少(也即，减少)。例如，一种活性成分可包覆肠溶包衣。通过将活性成分中的一种包覆肠溶包衣，有可能不仅使组合的活性成分之间的接触减至最少，而且有可能控制这些组分中的一种在胃肠道中的释放以使得这些组分中的一种不在胃中释放而在肠中释放。一种活性成分也可包覆可实现在整个胃肠道中持续释放且也用以使组合的活性成分之间的物理接触减至最少的物质。此外，持续释放的组分可另外包覆肠溶包衣以使得此组分仅在肠中进行释放。另一方法将涉及配制组合产物，其中一种组分包覆持续和/或肠释放聚合物，且另一种组分也包覆聚合物，诸如低粘度等级的羟丙基甲基纤维素(HPMC)或本领域中已知的其它适当物质，以进一步分离活性组分。聚合物涂层用来形成与其它组分相互作用的另一障壁。
使本发明的组合产物的组分(无论是以单一剂型给予或以独立形式但以相同方式同时给予)之间的接触减至最少的这些以及其它方式对本领域技术人员而言在本发明的基础上为显而易见的。
在另一实施方案中，本发明提供一种药物组合物，其进一步包含选自以下的其它治疗剂：钾通道开放剂、钾通道阻断剂、钙通道阻断剂、钠氢交换抑制剂、抗心律不齐剂、抗动脉粥样硬化剂、抗凝血剂、抗血栓剂、促血栓溶解剂、纤维蛋白原拮抗剂、利尿剂、抗高血压剂、ATP酶抑制剂、盐皮质素受体拮抗剂、磷酸二酯酶抑制剂、抗糖尿病剂、消炎剂、抗氧化剂、血管生成调节剂、抗骨质疏松剂、激素替代疗法、激素受体调节剂、口服避孕药、抗肥胖剂、抗抑郁剂、抗焦虑剂、抗精神病剂、抗增殖剂、抗肿瘤剂、抗溃疡和胃食管回流病剂、生长激素剂和/或生长激素促泌素、甲状腺模拟剂、抗感染剂、抗病毒剂、抗细菌剂、抗真菌剂、胆固醇/脂质降低剂和脂质型态疗法(lipidprofiletherapies)，以及模拟缺血预处理和/或心肌顿抑的药剂，或其组合。
在另一实施方案中，本发明提供一种药物组合物，其进一步包含选自以下的其它治疗剂：抗心律不齐剂、抗高血压剂、抗凝血剂、抗血小板剂、凝血酶抑制剂、血栓溶解剂、纤维蛋白溶解剂、钙通道阻断剂、钾通道阻断剂、胆固醇/脂质降低剂或其组合。
在另一实施方案中，本发明提供一种药物组合物，其进一步包含选自以下的其它治疗剂：华法林、未分离肝素、低分子量肝素、合成五糖、水蛭素、阿加曲班、阿司匹林、布洛芬、萘普生、舒林酸、吲哚美辛、甲芬那酸酯、双嘧达莫(dipyridamol)、屈噁昔康、双氯芬酸、磺吡酮、吡罗昔康、噻氯匹定、氯吡格雷、替罗非班、依替巴肽、阿昔单抗、美拉加群(melagatran)、希美加群(ximelagatran)、二硫酸根络水蛭素(disulfatohirudin)、组织纤维蛋白溶酶原活化剂、被修饰的组织纤维蛋白溶酶原活化剂、阿尼普酶、尿激酶和链激酶，或其组合。
在另一实施方案中，本发明提供一种药物组合物，其中其它治疗剂为选自ACE抑制剂、AT-1受体拮抗剂、β-肾上腺素能受体拮抗剂、ETA受体拮抗剂、双重ETA/AT-1受体拮抗剂、肾素抑制剂(阿利克仑(alliskerin))和血管肽酶抑制剂的抗高血压剂；选自IKur抑制剂的抗心律不齐剂；选自凝血酶抑制剂、抗凝血酶-III活化剂、肝素辅因子II活化剂、其它因子XIa抑制剂、其它激肽释放酶抑制剂、纤维蛋白溶酶原活化剂抑制因子(PAI-1)拮抗剂、凝血酶可活化纤维蛋白溶解抑制因子(TAFI)抑制剂、因子VIIa抑制剂、因子IXa抑制剂和因子Xa抑制剂的抗凝血剂；或选自GPIIb/IIIa阻断剂、GPIb/IX阻断剂、蛋白酶活化受体1(PAR-1)拮抗剂、蛋白酶活化受体4(PAR-4)拮抗剂、前列腺素E2受体EP3拮抗剂、胶原蛋白受体拮抗剂、磷酸二酯酶-III抑制剂、P2Y1受体拮抗剂、P2Y12拮抗剂、血栓素受体拮抗剂、环加氧酶-1抑制剂(cyclooxygense-1inhibitors)和阿司匹林的抗血小板剂；或其组合。
在另一实施方案中，本发明提供药物组合物，其中其它治疗剂为抗血小板剂或其组合。
在另一实施方案中，本发明提供一种药物组合物，其中其它治疗剂为抗血小板剂氯吡格雷。
本发明化合物可单独给予或与一种或多种其它治疗剂组合给予。“组合给予”或“组合疗法”表示本发明化合物与一种或多种其它治疗剂并行地给予所治疗的哺乳动物。当组合给予时，各组分可同时给予或按任何次序在不同时间点依序给予。因此，各组分可单独给予，但时间上足够紧密以便提供所需的治疗作用。
可与本发明化合物组合给予的化合物包括(但不限于)抗凝血剂、抗凝血酶剂、抗血小板剂、纤维蛋白溶解剂、降血脂剂、抗高血压剂和抗缺血剂。
可与本发明化合物组合使用的其它抗凝血剂(或凝血抑制剂)包括华法林、肝素(未分离肝素或任何市售的低分子量肝素，例如
Figure BDA0000487247700000681
)、合成五糖、直接作用凝血酶抑制剂(包括水蛭素和阿加曲班)，以及其它因子VIIa抑制剂、因子IXa抑制剂、因子Xa抑制剂(例如
Figure BDA0000487247700000682
阿哌沙班(apixaban)、利伐沙班(rivaroxaban)、LY-517717、DU-176b、DX-9065a，和WO98/57951、WO03/026652、WO01/047919和WO00/076970中所披露的那些)、因子XIa抑制剂，和本领域中已知的活化TAFI和PAI-1抑制剂。
如本申请所用的术语抗血小板剂(或血小板抑制剂)表示例如通过抑制血小板聚集、粘附或分泌颗粒内含物来抑制血小板功能的药剂。这种药剂包括(但不限于)各种已知的非类固醇消炎药(NSAID)，诸如对乙酰氨基酚(acetaminophen)、阿司匹林、可待因(codeine)、双氯芬酸、屈噁昔康、芬太尼(fentaynl)、布洛芬、吲哚美辛、酮咯酸(ketorolac)、甲芬那酸酯、吗啡(morphine)、萘普生、非那西丁(phenacetin)、吡罗昔康、舒芬太尼(sufentanyl)、磺吡酮、舒林酸和其药学上可接受的盐或前药。在NSAID中，阿司匹林(乙酰水杨酸或ASA)和吡罗昔康优选。其它适合的血小板抑制剂包括糖蛋白IIb/IIIa拮抗剂(例如替罗非班、依替巴肽、阿昔单抗和引替瑞林(integrelin))、血栓素-A2受体拮抗剂(例如伊非曲班(ifetroban))、血栓素-A合成酶抑制剂、磷酸二酯酶-III(PDE-III)抑制剂(例如双嘧达莫、西洛他唑(cilostazol))和PDE-V抑制剂(诸如西地那非(sildenafil))、蛋白酶活化受体1(PAR-1)拮抗剂(例如E-5555、SCH-530348、SCH-203099、SCH-529153和SCH-205831)，和其药学上可接受的盐或前药。
适于与本发明化合物在存在或不存在阿司匹林下组合使用的抗血小板剂的其它实例为ADP(二磷酸腺苷)受体拮抗剂，优选为嘌呤能受体P2Y1和P2Y12(其中P2Y12甚至更优选)的拮抗剂。优选的P2Y12受体拮抗剂包括氯吡格雷、噻氯匹定、普拉格雷(prasugrel)、替卡格雷(ticagrelor)和坎格雷洛(cangrelor)，和其药学上可接受的盐或前药。噻氯匹定和氯吡格雷也为优选的化合物，因为已知其在使用中相较于阿司匹林对胃肠道较温和。氯吡格雷为甚至更优选的药剂。
优选实例为本发明化合物、阿司匹林和另一抗血小板剂的三重组合。优选地，抗血小板剂为氯吡格雷或普拉格雷，更优选为氯吡格雷。
如本申请所用的术语凝血酶抑制剂(或抗凝血酶剂)表示丝氨酸蛋白酶凝血酶的抑制剂。通过抑制凝血酶，会破坏各种凝血酶介导的过程，诸如凝血酶介导的血小板活化(即例如血小板聚集和/或分泌血小板颗粒内含物(包括血清素))和/或纤维蛋白形成。多种凝血酶抑制剂为本领域技术人员所知且这些抑制剂预期与本发明化合物组合使用。这种抑制剂包括(但不限于)硼精氨酸衍生物、硼肽(boropeptide)、肝素、水蛭素、阿加曲班、达比加群(dabigatran)、AZD-0837和WO98/37075和WO02/044145中所披露的那些以及其药学上可接受的盐和前药。硼精氨酸衍生物和硼肽包括硼酸的N-乙酰基和肽衍生物，诸如赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸、高精氨酸的C端a-氨基硼酸衍生物和其相应异硫脲鎓类似物。如本申请所用的术语水蛭素包括本申请称作水蛭肽的适合的水蛭素衍生物或类似物，诸如二硫酸根络水蛭素。
如本申请所用的术语血栓溶解(或纤维蛋白溶解)剂(或血栓溶解剂或纤维蛋白溶解剂)表示溶解血液凝块(血栓)的药剂。这种药剂包括组织纤维蛋白溶酶原活化剂(TPA，天然或重组)和其被修饰形式、阿尼普酶、尿激酶、链激酶、替奈替普酶(tenecteplase，TNK)、拉诺替普酶(lanoteplase，nPA)、因子VIIa抑制剂、凝血酶抑制剂、因子IXa、Xa和XIa的抑制剂、PAI-I抑制剂(也即组织纤维蛋白溶酶原活化剂抑制因子的灭活剂)、活化TAFI抑制剂、α-2抗纤维蛋白溶酶抑制剂和茴酰化纤维蛋白溶酶原链激酶活化剂复合物，包括其药学上可接受的盐或前药。如本申请所用的术语阿尼普酶是指茴酰化纤维蛋白溶酶原链激酶活化剂复合物，如例如欧洲专利申请028,489中所述，将其披露内容以引用方式并入本申请中。如本申请所用的术语尿激酶意图表示双链和单链尿激酶，后者在本申请中也称作尿激酶原。
适于与本发明化合物组合使用的胆固醇/脂质降低剂和脂质型态疗法的实例包括HMG-CoA还原酶抑制剂(例如普伐他汀(pravastatin)、洛伐他汀(lovastatin)、辛伐他汀(simvastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、阿托伐他汀(atorvastatin)、瑞舒伐他汀(rosuvastatin)和其它他汀(statin))、低密度脂蛋白(LDL)受体活性调节剂(例如HOE-402、PCSK9抑制剂)、胆汁酸螯合剂(例如考来烯胺(cholestyramine)和考来替泊(colestipol))、吡啶-3-甲酸或其衍生物(例如
Figure BDA0000487247700000691
)、GPR109B(吡啶-3-甲酸受体)调节剂、非诺贝特酸(fenofibricacid)衍生物(例如吉非罗齐(gemfibrozil)、氯贝丁酯(clofibrate)、非诺贝特(fenofibrate)和苯扎贝特(benzafibrate))和其它过氧化物酶体增殖物活化受体(PPAR)α调节剂、PPARδ调节剂(例如GW-501516)、PPARγ调节剂(例如罗格列酮(rosiglitazone))、具有调节PPARα、PPARγ和PPARδ的各种组合的活性的多种功能的化合物、普罗布可(probucol)或其衍生物(例如AGI-1067)、胆固醇吸收抑制剂和/或尼-皮二氏C1样转运体(Niemann-PickC1-liketransporter)抑制剂(例如依泽替米贝(ezetimibe))、胆固醇酯转移蛋白抑制剂(例如CP-529414)、角鲨烯合成酶抑制剂和/或角鲨烯环氧酶抑制剂或其混合物、酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶(ACAT)1抑制剂、ACAT2抑制剂、双重ACAT1/2抑制剂、回肠胆汁酸转运抑制剂(或顶端钠共依赖性胆汁酸转运抑制剂(apicalsodiumco-dependentbileacidtransportinhibitors))、微粒体三酸甘油酯转移蛋白抑制剂、肝脏X-受体(LXR)α调节剂、LXRβ调节剂、LXR双重α/β调节剂、FXR调节剂、Ω3脂肪酸(例如3-PUFA)、植物固烷醇(plantstanols)和/或植物固烷醇的脂肪酸酯(例如
Figure BDA0000487247700000701
人造奶油中所用的二氢谷固醇酯)、内皮脂肪酶抑制剂和活化胆固醇逆转运的HDL功能模拟剂(例如apoAI衍生物或apoAI肽模拟剂)。
本发明化合物也可在涉及抑制凝血酶、因子VIIa、IXa、Xa、XIa和/或血浆激肽释放酶的测试或分析中用作标准或参考化合物，例如用作质量标准或对照物。这种化合物可提供在市售试剂盒中，所述市售试剂盒例如用于涉及凝血酶、因子VIIa、IXa、Xa、XIa和/或血浆激肽释放酶的医药研究中。XIa。例如，本发明化合物可在将其已知活性与具有未知活性的化合物相比较的分析中用作参考物。这将使实验者确保分析得以适当地进行且提供用于比较的基础，尤其在测试化合物为参考化合物的衍生物的情况下。当研发新分析或规程时，本发明化合物可用于测试其有效性。
本发明化合物也可用于涉及凝血酶、因子VIIa、IXa、Xa、XIa和/或血浆激肽释放酶的诊断分析中。例如，未知样品中凝血酶、因子VIIa、IXa、Xa、XIa和/或血浆激肽释放酶的存在可通过以下方法测定：将相关产色性底物(例如对于因子XIa而言，为S2366)添加至含有测试样品且任选含有本发明化合物的一系列溶液中。若在含有测试样品的溶液中，但并非在本发明化合物存在下观测到pNA产生，则可推断因子XIa存在。
极有效且具选择性的本发明化合物，即针对目标蛋白酶的Ki值小于或等于0.001μM且针对其它蛋白酶的Ki值大于或等于0.1μM的本发明化合物也可用于涉及定量血清样品中的凝血酶、因子VIIa、IXa、Xa、XIa和/或血浆激肽释放酶的诊断分析中。例如，血清样品中因子XIa的量可通过以下方法测定：在相关产色性底物S2366存在下小心地用有效且具选择性的本发明因子XIa抑制剂滴定蛋白酶活性。
本发明也涵盖一种制品。如本申请所用的制品意图包括(但不限于)试剂盒和包装。本发明的制品包含：(a)第一容器；(b)位于第一容器内的药物组合物，其中所述组合物包含：第一治疗剂，包含：本发明化合物或其药学上可接受的盐形式；和(c)表明该药物组合物可用于治疗血栓栓塞和/或炎性障碍(如先前所定义)的药品说明书。在另一实施方案中，药品说明书表明该药物组合物可与第二治疗剂组合(如先前所定义)用于治疗血栓栓塞和/或炎性障碍。该制品可进一步包含：(d)第二容器，其中组分(a)和(b)位于第二容器内且组分(c)位于第二容器内或外部。位于第一和第二容器内表示相应的容器将对象容纳在其边界以内。
第一容器为用于容纳药物组合物的贮器。此容器可用于制造、储存、运送和/或零售/批发。第一容器意图涵盖瓶子、罐、小瓶、烧瓶、注射器、管(例如用于乳膏制剂)，或任何其它用于制造、容纳、储存或分配医药产品的容器。
第二容器为用于容纳第一容器和任选存在的药品说明书的容器。第二容器的实例包括(但不限于)盒子(例如纸板或塑料)、板条箱、纸箱、袋(例如纸或塑料袋)、囊和麻袋。药品说明书可经由胶带、胶、夹线钉(staple)或另一附着方法以物理方式附着于第一容器外部，或其可置于第二容器内部而未以任何物理方式附着于第一容器。或者，药品说明书位于第二容器外部。当位于第二容器外部时，药品说明书优选经由胶带、胶、夹线钉或另一附着方法以物理方式附着。或者，其可靠近或接触第二容器外部而未以物理方式附着。
药品说明书为叙述与位于第一容器内的药物组合物有关的信息的标签、卷标、标示等。所述的信息通常将由管理欲出售该制品的地区的管理机构(例如美国食品和药物管理局(United States Food and DrugAdministration))确定。优选地，药品说明书尤其叙述药物组合物已批准用于的适应症。药品说明书可由人员可阅读其中或其上所含的信息的任何材料制成。优选地，药品说明书为上面已形成(例如印刷或涂覆)所需信息的可印刷材料(例如纸、塑料、纸板、箔、粘着剂衬底的纸或塑料等)。
本发明的其它特征在以下对例示性实施方案进行描述的过程中将变得显而易见，所述例示性实施方案是为说明本发明而给出且不意图限制本发明。已使用本申请披露的方法制备、分离和表征以下实例。
VI.一般合成(包括方案)
本发明化合物可通过有机化学领域技术人员可用的多种方法合成(Maffrand,J.P.等人，Heterocycles,16(1):35-37(1981))。用于制备本发明化合物的一般合成方案描述于下文中。这些方案具说明性且不欲限制本领域技术人员可用于制备本申请所披露的化合物的可能技术。制备本发明化合物的不同方法对于本领域技术人员而言将为明显的。另外，可以交替的序列进行合成中的各个步骤以得到所需的化合物。
由一般方案中所述的方法制备的本发明化合物的实例在下文所述的中间体和实例部分中给出。实例化合物通常制备成外消旋混合物。可通过为本领域技术人员所知的技术来制备纯手性实例。例如，可通过手性相制备性HPLC分离外消旋产物来制备纯手性化合物。或者，可通过已知用于得到对映异构富集产物的方法来制备实例化合物。这些方法包括(但不限于)将手性辅助官能基并入至外消旋中间体中以用来控制转化的非对映立体选择性，在裂解手性辅助官能基后得到对映异构富集的产物。
可以有机合成领域技术人员已知的多种方式制备本发明化合物。本发明化合物可使用下文所述的方法，以及合成有机化学的技术中已知的合成方法，或如本领域技术人员所了解的其变体来合成。优选方法包括(但不限于)下文所述的方法。在适于所用的试剂和物质且适用于实现转化的溶剂或溶剂混合物中进行反应。有机合成领域技术人员应了解，分子上存在的官能基应与所建议的转化兼容。这有时将需要判断修改合成步骤的次序或选择一个特定方法方案而非另一个方法方案以获得所需的本发明化合物。
也应了解，此领域中设计任一合成途径的另一主要考虑事项为正确选择用于保护本发明中所述化合物中存在的反应性官能基的保护基。向受过训练的专业人员描述许多替代方案的权威性报导为Greene等人(ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis，第4版，Wiley-Interscience(2006))。
并非市售可得但用于本发明中的某些2-溴苯乙酮类似物(1b)可如方案1中所述自市售的起始物质合成。可用溴化试剂(诸如溴)在诸如CHCl3的溶剂中处理苯乙酮衍生物1a，得到1b。或者，可用溴化铜(II)在诸如EtOAc的溶剂中于高温处理苯乙酮衍生物1a或用三溴化苯基三甲基铵在诸如THF的溶剂中于低温处理苯乙酮衍生物1a，得到1b。可依序在含有几滴DMF的适合溶剂(诸如DCM)中用乙二酰氯处理苯甲酸衍生物1c，且接着用三甲基甲硅烷基重氮基甲烷在适合溶剂或溶剂组合(诸如ACN和己烷)中处理。分离中间体重氮基酮且用氢溴酸水溶液和DCM处理，得到1b。或者，可以如方案1中所述的三个步骤将苯甲酸衍生物1c转化成苯乙酮衍生物1a。或者，用钯催化剂(诸如二氯化双-(三苯基膦)钯)使被适当取代的芳基卤化物或三氟甲磺酸酯与三丁基-(1-乙氧基乙烯基)甲锡烷在适合溶剂(诸如甲苯)中于高温进行斯蒂尔偶合(Stillecoupling)，得到烯醇醚1e，接着可用N-溴代丁二酰亚胺将其转化成1b。
方案1
Figure BDA0000487247700000731
本发明的三唑酸(诸如2c、2d、2e、2f)可容易地以方案2中所概述的三步骤方法自易得的苯胺制备。经由用叠氮化钠重氮化且替代以形成芳基叠氮化物(2b)中间体，继而与适当的炔属化合物缩合且移除为本领域技术人员所知的保护基，应得到诸如2c的中间体。使芳基叠氮化物与丙二酸酯或酮酯缩合，继而水解，应得到本发明的中间体(诸如2d、2e和2f)。在苯胺不可得的状况下，可使用相应的芳基羧酸，接着将其经由柯提斯重排(Curtiusrearrangement)转化成苯胺。或者可经由BuLi来锂化卤芳基中间体且使其与CO2反应，得到相应羧酸，接着可如下文所概述将其转化成苯胺。
方案2
Figure BDA0000487247700000741
本发明的被取代的肼(3a)可获自商业来源或可由相应苯胺经由重氮化，继而用氯化锡还原来制备。可使这些被取代的肼直接或在分离后与适当的丙二腈反应，得到诸如化合物3b的氨基吡唑。在高温用亚硝酸异戊酯在THF中处理3b，应得到所需的吡唑中间体，将其水解得到本发明的吡唑酸中间体，诸如3c。此外，本发明的氨基吡唑中间体可通过使酯水解来获得，得到3d。在氟硼酸中重氮化如3b中的氨基部分，继而在高温加热，接着应得到诸如3e的氟吡唑中间体。可使被适当取代的肼与(E)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-3-氧代丁酸乙酯缩合，在水解后得到甲基吡唑衍生物3f。
方案3
Figure BDA0000487247700000751
得到吡唑的替代方法也可经由如方案4中所示的陈-兰姆二氏偶合(Chan-Lamcoupling)来实现。所需的吡唑(4b)和被适当取代的硼酸(4a)为市售可得的。或者可使这些实体经由乌尔曼偶合方法(Ullman couplingmethodology)用CuI、K2CO3在DMSO中于130℃偶合。在这些状况下，将用芳基溴化物或碘化物替代硼酸衍生物。
方案4
Figure BDA0000487247700000752
本发明的咪唑酸(诸如4af和4ag)可如方案4a中所概述来制备。可使被适当取代的咪唑4aa与被适当取代的芳基卤化物4ab之间进行乌尔曼偶合，以一个步骤得到咪唑衍生物4ad和4ae。使酯水解，产生咪唑酸4af和4ag。或者，可使用被修改的由Sreedhar(Synthesis,5:795(2008))所述的操作使被适当取代的咪唑4aa偶合至被适当取代的芳基硼酸4ac。得到咪唑衍生物4ad和4ae的替代方法可使用被修改的由Gomez-Sanchez(J.HeterocyclicChem.,24:1757(1987))所述的操作实现。可使硝基乙酸乙酯、原甲酸三乙酯与被适当取代的苯胺(4ah)缩合，得到3-芳基氨基-2-硝基丙烯酸乙酯4ai。可通过使3-乙氧基-2-硝基巴豆酸乙酯与被适当取代的苯胺4ah反应来制备3-芳基氨基-2-硝基巴豆酸乙酯衍生物4aj。可在氢气氛围下于高温使化合物4ai和4aj与原甲酸三乙酯和铂/碳反应，得到咪唑衍生物4ad和4ae。使酯水解，产生咪唑酸4af和4ag。
方案4a
Figure BDA0000487247700000761
可经由方案5中所概述的方法来形成本发明的二环吡唑中间体。使肼(3a)与适当醛反应，应得到腙5a，将其用NCS氯化，继而与适当丙二酸酯缩合，应得到诸如5b的吡唑。使所需酸与本发明的大环胺偶合，应得到羧酰胺吡唑5c，可经由所概述或为本领域技术人员所知的方法将其转化成本发明化合物。
方案5
Figure BDA0000487247700000771
用于制备环B为咪唑环的本发明化合物的中间体可根据方案6中所概述的一般方法自N上被适当保护的烯丙基甘氨酸(6a)来制备(Contour-Galcera等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.,11(5):741-745(2001))。使6a与被适当取代的溴苯乙酮(1b)在适合的碱(诸如碳酸氢钾、K2CO3或Cs2CO3)存在下在适合溶剂(诸如DMF)中缩合，得到酮酯中间体，可在加热下在过量乙酸铵存在下于诸如甲苯或二甲苯的溶剂中使其环化，得到咪唑(6c)。后面的这种转化适宜在微波反应器中于160℃小规模进行，或通过使混合物回流，同时经由迪恩-斯达克分离器(Dean-Starktrap)移除水而大规模进行。接着通过在诸如氢化钠或二环己基甲胺的碱存在下于诸如THF或DCM的溶剂中用SEM-Cl处理来保护所得咪唑中间体(6c)。接着通过在密封容器中在碘化铜、诸如Cs2CO3的碱和催化量的脯氨酸存在下在作为溶剂的DMSO中与过量氢氧化铵一起加热来将芳基溴化物(6d)转化成相应苯胺(6e)。用适当烯酸和诸如T3P或BOP试剂的偶合剂，或者通过用烯酸氯化物在诸如TEA或DIEA的碱存在下进行处理来酰化6e，得到二烯6f，通过在稀溶液中在对甲苯磺酸和格拉布II催化剂存在下于诸如DCM或DCE的适合溶剂中加热来使其进行闭环复分解，得到相应大环化合物(6g)(TetrahedronLetters,44:1379(2003))。或者，可在微波中于高温在不存在pTsOH下操作RCM。用NCS在咪唑环上进行氯化，或首先还原双键，继而氯化，且脱除保护基，分别得到中间体6h和6i。或者，对于R10=CN的化合物，对6g进行催化氢化，继而在室温用NBS进行溴化且后继进行钯催化的氰化且脱除保护基，得到中间体6j。可遵循方案15中所述的步骤将中间体6h-j转化成本发明化合物。
方案6
Figure BDA0000487247700000781
适用于合成本发明化合物的代表性含有咪唑的酰胺大环中间体描述于方案7中。可使用丙烷膦酸酐(T3P)使苯胺6e与被适当取代的羧酸7a偶合，得到酰胺7b(n=0)和7c(n=1)。可使用被修改的由Lovely(TetrahedronLetters,44:1379(2003))所述的操作，使7b和7c在用p-TsOH预处理形成咪唑啉鎓离子后经由使用催化剂(诸如格拉布(II)催化剂)在适合溶剂(诸如DCM、DCE或甲苯)中于高温进行闭环复分解而环化，得到含有咪唑的大环7d(n=0)和7e(n=1)。接着可用氢气在钯/碳或氧化铂上还原烯烃且继而用TFA在DCM中脱除保护基，得到胺7f和7g。可根据方案15将式7f和7g的化合物转化成本发明的化合物。
方案7
Figure BDA0000487247700000791
适用于合成本发明化合物的代表性含有区位异构咪唑的酰胺大环中间体描述于方案7a中。可以两个步骤将N上被适当保护的烯丙基甘氨酸6a转化成溴酮7ab。在高温使7ab与甲脒缩合，产生咪唑7ac。可用SEM-Cl保护咪唑7ac，且接着用nBuLi去质子化且继而用NBS淬灭，得到溴代咪唑7ae。在碱(诸如K3PO4)存在下使用预催化剂(诸如Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2复合物)使溴代咪唑7ae与被适当取代的芳基或杂芳基硼酸或硼酸酯11e之间进行铃木-宫浦偶合(Suzuki-Miyauracoupling)，在分离对映异构体后得到苯胺7af。可根据方案7将苯胺7af转化成7ag和7ah。可根据方案15将式7ag和7ah的化合物转化成本发明的化合物。
方案7a
或者，含有咪唑的本发明大环可根据方案8由中间体8e获得。使化合物6d与烯丙基甘氨酸进行乌尔曼型偶合反应，继而将酸甲基化，得到延长的苯胺类似物8b。使用格拉布II催化剂使二烯8b进行闭环复分解，得到大环烯烃8c。接着，可经由氢化且自化合物8d选择性脱除胺保护基来将大环烯烃8c转化成关键中间体8e。可遵循方案15中所述的操作将胺8e转化成相应环状氨基甲酸酯或其它类似物。也可以与上文所述相同的方式制备甲酯位置上的其它非对映异构体。
方案8
Figure BDA0000487247700000801
中间体8e的氰基或氯代咪唑类似物可通过方案9的略被修改的序列来获得。可用三氟乙酰基(TFA)保护化合物8b中的苯胺氮以抑制在使化合物9b转化成9c期间苯基上的溴化/氯化。遵循与方案8中所概述相同的序列，将所得的被保护的苯胺9a转化成大环化合物9b。分别用NBS或NCS溴化或氯化9b，得到中间体9c。对于R10为CN的化合物，通过如上述方案6中所述进行钯催化的氰化来将溴化物9c转化成氰基咪唑9d。自化合物9d选择性移除胺保护基，得到胺中间体9e。例如，可在弱酸性条件下或以热的方式通过在微波中于150℃在三氟乙醇中加热来选择性移除Boc保护基。可根据方案15将中间体9e转化成本发明中所述的最终化合物。
方案9
Figure BDA0000487247700000802
或者，本发明的咪唑化合物可由被三氟甲基取代的大环中间体10c获得，所述中间体可遵循方案10中所述的序列自苯胺6e来制备。使苯胺6e与三氟乙醛乙基半缩醛进行缩合反应，得到缩醛胺10a。用烯丙基格林纳试剂(Grignardreagent)处理10a，得到苯胺10b，接着将其经由方案6中所述的序列转化成目标化合物10c。
方案10
方案11
Figure BDA0000487247700000812
环B为6元杂环(实例：吡啶)的本发明代表性化合物可由中间体11l获得，所述中间体11l的合成描述于方案11中。使根据被修改的由Negi(Synthesis,991(1996))所述的操作制备的醛11a(X=N)与(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺在无水硫酸铜存在下于诸如DCM的溶剂中缩合，得到亚磺酰亚胺11b(Ellman,J.,J.Org.Chem.,64:1278(1999))。可使用被修改的由Kuduk(TetrahedronLetters,45:6641(2004))所述的操作，将被适当取代的格林纳试剂(例如溴化烯丙基镁)添加至亚磺酰亚胺11b中，得到呈非对映异构体混合物形式的亚磺酰胺11c，可在序列的各个阶段将其分离。将溴化烯丙基镁添加至亚磺酰亚胺11b中的非对映立体选择性可根据被修改的Xu(Xu,M-H,OrganicLetters,2008,10(6),1259)的操作通过使用氯化铟(III)来改良。在碱(诸如磷酸钾)存在下于溶剂混合物(诸如DMSO和H2O或DMF)中使用预催化剂(诸如Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2复合物)使4-氯吡啶1c与被适当取代的芳基或杂芳基硼酸或硼酸酯11e之间进行铃木-宫浦偶合，得到11g。或者，可利用硼酸11d与被适当取代的芳基或杂芳基卤化物11f之间的铃木-宫浦偶合来制备11g。可以两个步骤实现保护基相互转化，得到11h。或者，首先可在11c上进行保护基相互转化，继而进行铃木-宫浦偶合。接着可使用T3P和碱(诸如吡啶)使苯胺11h与被适当取代的羧酸11i偶合，得到酰胺11j。可使用被修改的由Lovely(TetrahedronLetters,44:1379(2003))所述的操作，使11j在用对甲苯磺酸预处理形成吡啶鎓离子后经由使用催化剂(诸如格拉布(II)催化剂)在适合溶剂(诸如DCM、DCE或甲苯)中于高温进行闭环复分解而环化，得到含有吡啶的大环11k。可用氢气在钯/碳或氧化铂上还原烯烃，且继而用TFA/DCM或用4MHCl/二噁烷脱除保护基，得到胺11l。可根据方案15将式11l的化合物转化成本发明的化合物。
适用于合成本发明化合物的其它含有吡啶的大环也可根据方案11来制备。在吡啶核心为4-吡啶(Z=N)而非2-吡啶(X=N)的状况下，可通过使用11i的酸氯化物容易地使11h转化成11j。可进一步修饰R8=NO2的式11g的中间体，在与酸11i偶合之前或在与酸偶合之后，得到R8=NHCO2-C1-4烷基的中间体。可在惰性溶剂(例如MeOH)中用还原剂(例如Zn-NH4Cl)将硝基还原成氨基，得到R8=NH2的式11g的中间体。可使这些苯氨基衍生物与式ClCO2-C1-4烷基的氯烷酸酯在碱(例如DIEA)存在下于惰性溶剂(例如DCM)中偶合，得到R8=NHCO2-C1-4烷基的中间体。
方案12
Figure BDA0000487247700000831
氨基酯类似物13e是遵循方案13中所述的序列由关键中间体12j获得。使12j与2,3-二氧代丙酸乙酯逐步形成亚胺，继而在氯化锡(IV)条件下添加烯丙基三丁基锡，得到RCM前体13a。遵循与方案12相同的序列，可经多个步骤将13a转化为关键中间体13e。酯被多种取代基替代的其它大环中间体(诸如13e)也可相似地形成且在上文所概述的反应序列后可根据方案15转化成本发明化合物。
方案13
Figure BDA0000487247700000832
合成多种适用作用于制备本发明化合物的起始物质的被取代的吡啶化合物的方法在本领域中为熟知的且已得到广泛评述。(对于适用于制备吡啶起始物质的方法的实例，参见：Kroehnke,F.,Synthesis,1(1976)；Abramovitch,R.A.编，“PyridineandItsDerivatives”，TheChemistryofHeterocyclicCompounds,14(增刊1-4),JohnWiley&Sons,NewYork(1974)；Boulton,A.J.等人编，ComprehensiveHeterocyclicChemistry,2:165-524,PergamonPress,NewYork(1984)；McKillop,A.编，ComprehensiveHeterocyclicChemistry,5:1-300,PergamonPress,NewYork(1996))。
在被适当取代的硼酸并非市售可得的状况下，可采用此方法的修改方法，其中使用Ishiyama,T.等人(J.Org.Chem.,60(23):7508-7510(1995))的方法使芳基卤化物与二硼物质(诸如二(频哪醇合)二硼或二(新戊基乙二醇合)二硼)进行钯介导的偶合，得到相应4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷或5,5-二甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷中间体。或者，可如由Murata等人(J.Org.Chem.,62(19):6458-6459(1997))所述通过使中间体卤化物与相应二烷氧基氢化硼烷反应来制备此相同中间体。可使用频哪醇硼中间体替代硼酸来偶合至芳基/杂芳基卤化物或三氟甲磺酸酯或可使频哪醇硼中间体转化成硼酸。或者，相应硼酸可通过以下方法制备：使芳基/杂芳基卤化物进行金属-卤素交换，用三烷氧基硼酸酯试剂淬灭且进行水性处理，得到硼酸(Miyaura,N.等人，Chem.Rev.,95:2457(1995))。
也应了解，中间体合成的范畴可进一步扩展超出使用铃木-宫浦偶合方法以外，因为上文所述的前体芳基卤化物或三氟甲磺酸酯也为斯蒂尔、根岸(Negishi)、桧山(Hiyama)和熊田(Kumada)型交叉偶合方法的前体(Tsuji,J.,TransitionMetalReagentsandCatalysts:InnovationsinOrganicSynthesis,JohnWiley&Sons(2000)；Tsuji,J.,PalladiumReagentsandCatalysts:InnovationsinOrganicSynthesis,JohnWiley&Sons(1996))。
可根据方案14制备其它含有哒嗪和哒嗪酮的大环。使14a的钾盐与市售或使用被修改的由Domagala(TetrahedronLett.,21:4997-5000)所述的操作所制备的被适当取代的α-酮酯14b在诸如THF的溶剂中缩合，产生α,β-不饱和酮衍生物，接着可使其与被适当取代的肼衍生物缩合，得到哒嗪酮14c。接着可用锌和NH4Cl在甲醇中还原硝基，得到苯胺14f。可通过脱除胺保护基，继而用POCl3处理，接着再保护来将哒嗪酮14c转化成氯-哒嗪14d。可用铁和AcOH还原硝基，得到苯胺14e。接着可使用T3P使苯胺14e和14f与被适当取代的羧酸7a偶合，分别得到酰胺14g(R10=Cl)和14h(R10=OH)。接着可经由使用催化剂(诸如格拉布(II)催化剂)在适合溶剂(诸如DCM、DCE或甲苯)中在高温进行闭环复分解来使14g和14h环化，分别得到大环14i(R10=Cl)和14j(R10=OH)。接着可用氢气在钯/碳或氧化铂上还原所得烯烃，得到14k和14l。可用乙酸铵和钯/碳还原14k以还原氯，得到14m。继而脱除14m和14l的保护基，得到胺14n(R10=H)和14o(R10=OH)。可根据方案15将式14n和14o的化合物转化成本发明的化合物。
方案14
Figure BDA0000487247700000851
适用于合成本发明化合物的代表性含有区位异构哒嗪的酰胺大环中间体描述于方案14a中。使用由Cowden(Org.Lett.,5:4497-4499(2003))所述的米尼希反应(Miniscireaction)的修改方案，在高温，在硝酸银、过氧硫酸铵和诸如甲酸铵的酸存在下，于诸如水或水/二甲基甲酰胺混合物的溶剂中使被适当保护的甘氨酸14aa与3,6-二氯哒嗪偶合，得到式14ab化合物。可通过用nBuLi去质子化且继而用被适当取代的烷基卤化物(例如烯丙基溴)进行烷基化来进一步官能化化合物14ab，得到化合物14ac。在碱(诸如碳酸钠)存在下，使用预催化剂(诸如(Ph3P)4Pd)使氯哒嗪14ac与被适当取代的芳基或杂芳基硼酸或硼酸酯11e之间进行铃木-宫浦偶合，在分离对映异构体后得到苯胺14ad。可根据方案7将苯胺14ad转化成14ae和14af。在转移氢化条件下对氯进行氢解且脱除保护基Boc，得到化合物14ag和14ah。可根据方案15将式14ag和14ah的化合物转化成本发明的化合物。
方案14a
Figure BDA0000487247700000861
接着可如方案15所示使用在方案2至13中制备的中间体来制备本发明代表性化合物。可使由式15b表示的各种被取代的酸与由15a表示的6元和5元大环胺在使用偶合试剂下或通过将其转化成酸氯化物(如维尔斯梅尔试剂(Vilsmeierreagent))且接着用碱处理混合物来进行偶合，得到所需的本发明大环。
方案15
Figure BDA0000487247700000862
经由正相或反相色谱对中间体和最终产物进行纯化。除非另外指示，否则使用预封装的SiO2柱(用己烷和EtOAc或DCM和MeOH的梯度进行洗脱)进行正相色谱。使用C18柱(用溶剂A(90%H2O、10%MeOH、0.1%TFA)和溶剂B(10%H2O、90%MeOH、0.1%TFA，UV220nm)的梯度或用溶剂A(90%H2O、10%ACN、0.1%TFA)和溶剂B(10%H2O、90%ACN、0.1%TFA，UV220nm)的梯度或用溶剂A(98%H2O、2%ACN、0.05%TFA)和溶剂B(98%ACN、2%H2O、0.05%TFA，UV220nm)的梯度进行洗脱)(或)Sunfire制备性C18OBD5μ30×100mm(0%至100%B的25分钟梯度)进行逆相制备性HPLC。A=H2O/ACN/TFA(90:10:0.1)。B=ACN/H2O/TFA(90:10:0.1)。
除非另外说明，否则通过反相分析性HPLC对最终产物进行分析。
方法A：大部分分析性HPLC操作为：SunFire(3.0×150mm)(15分钟梯度-95:5H2O/ACN至95:5ACN/H2O-0.05%TFA)。
方法B：
Figure BDA0000487247700000871
(4.6×75mm)(8分钟梯度-10:90MeOH/H2O至90:10MeOH/H2O，0.2%H3PO4)
方法C：Phenomenex Luna5μ4.6×50mm(4分钟梯度-10:90ACN/H2O至90:10ACN/H2O-0.1%TFA)
方法D：SunFire柱(3.5μm C18，3.0×150mm)。使用10%至100%溶剂B(持续10分钟)且接着100%溶剂B(持续5分钟)的梯度洗脱(1.0毫升/分钟)。溶剂A为(95%水、5%乙腈、0.05%TFA)且溶剂B为(5%水、95%乙腈、0.05%TFA，UV254nm)。
方法E：SunFire柱(3.5μm C18，3.0×150mm)。使用10%至100%溶剂B(持续12分钟)且接着100%溶剂B(持续3分钟)的梯度洗脱(1.0毫升/分钟)。溶剂A为(95%水、5%乙腈、0.05%TFA)且溶剂B为(5%水、95%乙腈、0.05%TFA，UV254nm)。
大部分质谱操作为：LCMS(ESI)m/z:[M+H]+
Figure BDA0000487247700000873
LunaC18(2×30mm)(2分钟梯度：90%H2O/10%MeOH/0.1%TFA至90%MeOH/10%H2O/0.1%TFA)(或)BEHC182.1×50mm-0%-100%B的2分钟梯度。(A:90/10/0.1H2O/ACN/TFA；B:90/10/0.1ACN/H2O/TFA)。
中间体1
1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
中间体1.1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸：将3-氯-2-氟苯胺溶解于TFA(4mL)中且将H2O(2mL)添加至上述溶液中。接着将混合物冷却至0℃且向其中逐滴添加预先溶解的NaNO2水溶液(2mL)以确保温度不升至5℃以上。在此温度搅拌反应混合物0.5小时，继而逐份添加固体NaN3。冷搅拌反应混合物且接着使其升温至室温过夜。用H2O(100mL)淬灭反应混合物且用EtOAc(2×50mL)萃取叠氮化物，干燥且蒸发，得到固体物质(1.1g)。在微波烧瓶中将所得产物溶解于DMSO(5mL)中且向其中添加L-脯氨酸(0.02g)、Cu(OAc)2(0.1g)、K2CO3(1.5g)和抗坏血酸钠(0.1g)以及过量的丙炔酸叔丁酯(3mL)。密封烧瓶且在75℃加热过夜。等分试样的LCMS展示反应完成。用H2O(100mL)淬灭反应混合物且用EtOAc(2×100mL)萃取有机层，用盐水(50mL)洗涤且干燥(MgSO4)。接着使用硅胶色谱纯化粗产物。分离所需的酯且浓缩，蒸发，得到棕色固体(0.98g)。将酯(0.2g)溶解于DCM(2mL)中且向其中添加TFA(1mL)且在室温搅拌过夜。等分试样的LCMS展示反应完成。接着用H2O(50mL)淬灭反应混合物且用EtOAc(2×100mL)萃取有机层，干燥且蒸发，得到棕色固体物质。MS(ESI)m/z:342.1(M+H)+。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ8.20(s,1H),7.60-7.55(dt,1H),7.42-7.37(dt,1H),7.28-7.23(dt,1H)ppm。
中间体2
1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700000881
中间体2A.5-氨基-1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯：在室温向(3-氯-2-氟苯基)肼盐酸盐(0.67g，3.40mmol)、(E)-2-氰基-3-乙氧基丙烯酸乙酯(0.633g，3.72mmol)和乙酸钠(0.586g，7.12mmol)的混合物中添加AcOH和H2O，形成浆料。在室温继续搅拌反应混合物0.25小时且接着在100℃加热过夜。搅拌过夜后，用H2O(200mL)淬灭反应混合物且分离黄棕色固体。过滤固体且用H2O充分洗涤。将残余物再溶解于DCM中，干燥且蒸发得到作为所需产物的棕色固体(0.76g，78%)。MS(ESI)m/z:284.2(M+H)+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.76(s,1H),7.51-7.29(m,2H),7.27-7.03(m,1H),5.30-5.06(m,2H),4.24(q,J=7.2Hz,2H),1.38-1.04(m,3H)ppm。
中间体2.1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酸：在100℃加热中间体2A(0.317g，1.117mmol)、亚硝酸异戊酯(1.304g，11.14mmol)于THF(20mL)中的混合物。2小时后，在真空中浓缩反应混合物，得到粗产物。向粗产物中添加NaOH(0.610g，10当量)、MeOH和H2O。在室温搅拌反应混合物2小时。接着用H2O(100mL)淬灭反应混合物且用EtOAc(2×100mL)萃取未反应的起始物质。接着用HCl(1N)酸化水层且接着用EtOAc(2×100mL)萃取有机物。经硫酸钠干燥合并的有机层，过滤且浓缩，得到呈棕色固体物质状的中间体2。MS(ESI)m/z:240.9(M+H)+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.49(d,J=2.5Hz,1H),8.12(s,1H),7.77(ddd,J=8.3,6.9,1.8Hz,1H),7.41-7.28(m,1H),7.23-7.10(m,1H)ppm。
中间体3
5-氨基-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700000891
中间体3A.5-氨基-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯：(参考文献：J.HeterocyclicChem.,267(1987))向(3-氯苯基)肼盐酸盐(2.328g，13mmol)、(E)-2-氰基-3-乙氧基丙烯酸乙酯(2.199g，13.00mmol)和K2CO3(1.797g，13.00mmol)的混合物中添加EtOH(20mL)。接着使悬浮液升温至回流且在回流温度搅拌过夜。20小时后，将反应混合物倾注于冰-H2O中。接着过滤悬浮液且在真空中干燥(50℃)通过过滤收集的固体过夜，得到棕色固体(2.93g)。MS(ESI)m/z:266.1(M+H)+。
中间体3.5-氨基-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-甲酸：(参考文献：J.HeterocyclicChem.,773(2003))使中间体3A(0.652g，2.454mmol)和NaOH(0.613g，15.34mmol)于EtOH(1.534mL)和H2O(13.80mL)中的溶液回流直至反应混合物变成均质的为止。24小时后，将反应混合物冷却至室温且过滤。用浓HCl酸化滤液，得到悬浮液，对其进行过滤。用H2O洗涤通过过滤收集的固体且在真空中干燥(50℃)4小时，得到作为所需产物的黄色固体(0.51g)。MS(ESI)m/z:238.1(M+H)+。1H NMR(500MHz,MeOD)δ7.77(s,1H),7.64-7.61(m,1H),7.58-7.51(m,2H),7.50-7.46(m,1H)ppm。
中间体4
5-氨基-1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酸
中间体4A.5-氨基-1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯：使(3-氯-2-氟苯基)肼盐酸盐(0.500g，2.54mmol)和(E)-2-氰基-3-乙氧基丙烯酸乙酯(0.472g，2.79mmol)于EtOH(2.54mL)和三乙胺(0.707mL，5.08mmol)中的棕色悬浮液升温至85℃。4.5小时后，停止反应且冷却至室温。浓缩反应混合物，得到棕色固体。通过正相色谱纯化，得到呈灰白色固体状的中间体4A(0.185g，26%)。MS(ESI)m/z:284.0(M+H)+。
中间体4.5-氨基-1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酸：在室温搅拌中间体4A(0.184g，0.649mmol)于MeOH(3.24mL)和1.0NNaOH(1.946mL，1.946mmol)中的澄清暗黄色溶液。1小时后，使反应混合物升温至50℃。8小时后，停止反应且冷却至室温。浓缩澄清黄橙色溶液，得到白色固体。将白色固体分配于EtOAc、水与1.0NNaOH之间且分离各层。用EtOAc萃取水层。用1.0NHCl酸化水层且接着用EtOAc(2×)萃取。酸化后，用盐水洗涤合并的有机层，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到呈灰白色固体状的中间体4(0.153g，92%)。MS(ESI)m/z:256.0(M+H)+和258.0(M+2+H)+。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.02(br.s.,1H),7.74(ddd,J=8.1,6.7,1.7Hz,1H),7.69(s,1H),7.50(td,J=7.4,1.7Hz,1H),7.37(td,J=8.0,1.2Hz,1H),6.43(s,2H)。
中间体5
1-(3-氯-2,6-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
中间体5A:(3-氯-2,6-二氟苯基)氨基甲酸叔丁酯：将3-氯-2,6-二氟苯甲酸(4.85g，25.2mmol)溶解于THF(50mL)中且冷却至0℃。接着向此溶液中添加氯甲酸乙酯(3.01g，27.7mmol)，继而添加TEA(3.86mL，27.7mmol)且在相同温度搅拌1小时。接着向产生的浆料中逐滴添加NaN3的H2O(5mL)溶液且在0℃搅拌反应混合物1.25小时。自反应混合物分离出固体且滗析固体，继而分离滗析液。将残余物溶解于H2O(50mL)中且用DCM(2×)萃取。接着将上述有机层与滗析液合并，干燥(MgSO4)且浓缩，得到残余物。将残余物再溶解于甲苯(50mL)中且在110℃加热。向上述溶液中添加t-BuOH(1.5g)且使其回流过夜。浓缩反应混合物且通过硅胶色谱纯化，得到所需产物(2.86g，43%)。MS(ESI)m/z:286.0(M+Na)+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.28(s,1H),7.03-6.72(m,1H),6.10-5.83(m,1H),1.57-1.37(m,9H)ppm。
中间体5B.1-(3-氯-2,6-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸叔丁酯：向中间体5A于DCM(5mL)中的溶液中添加TFA(1mL)且在室温搅拌1小时。接着浓缩反应混合物，得到棕色油状物，将其再溶解于TFA(5mL)中且冷却至0℃。接着向此冷却的溶液中逐滴添加于H2O(1mL)中的NaNO2(0.209g，3.03mmol)。在0℃搅拌反应混合物0.5小时，继而添加于H2O(1mL)中的NaN3(0.394g，6.07mmol)。在相同温度继续搅拌反应混合物2小时且接着用H2O(100mL)淬灭且用EtOAc(2×)萃取水层。干燥合并的有机层且蒸发，得到棕色油状物。接着将来自上述反应的叠氮化物溶解于DMSO(5mL)中且向此溶液中添加丙炔酸叔丁酯(1.5mL，1.517mmol)、Cu(OAc)2(0.055g，0.303mmol)和K2CO3(0.839g，6.07mmol)。在室温搅拌反应混合物过夜。接着用H2O淬灭反应混合物且分离固体物质。用EtOAc(2×)萃取反应混合物。干燥有机层且蒸发，得到暗棕黑色油状物。接着使用硅胶色谱纯化粗产物。分离呈微红色油状的所需产物(0.3g，62%)。MS(ESI)m/z:316.0(M+H)+。
中间体5.1-(3-氯-2,6-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸：向中间体5B(0.3g，0.950mmol)于DCM(5mL)中的溶液中添加TFA(1mL)且在室温搅拌反应混合物1小时。接着浓缩反应混合物，得到粗产物，使用反相HPLC将其纯化。MS(ESI)m/z:260.0(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.94(s,1H),7.85(ddd,J=9.3,8.1,5.3Hz,1H),7.40(td,J=9.2,2.0Hz,1H)ppm。
中间体6
1-(3-氯苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
中间体6A.1-(3-氯苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯：将溶解于H2O(5mL)中的亚硝酸钠(1.947g，28.2mmol)添加至3-氯苯胺(3.6g，28.2mmol)的冷(<5℃)TFA(20mL)溶液中。0.5小时后，将溶解于H2O(1mL)中的叠氮化钠(1.835g，28.2mmol)逐滴添加至上述反应混合物中。接着冷搅拌反应混合物2小时，且接着用H2O(100mL)淬灭且用EtOAc(2×100mL)萃取有机物。接着经MgSO4干燥有机层且浓缩，得到棕色油状物(3.5g)。将来自上述粗产物的约1g叠氮化物装入微波烧瓶中。向其中添加丙炔酸乙酯(1.5mL)、DMSO(4mL)、碳酸钠(0.1g)和L-脯氨酸(0.1g)且在75℃加热反应混合物过夜。接着用H2O淬灭反应以使固体沉淀出。过滤固体且用过量H2O洗涤，继而在真空下干燥，得到1.3g所需三唑酯。MS(ESI)m/z:252.1(M+H)+。
中间体6.1-(3-氯苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸：向中间体6A(0.3g，1.192mmol)于THF与H2O的混合物(1:1)中的溶液中添加LiOH且在室温搅拌1小时。1小时后，用H2O(50mL)淬灭反应混合物且用EtOAc萃取未反应的起始物质。接着酸化水层且用EtOAc(2×100mL)萃取酸。接着经MgSO4干燥有机层且蒸发，得到棕色油状物，其在室温凝固。MS(ESI)m/z:224.0(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.13(s,1H),8.03(s,1H),7.89(dd,J=2.2和8.4Hz,2H),7.61-7.56(m,2H)ppm。
中间体7
1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-甲酸
中间体7.1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-甲酸：将1-(1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)乙酮溶解于MeOH与DMSO(5:1)的溶液中。接着向此溶液中添加NaOMe溶液(2N，10mL)，继而添加漂白剂(20mL)且在室温搅拌过夜。搅拌过夜后，用H2O(200mL)淬灭反应混合物且用浓HCl酸化。用EtOAc(2×100mL)萃取有机物且浓缩，得到作为所需产物的棕色固体。MS(ESI)m/z:223.1(M+H)+。1HNMR(400MHz,CD3OD)δ7.36-7.38(m,1H),7.47-7.51(m,1H),7.74-7.77(m,1H),7.89-7.90(m,1H),8.04(s,1H),8.65(s,1H)ppm。
中间体8
5-氨基-1-(3-氯苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700000922
中间体8.5-氨基-1-(3-氯苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸：如先前所述(中间体6)以3-氯苯胺为起始物来制备叠氮化物。接着在回流条件下用2-氰基乙酸叔丁酯处理叠氮化物过夜。搅拌过夜后，用H2O(100mL)淬灭反应混合物且用EtOAc(2×100mL)萃取。接着干燥(MgSO4)有机层且蒸发，得到棕色固体。接着将棕色固体再溶解于DCM(2mL)中且向此溶液中添加TFA(2mL)且在室温搅拌过夜。接着浓缩反应混合物且用H2O淬灭以使棕色固体沉淀出。过滤固体，用过量MeOH洗涤且干燥，得到棕白色固体。MS(ESI)m/z:238.9(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.75(bs,1H),7.37-7.34(dd,J=1.7和8.3Hz,1H),7.25-7.21(t,1H),6.91-6.89(bd,1H)ppm。
中间体9
1-(3-氯苯基)-3-(2-羟基乙基)-1H-吡唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700000931
中间体9A:3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)丙醛：向氯化叔丁基二苯基甲硅烷(2.20g，8.0mmol)于DCM/DMF(95:1)中的溶液中添加1,3-丙二醇(2.010g，26.4mmol)，继而添加TEA(1.053g，10.43mmol)和催化性DMAP(0.049g，0.4mmol)且在室温搅拌反应混合物过夜。接着用H2O(200mL)淬灭反应混合物且用EtOAc(3×)萃取有机物。将粗产物于DCM(5mL)中的溶液缓慢添加至乙二酰氯(5.75mL，11.59mmol)于DCM(20mL)中的经冷却溶液(-78℃)中。在-78℃继续搅拌反应混合物20分钟且接着用TEA(5.34mL，38.3mmol)处理且接着缓慢升至室温。接着用乙醚稀释反应混合物，用10%柠檬酸水溶液洗涤，继而用盐水洗涤。接着干燥有机层且浓缩，得到所需产物。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.90-7.56(m,4H),7.49-7.28(m,6H),3.96-3.61(m,2H),2.27(br.s.,1H),1.88-1.72(m,2H),1.16-0.96(m,9H)ppm。
中间体9B:(E)-1-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)亚丙基)-2-(3-氯苯基)肼：在室温搅拌(3-氯苯基)肼盐酸盐和TEA(3mL，21.5mmol)以及3-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)丙醛(21.5mmol)于甲苯中的溶液过夜。接着用H2O(100mL)淬灭反应混合物且用EtOAc(2×)萃取。干燥(MgSO4)有机层且蒸发，得到微红色油状物。接着使用硅胶色谱纯化粗产物。分离出呈红色油状的所需产物。MS(ESI)m/z:437.1(M-Boc)+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.84-7.59(m,4H),7.50-7.29(m,6H),7.18-6.90(m,1H),6.77(dt,J=8.1,2.0Hz,1H),3.98-3.68(m,2H),2.63-2.38(m,2H),1.12-0.90(m,9H)ppm。
中间体9B.5-氨基-3-(2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)乙基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯：向中间体9A(1.34g，3.1mmol)于DMF(5mL)中的溶液中添加NCS(0.455，3.41mmol)且在室温搅拌。4小时后，用H2O(100mL)淬灭反应混合物且用EtOAc(2×)萃取。干燥(MgSO4)有机层且蒸发，得到微红色油状物。单独将氰基乙酸乙酯(0.351g，3.10mmol)溶解于EtOH(5mL)中且向此溶液中添加NaOEt(21%)(1.16mL，3.10mmol)且在室温搅拌反应混合物0.5小时，继而引入亚氨基氯化物粗混合物。接着在室温搅拌上述混合物。2小时后，用H2O淬灭反应且用EtOAc(2×)萃取。干燥(MgSO4)有机层且蒸发，得到橙红色油状物。接着使用硅胶色谱纯化粗产物。分离出两个峰：一个为所需产物且另一个为氯化吡唑啉化合物且两种产物以粗混合物形式用于下一步。MS(ESI)m/z:548.1(M+H)+。
中间体9C.3-(2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)乙基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯：将亚硝酸异戊酯(1mL)添加至中间体9B(粗混合物)的THF溶液中且在70℃搅拌过夜。浓缩反应混合物且以粗混合物形式用于下一步。MS(ESI)m/z:555.3(M+Na)+。
中间体9.1-(3-氯苯基)-3-(2-羟基乙基)-1H-吡唑-4-甲酸：向中间体9C(0.5g，0.938mmol)的正搅拌的THF溶液中添加1MnBu4NF的THF溶液(2.81mL，2.81mmol)且在室温剧烈搅拌反应混合物过夜。接着用H2O(100mL)淬灭反应混合物且用EtOAc(2×)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机层且浓缩，得到油状物。接着使用反相HPLC纯化粗产物，得到呈油状的所需产物(0.045g，16%)。MS(ESI)m/z:295.1(M+H)+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.35(s,1H),7.83(s,1H),7.59-7.42(m,2H),7.31-7.18(m,1H),5.42(br.s.,1H),4.80-4.65(m,1H),4.42-4.26(m,2H),4.14-3.93(m,2H),3.51-3.38(m,1H),3.26(t,J=5.8Hz,3H)ppm。
中间体10
1-(3-氯苯基)-5-氧代吡咯烷-3-甲酸
中间体10.1-(3-氯苯基)-5-氧代吡咯烷-3-甲酸：(参考文献：J.Med.Chem.,30:400-405(1987))在120℃(开杯闪点(openflash))加热3-氯苯胺(2.55g，20mmol)与2-亚甲基丁二酸(2.60g，20.00mmol)的混合物。20分钟后，将反应混合物冷却至室温。随后，添加水且使反应混合物升温至110℃(密封管)，得到黄色悬浮液。冷却至室温后，黄色油状物缓慢凝固，向其中添加MeOH(20mL)，得到黄色溶液。1小时后，过滤混合物且用少量MeOH冲洗固体且空气干燥，得到作为中间体10的灰白色固体(2.5g，52%)。MS(ESI)m/z:240.0(M+H)+。1H NMR(500MHz,MeOD)δ7.80(t,J=2.1Hz,1H),7.49-7.46(m,1H),7.36(t,J=8.1Hz,1H),7.18(ddd,J=8.0,2.1,1.0Hz,1H),4.16-4.07(m,2H),3.46-3.38(m,1H),2.88(dd,J=8.3,1.1Hz,2H)。
中间体11
1-(3-氯苯基)吡咯烷-3-甲酸
中间体11A.1-(3-氯苯基)-5-氧代吡咯烷-3-甲酸甲酯：(参考文献：Tetrahedron,62:4011-4017(2006))。向冷MeOH溶液(8.35mL)(0℃)中逐滴添加亚硫酰氯(0.335mL，4.59mmol)。30分钟后，添加中间体10(1g，4.17mmol)，且使反应混合物升温至室温。接着浓缩反应混合物且将残余物溶解于EtOAc中，用饱和NaHCO3、H2O和盐水洗涤。经Na2SO4干燥有机层，过滤且浓缩，得到呈黄色油状的所需产物(1.04g，98%)。MS(ESI)m/z:254.0(M+H)+。
中间体11B.1-(3-氯苯基)吡咯烷-3-甲酸甲酯：向中间体11A(0.27g，1.064mmol)于THF(3mL)中的溶液中添加BH3-THF复合物(1.596mL，1.596mmol)(1MTHF溶液)。在室温搅拌反应混合物。17小时后，通过添加1mLMeOH，接着添加H2O淬灭反应混合物。接着用EtOAc萃取上述混合物且用H2O、盐水洗涤有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。接着使用硅胶色谱纯化粗产物，得到作为所需产物的无色油状物(0.175g，68.6%)。MS(ESI)m/z:240.1(M+H)+。
中间体11.1-(3-氯苯基)吡咯烷-3-甲酸：向1-(3-氯苯基)吡咯烷-3-甲酸甲酯(0.175g，0.730mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中添加1NNaOH(1.460mL，1.460mmol)。在室温搅拌反应混合物2小时。2小时后，接着浓缩反应混合物以移除MeOH。接着用1NHCl(2mL)中和残余物且用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。得到作为所需产物的白色固体(0.15g，91%)。MS(ESI)m/z:226.1(M+H)+。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ10.34(br.s.,1H),7.16(t,J=8.1Hz,1H),6.72-6.68(m,1H),6.57(t,J=2.2Hz,1H),6.49-6.43(m,1H),3.64-3.52(m,2H),3.48-3.25(m,3H),2.43-2.29(m,2H)ppm。
中间体12
1-(3-氯苯基)-1H-咪唑-4-甲酸盐酸盐
Figure BDA0000487247700000961
中间体12A.1-(3-氯苯基)-1H-咪唑-4-甲酸乙酯，1TFA：将1-氯-3-碘苯(0.170g，0.714mmol)、1H-咪唑-4-甲酸乙酯(0.1g，0.714mmol)、碘化铜(I)(0.027g，0.143mmol)和K2CO3(0.296g，2.141mmol)于DMSO(1.427mL)中的混合物排空且用氩气回填三次，接着加盖且在110℃加热。16小时后，将反应混合物冷却至室温且接着用EtOAc稀释，用H2O洗涤，继而用盐水洗涤。接着经Na2SO4干燥有机层，过滤且浓缩。使用硅胶色谱纯化粗产物，得到作为所需产物的白色固体(0.118g，66%)。MS(ESI)m/z:251.0(M+H)+。
中间体12.1-(3-氯苯基)-1H-咪唑-4-甲酸：向中间体12A(0.118g，0.471mmol)于MeOH(4.71mL)中的溶液中添加1NNaOH(0.941mL，0.941mmol)且在室温搅拌反应混合物。2小时后，浓缩反应混合物且将残余物溶解于MeOH/H2O中。接着向上述溶液中添加1NHCl(1.5mL)，得到白色悬浮液，将其过滤以分离固体。用H2O冲洗固体，且接着在真空烘箱(50℃)中干燥4小时，得到作为中间体12的白色固体(0.09g，74%)。MS(ESI)m/z:223.0(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.44-8.23(m,2H),7.77(t,J=1.9Hz,1H),7.63-7.45(m,3H)ppm。
中间体13
1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-咪唑-4-甲酸，1TFA
Figure BDA0000487247700000971
中间体13A.1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-咪唑-4-甲酸乙酯，1TFA：将1-氯-2-氟-3-碘苯(0.549g，2.141mmol)、1H-咪唑-4-甲酸乙酯(0.3g，2.141mmol)、碘化铜(I)(0.082g，0.428mmol)、L-脯氨酸(0.099g，0.856mmol)和K2CO3(0.888g，6.42mmol)于DMSO(4.28mL)中的混合物排空且用氩气回填三次，接着加盖且在110℃加热。20小时后，将反应混合物冷却至室温且用EtOAc稀释。用H2O、盐水洗涤有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。接着使用反相HPLC色谱纯化粗产物，得到呈无色油状的所需产物(0.01g，1.2%)。MS(ESI)m/z:269.0(M+H)+。
中间体13.1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-咪唑-4-甲酸：以与中间体12相同的方式，通过用中间体13A替换中间体12A来制备中间体13。MS(ESI)m/z:241.0(M+H)+。
中间体14
1-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酸
中间体14A.3-(4-(乙氧羰基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯：向1-Boc-3-羟基哌啶(0.250g，1.242mmol)、4-乙氧羰基-吡唑(0.174g，1.242mmol)和三苯基膦(0.391g，1.491mmol)于THF(4.97mL)中的澄清无色溶液中经5分钟逐份添加偶氮二甲酸二叔丁酯(0.372g，1.615mmol)。在室温搅拌所得浅黄色溶液过夜。接着浓缩反应混合物且通过硅胶色谱纯化，得到呈透明无色残余物形式的中间体14A(0.0646g，16%)。MS(ESI)m/z:268.1(M-C4H8+H)+。
中间体14.1-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酸：向中间体14A(0.0646g，0.200mmol)于MeOH(0.666ml)中的澄清无色溶液中逐滴添加1.0M氢氧化钠(0.599ml，0.599mmol)。在室温搅拌所得的略微混浊的反应混合物。6小时后，将反应混合物冷却至0℃且用1.0NHCl中和。浓缩混合物，得到白色固体。将固体分配于EtOAc与0.5NHCl之间且分离各层。用EtOAc(2×)萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到呈白色泡沫状的中间体14(0.0616g，104%)。MS(ESI)m/z:240.1(M-C4H8+H)+。
中间体15
1-(3-氯苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700000981
以与中间体14相同的方式制备中间体15。MS(ESI)m/z:210.1(M+H)+。
中间体16
4-(2-溴乙酰基)-3-硝基苯基氨基甲酸甲酯
Figure BDA0000487247700000982
中间体16A.4-碘-3-硝基苯基氨基甲酸甲酯：向4-碘-3-硝基苯胺(8.46g，32.0mmol)于DCM(320mL)和吡啶(2.85mL，35.2mmol)中的经冷却(0℃)的黄色悬浮液中逐滴添加氯甲酸甲酯(2.61mL，33.6mmol)且搅拌反应混合物1.5小时。用DCM稀释反应混合物且用饱和NaHCO3溶液洗涤，继而用盐水洗涤。接着经MgSO4干燥有机层，过滤且浓缩。将残余物溶解于极少量DCM(约100mL)中，接着添加己烷(600mL)，得到黄色悬浮液。接着过滤上述悬浮液且用己烷冲洗固体且空气干燥，得到呈黄色固体状的所需产物(10.3g，100%)。MS(ESI)m/z:321.3(M-H)-。
中间体16B.4-乙酰基-3-硝基苯基氨基甲酸甲酯：在密封管中于110℃加热中间体16A(1g，3.11mmol)、三丁基(1-乙氧基乙烯基)甲锡烷(2.098mL，6.21mmol)和氯化二(三苯基膦)钯(II)(0.218g，0.311mmol)于甲苯(6.21mL)中的溶液。3小时后，将反应混合物冷却至室温且浓缩至干燥。接着将残余物溶解于THF(5mL)中，添加1NHCl溶液(15.53mL，15.53mmol)，且在室温搅拌反应混合物1小时。用EtOAc稀释反应混合物，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。接着通过硅胶色谱纯化粗产物，得到呈棕色固体状的所需产物(0.544g，74%)。MS(ESI)m/z:239.3(M+H)+。
中间体16.4-(2-溴乙酰基)-3-硝基苯基氨基甲酸甲酯：向中间体16B(0.544g，2.284mmol)于EtOAc(18.27mL)中的黄色溶液中添加溴化铜(II)(1.020g，4.57mmol)。为烧瓶装备回流冷凝器且接着使反应混合物升温至70℃。3小时后，停止反应且冷却至室温。接着经烧结玻璃漏斗过滤反应混合物，用EtOAc洗脱。用H2O(3×)、盐水洗涤绿色滤液，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到呈棕色泡沫状的所需产物(0.724g，100%)。MS(ESI)m/z:317.4(M+H)+,319.4(M+2+H)+。粗产物未被任何进一步纯化即供继续使用。
此处强调用于中间体16的替代操作。
替代中间体16B.4-(1-乙氧基乙烯基)-3-硝基苯基氨基甲酸甲酯：在装备有冷凝器的圆底烧瓶中于110℃加热中间体16A(1g，3.11mmol)、三丁基(1-乙氧基乙烯基)甲锡烷(1.574mL，4.66mmol)和氯化二(三苯基膦)钯(II)(0.109g，0.155mmol)于甲苯(6.21mL)中的溶液。2小时后，将反应混合物冷却至室温，经0.45μGMF过滤器过滤且用EtOAc冲洗。将滤液浓缩至干燥且通过硅胶色谱纯化，得到呈棕色固体状的所需产物(0.56g，68%)。MS(ESI)m/z:267.3(M+H)+。
替代中间体16.(参考文献：J.Med.Chem.,45:2127-2130(2002))向替代中间体16B(0.56g，2.103mmol)于THF(3.12mL)和H2O(1.091mL)中的溶液中添加NBS(0.374g，2.103mmol)。在室温搅拌20分钟后，将反应混合物分配于EtOAc与盐水之间。接着经Na2SO4干燥有机层，过滤且浓缩，得到呈黄色油状的所需产物(0.667g，100%)。MS(ESI)m/z:317.2(M+H)+,319.2(M+2+H)+。
中间体17
2-甲基丁-3-烯酸苯甲酯
中间体17.2-甲基丁-3-烯酸苯甲酯：向2-甲基丁-3-烯酸(9.5g，95mmol)于DCM(80mL)中的溶液中添加苯基甲醇(10.26g，95mmol)、N,N'-甲二亚基二环己胺(19.58g，95mmol)和DMAP(1.159g，9.49mmol)(放热反应)且在室温经周末搅拌反应混合物。经
Figure BDA0000487247700001001
垫过滤反应混合物以移除固体且浓缩滤液。通过硅胶色谱纯化残余物，得到呈无色油状的所需产物。
中间体18
[3-溴-4-(2-溴-乙酰基)-苯基]-氨基甲酸甲酯
Figure BDA0000487247700001002
中间体18A.2-溴-4-硝基-苯甲酸：向吡啶(500mL)和水(1L)的温热(80℃)溶液中添加4-硝基-2-溴甲苯(100g，0.46mol)。搅拌所得悬浮液直至其变成澄清溶液为止。接着经1.5小时向上述反应混合物中逐份添加KMnO4(600g，3.8mol)且继续搅拌过夜。接着将反应混合物冷却至室温且接着添加10%NaOH水溶液(200mL)。15分钟后，过滤反应混合物且用10%NaOH水溶液(5×100mL)冲洗固体。用MTBE(3×250mL)萃取滤液。将澄清水层冷却至10℃且接着将其用浓HCl酸化。再用MTBE(4×500mL)萃取水层。经硫酸钠干燥合并的有机层，过滤且浓缩，得到72g中间体18A。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.96(d,J=8Hz,1H),8.28-8.48(m,1H),8.49(d,J=2.4Hz,1H),14.1(br.s,1H)ppm。
中间体18B.2-(2-溴-4-硝基-苯甲酰基)-丙二酸二乙酯：向中间体18A(50g，0.2mol)于甲苯(500mL)中的溶液中添加TEA(24.6g，0.24mol)。将反应混合物冷却至15℃且添加氯甲酸乙酯(24g，0.22mol)。45分钟后，将混合酸酐溶液冷却至0℃。在单独烧瓶中，向Mg切屑(5.4g)于无水乙醚(300mL)中的悬浮液中添加EtOH(3.0mL)、CCl4(2.0mL)和丙二酸二乙酯(34mL，0.22mol)。在40℃搅拌混合物1小时以确保镁完全溶解。在反应混合物变成澄清溶液后，将其添加至混合酸酐的经冷却溶液中。2小时后，用2N硫酸(200mL)淬灭反应且接着用EtOAc(4×100mL)萃取。经硫酸钠干燥合并的有机层，过滤且浓缩，得到80g中间体18B。此中间体18B未经进一步纯化即用于下一步中。
中间体18C.1-(2-溴-4-硝基-苯基)-乙酮：在105℃搅拌中间体18B(80g，0.2mol)于乙酸(400mL)和硫酸(400mL)中的混合物。3小时后，将反应混合物冷却至室温且接着用乙酸乙酯(2×500mL)萃取。用20%NaOH水溶液洗涤合并的有机层，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到43.0g中间体18C。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ2.66(s,3H),7.57(d,J=8Hz,1H),8.21-8.24(dd,1H),8.48(d,J=2.0Hz,1H)ppm。
中间体18D.1-(4-氨基-2-溴苯基)乙酮：向中间体18C(19g，0.077mol)于EtOH(400mL)中的溶液中逐份添加氯化锡(II)(74g，0.39mol)。在添加后，将反应混合物加热至回流温度过夜。接着浓缩反应混合物且将残余物溶解于10%NaOH水溶液(200mL)中。用乙酸乙酯(2×200mL)萃取水溶液。用盐水洗涤合并的有机层且浓缩，得到油状物。将石油醚(25mL)添加至油状物中，得到悬浮液，将其滗析且将固体悬浮于20%乙酸乙酯/石油醚中。过滤有机层且收集固体，得到14g中间体18D。
中间体18E.(4-乙酰基-3-溴-苯基)-氨基甲酸甲酯：向中间体18D(14g，0.065mol)和许尼希碱(12.7g，0.098mol)于无水二噁烷(140mL)中的经冷却(10℃)混合物中逐滴添加氯甲酸甲酯(7.4g，0.078mol)。3小时后，用水(100mL)淬灭反应混合物且接着用乙酸乙酯(2×150mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩。通过自异丙醇中研磨来纯化，得到14g中间体18E。MS(ESI)m/z:271.7(M+H)+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)2.50(s,3H),3.71(s,3H),7.53-7.56(m,1H),7.78(d,J=8.8Hz,1H),7.86(d,J=2.0Hz,1H),10.14(s,1H)ppm。
中间体18.[3-溴-4-(2-溴-乙酰基)-苯基]-氨基甲酸甲酯：经1小时向中间体18E(90g，0.33mol)于无水二噁烷(900mL)中的经冷却(10℃)溶液中逐滴添加溴(52.9g，0.33mol)于二噁烷(430mL)中的溶液。2小时后，添加冰冷水(500mL)且用乙酸乙酯(2×500mL)萃取反应混合物。用盐水洗涤合并的有机层，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到110g粗产物。使粗产物于EtOH(1L)中的悬浮液升温至50℃。形成澄清溶液后，逐滴添加水(1.0L)且将混合物逐渐冷却至35℃。通过过滤收集沉淀的固体，用EtOH(200mL)洗涤，空气干燥，且接着在50℃于真空下干燥30分钟，得到70g中间体18。
中间体19
5-氨基-1-(2,3-二氯苯基)-1H-吡唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001011
中间体19A.5-氨基-1-(2,3-二氯苯基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯：将(2,3-二氯苯基)肼盐酸盐(1g，4.68mmol)、(E)-2-氰基-3-乙氧基丙烯酸乙酯(0.792g，4.68mmol)和K2CO3(0.647g，4.68mmol)于EtOH(10mL)中的混合物添加至微波小瓶中且在85℃加热20小时。接着将反应混合物冷却至室温且接着倾注于冰水中。接着过滤形成的悬浮液且用水冲洗固体且在真空烘箱(50℃)中干燥4小时，得到棕色固体。接着通过硅胶色谱纯化粗产物，得到为5-氨基-1-(2,3-二氯苯基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯的棕色固体(0.93g，66%产率)。MS(ESI)m/z:300.0(M+H)+。
中间体19.5-氨基-1-(2,3-二氯苯基)-1H-吡唑-4-甲酸：在室温搅拌中间体19A(0.026g，0.087mmol)于MeOH(2mL)和1.0NNaOH(0.260mL，0.260mmol)中的澄清黄色溶液，继而将其加热至70℃并持续24小时。向混合物中再添加1NNaOH(0.260ml，0.260mmol)，且使反应混合物升温至90℃并持续7小时。将反应混合物冷却至室温，且添加1NHCl(0.75mL)且浓缩反应混合物，得到为5-氨基-1-(2,3-二氯苯基)-1H-吡唑-4-甲酸的黄色固体(0.065g，99%)。MS(ESI)m/z:271.9(M+H)+。
中间体20
1-(2,3-二氯苯基)-1H-吡唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001021
中间体20A.1-(2,3-二氯苯基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯：向中间体19A(0.23g，0.766mmol)于THF(8mL)中的溶液中添加亚硝酸异戊酯(0.206mL，1.533mmol)且在微波小瓶中于80℃加热反应混合物。16小时后，将反应混合物冷却至室温且浓缩。接着通过硅胶色谱纯化粗产物，得到为1-(2,3-二氯苯基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯的黄色胶粘油状物(0.187g，86%)。MS(ESI)m/z:285.0(M+H)+。
中间体20.1-(2,3-二氯苯基)-1H-吡唑-4-甲酸：向中间体20A(0.187g，0.656mmol)于MeOH(8mL)中的澄清黄色溶液中添加1.0NNaOH(1.968mL，1.968mmol)且在室温搅拌反应混合物。18小时后，浓缩反应混合物以移除MeOH。接着向上述粗产物中添加水，得到黄色溶液。接着向此溶液中添加1NHCl(2.5mL)，得到白色悬浮液，将其过滤且用水冲洗固体，且接着在真空烘箱(50℃)中干燥4小时。得到为1-(2,3-二氯苯基)-1H-吡唑-4-甲酸的黄色固体(0.16g，95%)。MS(ESI)m/z:257.0(M+H)+。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.51(s,1H),8.13(s,1H),7.75(dd,J=8.3,1.7Hz,1H),7.61-7.56(m,1H),7.54-7.49(m,1H)ppm。
中间体21
1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001031
中间体21.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸：向3-氯-2-氟苯胺(1.7g，11.68mmol)于TFA(10mL)中的溶液中添加水(2mL)且将反应混合物冷却至0℃。接着经0.5小时向上述溶液中添加亚硝酸钠(0.806g，11.68mmol)。接着向上述混合物中缓慢添加叠氮化钠(1.928g，29.7mmol)于水中的溶液。接着在0℃搅拌反应混合物10分钟，且接着使其升温至室温。2小时后，通过添加水(100mL)淬灭反应混合物且过滤反应混合物中的不可溶固体且在氮气存在下在抽吸下干燥。接着向叠氮化物中添加于MeOH(12mL)中的乙酰乙酸甲酯(1.492g，12.85mmol)和甲醇、钠衍生物(2.78g，12.85mmol)且在密封管中于65℃加热混合物过夜。将反应混合物冷却至室温且接着冷却至0℃，继而添加THF(50mL)。接着向上述混合物中添加NaOH(58.4mL，58.4mmol)，且使反应混合物升温至50℃。2小时后，浓缩有机物且用1.0MHCl溶液酸化残余的水层。过滤所得悬浮液且用水洗涤固体，继而用少量冷MeOH洗涤，且在烘箱(50℃)中干燥过夜，得到呈灰白色固体状的1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸(1.86g，62%)。MS(ESI)m/z:256.0(M+H)+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.99-7.89(m,1H),7.80-7.71(m,1H),7.53(td,J=8.2,1.3Hz,1H),2.44(s,3H)ppm。
中间体22
2-(3-氯-2,6-二氟苯基)-1H-咪唑-4-甲酸
中间体22A.2-(3-氯-2,6-二氟苯基)-4-(三氟甲基)-1H-咪唑：(参考文献：WO2008/050244)向乙酸钾(0.872g，8.88mmol)于H2O(3mL)中的溶液中添加3,3-二溴-1,1,1-三氟丙-2-酮(1.098g，4.07mmol)。接着在100℃加热上述反应混合物0.5小时。接着将反应混合物冷却至室温且接着向混合物中添加3-氯-2,6-二氟苯甲醛(0.653g，3.7mmol)于MeOH(4mL)和THF(4mL)中的溶液，继而添加浓NH4OH(8mL)。在室温搅拌混合物过夜。用EtOAc萃取反应混合物。用盐水洗涤有机层，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，得到2-(3-氯-2,6-二氟苯基)-4-(三氟甲基)-1H-咪唑(0.95g，91%)。MS(ESI)m/z:283.0(M+H)+。
中间体22.2-(3-氯-2,6-二氟苯基)-1H-咪唑-4-甲酸：在90℃加热中间体22A(0.95g，3.36mmol)于5NNaOH水溶液(10mL)中的溶液2小时。接着将反应混合物冷却至室温，小心地中和至pH值=6-7且用1-丁醇(3×30mL)萃取，得到2-(3-氯-2,6-二氟苯基)-1H-咪唑-4-甲酸(0.57g，66%)。MS(ESI)m/z:259.0(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.66-7.55(m,H),7.60(s,1H),7.16(td,J=9.2,1.8Hz,1H)ppm。
中间体23
5-氨基-1-(5-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001042
中间体23A.5-氨基-1-(5-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯：使(5-氯-2-氟苯基)肼盐酸盐(0.500g，2.54mmol)、(E)-2-氰基-3-乙氧基丙烯酸乙酯(0.472g，2.79mmol)于EtOH(2.54mL)和TEA(0.707mL，5.08mmol)中的棕色悬浮液升温至85℃。5小时后，停止反应，冷却至室温，且浓缩，得到棕色固体。通过正相色谱来纯化，得到呈稠厚粘性橙色油状的中间体23A(0.244g，34%)。MS(ESI)m/z:284.0(M+H)+。
中间体23.5-氨基-1-(5-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酸：使中间体23A(0.125g，0.441mmol)于MeOH(2.203mL)和1.0NNaOH(1.763mL，1.763mmol)中的混浊黄色悬浮液升温至50℃。8小时后，将反应混合物冷却至室温且浓缩澄清黄橙色溶液，得到黄色固体。将黄色固体溶解于水中且添加1.0NHCl，得到白色悬浮液(pH3-4)。接着用EtOAc(2×)萃取混合物。用盐水洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到呈灰白色固体状的中间体23(0.096g，85%)。MS(ESI)m/z:256.0(M+H)+和258.0(M+2+H)+。
中间体24
1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-咪唑-4-甲酸盐酸盐
Figure BDA0000487247700001051
中间体24A.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-咪唑-4-甲酸乙酯：使用被修改的Sreedhar的操作。(参考文献：Sreedhar,B.;Synthesis,795(2008))。向4-甲基-1H-咪唑-5-甲酸乙酯(0.530g，3.44mmol)和(3-氯-2-氟苯基)硼酸(0.500g，2.87mmol)于MeOH(5.74mL)中的悬浮液中添加氧化亚铜(0.041g，0.287mmol)。在空气氛围下剧烈搅拌所得紫色悬浮液(使用干燥管)。20小时后，过滤反应混合物以移除固体且浓缩澄清蓝色滤液，得到蓝色固体。将蓝色固体悬浮于DCM中且过滤以移除固体且浓缩蓝色滤液，得到重量为0.187g的浅蓝色固体。通过正相色谱纯化，得到呈澄清无色残余物形式的1-(3-氯-2-氟苯基)-4-甲基-1H-咪唑-5-甲酸乙酯(0.0187g，2%)和呈澄清无色残余物形式的1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-咪唑-4-甲酸乙酯(中间体24A)(0.0079g，1%)。MS(ESI)m/z:283.1(M+H)+。
中间体24A也可根据以下序列以三个步骤合成：
中间体24A1.3-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-2-硝基丁-2-烯酸乙酯：使用被修改的由Gomez-Sanchez所述的操作。(参考文献：Gomez-Sanchez,A;Hidalgo-Garcia,F.J.;Chiara,J.L;Bellanato,J.;AnalesDeQuimica,1985,81(2),139。)将硝基乙酸乙酯(4.17ml，37.6mmol)和原乙酸三乙酯(6.93mL，37.6mmol)于甲苯(9.39mL)中的澄清淡黄色溶液加热至110℃。使用迪恩-斯达克分离器使乙醇共沸。约每30分钟，自迪恩-斯达克分离器移除溶剂且再将甲苯(6mL)添加至反应烧瓶中。在反应过程中，颜色变成澄清暗黄色。7.5小时后，停止反应且将其冷却至室温。通过蒸馏(在100℃5mmHg)移除过量溶剂和起始物质，留下呈橙色液体状的3-乙氧基-2-硝基丁-2-烯酸乙酯(5.46g)。在室温搅拌3-氯-2-氟苯胺(5.86g，40.2mmol)和3-乙氧基-2-硝基丁-2-烯酸乙酯(5.45g，26.8mmol)于乙醇(13.41mL)中的橙色溶液。7小时后，停止反应且浓缩，得到橙色油状物。用EtOAc稀释橙色油状物且用1.0NHCl(2×)、饱和NaHCO3、盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到橙色油状物。通过正相色谱来纯化，得到呈粘性橙黄色油状的中间体24A1(2.90g，36%)。1HNMR指示1:1E型:Z型混合物。MS(ESI)m/z:325.0(M+H)+。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ11.54(br.s.,1H),10.77(br.s.,1H),7.50-7.45(m,1H),7.44-7.38(m,1H),7.24-7.12(m,4H),4.39(q,J=7.2Hz,2H),4.34(q,J=7.2Hz,2H),2.15(d,J=1.4Hz,3H),2.12(d,J=1.4Hz,3H),1.39(t,J=7.2Hz,3H),1.36(t,J=7.0Hz,3H)。
中间体24A(替代).1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-咪唑-4-甲酸乙酯：使用被修改的由Gomez-Sanchez所述的操作。(参考文献：Gomez-Sanchez,A.;Hidalgo,F.J.;Chiara,J.L.;J.HeterocyclicChem.,1987,24,1757。)用氩气使中间体24A1(2.90g，9.58mmol)于原甲酸三乙酯(96mL)中的澄清黄色溶液脱气20分钟。随后，添加铂/碳(0.935g，0.479mmol)。2总共4小时后，将反应混合物冷却至室温。将反应混合物置于真空下数分钟且接着用氩气回填。重复该过程总共5次。随后，添加
Figure BDA0000487247700001061
且过滤反应混合物，用乙醇洗涤。浓缩滤液，得到重量为3.17g的澄清黄棕色油状物。通过正相色谱纯化，得到呈白色固体状的中间体24A(替代)(1.64g，61%)。MS(ESI)m/z:283.0(M+H)+。1HNMR(500MHz,甲醇-d4)δ7.82(d,J=0.8Hz,1H),7.73(ddd,J=8.3,6.7,1.8Hz,1H),7.48(ddd,J=8.0,6.5,1.7Hz,1H),7.43-7.38(m,1H),4.36(q,J=7.2Hz,2H),2.39(d,J=1.1Hz,3H),1.39(t,J=7.2Hz,3H)。
中间体24.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-咪唑-4-甲酸盐酸盐：向中间体24A(替代)(1.64g，5.80mmol)于甲醇(29.0ml)中的澄清无色溶液中添加1.0MNaOH(17.40mL，17.40mmol)。在室温搅拌反应混合物。20小时后，在高真空下在最小限度加热下浓缩反应混合物，得到白色固体。将固体悬浮于水中且添加1.0NHCl直至混合物达到pH值=1-2为止。通过过滤收集固体且用水冲洗，空气干燥且在高真空下干燥，得到呈白色固体状的中间体24(1.44g，81%)。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.91(d,J=0.5Hz,1H),7.83(ddd,J=8.3,6.9,1.7Hz,1H),7.63(td,J=7.5,1.5Hz,1H),7.46(td,J=8.1,1.4Hz,1H),2.32(s,3H)。MS(ESI)m/z:255.0(M+H)+和257.0(M+2+H)+。
中间体25
1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001071
中间体25A.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯：(参考文献：Herold,P.等人，Tetrahedron,56:6497-6499(2000))在室温搅拌2-((二甲氨基)亚甲基)-3-氧代丁酸乙酯(0.517g，2.79mmol)、(3-氯-2-氟苯基)肼盐酸盐(0.500g，2.54mmol)于EtOH(2.54mL)和TEA(0.707mL，5.08mmol)中的溶液。10分钟后，浓缩反应混合物且通过硅胶色谱纯化。得到呈灰白色固体状的所需产物1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(200mg，28%)。MS(ESI)m/z:283.1(M+H)+。
中间体25.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸：向中间体25A(50mg，0.177mmol)于MeOH(0.884mL)中的溶液中添加1NNaOH(水溶液)(1.061mL，1.061mmol)且在密封小瓶中于50℃搅拌反应混合物3小时。接着将反应混合物冷却至室温且浓缩。接着将残余物分配于1NHCl(水溶液)与EtOAc之间。分离各层且用EtOAc萃取水层。合并有机层，用盐水洗涤且浓缩，得到呈灰白色固体状的中间体25(48mg，107%)。MS(ESI)m/z:255.0(M+H)+。
中间体26
1-(3-氯-2,6-二氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001081
中间体26A.2-叠氮基-4-氯-1,3-二氟苯：在0℃经0.5小时时段向3-氯-2,6-二氟苯胺(1.7g，10.39mmol)于TFA(10mL)和水(2mL)中的溶液中添加亚硝酸钠(0.717g，10.39mmol)。添加完成后，逐滴添加于水(5mL)中的叠氮化钠(1.716g，26.4mmol)。在0℃搅拌反应混合物10分钟且接着使其升温至室温。用水(75mL)稀释反应混合物且用EtOAc萃取。干燥有机层且浓缩，得到呈棕色固体状的所需产物(1.16g，56%)。
中间体26B.1-(3-氯-2,6-二氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯：在65℃于微波小瓶中搅拌中间体26A(1.16g，6.12mmol)、3-氧代丁酸甲酯(0.729mL，6.73mmol)、NaOMe(1.539mL，6.73mmol)和MeOH(12mL)的混合物过夜。浓缩反应混合物且通过硅胶色谱纯化，分离出呈黄色固体状的所需产物(46mg，2%)。MS(ESI)m/z:287.8(M+H)+。
中间体26.1-(3-氯-2,6-二氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸：向中间体26B(46mg，0.160mmol)的溶液中添加LiOH(0.320mL，0.320mmol)。在室温搅拌反应混合物过夜且用1NHCl酸化。用EtOAc萃取混合物。干燥有机层且浓缩，得到所需产物(40mg，82%)。MS(ESI)m/z:274.0(M+H)+。
中间体27
5-氨基-1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001082
中间体27A.5-氨基-1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯：(PCT国际申请,2006/047516,(2006))在0℃向NaOEt(4.99g，15.39mmol)于EtOH(10mL)中的溶液中添加2-氰基乙酸乙酯(1.501ml，14.11mmol)。在0℃搅拌反应混合物10分钟且添加1-叠氮基-3-氯-2-氟苯(2.2g，12.82mmol)。使反应混合物缓慢升温至室温且搅拌14小时。用水(3mL)处理混合物且用EtOAc(3×30mL)萃取。浓缩合并的萃取物且通过硅胶色谱纯化，得到所需产物(2.1g，58%)。MS(ESI)m/z:285.1(M+H)+。
中间体27.5-氨基-1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸：向中间体27A(100mg，0.351mmol)于THF(15mL)和MeOH(15.0mL)中的溶液中添加NaOH(70mg，1.756mmol)。在50℃搅拌反应混合物2小时且接着浓缩。用1NHCl将混合物酸化至pH约5。过滤所得固体且干燥，得到所需产物(69mg，77%)。MS(ESI)m/z:257.0(M+H)+。
中间体28
5-氯-1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001091
中间体28A.5-氯-1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯：(CanJ.Chem.1959,37,118-119)在0℃向中间体27A(1.1g，3.86mmol)于EtOH(30mL)中的溶液中通入HCl气体直至所有固体溶解为止。向溶液中一次性添加亚硝酸异戊酯(0.520mL，3.86mmol)且将所得溶液在0℃至5℃保持48小时。在EtOAc中稀释反应混合物且用NaHCO3水溶液和盐水洗涤。浓缩有机层且通过反相HPLC纯化，得到所需产物。MS(ESI)m/z:304.0(M+H)+。
中间体28.1-(3-氯-2,6-二氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸：向中间体28A(50mg，0.164mmol)于THF(6mL)和MeOH(3.00mL)中的溶液中添加LiOH(39.4mg，1.644mmol)。在室温搅拌反应混合物1小时且浓缩。通过反相HPLC纯化残余物，得到中间体28(23mg，51%)。MS(ESI)m/z:276.0(M+H)+。
中间体29
1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲氧基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001101
中间体29.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲氧基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸：向中间体28A(50mg，0.164mmol)于THF(6mL)和MeOH(3.00mL)中的溶液中添加LiOH(39.4mg，1.644mmol)。在室温搅拌反应混合物1小时且浓缩。通过反相HPLC纯化残余物，得到中间体29(12mg，27%)。MS(ESI)m/z:272.0(M+H)+。
中间体30
1-(2-氟-3-甲氧基苯基)-5-甲氧基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
中间体30.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲氧基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸：在0℃向2-氟-3-甲氧基苯胺(1g，7.09mmol)于TFA(10mL)和水(5mL)中的溶液中逐滴添加NaNO2水溶液(0.733g，10.63mmol)。在0℃搅拌所得混合物0.5小时且逐份添加NaN3(0.921g，14.17mmol)。使反应混合物逐渐升温至室温且搅拌4小时。用水(150mL)淬灭反应且用EtOAc(2×100mL)萃取。用磷酸钠溶液(10%)和盐水(50mL)洗涤有机层，干燥且浓缩。将所得棕色油状物再溶解于DMSO(20mL)中且添加丙炔酸叔丁酯(1mL)，继而添加K2CO3(1g)、Cu(OAc)2(0.2g)和抗坏血酸钠(100mg)。在室温搅拌所得混合物过夜。用水(200mL)淬灭反应且用EtOAc(2×100mL)萃取。干燥有机层且浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，得到呈棕色油状的所需产物。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ13.19(br.s.,1H),7.36-7.20(m,2H),7.17-6.95(m,1H),6.76(td,J=8.1,1.3Hz,1H),3.91(s,3H),1.74-1.49(m,10H)。MS(ESI)m/z:238.0(M+H)+。
中间体31
1-(噻唑-2-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
中间体31.1-(噻唑-2-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸：向1-(噻唑-2-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(7.4mg，0.035mmol)(如J.Heterocyclicchem.42,1167(2005)中所制备)于MeOH(352μL)中的悬浮液中添加1NNaOH(141μL，0.141mmol)。反应混合物在5分钟内变得澄清。浓缩反应混合物。将所得残余物分配于1NHCl与EtOAc之间。分离各层且用EtOAc(2×)萃取水层。合并有机层，用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤且浓缩，得到呈白色固体状的所需产物(5mg，72%)。MS(ESI)m/z:169.9(M+H)+。
中间体32
3-乙酰基-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001112
中间体32A.(E)-N'-(3-氯-2-氟苯基)-2-氧代丙烷腙酰氯：在0℃向3-氯-2-氟苯胺(1.511mL，13.74mmol)于HCl(116mL，116mmol)中的溶液中逐滴添加亚硝酸钠(1.896g，27.5mmol)于水(12mL)中的溶液，同时将温度维持在0℃。添加完成后，在相同温度再搅拌反应混合物30分钟。使用固体乙酸钠将反应混合物的pH值调节至4.5。接着逐滴用于甲醇(12mL)中的3-氯戊烷-2,4-二酮(2.129mL，17.86mmol)处理所得混合物。添加完成后，使反应混合物升温至室温且在室温搅拌过夜。用水稀释反应混合物且接着用乙醚萃取。接着通过硅胶色谱纯化粗产物，分离出所需产物。MS(ESI)m/z:249.0(M+2H)+。
中间体32B.3-乙酰基-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯：向(E)-3-(吡咯烷-1-基)丁-2-烯酸乙酯(36.8mg，0.201mmol)于DCM(2mL)中的溶液中添加DIEA(0.168mL，1.204mmol)，继而添加32A(50mg，0.201mmol)且在回流温度搅拌反应混合物过夜。用水稀释反应混合物且用乙酸乙酯萃取。经MgSO4干燥有机层且浓缩，得到粗产物。接着使用ISCO正相系统纯化粗产物。MS(ESI)m/z:325.0(M+H)+。
中间体32.3-乙酰基-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸：向32B(67mg，0.206mmol)于THF(2mL)中的溶液中添加LiOH(0.227mL，0.227mmol)且在室温搅拌反应混合物过夜。用1NHCl酸化反应混合物且用EtOAc萃取。粗产物未经进一步纯化即用于下一步。MS(ESI)m/z:297.0(M+H)+。
中间体33
1-(3-氯-2-氟苯基)-3-羟基-1H-吡唑-4-甲酸
中间体33A.N'-(3-氯-2-氟苯基)乙酰肼：在0℃向(3-氯-2-氟苯基)肼盐酸盐(450mg，2.284mmol)于乙醚(10mL)和THF(1mL)中的溶液中添加氢氧化钠(0.228mL，2.284mmol)且在室温搅拌1小时。浓缩反应混合物，用EtOAc稀释且用盐水洗涤。接着在真空下干燥粗产物且用于下一步。在0℃向上文所得油状物于乙醚(10mL)中的溶液中逐滴添加乙酸酐(0.215mL，2.284mmol)于乙醚(5mL)中的溶液且在0℃搅拌30分钟。浓缩反应混合物，用乙酸乙酯稀释且用盐水洗涤。经MgSO4干燥有机层且浓缩，得到粗产物。接着粗产物未经进一步纯化即用于下一步。MS(ESI)m/z:203.1(M+H)+。
中间体33B.1-(3-氯-2-氟苯基)-3-羟基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯：向中间体33A(261mg，1.288mmol)中添加磷酰三氯(973μL，10.43mmol)，继而添加2-(乙氧基亚甲基)丙二酸二乙酯(351μL，1.739mmol)，且在70℃加热所得溶液过夜。向反应混合物中缓慢添加水(请注意：产生大量热)且搅拌直至反应混合物冷却回室温为止。接着用乙酸乙酯稀释粗产物且用盐水洗涤。经MgSO4干燥有机层且浓缩，得到粗产物，接着使用硅胶色谱将其纯化。MS(ESI)m/z:285.0(M+H)+。
中间体33.1-(3-氯-2-氟苯基)-3-羟基-1H-吡唑-4-甲酸：向中间体33B(52mg，0.183mmol)于THF(2mL)中的溶液中添加LiOH(0.183mL，0.183mmol)且在室温搅拌过夜。使用1NHCl酸化反应混合物且接着用EtOAc萃取。经MgSO4干燥有机层且浓缩，得到粗产物。粗产物未经任何进一步纯化即供进一步使用。MS(ESI)m/z:257.0(M+H)+。
中间体34
1-(5-氯-2-氰基苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001131
中间体34A.2-叠氮基-4-氯苯甲腈：向2-氨基-4-氯苯甲腈(2.0g，13.11mmol)于TFA(12mL)中的溶液中添加水(2.4mL)。冷却至0℃后，经0.5小时时段添加亚硝酸钠(0.904g，13.11mmol)。此添加后，逐渐逐滴添加于水(5mL)中的叠氮化钠(2.164g，33.3mmol)。在0℃搅拌反应混合物10分钟，且接着使其升温至室温。2小时后，用水(100mL)淬灭反应，且过滤不可溶固体且在抽吸和氮气下干燥。等分试样的LCMS分析指示起始物质消失且形成新峰，其不发生电离。
中间体34.1-(5-氯-2-氰基苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸：向中间体34A(400mg，2.035mmol)和乙酰乙酸甲酯(0.241mL，2.238mmol)于MeOH(12mL)中的混合物中添加NaOMe(121mg，2.238mmol)。在密封管中于65℃加热混合物过夜。用盐水淬灭反应混合物且萃取，得到酯产物。酸化水层且接着用乙酸乙酯萃取，得到所需水解产物，其未经进一步纯化即用于下一步中。MS(ESI)m/z:262.9(M+H)+。
中间体35
1-(3-氯-2,6-二氟苯基)-1H-咪唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001132
中间体35A.3-((3-氯-2,6-二氟苯基)氨基)-2-硝基丙烯酸乙酯：将容纳硝基乙酸乙酯(0.170ml，1.529mmol)、原甲酸三乙酯(0.255ml，1.529mmol)、3-氯-2,6-二氟苯胺(0.250g，1.529mmol)、乙酸(0.026ml，0.459mmol)和EtOH(1.529ml)的澄清无色溶液的密封高压小瓶加热至70℃。92小时后，浓缩澄清暗黄色溶液，得到橙色油状物。通过正相色谱纯化，得到呈黄色固体状的中间体35A(0.0721g，15%)。MS(ESI)m/z:307.0(M+H)+。
中间体35B.1-(3-氯-2,6-二氟苯基)-1H-咪唑-4-甲酸乙酯：根据对于中间体24A(替代)所述的操作，通过用中间体35A替换中间体24A1来制备中间体35B(0.029g，43%)。MS(ESI)m/z:287.1(M+H)+。
中间体35.1-(3-氯-2,6-二氟苯基)-1H-咪唑-4-甲酸：根据对于中间体24所述的操作，通过用中间体35B替换中间体24A(替代)来制备中间体35(0.0246g，94%)。MS(ESI)m/z:259.0(M+H)+。
中间体36
3-(3-氯-2-氟苯基)-4,5-二氢异噁唑-5-甲酸
Figure BDA0000487247700001141
1H NMR(500MHz,MeOD)δ7.72(ddd,J=8.0,6.5,1.7Hz,1H),7.60-7.56(m,1H),7.24(td,J=8.0,1.1Hz,1H),5.22(dd,J=11.8,6.9Hz,1H),3.84-3.76(m,1H),3.71-3.64(m,1H)。
中间体37
1-(3-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1H-咪唑-4-甲酸盐酸盐
Figure BDA0000487247700001142
中间体37A.3-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-2-硝基丙烯酸乙酯：根据对于中间体35A所述的操作，通过用3-氯-2-氟苯胺替换3-氯-2,6-二氟苯胺来制备中间体37A(0.563g，52%)。MS(ESI)m/z:289.0(M+H)+。
中间体37B.1-(3-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1H-咪唑-4-甲酸乙酯三氟乙酸盐：根据对于中间体24A(替代)所述的操作，通过用中间体37A替换中间体24A1，通过用原乙酸三乙酯替换原甲酸三乙酯且通过进行反应45分钟来制备中间体37B。通过反相色谱纯化，得到中间体37B(0.027g，17%)。MS(ESI)m/z:283.1(M+H)+。
中间体37.1-(3-氯-2-氟苯基)-2-甲基-1H-咪唑-4-甲酸盐酸盐：根据对于中间体24所述的操作，通过用中间体37B替换中间体24A(替代)来制备中间体37(0.0175g，88%)。MS(ESI)m/z:254.9(M+H)+。
中间体38
1-(5-氯-2-甲氧基苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001151
中间体38A.1-(5-氯-2-甲氧基苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯：根据对于中间体25所述的操作，通过用(5-氯-2-甲氧基苯基)肼盐酸盐替换(3-氯-2-氟苯基)肼盐酸盐来制备中间体38A(0.472g，67%)。MS(ESI)m/z:295.1(M+H)+。
中间体38.1-(5-氯-2-甲氧基苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸：根据对于中间体24所述的操作，通过用中间体38A替换中间体24A(替代)来制备中间体38(0.075g，73%)。MS(ESI)m/z:267.0(M+H)+和269.0(M+2+H)+。
中间体39
1-(5-氯-2-羟基苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001152
中间体39.1-(5-氯-2-羟基苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸：向中间体38A(0.100g，0.339mmol)于DCM(3.39mL)中的经冷却(0℃)的澄清黄色溶液中逐滴添加三溴化硼(0.321ml，3.39mmol)。在0℃搅拌所得澄清淡绿色溶液30分钟且接着使反应混合物升温至室温。45分钟后，将反应混合物逐滴添加至冷EtOAc与NaHCO3的经剧烈搅拌的混合物中。添加后，剧烈搅拌混合物10分钟。接着，分离各层且用EtOAc萃取水层。合并有机层，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到呈橙色残余物形式的酚(0.105g)。MS(ESI)m/z:281.0(M+H)+和283.0(M+2H)+。向酚于甲醇(2mL)中的澄清黄橙色溶液中添加1.0MNaOH(2.036mL，2.036mmol)。在室温搅拌所得的澄清暗红色溶液过夜。使反应混合物升温至50℃并持续2.5小时。将反应混合物冷却至室温且浓缩。将残余物分配于水与EtOAc之间且分离各层。用EtOAc萃取水层。用1.0MHCl酸化水层且接着用EtOAc(2×)萃取此水层。在酸化后合并有机层且用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到呈橙棕色固体状的中间体39(0.0657g，77%)。MS(ESI)m/z:253.0(M+H)+和254.9(M+2H)+。
中间体40
3-氨基-1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001161
中间体40A.(E)-1-苯亚甲基-2-(3-氯-2-氟苯基)肼：使用被修改的由Deprez-Poulain所述的操作。(Deprez-Poulain,R.等人，European Journal ofMedicinalChemistry,46,3867(2011))。向(3-氯-2-氟苯基)肼盐酸盐(3g，15.23mmol)于甲醇(60.9ml)中的澄清橙棕色溶液中添加苯甲醛(1.543mL，15.23mmol)，继而缓慢添加1.0MNaOH(15.23mL，15.23mmol)。在室温搅拌所得暗棕色溶液。随时间推移，形成沉淀物。2.5小时后，停止反应且通过过滤收集固体。用水洗涤固体，空气干燥且在真空下干燥过夜，得到呈灰白色固体状的中间体40A(1.01g，27%)。MS(ESI)m/z:249.0(M+H)+。
中间体40B.3-氨基-1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯：使中间体40A(1.10g，4.42mmol)和2-氰基-3-乙氧基-2-丙烯酸乙酯(0.786g，4.64mmol)于二甲苯(5.90ml)中的暗棕色混合物升温至160℃。72小时后，停止反应且冷却至室温。浓缩反应混合物，得到棕色残余物。随后，添加30mL37%HCl/EtOH(1:2)溶液，得到悬浮液。使悬浮液升温至100℃。在高温，形成棕色溶液。20分钟后，将反应混合物冷却至室温且移除溶剂，得到棕色残余物。将残余物分配于饱和NaHCO3与EtOAc之间且分离各层。用EtOAc(2×)萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到重量为1.3g的棕色液体。通过正相色谱纯化，得到重量为0.269g的灰白色固体。通过反相色谱纯化，得到呈蓬松白色固体状的中间体40B(0.080g，6%)。MS(ESI)m/z:284.0(M+H)+和286.0(M+2+H)+。
中间体40.3-氨基-1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酸：向中间体40B(0.075g，0.264mmol)于甲醇(2.64mL)中的白色悬浮液中添加1.0MNaOH(1.058mL，1.058mmol)。使悬浮液升温至50℃。3小时后，将所得的澄清无色溶液冷却至室温。接着，浓缩反应混合物，得到白色固体。将固体溶解于水中且用1.0NHCl酸化至pH3-4，得到白色悬浮液。用EtOAc(3×)萃取悬浮液。用盐水洗涤合并的有机层，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到呈白色固体状的中间体40(0.0708g，105%)。MS(ESI)m/z:256.0(M+H)+和258.0(M+2+H)+。
中间体41
1-(4-氯-3-氟吡啶-2-基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001171
中间体101A.2-溴-4-氯-3-氟吡啶：在-78℃向2,2,6,6-四甲基哌啶(1.54mL，9.12mmol)于THF(40mL)中的溶液中逐滴添加1.6Mn-BuLi的己烷溶液(5.23mL，8.36mmol)。在0℃搅拌所得溶液0.5小时。接着将其冷却至-78℃且经30分钟逐滴添加于5mLTHF中的4-氯-3-氟吡啶(0.769mL，7.60mmol)。在-78℃搅拌所得溶液30分钟。向溶液中逐滴添加于THF(25mL)中的NBS(1.624g，9.12mmol)且在-78℃搅拌所得溶液1小时，接着在环境温度搅拌12小时。接着用EtOAc和水稀释反应混合物。用盐水洗涤有机层，浓缩且经硅胶色谱纯化，得到呈橙色油(挥发性)状的所需产物(0.541g，34%)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(d,J=5.0Hz,1H),7.35(t,J=5.1Hz,1H)。
中间体41B.4-氯-3-氟-2-肼基吡啶二盐酸盐：在微波小瓶中添加甲苯(3mL)且用N2吹扫5分钟。将肼基甲酸叔丁酯(128mg，0.950mmol)、中间体101A(200mg，0.950mmol)、Cs2CO3(310mg，0.950mmol)、DPPF(20mg，0.036mmol)和Pd2(dba)3(25mg，0.027mmol)依序添加至溶液中。在100℃加热密封管12小时。用盐水稀释反应混合物，且用EtOAc(2×)萃取。在真空中浓缩合并的有机层，得到油状残余物，将其通过硅胶色谱纯化，得到呈橙色固体状的2-(4-氯-3-氟吡啶-2-基)肼甲酸叔丁酯(41mg，16%)。MS(ESI)m/z:262.1(M+H)+。向固体中添加EtOH(1mL)和4NHCl的二噁烷(4mL)溶液且在室温搅拌反应混合物2小时。将混合物浓缩至干燥，得到所需产物。MS(ESI)m/z:162.1(M+H)+。
中间体41.1-(4-氯-3-氟吡啶-2-基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸：向2-((二甲氨基)亚甲基)-3-氧代丁酸叔丁酯(0.045g，0.211mmol)于乙腈(2mL)中的溶液中添加TEA(0.030mL，0.215mmol)，继而添加中间体41B(0.038g，0.19mmol)。在85℃搅拌暗棕色溶液1小时。浓缩反应混合物，且添加水(1mL)和CH2Cl2(1mL)。浓缩有机层且通过硅胶色谱纯化，得到呈棕色油状的1-(4-氯-3-氟-吡啶-2-基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸叔丁酯。MS(ESI)m/z:312.1(M+H)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.39-8.25(m,1H),8.04(s,1H),7.51(t,J=5.0Hz,1H),2.57(s,3H),1.48(s,9H)。在室温将油状物与4NHCl的二噁烷(2mL)溶液一起搅拌12小时。将溶液蒸发至干燥，继而与甲苯(2×)共蒸发，得到所需产物(12mg，22%)。MS(ESI)m/z:256.1(M+H)+。
中间体42
1-(4-氯吡啶-2-基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001181
中间体42A.4-氯-2-肼基吡啶二盐酸盐：在微波小瓶中添加甲苯(4mL)且用N2吹扫5分钟。添加肼基甲酸叔丁酯(66.6mg，0.494mmol)、2-溴-4-氯吡啶(95mg，0.494mmol)、Cs2CO3(161mg，0.494mmol)和PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(4.03mg，4.94μmol)。在100℃加热密封管5小时。向反应混合物中添加水、盐水且用EtOAc(2×)萃取混合物。浓缩合并的有机层且通过硅胶色谱纯化，得到呈红色油状的2-(4-氯吡啶-2-基)肼甲酸叔丁酯(42mg，35%)。MS(ESI)m/z:244.2(M+H)+。向上述油状物中添加4NHCl的二噁烷(2mL)溶液且在室温搅拌反应混合物2小时。将混合物浓缩至干燥，得到呈白色固体状的所需物质(36mg，34%)。MS(ESI)m/z:144.0(M+H)+。
中间体42.1-(4-氯吡啶-2-基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸：向2-((二甲氨基)亚甲基)-3-氧代丁酸叔丁酯(0.032g，0.148mmol)于乙腈(2mL)中的溶液中添加TEA(0.021mL，0.148mmol)和中间体42A(0.024g，0.133mmol)。将暗棕色溶液加热至85℃并持续1小时。浓缩反应混合物，且添加水(1mL)和CH2Cl2(1mL)。浓缩有机层且通过硅胶色谱纯化，得到呈黄色油状的1-(4-氯吡啶-2-基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸叔丁酯(12mg，27%)。MS(ESI)m/z:294.2(M+H)+。向油状物中添加4NHCl的二噁烷(2mL)溶液。在室温搅拌反应混合物4小时，且将澄清橙色溶液蒸发至干燥，继而与甲苯(2×)共蒸发，得到呈粘性粉红色固体状的所需产物。MS(ESI)m/z:238.2(M+H)+。
中间体43
1-(3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001191
中间体43A.3-氟-2-肼基-4-甲基吡啶：在微波小瓶中，在50℃加热单水合肼(0.051mL，1.053mmol)、2-溴-3-氟-4-甲基吡啶(200mg，1.053mmol)、DIEA(0.551mL，3.16mmol)于异丙醇(2mL)中的溶液过夜。再添加单水合肼(0.100mL)且在微波反应器中在100℃加热反应混合物30分钟，接着在120℃加热30分钟。再添加单水合肼(0.100mL)且在120℃加热反应混合物过夜。在真空中移除挥发性有机物且用CH2Cl2洗涤残余物。过滤所得固体，得到所需产物。MS(ESI)m/z:142.0(M+H)+。
中间体43.1-(3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸：向2-((二甲氨基)亚甲基)-3-氧代丁酸叔丁酯(0.123g，0.575mmol)于乙腈(2mL)中的溶液中添加TEA(0.080mL，0.575mmol)和中间体43A(0.073g，0.517mmol)。将橙色溶液加热至85℃并持续1小时。再将2-((二甲氨基)亚甲基)-3-氧代丁酸叔丁酯(0.160mL)和Et3N(0.080mL)添加至溶液中且在85℃加热反应混合物1小时。浓缩反应混合物且通过硅胶色谱纯化，得到呈黄色油状的1-(3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸叔丁酯。MS(ESI)m/z:292.1(M+H)+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.26(d,J=4.8Hz,1H),8.02(s,1H),7.29(t,J=4.8Hz,1H),2.54(s,3H),2.43(d,J=1.5Hz,3H),1.58(s,9H)。向油状物中添加4NHCl的二噁烷(2mL)溶液且在室温搅拌反应混合物4小时。将澄清橙色溶液蒸发至干燥，继而与甲苯(2×)共蒸发，得到呈粘性粉红色固体状的所需产物(15mg，11%)。MS(ESI)m/z:236.1(M+H)+。
中间体44
1-(3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-甲酸
Figure BDA0000487247700001201
中间体44A.1-(3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-甲酸甲酯：在微波条件下在120℃加热1H-咪唑-4-甲酸甲酯(83mg，0.658mmol)、2-溴-3-氟-4-甲基吡啶(200mg，1.053mmol)、碘化铜(I)(125mg，0.658mmol)和碳酸钾(546mg，3.95mmol)于DMSO(2mL)中的悬浮液90分钟。用H2O淬灭反应混合物，且将固体悬浮于EtOAc和MeOH中。在真空中浓缩合并的有机层，得到油状残余物，将其通过反相HPLC纯化，得到所需产物(5mg，3%)。MS(ESI)m/z:236.1(M+H)+。
中间体44.1-(3-氟-4-甲基吡啶-2-基)-1H-咪唑-4-甲酸：向中间体44A(5mg，0.021mmol)于THF(0.6mL)和H2O(0.3mL)中的溶液中添加LiOH(5mg)。在室温搅拌反应混合物12小时。在真空中移除THF且添加1NHCl水溶液直至溶液变成酸性为止。用EtOAc(2×)萃取混合物。将合并的有机层浓缩至干燥，得到呈白色固体状的所需产物(4mg，3%)。MS(ESI)m/z:222.1(M+H)+。
中间体45
(R)-2-甲基丁-3-烯酸
Figure BDA0000487247700001211
中间体45A.(R)-4-苯甲基-3-((R)-2-甲基丁-3-烯酰基)噁唑烷-2-酮：在0℃向2-甲基丁-3-烯酸(5.59g，55.9mmol)和N-甲基吗啉(6.14ml，55.9mmol)于THF(62mL)中的溶液中逐滴添加特戊酰氯(6.87ml，55.9mmol)。将反应混合物冷却至-78℃，且搅拌约2小时。在单独烧瓶中：在-78℃向(R)-4-苯甲基噁唑烷-2-酮(8.25g，46.6mmol)于THF(126mL)中的溶液中逐滴添加N-丁基锂(2.5M己烷溶液)(20.49mL，51.2mmol)。35分钟后，经由套管将此反应混合物转移至最初的反应混合物中。在-78℃搅拌反应混合物2小时，接着移除冷却浴，且用饱和NH4Cl淬灭反应。用水稀释反应混合物且用EtOAc(3×)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到黄色油状物(15g)。通过硅胶色谱纯化，得到呈无色油状的所需产物(6.59g，55%)。MS(ESI)m/z:282.1(M+Na)+。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.36-7.19(m,5H),6.03-5.93(m,1H),5.23-5.10(m,2H),4.69-4.63(m,1H),4.51-4.43(m,1H),4.23-4.15(m,2H),3.29(dd,J=13.5,3.3Hz,1H),2.79(dd,J=13.5,9.6Hz,1H),1.35(d,J=6.9Hz,3H)ppm。也得到呈白色固体状的另一非对映异构体(R)-4-苯甲基-3-((S)-2-甲基丁-3-烯酰基)噁唑烷-2-酮(4.6g，38%)。MS(ESI)m/z:260.1(M+H)+。
中间体45.(R)-2-甲基丁-3-烯酸：在0℃向中间体45A(6.05g，23.33mmol)于THF(146mL)中的澄清无色溶液中逐滴添加过氧化氢(9.53mL，93mmol)(30%水溶液)，继而添加2N氢氧化锂(23.33mL，46.7mmol)。30分钟后，用25mL饱和Na2SO3和25mL饱和NaHCO3淬灭反应。接着浓缩反应混合物以移除THF。用水稀释残余物且用CHCl3(3×)萃取。用浓HCl将水层酸化至pH约3且接着将其用EtOAc(3×)萃取。合并EtOAc层，用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤且浓缩，得到呈无色油状的所需产物(2.15g，92%)。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ10.84(br.s.,1H),5.94(ddd,J=17.4,10.1,7.4Hz,1H),5.22-5.13(m,2H),3.23-3.15(m,1H),1.31(d,J=7.2Hz,3H)ppm。
中间体46
3-(3-氯-2-氟苯基)-4-甲基异噁唑-5-甲酸
中间体46A.(E)-3-氯-2-氟苯甲醛肟：向3-氯-2-氟苯甲醛(1.3g，8.20mmol)和羟胺盐酸盐(0.695g，10.00mmol)于EtOH(6.83mL)/水(6.83mL)中的溶液中添加1NNaOH(10.00mL，10.00mmol)。在室温搅拌反应混合物4小时，接着用1NHCl将其酸化至pH6，得到白色悬浮液。过滤反应混合物，且用水冲洗固体，且空气干燥，得到呈白色固体状的所需产物(1.31g，92%)。MS(ESI)m/z:174.0(M+H)+。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ8.36(s,1H),7.74(s,1H),7.66(ddd,J=7.8,6.3,1.7Hz,1H),7.42(ddd,J=8.0,7.2,1.7Hz,1H),7.13-7.07(m,1H)ppm。
中间体46B.3-(3-氯-2-氟苯基)-4-甲基异噁唑-5-甲酸乙酯：将丁-2-炔酸乙酯(0.725ml，6.22mmol)和中间体46A(0.36g，2.074mmol)溶解于乙腈(10.37mL)中。添加Magtrieve(1.742g，20.74mmol)且在密封管中于80℃搅拌反应混合物。2小时后，将反应混合物冷却至室温且接着将其经
Figure BDA0000487247700001222
过滤，用EtOAc冲洗。浓缩滤液且通过反相HPLC纯化，得到呈白色固体状的所需产物(0.009g，2%产率)。MS(ESI)m/z:284.0(M+H)+。1HNMR(500MHz,MeOD)δ7.70(ddd,J=8.0,7.2,1.7Hz,1H),7.49(ddd,J=7.8,6.3,1.7Hz,1H),7.35(td,J=7.8,1.1Hz,1H),4.46(q,J=7.2Hz,2H),2.25(d,J=1.9Hz,3H),1.42(t,J=7.2Hz,3H)ppm。也得到呈无色油状的另一区位异构体3-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基异噁唑-4-甲酸乙酯(0.083g，14%)。MS(ESI)m/z:284.0(M+H)+。
中间体46.3-(3-氯-2-氟苯基)-4-甲基异噁唑-5-甲酸：向中间体46B(0.011g，0.039mmol)于MeOH(1mL)中的溶液中添加1NNaOH(0.078mL，0.078mmol)。18小时后，用1NHCl(0.1mL)淬灭反应且接着将其浓缩，得到呈白色固体状的所需产物(10mg，100%产率)。MS(ESI)m/z:255.9(M+H)+。该物质未经进一步纯化即用于下一步。
中间体47
5-(3-氯-2-氟苯基)-4-甲基异噁唑-3-甲酸
Figure BDA0000487247700001231
中间体47A.1-(3-氯-2-氟苯基)丙-1-醇：在-78℃向3-氯-2-氟苯甲醛(2.8g，17.66mmol)于THF(88mL)中的溶液中逐滴添加溴化乙基镁(1MTHF溶液)(21.19mL，21.19mmol)。2小时后，使反应混合物升温至0℃且将其小心地用饱和NH4Cl溶液淬灭。用水稀释反应混合物且用EtOAc(3×)萃取。合并有机层且用水、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤且浓缩。通过硅胶色谱纯化，得到呈无色油状的所需产物(2.04g，61%)。MS(ESI)m/z:211.0(M+Na)+。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.37(td,J=7.0,1.7Hz,1H),7.33-7.28(m,1H),7.09(td,J=7.8,1.1Hz,1H),4.99-4.94(m,1H),1.92(d,J=4.4Hz,1H),1.85-1.77(m,2H),0.95(t,J=7.4Hz,3H)ppm。
中间体47B.1-(3-氯-2-氟苯基)丙-1-酮：向中间体47A(1.9g，10.07mmol)于DCM(40.3ml)中的溶液中添加PDC(11.37g，30.2mmol)和
Figure BDA0000487247700001232
MS(2g)(粉末状)。在室温搅拌反应混合物24小时，接着将其经
Figure BDA0000487247700001233
过滤，用DCM洗涤。浓缩滤液。通过硅胶色谱纯化，得到呈无色油状的所需产物(1.6g，85%)。MS(ESI)m/z:187.0(M+H)+。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.74(ddd,J=7.9,6.3,1.8Hz,1H),7.58-7.53(m,1H),7.17(td,J=7.8,0.8Hz,1H),3.00(qd,J=7.2,3.3Hz,2H),1.21(td,J=7.2,0.7Hz,3H)ppm。
中间体47C.4-(3-氯-2-氟苯基)-3-甲基-2,4-二氧代丁酸乙酯：在-78℃向LiHMDS(1MTHF溶液)(3.19mL，3.19mmol)于乙醚(12mL)中的溶液中逐滴添加中间体47B(0.59g，3.16mmol)于乙醚(2mL)中的溶液。45分钟后，一次性添加乙二酸二乙酯(0.492mL，3.60mmol)，且使反应混合物升温至室温。18小时后，过滤反应混合物，用乙醚洗涤。用EtOAc稀释滤液，用1NHCl、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。通过硅胶色谱纯化，得到呈黄色油状的所需产物(0.057g，6%)。MS(ESI)m/z:241.0(M-OEt)+。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.80(ddd,J=8.0,6.3,1.7Hz,1H),7.65(ddd,J=7.8,7.0,1.9Hz,1H),7.23(td,J=8.0,0.8Hz,1H),4.91(q,J=7.2Hz,1H),4.31(qd,J=7.2,0.8Hz,2H),1.46(dd,J=7.2,0.8Hz,3H),1.34(t,J=7.2Hz,3H)ppm。
中间体47D.5-(3-氯-2-氟苯基)-4-甲基异噁唑-3-甲酸乙酯：在密封管中于90℃加热中间体47C(0.057g，0.199mmol)和羟胺盐酸盐(0.017g，0.239mmol)于EtOH(1mL)中的混合物。5小时后，将反应混合物冷却至室温且接着将其浓缩。通过反相HPLC纯化，得到呈白色固体状的所需产物(0.022g，39%)。MS(ESI)m/z:284.0(M+H)+。1H NMR(500MHz,MeOD)δ7.73-7.68(m,1H),7.56(ddd,J=7.8,6.2,1.7Hz,1H),7.37(td,J=8.0,1.1Hz,1H),4.45(q,J=7.0Hz,2H),2.24(d,J=2.2Hz,3H),1.42(t,J=7.2Hz,3H)ppm。
中间体47.5-(3-氯-2-氟苯基)-4-甲基异噁唑-3-甲酸：向中间体47D(0.009g，0.032mmol)于MeOH(1mL)中的溶液中添加1NNaOH(0.063mL，0.063mmol)。3小时后，用1NHCl(0.1mL)淬灭反应且接着将其浓缩，得到呈白色固体状的所需产物(8.1mg，100%产率)。MS(ESI)m/z:255.9(M+H)+。该物质未经进一步纯化即用于下一步。
中间体48
(R)-2-甲基丁-3-烯酰氯
中间体48.(R)-2-甲基丁-3-烯酰氯：向(R)-2-甲基丁-3-烯酸(0.450g，4.49mmol)于DCM中的经冷却(0℃)的溶液中逐滴添加乙二酰氯(0.393mL，4.49mmol)。在0℃搅拌反应混合物30分钟且接着在室温将其搅拌80分钟。直接使用所得的(R)-2-甲基丁-3-烯酰氯溶液。
中间体49
2-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧硼杂环己烷-2-基)-5-硝基-苯胺
Figure BDA0000487247700001242
向容纳2-溴-5-硝基苯胺(10.0g，46.1mmol)、二(新戊基乙二醇合)二硼(13.01g，57.6mmol)、乙酸钾(13.57g，138mmol)和PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(0.941g，1.152mmol)的装备有回流冷凝器的火焰干燥的烧瓶中添加DMSO(132mL)。用氩气使所得的暗红棕色悬浮液脱气30分钟且接着使反应混合物升温至80℃。4小时后，停止反应且冷却至室温。将反应混合物缓慢倾注至经剧烈搅拌的冰冷水(300mL)中，得到棕色悬浮液。搅拌10分钟后，过滤悬浮液以收集固体。用水(3×125mL)冲洗固体，空气干燥，且接着在真空下干燥，得到棕色固体。通过正相色谱纯化，得到4.36g呈橙色固体状的中间体49。MS(ESI)m/z:183.1(M-C5H8+H)+。
中间体50
4-氯-5-(3-氯-2-氟苯基)异噻唑-3-甲酸
Figure BDA0000487247700001251
中间体50A.4,5-二氯异噻唑-3-甲酸甲酯：向4,5-二氯异噻唑-3-甲酸(211mg，1.07mmol)于甲苯(3mL)和MeOH(1mL)中的溶液中逐滴添加三甲基甲硅烷基重氮基甲烷(2M己烷溶液)(0.7mL，1.400mmol)溶液。在室温搅拌浅黄色溶液0.5小时。在真空下浓缩溶液，得到黄色固体，其未经进一步纯化即进行以下反应。MS(ESI)m/z:212.1(M+H)+。
中间体50B.4-氯-5-(3-氯-2-氟苯基)异噻唑-3-甲酸甲酯：向中间体50A(0.100g，0.472mmol)和Cs2CO3(0.461g，1.415mmol)于DME(3.02mL)和水(0.605mL)中的溶液中添加4,5-二氯异噻唑-3-甲酸甲酯(0.100g，0.472mmol)。用Ar吹扫溶液0.5小时。向溶液中添加Pd(PPh3)4(0.054g，0.047mmol)。接着密封反应混合物且在微波中于100℃加热0.5小时。接着用EtOAc稀释反应混合物且滗析水层。在真空中浓缩有机层，得到油状残余物，将其通过硅胶柱色谱纯化，得到呈白色固体状的所需产物(53mg，37%)。MS(ESI)m/z:360.0(M+H)+。
中间体50.4-氯-5-(3-氯-2-氟苯基)异噻唑-3-甲酸：向中间体50B(53mg，0.173mmol)于THF(2mL)和水(1mL)中的溶液中添加单水合氢氧化锂(0.014mL，0.519mmol)。在室温搅拌所得溶液2小时。在真空中浓缩反应混合物。用1NHCl酸化水溶液(pH值=2至3)且用EtOAc(2×)萃取。经Na2SO4干燥有机溶液，过滤且在真空中浓缩，得到呈白色固体状的所需产物(47mg，93%)。MS(ESI)m/z:291.1(M+H)+。
中间体51
5-(3-氯-2-氟苯基)吡啶-3-甲酸盐酸盐
Figure BDA0000487247700001261
中间体51A.5-(3-氯-2-氟苯基)吡啶-3-甲酸乙酯：向(3-氯-2-氟苯基)硼酸(148mg，0.848mmol)、5-溴吡啶-3-甲酸乙酯(150mg，0.652mmol)、溴化四丁铵(315mg，0.978mmol)和Cs2CO3(637mg，1.956mmol)于二甲氧基乙烷(9mL)和水(1mL)中的溶液中添加Pd(Ph3P)4(113mg，0.098mmol)且用N2吹扫所得的非均相溶液。接着将其密封且在微波反应器中于120℃加热0.5小时。用DCM稀释反应混合物且用盐水(2×)洗涤。经Na2SO4干燥有机溶液，过滤且在真空中浓缩，得到油状残余物，将其通过硅胶柱色谱纯化，得到所需产物(100mg，55%)。MS(ESI)m/z:280.1(M+H)+。
中间体51.5-(3-氯-2-氟苯基)吡啶-3-甲酸：向中间体51A(100mg，0.358mmol)于THF(4mL)和水(3mL)中的溶液中添加单水合氢氧化锂(0.030mL，1.073mmol)且在室温搅拌所得溶液2小时。在真空中浓缩反应混合物。用1NHCl酸化水溶液(pH值=2至3)。此时，白色固体自溶液中沉淀。通过过滤收集固体且在真空下干燥，得到呈白色固体状的中间体51(102mg，99%)。MS(ESI)m/z:252.1(M+H)+。
实施例1
N-[(14S)-14-[1-(3-氯苯基)-3-(2-羟基乙基)-1H-吡唑-4-酰氨基]-16-氟-10-甲基-9-氧代-8,17-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001262
1A.(R,E)-N-((5-溴-2-氟吡啶-3-基)亚甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺：向5-溴-2-氟吡啶-3-甲醛(5g，24.51mmol)、乙醇钛(IV)(15.42ml，73.5mmol)于DCM(49.0ml)中的溶液中添加(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(3.12g，25.7mmol)且在室温搅拌反应混合物。48小时后，将反应混合物倾注至盐水中，同时快速搅拌，形成悬浮液。经塞过滤所得悬浮液且用DCM洗涤滤饼若干次。分离滤液的各相，且用盐水洗涤有机相且经MgSO4干燥。接着浓缩有机层，得到7.6g粗产物，使用硅胶色谱将其进一步纯化，得到呈灰白色固体状的所需产物(6.97g，93%)。MS(ESI)m/z:330.8(M+Na)+。
1B.(R)-N-((S)-1-(5-溴-2-氟吡啶-3-基)丁-3-烯-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺：向饱和溴化钠水溶液(420g，4084mmol)(约420g于450mlH2O中)中添加1A(6.97g，22.69mmol)和铟(10.42g，91mmol)。接着向此混合物中逐滴添加3-溴丙-1-烯(7.85ml，91mmol)，且在室温搅拌所得混浊白色悬浮液10小时。接着用饱和NaHCO3水溶液淬灭反应，继而用EtOAc萃取。经无水MgSO4干燥有机层且浓缩，得到粗产物。接着使用硅胶色谱纯化粗产物，得到呈灰白色固体状的所需产物(8.8g，98%)。MS(ESI)m/z:350.8(M+H)+。
1C.(S)-1-(5-溴-2-氟吡啶-3-基)丁-3-烯-1-胺二盐酸盐：向1B(8.8g，25.2mmol)于MeOH(100mL)中的溶液中添加HCl(31.5mL，126mmol)(4M二噁烷溶液)。在室温搅拌反应混合物1小时且接着浓缩至接近干燥。添加Et2O，得到黄色悬浮液，接着将其过滤且再用Et2O洗涤过滤的固体。浓缩滤液且用Et2O再过滤。接着经真空泵干燥所收集的固体，得到呈白色固体状的1C(6.45g，80%)。MS(ESI)m/z:246.9(M+H)+。
1D.(S)-(1-(5-溴-2-氟吡啶-3-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯：在0℃向1C(6.55g，20.60mmol)于DCM(68.7ml)中的溶液中添加TEA(11.48ml，82mmol)和Boc2O(4.50g，20.60mmol)。在0℃搅拌反应混合物2小时，且接着使其升温至室温。搅拌2小时后，用DCM稀释反应混合物且用饱和NaHCO3溶液洗涤。用DCM(2×)再萃取水层。接着用盐水洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，得到粗产物。接着使用硅胶色谱纯化粗产物，得到呈白色固体状的所需产物(6.64g，87%)。MS(ESI)m/z:368.9(M+Na)+。
1E.(S)-(1-(5-(2-氨基-4-硝基苯基)-2-氟吡啶-3-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯：向圆底烧瓶中添加1D(4.5g，13.04mmol)、2-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧硼杂环己烷-2-基)-5-硝基苯胺(6.52g，26.1mmol)、PdCl2(dppf)-DCM加合物(1.065g，1.304mmol)和磷酸三钾(5.53g，26.1mmol)。为圆底烧瓶装备回流冷凝器且将该装置排空且用氩气回填。添加经脱气的DMSO(65.2mL)，继而添加经脱气的H2O(1.174mL，65.2mmol)。使暗红色反应混合物升温至90℃并持续1小时，且接着将其冷却至室温。接着将反应混合物分配于EtOAc与盐水之间，且分离各层。用EtOAc再萃取水层。经MgSO4干燥合并的有机层，过滤且浓缩，得到呈稠厚黑色油状的粗产物，对其实施硅胶色谱，得到呈黄色泡沫状的所需产物(5.90g，100%)。MS(ESI)m/z:403.0(M+H)+。
1F.(3-氨基-4-(5-((1S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)-6-氟吡啶-3-基)苯基)氨基甲酸甲酯：向1E(4.4g，9.95mmol)于MeOH(100mL)中的澄清橙色溶液中依序添加锌(6.51g，99mmol)和氯化铵(5.32g，99mmol)。所得的黄橙色悬浮液在几分钟后变得澄清且在室温进行搅拌。2小时后，滤出反应混合物以移除固体且浓缩，得到残余物。用EtOAc稀释残余物且用饱和NaHCO3溶液洗涤。接着经MgSO4干燥有机层且通过硅胶色谱纯化，得到呈桃红色泡沫状的所需双胺产物。向上述双胺产物(5.08g，13.64mmol)和吡啶(1.103ml，13.64mmol)于DCM(136mL)中的-78℃澄清橙色溶液中逐滴添加氯碳酸甲酯(0.949ml，12.28mmol)且在-78℃搅拌反应混合物1.5小时。接着用饱和NH4Cl溶液淬灭反应，且使其缓慢升温至室温。用DCM稀释反应混合物且用DCM再萃取水层。用饱和NaHCO3溶液洗涤合并的有机层，继而用盐水洗涤。接着经MgSO4干燥有机层，过滤且浓缩，得到呈桃红色泡沫状的粗产物，接着使用硅胶色谱将其纯化。COSY和NOE分析确定加成位点。分离出呈米色泡沫状的所需产物(4.77g，81%)。MS(ESI)m/z:431.1(M+H)+。
1G.(4-(5-((1S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)-6-氟吡啶-3-基)-3-((2-甲基丁-3-烯酰基)氨基)苯基)氨基甲酸甲酯：向2-甲基丁-3-烯酸(0.216mL，2.091mmol)和1F(0.900g，2.091mmol)于EtOAc(59.7mL)中的溶液中添加DIEA(1.095mL，6.27mmol)且在氩气下将反应混合物冷却至-10℃。接着向此混合物中添加T3P(2.464mL，4.18mmol)且在相同温度搅拌反应混合物5分钟且接着使其升温至0℃，继而缓慢升温至室温，同时在氩气下在室温搅拌。搅拌过夜后，浓缩反应混合物且通过硅胶色谱纯化，得到呈白色固体状的1G(887mg，83%)。MS(ESI)m/z:513.1(M+H)+。
1H.N-[(11E)-16-氟-9-羟基-5-[(甲氧羰基)氨基]-10-甲基-8,17-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-11-烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯：用氩气使11G(887mg，1.730mmol)于DCE(100mL)中的澄清无色溶液脱气，接着将其分装入5个微波小瓶中。接着向上述混合物中添加格拉布II催化剂(588mg，0.692mmol)(向每个小瓶中添加118mg)且在微波中于120℃加热每个小瓶25分钟。接着合并反应混合物且用饱和NaHCO3洗涤，继而用盐水洗涤。接着经MgSO4干燥有机层，过滤且浓缩，得到粗产物，通过硅胶色谱将其纯化。收集所需洗脱份且浓缩，得到呈棕色固体状的1H(568mg，68%)。MS(ESI)m/z:485.1(M+H)+。
1I.N-[(14S)-16-氟-5-[(甲氧羰基)氨基]-10-甲基-9-氧代-8,17-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯：向1H(0.568g，1.172mmol)于MeOH(39.1mL)中的溶液中添加氧化铂(IV)(0.027g，0.117mmol)。接着使用H2气球向反应混合物中添加H2气体且用H2排空若干次。接着在室温于H2下搅拌反应混合物40小时。搅拌40小时后，经
Figure BDA0000487247700001291
垫过滤反应混合物且浓缩滤液，得到粗产物。接着通过硅胶色谱纯化粗产物，得到呈白色固体状的非对映异构体A(1Ia)(178mg，25%)和非对映异构体B(95mg，14%，1Ib)。非对映异构体A-MS(ESI)m/z:487.1(M+H)+。
1J.N-[(14S)-14-氨基-16-氟-10-甲基-9-氧代-8,17-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯：将氯化氢于二噁烷中的溶液(5932μL，23.73mmol)添加至1Ia(95mg，0.158mmol)中且在室温搅拌反应混合物。搅拌1小时后，浓缩反应混合物，得到所需产物(73mg，100%)。MS(ESI)m/z:387.1(M+H)+。
实施例1.N-[(14S)-14-[1-(3-氯苯基)-3-(2-羟基乙基)-1H-吡唑-4-酰氨基]-16-氟-10-甲基-9-氧代-8,17-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：在室温搅拌中间体9(0.030g，0.112mmol)、1J(0.043g，0.112mmol)、DIEA(0.60mL，0.334mmol)和T3P(0.115mmol)于DMF(2mL)中的混合物过夜。浓缩反应混合物且通过反相HPLC直接纯化，分离出呈纯手性化合物形式的所需产物。1HNMR(400MHz,MeOD)δ8.59(s,1H),8.01-7.99(m,1H),7.96-7.95(dd,J=8.3和1.3Hz,1H),7.67-7.49(m,3H),7.48-7.39(m,1H),7.38-6.37(m,2H),7.26-7.24(m,1H),5.17-4.93(m,1H),3.82-3.57(t,J=6.3Hz,2H),3.02(t,J=6.3Hz,2H),2.23-2.00(m,1H),1.96(m,1H),1.82(m,1H),1.51-1.49(m,1H),1.36(m,2H),1.12-1.10(d,2H),0.92(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:635.1(M+H)+。分析性HPLCRT=6.44分钟(方法B)。
实施例2
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯苯基)吡咯烷-3-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯双三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001301
2A.(S,E)-N-((4-氯吡啶-2-基)亚甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺：Liu,G.等人，J.Org.Chem.,64:1278(1999)。向S-(-)-叔丁基-亚磺酰胺(0.856g，7.06mmol)于二氯甲烷(14.13mL)中的溶液中依序添加硫酸铜(II)(2.481g，15.54mmol)和4-氯吡啶-2-甲醛[1.0g，7.06mmol，根据被修改的由Negi(Synthesis,991(1996))所述的方法来制备]。在室温搅拌白色悬浮液。3小时后，经
Figure BDA0000487247700001302
过滤棕色悬浮液，用DCM洗脱，得到澄清棕色滤液。浓缩，得到重量为1.85g的棕色油状物。通过正相色谱纯化，得到1.31g呈澄清黄色油状的2A。MS(ESI)m/z:245.0(M+H)+。
2B.(S)-N-((S)-1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺：向2A(10g，40.9mmol)于THF(204mL)中的经冷却的溶液(-78℃)中逐滴添加溴化烯丙基镁(44.9mL，44.9mmol，1MEt2O溶液)。在-78℃搅拌反应混合物。2小时后，通过添加饱和NH4Cl(25mL)淬灭反应混合物，且接着使反应混合物升温至室温。接着用EtOAc和水稀释反应混合物且分离各层。用EtOAc萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。通过正相色谱纯化，得到呈澄清橙色油状的2B(9.23g，79%)。1HNMR指示非对映异构体的4.7:1混合物，其中主要非对映异构体对应于标题化合物。MS(ESI)m/z:287.1(M+H)+。
2C.(S)-N-((S)-1-(4-(2-氨基-4-硝基苯基)吡啶-2-基)丁-3-烯基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(非对映异构体A)和2D.(S)-N-((R)-1-(4-(2-氨基-4-硝基苯基)吡啶-2-基)丁-3-烯基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(非对映异构体B)：向圆底烧瓶中添加2B(9.23g，32.2mmol)、2-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧硼杂环己烷-2-基)-5-硝基苯胺(16.09g，64.4mmol)、磷酸三钾(13.66g，64.4mmol)、DMSO(161mL)和水(2.90mL，161mmol)。为圆底烧瓶装备回流冷凝器且接着用氩气吹扫该装置30分钟。随后，添加Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2加合物(2.63g，3.22mmol)且使反应混合物升温至90℃。4小时后，将反应混合物冷却至室温且接着将其倾注至水(1000mL)中，得到悬浮液。通过过滤收集固体且接着将其溶解于EtOAc中。用EtOAc(1×)萃取滤液。合并有机层且用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩。通过正相色谱纯化，得到呈橙色泡沫状的2C(3.9g)。得到另外的3.84g呈非对映异构体2C与2D的混合物形式的物质。通过手性SFC制备性HPLC(
Figure BDA0000487247700001311
OD-H；20%甲醇/80%二氧化碳)分离非对映异构体，得到呈橙色泡沫状的2C(2.0g)和呈橙色泡沫状的2D(0.90g)。所分离出的2C的总量为(5.9g，47%)，呈橙色泡沫状。MS(ESI)m/z:389.2(M+H)+。
2E.(S)-N-((S)-1-(4-(2,4-二氨基苯基)吡啶-2-基)丁-3-烯基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺：向2C(2g，5.15mmol)于甲醇(51.5mL)中的澄清橙色溶液中依序添加锌(3.37g，51.5mmol)和氯化铵(2.75g，51.5mmol)。剧烈搅拌所得悬浮液。3小时后，停止反应且将其经0.45微米GMF过滤，用甲醇洗脱，得到黄色滤液。浓缩滤液，接着将残余物分配于EtOAc与水之间，且分离各层。用EtOAc萃取水层。用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤合并的有机层，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到呈黄色泡沫状的2E(1.86g，101%)。此物质未经进一步纯化即用于下一步中。MS(ESI)m/z:359.1(M+H)+。
2F.3-氨基-4-(2-((S)-1-((S)-1,1-二甲基乙亚磺酰氨基)丁-3-烯基)吡啶-4-基)苯基氨基甲酸甲酯：向2E(1.86g，5.19mmol)和吡啶(0.420mL，5.19mmol)于DCM(52mL)中的经冷却(-78℃)的澄清黄色溶液中逐滴添加氯碳酸甲酯(0.361mL，4.67mmol)。在-78℃搅拌反应混合物。2小时后，用饱和NH4Cl淬灭反应，且使反应混合物升温至室温。接着用DCM和水稀释反应混合物且分离各层。用DCM萃取水层。用饱和NaHCO3、盐水洗涤合并的有机层，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到呈黄色泡沫状的2F(2.3g，106%)。此物质未经进一步纯化即用于下一步中。MS(ESI)m/z:417.1(M+H)+。
2G.(S)-3-氨基-4-(2-(1-氨基丁-3-烯基)吡啶-4-基)苯基氨基甲酸甲酯三盐酸盐：向2F(2.3g，5.52mmol)于MeOH(55.2mL)中的澄清黄色溶液中添加4MHCl的二噁烷溶液(13.80mL，55.2mmol)。在室温搅拌反应混合物。2小时后，浓缩反应混合物，得到黄色残余物。将残余物悬浮于DCM中且接着将其浓缩。再一次重复此操作，得到呈黄色固体状的2G(2.329g，100%)。此物质未经进一步纯化即用于下一步中。MS(ESI)m/z:313.1(M+H)+。
2H.N-(3-氨基-4-{2-[(1S)-1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}丁-3-烯-1-基]吡啶-4-基}苯基)氨基甲酸甲酯：向2G(2.328g，5.52mmol)于DCM(18.40mL)中的黄色悬浮液中添加Boc2O(1.282mL，5.52mmol)，继而添加TEA(3.08mL，22.08mmol)。在室温搅拌所得橙棕色溶液。3小时后，用DCM稀释反应混合物且接着用饱和NaHCO3、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤且浓缩。通过正相色谱纯化，得到呈灰白色固体状的2H(1.91g，84%)。MS(ESI)m/z:413.0(M+H)+。
2I.N-(4-{2-[(1S)-1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}丁-3-烯-1-基]吡啶-4-基}-3-(2-甲基丁-3-烯酰氨基)苯基)氨基甲酸甲酯(非对映异构体)：向2-甲基丁-3-烯酸(0.456mL，4.41mmol)和2H(1.82g，4.41mmol)于EtOAc(126mL)和DIEA(2.312mL，13.24mmol)中的经冷却溶液(-10℃)中逐滴添加1-丙烷膦酸环酐于EtOAc中的溶液(5.20mL，8.82mmol)。5分钟后，使反应混合物升温至0℃。7小时后，停止反应且浓缩。通过正相色谱纯化，得到呈非对映异构体混合物形式且呈黄色固体状的2I(1.57g，72%)。MS(ESI)m/z:495.1(M+H)+。
2J.((E)-(10R,14S)-5-甲氧羰基氨基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂-三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,11,15,17-七烯-14-基)-氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体A)和2K.((E)-(10S,14S)-5-甲氧羰基氨基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂-三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,11,15,17-七烯-14-基)-氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体B)：向圆底烧瓶中添加2I(1.57g，3.17mmol)、pTsOH(0.664g，3.49mmol)和DCM(794mL)。接着为烧瓶装备回流冷凝器且用氩气使澄清黄色溶液脱气30分钟。接着使反应混合物升温至40℃并持续1小时。接着将格拉布II催化剂(0.269g，0.317mmol)于DCM(2mL)中的溶液逐滴添加至反应混合物中。接着在40℃搅拌反应混合物。6小时后，将反应混合物冷却至室温。用饱和碳酸钠、盐水洗涤反应混合物，经硫酸镁干燥，过滤且浓缩，得到呈暗棕色固体状的粗产物。通过正相色谱纯化，得到呈棕色固体状的2J(非对映异构体A)(0.374g，25%)和呈棕色固体状的2J(非对映异构体A)与2K(非对映异构体B)的混合物(0.44g，30%)。MS(ESI)m/z:466.9(M+H)+。
2L.N-[(10R,14S)-14-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯：向500mL氢化烧瓶中添加10%钯/碳(0.372g，0.349mmol)。用氩气吹扫烧瓶且接着将经脱气的甲醇(72mL)缓慢添加至烧瓶中。随后，添加2J(1.63g，3.49mmol)于甲醇(5mL)中的澄清淡棕色溶液。将烧瓶加压至50psi氢气且搅拌反应混合物过夜。20小时后，停止反应，用甲醇(100mL)稀释且接着经
Figure BDA0000487247700001331
过滤反应混合物，用甲醇冲洗，得到澄清淡棕色滤液。浓缩滤液，得到重量为1.37g的灰白色固体。将灰白色固体悬浮于甲醇(10mL)中且进行超声处理。通过过滤收集固体，用甲醇(8mL)冲洗，空气干燥，且在真空下干燥，得到呈白色固体状的2L(1.13g，69.0%)。MS(ESI)m/z:469.1(M+H)+。
2M.N-[(10R,14S)-14-氨基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯双三氟乙酸盐：向2L(0.45g，0.960mmol)于DCM(5mL)中的白色悬浮液中添加TFA(3mL，38.9mmol)。在室温搅拌所得澄清溶液。1小时后，浓缩反应混合物，得到固体。冻干，得到呈黄色固体状的2M(0.52g，91%)。MS(ESI)m/z:369.0(M+H)+。
2M(替代，二盐酸盐)：向容纳2L(0.880g，1.878mmol)的烧瓶中添加4.0MHCl的二噁烷溶液(21.13ml，85mmol)。对所得悬浮液进行超声处理，得到澄清黄色溶液。5至10分钟后，形成沉淀物。1小时后，停止反应且通过过滤收集沉淀物。用二噁烷冲洗固体且空气干燥，得到吸湿性黄色固体。将固体溶解于甲醇中，浓缩且冻干，得到呈黄色固体状的2M(替代，二盐酸盐)(0.7171g，87%)。MS(ESI)m/z:369.3(M+H)+。
实施例2.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯苯基)吡咯烷-3-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯双三氟乙酸盐：在50℃搅拌2M(0.02g，0.034mmol)、中间体11(0.011g，0.050mmol)、EDC(0.013g，0.067mmol)、HOBT(10.27mg，0.067mmol)和TEA(0.023mL，0.168mmol)于DMF(1mL)中的溶液。2小时后，将反应混合物冷却至室温且接着浓缩。通过反相色谱纯化，得到呈非对映异构体混合物形式且呈黄色固体状的实施例2(0.012g，44%)。1HNMR(500MHz,CD3OD)δ8.80-8.72(m,1H),8.20(s,1H),7.99-7.91(m,1H),7.68-7.48(m,3H),7.15-7.07(m,1H),6.65-6.43(m,3H),5.11(dd,J=10.6,5.9Hz,1H),3.79(s,3H),3.59-3.47(m,1H),3.43-3.26(m,4H),2.82-2.73(m,1H),2.37-2.09(m,3H),1.99-1.84(m,2H),1.69-1.47(m,2H),0.97(d,J=6.9Hz,3H),0.55-0.41(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:576.3(M+H)+。分析性HPLCRT=6.70分钟。
用于制备化合物2J的优选序列描述于下文中：
2B(替代).(S)-N-((S)-1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺：经30分钟向氯化铟(III)(13.56g，61.3mmol)于四氢呋喃(170mL)中的经冷却(0℃至5℃)混合物中逐滴添加溴化烯丙基镁(1M乙醚溶液)(62mL，61.3mmol)。使反应混合物升温至室温。在室温1小时后，添加2A(10g，40.9mmol)于乙醇(170mL)中的溶液。2至3小时后，在真空下于50℃至55℃浓缩反应混合物。将粗物质分配于乙酸乙酯(200mL)与水(50mL)之间且分离各层。用乙酸乙酯(2×50mL)萃取水层。合并有机层且用盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到呈黄色油状的2B(替代)(13.5g，106%)。MS(ESI)m/z:287.2(M+H)+。此物质未经进一步纯化即用于下一步中。
2N.(S)-1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯基氨基甲酸叔丁酯：以两个步骤，通过根据步骤2G中的操作移除手性辅助官能基且根据步骤2H中的操作进行Boc保护来将化合物2B(替代)转化成2N。MS(ESI)227.3(M-C4H8+H)+和305.4(M+Na)+。
2O.(S)-1-(4-(2-氨基-4-硝基苯基)吡啶-2-基)丁-3-烯基氨基甲酸叔丁酯：通过遵循步骤2C中所述的操作，通过用2N替换2B来制备化合物2O。MS(ESI)385.1(M+H)+。
2P.(S)-1-(4-(2,4-二氨基苯基)吡啶-2-基)丁-3-烯基氨基甲酸叔丁酯：向2O(2.9g，7.54mmol)于甲醇(75mL)中的澄清橙色溶液中依序添加锌粉(4.93g，75mmol)和氯化铵(4.04g，75mmol)。剧烈搅拌所得悬浮液4小时。停止反应且经0.45微米GMF过滤，用甲醇洗脱，得到澄清黄色滤液。浓缩滤液，得到黄黑色残余物。将残余物分配于EtOAc与0.25MHCl(50mL)之间且分离各层。用0.25MHCl(50mL)萃取有机层。用1.5MK2HPO4碱化合并的水层，且接着用EtOAc(3×)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到呈棕色泡沫状的2P(2.63g，98%)。MS(ESI)m/z:355.2(M+H)+。
2Q.{3-氨基-4-[2-((S)-1-叔丁氧羰基氨基-丁-3-烯基)-吡啶-4-基]-苯基}-氨基甲酸甲酯：经30分钟向2P(2.63g，7.42mmol)和吡啶(0.600ml，7.42mmol)于二氯甲烷(74.2ml)中的经冷却(-78℃)的澄清棕色溶液中逐滴添加氯甲酸甲酯(0.516ml，6.68mmol)。在-78℃搅拌反应混合物。1.5小时后，用饱和NH4Cl淬灭反应，且使其升温至室温。用DCM和水稀释反应混合物且分离各层。用DCM萃取水层。用饱和NaHCO3、盐水洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。将残余物溶解于DCM(约10mL)中且接着添加己烷(约300mL)，得到在底部有棕色胶状粘性物质的棕色悬浮液。对混合物进行超声处理，得到在底部有棕色物质的几乎澄清的溶液。滗析溶液且用己烷冲洗底部物质，干燥，得到呈微棕色泡沫状的2Q(2.7g，88%)。MS(ESI)m/z:413.2(M+H)+。
2I(替代).N-(4-{2-[(1S)-1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}丁-3-烯-1-基]吡啶-4-基}-3-[(2R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基]苯基)氨基甲酸甲酯：在Ar下将于EtOAc(40.0mL)中的中间体45(1.201g，12.00mmol)、2Q(3.3g，8.00mmol)、吡啶(1.937ml，24.00mmol)冷却至-10℃，逐滴添加T3P(50wt%于EtOAc中)(9.52mL，16.00mmol)且在-10℃搅拌，接着使其逐渐升温至室温过夜。用饱和NaHCO3洗涤反应混合物两次。用EtOAc萃取合并的水层。用盐水洗涤合并的EtOAc相，经MgSO4干燥，过滤，浓缩。接着使用硅胶色谱纯化粗产物，得到呈白色固体状的所需产物(4.06g，97%)。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.46(d,J=5.0Hz,1H),7.64(s,1H),7.47(dd,J=8.4,2.1Hz,1H),7.35(s,1H),7.29(d,J=8.3Hz,1H),7.25(m,1H),5.87-5.73(m,2H),5.16-5.02(m,4H),4.79-4.71(m,1H),3.75(s,3H),3.14-3.05(m,1H),2.64-2.55(m,1H),2.52-2.43(m,1H),1.42(s,9H),1.16(d,J=6.9Hz,3H)。MS(ESI)m/z:495.1(M+H)+。
2J(替代).N-[(10R,11E,14S)-14-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,11,15,17-七烯-5-基]氨基甲酸甲酯：向圆底烧瓶中添加2I(替代)(0.5g，1.011mmol)、单水合pTsOH(0.212g，1.112mmol)和二氯甲烷(84ml)。为烧瓶装备回流冷凝器且用氩气使澄清黄色溶液脱气30分钟。接着使反应混合物升温至回流并持续1小时。接着将格拉布II催化剂(0.172g，0.202mmol)于DCM(2mL)中的溶液逐滴添加至反应混合物中。在回流下4小时后，将反应混合物冷却至室温，用饱和Na2CO3、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤且浓缩，得到棕色固体。接着使用硅胶色谱纯化粗产物，得到呈黄色固体状的所需产物(0.336g，71%)。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.52(d,J=5.2Hz,1H),7.54(d,J=1.4Hz,1H),7.48-7.43(m,1H),7.38(d,J=8.3Hz,1H),7.24(dd,J=5.1,1.5Hz,1H),6.89(s,1H),5.75-5.65(m,1H),4.60(dd,J=11.3,3.6Hz,1H),4.39(dd,J=15.1,9.6Hz,1H),3.75(s,3H),3.14-3.06(m,1H),2.75-2.68(m,1H),2.04-1.94(m,1H),1.44(s,9H),1.30(br.s.,1H),1.04(d,J=6.6Hz,3H)。MS(ESI)m/z:467.2(M+H)+。
表2中的以下实施例是通过与实施例2中所示相同的操作来制备。最终步骤中所使用的酸是如下表中的中间部分中所示。除实施例2中所述的偶合试剂以外，可使用多种偶合试剂，诸如BOP、PyBop、EDC/HOBt或HATU。必要时，使偶合产物经受TFA脱保护条件以移除叔丁基保护基。
Figure BDA0000487247700001361
表2
Figure BDA0000487247700001362
Figure BDA0000487247700001371
Figure BDA0000487247700001381
*进行TFA脱保护
实施例21
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-酰氨基]-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001392
21A.(3-(丁-3-烯酰基氨基)-4-(2-((1S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)吡啶-4-基)苯基)氨基甲酸甲酯：向丁-3-烯酸(0.412mL，4.85mmol)于EtOAc(100mL)中的溶液中添加DIEA(2.54mL，14.55mmol)和2G(2g，4.85mmol)且在氩气下将反应混合物冷却至-78℃。接着向此混合物中添加T3P(5.71mL，9.70mmol)且在相同温度搅拌反应混合物15分钟且使反应温度逐渐升温至室温且在室温搅拌过夜。在室温搅拌过夜后，浓缩反应混合物，得到暗棕色油状物，将其使用硅胶色谱纯化，得到呈白色固体状的所需产物(1.88g，81%)。MS(ESI)m/z:481.2(M+H)+。
21B.((4E,7S)-2-氧代-2,3,6,7-四氢-1H-8,12-(亚甲桥)-1,9-苯并二氮杂环十四碳炔-7,15-二基)二氨基甲酸叔丁酯甲酯：向圆底烧瓶中添加21A(1.57g，3.27mmol)、pTsOH(0.684g，3.59mmol)和DCM(817mL)。接着为烧瓶装备回流冷凝器且用氩气使澄清黄色溶液脱气70分钟。接着使反应混合物升温至40℃并持续1小时。在单独圆底烧瓶中添加格拉布II催化剂(1.109g，1.307mmol)且用氩气吹扫烧瓶若干分钟。添加经脱气的DCM(2mL)，得到澄清暗红色溶液。接着经15分钟经由注射器将溶液逐滴添加至上述反应混合物中。在40℃至45℃搅拌反应混合物。搅拌3小时后，将反应混合物逐渐冷却至室温且在室温搅拌过夜。接着用饱和Na2CO3溶液洗涤反应混合物，继而用盐水洗涤。接着经MgSO4干燥有机层，过滤且浓缩，得到暗棕色油状物。使用硅胶色谱纯化粗产物，得到呈淡棕灰色固体状的所需产物(395mg，26%)。MS(ESI)m/z:453.1(M+H)+。
21C.((7S)-2-氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-8,12-(亚甲桥)-1,9-苯并二氮杂环十四碳炔-7,15-二基)二氨基甲酸叔丁酯甲酯：在氢气氛围(50psi至55psi)下搅拌21B(395mg，0.873mmol)和钯(II)/碳(93mg，0.087mmol)于MeOH(5mL)中的混合物。搅拌8小时后，经微量过滤器过滤反应混合物，得到呈红棕色固体状的所需产物(350mg，88%)。MS(ESI)m/z:455.2(M+H)+。
21D.((7S)-7-氨基-2-氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-8,12-(亚甲桥)-1,9-苯并二氮杂环十四碳炔-15-基)氨基甲酸甲酯：在室温搅拌21C(20mg，0.044mmol)与HCl(550μL，2.200mmol)(4N二噁烷溶液)的混合物。搅拌2小时后，浓缩反应混合物，得到作为所需产物的褐黄色粉末(18mg，99%)。MS(ESI)m/z:355.2(M+H)+。
实施例21.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-酰氨基]-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：在室温搅拌中间体2(5.57mg，0.023mmol)、HOBT(6.45mg，0.042mmol)、EDC(8.07mg，0.042mmol)和DIEA(0.037mL，0.211mmol)于DMF(0.2mL)中的混合物15分钟。接着向此混合物中添加21D(9mg，0.021mmol)且在室温搅拌过夜。浓缩反应混合物且通过反相HPLC纯化，分离出呈灰白色固体状的所需产物(7.2mg，48%)。1HNMR(500MHz,CD3CN)δ8.82(d,J=5.78Hz,1H),8.55(d,J=6.05Hz,1H),8.49(d,J=2.20Hz,1H),8.31(s,1H),8.07(s,1H),8.05(d,J=J=16,2H),7.98(s,1H),7.68(t,J=1.38Hz,1H),7.64(dd,J=1.65,6.05Hz,1H),7.43(m,2H),7.37(m,2H),7.22(dt,J=1.51,8.18Hz,1H),5.31(m,1H),3.63(s,3H),2.40(m,2H),2.00(m,2H),1.71(m,2H),1.55(m,1H),1.38(dd,J=3.85,11.00Hz,1H),0.43(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:577.2(M+H)+。分析性HPLC(方法E)RT=5.79分钟。
实施例22
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16,17-三氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
22A.(S)-1-(二甲氧基磷酰基)-2-氧代己-5-烯-3-基氨基甲酸叔丁酯：在-78℃向甲基膦酸二甲酯(15.85ml，148mmol)于THF(99mL)中的溶液中逐滴添加正丁基锂(93mL，148mmol)。添加完成后，在相同温度搅拌反应混合物30分钟且接着逐滴添加(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)戊-4-烯酸甲酯(6.8g，29.7mmol)于THF(15mL)中的溶液。接着在-78℃再搅拌反应混合物40分钟。接着通过添加H2O淬灭反应且用EtOAc稀释。用1MHCl、饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤有机层。经MgSO4干燥有机相，过滤且浓缩，得到澄清油状物。接着通过硅胶色谱纯化粗产物，得到呈无色油状的所需产物(9.3g，98%)。MS(ESI)m/z:599.0(M+Na)+。
22B.4-碘-3-硝基苯基氨基甲酸甲酯：向4-碘-3-硝基苯胺(1.320g，5mmol)于DCM(50.0mL)和吡啶(0.445mL，5.50mmol)中的经冷却(0℃)的黄色悬浮液中逐滴添加氯甲酸甲酯(0.407mL，5.25mmol)且搅拌3小时。接着用DCM稀释反应混合物，用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤且浓缩。接着将粗产物溶解于极少量DCM(约20mL)中且接着添加己烷(200mL)，得到黄色悬浮液。接着过滤黄色悬浮液且用己烷冲洗所过滤的固体，且空气干燥，得到作为所需产物的黄色固体(1.51g，94%)。MS(ESI)m/z:322.9(M+H)+。
22C.4-乙酰基-3-硝基苯基氨基甲酸甲酯：在密封管中于110℃加热22B(0.5g，1.553mmol)、三丁基(1-乙氧基乙烯基)甲锡烷(1.049mL，3.11mmol)和氯化二(三苯基膦)钯(II)(0.109g，0.155mmol)于甲苯(3mL)中的溶液。3小时后，将反应混合物冷却至室温且浓缩，得到残余物。将残余物溶解于THF(3mL)中，继而添加1NHCl溶液(5mmol)。接着在室温搅拌上述混合物1小时且接着用EtOAc稀释。接着用盐水洗涤EtOAc混合物，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到粗产物，将其通过硅胶色谱纯化，得到呈黄色固体状的所需产物(0.254g，69%)。MS(ESI)m/z:239.3(M+H)+。
22D.2-(4-((甲氧羰基)氨基)-2-硝基苯基)-2-氧代乙酸：向22C(11.5g，48.3mmol)于吡啶(48.3mL)中的溶液中逐份添加二氧化硒(8.04g，72.4mmol)。接着在氩气下于60℃搅拌反应混合物过夜且浓缩。抽吸残余物几小时以确保移除大部分吡啶。接着向固体中添加1.0NHCl(80mL)且过滤，得到微灰色固体，将其在真空烘箱中于45℃干燥过夜。接着将微灰色固体与MeOH(200mL)混合，得到悬浮液，接着将其过滤且浓缩滤液，得到微棕色泡沫状物(11.8g，79%)，其中仍存在一些残余吡啶。MS(ESI)m/z:269.0(M+H)+。
22E.2-(4-((甲氧羰基)氨基)-2-硝基苯基)-2-氧代乙酸甲酯：在0℃向22D(11.8g，38.3mmol)于DCM(150mL)中的红色油状物中添加TEA(7.47mL，53.6mmol)且对混合物进行超声处理，形成红色溶液。接着在0℃向此混合物中添加氯甲酸甲酯(4.15mL，53.6mmol)。20分钟后，用DCM(300mL)稀释反应混合物，用1MHCl、饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤。经MgSO4干燥有机相，过滤且浓缩，得到红色固体。接着通过硅胶色谱纯化粗产物，得到呈淡灰色粉末状的所需产物(8.6g，80%)。MS(ESI)m/z:283.0(M+H)+。
22F.(4-(6-((1S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-3-硝基苯基)氨基甲酸甲酯：在室温向22A(1.16g，3.61mmol)于EtOH(38.4mL)中的澄清溶液中添加K2CO3(0.748g，5.42mmol)。搅拌反应混合物2小时且接着浓缩，得到残余物，将其在真空下干燥1小时。接着向残余物中添加THF(30mL)，继而经由加料漏斗逐滴添加22E(1.121g，3.97mmol)于8mLTHF中的悬浮液。3小时后，添加肼(0.567mL，18.05mmol)且在室温搅拌反应混合物4天。接着用EtOAc稀释反应混合物，用1NHCl和盐水洗涤。接着经MgSO4干燥有机层，过滤且浓缩，得到粗产物，将其通过硅胶色谱纯化，得到呈淡橙色固体状的所需产物(0.48g，29%)。MS(ESI)m/z:460.0(M+H)+。
22G.(S)-(4-(6-(1-氨基丁-3-烯-1-基)-3-氯哒嗪-4-基)-3-硝基苯基)氨基甲酸甲酯：向22F(2.2g，4.79mmol)于MeOH(23.94mL)中的溶液中添加HCl(4M二噁烷溶液)(5.186mL，20.74mmol)且在室温搅拌6小时。接着浓缩反应混合物，得到微棕色固体。向微棕色固体中添加ACN(23.94mL)和磷酰三氯(13.39mL，144mmol)，且在80℃加热反应混合物过夜。搅拌过夜后，浓缩反应混合物且在真空下干燥过夜。接着将粗混合物冷却至0℃，继而添加1NHCl(20mL)以淬灭反应。用1NNaOH中和混合物且用EtOAc(2×)萃取。接着合并有机层，用盐水洗涤，干燥且浓缩，得到作为所需产物的微棕色固体(1.03g，57%)。MS(ESI)m/z:377.9(M+H)+。
22H.(4-(6-(1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)-3-氯哒嗪-4-基)-3-硝基苯基)氨基甲酸甲酯：在0℃向22G(1.03g，2.73mmol)于DCM(27.3mL)中的溶液中添加TEA(1.140mL，8.18mmol)和Boc2O(0.760mL，3.27mmol)。接着在0℃搅拌反应混合物10分钟且接着使其缓慢升温至室温且搅拌过夜。浓缩粗产物且通过硅胶色谱纯化，分离出呈橙色泡沫状的所需产物(414mg，36%)。MS(ESI)m/z:477.9(M+H)+。
22I.(3-氨基-4-(6-((1S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)-3-氯哒嗪-4-基)苯基)氨基甲酸甲酯：向22H(472mg，0.988mmol)和铁粉(276mg，4.94mmol)于乙酸(7.407mL)中的混合物中添加H2O(2.469mL)且在70℃加热1小时。接着使用冰-H2O浴冷却反应混合物，继而用10NNaOH(水溶液)中和，且在最终阶段，使用浓NaHCO3溶液将pH值调节至7-8。接着用EtOAc(3×)萃取反应混合物且用盐水进一步洗涤合并的EtOAc层，经MgSO4干燥，过滤，浓缩且通过硅胶色谱纯化。接着使用
Figure BDA0000487247700001431
AD柱且使用40%异丙醇/60%庚烷混合物作为移动相对纯化的产物进行手性HPLC分离。观测到两个峰洗脱且将峰1指定为非对映异构体A(22Ia)且将峰2指定为非对映异构体B(22IB)(144mg，32%)。MS(ESI)m/z:447.8(M+H)+。
实施例22.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16,17-三氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例1相同的方式，通过用22I替换1F，继而在最后偶合步骤中用中间体2替代中间体14来制备实施例22。在最后步骤中所用的偶合试剂为EDC/HOBt且分离出呈纯手性化合物形式的所需产物。1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.56(br.s.,1H),9.22(br.s.,1H),7.82(d,J=1.8Hz,1H),7.62(d,J=8.6Hz,4H),7.11-7.01(m,1H),5.81(dd,J=11.9,2.8Hz,1H),5.40(dd,J=12.3,5.4Hz,1H),4.45-4.36(m,1H),3.85-3.74(m,4H),2.90-2.48(m,2H),2.39-2.21(m,2H),2.12-1.99(m,1H),1.94-1.78(m,1H),1.56-1.20(m,2H),0.97(d,J=6.8Hz,3H),0.67(br.s.,1H)ppm。MS(ESI)m/z:592.1(M+H)+。分析性HPLC(方法A)RT=8.25分钟。
实施例23
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16,17-三氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐(非对映异构体A)
Figure BDA0000487247700001441
实施例23.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16,17-三氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例22相同的方式，通过用22IA替换22IB来制备实施例23。1H NMR(500MHz,MeOD)δ9.67(s,1H),9.43(br.s.,1H),8.75-8.70(m,1H),8.27-8.18(m,2H),7.82(ddd,J=8.3,6.8,1.7Hz,1H),7.67(d,J=8.5Hz,1H),7.63-7.49(m,4H),7.37(td,J=8.2,1.5Hz,1H),5.43-5.29(m,1H),3.84-3.77(m,1H),2.82-2.69(m,1H),2.26-2.00(m,2H),1.96-1.83(m,1H),1.66-1.42(m,2H),0.98(d,J=6.9Hz,3H),0.50(d,J=11.8Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:592.0(M+H)+。分析性HPLC(方法A)RT=8.27分钟。
实施例24
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-乙基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001442
24A.(4-(2-((1S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)吡啶-4-基)-3-((2-乙基丁-3-烯酰基)氨基)苯基)氨基甲酸甲酯：遵循2I中所述的操作，通过用2-乙基丁-3-烯酸替换2-甲基丁-3-烯酸来制备化合物24A。通过正相色谱纯化，得到呈黄色泡沫状的24A(0.412g，74%)。MS(ESI)m/z:509.3(M+H)+。
24B.((4E,7S)-3-乙基-2-氧代-2,3,6,7-四氢-1H-8,12-(亚甲桥)-1,9-苯并二氮杂环十四碳炔-7,15-二基)二氨基甲酸叔丁酯甲酯(非对映异构体A)和24C.((4E,7S)-3-乙基-2-氧代-2,3,6,7-四氢-1H-8,12-(亚甲桥)-1,9-苯并二氮杂环十四碳炔-7,15-二基)二氨基甲酸叔丁酯甲酯(非对映异构体B)：遵循1H中所述的操作，通过用24A替换1G来制备化合物24B和24C。通过正相色谱纯化，得到24C(峰1，指定为非对映异构体B)[0.05g，16%，MS(ESI)m/z:481.2(M+H)+]和24B(峰2，指定为非对映异构体A)[0.03g，10%，MS(ESI)m/z:481.2(M+H)+]。
24D.((3R,7S)-3-乙基-2-氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-8,12-(亚甲桥)-1,9-苯并二氮杂环十四碳炔-7,15-二基)二氨基甲酸叔丁酯甲酯(非对映异构体B)：向24C(0.05g，0.104mmol)于MeOH(5mL)中的经脱气溶液中添加10%钯/碳(0.011g，10.40μmol)。接着在H2气球下搅拌反应混合物72小时。接着经
Figure BDA0000487247700001451
垫过滤反应混合物，用MeOH和DCM冲洗。浓缩滤液，得到呈棕色固体状的24D(0.045g，90%)。此物质未经进一步纯化即用于下一步中。MS(ESI)m/z:483.3(M+H)+。
实施例24.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-乙基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：遵循步骤2M中所述的操作，通过用24D替换2L；继而遵循步骤2N中所述的操作，通过用中间体1替换中间体11来制备实施例24(0.006g，49%，黄色固体)。1HNMR(500MHz,CD3OD)δ8.91(d,J=2.2Hz,1H),8.76(d,J=6.1Hz,1H),8.26(d,J=1.4Hz,1H),7.93(dd,J=6.1,1.7Hz,1H),7.86(ddd,J=8.2,6.7,1.4Hz,1H),7.75(ddd,J=8.2,6.8,1.5Hz,1H),7.66(d,J=8.5Hz,1H),7.61(d,J=2.2Hz,1H),7.53(dd,J=8.5,2.2Hz,1H),7.45(td,J=8.3,1.4Hz,1H),5.40(dd,J=11.4,5.9Hz,1H),3.80(s,3H),2.56-2.50(m,1H),2.33-2.24(m,1H),2.09-2.01(m,1H),1.96-1.88(m,1H),1.73-1.46(m,3H),1.36-1.25(m,1H),0.89(t,J=7.4Hz,3H),0.70-0.59(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:606.3(M+H)+。分析性HPLC(方法A)RT=6.32分钟。
实施例25
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-乙基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001461
实施例25.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-乙基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：遵循实施例24中所述的操作，通过在步骤24D中用24B(非对映异构体A)替换24C(非对映异构体B)来制备实施例25(0.013g，60%，黄色固体)。1HNMR(500MHz,CD3OD)δ8.87(d,J=2.2Hz,1H),8.69(d,J=5.2Hz,1H),7.87(ddd,J=8.1,6.6,1.5Hz,1H),7.77-7.70(m,2H),7.62-7.51(m,4H),7.45(td,J=8.2,1.5Hz,1H),5.29(dd,J=11.0,5.0Hz,1H),3.79(s,3H),2.22-2.04(m,2H),1.92-1.76(m,3H),1.61-1.38(m,3H),1.03(t,J=7.3Hz,3H),0.91-0.78(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:606.2(M+H)+。分析性HPLC(方法A)RT=7.09分钟。
实施例26
(9R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-酰氨基]-5-[(甲氧羰基)氨基]-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-9-甲酸乙酯双三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001462
26A.2-((2-(2-((S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)吡啶-4-基)-5-((甲氧羰基)氨基)苯基)氨基)戊-4-烯酸乙酯：在室温在氩气下搅拌2G(954mg，2.313mmol)和顺丁烯二酸(537mg，4.63mmol)于ACN(20mL)中的混合物。接着向此混合物中添加2-氧代乙酸乙酯(0.458mL，2.313mmol)(50%于甲苯中)且继续搅拌5分钟。随后，将烯丙基三丁基甲锡烷(0.860mL，2.78mmol)添加至上述混合物中且继续搅拌过夜。搅拌过夜后，在真空中浓缩反应混合物且用EtOAc稀释。接着用1NNaOH(2×)溶液洗涤有机层且经MgSO4干燥。接着在真空中浓缩有机层，得到粗产物，使用硅胶色谱将其纯化，得到呈浅黄色油状的所需产物(344mg，28%)。MS(ESI)m/z:539.0(M+H)+。
26B.(4E,7S)-7-((叔丁氧羰基)氨基)-15-((甲氧羰基)氨基)-2,3,6,7-四氢-1H-8,12-(亚甲桥)-1,9-苯并二氮杂环十四碳炔-2-甲酸乙酯：如之前所述对26A进行格拉布化学处理，得到呈棕色油状的所需产物(0.315g，47%)。MS(ESI)m/z:510.9(M+H)+。
26C.(2R,7S)-7-((叔丁氧羰基)氨基)-15-((甲氧羰基)氨基)-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-8,12-(亚甲桥)-1,9-苯并二氮杂环十四碳炔-2-甲酸乙酯：在氢气球下剧烈搅拌26B(315mg，0.617mmol)、钯(II)/碳(131mg，0.123mmol)(10%/碳)、三氟乙酸(0.047mL，0.617mmol)和EtOH(7mL)的混合物4小时。接着经
Figure BDA0000487247700001471
垫过滤反应混合物且在真空中移除溶剂，得到棕色油状物。用EtOAc稀释油状物且用饱和Na2CO3(2×)溶液洗涤。经MgSO4干燥合并的有机物且接着浓缩，得到粗产物。接着使用硅胶色谱纯化粗产物，得到呈浅黄色油状的26Ca(132mg，42%，非对映异构体A)且将26Cb指定为非对映异构体B。MS(ESI)m/z:513.1(M+H)+。
26D.(2R,7S)-7-氨基-15-((甲氧羰基)氨基)-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-8,12-(亚甲桥)-1,9-苯并二氮杂环十四碳炔-2-甲酸乙酯：在室温搅拌26Ca(132mg，0.258mmol)、HCl(1288μL，5.15mmol)(4M二噁烷溶液)和EtOAc(2mL)的混合物。搅拌4.5小时后，在真空中移除溶剂，得到作为所需产物的淡褐黄色固体(125mg，100%)。
实施例26.(9R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-酰氨基]-5-[(甲氧羰基)氨基]-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-9-甲酸乙酯双三氟乙酸盐(非对映异构体A)：在室温搅拌1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酸(3.82mg，0.016mmol)、HOBT(4.42mg，0.029mmol)、EDC(5.53mg，0.029mmol)和DIEA(0.025mL，0.144mmol)于DMF(0.2mL)中的混合物5分钟。接着向上述混合物中添加26D(7mg，0.014mmol)且继续搅拌过夜。用MeOH稀释反应混合物且通过反相HPLC纯化，分离出呈淡黄色固体状的所需产物(4.2mg，33%)。1HNMR(400MHz,CD3CN)?δ8.86(br.s.,1H),8.67(s,1H),8.56(d,J=6.0Hz,1H),8.51(d,J=2.7Hz,1H),8.07(s,1H),7.88(s,1H),7.69(td,1H,J=8,2),7.62(dd,J=6.0,1.6Hz,1H),7.44(ddd,J=8.1,6.7,1.6Hz,1H),7.35(d,1H,J=8),7.30(d,J=1.6Hz,1H),7.22(td,J=8.2,1.6Hz,1H),7.12(dd,J=8.2,2.2Hz,1H),5.35(m,1H),3.85(m,2H),3.62(s,3H),2.93(d,J=11.0Hz,1H),2.08(m,4H),1.63(m,2H),1.29(m,4H),0.97(t,J=7.1Hz,3H),0.20(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:635.1(M+H)+。分析性HPLC(方法E)RT=7.39分钟。
实施例27
N-[(14S)-14-[2-(3-氯苯基)-4-氧代-2H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-基]-16-氟-10-甲基-9-氧代-8,17-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001481
27A.甲烷磺酸2-(1-(3-氯苯基)-4-(((7S)-9-氟-15-((甲氧羰基)氨基)-3-甲基-2-氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-8,12-(亚甲桥)-1,10-苯并二氮杂环十四碳炔-7-基)氨基甲酰基)-1H-吡唑-3-基)乙酯：向实施例1(0.01g，0.016mmol)于吡啶(0.274mL，3.39mmol)和DCM(0.5mL)中的溶液中添加甲烷磺酰氯(1.23μL，0.016mmol)且在室温搅拌反应混合物过夜。接着浓缩反应混合物且未经进一步处理或纯化即用于下一步。MS(ESI)m/z:713.5(M+H)+。
27B.((7S)-7-(((3-(2-氯乙基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)羰基)氨基)-9-氟-3-甲基-2-氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-8,12-(亚甲桥)-1,10-苯并二氮杂环十四碳炔-15-基)氨基甲酸甲酯：将来自步骤27A的粗产物(0.014g，0.020mmol)溶解于DCM(1mL)中且转移至密封管中，在该密封管中蒸发DCM。接着向上述固体中添加DIEA(0.2mL)和甲苯(1mL)。密封反应烧瓶且加热至110℃并持续18小时。等分试样的LCMS展示未观测到闭环产物，而仅观测到氯乙基产物。MS(ESI)m/z:653.4(M+H)+。
实施例27.N-[(14S)-14-[2-(3-氯苯基)-4-氧代-2H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-基]-16-氟-10-甲基-9-氧代-8,17-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：将NaH(0.147mg，6.12μmol)添加至27B(4mg，6.12μmol)的THF溶液中且向其中添加过量NaI且在室温搅拌过夜。用H2O(0.1mL)淬灭反应混合物，浓缩且直接经反相HPLC纯化。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.61(s,1H),8.38(dd,J=9.3,2.1Hz,1H),8.23(d,J=1.4Hz,1H),7.90(s,1H),7.99(m,1H),7.73(dd,1H),7.72(m,1H),7.55(m,3H),7.35(dd,1H),5.75-5.71(m,1H),3.77(m,1H),3.76(s,3H),3.70(m,1H),2.65(m,1H),2.29(m,1H),2.28(m,1H),1.99(m,1H),1.85(m,1H),1.65(m,1H),1.40(m,1H),(d,J=6.9Hz,3H),1.05(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:617.2(M+H)+。分析性HPLC(方法B)RT=11.7分钟。
实施例28
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-酰氨基]-16-氟-10-甲基-9-氧代-8,17-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001491
实施例28.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-酰氨基]-16-氟-10-甲基-9-氧代-8,17-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例1相同的方式，使用1Ib且用中间体2替换中间体9来制备实施例28。1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.47(s,1H),8.75(d,J=7.2Hz,1H),8.67(d,J=2.2Hz,1H),8.21(s,1H),8.05-8.18(m,2H),7.81(ddd,J=8.3,6.8,1.7Hz,1H),7.58(ddd,J=8.2,6.7,1.4Hz,1H),7.45-7.54(m,3H),7.35(td,J=8.3,1.7Hz,1H),5.18-5.31(m,1H),3.78(s,3H),2.55-2.68(m,1H),2.09-2.23(m,1H),1.94-2.09(m,1H),1.71-1.87(m,1H),1.51-1.63(m,1H),1.29-1.43(m,1H),1.06(d,J=6.9Hz,4H)ppm。MS(ESI)m/z:609.0(M+H)+。分析性HPLCRT=9.71分钟(方法A)。
实施例29
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9,17-二氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,15(19)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯
Figure BDA0000487247700001501
29A.4-(1,3-二氧杂环戊-2-基)-3-硝基苯甲酸甲酯：向4-甲酰基-3-硝基苯甲酸甲酯(9.0g，43.0mmol)于甲苯(150mL)中的溶液中添加乙二醇(7.20mL，129mmol)，继而添加p-TsOH(0.409g，2.152mmol)且在回流温度加热反应混合物，同时使用迪恩-斯达克分离器共沸移除H2O，持续4小时。接着冷却反应混合物且用DCM稀释。接着用饱和NaHCO3溶液洗涤DCM层。干燥(MgSO4)有机层，过滤且浓缩，得到残余物。将残余物溶解于极少量DCM中且通过硅胶色谱纯化，得到呈白色固体状的所需产物(8.53g，78%)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.39(s,1H),8.27(d,J=8.2Hz,1H),7.90(d,J=8.2Hz,1H),6.38(s,1H),4.00(dt,J=3.8,1.9Hz,2H),3.94(dt,J=3.8,1.9Hz,2H),3.91(s,3H)ppm。
29B.4-(1,3-二氧杂环戊-2-基)-3-硝基苯甲酸：将单水合氢氧化锂(5.67g，135mmol)添加至29A(11.4g，45.0mmol)于THF(120mL)、MeOH(120mL)和H2O(40.0mL)中的溶液中。接着将上述混合物加热至50℃。1小时后，将加热降低至室温且继续搅拌过夜。接着向反应混合物中添加H2O(50mL)且浓缩有机物。用1.0N盐酸溶液使残余水层呈酸性以使固体沉淀出。通过过滤收集固体，用H2O洗涤且在真空下干燥过夜。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.68(br.s.,1H),8.36(d,J=1.5Hz,1H),8.25(dd,J=8.1,1.3Hz,1H),7.88(d,J=8.1Hz,1H),6.38(s,1H),4.05-3.89(m,4H)ppm。
29C.(4-(1,3-二氧杂环戊-2-基)-3-硝基苯基)氨基甲酸甲酯：在冰-盐浴中于-5℃向29B(6.77g，28.3mmol)于THF(100mL)中的溶液中逐滴添加于THF(25mL)中的TEA(7.89mL，56.6mmol)。将温度维持在-5℃，且经10分钟逐滴添加氯甲酸乙酯(3.25mL，34.0mmol)于THF(30mL)中的溶液。再搅拌30分钟后，逐滴添加叠氮化钠(3.68g，56.6mmol)于H2O(12.5mL)中的冷溶液。再搅拌1小时后，在真空中(在不加热下)浓缩反应混合物。将油状残余物溶解于Et2O(100mL)中，用H2O、盐水洗涤，且经硫酸钠干燥，过滤且浓缩(在不加热下)，得到酰基叠氮化物。将此物质溶解于甲苯(100mL)中且加热至110℃。1小时后，将温度降低至80℃，添加MeOH(60mL)，且继续加热过夜。浓缩反应混合物且通过硅胶色谱纯化，得到呈琥珀色固体状的所需产物(5.01g，66%)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.21(s,1H),8.10(d,J=1.6Hz,1H),7.74-7.62(m,2H),6.22(s,1H),3.95-3.90(m,4H),3.69(s,3H)ppm。
29D.(4-甲酰基-3-硝基苯基)氨基甲酸甲酯：将29C(5.00g，18.64mmol)添加至TFA(27mL)和H2O(3mL)的溶液中且在室温搅拌。3小时后，浓缩反应混合物且将残余物分配于H2O与EtOAc之间。接着用饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤有机层，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到作为所需产物的淡黄色固体(3.83g，92%)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.59(s,1H),10.09(s,1H),8.23(d,J=1.6Hz,1H),7.92(d,J=8.2Hz,1H),7.86-7.81(m,1H),3.74(s,3H)ppm。
29E.(S)-1-(二甲氧基磷酰基)-2-氧代己-5-烯-3-基氨基甲酸叔丁酯：在-78℃向甲基膦酸二甲酯(13.98mL，131mmol)于THF(87mL)中的溶液中缓慢添加n-BuLi(82mL，131mmol)。添加完成后，搅拌反应混合物40分钟且接着缓慢添加(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)戊-4-烯酸甲酯(6.0g，26.2mmol)于THF(30mL)中的溶液。在-78℃再继续搅拌40分钟。接着通过添加H2O(2.357mL，131mmol)淬灭反应混合物。用EtOAc(100mL)稀释反应混合物且分离各层。用1MHCl、饱和NaHCO3溶液、盐水洗涤有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩，得到澄清油状物。最终使用硅胶色谱纯化粗产物，得到呈无色油状的所需产物(7.46g，89%)。MS(ESI)m/z:343.9(M+Na)+。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ5.63-5.76(1H,m),5.08-5.17(2H,m),4.33-4.43(1H,m),3.80(3H,d,J=2.20Hz),3.77(3H,d,J=2.20Hz),3.28-3.37(1H,m),3.05-3.16(1H,m),2.58-2.69(1H,m),2.42(1H,dt,J=14.58,7.29Hz),1.43(9H,s)ppm。
29F.(4-((1E,4S)-4-((叔丁氧羰基)氨基)-3-氧代庚-1,6-二烯-1-基)-3-硝基苯基)氨基甲酸甲酯：在氮气下于0℃向29E(4.47g，13.92mmol)和29D(2.6g，11.60mmol)于THF(无水)(115mL)和EtOH(绝对)(1.148mL)中的经剧烈搅拌的溶液中逐份添加K2CO3(无水)(2.56g，18.56mmol)。使反应混合物升温至室温且接着在55℃加热混合物。接着藉助于EtOAc过滤反应混合物且蒸发滤液，得到残余物，将其溶解于少量二氯甲烷中且通过正相色谱纯化，得到呈黄色固体状的所需产物(4.38g，90%)。MS(ESI)m/z:420.2(M+H)+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.36(s,1H),8.22(d,J=2.2Hz,1H),7.89(d,J=8.8Hz,1H),7.83-7.73(m,2H),7.21(d,J=7.7Hz,1H),7.02(d,J=15.9Hz,1H),5.77(ddt,J=17.0,10.2,6.7Hz,1H),5.16-5.01(m,2H),4.32(td,J=8.5,4.9Hz,1H),3.71(s,3H),2.34-2.23(m,1H),1.36(s,9H)ppm。
29G.(4-(6-(1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基)-3-硝基苯基)氨基甲酸甲酯：向29F(3.0g，7.15mmol)和溴化1-(2-乙氧基-2-氧代乙基)吡啶鎓(1.189g，7.15mmol)于EtOH(130mL)中的溶液中逐份添加乙酸铵(11.03g，143mmol)。15分钟后，在75℃搅拌混合物。接着浓缩反应混合物且将其溶解于EtOAc中。接着用1.0NHCl、H2O、饱和碳酸氢钠溶液洗涤有机层且最终通过盐水洗涤。经硫酸钠干燥有机相，过滤且浓缩，得到残余物，将其通过正相色谱纯化，分离出呈棕色固体状的所需产物(2.2g，67%)。MS(ESI)m/z:459.3(M+H)+。
29H.(3-氨基-4-(6-((1S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基)苯基)氨基甲酸甲酯：向29G(2.9g，6.33mmol)于MeOH(120mL)中的溶液中添加氯化铵(0.677g，12.65mmol)和锌(4.14g，63.3mmol)。在室温搅拌悬浮液1小时且接着在65℃搅拌过夜。经由
Figure BDA0000487247700001521
塞趁热过滤悬浮液且用热MeOH洗涤滤饼。浓缩滤液且在真空下干燥，得到黄棕色固体。将此残余物再溶解于EtOAc(含10%MeOH)中，用饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤。接着经硫酸钠干燥有机层，过滤且浓缩。接着使用手性AD-H21×250mm，使用35%(50/50EtOH、i-PrOH和0.1%DEA)与65%CO2的混合物，以70毫升/分钟的流速和150巴在40℃对粗产物进行手性分离。单独浓缩分离的各对映异构体且将所得固体在真空下置放过夜。分析资料符合所需产物(1.12g，41%，29Ha)。MS(ESI)m/z:429.2(M+H)+。1H NMR:(400MHz,MeOD)δ7.03(d,J=8.6Hz,2H),6.79(dd,J=8.3,2.0Hz,1H),6.48(d,J=5.6Hz,2H),5.91-5.74(m,1H),5.22-5.09(m,2H),4.58-4.48(m,1H),3.75(s,3H),2.55(t,J=5.9Hz,1H),2.53-2.43(m,1H),1.45(br.s.,9H)ppm。也单独分离另一异构体(29Hb)。
29I.(4-(6-((1S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基)-3-((2-甲基丁-3-烯酰基)氨基)苯基)氨基甲酸甲酯：在0℃于氮气氛围下将氯甲酸异丁酯(0.956g，7.00mmol)添加至于THF(33.3mL)中的2-甲基丁-3-烯酸(0.701g，7.00mmol)和4-甲基吗啉(0.770mL，7.00mmol)中且搅拌3小时。滤出所得固体且滤液直接用于下一步。经1小时向容纳混合酸酐的圆底烧瓶中逐份(1mL)(每10分钟添加一次)添加于DMF(6mL)中的29H(0.200g，0.467mmol)和4-甲基吗啉(0.770ml，7.00mmol)。接着在室温搅拌反应混合物。3天后，将反应混合物分配于EtOAc与1.0NNaOH(20mL)之间。用1.0NNaOH、H2O、1.0NHCl溶液、H2O和盐水洗涤有机层。干燥有机层，过滤且浓缩。再将粗产物溶解于THF(20mL)中且用NaOH(10mL，10.00mmol)处理。搅拌1小时后，浓缩反应混合物且使用反相HPLC纯化，得到所需产物(0.09g，38%)。MS(ESI)m/z:511.4(M+H)+。
29J.((7S)-3-甲基-2,10-二氧代-2,3,4,5,6,7,9,10-八氢-1H-12,8-(亚甲桥)-1,9-苯并二氮杂环十四碳炔-7,15-二基)二氨基甲酸叔丁酯甲酯：在微波小瓶中使29I(90mg，0.176mmol)于DCE(无水)(9793μL)中的溶液脱气15分钟。接着向此溶液中添加二氯化三环己基膦[1,3-二(2,4,6-三甲苯基)-4,5-二氢咪唑-2-亚基][苯亚甲基]钌(IV)(60.0mg，0.071mmol)且在微波条件下将混合物加热至120℃并持续30分钟。接着浓缩反应混合物且通过反相HPLC纯化。浓缩非对映异构体29J1的洗脱份(次要；峰1；极性较大，RT(通过制备性ACN测定)=3.776分钟)和非对映异构体29J2的洗脱份(主要；峰2；极性较小，RT(通过制备性ACN测定)=3.978分钟)。在格拉布大环化后回收29J1(8.2mg，19%)和29J2(14.8mg，35%)。通过以下步骤对各非对映异构体进行PtO2还原：在两个单独氢化容器中用EtOH(10mL)溶解，用等量的氧化铂(IV)(12.01mg，0.053mmol)对每个进行处理，且暴露于氢气(55psi)过夜。过滤反应混合物，浓缩且未经进一步纯化即继续用于下一反应。回收呈棕色膜状的最终饱和的类似物29J3(8.4mg，20%)和29J4(13.8mg，32%)。两种非对映异构体的MS(ESI)m/z:485.3(M+H)+。
实施例29.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9,17-二氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,15(19)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯：以与实施例1相同的方式，通过对29J4进行脱除保护基Boc，继而使用游离胺和中间体1进行T3P偶合来制备实施例21。通过反相HPLC纯化粗反应混合物。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.88(d,J=2.2Hz,1H),7.86(ddd,J=8.1,6.6,1.5Hz,1H),7.76-7.71(m,1H),7.52-7.40(m,4H),6.67(d,J=1.1Hz,1H),6.52(d,J=1.1Hz,1H),5.17(dd,J=10.7,6.6Hz,1H),3.78(s,3H),2.79(d,J=5.5Hz,1H),2.05-1.94(m,2H),1.79-1.58(m,3H),1.37-1.25(m,1H),1.11-1.05(m,3H),1.04(d,J=7.2Hz,3H),0.96-0.88(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:608.4(M+H)+。分析性HPLC(方法A)RT=6.27分钟。
实施例30
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9,17-二氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,15(19)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯
Figure BDA0000487247700001541
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9,17-二氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,15(19)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯：以与实施例29相同的方式，通过用29J3替换29J4来制备实施例30。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.90(d,J=2.2Hz,1H),7.88(ddd,J=8.3,6.6,1.7Hz,2H),7.76(ddd,J=8.2,6.8,1.5Hz,1H),7.54-7.44(m,5H),6.57(s,1H),6.47(s,1H),5.11(dd,J=10.6,6.2Hz,1H),3.80(s,3H),2.41-2.30(m,1H),2.10-1.93(m,3H),1.87-1.78(m,1H),1.58-1.49(m,1H),1.39-1.32(m,1H),1.31-1.28(m,3H),1.21-1.04(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:608.4(M+H)+。分析性HPLC(方法A)RT=6.23分钟。
实施例31
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,18-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001551
实施例31.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,18-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例2相同的方式，通过用2-溴吡啶-4-甲醛替换4-溴吡啶-2-甲醛且用中间体2替代中间体11来制备实施例31。并且，在步骤2H中在偶合步骤中使用酸氯化物替代酸。对于实施例31不幸的是，未如同实施例1一般在步骤1I中实现手性拆分且因此最终化合物为非对映异构体混合物。1HNMR(500MHz,CD3CN)δ8.60(m,1H),8.42(m,1H),8.22(s,1H),8.02(m,1H),7.91(m,1H),7.70(ddd,J=8.4,7.0,1.7Hz,1H),7.62(m,1H),7.37(m,2H),7.23(td,J=8.2,1.5Hz,1H),4.98(m,1H),3.64,3.66(2s,3H),2.55(m,2H),1.98(m,1H),1.71(m,4H),1.33(m,5H),1.08(d,J=6.9Hz,0.3H),0.81(d,J=6.9Hz,2.7H),0.49(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:591.1(M+H)+。分析性HPLC(方法E)RT=6.00分钟。
实施例32
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-酰氨基]-16-氟-9-氧代-8,17-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001552
实施例32.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-酰氨基]-16-氟-9-氧代-8,17-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例21相同的方式，通过使用1F替代以21A为起始物来制备实施例32。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.68(d,J=1.9Hz,1H),8.22(s,1H),8.14(d,J=1.7Hz,1H),8.07(dd,J=9.4,2.2Hz,1H),7.81(ddd,J=8.3,6.8,1.7Hz,1H),7.58(ddd,J=8.2,6.7,1.7Hz,1H),7.45-7.55(m,3H),7.36(td,J=8.2,1.5Hz,1H),5.23(dd,J=11.0,5.5Hz,1H),3.78(s,3H),2.39-2.55(m,1H),2.08-2.23(m,1H),1.94-2.08(m,2H),1.60-1.84(m,2H),1.35-1.50(m,1H),0.99-1.21(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:594.9(M+H)+。分析性HPLCRT=9.18分钟(方法A)。
实施例33
N-[(12E,15S)-15-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-9,18-二氧代-8,17-二氮杂三环[14.3.1.02,7]二十碳-1(19),2,4,6,12,16(20)-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001561
33A.(4-(6-((1S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基)-3-(戊-4-烯酰基氨基)苯基)氨基甲酸甲酯：向29H(115.4mg，0.269mmol)于DCM(40mL)中的溶液中添加吡啶(0.109mL，1.347mmol)。将烧瓶置放于氮气下且将混合物冷却至0℃。接着向此混合物中添加戊-4-烯酰氯(0.104mL，0.943mmol)且在相同温度搅拌混合物10分钟且使反应混合物缓慢升温至室温且在室温搅拌。搅拌过夜后，在减压下浓缩反应混合物且将所得黄色残余物溶解于THF与1NNaOH(5:2，7mL)中且在30℃搅拌1.5小时，以使o-酰化的中间体水解成所需产物。用EtOAc稀释反应混合物且添加1NHCl以将pH值调节至5-6且分离两相。用EtOAc(2×)进一步萃取水层且用盐水洗涤合并的有机物，干燥(Na2SO4)，过滤且蒸发，得到残余物。接着使用硅胶色谱纯化粗产物，得到呈褐色固体状的所需产物(97mg，70%)。MS(ESI)m/z:511.1(M+H)+。
33B.((5E,8S)-2,11-二氧代-1,2,3,4,7,8,10,11-八氢-13,9-(亚甲桥)-1,10-苯并二氮杂环十五碳炔-8,16-二基)二氨基甲酸叔丁酯甲酯：向微波小瓶中添加33A(96.6mg，0.189mmol)和二氯化三环己基膦[1,3-二(2,4,6-三甲苯基)-4,5-二氢咪唑-2-亚基][苯亚甲基]钌(IV)(64.4mg，0.076mmol)。接着将小瓶加盖，用氩气吹扫且添加DCE(无水-经脱气)(10mL)。接着在微波中将反应混合物加热至120℃并持续30分钟。接着将混合物冷却至室温且用饱和NaHCO3洗涤，继而用盐水洗涤。接着经Na2SO4干燥有机层，过滤且蒸发，得到深色固体。接着使用反相HPLC纯化粗产物，得到呈棕色固体状的所需产物(24mg，26%)。MS(ESI)m/z:483.0(M+H)+。
实施例33.N-[(12E,15S)-15-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-9,18-二氧代-8,17-二氮杂三环[14.3.1.02,7]二十碳-1(19),2,4,6,12,16(20)-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：向容纳33B(4.1mg，8.50μmol)的圆底烧瓶中添加HCl(4M二噁烷溶液)(2mL，8.00mmol)且在氮气下于环境温度搅拌反应混合物。1小时后，浓缩反应混合物且粗产物未经进一步纯化即用于下一步。在氮气下向脱除保护基Boc的产物(3.59mg，8.57μmol)和DIEA(0.015mL，0.086mmol)于DMF(无水)(1.5mL)中的溶液中添加中间体1(2.485mg，10.28μmol)，继而添加T3P(7.65μL，0.013mmol)。在环境温度搅拌反应混合物20分钟。20分钟后，用MeOH将反应混合物稀释至2mL且通过反相HPLC纯化，得到呈白色固体状的最终所需产物(2.4mg，43%)。1HNMR(400MHz,MeOD)δ8.85(d,J=2.2Hz,1H),7.85-7.80(m,1H),7.74-7.69(m,1H),7.55-7.52(m,1H),7.44-7.39(m,2H),7.30-7.27(m,1H),6.40(d,J=1.4Hz,1H),6.23(d,J=1.1Hz,1H),5.56-5.49(m,2H),5.03-4.97(m,2H),3.74(s,3H),2.69-2.60(m,3H),2.51-2.38(m,5H)。MS(ESI)m/z:606.0(M+H)+。分析性HPLCRT=8.75分钟。
实施例34
N-[(10R,14S)-10-甲基-9-氧代-14-[1-(哌啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯双三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001581
34A.(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)戊-4-烯酸2-(4-(甲氧羰基氨基)-2-硝基苯基)-2-氧代乙酯：向(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)戊-4-烯酸(2.91g，13.50mmol)于DMF(33.7mL)中的澄清无色溶液中添加碳酸氢钾(1.622g，16.20mmol)。在室温搅拌反应混合物20分钟且接着冷却至0℃。向上述反应混合物中逐滴添加中间体16(4.28g，13.50mmol)于DMF(33.7mL)中的溶液且使反应混合物升温至室温且接着在室温搅拌。18小时后，将反应混合物冷却至0℃且倾注至冰冷水中。接着用EtOAc(3×)萃取水层且用H2O和盐水洗涤合并的有机层。接着经Na2SO4干燥有机层，过滤且浓缩，得到为(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)戊-4-烯酸2-(4-(甲氧羰基氨基)-2-硝基苯基)-2-氧代乙酯的黄色泡沫状物(6.09g，100%)。MS(ESI)m/z:450.5(M-H)+。
34B.(4-(2-((1S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)-1H-咪唑-5-基)-3-硝基苯基)氨基甲酸甲酯：向容纳34A(6.09g，13.49mmol)的1000mL圆底烧瓶中添加二甲苯(135mL)且对上述混合物进行超声处理，得到澄清黄色溶液。接着向此溶液中添加乙酸铵(10.40g，135mmol)且为烧瓶装备迪恩-斯达克分离器和回流冷凝器。使反应混合物升温至110℃并持续2小时且接着升高至140℃并持续2小时。搅拌总共4小时后，停止反应且冷却至室温。接着用EtOAc稀释反应混合物且用饱和NaHCO3(2×)溶液和盐水洗涤。接着经Na2SO4干燥有机层，过滤且浓缩，得到棕色胶状物，使用硅胶色谱将其纯化，分离出作为所需产物的棕色泡沫状物(0.91g，16%)。MS(ESI)m/z:432.5(M+H)+。
34C.(4-(2-((1S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)-3-硝基苯基)氨基甲酸甲酯：向火焰干燥的25mL圆底烧瓶中添加NaH(0.092g，2.295mmol)且接着添加THF(4.17mL)，得到灰色悬浮液。接着将上述悬浮液冷却至0℃且接着逐滴添加34B(0.9g，2.086mmol)于THF(4.17mL)中的澄清黄色溶液。接着在0℃搅拌反应混合物30分钟且接着使其升温至室温且搅拌0.5小时。再将黄色悬浮液冷却至0℃且接着逐滴添加SEM-Cl(0.370mL，2.086mmol)。在0℃搅拌所得混浊反应混合物。1小时后，通过用饱和NH4Cl淬灭来停止反应，继而用EtOAc稀释。接着分离各层且用EtOAc萃取水层。用饱和NaHCO3、盐水洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到黄色油状物，通过硅胶色谱将其纯化，得到呈黄色泡沫状的所需产物(0.424g，36%)。MS(ESI)m/z:562.0(M+H)+。1DNOE确定咪唑环上SEM的区位异构位置。
34D.(S)-4-(2-(1-Boc-氨基丁-3-烯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)-3-氨基苯基氨基甲酸甲酯：向34C(0.424g，0.755mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中添加锌(0.494g，7.55mmol)和氯化铵(0.404g，7.55mmol)。接着在密封管中于60℃搅拌混合物。4小时后，将反应混合物冷却至室温且用DCM稀释黄色悬浮液且用H2O洗涤。用含15%IPA的CHCl3萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩。接着使用硅胶色谱纯化粗产物，得到作为所需产物的橙色固体(0.31g，77%)。MS(ESI)m/z:532.4(M+H)+。
34E.(4-(2-((1S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)-3-((三氟乙酰基)氨基)苯基)氨基甲酸甲酯：在氩气下将34D(10.2g，19.18mmol)和TEA(3.19mL，23.02mmol)于EtOAc(50mL)中的溶液冷却至0℃。经由注射泵向此溶液中逐滴添加2,2,2-三氟乙酸酐(2.97mL，21.10mmol)。完成添加后，在0℃再搅拌反应混合物30分钟。接着用EtOAc稀释反应混合物，用H2O、盐水洗涤且经MgSO4干燥。接着过滤粗产物以移除固体且浓缩有机层且通过硅胶色谱纯化，得到呈黄色固体状的所需产物(10.69g，89%)。MS(ESI)m/z:627.9(M+H)+。
34F.(6S,E)-6-((叔丁氧羰基)氨基)-6-(4-(4-((甲氧羰基)氨基)-2-(2,2,2-三氟乙酰氨基)苯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基己-3-烯酸苯甲酯：向34E(3.3g，5.26mmol)和中间体17(5.91g，31.1mmol)于DCM(80mL)中的溶液中添加pTsOH(0.905g，5.26mmol)。接着用氩气使上述溶液鼓泡30分钟。密封反应混合物，在氩气下加热至40℃并持续10分钟，且经由注射泵经3小时逐滴添加于20mL经氩气脱气的DCM中的格拉布II催化剂(1.5g，1.767mmol)，同时将反应温度维持在40℃。搅拌过夜后，用浓NaHCO3(水溶液)和盐水洗涤反应混合物。经MgSO4干燥有机层，过滤且浓缩。接着通过硅胶色谱纯化粗产物，得到呈黄色固体状的所需产物(1.93g，46%)。MS(ESI)m/z:790.4(M+H)+。
34G.(6S)-6-((叔丁氧羰基)氨基)-6-(4-(4-((甲氧羰基)氨基)-2-(2,2,2-三氟乙酰氨基)苯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基己酸：将34F(1.76g，2.228mmol)于MeOH(40mL)中的溶液排空且用氩气再填充。在氩气下向此溶液中添加钯/碳(10%)(500mg，0.470mmol)，排空且用H2气体(3×)再填充。接着在室温于H2气球下搅拌反应混合物。搅拌过夜后，经
Figure BDA0000487247700001601
过滤反应混合物。浓缩滤液且通过硅胶色谱纯化，分离出呈米色固体状的所需产物(1.23g，79%)。MS(ESI)m/z:702.1(M+H)+。
34H.(6S)-6-(4-(2-氨基-4-((甲氧羰基)氨基)苯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)-6-((叔丁氧羰基)氨基)-2-甲基己酸：向34G(1.656g，2.360mmol)于MeOH(14mL)中的溶液中添加LiOH(2N水溶液)(7mL，14.00mmol)。密封反应混合物且在60℃加热。1小时后，在冰H2O浴上冷却反应混合物，添加1NHCl(水溶液)以将pH值调节至6。用EtOAc(2×60mL)萃取水层。用盐水洗涤合并的EtOAc层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩，得到呈微灰色固体状的所需产物(1.43g，100%)。MS(ESI)m/z:606.3(M+H)+。
34I.((3R,7S)-3-甲基-2-氧代-9-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,2,3,4,5,6,7,9-八氢-11,8-(氮烯基)-1,9-苯并二氮杂环十三碳炔-7,14-二基)二氨基甲酸叔丁酯甲酯：经由注射泵向BOP(1141mg，2.58mmol)、DMAP(529mg，4.33mmol)和DIEA(1.261mL，7.22mmol)于DCM(300mL)中的混合物中逐滴添加于DMF(5mL)中的34H(625mg，1.032mmol)。在室温搅拌反应混合物2天，之后将其转移至密封容器中。在50℃加热反应混合物48小时，之后将其冷却至室温。将反应混合物浓缩至较小体积且向残余物中添加EtOAc。用10%LiCl溶液洗涤EtOAc层以移除DMF且经MgSO4干燥有机层。接着浓缩有机层且通过硅胶色谱纯化，继而通过反相HPLC纯化。在HPLC上观测到两个主峰且第一峰是基于先前X射线研究而鉴别为所需产物(第二峰为另一异构体)且基于先前化合物指定立体化学。分离出132mg(22%)呈白色固体状的所需产物。MS(ESI)m/z:588.1(M+H)+。
34J.((3R,7S)-7-氨基-3-甲基-2-氧代-9-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,2,3,4,5,6,7,9-八氢-11,8-(氮烯基)-1,9-苯并二氮杂环十三碳炔-14-基)氨基甲酸甲酯：向34I(120mg，0.204mmol)于DCM(4mL)中的溶液中添加TFA(0.8mL，10.38mmol)且在室温搅拌1小时。用浓Na2CO3水溶液淬灭反应，继而用DCM和EtOAc萃取。用盐水洗涤有机层，经MgSO4干燥且在真空下浓缩，得到呈黄色胶状的所需产物(71mg，71%)。MS(ESI)m/z:488.3(M+H)+。
实施例34.N-[(10R,14S)-10-甲基-9-氧代-14-[1-(哌啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯双三氟乙酸盐：向34J(23mg，0.047mmol)于DMF(1mL)中的溶液中添加1-[1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸(15.37mg，0.052mmol)、EDC(18.08mg，0.094mmol)、HOBT(14.45mg，0.094mmol)和TEA(0.066mL，0.472mmol)且在室温搅拌反应混合物过夜。浓缩反应混合物且经反相HPLC纯化，得到呈白色固体状的经Boc保护的产物(29mg，70%)。在小瓶中向上述白色固体(29.2mg，0.033mmol)中添加HCl(4N二噁烷溶液)(0.8mL，3.20mmol)且在75℃加热反应混合物1小时。将反应混合物冷却至室温且浓缩。接着对粗产物进行反相HPLC纯化，得到呈白色固体状的所需产物(22mg，81%)。1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.57(s,1H),8.52(s,1H),7.57(d,J=2.0Hz,1H),7.52-7.38(m,2H),5.38(dd,J=10.4,6.8Hz,1H),4.99-4.89(m,1H),3.76(s,3H),3.63-3.55(m,2H),3.28-3.21(m,1H),2.77(br.s.,1H),2.51-2.19(m,4H),2.17-2.02(m,1H),1.84-1.51(m,3H),1.03(d,J=7.1Hz,3H),0.70(d,J=12.1Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:536.4(M+H)+。分析性HPLCRT=5.02分钟(方法A)。
表3中的以下实施例是通过使用与实施例34中所示相同的操作来制备。最终步骤中所使用的酸是如下表中的中间部分中所指示。除实施例34中所述的偶合试剂以外，可使用多种偶合试剂，如BOP、PyBop、EDC/HOBt、HATU或T3P。在最终偶合之前实现脱除保护基Boc和SEM，这不同于实施例34，其中在步骤34J中单独移除Boc基团。
Figure BDA0000487247700001611
表3
表4中的以下实施例是通过使用与实施例34中所示相同的操作，使用步骤34I中的第二异构体来制备。最终步骤中所使用的酸是如下表中的中间部分中所指示。除实施例34中所述的偶合试剂以外，可使用多种偶合试剂，诸如BOP、PyBop、EDC/HOBt、HATU或T3P。在最终偶合之前实现脱除保护基Boc和SEM，这不同于实施例34，其中在步骤34J中单独移除Boc基团。
Figure BDA0000487247700001631
表4
Figure BDA0000487247700001632
实施例45
(9R,14S)-14-[5-氨基-1-(3-氯苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-5-[(甲氧羰基)氨基]-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-9-甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001641
45A.(3-溴-4-(2-((1S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)苯基)氨基甲酸甲酯：遵循步骤34A中所述的操作，通过用中间体18替换中间体16；继而进行步骤34B和34C来制备45A。MS(ESI)m/z:597.1(M+2+H)+。
45B:(R)-2-(2-(2-((S)-1-(叔丁氧羰基氨基)丁-3-烯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)-5-(甲氧羰基氨基)苯基氨基)戊-4-烯酸：在可密封管中向45A(2g，3.36mmol)、碘化铜(I)(0.064g，0.336mmol)和K2CO3(1.160g，8.39mmol)的混合物中添加(R)-2-氨基戊-4-烯酸(0.464g，4.03mmol)和DMSO(6.72mL)。将反应混合物排空且用氩气回填三次，接着加盖且在90℃加热18小时。接着将反应混合物冷却至室温且接着用EtOAc和H2O稀释。用EtOAc(2×)萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到粗残余物。添加少量DCM(约5mL)，得到棕色溶液，继而添加己烷(约300mL)，得到黄色悬浮液，将其过滤。用己烷冲洗固体且空气干燥，得到呈黄色固体状的所需产物(1.8g，85%)。MS(ESI)m/z:630.4(M+H)+。
45C.(R)-2-(2-(2-((S)-1-(叔丁氧羰基氨基)丁-3-烯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)-5-(甲氧羰基氨基)苯基氨基)戊-4-烯酸甲酯：向45B(1.8g，2.86mmol)于DMF(25mL)中的溶液中添加K2CO3(0.395g，2.86mmol)和MeI(0.179mL，2.86mmol)。在室温搅拌反应混合物。20小时后，用EtOAc和H2O稀释反应混合物。用EtOAc萃取水层且用H2O和盐水洗涤合并的有机层。接着经Na2SO4干燥有机层，过滤且浓缩。接着通过硅胶色谱纯化粗产物，得到作为所需产物的棕色泡沫状物(0.58g，32%)。MS(ESI)m/z:644.3(M+H)+。
45D.(2R,7S)-7-((叔丁氧羰基)氨基)-14-((甲氧羰基)氨基)-9-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,2,3,4,5,6,7,9-八氢-11,8-(氮烯基)-1,9-苯并二氮杂环十三碳炔-2-甲酸甲酯：在微波条件下于120℃加热45C(0.58g，0.901mmol)和格拉布(II)催化剂(0.306g，0.360mmol)于DCE(22.52mL)中的溶液20分钟且接着将其冷却至室温。用EtOAc稀释反应混合物且接着用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤。接着经MgSO4干燥有机层，过滤且浓缩。接着使用硅胶色谱纯化粗产物，得到作为所需产物的黄色固体(0.128g，23%)。MS(ESI)m/z:616.4(M+H)+。
45E.(2R,7S)-7-((叔丁氧羰基)氨基)-14-((甲氧羰基)氨基)-9-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,2,3,4,5,6,7,9-八氢-11,8-(氮烯基)-1,9-苯并二氮杂环十三碳炔-2-甲酸甲酯：向45D(0.128g，0.208mmol)于EtOAc(5mL)中的溶液中添加TFA(0.032mL，0.416mmol)和10%钯/碳(0.022g，0.021mmol)。使氢气鼓泡通过反应混合物5分钟，且在H2气球下搅拌反应混合物。17小时后，将EtOH(1mL)添加至反应混合物中，且经0.45μM GMF过滤反应混合物，用MeOH冲洗(过滤两次)且浓缩。接着通过反相HPLC纯化粗产物且分离出呈固体状的所需产物(0.113g，64%)。MS(ESI)m/z:618.4(M+H)+。
实施例45.(9R,14S)-14-[5-氨基-1-(3-氯苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-5-[(甲氧羰基)氨基]-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-9-甲酸甲酯三氟乙酸盐：向圆底烧瓶中添加45E(0.01g，0.016mmol)，继而添加HCl(4N二噁烷溶液)(2mL)且在50℃将反应混合物与少量半胱氨酸一起加热过夜。接着浓缩反应混合物，得到固体物质。在单独烧瓶中，向于DCM(1mL)中的中间体8(3.86mg，0.016mmol)中添加维尔斯梅尔试剂(0.1mL)且在室温搅拌反应混合物2小时。在DCM(1mL)中搅拌上述干燥的脱除保护基的大环内酯且向其中插管放入三唑酸氯化物粗物质，继而添加吡啶(0.4mL)且在室温继续搅拌2小时。浓缩反应混合物且经由反相HPLC纯化，得到所需产物(3mg，27%)。1HNMR(400MHz,MeOD)δ7.57-7.46(m,4H),7.45-7.32(m,2H),7.13(m,2H),5.40-5.37(dd,J=10.9,7.1Hz,1H),3.66(s,3H),3.49(s,3H),3.03-2.94(m,2H),2.28(m,J=6.8Hz,1H),1.75-1.66(m,4H),1.23-1.14(m,2H),0.32(d,J=11.9Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:608.2(M+H)+。分析性HPLC(方法A)：RT=6.96分钟。
表5中的以下实施例是通过使用与实施例45中所示相同的操作来制备。最终步骤中所使用的酸是如下表中的中间部分中所指示。除实施例45中所述的偶合试剂以外，可使用多种偶合试剂，如BOP、PyBop、EDC/HOBt、HATU或T3P。
Figure BDA0000487247700001661
表5
Figure BDA0000487247700001662
实施例51
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-9-氧代8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001671
51A.(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)戊-4-烯酸2-(4-(甲氧羰基氨基)-2-硝基苯基)-2-氧代乙酯：向(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)戊-4-烯酸(2.91g，13.50mmol)于DMF(33.7mL)中的澄清无色溶液中添加碳酸氢钾(1.622g，16.20mmol)。接着在室温搅拌反应混合物20分钟且接着冷却至0℃。接着向上述经冷却的溶液中逐滴添加中间体16(4.28g，13.50mmol)于DMF(33.7mL)中的溶液且使反应混合物升温至室温且在室温继续搅拌。18小时后，将反应混合物冷却至0℃且倾注于冰冷H2O中。接着用EtOAc(3×)萃取水层且用H2O、盐水洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到呈黄色泡沫状的所需产物(6.09g，100%)。MS(ESI)m/z:450.5(M-H)-。
51B.(4-(2-((1S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)-1H-咪唑-5-基)-3-硝基苯基)氨基甲酸甲酯：向容纳51A(6.09g，13.49mmol)的1000mL圆底烧瓶中添加二甲苯(135mL)且对反应混合物进行超声处理，得到澄清黄色溶液。接着向澄清溶液中添加乙酸铵(10.40g，135mmol)且为烧瓶装备迪恩-斯达克分离器和回流冷凝器。接着在110℃加热反应混合物2小时且接着在140℃再加热2小时。将反应混合物冷却至室温且用EtOAc稀释。接着用饱和NaHCO3(2×)溶液洗涤混合物，继而用盐水洗涤。经Na2SO4干燥有机层，过滤且浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，得到呈棕色泡沫状的所需产物(0.91g，16%)。MS(ESI)m/z:432.5(M+H)+。
51C.(4-(2-((1S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)-3-硝基苯基)氨基甲酸甲酯：向火焰干燥的25mL圆底烧瓶中添加NaH(0.092g，2.295mmol)且接着添加THF(4.17mL)，得到灰色悬浮液。将悬浮液冷却至0℃且接着逐滴添加51B(0.9g，2.086mmol)于THF(4.17mL)中的澄清黄色溶液。在0℃搅拌反应混合物30分钟且接着使其升温至室温且搅拌0.5小时。将黄色悬浮液冷却至0℃且接着逐滴添加SEM-Cl(0.370mL，2.086mmol)。在0℃搅拌所得混浊反应混合物。1小时后，停止反应且用饱和NH4Cl溶液淬灭，继而用EtOAc稀释。分离各层，且用EtOAc萃取水层。用饱和NaHCO3、盐水洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。接着通过硅胶色谱纯化残余物，得到呈黄色泡沫状的所需产物(0.424g，36%)。MS(ESI)m/z:562.0(M+H)+。1DNOE确定咪唑环上SEM的区位异构位置。
51D.(S)-4-(2-(1-Boc-氨基丁-3-烯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)-3-氨基苯基氨基甲酸甲酯：向51C(0.424g，0.755mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中添加锌(0.494g，7.55mmol)和氯化铵(0.404g，7.55mmol)。在60℃于密封管中搅拌合并的反应混合物4小时且接着冷却至室温。用DCM稀释黄色悬浮液且用H2O洗涤。用15%IPA/CHCl3萃取水层且用盐水洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩。接着使用硅胶色谱纯化粗产物，得到作为所需产物的橙色固体(0.31g，77%)。MS(ESI)m/z:532.4(M+H)+。
51E.(S)-4-(2-(1-Boc-氨基丁-3-烯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)-3-(丁-4-烯酰氨基)-苯基氨基甲酸甲酯：向丁-3-烯酸(0.024g，0.282mmol)和51D(0.15g，0.282mmol)于EtOAc(8.06mL)中的溶液中添加DIEA(0.148mL，0.846mmol)。在氩气下将反应混合物冷却至-10℃。随后，添加T3P(0.332mL，0.564mmol)且搅拌反应混合物5分钟。接着使反应混合物升温至室温，同时在氩气下搅拌1小时。接着通过硅胶色谱纯化粗产物，得到黄色固体(0.130g，77%)。MS(ESI)m/z:600.4(M+H)+。
51F.((7S)-2-氧代-9-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,2,3,4,5,6,7,9-八氢-11,8-(氮烯基)-1,9-苯并二氮杂环十三碳炔-7,14-二基)二氨基甲酸叔丁酯甲酯：对51E进行如先前所述的大环化方案，得到不饱和大环化产物。接着使用钯/碳(10%)(83mg，0.042mmol)对纯化的产物进行氢化。用氮气吹扫烧瓶且向烧瓶中添加EtOH(绝对)(10mL)和EtOAc(10mL)。再用氮气(3×)吹扫烧瓶，排空且引入氢气氛围(约55psi)且在环境温度搅拌反应混合物。接着再藉助于EtOAc经
Figure BDA0000487247700001681
垫过滤反应混合物且蒸发溶剂。得到呈无色固体状的所需产物(113mg，93%)，其未经进一步纯化即供使用。MS(ESI)m/z:574.5(M+H)+。
实施例51.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-9-氧代-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：向添加有51F(0.02g，0.035mmol)的圆底烧瓶中添加4NHCl的二噁烷(2mL)溶液且在70℃搅拌2小时。接着浓缩反应混合物且在真空下干燥。接着将粗产物溶解于DMF(2mL)中且向上述溶液中添加中间体1(8.42mg，0.035mmol)和T3P(0.040mmol)。在室温再搅拌反应混合物。2小时后，接着浓缩反应混合物且经由反相HPLC纯化，分离出呈黄色固体状的所需产物(1.4mg，5%)。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.84(dd,J=17.0,2.2Hz,1H),7.75(td,J=7.3,1.4Hz,1H),7.68-7.55(m,1H),7.50(d,J=1.6Hz,1H),7.44-7.23(m,5H),5.27(dd,J=10.7,6.3Hz,3H),4.49-4.29(m,3H),3.72-3.59(m,3H),2.47-2.34(m,2H),2.32-2.12(m,3H),2.09-1.89(m,4H),1.69-1.08(m,13H),1.31-1.08(m,4H),0.93(s,3H)ppm。MS(ESI)m/z:567.0(M+H)+。分析性HPLC：RT=4.76分钟(方法B)。
实施例52
N-[(14S)-14-[1-(3-氯苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-9-氧代-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001691
实施例52.N-[(14S)-14-[1-(3-氯苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-9-氧代-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：除最终偶合步骤之外，以与实施例51相同的方式来制备实施例52，在该最终偶合步骤中使用如对于实施例45所述的维尔斯梅尔方案。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.96(s,1H),7.91(t,1H),7.78(dd,1H),7.51-7.45(m,3H),7.42-7.403(m,2H),7.34(dd,1H),5.26(m,1H),3.66(s,3H),2.40(m,1H),2.24(m,1H),2.04-1.98(m,2H),1.65-1.53(m,2H),1.38(m,1H),0.98(bm,1H)ppm。MS(ESI)m/z:549.2(M+H)+。分析性HPLC：RT=4.90分钟(方法B)。
实施例53
N-[(10S,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-乙基-9-氧代-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2(7),3,5,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001701
实施例53.N-[(10S,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-乙基-9-氧代-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2(7),3,5,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例24相同的方式，通过用51D替代24A且在最终偶合步骤之前使用4NHCl的二噁烷溶液同时脱除保护基Boc和SEM基团来制备实施例53。经制备性HPLC在还原大环期间以早期洗脱的非对映异构体中的一个的形式分离出实施例53。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.86(d,J=2.3Hz,1H),7.93(dd,J=8.2,1.6Hz,1H),7.78-7.90(m,1H),7.68-7.76(m,1H),7.52(d,J=1.8Hz,1H),7.28-7.48(m,3H),7.09(s,1H),5.40-5.51(m,1H),3.74(s,3H),2.34-2.47(m,1H),2.08-2.24(m,1H),1.86-2.02(m,2H),1.50-1.79(m,2H),1.33-1.50(m,2H),1.23-1.32(m,1H),0.93(t,J=7.5Hz,3H)ppm。MS(ESI)m/z:595.2(M+H)+。分析性HPLC：RT=5.55分钟(方法A)。
实施例54
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-乙基-9-氧代-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2(7),3,5,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001702
实施例54.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-乙基-9-氧代-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2(7),3,5,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例53相同的方式来制备实施例54且经制备性HPLC在还原大环期间以后期洗脱的非对映异构体形式分离。1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.62(s,1H),8.93(d,J=2.2Hz,1H),7.80-7.94(m,1H),7.76(ddd,J=8.3,6.7,1.5Hz,1H),7.41-7.64(m,5H),5.31(dd,J=10.3,5.9Hz,1H),3.78(s,3H),2.25-2.45(m,2H),1.99-2.16(m,1H),1.71-1.85(m,1H),1.58-1.71(m,1H),1.45-1.58(m,1H),1.18-1.41(m,3H),1.02(t,J=7.3Hz,3H)ppm。MS(ESI)m/z:595.3(M+H)+。分析性HPLC：RT=5.91分钟(方法A)。
实施例55
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-9-氧代-10-(丙-2-基)-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001711
55A.N-[(1S)-1-(4-{4-[(甲氧羰基)氨基]-2-[2-(丙-2-基)丁-3-烯酰氨基]苯基}-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-咪唑-2-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯三氟乙酸盐：以与21B相同的方式，通过用2-异丙基丁-3-烯酸替代丁-3-烯酸且用51D替代21A来制备55A。分离出呈微绿色油状的所需产物。MS(ESI)m/z:642.6(M+H)+。
实施例55.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-9-氧代-10-(丙-2-基)-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例24相同的方式，通过用55A替代24A且在最终偶合步骤之前使用4NHCl的二噁烷溶液同时脱除保护基Boc和SEM基团来制备实施例55。分离出呈非对映异构体混合物形式的实施例55且因此最终化合物为非对映异构体混合物。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.90(m,1H),7.85-7.84(m,1H),7.71-7.69(m,1H),7.60(s,1H),7.55-7.41(m,4H),5.39(dd,J=10.8,6.9Hz,1H),3.76(s,2H),2.42(m,1H),2.24-2.10(m,2H),1.81-1.47(m,4H),0.98(d,3H),0.90(d,3H)ppm。MS(ESI)m/z:609.2(M+H)+。分析性HPLC：RT=5.51分钟(方法B)。
实施例56
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-9-氧代-10-(丙-2-基)-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001721
实施例56.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-9-氧代-10-(丙-2-基)-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例55相同的方式来制备实施例56且在格拉布大环化方案期间以单个非对映异构体形式分离。其在大环化后作为第二峰分离且最终化合物具纯手性。MS(ESI)m/z:609.3(M+H)+。分析性HPLC(方法A)RT=7.34分钟。
实施例57
N-[(12E,15S)-15-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-酰氨基]-18-氰基-9-氧代8,17,19-三氮杂三环[14.2.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,12,16(19)-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001722
57A.(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)戊-4-烯酸2-(4-(甲氧羰基氨基)-2-硝基苯基)-2-氧代乙酯：向(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)戊-4-烯酸(2.91g，13.50mmol)于DMF(33.7mL)中的澄清无色溶液中添加碳酸氢钾(1.622g，16.20mmol)且在室温搅拌反应混合物20分钟且接着冷却至0℃。接着向上述混合物中逐滴添加中间体16(4.28g，13.50mmol)于DMF(33.7mL)中的溶液且使反应混合物升温至室温且继续搅拌。18小时后，停止反应，将其冷却至0℃且倾注至冰冷H2O中。接着用EtOAc(3×)萃取水层且用H2O和盐水洗涤合并的有机层。接着经Na2SO4干燥有机层，过滤且浓缩，得到呈黄色泡沫状的所需产物(6.09g，100%)。MS(ESI)m/z:450.5(M-H)-。
57B.(4-(2-((1S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)-1H-咪唑-5-基)-3-硝基苯基)氨基甲酸甲酯：向容纳57A(6.09g，13.49mmol)的1000mL圆底烧瓶中添加二甲苯(135mL)且进行超声处理，得到澄清黄色溶液。接着向上述澄清溶液中添加乙酸铵(10.40g，135mmol)且为烧瓶装备迪恩-斯达克分离器和回流冷凝器。接着使反应混合物升温至110℃并持续2小时，接着再升温至140℃并持续2小时。将反应混合物冷却至室温且用EtOAc稀释。接着用饱和NaHCO3(2×)和盐水洗涤混合物。经Na2SO4干燥有机层，过滤且浓缩。通过硅胶色谱纯化粗产物，得到作为所需产物的棕色泡沫状物(0.91g，16%)。MS(ESI)m/z:432.5(M+H)+。
57C.(4-(2-((1S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)-3-硝基苯基)氨基甲酸甲酯：向火焰干燥的25mL圆底烧瓶中添加NaH(0.092g，2.295mmol)且接着添加THF(4.17mL)，得到灰色悬浮液。将悬浮液冷却至0℃且接着逐滴添加57B(0.9g，2.086mmol)于THF(4.17mL)中的澄清黄色溶液。在0℃搅拌反应混合物30分钟且接着使其升温至室温且搅拌0.5小时。将黄色悬浮液冷却至0℃且接着逐滴添加SEM-Cl(0.370mL，2.086mmol)。接着在0℃搅拌所得混浊反应混合物。1小时后，用饱和NH4Cl溶液淬灭反应混合物，继而用EtOAc稀释。分离各层，且用EtOAc萃取水层。用饱和NaHCO3、盐水洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。通过硅胶色谱纯化粗产物，得到呈黄色泡沫状的所需产物(0.424g，36%)。MS(ESI)m/z:562.0(M+H)+。1DNOE确定咪唑环上SEM的区位异构位置。
57D.(S)-4-(2-(1-Boc-氨基丁-3-烯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)-3-氨基苯基氨基甲酸甲酯：向57C(0.424g，0.755mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中添加锌(0.494g，7.55mmol)和氯化铵(0.404g，7.55mmol)。在60℃于密封管中搅拌混合物4小时且接着冷却至室温。用DCM稀释黄色悬浮液且接着用H2O洗涤。用15%IPA/CHCl3萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩。使用硅胶色谱纯化粗产物，得到作为所需产物的橙色固体(0.31g，77%)。MS(ESI)m/z:532.4(M+H)+。
57E.(S)-4-(2-(1-Boc-氨基丁-3-烯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)-3-(戊-4-烯酰氨基)-苯基氨基甲酸甲酯：向戊-4-烯酸(0.028g，0.282mmol)和57D(0.15g，0.282mmol)于EtOAc(8.06mL)中的溶液中添加DIEA(0.148mL，0.846mmol)。在氩气下将反应混合物冷却至-10℃。接着向上述混合物中添加1-丙烷膦酸环酐的EtOAc溶液(0.332mL，0.564mmol)且搅拌反应混合物5分钟。接着使反应混合物升温至室温，同时在氩气下再搅拌1小时且接着将其浓缩。通过硅胶色谱纯化粗产物，得到黄色固体(0.092g，53%)。MS(ESI)m/z:614.1(M+H)+。
57F.((5E,8S)-2-氧代-10-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3,4,7,8,10-六氢-2H-12,9-(氮烯基)-1,10-苯并二氮杂环十四碳炔-8,15-二基)二氨基甲酸叔丁酯甲酯：向装备有氩气鼓泡器的圆底烧瓶中添加细粉状57E(1.0165g，1.656mmol)和单水合p-TsOH(0.299g，1.739mmol)。接着用氩气吹扫烧瓶且添加DCM(无水-经脱气)(78mL)，继而在40℃加热无色混合物。在此温度快速搅拌混合物直至反应混合物溶解为止(约5分钟)，之后以每秒约1滴的速率添加二氯化三环己基膦[1,3-二(2,4,6-三甲苯基)-4,5-二氢咪唑-2-亚基][苯亚甲基]钌(IV)(0.070g，0.083mmol)于DCM(无水-经脱气)(5.0mL)中的溶液。在40℃继续搅拌90分钟，此时移出等分试样。接着将混合物冷却至室温且用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤。接着经Na2SO4干燥有机层，过滤且浓缩，得到深色固体。使用硅胶色谱纯化残余物，得到呈顺式与反式烯烃异构体的混合物形式的所需产物。通过反相HPLC纯化粗产物，得到两个洗脱份，洗脱份1(反式烯烃异构体)和洗脱份2(顺式烯烃异构体)。蒸发适当反式洗脱份，得到呈无色固体状的所需产物(404mg，42%)。MS(ESI)m/z:586.5(M+H)+。
57G.(5E,8S)-11-溴-10,15-二甲基-8-(甲氨基)-1,3,4,7,8,10-六氢-2H-12,9-(氮烯基)-1,10-苯并二氮杂环十四碳炔-2-酮：向57F(0.225g，0.384mmol)于CHCl3(5mL)和ACN(5mL)中的溶液中一次性添加NBS(0.082g，0.461mmol)且在室温搅拌所得溶液0.5小时。浓缩混合物且使用硅胶色谱纯化，分离出所需产物(0.178g，70%)。MS(ESI)m/z:666.3(M+H)+。
57H.((5E,8S)-11-氰基-2-氧代-10-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,3,4,7,8,10-六氢-2H-12,9-(氮烯基)-1,10-苯并二氮杂环十四碳炔-8,15-二基)二氨基甲酸叔丁酯甲酯：在氩气鼓泡下使57G(0.18g，0.271mmol)、氰化锌(0.019g，0.162mmol)、DPPF(0.018g，0.032mmol)和Pd2(dba)3-CHCl3(0.012g，0.014mmol)于DMF(2mL)中的溶液脱气0.5小时。接着在微波条件下在130℃搅拌溶液0.5小时。接着用EtOAc稀释反应混合物且用NaHCO3溶液洗涤，继而用盐水洗涤。接着经MgSO4干燥有机层且浓缩，得到粗产物，使用反相HPLC将其纯化，分离出所需产物(0.145g，88%)。MS(ESI)m/z:611.3(M+H)+。
57I.((5E,8S)-8-氨基-11-氰基-2-氧代-1,3,4,7,8,10-六氢-2H-12,9-(氮烯基)-1,10-苯并二氮杂环十四碳炔-15-基)氨基甲酸甲酯：向57H(145mg，0.237mmol)于DCM(3mL)中的溶液中添加TFA(0.500mL)且在室温搅拌反应混合物。2小时后，将反应混合物浓缩至干燥。向固体中添加EtOAc和足够的饱和NaHCO3(以使其呈碱性)。接着用EtOAc(3×)萃取水层且用盐水洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩，得到呈微红色固体状的42I(90mg，100%)。MS(ESI)m/z:381.1(M+H)+。
实施例57.N-[(12E,15S)-15-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-酰氨基]-18-氰基-9-氧代-8,17,19-三氮杂三环[14.2.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,12,16(19)-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：在如先前所述的T3P(0.034g，0.045mmol)/DIEA(7.81μL，0.045mmol)和DMF条件下使57I(0.017g，0.045mmol)与中间体2(10.75mg，0.045mmol)偶合。2小时后，浓缩反应混合物且经由反相HPLC纯化，得到呈白色固体状的所需产物(6mg，22%)。MS(ESI)m/z:603.1(M+H)+。分析性HPLC：RT=6.16分钟(方法B)。
实施例58
((12E,15S)-15-(((2-(3-氯-2,6-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)羰基)氨基)-9-氧代-8,17,19-三氮杂三环[14.2.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,12,16(19)-六烯-5-基)氨基甲酸甲酯双三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001761
实施例58.((12E,15S)-15-(((2-(3-氯-2,6-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)羰基)氨基)-9-氧代-8,17,19-三氮杂三环[14.2.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,12,16(19)-六烯-5-基)氨基甲酸甲酯双三氟乙酸盐：以与实施例57相同的方式，通过用中间体22替换中间体2来制备实施例58。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.95(s,1H),7.73(td,J=8.7,5.5Hz,1H),7.46(s,3H),7.34-7.21(m,1H),5.73-5.58(m,1H),5.51(br.s.,1H),5.31(dd,J=10.3,4.8Hz,1H),3.80(s,3H),3.31-3.24(m,1H),2.94(d,J=13.8Hz,1H),2.76-2.64(m,1H),2.61-2.38(m,3H)ppm。MS(ESI)m/z:596.1(M+H)+。分析性HPLC：RT=4.24分钟。
实施例59
((10R,14S)-14-(((1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)羰基)氨基)-10-甲基-9-氧代-8,18-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-5-基)氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001762
实施例59.((10R,14S)-14-(((1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)羰基)氨基)-10-甲基-9-氧代-8,18-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-5-基)氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例31相同的方式，通过用中间体1替换中间体2来制备实施例59。1HNMR(500MHz,乙腈-d3)δ8.63(d,J=5.8Hz,1H),8.50(d,J=2.2Hz,1H),8.21(s,1H),7.91(s,1H),7.87(d,J=6.9Hz,1H),7.83(s,1H),7.70(ddd,J=8.2,6.7,1.7Hz,1H),7.66(d,J=8.5Hz,1H),7.60(ddd,J=8.3,6.8,1.7Hz,1H),7.42-7.38(m,2H),7.34-7.27(m,2H),5.11-5.02(m,1H),3.64(s,3H),2.55(td,J=6.4,2.6Hz,2H),1.99(td,J=4.7,2.3Hz,1H),1.72-1.69(m,1H),1.47-1.39(m,2H),1.36-1.30(m,2H),0.83(d,J=6.9Hz,3H)。MS(ESI)m/z:592.3(M+H)+。分析性HPLC(方法E)RT=5.97分钟。
实施例60
((10S,14S)-14-(((1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)羰基)氨基)-10-甲基-9-氧代-8,18-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-5-基)氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001771
实施例60.((10S,14S)-14-(((1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)羰基)氨基)-10-甲基-9-氧代-8,18-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-5-基)氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例59相同的方式，使用另一异构体来制备实施例60。1HNMR(500MHz,CD3CN)δ8.46-8.52(m,1H),7.86(s,1H),7.80(br.s.,2H),7.69(d,J=8.25Hz,2H),7.60(ddd,J=1.51,6.81,8.18Hz,1H),7.48(s,1H),7.26-7.38(m,4H),7.14(dd,J=1.65,5.23Hz,1H),4.92-5.00(m,1H),3.97(q,J=7.15Hz,1H),3.63(s,3H),2.11-2.18(m,1H),1.91-1.96(m,1H),1.62-1.76(m,2H),1.07-1.13(m,3H),0.91-0.97(m,1H),0.76-0.81(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:592.2(M+H)+。分析性HPLC(方法E)RT=6.00分钟。
实施例61
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
实施例61.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：向容纳中间体25(0.085g，0.335mmol)、2M(0.2g，0.335mmol)、EDC(0.096g，0.503mmol)、HOBT(0.077g，0.503mmol)和DMF(4mL)的小瓶中添加许尼希碱(0.293mL，1.677mmol)。在室温搅拌反应混合物过夜且接着浓缩。通过反相HPLC纯化残余物，得到呈灰白色固体状的所需产物(0.073g，30%)。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.69(d,J=6.1Hz,1H),8.30(s,1H),8.11(d,J=1.1Hz,1H),7.81(dd,J=5.9,1.8Hz,1H),7.71(ddd,J=8.1,6.7,1.7Hz,1H),7.62(d,J=8.5Hz,1H),7.57(d,J=1.9Hz,1H),7.50(dd,J=8.5,2.2Hz,1H),7.46(ddd,J=8.0,6.5,1.7Hz,1H),7.40-7.36(m,1H),5.24(dd,J=11.4,5.9Hz,1H),3.77(s,3H),2.80-2.73(m,1H),2.35(d,J=1.1Hz,3H),2.23-2.13(m,1H),2.02-1.90(m,2H),1.65-1.46(m,2H),0.97(d,J=6.9Hz,3H),0.55-0.44(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:605.2(M+H)+。分析性HPLCRT=5.96分钟(方法A)。
实施例62
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-咪唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯双三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001782
实施例62.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-咪唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯双三氟乙酸盐：在室温搅拌中间体24(0.012g，0.045mmol)、2M(替代性二盐酸盐)(0.020g，0.045mmol)、EDC(0.013g，0.068mmol)、HOBT(10.41mg，0.068mmol)和许尼希碱(0.040ml，0.227mmol)于DMF(0.453mL)中的澄清无色溶液过夜。用MeOH稀释反应混合物且通过反相HPLC纯化，得到呈灰白色颗粒固体状的所需产物(0.0172g，44%)。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.71(d,J=5.8Hz,1H),8.14(d,J=1.7Hz,1H),7.84(dd,J=5.9,1.8Hz,1H),7.81(s,1H),7.72(ddd,J=8.2,6.7,1.7Hz,1H),7.63(d,J=8.5Hz,1H),7.57(d,J=1.9Hz,1H),7.50(dd,J=8.4,2.1Hz,1H),7.47-7.43(m,1H),7.41-7.37(m,1H),5.29(dd,J=11.3,6.1Hz,1H),3.77(s,3H),2.81-2.73(m,1H),2.32(d,J=0.6Hz,3H),2.25-2.17(m,1H),2.01-1.90(m,2H),1.66-1.48(m,2H),0.96(d,J=7.2Hz,3H),0.53-0.42(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:605.4(M+H)+。分析性HPLCRT=5.20分钟(方法D)。
实施例63
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001791
实施例63.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：向容纳于DMF(0.5mL)中的中间体21(10.7mg，0.042mmol)、2M(0.025g，0.042mmol)、EDC(0.012g，0.063mmol)和HOBT(9.6mg，0.063mmol)的小瓶中添加许尼希碱(0.037mL，0.210mmol)。在55℃加热反应混合物2小时且接着冷却至室温。用MeOH稀释反应混合物且过滤。浓缩滤液且通过反相HPLC纯化，得到呈白色固体状的所需产物(0.014g，46%)。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.70(d,J=5.5Hz,1H),7.92(ddd,J=8.3,6.9,1.7Hz,1H),7.81(s,1H),7.70(td,J=7.4,1.7Hz,1H),7.58-7.45(m,4H),7.39(d,J=1.9Hz,1H),5.25(dd,J=10.7,5.8Hz,1H),3.69(s,3H),2.71-2.63(m,1H),2.40(s,3H),2.05-1.96(m,1H),1.90-1.77(m,2H),1.46-1.24(m,2H),0.83(d,J=6.9Hz,3H),0.31-0.19(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:606.3(M+H)+。分析性HPLCRT=6.46分钟(方法A)。
表6中的以下实施例是通过使用与实施例63中所示相同的操作来制备。最终步骤中所使用的酸是如下表中的中间部分中所指示。除实施例63中所述的偶合试剂以外，可使用多种偶合试剂，诸如BOP、PyBop、EDC/HOBt或HATU。
Figure BDA0000487247700001801
表6
Figure BDA0000487247700001802
Figure BDA0000487247700001811
Figure BDA0000487247700001821
实施例77
N-[(10R,14S)-14-[1-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001822
实施例77.N-[(10R,14S)-14-[1-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例63相同的方式，通过使用中间体30来制备实施例77。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.85(s,1H),7.61(d,J=2.0Hz,1H),7.56-7.52(m,2H),7.47-7.36(m,4H),5.55-5.39(m,1H),4.06-3.92(m,3H),3.99(s,3H),3.79(s,3H),2.79-2.77(bm,J=10.6Hz,2H),2.69-2.64(bm,1H),2.32(m,1H),1.75(m,1H),1.66(bm,2H),1.08(d,3H),0.99(bm,1H)。MS(ESI)m/z:577.3(M+H)+。分析性HPLCRT=5.74分钟(方法A)。
表7中的以下实施例是通过使用与实施例31中所示相同的操作来制备。最终步骤中所使用的酸是如下表中的中间部分中所指示。除实施例2中所述的偶合试剂以外，可使用多种偶合试剂，如BOP、PyBop、EDC/HOBt或HATU。在步骤2F中，可用3-甲氧基丙酰氯替换氯甲酸甲酯。
Figure BDA0000487247700001831
表7
Figure BDA0000487247700001841
实施例86
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-16-氟-10-甲基-9-氧代-8,18-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001851
实施例86.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-16-氟-10-甲基-9-氧代-8,18-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例2相同的方式，通过用2-溴-5-氟吡啶-4-甲醛替换4-溴吡啶-2-甲醛且用中间体21替代中间体11来制备实施例86。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.65(d,J=2.8Hz,1H),7.95(d,J=6.3Hz,1H),7.82(ddd,J=8.2,6.8,1.5Hz,1H),7.68(d,J=8.5Hz,1H),7.61-7.52(m,2H),7.50-7.43(m,2H),5.35(dd,J=11.3,5.8Hz,1H),3.78(s,3H),3.32(m,3H),2.71(td,J=6.7,2.5Hz,1H),2.45(d,J=0.6Hz,3H),2.24-2.16(m,1H),2.14-2.05(m,1H),1.97-1.86(m,1H),1.74-1.62(m,1H),1.55-1.43(m,1H),1.01(d,J=7.2Hz,3H),0.97-0.86(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:623.9(M+H)+。分析性HPLCRT=8.73分钟(方法A)。
实施例87
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-6-氟-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001852
87A.N-{3-氨基-4-[2-(1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}丁-3-烯-1-基)吡啶-4-基]-2-氟苯基}氨基甲酸甲酯：向2H(50mg，0.121mmol)于DMF(0.5mL)中的溶液中添加Na2CO3(22mg，0.208mmol)，继而添加阿库氟(accufluor)(50%于氧化铝中)(143mg，0.222mmol)。在室温搅拌反应混合物40分钟且浓缩。通过反相HPLC纯化残余物，分离出所需产物(10mg，19%)。MS(ESI)m/z:431.1(M+H)+。
87B.N-[(10R,11E,14S)-14-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-6-氟-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,11,15,17-七烯-5-基]氨基甲酸甲酯(非对映异构体混合物)：以与2J相同的方式，通过用87A替换2H来制备87B。MS(ESI)m/z:485.1(M+H)+。
87C.N-[(10R,14S)-14-氨基-6-氟-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯盐酸盐：向87B(3.5mg，7.22μmol)于乙酸乙酯(5mL)中的溶液中添加氧化铂(IV)(1.8mg，7.93μmol)。使反应混合物脱气，用氩气(3×)吹扫且添加H2气球过夜。过滤混合物且用MeOH洗涤。浓缩滤液。用1mLHCl(4N二噁烷溶液)处理残余物1小时且接着浓缩，得到呈棕色固体状的所需产物(非对映异构体混合物)(3.5mg，100%)。MS(ESI)m/z:387.2(M+H)+。
实施例87.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-6-氟-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐(非对映异构体混合物)：以与实施例2相同的方式，通过用87C替换2M来制备实施例87。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.75(d,J=5.8Hz,1H),8.28-8.00(m,2H),7.93-7.74(m,2H),7.67-7.41(m,3H),5.35(d,J=5.3Hz,1H),3.80(s,3H),2.83(br.s.,1H),2.44(d,J=1.0Hz,3H),2.23(br.s.,1H),2.09-1.85(m,1H),1.81-1.42(m,3H),1.26(d,J=18.1Hz,1H),0.99(d,J=7.0Hz,3H),0.62-0.42(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:624.2(M+H)+。分析性HPLCRT=5.79分钟(方法A)。
实施例88
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-13-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
88A.(S,E)-N-((4-氯吡啶-2-基)亚甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺：Angew.Chem.Int.Ed.2009,48,914-917。经10分钟时段向(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(5g，41.3mmol)和Cs2CO3(20.16g，61.9mmol)于DCM(100mL)中的经搅拌悬浮液中逐滴添加4-氯吡啶-2-甲醛(5.84g，41.3mmol)于DCM(50mL)中的溶液。接着在室温搅拌溶液2小时。用EtOAc(50mL)稀释反应混合物且用盐水(20mL×3)洗涤。经MgSO4干燥有机层且浓缩，得到呈棕色稠厚油状的所需产物(9.56g，95%)。MS(ESI)m/z:246.9(M+H)+。
88B.(S)-N-((1S,2R)-1-(4-氯吡啶-2-基)-2-甲基丁-3-烯基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺：在-78℃经1小时时段向88A(1.7g，6.95mmol)于THF(50mL)中的溶液中逐滴添加氯化1-甲基-2-丙烯基镁(0.5MTHF溶液)(13.89mL，6.95mmol)。在-78℃搅拌所得溶液0.5小时且在室温搅拌过夜。将反应混合物冷却至0℃且用饱和NH4Cl淬灭。用EtOAc(3×)萃取混合物。浓缩合并的有机层且通过硅胶色谱纯化，得到呈粗米色油状的所需产物(1.27g，61%)。1HNMR指示非对映异构体的约4:1混合物，其中主要非对映异构体对应于标题化合物。MS(ESI)m/z:301.1(M+H)+。
88C.(1S,2R)-1-(4-氯吡啶-2-基)-2-甲基丁-3-烯基氨基甲酸叔丁酯：在0℃向88B(1.27g，4.22mmol)于MeOH(20mL)中的溶液中添加HCl(5.28mL，21.11mmol)(4M二噁烷溶液)。使反应混合物升温至室温且搅拌1小时。浓缩混合物且添加Et2O。过滤黄色悬浮液，用Et2O洗涤且干燥。将上述固体溶解于DCM(20mL)和Et3N(2.354mL，16.89mmol)中且冷却至0℃。添加BOC2O(0.980mL，4.22mmol)且在室温搅拌反应混合物2小时。用饱和NaHCO3稀释反应混合物且用DCM(2×)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，得到呈白色固体状的所需产物(1g，80%产率)。MS(ESI)m/z:297.1(M+H)+。
88D.(1S,2R)-1-(4-(2-氨基-4-硝基苯基)吡啶-2-基)-2-甲基丁-3-烯基氨基甲酸叔丁酯：向20mL微波小瓶中添加88C(0.25g，0.842mmol)、2-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧硼杂环己烷-2-基)-5-硝基苯胺(0.253g，1.011mmol)、磷酸三钾(0.358g，1.685mmol)、水(0.076mL，4.21mmol)和DMSO(4.21mL)。用N2使混合物鼓泡5分钟且添加PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(0.069g，0.084mmol)。密封小瓶且在90℃加热3小时且接着在室温搅拌2天。将混合物分配于EtOAc与盐水之间。用EtOAc萃取水层。浓缩合并的有机层且通过硅胶色谱纯化，得到呈黄色泡沫状的所需产物(0.27g，80%)。MS(ESI)m/z:399.1(M+H)+。
88E.((1S,2R)-1-(4-(2,4-二氨基苯基)吡啶-2-基)-2-甲基丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯：向88D(0.27g，0.678mmol)于甲醇(6.78mL)中的澄清橙色溶液中添加锌(0.443g，6.78mmol)和NH4Cl(0.362g，6.78mmol)。所得的黄橙色悬浮液在几分钟后变得澄清且在室温搅拌1小时。过滤反应混合物且用MeOH洗涤。浓缩滤液。用EtOAc稀释残余物且用饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤且浓缩，得到呈微棕色泡沫状的所需产物(0.25，100%)。MS(ESI)m/z:369.2(M+H)+。
88F.N-[(1S)-1-(4-{2-氨基-4-[(甲氧羰基)氨基]苯基}吡啶-2-基)-2-甲基丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯：在-78℃向88E(0.25g，0.678mmol)和吡啶(0.055mL，0.678mmol)于DCM(6.78ml)中的澄清橙色溶液中逐滴添加氯碳酸甲酯(0.047mL，0.611mmol)。在-78℃搅拌反应混合物1小时且用饱和NH4Cl淬灭。用EtOAc和水稀释反应混合物。用EtOAc萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩，得到呈棕色玻璃状的所需产物(0.3g，100%)。MS(ESI)m/z:427.1(M+H)+。
88G.N-[(1S)-1-{4-[2-(丁-3-烯酰氨基)-4-[(甲氧羰基)氨基]苯基]吡啶-2-基}-2-甲基丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯：在0℃向88F(100mg，0.234mmol)和丁-3-烯酸(0.020mL，0.234mmol)于吡啶(1mL)中的溶液中添加POCl3(0.044mL，0.469mmol)。在0℃搅拌所得橙色溶液10分钟且用DCM稀释。用NaHCO3水溶液、盐水洗涤混合物且浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，得到呈米色泡沫状的所需产物(52mg，45%)。MS(ESI)m/z:495.1(M+H)+。
88H.N-[(11E,14S)-5-[(甲氧羰基)氨基]-13-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,11,15,17-七烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯：用N2使88G(89mg，0.180mmol)于甲苯(20mL)中的溶液鼓泡10分钟。添加格拉布II催化剂(61.1mg，0.072mmol)且在微波条件下于160℃加热反应混合物20分钟。浓缩反应混合物且通过反相HPLC纯化，分离出所需产物(10mg，12%)。MS(ESI)m/z:467.1(M+H)+。
88I.N-[(14S)-14-氨基-13-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯盐酸盐：向88H(10mg，0.021mmol)于MeOH中的溶液中添加氧化铂(IV)(9mg，0.040mmol)。将混合物排空，用H2(3×)吹扫，且接着添加50psiH2过夜。过滤混合物且浓缩滤液。用1mLHCl(4N二噁烷溶液)处理残余物且在室温搅拌1小时。浓缩混合物，得到所需产物(10mg，23%)。MS(ESI)m/z:369.2(M+H)+。
实施例88.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-13-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：向88I(10mg，0.023mmol)、中间体21(6.95mg，0.027mmol)、HOBT(5.20mg，0.034mmol)和EDC(6.52mg，0.034mmol)于DMF(1mL)中的溶液中添加DIEA(0.040mL，0.227mmol)。在室温搅拌所得溶液过夜。用NaHCO3水溶液淬灭反应且接着用DCM(2×30mL)萃取。浓缩合并的有机层且通过反相HPLC纯化，得到呈白色固体状的所需产物(2.5mg，18%)。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.61(d,J=5.0Hz,1H),7.81(td,J=7.5,1.5Hz,1H),7.65-7.32(m,7H),5.48(s,1H),5.04(d,J=10.8Hz,1H),3.76(s,3H),2.64-2.54(m,1H),2.52-2.42(m,3H),2.18-2.03(m,1H),1.82(d,J=11.3Hz,3H),1.43-1.26(m,3H),1.21(d,J=7.0Hz,2H),1.07(d,J=7.0Hz,1H),0.90(d,J=6.8Hz,1H),0.72(br.s.,1H)ppm。MS(ESI)m/z:606.2(M+H)+。分析性HPLCRT=5.40分钟(方法A)。
实施例89
N-[(10R,14S)-5-氨基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺双三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001891
89A.N-[(10R,14S)-5-氨基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯：向2L(0.9g，1.921mmol)于MeOH(29.6ml)中的悬浮液中添加1NNaOH(11.53ml，11.53mmol)。在密封管中于75℃搅拌反应混合物过夜。将反应混合物冷却至室温且浓缩。将残余物分配于15%IPA/CHCl3与水之间。用盐水洗涤有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到呈棕色固体状的所需产物(0.79g，100%)。MS(ESI)m/z:411.1(M+H)+。
89B.(10R,14S)-5,14-二氨基-10-甲基-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-9-酮：用HCl(4M1,4-二噁烷溶液)(10mL，40.0mmol)处理89A(0.75g，1.827mmol)且在室温搅拌反应混合物1小时。过滤黄色悬浮液，用己烷冲洗且干燥，得到所需产物(0.87g，100%)。MS(ESI)m/z:311.1(M+H)+。
实施例89.N-[(10R,14S)-5-氨基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺双三氟乙酸盐：在室温搅拌中间体21(0.229g，0.896mmol)、89B(0.45g，0.943mmol)、EDC(0.362g，1.887mmol)、HOBT(0.289g，1.887mmol)和许尼希碱(0.824mL，4.72mmol)于DMF(6.29mL)中的黄色溶液过夜。用水淬灭反应。过滤所得黄色悬浮液，干燥且通过反相HPLC纯化，分离出呈黄色泡沫状的所需产物(0.454g，62%)。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.62(d,J=6.3Hz,1H),8.22(d,J=1.9Hz,1H),7.87(dd,J=6.2,1.8Hz,1H),7.82(ddd,J=8.3,6.8,1.7Hz,1H),7.56(ddd,J=8.0,6.5,1.7Hz,1H),7.51(d,J=8.5Hz,1H),7.48-7.44(m,1H),6.80(dd,J=8.5,2.2Hz,1H),6.61(d,J=2.2Hz,1H),5.35(dd,J=11.3,6.1Hz,1H),2.83-2.75(m,1H),2.43(d,J=0.8Hz,3H),2.29-2.19(m,1H),2.09-1.96(m,2H),1.73-1.52(m,2H),0.98(d,J=6.9Hz,3H),0.60-0.49(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:548.1(M+H)+。分析性HPLCRT=3.99分钟(方法A)。
实施例89(替代性二盐酸盐)：将实施例89(0.067g，0.086mmol)溶解于1.25MHCl的MeOH溶液(1mL，1.250mmol)中且接着浓缩。再一次重复该过程，得到呈黄色固体状的所需产物(55mg，100%)。
实施例90
N-[(10R,14S)-5-氨基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺双三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001911
实施例90.N-[(10R,14S)-5-氨基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺双三氟乙酸盐：以与实施例89相同的方式，通过用中间体25替换中间体21来制备实施例90。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.58(d,J=6.3Hz,1H),8.31(s,1H),8.19(d,J=1.9Hz,1H),7.85(dd,J=6.2,1.8Hz,1H),7.72(ddd,J=8.3,6.8,1.7Hz,1H),7.49(d,J=8.5Hz,1H),7.46(ddd,J=8.0,6.5,1.7Hz,1H),7.41-7.36(m,1H),6.77(dd,J=8.5,2.2Hz,1H),6.58(d,J=2.2Hz,1H),5.22(dd,J=11.4,5.9Hz,1H),2.81-2.74(m,1H),2.35(d,J=1.1Hz,3H),2.25-2.16(m,1H),2.04-1.95(m,2H),1.71-1.61(m,1H),1.61-1.50(m,1H),0.98(d,J=6.9Hz,3H),0.61-0.51(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:547.3(M+H)+。分析性HPLCRT=4.57分钟(方法D)。
实施例91
N-[(10S,14S)-5-氨基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺双三氟乙酸盐
实施例91.N-[(10S,14S)-5-氨基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺双三氟乙酸盐：以与实施例90相同的方式，通过使用另一异构体来制备实施例91。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.58(d,J=6.1Hz,1H),8.29(s,1H),8.09(s,1H),7.83(dd,J=6.2,1.8Hz,1H),7.71(ddd,J=8.2,6.7,1.7Hz,1H),7.52(d,J=8.5Hz,1H),7.45(ddd,J=8.0,6.5,1.7Hz,1H),7.40-7.35(m,1H),6.79(dd,J=8.5,2.2Hz,1H),6.60(d,J=2.2Hz,1H),5.13(dd,J=11.3,5.2Hz,1H),2.46-2.38(m,1H),2.36(d,J=0.8Hz,3H),2.23-2.14(m,1H),2.07-1.98(m,1H),1.80-1.70(m,1H),1.66-1.56(m,1H),1.31-1.22(m,4H),1.06-0.95(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:547.3(M+H)+。分析性HPLCRT=4.45分钟(方法D)。
实施例92
N-[(10R,14S)-5-氨基-10-甲基-9-氧代-8,18-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
实施例92.N-[(10R,14S)-5-氨基-10-甲基-9-氧代-8,18-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：以与实施例89相同的方式，通过在步骤2A中用2-溴吡啶-4-甲醛替换4-氯吡啶-2-甲醛且用中间体25替换中间体21来制备实施例92。1HNMR(500MHz,乙腈-d3)δ8.68(d,J=6.33Hz,1H),8.29(s,1H),8.14(s,1H),8.12(d,J=1.65Hz,1H),7.65-7.73(m,1H),7.51(s,1H),7.49(s,1H),7.45(ddd,J=1.79,6.60,8.12Hz,1H),7.34-7.40(m,1H),7.31(d,J=5.78Hz,1H),6.72(dd,J=2.20,8.53Hz,1H),6.53(d,J=2.20Hz,1H),5.16(td,J=5.95,11.49Hz,1H),2.61-2.72(m,1H),2.35(d,J=1.10Hz,3H),2.07-2.15(m,1H),1.93-1.98(m,2H),1.88-1.93(m,1H),1.42-1.62(m,2H),0.93(d,J=6.88Hz,3H),0.55-0.65(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:547.5(M+H)+。分析性HPLCRT=5.43分钟(方法A)。
实施例93
N-[(10R,14S)-5-氨基-10-甲基-9-氧代-8,18-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-咪唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001931
实施例93.N-[(10R,14S)-5-氨基-10-甲基-9-氧代-8,18-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-咪唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：以与实施例92相同的方式，通过用中间体24替换中间体25来制备实施例93。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.61(d,J=6.3Hz,1H),8.21(d,J=1.9Hz,1H),7.86(dd,J=6.3,1.9Hz,1H),7.83(s,1H),7.73(ddd,J=8.3,6.7,1.8Hz,1H),7.50(d,J=8.3Hz,1H),7.47-7.43(m,1H),7.42-7.37(m,1H),6.78(dd,J=8.5,2.2Hz,1H),6.59(d,J=2.2Hz,1H),5.28(dd,J=11.3,6.1Hz,1H),2.82-2.75(m,1H),2.32(br.s,3H),2.27-2.17(m,1H),2.04-1.95(m,2H),1.73-1.63(m,1H),1.63-1.52(m,1H),0.98(d,J=7.2Hz,3H),0.58-0.48(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:547.3(M+H)+。分析性HPLCRT=4.66分钟(方法D)。
实施例94
1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-5-[(甲基氨基甲酰基)氨基]-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001932
实施例94.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-5-[(甲基氨基甲酰基)氨基]-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：向实施例89(0.02g，0.026mmol)于DCM(1mL)和乙腈(1mL)中的溶液中添加碳酸氢钠(6.49mg，0.077mmol)。在氩气下将混合物冷却至0℃，且接着添加光气溶液(20%甲苯溶液)(0.041mL，0.077mmol)。在0℃搅拌混合物30分钟且浓缩。在氩气下将残余物溶解于乙腈(1mL)和DCM(1mL)中且冷却至0℃。添加甲胺盐酸盐(5.22mg，0.077mmol)和TEA(7.18μL，0.052mmol)。在0℃搅拌所得混浊混合物30分钟，且接着在室温搅拌过夜。浓缩反应混合物且通过反相HPLC纯化残余物，得到呈黄色固体状的所需产物(8mg，43%)。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.73(d,J=6.3Hz,1H),8.26(d,J=1.7Hz,1H),7.92(dd,J=6.2,1.8Hz,1H),7.82(ddd,J=8.3,6.8,1.7Hz,1H),7.62(d,J=8.5Hz,1H),7.58-7.53(m,2H),7.49-7.41(m,2H),5.37(dd,J=11.3,6.1Hz,1H),2.83-2.75(m,4H),2.43(d,J=0.8Hz,3H),2.30-2.21(m,1H),2.08-1.92(m,2H),1.70-1.50(m,2H),0.97(d,J=7.2Hz,3H),0.57-0.45(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:605.1(M+H)+。分析性HPLCRT=5.50分钟(方法A)。
实施例95
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸丙-2-基酯三氟乙酸盐
实施例95.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸丙-2-基酯三氟乙酸盐：在0℃向实施例89(0.025g，0.032mmol)、吡啶(0.013mL，0.161mmol)于DCM(1mL)中的溶液中添加氯甲酸异丙酯(1M甲苯溶液)(0.097mL，0.097mmol)。在室温搅拌反应混合物1小时且用MeOH淬灭。浓缩混合物且通过反相HPLC纯化，得到呈白色固体状的所需产物(0.015g，61%)。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.75(d,J=6.1Hz,1H),8.27(d,J=1.4Hz,1H),7.94(dd,J=6.1,1.9Hz,1H),7.81(ddd,J=8.2,6.8,1.5Hz,1H),7.64(d,J=8.5Hz,1H),7.59-7.50(m,3H),7.48-7.43(m,1H),5.37(dd,J=11.3,6.1Hz,1H),4.99(spt,J=6.2Hz,1H),2.82-2.75(m,1H),2.42(d,J=0.8Hz,3H),2.31-2.21(m,1H),2.10-1.92(m,2H),1.70-1.51(m,2H),1.32(d,J=6.3Hz,6H),0.97(d,J=6.9Hz,3H),0.57-0.45(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:634.2(M+H)+。分析性HPLCRT=6.86分钟(方法A)。
表8中的以下实施例是以与实施例95中所示相同的方式来制备。氯甲酸酯可来自商业来源或由相应醇和各种试剂(诸如光气、三光气)产生。也可用通过用氯甲酸4-硝基苯酯处理醇而活化的醇替换氯甲酸酯。
Figure BDA0000487247700001951
表8
Figure BDA0000487247700001952
Figure BDA0000487247700001971
实施例135
1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-[(二甲基氨基甲酰基)氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001972
实施例135.1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-[(二甲基氨基甲酰基)氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：以与实施例94相同的方式，通过用二甲胺盐酸盐替换甲胺盐酸盐来制备实施例135。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.74(d,J=6.1Hz,1H),8.27(d,J=1.7Hz,1H),7.94(dd,J=6.2,1.8Hz,1H),7.82(ddd,J=8.1,6.7,1.7Hz,1H),7.64(d,J=8.5Hz,1H),7.58-7.51(m,3H),7.48-7.44(m,1H),5.37(dd,J=11.4,6.2Hz,1H),3.06(s,6H),2.83-2.75(m,1H),2.43(d,J=1.1Hz,3H),2.26(m,1H),2.10-1.92(m,2H),1.70-1.51(m,2H),0.97(d,J=6.9Hz,3H),0.58-0.46(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:619.1(M+H)+。分析性HPLCRT=5.64分钟(方法A)。
实施例136
1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-甲烷磺酰氨基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001981
实施例136.1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-甲烷磺酰氨基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：在0℃向实施例89(替代，盐酸盐)(0.012g，0.019mmol)于吡啶(0.5mL，6.18mmol)和DCM(1mL)中的溶液中添加甲烷磺酰氯(2.3μL，0.029mmol)。在0℃搅拌反应混合物1小时且浓缩。通过反相HPLC纯化残余物，得到呈白色固体状的所需产物(10mg，69%产率)。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.74(d,J=5.8Hz,1H),8.07(d,J=1.4Hz,1H),7.84-7.76(m,2H),7.66(d,J=8.5Hz,1H),7.56(ddd,J=8.0,6.5,1.7Hz,1H),7.48-7.43(m,1H),7.32(dd,J=8.4,2.3Hz,1H),7.23(d,J=2.5Hz,1H),5.34(dd,J=11.1,5.9Hz,1H),3.08(s,3H),2.79-2.72(m,1H),2.44(d,J=0.8Hz,3H),2.27-2.17(m,1H),2.02-1.89(m,2H),1.64-1.47(m,2H),0.96(d,J=6.9Hz,3H),0.54-0.43(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:626.1(M+H)+。分析性HPLCRT=6.02分钟(方法A)。
实施例137
1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-9-氧代-5-(三氟乙酰氨基)-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001991
实施例137.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-9-氧代-5-(三氟乙酰氨基)-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：以与实施例136相同的方式，通过使用实施例89来制备实施例137。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.74(d,J=5.8Hz,1H),8.02(s,1H),7.82(ddd,J=8.1,6.7,1.7Hz,1H),7.78-7.69(m,4H),7.56(ddd,J=8.1,6.5,1.7Hz,1H),7.48-7.43(m,1H),5.34(dd,J=11.1,5.9Hz,1H),2.79-2.72(m,1H),2.44(d,J=0.8Hz,3H),2.25-2.16(m,1H),2.00-1.89(m,2H),1.62-1.45(m,2H),0.96(d,J=6.9Hz,3H),0.54-0.43(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:644.2(M+H)+。分析性HPLCRT=7.07分钟(方法A)。
实施例138
1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-乙酰氨基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700001992
实施例138.1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-乙酰氨基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：以与实施例136相同的方式，通过用乙酰氯替换甲烷磺酰氯来制备实施例138。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.75(d,J=6.1Hz,1H),8.22(d,J=1.4Hz,1H),7.91(dd,J=6.1,1.7Hz,1H),7.82(ddd,J=8.3,6.8,1.7Hz,1H),7.76(d,J=1.9Hz,1H),7.69-7.65(m,1H),7.60(dd,J=8.5,2.2Hz,1H),7.56(ddd,J=8.1,6.5,1.7Hz,1H),7.46(td,J=8.2,1.5Hz,1H),5.36(dd,J=11.3,6.1Hz,1H),2.81-2.74(m,1H),2.43(d,J=1.1Hz,3H),2.31-2.20(m,1H),2.17(s,3H),2.07-1.90(m,2H),1.67-1.50(m,2H),0.97(d,J=7.2Hz,3H),0.56-0.45(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:590.2(M+H)+。分析性HPLCRT=5.63分钟(方法A)。
实施例139
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸氟甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002001
139A.氟甲酸氟甲酯：在密封管中于室温搅拌氯甲酸氯甲酯(0.16g，1.241mmol)、氟化钾(0.29g，4.99mmol)和18-冠-6(0.1g，0.378mmol)于乙腈(2.5mL)中的混合物过夜。混合物未经进一步纯化而以0.5M溶液形式用于下一步中。
实施例139.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸氟甲酯三氟乙酸盐：以与实施例136相同的方式，通过用139A替换甲烷磺酰氯来制备实施例139。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.77(d,J=6.3Hz,1H),8.28(d,J=1.7Hz,1H),7.95(dd,J=6.1,1.9Hz,1H),7.82(ddd,J=8.3,6.9,1.7Hz,1H),7.69(d,J=8.5Hz,1H),7.62(s,1H),7.59-7.54(m,2H),7.46(td,J=8.1,1.4Hz,1H),5.86-5.83(m,1H),5.76-5.72(m,1H),5.37(dd,J=11.3,6.1Hz,1H),2.83-2.75(m,1H),2.42(d,J=0.8Hz,3H),2.30-2.21(m,1H),2.10-1.91(m,2H),1.70-1.51(m,2H),0.97(d,J=6.9Hz,3H),0.54-0.43(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:624.2(M+H)+。分析性HPLCRT=6.44分钟(方法A)。
实施例140
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,18-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸氟甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002011
实施例140.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,18-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸氟甲酯三氟乙酸盐：以与实施例139相同的方式，通过用实施例92替换实施例89来制备实施例140。1HNMR(500MHz,乙腈-d3)δ8.62(d,J=5.78Hz,1H),8.22(s,1H),8.02(s,1H),8.00(s,1H),7.84(s,1H),7.66(d,J=8.53Hz,1H),7.57(ddd,J=1.79,6.74,8.25Hz,1H),7.38-7.41(m,2H),7.30-7.35(m,2H),7.21-7.28(m,1H),7.14(d,J=6.05Hz,1H),5.00(td,J=5.88,11.62Hz,1H),4.58-4.61(m,1H),4.48-4.51(m,1H),4.30-4.33(m,1H),4.25-4.28(m,1H),2.55(dt,J=2.75,6.46Hz,1H),2.24(d,J=1.10Hz,3H),1.91-2.01(m,2H),1.68-1.80(m,3H),1.41(dt,J=6.33,12.79Hz,1H),1.27-1.36(m,1H),0.82(d,J=6.88Hz,2H),0.46-0.59(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:637.6(M+H)+。分析性HPLCRT=6.09分钟(方法A)。
实施例141
1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-(2-甲氧基乙酰氨基)-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002021
实施例141.1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-(2-甲氧基乙酰氨基)-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：以与实施例136相同的方式，通过用2-甲氧基乙酰氯替换甲烷磺酰氯来制备实施例141。1HNMR(500MHz,乙腈-d3)δ8.63-8.69(m,1H),8.60(d,J=5.78Hz,1H),8.36(d,J=7.15Hz,1H),8.17(s,1H),7.85(s,1H),7.67(ddd,J=1.65,6.88,8.25Hz,1H),7.64(s,1H),7.46-7.53(m,3H),7.38-7.44(m,1H),7.29-7.35(m,1H),5.24(td,J=6.53,10.87Hz,1H),3.91(s,3H),3.38(s,3H),2.51-2.58(m,2H),2.33(s3H),1.97-2.09(m,2H),1.30-1.44(m,2H),0.81(d,J=6.88Hz,3H),0.30-0.35(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:620.6(M+H)+。分析性HPLCRT=6.06分钟(方法A)。
实施例142
1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10S,14S)-5-(2-甲氧基乙酰氨基)-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
实施例142.1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10S,14S)-5-(2-甲氧基乙酰氨基)-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：以与实施例141相同的方式，通过使用另一异构体来制备实施例142。1HNMR(500MHz,乙腈-d3)δ8.66(s,1H),8.61(d,J=5.50Hz,1H),8.35(d,J=6.60Hz,1H),7.93(s,1H),7.65-7.69(m,2H),7.64(d,J=2.20Hz,1H),7.56(dd,J=2.20,8.53Hz,1H),7.46-7.50(m,2H),7.41(ddd,J=1.65,6.53,8.05Hz,1H),7.33(dt,J=1.51,8.18Hz,1H),5.18(td,J=5.61,11.62Hz,1H),3.90(s,3H),3.36(s,3H),2.34(d,J=1.10Hz,3H),2.02-2.17(m,2H),1.74-1.81(m,1H),1.56-1.67(m,1H),1.25-1.37(m,2H),1.09(d,J=7.15Hz,3H),0.74-0.87(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:620.6(M+H)+。分析性HPLCRT=6.11分钟(方法A)。
实施例143
1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-9-氧代-5-(2-氧代丙酰氨基)-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002031
实施例143.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-9-氧代-5-(2-氧代丙酰氨基)-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：以与实施例136相同的方式，通过用2-氧代丙酰氯替换甲烷磺酰氯来制备实施例143。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.72(d,J=5.2Hz,1H),7.91(td,J=7.6,1.5Hz,1H),7.85(s,1H),7.82-7.77(m,2H),7.72-7.67(m,1H),7.64-7.57(m,2H),7.51(td,J=8.3,1.4Hz,1H),5.25(dd,J=10.6,5.6Hz,1H),2.71-2.62(m,1H),2.44(s,3H),2.40(s,3H),2.05-1.96(m,1H),1.89-1.78(m,2H),1.47-1.24(m,2H),0.82(d,J=6.9Hz,3H),0.31-0.20(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:618.1(M+H)+。分析性HPLCRT=6.34分钟(方法A)。
实施例144
1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-(2-羟基丙酰氨基)-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002041
实施例144.1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-(2-羟基丙酰氨基)-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：向实施例143(0.019g，0.026mmol)于MeOH(1mL)中的溶液中添加硼氢化钠(2mg，0.052mmol)。在室温搅拌反应混合物1小时且浓缩。通过反相HPLC纯化残余物，得到呈黄色固体状的所需产物(8mg，40%)。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.75(d,J=5.8Hz,1H),8.17(s,1H),7.86(dd,J=5.9,1.8Hz,1H),7.84-7.79(m,2H),7.73-7.65(m,2H),7.56(ddd,J=8.1,6.5,1.7Hz,1H),7.46(td,J=8.1,1.4Hz,1H),5.36(dd,J=11.1,5.9Hz,1H),4.29(q,J=6.9Hz,1H),2.81-2.74(m,1H),2.43(d,J=0.8Hz,3H),2.28-2.19(m,1H),2.05-1.91(m,2H),1.66-1.49(m,2H),1.45(d,J=6.9Hz,3H),0.97(d,J=7.2Hz,3H),0.56-0.44(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:620.2(M+H)+。分析性HPLCRT=5.62分钟(方法A)。
实施例145
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸2-羟基丙酯三氟乙酸盐
145A.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸2-氧代丙酯：向实施例89(0.02g，0.032mmol)于DCM(1mL)和乙腈(1mL)中的溶液中添加碳酸氢钠(8.12mg，0.097mmol)。在氩气下将混合物冷却至0℃，且接着添加光气溶液(20%甲苯溶液)(0.051mL，0.097mmol)。再过2小时后，浓缩反应混合物。将残余物溶解于乙腈(1mL)和DCM(1mL)中且在氩气下冷却至0℃。添加1-羟基丙-2-酮(7.2mg，0.097mmol)和TEA(9μL，0.064mmol)且在0℃搅拌所得混浊混合物30分钟，接着在室温搅拌过夜。浓缩反应混合物且通过反相HPLC纯化，分离出呈黄色固体状的所需产物(11mg，18%)。MS(ESI)m/z:648.2(M+H)+。
实施例145.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸2-羟基丙酯三氟乙酸盐：向145A(0.011g，5.77μmol)于MeOH(1mL)中的溶液中添加NaBH4(0.655mg，0.017mmol)。在室温搅拌反应混合物1小时且浓缩。通过反相HPLC纯化残余物，得到呈黄色固体状的所需产物(2mg，44%产率)。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.71(d,J=5.8Hz,1H),8.05(s,1H),7.82(ddd,J=8.3,6.8,1.7Hz,1H),7.75(dd,J=5.8,1.7Hz,1H),7.61(d,J=8.5Hz,1H),7.58-7.54(m,2H),7.51(dt,J=8.5,2.1Hz,1H),7.46(td,J=8.2,1.5Hz,1H),5.34(dd,J=11.3,5.8Hz,1H),4.12-3.99(m,3H),2.80-2.72(m,1H),2.44(d,J=0.8Hz,3H),2.25-2.16(m,1H),2.01-1.91(m,2H),1.65-1.46(m,2H),1.23(d,J=6.3Hz,3H),0.97(d,J=7.2Hz,3H),0.54-0.43(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:650.2(M+H)+。分析性HPLCRT=5.77分钟(方法A)。
实施例146
2-{[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酰基}乙酸叔丁酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002051
实施例146.2-{[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酰基}乙酸叔丁酯三氟乙酸盐：向实施例89(0.02g，0.026mmol)于DMF(1mL)中的溶液中添加3-(叔丁氧基)-3-氧代丙酸(0.012g，0.077mmol)、EDC(9.88mg，0.052mmol)、HOBT(7.89mg，0.052mmol)和DIPEA(0.023mL，0.129mmol)。在室温搅拌反应混合物过夜且在55℃搅拌2小时。将混合物冷却至室温且浓缩。通过反相HPLC纯化残余物，得到呈白色固体状的所需产物(12mg，57%)。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.76(d,J=6.1Hz,1H),8.25(d,J=1.7Hz,1H),7.93(dd,J=6.1,1.9Hz,1H),7.81(ddd,J=8.3,6.8,1.7Hz,1H),7.76(d,J=1.9Hz,1H),7.69(d,J=8.3Hz,1H),7.62(dd,J=8.4,2.1Hz,1H),7.56(ddd,J=8.1,6.5,1.7Hz,1H),7.46(td,J=8.1,1.4Hz,1H),5.37(dd,J=11.3,6.1Hz,1H),3.43(s,2H),2.82-2.74(m,1H),2.43(d,J=0.8Hz,3H),2.30-2.20(m,1H),2.08-1.90(m,2H),1.68-1.43(m,11H),0.97(d,J=6.9Hz,3H),0.56-0.45(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:690.3(M+H)+。分析性HPLCRT=7.03分钟(方法A)。
实施例147
1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-[(E)-2-氰基-1-甲基亚氨代氨基甲酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002061
147A.1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-{[(1Z)-(氰基亚氨基)(苯氧基)甲基]氨基}-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺：在室温于压力测试小瓶中搅拌实施例89(替代，盐酸盐)(10mg，0.016mmol)、吡啶(10.42μl，0.129mmol)和氰基亚氨代碳酸二苯酯(7.67mg，0.032mmol)于2-丙醇(0.15mL)中的混合物2小时。浓缩反应混合物，得到呈油状固体状的产物(11mg，99%)。MS(ESI)m/z:692.7(M+H)+。
实施例147.1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-[(E)-2-氰基-1-甲基亚氨代氨基甲酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：在室温于压力测试小瓶中搅拌147A(11mg，0.016mmol)和单甲胺(0.795mL，1.589mmol)于2-丙醇(0.2mL)中的混合物1小时。再添加单甲胺(0.795mL，1.589mmol)且在室温再搅拌反应混合物1小时。浓缩反应混合物且通过反相HPLC纯化，得到呈白色固体状的所需产物(6.2mg，95%)。1HNMR(500MHz,乙腈-d3)δ8.62(d,J=5.78Hz,1H),8.39(d,J=6.88Hz,1H),8.25(s,1H),7.90(s,1H),7.67(ddd,J=1.51,6.88,8.12Hz,1H),7.56(dd,J=1.38,5.78Hz,1H),7.51(d,J=8.53Hz,1H),7.46(br.s.,1H),7.42(ddd,J=1.65,6.53,8.05Hz,1H),7.33(dt,J=1.38,8.12Hz,1H),7.28(dd,J=1.79,8.39Hz,1H),7.23(br.s.,1H),5.96(d,J=3.58Hz,1H),5.26(td,J=6.57,11.07Hz,1H),2.80(d,J=4.68Hz,3H),2.52-2.60(m,2H),2.33(s,2H),2.01-2.09(m,2H),1.90-1.99(m,2H),1.77(t,J=12.10Hz,1H),1.33-1.46(m,2H),0.81(d,J=6.88Hz,3H),0.24-0.36(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:629.6(M+H)+。分析性HPLCRT=5.92分钟(方法A)。
实施例148
1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10S,14S)-5-[(E)-2-氰基-1-甲基亚氨代氨基甲酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
实施例148.1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10S,14S)-5-[(E)-2-氰基-1-甲基亚氨代氨基甲酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：以与实施例147相同的方式，通过使用另一异构体来制备实施例148。1HNMR(500MHz,乙腈-d3)δ8.62(d,J=5.50Hz,1H),8.33(d,J=6.88Hz,1H),7.88(s,1H),7.64-7.70(m,1H),7.61(s,1H),7.50(d,J=8.25Hz,1H),7.39-7.46(m,2H),7.30-7.36(m,2H),7.26(br.s.,1H),5.90(br.s.,1H),5.13-5.20(m,1H),2.80(d,J=4.95Hz,3H),2.42(d,J=6.05Hz,1H),2.35(d,J=0.55Hz,3H),2.03-2.18(m,2H),1.67-1.78(m,2H),1.66-1.60(m,1H),1.25-1.35(m,4H),1.08(d,J=7.15Hz,3H),0.88-83(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:629.6(M+H)+。分析性HPLCRT=5.90分钟(方法A)。
实施例149
1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-{[6-(甲氧基甲基)嘧啶-4-基]氨基}-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002081
实施例149.1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-{[6-(甲氧基甲基)嘧啶-4-基]氨基}-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：在微波条件下于150℃加热实施例89(替代，盐酸盐)(0.01g，0.016mmol)、4-氯-6-(甲氧基甲基)嘧啶(7.66mg，0.048mmol)和DIPEA(0.014mL，0.081mmol)于IPA(0.5mL)中的溶液30分钟。将反应混合物冷却至室温且浓缩。通过反相HPLC纯化残余物，得到呈黄色固体状的所需产物(5mg，33%)。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.80(d,J=0.8Hz,1H),8.76(d,J=5.8Hz,1H),8.06(d,J=1.1Hz,1H),7.84-7.73(m,5H),7.56(ddd,J=8.0,6.5,1.7Hz,1H),7.46(td,J=8.1,1.4Hz,1H),7.04(d,J=0.8Hz,1H),5.35(dd,J=11.1,5.9Hz,1H),4.58(d,J=0.6Hz,2H),3.53(s,3H),2.80-2.73(m,1H),2.44(d,J=0.8Hz,3H),2.26-2.17(m,1H),2.02-1.90(m,2H),1.64-1.47(m,2H),0.97(d,J=6.9Hz,3H),0.55-0.45(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:670.3(M+H)+。分析性HPLCRT=4.94分钟(方法A)。
实施例150
1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-[(E)-[(二甲氨基)亚甲基]氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002091
实施例150.1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-[(E)-[(二甲氨基)亚甲基]氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：在120℃搅拌实施例89(替代，盐酸盐)(0.01g，0.016mmol)、2-溴丙酸乙酯(4.37mg，0.024mmol)、KI(0.802mg，4.83μmol)和K2CO3(6.68mg，0.048mmol)于DMF(0.5mL)中的溶液5小时。将反应混合物冷却至室温且通过反相HPLC纯化，分离出呈黄色固体状的产物(3.5mg，26%)。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.80-8.70(m,2H),8.00(br.s.,1H),7.85-7.72(m,3H),7.60-7.50(m,2H),7.49-7.43(m,1H),7.35(d,J=2.5Hz,1H),5.33(dd,J=10.7,5.8Hz,1H),3.48(s,3H),3.34(s,3H),2.78-2.71(m,1H),2.44(d,J=0.8Hz,3H),2.26-2.16(m,1H),2.01-1.86(m,2H),1.62-1.44(m,2H),0.97(d,J=7.2Hz,3H),0.60-0.47(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:603.2(M+H)+。分析性HPLCRT=3.93分钟(方法A)。
使用类似于实施例149中所述的方法的方法来合成表9中的以下实施例。
表9
Figure BDA0000487247700002093
Figure BDA0000487247700002101
实施例156
2-{[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,1六烯-5-基]氨基}乙酸乙酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002102
实施例156.2-{[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基}乙酸乙酯三氟乙酸盐：向实施例89(替代，盐酸盐)(0.013g，0.021mmol)和2-氧代乙酸乙酯(6.23μl，0.031mmol)于MeOH(0.5mL)中的溶液中添加乙酸(1.2μL，0.021mmol)，继而添加氰基硼氢化钠(1.3mg，0.021mmol)。在室温搅拌反应混合物2小时且浓缩。通过反相HPLC纯化残余物，得到呈黄色固体状的所需产物(11mg，59%)。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.63(d,J=6.3Hz,1H),8.24(d,J=1.9Hz,1H),7.88(dd,J=6.2,1.8Hz,1H),7.82(ddd,J=8.1,6.7,1.7Hz,1H),7.58-7.52(m,2H),7.46(td,J=8.1,1.4Hz,1H),6.72(dd,J=8.7,2.3Hz,1H),6.51(d,J=2.5Hz,1H),5.36(dd,J=11.6,6.1Hz,1H),4.22(q,J=7.0Hz,2H),4.02(s,2H),2.84-2.75(m,1H),2.43(d,J=0.8Hz,3H),2.30-2.19(m,1H),2.09-1.95(m,2H),1.74-1.52(m,2H),1.28(t,J=7.2Hz,3H),0.98(d,J=6.9Hz,3H),0.59-0.47(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:634.2(M+H)+。分析性HPLCRT=6.31分钟(方法A)。
实施例157
(10R,14S)-5-氨基-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-4-甲酸甲酯双三氟乙酸盐
157A.N-[(10R,14S)-5-氨基-4-碘-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯：在0℃向实施例89A(0.05g，0.122mmol)于MeOH(2.5mL)中的溶液中添加于DCM(1.0mL)中的单氯化碘(0.030g，0.183mmol)。在室温搅拌反应混合物2小时且浓缩。将残余物再溶解于EtOAc中，用饱和NaHCO3、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，得到呈黄色固体状的所需产物(0.061g，93%)。MS(ESI)m/z:537.2(M+H)+。
157B.(10R,14S)-5-氨基-14-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-4-甲酸甲酯：将Pd(OAc)2(0.8mg，3.73μmol)、DPPF(2mg，3.73μmol)、K2CO3(0.015g，0.112mmol)、TEA(5.2μL，0.037mmol)和157A(0.02g，0.037mmol)于乙腈(2mL)和MeOH(1mL)中的混合物排空且用氩气回填三次。经由针将CO鼓泡至溶液中3分钟，且在CO气球下于70℃加热混合物3小时。将反应混合物冷却至室温，用EtOAc稀释，用水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，得到呈黄色固体状的所需产物(0.012g，69%)。MS(ESI)m/z:469.3(M+H)+。
实施例157.(10R,14S)-5-氨基-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-4-甲酸甲酯双三氟乙酸盐：以与实施例89相同的方式，通过用157B替换实施例89A来制备实施例157。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.68(d,J=6.3Hz,1H),8.22(d,J=1.9Hz,1H),8.16(s,1H),7.92(dd,J=6.2,1.8Hz,1H),7.81(ddd,J=8.3,6.8,1.7Hz,1H),7.56(ddd,J=8.1,6.5,1.4Hz,1H),7.46(td,J=8.1,1.4Hz,1H),6.67(s,1H),5.37(dd,J=11.6,6.1Hz,1H),3.90(s,3H),2.84-2.75(m,1H),2.43(d,J=0.8Hz,3H),2.30-2.20(m,1H),2.10-1.94(m,2H),1.74-1.53(m,2H),0.96(d,J=7.2Hz,3H),0.55-0.43(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:606.2(M+H)+。分析性HPLCRT=6.19分钟(方法A)。
实施例158
(10R,14S)-5-氨基-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-4-甲酸双三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002121
实施例158.(10R,14S)-5-氨基-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-4-甲酸双三氟乙酸盐：向实施例157(0.009g，10.79μmol)于MeOH(1mL)中的溶液中添加1NNaOH(0.108mL，0.108mmol)。在50℃搅拌反应混合物24小时。用TFA淬灭反应且通过反相HPLC纯化，分离出呈黄色固体状的所需产物(6mg，65%产率)。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.65(d,J=5.8Hz,1H),8.18(s,1H),8.11(s,1H),7.85-7.79(m,2H),7.59-7.53(m,1H),7.49-7.43(m,1H),6.65(s,1H),5.35(dd,J=11.3,6.1Hz,1H),2.82-2.74(m,1H),2.44(s,3H),2.27-2.17(m,1H),2.05-1.94(m,2H),1.71-1.49(m,2H),0.96(d,J=6.9Hz,3H),0.55-0.44(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:592.3(M+H)+。分析性HPLCRT=5.59分钟(方法A)。
实施例159
1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-5-[(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)氨基]-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002131
159A.1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-异硫氰基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺：在0℃向实施例89(替代，母化合物)(36mg，0.066mmol)于DCM(1mL)中的溶液中逐滴添加于二氯甲烷(0.5mL)中的1,1'-硫羰基二(吡啶-2(1H)-酮)(15.26mg，0.066mmol)。使反应混合物缓慢升温至室温且搅拌过夜。浓缩反应混合物且通过硅胶色谱纯化，得到所需产物(10mg，25%)。MS(ESI)m/z:592.3(M+H)+。
实施例159.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-5-[(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)氨基]-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：在室温搅拌159A(10mg，0.017mmol)和乙酰肼(1.255mg，0.017mmol)于THF(1mL)中的混合物过夜。浓缩混合物。用DMF(1mL)溶解残余物且添加EDC(13.00mg，0.068mmol)和TEA(0.014mL，0.102mmol)。在室温搅拌所得混合物过夜。用MeOH稀释反应混合物且通过反相HPLC纯化，得到呈黄色固体状的所需产物(4.5mg，34%)。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.78(d,J=6.1Hz,1H),8.29(d,J=1.7Hz,1H),7.96(dd,J=6.1,1.7Hz,1H),7.85(ddd,J=8.1,6.7,1.7Hz,1H),7.75(d,J=8.8Hz,1H),7.69(d,J=2.2Hz,1H),7.63-7.56(m,2H),7.49(td,J=8.1,1.4Hz,1H),5.40(dd,J=11.3,6.1Hz,1H),3.31(m,3H),2.88-2.80(m,1H),2.51(s,3H),2.46(d,J=0.8Hz,3H),2.34-2.23(m,1H),2.12-1.96(m,2H),1.77-1.52(m,2H),1.01(d,J=7.2Hz,3H),0.54(d,J=11.6Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:629.9(M+H)+。分析性HPLCRT=5.85分钟(方法A)。
实施例160
N-[(10R,14S)-5-亚氨代氨基甲酰氨基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002141
实施例160.N-[(10R,14S)-5-亚氨代氨基甲酰氨基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：向159A(31mg，0.053mmol)与乙酰肼(3.89mg，0.053mmol)的混合物中添加THF(1mL)且在室温搅拌反应混合物过夜。浓缩反应混合物。将残余物溶解于DCM(1.4mL)中，冷却至0℃且添加TFA(0.6mL，7.79mmol)。在0℃搅拌反应混合物30分钟。浓缩反应混合物且通过反相HPLC纯化，得到所需产物(11mg，78%)。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.81(d,J=5.5Hz,1H),8.03(d,J=1.1Hz,1H),7.88-7.79(m,2H),7.77(dd,J=5.6,1.8Hz,1H),7.59(ddd,J=8.0,6.5,1.7Hz,1H),7.53-7.42(m,2H),7.26(d,J=2.2Hz,1H),5.37(dd,J=11.0,5.8Hz,1H),3.36(m,6H),2.81-2.71(m,1H),2.48(d,J=1.1Hz,3H),2.29-2.19(m,1H),2.05-1.88(m,2H),1.65-1.49(m,2H),1.01(d,J=6.9Hz,3H),0.57(d,J=12.7Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:590.0(M+H)+。分析性HPLCRT=4.82分钟(方法A)。
实施例161
1-(2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10S,14S)-10-甲基-5-[(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)氨基]-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002151
实施例161.1-(2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10S,14S)-10-甲基-5-[(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)氨基]-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：以与实施例159相同的方式，通过使用相应胺中间体来制备实施例161。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.77(d,J=5.8Hz,1H),8.12(d,J=1.4Hz,1H),7.89(dd,J=5.8,1.7Hz,1H),7.79-7.70(m,2H),7.69-7.54(m,4H),7.53-7.45(m,2H),5.29(dd,J=10.7,5.2Hz,1H),3.32(m,3H),2.56-2.42(m,7H),2.35-2.20(m,1H),2.16-2.00(m,1H),1.87-1.72(m,1H),1.70-1.57(m,1H),1.30-1.26(m,3H),1.13-0.98(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:596.0(M+H)+。分析性HPLCRT=5.16分钟(方法A)。
实施例162
1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-5-[(1,3,4-噁二唑-2-基)氨基]-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-123-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002152
实施例162.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-5-[(1,3,4-噁二唑-2-基)氨基]-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：以与实施例159相同的方式，通过用甲酰肼替换乙酰肼来制备实施例162。1HNMR(500MHz,乙腈-d3)δ8.60(d,J=5.50Hz,1H),8.53(br.s.,1H),8.34(d,J=6.88Hz,1H),8.13(s,1H),7.88(s,1H),7.67(ddd,J=1.65,6.74,8.12Hz,1H),7.56(d,J=1.93Hz,1H),7.48-7.54(m,1H),7.37-7.44(m,1H),7.29-7.35(m,2H),5.09-5.22(m,1H),3.03(dq,J=4.95,7.24Hz,1H),2.35(d,J=1.10Hz,3H),2.30-2.10(m,3H),1.60-1.73(m,2H),1.25-1.37(m,3H),1.11(d,J=7.15Hz,3H),0.85(dd,J=3.44,11.69Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:616.6(M+H)+。分析性HPLCRT=5.80分钟(方法A)。
实施例163
N-[(10R,14S)-5-溴-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002161
实施例163.N-[(10R,14S)-5-溴-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：在0℃向溴化铜(II)(58.3mg，0.261mmol)和亚硝酸叔丁酯(0.034mL，0.290mmol)于乙腈(1mL)中的混合物中添加实施例89(替代，母化合物)(159mg，0.290mmol)于乙腈(1mL)中的溶液。使反应混合物缓慢升温至室温且搅拌过夜。用1NHCL(2.0mL)淬灭反应且用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩。通过反相HPLC纯化残余物，得到呈白色固体状的所需产物(90mg，41%)。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.78(d,J=5.5Hz,1H),7.95(s,1H),7.85(ddd,J=8.3,6.8,1.7Hz,1H),7.73-7.66(m,2H),7.64-7.57(m,2H),7.54-7.44(m,2H),5.35(dd,J=11.0,5.8Hz,1H),3.31(m,2H),2.80-2.69(m,1H),2.49(d,J=1.1Hz,3H),2.22(br.s.,1H),2.04-1.84(m,2H),1.65-1.45(m,2H),0.99(d,J=6.9Hz,3H),0.51(d,J=12.1Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:612.8(M+H)+。分析性HPLCRT=7.73分钟(方法A)。
实施例164
1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-9-氧代-5-(1H-吡唑-5-基)-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002171
实施例164.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-9-氧代-5-(1H-吡唑-5-基)-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：使实施例163(10mg，0.016mmol)、(1H-吡唑-5-基)硼酸(3.66mg，0.033mmol)和Cs2CO3(16mg，0.049mmol)于1,2-二甲氧基乙烷(1mL)和水(0.2mL)中的混合物脱气15分钟。接着向此混合物中添加钯肆(palladiumtetrakis，2mg，1.63μmol)。在微波条件下于120℃加热反应混合物20分钟。浓缩混合物且通过反相HPLC纯化，得到呈黄色固体状的所需产物(2.3mg，19%)。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.76(d,J=5.5Hz,1H),8.07(s,1H),7.91(dd,J=8.0,1.7Hz,1H),7.85-7.78(m,3H),7.76-7.69(m,3H),7.61-7.53(m,1H),7.46(td,J=8.2,1.5Hz,1H),6.80(d,J=2.5Hz,1H),5.36(dd,J=11.0,6.1Hz,1H),3.21(m,2H),2.83-2.70(m,1H),2.48-2.44(m,3H),2.29-2.14(m,1H),2.05-1.89(m,2H),1.66-1.43(m,2H),1.03-0.96(m,3H),0.53(d,J=12.1Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:598.9(M+H)+。分析性HPLCRT=1.37分钟(方法C)。
实施例165
1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10S,14S)-10-甲基-9-氧代-5-(1H-吡唑-5-基)-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002172
实施例165.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10S,14S)-10-甲基-9-氧代-5-(1H-吡唑-5-基)-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：以与实施例164相同的方式，通过使用另一异构体来制备实施例165。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.76(d,J=5.5Hz,1H),8.07(s,1H),7.91(dd,J=8.0,1.7Hz,1H),7.85-7.78(m,3H),7.76-7.69(m,3H),7.61-7.53(m,1H),7.46(td,J=8.2,1.5Hz,1H),6.80(d,J=2.5Hz,1H),5.36(dd,J=11.0,6.1Hz,1H),3.21(m,2H),2.83-2.70(m,1H),2.48-2.44(m,3H),2.29-2.14(m,1H),2.05-1.89(m,2H),1.66-1.43(m,2H),1.03-0.96(m,3H),0.53(d,J=12.1Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:598.9(M+H)+。分析性HPLCRT=6.27分钟(方法A)。
实施例166
1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-9-氧代-5-[(1,3-噻唑-2-基)氨基]-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002181
实施例166.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-9-氧代-5-[(1,3-噻唑-2-基)氨基]-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：用氩气流吹扫容纳碳酸钾(16.94mg，0.123mmol)、噻唑-2-胺(2.455mg，0.025mmol)、二-叔丁基(2',4',6'-三异丙基-3,6-二甲氧基-[1,1'-联苯]-2-基)膦(2.376mg，4.90μmol)和三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(1.122mg，1.226μmol)的小瓶且用盖密封。通过使氩气鼓泡通过液体10分钟来吹扫容纳磁力搅拌器、实施例163(15mg，0.025mmol)、叔丁醇(0.3mL)、乙酸(1滴)和(1滴)的单独压力测试小瓶。快速添加第一小瓶的内容物且密封第二小瓶。在110℃加热反应混合物4.5小时且接着冷却至室温。浓缩反应混合物且通过反相HPLC纯化，得到呈淡黄色固体状的所需产物(2.5mg，12%)。1HNMR(500MHz,乙腈-d3)δ8.58(d,J=5.50Hz,1H),8.42(d,J=7.15Hz,1H),8.22(s,1H),7.89(s,1H),7.67(ddd,J=1.65,6.88,8.25Hz,1H),7.46-7.54(m,4H),7.42(ddd,J=1.65,6.53,8.05Hz,1H),7.33(dt,J=1.38,8.12Hz,1H),7.25(d,J=3.85Hz,1H),6.79(d,J=3.85Hz,1H),5.22-5.31(m,1H),2.56-2.62(m,1H),2.33(s,3H),1.92-2.08(m,2H),1.77-1.81(m,2H),1.32-1.48(m,3H),0.82(d,J=6.88Hz,3H),0.26-0.36(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:631.6(M+H)+。分析性HPLCRT=6.13分钟(方法A)。
实施例167
1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10S,14S)-10-甲基-9-氧代-5-[(1,3-噻唑-2-基)氨基]-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002191
实施例167.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10S,14S)-10-甲基-9-氧代-5-[(1,3-噻唑-2-基)氨基]-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：以与实施例166相同的方式，通过使用另一异构体来制备实施例167。1HNMR(500MHz,乙腈-d3)δ8.59(d,J=5.50Hz,1H),8.38(d,J=7.15Hz,1H),7.83(s,1H),7.68(ddd,J=1.65,6.81,8.32Hz,1H),7.50-7.55(m,2H),7.46-7.49(m,1H),7.42(ddd,J=1.51,6.53,8.18Hz,1H),7.30-7.36(m,2H),7.23(d,J=3.58Hz,1H),6.76(d,J=3.85Hz,1H),5.09-5.19(m,1H),2.36(d,J=0.83Hz,3H),2.02-2.17(m,4H),1.97-2.00(m,1H),1.60-1.73(m,3H),1.25-1.37(m,2H),1.10(d,J=7.15Hz,3H),0.88-0.82(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:631.6(M+H)+。分析性HPLCRT=6.11分钟(方法A)。
使用类似于实施例164中所示的操作的操作来合成表10中的以下实施例。实施例171为偶合反应的常见副产物。
Figure BDA0000487247700002201
表10
Figure BDA0000487247700002202
实施例172
1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-9-氧代-5-(2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002203
实施例172.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-9-氧代-5-(2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：向实施例170(4mg，6.25μmol)于水(0.50mL)和二噁烷(0.2mL)中的溶液中添加浓HCl(0.011mL，0.375mmol)。在100℃搅拌反应混合物1小时。浓缩反应混合物且通过反相HPLC纯化，得到呈灰白色固体状的所需产物(1.4mg，29%)。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.78(d,J=5.5Hz,1H),8.06(s,1H),7.92-7.82(m,3H),7.79(dd,J=5.5,1.7Hz,1H),7.77-7.73(m,2H),7.60(ddd,J=8.0,6.4,1.5Hz,1H),7.54-7.47(m,2H),6.60-6.52(m,1H),5.39(dd,J=11.0,5.8Hz,1H),3.32(m,3H),2.84-2.75(m,1H),2.49(d,J=0.8Hz,3H),2.30-2.15(m,1H),2.06-1.92(m,2H),1.66-1.49(m,2H),1.00(d,J=7.2Hz,3H),0.55(d,J=12.1Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:625.9(M+H)+。分析性HPLCRT=5.87分钟(方法A)。
实施例173
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9,11-二氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002211
173A.N-[(10R,14S)-11-羟基-5-[(甲氧羰基)氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,15(19),16-六烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯与N-[(10R,14S)-12-羟基-5-[(甲氧羰基)氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,15(19),16-六烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯(1:1混合物)：在0℃向2J(634mg，1.36mmol)于THF(13.6mL)中的溶液中逐滴添加甲硼烷-四氢呋喃复合物(4.08mL，4.08mmol)。使反应混合物升温至室温且搅拌2.5小时。将反应混合物冷却至0℃且添加乙酸钠(9.06ml，27.2mmol)，继而逐滴添加过氧化氢(4.16mL，40.8mmol)。使反应混合物升温至室温且搅拌8小时。用H2O稀释混合物且用EtOAc(2×)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩。通过硅胶色谱(0%-10%MeOH/DCM)纯化残余物，得到呈淡灰色固体状的两种产物的混合物(323mg，49%)。MS(ESI)m/z:485.1(M+H)+。
173B.N-[(10R,14S)-5-[(甲氧羰基)氨基]-10-甲基-9,11-二氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,15(19),16-六烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯与N-[(10R,14S)-5-[(甲氧羰基)氨基]-10-甲基-9,12-二氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,15(19),16-六烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯(1:1混合物)：将173A(非对映异构体的1:1混合物)(116mg，0.239mmol)溶解于DCM(2.4mL)中且在室温添加马丁氏试剂(Martin'sreagent)(132mg，0.311mmol)。在室温搅拌反应混合物1.5小时。用DCM稀释混合物，用H2O、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤且浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，得到呈白色固体状的区位异构体的1:1混合物(78mg，68%)。MS(ESI)m/z:483.1(M+H)+。
173C.N-[(10R,14S)-14-氨基-10-甲基-9,11-二氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,15(19),16-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯与173D,N-[(10R,14S)-14-氨基-10-甲基-9,12-二氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,15(19),16-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯：将173B(区位异构体的1:1混合物)(78mg，0.162mmol)悬浮于DCM(3mL)中且添加TFA(0.623mL，8.08mmol)。反应混合物变成澄清淡棕色溶液且在室温搅拌1小时。浓缩反应混合物且通过反相HPLC纯化，得到呈微棕色油状的173C(早期洗脱的区位异构体)(40mg，38%)和呈微棕色油状的173D(后期洗脱的区位异构体)(27mg，26%)。MS(ESI)m/z:383.1(M+H)+。
实施例173.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9,11-二氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例63相同的方式，通过用173C替换2M来制备实施例173。1HNMR(500MHz,MeOD)δ9.69(s,1H),8.76(d,J=6.1Hz,1H),7.90-7.77(m,2H),7.70-7.40(m,6H),5.30(dd,J=10.0,6.5Hz,1H),3.80(s,3H),3.75(d,J=6.6Hz,1H),3.06-2.95(m,1H),2.72-2.58(m,1H),2.52-2.36(m,5H),1.24(d,J=6.6Hz,3H)ppm。MS(ESI)m/z:619.9(M+H)+。分析性HPLCRT=6.98分钟(方法A)。
实施例174
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9,12-二氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002231
实施例174.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9,12-二氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例173相同的方式，通过用173D替换173C来制备实施例174。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.78(d,J=5.5Hz,1H),8.06(s,1H),7.92-7.82(m,3H),7.79(dd,J=5.5,1.7Hz,1H),7.77-7.73(m,2H),7.60(ddd,J=8.0,6.4,1.5Hz,1H),7.54-7.47(m,2H),6.60-6.52(m,1H),5.39(dd,J=11.0,5.8Hz,1H),3.32(m,3H),2.84-2.75(m,1H),2.49(d,J=0.8Hz,3H),2.30-2.15(m,1H),2.06-1.92(m,2H),1.66-1.49(m,2H),1.00(d,J=7.2Hz,3H),0.55(d,J=12.1Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:620.1(M+H)+。分析性HPLCRT=7.86分钟(方法A)。
实施例175
N-[(10R,12R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-12-羟基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
175A.在0℃向2J(68.9mg，0.148mmol)于THF(1477μL)中的溶液中逐滴添加甲硼烷-四氢呋喃复合物(443μL，0.443mmol)。使反应混合物升温至室温且搅拌4小时。逐滴添加3M NaOAc(985μL，2.95mmol)和H2O2(453μL，4.43mmol)。在室温搅拌反应混合物2小时且用H2O稀释。用EtOAc萃取混合物。用盐水洗涤有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物。通过使用手性OD柱(移动相：50%MeOH/EtOH:50%庚烷)进行进一步纯化，得到呈非对映异构体混合物形式的175A(第二峰)(7mg，10%)。分离其它区位异构体175B(第一峰)(5mg，6%)和175C(第三峰)(3mg，4%)，即呈纯手性化合物形式的N-[(10R,14S)-14-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-11-羟基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯。MS(ESI)m/z:485.1(M+H)+。
实施例175.N-[(10R,12R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-12-羟基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：向175A(7.1mg，0.015mmol)于CH2Cl2(0.5mL)中的溶液中添加TFA(0.034mL，0.440mmol)。在室温搅拌反应混合物40分钟且浓缩。将残余物再溶解于DMF(0.3mL)中，且添加中间体25(3.73mg，0.015mmol)，继而添加EDC(4.21mg，0.022mmol)、HOBT(3.37mg，0.022mmol)和许尼希碱(0.026mL，0.147mmol)。在室温搅拌反应混合物过夜。浓缩反应混合物且通过反相HPLC纯化，得到呈白色固体状的所需产物(后期洗脱的异构体)(2mg，18%)。通过X射线结晶学确定立体化学。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.78(d,J=5.5Hz,1H),8.06(s,1H),7.92-7.82(m,3H),7.79(dd,J=5.5,1.7Hz,1H),7.77-7.73(m,2H),7.60(ddd,J=8.0,6.4,1.5Hz,1H),7.54-7.47(m,2H),6.60-6.52(m,1H),5.39(dd,J=11.0,5.8Hz,1H),3.32(m,3H),2.84-2.75(m,1H),2.49(d,J=0.8Hz,3H),2.30-2.15(m,1H),2.06-1.92(m,2H),1.66-1.49(m,2H),1.00(d,J=7.2Hz,3H),0.55(d,J=12.1Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:621.2(M+H)+。分析性HPLCRT=5.13分钟(方法A)。
实施例176
N-[(10R,12S,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-12-羟基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
实施例176.N-[(10R,12S,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-12-羟基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例175相同的方式来制备实施例176且在最终步骤中作为早期洗脱的异构体而分离。1H NMR(500MHz,MeOD)δ9.63(s,1H),8.71(d,J=5.8Hz,1H),8.23(s,1H),7.83(s,1H),7.76(dd,J=5.9,1.5Hz,1H),7.71(ddd,J=8.1,6.7,1.7Hz,1H),7.58(s,1H),7.55(d,J=1.1Hz,2H),7.45(ddd,J=8.0,6.4,1.8Hz,1H),7.41-7.36(m,1H),5.32(dd,J=11.1,4.8Hz,1H),3.77(s,3H),3.63-3.55(m,1H),2.60-2.52(m,1H),2.37(d,J=0.8Hz,3H),2.33(dt,J=14.0,4.7Hz,1H),2.18(ddd,J=14.0,11.2,5.6Hz,1H),1.47(dd,J=12.8,7.3Hz,1H),1.33-1.25(m,1H),1.12(d,J=6.9Hz,3H)ppm。MS(ESI)m/z:621.2(M+H)+。分析性HPLCRT=5.10分钟(方法A)。
实施例177
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-11-羟基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002251
实施例177.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-11-羟基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例175相同的方式，通过用175B替换175A来制备实施例177。1HNMR(500MHz,MeOD)δ9.70(s,1H),8.70(d,J=6.1Hz,1H),8.24-8.21(m,1H),8.17(s,1H),7.89(dd,J=6.1,1.7Hz,1H),7.78-7.68(m,2H),7.63-7.46(m,3H),7.45-7.36(m,1H),5.46(dd,J=7.3,5.6Hz,1H),3.83-3.78(s,3H),2.94(quin,J=6.5Hz,1H),2.81-2.72(m,1H),2.46-2.37(m,5H),2.21-2.12(m,1H),1.99-1.91(m,1H),1.71(dt,J=14.6,7.6Hz,1H),1.20(d,J=6.9Hz,3H)ppm。MS(ESI)m/z:621.2(M+H)+。分析性HPLCRT=6.04分钟(方法A)。
实施例178
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-11-羟基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002261
实施例178.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-11-羟基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例175相同的方式，通过用175C替换175A来制备实施例178。1HNMR(500MHz,MeOD)δ9.70(s,1H),8.70(d,J=6.3Hz,1H),8.38(s,1H),8.35(s,1H),7.94(dd,J=6.2,1.8Hz,1H),7.78-7.72(m,1H),7.68-7.62(m,2H),7.55(dd,J=8.4,2.1Hz,1H),7.49(ddd,J=8.1,6.5,1.7Hz,1H),7.44-7.39(m,1H),5.47(dd,J=10.2,5.8Hz,1H),3.80(s,3H),3.54-3.46(m,1H),3.24-3.09(m,1H),2.66(quin,J=6.9Hz,1H),2.48-2.40(m,1H),2.38(s,3H),2.08-1.99(m,1H),1.74-1.66(m,1H),1.06(d,J=7.2Hz,3H)ppm。MS(ESI)m/z:621.2(M+H)+。分析性HPLCRT=6.09分钟(方法A)。
实施例179
N-[(10S,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-11-氟-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002271
179A.N-[(10S,14S)-14-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-11-氟-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯：在-78℃向175B(25mg，0.052mmol)于DCM(1mL)中的溶液中添加DAST(10.76μL，0.077mmol)。在-78℃搅拌反应混合物10分钟，且接着使其缓慢升温至室温。在室温搅拌反应混合物1小时且浓缩。通过反相HPLC纯化残余物，得到呈纯手性化合物形式的产物(2.3mg，7%)。MS(ESI)m/z:487.0(M+H)+。
实施例179.N-[(10S,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-氨基]-11-氟-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐。实施例179以与实施例175相同的方式通过用179A替代175A制备。1HNMR(500MHz,MeOD)δ9.67(s,1H),8.72(d,J=5.8Hz,1H),8.33(s,1H),7.98(s,1H),7.79-7.70(m,2H),7.65-7.59(m,2H),7.55-7.45(m,2H),7.44-7.37(m,1H),5.36(dd,J=11.6,6.1Hz,1H),5.26-5.08(m,1H),3.80(s,3H),3.22-3.18(m,1H),2.49-2.42(m,1H),2.38(s,3H),2.07-1.97(m,1H),1.84-1.68(m,1H),1.00(d,J=6.9Hz,3H),0.84-0.63(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:623.0(M+H)+。分析性HPLCRT=6.97分钟(方法A)。
实施例180
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-18-氟-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002281
实施例180.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-18-氟-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例2相同的方式，通过使用4-溴-5-氟吡啶-2-甲醛作为起始物质且用中间体21替换中间体11来制备实施例180。中间体以非对映异构体形式供继续使用，得到呈非对映异构体混合物形式的实施例180。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.90(d,J=3.0Hz,1H),8.09(d,J=6.5Hz,1H),7.88-7.76(m,1H),7.71-7.60(m,2H),7.59-7.52(m,1H),7.52-7.40(m,2H),5.32(dd,J=11.3,6.0Hz,1H),3.78(s,3H),3.66(s,2H),2.70(br.s.,1H),2.44(s,3H),2.26(d,J=10.0Hz,1H),2.05-1.88(m,1H),1.87-1.70(m,1H),1.50(br.s.,2H),0.96(d,J=6.8Hz,3H),0.66(br.s.,1H)ppm。MS(ESI)m/z:624.1(M+H)+。分析性HPLCRT=8.07分钟(方法A)。
实施例181
N-[(10S,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-18-氟-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002282
实施例181.N-[(10S,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-18-氟-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：使用ChiralcelOJ-H柱且使用15%甲醇/85%CO2作为移动相对实施例180进行手性HPLC分离。得到作为实施例181的峰1。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.86(d,J=3.0Hz,1H),7.91(d,J=6.3Hz,1H),7.85-7.75(m,1H),7.67-7.58(m,2H),7.58-7.40(m,3H),5.23(dd,J=10.2,5.1Hz,1H),3.77(s,4H),3.66(s,1H),2.44(s,3H),2.26-2.08(m,1H),1.98(br.s.,1H),1.67-1.39(m,2H),1.29(d,J=5.0Hz,2H),1.19(d,J=7.0Hz,3H),1.13-0.98(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:624.2(M+H)+。分析性HPLCRT=8.07分钟(方法A)。
实施例182
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-18-氟-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002291
实施例182.N-[(10S,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-18-氟-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：使用ChiralcelOJ-H柱且使用15%甲醇/85%CO2作为移动相对实施例180进行手性HPLC分离。得到作为实施例182的峰2。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.90(d,J=3.0Hz,1H),8.09(d,J=6.5Hz,1H),7.88-7.76(m,1H),7.71-7.60(m,2H),7.59-7.52(m,1H),7.52-7.40(m,2H),5.32(dd,J=11.3,6.0Hz,1H),3.78(s,3H),3.66(s,2H),2.70(br.s.,1H),2.44(s,3H),2.26(d,J=10.0Hz,1H),2.05-1.88(m,1H),1.87-1.70(m,1H),1.50(br.s.,2H),0.96(d,J=6.8Hz,3H),0.66(br.s.,1H)ppm。MS(ESI)m/z:624.2(M+H)+。分析性HPLCRT=8.07分钟(方法A)。
实施例183
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10,18-二甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002301
实施例183.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10,18-二甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例2相同的方式，通过使用4-溴-5-甲基吡啶-2-甲醛作为起始物质且用中间体21替换中间体11来制备实施例183。中间体以非对映异构体形式供继续使用，得到呈非对映异构体混合物形式的实施例183。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.67(s,1H),7.87-7.77(m,2H),7.63-7.41(m,5H),5.32(dd,J=11.3,6.0Hz,1H),3.78(s,3H),3.66(s,2H),2.70(br.s.,1H),2.50(s,3H),2.44(s,3H),2.26(d,J=10.0Hz,1H),2.05-1.88(m,1H),1.87-1.70(m,1H),1.50(br.s.,2H),0.96(d,J=6.8Hz,3H),0.66(br.s.,1H)ppm。MS(ESI)m/z:620.1(M+H)+。分析性HPLCRT=5.53分钟(方法A)。
实施例184
(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-4-甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002302
实施例184.(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-4-甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例2相同的方式，通过在步骤2C中用(2-氨基-4-(甲氧羰基)苯基)硼酸替换2-氨基-4-硝基苯基硼酸且用中间体25替换中间体11来制备实施例184。在步骤2J期间分离非对映异构体混合物。使用非对映异构体A(在硅胶色谱上早期洗脱的异构体)得到纯手性最终产物。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.84(d,J=5.8Hz,1H),8.40-8.30(m,2H),8.27-8.12(m,2H),7.99(dd,J=5.9,1.8Hz,1H),7.74(d,J=1.4Hz,1H),7.53-7.30(m,3H),5.28(dd,J=11.4,6.2Hz,1H),3.98(s,3H),2.84-2.73(m,1H),2.37(s,3H),2.28-2.17(m,1H),2.08-1.97(m,1H),1.96-1.83(m,1H),1.68-1.49(m,2H),0.98(d,J=6.9Hz,3H),0.62-0.46(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:590.2(M+H)+。分析性HPLCRT=5.53分钟(方法A)。
实施例185
(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-4-甲酸三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002311
实施例185.(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-4-甲酸：向实施例184(12.15mg，0.017mmol)于THF(173μL)中的溶液中添加LiOH(34.5μL，0.069mmol)。在室温搅拌反应混合物2小时。添加0.1mL1NHCl且浓缩混合物。通过反相HPLC纯化残余物，得到呈透明玻璃状的所需产物(8.8mg，73%)。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.82(d,J=6.1Hz,1H),8.36-8.29(m,2H),8.27-8.17(m,2H),8.01(d,J=5.8Hz,1H),7.70(t,J=7.5Hz,1H),7.50-7.33(m,3H),5.27(dd,J=11.1,6.1Hz,1H),2.82-2.72(m,J=6.6Hz,1H),2.34(s,3H),2.28-2.16(m,1H),2.09-1.96(m,1H),1.90(t,J=12.1Hz,1H),1.68-1.46(m,2H),0.96(d,J=6.8Hz,3H),0.53(d,J=11.4Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:576.1(M+H)+。分析性HPLCRT=5.84分钟(方法A)。
实施例186
(10S,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-4-甲酸三氟乙酸盐
实施例186.(10S,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-4-甲酸三氟乙酸盐：以与实施例185相同的方式，通过使用另一异构体来制备实施例186。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.82(d,J=5.8Hz,1H),8.35(d,J=1.9Hz,1H),8.29(s,1H),8.24(dd,J=8.3,1.9Hz,1H),8.04(s,1H),7.91(d,J=5.5Hz,1H),7.74(ddd,J=8.3,6.7,1.8Hz,1H),7.51-7.45(m,2H),7.41(dd,J=8.1,1.2Hz,1H),5.20(dd,J=10.5,5.5Hz,1H),2.47-2.34(m,4H),2.26-2.14(m,1H),2.07-1.96(m,1H),1.76-1.63(m,1H),1.57(d,J=11.0Hz,1H),1.35-1.21(m,4H),1.10-0.96(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:576.2(M+H)+。分析性HPLCRT=5.44分钟(方法A)。
实施例187
(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-甲酸三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002331
实施例187.(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-甲酸三氟乙酸盐：以与实施例185相同的方式，通过在步骤2C中用2-氨基-5-(甲氧羰基)苯基硼酸替换(2-氨基-4-(甲氧羰基)苯基)硼酸来制备实施例187。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.81(d,J=6.1Hz,1H),8.30(s,1H),8.17(s,1H),8.12(dd,J=8.0,1.4Hz,1H),7.95-7.87(m,2H),7.81(d,J=8.0Hz,1H),7.75-7.67(m,1H),7.49-7.42(m,1H),7.41-7.34(m,1H),5.26(dd,J=11.1,5.9Hz,1H),2.81-2.70(m,1H),2.35(s,3H),2.26-2.14(m,1H),2.06-1.94(m,1H),1.93-1.83(m,1H),1.63-1.44(m,2H),0.97(d,J=6.9Hz,3H),0.53(d,J=10.5Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:576.3(M+H)+。分析性HPLCRT=5.84分钟(方法A)。
实施例188
(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-4-甲酸三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002332
实施例188.(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-4-甲酸三氟乙酸盐：以与实施例21相同的方式，通过用2-氨基-5-(甲氧羰基)苯基硼酸替换2-氨基-4-硝基苯基硼酸来制备实施例188。在最后步骤中将甲酯水解成酸。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.82(d,J=6.1Hz,1H),8.34-8.28(m,2H),8.21(dd,J=8.2,1.9Hz,1H),8.17(d,J=1.3Hz,1H),7.95(dd,J=6.1,1.8Hz,1H),7.71(ddd,J=8.2,6.7,1.8Hz,1H),7.49-7.33(m,3H),5.26(dd,J=11.1,5.8Hz,1H),2.60-2.50(m,1H),2.35(d,J=0.8Hz,3H),2.29-2.17(m,1H),2.08-1.93(m,2H),1.89-1.63(m,2H),1.52-1.37(m,1H),0.87-0.71(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:562.2(M+H)+。分析性HPLCRT=6.05分钟(方法A)。
实施例189
(10R,14S)-14-C-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-N,10-二甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-4,14-二酰氨基三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002341
实施例189.(10R,14S)-14-C-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-N,10-二甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-4,14-二酰氨基三氟乙酸盐：称量实施例185(5.76mg，8.35μmol)、甲胺(29.2μL，0.058mmol)(2MTHF溶液)、EDC(3.20mg，0.017mmol)和HOBT(2.56mg，0.017mmol)放入2打兰小瓶中。添加DMF(167μL)，继而添加许尼希碱(7.29μL，0.042mmol)。在室温搅拌混合物过夜。用MeOH稀释反应混合物且通过反相HPLC纯化，得到呈白色固体状的所需产物(1.6mg，27%)。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.82(d,J=6.1Hz,1H),8.32(s,1H),8.19-8.12(m,2H),8.03(dd,J=8.3,2.2Hz,1H),7.94(dd,J=5.9,1.8Hz,1H),7.74(td,J=7.5,1.8Hz,1H),7.52-7.45(m,1H),7.44-7.37(m,2H),5.27(dd,J=11.1,5.9Hz,1H),2.98(s,3H),2.82-2.74(m,1H),2.38(s,3H),2.27-2.16(m,1H),2.06-1.86(m,2H),1.66-1.48(m,2H),0.98(d,J=6.9Hz,3H),0.54(d,J=11.8Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:589.2(M+H)+。分析性HPLCRT=5.25分钟(方法A)。
实施例190
(10R,14S)-14-C-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5,14-二酰氨基三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002351
实施例190.(10R,14S)-14-C-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5,14-二酰氨基三氟乙酸盐：称量实施例187(12mg，0.021mmol)、NH4Cl(7.80mg，0.146mmol)、EDC(7.99mg，0.042mmol)和HOBT(6.38mg，0.042mmol)放入1打兰小瓶中。添加DMF(208μL)，继而添加许尼希碱(18.19μL，0.104mmol)。在室温搅拌所得澄清浅黄色溶液过夜。用MeOH稀释混合物且通过反相HPLC纯化，得到呈白色固体状的所需产物(11.3mg，77%)。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.82(d,J=6.1Hz,1H),8.31(s,1H),8.24(s,1H),8.04-7.90(m,2H),7.87-7.76(m,2H),7.71(ddd,J=8.2,6.7,1.7Hz,1H),7.51-7.42(m,1H),7.40-7.28(m,1H),5.27(dd,J=11.1,5.9Hz,1H),2.76(t,J=6.5Hz,1H),2.35(d,J=0.6Hz,3H),2.27-2.12(m,1H),2.10-1.96(m,1H),1.97-1.81(m,1H),1.68-1.44(m,2H),0.97(d,J=6.9Hz,3H),0.55(d,J=10.7Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:575.3(M+H)+。分析性HPLCRT=5.32分钟(方法A)。
实施例191
(10S,14S)-14-C-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5,14-二酰氨基三氟乙酸盐
实施例191.(10S,14S)-14-C-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5,14-二酰氨基三氟乙酸盐：以与实施例190相同的方式，通过使用另一异构体来制备实施例191。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.82(d,J=5.8Hz,1H),8.28(s,1H),8.09(s,1H),8.02(dd,J=8.0,1.7Hz,1H),7.93(d,J=5.2Hz,1H),7.87-7.80(m,2H),7.71(ddd,J=8.3,6.8,1.7Hz,1H),7.45(ddd,J=8.0,6.5,1.7Hz,1H),7.41-7.34(m,1H),5.19(dd,J=10.7,5.2Hz,1H),2.45-2.37(m,1H),2.35(d,J=0.6Hz,3H),2.24-2.13(m,1H),2.07-1.96(m,1H),1.68(q,J=10.8Hz,1H),1.60-1.50(m,1H),1.30(dd,J=8.4,4.3Hz,1H),1.24(d,J=6.9Hz,3H),1.06-0.93(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:575.3(M+H)+。分析性HPLCRT=5.25分钟(方法A)。
实施例192
(14S)-14-C-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5,14-二酰氨基三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002362
实施例192.(14S)-14-C-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5,14-二酰氨基三氟乙酸盐：以与实施例190相同的方式，通过用实施例188替换实施例187来制备实施例192。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.85(d,J=6.0Hz,1H),8.32(s,1H),8.26(s,1H),8.22(d,J=2.2Hz,1H),8.09(dd,J=8.2,2.2Hz,1H),8.03(dd,J=6.0,1.6Hz,1H),7.72(ddd,J=8.2,6.6,1.6Hz,1H),7.48-7.35(m,3H),5.27(dd,J=11.0,6.0Hz,1H),2.60-2.52(m,1H),2.34(s,3H),2.31-2.20(m,1H),2.09-1.94(m,2H),1.89-1.67(m,2H),1.45(dd,J=7.1,3.8Hz,1H),0.86-0.71(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:561.2(M+H)+。分析性HPLCRT=5.56分钟(方法A)。
实施例193
(14S)-14-C-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-5-N,5-N-二甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5,14-二酰氨基三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002371
实施例193.(14S)-14-C-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4--5-N,5-N-二甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5,14-二酰氨基三氟乙酸盐：以与实施例192相同的方式，通过用二甲胺替换NH4Cl来制备实施例193。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.80(d,J=6.0Hz,1H),8.30(s,1H),8.17(d,J=1.1Hz,1H),7.92(dd,J=6.0,1.6Hz,1H),7.79(d,J=1.6Hz,1H),7.75-7.63(m,2H),7.49-7.35(m,3H),5.24(dd,J=11.0,5.5Hz,1H),3.13(s,3H),3.08(s,3H),2.60-2.49(m,1H),2.38-2.31(s,3H),2.29-2.16(m,1H),2.07-1.92(m,2H),1.89-1.63(m,2H),1.52-1.37(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:589.3(M+H)+。分析性HPLCRT=5.90分钟(方法A)。
实施例194
1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-9-氧代-5-(1H-1,2,4-三唑-5-基)-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002381
实施例194.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-9-氧代-5-(1H-1,2,4-三唑-5-基)-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：在75℃于N,N-二甲基甲酰胺二甲缩醛(0.5mL，3.73mmol)中搅拌实施例190(8.3mg，0.014mmol)3小时。浓缩反应混合物。将残余物溶解于AcOH(0.1mL，1.747mmol)和单水合肼(0.025mL，0.510mmol)中。在75℃搅拌混合物1小时且浓缩。通过反相HPLC纯化残余物，得到呈浅黄色固体状的所需产物(7.2mg，60%)。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.80(d,J=5.8Hz,1H),8.54(s,1H),8.31(s,1H),8.26(s,1H),8.17(dd,J=8.3,1.7Hz,1H),8.02-7.93(m,2H),7.84(d,J=8.3Hz,1H),7.71(ddd,J=8.1,6.7,1.7Hz,1H),7.46(ddd,J=8.0,6.5,1.7Hz,1H),7.41-7.34(m,1H),5.27(dd,J=11.3,6.1Hz,1H),2.83-2.74(m,1H),2.35(d,J=0.8Hz,3H),2.28-2.15(m,1H),2.08-1.98(m,1H),1.97-1.87(m,1H),1.70-1.45(m,2H),0.99(d,J=6.9Hz,3H),0.56(d,J=11.6Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:599.3(M+H)+。分析性HPLCRT=5.26分钟(方法A)。
实施例195
1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-5-(5-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002382
实施例195.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(10R,14S)-10-甲基-5-(5-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：以与实施例194相同的方式，通过用1,1-二甲氧基-N,N-二甲基乙胺替换N,N-二甲基甲酰胺二甲缩醛来制备实施例195。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.80(d,J=6.1Hz,1H),8.31(s,1H),8.29(d,J=1.4Hz,1H),8.13(dd,J=8.1,1.8Hz,1H),8.01(dd,J=6.1,1.9Hz,1H),7.94(d,J=1.7Hz,1H),7.84(d,J=8.0Hz,1H),7.72(ddd,J=8.1,6.7,1.7Hz,1H),7.46(ddd,J=8.1,6.5,1.7Hz,1H),7.42-7.34(m,1H),5.27(dd,J=11.3,6.1Hz,1H),2.83-2.74(m,1H),2.55(s,3H),2.35(d,J=0.8Hz,3H),2.29-2.18(m,1H),2.03(m,1H),1.97-1.86(m,1H),1.68-1.48(m,2H),0.99(d,J=6.9Hz,3H),0.57(d,J=11.3Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:613.3(M+H)+。分析性HPLCRT=5.16分钟(方法A)。
实施例196
1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-(羟甲基)-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺
Figure BDA0000487247700002391
实施例196.1-(3-氯-2-氟苯基)-N-[(10R,14S)-5-(羟甲基)-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺：向实施例187(35mg，0.061mmol)和BOP(32.2mg，0.073mmol)于THF(1mL)中的悬浮液中添加DIPEA(0.032mL，0.182mmol)。在室温搅拌反应混合物5分钟且添加NaBH4(9.20mg，0.243mmol)。搅拌反应混合物1小时，用MeOH淬灭且接着浓缩。通过反相HPLC纯化残余物，得到呈白色固体状的所需产物(9mg，25%产率)。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.63(d,J=5.2Hz,1H),8.25(s,1H),7.78-7.68(m,1H),7.65(s,1H),7.57(d,J=8.0Hz,1H),7.52-7.33(m,4H),7.25(s,1H),5.21(dd,J=11.1,5.6Hz,1H),4.67(s,2H),2.70(m,1H),2.38(d,J=0.8Hz,3H),2.00(d,J=14.3Hz,1H),1.96-1.80(m,2H),1.51(m,1H),1.40(m,1H),0.95(d,J=6.9Hz,3H),0.44(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:562.2(M+H)+。分析性HPLCRT=5.23分钟(方法A)。
实施例197
1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(14S)-10-甲基-5-(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002401
197A.(14S)-14-C-1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5,14-二酰氨基三氟乙酸盐：以与实施例189相同的方式，通过在步骤2C中用2-氨基-5-(甲氧羰基)苯基硼酸替换(2-氨基-4-(甲氧羰基)苯基)硼酸来制备197A。不分离非对映异构体混合物且在合成中继续使用。MS(ESI)m/z:575.6(M+H)+。
实施例197.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(14S)-10-甲基-5-(3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基)-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：在75℃于N,N-二甲基乙酰胺二甲缩醛(0.424mL，2.90mmol)中搅拌197A(8mg，0.012mmol)4小时。用乙醚稀释反应混合物且混合。自浅黄白色固体滗析有机溶液。干燥固体且用羟胺盐酸盐(0.807mg，0.012mmol)、氢氧化钠(0.017mL，0.017mmol)、乙酸(1.329μL，0.023mmol)和二噁烷(0.5mL)处理。在室温搅拌混合物1小时且在室温静置过夜。浓缩反应混合物。通过反相HPLC纯化残余物，得到呈非对映异构体混合物形式的所需产物(3.4mg，39%)。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.64(d,J=5.50Hz,1H),8.26(s,1H),8.02-8.09(m,1H),8.01(d,J=5.65Hz,1H),7.96(d,J=1.65Hz,1H),7.91(s,0.5H),7.86(d,J=1.65Hz,1H),7.81(s,0.5H),7.69-7.72(m,1H),7.56(dt,J=1.51,7.50Hz,1H),7.51(d,J=4.13Hz,0.5H),7.41(dd,J=1.38,5.23Hz,0.5H),7.31-7.35(m,1H),7.22-7.27(m,1H),5.18-5.24(m,1H),5.08-5.15(m,1H),2.53-2.58(m,1H),2.34-2.36(m,1H),2.35(s,3H),2.27,2.26(2s,3H),2.12(d,J=7.43Hz,1H),1.98(ddd,J=2.48,4.95,7.43Hz,1H),1.69-1.72(m,1H),1.56-1.63(m,1H),1.28-1.42(m,1H),1.11(d,J=6.88Hz,1.2H),0.81(d,J=6.88Hz,1.8H),0.28(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:614.6(M+H)+。分析性HPLCRT=6.78分钟(方法A)。
实施例198
1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(14S)-9-氧代-4-(2H-1,2,3,4-四唑-5-基)-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002411
198A.N-[(11E,14S)-4-氰基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,11,15,17-七烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯：以与2J相同的方式，通过在步骤2C中用2-氨基-5-氰基苯基硼酸替换2-氨基-4-硝基苯基硼酸且在步骤2I中用丁-3-烯酸替换2-甲基丁-3-烯酸来制备198A。MS(ESI)m/z:405.3(M+H)+。
实施例198B.N-[(11E,14S)-9-氧代-4-(2H-1,2,3,4-四唑-5-基)-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,11,15,17-七烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯：向198A(56mg，0.138mmol)于DMF(1385μL)中的溶液中添加NaN3(45mg，0.692mmol)和NH4Cl(44.4mg，0.831mmol)。在90℃搅拌混合物过夜。将混合物冷却至室温且通过反相HPLC纯化，分离出呈黄色固体状的所需产物(64mg，68%)。MS(ESI)m/z:448.2(M+H)+。
实施例198.1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-N-[(14S)-9-氧代-4-(2H-1,2,3,4-四唑-5-基)-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-14-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐：以与实施例2相同的方式，通过用198B替换2J且在最终步骤中使用中间体25来制备实施例198。1HNMR(400MHz,MeOD)δ8.84(d,J=6.0Hz,1H),8.37(d,J=2.2Hz,1H),8.31(s,1H),8.24(dd,J=8.2,1.6Hz,1H),8.15(s,1H),7.94(dd,J=6.0,1.6Hz,1H),7.72(ddd,J=8.2,6.6,1.6Hz,1H),7.52(d,J=8.2Hz,1H),7.49-7.43(m,1H),7.42-7.35(m,1H),5.26(dd,J=11.0,6.0Hz,1H),2.61-2.51(m,1H),2.35(s,3H),2.29-2.16(m,1H),2.05-1.93(m,2H),1.91-1.64(m,2H),1.52-1.37(m,1H),0.85-0.69(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:586.2(M+H)+。分析性HPLCRT=6.14分钟(方法A)。
实施例199
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-17-甲氧基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,15(19),16-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002421
199A.N-(4-{2-[(1S)-1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}丁-3-烯-1-基]-6-甲氧基吡啶-4-基}-3-硝基苯基)氨基甲酸甲酯：在氩气氛围下向29G(3.0g，6.54mmol；通过类似于用于29H的方法的手性SFC分离方法加以富集)于氯仿(131mL)中的经搅拌溶液中分别添加碳酸银(I)(50%于上)(3.61g，6.54mmol)和碘代甲烷(1.22mL，19.63mmol)。在65℃加热反应混合物。搅拌14小时后，过滤反应混合物，浓缩，且通过正相色谱纯化，得到呈褐色固体状的199A(2.69克，87%)。MS(ESI)m/z:473(M+H)+。
199B.N-(3-氨基-4-{2-[(1S)-1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}丁-3-烯-1-基]-6-甲氧基-吡啶-4-基}苯基)氨基甲酸甲酯：用锌粉(3.86g，59.0mmol)和氯化铵(0.632g，11.81mmol)处理于MeOH(60ml)中的199A(2.69g，5.69mmol)且在65℃加热过夜。经由
Figure BDA0000487247700002423
塞趁热过滤悬浮液且浓缩。将此残余物再溶解于EtOAc(含10%MeOH)中，用饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到199B。MS(ESI)m/z:443(M+H)+。
199C.N-(4-{2-[(1S)-1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}丁-3-烯-1-基]-6-甲氧基吡啶-4-基}-3-(2-甲基丁-3-烯酰氨基)苯基)氨基甲酸甲酯：在-10℃于氩气下将DIPEA(3.02mL，17.29mmol)添加至2-甲基丁-3-烯酸(0.865g，8.64mmol)和199B(2.55g，5.76mmol)于EtOAc(57.6ml)中的溶液中。随后，逐滴添加1-丙烷膦酸环酐(6.79ml，11.53mmol；50%EtOAc溶液)且在规定条件下搅拌反应混合物1小时且接着使其达到室温。48小时后，用EtOAc稀释反应混合物，用饱和NaHCO3、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。通过正相色谱纯化，得到呈白色固体状的199C(2.52g，83%)。MS(ESI)m/z:525.1(M+H)+。
199D.N-[(14S)-17-甲氧基-5-[(甲氧羰基)氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯：加热199C(1.50g，2.86mmol)和Ts-OH(0.598g，3.15mmol)于DCM(337mL)中的溶液0.5小时。将溶液冷却至室温且用氩气使其鼓泡0.5小时。向溶液中添加二氯化三环己基膦[1,3-二(2,4,6-三甲苯基)-4,5-二氢咪唑-2-亚基][苯亚甲基]钌(IV)(0.728g，0.858mmol)且用氩气再使所得溶液鼓泡0.5小时，之后在45℃加热12小时。用饱和NaHCO3水溶液洗涤反应混合物。用DCM(2×30mL)进一步萃取水层。经Na2SO4干燥合并的有机萃取物，浓缩且通过正相色谱纯化。通过以下步骤来还原烯烃双键：将其溶解于EtOH(50mL)中，用氧化铂(0.065克，0.286mmol)处理，且经受氢气氛围(55psi)过夜。经由
Figure BDA0000487247700002431
塞滤出催化剂且浓缩滤液，得到呈非对映异构体混合物形式的199D(720mg，51%)。
199E1.N-[(10S,14S)-17-甲氧基-5-[(甲氧羰基)氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯与199E2.N-[(10R,14S)-17-甲氧基-5-[(甲氧羰基)氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环-[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯：使用手性AD-H30×250mm柱，用30%EtOH与70%CO2的混合物以85毫升/分钟的流速和100巴在40℃对非对映异构体混合物199D(720mg，1.44mmol)进行手性SFC分离。将峰1指定为对映异构体A(199E1；280mg，74%)且将峰2指定为对映异构体B(199E2；360mg，100%)。两种对映异构体的MS(ESI)m/z:499.1(M+H)+。
实施例199.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-17-甲氧基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,15(19),16-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：用HCl(0.501mL，2.006mmol)处理于MeOH(0.20mL)中的199E2(0.020g，0.040mmol)1小时且接着浓缩至干燥。通过反相制备性HPLC纯化粗残余物。将胺三氟乙酸盐溶解于DMF(1mL)中，接着分别添加中间体21(0.012g，0.048mmol)、EDC(0.015g，0.080mmol)、水合1-羟基苯并三唑(0.012g，0.080mmol)和DIPEA(0.070mL，0.401mmol)。3小时后，通过反相HPLC纯化反应混合物，得到呈白色固体状的所需产物(11mg，35%)。基于先前化合物指定手性。1HNMR(500MHz,MeOD)δ7.87-7.84(m,1H),7.64-7.60(m,1H),7.52-7.46(m,4H),7.19(d,J=1.1Hz,1H),6.79(d,J=1.4Hz,1H),5.25(dd,J=10.5,5.5Hz,1H),4.07(s,3H),3.80(s,3H),2.75-2.72(m,1H),2.54(d,J=0.8Hz,3H),2.17-2.12(m,1H),1.98-1.93(m,1H),1.85-1.79(m,1H),1.51-1.45(m,2H),1.01(d,J=7.2Hz,3H),0.64(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:636(M+H)+。分析性HPLCRT=7.32分钟(方法B)。
实施例200
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-17-乙氧基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,15(19),16-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002441
实施例200.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-17-乙氧基-10-甲基-9-氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,15(19),16-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例199类似的方式，通过在o-烷基化步骤中用碘代乙烷替换碘代甲烷来制备实施例200。基于先前化合物指定手性。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.89(s,1H),9.68(s,1H),8.43(d,J=8.0Hz,1H),7.95(ddd,J=8.3,6.8,1.7Hz,1H),7.75(ddd,J=8.1,6.6,1.5Hz,1H),7.53(td,J=8.3,1.4Hz,1H),7.51-7.47(m,1H),7.46-7.42(m,1H),7.35(d,J=1.7Hz,1H),7.16(d,J=0.8Hz,1H),6.66(d,J=1.1Hz,1H),5.19-5.05(m,1H),4.40(q,J=7.1Hz,2H),3.70(s,3H),2.69-2.63(m,1H),2.49-2.43(m,3H),2.00-1.83(m,2H),1.77-1.65(m,1H),1.43-1.35(m,4H),1.33-1.23(m,1H),0.85(d,J=6.9Hz,3H),0.37(d,J=11.0Hz,1H)ppm。MS(ESI)m/z:650(M+H)+。分析性HPLCRT=7.58分钟(方法B)。
实施例201
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10,16-二甲基-9,17-二氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,15(19)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯
Figure BDA0000487247700002451
201A.N-(4-{6-[(1S)-1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}丁-3-烯-1-基]-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基}-3-硝基苯基)氨基甲酸甲酯：在氩气氛围下向29G(1.0g，2.181mmol；通过类似于用于29H的方法的SFC分离方法加以富集)于氯仿(43.6mL)中的经搅拌溶液中添加Cs2CO3(0.711g，2.181mmol)和碘代甲烷(0.929g，6.54mmol)。在65℃加热反应混合物。14小时后，反应混合物展示1:1比率的所需的N-甲基化产物(由LC测定极性较大)与O-甲氧基产物(由LC测定极性较小)。过滤反应混合物，浓缩且通过正相柱色谱纯化。分离两种产物，其中所需产物(0.542g，53%)继续用于后继反应且搁置O-甲基化副产物(382mg，37%，分析资料对应于来自先前替代合成的分析资料)。MS(ESI)m/z:473(M+H)+。
201B.N-(4-{6-[(1S)-1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}丁-3-烯-1-基]-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基}-3-(2-甲基丁-3-烯酰氨基)苯基)氨基甲酸甲酯：将氯化铵(0.122g，2.286mmol)添加至201A(0.540g，1.143mmol)和锌(0.747g，11.43mmol)于MeOH(11.43mL)中的悬浮液中。在65℃加热反应混合物过夜。使反应混合物通过
Figure BDA0000487247700002461
塞且浓缩。将此残余物再溶解于EtOAc中，用饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩。将1-丙烷膦酸环酐(1.455g，2.286mmol；50%EtOAc溶液)添加至苯胺中间体、2-甲基丁-3-烯酸(0.460g，4.58mmol)和DIPEA(1.2ml，6.86mmol)于EtOAc(30mL)中的溶液中。搅拌48小时后，用饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤反应混合物，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到所需产物。MS(ESI)m/z:525.2(M+H)+。
201C.N-[(14S)-5-[(甲氧羰基)氨基]-10,16-二甲基-9,17-二氧代-8,16-二氮杂三环-[13.3.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,15(19)-五烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯：将溶解于DCE(无水)(21.8mL)中的201B(200mg，0.381mmol)以等份添加至两个大微波瓶中。脱气15分钟后，将二氯化三环己基膦[1,3-二(2,4,6-三甲苯基)-4,5-二氢咪唑-2-亚基][苯亚甲基]钌(IV)(130mg，0.152mmol)以等份添加至各瓶中，继而在微波条件下于120℃照射30分钟。浓缩反应混合物且通过反相制备性HPLC纯化。在这些条件下成功地分离非对映异构体。将峰1指定为非对映异构体A(201C1；次要；极性较大RT(由制备性ACN测定))且将峰2指定为非对映异构体B(201C2，主要；极性较小RT(由制备性ACN测定))。将各非对映异构体溶解于EtOH(10mL)中，用氧化铂(IV)(13mg，0.057mmol)处理且经受氢气(55psi)过夜。过滤反应混合物，浓缩。搁置201C1(42mg，44%)且201C2(51mg，54%)未经进一步纯化即继续用于下一反应。两种非对映异构体的MS(ESI)m/z:499(M+H)+。
实施例201.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10,16-二甲基-9,17-二氧代-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,15(19)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯：用HCl(0.552ml，2.206mmol)处理于MeOH(0.200mL)中的201C2(0.022g，0.044mmol)1小时且接着浓缩至干燥。将胺盐酸盐溶解于DMF(1mL)中，接着分别添加中间体21(0.014g，0.053mmol)、EDC(0.017g，0.088mmol)、水合1-羟基苯并三唑(0.014g，0.088mmol)、DIPEA(0.077ml，0.441mmol)。15小时后，通过反相制备性HPLC纯化反应混合物，得到呈白色固体状的所需产物(10mg，33%)。基于先前化合物指定手性。1H NMR(500MHz,MeOD)δ7.83(ddd,J=8.2,6.8,1.5Hz,1H),7.57(ddd,J=8.0,6.5,1.7Hz,1H),7.53-7.45(m,4H),6.74(d,J=1.7Hz,1H),6.60(d,J=1.9Hz,1H),5.26(dd,J=11.0,4.4Hz,1H),3.77(s,3H),3.66(s,3H),2.58-2.53(m,1H),2.52-2.49(m,3H),2.19-2.14(m,1H),2.11-2.06(m,1H),1.67-1.61(m,2H),1.46-1.40(m,1H),1.35-1.29(m,1H),1.19(d,J=6.9Hz,3H)ppm。MS(ESI)m/z:636(M+H)+。分析性HPLCRT=6.28分钟(方法B)。
实施例202
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16,17-三氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002471
实施例202.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16,17-三氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例22相同的方式，通过使用22IA且用中间体21替换中间体2来制备实施例202。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ9.63(br.s.,1H),8.74-8.11(m,2H),8.04-7.31(m,4H),7.21-6.97(m,1H),5.53(br.s.,1H),3.64-3.32(m,3H),2.76(br.s.,1H),2.57-2.37(s,3H),2.27(br.s.,1H),2.09(d,J=9.3Hz,1H),1.99-1.48(m,3H),0.94(d,J=6.6Hz,3H),0.43(br.s.,1H)ppm。MS(ESI)m/z:607.2(M+H)+。分析性HPLCRT=9.17分钟(方法A)。
实施例203
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-10,10-二氟-9-氧代-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002481
实施例203.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-10,10-二氟-9-氧代-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例34相同的方式，通过在步骤2I中用2,2-二氟戊-4-烯酸替换2-甲基丁-3-烯酸且在最终步骤中使用中间体25来制备实施例203。1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.69(s,1H),8.28(s,1H),7.73(ddd,J=8.2,6.6,1.6Hz,1H),7.65(d,J=1.6Hz,1H),7.60-7.44(m,4H),7.43-7.35(m,1H),5.23(dd,J=10.4,6.6Hz,1H),3.77(s,3H),2.45-2.29(m,4H),2.20-2.04(m,3H),1.63(br.s.,1H),1.05(br.s.,1H)ppm。MS(ESI)m/z:616.2(M+H)+。分析性HPLCRT=6.89分钟(方法A)。
实施例204
N-[(15S)-15-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-9-氧代-8,17,19-三氮杂四环[14.2.1.02,7.011,13]十九碳-1(18),2,4,6,16(19)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002482
204A.N-[(15S)-5-[(甲氧羰基)氨基]-9-氧代-17-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-8,17,19-三氮杂四环[14.2.1.02,7.011,13]十九碳-1(18),2,4,6,16(19)-五烯-15-基]氨基甲酸叔丁酯：在0℃向34F(100mg，0.175mmol)和二乙酰氧基钯(1.963mg，8.75μmol)于CH2Cl2(20mL)中的混合物中逐滴添加重氮甲烷(73.5mg，1.749mmol)。搅拌反应混合物2小时且用1mLHOAc淬灭。用Na2CO3水溶液中和溶液且用乙醚萃取。用盐水洗涤有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩。通过反相HPLC纯化残余物，得到呈白色固体状的产物(29mg，28%)。NMR展示为非对映异构体的混合物。MS(ESI)m/z:586.4(M+H)+。
实施例204.N-[(15S)-15-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-9-氧代-8,17,19-三氮杂四环[14.2.1.02,7.011,13]十九碳-1(18),2,4,6,16(19)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例34相同的方式，通过用204A替换34F来制备实施例204。实施例204为非对映异构体的混合物。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.36(s,1H),7.74(ddd,J=8.3,6.7,1.8Hz,1H),7.60(d,J=1.7Hz,1H),7.52-7.37(m,5H),5.31(dd,J=4.4,3.6Hz,1H),3.78(s,3H),2.80-2.70(m,2H),2.38(d,J=0.8Hz,3H),1.58-1.46(m,2H),1.06(tt,J=9.3,4.7Hz,1H),0.82(ddd,J=11.1,7.6,3.9Hz,1H),0.60-0.48(m,2H)ppm。MS(ESI)m/z:592.0(M+H)+。分析性HPLCRT=5.31分钟(方法A)。
实施例205
N-[(12E,15S)-15-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-9-氧代-8,17,19-三氮杂三环[14.2.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,12,16(19)-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002491
实施例205.N-[(12E,15S)-15-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-9-氧代-8,17,19-三氮杂三环[14.2.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,12,16(19)-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例58相同的方式，通过用中间体25替换中间体22来制备实施例205。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.30(s,1H),7.72(ddd,J=8.3,6.8,1.7Hz,1H),7.58(s,1H),7.50-7.37(m,6H),5.60(ddd,J=15.2,9.1,5.6Hz,1H),5.48-5.40(m,1H),5.20(dd,J=10.5,4.7Hz,1H),3.76(s,3H),2.91-2.85(m,1H),2.67-2.60(m,1H),2.55-2.36(m,7H)ppm。MS(ESI)m/z:592.3(M+H)+。分析性HPLCRT=5.84分钟(方法A)。
表11中的以下实施例是通过使用与实施例34中所示相同的操作来制备。最终步骤中所使用的酸是如下表中的中间部分中所指示。除实施例34中所述的偶合试剂以外，可使用多种偶合试剂，如BOP、PyBop、EDC/HOBt、HATU或T3P。在最终偶合之前实现脱除保护基Boc和SEM，这不同于实施例34，其中在步骤34J中单独移除Boc基团。
Figure BDA0000487247700002501
表11
Figure BDA0000487247700002502
Figure BDA0000487247700002511
实施例215
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸2-甲氧基乙酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002512
215A.{3-溴-4-[2-((S)-1-叔丁氧羰基氨基-丁-3-烯基)-3H-咪唑-4-基]-苯基}-氨基甲酸甲酯：遵循步骤34A中所述的操作，通过用中间体18替换中间体16；继而进行步骤34B来制备此化合物。MS(ESI)m/z:467.1(M+2+H)+。
215B.{3-溴-4-[2-((S)-1-叔丁氧羰基氨基-丁-3-烯基)-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-咪唑-4-基]-苯基}-氨基甲酸甲酯：向215A(15g，32.2mmol)于THF(77mL)中的经冷却(0℃)溶液中添加N,N-二环己基甲胺(7.52mL，35.5mmol)，继而逐滴添加SEM-Cl(6.29mL，35.5mmol)。在0℃搅拌反应混合物2小时且接着使其缓慢升温至室温。18小时后，用EtOAc稀释黄色悬浮液，用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤且浓缩。通过正相色谱纯化，得到12.24g(64%)呈灰白色固体状的215B。MS(ESI)m/z:595.1(M+H)+和597.2(M+2+H)+。
215C.{3-氨基-4-[2-((S)-1-叔丁氧羰基氨基-丁-3-烯基)-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-咪唑-4-基]-苯基}-氨基甲酸甲酯：将容纳于DMSO(6.72mL)中的215B(2g，3.36mmol)、碘化铜(I)(0.128g，0.672mmol)、L-脯氨酸(0.155g，1.343mmol)和碳酸钾(1.392g，10.07mmol)的厚壁小瓶排空且用氩气回填三次。接着添加28%氢氧化铵水溶液(0.607mL，4.37mmol)。用涂有铁氟龙(teflon)的螺旋盖密封小瓶且使反应混合物升温至85℃。20小时后，将反应混合物冷却至室温，用EtOAc稀释，用水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩。通过正相色谱纯化，得到1.05g(58.8%)呈黄色固体状的215C。MS(ESI)m/z:532.5(M+H)+。
215D.N-[(1S)-1-(4-{4-[(甲氧羰基)氨基]-2-[(2R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基]苯基}-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-咪唑-2-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯：向215C(4.83g，9.08mmol)于乙酸乙酯(91mL)中的经冷却(0℃)的澄清黄橙色溶液中添加中间体45(1.0g，9.99mmol)和许尼希碱(6.34mL，36.3mmol)。随后，经20分钟逐滴添加1-丙烷膦酸环酐(T3P)(50%EtOAc溶液)(13.38mL，22.70mmol)且在0℃搅拌反应混合物。3小时后，用EtOAc稀释反应混合物且用饱和NaHCO3洗涤。用EtOAc(2×)萃取水层。合并有机层且用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到橙色泡沫状物。通过正相色谱纯化，得到呈白色泡沫状的215D(4.53g，81%)。质子NMR指示非对映异构体的3:1混合物。MS(ESI)m/z:614.4(M+H)+。
215E.N-[(10R,11E,14S)-5-[(甲氧羰基)氨基]-10-甲基-9-氧代-16-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,11,15(18)-六烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体A)与215F.N-[(10S,11E,14S)-5-[(甲氧羰基)氨基]-10-甲基-9-氧代-16-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,11,15(18)-六烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体B)：向215D(4.40g，7.17mmol)于二氯甲烷(717mL)中的溶液中添加单水合pTsOH(1.523g，7.89mmol)且用氩气使混合物脱气30分钟。随后，为烧瓶装备回流冷凝器且使反应混合物升温至40℃并持续1小时。随后，经35分钟至40分钟经由注射器逐滴添加第二代格拉布催化剂(2.440g，2.87mmol)于20mLDCM(用氩气脱气)中的暗红色溶液。21.5小时后，将反应混合物冷却至室温。用饱和NaHCO3、盐水洗涤反应混合物，经MgSO4干燥，过滤且浓缩，得到棕色泡沫状物。通过正相色谱纯化，得到呈灰白色固体状的215E(非对映异构体A)(1.71g，41%)和215E(非对映异构体A)与215F(非对映异构体B)的混合物(1.4g)。MS(ESI)m/z:586.3(M+H)+。
215G.N-[(10R,14S)-5-[(甲氧羰基)氨基]-10-甲基-9-氧代-16-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯：用氩气使215E(1.71g，2.92mmol)于EtOAc(97mL)中的暗棕色溶液脱气30分钟。随后，添加氧化铂(IV)(0.066g，0.292mmol)且使来自气球的氢气鼓泡通过反应混合物数分钟。在氢气氛围下搅拌反应混合物。24小时后，再添加一定量氧化铂(IV)(0.192g，0.876mmol)且在氢气氛围下搅拌反应混合物。21小时后，停止反应。用真空/氩气吹扫容器三次，接着添加
Figure BDA0000487247700002531
且过滤反应混合物，用EtOAc冲洗。浓缩所得的澄清黄棕色滤液，得到重量为1.66g的灰白色固体。自甲醇(30mL)中重结晶，得到呈白色固体状的215G(0.575g，34%)。MS(ESI)m/z:588.4(M+H)+。
215H.N-[(10R,14S)-5-氨基-10-甲基-9-氧代-16-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体A)双三氟乙酸盐与215I.N-[(10S,14S)-5-氨基-10-甲基-9-氧代-16-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体B)双三氟乙酸盐：使容纳215G(0.100g，0.170mmol)于MeOH(2.84mL)和1.0MNaOH(1.021mL，1.021mmol)中的白色悬浮液的密封管升温至75℃。2.5小时后，再添加MeOH(5.6mL)和1.0MNaOH(1.021mL，1.021mmol)且在75℃加热反应混合物。16.5小时后，再添加1.0MNaOH(2mL)且在75℃加热反应混合物。21小时后，停止反应且冷却至室温。用1.0NHCl中和反应混合物且浓缩。将固体分配于EtOAc与饱和NaHCO3之间且分离各层。用EtOAc萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到重量为0.107g的白色固体。通过反相色谱纯化，得到215H(非对映异构体A)(0.082g，63.6%产率)和215I(非对映异构体B)(0.025g，19%)。MS(ESI)m/z:530.4(M+H)+。
215J.N-[(10R,14S)-5-{[(2-甲氧基乙氧基)羰基]氨基}-10-甲基-9-氧代-16-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯：向215H(0.082g，0.108mmol)于二氯甲烷(1.082mL)和吡啶(0.026mL，0.325mmol)中的经冷却(0℃)的澄清微黄色溶液中添加氯甲酸2-甲氧基乙酯(0.013mL，0.114mmol)。1.5小时后，用EtOAc稀释反应混合物且用饱和NaHCO3、盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到呈灰白色固体状的215J(0.062g，91%产率)。MS(ESI)m/z:632.4(M+H)+。此物质未经进一步纯化即用于下一步中。
215K.N-[(10R,14S)-14-氨基-10-甲基-9-氧代-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸2-甲氧基乙酯二盐酸盐：在75℃加热容纳215J(0.062g，0.098mmol)于4.0MHCl的二噁烷溶液(2.453mL，9.81mmol)中的澄清微黄色溶液的密封管。1小时后，浓缩所得悬浮液，得到呈暗黄色固体状的215K(0.057g，122%)。MS(ESI)m/z:402.1(M+H)+。此物质未经进一步纯化即用于下一步中。
实施例215.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸2-甲氧基乙酯三氟乙酸盐：根据实施例2中所述的操作，通过用215K替换2M且通过用中间体1替换中间体11来制备实施例215。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.91(d,J=2.2Hz,1H),7.84(ddd,J=8.1,6.6,1.5Hz,1H),7.73(ddd,J=8.3,6.8,1.7Hz,1H),7.58(d,J=1.9Hz,1H),7.51(d,J=8.3Hz,1H),7.48(s,1H),7.47-7.40(m,2H),5.41(dd,J=10.3,6.7Hz,1H),4.32-4.27(m,2H),3.68-3.63(m,2H),3.39(s,3H),2.82-2.73(m,1H),2.34-2.24(m,1H),2.18-2.08(m,1H),1.82-1.73(m,1H),1.67-1.56(m,2H),1.04(d,J=7.2Hz,3H),0.78-0.65(m,1H)。MS(ESI)m/z:625.1(M+H)+。分析性HPLCRT=4.92分钟(方法D)。
实施例216
N-[(12E,15S)-18-氯-15-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-9-氧代-8,17,19-三氮杂三环[14.2.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,12,16(19)-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002551
216A.N-[(12E,15S)-18-氯-5-[(甲氧羰基)氨基]-9-氧代-17-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-8,17,19-三氮杂三环[14.2.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,12,16(19)-六烯-15-基]氨基甲酸叔丁酯：将57F(2.56g，4.37mmol)和NCS(0.700g，5.24mmol)于CHCl3(18.36mL)和ACN(18.36mL)中的白色悬浮液加热至65℃。10小时后，将反应混合物冷却至室温且分配于DCM与水之间且分离各层。用DCM(2×)萃取水层。合并有机层，用饱和NaHCO3、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤且浓缩，得到棕色泡沫状物。通过反相色谱分离E型与Z型烯烃异构体。合并含有E型烯烃异构体的洗脱份，用饱和NaHCO3溶液中和，且接着浓缩，得到固体。将固体分配于EtOAc与水之间且分离各层。用盐水洗涤有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到呈黄色泡沫状的所需产物(1.15g，42%)。MS(ESI)m/z:620.1(M+H)+。
216B.N-[(12E,15S)-15-氨基-18-氯-9-氧代-17-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-8,17,19-三氮杂三环[14.2.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,12,16(19)-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯：向216A(0.24g，0.387mmol)于DCM(5mL)中的溶液中添加TFA(1mL，12.98mmol)。在室温搅拌反应混合物1小时且浓缩。通过反相色谱纯化，在用饱和NaHCO3中和洗脱份且浓缩后，得到固体。将固体分配于EtOAc与水之间且分离各层。用盐水洗涤有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到呈白色固体状的所需产物(0.095g，47%)。MS(ESI)m/z:520.1(M+H)+。
实施例216.N-[(12E,15S)-18-氯-15-[1-(3-氯-2-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-9-氧代-8,17,19-三氮杂三环[14.2.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,12,16(19)-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：以与实施例57相同的方式，通过使用216B和中间体1来制备实施例216。1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.52(br.s.,1H),8.84(dd,J=17.0,2.2Hz,2H),7.75(td,J=7.3,1.4Hz,1H),7.68(m,1H),7.41(m,1H),7.35-7.31(m,2H),5.27(dd,J=10.7,6.3Hz,1H),4.51-4.20(m,1H),3.67(s,3H),2.51-2.33(m,1H),2.30-1.92(m,2H),1.67-1.42(m,2H),1.45-1.07(m,2H),0.93(s,1H)ppm。MS(ESI)m/z:613.0(M+H)+。分析性HPLCRT=8.53分钟(方法A)。
实施例217
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-9-氧代-11-氧杂-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002561
217A.(S)-1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-胺：向(S)-(1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(3g，10.61mmol)中添加HCl的二噁烷溶液(15mL，60.0mmol)且在室温搅拌反应混合物1小时。接着浓缩反应混合物且未经进一步纯化即用于下一步。MS(ESI)m/z:183.1(M+H)+。
217B.(S)-(1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸苯甲酯：向217A(1.938g，10.61mmol)于MeOH(40mL)中的溶液中添加(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)碳酸苯甲酯(2.64g，10.61mmol)，继而添加DIEA(3.71mL，21.22mmol)且在室温搅拌反应混合物过夜。浓缩混合物。用乙酸乙酯稀释残余物且用盐水洗涤。经MgSO4干燥有机层且浓缩。通过硅胶色谱纯化粗产物，得到呈黄色固体状的所需产物(3.3g，95%)。MS(ESI)m/z:317.0(M+H)+。
217C.(S)-(1-(4-氯吡啶-2-基)-3-氧代丙基)氨基甲酸苯甲酯：(参考文献：J.Org.Chem58,4,1993,860-866)向217B(1g，3.16mmol)于MeOH(40mL)和水(20mL)中的溶液中添加4wt%OsO4的水溶液(1.350mL，0.221mmol)。搅拌5分钟后，形成澄清褐黄色溶液。接着在剧烈搅拌下向此溶液中添加过碘酸钠(2.026g，9.47mmol)。接着颜色逐渐褪去，形成白色悬浮液。在室温继续搅拌反应混合物过夜。用水(约100mL)稀释反应混合物且用EtOAc(3×)萃取。经MgSO4干燥合并的有机层，过滤且浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，得到所需产物(66%)。MS(ESI)m/z:319.0(M+H)+。
217D.(S)-(1-(4-氯吡啶-2-基)-3-羟基丙基)氨基甲酸苯甲酯：向217C(2.2g，6.90mmol)于乙醇(50mL)中的溶液中添加硼氢化钠(0.522g，13.80mmol)且在室温搅拌反应混合物过夜。接着用盐水淬灭反应混合物且用EtOAc萃取。浓缩有机层且通过硅胶色谱纯化残余物，得到所需产物(1.58g，68%)。MS(ESI)m/z:321.0(M+H)+。
217E.(S)-2-(3-(((苯甲氧基)羰基)氨基)-3-(4-氯吡啶-2-基)丙氧基)乙酸叔丁酯：在0℃向溴乙酸叔丁酯(0.415mL，2.81mmol)和NaH(224mg，5.61mmol)于THF(18mL)中的混合物中逐滴添加217D(900mg，2.81mmol)于THF(9mL)中的溶液。在0℃再搅拌反应混合物1小时且接着用饱和NH4Cl淬灭。用乙酸乙酯萃取混合物。经MgSO4干燥有机层且浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，分离出所需产物(300mg，23%)。MS(ESI)m/z:435.0(M+H)+.
217F.(S)-2-(3-(4-(2-氨基-4-硝基苯基)吡啶-2-基)-3-(((苯甲氧基)羰基)氨基)丙氧基)乙酸叔丁酯：使氩气鼓泡通过DMSO(8mL)和水(0.062mL，3.45mmol)的溶液30分钟。接着将此溶剂混合物添加至容纳217E(300mg，0.690mmol)、2-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧硼杂环己烷-2-基)-5-硝基苯胺(345mg，1.380mmol)和磷酸钾盐(293mg，1.380mmol)的微波小瓶中。再使氩气鼓泡通过深红色溶液15至20分钟。接着添加二氯化1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁钯(II)-DCM(56.7mg，0.069mmol)且在90℃搅拌混合物5小时。用乙酸乙酯稀释反应混合物且用盐水洗涤。经MgSO4干燥有机层且浓缩。通过硅胶色谱纯化残余物，得到所需产物(170mg，43%)。MS(ESI)m/z:537.0(M+H)+。
217G.(S)-2-(3-(((苯甲氧基)羰基)氨基)-3-(4-(2,4-二氨基苯基)吡啶-2-基)丙氧基)乙酸叔丁酯：向217F(170mg，0.317mmol)于MeOH(8mL)中的溶液中添加锌(207mg，3.17mmol)和氯化铵(169mg，3.17mmol)。在室温搅拌反应混合物5小时。使用0.45微米过滤器过滤反应混合物且浓缩，得到粗产物，将其通过硅胶色谱纯化，得到所需产物(70mg，41%)。MS(ESI)m/z:507.0(M+H)+。
217H.(S)-2-(3-(4-(2-氨基-4-((甲氧羰基)氨基)苯基)吡啶-2-基)-3-(((苯甲氧基)羰基)氨基)丙氧基)乙酸叔丁酯：在-78℃向217G(70mg，0.138mmol)于DCM(5mL)中的溶液中添加吡啶(0.011mL，0.138mmol)，继而添加氯甲酸甲酯(10.70μL，0.138mmol)。在-78℃搅拌反应混合物1小时且接着用饱和氯化铵淬灭。用DCM和EtOAc萃取混合物。浓缩合并的有机层且通过硅胶色谱纯化，得到所需产物(70mg，85%)。MS(ESI)m/z:565.1(M+H)+。
217I.(S)-2-(3-(4-(2-氨基-4-((甲氧羰基)氨基)苯基)吡啶-2-基)-3-(((苯甲氧基)羰基)氨基)丙氧基)乙酸：在室温于氩气下用HCl的二噁烷溶液(5mL，20.00mmol)处理217H(70mg，0.124mmol)1小时。接着浓缩反应混合物且粗产物未经进一步纯化即用于下一步(56mg，84%)。MS(ESI)m/z:509.0(M+H)+。
217J.N-[(14S)-5-[(甲氧羰基)氨基]-9-氧代-11-氧杂-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-14-基]氨基甲酸苯甲酯：向圆底烧瓶中添加BOP(41.3mg，0.093mmol)、DMAP(19.17mg，0.157mmol)和DIEA(0.046mL，0.262mmol)以及DCM(11mL)。在室温持续搅拌上述混合物，同时在容纳217I(19mg，0.037mmol)的单独的圆底烧瓶中添加DIEA(0.046mL，0.262mmol)和DMF(2mL)。接着经6小时时段将DMF溶液逐滴添加至DCM溶液中。浓缩反应混合物且接着通过反相HPLC纯化粗产物，得到所需产物(5.2mg，27%)。MS(ESI)m/z:491.0(M+H)+。
217K.N-[(14S)-14-氨基-9-氧代-11-氧杂-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯：向217J(1.2mg，2.446μmol)于乙醇(1mL)中的经脱气溶液中添加Pd/C(2.60mg，2.446μmol)。用氢气吹扫反应容器3次且接着在氢气球下搅拌2小时。经
Figure BDA0000487247700002581
过滤反应混合物，用MeOH洗脱。浓缩滤液，得到所需产物(0.9mg，98%)。MS(ESI)m/z:357.2(M+H)+。
实施例217.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-9-氧代-11-氧杂-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：向中间体25(2.59mg，10.19μmol)于DMF(0.5mL)中的溶液中添加EDC(3.55mg，0.019mmol)、HOBT(4.5mg，0.019mmol)和DIEA(0.016mL，0.093mmol)。在室温搅拌反应混合物15分钟且添加217K(3.3mg，9.26μmol)。在室温于氩气下搅拌反应混合物过夜。浓缩反应混合物且通过反相HPLC纯化，得到所需产物。1HNMR(500MHz,乙腈-d3)δ8.65(d,J=5.8Hz,1H),8.60(s,1H),8.20-8.13(m,3H),8.05(s,1H),7.85(d,J=1.7Hz,1H),7.72-7.64(m,2H),7.61(d,J=8.5Hz,1H),7.48(dd,J=8.5,1.9Hz,1H),7.45-7.39(m,1H),7.37-7.31(m,1H),5.41-5.29(m,1H),4.00(d,J=12.9Hz,1H),3.77(s,1H),3.68-3.58(m,1H),3.37-3.25(m,2H),2.51-2.38(m,3H),2.36(s,3H),2.25-2.18(m,1H)ppm。MS(ESI)m/z:593.0(M+H)+。分析性HPLCRT=6.18分钟(方法A)。
实施例218
N-[(14R)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-9-氧代-12-氧杂-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002591
218A.N-[(1R)-1-(4-{2-氨基-4-[(甲氧羰基)氨基]苯基}-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-咪唑-2-基)-2-(苯甲氧基)乙基]氨基甲酸叔丁酯：遵循文献操作(WO11100401，实施例10)，通过用(S)-3-(苯甲氧基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酸替换(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)戊-4-烯酸来制备此化合物。黄色固体。MS(ESI)m/z:612.5(M+H)+。
218B.N-[(1R)-2-(苯甲氧基)-1-(4-{4-[(甲氧羰基)氨基]-2-(三氟乙酰氨基)苯基}-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-咪唑-2-基)乙基]氨基甲酸叔丁酯：在0℃向218A(2.035g，3.33mmol)于DCM(107mL)中的溶液中添加吡啶(0.404mL，4.99mmol)，继而添加TFAA(0.611mL，4.32mmol)。30分钟后，停止反应且将其用饱和NaHCO3、1NHCl、盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且浓缩，得到呈黄色固体状的所需产物(2.3g，98%产率)。该物质未经进一步纯化即继续用于下一步。
218C.N-[(1R)-2-羟基-1-(4-{4-[(甲氧羰基)氨基]-2-(三氟乙酰氨基)苯基}-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-咪唑-2-基)乙基]氨基甲酸叔丁酯：向218B(2.07g，2.92mmol)于EtOH(58.5mL)中的溶液中添加TFA(0.338mL，4.39mmol)。在室温搅拌反应混合物5分钟，接着添加10%钯/碳(0.311g，0.292mmol)。使氢气鼓泡进入几分钟，且接着在氢气球下搅拌反应混合物24小时。经45μm GMF过滤器过滤反应混合物，用MeOH冲洗。浓缩滤液。将残余物溶解于EtOAc中，用饱和NaHCO3、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。通过硅胶色谱纯化，得到呈白色固体状的所需产物(1.61g，89%)。MS(ESI)m/z:618.4(M+H)+。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.58(d,J=2.2Hz,1H),7.68-7.62(m,2H),7.43(d,J=8.0Hz,1H),5.58(d,J=10.7Hz,1H),5.46(d,J=11.0Hz,1H),5.04(t,J=6.2Hz,1H),3.92(d,J=6.6Hz,2H),3.77(s,3H),3.65(t,J=8.1Hz,2H),1.46(s,9H),1.04-0.92(m,2H),0.02(s,9H)ppm。
218D.3-[(2R)-2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-2-(4-{4-[(甲氧羰基)氨基]-2-(三氟乙酰氨基)苯基}-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-咪唑-2-基)乙氧基]丙酸苯甲酯三氟乙酸盐：在室温向218C(0.054g，0.074mmol)、丙烯酸苯甲酯(0.575mL，3.69mmol)于THF(0.922mL)中的溶液中添加氢氧化苯甲基三甲基铵(0.087mL，0.221mmol)(40wt.%水溶液)。在室温搅拌反应混合物3天，接着将其浓缩。通过反相HPLC纯化，得到呈白色固体状的所需产物(0.013g，20%)。MS(ESI)m/z:780.4(M+H)+。1HNMR(500MHz,MeOD)d8.26(br.s.,1H),7.61-7.55(m,3H),7.47(d,J=7.4Hz,1H),7.34-7.23(m,4H),5.57-5.44(m,2H),5.20-5.15(m,1H),5.08-4.98(m,2H),3.88-3.73(m,7H),3.64(t,J=8.3Hz,2H),2.61(t,J=5.9Hz,2H),1.43(s,9H),1.04-0.90(m,2H),0.01(s,9H)ppm。
218E.3-[(2R)-2-(4-{2-氨基-4-[(甲氧羰基)氨基]苯基}-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-咪唑-2-基)-2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}乙氧基]丙酸双三氟乙酸盐：向218D(0.013g，0.015mmol)于MeOH(1mL)中的溶液中添加1NNaOH(0.1mL，0.100mmol)。在密封管中于75℃搅拌反应混合物。7小时后，将反应混合物冷却至室温且接着将其浓缩。通过反相HPLC纯化，得到呈黄色固体状的所需产物(0.008g，67%)。MS(ESI)m/z:594.4(M+H)+。
218F.N-[(14R)-5-[(甲氧羰基)氨基]-9-氧代-16-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-12-氧杂-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯三氟乙酸盐：向218E(0.008g，9.73μmol)于DMF(9.73mL)中的溶液中添加BOP(0.015g，0.034mmol)、DMAP(4.16mg，0.034mmol)和DIPEA(8.50μL，0.049mmol)。在室温搅拌反应混合物16小时且接着将其浓缩。通过反相HPLC纯化，得到呈黄色固体状的所需产物(0.005g，75%)。MS(ESI)m/z:576.3(M+H)+。1HNMR(500MHz,MeOD)δ7.67(s,1H),7.61(d,J=1.9Hz,1H),7.53(d,J=8.5Hz,1H),7.41(dd,J=8.4,2.1Hz,1H),5.79(d,J=11.0Hz,1H),5.59(d,J=11.0Hz,1H),5.19(t,J=2.6Hz,1H),4.15(dd,J=10.5,2.5Hz,1H),3.99(dt,J=8.7,3.5Hz,1H),3.81-3.69(m,5H),3.56-3.48(m,1H),3.42(dd,J=10.2,3.0Hz,1H),2.71(ddd,J=14.5,11.2,3.7Hz,1H),2.35(dt,J=14.3,2.8Hz,1H),1.43(s,9H),1.13-0.96(m,2H),0.06(s,9H)ppm。
218G.N-[(14R)-14-氨基-9-氧代-12-氧杂-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯二盐酸盐：在密封小瓶中于65℃加热218F(0.005g，7.25μmol)于4MHCl的1,4-二噁烷溶液(0.5mL，2.000mmol)中的溶液。1小时后，将反应混合物冷却至室温且接着将其浓缩，得到呈黄色固体状的所需产物(3mg，100%产率)。MS(ESI)m/z:346.2(M+H)+。该物质未经进一步纯化即继续用于下一步。
实施例218.N-[(14R)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-9-氧代-12-氧杂-8,16,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(17),2,4,6,15(18)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：根据实施例2中所述的操作，通过用218G替换2M且通过用中间体25替换中间体11来制备实施例218(0.0021g，41%产率，白色固体)。MS(ESI)m/z:582.2(M+H)+。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.30(s,1H),7.75(ddd,J=8.3,6.8,1.7Hz,1H),7.62(d,J=1.9Hz,1H),7.56(d,J=8.5Hz,1H),7.51-7.47(m,2H),7.44-7.39(m,2H),5.34(dd,J=7.2,4.4Hz,1H),3.96-3.85(m,2H),3.84-3.77(m,5H),2.67-2.61(m,1H),2.55(ddd,J=14.4,6.3,3.2Hz,1H),2.42(d,J=0.8Hz,3H)ppm。分析性HPLCRT=5.54分钟(方法A)。
实施例219
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-9-氧代-10-氧杂-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002621
219A.N-[(1S)-1-(4-{2-氨基-4-[(甲氧羰基)氨基]苯基}吡啶-2-基)-4-羟基丁基]氨基甲酸叔丁酯：向2H(0.110g，0.267mmol)于THF(5mL)中的溶液中添加1.0M甲硼烷的THF溶液(0.533mL，0.533mmol)。3小时后，用冰浴冷却反应混合物。随后，缓慢添加6NNaOH(0.089mL，0.533mmol)，继而缓慢添加H2O2(0.054mL，0.533mmol)。使反应混合物升温至室温。1小时后，用乙酸乙酯(20mL)萃取反应混合物。用盐水(50mL)洗涤有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到浅黄色油状物。通过正相色谱纯化，得到呈浅黄色半固体状的所需产物(0.150g，27%)。MS(ESI)m/z:431.2(M+H)+。1HNMR(400MHz,MeOD)δ8.49-8.50(m,1H),7.51(s,1H),7.40(d,J=5.02Hz,1H),7.00-7.14(m,2H),6.83(dd,J=8.41,2.13Hz,1H),4.68(br.s,1H),3.75(s,3H),3.54-3.64(m,2H),1.51-2.05(m,5H),1.44(s,9H)。
219B.向219A(0.050g，0.116mol)于DCM(10mL)和乙腈(10mL)中的经冷却(0℃)溶液中添加光气(20%甲苯溶液)(0.077mL，0.139mmol)。使反应混合物升温至室温。1小时后，通过用氮气吹扫来浓缩反应混合物，得到残余物。在单独烧瓶中，制备TEA(0.113mL，0.813mmol)和DMAP(0.004g，0.116μmol)于DCM(25mL)中的溶液。将上述残余物溶解于DCM(10mL)中且使用注射泵经2小时将此溶液缓慢添加至TEA/DMAP溶液中。浓缩反应混合物。通过硅胶色谱纯化，得到呈灰白色固体状的所需产物(0.03g，57%)。MS(ESI)m/z:457.2(M+H)+。1H NMR(300MHz,MeOD)δ8.51(d,J=5.6Hz,1H),7.73(s,1H),7.56-7.59(m,1H),7.18-7.37(m,2H),7.01(dd,J=8.4,2.50Hz,1H),6.63(d,J=8.3Hz,1H),3.77(s,3H),2.30-2.40(m,1H),1.99-2.24(m,4H),1.44(d,J=42.4Hz,2H),1.20-1.51(m,9H)。
219C.N-[(14S)-14-氨基-9-氧代-10-氧杂-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯双三氟乙酸盐：在0℃向219B(0.026g，0.057mmol)于DCM(5mL)中的经搅拌溶液中添加TFA(0.500mL，6.49mmol)。使反应混合物升温至室温。2小时后，浓缩反应混合物且用乙醚(6mL)洗涤粗物质且干燥，得到所需产物(0.015g，73%)。MS(ESI)m/z:357.2(M+H)+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.94(s,1H),9.35(s,1H),8.61(d,J=5.27Hz,1H),8.29(br.s,3H),7.74(s,1H),7.57-7.59(m,1H),7.48-7.51(m,1H),7.39-7.40(m,1H),7.35(d,J=1.76Hz,1H),4.71(br.s,1H),3.91-3.94(m,1H),3.69(s,3H),3.66(s,1H),2.11-2.32(m,2H),0.94-1.40(m,2H)。
实施例219.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-9-氧代-10-氧杂-8,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：根据实施例2中所述的操作使219C与中间体25偶合。得到灰白色固体(0.019g，48%)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6(含两滴D2O))δ8.69(d,J=5.77Hz,1H),8.24(s,1H),8.11(s,1H),7.76-7.83(dd,J=6.80Hz,J=1.60Hz,1H),7.72(d,J=5.27Hz,1H),7.66(d,J=8.53Hz,1H),7.48-7.55(m,2H),7.38-7.46(m,2H),5.13(dd,J=9.20,6.4Hz,1H),3.96-4.01(m,1H),3.76-3.80(m,1H),3.68(s,3H),2.33(s,3H),2.23-2.26(m,2H),1.42-1.53(m,1H),1.05-1.12(m1H)。MS(ESI)m/z:593.2(M+H)+。分析性HPLCRT=7.24分钟(方法A)。
实施例220
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-8-氧代-9,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002631
220A.(S)-(2-(1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)吡啶-4-基)硼酸三氟乙酸盐：向5,5,5',5'-四甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼杂环己烷)(1.198g，5.30mmol)和(S)-(1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(1.0g，3.54mmol)于DMSO(10mL)中的溶液中添加乙酸钾(1.041g，10.61mmol)和PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(0.289g，0.354mmol)。用氩气吹扫反应混合物10分钟。接着密封反应混合物且在85℃搅拌12小时。将反应混合物冷却至室温且接着将其用EtOAc稀释且用水洗涤。用EtOAc萃取水层。用盐水洗涤有机层，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩。通过反相HPLC纯化，得到呈白色固体状的所需产物(1.1g，77%)。MS(ESI)m/z:293.2(M+H)+。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.54(d,J=5.8Hz,1H),8.11(s,1H),8.02(dd,J=5.8,0.6Hz,1H),5.79(ddt,J=17.1,10.2,7.1Hz,1H),5.11-5.03(m,2H),4.86(t,J=7.0Hz,1H),2.69-2.55(m,2H),1.40(br.s.,9H)ppm。
220B.(S)-2-(2-(1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)吡啶-4-基)-5-硝基苯甲酸甲酯：在氩气下吹扫220A(0.2g，0.492mmol)、2-溴-5-硝基苯甲酸甲酯(0.141g，0.542mmol)、Cs2CO3(0.802g，2.462mmol)于DME(8mL)和水(1.600mL)中的溶液5分钟，接着添加四(三苯基膦)钯(0)(0.057g，0.049mmol)，且在90℃加热反应混合物。4小时后，将反应混合物冷却至室温。将反应混合物分配于水/盐水与EtOAc之间且分离各层。用盐水洗涤有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。通过硅胶色谱纯化，得到呈白色固体状的所需产物(0.176g，84%)。MS(ESI)m/z:428.2(M+H)+。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ8.78(d,J=2.5Hz,1H),8.65-8.61(m,1H),8.41(dd,J=8.4,2.3Hz,1H),7.51(d,J=8.3Hz,1H),7.17-7.10(m,2H),5.75-5.58(m,2H),5.11-5.02(m,2H),4.90-4.83(m,1H),3.74(s,3H),2.68-2.59(m,2H),1.44(s,9H)ppm。
220C.(S)-2-(2-(1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)吡啶-4-基)-5-((甲氧羰基)氨基)苯甲酸甲酯：向220B(0.33g，0.772mmol)于MeOH(7.72mL)中的溶液中添加氯化铵(0.413g，7.72mmol)和锌(0.505g，7.72mmol)。在55℃搅拌反应混合物5小时。将反应混合物冷却至室温，过滤且浓缩滤液。将残余物分配于EtOAc与饱和NaHCO3之间且分离各层。用水、盐水洗涤有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到呈黄色固体状的苯胺(0.317g，103%)。MS(ESI)m/z:398.2(M+H)+。向苯胺(0.317g，0.798mmol)和吡啶(0.097mL，1.196mmol)于DCM(7.98mL)中的经冷却(-78℃)澄清溶液中逐滴添加氯甲酸甲酯(0.074mL，0.957mmol)。在-78℃搅拌反应混合物1小时，用饱和NH4Cl淬灭且接着使其升温至室温。用DCM和水稀释反应混合物且分离各层。用DCM萃取水层。用饱和NaHCO3、盐水洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到棕色泡沫状物。通过硅胶色谱纯化，得到呈白色固体状的所需产物(0.304g，84%)。MS(ESI)m/z:456.2(M+H)+。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ8.54(d,J=5.0Hz,1H),7.89(d,J=2.2Hz,1H),7.72(d,J=7.4Hz,1H),7.28-7.21(m,2H),7.11(s,1H),7.08(dd,J=5.2,1.7Hz,1H),5.74-5.64(m,2H),5.09-5.01(m,2H),4.88-4.81(m,1H),3.81(s,3H),3.66(s,3H),2.67-2.55(m,2H),1.44(s,9H)ppm。
220D.(S)-2-(2-(1-((叔丁氧羰基)氨基)丁-3-烯-1-基)吡啶-4-基)-5-((甲氧羰基)氨基)苯甲酸：向220C(0.304g，0.667mmol)于MeOH(6.67mL)中的溶液中添加1NNaOH(2.67mL，2.67mmol)。在室温搅拌反应混合物。48小时后，用1NHCl中和反应混合物且接着将其浓缩以移除MeOH。用EtOAc(2×)萃取残余物。合并有机层且用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到呈黄色固体状的220D(0.291g，99%)。MS(ESI)m/z:442.2(M+H)+。1HNMR(500MHz,MeOD)δ8.45(d,J=5.2Hz,1H),8.01(d,J=2.2Hz,1H),7.73(dd,J=8.3,2.2Hz,1H),7.36(d,J=1.1Hz,1H),7.30(d,J=8.5Hz,1H),7.26(dd,J=5.2,1.7Hz,1H),5.84-5.74(m,1H),5.14-5.04(m,2H),4.80-4.74(m,1H),3.77(s,3H),2.65-2.45(m,2H),1.42(s,9H)ppm。
220E.N-{3-[(丁-3-烯-2-基)氨基甲酰基]-4-{2-[(1S)-1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}丁-3-烯-1-基]吡啶-4-基}苯基}氨基甲酸甲酯：向220D(0.29g，0.657mmol)、丁-3-烯-2-胺盐酸盐(0.085g，0.788mmol)、EDC(0.252g，1.314mmol)和HOBT(0.201g，1.314mmol)于DMF(5mL)中的溶液中添加TEA(0.275mL，1.971mmol)。在室温搅拌反应混合物。24小时后，用EtOAc稀释反应混合物，用水(2×)、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。通过硅胶色谱纯化，得到呈白色固体状的所需产物(0.31g，95%)。MS(ESI)m/z:495.3(M+H)+。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ8.54(d,J=5.2Hz,1H),7.72(d,J=7.7Hz,1H),7.59(d,J=1.9Hz,1H),7.30(d,J=8.5Hz,1H),7.26-7.20(m,3H),5.74-5.54(m,3H),5.35-5.30(m,1H),5.09-4.89(m,4H),4.87-4.81(m,1H),4.60-4.51(m,1H),3.80(s,3H),2.66-2.54(m,2H),1.43(s,9H),1.05-1.01(m,3H)ppm。
220F与220G.N-[(11E,14S)-14-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-10-甲基-8-氧代-9,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,11,15,17-七烯-5-基]氨基甲酸甲酯(非对映异构体A)与N-[(11E,14S)-14-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-10-甲基-8-氧代-9,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,11,15,17-七烯-5-基]氨基甲酸甲酯(非对映异构体B)：遵循如对于实施例2J/2K所述的操作，用220E替换2I。通过硅胶色谱纯化，得到呈棕色固体状的220F(非对映异构体A)(0.073g，25%)和呈棕色固体状的220G(非对映异构体B)(0.052g，18%)。非对映异构体A:MS(ESI)m/z:467.2(M+H)+。非对映异构体B:MS(ESI)m/z:467.2(M+H)+。
实施例220.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-8-氧代-9,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：根据实施例2中所述的操作，以三个步骤(氢化、脱除保护基Boc和使用中间体25形成酰胺)将220F(非对映异构体A)转化成标题化合物。得到为纯手性化合物的白色固体(0.008g，38%)。MS(ESI)m/z:605.3(M+H)+。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.73(d,J=6.1Hz,1H),8.30(s,1H),8.04(dd,J=6.1,1.9Hz,1H),7.95(d,J=1.7Hz,1H),7.85-7.78(m,2H),7.75-7.69(m,2H),7.46(ddd,J=8.0,6.5,1.7Hz,1H),7.41-7.35(m,1H),5.23(dd,J=11.8,5.5Hz,1H),4.28-4.21(m,1H),3.78(s,3H),2.35(d,J=0.8Hz,3H),2.27-2.10(m,2H),1.99-1.90(m,1H),1.63-1.53(m,1H),1.37-1.26(m,1H),1.04(d,J=7.2Hz,3H),0.56-0.44(m,1H)ppm。分析性HPLCRT=6.04分钟。
实施例221
N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-8-氧代-9,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002661
实施例221.N-[(14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-10-甲基-8-氧代-9,16-二氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：根据实施例2中所述的操作，以三个步骤(氢化、脱除保护基Boc和使用中间体25形成酰胺)将220G(非对映异构体B)转化成标题化合物。得到为纯手性化合物的白色固体(0.005g，50%)。MS(ESI)m/z:5.95(M+H)+。1H NMR(500MHz,MeOD)δ8.71(d,J=6.1Hz,1H),8.31(s,1H),8.04(s,1H),7.93(dd,J=6.1,1.4Hz,1H),7.75-7.68(m,4H),7.46(ddd,J=8.0,6.5,1.7Hz,1H),7.41-7.36(m,1H),5.23(dd,J=9.9,5.2Hz,1H),4.14-4.06(m,1H),3.77(s,3H),2.36(d,J=1.1Hz,3H),2.12-1.97(m,2H),1.78-1.69(m,1H),1.54-1.20(m,6H)ppm。分析性HPLCRT=5.95分钟。
实施例222
N-[(11R,15S)-15-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-11-甲基-9-氧代-8,17,19-三氮杂三环[14.2.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,16(19)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002671
222A.N-[(1S)-1-(4-{4-[(甲氧羰基)氨基]-2-(3-甲基戊-4-烯酰氨基)苯基}-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-咪唑-2-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体混合物)：根据实施例57E中所述的操作，通过用3-甲基戊-4-烯酸替换戊-4-烯酸来制备222A。MS(ESI)m/z:628.4(M+H)+。1HNMR(400MHz,MeOD)δ8.45(d,J=2.01Hz,1H),7.51-7.58(m,2H),7.35(d,J=7.03Hz,1H),5.80-5.94(m,2H),5.61(d,J=10.79Hz,1H),5.36(d,J=11.04Hz,1H),5.20(s,1H),5.04-5.13(m,2H),4.92-5.03(m,2H),3.75(s,3H),3.62(t,J=8.03Hz,2H),2.73-2.87(m,3H),2.40-2.57(m,2H),1.45(s,9H),1.14(t,J=6.78Hz,3H),0.96(td,J=8.03,5.52Hz,2H),-0.01-0.04(m,9H)。
222B.N-[(12E,15S)-5-[(甲氧羰基)氨基]-11-甲基-9-氧代-17-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-8,17,19-三氮杂三环[14.2.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,12,16(19)-六烯-15-基]氨基甲酸叔丁酯与Z型异构体：用氮气使容纳222A(1.1g，1.752mmol)和单水合对甲苯磺酸(0.367g，1.927mmol)于DCM(1600mL)中的溶液的装备有冷凝器的经火焰干燥的圆底烧瓶脱气1小时。在氮气氛围下使反应混合物回流1小时。随后，缓慢添加用氮气吹扫10分钟的二氯化三环己基膦[1,3-二(2,4,6-三甲苯基)-4,5-二氢咪唑-2-亚基][苯亚甲基]钌(IV)(0.596g，0.701mmol)于DCM(15mL)中的溶液。在45℃搅拌反应混合物过夜。将反应混合物冷却至室温。用饱和NaHCO3(2×250mL)、盐水溶液(250mL)洗涤反应混合物，由Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到胶状棕色固体。使用硅胶色谱纯化，得到呈棕色固体状且呈E型与Z型异构体的混合物形式的所需产物(0.88g，84%)。MS(ESI)m/z:600.4(M+H)+。
222C(非对映异构体A).N-[(11R,15S)-5-[(甲氧羰基)氨基]-11-甲基-9-氧代-17-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-8,17,19-三氮杂三环[14.2.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,16(19)-五烯-15-基]氨基甲酸叔丁酯与222D(非对映异构体B).N-[(11S,15S)-5-[(甲氧羰基)氨基]-11-甲基-9-氧代-17-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-8,17,19-三氮杂三环[14.2.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,16(19)-五烯-15-基]氨基甲酸叔丁酯：向222B(2.1g，3.50mmol)于MeOH(100mL)中的溶液中添加氧化铂(IV)(0.159g，0.700mmol)且在室温于氢气氛围下搅拌反应混合物。30小时后，停止反应且经
Figure BDA0000487247700002681
过滤，用甲醇(4×50mL)和乙酸乙酯(4×50mL)洗涤。浓缩滤液，得到棕色固体。通过手性HPLC，使用手性OD-H柱分离非对映异构体，得到(非对映异构体A，0.750g，34%)和(非对映异构体B，0.700g，33%)。222C(非对映异构体A)：MS(ESI)m/z:602.2(M+H)+。[α]20.0 D=-44.48(c0.5,MeOH)。1H NMR(300MHz,MeOD)δ8.11(d,J=2.17Hz,1H),7.39-7.45(m,2H),7.33-7.38(m,1H),5.50-5.59(m,2H),5.33(d,J=10.76Hz,1H),3.75(s,3H),3.60(t,J=8.12Hz,2H),2.36-2.49(m,1H),2.26-2.35(m,2H),2.16-2.25(m,1H),1.82-1.93(m,1H),1.75-1.82(m,1H),1.46(s,9H),1.22-1.33(m,1H),1.07-1.16(m,1H),1.04(d,J=6.42Hz,3H),0.95(td,J=8.14,4.49Hz,2H),0.02(s,9H)。222D(非对映异构体B)：MS(ESI)m/z:602.2(M+H)+。[α]20.0 D=-66.40(c0.5,MeOH)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.02(s,1H),9.66(s,1H),8.30(d,J=2.26Hz,1H),7.65(s,1H),7.43-7.52(m,2H),7.25(dd,J=8.41,2.13Hz,1H),5.27-5.39(m,2H),3.67(s,3H),3.50-3.56(m,2H),2.53-2.60(m,2H),2.46(s,1H),2.04-1.95(m,2H),1.93(dd,J=13.30,6.02Hz,2H),1.41(s,9H),0.99(d,J=6.78Hz,3H),0.89(td,J=8.16,3.26Hz,2H),-0.02(s,9H)。
222E.N-[(11R,15S)-15-氨基-11-甲基-9-氧代-8,17,19-三氮杂三环[14.2.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,16(19)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯二盐酸盐：在50℃加热容纳于4MHCl的二噁烷溶液(1.5mL，49.4mmol)中的222C(0.050g，0.083mmol)的密封管3小时。浓缩反应混合物，得到灰白色固体。自石油醚(3×5mL)和乙醚(2×7mL)中研磨，得到呈灰白色固体状的所需产物(0.030g，97%)。MS(ESI)m/z:372.2(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.64(d,J=7.03Hz,2H),7.44-7.50(m,2H),4.71(dd,J=11.29,4.27Hz,1H),3.78(s,3H),3.68(s,1H),2.54(dd,J=13.68,2.89Hz,1H),2.38-2.44(m,1H),2.09-2.22(m,2H),1.96-2.04(m,1H),1.79(d,J=6.27Hz,1H),1.41(d,J=9.54Hz,1H),1.02(d,J=6.53Hz,3H),0.74(d,J=6.78Hz,1H)。
实施例222.N-[(11R,15S)-15-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑-4-酰氨基]-11-甲基-9-氧代-8,17,19-三氮杂三环[14.2.1.02,7]十九碳-1(18),2,4,6,16(19)-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：根据实施例2中所述的操作，使222E与中间体25偶合。得到灰白色固体(0.009g，14%)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6(含两滴D2O))δ8.29-8.32(m,1H),8.18-8.21(m,1H),7.75-7.81(m,1H),7.48-7.54(m,2H),7.40-7.46(m,2H),7.13-7.18(m,1H),5.09(d,J=12.30Hz,1H),3.64(s,3H),2.37(s,3H),2.24-2.36(m,2H),2.17-2.05(m,2H),1.99-2.10(m,2H),1.78-1.45(m,2H),1.34(d,J=13.80Hz,1H),0.99(d,J=6.78Hz,3H)。MS(ESI)m/z:608.3(M+H)+。分析性HPLCRT=6.20分钟(方法A)。
实施例223
N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,17,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(18),2,4,6,15-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
223A.N-(1-重氮基-2-氧代己-5-烯-3-基)氨基甲酸叔丁酯：向2-((叔丁氧羰基)氨基)戊-4-烯酸(15g，69.7mmol)于THF(250mL)中的经冷却(-40℃)溶液中添加N-甲基吗啉(9.19mL，84mmol)，继而逐滴添加氯甲酸异丁酯(10.98mL，84mmol)。在-40℃搅拌反应混合物20分钟，此时将其过滤以移除盐。将滤液添加至重氮甲烷(4.39g，105mmol)于Et2O(500mL)中的溶液中[由1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍产生]。在-40℃搅拌反应混合物3小时且接着使反应混合物升温至室温。1小时后，用氮气吹扫反应混合物30分钟以移除过量的重氮甲烷。用饱和NaHCO3溶液(2×100mL)、水(2×50mL)、盐水溶液(1×80mL)洗涤反应混合物，由Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到黄色固体(16g)。通过正相色谱纯化，得到呈黄色固体状的所需产物(12.5g，75%)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ5.66-5.83(m,1H),5.48(br.s.,1H),5.19(dd,J=3.21,1.79Hz,1H),5.03-5.16(m,2H),4.24(br.s.,1H),2.35-2.62(m,2H),1.46(s,9H)。
223B.N-(1-溴-2-氧代己-5-烯-3-基)氨基甲酸叔丁酯：向223A(15g，62.7mmol)于乙醚(500mL)中的经冷却(-15℃)悬浮液中逐滴添加HBr(约47%水溶液)(18.11mL，157mmol)。15分钟后，经2.5小时使反应混合物缓慢升温至0℃。用乙醚(100mL)稀释反应混合物且用水(2×100mL)、饱和NaHCO3溶液(1×80mL)、盐水溶液(1×80mL)洗涤反应混合物，由Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到呈粘性黄色液体状的所需产物(17g，93%)，其在冰箱中凝固。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ5.62-5.76(m,1H),5.12-5.21(m,2H),5.08(br.s.,1H),4.57(d,J=6.00Hz,1H),3.99-4.12(m,2H),2.38-2.67(m,2H),1.43(s,9H)。
223C.N-[1-(1H-咪唑-4-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯：在100℃加热容纳223B(28g，96mmol)、乙酸甲脒(19.95g，192mmol)和K2CO3(53.0g，383mmol)于DMF(200mL)中的溶液的压力管过夜。将反应混合物冷却至室温且浓缩。将残余物分配于水(200mL)与乙酸乙酯(500mL)之间且分离各层。用乙酸乙酯(2×200mL)萃取水层。合并有机层且用盐水(1×100mL)洗涤，由Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到呈胶状棕色固体状的所需产物(25.5g，84%)。此物质未经纯化即用于下一步中。MS(ESI)m/z:238.2(M+H)+。
223D.N-[1-(1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-咪唑-4-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯：向223C(25.5g，107mmol)于THF(260mL)中的经冷却(0℃)溶液中添加氢化钠(4.73g，118mmol)。在添加后，使反应混合物升温至室温。30分钟后，将反应混合物冷却至0℃且逐滴添加SEM-Cl(19.06mL，107mmol)。使反应混合物升温至室温且搅拌过夜。浓缩反应混合物，得到棕色胶状固体。通过正相色谱纯化，得到呈胶状棕色固体状的所需产物(11.5g，70%)。MS(ESI)m/z:368.4(M+H)+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.51(d,J=1.25Hz,1H),6.87(s,1H),5.71(dd,J=17.13,10.13Hz,1H),5.20(s,2H),4.99-5.10(m,3H),4.73(dd,J=13.88,6.38Hz,1H),3.43-3.48(m,2H),2.55-2.63(m,2H),1.43(s,9H),0.86-0.91(m,2H),0.02-0.03(m,9H)。
223E.N-[1-(2-溴-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-咪唑-4-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯：向223D(5.0g，13.60mmol)于THF(100mL)中的经冷却(-78℃)溶液中逐滴添加nBuLi(1.6M己烷溶液)(25.5mL，40.8mmol)。2小时后，添加N-溴代丁二酰亚胺(2.421g，13.60mmol)。2小时后，用饱和NH4Cl溶液(30mL)淬灭反应混合物。用乙酸乙酯(3×50mL)萃取反应混合物。合并有机层且用盐水(1×50mL)洗涤，由Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到胶状黄色固体。通过正相色谱纯化，得到呈胶状棕色固体状的所需产物(2.0g，26.5%)。MS(ESI)m/z:446.0(M+H)+。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ6.95(s,1H),5.63-5.78(m,1H),5.22(s,2H),5.02-5.14(m,3H),4.64-4.74(m,1H),3.50-3.57(m,2H),2.58(t,J=6.61Hz,2H),1.44(s,9H),0.89-0.96(m,2H),0.01(s,9H)。
223F.N-[(1S)-1-[2-(2-氨基-4-硝基苯基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-咪唑-4-基]丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(对映异构体I)与223G.N-[(1R)-1-[2-(2-氨基-4-硝基苯基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-咪唑-4-基]丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(对映异构体II)：向223E(3g，6.72mmol)和(2-(2-氨基-4-硝基苯基)-5-甲基-1,3,2-二氧硼杂环己烷-5-基)甲基鎓(5.02g，20.16mmol)于甲苯(40mL)中的溶液中添加磷酸钾盐(4.28g，20.16mmol)和水(10mL)。用氮气吹扫反应混合物15分钟。随后，添加PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(0.274g，0.336mmol)且在110℃加热反应混合物。3小时后，将反应混合物冷却至室温。用乙酸乙酯(80mL)稀释反应混合物且接着将其用饱和NaHCO3(50mL)、水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到胶状棕色固体。通过正相色谱纯化，得到胶状棕色固体。通过手性HPLC，使用ChiralpakAD-H250×21mm柱(移动相：CO2：80%，溶剂：20%(0.5%DEA/甲醇))分离对映异构体，得到223F(对映异构体I，0.42g，13%)和223G(对映异构体II，0.545g，16%)。223F(对映异构体I)：MS(ESI)m/z:503.9(M+H)+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6(含两滴D2O))δ7.56-7.62(m,2H),7.39(dd,J=8.53,2.51Hz,1H),7.20(s,1H),5.65-5.75(m,1H),5.23(s,2H),4.95-5.08(m,2H),4.55(d,J=8.53Hz,1H),3.40(t,J=8.03Hz,2H),2.32-2.49(m,2H),1.33(s,9H),0.69-0.77(m,2H),-0.14(s,9H)。223G(对映异构体II)：MS(ESI)m/z:503.9(M+H)+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6(含两滴D2O))δ7.60-7.64(m,2H),7.38(dd,J=8.78,2.26Hz,1H),7.22(s,1H),5.66-5.77(m,1H),5.24(s,2H),4.95-5.09(m,2H),4.57(d,J=8.53Hz,1H),3.44(t,J=8.03Hz,2H),2.32-2.48(m,2H),1.35(s,9H),0.73-0.80(m,2H),-0.11(s,9H)。
223H.N-[(1S)-1-(2-{2-[(2R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基]-4-硝基苯基}-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-咪唑-4-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯：向223F(0.650g，1.291mmol)于DCM(10mL)中的经冷却(0℃)溶液中添加吡啶(0.313mL，3.87mmol)，继而添加DMAP(0.015g，0.129mmol)。随后，逐滴添加于DCM(0.5mL)中的新鲜制备的中间体48(0.383g，3.23mmol)。20分钟后，浓缩反应混合物。通过正相色谱纯化，得到呈黄色油状的所需产物(0.740g，98%)。MS(ESI)m/z:586.5(M-H)。1HNMR(300MHz,MeOD)δ9.34(t,J=1.37Hz,1H),8.05(d,J=1.32Hz,2H),7.35(s,1H),6.98(d,J=8.12Hz,1H),5.76-6.04(m,2H),5.36(m,2H),5.04-5.26(m,4H),4.80(d,J=6.66Hz,1H),3.65(t,J=7.8Hz,2H),3.25-3.30(m,1H),2.64-2.79(m,1H),2.50-2.61(m,1H),1.46(s,9H),1.32(d,J=6.9,3H),0.93(t,J=8.1Hz,3H),0.01(s,9H)。
223I.N-[(10R,11E,14S)-10-甲基-5-硝基-9-氧代-17-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-8,17,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(18),2,4,6,11,15-六烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯：用氩气吹扫容纳223H(0.42g，0.717mmol)和单水合对甲苯磺酸(0.15g，0.789mmol)于DCM(700mL)中的溶液的经火焰干燥的3颈1L圆底烧瓶1小时。随后，使反应混合物升温至回流。1小时后，逐滴添加二氯化三环己基膦[1,3-二(2,4,6-三甲苯基)-4,5-二氢咪唑-2-亚基][苯亚甲基]钌(IV)(0.244g，0.287mmol)于DCM(6mL)中的溶液。在回流下搅拌反应混合物过夜。将反应混合物冷却至室温，用饱和NaHCO3(2×80mL)、盐水(80mL)洗涤，由Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到胶状棕色固体。通过正相色谱纯化，得到呈胶状黄色固体状的标题化合物(0.225mg，56%)。MS(ESI)m/z:558.5(M+H)+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ12.80(br.s.,1H),9.33(br.s.,1H),7.94-8.04(m,2H),6.99(d,J=8.00Hz,1H),6.01-5.25(m,1H),5.19-5.27(m,4H),5.14(d,J=7.50Hz,2H),3.64-3.73(m,2H),3.60(m,2H),1.54(s,9H),0.94-1.01(m,3H),0.00(s,9H)。
223J.N-[(10R,14S)-5-氨基-10-甲基-9-氧代-17-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-8,17,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(18),2(7),3,5,15-五烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯：用氮气吹扫223I(0.210g，0.377mmol)于EtOAc(20mL)中的溶液且排空。重复此操作3次。随后，添加氧化铂(IV)(0.043g，0.188mmol)且用H2气体吹扫反应混合物数分钟(H2填充于气球中)。在氢气氛围下剧烈搅拌反应混合物。16小时后，用甲醇(5mL)稀释反应混合物，且接着将其经
Figure BDA0000487247700002731
床过滤，用甲醇(2×5mL)洗涤。浓缩滤液，得到呈白色固体状的223J(0.200g，95%)。MS(ESI)m/z:530.2(M+H)+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ12.15(br.s.,1H),7.56(d,J=8.51Hz,1H),7.48(d,J=2.25Hz,1H),6.86(s,1H),6.46(dd,J=8.50,2.50Hz,1H),5.09-5.18(m,3H),5.29-5.12(m,1H),3.90-3.60(m,2H),3.55-3.62(m,2H),2.45-1.90(m,1H),1.86-1.97(m,2H),1.66-1.78(m,3H),1.47(s,9H),1.26(s,2H),0.92-0.98(m,3H),0.01(s,9H)。
223K.N-[(10R,14S)-5-[(甲氧羰基)氨基]-10-甲基-9-氧代-17-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-8,17,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(18),2(7),3,5,15-五烯-14-基]氨基甲酸叔丁酯：向223J(0.195g，0.368mmol)于DCM(5mL)中的经冷却(0℃)溶液中添加吡啶(0.045mL，0.552mmol)，继而逐滴添加氯甲酸甲酯(0.043mL，0.552mmol)。10分钟后，使反应混合物升温至室温。1小时后，用DCM(30mL)稀释反应混合物且接着将其用饱和NaHCO3(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，由Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到胶状棕色固体。通过正相色谱纯化，得到呈黄色固体状的标题化合物(0.145g，67%)。MS(ESI)m/z:588.2(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.71(d,J=8.53Hz,1H),7.64(s,1H),7.44(dd,J=8.28,2.26Hz,1H),7.12(s,1H),5.19-5.27(m,2H),3.78(s,3H),3.64-3.73(m,2H),2.58(t,J=6.27Hz,1H),2.01-2.11(m,1H),1.76(dt,J=6.40,3.58Hz,2H),1.52-1.62(m,2H),1.47(s,9H),1.35-1.41(m,2H),1.07(d,J=7.03Hz,3H),0.99(dt,J=8.91,6.59Hz,2H),0.05(s,9H)。
223L.N-[(10R,14S)-14-氨基-10-甲基-9-氧代-8,17,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(18),2(7),3,5,15-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯：向223K(0.030g，0.051mmol)于DCM(1mL)中的溶液中添加TFA(1mL，12.98mmol)。1小时后，再添加TFA(0.4mL)。1小时后，浓缩反应混合物，得到白色固体。添加石油醚(5mL)且搅拌混合物。用滴管移除溶剂。用乙醚(2×7mL)重复此操作且在高真空下干燥固体，得到呈白色固体状的所需产物(0.040g，93%)。MS(ESI)m/z:358.4(M+H)+。1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.68(d,J=2.01Hz,1H),7.62(d,J=8.53Hz,1H),7.50-7.55(m,1H),7.39(s,1H),4.63(dd,J=8.78,5.77Hz,1H),3.79(s,3H),2.17-2.30(m,1H),1.81-1.95(m,2H),1.65-1.80(m,2H),1.34-1.55(m,2H),1.12(d,J=7.03Hz,3H)。
实施例223.N-[(10R,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,17,18-三氮杂三环[13.2.1.02,7]十八碳-1(18),2,4,6,15-五烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：向223L(0.010g，0.028mmol)于DMF(1.0mL)中的溶液中添加中间体21(0.0071g，0.028mmol)、EDC(0.0085mg，0.042mmol)、HOBT(0.0064mg，0.042mmol)和许尼希碱(0.024mL，0.140mmol)。在室温搅拌反应混合物过夜。浓缩反应混合物，得到胶状固体。通过反相HPLC纯化，得到呈灰白色固体状的标题化合物(2.8mg，13%)。1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.79-7.79(m,2H),7.58-7.66(m,2H),7.46-7.53(m,2H),7.13(s,1H),5.37(t,J=4.52Hz,1H),3.78(s,3H),2.68(m,1H),2.54(d,J=1.00Hz,3H),2.18-2.25(m,2H),2.00-2.09(m,2H),1.63(m,2H),1.23(d,J=7.03Hz,3H)。MS(ESI)m/z:593.0(M+H)+。分析性HPLCRT=6.38分钟。
实施例224
N-[(10S,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,17,18-三氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐
Figure BDA0000487247700002741
224A.N-[(3,6-二氯哒嗪-4-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯：将3,6-二氯哒嗪(0.765g，5.14mmol)于水(25mL)中的混合物加热至75℃。添加2-((叔丁氧羰基)氨基)乙酸(1g，5.71mmol)和甲酸铵(0.072g，1.142mmol)。接着，经2分钟逐滴添加硝酸银(0.194g，1.142mmol)于水(1mL)中的溶液。经25分钟向所得的暗棕色溶液中逐滴添加过氧硫酸铵(5.21g，22.83mmol)于水(30mL)中的溶液。形成紫色沉淀物。再搅拌反应混合物40分钟，且接着将其冷却至室温。将反应混合物倾注至冰上，用氨水溶液碱化，同时保持温度低于5℃。用乙酸乙酯萃取反应混合物且经硫酸钠干燥有机层，过滤且浓缩。通过正相色谱纯化，得到呈灰白色固体状的所需产物(0.3g，18%)。MS(ESI)m/z:278.1(M+H)+。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ7.51(s,1H),5.15(br.s.,1H),4.40(s,2H),1.49(s,9H)。
224B.N-[1-(3,6-二氯哒嗪-4-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯：向224A(2g，7.19mmol)于四氢呋喃(25mL)中的经冷却(-78℃)溶液中添加TMEDA(3.2mL，21.20mmol)。向所得的淡绿色溶液中逐滴添加正丁基锂(1.6M己烷溶液)(25.2mL，40.3mmol)。添加后，经30分钟使反应混合物升温至-40℃。将反应混合物冷却至-78℃且接着逐滴添加烯丙基溴(2.7mL，31.2mmol)。1小时后，通过添加饱和氯化铵(25mL)来淬灭反应且使反应混合物升温至室温。用乙酸乙酯稀释反应混合物，用1NHCl(15mL)、饱和碳酸氢钠(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。通过正相色谱纯化，得到呈浅黄色固体状的所需产物(0.93g，41%)。MS(ESI)m/z:318.2(M+H)+。1HNMR(400MHz,MeOD)δ7.76-7.76(m,1H),5.85-5.86(m,1H),5.17(d,J=1.00Hz,2H),4.88-4.88(m,1H),2.55-2.57(m,1H),2.41-2.43(m,1H),1.42-1.44(m,9H)。
224C.N-[(1S)-1-[6-(2-氨基-4-硝基苯基)-3-氯哒嗪-4-基]丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(对映异构体I)与224D.N-[(1R)-1-[6-(2-氨基-4-硝基苯基)-3-氯哒嗪-4-基]丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(对映异构体II)：使用氮气使224B(0.5g，1.571mmol)于甲苯(10mL)和乙醇(1mL)中的混合物脱气。随后，添加2-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧硼杂环己烷-2-基)-5-硝基苯胺(0.452g，1.807mmol)和碳酸钠(0.500g，4.71mmol)。用氮气使反应混合物脱气10分钟。接着，添加四(三苯基膦)钯(0)(0.082g，0.071mmol)且将反应混合物加热至100℃。16小时后，将反应混合物冷却至室温且经
Figure BDA0000487247700002751
塞过滤。用水、盐水洗涤滤液，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。通过正相色谱纯化，得到呈浅黄色固体状的所需产物(0.2g，30%)。通过手性HPLC，使用ChiralcelOJ-H分离对映异构体，得到呈浅黄色固体状的224C(对映异构体I)和呈浅黄色固体状的224D(对映异构体II)。224C(对映异构体I)：(ESI)m/z:420.2(M+H)+。1H NMR(300MHz,MeOD)δ8.11(s,1H),7.72-7.79(m,2H),7.54(dd,J=8.73,2.31Hz,1H),5.83-5.95(m,1H),5.14-5.20(m,2H),5.01(br.s,1H),2.41-2.71(m,2H),1.39-1.49(m,9H)。[α]20 D=-62(c0.1,MeOH)。224D(对映异构体II)：MS(ESI)m/z:420.2(M+H)+。1H NMR(300MHz,MeOD)δ8.11(s,1H),7.74-7.76(m,2H),7.54(dd,J=8.69,2.36Hz,1H),5.81-5.95(m,1H),5.14-5.20(m,2H),4.96-5.06(m,1H),2.14-2.43(m,2H),1.39-1.50(m,9H)。[α]20 D=78.4(c0.1,MeOH)。
224E.N-[(1S)-1-{3-氯-6-[2-(2-甲基丁-3-烯酰氨基)-4-硝基苯基]哒嗪-4-基}丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯：向224C(0.1g，0.238mmol)于二氯甲烷(1mL)和吡啶(0.058mL，0.715mmol)中的经冷却(0℃)溶液中添加中间体48(0.031g，0.262mmol)。使反应混合物升温至室温。35分钟后，浓缩反应混合物。通过正相色谱纯化，得到呈浅黄色半固体状的所需产物(0.1g，84%)。MS(ESI)m/z:502.2(M+H)+。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.63-10.64(d,J=6.03Hz,1H),8.93-8.95(m,1H),8.17-8.19(m,2H),7.92-7.93(m,1H),7.70-7.71(m,1H),5.87-5.91(m,2H),5.13-5.20(m,4H),4.99-5.11(m,1H),3.19-3.22(m,1H),2.51-2.53(m,1H),2.45-2.49(m,1H),1.72-1.79(m,1H),1.36-1.51(m,9H),1.27(d,J=6.73Hz,3H)。
224F.N-[(1S)-1-{6-[4-氨基-2-(2-甲基丁-3-烯酰氨基)苯基]-3-氯哒嗪-4-基}丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯：在N2下将224E(0.24g，0.478mmol)于乙酸(5mL)和水(1.667mL)中的混合物加热至70℃。随后，添加细粉状铁(0.134g，2.391mmol)。30分钟后，将反应混合物冷却至室温且经
Figure BDA0000487247700002761
过滤。用10%NaOH溶液中和滤液。用DCM萃取混合物。用盐水洗涤有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。用乙醚(2×5mL)洗涤粗产物且干燥，得到呈浅粉红色固体状的所需产物(0.19g，84%)。此物质未经进一步纯化即用于下一步中。MS(ESI)m/z:502.2(M+H)+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.61-11.63(d,J=7.21Hz,1H),8.07-8.32(m,1H),7.65-7.69(m,2H),7.46-7.48(m,1H),6.46-6.48(m,1H),5.80-5.88(m,4H),5.20-5.24(m,1H),5.12-5.14(m,3H),4.99-5.10(m,1H),3.19-3.22(m,1H),2.51-2.53(m,1H),2.45-2.49(m,1H),1.72-1.79(m,1H),1.36(s,9H),1.27(m,3H)。
224G.N-[(1S)-1-(3-氯-6-{4-[(甲氧羰基)氨基]-2-(2-甲基丁-3-烯酰氨基)苯基}哒嗪-4-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯：向224F(0.06g，0.127mmol)于DCM(4mL)中的经冷却(-60℃)溶液中添加吡啶(0.011mL，0.140mmol)。随后，逐滴添加氯甲酸甲酯(9.85μL，0.127mmol)于DCM中的溶液。30分钟后，用DCM稀释反应混合物且用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。通过正相色谱纯化，得到呈浅粉红色固体状的所需产物(0.021g，31%)。MS(ESI)m/z:530.2(M+H)+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.83-10.84(d,J=7.21Hz,1H),9.96(s,1H),8.27(s,1H),8.07(s,1H),7.70-7.71(m,1H),7.61-7.63(dd,J=8.28,6.90Hz,1H),7.48-7.51(m,1H),5.77-5.92(m,2H),5.12-5.20(m,4H),4.92-5.10(m,1H),3.70(s,3H),3.14-3.18(m,1H),2.45-2.50(m,2H),1.72-1.79(m,1H),1.36(s,9H),1.27(d,J=7.03Hz,3H)。
224H.N-[(11E,14S)-14-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-16-氯-10-甲基-9-氧代-8,17,18-三氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,11,15,17-七烯-5-基]氨基甲酸甲酯：用氩气使224G(0.1g，0.189mmol)于1,2-二氯乙烷(40mL)中的溶液脱气25分钟。随后，添加格拉布II催化剂(0.064g，0.075mmol)且在微波条件下于120℃加热反应混合物30分钟。经
Figure BDA0000487247700002771
过滤反应混合物且用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤滤液，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。通过正相色谱纯化，得到呈灰白色固体状的224H(0.02g，22%)。MS(ESI)m/z:501.2(M+H)+。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.98(s,1H),7.9-8.01(m,2H),7.79-7.85(m,1H),7.74(s,1H),7.34-7.4(m,2H),5.82-5.93(m,1H),5.68-5.79(m,1H),4.94-5.06(m,1H),3.71(s,3H),3.20-3.29(m,1H),2.38-0.63(m,2H),1.30(s,9H),0.90-0.97(m,3H)。
224I.N-[(10S,14S)-14-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-10-甲基-9-氧代-8,17,18-三氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2(7),3,5,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯：用N2吹扫224H(0.025g，0.050mmol)和甲酸铵(0.001mg，0.025mmol)于甲醇(10mL)中的混合物10分钟。随后，将Pd/C(0.042g，0.398mmol)添加至反应混合物中。16小时后，经
Figure BDA0000487247700002772
过滤反应混合物且浓缩滤液。用乙醚(2×5mL)洗涤粗物质且干燥，得到呈黑色固体状的所需产物(0.019g，81%)。MS(ESI)m/z:470.2(M+H)+。
224J.N-[(10S,14S)-14-氨基-10-甲基-9-氧代-8,17,18-三氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯：向224I(0.027g，0.058mmol)于DCM(3mL)中的经冷却(0℃)溶液中添加TFA(0.250mL，3.24mmol)。使反应混合物升温至室温。2小时后，浓缩反应混合物。用乙醚(2×3mL)、乙酸乙酯(2×5mL)、DCM(5×15mL)洗涤粗物质且干燥，得到呈红棕色固体状的所需产物(0.018g，52%)。MS(ESI)m/z:370.6(M+H)+。
实施例224.N-[(10S,14S)-14-[1-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰氨基]-10-甲基-9-氧代-8,17,18-三氮杂三环[13.3.1.02,7]十九碳-1(19),2,4,6,15,17-六烯-5-基]氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐：向224J(0.018g，0.049mmol)于DMF(1mL)中的溶液中添加中间体21(0.012g，0.049mmol)、HOBT(0.011g，0.073mmol)、EDC(0.014g，0.073mmol)和DIPEA(0.043mL，0.244mmol)。在室温搅拌反应混合物过夜。浓缩反应混合物，得到胶状固体。通过反相HPLC纯化，得到呈灰白色固体状的所需产物(3.5mg，12%)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.96(s,1H),9.59(s,1H),9.35(d,J=7.53Hz,1H),9.23(d,J=1.76Hz,1H),8.32(s,1H),7.95(ddd,J=8.28,6.90,1.63Hz,1H),7.69-7.78(m,1H),7.86(d,J=8.53Hz,1H),7.49-7.60(m,2H),7.44(d,J=2.0Hz,1H),4.99-5.11(m,1H),3.71(s,3H),2.40(s,3H),2.26(dd,J=15.56,7.53Hz,1H),1.89-2.04(m,2H),1.63-1.75(m,1H),1.46-1.57(m,1H),1.30-1.43(m,2H),1.13(d,J=7.03Hz,3H)。MS(ESI)m/z:607.2(M+H)+。分析性HPLCRT=8.40分钟(方法A)。
表12中的以下实施例是通过利用酸与胺偶合来制备。所用的酸是如下表中的中间部分中所示。除实施例34中所述的偶合试剂以外，可使用多种偶合试剂，如BOP、PyBop、EDC/HOBt、HATU或T3P。必要时，脱除保护基Boc和SEM。
表12
Figure BDA0000487247700002791
Figure BDA0000487247700002801
Figure BDA0000487247700002811
Figure BDA0000487247700002821
Figure BDA0000487247700002831
Figure BDA0000487247700002841
Figure BDA0000487247700002851

Claims (21)

1.一种式(I)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物，所述式(I)化合物为：
Figure FDA0000487247690000011
其中：
环A选自芳基和5元至6元杂环，所述杂环包含碳原子和1至4个选自N、NH、N(C1-4烷基)、S(O)p和O的杂原子，其中所述芳基和杂环任选被R1取代；
环B为5元至6元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N、NH、S(O)p和O的杂原子，其中所述杂环任选被R10取代；
环C为4元至5元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N、NR9、S(O)p和O的杂原子，其中所述杂环任选被R2取代；
X1选自C1-4亚烷基和C2-4亚烯基；所述亚烷基和亚烯基的一个或多个碳原子可任选被O、S(O)p、NH和N(C1-4烷基)替代；
R1在每次出现时独立地选自H、卤素、NO2、C1-6烷基、OH、OMe和CN；
R2选自H、=O、OH、NH2、CF3、卤素和任选被OH取代的C1-4烷基；
R3选自H和C1-4烷基；
或者，R2和R3连同它们直接或间接连接的原子一起形成环，其中所述环任选被=O取代；
R4选自H、C1-4烷基、羟基和C3-6环烷基；
R5选自H和C1-4烷基；
R6选自H、卤素、C(O)OH和C(O)O(C1-4烷基)；
R7选自H、C1-4烷基和CF3；
或者，R6连同R7一起为=O；
R8在每次出现时独立地选自H、卤素、NHC(O)O-C1-4烷基、CN、OH、O-C1-4烷基；CF3、CO2H、CO2(C1-4烷基)、-CH2CO2H、-(CH2)2CO2H、-CH2CO2(C1-4烷基)、-(CH2)2CO2(C1-4烷基)、NH2、-CH2NH2、-NHCO(C1-4烷基)、-NHCO2(CH2)1-2O(C1-4烷基)、-NHCO2(CH2)1-3O(C1-4烷基)、NHCO2CH2CH(C1-4烷基)O(C1-4烷基)、-NHCO2(CH2)1-2OH、-NHCO2CH2CO2H、-CH2NHCO2(C1-4烷基)、-NHC(O)NH(C1-4烷基)、-NHC(O)N(C1-4烷基)2、NHC(O)NH(C1-4烷基)N[5元至6元杂环)]、-NHSO2(C1-4烷基)、-CONH2、-CONH(C1-4烷基)、-CON(C1-4烷基)2和-CH2CONH2；
R9选自H和C1-4烷基；
R10在每次出现时独立地选自H、卤素、CN、=O、OH、NH2、C3-6环烷基、C1-4烷氧基、CF3、CH2OH、CO2H、CO2(C1-4烷基)和CONH；以及
p在每次出现时独立地选自0、1和2；
条件为不包括以下化合物：
Figure FDA0000487247690000021
2.权利要求1的化合物，其具有式(II)，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物，所述式(II)为：
Figure FDA0000487247690000022
其中：
环A选自芳基和6元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至3个选自N、NH和N(C1-4烷基)的杂原子；
环B选自咪唑、吡啶、吡啶酮和哒嗪；
X1选自CH2和CH=CH；
W和Q各自独立地选自N、NR9、CR2和CHR2；以及
R2a选自H、NH2和C1-4烷基。
3.如权利要求2的化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物，其中：
环A选自苯基和哌啶；
独立地选自
Figure FDA0000487247690000033
以及
R10选自H、卤素和CN。
4.权利要求3的化合物，其具有式(III)，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物，所述式(III)为：
其中：
Figure FDA0000487247690000041
独立地选自
W和Q各自独立地选自N和CR2；
R1a和R1b各自独立地选自H和卤素；
R2在每次出现时独立地选自H和任选被OH取代的C1-4烷基；
R2a选自H、NH2和Me；
R4选自H和C1-4烷基；
R5选自H和C1-4烷基；
R6独立地选自H、C(O)OH和C(O)O(C1-4烷基)；
R7选自H、C1-4烷基和CF3；
或者，R6连同R7一起为=O；以及
R10选自H、卤素和CN。
5.权利要求4的化合物，其具有式(IV)，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物，所述式(IV)为：
Figure FDA0000487247690000043
其中：
W和Q各自独立地选自N和CH；
R1a和R1b各自独立地选自H、F和Cl；
R4选自H、甲基、乙基、丙基、异丙基和丁基；
R5为H；
R8为NHC(O)O-C1-4烷基；以及
R10选自H和CN。
6.权利要求5的化合物，其具有式(V)，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物，所述式(V)为：
其中：
R1a选自H和F；
R1b为Cl；以及
R4选自H、甲基、乙基和异丙基。
7.权利要求4的化合物，其具有式(VI)，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物，所述式(VI)为：
Figure FDA0000487247690000052
其中：
Figure FDA0000487247690000061
独立地选自
Figure FDA0000487247690000062
W选自N和CH；
Q选自N和CH；
R1a和R1b各自独立地选自F和Cl；
R4选自H、甲基和乙基；以及
R8为NHC(O)OMe。
8.式(Ia)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物，所述式(Ia)化合物为：
Figure FDA0000487247690000063
其中：
环A选自芳基和5元至6元杂环，所述杂环包含碳原子和1至4个选自N、NH、N(C1-4烷基)、S(O)p和O的杂原子，其中所述芳基和杂环任选被R1取代；
环B为5元至6元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N、NH、S(O)p和O的杂原子，其中所述杂环任选被R10取代；
环C为4元至6元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至4个选自N、NR9、S(O)p和O的杂原子，其中所述杂环任选被R2取代；
X选自C4-8亚烷基和C4-8亚烯基，其中所述亚烷基和亚烯基被R4和R5取代；或者，所述亚烷基和亚烯基的一个或多个碳原子可被O、C=O、S(O)p、NH和N(C1-4烷基)替代；
Y选自-CR6R7-NH-和-NH-CR6R7-；
R1选自H、卤素、NO2、C1-6烷基、OH、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、-C(=O)C1-3烷基和CN；
R2选自H、=O、OH、NH2、CF3、卤素、C1-4烷基(任选被OH取代)、C1-3烷氧基和C(O)C1-3烷基；
R3选自H和C1-4烷基；
或者，R2和R3连同它们直接或间接连接的原子一起形成环；
R4和R5独立地选自H、卤素、C1-6烷基、OH、NH2、-CH2NH2、C1-4卤代烷基、-OCH2F、-OCHF2、-OCF3、NH(C1-4烷基)、N(C1-4烷基)2、C1-4烷氧基、-CH2OH和-CH2O(C1-4烷基)；当R4与R5不连接至同一碳原子时，它们可连同它们所连接的碳原子一起形成碳环；
R6选自H、卤素、C(O)OH和C(O)O(C1-4烷基)；
R7选自H、C1-4烷基和CF3；
或者，R6连同R7一起为=O；
R8在每次出现时独立地选自H、卤素、卤代烷基、CN、-(CH2)nOH、NR12R12、-CH2NH2、C(O)OH、-(CH2)n-NHC(O)OR12、-NHC(O)R12、-NHC(O)C(O)R12、-NHC(N-CN)NHR12、-NHC(NH)NHR12、-N=CHNR12R12、-NHC(O)NR12R12、-NHS(O)2C1-4烷基、-(CH2)n-CONR12R12、-(CH2)nC(O)O(C1-4烷基)、-NHC(O)OCH2(C(CH2)2)O-(CH2)n-C3-10碳环、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代；
R9选自H和C1-4烷基；
R10选自H、卤素、CN、=O、OH、NH2、C3-6环烷基、C1-4烷基、C1-4烷氧基和C1-4卤代烷基；
R11选自H、卤素和甲基；
R12选自H、C1-4烷基(任选被卤素、羟基、烷氧基、羧基、烷氧羰基和芳基烷氧基取代)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代；
R13选自OH、卤素、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(CH2)n-C(=O)OH、-(CH2)n-C(=O)OC1-4烷基、-(CH2)n-OC1-4烷基和=O；
n在每次出现时独立地选自0、1、2、3和4；
p在每次出现时独立地选自0、1和2；
条件为不包括以下化合物：
Figure FDA0000487247690000081
9.权利要求8的化合物，其具有式(IIa)，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物，所述式(IIa)为：
Figure FDA0000487247690000082
其中：
环A选自芳基和5元至6元杂环，所述杂环包含：碳原子和1至3个选自N、NH和N(C1-4烷基)的杂原子；
环B选自咪唑、吡啶、吡啶酮、嘧啶和哒嗪；
X1a选自C2-4亚烷基和C2-4亚烯基，其中所述C2-4亚烷基和C2-4亚烯基任选被R4和R5取代；或者，所述亚烷基的一个或多个碳原子可被O和C=O替代；
U、V、W和Q各自独立地选自N、NR9、S、O、C、CR2和CHR2；
---为任选存在的键；
R1在每次出现时独立地选自H、卤素、NO2、C1-6烷基、OH、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基和CN；
R2选自H、=O、OH、NH2、CF3、卤素、C1-4烷基(任选被OH取代)、C1-3烷氧基和C(O)C1-3烷基；
R3为H；
R4和R5独立地选自H、卤素、C1-6烷基、OH和NH2；当R4与R5不连接至同一碳原子时，它们可连同它们所连接的碳原子一起形成碳环；
R6选自H、卤素、C(O)OH和C(O)O(C1-4烷基)；
R7选自H、C1-4烷基和CF3；
或者，R6连同R7一起为=O；
R8在每次出现时独立地选自H、卤素、卤代烷基、CN、-(CH2)nOH、NR12R12、C(O)OH、-(CH2)n-NHC(O)OR12、-NHC(O)R12、-NHC(O)NR12R12、-NHS(O)2C1-4烷基、-(CH2)n-CONR12R12、-(CH2)nC(O)O(C1-4烷基)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，所述杂环任选被R13取代；
R9选自H和C1-4烷基；
R10在每次出现时独立地选自H、卤素、CN、=O、OH、NH2、C3-6环烷基、C1-4烷基、C1-4烷氧基和C1-4卤代烷基；
R11为H；
R12选自H、C1-4烷基(任选被卤素、羟基、烷氧基、羧基、烷氧羰基取代)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代；
R13选自OH、卤素、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(CH2)n-C(=O)OH、-(CH2)n-C(=O)OC1-4烷基、-(CH2)n-OC1-4烷基和=O；以及
n在每次出现时独立地选自0、1、2和3。
10.如权利要求9的化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物，其中：
环A选自苯基、哌啶和吡啶；
Figure FDA0000487247690000091
选自
Figure FDA0000487247690000092
Figure FDA0000487247690000093
Figure FDA0000487247690000101
以及
R10选自H、F、Cl、C1-4烷基、C1-4烷氧基和CN。
11.权利要求10的化合物，其具有式(IIIa)，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物，所述式(IIIa)为：
其中：
Figure FDA0000487247690000103
独立地选自
Figure FDA0000487247690000105
X1a选自-CR4R5-CR4R5-、-CR4R5-CR4R5-CR4R5-和-CR4=CR5CR4R5-，其中一个或多个-CR4R5-可被O或C=O替代；
U、V、W和Q各自独立地选自N、NR9、S、C、CR2和CHR2；
R1a和R1b各自独立地选自H、卤素、OH、CN、CH3、OCH3、CF3和OCHF2；
R2选自H、NH2、CF3、卤素和C1-4烷基(任选被OH取代)、C1-3烷氧基和C(O)C1-3烷基；
R4选自H、F、Cl、OH和C1-4烷基；
R5选自H、F和C1-4烷基；
R6独立地选自H、C(O)OH和C(O)O(C1-4烷基)；
R7选自H、C1-4烷基和CF3；
或者，R6连同R7一起为=O；
R8在每次出现时独立地选自H、卤素、卤代烷基、CN、-(CH2)nOH、NR12R12、-CH2NH2、C(O)OH和-NHC(O)OR12、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，所述杂环任选被R13取代；
R9选自H和C1-4烷基；
R10选自H、卤素、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基和CN；
R12选自H、C1-4烷基(任选被F、OH、-O(C1-4烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4烷基)取代)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代；
R13选自OH、卤素、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(CH2)n-C(=O)OH、-(CH2)n-C(=O)OC1-4烷基、-(CH2)n-OC1-4烷基和=O；以及
n在每次出现时独立地选自0、1、2和3。
12.权利要求11的化合物，其具有式(IVa)，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物，所述式(IVa)为：
Figure FDA0000487247690000111
其中：
Figure FDA0000487247690000112
独立地选自
Figure FDA0000487247690000113
W和Q各自独立地选自N和CR2；
R1a选自H、F和Cl；
R1b选自H、F、Cl、OH、CN、CH3、OCH3、CF3和OCHF2；
R2选自H、NH2、CF3、F、Cl和C1-4烷基；
R4选自H、F、甲基、乙基、丙基和异丙基；
R5为H和F；
R8在每次出现时独立地选自H、卤素、卤代烷基、CN、-(CH2)nOH、NR12R12、C(O)OH和-NHC(O)OR12；
R10选自H、卤素、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基和CN；
R12选自H、C1-4烷基(任选被F、OH、-O(C1-4烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4烷基)取代)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代；
R13选自OH、卤素、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(CH2)n-C(=O)OH、-(CH2)n-C(=O)OC1-4烷基、-(CH2)n-OC1-4烷基和=O；以及
n在每次出现时独立地选自0、1、2和3。
13.权利要求12的化合物，其具有式(Va)，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物，所述式(Va)为：
Figure FDA0000487247690000121
其中：
独立地选自
Figure FDA0000487247690000123
Figure FDA0000487247690000131
Q选自N和CR2；
R1a选自H和F；
R1b为Cl；
R2选自H、NH2、F、Cl和甲基；
R4选自H、OH、甲基、乙基和异丙基；
R5为H和F；
R8在每次出现时独立地选自H、-(CH2)nOH、NR12R12、C(O)OH和-NHC(O)OR12；
R10选自H、卤素、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基和CN；
R12选自H、C1-4烷基(任选被F、OH、-O(C1-4烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4烷基)取代)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代；
R13选自OH、卤素、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(CH2)n-C(=O)OH、-(CH2)n-C(=O)OC1-4烷基、-(CH2)n-OC1-4烷基和=O；以及
n在每次出现时独立地选自0、1、2和3。
14.权利要求12的化合物，其具有式(VIa)，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物，所述式(VIa)为：
Figure FDA0000487247690000132
其中：
Figure FDA0000487247690000141
独立地选自
Figure FDA0000487247690000142
Figure FDA0000487247690000143
R1a选自H和F；
R1b为Cl；
R2选自H、NH2、F、Cl和甲基；
R4选自H、OH、甲基、乙基和异丙基；
R5为H和F；
R8在每次出现时独立地选自H、-(CH2)nOH、NR12R12、C(O)OH和NHC(O)OR12；
R10选自H、卤素、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基和CN；
R12选自H、C1-4烷基(任选被F、OH、-O(C1-4烷基)、-C(O)OH、-C(O)O(C1-4烷基)取代)、-(CH2)n-C3-10碳环和-(CH2)n-4元至10元杂环，其中所述碳环和杂环任选被R13取代；
R13选自OH、卤素、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(CH2)n-C(=O)OH、(CH2)n-C(=O)OC1-4烷基、-(CH2)n-OC1-4烷基和=O；以及
n在每次出现时独立地选自0、1、2和3。
15.权利要求11的化合物，其具有式(VIIa)，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物，所述式(VIIa)为：
Figure FDA0000487247690000144
其中：
独立地选自
Figure FDA0000487247690000152
Figure FDA0000487247690000153
W选自N和CR2；
Q选自N和CR2；
R1a选自H和F；
R1b为Cl；
R2选自H、Cl、NH2和甲基；
R4选自H、F、甲基、乙基、OH；
R5选自H和F；
R8选自H、NHR12、-(CH2)nOH、-NHC(N-CN)NHR12、-C(O)OH、-NHC(O)OR12和-(CH2)n-4元至10元杂环，所述杂环任选被R13取代；
R10选自H、F、Cl、C1-2烷基、甲氧基、乙氧基和CN；
R12选自H、C1-4烷基(任选被F、OH、-OC1-4烷基、-C(O)OH、-C(O)OC1-4烷基、-O-芳基烷基取代)、-(CH2)n-C3-6环烷基和-(CH2)n-4元至6元杂环，所述杂环包含碳原子和1至4个选自N、NH、N(C1-4烷基)和O的杂原子，其中所述杂环任选被R13取代；
R13选自OH、OC1-4烷基、C1-6烷基(任选被烷氧基取代)、C3-6环烷基和=O；以及
n在每次出现时独立地选自0、1、2和3。
16.如权利要求15的化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物，其中：
Figure FDA0000487247690000154
独立地选自
Figure FDA0000487247690000155
W选自N和CR2；
Q选自N和CR2；
R1a选自H和F；
R1b为Cl；
R2选自H、Cl、NH2和甲基；
R4选自H、F、甲基、乙基、OH；
R5选自H和F；
R8选自H、NHR12、-C(O)OH和-NHC(O)OR12；
R10选自H、F、Cl、甲基、甲氧基、乙氧基和CN；
R12选自H、C1-4烷基(任选被F、OH、-OC1-4烷基、-C(O)OH、-C(O)OC1-4烷基取代)、-(CH2)n-C3-6环烷基和-(CH2)n-4元至6元杂环，所述杂环包含碳原子和1至4个选自N、NH、N(C1-4烷基)和O的杂原子，其中所述杂环任选被R13取代；
R13选自OH、OC1-4烷基、C1-6烷基(任选被烷氧基取代)、C3-6环烷基和=O；以及
n在每次出现时独立地选自0、1、2和3。
17.一种药物组合物，其包含一种或多种如权利要求1至16中任一项的化合物和药学上可接受的载体或稀释剂。
18.一种治疗和/或防治血栓栓塞障碍的方法，其包括：向需要的患者给药治疗有效量的如权利要求1至16中任一项的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。
19.如权利要求18的方法，其中所述血栓栓塞障碍选自动脉心血管血栓栓塞障碍、静脉心血管血栓栓塞障碍和心腔或周围循环中的血栓栓塞障碍。
20.如权利要求19的方法，其中所述血栓栓塞障碍选自不稳定型心绞痛、急性冠脉综合征、心房颤动、心肌梗塞、短暂性缺血性发作、中风、动脉粥样硬化、周围阻塞性动脉疾病、静脉血栓形成、深静脉血栓形成、血栓性静脉炎、动脉栓塞、冠状动脉血栓形成、脑动脉血栓形成、脑栓塞、肾栓塞、肺栓塞，和由使血液暴露于促进血栓形成的人工表面的医学植入物、设备或操作引起的血栓形成。
21.如权利要求1至16中任一项的化合物，或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其用于疗法中。
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