CN103690573A - 一种用于增强免疫力的天然药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于增强免疫力的天然药物组合物及其制备方法，该组合物主要由下列重量份的原料药制成：灵芝孢子提取物95～185重量份，番茄红素5～15重量份。本发明药物组合物具有增强免疫力的保健功能，疗效比单味药材有显著性提高，并且本发明组方服用量比单方使用明显降低，组合使用还能够减少单味药材的毒副作用。

Description

一种用于增强免疫力的天然药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种用于增强免疫力的天然药物组合物。

背景技术

灵芝孢子粉为灵芝成熟时从菌盖弹射的孢子,为灵芝的生殖细胞,具有灵芝的全部遗传活性物质。灵芝孢子经破壁加工后，开发成新的保健药材，它浓缩了灵芝的精华，禀天地生云之气，药效及临床应用效果更有明显提高。

灵芝孢子含有蛋白质、氨基酸类、三萜类、多糖类、腺苷类、甾醇类、生物碱类、脂肪酸类等化学物质。现代药理研究及临床试验证实，灵芝孢子粉比灵芝具有更强更全面的作用，灵芝孢子具有抗染色体突变，诱导肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤细胞增殖、杀伤癌细胞，拮抗环磷酰胺引起的小鼠耐力下降、血红蛋白与白细胞下降、巨噬细胞吞噬力下降和SGPT升高，抑制⁶⁰Co照射引起的白细胞减少不良反应、激活并提高特异性杀伤细胞（CTL）和非特异性杀伤细胞（NK、LAK）的抗肿瘤作用、增强单核-巨噬细胞吞噬功能，并具有抗脂质过氧化反应等作用。以上总总，显示出灵芝孢子在调节免疫功能等方面的良好应用前景。从而也为“疗虚劳、益气血”，提供了新的客观依据。

番茄红素是类胡萝卜素之一，是在人体血浆中发现的主要的类胡萝卜素之一。番茄红素主要存在于细胞的有色体中，在番茄果实中，番茄红素在番茄果皮和番茄果肉中均有分布。人体自身无法合成番茄红素，只能通过饮食－主要是番茄来摄取。由于番茄红素是脂溶性的，不溶于水，鲜食番茄或一般加工的番茄产品，在人体内难以被消化、吸收。新鲜番茄中番茄红素的含量为3-10mg／100g，而人体每日所需的番茄红素有效量为6～60mg。这就意味着，若想通过食用番茄来达到摄取番茄红素的目的，那么每日就需食用400-500g的番茄。考虑到人体对番茄中的番茄红素吸收率较低这一现实，补充番茄红素就很有必要。

番茄红素作用机理：(1)是强抗氧化剂，可消除自由基，防止脂蛋白和DNA受到氧化破坏，从而预防癌症的发生；抑制低密度脂蛋白胆固醇氧化产物的形成，预防冠心病的发生。(2)活化免疫细胞的作用。(3)促进细胞间的正常结合。当细胞发生癌变时，细胞间的结合会变弱，而番茄红素能促进具有维持细胞间正常结合的蛋白质的合成。(4)抑制癌细胞转移增殖因子的遗传表达。(5)抵制癌细胞增殖因子的作用。

至今为止，寻找一种能有效增强人体免疫力的天然产品组方仍是科学研究的热点。

发明内容

发明人经过反复探索并通过药效实验验证，终于找到以灵芝孢子提取物和番茄红素为主要原料，能有效增强人体免疫力的天然产品组方，该组方增强免疫力的功效远远强于单方使用，并且该功效非简单地二者功效之和简单叠加。

本发明所解决的技术问题在于提供一种基于灵芝孢子提取物，番茄红素为主要成分，混合制备出可增强免疫力的中药组合物。

本发明的目的是通过以下方式实现的：

一种用于增强免疫力的中药组合物，其特征是该组合物主要由下列重量份的原料药制成：灵芝孢子提取物95～185重量份，番茄红素5～15重量份。

上述组合物优选主要由下列重量份的原料药制成：灵芝孢子提取物110～130重量份，番茄红素10～20重量份。

上述组合物最优选主要由下列重量份的原料药制成：灵芝孢子提取物119重量份，番茄红素13重量份。

上述灵芝孢子提取物是通过以下方法制备得到的：将灵芝孢子粉采用CO₂超临界萃取得到灵芝孢子油和脱脂产物，将脱脂产物加脱脂产物重8-10倍水煎煮2-3次，每次2-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至50℃时相对密度为1.25－1.30的稠膏，≤60℃干燥，得到脱脂产物提取物，脱脂产物提取物即为灵芝孢子提取物。使用的灵芝孢子粉的破壁率≥90％。使用前可在60℃条件下烘干。

优选CO₂超临界萃取条件为萃取温度38-42℃，萃取压力28-32MPa，萃取时间为4-5h。最优选CO₂超临界萃取条件为温度40℃，压力30MPa，萃取时间为5h。

本发明所述的中药组合物的制备方法包括以下步骤：将灵芝孢子提取物，番茄红素混合均匀加入药学上允许的辅料制成药学规定的剂型。该剂型优选为硬胶囊或软胶囊。

本发明中药组合物可在制备增强免疫力的药物中应用。

上述用于增强免疫力的中药组合物软胶囊由以下组分制成：

灵芝孢子提取物95～185重量份，番茄红素5～15重量份，大豆油300～500重量份，明胶200～300重量份，甘油70～90重量份，纯化水200～300重量份。

该用于增强免疫力的中药组合物软胶囊的制备方法包括以下步骤：

先将甘油、纯化水混匀，搅拌加热至60～70℃，缓慢投入明胶，加热至75～85℃，待明胶完全溶解后继续保温搅拌20～30min得到胶液；

取灵芝孢子提取物，番茄红素，再加入1/3处方重量的大豆油，研磨均匀，逐渐加入剩余量的大豆油，边加边研磨均匀，直至物料粒径在80um以下，得到均匀细腻的混悬液；将混悬液与胶液混合制软胶囊，即得。

优选胶液中灵芝孢子提取物119重量份，番茄红素13重量份，大豆油368重量份。

与现有技术比较本发明的有益效果：组合物增强免疫力疗效比单味药材有显著性提高，并且本发明组方服用量比单方使用明显降低，组合使用还能够减少单味药材的毒副作用。

以下通过药效实验进一步说明本发明的效果：

样品：按照实施例1方法制备得到的胶囊（以下简称番灵胶囊），人体推荐摄入量为0.96g/人/日（胶囊内容物、人的体重按60kg计）。灵芝孢子提取物（按照实施例1方法制备得到），番茄红素。

实验动物：上海斯莱克实验动物有限责任公司繁殖的清洁级ICR健康小鼠。

一、安全性实验

番灵胶囊由南京医科大学研究其安全性及功效性，实验研究证明番灵胶囊雌、雄性小鼠急性经口MTD大于15.0g/kg·bw，属无毒级；番灵胶囊以0.48g/kg·bw、1.04g/kg·bw、1.60g/kg·bw三个剂量给予大鼠30d，受试动物一般情况良好，体重、食物利用率、脏器重量、脏器系数均无异常改变。血液学指标及生化指标结果显示，各项指标均在正常范围。各脏器病理组织学检查均未见与受试样品有关的改变。

二、致突变试验

1、小鼠骨髓细胞微核试验

试验方法

选用体重25～30g ICR种清洁级小鼠50只，动物购买后适应环境3天进行试验。按体重随机分为5个组，每组10只，雌雄各半。番灵胶囊剂量组10000mg/kg·bw、灵芝孢子提取物剂量组10000mg/kg·bw、番茄红素剂量组10000mg/kg·bw、阴性对照组（无菌水）、阳性对照组（环磷酰胺40mg/kg·bw）。受试样品用无菌水配制，番灵胶囊剂量组、灵芝孢子提取物剂量组、番茄红素剂量组分别含受试样品浓度为500、500、500mg/mL，以20mL/kg·bw灌胃，采用30h给受试物法。两次给受试样品间隔24h，第二次给受试样品后6小时处死动物，取胸骨常规制片、镜检，每鼠计数1000个骨髓嗜多染红细胞(PCE)，观察含微核的嗜多染红细胞数并计算微核发生率，以千分率计，结果采用Poisson分布U检验进行统计处理。每鼠计数200个嗜多染红细胞时所观察到的成熟红细胞数，并计算嗜多染红细胞与成熟红细胞比值（PCE/RBC）。

试验结果

由表1可见，各样品组微核率与阴性对照组相比无显著性差异(P>0.05)，而阳性对照组则显著高于阴性对照组(P<0.01)。故未见各样品组对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核形成及PCE/RBC比值产生影响。

表1各样品组对小鼠骨髓细胞微核发生率和PCE/RBC比值的影响

注：“**”与阴性对照组比较P<0.01。

2、小鼠精子畸形试验

试验方法

选用体重25～35g ICR种清洁级性成熟雄性小鼠25只，动物购买后适应环境3天进行试验。按体重随机分为5组，每组5只。番灵胶囊剂量组10000mg/kg·bw、灵芝孢子提取物剂量组10000mg/kg·bw、番茄红素剂量组10000mg/kg·bw、阴性对照组（无菌水）、阳性对照组（环磷酰胺40mg/kg·bw）。受试样品用无菌水配制，番灵胶囊剂量组、灵芝孢子提取物剂量组、番茄红素剂量组含受试样品浓度均为500mg/mL，以20mL/kg·bw灌胃，每天1次，连续5d。于首次给受试样品后的第35天处死动物，取两侧附睾精子滤液按常规制片、镜检。每鼠计数1000个结构完整的精子，计算精子畸形发生率(以百分率计)，结果采用秩和检验进行统计处理。

试验结果

由表2、表3可见，各样品组精子畸形率与阴性对照组比较，无显著性差异(P>0.05)，而阳性对照组小鼠精子畸形率与阴性对照组比较有显著提高(P<0.01)。因此各样品组对小鼠精子畸形率未产生影响。

表2各样品组对小鼠精子畸形率的影响

注：“**”与阴性对照组比较P<0.01。

表3各样品组对小鼠精子畸形类型及比例的影响

各样品组小鼠骨髓细胞微核试验结果为阴性，小鼠精子畸形试验结果为阴性。因此，本发明无明显毒副作用，安全可靠。

二、本发明增强免疫力功能的药效实验

样品：按照实施例1方法制备得到的用于增强免疫力的天然药物组合物，以下简称番灵胶囊，规格：0.32g/粒，性状为棕褐色粉末。灵芝孢子提取物，番茄红素。

试验动物及分组：选用上海斯莱克实验动物有限责任公司繁殖的清洁级CKF1代健康雌性小鼠250只，体重为19.2～21.9g。

小鼠按体重随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ五个大组，每大组50只小鼠，分成5个剂量组，每个剂量组10只。其中Ⅰ组小鼠进行ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化、NK细胞活性试验；II组小鼠进行二硝基氟苯诱导小鼠DTH试验；Ⅲ组小鼠进行小鼠抗体生成细胞及半数溶血值（HC₅₀）试验；Ⅳ组小鼠进行小鼠碳廓清试验；Ⅴ组小鼠进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验。

剂量：番灵胶囊的人体推荐剂量0.96g/人/日(以60kg体重计)，设番灵胶囊剂量组0.48/kg·bw、灵芝孢子提取物剂量组0.48/kg·bw、番茄红素剂量组0.48/kg·bw，番灵胶囊剂量组0.36/kg·bw，另设0g/kg·bw组以无菌水代替受试样品。受试样品用无菌水配制，番灵胶囊剂量组、灵芝孢子提取物剂量组、番茄红素剂量组配制浓度均为48mg/mL，经口每日一次给予小鼠相应剂量的受试样品，小鼠灌胃量为0.1mL/10g·bw。连续灌胃1个月后测定各项增强免疫力功能指标。

实验方法：

1、ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验——MTT法：

各样品组动物连续灌胃1个月后，颈椎脱臼法处死动物，无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank’s液的小平皿中，研磨脾脏，制成单个细胞悬液，经200目筛网过滤，用Hank’s液洗2次，每次离心10min（1000r/min），然后将细胞悬浮于1mL RPMI1640完全培养液中，台酚蓝染色计数活细胞数（均在95%以上），用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为3×10⁶个/mL。将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔1mL，一孔加75μL ConA液，另一孔作为对照，置37℃、5%CO₂培养箱中培养72h。培养结束前4h，每孔轻轻吸去上清液0.7mL，加入0.7mL不含小牛血清的RPMI1640培养液，同时加入MTT（5mg/mL）50μL/孔，继续培养4h。培养结束后，每孔加入1mL酸性异丙醇，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解。将溶解液移入96孔培养板中，用酶标仪在波长570nm下测定各样品管光密度值。

用加ConA孔的光密度值减去不加ConA孔的光密度值代表淋巴细胞的增殖能力，受试样品组的光密度差值显著高于对照组的光密度差值，可判定该项实验结果阳性。

2、DNFB诱导小鼠迟发型变态反应（DTH）——耳肿胀法：

各样品组动物连续灌胃1个月后，每鼠用剃毛机将腹部毛剃去，范围约3cm×3cm，用10mg/mL DNFB溶液50μL均匀涂抹致敏。5日后用10mg/mL DNFB溶液10μL均匀涂抹于小鼠右耳（两面）进行攻击，攻击后24h颈椎脱臼处死小鼠，剪下左右耳壳，用打孔器取下直径8mm耳片，称重。

用左右耳重量之差表示DTH的程度。受试样品组的重量差值显著高于对照组的重量差值，可判定该项实验结果阳性。

3、抗体生成细胞检测——Jeme改良玻片法

各样品组动物连续灌胃1个月后，每只鼠腹腔注射2％（v/v）的SRBC悬液0.2mL进行免疫，4d后小鼠颈椎脱臼处死，取出脾脏，放在盛有适量无菌Hank’s液的小平皿中，研磨脾脏，制成细胞悬液，经200目筛网过滤，离心1000r/min（10min），用Hank’s液洗2次，最后将细胞悬浮于5mlRPMI1640培养液中，计数细胞数，用RPMI1640培养液调整细胞浓度为5×10⁶个/mL。将表层培养基加热溶解后，放45℃水浴保温，与等量pH7.2～7.4两倍浓度的Hank’s液混合，分装小试管，每管0.5mL，再向管内加10％SRBC（v/v，用SA缓冲液配制）50μL，20μL脾细胞悬液（5×10⁶个/mL），迅速混匀，倾倒于已刷琼脂糖薄层的玻片上，做二个平行片，待琼脂凝固后，将玻片水平扣放在片架上，放入37℃、5％CO₂培养箱中孵育1.5h，然后将制备好的补体1∶8稀释后加入到玻片架凹槽内，继续孵育1.5h后，计数溶血空斑数。

用空斑数/10⁶脾细胞来表示，受试样品组的空斑数显著高于对照组的空斑数，可判定该项实验结果阳性。

4、血清溶血数测定——半数溶血值（HC₅₀）

各样品组动物连续灌胃1个月后，制备2％（v/v）的SRBC悬液，每只鼠腹腔注射0.2mL进行免疫，4d后摘除眼球取血于离心管内，放置1h，2000r/min离心10min，分离并收集血清。血清200倍稀释后，按检验方法测定样品管及SRBC半数溶血时的光密度值。溶血素的量以半数溶血值（HC₅₀）表示。

溶血素的量以半数溶血值（HC₅₀）表示，受试样品组的HC₅₀显著高于对照组的HC₅₀，可判定该项实验结果阳性。

5、小鼠碳廓清试验：

各样品组动物连续灌胃1个月后，每鼠尾静脉注入5倍稀释的印度墨汁(0.1mL/10g·bw)，待墨汁注入，立即计时。注入墨汁后2min及10min分别从眼内眦静脉丛取血20μL，并将其加到2mL0.1%Na₂CO₃溶液中，用721分光光度计在600nm波长处测光密度值，并取胸腺、肝、脾，利用光密度值、肝重和脾重计算吞噬指数a。另计算胸腺/体比、脾/体比。

以吞噬指数表示小鼠碳廓清的能力。受试样品组的吞噬指数显著高于对照组的吞噬指数，可判定该项实验结果阳性。

6、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验——半体内法：

各样品组动物连续灌胃1个月，制备20%（v/v）的鸡红细胞悬液，每只鼠腹腔注射1mL，间隔30min，颈椎脱臼处死小鼠，将其仰位固定于鼠板上，正中剪开腹壁皮肤，经腹腔注入生理盐水2mL，转动鼠板1min，然后吸出腹腔洗液1mL，平均分滴于2片载玻片上，放入垫有湿纱布的搪瓷盒内，移置37℃恒温培养箱孵育30min，然后，于生理盐水中漂洗，晾干，以1:1丙酮甲醇溶液固定，4%（v/v）Giemsa-磷酸缓冲液染色3min，再用蒸馏水漂洗晾干，封片，光镜下观察。

受试样品组的吞噬百分率或吞噬指数与对照组比较，差异均有显著性，方可判定该项实验结果阳性。

7、NK细胞活性测定——乳酸脱氢酶测定法：

各样品组动物连续灌胃1个月，颈椎脱臼处死小鼠，无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank’s液的小平皿中，研磨脾脏，制成单细胞悬液，经200目筛网过滤，用Hank’s液洗2次，每次离心10min（1000r/min），弃上清将细胞浆弹起，加入0.5mL灭菌水20秒，裂解红细胞后再加入0.5mL2倍Hank’s液及8mL Hank’s液，离心10min（1000r/min），用含10％小牛血清RPMI1640完全培养液重悬，1％冰乙酸稀释后计数，台酚蓝染色计数活细胞数（均在95%以上），用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为2×10⁷个/mL。

试验前24h将靶细胞（YAC-1细胞）传代培养，应用前以Hank’s液洗3次，用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为4×10⁵个/mL。取YAC-1细胞和脾细胞各100μL（效靶比50:1）加入U型96孔培养板中，YAC-1细胞自然释放孔加YAC-1细胞和培养液各100μL，YAC-1细胞最大释放孔加YAC-1细胞和1%NP40各100μL，上述各项均设三个平行孔，于37℃、5%CO₂培养箱中培养4h，然后将96孔培养板以1500r/min离心5min，每孔吸取上清液100μL置平底96孔培养板中，同时加入LDH基质液100μL，反应10min，每孔加入1mol/L的HCl30μL，在酶标仪490nm处测定光密度值。

受试样品组的NK细胞活性显著高于对照组的NK细胞活性，方可判定该项实验结果阳性。

结果判定：在细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能、NK细胞活性四个方面任两个方面结果阳性，可判定该受试样品具有增强免疫力功能作用。

其中细胞免疫功能测定项目中的两个实验结果均为阳性，或任一个实验的两个剂量组结果阳性，可判定细胞免疫功能测定结果阳性。体液免疫功能测定结果中两个实验结果均为阳性，或任一个实验的两个剂量组结果阳性，可判定体液免疫功能测定结果阳性。单核-巨噬细胞功能测定项目中的两个实验结果均为阳性，可判定单核-巨噬细胞功能结果阳性。NK细胞活性测定实验的一个结果阳性，可判定NK细胞活性结果阳性。

结果

1、各样品组对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化的影响

经口给予小鼠不同的样品1个月后，加ConA孔与不加ConA孔吸光度的差值经方差齐性检验，不满足方差齐性要求，用秩和检验进行统计处理。由表4结果可见，番灵胶囊剂量组0.36/kg·bw，0.48g/kg·bw组加ConA孔与不加ConA孔吸光度的差值高于0g/kg·bw组，且差异有统计学意义（P＜0.05）。

表4各样品组对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化的影响

2、各样品组对DNFB诱导小鼠DTH的影响、、

经口给予小鼠不同的样品1个月后，耳壳增重经方差齐性检验，满足方差齐要求，用单因素方差分析方法中多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。由表5结果可见，各样品组与0g/kg·bw组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

表5各样品组对DNFB诱导小鼠DTH的影响

3、各样品组对小鼠抗体生成细胞（溶血空斑数）的影响

经口给予小鼠不同的样品1个月后，溶血空斑数经方差齐性检验，满足方差齐性要求，用单因素方差分析方法中多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。由表6结果可见番灵胶囊剂量0.36/kg·bw，0.48g/kg·bw组溶血空斑数高于0g/kg·bw组，且差异有统计学意义（P＜0.05）。

表6各样品组对小鼠溶血空斑数的影响

4、各样品组对小鼠血清半数溶血值（HC₅₀）的影响

经口给予小鼠不同的样品1个月后，HC₅₀经方差齐性检验，满足方差齐性要求，用单因素方差分析方法中多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。由表7结果可见，0.48g/kg·bw（灵芝孢子提取物）、番灵胶囊剂量0.36/kg·bw，0.48g/kg·bw组溶血空斑数高于0g/kg·bw组，且差异有统计学意义（P＜0.05）。

表7各样品组对小鼠HC₅₀的影响

5、各样品组对小鼠碳廓清能力的影响

经口给予小鼠不同的样品1个月后，吞噬指数a经方差齐性检验，满足方差齐性要求，用单因素方差分析方法中多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。由表8结果可见，各样品组与0g/kg·bw组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

表8各样品组对小鼠碳廓清能力的影响

6、各样品组对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率及吞噬指数的影响

经口给予小鼠不同的样品1个月后，吞噬指数、吞噬百分率经sin^-1P^1/2(P为吞噬百分率,用小数表示)转化后经方差齐性检验，满足方差齐性要求，用单因素方差分析方法中多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。由表9结果可见，番灵胶囊剂量0.36/kg·bw，0.48g/kg·bw组吞噬指数高于0g/kg·bw组，且差异有统计学意义（P＜0.05）。

表9各样品组对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬率及吞噬指数影响

7、各样品组对小鼠NK细胞活性的影响

经口给予小鼠不同的样品1个月，NK细胞活性经sin^-1P^1/2(P为NK细胞活性,用小数表示)转化后进行方差齐性检验，满足方差齐性要求，用单因素方差分析方法中多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。由表10结果可见番灵胶囊剂量0.36/kg·bw，0.48g/kg·bw组NK细胞活性高于0g/kg·bw组，且差异有统计学意义（P＜0.05）。

表10各样品组对小鼠NK细胞活性的影响

结论

番灵胶囊0.36/kg·bw，0.48g/kg·bw剂量组经口给予小鼠一个月，进行小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能及NK细胞活性测定。结果显示，番灵胶囊0.48g/kg·bw、0.36/kg·bw组加ConA孔与不加ConA孔吸光度的差值高于0g/kg·bw组；番灵胶囊0.48g/kg·bw、0.36/kg·bw组溶血空斑数及灵芝孢子提取物0.48g/kg·bw组、番灵胶囊0.48g/kg·bw、0.36/kg·bw组血清半数溶血值高于0g/kg·bw组；番灵胶囊0.48g/kg·bw、0.36/kg·bw组吞噬指数高于0g/kg·bw组；番灵胶囊0.48g/kg·bw、0.36/kg·bw组NK活性高于0g/kg·bw组，且差异均有统计学意义（P<0.05）。根据《保健食品检验与评价技术规范》之增强免疫力功能试验的结果判定，番灵胶囊具有增强免疫力功能，且番茄红素与灵芝孢子提取物复方增强免疫力的功效显著强于单方，说明番灵胶囊的功效非简单地二者功效之和简单叠加，并且组方服用剂量比单方显著降低。

具体实施方式

以下通过具体实施例对本发明进行进一步阐述。（每重量份为1kg）

实施例1

灵芝孢子提取物119重量份，番茄红素13重量份。

灵芝孢子提取物是通过以下方法制备得到的：将灵芝孢子破壁后（破壁率≥90％），60℃烘干，采用CO₂超临界萃取，控制萃取温度40℃，萃取压力30MPa，萃取时间为5h，得到灵芝孢子油和脱脂产物，将脱脂产物加水煎煮二次，第一次加水量为脱脂产物重10倍量、第一次加水量为脱脂产物重8倍量，每次3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.25－1.30（50℃）的稠膏，≤60℃真空干燥，得到脱脂产物提取物，脱脂产物提取物即为灵芝孢子提取物。

将灵芝孢子提取物，番茄红素混合均匀加入药学上允许的辅料按照常规的硬胶囊制备方法制成番灵胶囊。

实施例2

灵芝孢子提取物119重量份，番茄红素13重量份，大豆油368重量份，明胶250重量份，甘油80重量份，纯化水250重量份。

灵芝孢子提取物是通过以下方法制备得到的：将灵芝孢子破壁后（破壁率≥90％），60℃烘干，采用CO₂超临界萃取，控制萃取温度40℃，萃取压力30MPa，萃取时间为5h，得到灵芝孢子油和脱脂产物，将脱脂产物加水煎煮二次，第一次加水量为脱脂产物重10倍量、第一次加水量为脱脂产物重8倍量，每次3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.25－1.30（50℃）的稠膏，≤60℃真空干燥，得到脱脂产物提取物，脱脂产物提取物即为灵芝孢子提取物。

软胶囊制备方法：

先将甘油、纯化水混匀，搅拌加热至60～70℃，缓慢投入明胶，加热至75～85℃，待明胶完全溶解后继续保温搅拌20～30min得到胶液；

取灵芝孢子提取物，番茄红素，再加入1/3处方重量的大豆油，研磨均匀，逐渐加入剩余量的大豆油，边加边研磨均匀，直至物料粒径在80um以下，得到均匀细腻的混悬液；将混悬液与胶液混合制软胶囊，即得番灵胶囊。

本发明对番灵胶囊和番茄红素原料同时进行稳定性检测：结果24个月后番茄红素原料中番茄红素含量仅为原值的20％，而本发明番灵胶囊中的番茄红素含量仅减少了6.25%，说明本发明番灵胶囊其番茄红素的稳定性也大大增加。

表11稳定性检验结果

实施例3

灵芝孢子提取物110重量份，番茄红素15重量份。

灵芝孢子提取物是通过以下方法制备得到的：将灵芝孢子破壁后（破壁率≥90％），60℃烘干，采用CO2超临界萃取，控制萃取温度40℃，萃取压力30MPa，萃取时间为4h，得到灵芝孢子油和脱脂产物，将脱脂产物加水煎煮三次，每次加水量为脱脂产物重8倍量，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.25－1.30（50℃）的稠膏，≤60℃真空干燥，得到脱脂产物提取物，脱脂产物提取物即为灵芝孢子提取物。

将灵芝孢子提取物，番茄红素混合均匀加入药学上允许的辅料按照常规的胶囊制备方法制成硬胶囊。

实施例4

灵芝孢子提取物130重量份，番茄红素20重量份。

灵芝孢子提取物是通过以下方法制备得到的：将灵芝孢子破壁后（破壁率≥90％），60℃烘干，采用CO₂超临界萃取，控制萃取温度40℃，萃取压力30MPa，萃取时间为4h，得到灵芝孢子油和脱脂产物，将脱脂产物加水煎煮三次，每次加水量为脱脂产物重8倍量，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.25－1.30（50℃）的稠膏，≤60℃真空干燥，得到脱脂产物提取物，脱脂产物提取物即为灵芝孢子提取物。

将灵芝孢子提取物，番茄红素混合均匀加入药学上允许的辅料按照常规的胶囊制备方法制成硬胶囊。

Claims (10)

1.一种用于增强免疫力的天然药物组合物，其特征是该组合物主要由下列重量份的原料药制成：灵芝孢子提取物95～185重量份，番茄红素5～15重量份。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征是该组合物主要由下列重量份的原料药制成：灵芝孢子提取物110～130重量份，番茄红素10～20重量份。

3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征是该组合物主要由下列重量份的原料药制成：灵芝孢子提取物119重量份，番茄红素13重量份。

4.根据权利要求1、2或3所述的药物组合物，其特征是所述的灵芝孢子提取物是通过以下方法制备得到的：将灵芝孢子粉采用CO₂超临界萃取得到灵芝孢子油和脱脂产物，将脱脂产物加脱脂产物重8-10倍水煎煮2-3次，每次2-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至50℃下相对密度为1.25－1.30的稠膏，≤60℃干燥，得到的脱脂产物提取物即为灵芝孢子提取物。

5.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征是所述的CO₂超临界萃取条件为温度38-42℃，压力28-32MPa，萃取时间为4-5h。

6.一种权利要求1、2或3所述的药物组合物的制备方法，其特征是该方法包括以下步骤：将灵芝孢子提取物，番茄红素混合均匀加入药学上允许的辅料制成药学规定的剂型。

7.根据权利要求6所述的药物组合物，其特征是所述的剂型为硬胶囊或软胶囊。

8.权利要求1、2或3所述的药物组合物在制备增强免疫力的药物中的应用。

9.一种用于增强免疫力的药物组合物软胶囊，其特征是该软胶囊由以下组分制成：

灵芝孢子提取物95～185重量份，番茄红素5～15重量份，大豆油300～500重量份，明胶200～300重量份，甘油70～90重量份，纯化水200～300重量份。

10.一种权利要求9所述的用于增强免疫力的药物组合物软胶囊的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

先将甘油、纯化水混匀，搅拌加热至60～70℃，缓慢投入明胶，加热至75～85℃，待明胶完全溶解后继续保温搅拌20～30min得到胶液；

取灵芝孢子提取物，番茄红素，再加入1/3处方重量的大豆油，研磨均匀，逐渐加入剩余量的大豆油，边加边研磨均匀，直至物料粒径在80um以下，得到均匀细腻的混悬液；将混悬液与胶液混合制软胶囊，即得。