CN104706729B - 一种具有抗肿瘤功效的中药提取物及其提取方法和应用 - Google Patents
一种具有抗肿瘤功效的中药提取物及其提取方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种具有抗肿瘤功效的中药提取物及其提取方法和应用,按质量份数计,该中药提取物的原料药为3~9份木鳖子和2~8份马钱子。分别提取木鳖子提取物和马钱子提取物,再将二者混合即得到该中药提取物,其中木鳖子提取物是将木鳖子先用正己烷提取,弃去提取液后,再用乙酸乙酯提取得到的提取物;马钱子提取物是将马钱子用乙醇提取得到的提取物。该中药提取物能够在制备抗肿瘤药物方面应用。并且可以以该中药提取物为药用成分,添加辅料将其制备成胶囊或片剂进行使用。本发明发现了木鳖子和马钱子联合应用后具有良好的抗肿瘤效果,通过两者的药物协同作用能够使抗肿瘤的疗效得以最大化,具有很高的科研价值和良好的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域,具体涉及一种具有抗肿瘤功效的中药提取物及其提取方法和应用。
背景技术
肿瘤已成为严重威胁人类健康的主要问题,其发病率和死亡率成逐年上升的趋势。根据世界卫生组织(WHO)报道,预计2007年到2030年期间,全世界新出现的癌症病例将由1130万例增到1550万例,而癌症死亡人数将由790万人增至1150万人,增幅高达45%,因此预防与控制面临着更大的挑战。从植物中寻找药物,在世界范围内已成为抗肿瘤药物研究的一个重要的组成来源,目前研究表明很多天然植物的提取物具有良好的抗肿瘤的活性,很多天然产物或其结构改性化合物已进入临床研究范围。
中药复方是中医药防治疾病的主要手段。近年来,联合用药已经成为抗肿瘤疗法的重要手段,通过选择不同作用机制抗肿瘤药物或者不同治疗方法,协同作用使疗效得以最大化,降低肿瘤细胞的抵抗阈值,因此联合应用可以成为肿瘤治疗中单一治疗障碍时有效地应对策略,为新药开发奠定基础。
木鳖子为葫芦科(CUCURBITACEAE)苦瓜属(Momordica Linn.)植物木鳖Momordicacochinchinensis(Lour.)Spreng.的干燥成熟果实,主产于江苏、安徽、江西、湖南、四川、贵州、福建、台湾、广东、广西、云南和西藏。据《中华人民共和国药典》2005年版记载其干燥种子入药,味苦、微甘,有毒,入肝、脾、胃经,具散结消肿、攻毒疗疮功效。用于疮疡肿毒,乳痈,瘰疬,痔漏,干癣,秃疮。
马钱子(Strychnos nux-vomica L.)为马钱科(LOGANIACEAE,nom.conserv.)马钱属(Strychnos Linn.)植物的成熟种子。主产于我国福建、台湾、广东、海南、广西和云南南部,印度、斯里兰卡、缅甸、泰国、越南、老挝、柬埔寨、马来西亚、印度尼西亚和菲律宾等地区也有分布。中医将种子炮制后入药,性味苦,寒,有毒,归肝、脾经,具通络止痛、散结消肿之功效。
创新药物研究与开发是国家科技计划中的重大研究领域,目前虽然有不少防癌抗癌的基础药物的研究报道,但能够用于实际临床使用的特效药并未见报道,癌症的防治仍是医疗工作者的巨大难题,因此研究新型的防癌抗癌药物仍是医药科研工作者的工作重点,而之前也并未发现有木鳖子和马钱子联合应用作为防癌抗癌药物的相关报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有抗肿瘤功效的中药提取物及其提取方法和应用,发现木鳖子和马钱子联合应用后具有良好的抗肿瘤效果,可作为新型的抗肿瘤药物。
为达到上述目的,本发明采用的技术方案为:
一种具有抗肿瘤功效的中药提取物,按质量份数计,该中药提取物的原料药为3~9份木鳖子和2~8份马钱子。
该中药提取物由木鳖子提取物和马钱子提取物混合而成;其中木鳖子提取物是将木鳖子先用正己烷提取,弃去提取液后,再用乙酸乙酯提取得到的提取物;马钱子提取物是将马钱子用乙醇提取得到的提取物。
具有抗肿瘤功效的中药提取物的提取方法,包括以下步骤:
1)木鳖子的提取
将木鳖子药材粉碎,得到木鳖子碎末,采用索氏提取法,加入正己烷,将木鳖子碎末浸泡后加热回流5~8h进行提取,弃去得到的提取液,然后向提取后的木鳖子碎末中加入乙酸乙酯,加热回流5~8h进行提取,提取一次或多次,收集得到的提取液,再减压回收提取液中的溶剂,浓缩后得到木鳖子浸膏;
2)马钱子的提取
将马钱子药材粉碎,用乙醇加热回流进行提取,收集得到的提取液,再减压回收提取液中的溶剂,浓缩后得到马钱子浸膏;
3)将步骤1)得到的木鳖子浸膏和步骤2)得到的马钱子浸膏混合,即得到具有抗肿瘤功效的中药提取物。
所述步骤1)中木鳖子碎末浸泡12~20h后再加热回流;
所述步骤1)中正己烷的体积为木鳖子碎末体积的6~8倍,用正己烷加热回流时的回流温度为66~70℃;
所述步骤1)中乙酸乙酯的体积为木鳖子碎末体积的6~8倍,用乙酸乙酯加热回流时的回流温度为72~80℃。
所述步骤2)中用pH=4~6、体积分数为40~60%的乙醇提取马钱子,乙醇的体积为马钱子药材体积的6~8倍。
所述步骤2)中加热回流3~5次,回流温度为76~80℃,每次1~2h。
具有抗肿瘤功效的中药提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。
所述的抗肿瘤药物为治疗乳腺癌、肝癌、胃癌和/或宫颈癌的药物。
所述的抗肿瘤药物为抑制人肝癌细胞BEL-7402、人胃癌细胞SGC-7901、人子宫颈癌细胞Hela和/或人乳腺癌细胞MCF7生长的药物;
或者所述的抗肿瘤药物为抑制人乳腺癌细胞ZR-75-30增殖的药物;
或者所述的抗肿瘤药物为抑制小鼠S180肉瘤生长的药物。
具有抗肿瘤功效的中药提取物的制剂,以该中药提取物为药用成分,添加溶剂将其制备成注射针剂,或者添加辅料将其制备成胶囊剂或片剂。
相对于现有技术,本发明的有益效果为:
本发明提供了一种新型的具有抗肿瘤功效的中药提取物,发现了木鳖子和马钱子联合应用后具有良好的抗肿瘤效果,通过两者的药物协同作用能够使抗肿瘤的疗效得以最大化,因此两者的提取物可作为新型的抗肿瘤药物,并且可制成注射针剂进行使用。本发明为联合用药治疗肿瘤提供了新的药物配方,也为创新药物研究与开发提供了新的思路,具有很高的科研价值和良好的应用前景。
本发明提供的具有抗肿瘤功效的中药提取物的提取方法,在研究了不同溶剂提取木鳖子后提取物的抗肿瘤活性后,筛选出适宜的溶剂对木鳖子进行提取,即乙酸乙酯,能够保证最终得到的中药提取物的良好抗肿瘤效果,而且本发明的提取方法操作简便,适于工业化大规模生产。
进一步的,本发明中分别采用MTT法研究了木鳖子提取物以及马钱子提取物对乳腺癌的抑制作用,考察了两种提取物分别以及联合作用时对ZR-75-30细胞增殖的抑制作用,发现两种提取物在联合作用时能够表现出对ZR-75-30的协同抑制作用。另外,本发明还研究了两种提取物分别以及联合作用时对小鼠S180肉瘤抑制模型的生长抑制作用,发现两种提取物在联合作用时其抑制率远远高于单独用药,而且联合用药的抑制率与阳性对照药的抑制率接近,表现出非常好的抗肿瘤效果,并且还未表现出对实验动物的毒副作用,减轻了木鳖子单独用药时的毒副作用。
附图说明
图1为木鳖子提取物与马钱子提取物单独给药时对人乳腺癌ZR-75-30细胞增殖的抑制作用结果图,其中(a)是木鳖子提取物对人乳腺癌ZR-75-30细胞增殖的抑制率,(b)是马钱子提取物对人乳腺癌ZR-75-30细胞增殖的抑制率。
具体实施方式
下面结合实验对本发明做进一步详细说明。
实施例1
1)木鳖子的提取
按质量份数计,将6份木鳖子药材粉碎,得到木鳖子碎末,采用索氏提取法,加入正己烷,将木鳖子碎末浸泡12h,然后在68℃下加热回流6h进行提取,弃去得到的提取液,然后向提取后的木鳖子碎末中加入乙酸乙酯,在76℃下加热回流6h进行提取,收集得到的提取液,再减压回收提取液中的溶剂,浓缩后得到木鳖子浸膏;其中加入的正己烷的体积为木鳖子碎末体积的6倍,乙酸乙酯的体积为木鳖子碎末体积的6倍;
2)马钱子的提取
将4份马钱子药材粉碎,用pH=5、体积分数为50%的乙醇加热回流进行提取,乙醇的体积为马钱子药材体积的6倍,加热回流3次,回流温度为78℃,每次1h,合并收集得到的提取液,再减压回收提取液中的溶剂,浓缩后得到马钱子浸膏;
3)将步骤1)得到的木鳖子浸膏和步骤2)得到的马钱子浸膏混合,即得到具有抗肿瘤功效的中药提取物。
实施例2
1)木鳖子的提取
按质量份数计,将3份木鳖子药材粉碎,得到木鳖子碎末,采用索氏提取法,加入正己烷,将木鳖子碎末浸泡20h,然后在66℃下加热回流5h进行提取,弃去得到的提取液,然后向提取后的木鳖子碎末中加入乙酸乙酯,在72℃下加热回流7h进行提取,提取两次,收集得到的提取液,再减压回收提取液中的溶剂,浓缩后得到木鳖子浸膏;其中加入的正己烷的体积为木鳖子碎末体积的8倍,乙酸乙酯的体积为木鳖子碎末体积的7倍;
2)马钱子的提取
将8份马钱子药材粉碎,用pH=4、体积分数为40%的乙醇加热回流进行提取,乙醇的体积为马钱子药材体积的7倍,加热回流4次,回流温度为76℃,每次2h,合并收集得到的提取液,再减压回收提取液中的溶剂,浓缩后得到马钱子浸膏;
3)将步骤1)得到的木鳖子浸膏和步骤2)得到的马钱子浸膏混合,即得到具有抗肿瘤功效的中药提取物。
实施例3
1)木鳖子的提取
按质量份数计,将9份木鳖子药材粉碎,得到木鳖子碎末,采用索氏提取法,加入正己烷,将木鳖子碎末浸泡16h,然后在70℃下加热回流8h进行提取,弃去得到的提取液,然后向提取后的木鳖子碎末中加入乙酸乙酯,在80℃下加热回流5h进行提取,提取三次,收集得到的提取液,再减压回收提取液中的溶剂,浓缩后得到木鳖子浸膏;其中加入的正己烷的体积为木鳖子碎末体积的7倍,乙酸乙酯的体积为木鳖子碎末体积的8倍;
2)马钱子的提取
将2份马钱子药材粉碎,用pH=6、体积分数为45%的乙醇加热回流进行提取,乙醇的体积为马钱子药材体积的8倍,加热回流5次,回流温度为77℃,每次1.5h,合并收集得到的提取液,再减压回收提取液中的溶剂,浓缩后得到马钱子浸膏;
3)将步骤1)得到的木鳖子浸膏和步骤2)得到的马钱子浸膏混合,即得到具有抗肿瘤功效的中药提取物。
实施例4
1)木鳖子的提取
按质量份数计,将5份木鳖子药材粉碎,得到木鳖子碎末,采用索氏提取法,加入正己烷,将木鳖子碎末浸泡14h,然后在67℃下加热回流7h进行提取,弃去得到的提取液,然后向提取后的木鳖子碎末中加入乙酸乙酯,在78℃下加热回流8h进行提取,收集得到的提取液,再减压回收提取液中的溶剂,浓缩后得到木鳖子浸膏;其中加入的正己烷的体积为木鳖子碎末体积的6.5倍,乙酸乙酯的体积为木鳖子碎末体积的7.5倍;
2)马钱子的提取
将6份马钱子药材粉碎,用pH=4.5、体积分数为55%的乙醇加热回流进行提取,乙醇的体积为马钱子药材体积的6.5倍,加热回流3次,回流温度为80℃,每次1.2h,合并收集得到的提取液,再减压回收提取液中的溶剂,浓缩后得到马钱子浸膏;
3)将步骤1)得到的木鳖子浸膏和步骤2)得到的马钱子浸膏混合,即得到具有抗肿瘤功效的中药提取物。
实施例5
1)木鳖子的提取
按质量份数计,将8份木鳖子药材粉碎,得到木鳖子碎末,采用索氏提取法,加入正己烷,将木鳖子碎末浸泡18h,然后在69℃下加热回流6.5h进行提取,弃去得到的提取液,然后向提取后的木鳖子碎末中加入乙酸乙酯,在74℃下加热回流6.5h进行提取,提取两次,收集得到的提取液,再减压回收提取液中的溶剂,浓缩后得到木鳖子浸膏;其中加入的正己烷的体积为木鳖子碎末体积的7.5倍,乙酸乙酯的体积为木鳖子碎末体积的6.5倍;
2)马钱子的提取
将5份马钱子药材粉碎,用pH=5.5、体积分数为60%的乙醇加热回流进行提取,乙醇的体积为马钱子药材体积的7.5倍,加热回流4次,回流温度为79℃,每次1.8h,合并收集得到的提取液,再减压回收提取液中的溶剂,浓缩后得到马钱子浸膏;
3)将步骤1)得到的木鳖子浸膏和步骤2)得到的马钱子浸膏混合,即得到具有抗肿瘤功效的中药提取物。
实施例6
1)木鳖子的提取
按质量份数计,将4份木鳖子药材粉碎,得到木鳖子碎末,采用索氏提取法,加入正己烷,将木鳖子碎末浸泡15h,然后在68℃下加热回流6h进行提取,弃去得到的提取液,然后向提取后的木鳖子碎末中加入乙酸乙酯,在75℃下加热回流6h进行提取,提取两次,收集得到的提取液,再减压回收提取液中的溶剂,浓缩后得到木鳖子浸膏;其中加入的正己烷的体积为木鳖子碎末体积的6倍,乙酸乙酯的体积为木鳖子碎末体积的6倍;
2)马钱子的提取
将3份马钱子药材粉碎,用pH=5、体积分数为50%的乙醇加热回流进行提取,乙醇的体积为马钱子药材体积的6倍,加热回流3次,回流温度为77℃,每次1h,合并收集得到的提取液,再减压回收提取液中的溶剂,浓缩后得到马钱子浸膏;
3)将步骤1)得到的木鳖子浸膏和步骤2)得到的马钱子浸膏混合,即得到具有抗肿瘤功效的中药提取物。
下面通过实验说明本发明提供的中药提取物的抗肿瘤效果。
实验1:木鳖子抗肿瘤有效成分的分离
1.仪器与材料
SW-CJ-1F型超净工作台(苏州市安泰空气技术有限公司);Ti-U型倒置显微镜(Nikon);MAC 15AC型二氧化碳恒温培养箱(SANYO);80-2型台式电动离心机(上海市分析器械厂);GH隔水式恒温培养箱(北京市科伟永兴仪器有限公司);移液器(Eppendorf);UPT-IV-5T超纯水制备机(成都市超纯科技有限公司);BP211D电子天平(上海光正医疗仪器有限公司);细胞计数板(上海求精生化试剂有限公司);培养板(Costar)。
2.实验方法
将木鳖子药材的果仁和果壳分离,粉碎,分别装入用滤纸制作的圆柱状滤纸筒,将开口端折叠封住,放入提取筒中。将圆底烧瓶安装于电热套上,放入2粒沸石,加入正己烷,从提取筒中倒入烧瓶,安装好索氏提取装置,药材浸泡过夜,打开电源,加热回流5~8h,收集得到的提取液。然后依次向提取后的药材中加入乙酸乙酯、丙酮、乙醇,重复以上步骤提取,每次提取5~8h,最后将药材用水煎煮,收集相应部分的提取液,旋干,得到果仁和果壳10个部位的固形物,用肿瘤细胞进行筛选。
3.实验结果
将5种溶剂:正己烷、乙酸乙酯、丙酮、乙醇、水通过索氏提取木鳖子得到的10个组分进行MTT实验,结果如表1所示。其中BEL-7402为人肝癌细胞、SGC-7901为人胃癌细胞、Hela为人子宫颈癌细胞、MCF7为人乳腺癌细胞。编号1-10中1、2号为正己烷提取木鳖子果壳、果仁得到的组分,3、4号为乙酸乙酯提取木鳖子果壳、果仁得到的组分,5、6号为丙酮提取木鳖子果壳、果仁得到的组分,7、8号为乙醇提取木鳖子果壳、果仁得到的组分,9、10号为水提取木鳖子果壳、果仁得到的组分。
表1 木鳖子各部位对肿瘤细胞生长抑制率(%)
其中,3、4号分别为乙酸乙酯提取果壳、果仁得到的部分,这两部分具有明显抑制肿瘤细胞生长的作用。说明木鳖子的乙酸乙酯提取部位存在抗肿瘤活性成分。
因此确定本发明的中药提取物中木鳖子的提取工艺为:木鳖子粉碎,采用索氏提取法,加入正己烷,药材浸泡过夜,加热回流5~8h,收集得到的提取液,弃之。然后向提取后的药材中加入乙酸乙酯,加热回流5~8h,提取次数为一次或多次,收集提取液,减压回收溶剂,浓缩后得到木鳖子浸膏备用。
实验2:中药提取物的细胞活力实验及联合作用指数分析
1.仪器与材料
SW-CJ-1F型超净工作台(苏州市安泰空气技术有限公司);Ti-U型倒置显微镜(Nikon);MAC 15AC型二氧化碳恒温培养箱(SANYO);80-2型台式电动离心机(上海市分析器械厂);GH隔水式恒温培养箱(北京市科伟永兴仪器有限公司);移液器(Eppendorf);UPT-IV-5T超纯水制备机(成都市超纯科技有限公司);BP211D电子天平(上海光正医疗仪器有限公司);细胞计数板(上海求精生化试剂有限公司);培养板(Costar)。
实验用人乳腺癌细胞ZR-75-30购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库,在含10%胎牛血清的培养基(含100U/ml青霉素和链霉素)中,放置于37℃,5%CO2培养箱中进行培养,每隔2~3d传代一次。
2.实验方法
木鳖子粉碎,采用索氏提取法,加入正己烷,药材浸泡过夜,加热回流6h,收集得到的提取液,弃之。然后向提取后的药材中加入乙酸乙酯,加热回流6h,收集提取液,减压回收溶剂,浓缩后得到木鳖子浸膏待用。
马钱子药材粉碎,通过6倍于药材体积50%乙醇(pH=5),加热回流3次,每次1h,减压回收溶剂,浓缩后得到马钱子浸膏待用。
通过MTT实验的方法,检测测试药物对人乳腺癌细胞ZR-75-30增殖的影响。将处于指数级增长期的ZR-75-30细胞,用胰酶消化,吹散成单细胞悬液,计数,接种到96孔培养板中。在培养箱中培养24h,待细胞贴壁后,加入不同浓度的测试药物,分别作用48h后终止培养,每孔加入20μl MTT(5mg/ml),37℃避光孵育4h。然后将各个孔内液体弃去,加入150μlDMSO,震荡15min,使结晶物充分溶解,在酶标仪490nm波长下测定细胞光密度值。
采用上述MTT方法检测木鳖子和马钱子联合用药的细胞抑制作用,用金正均法判断两药合用是否有协同作用。药物作用关系计算方法为:
药物相互作用指数(CI):Q=EAB/(EA+EB-EAEB)。其中,EA,EB为两种药物单独作用抑制率,EAB为联合抑制率,Q大于1.15协同,小于0.85拮抗,在0.85与1.15之间为相加作用。
实验数据采用平均值±标准误(Mean±SEM)来表示,用SPSS 19.0统计学软件进行分析,P<0.05表示具有显著性差异。
3.实验结果
分别用MTT法考察马钱子与木鳖子单独及联用对肿瘤细胞的抑制作用,通过计算获得药物相互作用指数CI。木鳖子与马钱子单独用药时的抑制效果如图1所示,并且通过实验发现,马钱子提取物(20、40、80、160μg/ml)与木鳖子提取物(8、15、30、60μg/ml)联合使用时,可以在部分浓度下表现出对ZR-75-30的协同抑制作用,实验结果见表2。
表2 木鳖子与马钱子联用对ZR-75-30的抑制率(%)以及联合作用指数
注:括号内为计算得到的联合指数。▲:Q大于1.15,表现出协同作用效果的组合。
表2中,不同浓度配比的木鳖子与马钱子联合使用,在部分浓度下药物相互作用指数CI值Q大于1.15,表现出协同作用。如木鳖子8μg/ml+马钱子20μg/ml;木鳖子8μg/ml+马钱子40μg/ml;木鳖子15μg/ml+马钱子20μg/ml;木鳖子15μg/ml+马钱子40μg/ml;木鳖子30μg/ml+马钱子20μg/ml。其余实验浓度下的组合均表现为简单的相加作用(0.85<Q<1.15)。
实验3:中药提取物的小鼠S180肉瘤模型实验
1.仪器与材料
注射用环磷酰胺(江苏恒瑞医药股份有限公司)。
Ti-U型倒置显微镜(Nikon);80-2型台式电动离心机(上海市分析器械厂);移液器(Eppendorf);UPT-IV-5T超纯水制备机(成都市超纯科技有限公司);BP211D电子天平(上海光正医疗仪器有限公司);细胞计数板(上海求精生化试剂有限公司);一次性注射器(江西市金山医疗器械有限公司);游标卡尺(无锡市锡工量具有限公司);手术剪(上海市医疗器械有限公司);超低温冰箱(青岛市海尔集团);细胞工厂培养系统(NUNC)。
小鼠S180腹水瘤细胞来自陕西中医药研究所实验动物中心。
健康昆明种小鼠,雌雄各半,18-22g,西安交通大学实验动物中心提供,自由摄取食物和水,培养于22-24℃,50%-70%,12h-12h光照-黑暗循环的洁净动物房。
2.实验方法
通过小鼠S180肉瘤模型,检测联合用药对小鼠S180肉瘤模型的抑制作用。
复苏S180细胞,将S180细胞接种于健康昆明小鼠的腹腔内,7d后将肿瘤生长旺盛且无破溃的小鼠脱颈处死,置于75%的乙醇中浸泡5min消毒,解剖并采用一次性无菌注射器吸取白色的浓稠腹水,尽量避免有血混入。采用血球计数板计数,并用无菌生理盐水稀释至细胞浓度为2×107个/ml。将细胞悬液接种于小鼠右腋窝皮下位置,每只0.2ml。
接种后第二天随机分组,每组12只,雌雄各半,根据半数致死量设计浓度梯度进行给药,按照方案给药10d。10d后处死,剥离肿瘤,称重,计算中药材提取物对小鼠S180肉瘤生长的抑制率。
抑瘤率的计算公式如下:
实验数据采用平均值±标准误(Mean±SEM)来表示,用SPSS 19.0统计学软件进行分析,P<0.05表示具有显著性差异。
3.实验结果
如表3所示,木鳖子单独给药浓度为25mg/kg时,小鼠S180肉瘤模型的抑制率为54.97%;马钱子单独给药浓度为200mg/kg时,小鼠S180肉瘤模型的抑制率为17.24%;而将两者联合使用时,抑制率可以达到70.95%,与阳性对照药环磷酰胺的肿瘤抑制率接近。
同时,单独给药组别的小鼠出现体重减低的现象,但是联合给药组与阴性对照组比较,给药显著降低小鼠肉瘤体积和瘤重的同时,小鼠的体重并未出现明显的降低,说明联合用药对小鼠的生理状态没有明显的影响,未表现出对实验动物的毒副作用。
表3 木鳖子及组方动物实验结果
与阴性对照组相比,*P<0.05,**P<0.01
根据实验2及实验3所述,结合药材提取率(30g木鳖子按本发明的提取工艺可获得1g固形物(提取物),30g马钱子按本提取工艺可获得3g固形物(提取物))计算,本发明的中药提取物的原料组方为木鳖子3~9份、马钱子2~8份(质量份数)。在具体使用时,可以将本发明的中药提取物作为要用成分,添加溶剂将其制备成注射针剂,或者添加辅料将其制备成胶囊剂或片剂。本发明发现了木鳖子和马钱子联用具有良好的治疗乳腺癌、肝癌、胃癌、宫颈癌等癌症的效果,本发明提供的中药提取物能够用于制备治疗乳腺癌、肝癌、胃癌、宫颈癌等癌症的药物,这一发现目前未见相关报道。另外本发明进行了大量的实验,旨在通过药物的协同作用使疗效得以最大化,本发明中的大量实验数据为制备抑制乳腺癌生长的木鳖子和马钱子的组方制剂提供了实验依据。而且本发明提供的中药提取物具有散结消肿、攻毒疗疮、通络止痛等作用,符合中医药治疗乳腺癌的原则。
Claims (7)
1.一种具有抗肿瘤功效的中药提取物,其特征在于:按质量份数计,该中药提取物的原料药为3~9份木鳖子和2~8份马钱子;
该中药提取物由木鳖子提取物和马钱子提取物混合而成;其中木鳖子提取物是将木鳖子先用正己烷提取,弃去提取液后,再用乙酸乙酯提取得到的提取物;马钱子提取物是将马钱子用pH=5、体积分数为50%的乙醇加热回流进行提取得到的提取物。
2.权利要求1所述的具有抗肿瘤功效的中药提取物的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)木鳖子的提取
将木鳖子药材粉碎,得到木鳖子碎末,采用索氏提取法,加入正己烷,将木鳖子碎末浸泡后加热回流5~8h进行提取,弃去得到的提取液,然后向提取后的木鳖子碎末中加入乙酸乙酯,加热回流5~8h进行提取,提取一次或多次,收集得到的提取液,再减压回收提取液中的溶剂,浓缩后得到木鳖子浸膏;
2)马钱子的提取
将马钱子药材粉碎,用乙醇加热回流进行提取,收集得到的提取液,再减压回收提取液中的溶剂,浓缩后得到马钱子浸膏;
3)将步骤1)得到的木鳖子浸膏和步骤2)得到的马钱子浸膏混合,即得到具有抗肿瘤功效的中药提取物。
3.根据权利要求2所述的具有抗肿瘤功效的中药提取物的提取方法,其特征在于:所述步骤1)中木鳖子碎末浸泡12~20h后再加热回流;
所述步骤1)中正己烷的体积为木鳖子碎末体积的6~8倍,用正己烷加热回流时的回流温度为66~70℃;
所述步骤1)中乙酸乙酯的体积为木鳖子碎末体积的6~8倍,用乙酸乙酯加热回流时的回流温度为72~80℃。
4.根据权利要求2所述的具有抗肿瘤功效的中药提取物的提取方法,其特征在于:所述步骤2)中用pH=4~6、体积分数为40~60%的乙醇提取马钱子,乙醇的体积为马钱子药材体积的6~8倍。
5.根据权利要求2所述的具有抗肿瘤功效的中药提取物的提取方法,其特征在于:所述步骤2)中加热回流3~5次,回流温度为76~80℃,每次1~2h。
6.权利要求1所述的具有抗肿瘤功效的中药提取物在制备抗肿瘤药物中的应用,其中,所述的抗肿瘤药物为治疗乳腺癌、肝癌、胃癌和/或宫颈癌的药物;或者所述的抗肿瘤药物为抑制人乳腺癌细胞ZR-75-30增殖的药物;或者所述的抗肿瘤药物为抑制小鼠S180肉瘤生长的药物。
7.基于权利要求1所述的具有抗肿瘤功效的中药提取物的制剂,其特征在于:以该中药提取物为药用成分,添加溶剂将其制备成注射针剂,或者添加辅料将其制备成胶囊剂或片剂。
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WO2009148684A1 (en) * | 2008-06-02 | 2009-12-10 | Micro-Dose Life Sciences, Llc | Botanical composition and its uses |
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"马钱子抗肿瘤研究进展";侯风刚,等。;《上海中医药杂志》;20091231;第43卷(第2期);第75页右栏第1段。 |
Strychnos nux-vomica Root Extract Induces Apoptosis in the Human Multiple Myeloma Cell Line—U266B1;Pasupuleti Sreenivasa Rao ,等。;《Cell Biochem Biophys》;20131231;第66卷;第443-450页。 |
中药木鳖子与马钱子抗肿瘤组方及其作用机制研究;郑蕾;《www.ir.xjtu.edu.cn》;20141231;标题,摘要。 |
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