CN103827130B - 2′‑氟‑6′‑亚甲基碳环核苷和治疗病毒感染的方法 - Google Patents
2′‑氟‑6′‑亚甲基碳环核苷和治疗病毒感染的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103827130B CN103827130B CN201280034528.XA CN201280034528A CN103827130B CN 103827130 B CN103827130 B CN 103827130B CN 201280034528 A CN201280034528 A CN 201280034528A CN 103827130 B CN103827130 B CN 103827130B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- group
- compound
- hbv
- virus
- infection
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 0 C[C@](C(OC)=O)N*(Oc1ccccc1)=O Chemical compound C[C@](C(OC)=O)N*(Oc1ccccc1)=O 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N COc1ccccc1 Chemical compound COc1ccccc1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
- C07D473/26—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with an oxygen, sulphur, or nitrogen atom directly attached in position 2 or 6, but not in both
- C07D473/32—Nitrogen atom
- C07D473/34—Nitrogen atom attached in position 6, e.g. adenine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
- A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
- C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
- C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
- C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
- C07D239/52—Two oxygen atoms
- C07D239/54—Two oxygen atoms as doubly bound oxygen atoms or as unsubstituted hydroxy radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
- C07D473/26—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with an oxygen, sulphur, or nitrogen atom directly attached in position 2 or 6, but not in both
- C07D473/28—Oxygen atom
- C07D473/30—Oxygen atom attached in position 6, e.g. hypoxanthine
Abstract
本发明涉及2'‑氟‑6'‑亚甲基碳环核苷、包含这些核苷的药用组合物及它们在治疗或预防一些病毒感染和其继发性疾病状态与病况中的用途,尤其包括乙型肝炎病毒(HBV)和其继发性疾病状态和病况(肝硬化和肝癌)、丙型肝炎病毒(HCV)、单纯性疱疹病毒I和II(HSV‑1和HSV‑2)、巨细胞病毒(CMV)、水痘带状疱疹病毒(VZV)和爱泼斯坦巴尔病毒(EBV)及其发生而继发的癌症(淋巴瘤、鼻咽癌),包括耐药的(尤其包括耐受拉米夫定和/或阿德福韦的)和这些病毒的其他突变体,尤其HBV。
Description
要求优先权和政府权力
本申请要求来自于2011年5月13日提交的美国申请序列号13/107,713的优先权,标题为“2'-氟-6'-亚甲基碳环核苷和治疗病毒感染的方法”,其申请的全部内容通过引用结合在此。
对本专利申请给出的工作受到了来自美国国家过敏症研究所(NationalInstitute of Allergy)的美国公共健康搜索(U.S.Public Health Search)拨款号AI25899的支持。因此,在本发明中该政府保留了特定的权力。
技术领域
本发明涉及2'-氟-6'-亚甲基碳环核苷、包含这些核苷的药用组合物及其在治疗或预防以下一些病毒感染及其继发性疾病状态和病况中的用途,包括:乙型肝炎病毒(HBV)和其继发性疾病状态和病况(肝硬化和肝癌)、包括肝癌,丙型肝炎病毒(HCV),单纯性疱疹病毒I和II(HSV-1和HSV-2),巨细胞病毒(CMV),水痘带状疱疹病毒(VZV)和爱泼斯坦巴尔病毒(EBV),包括耐药的(尤其包括耐受拉米夫定和/或阿德福韦的)以及这些病毒的其他突变型。2’-氟-6’亚甲基-碳环腺苷(FMCA,化合物15/18)及其单磷酸酯前药(氨基磷酸酯)(化合物15P)的使用展现了对抗HBV、并且特别是HBV的耐药型(尤其是耐受拉米夫定和/或阿德福韦抗-HBV剂的HBV)的优异活性。意外发现尤其该前药形式对抗HBV耐药型具有特别的活性。
背景技术
乙型肝炎病毒(HBV)感染是主要的全球健康问题之一。1尽管初次HBV感染在大多数成人体内是自限性的,3%-5%患者不消退并且发展为慢性感染,而在被HBV感染的幼儿中这个比率是更加高的。2全世界的慢性乙型肝炎(CHB)携带者的估计数量是大约3.5-4亿,每年有多于一百万例由肝硬化、肝衰竭和肝细胞癌导致的死亡。2
目前对治疗HBV感染可用的药剂可被分为两个主要的类别:免疫调节剂和核苷/核苷酸类似物。尽管INFα(一种具有代表性的免疫调节剂)的功效已被许多研究确定,但INFα的临床应用已被低整体反应率、副作用和高成本打了折扣。3,4在这一方面,核苷/核苷酸类似物继续在抗HBV治疗中占主导地位。在临床用途中存在至少六种核苷/核苷酸,包括拉米夫定葛兰素史克(GlaxoSmithKline))、阿德福韦二匹伏酯恩替卡韦百时美施贵宝(Bristol-Myers Squibb))、替比夫定Idenix/Novartis)、克拉夫定在南韩,阶段III在US,Bukwang/Pharmasset)以及最近的泰诺福韦(图1)。这些药剂将HBV DNA的复制显著地抑制到一个最低可能的水平,这带来有利的临床产出并预防晚期肝脏后遗症。实际上,这些口服核苷/核苷酸的引入是抗HBV治疗中的突破。据报道,自应用核苷抗HBV剂以来,在US登记的针对肝脏移植的患者的数量已减少了30%。5
没有实证表明当前核苷/核苷酸治疗对HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)具有直接作用,该共价闭合DNA具有长半衰期并且被认为在治疗终止时充当转录模板,6导致该病毒DNA重新结合。因此,可能需要长期的、高效的抗病毒治疗以预防治疗中止后病毒复发。7不幸地是,长期核苷/核苷酸治疗总与显著损害疗效的耐药突变体的形成相关联。HBV聚合酶的性质加上高复制率导致HBV突变体的出现,这些突变型在某些抗病毒剂的存在下具有生存优势。8拉米夫定(第一个被批准的抗-HBV核苷)的当前使用已被高频率的拉米夫定耐受(最常见的rtL180M±rtM204V/I)所限制。体外研究表明rtL180M+rtM204V/I突变导致该病毒对拉夫米定的敏感性降低>1000倍而不显著损害聚合酶功能。9,10在临床实践中,拉夫米定的耐受的大概比率在1年结束时是大约20%并且在5年治疗之后是70%。11-14另外一种L-核苷替比夫定,对在YMDD基序上的由rtM204I代表的主要的拉夫米定突变是交叉耐受的。这与相对于拉夫米定一年治疗之后(在HBeAg-阳性患者中大约5%)更低比率的耐受是相关的,而在2年之后该比率暴增至22%。15这些数据可能表明在持续更长时间的替比夫定治疗中一个可能的高比率的耐药性。阿德福韦属于非环状膦酸酯。带有明显的非环状糖部分的该核苷对L-核苷不是交叉耐受的。然而,在密码子181(rtA181T)和密码子236(rtN236T)处存在两个主要的耐受阿德福韦的突变,这导致中间有效浓度方面二倍至九倍的增加。16-18尽管增长的倍数是适度的,报道显示对阿德福韦治疗的无响应与形成一种突变的三个患者相关联。19,20用阿德福韦治疗形成耐受的比率也是显著高的,2年时是大约3%并且5年时是29%。21另一种有效的抗HBV核苷恩替卡韦对耐药性具有高遗传障碍。然而,在预先存在耐受拉米夫定突变的患者中,恩替卡韦耐药的可能性从在1年时的1%增加至5年时的51%。22,23因此,在具有YMDD突变的患者中恩替卡韦不推荐作为单一治疗。尽管至今没有实证表明在临床上用泰诺福韦或克拉夫定持续治疗之后检测到耐药性,在延长治疗之后的结果还待确定。
抗病毒耐药的形成通常与更糟的临床产出是相关联的。8例如,拉米夫定治疗的功效被耐药性的形成而否定。24与不具有耐药性迹象的受试者相比,形成了耐药性的患者较少可能显示出组织学改善(44%比77%)并且更多可能显示肝脏恶化(15%比5%)。特别是,已经报道在抗病毒耐药性形成之后患者肝炎发作和肝变质。25因此,在抗HBV治疗中谨慎管理抗病毒耐药是最重要的。对于对初始单一核苷治疗反应不佳的患者来说,附加(与不同的核苷或干扰素结合)治疗和向一种替代核苷单一治疗转换是两个主要的选择。尽管在耐药性管理中不清楚哪种是最有效的方式,提供具有高遗传障碍和具有来自初始药物的不同耐受曲线的附加的/替代的药剂是关键的。当前抗HBV武器库是受限的。因此,重要的是开发不仅在对抗野生型(WT)上并且也在对抗存在的HBV耐药突变体方面是有活性的新的核苷类似物。
在我们的药物发现项目的进程中,向糖部分上引入氟原子获得了一些新的具有有趣的生物学趣味的核苷。26-35因此,探索用一个6'-外-环烯烃(6'-亚甲基)取代碳环核苷上的氟原子是有很大意义的。在此,我们想在本发明中报道该有趣的氟化的碳环核苷,其在对抗HBV-WT以及耐受拉夫米定和阿德福韦突变体方面是有活性的。
对于乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、单纯性疱疹病毒I和II(HSV-I和II)、巨细胞病毒(CMV)、水痘带状疱疹病毒(VZV)和爱泼斯坦巴尔病毒(EBV)的抗病毒剂治疗的搜寻是一个不间断的过程并且本发明是针对那些病毒疾病状态。
发明内容
本发明涉及根据以下结构的碳环核苷化合物:
其中B是
其中R是H、F、Cl、Br、I、C1-C4烷基(优选地CH3)、-C≡N、-C≡C-Ra、;X是H、C1-C4烷基(优选地CH3)、F、Cl、Br或I;
Ra是H或一个-C1-C4烷基基团;
R1和R1a各自独立地是H、一个酰基基团、一个C1-C20烷基或醚基团、一个氨基酸残基(D或L)、一个磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯、磷酸二酯或氨基磷酸酯基团或R1和R1a与它们所连接的氧原子一起形成一个碳酸二酯、磷酸二酯或氨基磷酸酯基团;
R2是H、一个酰基基团、一个C1-C20烷基或醚基团或一个氨基酸残基(D或L);
或其一种药学上可接受的盐、对映异构体、水合物或溶剂化物。
优选地R1a是H。还优选地,R1和R2各自独立地是H或一个C2-C20酰基基团,更优选地都是H。在某些方面,R1是一个氨基磷酸酯基团。
B优选地是
在替代的优选方面,该化合物由以下化学结构所代表:
其中B是如以上所述的,优选地是并且R1、R1a和R2是如上文中另外所述的。注意在2’位的氟基团(其可以被处置为根据本发明所述的化合物中的一个α或β(上或下)构型)优选地被处理为如所描绘的一个β(向上)构型。根据本发明所述的优选化合物是前药形式,其中R1a是一个如此处另外所述的氨基磷酸酯基团,优选地是如此处另外所述的衍生自氨基酸的一个氨基磷酸酯基团。在某些方面中,一个特别优选的R1基团是该氨基磷酸酯基团
其中Rp1是一个可任选地取代的(即被例如OH、卤素)C1-C20烷基基团,优选地是一个C1-C4烷基基团,甚至更优选地是一个甲基、乙基、异丙基基团或异丁基基团;并且
RP是H、硝基、氰基、甲氧基、或一个被从1至3个卤素取代基(优选地F)任选地取代的C1-C3烷基基团。本发明还针对具有如此处另外所述的氨基磷酸酯基团的个别非对映异构体(磷是一个手性中心)。
对于R1的优选氨基磷酸酯基团包括根据以下化学结构的那些:
其中RP是H或C1-C3烷基基团并且Rp1是甲基、乙基、异丙基或异丁基,更优选地是一个甲基或异丙基基团。
优选地,R1是一个基团。
在本发明的特别优选方面中,用于在本发明中使用的抗HBV化合物是
或其一种药学上可接受的盐。
本发明还涉及包括有效量的如上所述的一种化合物的药用组合物,可任选地与一种药学上可接受的载体、添加剂或赋形剂组合。药用组合物的替代实施例包括有效量的如此处另外所述的一种碳环核苷化合物与一种另外的抗病毒剂组合。优选的抗病毒剂包括:例如阿昔洛韦、泛昔洛韦、更昔洛韦、伐昔洛韦、阿糖腺苷、利巴韦林、带状疱疹免疫球蛋白(ZIG)、拉米夫定、阿德福韦二匹伏酯、恩替卡韦、替比夫定、克拉夫定、泰诺福韦和其混合物。用于在本发明的药用方面中使用的特别优选的化合物包括
或其一种药学上可接受的盐。
根据本发明治疗方法代表了另外的实施例。在本方面中,一种治疗或减少病毒感染的可能性的方法,其中该病毒感染由乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、单纯性疱疹I(HSV-I)、单纯性疱疹II(HSV-II)、巨细胞病毒(CMV)、水痘带状疱疹病毒(VZV)或爱泼斯坦巴尔病毒(EBV)引起,该方法包括向需要治疗的或对其有感染风险的一个患者给予有效量的如此处另外所述的一种化合物。
在本发明的方法方面中,用于在本发明中使用以治疗HBV的优选化合物包括:
或其一种药学上可接受的盐。
在一个优选的方面,本发明涉及一种治疗HBV感染的方法,该HBV感染包括一种耐药(进一步包括多重耐药)HBV感染,其中该耐药性是对目前使用的抗HBV剂中的任一种或多种,包括阿德福韦、恩替卡韦和/或拉米夫定耐药性,除了其他的以外,尤其包括对拉米夫定和恩替卡韦,拉米夫定和阿德福韦,恩替卡韦和拉米夫定和拉米夫定、恩替卡韦和阿德福韦耐受的菌株。在本发明的本方面中,用于在本方法中使用以治疗HBV感染尤其包括一种耐药(包括如上文中所述的多重耐药)HBV感染的优选化合物包括:
或其一种药学上可接受的盐。
使用本发明的这些化合物与一种另外的抗病毒剂相结合的联合治疗代表本发明的另外的方面。优选的抗病毒剂包括:例如阿昔洛韦、泛昔洛韦、更昔洛韦、伐昔洛韦、阿糖腺苷、利巴韦林、带状疱疹免疫球蛋白(ZIG)、拉米夫定、阿德福韦二匹伏酯、恩替卡韦、替比夫定、克拉夫定、泰诺福韦和其混合物,包括如此处另外所述的其他药剂。治疗或减少病毒感染(包括一种耐药病毒感染(尤其包括HBV和/或HCV))继发的纤维化、肝癌或肝硬化的形成的可能性的方法代表本发明的另外的方面。在用于治疗HBV感染(尤其包括HBV的一种耐药(包括如此处另外所述的多重耐药)菌株)的联合治疗的某些方面中以下化合物(包括它们的非对映异构体富集的和/或非对映异构体纯的化合物)的使用是特别优选的:
或其一种药学上可接受的盐与任一种或多种如此处另外所述的另外的抗HBV剂相结合。
附图说明
图1显示了一些当前的抗HBV核苷/核苷酸。
图2显示了(a)建模核苷16的低能构象异构体(以蓝色指明),采用一个2'-内、Southern构象。尽管本构象异构体不是全局最小值,在它们之间的能量势垒低至0.5kJ/mol。(b)16和15的叠加结构表明两分子的构象之间的相似性。(c)氟化的碳环核苷15(C:灰色,N:蓝色,O:红色,F:绿色,H:白色)也优选一个2'-内,Southern构象。
图3显示合成方案1,其提供了至糖合成子(synthon)中间体10的一系列合成步骤。使用了以下试剂和条件:(a)参考文献33,34,40,J.Org.Chem.(《有机化学杂志》)2003,68,9012-9018;(b)i)LDA,Echenmoser盐,THF,-78℃,ii)MeI,室温,iii)饱和NaHCO3溶液,室温;(c)NaBH4/CeCl3·7H2O,THF,-78℃;(d)NaH,BnBr,TBAI,THF,室温;(e)3N HCl,MeOH,90℃;(f)TIPDSCl,Py,-30℃至室温;(g)DAST,CH2Cl2,室温;(h)i)Tf2O,Py,-30℃至室温,ii)CeOAc,18-冠醚-6,苯,50℃;iii)NaOMe,MeOH,室温;(i)i)TBAF/HOAc,THF,室温,ii)BZCl,Py,室温;(j)BCl3,CH2Cl2,-78℃。
图4显示合成方案2,其提供了至核苷化合物15/18的一系列合成步骤。使用了以下试剂和条件:(a)DIAD,Ph3P,6-氯嘌呤,THF,室温;(b)NH3,MeOH,100℃或NaN3,DMF,随后H2O;(c)i)OsO4/NMO,丙酮/H2O,室温,ii)NaN3,DMF,140℃,iii)H2/Pd/C,EtOH,室温;(d)i)1-溴羰基-1-甲基乙酸乙酯,乙腈,-30℃–室温,ii)Zn/HOAc,DMF,室温;(e)DIBAL-H,CH2Cl2,-78℃。
图5显示替代方案2,其提供了至化合物15/18的一系列合成步骤,该化合物是用于针对如在实例部分中所述的野生型和突变体HBV的测试中。使用了以下试剂和条件:(a)见Jin等人,J.Org.Chem.(《有机化学杂志》),2003,68,9012-9018(b)i)LDA,Eshenmoser盐,THF,-78℃;ii)MeI,室温;iii)饱和NaHCO3溶液,室温;(c)NaBH4/CeCl3.7H2O,MeOH,-78℃;(d)NaH,BnBr,DMF,0℃;(e)TFA/H2O(2:1),50℃;(f)TIDPSCl2/咪唑,DMF,0℃;(g)DAST,CH2Cl2,室温;(h)TBAF/AcOH,THF,室温;(i)BzCl,吡啶,室温;(j)BCl3,CH2Cl2,-78℃。
替代地,使用了以下试剂和条件:(a)DIAD,Ph3P,6-氯嘌呤,THF,室温;(b)NH3,MeOH,100℃;(c)OsO4/NMO,丙酮/H2O,室温;(d)i)NaN3,DMF,140℃;(ii)H2/Pd/C,EtOH,室温;(e)i)1-溴羰基-1-乙酸亚甲酯,乙腈,室温;(ii)Zn/HOAc,DMF;(f)DIAD,Ph3P,THF,0℃;(g)TFA,CH2Cl2,室温;(h)DIABAL-H,CH2Cl2,-78℃。
图6显示了又另一个替代化学方案,其提供了至化合物15/18的一系列合成步骤。这是如在此另外提供的合成的一种简短方法。
图7显示替代方案3,其提供了至化合物15/18的一系列合成步骤。使用了以下试剂和条件:(a)i)OsO4/NMO,丙酮/水(ii)二甲氧基丙烷,PTSA,丙酮(b)NaBH4,甲醇(c)叔-丁基氯,NaH,DMF(d),TFA,DCM或NaOtBu,H2O/THF(e)NBS,NaOMe,乙醇,H+(f)(i)LDA,Eshenmoser盐,THF,-78℃;ii)MeI,室温;iii)饱和NaHCO3溶液,室温;(g)NaBH4/CeCl3.7H2O,MeOH(h)NaH,BnBr,DMF,(i)TFA/H2O(2:1),50℃;(j)TIDPSCl2/咪唑,DMF;(k)DAST,CH2Cl2,(l)BCl3,CH2Cl2;(m)DIAD,Ph3P,THF;(m)TFA,CH2Cl2。
图8显示了化合物15P/18P和15PI/18PI的前药合成。该合成从二氯膦1P进行在二氯甲烷溶剂中三乙胺存在下通过使L-丙氨酸取代的盐酸酯反应以产生2P或3P,氯苯基磷酰基-L-氨基丙酸乙酯的甲基酯或异丙基酯。向磷酰中间体2P或3P中过夜添加在干燥的四氢呋喃中的N-甲基咪唑里的化合物15/18以产生如指明的前药类似物15P/18P和15PI/18PI。注意当显示甲基酯或异丙基酯15P/18P和15PI/18PI时,相应的乙基酯和异丁基酯也经由相同程序制成。在图8中的合成显示了化合物的一种非对映异构体混合物(在该丙氨酸基团和磷基团上展现一个立体定向的甲基的两个碳是手性中心,但是所显示的磷基团是外消旋的,导致了化合物的一种非对映异构体混合物)。这些非对映异构体使用本领域中可获得的标准方法是易于分开的,这些方法包括选择结晶技术和/或手性柱。
图9显示了在本说明书中另外披露的化学方案的一个粗略示意图。本合成提供了从如指明的D-核糖合成根据本发明所述的化合物的一个途径。
图10显示在细胞内HBV DNA复制测定时化合物15/18对抗拉米夫定和阿德福韦耐药突变体的体外抗HBV活性。针对表1的附图说明如下:artLM/rtMV=rt180M/rtM204V双突变体。b抑制50%的HBV-DNA所需要的有效浓度。c将传染性病毒效价减少90%所需的浓度。d>符号表示在所测试的最高浓度上未达到50%抑制。e在3天后将通过MTT测定所确定的细胞生存能力减少未处理对照的50%所需的药物浓度。
图11显示表2提出化合物15/18、它的单磷酸酯前药15P/18P、拉米夫定和恩替卡韦在Huh7细胞中对抗野生型和恩替卡韦耐药突变体的体外抗HBV活性。a见第二组参考文献的参考文献(22);b参考文献(23)。
图12A和12B显示化合物15P/18P在Huh7细胞中对抗HBV基因型C耐受恩替卡韦的克隆(L180M+S202G+M204V)的抗HBV活性。图12B显示了0.054μM的化合物15/18的IC50值。
图13显示化合物15/18、AZT和3TC通过乳酸脱氢酶释放(LDH)测定的线粒体毒性。
图14显示化合物15/18A)在野生型HBV中和B)在N236T阿德福韦突变体HBV中的结合模式和范德瓦耳斯(van der Waals)相互作用。更轻的虚线是氢键相互作用。
图15显示FMCA单磷酸酯前药(如图8的化合物15P/18P)对野生型HBV是有活性的,具有2对数的病毒载量降低。
图16A显示ETV(恩替卡韦)对耐受恩替卡韦的HBV突变体(L180M+M204V+S202G)是不具有活性的。
图16B显示FMCA单磷酸酯前药(如图8的化合物15P/`8P)对耐受恩替卡韦HBV突变体(L180M+M204V+S202G)是有活性的,具有1对数的病毒载量降低。
具体实施方式
以下定义用来说明本发明。如果一个术语未在此处明确定义,对该术语给出的意思是普通技术人员在该术语使用的语境内会对该术语应用的那个。
除非另外指明,如此处使用的术语“化合物”是指此处披露的任何具体的化学化合物,通常指这些化合物的β-D核苷类似物,但在语境内可以包括其互变异构体、区域异构体、几何异构体、端基异构体、以及在适用时旋光异构体(对映异构体)或非对映异构体(两个手性中心),连同其药学上可接受的盐、其溶剂化物和/或多晶型物。在它使用的语境内,该术语通常指一种单一的化合物,但也可以包括其他化合物诸如立体异构体、区域异构体和/或旋光异构体(包括如此处所述的外消旋混合物和/或非对映异构体)连同具体的对映异构体、对映异构体富集的或单独非对映异构体或所披露化合物的混合物。注意的是在对一种化合物提供了一个碳范围的情况下,该范围表示每一个碳独立地被认为是该范围的部分。例如一个C1-C20基团说明一个带有一个碳、两个碳原子、三个碳原子、四个碳原子等一直到二十个碳的基团。
术语“患者”或“受试者”在整个说明书中使用以说明一种动物,优选地是一种家养动物尤其包括一种哺乳动物或一个人,更优选地是向其提供用根据本发明所述的组合物的治疗的一个人,该治疗预防治疗。对于具体针对一个具体的动物诸如一个人类患者的那些感染、病况或疾病状态的治疗,该术语患者是指那具体的动物。通常,在本发明中,除非另外说明该术语患者是指一个人类患者。在本发明中,除了人类,家养动物(例如马、乳牛、猪、绵羊、山羊、狗、猫等)也通常可以被治疗。
术语“乙型肝炎病毒”或“HBV”是用以说明一种感染人科(包括人类)的肝脏并引起一种称为肝炎的炎症的病毒。最初被称为“血清性肝炎”,该疾病已引起亚洲和非洲部分地区的流行病,并且它在中国是地方性的。大约世界人口的三分之一(超过20亿人)已被该乙型肝炎病毒感染。这包括该病毒的3.5亿慢性携带者。乙型肝炎病毒的传播由接触传染性的血液或包含血液的体液引起。该急性病引起肝炎、呕吐、黄疸并很少死亡。慢性乙型肝炎最终可以引起肝硬化和肝癌—一种对目前的化学治疗反应十分差的致命的疾病。
乙型肝炎病毒是一种嗜肝DNA病毒(hepadnavirus)—hepa来自hepatotrophic并且dna因为它是一种DNA病毒,并且它具有由部分双链DNA组成的环形基因组。这些病毒通过由反转录形成的一个RNA中间体复制,并且在这方面它们与逆转录病毒相似。尽管复制发生在肝脏中,但该病毒传播至被感染的人的血液,在该血液中发现了病毒特异性蛋白和它们相应的抗体。针对这些蛋白和抗体的血液检查被用于诊断该感染。
肝脏的硬化和肝癌可以随着乙型肝炎病毒感染发生。该乙型肝炎病毒主要通过在肝脏细胞(被称为肝细胞)中复制妨碍肝脏的功能。传播的主要方法反映了在给出区域中的慢性HBV感染的流行率。在低流行率区域诸如美国大陆和西欧(这里少于2%的人口被慢性感染),注射药物滥用和不安全性行为是主要的方法,尽管其他因素可能是重要的。在中等流行率区域该疾病主导在孩子间传播,这些区域包括东欧、俄罗斯和日本,这里2%-7%的人口是被慢性感染的。在高流行率区域诸如中国和东南亚,在分娩期间传播是最普遍的,尽管在其他区域诸如非洲在幼年时期传播是一个重要因素。在某些区域中的慢性HBV感染的流行率可能是至少8%。
乙型肝炎病毒的传播由接触传染性的血液或包含血液的体液引起。传播的可能形式包括(但不限于)不安全性接触、输血、被污染针头&注射器的再使用、以及在分娩期间的母婴垂直传播。
已经显示在治疗和/或抑制HBV感染中有用并可与根据本发明所述的用于治疗HBV感染的2’-氟核苷化合物组合的化合物包括:例如,阿德福韦酯(阿德福韦二匹伏酯)、拉米夫定、恩替卡韦、替比夫定、泰诺福韦、恩曲他滨、克拉夫定、伐托他滨、氨多索韦、普雷福韦、racivir、BAM205、硝唑尼特、UT231-B、Bay41-4109、EHT899、日达仙(胸腺素α-1)、及其混合物。术语HBV的“耐药性”或“耐药突变体”包括耐受一种或多种(包括多重耐药菌株)上述抗HBV剂(尤其包括拉米夫定、阿德福韦和恩替卡韦中的一种或多种)的所有HBV菌株。除了其他之外,这些菌株包括:例如,HBV菌株rtM204V、rtM204I、rtL180M、rtLM/rtMV(其是rt180M/rtM204V的一种双突变体)、rtN236T、L180M+S02I+M202V(一种恩替卡韦突变体)。本发明的这些化合物对所有类型的耐药HBV菌株包括多重耐药菌株有效。
术语“丙型肝炎病毒”或“HCV”是用以说明一种引起丙型肝炎感染的病毒,该感染是肝脏的一种传染性疾病。该感染常常是无症状的,但一旦建立,慢性感染可发展为肝脏的瘢痕(纤维化)和晚期瘢痕(肝硬化),这通常在许多年之后显现。在一些情况下,那些带有肝硬化的将继续形成肝衰竭或肝硬化的其他并发症,包括肝癌。
丙型肝炎病毒(HCV)是通过血液至血液接触而传播。在最初感染之后如果说有任何症状,大部分人有很少,,然而病毒在被感染的大约85%人中存留于肝脏。那些形成了肝硬化或肝癌的人可能需要肝脏移植,并且在移植后该病毒普遍复发。
估计全世界有2.7-3亿人被丙型肝炎感染。丙型肝炎严格来说是人类疾病。它不能从任何动物感染或给至任何动物,尽管对黑猩猩的实验是可能的。急性丙型肝炎是指在被HCV感染之后的前6个月。在急性期60%和70%之间的被感染的人不形成症状。在少数经历了急性期症状的患者中,这些症状通常是温和的和非特异性的,并且很少导致丙型肝炎的一个特异性诊断。急性丙型肝炎的症状包括降低的食欲、疲劳、腹痛、黄疸、瘙痒、和类似感冒的症状。通常在感染后的一至三周内丙型肝炎病毒通过PCR在血液中是可检测的,并且在3至15周之内该病毒的抗体通常是可检测的。自发的病毒清除比率是高度可变的并且10%-60%之间的被HCV感染的人在急性期如显示的通过肝酶(丙氨酸转氨酶(ALT)&天冬氨酸转氨酶(AST))中的标准化和血浆HCV-RNA清除(这是所谓的自发性病毒清除)从他们身体中清除该病毒。然而,常见的是持续性感染,并且大部分患者形成慢性丙型肝炎,即感染持续超过6个月。先前的实践是不去治疗急性感染以观察这个人是否将自发性的清除;最近的研究显示在基因型1感染的急性期治疗用针对慢性感染所需的治疗时间的一半具有一个大于90%的成功率。
慢性丙型肝炎被定义为被丙型肝炎病毒感染持续超过六个月。临床上,它常常是无症状的(没有症状)并且它大多是偶然发现的。丙型肝炎病毒的自然进程从一个人到另一个差异很大。尽管几乎所有被HCV感染的人在肝活组织检查上都具有炎症的证据,但肝脏瘢痕(纤维化)的发展比率在个体之间显示了显著性差异。准确估计随着时间的风险是难以实现的,因为针对该病毒检验的可用时间是有限的。最近的数据显示在未治疗的患者中,在少于20年中粗略有三分之一发展为肝硬化。另三分之一在30年内发展为肝硬化。剩余的患者似乎发展缓慢以至于他们不太可能在他们的余生内形成肝硬化。相比之下,NIH共识指南(NIH consensus guidelines)声明经一个20年的时间段发展为肝硬化的风险是3%-20%。
已被报道的影响HCV疾病发展速率的因素包括年龄(增长的年龄与更快速的发展相关)、性别(雄性比雌性具有更快速的疾病发展)、酒精消耗(与疾病发展的增加的速率相关)、HIV共感染(与疾病发展显著增加的速率相关)、以及脂肪肝(肝脏细胞中脂肪的存在与疾病发展的增加的速率相关)。
肝脏疾病的特异提示性症状典型地是没有的直至发生了大量肝脏瘢痕。然而,丙型肝炎是全身性疾病并且患者在形成晚期肝脏疾病之前可能经历从症状缺失到更多症状疾病的一系列的临床表现。与慢性丙型肝炎相关的一般征兆和症状包括疲劳、类似感冒症状、关节痛、瘙痒、睡眠障碍、食欲改变、恶心、和抑郁。
一旦慢性丙型肝炎发展为肝硬化,由降低的肝脏功能或肝脏循环中增加的压力(所谓门脉高压的一种病况)引起的征兆和症状可能会出现。肝硬化的可能征兆和症状包括腹水(腹部液体的积聚)、瘀伤和出血倾向、静脉曲张(扩大的静脉,尤其在胃和食管中)、黄疸、和称为肝性脑病的一种认知障碍综合征。肝性脑病归因于在正常情况下被健康肝脏清除的氨和其他物质的积聚。
在肝脏检验中,丙型肝炎感染脏脏显示ALT和AST的可变增高。周期性地它们可展示正常的结果。通常凝血素和白蛋白结果是正常的,但一旦肝硬化形成可能变得不正常。在活组织检查时肝脏检验的提升水平与肝脏损伤量没有很好的对应。病毒基因型和病毒载量与肝脏损伤量也没有对应。肝活组织检查是确定瘢痕和炎症量的最好的检验。射线照相研究诸如超声波或CT扫描不总是展示肝脏损伤直到相当的晚期。然而,即将到来的是非侵入性检验(血液样品),有FibroTest(肝纤维化检验)和ActiTest,分别评估肝纤维化和坏死性炎症。这些检验是经过验证的并且在欧洲是推荐的(FDA程序,起始于USA)。
慢性丙型肝炎,超过其他肝炎形式,可与肝外表现相关,这些肝外表现与HCV诸如迟发性皮肤卟啉症(小血管血管炎的一种形式)和血管球性肾炎(肾脏的炎症)特别是膜性增生性肾小球肾炎(MPGN)的存在有关。丙型肝炎还很少地与干燥综合征(一种自身免疫性疾病)、血小板减少、扁平苔癣、糖尿病和与B细胞淋巴增殖性病变相关。
已经显示在治疗和/或抑制HCV感染中有用并可与根据本发明所述的用于治疗HCV感染的2’-氟核苷化合物组合的化合物包括:例如,NM283、利巴韦林、VX-950(特拉匹韦)、SCH50304、TMC435、VX-500、BX-813、SCH503034、R1626、ITMN-191(R7227)、R7128、PF-868554、TT033、CGH-759、GI5005、MK-7009、SIRNA-034、MK-0608、A-837093、GS9190、ACH-1095、GSK625433、TG4040(MVA-HCV)、A-831、F351、NS5A、NS4B、ANA598、A-689、GNI-104、IDX102、ADX184、GL59728、GL60667、PSI-7851、TLR9激动剂、PHX1766、SP-30及其混合物,以及如此处认定的其他抗病毒化合物。
术语“单纯性疱疹病毒”、“单纯性疱疹病毒-1”(HSV-1)、“单纯性疱疹病毒-2”(HSV-2)是疱疹病毒家族疱疹病毒科中的两种,其在人类中引起感染。与其他疱疹病毒科的一样,单纯性疱疹病毒可以引起终身感染。它们也被称为人类疱疹病毒1和2(HHV-1和HHV-2)并且是嗜神经的和侵入神经的病毒;它们进入并隐藏在人类神经系统内,解释了它们在人类身体内的持久性。HSV-1通常与脸的疱疹(已知为唇疱疹或热病性疱疹)爆发相关,而HSV-2更多时候与生殖器疱疹相关,尽管HSV的这两种菌株中的每种都可以被发现在正常情况下与另一种菌株相关的区域中。
通过单纯性疱疹病毒的感染是由皮肤或唇粘膜、嘴唇或生殖器的水泡标示。损伤愈合为疱疹疾病特征性的一个痂。然而,该感染是持久的并且症状可以周期性的复发为在靠近最初感染点的疮的爆发。在最初的或主要的感染之后,HSV在该区域的神经的细胞体中变为潜在的。一些被感染的人经历病毒再度活动的零星发作,随后病毒经由神经轴突传输至皮肤,在这里病毒复制并发生泻出。疱疹是传染性的如果该携带者正在产生和泻出该病毒。这在爆发期间是特别可能的但在其他时间是可能的。还不存在治愈,但存在减少病毒泄出的可能性的治疗。
术语“巨细胞病毒”“CMV”、人类巨细胞病毒“HCMV”是用于说明疱疹病毒群的一个疱疹病毒属,在人类中它通常也被称为HCMV或人类疱疹病毒5(HHV-5)。CMV属于疱疹病毒科的β疱疹病毒亚科,其还包括玫瑰疹病毒属。其他疱疹病毒落入α疱疹病毒亚科(包括HSV1和2以及水痘)或γ疱疹病毒丙亚科(包括爱泼斯坦巴尔病毒)的亚科。[1]所有疱疹病毒共享长期在体内保持潜伏的特征能力。
HCMV感染经常与唾液腺相关,尽管它们可在全身被找到。HCMV感染对于免疫功能不全的患者(例如,HIV患者、器官移植接受患者、或婴儿)还可以是危及生命的。[1]其他CMV病毒被发现于若干哺乳动物物种中,但就基因组结构而言从动物中分离的种类与HCMV不同,并且未见报道会引起人类疾病。
HCMV被发现于所有地理位置和社会经济组织,并且感染了美国50%和80%之间的成人(全世界40%),如通过大部分的普通群体中存在的抗体表明的。血清阳性率是年龄相关的:58.9%被感染CMV,而80岁以及更大的个体的90.8%为HCMV阳性。HCMV还是最常见传输给发育中的胎儿的病毒。HCMV感染在发展中国家和在社会经济地位较低的社区中更普遍并且代表了工业化国家中出生缺陷方面最重大的病毒原因。
在出生后被HCMV感染的大部分健康人没有症状。他们中的一些形成了传染性单核细胞增多症/类腺热综合征,伴有长时间发烧和轻度肝炎。咽喉痛是常见的。在感染之后,该病毒在该人的余生中在体内保持潜伏。很少发生明显的疾病除非免疫力被药物、感染或老龄所抑制。在经常是无症状的初始HCMV感染之后是一种长期的不明显的感染,在此期间病毒存在于细胞中不引起可检测的损伤或临床疾病。
传染性CMV可以散布在任一被感染的人的体液中,并且可被发现于尿、唾液、血液、眼泪、精液和母乳中。病毒的泄出可间歇性地发生,不具有任何可检测的征兆或症状。
术语“水痘带状疱疹病毒”或“VZV”是用以说明感染人类(以及其他脊椎动物)的已知的八种疱疹病毒中的一种。VZV通常在儿童中引起水痘并且在成人中既引起带状疱疹又引起带状疱疹后遗神经痛。已知水痘带状疱疹病毒(VZV)有许多名称,包括:水痘病毒(chickenpox virus)、水痘病毒(varicella virus)、带状疱疹病毒(zoster virus)、以及人类疱疹病毒(human herpes virus)类型3(HHV-3)。初次VZV感染导致水痘(chickenpox或varicella),其可以很少导致并发症,包括脑炎或肺炎。甚至当水痘的临床症状被解决时,VZV在被感染的人的神经系统中(在三叉神经和背根神经节中)保持休眠(病毒潜伏期)。在大约10%-20%的案例中,VZV在以后的生活中再度活动产生一种被称为带状疱疹(herpeszoster或shingles)的疾病。带状疱疹的严重的并发症包括带状疱疹后遗神经痛、多重带状疱疹、脊髓炎、眼疱疹、或无疱型带状疱疹。
VZV与单纯性疱疹病毒(HSV)紧密联系,共享许多基因组同源性。VZV的已知包膜糖蛋白中的许多与在HSV中的那些相对应。和HSV不同,VZV未能产生LAT(潜伏相关转录本),该LAT在建立HSV潜伏期(单纯性疱疹病毒)中起着重要作用。该病毒对消毒剂非常敏感,尤其次氯酸钠。在人体内,连同本发明的化合物一起,它可以通过一些药物和治疗剂(包括阿昔洛韦、带状疱疹免疫球蛋白(ZIG)、和阿糖腺苷)被治疗。
术语“爱泼斯坦巴尔病毒”或“EBV”(HHV-4)也被称人类疱疹病毒4(HHV-4),是疱疹家族的一种病毒并且是人类中最常见病毒中的一种。多数人感染了EBV,这经常是无症状的,但感染通常引起传染性单核细胞增多症(也被称为腺热)。爱泼斯坦巴尔病毒在全世界发生。多数人在他们生命中的某个时候感染了EBV,并因此收获了获得性免疫,通过EBV抗体预防来自再感染的重复疾病。在美国,多达95%的成人在35和40年岁间已被感染。一旦母亲抗体保护(出生时存在)消失婴儿就变得易被EBV感染。当带有EBV的感染发生在青春期或青年成年期间时,它在此时引起35%至69%的传染性单核细胞增多症。
在本说明书全篇使用的术语“瘤形成”或“癌症”是指导致一种癌性或恶性的瘤的形成和生长的病理过程,该瘤即是通过细胞增殖生长的不正常组织,经常比正常的生长更快速并在发起新的生长的刺激停止之后继续生长。恶性肿瘤显示了与正常组织的结构性组织和功能性协调的部分或全部缺失并且多数侵入周围组织,转移至若干部位,并且除非充分治疗,很可能在尝试移除之后再发生并引起患者死亡。如此处使用的,术语瘤形成是用于说明所有癌性疾病状态并且包括或涵盖与恶性血源性、腹水和实体肿瘤相关的病理过程。除了其他之外,代表性癌症包括:例如胃癌、结肠癌、直肠癌、肝脏癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、子宫颈癌、子宫体癌、卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、膀胱癌、肾癌、大脑/CNS癌、头颈癌、咽喉癌、何杰金氏病、非何杰金氏淋巴瘤、多发性骨髓瘤、白血病、黑色素瘤、急性淋巴细胞白血病、急性骨髓性白血病、尤因肉瘤、小细胞肺癌、绒毛膜癌、横纹肌肉瘤、维耳姆斯瘤、成神经细胞瘤、毛细胞白血病、口/咽癌、鼻咽癌、食道癌、喉癌、肾癌和淋巴瘤,这些可能通过根据本发明所述的一种或多种化合物治疗。在本发明的某些方面,术语肿瘤或癌症是指肝细胞癌、淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤(Burkitt’s lymphoma)、何杰金氏淋巴瘤(Hodgkin’slymphoma)和鼻咽癌,这些是经常继发于乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)和/或爱泼斯坦巴尔病毒(Epstein-Barr virus)(EBV)感染的癌症。
术语“肿瘤”是用于说明一种恶性的或良性的增长或肿大的。
术语“抗癌化合物”或“抗癌剂”是用于说明可被用于治疗癌症的任一化合物。用于在本发明中使用的抗癌化合物可与一种或多种根据本发明所述的化合物联合给药以治疗存在一种病毒感染下发生的或继发于一种病毒感染的癌症。用于与根据本发明所述的化合物联合给药的为了在本发明中使用的示例性抗癌化合物包括一些大致表征为抗代谢物、拓扑异构酶I和II的抑制剂、烷化剂和微管抑制剂(例如紫杉酚)的化合物。除了其他以外,用于在本发明中使用的抗癌化合物包括:例如,阿地白介素;阿仑单抗;阿利维A酸;别嘌醇;六甲蜜胺;氨磷汀;阿那曲唑;三氧化二砷;天冬酰胺酸酶;BCG活菌(BCG Live);贝沙罗汀胶囊剂;贝沙罗汀凝胶剂;博莱霉素;白消安静脉注射剂;白消安口服剂;卡普睾酮;卡培他滨;脱羧铂氨;卡莫司汀;具有聚苯丙生20植入片的卡莫司汀;塞来昔布;苯丁酸氮芥;顺铂;克拉屈滨;环磷酰胺;阿糖胞苷;阿糖胞苷脂质体;达卡巴嗪;更生霉素;放线菌素D;达贝泊汀α;柔红霉素脂质体;柔红霉素、道诺霉素;地尼白介素、右雷佐生;多西他赛;阿霉素;阿霉素脂质体;丙酸屈他雄酮;Elliott's B溶液;表柔比星;依伯汀α雌氮芥;磷酸依托泊苷;依托泊苷(VP-16);依西美坦;非格司亭;氮尿苷(动脉注射);氟达拉滨;氟尿嘧啶(5-FU);氟维司群;格列卫、吉姆单抗、奥佐米星;醋酸戈舍瑞林;羟基脲;替伊莫单抗;伊达比星;异环磷酰胺;甲磺酸伊马替尼;干扰素α-2a;干扰素α-2b;伊立替康;来曲唑;亚叶酸;左旋咪唑;洛莫司汀(CCNU);氮芥(meclorethamine或nitrogen mustard);醋酸甲地孕酮;美法仑(L-PAM);巯基嘌呤(6-MP);美司钠;甲氨蝶呤;甲氧沙林;丝裂霉素C;米托坦;米托蒽醌;苯丙酸南诺龙;诺莫单抗;LOddC;奥普瑞白介素;奥沙利铂;紫杉醇;帕米膦酸盐;培加酶;培门冬酶;培非司亭;喷司他丁;哌泊溴烷;普卡霉素;光神霉素;卟吩姆钠;丙卡巴肼;米帕林;拉布立酶;利妥昔单抗;沙格司亭;链佐星;talbuvidine(LDT);滑石;他莫西芬;替莫唑胺;替尼泊苷(VM-26);睾内酯;硫鸟嘌呤(6-TG);噻替派;托泊替康;托瑞米芬;托西莫单抗;曲妥珠单抗;维甲酸(ATRA);乌拉莫司汀;戊柔比星;伐托他滨(单LDC);长春碱;长春瑞滨;唑来膦酸盐;及其混合物。
术语“药学上可接受的盐”在整个说明书中使用以说明在适合时一种或多种此处所述的化合物的一种盐形式,它们的存在是为了增加该化合物在患者胃肠道的胃液中的溶解性以促进这些化合物的溶解和生物利用率。药学上可接受的盐包括在适合时衍生自药学上可接受的无机的或有机的碱和酸的那些。适合的盐包含衍生自在制药领域中熟知的众多的其他酸中间的碱金属(诸如钾和钠)、碱土金属(诸如钙、镁和铵盐)的那些。特别优选作为根据本发明所述的磷酸盐的中性盐的是钠和钾盐。
术语“药学上可接受的衍生物”在整个说明书中使用以说明任一种药学上可接受的前药形式(诸如一种酯、醚、亦或酰胺或其他前药基团),该前药形式在给予患者时直接或间接提供本发明化合物或本发明化合物的一种活性代谢物。
术语“烷基”在它的语境中将意味着一个C1-C20(优选地是一个C1-C10)直链、支链或环的完全饱和的烃基,其可以被可任选地取代。注意的是在提供了一个碳范围的情况下,该范围表示每一个碳都被认为是该范围的部分。例如一个C1-C20基团说明一个带有一个碳、两个碳原子、三个碳原子、四个碳原子等的基团。术语“醚”将意味着一个可任选地取代的C1至C20醚基团,由一个氧和一个烷基基团形成,或可替代地在该烷基或亚烷基链内也可包含至少一个氧。
术语“芳香族的”或“芳基”在它的语境中将意味着一个取代的或未取代的一价碳环芳族基,该芳族基具有一个单环(例如苯基)或多元稠环(例如萘基、蒽、菲)。其他实例包括任选地取代的杂环的芳族环基团(“杂芳族的”或“杂芳基”),其在环中具有一个或多个氮、氧、或硫原子,并且优选地包括五元或六元杂芳基基团,其中诸如咪唑、呋喃基(furyl)、吡咯、呋喃基(furanyl)、噻烯、噻唑、吡啶、吡嗪、三唑、噁唑,但还可包括稠环杂芳基基团其中诸如吲哚基团。在根据本发明的化合物中的优选的芳基基团是苯基或一个取代的苯基基团。
术语“杂环”将意味着一种环状的可任选地取代的部分并且除了碳原子外包含至少一个原子诸如氮、硫、氧或其他原子,该环可以是饱和的和/或不饱和的。
术语“未取代的”将意味着仅用氢原子取代。术语“取代的”将意味着在所定义的化合物的化学背景内一个选自以下的取代基(每个取代基自身可以被取代):一个烃基(其自身可被优选地被一个任选地取代的烷基或氟基团取代)、优选地一个烷基(通常在长度上不大于大约3个碳单位),包括CF3,一个任选地取代的芳基、卤素(F、Cl、Br、I)、硫醇、羟基、羧基、C1-C3烷氧基、烷氧基羰基、CN、硝基或一个任选地取代的胺(例如一个亚烷基胺或一个C1-C3一烷基或二烷基胺)。不同的任选地取代的部分可被3个或更多个取代基、优选地用不超过3个取代基并且优选地被1个或2个取代基取代。
术语“酰基”在整个说明书中使用以说明在核苷类似物的5'或3’位(即在碳环部分中的游离羟基位置)或在包含一个C1至C20烷基直链、支链或环链的核苷碱基的环外胺上的一个基团。该酰基基团与该羟基基团结合生成一个酯并且该酰基基团与一个环外胺基团结合生成一个胺,在给药后其可以被裂解以产生本发明的游离核苷形式。根据本发明的酰基基团由以下结构代表:
其中R4除了其他之外是一个C1至C20直链、支链或环烷基基团,其任选地优选地被以下取代:例如,1-3羟基基团、1-3卤素基团(F、Cl、Br、I)或一个胺基团(其自身可任选地被一个或两个C1-C6烷基基团(任选地带有在1个和3个之间的羟基基团)取代),烷氧基烷基(包括一个氧化乙烯链,其可以一个游离羟基基团或一个C1-C10烷基基团为末端并且分子量范围从大约50至大约40,000或大约200至大约5,000)诸如苯氧甲基,芳基,烷氧基,烷氧基羰氧基基团(例如[(异丙氧基羰基)氧基]-甲氧基),芳氧基烷基,如上所述的这些基团中的所有都可以被任选地取代。优选的酰基基团是其中R4是一个C1至C12烷基基团的那些。根据本发明酰基基团还包括:例如,在许多其他之中,衍生自以下的那些酰基:苯甲酸和相关的酸,的3-氯苯甲酸、琥珀酸、癸酸和己酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸和油酸基团,并且可以包括此类相关的基团如砜基团诸如甲磺酸酯基团。在如此处另外所述的语境中所有基团都可以被适当地取代。本领域的普通技术人员将认识到在本发明中要么在合成目标药用化合物上要么在作为根据本发明的核苷的前药上会具有效用的酰基基团。
术语“氨基酸”或“氨基酸残基”在语境内将意味着一个D-或L-氨基酸残基,该残基通过该氨基酸的一个羧酸部分在胞嘧啶碱基的4’环外胺位置的或在糖合成子(R2、R1、R1a)的5’-或3’-OH位置共价地结合至一个核苷类似物,因此分别形成一个将该核苷连接至该氨基酸的酰胺或酯基团。氨基酸还可以被用于提供如此处另外所述的根据本发明的核苷化合物中的氨基磷酸酯基团。代表性的氨基酸包括天然的和非天然的氨基酸,优选地包括:除了其他之外,例如,丙氨酸、β-丙胺酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、缬氨酸、色氨酸或酪氨酸。
术语“磷酸酯”或“磷酸二酯”(在语境中该术语包括磷酸三酯基团和氨基磷酸酯基团)在整个说明书中使用以说明在碳环糖合成子的5'位置上形成的单磷酸酯基团,这些基团是单-或二酯化的(或在氨基磷酸酯的情况下酰胺化的和任选地酯化的)以使得该磷酸酯基团是带负电荷的或呈现中性(即具有中性电荷)。用于在本发明中使用的磷酸酯、磷酸二酯和/或氨基磷酸酯基团包括由以下结构代表的那些:
其中R5和R6各自独立地选自H、一个C1-C20直链的或支链的或环的烷基基团、烷氧基烷基、芳氧基烷基诸如苯氧甲基、任选地取代的芳基(尤其一个任选地取代的苯基基团)和烷氧基,除其他之外包括烷氧基羰氧基基团(例如,[(异丙氧基羰基)氧基]-甲氧基),这些基团中的每个都可以被可任选地取代(例如,一个苯基或其他基团如此处另外所述的可被任选地或优选地被从一至三个以下项取代:C1-C6烷基基团、卤素(优选地F、Cl或Br)、硝基、氰基、或C2-C6羧基酯基团),其条件是至少一个R5基团不是H、或两个R5基团一起形成一个五元或六元杂环基团;
B’是一个基团或一个从一种氨基酸获得的基团以优选地提供一个根据结构的基团,该氨基酸是一种天然的或非天然的氨基酸,诸如:除了其他之外,例如,丙氨酸、β-丙胺酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、缬氨酸、色氨酸或酪氨酸
其中i是0、1、2、或3(优选地0)
R7除其他以外是一个C1至C20直链、支链或环的烷基或酰基基团、烷氧基烷基、芳氧基烷基,诸如苯氧甲基、任选地取代的芳基基团(如以上所述)和烷氧基,这些基团中的每个都可以被任选地取代;
R8是一个氨基酸的侧链,优选地是一个选自下组的氨基酸的侧链,该组由以下各项组成:丙氨酸、β-丙胺酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、缬氨酸、色氨酸或酪氨酸(优选地R8是衍生自丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸或苏氨酸,更优选地丙氨酸-R8是甲基),并且
R”是一个C1至C20直链、支链或环烷基或一个苯基或杂芳基基团,这些基团中的每个被任选地取代。
用于在根据本发明的前药形式中使用的优选的单磷酸酯是以下的那些:其中R5是一个C1至C20直链或支链烷基基团,更优选地一个C1至C3烷基基团,这些基团中的每个都可以被任选地取代。优选的其他化合物是如在此处另外提出的,尤其如此处另外所述的其中R1是一个氨基磷酸酯基团的。一个优选的氨基磷酸酯是
其中Rp1是一个可任选地取代的(OH、卤素)C1-C20烷基基团,优选地是一个C1-C4烷基基团,甚至更优选地是一个甲基、乙基、异丙基基团或异丁基基团;并且
RP是H、硝基、氰基、甲氧基、或一个被从1至3个卤素取代基(优选地F)任选地取代的C1-C3烷基基团。
对于R1的优选氨基磷酸酯基团包括根据以下化学结构的那些:
其中RP是H或C1-C3烷基基团(优选地H)并且Rp1是甲基、乙基、异丙基或异丁基基团,更优选地是一个甲基或异丙基基团。
在其他实施例中,R1是一个基团。
术语“有效量”将意味着根据本发明的一种化合物的一个量或浓度,其在它的给药或使用的背景下是有效的,该化合物可以是一种抑制剂、预防的和/或治疗的。在语境中,所有在本发明中使用的活性化合物是以有效量使用的。本发明还涉及包含有效量的所使用的每种化合物的化合物的组合,无论该组合在作用上是附加的或协同的,提供:化合物的该组合的整体效应如此处另外所述的是抑制增长、减少患者的病毒感染的可能性或治疗患者的病毒感染。
如在本发明的语境中使用的术语“D-构型”是指根据本发明的核苷化合物的构型,对照非天然发生的核苷或“L”构型其模拟了糖部分的天然构型。术语“β”或“β端基异构体”是用以说明根据本发明的核苷类似物,其中该核苷碱基被配置(处置)在该化合物中的碳环部分的平面之上。
术语“对映异构体富集”在整个说明书中使用以说明一种核苷,该核苷包括至少大约95%、优选地至少大约96%、更优选地至少大约97%、甚至更优选地至少大约98%、并且甚至更优选地至少大约100%或更多的该核苷的一种单一对映体异构体。根据本发明的碳环核苷化合物通常是β-D核苷化合物。当在本说明书中提及根据本发明的这些化合物时,除非另外说明,假定这些核苷具有D核苷构型并且是对映异构体富集的(优选地,大约100%的该D核苷)。术语“非对映异构体纯的”是用以说明根据本发明的一种化合物的一种单一非对映异构体,该非对映异构体包含一种单一非对映异构体对其他可能非对映异构体的总体的以重量计的至少95%、96%、97%、98%、99%、99.5%或100%。
术语“联合给予(药)”和“联合给药”是同义使用的以说明至少一种根据本发明的核苷化合物与至少一种其他药剂组合以被认为会是有效量的量或浓度在相同的时间或大约相同的时间的给药,该其他药剂优选地是至少一种另外的抗病毒剂,包括此处具体披露的其他核苷抗病毒剂。尽管联合给药的多种试剂在相同时间给药是优选的,但多种试剂可以被间或给药以使两种(或多种)试剂的有效浓度在患者体内在相同时间出现持续至少短暂的时间。可替代地,在本发明的某些方面,使联合给药的每种药剂在不同时间在患者体内展现它的抑制效果而具有抑制该病毒和治疗前述感染的最终结果可以是可能的。当然,当存在多于一种病毒感染或其他感染或其他病况时,在需要时可以将本发明化合物与治疗该其他感染或病况的药剂组合。在某些优选的组合物和方法中,本发明的碳环核苷化合物被与至少一种另外的抗病毒剂联合配制和/或联合给药,优选地其中该抗病毒剂是阿昔洛韦、泛昔洛韦、更昔洛韦、伐昔洛韦、阿糖腺苷、利巴韦林、带状疱疹免疫球蛋白(ZIG)、拉米夫定、阿德福韦二匹伏酯、恩替卡韦、替比夫定、克拉夫定、泰诺福韦或其一种混合物。在HBV感染的情况中,优选地本发明的2’-氟碳环核苷化合物可以与另一种以下的抗HBV剂联合给药:例如,阿德福韦酯(阿德福韦二匹伏酯)、拉米夫定、恩替卡韦、替比夫定、泰诺福韦、恩曲他滨、克拉夫定、伐托他滨、氨多索韦、普雷福韦、racivir、BAM205、硝唑尼特、UT231-B、Bay41-4109、EHT899、日达仙(胸腺素α-1)及其混合物。在HCV感染的情况中,优选地本发明的2’-氟碳环核苷化合物可以与另一种以下的抗HCV剂联合给药:例如,NM283、利巴韦林、VX-950(特拉匹韦)、SCH50304、TMC435、VX-500、BX-813、SCH503034、R1626、ITMN-191(R7227)、R7128、PF-868554、TT033、CGH-759、GI5005、MK-7009、SIRNA-034、MK-0608、A-837093、GS9190、ACH-1095、GSK625433、TG4040(MVA-HCV)、A-831、F351、NS5A、NS4B、ANA598、A-689、GNI-104、IDX102、ADX184、GL59728、GL60667、PSI-7851、TLR9激动剂、PHX1766、SP-30及其混合物。
在替代的实施例中,尤其在HBV、HCV或爱泼斯坦巴尔治疗的情况中,根据本发明的化合物还可以与一种抗癌剂联合给药。
术语“独立地”在此处使用以指明独立地应用的变量从应用到应用独立地变化。
本发明涉及根据以下结构的碳环核苷化合物:
其中B是
其中R是H、F、Cl、Br、I、C1-C4烷基(优选地CH3)、-C≡N、-C≡C-Ra、
X是H、C1-C4烷基(优选地CH3)、F、Cl、Br或I;
Ra是H或一个-C1-C4烷基基团;
R1和R1a各自独立地是H、一个酰基基团、一个C1-C20烷基或醚基团、一个氨基酸残基(D或L)、一个磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯、磷酸二酯或氨基磷酸酯基团或R1和R1a与它们所连接的氧原子一起形成一个碳酸二酯、磷酸二酯或氨基磷酸酯基团;
R2是H、一个酰基基团、一个C1-C20烷基或醚基团或一个氨基酸残基(D或L);
或其一种药学上可接受的盐、对映异构体、水合物或溶剂化物。
优选地R1a是H。还优选地,R1和R2各自独立地是H或一个C2-C20酰基基团,更优选地H。在其他实施例中,R1是如此处另外所述的一个氨基磷酸酯基团或根据以下结构的一个氨基磷酸酯基团:
其中Rp1是一个可任选地取代的(OH、卤素)C1-C20烷基基团,优选地是一个C1-C4烷基基团,甚至更优选地是一个甲基、乙基、异丙基基团或异丁基基团;并且
RP是H、硝基、氰基、甲氧基、或一个被从1至3个卤素取代基(优选地F)任选地取代的C1-C3烷基基团。
对于R1的优选氨基磷酸酯基团包括根据以下化学结构的那些:
其中Rp1是甲基、乙基、异丙基或异丁基并且
RP是H、硝基、氰基、甲氧基或C1-C3烷基,优选地H。在本发明的某些方面,该R1氨基磷酸酯基团优选地是一个
当R1是如上所述的氨基磷酸酯基团时,R1a优选地是H并且R2优选地是H或一个C2-C20酰基基团。
B优选地是
在替代的优选方面,该化合物由以下化学结构所代表:
其中B是如以上所述的,优选地是并且R1、R1a和R2是如上文中另外所述的,最优选地R1a和R2是H并且R1优选地是一个氨基磷酸酯基团,尤其包括根据以下结构的一个氨基磷酸酯基团:
其中Rp1是甲基、乙基、异丙基或异丁基并且
Rp是H。
本发明还涉及包括有效量的如上所述的一种化合物的药用组合物,可任选地与一种药学上可接受的载体、添加剂或赋形剂组合。在替代的实施例中,药用组合物还可包括一种或多种如此处另外所述的与一种添加剂、载体或赋形剂组合的另外的抗病毒剂。
根据本发明治疗方法代表了另外的实施例。在本方面中,一种治疗或减少需要治疗的或者有感染风险或其继发性疾病状态或病况风险的一个患者的一种病毒感染或其一种继发性疾病状态或病况(具体而言,来自HBV、HCV、HSV-1、HSV-2、CMV(包括HCMV)、VZV或EBV感染的一种病毒感染)的可能性的方法包括向该患者给予有效量的如以上另外所述的一种化合物。可替代的实施例依赖于将根据本发明的化合物与另外的抗病毒剂的组合联合给予所述患者。在优选的方面,一种治疗或减少HBV(包括其一种耐药菌株或作为HBV的结果发生的一种继发性疾病或病况)可能性的方法旨在向需要的患者给予有效量的如此处所述的根据本发明的化合物,优选地是一种根据以下化学结构的化合物:
或其一种药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物。
基于根据本发明的核苷化合物的药用组合物包括以有效量的一种或多种用于治疗或减少需要其治疗的患者的一种病毒感染(尤其一种HBV、HCV、HSV-1、HSV-2、CMV(HMCV)、VZV或EBV感染)的可能性的上述化合物,任选地与一种药学上可接受的添加剂、载体或赋形剂组合。本领域的普通技术人员将认识到一个治疗有效量将随着有待治疗的感染或病况、它的严重性、有待采用的治疗方案、所使用的药剂的药物动力学、连同有待治疗的患者或受试者(动物或人)而变化。
在根据本发明的药用方面中,根据本发明的化合物优选地是以与一种药学上可接受的载体的混合物来配制的。通常,以口服给药的形式给予该药物组合物是优选的,但是某些配制品可以经由肠胃外、静脉内、肌内、透皮、颊、皮下、栓剂或其他途径给药。静脉内的和肌内的配制品优选地是以无菌生理盐水给药。在某些例子中,经皮给药可以是优选的。当然,本领域的普通技术人员可在该说明书的教导下在使本发明的这些组合物稳定或不损害它们的治疗活性下修饰这些配制品以提供众多的用于具体给药途径的配制品。具体而言,本发明化合物的修饰(使其更可溶于水或其他媒介)例如可以通过本领域的普通技术人员熟悉的较小的修饰(盐配制品、酯化等)容易地达到。为了控制本发明化合物的药物动力学以将对患者的有益效果最大化而修饰一个具体化合物的给药途径和给药方案也是常规的技术人员熟悉的。
在某些药物剂型中,这些化合物的前药形式尤其包括本发明化合物的酰化的(乙酰化或其他)和醚(烷基和相关的)衍生物、磷酸酯和不同的盐形式是优选的。本领域的普通技术人员将认识到怎样将本发明化合物容易地修饰到前药形式以促进活性化合物向寄主有机体或患者的目标位点传递。该常规技术人员还将在适合时在向寄主有机体或患者的目标位点传递本发明化合物中利用前药形式的有利药物动力学参数以将该化合物的预期效果最大化。
包括在根据本发明的活性配制品内的化合物的量是一个用于治疗该感染或病况的尤其如此处另外所述的一种病毒感染的有效量。通常,取决于所使用的化合物、所治疗的病况或感染以及给药途径,在药物剂型中的本发明化合物的治疗有效量一般在从大约0.05mg/kg至大约100mg/kg每天或更多的范围,更优选地略少于患者的大约1mg/kg至大约25mg/kg每天或多得多。根据本发明的活性核苷化合物优选地是以该患者的从大约0.5mg/kg到大约25mg/kg的范围的量给药,这取决于该患者的该药剂的药物动力学。这一剂量范围通常产生活性化合物的能以该患者的血液的从大约0.05至大约100微克/cc的范围的有效血液水平浓度。为了本发明的目的,根据本发明的组合物的一个预防性或预防的有效量(即减少有风险的患者感染一种病毒感染的可能性的有效的一个量)落入如以上针对治疗有效量提出的相同的浓度范围内并且通常与一个治疗有效量相同。
该活性化合物的给药可以从连续的(静脉滴注)至每天若干口服给药(例如Q.I.D.)或经皮给药的范围,并且在其他给药途径中可以包括口服、外用、肠胃外、肌内、静脉内、皮下、透皮(其可以包括一种渗透增强剂)、颊和栓剂给药。肠溶包衣口服片剂还可被用于增强来自一种口服给药途径的这些化合物的生物利用率。最有效的剂型将取决于所选择的的具体药剂的生物利用率/药物动力学连同患者的疾病的严重性。口服剂型是特别优选的,因为容易给药及预期的良好患者顺应性。
为了制备根据本发明的药用组合物,优选地治疗有效量的一种或多种根据本发明的化合物与根据常规的药物配合技术的一种药学上可接受的载体被密切混合以产生一种剂量。取决于所希望的用于给药(例如口服或肠胃外)制剂形式,载体可以采用多种多样的形式。在以口服剂型制备药用组合物中,可以使用一般的药物介质的任一种。因此,对于液体口服制剂(诸如悬浮液、酏剂和溶液)可以使用适合的载体和添加剂包括水、甘油、油类、醇类、调味剂、防腐剂、着色剂以及类似物。对于诸如粉末、片剂、胶囊的固体口服制剂和对于诸如栓剂的固体制剂,可以使用适合的载体和添加剂包括淀粉、糖载体(诸如葡萄糖、甘露醇、乳糖)和相关的载体、稀释剂、造粒剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂和类似物。如果希望的话,这些片剂或胶囊通过标准技术可以被肠溶包衣或缓释。这些剂型的使用可显著增强这些化合物在患者体内的生物利用率。
对于肠胃外配制品,该载体通常将包括无菌水或水性氯化钠溶液,但还可包括其他成分,这些成分包括协助分散的那些。当然,当要使用无菌水并保持为无菌时,这些组合物和载体也必须灭菌。还可以制备可注射的悬浮液,在此情况下,可以采用适合的液体载体、悬浮剂和类似物。
还可通过常规方法制备脂质体悬浮液(包含靶向病毒抗原的脂质体)以产生药学上可接受的载体。这对于根据本发明的核苷化合物的游离核苷、酰基/烷基核苷或磷酸酯前药形式的递送来说可以是适合的。
在根据本发明的特别优选的实施例中,这些化合物和组合物被使用以治疗、预防或延迟如此处另外披露的一种病毒感染(HBV、HCV、HSV-1、HSV-2、CMV、VZV和/或EBV)的发作。优选地,为了治疗、预防或延迟这些病毒感染或继发于这些病毒感染的疾病状态和/或病况(尤其继发于HBV和/或HCV感染的肝硬化、纤维化和/或肝癌)的发作,这些组合物将以口服剂型以范围从大约250微克直至大约500mg或更多的量至少一天一次(优选地多达一天四次)地给药。本发明化合物优选地是口服地给药,但可以是肠胃外地、局部地或以栓剂形式给药。
在本发明化合物与另一种用于治疗病毒感染(具体而言是诸如HBV、HCV、HSV-1、HSV-2、CMV、VZV和/或EBV感染的一种病毒感染)的化合物联合给药的情况下,有待给予的根据本发明的碳环核苷化合物的量范围在该患者的从大约1mg/kg至大约500mg/kg、或该患者的更多或多得多,这取决于有待联合给予的第二种药剂和它在对抗有待抑制的每种病毒感染上的效能、所治疗的病况或感染以及给药的途径。在联合给药的情况中,优选地另一种抗病毒剂可以从大约100ug/kg(微克每千克)至大约500mg/kg的范围的量给药。在某些优选实施例中,这些化合物优选地可以从大约1mg/kg到大约50mg/kg或更多(通常多达大约100mg/kg)的范围的量给药,通常取决于这两种药剂在该患者体内的药物动力学。这些剂量范围通常在患者体内产生活性化合物的有效血液水平浓度。典型的可与根据本发明的化合物联合给药的抗病毒剂包括:阿昔洛韦、泛昔洛韦、更昔洛韦、伐昔洛韦、阿糖腺苷、利巴韦林、带状疱疹免疫球蛋白(ZIG)、拉米夫定、阿德福韦二匹伏酯、恩替卡韦、替比夫定、克拉夫定、泰诺福韦和其混合物。在治疗HBV感染的情况中,与本发明的2’-氟碳环核苷化合物组合的优选化合物包括:例如,阿德福韦酯(阿德福韦二匹伏酯)、拉米夫定、恩替卡韦、替比夫定、泰诺福韦、恩曲他滨、克拉夫定、伐托他滨、氨多索韦、普雷福韦、racivir、BAM205、硝唑尼特、UT231-B、Bay41-4109、EHT899、日达仙(胸腺素α-1)及其混合物。在HCV感染的情况中,优选地本发明的2’-氟碳环核苷化合物可以与另一种以下的抗HCV剂联合给药:例如,NM283、VX-950(特拉匹韦)、SCH50304、TMC435、VX-500、BX-813、SCH503034、R1626、ITMN-191(R7227)、R7128、PF-868554、TT033、CGH-759、GI5005、MK-7009、SIRNA-034、MK-0608、A-837093、GS9190、ACH-1095、GSK625433、TG4040(MVA-HCV)、A-831、F351、NS5A、NS4B、ANA598、A-689、GNI-104、IDX102、ADX184、GL59728、GL60667、PSI-7851、TLR9激动剂、PHX1766、SP-30及其混合物。
在预防上可方便地采用根据本发明的这些化合物以预防或减少一种病毒感染的可能性,或预防或减少与该病毒感染相关的临床症状发生的可能性,或预防或减少一种病毒感染向另一人的传播的可能性。因此,本发明还包括用于一种HBV、HCV、HSV-1、HSV-2、CMV、VZV和/或EBV感染的预防治疗的方法。在根据本发明的这一方面中,本发明的这些组合物可被使用以预防或减少以下情况的可能性和/或延迟以下情况的发作:一种病毒感染或一种病毒相关疾病状态或病况(例如肝硬化、纤维化和/或肝癌)或感染向其他人的传播。该预防方法包括向需要这样的治疗的或对于一种HBV、HCV、HSV-1、HSV-2、CMV、VZV和/或EBV感染(包括一种病毒相关疾病状态或病况)的形成有风险的一个患者或希望预防或减少一种病毒感染向另一人传播的可能性的已感染患者单独给予或与另一种对于缓解、预防或延迟该病毒感染发作的有效的抗病毒剂组合地给予一个量的根据本发明的一种化合物。在根据本发明的预防治疗中,优选的是所利用的抗病毒化合物应为低毒性的并且优选地对患者无毒的。在本发明的这个方面中特别优选的是所使用的化合物对病毒应是最大限度地有效的并且应对该患者表现最小的毒性。在本发明的化合物用于病毒感染的预防治疗的情况中,这些化合物可以在针对治疗性治疗的相同剂量范围(即对于一种口服剂型来说大约250微克直至大约500mg或更多,每天一次至四次)内作为预防药剂给药,以预防病毒感染的扩散,或替代地,以拖延发作或减少患者感染一种以临床症状表现自身的病毒感染的可能性。
另外,根据本发明化合物可单独或与其他药剂(包括本发明的其他化合物)组合给予。某些根据本发明的化合物通过减少其他化合物的新陈代谢、分解代谢或失活可以对于增强根据本发明的某些药剂的生物活性是有效的,并且照这样为了预期效果是联合给予的。
化学合成
通常,根据本发明的组合物根据方案I、II和替代方案II(呈现在附图3、4、5和8中)是容易从D-核糖合成的。在本方案中,通过一系列化学步骤D-核糖首先被转换为如在图3方案1中所描绘的一个保护的碳环五元环(化合物10)。依据方案I,然后通过缩聚一个核苷碱基(在图中,一个6-氯腺嘌呤)化合物10被转换为一个根据本发明的化合物(化合物15/18),以产生化合物11,随后其被转换为一个如所呈现的胺基团以产生化合物15/18。在替代方案II(图5)中,化合物15/18是使用如在替代方案II(图5)中所概括的替代途径从化合物10合成。替代方案III图8显示了化合物15/18和它的前药15P,该前药在糖合成子的5'位置上包含一个磷酰胺基团根据本发明的每种化合物还可以由类似物依据在图3、4、5、6和7中所呈现的普通化学方案产生。
利用针对将不同基团引至碳环部分的位置2’、3’和/或5’的羟基位置或替代地胞嘧啶碱基的4-位置的环外胺位置上的标准的合成化学,如上制备的每种碳环核苷化合物可容易地被转换为本发明的前药或替代形式(例如酰化的、磷酸酯或磷酸二酯衍生物等,如此处另外所示的)。酰化通过熟知的合成方法(酰基酐、酰基卤等)进行并且磷酰化可使用本领域中熟知的标准化学技术执行。本领域的普通技术人员通过利用此处所呈现的具体化学步骤或通过类似的方法凭借类比文献中的化学步骤的使用可容易地合成根据本发明的化合物。
在碳环核苷的合成中,有相当好的产率和规模的所希望的碳环的建设经常是棘手的。仅存在几种意在制备带有6'-外-环烯烃的碳环核心的报道,包括来自Bristol-MeyerSquibb的恩替卡韦的合成或通过彻底的环化反应的方案。36-39然而,这些方法论不太适合碳环2'位置上的修饰。最近,关键中间体1的有效的和实用的合成方法学也已被我们组完成。33,34,40因此,为了制备2'-F-6'-亚甲基碳环核苷已形成了一个可替代的途径(方案1和2)。
更具体地,环戊酮1是根据已知的过程制备的33,34,40。1的烯醇化物与Eschenmoser盐的反应在该酮的α-位置上安置了一个N,N-二甲基氨基甲基基团。在霍夫曼消去反应之后,一个6'-亚甲基以相当好的产率装入。归因于α-面上的位阻,通过一个典型的Luche还原条件来还原该α,β-不饱和酮2以专门给出α-羟基化合物3。苄基基团对烯丙醇的保护流利地从环戊酮1产生了化合物4,产率43%。丙酮化合物和叔丁基基团在酸性条件下同时脱保护提供以85%产率的三醇5。用在吡啶中的二氯四异丙基二硅氧烷(TIPDSCl)处理三醇5给出高产率的3',5'-二脱保护的化合物6。6中的游离2'-α-OH准备用于氟化反应。此外,当将化合物6经受一个三步方案(包括三膨胀、SN2替代和脱乙酰)时以81%产率获得2'-β-OH化合物7,其可被用于制备2'-α-F同分异构体。6与(二乙氨基)三氟化硫(DAST)的反应产生了一个为2'-β-F化合物7的主产物。然而,在伯奇(Birch)还原反应或路易斯酸条件下在甲硅烷基存在下随后的脱苄基是不成功的。因此,该甲硅烷基经由标准过程被苯甲酰基基团代替以提供10。然后将化合物10在-78℃经受三氯化硼(BCl3)并以89%产率成功产生彻底精制的中间体11(方案1)。
核苷12的构建是由典型的Mitsunobu条件33,34通过在0℃至室温下在三苯基膦和偶氮二羧酸二异丙酯存在下在THF中用6-氯嘌呤将11处理1小时完成。不幸的是,氯原子直接胺化为氨基基团并同时甲醇氨水解苯甲酰基团是不成功的。在诸如由1H-NMR和19F-NMR确认的条件下消除一个HF分子。有趣的是,即使很温和的条件诸如施陶丁格反应(Staudingerreaction)也未能达成该转化。合理的是该6'-亚甲基基团激活了该1'-质子以经受一个反式消除反应而形成一个稳定的二烯。为了绕过该6'-亚甲基基团的作用,一个临时保护是优选的。使用四氧化锇/NMO执行该外-环烯烃的二羟基化反应以提供非对映异构体12的一个混合物。如所预期的,通过与叠氮化钠反应接着通过H2还原使12向腺嘌呤衍生物13的转换以62%产率平稳进行。然后,研究了若干条件以从二醇中重新获取该烯烃。通过用1,3-二甲基-2-苯基-1,3,2-二氮磷啶对1,3-二氧戊环-2-硫酮的脱硫作用的Corey烯烃合成由于它的温和和效力而被熟知。41然而当我们将本条件应用至化合物13时仅获得了络合反应混合物。通过加热在乙酸酐中的2-甲氧基-1,3-二氧戊环衍生物的另一种普通方法在目前的情况下也是不成功的,这可能归因于高反应温度。42最后,我们采用了还原消除方案,该方案在2',3'-双脱氧-2',3'-二氢核苷或2',3'-双脱氧核苷酸的合成中广泛使用。43-45在-30℃至室温下使二醇13与1-溴羰基-1-甲基乙酸乙酯反应,接着在存在催化量的HOAc下在室温下与活化Zn金属在DMF中反应8小时。以两步以68%的产率获得所希望的带有6'-亚甲基基团的核苷14。基于我们先前的经验,当6'-亚甲基基团和2'-F在该分子同时存在时,对于解块(deblock)苯甲酰基团碱性条件与14不相容。因此,应用了还原裂解方法。在-78℃用二异丁基氢铝(DIBAL-H)在CH2Cl2中将14处理30min之后,终于以76%产率获得了目标腺苷类似物15(方案2)。通过NMR、元素分析、高分辨质谱仪、和UV光谱学完成对新合成的核苷的结构的分配。
还采用了一种替代途径以产生化合物15(在图5替代方案II中被称为化合物18),使用了提出替代化学合成(图5)的合成步骤。采用几种途径以产生化合物18(与图4的化合物15相同)。在标准Mitsunobu条件下将化合物10与6-氯嘌呤进行缩合以76%产率给出11。然而,由甲醇氨尝试氨基化11以获得相应的腺嘌呤衍生物13是不成功的。仅分离了副产物12,其大概是在碱性条件下通过失去HF形成的。推测消去反应产物12(一种共轭二烯)的稳定性是促进副反应的驱动力。因此,环外双键的瞬时保护作用是需要的。因此用四氧化锇/NMO处理化合物11以41%的产率提供14。这是用NaN3处理的,随后用H2还原生成62%的腺嘌呤衍生物15a。用1-溴羰基-1-甲基乙酸乙酯接着是在存在催化量的AcOH下的活化Zn的15a的还原消除以68%产率供应所希望的核苷13。
归因于途径1中的多步骤合成连同13的低产率,近来诸位发明人将该合成改进为途径2。根据文献15中所报道的方案合成N-Boc保护的腺嘌呤16并与10缩合以76%产率获得17。Boc基团的脱保护是通过TFA开展的以获得82%的13。最终,用DIBAL-H处理13以76%产率给出了目标化合物18(化合物15)。针对化合物15/18的分析数据呈现在以下的实例部分中。
图6提供了化合物15/18的合成的另一种描述。在图6中提出的方案中,如在图6方案中简述的用酮1作为关键中间体开始合成目标化合物15/18。启动于D-核糖,该酮1是经由根据Jin等人,J.Org.Chem.(有机化学杂志),68:9012-9018(2003)的已知过程的九个步骤合成的。用曼尼希碱(Mannich base)(Eshenmoser盐)引入环外亚甲基基团,随后霍夫曼降解(Hoffmann degradation)至一种烯酮,其被选择性地通过使用硼氢化钠还原以专有地以好的产率给出α-羟基化合物3。以7个步骤将化合物3转换为2-氟衍生物4,根据Dey(戴伊)和Garner(加纳),J.Org.Chem.(有机化学杂志),65:7697(2000)所报道的方案将其与N-Boc保护的腺嘌呤进行缩合,以三个步骤从其中获得最终的核苷15/18。根据McGuigan(麦圭根)等人,J.Med.Chem.(药物化学杂志),53:4949-4957(2010)的文献过程还制备了单磷酸酯前药15p/18p。
在另一合成中,依据在图7的化学方案中提出的化学方案,从保护的lactum(-)Vincelactum合成化合物15/18。使用的每个步骤和每种试剂呈现在以上的图7的说明中。
如在图8的方案中所呈现的制备氨基磷酸酯前药化合物15P/18P。在那个方案中,在二氯甲烷中在三乙胺的存在下将该苯膦酰二氯(在图8中的化合物1P)与L-丙氨酸取代的盐酸酯反应,以产生适合地取代的氯苯基磷酰基-L-氨基丙酸乙酯(图8的2P或3P)。然后将图8的化合物2P或3P与在N-甲基异咪唑中的化合物15/18在溶剂(四氢呋喃)中过夜反应以产生该前药化合物15P/18P或化合物15PI/18PI。针对在图8中呈现的合成的实验过程呈现在实验部分中。注意的是甲基酯15P/18P和异丙基酯15PI/18PI相应的乙基和异丁基酯类似物是以相同的方式使用类似的反应物制备的。还注意的是该磷基团是一个手性中心并且在图8中的呈现提供了15P/18P和15PI/18PI的一个非对映异构体混合物。使用本领域中熟知的方法可将该非对映异构体混合物分离为纯的非对映异构体,该方法包括选择性结晶(一种非对映异构体从溶液中结晶出来以排除另一种非对映异构体)、手性柱色谱法(HPLC等)。
对抗HBV-WT和突变菌株的抗病毒活性
拉米夫定是第一种许可的抗HBV核苷,其产生了HBV治疗领域中的突破。与安慰剂组对比,用拉米夫定对患者的治疗经常与血清HBV DNA水平的显著降低和血清学的转换以及组织学的改进关联。11,46然而,耐受拉米夫定突变的比率是相对高的(在5年治疗之后70%),这限制了拉米夫定的临床影响。11-14主要的突变是rtM204V/I并且补偿性的突变包括rtV173L、rtL180M和rtL80I。9,10从结构性观点中,该rtM204V/I通过在Val/Ile204的侧链和拉米夫定的L-糖环间的位阻诱导了该耐药性。47,48考虑相同的L-构型,替比夫定必然对该拉米夫定耐药型诸如rtM204I交叉耐受。15另一中重要的临床HBV突变是rtN236T,其与阿德福韦治疗在5年治疗之后以高达29%的比率相关。16-18分子建模研究表明在密码子236上的从Asp至Thr的突变导致阿德福韦-二磷酸酯的γ-磷酸酯和原始Asp236之间的氢键的缺失,这降低了结合亲和性并因此损害阿德福韦对抗rtN236T突变体的抗病毒活性。49,50
鉴于耐受拉米夫定和阿德福韦突变在抗HBV治疗的临床应用中的显著性,合成的核苷15/18针对HBV WT连同耐受拉米夫定和阿德福韦的突变体进行了测试。该筛选数据总结在图10表1中。核苷15/10展现了对抗HBV-WT的一个有力的抗病毒活性,具有1.5μM的50%有效浓度(EC50)和4.5μM的90%有效浓度(EC90)。有趣地,核苷15/18还对包括rtM204V/I±rtL180M的耐受拉米夫定的突变体是有活性的。倍数的增加是大约1.0-1.2,这与阿德福韦的是可比的。此外,化合物15/18亦并未对阿德福韦突变体(rtN236T)失去任何活性,具有4.6μM的EC90值。
15/18的结构与认可的抗HBV核苷恩替卡韦类似,除了在2'位置上带有一个另外的β-氟原子。两种核苷的低能构象异构体的构象也是相似的,如在我们的建模研究中标明的(参见以下)。然而,,该氟化的核苷15对所有测试的耐受拉夫米定的突变体无交叉耐受,而恩替卡韦失去8倍的活性50。尽管详细的机理仍不知道,但该2'-氟取代可以是非常重要的。
对该合成的核苷15/18在体外针对它对抗野生型HBV连同耐药突变体的抗病毒活性进行了评价,并且结果总结在以下的表1中。因为化合物15/18是一种腺嘌呤类似物的一种衍生物,诸位发明人对比了阿德福韦的抗病毒活性而不是恩替卡韦的,阿德福韦是一种鸟嘌呤类似物尽管其碳环部分与恩替卡韦的相同。从该抗HBV评价上来说,化合物15/18展示了对抗野生型HBV的显著抗HBV活性,具有1.5μM的EC50值。该抗病毒效能与阿德福韦相似,而比拉米夫定的少了7倍效能。抑制90%(EC90)野生型HBV DNA所需的化合物的浓度是4.5μM,这比阿德福韦(7.1μM)的多了1.5倍效能。
化合物15/18也显示了对抗拉米夫定和阿德福韦两者的相关联HBV突变体的优异活性。发现化合物15/18赋予了对抗阿德福韦突变型rtN236T的一个4.5倍增强的EC50值(1.7μM)和一个7.8倍更有利的EC90值(4.6μM)。对于rtM204V和rtM204I来说,化合物18分别显示了1.8和1.0μM的EC50值。对于rtM204V突变型来说,阿德福韦和化合物15/18的效能是相似的,但对于rtM204I来说,化合物15/18比阿德福韦在EC50连同EC90值上更有效。对于突变体rtL180M来说,化合物15/18的抗病毒活性与拉米夫定在EC50值(2.1比1.5)上是相似的,而它在EC90值上展示了4.3倍增长的抗病毒活性(5.1比22.0)。化合物15/18在对抗相同突变型上在EC50和EC90值两者上比阿德福韦的更有效。
对化合物15/18对抗双重突变体rtL180M/rtM204V也进行了测试并且它展现了2.2μM的EC50值,这与阿德福韦的相等,而15/18的EC90值(5.5μM)比阿德福韦(8.5μM)的更有效。
对化合物15/18对抗耐恩替卡韦克隆(L180M+S202I+M202V)也进行了评价,其中化合物5展现了与对野生型病毒的相似的抗HBV活性(EC500.67μM),而在恩替卡韦的情况下存在它的抗病毒效能上的显著的降低(EC501.2μM)(图11,表2)。
分子建模
了解该化合物15/18如何展示与阿德福韦的相比的有利的抗HBV活性是让人感兴趣的。因此,通过使用薛定谔模块(1-参考文献第二组)进行分子建模研究以获得对化合物15/18的分子机制的理解。HBV RT同源性模型是基于出版的HIV反转录酶的X射线晶体结构(PDB密码:1RTD)构建的,这在先前用于若干抗HBV核苷的分子机制研究(17)。在HBV聚合酶的同源性模型中,假定化合物15/18的α-、β-和γ-磷酸酯相对于催化三元组的相对位置以占有与HIV-1RT-DNA-dNTP复合体的晶体结构中的dNTP相似的位置。化合物15/18的分子对接显示三磷酸酯形成了与活性部位残基S85、A86、A87、R41、K32的所有氢键网络(图14a)。15/18的γ-磷酸酯维持了与S85的OH的关键H-键,在S85和N236之间具有氢键连接。一般地,该N236T突变体失去了键连到S85上的氢,这导致S85至γ-磷酸酯交互作用的不稳定,因此引起耐药。然而,化合物15/18(因为它的三磷酸酯)维持了一个与S85(图14b)的关键H-键,这与在WT中观察到的相似(图14a)。
15/18的带有一个环外烯的碳环占据疏水袋(残基F88、L180和M204)并使得与F88的有利的范德瓦耳斯相互作用(图14a&14b)。5的碳环中的2′-氟取代基似乎促进了在图14a&14b中所示的与R41的一个另外的结合,这与如在图10表1中所示的15/18的抗病毒活性相互印证。总体的,该建模研究可定性地解释新发现的化合物15/18在WT(图14a)中连同在对抗耐受阿德福韦突变体N236T(图14b)中有利的抗HBV活性。这些建模研究是信息性的,并且因此,保证了在将来的更定量的计算。
作为总结,合成了一种新的碳环腺苷衍生物15/18(FMCA)和它的单磷酸酯前药15P/18P(FMCAP)并且评价了它们的抗HBV活性。从这些研究中,该核苷和该前药两者都展示了对抗野生型连同所有主要的耐受核苷的HBV突变体两者的显著抗HBV活性。就这些有前景的抗HBV活性、低线粒体和细胞毒性连同对抗腺苷去胺酶的稳定性来说,计划进行该核苷15/18和它的前药15P/18P的另外的生物学和生物化学研究以在体内证实体外活性并且评估这些药剂作为抗HBV剂的充分潜力。
现在在以下实例中纯粹通过说明的方式对本发明进行了说明。本领域的普通技术人员将会明白这些实例是非限制的并且能够在不背离本发明的范围或精神下进行细节的变更。
实例
实验性的(化学合成)
总体方法。熔点由Mel-temp(熔点测定仪)II仪器测定并且未修正。用四甲基硅烷作为内标准,核磁共振频谱是在一台Varian Mercury400分光仪上针对1H NMR在400MHz以及针对13C NMR在100MHz记录的,或在一台Varian Inova500分光仪上针对1H NMR在500MHz以及针对13C NMR在125MHz记录的。化学位移(□)被报道为s(单峰)、d(双峰)、t(三峰)、q(四峰)、m(多峰)、或bs(宽的单峰)。UV频谱是在一台Beckman DU-650分光光度计上记录的。旋光度是在一台Jasco DIP-370数字偏光计上测定的。高分辨质谱是在一台MicromassAutospec高分辨质谱仪上记录的。TLC是在购买自Analtech公司的Uniplates(硅胶)上进行的,使用针对快速色谱的硅胶-60(220-440目)或针对真空快速柱色谱法的硅胶G(TLC级,>440目)进行柱色谱。元素分析是通过Atlantic Microlab Inc.,Norcross,GA进行的。
(-)-(3aR,4S,6R,6aR)-4-(苄氧基)-6-(叔丁氧基甲基)-2,2-二甲基-5-亚甲基四氢-3aH-环戊二烯并[d][1,3]间二氧杂环戊烯(4)在-78oC向化合物1(8.4g,34.6mmol)33,34,40在THF溶液的混合物中缓慢添加二异丙胺锂(2.0M溶液,19.1mL,38.1mmol)。在相同温度下搅拌3h后,一次性添加Eshenmoser盐(25.9g;138.4mmol)。在相同温度下将该混合物搅拌另外的3小时并且在室温下搅拌过夜。然后添加碘甲烷(108.8mL,1.73mol),并在用10%水性NaHCO3溶液(100mL)淬灭之前在室温下搅拌4h。将该混合物搅拌1h并用二乙醚(2×400mL)萃取。用10%水性NaHCO3、接着用盐水洗涤合并的醚萃取物,并用无水Na2SO4干燥,过滤并在真空下浓缩。通过真空硅胶柱色谱法(EtOAc:己烷=1:30至1:10)纯化该残余物以给出一种油(4.6g),在室温下将其溶解于MeOH并用CeCl3·7H2O(7.5g,19.6mmol)处理10min。在冷却降至-78oC后,缓慢添加NaBH4(0.75g,20.0mmol)。将该反应在相同温度下保持20min并用HOAc淬灭。将溶剂在真空中去除,并且将残余物溶解在EtOAc中,并用H2O和盐水洗涤,用Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂并且通过真空硅胶柱色谱法(EtOAc:己烷=1:30至1:10)纯化残余物以给出白色固体(4.0g),将其直接用于下一步。将从上一步中获得的白色固体(8.0g,31.2mmol)溶解于THF中,并用NaH(60%,1.62g,40.5mmol)在室温下处理15min。随后添加苄基溴(4.81mL,40.5mmol)和碘化四丁铵(TBAI)并且在40oC将该混合物搅拌3.5小时。在用冰/水淬灭以后,将该混合物吸收于Et2O中并用H2O和盐水进行洗涤,用Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂并且通过真空硅胶柱色谱法(EtOAc:己烷=1:30至1:20)纯化残余物以给出所希望的化合物4(9.7g,来自1的43%)。[α]24 D-121.09°(c0.83,CHCl3);1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.43-7.26(m,5H),5.28(d,J=1.0Hz,1H),5.07(t,J=1.0Hz,1H),4.83(d,J=12.0Hz,1H),4.68(d,J=13.0Hz,1H),4.56(t,J=5.5Hz,1H),4.44(t,J=1.0Hz,1H),4.32-4.30(m,1H),3.42(dd,J=4.0和8.5Hz,1H),3.21(dd,J=5.0和8.5Hz,1H),2.59-2.57(m,1H),1.46(s,3H),1.34(s,3H),1.02(s,9H);13C NMR(125MHz,CDCl3)δ150.6,138.6,128.3,127.8,127.6,110.8,108.9,81.3,79.7,78.5,72.6,71.8,64.5,49.9,27.3,26.9,25.3;(C21H30O4+H)+的HR-MS计算为347.2222,发现为347.2225。
(-)-(1S,2S,3S,5R)-3-(苄氧基)-5-(羟甲基)-4-亚甲基环戊烷-1,2-二醇(5)将化合物4(450mg,1.3mmol)溶解于MeOH中,并在回流温度下用3N HCl处理3.5h。在用固体NaHCO3中和之后,去除溶剂并且通过真空硅胶柱色谱法(MeOH:CH2Cl2=1:30至1:10)纯化残余物以给出三醇5(280mg,85%),为一种白色固体。mp122-124oC;[α]24D-123.05°(c0.37,MeOH);1H NMR(500MHz,CD3OD)δ7.46-7.30(m,5H),5.34(dd,J=1.0and3.0Hz,1H),5.21(s,1H),4.77(d,J=12.0Hz,1H),4.62(d,J=12.5Hz,1H),4.17-4.14(m,2H),3.95-3.93(m,1H),3.82-3.73(m,2H),2.69-2.66(m,1H);13C NMR(125MHz,CD3OD)δ148.9,138.3,128.0,127.6,127.3,109.1,80.8,71.7,71.0,70.8,61.8,49.6;(C14H18O4+H)+的HR-MS计算为251.1283,发现为251.1281。
(-)-(6aR,8S,9R,9aR)-8-(苄氧基)-2,2,4,4-四异丙基-7-亚甲基全氢化环戊二烯并[f][1,3,5,2,4]三氧杂二硅杂辛英-9-醇(6)在-30oC向在无水吡啶中的三醇5(4.0g,16.0mmol)一种溶液中逐滴添加1,3-二氯-1,1,3,3-四异丙基二硅氧烷(5.5mL,16.8mmol)。允许将该反应混合物渐渐升温到室温并且在相同温度下保持2h。在真空下去除该吡啶之后,将残余物溶解在EtOAc中,并用H2O和盐水洗涤,经硫酸镁干燥,过滤并在真空下浓缩。通过硅胶柱色谱(EtOAc:己烷=1:30至1:5)纯化残余物以产生该醇6(6.5g,82%),为一种浆料。[α]24D-105.94°(c0.58,CHCl3);1H NMR(500MHz,CDCl3)7.41-7.26(m,5H),5.36(t,J=2.5Hz,1H),5.11(t,J=2.5Hz,1H),4.77(d,J=12.0Hz,1H),4.62(d,J=12.5Hz,1H),4.18-4.14(m,2H),4.05(dd,J=4.5和12.0Hz,1H),3.78(dd,J=8.0和12.0Hz,1H),2.90-2.88(m,1H),1.08-0.97(m,27H);13C NMR(125MHz,CDCl3.)δ147.3,138.1,128.4,127.6,127.5,111.1,80.2,74.2,71.2,71.1,64.9,50.1,17.6,17.5,17.4,17.3,17.2,17.1,17.0。分析计算为C26H44O5Si2:C63.37;H,9.00。发现为:C,63.64;H,9.05。
(-)-(6aR,8S,9R,9aR)-8-(苄氧基)-2,2,4,4-四异丙基-7-亚甲基全氢化环戊二烯并[f][1,3,5,2,4]三氧杂二硅杂辛英-9-醇(7)在-78oC用三氟甲磺酸酐(0.94mL,5.6mmol)处理化合物6(2.1g,4.3mmol)和无水吡啶(1.05mL,12.6mmol)在无水CH2Cl2(20mL)中的一种溶液。允许将该反应混合物渐渐升温到室温并且在相同温度下保持20min。在真空下去除溶剂之后,将残余物溶解在EtOAc中,并用H2O和盐水洗涤,经硫酸镁干燥,过滤并在真空下浓缩。将残余物溶解于无水苯(40mL)中,并且加入18-冠醚-6(2.25g,8.6mmol)和乙酸铯(2.47g,12.6mmol)。将该悬浮液在50oC加热30min并将其冷却至室温。在去除溶剂之后,将残余物溶解在MeOH中,并在室温下用甲氧基钠处理3h并在真空下浓缩。通过硅胶柱色谱(EtOAc:己烷=1:10至1:3)纯化残余物以给出7(1.7g,来自6的81%)。[α]24D-76.47°(c0.82,CHCl3);1H NMR(500MHz,CDCl3)7.41-7.26(m,5H),5.34(t,J=2.5Hz,1H),5.16(t,J=2.0Hz,1H),4.80(q,J=12.0Hz,2H),4.12-3.89(m,5H),2.60(m,1H),1.09-0.94(m,27H);13C NMR(125MHz,CDCl3.)δ144.4,138.6,128.5,127.7,127.6,111.5,82.4,82.3,77.3,77.0,76.8,76.2,71.8,62.7,49.4,17.6,17.5,17.4,17.3,17.2,17.1,17.0,13.6,13.4,12.8,12.6。(C26H44O5Si2+H)+的HR-MS计算为493.2806,发现为493.2736。
(-)-(6aR,8S,9R,9aR)-8-(苄氧基)-9-氟-2,2,4,4-四异丙基-7-亚甲基六氢化环戊二烯并[f][1,3,5,2,4]三氧杂二硅杂辛英(8)在室温下,向在无水CH2Cl2中的醇6的一种溶液中缓慢添加(二乙氨基)三氟化硫)(DAST,1.84mL,13.9mmol)。在20min后,用冰H2O将该反应混合物淬灭。收集有机层并将水相用二氯甲烷萃取。然后将有机层合并,用硫酸镁干燥,过滤并在真空下浓缩。立即将该粗残余物使用于下一脱保护步骤。通过使用硅胶柱色谱(EtOAc:己烷=1:100至1:20)纯化获得8的分析样品。[α]24D-104.08°(c0.51,CHCl3);1H NMR(500MHz,CDCl3)7.39-7.26(m,5H),5.36(t,J=2.5Hz,1H),5.20(dd,J=2.5和5.0Hz,1H),4.92(ddd,J=6.0,7.5和55.0Hz,1H),4.78(d,J=11.5Hz,1H),4.65(d,J=11.5Hz,1H),4.31-4.26(m,1H),4.23-4.16(m,1H),4.01-3.92(m,1H),1.08-0.94(m,27H);13C NMR(100MHz,CDCl3.)142.6(d,J=9.2Hz),137.9,128.4,127.8,127.7,112.7,103.4(d,J=189.0Hz),80.4(d,J=21.3Hz),73.8(d,J=19.8Hz),71.3,61.6,48.8(d,J=5.3Hz),17.5,17.4,17.1,17.0,16.9,16.8,13.4,13.3,12.7,12.5。(C26H43FO4Si2+H)+的HR-MS计算为495.2762,发现为495.2769。
(-)-[(1R,2Ri3R,4R)-2-(苯甲酸基)-4-(苄氧基)-3-氟-5-亚甲基环戊基]苯甲酸甲酯(9)将粗的氟化的化合物8(直接来自上一步)溶解于THF中,并用乙酸(3.2mL,53.0mmol)接着用氟化四丁基铵(TBAF)(40mL,40.0mmol)在室温下处理1h。在真空下去除溶剂之后,将残余物溶解在异丙醇/氯仿(4:1)共溶剂中,并用H2O洗涤。收集有机层,用硫酸镁干燥,过滤并在真空下浓缩。通过在硅胶柱色谱(EtOAc:己烷=1:4至1:1)纯化残余物以给出一种二醇。在室温下,将二醇(1.0g,4.0mmol)溶解于无水吡啶中并用苯甲酰氯(1.88mL,16.0mmol)处理。在4h后在真空下去除吡啶并将残余物溶解于EtOAc中。用H2O和盐水洗涤该溶液,用硫酸镁干燥,过滤并在真空下浓缩。通过硅胶柱色谱(EtOAc:己烷=1:20至1:3)纯化残余物以给出9(1.8g,61%)。[α]24D-52.71°(c0.55,CHCl3);1H NMR(500MHz,CDCl3)8.03-7.26(m,15H),5.68-5.61(m,1H),5.49(t,J=2.5Hz,1H),5.34(dd,J=2.5and4.5Hz,1H),5.20(td,J=6.0和53.0Hz,1H),4.82(d,J=11.5Hz,1H),4.73(d,J=11.5Hz,1H),4.62(dd,J=5.0和10.5Hz,1H),4.55-4.50(m,2H),3.24-3.23(m,1H);13C NMR(125MHz,CDCl3.)□166.3,165.7,142.8(d,J=7.6Hz),137.5,133.4,133.0,129.8,129.6,129.5,129.3,128.5,128.4,128.3,128.0,127.9,114.3,99.9(d,J=189.9Hz),81.2(d,J=22.0Hz),76.2(d,J=23.8Hz),71.7,64.9,45.0(d,J=4.5Hz)。(C28H25FO5+H)+的HR-MS计算为461.1764,发现为461.1756。
(-)-[(1R,2R,3R,4R)-2-(苯甲酸基)-3-氟-4-羟基-5-亚甲基环戊基]苯甲酸甲酯(10)在-78℃用三氯化硼(9.1mL的在CH2Cl2中的1M溶液,9.1mmol)处理在无水CH2Cl2中的化合物9(1.4g,3.0mmol)的一种溶液。在相同温度下搅拌30min之后,添加另外部分的三氯化硼(6.1mL的在CH2Cl2中的1M溶液,6.1mmol)。在另一个15min之后,在-78℃用MeOH淬灭该反应并在真空下浓缩。通过硅胶柱色谱(EtOAc:己烷=1:10至1:3)纯化残余物以给出10(1.0g,89%),为一种浆料。[α]26D-53.55°(c0.25,CHCl3);1H NMR(500MHz,CDCl3)8.03-7.32(m,10H),5.66(td,J=6.8and16.4Hz,1H),5.49(t,J=2.0Hz,1H),5.32(dd,J=2.0和4.4Hz,1H),4.96(td,J=6.8和54.4Hz,1H),4.80(m,1H),4.64-4.52(m,2H),3.21(m,1H),2.66(d,J=7.0Hz,D2O可交换的,1H);13C NMR(125MHz,CDCl3.)δ166.3,165.8,144.4(d,J=8.4Hz),133.4,133.1,129.8,129.6,129.2,128.4,128.3,113.1,99.9(d,J=191.3Hz),75.3,75.2,75.1,75.0,65.4,44.8(d,J=3.8Hz)。分析计算为C21H19FO5:C,68.10;H,5.17。发现为:C,67.78;H,5.27。
(1R,3R,4R,5R)-5-(苯甲酸基)-3-(6-氯-9H-9-嘌呤基)-4-氟-2-羟基-2-(羟甲基)环戊基]苯甲酸甲酯(12)在0oC在5min期间向化合物10(1.07g,2.89mmol)、三苯基膦基(TPP,1.13g,4.33mmol)和6-氯嘌呤(0.67g,4.33mmol)在无水THF(20mL)中的一种溶液中,添加偶氮二羧酸二异丙酯(DIAD,0.89mL,4.33mmol)。允许将该反应升温至室温,并保持1h。通过添加MeOH(1mL)淬灭该反应并在真空下蒸发。通过硅胶柱色谱(EtOAc:己烷=1:4至1:2)纯化残余物以给出一种偶联核苷11(为一种混合物),其被减少的DIAD类污染。将该粗化合物11(660mg)溶解于丙酮/H2O(15mL/2.5mL)并用锇酸(1.3mL5%H2O溶液)/NMO(480mg)处理24h。用饱和的硫代硫酸钠水溶液将该反应混合物淬灭。在真空下去除有机溶液,并将水相用异丙醇/氯仿(4:1)共溶剂萃取。收集有机层并且经Na2SO4干燥,并过滤。将滤液在真空中浓缩,并且将残余物通过硅胶柱色谱(MeOH:CH2Cl2=1:60至1:40)来纯化以给出化合物12,为非对映异构体的一种混合物(640mg,来自10的41%)。主要的异构体:1H NMR(500MHz,CD3OD)δ8.80(d,J=5.0Hz,1H),8.78(s,1H),7.95-7.11(m,10H),6.10(ddd,J=3.0,12.5和17.5Hz,1H),5.80(dd,J=10.0和35.0Hz,1H),5.38(ddd,J=3.0,10.5和67.5Hz,1H),4.80(m,2H),3.73(d,J=14.5Hz,1H),3.40(d,J=14.5Hz,1H),3.00(m,1H);13C NMR(100MHz,CDCl3.)166.4,165.6,153.1,151.8,151.7,149.9,148.2,148.1,129.4,129.1,128.2,127.9,93.1(d,J=193.1Hz),80.8,79.3(d,J=26.2Hz),62.8,61.9(d,J=5.0Hz),60.2(d,J=13.4Hz),48.6(d,J=5.6Hz)。(C26H22ClFN4O6+H)+的HR-MS计算为541.1290,发现为541.1290。
(1R,3R,4R,5R)-3-(6-氨基-9H-9-嘌呤基)-5-(苯甲酸基)-4-氟-2-羟基-2-(羟甲基)环戊基]苯甲酸甲酯(13)在-70℃-80℃用叠氮化钠(750mg,11.5mmol)将在无水DMF中的核苷12(620mg,1.15mmol)处理1.5h。在真空下去除挥发物,并将残余物溶解在异丙醇/氯仿(4:1)共溶剂中,并用H2O洗涤,经Na2SO4干燥并蒸发至干燥。将所得粗叠氮化物化合物溶解于EtOH并在-40℃在H2气氛下用Pd/C(200mg)处理3h。在去除固体之后,将滤液蒸发并且将残余物通过硅胶柱色谱(MeOH:CH2Cl2=1:40至1:20)来纯化以给出所希望的腺苷类似物13(370mg,62%),为非对映异构体的一种混合物。
主要的异构体:UV(MeOH)λmax259.0nm;1H NMR(500MHz,CD3OD)δ8.43(d,J=4.0Hz,1H),8.29(s,1H),7.99-7.16(m,10H),6.11(ddd,J=2.5,9.5和14.5Hz,1H),5.59(dd,J=8.0和29.0Hz,1H),5.35(ddd,J=2.5,8.5和43.5Hz,1H),4.89(m,2H),3.72(d,J=11.0Hz,1H),3.50(d,J=11.0Hz,1H),3.00(m,1H);13C NMR(100MHz,CDCl3.)δ166.4,165.6,156.0,152.4,150.5,142.8,142.7,133.1,132.7,129.4,129.1,128.2,127.8,117.7,93.3(d,J=193.1Hz),80.8,79.4(d,J=26.2Hz),63.0,61.9(d,J=17.6Hz),60.3,48.9(d,J=5.2Hz)。
(C26H25FN5O6+H)+的HR-MS计算为522.1789,发现为522.1774。
(+)-[(1R,3R,4R,5R)-3-(6-氨基-9H-9-嘌呤基)-5-(苯甲酸基)-4-氟-2-亚甲基环戊基]苯甲酸甲酯(14)将化合物13(260mg,0.50mmol)溶解于潮湿的乙腈(将9μL H2O添加进入10mL无水乙腈中)并冷却至-30℃。向该混合物中逐滴添加过量1-溴羰基-甲基乙酸乙酯(0.54mL,3.68mmol)并允许升温至室温。在室温下搅拌1h,将该反应混合物再次冷却至-30℃并添加另外的1-溴羰基-甲基乙酸乙酯(0.2mL,1.47mmol)。添加破碎的冰以淬灭该反应并用饱和NaHCO3(20mL)溶液中和并用EtOAc(100mL×2)萃取。用盐水洗涤合并的有机层,经Na2SO4干燥并过滤。将滤液在真空中浓缩,并将残余物溶解在无水DMF中,并用活化的锌(c.a.2.0g)和HOAc(0.2mL)处理并在室温下搅拌8h。在真空下去除挥发物,并将残余物溶解在异丙醇/氯仿(4:1)共溶剂中,并用饱和NaHCO3(15mL)溶液、H2O和盐水洗涤。收集有机层并且经Na2SO4干燥,并过滤。将滤液在真空中浓缩,并且将残余物通过硅胶柱色谱(EtOAc:己烷=2:1至4:1)来纯化以给出外环烯核苷14(165.0mg,68%),为一种白色固体。mp:195-198℃(dec.)[□]25D+77.66°(c0.27,CHCl3);UV(MeOH)λmax231.0,259.0nm;1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.40(s,1H),8.12-8.06(m,2H),7.94(d,J=3.6Hz,1H),7.65-7.44(m,3H),6.0(dd,J=2.4和33.2Hz,1H),5.86(br,2H,D2O可交换的),5.75(d,(d,J=14.8Hz,1H),5.50(s,1H),5.21(dd,J=4.0和50.8Hz,1H),4.98(d,J=1.2Hz,1H),4.82-4.64(m,1H),4.66-4.61(m,1H),3.42(m,1H);13C NMR(100MHz,CDCl3.)δ166.4,165.0,155.5,153.2,150.5,144.4,140.9,140.8,133.8,133.3,130.0,129.7,129.6,128.7,128.6,128.5,118.8,113.2,93.6(d,J=184.4Hz),75.8(d,J=29.0Hz),64.4(d,J=3.1Hz),58.3(d,J=17.5Hz),46.5。(C26H22FN5O4+H)+的HR-MS计算为488.1734,发现为488.1731。
(+)-(1R,2R,3R,5R)-3-(6-氨基-9H-9-嘌呤基)-2-氟-5-(羟甲基)-4-亚甲基环戊-1-醇(15)在-78℃向化合物14(160.0mg,0.33mmol)在无水CH2Cl2中的溶液中缓慢添加氢化二异丁基铝(DIBAL-H,1.6mL,1.0M在甲苯中)。在相同温度下30min之后,用异丙醇/氯仿(4:1)共溶剂稀释该反应(30mL),并添加饱和的酒石酸钠钾溶液(10mL)。在室温下将该混合物搅拌2h并且收集有机层。用异丙醇/氯仿(4:1)共溶剂(3×10mL)萃取水层,并合并有机层,经Na2SO4干燥并过滤。将滤液在真空中浓缩,并且将残余物通过硅胶柱色谱来(MeOH:CH2Cl2=1:20至1:10)纯化以给出腺苷类似物15(70.0mg,76%),为一种白色固体。mp:215-218℃(dec.)[α]25D+151.80°(c0.23,CHCl3)UV(H2O)λmax259.0nm(ε13998,pH2),260.0nm(ε15590,pH7),260.0nm(ε15579,pH11);1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.22(s,1H),8.06(d,J=2.4Hz,1H),5.86(dd,J=2.4和25.6Hz,1H),5.42(t,J=2.4Hz,1H),4.93(td,J=3.2和52.4Hz,1H),4.92(s,1H,部分地埋在H2O峰内),4.40(td,J=3.2和10.8Hz,1H),3.88-3.76(m,2H),2.78(m,1H);13C NMR(100MHz,CDCl3.)δ156.0,152.5,149.9,146.1(d,J=1.0Hz),141.1(d,J=5.2Hz),117.9,111.8,95.9(d,J=186.0Hz),72.9(d,J=22.9Hz),61.8(d,J=3.4Hz),57.6(d,J=17.2Hz),51.1。分析计算为C12H14FN5O2:C,51.61;H,5.05;N,25.08。发现为:C,51.74;H,5.09;N,24.92。
化合物18(图5)。化合物18(与方案2的化合物15相同,但通过呈现于图5中的替代途径合成)是遵循在附图5中所提出的一种或多种途径合成的。以上针对化合物18的选择的分析数据与针对化合物15的相同。
针对化合物15P/18P和15PI/18PI的示例方案
在-78℃C在氩气氛下,将N-甲基咪唑(NMI,5.0mmol)添加至在干THF中的FMCA(1mmol)的搅拌悬浮液中。逐滴添加溶解于THF中的适当的取代的氯苯基磷酰基-L-氨基丙酸乙酯(2P或3P,3.0mmol),缓慢地加热至室温并继续在室温下搅拌过夜。蒸发挥发物,并且将残余物溶解在二氯甲烷(DCM)中,并且用0.5M HCL洗涤。将有机层用Na2SO4干燥,过滤,减压下至干燥,并通过快速色谱法纯化以给出FMCA的前药(15/18&15P/18P)。
化合物15P/18P的分析数据1H NMR(500Mz,CD3OD)d8.35(s,1H),7.86(d,J=3.0Hz,1H),7.34-7.15(m,5H),5.95(m,3H),5.26d,J=8.0Hz,1H),5.01-4.90(m,1H),4.83(s,1H),4.50-4.41(m,2H),4.25-4.04(m,3H),3.71(s,3H),3.07(s,1H),1.40(d,J=6.5Hz,3H);19FNMR(500MHz,CDCl3)δ-192.86(m,1F);13C NMR(125MHz,CD3OD)d171,159.0,156.5,152.5,150.4,142.9,130.1,121.2,120.3,106.7,102.4,72.2,71.1,62.3,51.9,46.3,43.9,19.1;31PNMR(CDCl3,202MHz):δ2.67,2.99。分析计算为C22H26FN6O6P.0.5H2O:C,49.91;H,5.14;N,15.87;发现为:C,49.84;H,5.06;N,15.22。
化合物15PI/18PI的分析数据1H NMR(500Mz,CD3OD)d8.36(s,1H),7.84(d,J=30.0Hz,1H),7.34-7.07(m,5H),5.94(d,J=23Hz,1H),5.76(bs,2H NH2),5.30(m,1H),5.04-4.86(m,3H),4.50-4.44(m,2H),4.21(m,1H),4.11-3.80(m,3H),3.09(s,1H),1.40(d,J=14.5Hz,3H),1.28(d,J=14.0Hz,6H);19F NMR(500MHz,CDCl3)δ-192.96(m,1F);31P NMR(CDCl3,202MHz):δ2.84,2.32.
抗病毒测定
如前所述进行药物敏感性测定。如前所述在PBM、CEM和Vero细胞中进行细胞毒测定。使用了两种化合物用于测试:第一种,一种腺嘌呤核苷类似物,其在该分子(化合物15/18)的糖部分上的R1和R1a处包含羟基基团;以及第二种,一种基于化合物15/18(在R1(R1a是H))上包含一个氨基磷酸酯基团)的前药核苷化合物15P/18P,其包含一个苯基基团为R6并且B’是衍生自丙氨酸的一个氨基酸基团,其中R8是甲基并且R”是一个甲基基团,形成了一个甲基酯。在Dr.Brent Korba实验室以一种标准HBV测定法测试了这些化合物。获得了以下结果。注意:在本测定中,所测试的根据本发明的这些化合物比3TC超过1000倍更有效。该前药化合物(所测试的第二种化合物,其中R1是一个氨基磷酸酯基团R6=苯基并且B’衍生自丙氨酸并包含一个甲基酯(R8是甲基并且R”是甲基))比其中R1和R1a都是H的化合物超过10倍更有活性。
HBV测定结果
如前所述,也对化合物15/18进行了针对抗HBV的野生型和耐药型的测试。该测试如上所述,并且这些结果呈现于在此的附图10中提出的表1中。
一种单磷酸酯前药可以不仅对通过该核苷激酶绕过比率限制性初始磷酸化步骤从而提高该抗病毒效能是有用的,而且还可潜在地靶向肝脏。因此,还合成了一种亚磷酰胺,化合物15P/18P。在各自的抗病毒评价试验中,观察到与母体化合物15/18相比,针对WTHBV,15P/18P在体外对抗HBV的效能在EC50和EC90值上分别增强了7倍和13倍而不具有细胞毒性的显著升高(表2,图11)。也对该单磷酸酯前药15P/18P(IC50=0.05μM)对抗Huh7细胞(16)中HBV基因型C耐受恩替卡韦的克隆(L180M+M204V+S202G)进行了评价(如图11表2所示),并且有趣地,该化合物15/18FMCA和15P/18P FMCA单磷酸酯前药仍维持对抗该恩替卡韦突变型的抗病毒效能。图12显示前药15P/18P对抗Huh7细胞中HBV基因型C耐受恩替卡韦的克隆(L180M+S202G+M204V)的抗HBV活性。
也在嵌合小鼠中针对活性测试了该FMCA单磷酸酯前药化合物(15P/18P)。在这些体内研究中,显示FMCA单磷酸酯前药15P/18P对抗野生型HBV是有活性的,具有2对数的病毒载量降低(图15)。在进一步的体内研究(小鼠)中,发现ETV(恩替卡韦)对抗耐受恩替卡韦的HBV突变型是没有活性的(L180M+M204V+S202G)(图16A),而相比之下,显示FMCA单磷酸酯前药(15P/18P)对抗耐受恩替卡韦的HBV突变型(L180M+M204V+S202G)是有活性的,具有1对数的病毒载量降低(图16B)。这些研究证明了根据本发明的如由EMCA(化合物15/18)并且尤其FMCA单磷酸酯前药化合物(15P/18P)代表的这些化合物的体内功效。
线粒体研究
在HepG2细胞中通过测定乳酸脱氢酶(13)的线粒体毒性研究显示FMCA15/18不展现如在拉米夫定(3TC)中的高达100μM的任何显著毒性,而叠氮胸苷(AZT)显示了显著毒性(图13)。另外,用来自小牛胸腺的腺苷去胺酶的脱氨研究表明化合物15/18完全是稳定的(20)。
分子建模研究
构象搜寻:通过在,8.5版(Schrodinger,Inc.(薛定谔有限公司))中的建造模块构建化合物15/18和恩替卡韦类似物16的初始构象在GB/SA水模型存在下使用中的MMFFs力场以5,000步进行该蒙特卡洛构(Monte Carlo)象搜寻。
假旋转分析:使用在线假旋转分析工具PROSIT(http://cactus.nci.nih.gov/ prosit/)计算所有假旋转参数。51
尤其可得出关于本发明的以下结论:
1.本发明化合物和它们的单盐酸酯前药在体外对抗耐受拉米夫定、阿德福韦和恩替卡韦的突变型是有活性的;
2.该2’-F部分似乎通过一个氢键增强了FMCA-TP结合至HBV聚合酶并且这些化合物在这些系列内是特别有活性的;
3.包括FMCA的本发明化合物展示了低细胞和线粒体毒性并且对预防连同治疗是有用的;
4.在被拉夫米定-阿德福韦-恩替卡韦三重突变感染的嵌合小鼠中的初步体内功效研究中,该FMCA-MP前药展现了抗病毒活性,而恩替卡韦没有,一个出乎意料的结果显示本发明化合物在治疗中特别有用,包括包含在一种对抗耐药的并导致传染病的HBV的治疗混合物中。
参考文献(第一组)
1.Mast,E.E.;Alter,M.J.;Margolis,H.S.Strategies to prevent and controlhepatitis B and C virus infections:a global perspective.Vaccine1999,17,1730-3.
2.Lee,W.M.Hepatitis B virus infection.N Engl J Med1997,337,1733-45.
3.Perrillo,R.P.;Schiff,E.R.;Davis,G.L.;Bodenheimer,H.C.,Jr.;Lindsay,K.;Payne,J.;Dienstag,J.L.;O'Brien,C.;Tamburro,C.;Jacobson,I.M.;et al.Arandomized,controlled trial of interferon alfa-2b alone and after prednisonewithdrawal for the treatment of chronic hepatitis B.The HepatitisInterventional Therapy Group.N Engl J Med1990,323,295-301.
4.Wong,D.K.;Cheung,A.M.;O'Rourke,K.;Naylor,C.D.;Detsky,A.S.;Heathcote,J.Effect of alpha-interferon treatment in patients with hepatitis Be antigen-positive chronic hepatitis B.A meta-analysis.Ann Intern Med1993,119,312-23.
5.Kim,W.R.;Benson,J.T.;Hindman,A.;Brosgart,C.;Fortner-Burton,C.Decline in the need for liver transplantation for end stage liver diseasesecondary to hepatitis B in the US.Hepatology2007,46(Suppl),238A.
6.Tuttleman,J.S.;Pourcel,C.;Summers,J.Formation of the pool ofcovalently closed circular viral DNA in hepadnavirus-infected cells.Cell1986,47,451-60.
7.Zoulim,F.Mechanism of viral persistence and resistance tonucleoside and nucleotide analogs in chronic hepatitis B virusinfection.Antiviral Res2004,64,1-15.
8.Ghany,M.G.;Doo,E.C.Antiviral resistance and hepatitis Btherapy.Hepatology2009,49,S174-84.
9.Ono,S.K.;Kato,N.;Shiratori,Y.;Kato,J.;Goto,T.;Schinazi,R.F.;Carrilho,F.J.;Omata,M.The polymerase L528M mutation cooperates withnucleotide binding-site mutations,increasing hepatitis B virus replicationand drug resistance.J Clin Invest2001,107,449-55.
10.Allen,M.I.;Deslauriers,M.;Andrews,C.W.;Tipples,G.A.;Walters,K.A.;Tyrrell,D.L.;Brown,N.;Condreay,L.D.Identification and characterization ofmutations in hepatitis B virus resistant to lamivudine.Lamivudine ClinicalInvestigation Group.Hepatology1998,27,1670-7.
11.Dienstag,J.L.;Schiff,E.R.;Wright,T.L.;Perrillo,R.P.;Hann,H.W.;Goodman,Z.;Crowther,L.;Condreay,L.D.;Woessner,M.;Rubin,M.;Brown,N.A.Lamivudine as initial treatment for chronic hepatitis B in the UnitedStates.N Engl J Med1999,341,1256-63.
12.Lai,C.L.;Chien,R.N.;Leung,N.W.;Chang,T.T.;Guan,R.;Tai,D.I.;Ng,K.Y.;Wu,P.C.;Dent,J.C.;Barber,J.;Stephenson,S.L.;Gray,D.F.A one-year trial oflamivudine for chronic hepatitis B.Asia Hepatitis Lamivudine Study Group.NEngl J Med1998,339,61-8.
13.Marcellin,P.;Lau,G.K.;Bonino,F.;Farci,P.;Hadziyannis,S.;Jin,R.;Lu,Z.M.;Piratvisuth,T.;Germanidis,G.;Yurdaydin,C.;Diago,M.;Gurel,S.;Lai,M.Y.;Button,P.;Pluck,N.Peginterferon alfa-2a alone,lamivudine alone,and the two incombination in patients with HBeAg-negative chronic hepatitis B.N Engl JMed2004,351,1206-17.
14.Yuen,M.F.;Seto,W.K.;Chow,D.H.;Tsui,K.;Wong,D.K.;Ngai,V.W.;Wong,B.C.;Fung,J.;Yuen,J.C.;Lai,C.L.Long-term lamivudine therapy reduces the riskof long-term complications of chronic hepatitis B infection even in patientswithout advanced disease.Antivir Ther2007,12,1295-303.
15.Lai,C.L.;Gane,E.;Liaw,Y.F.;Hsu,C.W.;Thongsawat,S.;Wang,Y.;Chen,Y.;Heathcote,E.J.;Rasenack,J.;Bzowej,N.;Naoumov,N.V.;Di Bisceglie,A.M.;Zeuzem,S.;Moon,Y.M.;Goodman,Z.;Chao,G.;Constance,B.F.;Brown,N.A.Telbivudine versuslamivudine in patients with chronic hepatitis B.N Engl J Med2007,357,2576-88.
16.Angus,P.;Vaughan,R.;Xiong,S.;Yang,H.;Delaney,W.;Gibbs,C.;Brosgart,C.;Colledge,D.;Edwards,R.;Ayres,A.;Bartholomeusz,A.;Locarnini,S.Resistance toadefovir dipivoxil therapy associated with the selection of a novel mutationin the HBV polymerase.Gastroenterology2003,125,292-7.
17.Qi,X.;Xiong,S.;Yang,H.;Miller,M.;Delaney,W.E.t.In vitrosusceptibility of adefovir-associated hepatitis B virus polymerase mutationsto other antiviral agents.Antivir Ther2007,12,355-62.
18.Villeneuve,J.P.;Durantel,D.;Durantel,S.;Westland,C.;Xiong,S.;Brosgart,C.L.;Gibbs,C.S.;Parvaz,P.;Werle,B.;Trepo,C.;Zoulim,F.Selection of ahepatitis B virus strain resistant to adefovir in a liver transplantationpatient.J Hepatol2003,39,1085-9.
19.Curtis,M.;Zhu,Y.;Borroto-Esoda,K.Hepatitis B virus containing theI233V mutation in the polymerase reverse-transcriptase domain remainssensitive to inhibition by adefovir.J Infect Dis2007,196,1483-6.
20.Schildgen,O.;Sirma,H.;Funk,A.;Olotu,C.;Wend,U.C.;Hartmann,H.;Helm,M.;Rockstroh,J.K.;Willems,W.R.;Will,H.;Gerlich,W.H.Variant of hepatitis Bvirus with primary resistance to adefovir.N Engl J Med2006,354,1807-12.
21.Hadziyannis,S.J.;Tassopoulos,N.C.;Heathcote,E.J.;Chang,T.T.;Kitis,G.;Rizzetto,M.;Marcellin,P.;Lim,S.G.;Goodman,Z.;Ma,J.;Brosgart,C.L.;Borroto-Esoda,K.;Arterburn,S.;Chuck,S.L.Long-term therapy with adefovir dipivoxil forHBeAg-negative chronic hepatitis B for up to5years.Gastroenterology2006,131,1743-51.
22.Sherman,M.;Yurdaydin,C.;Sollano,J.;Silva,M.;Liaw,Y.F.;Cianciara,J.;Boron-Kaczmarska,A.;Martin,P.;Goodman,Z.;Colonno,R.;Cross,A.;Denisky,G.;Kreter,B.;Hindes,R.Entecavir for treatment of lamivudine-refractory,HBeAg-positive chronic hepatitis B.Gastroenterology2006,130,2039-49.
23.Tenny,D.J.;Pokornowski,K.A.;Rose,B.E.;al.,e.Entecavir at fiveyears shows long-term maintenance of
high genetic barrier to hepatitis B virus resistance.Heptol Int2008,2,302-303.
24.Dienstag,J.L.;Goldin,R.D.;Heathcote,E.J.;Hann,H.W.;Woessner,M.;Stephenson,S.L.;Gardner,S.;Gray,D.F.;Schiff,E.R.Histological outcome duringlong-term lamivudine therapy.Gastroenterology 2003,124,105-17.
25.Lok,A.S.;Lai,C.L.;Leung,N.;Yao,G.B.;Cui,Z.Y.;Schiff,E.R.;Dienstag,J.L.;Heathcote,E.J.;Little,N.R.;Griffiths,D.A.;Gardner,S.D.;Castiglia,M.Long-term safety of lamivudine treatment in patients with chronic hepatitisB.Gastroenterology2003,125,1714-22.
26.Choi,Y.;Lee,K.;Hong,J.H.;Schinazi,R.F.;Chu,C.K.Synthesis and anti-HIV activity of L-2'-fluoro-2',3'-unsaturated purine nucleosides..TetrahedronLett1998,39,4437-4440.
27.Chong,Y.;Choo,H.;Choi,Y.;Mathew,J.;Schinazi,R.F.;Chu,C.K.Stereoselective synthesis and antiviral activity of D-2',3'-didehydro-2',3'-dideoxy-2'-fluoro-4'-thionucleosides.J Med Chem2002,45,4888-98.
28.Chong,Y.;Gumina,G.;Mathew,J.S.;Schinazi,R.F.;Chu,C.K.l-2',3'-Didehydro-2',3'-dideoxy-3'-fluoronucleosides:synthesis,anti-HIV activity,chemical and enzymatic stability,and mechanism of resistance.J Med Chem2003,46,3245-56.
29.Choo,H.;Chong,Y.;Choi,Y.;Mathew,J.;Schinazi,R.F.;Chu,C.K.Synthesis,anti-HIV activity,and molecular mechanism of drug resistance ofL-2',3'-didehydro-2',3'-dideoxy-2'-fluoro-4'-thionucleosides.J Med Chem2003,46,389-98.
30.Chu,C.K.;Ma,T.;Shanmuganathan,K.;Wang,C.;Xiang,Y.;Pai,S.B.;Yao,G.Q.;Sommadossi,J.P.;Cheng,Y.C.Use of2'-fluoro-5-methyl-beta-L-arabinofuranosyluracil as a novel antiviral agent for hepatitis B virus andEpstein-Barr virus.Antimicrob Agents Chemother1995,39,979-81.
31.Lee,K.;Choi,Y.;Gullen,E.;Schlueter-Wirtz,S.;Schinazi,R.F.;Cheng,Y.C.;Chu,C.K.Synthesis and anti-HIV and anti-HBV activities of2'-fluoro-2',3'-unsaturated L-nucleosides.J Med Chem1999,42,1320-8.
32.Lee,K.;Choi,Y.;Gumina,G.;Zhou,W.;Schinazi,R.F.;Chu,C.K.Structure-activity relationships of 2'-fluoro-2',3'-unsaturated D-nucleosides as anti-HIV-1agents.J Med Chem2002,45,1313-20.
33.Wang,J.;Jin,Y.;Rapp,K.L.;Bennett,M.;Schinazi,R.F.;Chu,C.K.Synthesis,antiviral activity,and mechanism of drug resistance of D-and L-2',3'-didehydro-2',3'-dideoxy-2'-fluorocarbocyclic nucleosides.J MedChem2005,48,3736-48.
34.Wang,J.;Jin,Y.;Rapp,K.L.;Schinazi,R.F.;Chu,C.K.D-and L-2',3'-didehydro-2',3'-dideoxy-3'-fluoro-carbocyclic nucleosides:synthesis,anti-HIVactivity and mechanism of resistance.J Med Chem2007,50,1828-39.
35.Zhou,W.;Gumina,G.;Chong,Y.;Wang,J.;Schinazi,R.F.;Chu,C.K.Synthesis,structure-activityrelationships,and drug resistance of beta-d-3'-fluoro-2',3'-unsaturated nucleosides as anti-HIV Agents.J Med Chem2004,47,3399-408.
36.Bisacchi,G.S.;Chao,S.T.;Bachard,C.;Daris,J.P.;Innaimo,S.;Jacobs,G.A.;Kocy,O.;Lapointe,P.;Martel,A.;Merchant,Z.;Slusarchyk,W.A.;Sundeen,J.E.;Young,M.G.;Colonno,R.;Zahler,R.BMS-200475,a novel carbocyclic2′-deoxyguanosine analog with potent and selective anti-hepatitis B virusactivity in vitro.Bioorg Med Chem Lett1997,7,127-132.
37.Gaudino,J.J.;Wilcox,C.S.A concise approach to enantiomericallypure carbocyclic ribose analogs.Synthesis of(4S,5R,6R,7R)-7-(hydroxymethyl)spiro[2.4]heptane-4,5,6-triol7-O-(dihydrogen phosphate).J Am Chem Soc1990,112,4374-4380.
38.Takagi,C.;Sukeda,M.;Kim,H.S.;Wataya,Y.;Yabe,S.;Kitade,Y.;Matsuda,A.;Shuto,S.Synthesis of 5'-methylenearisteromycin and its2-fluoro derivativewith potent antimalarial activity due to inhibition of the parasite S-adenosylhomocysteine hydrolase.Org Biomol Chem2005,3,1245-51.
39.Ziegler,F.E.;Sarpong,M.A.Radical cyclization studies directedtoward the synthesis of BMS-200475 'entecavir':the carbocycliccore.Tetrahedron2003,59,9013-9018.
40.Wang,P.;Agrofoglio,L.A.;Newton,M.G.;Chu,C.K.Chiral Synthesis ofCarbocyclic Analogues of L-ribofuranosides.J Org Chem1999,64,4173-4178.
41.Corey,E.J.;Winter,R.A.E.A New,Stereospecific Olefin Synthesisfrom1,2-Diols.J Am Chem Soc1963,85,2677-2678.
42.Ando,M.;Ohhara,H.;Takase,K.A mild and stereospecific conversion ofvicinal diols into olefins via 2-methoxy-1,3-dioxolane derivatives.ChemLetter1986,15,879-882.
43.Manchand,P.S.;Belica,P.S.;Holman,M.J.;Huang,T.N.;Maehr,H.;Tam,S.Y.K.;Yang,R.T.Syntheses of the anti-AIDS drug2',3'-dideoxycytidine fromcytidine.J Org Chem1992,57,3473-3478.
44.Robins,M.J.;Hansske,F.;Low,N.H.;Park,J.I.A mild conversion ofvicinal diols to alkenes.Efficient transformation of ribonucleosides into2'-ene and2',3'-dideoxynucleosides.Tetrahedron Lett1984,25,367-370.
45.Van Aerschot,A.;Everaert,D.;Balzarini,J.;Augustyns,K.;Jie,L.;Janssen,G.;Peeters,O.;Blaton,N.;De Ranter,C.;De Clercq,E.;et al.Synthesis andanti-HIV evaluation of2',3'-dideoxyribo-5-chloropyrimidine analogues:reducedtoxicity of5-chlorinated2',3'-dideoxynucleosides.J Med Chem1990,33,1833-9.
46.Tassopoulos,N.C.;Volpes,R.;Pastore,G.;Heathcote,J.;Buti,M.;Goldin,R.D.;Hawley,S.;Barber,J.;Condreay,L.;Gray,D.F.Efficacy of lamivudine inpatients with hepatitis B e antigen-negative/hepatitis B virus DNA-positive(precore mutant)chronic hepatitis B.Lamivudine Precore Mutant Study Group.
Hepatology1999,29,889-96.
47.Das,K.;Xiong,X.;Yang,H.;Westland,C.E.;Gibbs,C.S.;Sarafianos,S.G.;Arnold,E.Molecular modeling and biochemical characterization reveal themechanism of hepatitis B virus polymerase resistance to lamivudine(3TC)andemtricitabine(FTC).J Virol2001,75,4771-9.
48.Chong,Y.;Chu,C.K.Understanding the molecular mechanism of drugresistance of anti-HIV nucleosides by molecular modeling.Front Biosci2004,9,164-86.
49.Yadav,V.;Chu,C.K.Molecular mechanisms of adefovir sensitivity andresistance in HBV polymerase mutants:a molecular dynamics study.Bioorg MedChem Lett2004,14,4313-7.
50.Langley,D.R.;Walsh,A.W.;Baldick,C.J.;Eggers,B.J.;Rose,R.E.;Levine,S.M.;Kapur,A.J.;Colonno,R.J.;Tenney,D.J.Inhibition of hepatitis B viruspolymerase by entecavir.J Virol2007,81,3992-4001.
51.Sun,G.;Voigt,J.H.;Marquez,V.E.;Nicklaus,M.C.Prosit,an onlineservice to calculate pseudorotational parameters of nucleosides andnucleotides.Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids2005,24,1029-32.
52.Chong,Y.;Chu,C.K.Understanding the unique mechanism of L-FMAU(clevudine)against hepatitis B virus:molecular dynamics studies.Bioorg MedChem Lett2002,12,3459-62.
参考文献(第二组)
1.合并进入文本的化合物数据
2.合并进入文本的化合物数据
3.Chu,C.K.,T.Ma,K.Shanmuganathan,C.Wang,Y.Xiang,S.B.Pai,G.Q.Yao,J.P.Sommadossi,and Y.C.Cheng.1995.Use of2'-fluoro-5-methyl-beta-L-arabinofuranosyluracil as a novel antiviral agent for hepatitis B virus andEpstein-Barr virus.Antimicrobial agents and chemotherapy39:979.
4.Crimmins,M.T.1998.New developments in the enantioselectivesynthesis of cyclopentyl carbocyclic nucleosides.Tetrahedron54:9229-9272.
5.Delaney,W.E.,S.Locarnini,and T.Shaw.2001.Resistance of hepatitis Bvirus to antiviral drugs:current aspects and directions for futureinvestigation.Antiviral chemistry&chemotherapy12:1-35.
5.Dey,S.,and P.Garner.2000.Synthesis of tert-butoxycarbonyl(Boc)-protected purines.The Journal of Organic Chemistry65:7697-7699.
6.Ferrero,M.,and V.Gotor.2000.Biocatalytic selective modifications ofconventional nucleosides,carbocyclic nucleosides,and C-nucleosides.ChemicalReviews100:4319-4348.
7.Ganem,D.,and A.M.Prince.2004.Hepatitis B virus infection—naturalhistory and clinical consequences.New England Journal of Medicine350:1118-1129.
8.Genovesi,E.V.,L.Lamb,I.Medina,D.Taylor,M.Seifer,S.Innaimo,R.J.Colonno,D.N.Standring,and J.M.Clark.1998.Efficacy of the Carbocyclic2'-Deoxyguanosine Nucleoside BMS-200475in the Woodchuck Model of Hepatitis BVirus Infection.Antimicrob.Agents Chemother.42:3209-3217.
9.Iyer,R.P.,Y.Jin,A.Roland,J.D.Morrey,S.Mounir,andB.Korba.2004.Phosphorothioate Di-and Trinucleotides as a Novel Class of Anti-Hepatitis B Virus Agents.Antimicrob.Agents Chemother.48:2199-2205.
10.Jin,Y.H.,P.Liu,J.Wang,R.Baker,J.Huggins,and C.K.Chu.2003.Practicalsynthesis of D-and L-2-cyclopentenone and their utility for the synthesis ofcarbocyclic antiviral nucleosides against orthopox viruses(smallpox,monkeypox,and cowpox virus).The Journal of Organic Chemistry68:9012-9018.
12.Korba,B.E.,and J.L.Gerin.1992.Use of a standardized cell cultureassay to assess activities of nucleoside analogs against hepatitis B virusreplication.Antiviral research19:55-70.
13.Lai,Y.,C.M.Tse,and J.D.Unadkat.2004.Mitochondrial expression ofthe human equilibrative nucleoside transporter1(hENT1)results in enhancedmitochondrial toxicity of antiviral drugs.Journal of Biological Chemistry279:4490.
14.McGuigan,C.,A.Gilles,K.Madela,M.Aljarah,S.Holl,S.Jones,J.Vernachio,J.Hutchins,B.Ames,K.D.Bryant,E.Gorovits,B.Ganguly,D.Hunley,A.Hall,A.Kolykhalov,Y.Liu,J.Muhammad,N.Raja,R.Walters,J.Wang,S.Chamberlain,and G.Henson.2010.Phosphoramidate ProTides of2′-C-Methylguanosine as HighlyPotent Inhibitors of Hepatitis C Virus.Study of Their in Vitro and in VivoProperties.Journal of medicinal chemistry53:4949-4957.
15.Montgomery,J.A.,A.T.Shortnacy-Fowler,S.D.Clayton,J.M.Riordan,andJ.A.Secrist.1992.Synthesis and biological activity of2'-fluoro-2-haloderivatives of9-.beta.-D-arabinofuranosyladenine.Journal of medicinalchemistry35:397-401.
16.Mukaide,M.,Y.Tanaka,T.Shin-I,M.F.Yuen,F.Kurbanov,O.Yokosuka,M.Sata,Y.Karino,G.Yamada,and K.Sakaguchi.2010.Mechanism of EntecavirResistance of Hepatitis B Virus with Viral Breakthrough as Determined byLong-Term Clinical Assessment and Molecular Docking Simulation.Antimicrobialagents and chemotherapy54:882.
17.Sharon,A.,and C.K.Chu.2008.Understanding the molecular basis ofHBV drug resistance by molecular modeling.Antiviral research80:339-353.
18.Sharon,A.,A.K.Jha,and C.K.Chu.2010.Clevudine,to Treat Hepatitis BViral Infection,p.383-408.In J.Fisher and C.R.Ganellin(ed.),Analogue-basedDrug Discovery II.WILEY-VCH Verlag GmbH&Co.:KGaA,Weinheim.
19.Sorrell,M.F.,E.A.Belongia,J.Costa,I.F.Gareen,J.L.Grem,J.M.Inadomi,E.R.Kern,J.A.McHugh,G.M.Petersen,and M.F.Rein.2009.National Institutes ofHealth consensus development conference statement:management of hepatitisB.Hepatology49:S4-S12.
20.Stoeckler,J.D.,C.A.Bell,R.E.Parks Jr,C.K.Chu,J.J.Fox,andM.Ikehara.1982.C(2')-substituted purine nucleoside analogs:Interactions withadenosine deaminase and purine nucleoside phosphorylase and formation ofanalog nucleotides.Biochemical Pharmacology31:1723-1728.
21.Suzuki,Y.,F.Suzuki,Y.Kawamura,H.Yatsuji,H.Sezaki,T.Hosaka,N.Akuta,M.Kobayashi,S.Saitoh,and Y.Arase.2009.Efficacy of entecavir treatment forlamivudine resistant hepatitis B over3years:Histological improvement orentecavir resistance?Journal of gastroenterology and hepatology24:429-435.
22.Villet,S.,A.Ollivet,C.Pichoud,L.Barraud,J.-P.Villeneuve,C.Trépo,and F.Zoulim.2007.Stepwise process for the development of entecavirresistance in a chronic hepatitis B virus infected patient.Journal ofHepatology46:531-538.
23.Walsh,A.W.,D.R.Langley,R.J.Colonno,and D.J.Tenney.2010.Mechanisticcharacterization and molecular modeling of hepatitis B virus polymeraseresistance to entecavir.PloS one5:e9195.
24.Wang,J.,Y.Jin,K.L.Rapp,M.Bennett,R.F.Schinazi,andC.K.Chu.2005.Synthesis,antiviral activity,and mechanism of drug resistance ofD-and L-2',3'-didehydro-2',3'-dideoxy-2'-fluorocarbocyclicnucleosides.Journal of medicinal chemistry48:3736-3748.
25.Yuen,M.F.,and C.L.Lai.2004.Adefovir dipivoxil in chronic hepatitisB infection.Expert Opinion on Pharmacotherapy5:2361-2367.
Claims (26)
1.一种根据以下化学结构的核苷化合物:
其中B是
R2和R1a各自独立地是H或C2-C20酰基基团;并且
R1是
基团;
其中Rp1是C1-C20烷基基团;并且
RP是硝基、氰基、甲氧基、或一被从1至3个卤素取代基取代的C1-C3烷基基团。
2.根据权利要求1所述的化合物,其中RP是被1至3个卤素取代基取代的C1-C3烷基基团并且Rp1是甲基、乙基、异丙基或异丁基。
3.根据权利要求1所述的化合物,其中Rp1是甲基或异丙基。
4.根据权利要求1所述的化合物,其中Rp是被1个卤素基团取代的C1-C3烷基基团。
5.根据权利要求1,2或4任一项所述的化合物,其中Rp1是C1-C4烷基基团。
6.化合物
或其药学上可接受的盐。
7.一种药用组合物,包括有效量的根据权利要求1-6中任一项所述的化合物,可任选地与药学上可接受的载体、添加剂或赋形剂组合。
8.根据权利要求7所述的药用组合物,包括有效量的一另外的抗病毒剂。
9.根据权利要求8所述的组合物,其中所述的另外的抗病毒剂是阿昔洛韦、泛昔洛韦、更昔洛韦、伐昔洛韦、阿糖腺苷、利巴韦林、带状疱疹免疫球蛋白、拉米夫定、阿德福韦二匹伏酯、恩替卡韦、替比夫定、克拉夫定、泰诺福韦或它们的混合物。
10.根据权利要求8所述的组合物,其中所述的另外的抗病毒剂选自下组,该组由以下各项组成:阿德福韦酯、拉米夫定、恩替卡韦、替比夫定、泰诺福韦、恩曲他滨、克拉夫定、伐托他滨、氨多索韦、普雷福韦、racivir、BAM 205、硝唑尼特、UT 231-B、Bay 41-4109、EHT899、日达仙、NM 283、VX-950、SCH 50304、TMC435、VX-500、BX-813、SCH503034、R1626、ITMN-191、R7128、PF-868554、TT033、CGH-759、GI 5005、MK-7009、SIRNA-034、MK-0608、A-837093、GS 9190、ACH-1095、GSK625433、TG4040、A-831、F351、NS5A、NS4B、ANA598、A-689、GNI-104、IDX102、ADX184、GL59728、GL60667、PSI-7851、TLR9激动剂、PHX1766、SP-30及其混合物。
11.根据权利要求8所述的组合物,其中所述的另外的抗病毒剂选自下组,该组由以下各项组成:阿德福韦酯、拉米夫定、恩替卡韦、替比夫定、泰诺福韦、恩曲他滨、克拉夫定、伐托他滨、氨多索韦、普雷福韦、racivir、BAM 205、硝唑尼特、UT 231-B、Bay 41-4109、EHT899、日达仙及其混合物。
12.根据权利要求8所述的组合物,其中所述的另外的抗病毒剂选自下组,该组由以下各项组成:NM 283、VX-950、SCH 50304、TMC435、VX-500、BX-813、SCH503034、R1626、ITMN-191、R7128、PF-868554、TT033、CGH-759、GI 5005、MK-7009、SIRNA-034、MK-0608、A-837093、GS 9190、ACH-1095、GSK625433、TG4040、A-831、F351、NS5A、NS4B、ANA598、A-689、GNI-104、IDX102、ADX184、GL59728、GL60667、PSI-7851、TLR9激动剂、PHX1766、SP-30及其混合物。
13.一种根据权利要求7-12中任一项所述的组合物,进一步与至少一种抗癌剂组合。
14.根据权利要求13所述的组合物,其中所述抗癌剂选自下组,该组由以下各项组成:奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、吉西他滨或其混合物。
15.根据权利要求13所述的组合物,其中所述抗癌剂是一抗代谢药、拓扑异构酶I或II的抑制剂、烷化剂或微管抑制剂。
16.根据权利要求13所述的组合物,其中所述抗癌剂选自下组,该组由以下各项组成:阿地白介素;阿仑单抗;阿利维A酸;别嘌醇;六甲蜜胺;氨磷汀;阿那曲唑;三氧化二砷;天冬酰胺酸酶;BCG活菌;贝沙罗汀胶囊剂;贝沙罗汀凝胶剂;博莱霉素;白消安静脉注射剂;白消安口服剂;卡普睾酮;卡培他滨;脱羧铂氨;卡莫司汀;具有聚苯丙生20植入片的卡莫司汀;塞来昔布;苯丁酸氮芥;顺铂;克拉屈滨;环磷酰胺;阿糖胞苷;阿糖胞苷脂质体;达卡巴嗪;更生霉素;放线菌素D;达贝泊汀α;柔红霉素脂质体;柔红霉素、道诺霉素;地尼白介素、右雷佐生;多西他赛;阿霉素;阿霉素脂质体;丙酸屈他雄酮;Elliott's B溶液;表柔比星;依伯汀α雌氮芥;磷酸依托泊苷;依托泊苷;依西美坦;非格司亭;氮尿苷;氟达拉滨;氟尿嘧啶;氟维司群;吉西他滨、吉姆单抗、奥佐米星;格列卫、醋酸戈舍瑞林;羟基脲;替伊莫单抗;伊达比星;异环磷酰胺;甲磺酸伊马替尼;干扰素α-2a;干扰素α-2b;伊立替康;来曲唑;亚叶酸;左旋咪唑;洛莫司汀氮芥;醋酸甲地孕酮;美法仑;巯基嘌呤;美司钠;甲氨蝶呤;甲氧沙林;丝裂霉素C;米托坦;米托蒽醌;苯丙酸南诺龙;诺莫单抗;LOddC;奥普瑞白介素;奥沙利铂;紫杉醇;帕米膦酸盐;培加酶;培门冬酶;培非司亭;喷司他丁;哌泊溴烷;普卡霉素;光神霉素;卟吩姆钠;丙卡巴肼;米帕林;拉布立酶;利妥昔单抗;沙格司亭;链佐星;talbuvidine;滑石;他莫西芬;替莫唑胺;替尼泊苷;睾内酯;硫鸟嘌呤;噻替派;托泊替康;托瑞米芬;托西莫单抗;曲妥珠单抗;维甲酸;乌拉莫司汀;戊柔比星;伐托他滨;长春碱;长春瑞滨;唑来膦酸盐;及其混合物。
17.一种试剂盒,该试剂盒包括根据权利要求7-16中任一项所述的组合物和向有需要的患者给予所述组合物的说明书。
18.根据权利要求7-12任一项所述的组合物在制备治疗乙型肝炎病毒引起的病毒感染的药物中的用途。
19.根据权利要求18所述的用途,其中所述HBV是HBV的一耐药菌株。
20.根据权利要求19所述的用途,其中所述HBV菌株是rtM204V、rtM204I、rtL180M、rtLM/rtMV或rtN236T。
21.根据权利要求20所述的用途,其中所述HBV耐受拉米夫定和/或阿德福韦。
22.根据权利要求7-12中任一项所述的组合物在制备药物中的用途,所述药物减少有病毒感染风险的患者的病毒感染可能性,所述病毒感染由乙型肝炎病毒引起。
23.根据权利要求13-16任一项所述的组合物在制备药物中的用途,所述药物用于治疗有需要的患者的由HBV感染继发的肝纤维化、肝硬化或癌症。
24.根据权利要求23所述的用途,其中所述癌症是肝细胞癌。
25.根据权利要求13-16任一项所述的组合物在制备药物中的用途,所述药物用于减少患者的HBV感染将恶化至继发于所述感染的肝纤维化、肝硬化或肝癌的可能性。
26.根据权利要求24所述的用途,其中所述组合物是与至少一种抗癌剂联合给药的。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US13/107,713 US8816074B2 (en) | 2009-11-16 | 2011-05-13 | 2′-fluoro-6′-methylene carbocyclic nucleosides and methods of treating viral infections |
US13/107,713 | 2011-05-13 | ||
PCT/US2012/037612 WO2012158552A2 (en) | 2011-05-13 | 2012-05-11 | 2'-fluoro-6'-methylene carbocyclic nuceosides and methods of treating viral infections |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN103827130A CN103827130A (zh) | 2014-05-28 |
CN103827130B true CN103827130B (zh) | 2017-02-15 |
Family
ID=47178419
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201280034528.XA Active CN103827130B (zh) | 2011-05-13 | 2012-05-11 | 2′‑氟‑6′‑亚甲基碳环核苷和治疗病毒感染的方法 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US8816074B2 (zh) |
KR (1) | KR102002886B1 (zh) |
CN (1) | CN103827130B (zh) |
AR (1) | AR086372A1 (zh) |
TW (1) | TWI567074B (zh) |
WO (1) | WO2012158552A2 (zh) |
Families Citing this family (45)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
MY164523A (en) | 2000-05-23 | 2017-12-29 | Univ Degli Studi Cagliari | Methods and compositions for treating hepatitis c virus |
JP2006519753A (ja) | 2002-11-15 | 2006-08-31 | イデニクス(ケイマン)リミテツド | 2’−分枝ヌクレオシドおよびフラビウイルス科ウイルス突然変異 |
MX2012005601A (es) * | 2009-11-16 | 2012-08-01 | Univ Georgia | Nucleosidos carboxiclicos de 2'-fluoro-6'-metileno y metodos para tratar infecciones virales. |
US9700560B2 (en) * | 2009-11-16 | 2017-07-11 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | 2′-fluoro-6′-methylene carbocyclic nucleosides and methods of treating viral infections |
TW201329096A (zh) | 2011-09-12 | 2013-07-16 | Idenix Pharmaceuticals Inc | 經取代羰氧基甲基磷酸醯胺化合物及用於治療病毒感染之藥學組成物 |
US8507460B2 (en) | 2011-10-14 | 2013-08-13 | Idenix Pharmaceuticals, Inc. | Substituted 3′,5′-cyclic phosphates of purine nucleotide compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections |
RU2014136887A (ru) * | 2012-02-14 | 2016-04-10 | Юниверсити Оф Джорджиа Рисерч Фаундэйшн, Инк. | Спиро[2.4]гептаны для лечения инфекций, вызванных flaviviridae |
JP6165848B2 (ja) | 2012-05-22 | 2017-07-19 | イデニク ファーマシューティカルズ エルエルシー | 肝疾患のためのd−アミノ酸化合物 |
US9109001B2 (en) | 2012-05-22 | 2015-08-18 | Idenix Pharmaceuticals, Inc. | 3′,5′-cyclic phosphoramidate prodrugs for HCV infection |
EP2852605B1 (en) | 2012-05-22 | 2018-01-31 | Idenix Pharmaceuticals LLC | 3',5'-cyclic phosphate prodrugs for hcv infection |
SG11201407336PA (en) | 2012-05-25 | 2015-03-30 | Janssen Sciences Ireland Uc | Uracyl spirooxetane nucleosides |
WO2014052638A1 (en) | 2012-09-27 | 2014-04-03 | Idenix Pharmaceuticals, Inc. | Esters and malonates of sate prodrugs |
AP2015008384A0 (en) | 2012-10-08 | 2015-04-30 | Univ Montpellier Ct Nat De La Rech Scient | 2'-Chloro nucleoside analogs for hcv infection |
EP2909222B1 (en) | 2012-10-22 | 2021-05-26 | Idenix Pharmaceuticals LLC | 2',4'-bridged nucleosides for hcv infection |
CN103804417B (zh) * | 2012-11-13 | 2017-09-19 | 北京美倍他药物研究有限公司 | 抗乙肝病毒药物 |
WO2014099941A1 (en) | 2012-12-19 | 2014-06-26 | Idenix Pharmaceuticals, Inc. | 4'-fluoro nucleosides for the treatment of hcv |
JP2016507569A (ja) * | 2013-02-07 | 2016-03-10 | トビラ セラピューティクス, インコーポレイテッド | ラミブジン結晶塩 |
US9339541B2 (en) | 2013-03-04 | 2016-05-17 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Thiophosphate nucleosides for the treatment of HCV |
US9309275B2 (en) | 2013-03-04 | 2016-04-12 | Idenix Pharmaceuticals Llc | 3′-deoxy nucleosides for the treatment of HCV |
EP2981542B1 (en) | 2013-04-01 | 2021-09-15 | Idenix Pharmaceuticals LLC | 2',4'-fluoro nucleosides for the treatment of hcv |
EP3004130B1 (en) | 2013-06-05 | 2019-08-07 | Idenix Pharmaceuticals LLC. | 1',4'-thio nucleosides for the treatment of hcv |
WO2015013352A2 (en) * | 2013-07-25 | 2015-01-29 | Patel Hasmukh B | Nucleoside phosphoramidates and phosphoramidites |
US20150037282A1 (en) | 2013-08-01 | 2015-02-05 | Idenix Pharmaceuticals, Inc. | D-amino acid phosphoramidate pronucleotides of halogeno pyrimidine compounds for liver disease |
WO2015077360A2 (en) * | 2013-11-20 | 2015-05-28 | Idenix Pharmaceuticals, Inc. | Cyclopentane and cyclopentene nucleoside analogs for the treatment of hcv |
US9334273B1 (en) * | 2014-03-05 | 2016-05-10 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Efficient and stereoselective synthesis of 2′-fluoro-6′-methylene-carbocyclic adenosine (FMCA) |
EP3131914B1 (en) | 2014-04-16 | 2023-05-10 | Idenix Pharmaceuticals LLC | 3'-substituted methyl or alkynyl nucleosides for the treatment of hcv |
CN104706651A (zh) * | 2015-02-13 | 2015-06-17 | 新昌县大成生物科技有限公司 | 吉西他滨衍生物的组合物及用途 |
CN104650169A (zh) * | 2015-02-13 | 2015-05-27 | 新昌县大成生物科技有限公司 | 一种吉西他滨衍生物、制备方法及用途 |
AU2016229966B2 (en) | 2015-03-06 | 2018-09-27 | Atea Pharmaceuticals, Inc. | Beta-D-2'-deoxy-2'alpha-fluoro-2'-beta-C-substituted-2-modified-N6-substituted purine nucleotides for HCV treatment |
MX2018011479A (es) * | 2016-04-07 | 2019-01-10 | Univ Georgia | Sintesis de la 2'-fluoro-6'-metilen-adenosina carbociclica (fmca) y la 2'-fluoro-6'-metilen-guanosina carbociclica (fmcg). |
US10653678B2 (en) | 2016-04-11 | 2020-05-19 | Genfit | Methods of treatment for cholestatic and fibrotic diseases |
SG11201808402RA (en) | 2016-04-11 | 2018-10-30 | Genfit | Methods of treatment for cholestatic and fibrotic diseases |
WO2018013937A1 (en) | 2016-07-14 | 2018-01-18 | Atea Pharmaceuticals, Inc. | Beta-d-2'-deoxy-2'-alpha-fluoro-2'-beta-c-substituted-4'-fluoro-n6-substituted-6-amino-2-substituted purine nucleotides for the treatment of hepatitis c virus infection |
KR102456417B1 (ko) | 2016-09-07 | 2022-10-19 | 아테아 파마슈티컬즈, 인크. | Rna 바이러스 치료를 위한 2'-치환된-n6-치환된 퓨린 뉴클레오티드 |
KR102522060B1 (ko) | 2016-11-07 | 2023-04-14 | 아뷰터스 바이오파마 코포레이션 | 치환된 피리디논 함유 트리시클릭 화합물, 및 그의 사용 방법 |
JP6912100B2 (ja) | 2016-11-16 | 2021-07-28 | 国立研究開発法人国立国際医療研究センター | 抗ウイルス活性等の生理活性を有するヌクレオシド誘導体 |
CN110248951B (zh) | 2017-02-01 | 2022-10-28 | 阿堤亚制药公司 | 用于治疗丙型肝炎病毒的核苷酸半硫酸盐 |
MA49014A (fr) | 2017-03-21 | 2020-02-05 | Arbutus Biopharma Corp | Dihydroindène-4-carboxamides substitués, leurs analogues et procédés d'utilisation correspondant |
CN108938637B (zh) * | 2017-05-18 | 2023-07-21 | 中国科学院上海巴斯德研究所 | 抑制多种病毒感染的药物及其联用 |
KR20200140865A (ko) | 2018-04-10 | 2020-12-16 | 아테아 파마슈티컬즈, 인크. | 간경변증을 갖는 hcv 감염 환자의 치료 |
JPWO2020045628A1 (ja) * | 2018-08-31 | 2021-08-12 | 国立大学法人 鹿児島大学 | 核酸アナログ及び抗b型肝炎ウイルス剤 |
TWI827760B (zh) | 2018-12-12 | 2024-01-01 | 加拿大商愛彼特生物製藥公司 | 經取代之芳基甲基脲類及雜芳基甲基脲類、其類似物及其使用方法 |
CN111434663B (zh) * | 2019-01-14 | 2022-05-10 | 刘沛 | 一种恩替卡韦中间体及其合成方法和恩替卡韦的合成方法 |
US10874687B1 (en) | 2020-02-27 | 2020-12-29 | Atea Pharmaceuticals, Inc. | Highly active compounds against COVID-19 |
US20230357168A1 (en) * | 2022-04-15 | 2023-11-09 | The Chinese University Of Hong Kong | Carbobicyclic nucleosides for treatment of viral infection |
Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1051180A (zh) * | 1989-10-03 | 1991-05-08 | 惠尔康基金会集团公司 | 用于治疗的核苷 |
US5340816A (en) * | 1990-10-18 | 1994-08-23 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Hydroxymethyl(methylenecyclopentyl) purines and pyrimidines |
CN1100303A (zh) * | 1993-05-25 | 1995-03-22 | 耶鲁大学 | 作为抗乙肝(hbv)及抗hiv药物的l-2′,3′,-二去氧核苷类似物 |
US20020198171A1 (en) * | 1998-02-25 | 2002-12-26 | Schinazi Raymond F. | 2'-fluoronucleosides |
US20040110718A1 (en) * | 2000-08-30 | 2004-06-10 | Rene Devos | Anti-HCV nucleoside derivatives |
US20040157793A1 (en) * | 2002-11-12 | 2004-08-12 | Stuyver Lieven J. | Modified nucleosides as antiviral agents |
US20070042940A1 (en) * | 2002-06-28 | 2007-02-22 | Lacolla Paola | Modified 2' and 3'-nucleoside prodrugs for treating flaviviridae infections |
US20070225249A1 (en) * | 2006-03-23 | 2007-09-27 | Junxing Shi | 2'-Fluoronucleoside phosphonates as antiviral agents |
CN102725302A (zh) * | 2009-11-16 | 2012-10-10 | 乔治亚大学研究基金公司 | 2’-氟-6’-亚甲基碳环核苷和治疗病毒感染的方法 |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4396623A (en) | 1981-08-26 | 1983-08-02 | Southern Research Institute | Carbocyclic analogs of uracil nucleosides as antiviral agents |
KR20080059679A (ko) | 2000-03-29 | 2008-06-30 | 조지타운 유니버시티 | 델타형 간염 바이러스 감염의 치료방법 |
-
2011
- 2011-05-13 US US13/107,713 patent/US8816074B2/en active Active
-
2012
- 2012-05-11 CN CN201280034528.XA patent/CN103827130B/zh active Active
- 2012-05-11 WO PCT/US2012/037612 patent/WO2012158552A2/en active Application Filing
- 2012-05-11 AR ARP120101680A patent/AR086372A1/es unknown
- 2012-05-11 TW TW101116853A patent/TWI567074B/zh active
- 2012-05-11 KR KR1020137033144A patent/KR102002886B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1051180A (zh) * | 1989-10-03 | 1991-05-08 | 惠尔康基金会集团公司 | 用于治疗的核苷 |
US5340816A (en) * | 1990-10-18 | 1994-08-23 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Hydroxymethyl(methylenecyclopentyl) purines and pyrimidines |
CN1100303A (zh) * | 1993-05-25 | 1995-03-22 | 耶鲁大学 | 作为抗乙肝(hbv)及抗hiv药物的l-2′,3′,-二去氧核苷类似物 |
US20020198171A1 (en) * | 1998-02-25 | 2002-12-26 | Schinazi Raymond F. | 2'-fluoronucleosides |
US20040110718A1 (en) * | 2000-08-30 | 2004-06-10 | Rene Devos | Anti-HCV nucleoside derivatives |
US20070042940A1 (en) * | 2002-06-28 | 2007-02-22 | Lacolla Paola | Modified 2' and 3'-nucleoside prodrugs for treating flaviviridae infections |
US20040157793A1 (en) * | 2002-11-12 | 2004-08-12 | Stuyver Lieven J. | Modified nucleosides as antiviral agents |
US20070225249A1 (en) * | 2006-03-23 | 2007-09-27 | Junxing Shi | 2'-Fluoronucleoside phosphonates as antiviral agents |
CN102725302A (zh) * | 2009-11-16 | 2012-10-10 | 乔治亚大学研究基金公司 | 2’-氟-6’-亚甲基碳环核苷和治疗病毒感染的方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Antiviral activity of novel 2"-fluoro-6"-methylene-carbocyclic adenosine against wild-type and drug-resistant hepatitis B virus mutants;Jianing Wang,等;《Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters》;20110901;第21卷;第6328页左栏第1-7行,第6329页左栏第41-42行,第6329页右栏第1-42行,第6330页左栏第1-2行,第6330页右栏第27-35行,方案1,表1 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR102002886B1 (ko) | 2019-07-23 |
AR086372A1 (es) | 2013-12-11 |
CN103827130A (zh) | 2014-05-28 |
WO2012158552A2 (en) | 2012-11-22 |
US20110244027A1 (en) | 2011-10-06 |
US8816074B2 (en) | 2014-08-26 |
WO2012158552A3 (en) | 2013-01-24 |
TW201311691A (zh) | 2013-03-16 |
TWI567074B (zh) | 2017-01-21 |
KR20140033124A (ko) | 2014-03-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103827130B (zh) | 2′‑氟‑6′‑亚甲基碳环核苷和治疗病毒感染的方法 | |
CN102725302B (zh) | 2'-氟-6'-亚甲基碳环核苷和治疗病毒感染的方法 | |
TWI790704B (zh) | 含腈之抗病毒化合物類 | |
US11082386B2 (en) | 2′-fluoro-6′-methylene carbocyclic nucleosides and methods of treating viral infections | |
CA2882201C (en) | Tenofovir prodrug and pharmaceutical uses thereof | |
TW201829412A (zh) | 抗病毒之替諾福韋(tenofovir)之脂系酯前藥 | |
CN104470927A (zh) | 一种jak激酶抑制剂的硫酸氢盐及其制备方法 | |
CN102648201B (zh) | N-((1r,2s,5r)-5-(叔丁基氨基)-2-((s)-3-(7-叔丁基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-4-基氨基)-2-氧代吡咯烷-1-基)环己基)乙酰胺,趋化因子受体活性的双重调节剂,晶形及方法 | |
CN104119385B (zh) | 核苷类似物的磷酸酯前药及其应用 | |
Yang et al. | Synthesis and biological evaluation of 4-substituted fluoronucleoside analogs for the treatment of hepatitis B virus infection | |
Vardanyan et al. | Antiviral drugs | |
KR102556482B1 (ko) | 테트라히드로이소퀴놀린계 화합물, 이의 제조 방법, 테트라히드로이소퀴놀린계 화합물을 포함하는 약물 조성물 및 이의 용도 | |
EP3172189A1 (en) | Phenyl and tertbutylacetic acid substituted pyridinones having anti-hiv effects | |
KR20230030056A (ko) | Pd-l1을 표적화하기 위한 방법 및 조성물 | |
US7906518B2 (en) | Therapeutic compounds | |
US7820811B2 (en) | Pro-drugs of adenosine receptor agonists | |
Saleh | Part I: Synthesis of nucleobase lactams: Putative anti-HIV drugs. Part II. Synthesis of potential soluble epoxide hydrolase (sEH) inhibitors |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: DE Ref document number: 1194385 Country of ref document: HK |
|
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: GR Ref document number: 1194385 Country of ref document: HK |