CN103782905A - 一种金线莲野外选种及育种方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种金线莲野外选种、育种的方法，属于生物技术领域，本发明选用野生的具有优良性状已开花、健壮的金线莲，进行人工授粉后，形成果夹；采摘饱满、未破裂的果夹作为外植体，在无菌操作下，将果夹中的种子接种于培养基上培养，最后进入工厂化繁殖阶段。经过本发明的选种育种之后的金线莲的成活率可达到99%以上。

Description

一种金线莲野外选种及育种方法
技术领域
  本发明属于生物技术领域，具体涉及一种金线莲野外选种、育种的方法。
背景技术
金线莲（Anoectochilus roburghii）为兰科开唇植物花叶兰属多年生珍稀中草药，别名金线兰、金丝草、金草、鸟人参、金丝线、乌人参、金线虎头蕉、金钱草、金线石松等，分布于福建、广东、广西、海南、四川、贵州、云南有常绿阔叶树木的沟边、石壁、土质松散的潮湿地带。金线莲在民间使用范围较广，素有“药王”、“金草”、“神草”、“鸟人参”等美称。金线莲属于多年生珍稀中草药，全草入药，清热凉血，除湿解毒，平衡阴阳、扶正固本，阴阳互补、生津养颜、调和气血、五脏、养寿延年的功用。入肾、心、肺三经，能全面提高人体免疫力，增强人体对 疾病的抵抗力。主治肺热咳嗽，肺结核咯血，尿血，小儿惊风，破伤风，肾炎水肿，风湿痹痛，跌打损伤，毒蛇咬伤、支气管炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、急慢性肝炎、风湿性关节炎肿瘤等疑难病症，也兼除青春痘。
金线莲性状特征 ：福建金线莲本品为干燥全草，略呈皱缩状，茎节明显；叶互生具柄，叶基膜质鞘状抱茎，叶黄绿色，呈卵形或椭圆形，叶面有光泽、叶脉为金黄色羽状网脉，叶背淡紫红色 ；香气特异。
传统金线莲人工栽培以土壤或砂为栽培基质进行栽培育种，每平方米收货金线莲鲜品0.36kg，传统金线莲的栽培方法不仅栽培成本高，并且常出现金线莲叶子易黄，根系易烂等现象。
利用工厂化快速繁殖属于植物繁殖中的无性繁殖方式，该方式对于保持植物的优良性状较差，在经过一定周期后，就需要重新更换母种，以保持植物的优良品性。
发明内容
本发明的目的在于提供一种金线莲野外选种及育种的方法，金线莲与兰花的种子本身仅有胚无胚乳，所以必须具备活力及不具休眠性，同时还必须供给养分及具有适当的发芽环境才能顺利萌芽，而利用人工育种可以大大提高金线莲的发芽率，为金线莲的大规模繁殖找到了捷径。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种金线莲野外选种及育种方法，其具体步骤包括：
1）外植体的选择
在每年9月-11月之间，金线莲开花的时间，我们选用野生的具有优良性状已开花、健壮的金线莲，进行人工授粉后，形成果夹；采摘饱满、未破裂的果夹作为外植体；
2）外植体的无菌操作
将采摘的果夹清洗干净后，进行无菌操作，在无菌操作台内对果夹外部进行消毒后，开启果夹，将里面的种子接种于金线莲培养基上；
3）培养步骤
将接种后的外植体放置于恒温条件24-26℃下，暗培养10-15天，待种子开始生长后，进行光照，进入常规培养；常规培养过程中及时观察种子的长势，再进行判断，最后进入工厂化繁殖阶段。
所述消毒具体步骤为：将果夹放入质量分数为12-15%的漂白液中充分摇动3-5分钟，再静置5-7分钟后，再摇动2-3分钟，整个过程10-15分钟，即将外表果夹杀菌完成；
采取授粉后45-55天的果夹进行接种最适当。
所述的金线莲培养基为配方为：花宝一号2500-3000mg/L，蛋白胨1500-2000 mg/L，烟酸1-2 mg/L，维生素B1 0.5-1 mg/L，维生素B6 1-2 mg/L，氨基乙酸50-60 mg/L，肌醇50-60 mg/L，椰子汁50000-60000 mg/L，苹果50000-60000 mg/L，白糖20000-30000 mg/L，琼脂10000-20000，pH：5-6，加水配制成1000mL溶液。
本发明的优点在于：解决金线莲发芽困难这一难题，为金线莲大规模繁殖找到了捷径。金线莲与兰花的种子本身仅有胚无胚乳，所以必须具备活力及不具休眠性，同时还必须供给养分及具有适当的发芽环境才能顺利萌芽，而利用人工育种可以大大提高金线莲的发芽率，发芽率可达到99%，为金线莲的大规模繁殖找到了捷径。
具体实施方式
实施例1
1）外植体的选择
在每年9月，金线莲开花的时间，我们选用野生的具有优良性状已开花、健壮的金线莲，进行人工授粉后，形成果夹；采摘授粉后50天的饱满、未破裂的果夹作为外植体；
2）外植体的无菌操作
将采摘的果夹清洗干净后，进行无菌操作，在无菌操作台内对果夹外部进行消毒，将果夹放入质量分数为12%的漂白液中充分摇动3分钟，再静置5分钟后，再摇动2分钟，整个过程10分钟，即将外表果夹杀菌完成；开启果夹，将里面的种子接种于金线莲培养基上；
3）培养步骤
将接种后的外植体放置于恒温条件24℃下，暗培养10天，待种子开始生长后，进行光照，进入常规培养；常规培养过程中及时观察种子的长势，再进行判断，最后进入工厂化繁殖阶段。
金线莲培养基为配方为：花宝一号2500mg/L，蛋白胨1500 mg/L，烟酸1 mg/L，维生素B1 0.5 mg/L，维生素B6 1 mg/L，氨基乙酸50 mg/L，肌醇50 mg/L，椰子汁50000 mg/L，苹果50000 mg/L，白糖20000 mg/L，琼脂10000，pH：5，加水配制成1000mL溶液。
实施例2
1）外植体的选择
在每年9月-11月之间，金线莲开花的时间，我们选用野生的具有优良性状已开花、健壮的金线莲，进行人工授粉后，形成果夹；采摘采摘授粉后45天的饱满、未破裂的果夹作为外植体；
2）外植体的无菌操作
将采摘的果夹清洗干净后，进行无菌操作，在无菌操作台内对果夹外部进行消毒，将果夹放入质量分数为15%的漂白液中充分摇动5分钟，再静置7分钟后，再摇动3分钟，整个过程15分钟，即将外表果夹杀菌完成；开启果夹，将里面的种子接种于金线莲培养基上；
3）培养步骤
将接种后的外植体放置于恒温条件26℃下，暗培养15天，待种子开始生长后，进行光照，进入常规培养；常规培养过程中及时观察种子的长势，再进行判断，最后进入工厂化繁殖阶段。
所述的金线莲培养基为配方为：花宝一号2700mg/L，蛋白胨1500 mg/L，烟酸1.5 mg/L，维生素B1 1 mg/L，维生素B6 1.5 mg/L，氨基乙酸55 mg/L，肌醇55 mg/L，椰子汁55000 mg/L，苹果55000 mg/L，白糖25000 mg/L，琼脂20000 mg/L，pH：5.5，加水配制成1000mL溶液。
实施例3
1）外植体的选择
在每年9月-11月之间，金线莲开花的时间，我们选用野生的具有优良性状已开花、健壮的金线莲，进行人工授粉后，形成果夹；采摘采摘授粉后55天的饱满、未破裂的果夹作为外植体；
2）外植体的无菌操作
将采摘的果夹清洗干净后，进行无菌操作，在无菌操作台内对果夹外部进行消毒，将果夹放入质量分数为14%的漂白液中充分摇动4分钟，再静置6分钟后，再摇动2分钟，整个过程12分钟，即将外表果夹杀菌完成；开启果夹，将里面的种子接种于金线莲培养基上；
3）培养步骤
将接种后的外植体放置于恒温条件25℃下，暗培养12天，待种子开始生长后，进行光照，进入常规培养；常规培养过程中及时观察种子的长势，再进行判断，最后进入工厂化繁殖阶段。
所述的金线莲培养基为配方为：花宝一号3000mg/L，蛋白胨2000 mg/L，烟酸2 mg/L，维生素B1 1 mg/L，维生素B6 2 mg/L，氨基乙酸60 mg/L，肌醇60 mg/L，椰子汁60000 mg/L，苹果60000 mg/L，白糖30000 mg/L，琼脂20000，pH：6，加水配制成1000mL溶液。
金线莲与兰花的种子本身仅有胚无胚乳，所以必须具备活力及不具休眠性，同时还必须供给养分及具有适当的发芽环境才能顺利萌芽，而利用人工育种可以大大提高金线莲的发芽率，且发芽率均可达到99%以上，为金线莲的大规模繁殖找到了捷径。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。

Claims (4)

1.一种金线莲野外选种及育种方法，其特征在于：其具体步骤包括：
1）外植体的选择
在每年9月-11月之间，金线莲开花的时间，我们选用野生的具有优良性状已开花、健壮的金线莲，进行人工授粉后，形成果夹；采摘饱满、未破裂的果夹作为外植体；
2）外植体的无菌操作
将采摘的果夹清洗干净后，进行无菌操作，在无菌操作台内对果夹外部进行消毒后，开启果夹，将里面的种子接种于金线莲培养基上；
3）培养步骤
将接种后的外植体放置于恒温条件24-26℃下，暗培养10-15天，待种子开始生长后，进行光照，进入常规培养；常规培养过程中及时观察种子的长势，再进行判断，最后进入工厂化繁殖阶段。
2.根据权利要求1所述的一种金线莲野外选种及育种方法，其特征在于：所述消毒具体步骤为：将果夹放入质量分数为12-15%的漂白液中充分摇动3-5分钟，再静置5-7分钟后，再摇动2-3分钟，整个过程10-15分钟，即将外表果夹杀菌完成。
3.根据权利要求1所述的一种金线莲野外选种及育种方法，其特征在于：所述的金线莲培养基为配方为：花宝一号2500-3000mg/L，蛋白胨1500-2000 mg/L，烟酸1-2 mg/L，维生素B1 0.5-1 mg/L，维生素B6 1-2 mg/L，氨基乙酸50-60 mg/L，肌醇50-60 mg/L，椰子汁50000-60000 mg/L，苹果50000-60000 mg/L，白糖20000-30000 mg/L，琼脂10000-20000，pH：5-6，加水配制成1000mL溶液。
4.根据权利要求1所述的一种金线莲野外选种及育种方法，其特征在于：所述果夹为授粉后45-55天的果夹。
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