CN103808940A - 粗糙肌肤的评价方法 - Google Patents

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Abstract

本发明的课题在于，提供使用不会给用户造成负担、又可简便且确实地评价是否为粗糙肌肤的生物化学指标的新型评价方法。通过胶带剥离法等非侵袭式地采集皮肤角质层，通过测定其中所含有的半乳糖凝集素-7的表达量来评价粗糙肌肤的程度。

Description

粗糙肌肤的评价方法
技术领域
本发明涉及粗糙肌肤的评价方法。
背景技术
人体的皮肤经常与外界接触，会受到各种各样的刺激。其代表性刺激为紫外线。即使也有紫外线不使肌肤在外观上有较大变化的情况，但也会诱发皮肤细胞的DNA裂解、胶原蛋白的变性等而成为皮肤老化的原因。紫外线经常不断地给肌肤施加应激。且对于女性来说，洗脸、化妆等日常的行为也会给皮肤施加刺激，此种皮肤的外部刺激蓄积时，会形成被认为是肌肤粗糙的状态。肌肤粗糙虽指一时的症状，但该症状持续的状态即称为“粗糙肌肤”。
“粗糙肌肤”是指干燥、干巴巴的皮肤症状持续的状态的总称，其最显著的临床表现为鳞屑。此种粗糙肌肤状态和皮肤的屏障功能之间存在密切的关系，已知粗糙肌肤状态越严重，作为屏障功能的客观指标的经皮水分丧失量（以下称为TEWL）越高，作为由物理·化学的主要因素而产生的肌肤粗糙状态的指标，测定TEWL（非专利文献1：日皮会志（日语原名：「日皮会誌」）、第92卷、第1001页-1003页、1982年）。
该粗糙肌肤被认为是如前所述的紫外线、化学物质、其他各种各样的刺激影响皮肤内部环境，从而产生表皮的屏障功能受到抑制的结果。
此种状况呈现在皮肤上时，会产生如下变化，皮肤内部影响细胞增殖·分化的前列腺素、细胞因子的浓度上升（非专利文献2：J.Invest.Dermatol、Vol.81、519-523、1983）、核酸（DNA）合成机能的亢进（非专利文献3：Journal of Clinical Investigation、Vol.87、1668-1673、1991），与屏障功能有密切关系的TEWL上升（非专利文献4：J.Lipid.Res.、Vol.26、418-427、1985、Vol.30、323-333、1989）等。但是，有关这些现象的关联性的报道很少，其详细机理也不明了。因此，粗糙肌肤的指标至今为止还依赖于本人的申报、肉眼直观的判断，还不存在明确的指标。
此外还存在潜在的粗糙肌肤状态的人，但难于检测此种表面未显现的潜在的粗糙肌肤。该潜在的粗糙肌肤状态的肤质之一也可称为是所谓的敏感肌肤。
配合在化妆品及医药部外品（quasi drug）等的皮肤外用剂中的有效成分的有用性评价按照通过体外（in vitro）试验的1次筛选、通过使用动物的试验的2次筛选、使用人体的使用试验的顺序进行。但是，在如粗糙肌肤那样机理复杂且无法特定其主要原因的情况下，实施着眼于参与各机理的步骤的生物体外试验非常困难，最终的评价只能是在将粗糙肌肤的程度作为指标的人体上进行试验，此时的指标无论如何也不过是以感官评价和肉眼、显微观察（显微镜观察）等非定量的方法为主流。
近年来，为解决上述课题提出了一些方案。专利文献1（日本特开平11-76168号公报）中提出了使皮肤与二苯基苦基苯肼（DPPH）的醇溶液接触，测量着色的程度的方法。专利文献2（国际公开第2006／098523号）中公开了以皮肤角质层的鳞状细胞癌相关抗原为指标的方法。此外，专利文献3（国际公开第98／40045号）中公开了以真皮胶原纤维束的有序度的变化量为指标的方法。进而还在专利文献4（日本特开2010-71917号公报）中提出了用水从皮肤中提取吡咯烷酮羧酸，用其提取量来评价的方法。
本发明发现了以往完全未注意到的半乳糖凝集素-7的新功能，并且是首次利用该功能的提案。半乳糖凝集素是指识别结合半乳糖（β-半乳糖苷结构）或交联糖链之间的蛋白质的总称。阐明了其参与发生、分化、形态形成、肿瘤转移、细胞凋亡（细胞死亡）等的生命现象。现在，已知作为哺乳类的半乳糖凝集素有半乳糖凝集素-1～-15的15种。为人体的情况下，不存在相当于-5，-6，-14，-15的半乳糖凝集素，目前有10种，今后有进一步增加的可能性。半乳糖凝集素从其形态上大致分为3个亚型。第1亚型具有1个与糖链结合的部分（糖链结合结构域2：糖识别结构域（carbohydrate recognition domain,CRD）的雏型（proto-type），第2亚型是在1个糖链结合结构域具有不与糖链结合而与其他结构域链接的结构的嵌合型（chimera-type），第3类型为由2个糖链结合结构域形成的衔接型（tandem-repeat-type）。雏型（proto-type）和嵌合型（chimera-type）只具有1个糖链结合结构域，但通过2个分子结合（形成二聚体），而实质上与衔接型（tandem-repeat-type）相同为与2个糖链结合。
从哺乳动物复层上皮中检测出半乳糖凝集素-7，在角质形成细胞中从基底层到角质层均检测出半乳糖凝集素-7。复层上皮分布于表皮、食道上皮、鳞状化的气管上皮、外宫颈上皮、下咽部～喉头上皮、肛门上皮等。由于角质形成细胞中的半乳糖凝集素-7的表达不受Ca2+浓度的影响，因而可知其也不受角质化程度的控制（非专利文献5：Differetiation、1998、63、159-168)。另一方面，未确认出在成纤维细胞中的表达。此外，还可知半乳糖凝集素-7通过维甲酸微弱减少（非专利文献6：DevelopmentalBiology168、259-271(1995))。
有报道指出半乳糖凝集素-7被p53（癌抑制基因）诱导，被指定为PIG1（P53-诱导基因（induced gene1）），参与细胞凋亡。引起半乳糖凝集素-7的表达被强化的胱天蛋白酶-3的活化和多聚（ADP-核糖）聚合酶的裂解（非专利文献7：J Biol Chem.2002Feb1;277(5):3487-97.Epub2001Nov8.）。已知用UVB照射角质形成细胞时，半乳糖凝集素-7的表达剧增，经过JNK-BaX途径，而引起角质形成细胞的细胞凋亡（非专利文献8：Proc Natl Acad Sci U S A.1999Sep28;96(20):11329-34）。
此外，在专利文献5（日本特开2006-182744号公报）中，公开了半乳糖凝集素-7表达促进物质的筛选方法及通过涂抹配合半乳糖凝集素-7成分的组合物的保湿作用和皮肤症状改善作用。而且，在专利文献6（日本特开平9-216833号公报）中公开了含有1种或2种以上半乳糖凝集素的外用剂具有预防、改善皮肤的皱纹、弹性降低等的老化症状及创伤治愈效果。
现有技术文献
专利文献
专利文献1日本特开平11-76168号公报
专利文献2国际公开第2006／098523号公报
专利文献3国际公开第98／40045号公报
专利文献4日本特开2010-71917号公报
专利文献5日本特开2006-182744号公报
专利文献6日本特开平9-216833号公报
非专利文献
非专利文献1日皮会志、第92卷、第1001页-1003页、1982年
非专利文献2J.Invest.Dermatol、Vol.81、519-523、1983
非专利文献3Journal of Clinical Investigation、Vol.87、1668-1673、1991
非专利文献4J.Lipid.Res.、Vol.26、418-427、1985、Vol.30、323-333、1989
非专利文献5Differetiation、1998、63、159-168
非专利文献6Developmental Biology168、259-271(1995)
非专利文献7J Biol Chem.2002Feb1;277(5):3487-97.Epub2001Nov8.
非专利文献8Proc Natl Acad Sci U S A.1999Sep28;96(20):11329-34
发明内容
如上所述，期待有评价粗糙肌肤程度的客观评价方法。本发明为非外科式地摘取皮肤，不给皮肤施加刺激的方法，本发明的课题在于提供使用可简便且确实地评价是否为粗糙肌肤的生物化学指标的新型评价方法。
本发明如下构成。
（1）一种粗糙肌肤的程度的评价方法，其特征在于，测定皮肤角质层的半乳糖凝集素-7的表达量。
（2）一种粗糙肌肤的程度的评价方法，其特征在于，将皮肤角质层的半乳糖凝集素-7的表达量与预先或同时测定的正常部位的皮肤的半乳糖凝集素-7的表达量进行对比。
（3）一种敏感肌肤的评价方法，其特征在于，将皮肤角质层的半乳糖凝集素-7的表达量与预先或同时测定的正常部位的皮肤的半乳糖凝集素-7的表达量进行对比。
（4）根据（1）或（2）所述的评价方法，其特征在于，具备采集皮肤角质层的采集工序、测定所述采集工序中所采集的角质层细胞中的半乳糖凝集素-7的表达量的测定工序、将所述测定工序中所测定的半乳糖凝集素-7的表达量与健康正常肌肤的皮肤角质层中的半乳糖凝集素-7的表达量进行比较的比较工序。
（5）根据（4）所述的评价方法，其特征在于，采集皮肤的角质层的工序通过胶带剥离法进行。
根据本发明的评价方法，可通过测定角质层中的半乳糖凝集素-7的表达量来评价粗糙肌肤的程度。此外，以该半乳糖凝集素-7表达量为指标，可简便地检测出潜在的粗糙肌肤。进而，因本发明的评价方法用胶带剥离法等简便的操作方法采集评价试样，所以，受试者的负担少，任何人均可简单地进行评价。且因其为生物化学的试验方法，无论谁测定均可得到相同的结果，所以，不需进行如以往那样通过与专家面谈的方式的咨询。
此外，还可通过本发明的方法客观评价化妆品等的效果。
附图说明
图1为测定人体各部位的半乳糖凝集素-7的表达量的图。
图2为测定通过SDS制作的强制粗糙肌肤模型的半乳糖凝集素-7的表达量的图。
图3为测定通过丙酮制作的强制粗糙肌肤模型的半乳糖凝集素-7的表达量的图。
图4为健康正常肌肤的608名的半乳糖凝集素-7表达量和表达频率的图表。
图5为确认半乳糖凝集素-7和TEWL的相关性的图。
图6为表示保湿性高的乳霜连用14天前后的半乳糖凝集素-7的表达量的变化图。
图7为表示保湿性高的乳霜连用14天前后的TEWL值、角质层水分量值的变化图。
具体实施方式
以下，详细说明本发明。
本发明的评价方法的特征在于，以皮肤角质层中的半乳糖凝集素-7的存在量为指标。
本发明中的粗糙肌肤是指在干燥、干巴巴的状态下持续出现鳞屑的症状的肤质。此外，敏感肌肤是指虽无明显的皮肤病变，但易引起不利、有害的反应的肌肤，称为是潜在的粗糙肌肤的肤质。且对外界刺激的抵抗力比健康正常肌肤低，也可以说是容易产生皮肤问题的肌肤。另一方面，健康正常肌肤是指不表现如上所述的粗糙肌肤、敏感肌肤的性质的健康且正常的肌肤。已知敏感肌肤中TEWL增高，高频传导率（角质层水分量）有降低等的趋势。且被称为敏感肌肤的肤质有时会引起皮炎、肌肤粗糙。
角质层为皮肤最外层的组织，具有保护皮肤不受来自体外的异物侵害、刺激的作用。
本发明中的评价对象部位只要是可得到角质层的部位，也可包含任何部位，但作为主要的部位，可列举面部、颈部、上臂部。根据以往的方法，可得到来自上述部位的皮肤的角质层。但是，如前所述，因外科式摘取皮肤等的方法会给用户造成负担，所以，优选胶带剥离、刮擦等的可简便得到角质层的方法。
如此准备的各试样中的半乳糖凝集素-7的表达量可用以往已知的方法测定。例如，可使用基于针对半乳糖凝集素-7的抗体的反应的酶免疫测定法、放射免疫测定法、蛋白质印迹法等的方法。此种测定方法已有市售，作为代表性的半乳糖凝集素-7的酶免疫检验试剂盒，可例示Abcam公司制的Galectin7Human ELISA Kit、R&D systems公司制的ELISA Kit。
从各试样中，将半乳糖凝集素-7经由其自身已知的生物化学的方法、如冻融法、超声波破碎法、匀浆法等来制备可溶性组分。且提取后迅速测定。
因粗糙肌肤与健康正常肌肤相比角质层中的半乳糖凝集素-7的表达量显著高，所以，以角质层中的半乳糖凝集素-7的表达量的多少为指标，可简便地评价应激的蓄积度或肌肤是否是粗糙肌肤。本发明中使用的角质层可用以下简单的方法采集，即如胶带剥离法的仅将角质层的表层部分用角质胶带采集。且本发明不需给皮肤以紫外线、化学物质等的刺激即可测定半乳糖凝集素-7的表达量。因此，不会给用户造成负担即可评价用户的肌肤是否为粗糙肌肤。特别是可简便地选择更适合用户的肌肤的化妆品、化学焕肤剂，由此可避免皮肤炎症等的肌肤问题、副作用，并进一步发挥化妆品的护肤效果。
本发明的评价方法由采集角质层的采集工序、测定所述采集工序中所采集的角质层中的半乳糖凝集素-7的表达量的测定工序、将所述测定工序中所测定的半乳糖凝集素-7的表达量与健康正常肌肤的角质层中的半乳糖凝集素-7的表达量进行比较的比较工序构成。以下就该评价方法进行说明。
首先，将如上所述测定的半乳糖凝集素-7的表达量与受试者自身的健康正常肌肤的角质层中的半乳糖凝集素-7的表达量进行比较。此外，测定受试者的某一评价对象部位的角质层中的半乳糖凝集素-7的表达量，将所测定的半乳糖凝集素-7的表达量与具有健康正常肌肤的人的同一评价对象部位的角质层中的半乳糖凝集素-7的表达量进行比较。具有健康正常肌肤的人的角质层的半乳糖凝集素-7的表达量可通过使用多个具有健康正常肌肤的人的数据的平均值，进行更加客观的评价。更加具体地说，可由随机提取的受试者的半乳糖凝集素-7的表达量分布设定健康正常肌肤的分布。
如此比较的结果，在所测定的半乳糖凝集素-7的表达量显著大于健康正常肌肤的半乳糖凝集素-7的表达量的情况下，评价为应激的蓄积大，即使未呈现出粗糙肌肤，也可判断为作为敏感肌肤的可能性大。该健康正常肌肤的试样可从测定半乳糖凝集素-7的人的皮肤上采集，也可从与测定半乳糖凝集素-7的人不同的人的皮肤上采集。
此外，受试者的某一评价对象部位的角质层中的半乳糖凝集素-7的表达量显著大于具有健康正常肌肤的人的同一评价对象部位的角质层中的半乳糖凝集素-7的表达量的情况下，也评价为应激的蓄积大。而且，即使表面上为未呈现出粗糙肌肤的情况，在该数值显著高的情况下也评价为具有敏感肌肤。
即评价为应激蓄积高的情况下，可根据所测定的半乳糖凝集素-7的表达量的程度评价应激蓄积的程度。所测定的半乳糖凝集素-7的表达量与健康正常肌肤的半乳糖凝集素-7的表达量相比显著多的情况下，该肌肤评价为强烈显示粗糙肌肤的性质。且与健康正常肌肤相比，对外界刺激的抵抗力显著低，判断为极容易产生皮肤问题的可能性大。此外，所测定的半乳糖凝集素-7的表达量与健康正常肌肤的半乳糖凝集素-7的表达量相比仅少量增加的情况下，其肌肤比健康正常肌肤更具有应激的蓄积，对外界刺激的抵抗力低，虽产生皮肤问题的可能性低，但可评价为具有是轻度敏感肌肤的可能性。
以下就具体的实施例进行说明，但本发明不限于以下的实施例。
实施例
1.人体各部位的半乳糖凝集素-7表达量的测定
＜受试者＞
从35名健康正常肌肤的男性女性（包括以往有特应性皮炎（AD）的人）的脸颊、前臂内侧部、臀部采集样品。
＜角质层样品提取方法、蛋白定量＞
在受试者的脸颊、臂、臀部粘贴角质层测试片(ASAHIBIOMED公司)，采集角质层。从角质层测试片上用玻璃珠法（在容器内放入分析物、直径约2mm的玻璃珠和提取液进行振荡提取的方法）使用500μl T-PER提取缓冲液（组织蛋白提取试剂（Tissue Protein Extraction Reagent）赛默飞世尔科技有限公司（Thermo Scientific）制（product#78510））进行角质层蛋白质的提取。各样品的蛋白质的量用Pierce BCA protein Assay Kit(Thermo Scientific#23225)测定。测定时，在10μl所述角质层蛋白质提取液中加入200μl Pierce BCA protein Assay Kit的反应试剂液，在60℃下孵育30分钟后，测定562nm处的吸光度。同时用BSA绘出校正曲线，由吸光度的值算出蛋白质的量。
＜角质层中的半乳糖凝集素-7的测定＞
同样，将从胶带上提取的角质层蛋白质提取液使用R&D systems公司制的ELISA试剂盒（galectin-7：DY1339E）测定半乳糖凝集素-7的表达量。首先，在costar公司制的96孔酶标板（#3590）中，将成为1次抗体的固相化抗体用试剂盒指定的浓度在20℃下过夜使之固相化。其次，用1%BSA、37℃下1小时封闭酶标板，用0.01%Tween-PBS将酶标板洗涤后，各使用100μl成为校正曲线的标样及样品，在25℃下孵育2小时。用0.01%Tween-PBS将酶标板洗涤后，将2次抗体用试剂盒指定浓度在25℃下孵育2小时。进而用0.01%Tween-PBS将酶标板洗涤后，将Streptavidin-HRP用试剂盒指定浓度，在25℃下孵育30分钟。最后，用0.01%Tween-PBS将酶标板洗涤后，将显色底物TMB溶液(Promega,G7431)按100μl/孔加入，在试剂盒指定时间后，加入100μl终止溶液(0.5M硫酸)，测定450nm处的吸光度以算出表达量。
＜结果＞
测定结果如图1所示。
如图1可表明，可确认出日常暴露在外界刺激下的脸颊与所谓的粗糙肌肤通常不出现的臂、臀部（屁股）相比，半乳糖凝集素-7的表达量显著高。由该试验结果表明，作为粗糙肌肤、敏感肌肤的指标，半乳糖凝集素-7非常有用。
2.人工粗糙肌肤模型中的半乳糖凝集素-7表达量的变化
＜通过SDS的粗糙肌肤模型制作＞
＜受试者＞
将14名健康正常肌肤的女性作为受试者实施了试验。
在左前臂内侧部用2push表面活性剂（十二烷基硫酸钠，以下为SDS）10%溶液，重复涂抹100次。用热水（35℃、1L）冲洗，洗去表面活性剂。且作为对照，对右前臂内侧部也用热水（35℃、1L）冲洗。在1天4次，每次操作在隔开1小时以上的状态下重复该操作。持续进行2天此过程，人工制作粗糙肌肤模型。
＜角质采集＞
在深度方向上各采集4片不进行SDS洗涤、进行SDS洗涤的各个部分的角质层。采集角质层的日期为在洗涤前和洗涤后第4、8、12天进行采集。
＜角质层样品提取方法、蛋白定量、半乳糖凝集素-7的测定＞
与上述1.的方法同样进行测定。
＜结果＞
受试者的单独测定结果如图2所示。可确认出粗糙肌肤制作处理后第8～12天半乳糖凝集素-7的测定结果显著上升。
＜通过丙酮的粗糙肌肤模型制作＞
＜受试者＞
将3名健康正常肌肤的女性作为受试者实施试验。
将上下开口的玻璃制漏斗(直径3cm)用橡皮筋固定，将2ml丙酮(WAKO特级）/二乙醚(WAKO特级）等量混合液用移液管注入漏斗内，在振荡器上放置两臂处理20分钟。
而后，将漏斗内的丙酮/二乙醚混合液用滴液吸移管除去后，注入自来水，在振荡器上放置两臂处理（脱脂处理）5分钟。第二天，在同一部分进行同样的操作以再次进行脱脂处理，制作干燥皮肤。且将仅用自来水处理的部位作为对照。
＜角质采集＞
在深度方向上分别采集4片丙酮无处理、丙酮处理部位的角质层。采集的日期为丙酮处理前一天、丙酮处理后第1、5、8、12、16、20天采集。
＜角质层样品提取方法、蛋白定量、半乳糖凝集素-7的测定＞
与上述1.的试验方法同样进行操作。
＜结果＞
受试者的单独测定结果如图3所示。可确认出粗糙肌肤制作处理后第8～12天半乳糖凝集素-7的测定结果显著上升。
从以上的粗糙肌肤模型制作试验的结果可确认出，随着粗糙肌肤的产生，半乳糖凝集素-7上升。
3.健康正常肌肤的半乳糖凝集素-7的测定
＜受试者＞
采集608名健康正常肌肤的男性女性（包括以往有特应性皮炎的人）的脸颊样品，确认半乳糖凝集素-7的分布。此外，对于其中35名受试者，测定作为以往的粗糙肌肤的评价指标的TEWL，确认与半乳糖凝集素-7的测定结果有无相关性。
＜角质层样品提取方法、蛋白定量＞
与上述1.同样，在受试者的脸颊上粘贴角质层测试片(ASAHIBIOMED公司制)，采集角质层。
＜角质层中的半乳糖凝集素-7的测定＞
与上述1.同样，将从胶带上提取的角质层蛋白质提取液使用R&Dsystems公司制的ELISA试剂盒（galectin-7：DY1339E,）测定半乳糖凝集素-7的表达量。
＜TEWL值＞
TEWL使用keystone公司制的Delfin，将2次分别测定的平均值用于分析。
＜结果＞
608名的半乳糖凝集素-7测定结果如表1及图4所示。
表1
Figure BDA0000407115170000131
根据图4，表明健康正常肌肤的脸颊皮肤的半乳糖凝集素-7有80%在435pg/μg以内。且从受试者的听取调查中，可确认出以往有特应性皮炎的人、具有自我感觉易有肌肤粗糙等的人大部分显示出500pg/μg以上的半乳糖凝集素-7。因此，例如可将半乳糖凝集素-7的测定值500pg/μg作为粗糙肌肤的指标。
此外，与TEWL相关性如图5所示。
可确认出半乳糖凝集素-7与TEWL存在一定的相关性。
由以上试验结果判断，半乳糖凝集素-7的测定作为粗糙肌肤的指标很有用，而且可检测出用TEWL无法检测出的潜在的粗糙肌肤。
4.伴随粗糙肌肤改善的半乳糖凝集素-7的变动
＜试验内容＞
因半乳糖凝集素-7的表达量高的人具有为粗糙肌肤的趋势，所以，通过给半乳糖凝集素-7的表达量高的人涂布保湿性强的乳霜（芳珂公司制FDR乳霜），确认出粗糙肌肤得到改善，半乳糖凝集素-7降低，同时确认了半乳糖凝集素-7作为粗糙肌肤指标的有用性。
＜受试者＞
将半乳糖凝集素-7的表达量高的（平均约1400pg/μg蛋白质）10名作为受试者。
＜乳霜的连续使用＞
使受试者在14天内，在早晩各涂布1次日常使用的保湿化妆品的基础上再涂布保湿性强的乳霜（芳珂公司制FDR乳霜）。
＜角质层样品提取方法、蛋白定量＞
与上述1.同样，使用角质层测试片(ASAHIBIOMED公司制)，采集保湿性强的乳霜连续使用前后的脸颊的角质层。与上述1.同样，测定角质层的蛋白质的量。
＜角质层中的半乳糖凝集素-7的测定＞
与上述1.同样，将从胶带上提取的角质层蛋白质提取液使用R&Dsystems公司制的ELISA试剂盒（galectin-7：DY1339E），测定半乳糖凝集素-7的表达量。
＜TEWL值＞
TEWL使用keystone公司制的Delfin，在保湿性强的乳霜连续使用前后各测定2次洗脸、干燥后的脸颊，将平均值用于分析。
＜角质层水分量值＞
角质层水分量使用I.B.S公司制的Skicon-200EX，在保湿性强的乳霜连续使用前后各测定5次洗脸、干燥后的脸颊，将平均值用于分析。
＜结果＞
保湿性强的乳霜连续使用前后的半乳糖凝集素-7的表达量如图6所示，TEWL值、角质层水分量值如图7所示。
通过连续使用14天保湿性强的乳霜，半乳糖凝集素-7的表达量显著降低。另一方面，角质层水分量显著上升，表明粗糙肌肤得到了改善。TEWL值有一些降低，显示了粗糙肌肤改善的趋势。
由以上可知，半乳糖凝集素-7的表达量作为粗糙肌肤的指标而有效。

Claims (5)

1.一种粗糙肌肤的程度的评价方法，其特征在于，测定皮肤角质层的半乳糖凝集素-7的表达量。
2.一种粗糙肌肤的程度的评价方法，其特征在于，将皮肤角质层的半乳糖凝集素-7的表达量与预先或同时测定的正常部位的皮肤的半乳糖凝集素-7的表达量进行对比。
3.一种敏感肌肤的评价方法，其特征在于，将皮肤角质层的半乳糖凝集素-7的表达量与预先或同时测定的正常部位的皮肤的半乳糖凝集素-7的表达量进行对比。
4.根据权利要求1或根据权利要求2所述的评价方法，其特征在于，具备采集皮肤角质层的采集工序、测定所述采集工序中所采集的角质层细胞中的半乳糖凝集素-7的表达量的测定工序、将所述测定工序中所测定的半乳糖凝集素-7的表达量与健康正常肌肤的皮肤角质层中的半乳糖凝集素-7的表达量进行比较的比较工序。
5.根据权利要求4所述的评价方法，其特征在于，采集皮肤的角质层的工序通过胶带剥离法进行。
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