CN103805669B - 提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法 - Google Patents
提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法,该方法包括以下步骤:⑴将新鲜或经浸润、软化后的干燥的青藏高原特有牛种牦牛wild?yak的牦牛皮清洗干净,放入水溶液后加酶进行酶解,得到保毛脱毛后的牦牛皮;⑵保毛脱毛后的牦牛皮加水后加热,经清水冲洗得到灭酶后的牦牛皮;⑶灭酶后的牦牛皮剪切成小块后用水进行提取,得到滤液;⑷滤液浓缩后加凉水提沫,得到除沫后的滤液;⑸除沫后的滤液用水稀释后进行分离,即得14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液;⑹14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液经浓缩、干燥,即得牦牛皮大分子胶原蛋白。本发明方法简单、效果显著,所制得的牦牛皮胶原蛋白分子量分布集中,具有提高机体糖原储备的功能。
Description
技术领域
本发明涉及一种胶原蛋白的制备方法,尤其涉及提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法。
背景技术
糖原是由多个葡萄糖组成的大分子多糖,是体内糖的贮存形式,主要贮存在肌肉和肝脏中,在肌肉中约占1~2%,肝脏中约占6~8%。
肌糖原酵解后可提供组织能量,能够满足活动时肌肉对能量需要,特点是释放能量时不需要氧参与,在高海拔缺氧条件下或无氧条件下均可以及时提供机体需要的能量,肌糖原储备与缺氧、疲劳密切相关。肝糖原是葡萄糖聚合物以糖原的形式储存于肝脏,当机体需要时,可分解成葡萄糖,转化为能量。肝糖原和肌糖原都可以调理血糖,不同的是肝糖原分解直接变成葡萄糖,维持血糖均衡,而肌糖原需由肝脏转换成肝糖原后在分解变成葡萄糖。
牦牛是中国古老而又原始的牛种之一,是唯一能在青藏高原生态环境下生存繁衍的牛种,是青藏高原特有的优势畜种,具有独特的生态学特性及经济价值。经过千百年的自然选择与进化,形成了其独特的遗传性能和对高寒缺氧恶劣环境的适应能力,具有极强的抗逆能力、抗病能力、耐受性和适应性,能适应一般家畜不能适应的高海拔、高缺氧等严酷的高寒恶劣生态环境。牦牛体内含有许多抗疲劳、抗缺氧的生物活性物质,从牦牛皮中提取纯天然的胶原蛋白,提供人体能量储备很有必要。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种方法简单、效果显著的提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法。
为解决上述问题,本发明所述的提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法,包括以下步骤:
⑴将新鲜或经浸润、软化后的干燥的青藏高原特有牛种牦牛wildyak的牦牛皮清洗干净,放入pH值为4~9的水溶液中,然后加入质量浓度为0.1~20%的酶,在温度为10~50℃的条件下酶解2~20小时,得到保毛脱毛后的牦牛皮;
⑵将所述保毛脱毛后的牦牛皮按其重量的2~5倍加入水,并在温度为30~80℃的条件下加热1~30分钟后,用清水冲洗2~3次,洗净残余毛屑,得到灭酶后的牦牛皮;
⑶将所述灭酶后的牦牛皮剪切成3~5cm的小块,然后加入其重量5~20倍的水进行提取,提取时间为2~10小时后,过滤,弃去残渣,得到滤液;
⑷将所述滤液浓缩至比重为1:1.2~1.5时,加入温度为0~10℃凉水,提沫,并重复3~8次,得到除沫后的滤液;
⑸将所述除沫后的滤液用其体积的5~50倍水稀释后,在分离温度为30~50℃的条件下进行分离,即得14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液;
⑹将所述14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液经浓缩、干燥,即得牦牛皮大分子胶原蛋白。
所述步骤⑴中酶为木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶中的一种或两种。
所述步骤⑸中的滤液分离为离心、膜分离、透析方法中的任意一种。
所述步骤⑹中的浓缩是指减压浓缩、吹干浓缩方法中任意一种。
所述步骤⑹中的干燥条件为喷雾干燥、冷冻干燥、微波干燥、烘箱干燥中的任意一种。
本发明与现有技术相比具有以下优点:
1、本发明以牦牛皮为原料,通过酶法保毛脱毛处理牦牛皮,经过提取分离得到大分子胶原蛋白。采用该方法制得的牦牛皮胶原蛋白分子量分布集中,其分子量在14~25KDa,粒径大小在5.8~8nm之间,含量大于98%以上(参见表1、表2、图1、图2)。
表1牦牛皮胶原DLS动态光散射测定结果
注:Item为对同一批样品进行测定次数。
表2牦牛皮胶原不同粒径峰值分布
2、对本发明所得的牦牛皮大分子胶原蛋白进行药效学实验:
⑴动物负重游泳实验结果:
选两个给药剂量(200mg/kg/d、1.0g/kg/d)组进行,将健康KM小鼠30只随机分成3组,雌雄各半,空白组按0.2ml/10g灌胃纯净水,连续给药七天。给药前后小鼠的体重、力竭游泳时间进行了比较分析,观察不同给药剂量小鼠力竭游泳时间及体重的影响(参见表3)。
表3不同给药剂量对小鼠负重游泳实验的影响
与空白组比较:*P<0.05;**P<0.01。
⑵生化指标测定:
将健康KM小鼠30只,随机分成3组,雌雄各半,两个给药组(低、高)、空白对照组,给药七天。检测总蛋白(TP)、乳酸脱氢酶(LDH)、乳酸(LA)、肝糖元、肌糖元的含量(参见表4)。
表4给药七天后对血生化指标的影响
与空白组比较:*P<0.05;**P<0.01。
在高剂量给药范围,小鼠在肌肝糖元储备方面与空白组相比较,具有极显著作用。低、高剂量都可以延长小鼠的力竭游泳时间,生化指标测定表明,低、高剂量组小鼠的肝肌糖元储备都较空白组有明显的增加且在高剂量时具有极显著的提升。说明牦牛皮胶原蛋白作为一种能量物质迅速为小鼠进行了能量供应,小鼠力竭运动时,作为糖元分解从而使小鼠的力竭游泳时间得到了增长(Coyle,Cogganetal.1986)。高剂量较低剂量抗疲劳功效更明显,通过提高机体能量储备物质的含量,提高机体抵抗疲劳的作用。
因此,本发明所得的牦牛皮大分子胶原蛋白具有提高机体糖原储备的功能。
3、本发明提取过程中不添加任何化学品,效果显著,能提供人体能量储备,,可用于生产食品、保健品、药品及生产各种固体制剂和液体制剂,尤其适合高原长期居住和运动量大的人群使用。
附图说明
下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明。
图1为本发明大分子胶原蛋白的百分含量分布。
图2为本发明大分子胶原蛋白粒径含量分布。
具体实施方式
实施例1提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法,包括以下步骤:
⑴将新鲜或经浸润、软化后的干燥的青藏高原特有牛种牦牛wildyak的牦牛皮清洗干净,并放入pH值为4的水溶液中,然后加入质量浓度为1.2%的木瓜蛋白酶,在温度为25℃的条件下酶解4小时,得到保毛脱毛后的牦牛皮。
⑵将保毛脱毛后的牦牛皮按其重量的5倍加入水,并在温度为60℃的条件下加热20分钟后,用清水冲洗2次,洗净残余毛屑,得到灭酶后的牦牛皮。
⑶将灭酶后的牦牛皮剪切成5cm的小块,然后加入其重量10倍的水进行提取,提取时间为10小时后,过滤,弃去残渣,得到滤液。
⑷将滤液浓缩至比重为1:1.2时,加入温度为0℃凉水,提沫,并重复5次,得到除沫后的滤液。
⑸将除沫后的滤液用其体积的5倍水稀释后,在分离温度为35℃、压力为4.5KPa、用0.1um醋酸纤维素膜进行膜分离,即得14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液。
⑹将14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液经浓缩、冷冻干燥后,即得牦牛皮大分子胶原蛋白。
其中:浓缩是指减压浓缩,其真空度为0.08MPa,温度为50℃。冷冻干燥条件是指温度-30℃预冷30分钟,-50℃、50Pa干燥72小时。
实施例2提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法,包括以下步骤:
⑴将新鲜牦牛皮清洗干净,并放入pH值为9的水溶液中,然后加入质量浓度为0.1%的胃蛋白酶,在温度为10℃的条件下酶解20小时,再加入质量浓度为20%的中性蛋白酶,在温度为40℃的条件下酶解3小时,得到保毛脱毛后的牦牛皮。
⑵将保毛脱毛后的牦牛皮按其重量的3倍加入水,并在温度为80℃的条件下加热10分钟后,用清水冲洗3次,洗净残余毛屑,得到灭酶后的牦牛皮。
⑶将灭酶后的牦牛皮剪切成5cm的小块,然后加入其重量20倍的水进行提取,提取时间为2小时后,过滤,弃去残渣,得到滤液。
⑷将滤液浓缩至比重为1:1.5时,加入温度为8℃凉水,提沫,并重复8次,得到除沫后的滤液。
⑸将除沫后的滤液用其体积的10倍水稀释后,在分离温度为40℃的条件下,选用孔径55,分子量截留100000的透析袋,先用buffer煮透析袋,两头系个结,采用聚乙二醇PEG20000粉末外撒,每隔15~20分钟撒一次进行分离,即得14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液。
⑹将14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液经浓缩、微波干燥至恒重后,即得牦牛皮大分子胶原蛋白。
其中:浓缩是指减压浓缩,其真空度为0.08MPa,温度为50℃。微波干燥的条件是功率1000W,干燥时间30分钟。
⑹将14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液即得牦牛皮大分子胶原蛋白。
实施例3提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法,包括以下步骤:
⑴将经浸润、软化后的干燥的青藏高原特有牛种牦牛wildyak的牦牛皮清洗干净,并放入pH值为7的水溶液中,然后加入质量浓度为12%的酶,在温度为45℃的条件下酶解20小时,得到保毛脱毛后的牦牛皮。
其中:酶是指胃蛋白酶与碱性蛋白酶按1g:1.2g的比例混合而成的复合酶。
⑵将保毛脱毛后的牦牛皮按其重量的5倍加入水,并在温度为30℃的条件下加热30分钟后,用清水冲洗3次,洗净残余毛屑,得到灭酶后的牦牛皮。
⑶将灭酶后的牦牛皮剪切成3cm的小块,然后加入其重量5倍的水进行提取,提取时间为8小时后,过滤,弃去残渣,得到滤液。
⑷将滤液浓缩至比重为1:1.3时,加入温度为2℃凉水,提沫,并重复3次,得到除沫后的滤液。
⑸将除沫后的滤液用其体积的50倍水稀释后,在分离温度为50℃、压力为3.5KPa、用0.1um醋酸纤维素膜进行分离,即得14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液。
⑹将14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液经浓缩、喷雾干燥至恒重后,即得牦牛皮大分子胶原蛋白。
其中:浓缩是指减压浓缩,其真空度0.08MPa,温度50℃。喷雾干燥的条件是指流量18ml/min,进料温度38.5℃,进风温度165℃。
实施例4提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法,包括以下步骤:
⑴将经浸润、软化后的干燥的青藏高原特有牛种牦牛wildyak的牦牛皮清洗干净,并放入pH值为6的水溶液中,然后加入质量浓度为15%的中性蛋白酶,在温度为50℃的条件下酶解2小时,得到保毛脱毛后的牦牛皮。
⑵将保毛脱毛后的牦牛皮按其重量的2倍加入水,并在温度为30℃的条件下加热5分钟后,用清水冲洗3次,洗净残余毛屑,得到灭酶后的牦牛皮。
⑶将灭酶后的牦牛皮剪切成4cm的小块,然后加入其重量10倍的水进行提取,提取时间为10小时后,过滤,弃去残渣,得到滤液。
⑷将滤液浓缩至比重为1:1.5时,加入温度为10℃凉水,提沫,并重复8次,得到除沫后的滤液。
⑸将除沫后的滤液用其体积的20倍水稀释后,在温度为30℃的条件下以2000转/分速率离心分离20分钟,即得14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液。
⑹将14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液经浓缩、干燥至恒重后,即得牦牛皮大分子胶原蛋白。
其中:浓缩是指吹干浓缩,其温度50℃。干燥的条件是指40-50℃温度下恒温干燥箱干燥20小时。
实施例5提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法,包括以下步骤:
⑴将经浸润、软化后的干燥的青藏高原特有牛种牦牛wildyak的牦牛皮清洗干净,并放入pH值为5的水溶液中,然后加入质量浓度为5%的碱性蛋白酶,在温度为10℃的条件下酶解15小时,得到保毛脱毛后的牦牛皮。
⑵将保毛脱毛后的牦牛皮按其重量的4倍加入水,并在温度为80℃的条件下加热1分钟后,用清水冲洗2次,洗净残余毛屑,得到灭酶后的牦牛皮。
⑶将灭酶后的牦牛皮剪切成3cm的小块,然后加入其重量15倍的水进行提取,提取时间为8小时后,过滤,弃去残渣,得到滤液。
⑷将滤液浓缩至比重为1:1.4时,加入温度为4℃凉水,提沫,并重复4次,得到除沫后的滤液。
⑸将除沫后的滤液用其体积的30倍水稀释后,在分离温度为30℃的条件下以2000转/分速率离心分离20分钟,即得14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液。
⑹将14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液经浓缩、干燥至恒重后,即得牦牛皮大分子胶原蛋白。
其中:浓缩是指吹干浓缩,其温度50℃。干燥的条件是指40-50℃温度下恒温干燥箱干燥20小时。
实施例6提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法,包括以下步骤:
⑴将经浸润、软化后的干燥的青藏高原特有牛种牦牛wildyak的牦牛皮清洗干净,并放入pH值为6.5的水溶液中,然后加入质量浓度为18%的酶,在温度为15℃的条件下酶解4小时,得到保毛脱毛后的牦牛皮。
其中:酶是指胃蛋白酶与中性蛋白酶按1g:12g的比例混合而成的复合酶。
⑵将保毛脱毛后的牦牛皮按其重量的4.5倍加入水,并在温度为45℃的条件下加热3分钟后,用清水冲洗3次,洗净残余毛屑,得到灭酶后的牦牛皮。
⑶将灭酶后的牦牛皮剪切成4.5cm的小块,然后加入其重量12倍的水进行提取,提取时间为5.5小时后,过滤,弃去残渣,得到滤液。
⑷将滤液浓缩至比重为1:1.35时,加入温度为3.5℃凉水,提沫,并重复6次,得到除沫后的滤液。
⑸将除沫后的滤液用其体积的28倍水稀释后,在分离温度为50℃、压力为3.5KPa、用0.1um醋酸纤维素膜进行分离,即得14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液。
⑹将14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液经浓缩、喷雾干燥至恒重后,即得牦牛皮大分子胶原蛋白。
其中:浓缩是指减压浓缩,其真空度0.08MPa,温度50℃。喷雾干燥的条件是指流量18ml/min,进料温度38.5℃,进风温度165℃。
实施例7提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法,包括以下步骤:
⑴将经浸润、软化后的干燥的青藏高原特有牛种牦牛wildyak的牦牛皮清洗干净,并放入pH值为8.5的水溶液中,然后加入质量浓度为12%的酶,在温度为33.5℃的条件下酶解14.5小时,得到保毛脱毛后的牦牛皮。
其中:酶是指胃蛋白酶与木瓜蛋白酶按1g:2g的比例混合而成的复合酶。
⑵将保毛脱毛后的牦牛皮按其重量的2倍加入水,并在温度为30℃的条件下加热1分钟后,用清水冲洗2次,洗净残余毛屑,得到灭酶后的牦牛皮。
⑶将灭酶后的牦牛皮剪切成3cm的小块,然后加入其重量5倍的水进行提取,提取时间为2小时后,过滤,弃去残渣,得到滤液。
⑷将滤液浓缩至比重为1:1.2时,加入温度为0℃凉水,提沫,并重复3次,得到除沫后的滤液。
⑸将除沫后的滤液用其体积的5倍水稀释后,在分离温度为50℃、压力为3.5KPa、用0.1um醋酸纤维素膜进行分离,即得14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液。
⑹将14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液经浓缩、喷雾干燥至恒重后,即得牦牛皮大分子胶原蛋白。
其中:浓缩是指减压浓缩,其真空度0.08MPa,温度50℃。喷雾干燥的条件是指流量18ml/min,进料温度38.5℃,进风温度165℃。
实施例8提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法,包括以下步骤:
⑴将经浸润、软化后的干燥的青藏高原特有牛种牦牛wildyak的牦牛皮清洗干净,并放入pH值为4.5的水溶液中,然后加入质量浓度为16.5%的酶,在温度为20.5℃的条件下酶解17小时,得到保毛脱毛后的牦牛皮。
其中:酶是指木瓜蛋白酶与碱性蛋白酶按1g:3g的比例混合而成的复合酶。
⑵将保毛脱毛后的牦牛皮按其重量的5倍加入水,并在温度为80℃的条件下加热30分钟后,用清水冲洗3次,洗净残余毛屑,得到灭酶后的牦牛皮。
⑶将灭酶后的牦牛皮剪切成5cm的小块,然后加入其重量20倍的水进行提取,提取时间为10小时后,过滤,弃去残渣,得到滤液。
⑷将滤液浓缩至比重为1:1.45时,加入温度为10℃凉水,提沫,并重复5次,得到除沫后的滤液。
⑸将除沫后的滤液用其体积的50倍水稀释后,在分离温度为50℃、压力为3.5KPa、用0.1um醋酸纤维素膜进行分离,即得14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液。
⑹将14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液经浓缩、喷雾干燥至恒重后,即得牦牛皮大分子胶原蛋白。
其中:浓缩是指减压浓缩,其真空度0.08MPa,温度50℃。喷雾干燥的条件是指流量18ml/min,进料温度38.5℃,进风温度165℃。
实施例9提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法,包括以下步骤:
⑴将经浸润、软化后的干燥的青藏高原特有牛种牦牛wildyak的牦牛皮清洗干净,并放入pH值为5.5的水溶液中,然后加入质量浓度为2.4%的酶,在温度为48℃的条件下酶解4.5小时,得到保毛脱毛后的牦牛皮。
其中:酶是指木瓜蛋白酶与中性蛋白酶按1g:5.8g的比例混合而成的复合酶。
⑵将保毛脱毛后的牦牛皮按其重量的4倍加入水,并在温度为50℃的条件下加热20分钟后,用清水冲洗2次,洗净残余毛屑,得到灭酶后的牦牛皮。
⑶将灭酶后的牦牛皮剪切成4cm的小块,然后加入其重量10倍的水进行提取,提取时间为10小时后,过滤,弃去残渣,得到滤液。
⑷将滤液浓缩至比重为1:1.45时,加入温度为8℃凉水,提沫,并重复4次,得到除沫后的滤液。
⑸将除沫后的滤液用其体积的25倍水稀释后,在分离温度为50℃、压力为3.5KPa、用0.1um醋酸纤维素膜进行分离,即得14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液。
⑹将14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液经浓缩、喷雾干燥至恒重后,即得牦牛皮大分子胶原蛋白。
其中:浓缩是指减压浓缩,其真空度0.08MPa,温度50℃。喷雾干燥的条件是指流量18ml/min,进料温度38.5℃,进风温度165℃。
实施例10提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法,包括以下步骤:
⑴将经浸润、软化后的干燥的青藏高原特有牛种牦牛wildyak的牦牛皮清洗干净,并放入pH值为5.5的水溶液中,然后加入质量浓度为0.9%的酶,在温度为30.8℃的条件下酶解20小时,得到保毛脱毛后的牦牛皮。
其中:酶是指中蛋白酶与碱性蛋白酶按1g:7.7g的比例混合而成的复合酶。
⑵将保毛脱毛后的牦牛皮按其重量的3倍加入水,并在温度为45℃的条件下加热14分钟后,用清水冲洗3次,洗净残余毛屑,得到灭酶后的牦牛皮。
⑶将灭酶后的牦牛皮剪切成3.5cm的小块,然后加入其重量12倍的水进行提取,提取时间为6小时后,过滤,弃去残渣,得到滤液。
⑷将滤液浓缩至比重为1:1.时,加入温度为4℃凉水,提沫,并重复6次,得到除沫后的滤液。
⑸将除沫后的滤液用其体积的33倍水稀释后,在分离温度为50℃、压力为3.5KPa、用0.1um醋酸纤维素膜进行分离,即得14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液。
⑹将14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液经浓缩、喷雾干燥至恒重后,即得牦牛皮大分子胶原蛋白。
其中:浓缩是指减压浓缩,其真空度0.08MPa,温度50℃。喷雾干燥的条件是指流量18ml/min,进料温度38.5℃,进风温度165℃。
Claims (5)
1.提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法,包括以下步骤:
⑴将新鲜或经浸润、软化后的干燥的青藏高原特有牛种牦牛wildyak的牦牛皮清洗干净,放入pH值为4~9的水溶液中,然后加入质量浓度为0.1~20%的酶,在温度为10~50℃的条件下酶解2~20小时,得到保毛脱毛后的牦牛皮;
⑵将所述保毛脱毛后的牦牛皮按其重量的2~5倍加入水,并在温度为30~80℃的条件下加热1~30分钟后,用清水冲洗2~3次,洗净残余毛屑,得到灭酶后的牦牛皮;
⑶将所述灭酶后的牦牛皮剪切成3~5cm的小块,然后加入其重量5~20倍的水进行提取,提取时间为2~10小时后,过滤,弃去残渣,得到滤液;
⑷将所述滤液浓缩至比重为1:1.2~1.5时,加入温度为0~10℃凉水,提沫,并重复3~8次,得到除沫后的滤液;
⑸将所述除沫后的滤液用其体积的5~50倍水稀释后,在分离温度为30~50℃的条件下进行分离,即得14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液;
⑹将所述14~25Kda大分子的牦牛皮胶原蛋白溶液经浓缩、干燥,即得牦牛皮大分子胶原蛋白。
2.如权利要求1所述的提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法,其特征在于:所述步骤⑴中酶为木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶中的一种或两种。
3.如权利要求1所述的提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法,其特征在于:所述步骤⑸中的滤液分离为离心、膜分离、透析方法中的任意一种。
4.如权利要求1所述的提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法,其特征在于:所述步骤⑹中的浓缩是指减压浓缩、吹干浓缩方法中任意一种。
5.如权利要求1所述的提高机体糖原储备的牦牛皮大分子胶原蛋白的制备方法,其特征在于:所述步骤⑹中的干燥条件为喷雾干燥、冷冻干燥、微波干燥、烘箱干燥中的任意一种。
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