CN103768173A - 一种注射用乌头提取物的制备方法 - Google Patents

一种注射用乌头提取物的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN103768173A
CN103768173A CN201410024866.6A CN201410024866A CN103768173A CN 103768173 A CN103768173 A CN 103768173A CN 201410024866 A CN201410024866 A CN 201410024866A CN 103768173 A CN103768173 A CN 103768173A
Authority
CN
China
Prior art keywords
injection
extract
preparation
aconite
alkaloid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201410024866.6A
Other languages
English (en)
Inventor
周彬彬
金郁
柯燕雄
傅青
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
East China University of Science and Technology
Original Assignee
East China University of Science and Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by East China University of Science and Technology filed Critical East China University of Science and Technology
Priority to CN201410024866.6A priority Critical patent/CN103768173A/zh
Publication of CN103768173A publication Critical patent/CN103768173A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明涉及一种注射用乌头提取物的制备方法，其包括提取、萃取、反相色谱纯化和水解炮制过程；乌头药材采用乙醇提取，有机相萃取和反相色谱纯化，得到单酯型和双酯型生物碱组分；将该组分中的双酯型生物碱在碱性条件下水解转化，去除毒性，冷冻干燥，即得到淡黄色的乌头提取物。本发明的制备工艺重复性好，自动化程度高，操作工艺简便，适合于大规模工业化生产；得到的乌头提取物有效的去除了色素等大量杂质，提高了药效成分单酯型生物碱的含量，控制了毒性成分双酯型生物碱的含量，经适当的药效学和毒性评价，可作用乌头注射剂的原料。

Description

一种注射用乌头提取物的制备方法
【技术领域】
本发明属于医药技术领域，可用于一种注射用乌头提取物的制备方法。
【背景技术】
乌头(Aconitum carmichaeli Dibx)属于毛茛科乌头属植物，目前世界上已发现超过300个品类，我国是主要的产区之一。乌头具有祛风除湿，胜湿止痛的功效，临床上主要用于抗炎、镇痛、镇静、解热、免疫抑制、抗肿瘤作用及强心、降血压、扩张血管等作用，具有较高的药理活性和药用价值。
乌头注射剂是从乌头中提取出的总生物碱制剂，临床上主要用于癌症晚期的镇痛、抗炎和抗癌作用，给药方式主要有肌肉注射和静脉注射。传统的肌肉注射通过皮下血管吸收，起效慢，而且很容易造成局部组织痉挛；此外，肌肉注射的剂量小，需多次给药，给病人带来痛苦的同时药效也不显著，为临床应用带来巨大的局限性，所以，乌头注射剂正在向静脉注射的方向发展。
乌头的有效成分为二萜类生物碱，主要包括胺醇型生物碱，单酯型生物碱，双酯型生物碱和脂肪族生物碱，其中双酯型生物碱的含量最高，毒性也最大，在制备注射剂的过程中需要经过水解炮制，去除毒性。《中国药典》对炮制后的乌头中双酯型生物碱的含量有明确的规定，不得超过0.04％，以保证用药的安全性。
乌头注射剂传统的制备工艺比较简单，采用乙醇冷浸提取，药渣水煮，合并提取液后直接酸性条件下水煮炮制，活性炭脱色后再水煮的方法。此制备工艺没有明确的除杂过程，得到的乌头提取物中杂质含量较高，颜色较深；此外，该工艺在酸性条件下炮制效率不高，产物中还有部分毒性成分双酯型生物碱残留。因此，可以针对乌头药材建立一种乌头提取物的制备工艺，该工艺有效地去除了色素等杂质，提高了药效成分单酯型生物碱的含量，控制了毒性成分双酯型生物碱的含量，再经过适当的药效学和毒性评价，可作用乌头注射剂的原料，目标是改善乌头注射剂的安全性和稳定性。
【发明内容】
本发明的目的在于克服现有技术的不足，开发了一套完整的注射用乌头提取物的制备方法。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种注射用乌头提取物的制备方法，其具体步骤为：
(1)超声提取：将乌头药材粉碎后加入乙醇水溶液超声提取两次，合并两次提取液，蒸至无醇味；
所述的乙醇水溶液的体积浓度为75～100％，用量为6～10倍量(w∶v)，w∶v是指乌头药材的质量和乙醇水溶液的体积比；
所述的提取时间为每次1～3小时；
(2)有机相萃取：直接向步骤(1)所得的提取液中加水补充至固体充分溶解，滴加氨水调碱性；加入有机溶剂萃取，合并有机相溶液蒸干；
所述的碱性条件为pH8～10，有机溶剂为乙酸乙酯，环己烷，二氯甲烷等弱极性溶剂；
所述的有机相与水相体积比为1∶1～1∶1.5，萃取2～4次；
(3)反相色谱纯化：将步骤(2)所得的固体残余物加入有机溶剂和水的混合溶液重溶，进行反相色谱纯化；上样量与填料的质量比为1∶30～1∶100；依次用洗脱液进行三次梯度洗脱，每次洗脱体积为2～4倍柱体积；取第二次洗脱液减压浓缩，得到生物碱组分；
所述的有机溶剂可为甲醇、乙醇或者乙腈等；
所述的洗脱液有机相的体积分数为第一次10～20％，第二次20～60％，第三次100％；
所述的反相色谱填料粒径为5～60μm；
(4)水解炮制：直接向步骤(3)所得的生物碱组分中加水，超声至固体完全溶解，滴加氨水调碱性，回流煮沸，冷却，冷冻干燥得到注射用乌头提取物；
所述的水溶液用量为400～600倍量(w∶v)w∶v是指生物碱组分的质量和水溶液的体积比。
所述的水解炮制碱性条件为pH8～10；
所述的水解温度为60～100℃恒温环境，水解时间为20min～3h；
所述的注射用乌头提取物采用外标法，测得单酯型生物碱含量以苯甲酰乌头碱，苯甲酰中乌头碱和苯甲酰次乌头碱的总量计大于20％，双酯型生物碱含量以乌头碱，中乌头碱和次乌头碱的总量计小于4％。另有水解生成的胺醇型生物碱和中间产物焦乌头碱。
淡黄色的乌头提取物，采用外标法测得乌头提取物中单酯型生物碱含量大于20％，双酯型生物碱含量小于4％，换算到药材中双酯型生物碱含量小于0.005％，优于《中国药典》中制川乌和制草乌项下毒性成分双酯型生物碱的质量标准。
与现有技术相比，本发明的积极效果是：
(1)杂质含量少，水解过程稳定：本发明通过乙醇超声得到乌头生物碱提取液，采用有机相萃取除去了强极性杂质，反相色谱纯化除去了弱极性杂质，避免了水解炮制过程副反应的发生，为水解过程的稳定性和高效性提供了有力的保障。
(2)毒性成分双酯型生物碱含量低：本发明采用碱性水解炮制方法，得到产物用外标法测定双酯型生物碱含量以乌头碱，中乌头碱和次乌头碱总量计小于4％，控制了毒性成分双酯型生物碱的含量；
(3)方法简单易行，操作简便：本发明涉及到的注射用乌头提取物的制备方法，仪器自动化程度高，操作方法简便，可适用于大规模生产。
【具体实施方式】
以下提供本发明一种注射用乌头提取物的制备方法的具体实施方式。
实施例1
生川乌500g，粉碎，加入10倍量95％乙醇超声提取2次，每次1h，合并乙醇提取液，蒸至无醇味；加水定容至100mL，滴加1mL氨水(pH9～10，溶液颜色加深)，加入100mL乙酸乙酯溶液萃取3次，合并乙酸乙酯层，蒸干；加入100mL20％甲醇溶解，分三次过20g C18反相色谱填料，每次上样33mL，再用3倍柱体积20％甲醇水溶液、3倍柱体积40％甲醇水溶液和100％甲醇溶液洗脱，取40％甲醇水洗脱液蒸干；加入600倍量的水溶解(滴加氨水调pH8-9)，80℃油浴水煮1h，冷却，冷冻干燥，得到川乌提取物质量为0.32g。采用高效液相色谱法外标法测得单酯型生物碱含量以苯甲酰乌头碱，苯甲酰中乌头碱和苯甲酰次乌头碱的总量计约为20.6％，双酯型生物碱含量以乌头碱，中乌头碱和次乌头碱的总量计约为3.5％。
实施例2
生川乌500g，粉碎，加入8倍量75％乙醇超声提取2次，每次1h，合并乙醇提取液，蒸至无醇味；加水定容至100mL，滴加氨水调pH8～9，加入100mL乙酸乙酯溶液萃取4次，合并乙酸乙酯层，蒸干；加入100mL20％甲醇溶解，分三次过20g C18反相色谱填料，每次上样33mL，再用2倍柱体积20％甲醇水溶液、3倍柱体积50％甲醇水溶液和100％甲醇溶液洗脱，取50％甲醇水洗脱液蒸干；加入500倍量的水溶解(滴加氨水调pH8-9)，70℃油浴水煮2h，冷却，冷冻干燥，得到川乌提取物质量为0.33g。采用高效液相色谱法外标法测得单酯型生物碱含量以苯甲酰乌头碱，苯甲酰中乌头碱和苯甲酰次乌头碱的总量计约为20.5％，双酯型生物碱含量以乌头碱，中乌头碱和次乌头碱的总量计约为3.9％。
本发明的制备工艺重复性好，自动化程度高，操作工艺简便，适合于大规模工业化生产；得到的乌头提取物有效的去除了色素等大量杂质，提高了药效成分单酯型生物碱的含量，控制了毒性成分双酯型生物碱的含量，经适当的药效学和毒性评价，可作用乌头注射剂的原料。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，其具体步骤为：
(1)超声提取：将乌头药材粉碎后加入乙醇水溶液超声提取两次，合并两次提取液，蒸至无醇味；
(2)有机相萃取：直接向步骤(1)所得的提取液中加水补充至固体充分溶解，滴加氨水调碱性；加入有机溶剂萃取，合并有机相溶液蒸干；
(3)反相色谱纯化：将步骤(2)所得的固体残余物加入有机溶剂和水的混合溶液重溶，进行反相色谱纯化；上样量与填料的质量比为1∶30～1∶100；依次用洗脱液进行三次梯度洗脱，每次洗脱体积为2～4倍柱体积；取第二次洗脱液减压浓缩，得到生物碱组分；
(4)水解炮制：直接向步骤(3)所得的生物碱组分中加水，超声至固体完全溶解，滴加氨水调碱性，回流煮沸，冷却，冷冻干燥得到注射用乌头提取物。
2.如权利要求1所述的一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，在所述的步骤(1)中，所述的乙醇水溶液的体积浓度为75～100％，用量为6～10倍量(w∶v)；
所述的提取时间为每次1～3小时。
3.如权利要求1所述的一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，在所述的步骤(2)中，所述的碱性条件为pH8～10，有机溶剂为乙酸乙酯，环己烷，二氯甲烷中的一种；
所述的有机相与水相体积比为1∶1～1∶1.5，萃取2～4次。
4.如权利要求1所述的一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，在所述的步骤(3)中，所述的有机溶剂可为甲醇、乙醇或者乙腈中的一种。
5.如权利要求1所述的一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，在所述的步骤(3)中，所述的洗脱液有机相的体积分数为第一次10％～20％，第二次20％～60％，第三次100％。
6.如权利要求1所述的一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，在所述的步骤(3)中，所述的反相色谱填料粒径为5～60μm。
7.如权利要求1所述的一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，在所述的步骤(4)中，所述的水溶液用量为400～600倍量(w∶v)。
8.如权利要求1所述的一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，在所述的步骤(4)中，所述的水解炮制碱性条件为pH8～10。
9.如权利要求1所述的一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，在所述的步骤(4)中，所述的水解温度为60～100℃恒温环境，水解时间为20min～3h。
10.如权利要求1所述的一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，在所述的步骤(4)中，所述的注射用乌头提取物采用外标法，测得单酯型生物碱含量以苯甲酰乌头碱，苯甲酰中乌头碱和苯甲酰次乌头碱的总量计大于20％，双酯型生物碱含量以乌头碱，中乌头碱和次乌头碱的总量计小于4％。另有水解生成的胺醇型生物碱和中间产物焦乌头碱。
CN201410024866.6A 2014-01-20 2014-01-20 一种注射用乌头提取物的制备方法 Pending CN103768173A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410024866.6A CN103768173A (zh) 2014-01-20 2014-01-20 一种注射用乌头提取物的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410024866.6A CN103768173A (zh) 2014-01-20 2014-01-20 一种注射用乌头提取物的制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN103768173A true CN103768173A (zh) 2014-05-07

Family

ID=50561233

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410024866.6A Pending CN103768173A (zh) 2014-01-20 2014-01-20 一种注射用乌头提取物的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103768173A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107569543A (zh) * 2017-09-19 2018-01-12 吉林大学 一种单酯型乌头总生物碱的制备方法及其应用
CN108452036A (zh) * 2018-03-28 2018-08-28 合肥工业大学 一种川乌有效成分划段的提取分离工艺

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101357167A (zh) * 2008-09-12 2009-02-04 中国科学院长春应用化学研究所 一种增加乌头属植物提取物中单酯型生物碱含量的方法
CN101829201A (zh) * 2010-05-19 2010-09-15 重庆市中药研究院 一种从乌头药材中提取生物碱的方法
CN102579612A (zh) * 2012-03-27 2012-07-18 新疆医科大学 一种准噶尔乌头总生物碱的提取方法
CN102617468A (zh) * 2012-03-07 2012-08-01 西北师范大学 一种超声辅助提取高乌甲素的方法
CN103301214A (zh) * 2013-06-20 2013-09-18 上海北杰集团关东药业有限公司 一种改进的乌头注射液制备工艺
KR20130139678A (ko) * 2012-06-13 2013-12-23 정소영 한약재 혼합 추출물 및 이를 함유하는 약학 조성물 또는 건강기능식품

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101357167A (zh) * 2008-09-12 2009-02-04 中国科学院长春应用化学研究所 一种增加乌头属植物提取物中单酯型生物碱含量的方法
CN101829201A (zh) * 2010-05-19 2010-09-15 重庆市中药研究院 一种从乌头药材中提取生物碱的方法
CN102617468A (zh) * 2012-03-07 2012-08-01 西北师范大学 一种超声辅助提取高乌甲素的方法
CN102579612A (zh) * 2012-03-27 2012-07-18 新疆医科大学 一种准噶尔乌头总生物碱的提取方法
KR20130139678A (ko) * 2012-06-13 2013-12-23 정소영 한약재 혼합 추출물 및 이를 함유하는 약학 조성물 또는 건강기능식품
CN103301214A (zh) * 2013-06-20 2013-09-18 上海北杰集团关东药业有限公司 一种改进的乌头注射液制备工艺

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
彭波等: "反相离子对高效液相色谱法分离测定川乌和附片中乌头类生物碱的方法研究", 《药物分析杂志》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107569543A (zh) * 2017-09-19 2018-01-12 吉林大学 一种单酯型乌头总生物碱的制备方法及其应用
CN108452036A (zh) * 2018-03-28 2018-08-28 合肥工业大学 一种川乌有效成分划段的提取分离工艺

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103896890A (zh) 一种穿心莲内酯的提取工艺
CN106349304B (zh) 高纯度荨麻新苷及荨麻木脂素的制备方法
CN103768173A (zh) 一种注射用乌头提取物的制备方法
CN104434676A (zh) 一种三七浸膏粉提取工艺
CN101974005B (zh) 一种高含量倍半萜类雷公藤生物碱的制备方法
CN101780126B (zh) 巧玲花中的皂苷类化合物及其提取方法和应用
CN101301370B (zh) 一种以乌头属中药材为原料制备单酯型生物碱的方法
CN106543003A (zh) 一种由返魂草提取和制备绿原酸的方法
CN103524578B (zh) 一种从牡丹雄蕊中提取分离芍药苷类化合物的方法
CN107880084B (zh) 从凌霄属植物花中提取制备高纯度毛蕊花糖苷的方法
CN103450286A (zh) 独一味中四种环烯醚萜苷类单体化合物的分离制备方法
CN103467534B (zh) 一种从石榴皮中提取安石榴甙的方法
CN103570548B (zh) 一种丹酚酸a的制备方法
CN104474068B (zh) 鸡矢藤提取物及其用途
CN113082092A (zh) 一种川乌总乌头原碱提取物及其医药应用
CN105348338A (zh) 从琼岛染木树中提取分离鸡屎藤苷酸的方法
CN110772549A (zh) 一种鸦胆子汇总抗肿瘤新成分的制备方法
CN104402960A (zh) 糠酸环戊烷并多氢菲酯a及其提取方法和药物用途
CN104231014A (zh) 一种利用超临界co2萃取水杨苷的方法
CN108689934A (zh) 一种乌头碱的制备方法
CN110960577A (zh) 一种延胡索中叔胺碱类组分的制备方法
CN103588745A (zh) 一种从毛喉鞘蕊花中提取和分离弗斯可林的方法
CN101747157B (zh) 虎杖中白藜芦醇的简易制备方法
CN101357167A (zh) 一种增加乌头属植物提取物中单酯型生物碱含量的方法
CN106631940A (zh) 一种高纯度大蒜三硫二丙烯的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
AD01 Patent right deemed abandoned

Effective date of abandoning: 20161116

C20 Patent right or utility model deemed to be abandoned or is abandoned