CN103784510A - 一种治疗仔猪腹泻中草药口服液及生产方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗仔猪腹泻中草药口服液，采用40～60重量份的桃金娘根干燥药材和20～30重量份的黄藤干燥药材为原料，经水煮提取、梯度醇沉和干燥步骤得到桃金娘根提取物，经渗漉提取、沉淀和干燥步骤得到黄藤素粗品，再将桃金娘根提取物和黄藤素粗品加水配制成所述的中草药口服液。本发明原料来源广泛，制作工艺简单易行，能耗低，质量易于控制，产品质量稳定，适合规模化生产。

Description

一种治疗仔猪腹泻中草药口服液及生产方法

技术领域

本发明涉及兽药技术领域，具体是一种治疗仔猪腹泻中草药口服液及其生产方法。

背景技术

由大肠杆菌、猪痢疾螺旋体、猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）等病原引起的仔猪腹泻是集约化养猪生产条件下的一种典型的多病因性疾病，是仔猪最严重的疾病群之一，是影响仔猪成活率的一个重要因素；据调查，仔猪因腹泻死亡占仔猪死亡总数的39.8％；30kg以下的仔猪，全年平均发病率46.5％，死亡率10.3％。仔猪腹泻在养猪业危害中居首位，严重威胁着养猪业的健康发展，严重影响我国养猪业的经济效益。仔猪腹泻往往导致饲料报酬率较低、仔猪成活率下降、生长缓慢、生长发育停滞，甚至死亡。采取有效的措施预防和控制仔猪腹泻、提高仔猪成活率已成为养猪业生产的一项重要课题。

中草药防治畜禽疾病具有悠久的历史和完整的中医理论体系，并且具有广泛的生物同源性；尤其是中草药本身含有不同种类的化学成分，既能通过阻断细菌、病毒繁殖过程的某一环节直接抑杀细菌、病毒，又能通过提高机体免疫功能、诱导机体干扰素产生、双向调节机体防御功能、减轻病毒对机体的损害等达到治疗的目的；同时，中草药无细胞生理毒性，不易形成耐药性，无残留，能保证食品卫生安全。因此，研究发明治疗仔猪腹泻高效中草药制剂具有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种治疗仔猪腹泻中草药口服液及生产方法，预防和控制仔猪腹泻，提高仔猪成活率。

本发明解决上述技术问题所采取的技术方案如下：

一种治疗仔猪腹泻中草药口服液，由下述重量配比的干燥药材制成：桃金娘根饮片40～60份，黄藤饮片20～30份。

所述的治疗仔猪腹泻中草药口服液的生产方法，包括以下步骤：

（1）桃金娘根提取物制备：

（a）水煮提取：桃金娘根饮片40～60份粉碎，按重量比加水3～10倍，煮沸提取1.5～3.0h，提取2～3次，收集药液，过滤；按1:4将滤液真空浓缩成浸膏；

（b）梯度醇沉与干燥：向步骤（a）中得到的浸膏加入体积分数为95%乙醇，至乙醇含量终浓度体积分数为20～30%，凉暗处静置沉淀24～48h，取上清液过滤，弃沉淀；继续向上清液加入体积分数为95%乙醇，至乙醇含量终浓度体积分数为60～80%，凉暗处静置沉淀24～48h，取上清液过滤，滤液减压回收乙醇，沉淀物60～70℃真空干燥，得桃金娘根提取物；

（2）黄藤素提取：

（A）渗漉提取：取黄藤饮片20～30份粉碎，用体积分数为0.1～0.5%烟酸溶液浸润黄藤粉后，装入渗漉筒，加入体积分数为0.1～0.5%烟酸溶液浸泡4～6h后开始渗漉，直至渗滤液无生物碱反应停止渗漉，收集渗漉液；

（B）沉淀与干燥：合并步骤（A）中得到的渗漉液，过滤，滤液加氯化钠至质量体积百分比浓度达5～15%，摇匀，4～8℃静置36～72小时，过滤，沉淀物干燥，得黄藤素粗品；

（3）中草药口服液配制：向配液罐中注入配制总量1/2纯化水，加温至50～60℃后加入黄藤素粗品，搅拌，完全溶解后加入桃金娘根提取物，搅拌，至完全溶解；注入纯化水至配制总量，于50～60℃下搅拌20～30min；过滤，灌装，灭菌，包装即可。

本发明所述的口服液原料组分的药理功效如下：

（1）桃金娘Rhodomyrtus tomentosa(Ait.)Hassk.，为桃金娘科桃金娘属植物，别名山稔、岗稔、桃娘、稔子、仲尼，是在我国有天然分布的唯一种，在我国东南部、南部至西南部，南亚、东南亚以及日本等地均有广泛分布，是一种优良的野生植物资源。我国应用桃金娘历史悠久，在《本草纲目》《本草纲目拾遗》等本草专著中对桃金娘的药用价值已有详细记载。桃金娘性味甘涩平，以根、叶和果入药，具有养血、止血、涩肠、固精之功效，在古代早就被用于治疗痰嗽、暖腹脏、益肌肉。桃金娘具有良好的保健和药用功能，能够参与制备一些药用食品和组合药物，用于治疗幼儿腹泻、病毒性细菌感染腹泻及内服治疗慢性结肠炎；其还具有一定的抗癌活性，可用于保健饮料的开发，在医药、保健品和化妆品行业中均具有广泛的应用价值。

（2）黄藤Fibraurea recisa Pierre.，为防已科黄藤属植物,主要分布于我国云南的东南部、广东和广西的西南部,在越南、老挝、缅甸和柬埔寨也有分布，生长于海拔180～500m的热带、低纬度亚热带山野沟谷中；干燥藤茎为主要药用部位。黄藤作为一种传统中药,其味苦,具有清热、解毒，利尿，通便等功效。临床用于治疗生殖系统炎症、外科感染、菌痢、肠炎、呼吸道以及泌尿道感染、眼结膜炎、传染性肝炎、疮痈、赤眼、咽喉肿痛等。药理及临床研究证实,黄藤具有抗炎、抑菌、抗病毒、抗阴道毛滴虫、抗糖尿病和抗氧化活性及提高细胞免疫、体液免疫和非特异性免疫功能等多种功效。

本发明原料来源广泛，制作工艺简单易行，能耗低，质量易于控制，产品质量稳定，适合规模化生产。

具体实施方式

一、产品制备实施例

实施例1

（1）桃金娘根提取物制备

a.水煮提取：桃金娘根饮片50份粉碎，按重量比加水5倍，煮沸提取2h，提取3次，收集药液，过滤；按1:4将滤液真空浓缩成浸膏。

b.梯度醇沉与干燥：向步骤a中得到的浸膏加入95%乙醇，至乙醇含量终浓度体积分数为20～30%，凉暗处静置沉淀24h，取上清液过滤，弃沉淀；继续向上清液加入95%乙醇，至乙醇含量终浓度体积分数为70%，凉暗处静置沉淀24h，取上清液过滤，滤液减压回收乙醇；沉淀物60～70℃真空干燥，得桃金娘根提取物A。

（2）黄藤素提取

a.渗漉提取：取黄藤饮片25份粉碎，用0.3%烟酸溶液浸润黄藤粉后，装入渗漉筒，加入0.3%烟酸溶液浸泡5h后开始渗漉，直至渗滤液无生物碱反应停止渗漉，收集渗漉液。

b.沉淀与干燥：合并步骤a中得到的渗漉液，滤过，滤液加氯化钠至浓度达10%（W/V），摇匀，4～8℃静置48小时，滤过，沉淀物干燥，得黄藤素粗品B。

（3）中草药口服液配制：向配液罐中注入配制总量1/2纯化水，加温至50～60℃后加入黄藤素粗品B，搅拌，完全溶解后加入桃金娘根提取物A，搅拌，至完全溶解；注入纯化水至配制总量，于50～60℃下搅拌20～30min；过滤，灌装，灭菌，包装即得产品。

实施例2

（1）桃金娘根提取物制备

a.水煮提取：桃金娘根饮片40份粉碎，按重量比加水3倍，煮沸提取1.5h，提取2次，收集药液，过滤；按1:4将滤液真空浓缩成浸膏。

b.梯度醇沉与干燥：向步骤a中得到的浸膏加入95%乙醇，至乙醇含量终浓度体积分数为20～30%，凉暗处静置沉淀48h，取上清液过滤，弃沉淀；继续向上清液加入95%乙醇，至乙醇含量终浓度体积分数为30%，凉暗处静置沉淀48h，取上清液过滤，滤液减压回收乙醇；沉淀物60～70℃真空干燥，得桃金娘根提取物A。

（2）黄藤素提取

a.渗漉提取：取黄藤饮片20份粉碎，用0.1%烟酸溶液浸润黄藤粉后，装入渗漉筒，加入0.1%烟酸溶液浸泡4h后开始渗漉，直至渗滤液无生物碱反应停止渗漉，收集渗漉液。

b.沉淀与干燥：合并步骤a中得到的渗漉液，滤过，滤液加氯化钠至浓度达5%（W/V），摇匀，4～8℃静置36小时，滤过，沉淀物干燥，得黄藤素粗品B。

（3）中草药口服液配制：向配液罐中注入配制总量1/2纯化水，加温至50～60℃后加入黄藤素粗品B，搅拌，完全溶解后加入桃金娘根提取物A，搅拌，至完全溶解；注入纯化水至配制总量，于50～60℃下搅拌20～30min；过滤，灌装，灭菌，包装即得产品。

实施例3

（1）桃金娘根提取物制备

a.水煮提取：桃金娘根饮片60份粉碎，按重量比加水10倍，煮沸提取3h，提取3次，收集药液，过滤；按1:4将滤液真空浓缩成浸膏。

b.梯度醇沉与干燥：向步骤a中得到的浸膏加入95%乙醇，至乙醇含量终浓度体积分数为20～30%，凉暗处静置沉淀48h，取上清液过滤，弃沉淀；继续向上清液加入95%乙醇，至乙醇含量终浓度体积分数为30%，凉暗处静置沉淀48h，取上清液过滤，滤液减压回收乙醇；沉淀物60～70℃真空干燥，得桃金娘根提取物A。

（2）黄藤素提取

a.渗漉提取：取黄藤饮片30份粉碎，用0.5%烟酸溶液浸润黄藤粉后，装入渗漉筒，加入0.5%烟酸溶液浸泡6h后开始渗漉，直至渗滤液无生物碱反应停止渗漉，收集渗漉液。

b.沉淀与干燥：合并步骤a中得到的渗漉液，滤过，滤液加氯化钠至浓度达15%（W/V），摇匀，4～8℃静置72小时，滤过，沉淀物干燥，得黄藤素粗品B。

（3）中草药口服液配制：向配液罐中注入配制总量1/2纯化水，加温至50～60℃后加入黄藤素粗品B，搅拌，完全溶解后加入桃金娘根提取物A，搅拌，至完全溶解；注入纯化水至配制总量，于50～60℃下搅拌20～30min；过滤，灌装，灭菌，包装即得产品。

二、产品检测

1.产品中没食子酸含量的测定采用超高效液相色谱法，色谱仪：Waters Acquity UPLC，色谱柱：Phenomenex C18；柱温：35℃；流动相：乙腈-0.2%磷酸溶液（28:72）；体积流速：1.0mL/min，检测波长254nm；最终检测到不同批次产品中没食子酸含量为：0.5～2.0%。

2.产品中烟酸黄藤素含量的测定采用超高效液相色谱法，色谱仪：Waters Acquity UPLC，色谱柱：Phenomenex C18；柱温：40℃；流动相：乙腈-0.4%磷酸溶液（32:68）；体积流速：1.0mL/min，检测波长345nm；最终检测到不同批次产品中烟酸黄藤素含量为：0.5～3.0%。

三、产品临床试验

以下通过应用试验1和应用试验2进一步说明上述产品实施例1所获得的中草药口服液对仔猪腹泻的疗效。

应用试验1

（一）材料和方法

1.试验动物

南宁市某养猪场40日龄内仔猪，经临床症状、病理剖检、致病菌分离和鉴定确诊为致病性大肠杆菌引起的仔猪腹泻自然感染病例，共计75例。

2.试验分组及治疗方案

自然感染病例随机分为5组，每组15只。

A组为本发明中草药口服液高剂量组，每只仔猪灌服4ml/次，一日两次，连续用药3天；

B组为本发明中草药口服液中剂量（推荐剂量）组，每只仔猪灌服2ml/次，一日两次，连续用药3天；

C组为本发明中草药口服液低剂量组，每只仔猪灌服1ml/次，一日两次，连续用药3天；

D组为2%痢菌净口服液对照组，每只仔猪灌服2ml/次，一日两次，连续用药3天；

E组为空白对照组，不用药，只给予葡萄糖生理盐水饮用，一日两次，连续3天。

3.疗效判断标准

观察并记录用药前后临床症状，连续观察7天，按下列标准判断及统计治疗结果。

治愈：体温正常，呕吐、拉稀、脱水等临床症状体征消失，粪便成型，食欲、精神恢复正常。

好转：体温正常，呕吐、拉稀、脱水等临床症状体征明显减轻，食欲、精神好转。

无效：呕吐、拉稀、脱水等临床症状体征无明显变化或恶化，甚至死亡。

（二）结果

治疗结果见表1。

表1仔猪腹泻自然感染病例临床疗效

由表1中可以看出，本发明中草药口服液及痢菌净口服液对仔猪腹泻自然感染病例的临床疗效十分显著；而本发明中草药口服液高剂量组和中剂量组的疾病治愈率和有效率均显著高于痢菌净组，低剂量组疾病治愈率与痢菌净组相当、有效率高于痢菌净组；就本发明中草药口服液不同剂量组间比较，高剂量和中剂量组间在疾病治愈率、有效率方面无显著差异；但低剂量组疾病治愈率、有效率明显低于中剂量组，故本发明中草药口服液临床推荐剂量为中剂量比较适宜。

应用试验2

（一）临床病例和方法

1.临床资料

448例以腹泻为主要症状的自然感染仔猪病例，均通过临床症状、病理剖检、病原分离和鉴定、PCR或诊断试剂确诊的病例。其中，由致病性大肠杆菌引起的仔猪白痢223例，猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起的猪流行性腹泻63例，猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）引起的猪传染性胃肠炎104例，猪痢疾螺旋体引起的猪痢疾58例。

2.治疗方案

本发明中草药口服液，每只仔猪灌服2ml/次，一日两次，连续用药3天；加强饲养管理，喂以流质饲料，供应充足的葡萄糖盐水。

3.疗效判断标准

观察并记录用药前后临床症状，连续观察7天，按下列标准判断及统计治疗结果。

治愈：体温正常，呕吐、拉稀、脱水等临床症状体征消失，粪便成型，食欲、精神恢复正常。

好转：体温正常，呕吐、拉稀、脱水等临床症状体征明显减轻，食欲、精神好转。

无效：呕吐、拉稀、脱水等临床症状体征无明显变化或恶化，甚至死亡。

（二）结果

治疗结果见表2。

表2不同类型仔猪腹泻自然感染病例临床疗效

由表2中可以看出，本发明中草药口服液对致病性大肠杆菌引起的仔猪白痢、猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起的猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）引起的猪传染性胃肠炎、猪痢疾螺旋体引起的猪痢疾等不同类型仔猪腹泻自然感染病例的临床疗效十分显著，总有效率为95.5%。

Claims (2)

1.一种治疗仔猪腹泻中草药口服液，其特征在于，由下述重量配比的干燥药材为原料制成：桃金娘根饮片40～60份，黄藤饮片20～30份。

2.一种适用于权利要求1所述的治疗仔猪腹泻中草药口服液的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）桃金娘根提取物制备：

（a）水煮提取：桃金娘根饮片40～60份粉碎，按重量比加水3～10倍，煮沸提取1.5～3.0h，提取2～3次，收集药液，过滤；按1:4将滤液真空浓缩成浸膏；

（b）梯度醇沉与干燥：向步骤（a）中得到的浸膏加入体积分数为95%乙醇，至乙醇含量终浓度体积分数为20～30%，凉暗处静置沉淀24～48h，取上清液过滤，弃沉淀；继续向上清液加入体积分数为95%乙醇，至乙醇含量终浓度体积分数为60～80%，凉暗处静置沉淀24～48h，取上清液过滤，滤液减压回收乙醇，沉淀物60～70℃真空干燥，得桃金娘根提取物；

（2）黄藤素提取：

（A）渗漉提取：取黄藤饮片20～30份粉碎，用体积分数为0.1～0.5%烟酸溶液浸润黄藤粉后，装入渗漉筒，加入体积分数为0.1～0.5%烟酸溶液浸泡4～6h后开始渗漉，直至渗滤液无生物碱反应停止渗漉，收集渗漉液；

（B）沉淀与干燥：合并步骤（A）中得到的渗漉液，过滤，滤液加氯化钠至质量体积百分比浓度达5～15%，摇匀，4～8℃静置36～72小时，过滤，沉淀物干燥，得黄藤素粗品；

（3）中草药口服液配制：向配液罐中注入配制总量1/2纯化水，加温至50～60℃后加入黄藤素粗品，搅拌，完全溶解后加入桃金娘根提取物，搅拌，至完全溶解；注入纯化水至配制总量，于50～60℃下搅拌20～30min；过滤，灌装，灭菌，包装即可。