CN103743611A - 一种烟草腺毛及腺毛分泌物的染色液和染色方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种烟草腺毛及腺毛分泌物的染色液，其特征在于每100ml染色液含1mg固体碘和3mg固体碘化钾。本发明可以在显微镜下可非常明显直观地看到烟草腺毛的形态结构和其分泌物情况，简单快速且非常清晰，同时也能对腺毛密度进行准确计数。本发明成本低，方法简单，耗时短，可以短时间内检测大量样本，获得可靠结果。
Description
技术领域
本发明属于检测或测定领域，具体涉及烟草腺毛及腺毛分泌物的染色。
技术背景
烟草腺毛是烟草表皮毛的一种，占表皮毛的85％左右，有分泌功能，是烟草叶片表面的重要器官。烟草腺毛由表皮细胞特化而来，分为基部、柄部和头部。基部的1个细胞与表皮相连，柄部由l一6个柱形细胞组成，头部由分泌细胞构成。根据柄部细胞的数量和形态特点可把烟草腺毛分为长柄腺毛和短柄腺毛。长柄腺毛柄部一般有几个比较明显的长柱形细胞。短柄腺毛柄部由1～2个较短的柱形细胞构成。腺毛头部由分泌细胞构成，长柄腺毛头部较小，而短柄腺毛头部明显膨大，四周呈皱褶状，有凹陷和突起。一般认为腺毛腺头细胞具有分泌功能，而柄和基细胞不具分泌功能。腺毛能分泌精油、树脂、蜡质(生产上将这些混合物称为“烟油”)等物质，这些物质的化学成份主要是烷烃、萜醇、脂肪醇、树脂、高级脂肪酸及挥发性醛、酮、酸等的混合物。腺毛分泌物与烟草的香气和吃味密切相关，是烟叶香气和吃味的重要前体物质，同时对烟草的抗虫性抗微生物侵染也有重要作用。一般说来，烟草叶片腺毛密度大、分泌物多，香味比较浓，品质优；烟叶在去除表面分泌物后，香味明显减弱。因此，烟草腺毛的形态结构、密度和分泌活动对烟叶香气品质以及烟叶质量有重要影响，对烟草腺毛的深入研究在烟草工业加工和良种选育方面具有重要意义。
目前对烟草腺毛的形态结构观察主要通过扫描电镜进行。将烟草叶片固定，切片，染色后在电镜下观察，可以看到烟草腺毛的细微结构。但通过电镜观察烟草腺毛对技术和设备要求较高，费用昂贵，花费时间长，观察结果受样品前期处理的影响较大，而且观察范围较小，在对烟草叶片腺毛进行大范围、多样品研究时有极大困难。另一种观察烟草腺毛的方法是将烟草叶片做成水玻片直接在显微镜下进行观察。该方法虽然简单，但观察结果较差，无法满足烟草腺毛深入研究的需要。如何对烟草腺毛的形态结构和分泌活动进行清晰直观的观察是一直以来困扰烟草科研工作者的一个难题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种直观、快捷、方便的烟草腺毛及腺毛分泌物的染色液和染色方法。
本发明的目的是通过以下措施实现的：
一种烟草腺毛及腺毛分泌物的染色液，其特征在于每100ml染色液含1mg固体碘和3mg固体碘化钾。烟草腺毛分泌物可以与碘溶液反应呈现棕褐色，在显微镜下可以清楚地观察到每个腺毛顶部呈棕褐色的腺毛分泌物，从而实现对腺毛的精确观察。
采用上述染色液的染色烟草腺毛及腺毛分泌物的方法，染色时间为2～5分钟。
采用上述染色液的染色烟草腺毛及腺毛分泌物的方法，包括以下步骤：将烟草叶片浸入上述染色液里染色2～5分钟，取出后用水冲洗，放在显微镜下观察。使尽可能多的染色物质与染料均匀、充分、有机结合，又防止了可溶性染色物质的溶解而削弱甚至达不到染色效果。
有益效果
1.本发明可以在显微镜下可非常明显直观地看到烟草腺毛的形态结构和其分泌物情况，简单快速且非常清晰，同时也能对腺毛密度进行准确计数。
2. 本发明的染色结果以绿色和白色作为背景色，着色为棕褐色或深蓝色，色彩差异大，对比强烈，极易观察，并且可以通过腺毛染色的颜色深浅定量估测所观察腺毛分泌物量；腺毛直立于叶片上，分泌物粘附在腺毛端部，腺毛易拉倒拉断，分泌物的量、位置易转移，而本发明染色后并保留维持了腺毛和分泌物本身的自然形态，还能对腺毛与分泌物加以区分，染色结果能真实可靠的反映腺毛及分泌物的生长情况，甚至可用于记录腺毛的生长发育的动态过程，将各阶段的生长分泌状态固化下来作为研究依据。
3. 本发明观察视野开阔，能真实有效的反映烟草腺毛的生长发育情况。
4. 本发明成本低，方法简单，耗时短，可以短时间内检测大量样本，获得可靠结果。
附图说明
图1 实施例1染色前的烟草腺毛
图2 实施例1染色后的烟草腺毛。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的具体实施方式做进一步的描述，并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。
实施例1
材料：野生型烟草TN90
染色液配置： 配置100ml染色液，称1mg固体碘和3mg固体碘化钾，蒸馏水定容至100ml。
染色步骤：取生长至7周左右完全展开的烟草植株TN90叶片两片，取样时取从上往下第五片叶片。将两个叶片同时浸入染色液里染色2分钟，拿出后蒸馏水冲洗2次，直接放在体式显微镜下观察。
结果：未染色的野生型的烟草腺毛及其腺毛分泌物呈透明状，不易观察（如图1）。在显微镜下可清晰地观察到烟草的腺毛形态和其呈棕褐色的腺毛分泌物（如图2）；通过显微观察及计算得知，烟草的腺毛密度为350个/cm2，而且腺毛分泌物量多。
结论：野生型烟草TN90的叶面手感发涩，粘性大。经染色，可清楚观察叶片腺毛的密度及分泌物的分泌量。
Claims (3)
1. 一种烟草腺毛及腺毛分泌物的染色液，其特征在于每100ml染色液含1mg固体碘和3mg固体碘化钾。
2. 采用权利要求1所述的染色液染色烟草腺毛及腺毛分泌物的方法，染色时间为2～5分钟。
3. 采用权利要求1所述的染色液染色烟草腺毛及腺毛分泌物的方法，包括以下步骤：将烟草叶片浸入上述染色液里染色2～5分钟，取出后用水冲洗，放在显微镜下观察。
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