CN103820550A - 边鸡屠宰性能的分子遗传标记及应用 - Google Patents

边鸡屠宰性能的分子遗传标记及应用 Download PDF

Info

Publication number
CN103820550A
CN103820550A CN201410066978.8A CN201410066978A CN103820550A CN 103820550 A CN103820550 A CN 103820550A CN 201410066978 A CN201410066978 A CN 201410066978A CN 103820550 A CN103820550 A CN 103820550A
Authority
CN
China
Prior art keywords
slaughter
chicken
slaughter performance
samples
molecular genetic
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201410066978.8A
Other languages
English (en)
Inventor
张跟喜
丁馥香
王金玉
张丽
谢恺舟
戴国俊
张李俊
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Yangzhou University
Original Assignee
Yangzhou University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Yangzhou University filed Critical Yangzhou University
Priority to CN201410066978.8A priority Critical patent/CN103820550A/zh
Publication of CN103820550A publication Critical patent/CN103820550A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/124—Animal traits, i.e. production traits, including athletic performance or the like
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及家禽育种领域，具体涉及一种边鸡屠宰性能的分子遗传标记及应用。本发明公开了肌肉生长抑制素（myostatin,）基因作为边鸡屠宰性能分子遗传标记的应用。具体是扩增得到MSTN基因（162bp）的目的片段，目的片段经限制性内切酶BbvI酶切，凝胶电泳后用银染显色，得到DNA的酶切图谱，根据图谱中条带的数量和大小对待测样本的屠宰性能进行判断和和并选择符合育种目的的样本；其中仅有162bp条带的为屠宰性能高的纯合型样本，仅有127bp条带的为屠宰性能低的纯合型样本。本发明方法简单快捷，且不受外界环境的影响，可以用于边鸡屠宰性能的分子遗传标记，进行标记辅助选择。

Description

边鸡屠宰性能的分子遗传标记及应用
技术领域
本发明涉及家禽育种领域，具体涉及一种用分子标记提高边鸡屠宰性能的方法。
背景技术
屠宰性能是衡量鸡种性能最重要的依据之一，是肉鸡育种工作者着力改良的性状。屠宰性状为数量性状，由多基因控制，随着分子生物学技术的发展，遗传学家和育种学家认识到控制数量性状的基因并非在基因组中随机分布，且存在影响数量性状的主效基因。目前，在育种中对鸡屠宰性能的筛选方法主要是通过传统育种方法，因此周期长，效率低下，寻找到合适的DNA标记用于屠宰性能的辅助选择能增强选择的准确性、加快遗传进展。
肌肉生长抑制素（myostatin,MSTN）基因，也称生长分化因子-8基因，研究证实它具有抑制骨骼肌生长的作用，是骨骼肌生长的负调控因子，主要通过抑制MyoD家族成员的转录活性负向调控肌细胞的生长发育。因而研究肌肉生长抑制素基因的突变对鸡屠宰性能的影响，进而用于标记辅助选择具有很大的可能性。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种利用分子标记提高边鸡屠宰性能的方法，该方法利用MSTN基因BbvI酶切图谱对边鸡屠宰性能进行标记辅助选择，不受环境影响。
本发明公开了MSTN基因作为边鸡屠宰性能分子遗传标记的应用。
基于上述应用的利用分子标记提高边鸡屠宰性能的方法是：提取待测样本的基因组DNA，经序列如SEQ ID NO：1-2所示的特异性引物扩增得到162bp的目的片段，目的片段经限制性内切酶BbvI酶切，凝胶电泳后用银染显色，得到DNA的酶切图谱，根据图谱中条带的数量和大小对待测样本的屠宰性能进行判断并选择符合育种目的的样本。仅有162bp条带的为屠宰性能高的纯合型样本，仅有127bp条带的为屠宰性能低的纯合型样本。
本发明的原理是：利用前期研究发现的MSTN基因外显子1的BbvI酶切位点，针对该位点设计特异性引物扩增边鸡基因组DNA，扩增产物经BbvI酶切产生3种基因型（GG、GA和AA）。该单核苷酸突变能稳定遗传，选择的检测方法简单快捷，且不受外界环境的影响，可以用于边鸡屠宰性能的分子遗传标记，进行标记辅助选择。
所述分子遗传标记在应用于育种筛选时，选择MSTN基因中不含BbvI酶切位点的个体，即屠宰性能高的纯合型样本（AA型）。
附图说明
图1是MSTN基因BbvI酶切产物图，Marker为GM331。
具体实施方式
实施例1
1.试验材料
第7世代边鸡核心群母鸡血样299份、公鸡血样81份，所建立的第一世代AA系和GG系母鸡各50只均采自山西省农科院畜牧兽医研究所。用肝素钠作为抗凝剂，从第7世代边鸡核心群母鸡静脉各采集血样0.5mL，采用常规苯酚-氯仿法抽提基因组DNA，测定DNA的浓度后备用。
2.引物设计和PCR扩增
2.1酶切引物的设计
根据GenBank中鸡MSTN基因序列（GenBank登录号为AF346599）针对外显子1的BbvI位点设计1对引物，扩增产物大小为162bp。引物序列如下：
P1：F:5′-GCATTAGCAGGGACGTTAT-3′（SEQ ID NO：1）
R:5′-ACTCCGTAGGCATTGTGAT-3′（SEQ ID NO：2）
2.2PCR扩增
PCR扩增反应为25μL体系，包括：上、下游引物（10μmol/L）2μL；dNTPs（2mmol/L）2.5μL；Taq DNA聚合酶（5U/μL）0.2μL；DNA模板（50ng/μL）2μL；Mg2+（25mmol/L）1.5μL；10×PCR缓冲液2.5μL；超纯水14.3μL。PCR扩增反应程序：94℃变性6min；94℃变性30s，56℃复性30s，72℃延伸30s，进行30个循环；最后72℃延伸10min；10℃保存。
PCR反应完成后，用10%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测扩增结果，硝酸银染色，UV凝胶成像系统进行凝胶成像。
2.3PCR-RFLP检测及选育
PCR产物用BbvI酶切，以检测多态性。酶切反应总体积为20μL，超纯水16.5μL，BbvI酶(10u/μL)0.5μL，10×buffer2μL，37℃酶切2h，酶切产物用交联度为（Acr:Bis）29:1的10%的非变性聚丙烯酰胺凝胶检测，200V电泳5h，硝酸银染色。酶切图谱如图1所示，显示3种基因型，仅有162bp目的片段的样本不含BbvI酶切位点，命名为AA型；仅有127bp的为含有BbvI酶切位点的纯合型，命名为GG型；同时含有162bp和127bp的为杂合型样本，命名为GA型。当编码区234bp处为G时，BbvI酶切产生127bp和35bp的片段；当C.234bp处为A时，无BbvI酶切位点。
根据边鸡公母鸡MSTN基因BbvI酶切图谱中条带的数量和大小辨别扩增产物中是否含有BbvI酶切位点。根据基因型判定结果分别选留AA型公母鸡以及GG型公母鸡作为种鸡。人工受精后采集种蛋，建立AA和GG系边鸡群体。
2.4边鸡AA和GG系母鸡屠宰性能的比较
在16周龄时，分别屠宰50只建立的AA和GG系母鸡，测定其屠宰性状。AA和GG系母鸡屠宰性能的比较结果见表1。由表可见，AA系的屠体重、全净膛重、半净膛重、胸肌重、腿肌重、胸肌率都极显著的高于GG系（P<0.01），分别高出18.6%、19.5%、19.0%、27.3%、19.9%和6.5%。在育种时选择AA型（即不含BbvI酶切位点的MSTN基因）可作为边鸡屠宰性能的分子标记辅助选择方法。
表1边鸡母鸡AA和GG系屠宰性能的比较
屠宰性状 AA系（n=50） GG系（n=50）
屠体重(g) 1047.02±13.56A 882.62±10.20B
全净膛重(g) 803.59±11.04A 672.20±8.41B
半净膛重(g) 964.42±12.71A 810.27±9.43B
胸肌重(g) 139.42±3.51A 109.52±2.33B
腿肌重(g) 188.43±3.17A 157.18±2.63B
胸肌率(g) 17.30±0.30A 16.25±0.23B
腿肌率(g) 23.47±0.28 23.36±0.21
注：同行数据不同大写字母表示差异极显著（P<0.01）。
Figure IDA0000470170090000011

Claims (2)

1.肌肉生长抑制素基因MSTN作为边鸡屠宰性能分子遗传标记的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述应用是：提取待测样本的基因组DNA，经序列如SEQ ID NO：1-2所示的特异性引物扩增得到162bp的目的片段，目的片段经限制性内切酶BbvI酶切，凝胶电泳后用银染显色，得到DNA的酶切图谱，根据图谱中条带的数量和大小对待测样本的屠宰性能进行判断和和并选择符合育种目的的样本；其中仅有162bp条带的为屠宰性能高的纯合型样本，仅有127bp条带的为屠宰性能低的纯合型样本。
CN201410066978.8A 2014-02-26 2014-02-26 边鸡屠宰性能的分子遗传标记及应用 Pending CN103820550A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410066978.8A CN103820550A (zh) 2014-02-26 2014-02-26 边鸡屠宰性能的分子遗传标记及应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410066978.8A CN103820550A (zh) 2014-02-26 2014-02-26 边鸡屠宰性能的分子遗传标记及应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN103820550A true CN103820550A (zh) 2014-05-28

Family

ID=50755837

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410066978.8A Pending CN103820550A (zh) 2014-02-26 2014-02-26 边鸡屠宰性能的分子遗传标记及应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103820550A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106367519A (zh) * 2016-09-30 2017-02-01 扬州大学 利用mstn基因提高京海黄鸡屠宰性能的方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
张跟喜: "边鸡遗传多样性及Myostatin 基因对生长和繁殖形状的遗传效应研究", 《优秀博士论文全文数据库》 *
张跟喜等: "MSTN基因外显子3的多态性及其边鸡生长形状的关联分析", 《中国畜牧兽医》 *
张跟喜等: "肌肉生长抑制素基因(MSTN)夕b子1的多态性及其与边鸡生长性状的关联分析", 《农业生物技术学报》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106367519A (zh) * 2016-09-30 2017-02-01 扬州大学 利用mstn基因提高京海黄鸡屠宰性能的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102134593B (zh) 半滑舌鳎性别特异微卫星标记及其在超雌鱼鉴定中的应用
CN102352410B (zh) 一种用dna标记快速提高边鸡产蛋数的方法
CN106520939B (zh) 一种鲷鱼种质鉴定的方法及其应用
CN103667489B (zh) 一种鉴定家鸭、番鸭和半番鸭的dna标记方法
CN104328119B (zh) 团头鲂生长性状相关的微卫星分子标记及应用
CN105624322A (zh) 一种开发黄姑鱼ssr分子标记用于种群鉴定方法
CN103525814A (zh) 一种半滑舌鳎性别特异scar标记及应用方法
CN104419705B (zh) Snp标记及其应用
CN102912017B (zh) 一种快速准确鉴定乌鳢、斑鳢及杂交鳢的方法
CN105331724A (zh) 一种半滑舌鳎性染色体连锁的dna片段及其应用
CN102321750A (zh) 一种用分子标记快速筛选边鸡体重增长程度的方法
CN103484459B (zh) 青虾est-ssr分子标记的引物组、标记方法及应用
CN107937568B (zh) 一种prlr基因的应用及其方法
CN103820550A (zh) 边鸡屠宰性能的分子遗传标记及应用
CN102134600B (zh) 一种朱鹮性别鉴定的pcr方法
CN105671170A (zh) 一种用于鉴别鸡匍匐性状的引物组合及其应用
CN115948387A (zh) 用于鉴定五华三黄鸡品种的snp引物组合、方法及应用
CN104531688A (zh) 一种蜘蛛线粒体基因组全序列扩增引物及扩增方法
CN103805709A (zh) 边鸡肌纤维特性的分子遗传标记及应用
CN103031307A (zh) PPAR α基因及用作为鹅脂肪沉积相关遗传标记的方法
CN103789445B (zh) 京海黄鸡12周龄体重的分子遗传标记及应用
CN106755422A (zh) 一种与黄牛生长性状相关的meg3基因snp的检测方法及其应用
CN103276086B (zh) 京海黄鸡开产日龄的分子遗传标记及应用
CN102251051A (zh) 一种检测边鸡mstn基因型的试剂盒
CN106282391B (zh) 鲤种质资源鉴定方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20140528