CN103720716A - 改性黄腐植酸在制备抗肿瘤药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了改性黄腐植酸在制备抗肿瘤药物中的应用,所述的改性黄腐植酸的制备方法包括以下步骤:(1)将含黄腐植酸的原料或黄腐植酸,在水中经HNO3和H2SO4定向降解,制得黄腐植酸降解物;(2)微波条件下,将步骤(1)制得的黄腐植酸降解物,与曲酸或含曲酸的提取物反应,即得。本发明与现有的治疗药物相比,具有三个方面的优势:1)可利用泥炭资源提取改性黄腐植酸,充分利用了资源,保护了环境;2)原料药物资源丰富,与现有的治疗药物相比疗效相同,但性价比更高;3)与其他西药相比,疗效好但不良反应少。本发明改性黄腐植酸制剂将具有良好的社会效益和经济效益。
Description
技术领域
本发明属于药物领域,特别涉及泥炭提取物中的改性黄腐植酸的药物用途。
背景技术
泥炭是一种经过几千年所形成的天然沼泽地产物,是煤化程度最低的煤,也是腐殖煤系列最原始的状态。泥炭是在泥炭沼泽中堆积形成的,以后在上覆沉积物的压力及进一步菌解条件下,经过压紧和脱水变得更加坚固,成为褐煤,再继续受到地下温度和压力作用时,经煤化作用形成烟煤或无烟煤。泥炭中的有机质主要是纤维素、半纤维素、木质素、腐殖酸、沥青物质等。泥炭中腐殖酸含量常为10~30%,高者可达70%以上。泥炭用途广泛,可用于农业,如作为有机肥料和育苗及花卉培植的土基,还可用于工业,如作为燃料发电、化工(从中提取多种原料)、酿酒、医药、制陶以及建筑材料等。泥炭及其主要有效成分腐植酸类物质,在医药领域有多种用途,有部分报道可以用于胃肠道疾病、关节炎等,具有收敛、消炎、止痛、去腐生肌作用,对皮肤病、湿疹等有一定疗效。
中国专利(专利号200810205110.6)“一种黄腐植酸的改性方法及所得产品、及其在制备提高免疫力或防治HIV药物中的应用”公开了一种黄腐植酸的改性方法,其包括如下步骤:(1)将含黄腐植酸的原料或黄腐植酸,在水中,在降解剂的作用下,经定向降解,制得黄腐植酸降解物;所述的降解剂为HNO3、HNO3和H2SO4,或者醋酸和H2O2;(2)微波条件下,将步骤(1)制得的黄腐植酸降解物,与曲酸或含曲酸的提取物反应,即制得本发明的黄腐植酸改性物。该发明还涉及由上述方法制得的黄腐植酸改性物及其在制备提高免疫力的药物或防治HIV的药物中的应用。该发明的黄腐植酸改性物具有显著的提高免疫力,尤其是提高HIV患者免疫力的效果,且毒副作用小,耐药性小,靶向性明确,且制备方法简单易行,成本低。
肿瘤是危害人类健康最严重的一类常见病、多发病。由于环境污染加剧、营养失衡、人口老龄化以及激烈竞争下生活压力增大等因素,目前全世界恶性肿瘤的发病率越来越高。目前,我国肿瘤发病率约为200/10万,我国每年新发癌症病例约220万以上,每年在治患者600万以上,医疗费用在1500亿以上,每年死于癌症人数超过160万。
现代医学对肿瘤的治疗手段主要包括手术治疗、放射治疗、化学药物治疗等3大类。但是上述疗法在治疗肿瘤时不可避免地会给患者带来不良反应,影响患者的生存质量。当今,临床疗效的评价理念正在从“以疾病为核心,最大限度的杀伤肿瘤”的治疗模式向以“患者为核心,谋求最好生活质量的人性化“治疗模式转变。这种理念与中医理论特色即“整体观 念,辨证论治,调和阴阳”,相符合。
中医防治肿瘤有几千年的历史,肿瘤在中医中属“积聚”范畴,历代诸家均有论述,如《难经·五十五难》中“故积者,五脏所生;聚者,六腑所成。也积者,阴气也,其始发有常处,其病不离其部”,中医认为,肿瘤是正气亏虚、邪毒内侵凝聚而成早期以邪实为主,中晚期患者还存在着明显的虚像。其病的发生多由情志郁结、饮食所伤,寒邪外袭以及病后体虚,或黄疸、疟疾等经久不愈以致肝脾受损、脏腑失和、气机阻滞、瘀血内停或兼痰湿凝滞而成积聚。
从20世纪50年代起,我国对肿瘤的病因病机、中医治癌古代理论、古代秘方及民间验方进行系统整理和研究,提出了中医、中西医结合治疗肿瘸的基本方法与思路,且开始重视辨证论治规律等中医理论指导下的抗癌研究。中医学者从多层次、多角度验证了中医药在肿瘤治疗中的独到作用,明确了中医药在肿瘤综合治疗中的作用,并结合现代医学的最新进展,在采用中医药提高肿瘤患者生活质量、预防复发转移、抗肿瘤多药耐药、中药对肿瘤新生血管的干预及对放、化疗减毒增敏等方面进行了一系列研究。研究发现中药治疗肿瘤在稳定瘤体,调节机体功能,增加免疫能力,改善临床症状,减轻放化疗毒副作用,延长带瘤生存时间方面有独特疗效。从天然产物中发现新的抗肿瘤中药具有良好的经济效益及社会效益。
发明内容
本发明的目的是提供改性黄腐植酸在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明的技术方案是这样实现的:改性黄腐植酸在制备抗肿瘤药物中的应用,所述的改性黄腐植酸的制备方法包括以下步骤:(1)将含黄腐植酸的原料或黄腐植酸,在水中经HNO3和H2SO4定向降解,制得黄腐植酸降解物;(2)微波条件下,将步骤(1)制得的黄腐植酸降解物,与曲酸或含曲酸的提取物反应,即得。
所述的改性黄腐植酸在制备抗肿瘤且减轻环磷酰胺损伤免疫器官的药物中的应用。
所述的药剂的剂型为口服剂型。
所述的步骤(1)中,含黄腐植酸的原料为含黄腐殖酸的泥炭、褐煤或风化煤。
所述的步骤(1)中,HNO3和H2SO4的质量比为5:1~3:1。
所述的步骤(1)中,降解剂HNO3和H2SO4的用量为20~30%,百分比为降解剂在水中的质量浓度百分比。
所述的步骤(1)中,定向降解在超声波条件下进行,超声波频率为100~200KHz,温度为90-120℃,时间100~140分钟。
所述步骤(2)中,所述的微波条件为微波频率2450Hz,微波功率450~550W下,反应 25~35min。
所述的步骤(2)中,黄腐植酸降解物与曲酸或含曲酸的提取物的摩尔比为1:1~1:2。
本发明与现有的治疗药物相比,具有三个方面的优势:1)可利用泥炭资源提取改性黄腐植酸,充分利用了资源,保护了环境;2)原料药物资源丰富,与现有的治疗药物相比疗效相同,但性价比更高;3)与其他西药相比,疗效好但不良反应少。本发明改性黄腐植酸制剂将具有良好的社会效益和经济效益。
具体实施方式
本发明是改性黄腐植酸在制备抗肿瘤药物中的应用,所述的改性黄腐植酸为中国专利200810205110.6公开制备方法制得的产物,具体制备方法为:(1)将含黄腐植酸的原料或黄腐植酸,在水中经HNO3和H2SO4定向降解,制得黄腐植酸降解物;(2)微波条件下,将步骤(1)制得的黄腐植酸降解物,与曲酸或含曲酸的提取物反应,即得。优选的,步骤(1)中,含黄腐植酸的原料为含黄腐殖酸的泥炭、褐煤或风化煤。HNO3和H2SO4的质量比为5:1~3:1。降解剂HNO3和H2SO4的用量为20~30%,百分比为降解剂在水中的质量浓度百分比。定向降解在超声波条件下进行,超声波频率为100~200KHz,温度为90-120℃,时间100~140分钟。步骤(2)中,所述的微波条件为微波频率2450Hz,微波功率450~550W下,反应25~35min。黄腐植酸降解物与曲酸或含曲酸的提取物的摩尔比为1:1~1:2。
本发明的改性黄腐植酸是泥炭的活性成分,按照常规的制剂工艺,可以以改性黄腐植酸为主要活性成分,加入常规的赋形剂、调味剂、防腐剂、润滑剂、湿润剂、黏合剂、增稠剂、增溶剂等药物辅料,制成任何一种适于临床上使用的口服剂型,如胶囊剂、片剂、冲剂等。一般的,制剂的口服改性黄腐植酸剂量为每日4.5克,日服3次,每次服用1.5克。
由于本发明首次公开了改性黄腐植酸在制备抗肿瘤药物中的应用,尤其是改性黄腐植酸在制备抗肿瘤且减轻环磷酰胺损伤免疫器官的药物中的应用。将改性黄腐植酸单独或与其它活性组份或辅料配合制成药剂,只要该药剂用于治疗肿瘤,无论以何种给药方式,均属于本发明的保护范围。
本发明首次证实了改性黄腐植酸具有抑瘤、与环磷酰胺合用可以增效及减毒(减轻其对免疫器官的损伤)、增加小鼠外周血白细胞数,对小鼠60Co射线辐照致骨髓损伤模型有较好的放疗保护作用。以下结合具体的实施例对本发明做进一步的说明,但本发明并不限于此特定例子。
实施例1
将100g天然泥炭黄腐植酸,在含降解剂HNO3和H2SO4的水溶液(100ml,降解剂总浓度 25wt%,HNO3和H2SO4的质量比为4:1)中,温度110℃下,150KHz的超声波下,定向降解反应120min,得到平均分子量为140的黄腐植酸降解物。将1mol黄腐植酸降解物与曲酸提取物(含1.5mo1曲酸)在微波频率2450Hz,微波功率500W下,反应30min,再经医用活性炭吸附去杂,即制得本实施例的黄腐植酸改性物粉末。
实施例2改性黄腐植酸胶囊的制备
制备方法:将改性黄腐植酸、淀粉、和L-HPC混合,混合均匀;加入淀粉浆适量制软材,用16目制粒、干燥并整粒,加入微粉硅胶、硬脂酸镁混合均匀,制成1000粒。
口服剂量为日服3次,每次服用3粒。
实施例3改性黄腐植酸片剂的制备
配方:实施例1所得的改性黄腐植酸450g
硬脂酸镁5g
糊精40g
制备方法:取主药改性黄腐植酸与糊精充分混匀后过60目筛,制成软材,24目筛制粒,干燥,整粒,压片前加入硬脂酸镁充分混匀,测定颗粒含量合格后,压片即得,制成1000粒。
口服剂量为日服3次,每次服用3粒。
实验例1改性黄腐植酸的抗肿瘤作用研究
1.实验材料
1.1实验动物SPF级KM小鼠,雄性,体重18~22g,72只,小鼠肉瘤细胞株S180。
1.2实验药物改性黄腐植酸(FA)。分别精密称取实施例1所得的改性黄腐植酸粉末2.32g,4.64g,9.28g,溶解,定容至100ml,分别作为FA低、中、高浓度药液,冷冻备用。
1.3试剂注射用环磷酰胺(CTX),产品批号:12040925,江苏恒瑞医药股份有限公司。
1.4仪器分析天平;电子天平。
2.实验方法
2.1肿瘤动物模型的建立
取已接种7d的荷瘤S180腹水瘤小鼠,脱臼处死。在无菌条件下抽取腹腔内瘤细胞,并以生理盐水洗涤3次,2500r/min离心3min,弃上清液,用无菌生理盐水调整瘤细胞浓度为1.0×107/mL,接种于每只小鼠右前肢腋部皮下,接种量为0.2ml/只。
2.2FA与CTX合用对小鼠肿瘤生长的影响
将小鼠随机分成6组。即模型组、环磷酰胺(CTX)组、口服改性黄腐植酸(FA)中剂量组、CTX+FA低剂量组、CTX+FA中剂量组、CTX+FA高剂量组。模型组以蒸馏水灌胃,给药剂量为25ml/kg;环磷酰胺(CTX)组以CTX生理盐水溶液腹腔注射,给药剂量为20mg/kg;口服FA中剂量组以FA中浓度药液灌胃,给药剂量为1.1g/kg;CTX+FA低剂量组、CTX+FA中剂量组、CTX+FA高剂量组皆以20mg/kg腹腔注射环磷酰胺的同时,分别以FA低、中、高浓度药液进行灌胃,给药剂量分别为0.55g/kg,1.1g/kg,2.2g/kg。连续给药7天,末次给药后24h脱臼处死荷瘤小鼠,取瘤并称质量,比较单纯用CTX治疗组与加用FA组,单服FA间抑瘤作用的差异,观察FA对CTX抑瘤的增效作用,并计算各组的抑瘤率,计算公式如下:
2.3FA与CTX联用对小鼠免疫器官的影响
小鼠肿瘤模型的建立、分组、给药均同3.2。末次给药后24h脱臼处死荷瘤小鼠,取脾脏、胸腺并分别称质量,用以下公式分别计算脾脏指数和胸腺指数,观察FA的减毒作用。
2.4统计学方法
3.实验结果
3.1FA与CTX合用对小鼠肿瘤生长的影响
与模型组相比(见表1),环磷酰胺(CTX)组、口服改性黄腐植酸(FA)中剂量组、CTX+FA低剂量组、CTX+FA中剂量组、CTX+FA高剂量组均有明显的抑瘤作用。但是与环磷酰胺(CTX)组相比,CTX单独应用抑瘤效果一般,CTX+FA低剂量组、CTX+FA高剂量组可在一定程度上提高其抑瘤率。
表1FA与CTX合用对荷瘤小鼠的抑瘤作用(X±s)
与模型组相比,*P<0.05,**P<0.01;与CTX组相比,#P<0.05
3.2FA与CTX合用对荷瘤小鼠免疫器官的影响
3.2.1对荷瘤小鼠脾脏指数的影响
与模型组相比(见表2),各给药组的脾脏指数均有不同程度的下降。其中环磷酰胺(CTX)组、CTX+FA低剂量组、CTX+FA中剂量组、CTX+FA高剂量组的小鼠脾脏指数下降特别明显(P<0.01),说明环磷酰胺具有显著的导致荷瘤小鼠的脾脏萎缩的作用。而与CTX组的脾脏指数相比,CTX+FA低剂量组、CTX+FA中剂量组、CTX+FA高剂量组有了显著性的提高(P<0.05),口服改性黄腐植酸(FA)中剂量组的脾脏指数相差更为明显(P<0.01),说明FA能够改善由CTX所导致的脾脏的萎缩。
3.2.2对荷瘤小鼠胸腺指数的影响
与模型组相比(见表2),各给药组的胸腺指数均有不同程度的下降,说明环磷酰胺具有显著的导致荷瘤小鼠的胸腺萎缩的作用。而与CTX组的脾脏指数相比,CTX+FA高剂量组有显著性的增加(P<0.05),说明FA能够改善由CTX所导致的胸腺萎缩。
表2FA与CTX合用对荷瘤小鼠免疫器官的作用(X±s)
与模型组相比,*p<0.05,**p<0.01;与CTX组相比,#p<0.05,##p<0.01
4.结论
环磷酰胺具有广谱抗癌作用,是治疗恶性肿瘤最常用的烷化剂代表药物,但该药主要的毒副作用一直是临床使用中的一个突出问题。正如实验所说明的,该药可导致脾脏,胸腺等免疫器官出现严重的萎缩。因此在肿瘤治疗中如何降低放疗、化疗的毒副作用、改善肿瘤病人的状况已经成为治疗肿瘤的关键。结果发现,改性黄腐植酸有较强的抑瘤作用,与环磷酰胺合用,改性黄腐植酸能够改善由环磷酰胺所导致的动物脾脏及胸腺萎缩,提示改性黄腐植酸可以大幅度减少抗癌药物的对机体免疫系统的损伤。
实验例2改性黄腐植酸对小鼠60Co射线辐照致骨髓损伤模型减毒作用研究
1.实验材料
1.1动物SPF级KM小鼠,雄性,体重18~22g,72只(生产许可证号:SCXK(粤)2008-0002;控制饲养室室温20~25℃,湿度40~70%,自由饮水,摄食。
1.2药物改性黄腐植酸(FA)。分别精密称取实施例1所得的改性黄腐植酸粉末2.32g,4.64g,9.28g,溶解,定容至100ml,分别作为FA低、中、高浓度药液,冷藏备用。
1.3试剂地榆升白片(国药准字Z20026497;产品批号:130504)
1.4仪器电子天平;显微镜
2.实验方法
2.1造模随机选取60只C57BL/6小鼠,经60Co射线进行全身一次性照射,照射剂量为3.0Gy,4min。
2.2分组将未照射的12只分为空白组,照射的小鼠随机分为5组,分别为模型组,阳性对照组,改性黄腐植酸低、中、高剂量组。
2.3给药空白组与模型组灌蒸馏水,地榆升白片灌胃给药,剂量为0.15g/kg;改性黄腐 植酸低、中、高剂量组灌胃给药,给药剂量分别为:0.55g/kg,1.1g/kg,2.2g/kg。各组小鼠每天给药一次,连续给药12天,均按0.25ml/10g给与灌胃。实验结束前1天早上禁食不禁水。
2.4外周血白细胞计数
于末次给药24小时后,小鼠摘眼球取血,用血球计数板计数外周血白细胞数。在显微镜下用低倍镜计数4个大方格的白细胞总数,然后将该数乘以50,即得每立方毫米(1微升)的白细胞数。
2.5统计学分析
数据均采用SPSS13.0软件进行分析,计量资料采用One-Way ANOVA方差分析,组间用LSD比较,结果以平均数±标准差表示,以P<0.05为有统计学意义。
3.结果
结果显示(见表3),与正常对照组的小鼠外周血白细胞数相比,模型组显著降低,存在差异明显(P<0.01),表明造模成功。与模型组的小鼠外周血白细胞数相比,各给药组数据均与模型组有明显差异,其中改性黄腐植酸低剂量组、中剂量组与高剂量组存在显著性差异(P<0.01),说明改性黄腐植酸能够增加小鼠外周血白细胞数,对小鼠60Co射线辐照致骨髓损伤模型有较好的保护作用。
与模型组相比,*P<0.05,**P<0.01;与阳性对照药组相比,#P<0.05。
Claims (9)
1.改性黄腐植酸在制备抗肿瘤药物中的应用,所述的改性黄腐植酸的制备方法包括以下步骤:(1)将含黄腐植酸的原料或黄腐植酸,在水中经HNO3和H2SO4定向降解,制得黄腐植酸降解物;(2)微波条件下,将步骤(1)制得的黄腐植酸降解物,与曲酸或含曲酸的提取物反应,即得。
2.权利要求1所述的改性黄腐植酸在制备抗肿瘤且减轻环磷酰胺损伤免疫器官的药物中的应用。
3.根据权利要求1或2所述的改性黄腐植酸在制备抗肿瘤药物中的应用,其特征在于:所述的药剂的剂型为口服剂型。
4.根据权利要求1或2所述的改性黄腐植酸在制备抗肿瘤药物中的应用,其特征在于:所述的步骤(1)中,含黄腐植酸的原料为含黄腐殖酸的泥炭、褐煤或风化煤。
5.根据权利要求1或2所述的改性黄腐植酸在制备抗肿瘤药物中的应用,其特征在于:所述的步骤(1)中,HNO3和H2SO4的质量比为5:1~3:1。
6.根据权利要求1或2所述的改性黄腐植酸在制备抗肿瘤药物中的应用,其特征在于:所述的步骤(1)中,降解剂HNO3和H2SO4的用量为20~30%,百分比为降解剂在水中的质量浓度百分比。
7.根据权利要求1或2所述的改性黄腐植酸在制备抗肿瘤药物中的应用,其特征在于:所述的步骤(1)中,定向降解在超声波条件下进行,超声波频率为100~200KHz,温度为90-120℃,时间100~140分钟。
8.根据权利要求1或2所述的改性黄腐植酸在制备抗肿瘤药物中的应用,其特征在于:所述步骤(2)中,所述的微波条件为微波频率2450Hz,微波功率450~550W下,反应25~35min。
9.根据权利要求1或2所述的改性黄腐植酸在制备抗肿瘤药物中的应用,其特征在于:所述的步骤(2)中,黄腐植酸降解物与曲酸或含曲酸的提取物的摩尔比为1:1~1:2。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20140416 |