CN103833590A

CN103833590A - 替加环素晶型及其制备方法

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Publication number: CN103833590A
Application number: CN201210484377.XA
Authority: CN
Inventors: 李志怀; 陈肖卓; 何清超; 金凯; 刘春玲; 郝卫华; 刘磊娜; 底辉锋; 杜立民; 李少华
Original assignee: CSPC Zhongqi Pharmaceutical Technology Shijiazhuang Co Ltd
Current assignee: CSPC Zhongqi Pharmaceutical Technology Shijiazhuang Co Ltd
Priority date: 2012-11-26
Filing date: 2012-11-26
Publication date: 2014-06-04

Abstract

本发明提供了替加环素的M、N晶型及其制备方法。本发明的替加环素M晶型的粉末衍射图谱中2θ在8.8±0.2、10.1±0.2、20.4±0.2、21.8±0.2处有衍射峰。本发明提供了由替加环素N晶型制备替加环素M晶型的方法。本发明制备得到的M晶型适宜存放和运输，性质稳定，由该晶型所制备得到的粉针剂纯度高，杂质含量低，质量可控，符合药用要求。

Description

替加环素晶型及其制备方法

技术领域

本发明属于医药领域，特别涉及替加环素晶型及其制备方法。

背景技术

替加环素，商品名Tygacil，美国惠氏药物公司开发的一种新型广谱活性的静脉注射用抗生素，对有抗药性的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌也有活性，是甘氨酰四环素类中的首个药品。美国食品药品管理局（FDA）于2005年6月批准上市，用于18岁及18岁以上复杂皮肤和皮肤结构感染或复杂腹内感染（包括复杂阑尾炎、烧伤感染、腹内脓肿、深部软组织感染及溃疡感染等），以及社区获得性肺炎的治疗。目前本品已进口上市。

替加环素化学名为（4S,4aS,5aR,12aS）-4,7-双（二甲氨基）-9-[（叔丁基氨基）乙酰胺基]-3,10,12,12a-四羟基-1,11-二氧代-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-八氢并四苯-2-甲酰胺。结构如下：

Figure 201210484377X100002DEST_PATH_IMAGE001

。

多晶型现象是化合物的重要性质，对于多数化学药物，一般都存在多晶型现象，不同的晶型对于药物的稳定性、均一性、生物利用度和制剂等具有重要的影响。替加环素存在多晶现象，且其结构中含有多个手性中心，在制备或存放过程中容易产生其差向异构体表替加环素。另外，替加环素在国外的上市剂型为冻干粉针剂，由于替加环素存在降解的特性，因此在制备冻干粉针时需要在低温低氧的条件下进行，因此寻找能够控制差向异构体生成且性质稳定的晶型成为业内科研工作者的关注焦点。目前已申请的替加环素晶型专利如下。

惠氏公司于2006.05.25申请的CN101248038，该申请文件中描述了替加环素的五种晶型（I型、II型、III型、IV型和V型）及制备方法。该专利申请披露了各种晶型的表征峰位：I晶型用2θ角5.2°和11.1°表征；II晶型用2θ角9.2°表征；III晶型用2θ角6.0°表征；IV 晶型用2θ角4.6°表征；V晶型用4.3°表征。除此之外，公开了五种晶型的制备方法。I晶型可以在二氯甲烷或（水/二氯甲烷的混合溶液）中制备，II晶型可以由I晶型在甲醇或（甲醇/二氯甲烷的混合溶液）中制备，II晶型的DSC显示其为水合物。III晶型、IV晶型和V晶型也分别由I晶型在不同的溶剂中制备得到。

特瓦制药工业有限公司于2007.04.24申请的CN101479235，描述了两种晶型形式，均通过将无定形替加环素粉末与有机溶剂在环境温度下于敞开的容器中搅拌直到溶剂蒸发，收集剩余的固体得到替加环素晶型。该方法无法应用于工业生产，且在敞开的容器中搅拌使溶剂蒸发，对环境不友好，影响技术人员的身体健康。

赵军旭于2011.6.29申请的CN102295576，公开了晶型A和晶型B。A晶型制备方法为将1g替加环素精制品置于烧瓶中，先加入40ml异丙醇，搅拌升温至回流，继续补加异丙醇至完全溶解，缓慢降温至析出结晶后，降温至-10℃，继续搅拌2h，过滤析出的结晶，并用少量冷异丙醇洗涤，40℃减压干燥，得产物。B晶型的制备方法为：将1g替加环素加入到20ml丙酮中，室温搅拌4h，过滤，洗涤，40℃，过滤，洗涤，40℃减压干燥得产物。该专利对所得到的A晶型和B晶型做了稳定性试验，但并未对其制备冻干粉针过程中的稳定性进行考察。

宫宁瑞于2011.10.27申请的CN102417465，描述了特别适合制备冻干粉针的新晶型及其制备方法。具体为一种新的替加环素晶型及其制备方法：300mL乙醇冷却至15~20℃，搅拌下加入替加环素无定型物10g溶解，25℃以下水浴，真空旋蒸浓缩至100~110mL，冰水浴冷却下加入乙酸乙酯100~110mL，冰水浴搅拌至5℃左右，放入冷柜冷却（-20~0℃）15~20h，过滤，20~25℃真空干燥20~24h。所述晶型的制备方法操作复杂，且温度控制点较多，无疑增加了工业生产的成本。

除了上述专利外，以色列TEVA公司申请了WO2008066935，该专利公开了16种替加环素的晶型，该专利中披露了在MEK（甲基乙基酮）溶液中进行替加环素的制备，所得晶型在干燥状态下为III型，在湿润状态下为X型，由此可知，该晶型不稳定，容易在空气中发生转晶。另外该专利还公开了在异丙醇和甲醇的混合溶液中，搅拌1.5小时可得III晶型，搅拌1小时可得VII晶型，转晶情况不易控制。另外，瑞士的SANDOZ分别申请了WO2008155405、 WO2009062964、WO2009092680三件专利，一共公开了4种替加环素晶型及制备方法。

虽然先申请人已经针对替加环素的晶型进行了大量的研究工作，但是寻找一种制备方法简单，适合于工业生产，且产品稳定性好的替加环素晶型，仍然是本领域技术人员所迫切需要完成的任务。

发明内容

本发明的目的是提供新的替加环素晶型及制备方法。

一方面，本发明提供的替加环素M晶型的特征在于，其X射线-粉末衍射（X-RD）图谱中2θ在8.8±0.2、10.1±0.2、20.4±0.2、21.8±0.2处有衍射峰。

进一步的，本发明提供一种新的替加环素M晶型，其特征在于，其X射线-粉末衍射图谱中2θ在8.8±0.2处有最高衍射峰。

再进一步的，本发明提供的替加环素M晶型的特征在于，其X射线-粉末衍射图谱中2θ在8.8±0.2、10.1±0.2、10.4±0.2、13.2±0.2、20.4±0.2、21.8±0.2、22.1±0.2、22.6±0.2处有衍射峰。

更近一步的，本发明提供的替加环素M晶型的特征在于，其X射线-粉末衍射图谱中2θ在8.8±0.2、10.1±0.2、10.4±0.2、11.5±0.2、12.7±0.2、13.2±0.2、14.2±0.2、15.3±0.2、15.8±0.2、17.1±0.2、18.6±0.2、20.4±0.2、20.9±0.2、21.8±0.2、22.1±0.2、22.6±0.2、26.6±0.2处有衍射峰。

具体的，本发明所提供的替加环素M晶型的X-射线-粉末衍射图谱如附图1所示。

本发明提供的替加环素M晶型的特征在于，在165-180℃之间有特征吸热峰，具体为在172℃处有特征吸热峰。具体的如附图2所示。

另一方面，本发明提供了上述替加环素M晶型的制备方法，包括如下步骤：

（1）将替加环素N晶型加入溶剂中，控温，搅拌，析晶；

（2）分离所得固体。

进一步的，上述替加环素M晶型的制备方法中所述溶剂可选自甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、乙酸甲酯或水的一种或两种以上；优选的，所述溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇或水的一种或两种以上。所述原料与溶剂的质量体积（g：ml）比为1:1~10，优选的为1:1~5；更优选的为1:2~4。所述温度选自20-60℃，优选的为30-50℃。

本发明提供了一种替加环素M晶型的红外光谱表征方法，本发明的替加环素M晶型的红外光谱约在3290、2932、2785、1614、1589、1524、1451、1391、1365、1286、1241、1204、1103、1056、874、806、703处有峰。本发明所得替加环素M晶型的红外光谱谱图如附图3所示。

再一方面，本发明提供了一种替加环素N晶型，其特征在于，其X射线-粉末衍射图谱中2θ在8.2±0.2、10.3±0.2、15.4±0.2处有衍射峰。进一步的，本发明提供的替加环素N晶型的特征在于，其X射线-粉末衍射（X-RD）图谱中2θ在8.2±0.2处有最高衍射峰。

再进一步的，本发明提供的替加环素N晶型的特征在于，其X射线-粉末衍射图谱中2θ在5.1±0.2、8.2±0.2、10.3±0.2、13.1±0.2、15.4±0.2、19.1±0.2、21.1±0.2、21.4±0.2、22.3±0.2处有衍射峰。

更近一步的，本发明提供的替加环素N晶型的特征在于，其X射线-粉末衍射图谱中2θ在5.1±0.2、8.2±0.2、10.3±0.2、13.1±0.2、13.6±0.2、15.4±0.2、18.8±0.2、19.1±0.2、21.1±0.2、21.4±0.2、22.3±0.2、23.0±0.2、24.6±0.2处有衍射峰。

具体的，本发明所提供的替加环素N晶型的X射线-粉末衍射图谱图附图5所示。

最后，本发明还提供了上述替加环素N晶型的制备方法，包括如下步骤：

（1）将替加环素加入有机溶剂中，控温搅拌，析晶；

（2）分离所得固体。

进一步的，上述替加环素N晶型的制备方法中所述有机溶剂可选自乙酸乙酯、乙酸甲酯、二氯甲烷的一种或多种；优选的，所述有机溶剂为二氯甲烷。所述温度选自10-60℃，优选的为20-40℃，更优选的，为室温。

本发明所提供的替加环素M晶型的特性如下。

（1）性状：本品为橙色或橙黄色结晶性粉末。

（2）稳定性：对本发明所提供的替加环素M晶型进行40℃加速稳定性实验，结果见表1。

表1 替加环素M晶型40℃加速实验

	零个月	一个月	二个月	三个月	六个月
						性状	橙黄色粉末	橙黄色粉末	橙黄色粉末	橙黄色粉末	橙黄色粉末
替加环素（%）	99.83	99.84	99.82	99.82	99.81
						差向异构体（%）	0.17	0.16	0.18	0.18	0.19
其他最大杂质（%）	无	无	无	无	无

结论，本发明提供的替加环素M晶型具备较好的稳定性，在存放过程中可控制发生差向异构化，并有效的控制了降解产物的生成。保证了替加环素原料药的运输与长期储存。

（3）用替加环素M晶型制备的冻干粉针的质量研究

将辅料乳糖溶于注射用水，室温状态加入替加环素M晶型，搅拌溶解，调pH值，活性炭过滤，冷冻干燥制备3批冻干粉针。对所得产品进行分析，结果见表2。

批号	外观	替加环素（%）	差向异构体（%）	其他最大杂质（%）
					20120516	橙黄色冻干块状物	99.82	0.18	无
20120517	橙黄色冻干块状物	99.83	0.17	无
					20120518	橙黄色冻干块状物	99.82	0.18	无

结论，本发明所提供的替加环素M晶型适合在温和条件下进行冻干粉针的制备，所得产品没有增加降解产物，符合药用要求。

本发明所提供的替加环素M晶型，制备方法简单，适合工业化生产。

本发明所提供的替加环素M晶型，适宜存放和运输，性质稳定。

本发明所提供的替加环素M晶型适宜在温和条件下制备冻干粉针制剂。众所周知，替加环素存在稳定性差的缺点，其在溶液中容易发生异构化，降低有效成分的含量，因此替加环素的最佳储存和运输方式为制成冻干粉针剂。利用本发明所提供的替加环素M晶型，在温和条件下，所制备得到的粉针剂纯度高，杂质含量低，质量可控，符合药用要求。

附图说明

图1为本发明所提供的替加环素M晶型的X-RD图。

图2为本发明所提供的替加环素M晶型的DSC图。

图3为本发明所提供的替加环素M晶型的IR图。

图4为本发明实施例4所提供的替加环素M晶型的HPLC图。

图5为本发明所提供的替加环素N晶型的X-RD图。

具体实施方式

以下实施例，仅以说明为目的，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

实施例1 晶型N的制备

将替加环素5.5g加入50mL单口瓶，加入20mL二氯甲烷，室温（23℃）搅拌，得橙黄色浑浊液，继续室温搅拌2小时，抽滤，用0℃的二氯甲烷10mL淋洗，抽干，室温真空干燥，得5g。用X-RD检测为N 晶型。

实施例2 晶型N的制备

将替加环素5.5g加入50mL单口瓶，加入20mL乙酸乙酯，20℃搅拌，得橙黄色浑浊液，继续室温搅拌1.5小时，抽滤，用0℃的乙酸乙酯10mL淋洗，抽干，室温真空干燥，得4.8g。用X-RD检测为N 晶型。

实施例3晶型N的制备

将替加环素5.5g加入50mL单口瓶，加入20mL乙酸甲酯，40℃搅拌，得橙黄色浑浊液，继续室温搅拌2小时，抽滤，用0℃的乙酸甲酯10mL淋洗，抽干，室温真空干燥，得4.9g。用X-RD检测为N 晶型。

实施例4 晶型N的制备

将替加环素5.5g加入50mL单口瓶，加入20mL乙酸乙酯和二氯甲烷混合液（体积比1:1），35℃搅拌，得橙黄色浑浊液，继续室温搅拌2小时，抽滤，用0℃的二氯甲烷10mL淋洗，抽干，室温真空干燥，得4.9g。用X-RD检测为N 晶型。

实施例5 晶型M的制备

5.5g晶型N替加环素加入50mL单口瓶，加入11mL水：甲醇（体积比为1:4）混合液，37℃搅拌，大部分溶解，得暗红色略浑浊溶液，继续搅拌不断析出固体，加热20分钟后改为室温搅拌2小时，抽滤，用冷的水：甲醇=1:4（体积比）混合液10mL淋洗，室温真空干燥得5.1g。用X-RD检测为M晶型，纯度见附图4。

实施例6 晶型M的制备

5.5g晶型N替加环素加入50mL单口瓶，加入20mL水：甲醇（体积比为1:3）混合液，37℃搅拌，大部分溶解，得暗红色略浑浊溶液，继续搅拌不断析出固体，加热20分钟后改为室温搅拌2小时，抽滤，用冷的水和甲醇的混合液10mL淋洗，室温真空干燥得5 g。用X-RD检测为M晶型。

实施例7晶型M的制备

5.5g晶型N替加环素加入50mL单口瓶，加入22mL水和乙醇的混合液，30℃搅拌，大部分溶解，得暗红色略浑浊溶液，继续搅拌不断析出固体，加热30分钟后改为室温搅拌1小时，抽滤，用冷的水和乙醇的混合液10mL淋洗，室温真空干燥得5g。用X-RD检测为M晶型。

实施例8 晶型M的制备

5.5g晶型N替加环素加入50mL单口瓶，加入55mL乙酸乙酯，50℃搅拌，得暗红色略浑浊溶液，继续搅拌不断析出固体，加热30分钟后改为室温搅拌2小时，抽滤，用冷的水和甲醇的混合液10mL淋洗，室温真空干燥得4.9g。用X-RD检测为M晶型。

实施例9 晶型M的制备

5.5g晶型N替加环素加入50mL单口瓶，加入20mL甲醇中，35℃搅拌，得暗红色略浑浊溶液，继续搅拌不断析出固体，加热30分钟后改为室温搅拌2小时，抽滤，用冷的甲醇溶液10mL淋洗，室温真空干燥得5g。用X-RD检测为M晶型。

Claims

1.一种新的替加环素M晶型，其特征在于，其X射线-粉末衍射图谱中其X射线-粉末衍射图谱中以°为单位的2θ角在8.8±0.2、10.1±0.2、20.4±0.2、21.8±0.2处有衍射峰。

2.如权利要求1所述的替加环素M晶型，其特征在于，其X射线-粉末衍射图谱中其X射线-粉末衍射图谱中以°为单位的2θ角在8.8±0.2有最高衍射峰。

3.如权利要求1或2所述的替加环素M晶型，其特征在于，其X射线-粉末衍射图谱中以°为单位的2θ角在8.8±0.2、10.1±0.2、10.4±0.2、13.2±0.2、20.4±0.2、21.8±0.2、22.1±0.2、22.6±0.2处有衍射峰，进一步的，其X射线-粉末衍射图谱中2θ在8.8±0.2、10.1±0.2、10.4±0.2、11.5±0.2、12.7±0.2、13.2±0.2、14.2±0.2、15.3±0.2、15.8±0.2、17.1±0.2、18.6±0.2、20.4±0.2、20.9±0.2、21.8±0.2、22.1±0.2、22.6±0.2、26.6±0.2处有衍射峰。

4.如权利要求1所述的替加环素M晶型，其特征在于，其DSC图谱在165-180℃之间有特征吸热峰，具体为在172℃处有特征吸热峰。

5.如权利要求1或2所述的替加环素M晶型的制备方法，包括如下步骤：

（1）将替加环素N晶型加入溶剂中，控温，搅拌，析晶；

（2）分离所得固体。

6.如权利要求5所述的替加环素N晶型的制备方法，其特征在于，所述溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、乙酸甲酯或水的一种或两种以上。

7.一种替加环素N晶型，其特征在于，其X射线-粉末衍射图谱中以°为单位的2θ角在8.2±0.2、10.3±0.2、15.4±0.2处有衍射峰。

8.如权利要求7所述的替加环素N晶型，其特征在于其X射线-粉末衍射（X-RD）图谱中以°为单位的2θ角在8.2±0.2处有最高衍射峰。

9.如权利要求7或8所述的替加环素N晶型，其特征在于，其X射线-粉末衍射图谱中以°为单位的2θ角在5.1±0.2、8.2±0.2、10.3±0.2、13.1±0.2、15.4±0.2、19.1±0.2、21.1±0.2、21.4±0.2、22.3±0.2处有衍射峰，进一步的，其X射线-粉末衍射图谱中以°为单位的2θ角在5.1±0.2、8.2±0.2、10.3±0.2、13.1±0.2、13.6±0.2、15.4±0.2、18.8±0.2、19.1±0.2、21.1±0.2、21.4±0.2、22.3±0.2、23.0±0.2、24.6±0.2处有衍射峰。

10.如权利要求7或8所述的替加环素N晶型的制备方法，包括如下步骤：

（1）将替加环素加入有机溶剂中，控温搅拌，析晶；

（2）分离所得固体。