CN103734538A - 一种吉富罗非鱼保肝与增强免疫力的饲料配制方法及投喂方法 - Google Patents

Abstract

本发明公布了一种吉富罗非鱼保肝与增强免疫力的饲料配制方法及投喂方法，包括饲料配制、几丁聚糖的添加和饲料投喂步骤。通过上述方法处理9周后，吉富罗非鱼免疫指标明显上升，肝脏应激减小，肝脏抗氧化应激能力增强，肝脏中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活力、谷胱甘肽与谷胱甘肽过氧化物酶活力均明显升高，丙二醛水平下降。血清中葡萄糖、胆固醇和低密度胆固醇水平明显下降，碱性磷酸酶和高密度胆固醇水平明显上升。本发明所添加的几丁聚糖是无拮抗作用的微生物发酵产生的代谢产物，具有分子量小，易于吸收、价格低廉，同时取材相对容易等特点。罗非鱼摄取后易于消化吸收，体内基本无残留，并有很好地免疫增强剂作用，符合新型绿色健康添加剂的要求。

Description

一种吉富罗非鱼保肝与增强免疫力的饲料配制方法及投喂方法

技术领域

本发明属于水产养殖的饲料配方技术，具体涉及一种能够提高吉富罗非鱼免疫力与抗海豚链球菌感染能力的饲料配制及投喂方法。

背景技术

自2009年以来，我国南方多个省市爆发了罗非鱼链球菌病，其发病率高达40%，死亡率接近100%，链球菌病一直被养殖户喻为罗非鱼世界的“H1N1”。在不少养殖地区经常可见由于疾病暴发而倾家荡产的养殖户，疾病的发生严重挫伤了养殖户养殖积极性，也给当地罗非鱼产业造成了巨大的经济损失。

近几年，随着水产工作者对链球菌病的研究深入，提出了一些行之有效的方法。一是改善水环境，通过增加水体中光合细菌等有益菌来改善水质，调节罗非鱼健康状态。二是在饲料中添加免疫增强剂，如酵母多糖、维生素C和维生素E等可能提高鱼体免疫力，一些复合中草药也可以增强免疫力与抗病能力。然而，这些方法要么材料制作工艺繁琐、成本较高，要么选取的材料不具有普遍性，来源较为复杂。免疫疫苗可以对鱼体产生很好的免疫保护力，但是制作成本较高，影响了免疫疫苗的普及。化学药物治疗疾病是最直接和简便的措施手段，但长期使用或使用不当就难免使病原体产生耐药性导致防治失败，不仅破坏了养殖微生态环境，而且存在的药物残留也会危及人类健康。综上所述，我们可以看出，寻求一种价格低廉，取材容易，加工工艺简单，同时抗病保护能力较好的免疫增强剂是一种切实可行的方法。

发明内容

为了克服现有罗非鱼抗链球菌病害感染方法单一，效果较差，污染严重，无法从罗非鱼自身提高抗病能力的缺点。本发明提供一种饲料添加剂配制与投喂方法，能够有效的提高罗非鱼的天然免疫力，提高其抗海豚链球菌感染能力。同时，所使用的饲料添加剂属于绿色环保制剂，鱼体残留以及对环境的负作用较小，符合绿色健康水产品的要求。

本发明为实现上述目的，采取如下技术方案。

提高吉富罗非鱼免疫力与抗海豚链球菌感染能力，主要设计思想与分析程序包括以下步骤：

一是饲料配制，按照吉富罗非鱼的营养需要配制幼鱼与成鱼阶段的基础日粮，其中幼鱼阶段饲料中的营养成分包括粗蛋白31%～35%，粗脂肪7%～10%，用于饲养前5周；成鱼阶段饲料中的营养成分包括粗蛋白26%～29%，粗脂肪5%～8%，用于饲养后4周。

二是几丁聚糖的添加，幼鱼阶段饲料中几丁聚糖的添加量为1.4%～1.8%，将几丁聚糖按照14ml～18ml每1kg饲料的原则，先加水稀释后均匀泼洒到饲料上；成鱼阶段几丁聚糖的添加量为0.9%～1.2%，将几丁聚糖按照9ml～12ml每1kg饲料，加水稀释后均匀泼洒到饲料上。

三是饲料投喂，幼鱼阶段每天投喂3次（7：30、11：30和16：00），投喂量为体重的6%～10%；成鱼阶段每天投喂2次（8：00和15：00），投喂量为体重的3%～5%。

通过上述方法处理9周后，吉富罗非鱼免疫指标明显上升，主要表现在成鱼血液中红细胞和白细胞数量、血红蛋白浓度以及红细胞压积明显上升，同时血清中溶菌酶以及补体C3、超氧化物歧化酶活力也明显升高。肝脏应激减小，表现在血清中谷丙转氨酶活力明显下降。同时，肝脏抗氧化应激能力增强，超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活力、谷胱甘肽与谷胱甘肽过氧化物酶活力均明显升高，丙二醛水平下降。血清中葡萄糖、胆固醇和低密度胆固醇水平明显下降，碱性磷酸酶和高密度胆固醇水平明显上升。采用3.95×10⁶CPU/ml浓度的海豚链球菌菌液进行腹腔注射感染，196h小时后，添加几丁聚糖饲料组的死亡率为30.06%，远远低于对照组的52%。本发明所添加的几丁聚糖是无拮抗作用的微生物发酵产生的代谢产物，具有分子量小，易于吸收、价格低廉，同时取材相对容易等特点。罗非鱼摄取后易于消化吸收，体内基本无残留，并有很好地免疫增强剂作用，符合新型绿色健康添加剂的要求。

具体实施方式

一、饲料配制。选取3～5g的吉富罗非鱼幼鱼，按照2000尾/亩的密度放入池塘中。配制幼鱼阶段饲料，包括粗蛋白33%，粗脂肪8%。当吉富罗非鱼体重达到150g以上时，配制成鱼阶段饲料投喂，其中包含粗蛋白28%，粗脂肪7%。

二、饲料中几丁聚糖的添加。幼鱼阶段饲料中几丁聚糖的添加量为1.5%，将几丁聚糖按照15ml每1kg饲料的原则，先加水稀释后均匀泼洒到饲料上，通过饲料搅拌机混匀，用饲料制粒机制成颗粒，放置于阴凉处风干后，保存4℃中备用。成鱼饲料中几丁聚糖的添加量为1%，将几丁聚糖按照10ml每1kg饲料的原则添加至饲料中，饲料加工与保存方法同幼鱼阶段。

三、饲料投喂。幼鱼阶段每天投喂3次（7：30、11：30和16：00），投喂添加1.5%几丁聚糖的幼鱼饲料，投喂量为体重的6%～10%。投喂5周后，体重可达150g左右时，开始投喂添加1%几丁聚糖的成鱼饲料。成鱼阶段每天投喂2次（8：00和15：00），投喂量为体重的3%～5%，投喂4周。通过上述方法养殖9周后，吉富罗非鱼的体重达到350g左右。

表1对照组与添加几丁聚糖组血常规指标分析

添加几丁聚糖组的吉富罗非鱼成鱼血液中红细胞和白细胞数量、血红蛋白浓度以及红细胞压积明显高于未添加几丁聚糖的对照组。

表2对照组与添加几丁聚糖组血清生化与免疫指标分析

添加几丁聚糖组的吉富罗非鱼成鱼肝脏应激减小，血清谷丙转氨酶活力显著下降，免疫功能增加，表现为高密度胆固醇、溶菌酶、补体C3和超氧化物歧化酶活力明显上升。同时碱性磷酸酶也呈上升趋势，葡萄糖、胆固醇和低密度胆固醇明显下降。

表3对照组与添加几丁聚糖组肝脏抗氧化指标分析

添加几丁聚糖组的吉富罗非鱼成鱼肝脏抗氧化应激能力增强，超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活力、谷胱甘肽与谷胱甘肽过氧化物酶活力均明显升高，丙二醛水平下降。

养殖结束后，对照组与添加几丁聚糖饲料组分别选取30尾鱼进行海豚链球菌感染，以10尾/桶，每组设置3个平行。腹腔注射3.95×10⁶CPU/ml的海豚链球菌菌液，按照每100g体重注射0.15ml的原则进行注射。感染192小时后的累积死亡率见下表4。

表4对照组与添加几丁聚糖组吉富罗非鱼成鱼人工感染海豚链球菌192h后死亡率比较

经过本发明的处理，吉富罗非鱼成鱼免疫功能明显提高，肝脏抗氧化应激能力增强，感染海豚链球菌后的累积死亡率降低了21.13%。2013年5月开始，在广东茂名市和电白市，湛江雷州市以及广西柳州市等地选取6个罗非鱼养殖基地，在幼鱼与成鱼养殖阶段分别按照本发明方法添加几丁聚糖。8月份，在链球菌病高发季节，添加几丁聚糖的池塘，成鱼发病率降低了37.25%，发病后罗非鱼的成活率提高了16.17%。

Claims (2)

1.一种吉富罗非鱼保肝与增强免疫力的饲料配制方法，包括下述步骤：

（1）饲料配制：按照吉富罗非鱼的营养需要配制幼鱼与成鱼阶段的基础日粮，其中幼鱼阶段饲料中的营养成分包括粗蛋白31%~35%，粗脂肪7%~10%，用于饲养前5周；成鱼阶段饲料中的营养成分包括粗蛋白26%~29%，粗脂肪5%~8%，用于饲养后4周；

（2）几丁聚糖的添加：幼鱼阶段饲料中几丁聚糖的重量添加量为1.4%~1.8%，将几丁聚糖按照14ml~18ml每1kg饲料的原则，先加水稀释后均匀泼洒到饲料上；成鱼阶段几丁聚糖的添加量为0.9%~1.2%，将几丁聚糖按照9ml~12ml每1kg饲料，加水稀释后均匀泼洒到饲料上。

2.根据权利要求1所述的吉富罗非鱼保肝与增强免疫力的饲料的投喂方法，其步骤为：前5周，幼鱼阶段每天白天投喂3次，时间间隔3-4小时，投喂量为体重的6%~10%；后4周，成鱼阶段每天白天投喂2次，时间间隔7-8小时，投喂量为体重的3%~5%。