CN103690552A - 一种药物组合物及其在制备治疗乙型肝炎药物制剂中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种药物组合物及其在制备治疗乙型肝炎药物制剂中的应用。本发明研究发现，与单一药物相比，该药物组合物对乙型肝炎病毒(HBV)具有明显的增强抑制作用，可将其用作乙肝病人的治疗药物。

Description

一种药物组合物及其在制备治疗乙型肝炎药物制剂中的应用

技术领域

本发明涉及药品及其制备领域，具体涉及一种药物组合物及其在制备治疗乙型肝炎药物制剂中的应用。 

背景技术

急性或慢性乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus，HBV)引起的一种严重危害人体健康的传染病，其中慢性乙型肝炎是肝硬化和肝癌的主要原因之一，它具有极高的发病率和死亡率，目前仍是严重威胁人类健康的疾病。我国是肝炎大国，乙型肝炎病毒携带者占总人口的10～20％，乙型肝炎患者总人口的2％以上，且三分之一的病人会转为慢性乙型肝炎、肝硬化或肝癌，我国每年约有30万人死于该疾病，发病者以青壮年为主。随着都市人口密度增高，拥挤程度日渐增大，肝炎传播的机会更多，肝炎的发病率更高。据统计，世界上大约有3.5亿慢性乙型肝炎病毒携带者，每年大约有100万人死于乙型肝炎病毒引起的疾病，世界卫生组织已把乙型肝炎列为第九死因。病人一旦染上乙型肝炎病毒，不仅要长期服药，而且给工作和生活带来很大的不便。目前临床治疗药物主要有核苷类化合物如阿昔洛韦、拉米夫定、阿德福韦酯、替诺福韦酯等，中草药有效成分如甘草酸、甲基斑蝥胺、猪苓多糖，生物类药物干扰素等。此外，一些中草药如叶下珠、白花蛇舌草、夏枯草等对乙肝病毒也有一定的抑制作用。考虑到临床治疗乙型肝炎尚无特效药，且大多数药物存在治疗有效率较低或副作用较大或复发率较高或耐药性等问题。研究开发抗乙肝病毒的特效药物，是医药学界面临的一项紧迫任务。 

黄芪甲苷(Astragaloside IV)是自中药黄芪中提取分离的单体化合物，CAS号为83207-58-3，分子式C41H68014，分子量784.98，熔点295～296℃。药理学研究表明，黄芪甲苷可明显改善充血性心衰患者的左室构型和射血功能，有助于T、B淋巴细胞的增殖，增加抗体的生成，具有溶解内皮细胞纤维蛋白以及提高人体免疫、抗炎、降压、抗衰老等作用。有研究报道黄芪总苷具有体外抗乙肝病毒作用，其机制可能与其抑制HepG2.2.15细胞增殖以及对乙肝病毒基因复制的抑制有关。 

黄芩苷(Baicalin)是自中药黄芩中提取分离的单体化合物，CAS号为21967-41-9，分子式C21H18011，分子量446.35，熔点223～225℃。现代药理学研究表明黄芩苷有多种药理作用，如广谱抗菌、抗病毒、抗炎、免疫调节、抗肿瘤等，另外黄芩苷还有降血脂、抑制前 列腺素合成和抗氧化等作用。可以用于消炎、急性胆道感染、铅中毒、清热解毒等；对急性黄疸型、急性无黄疸型及慢性肝炎(chronic hepatitis)均有明显疗效。HAV抗原的体外活性抑制实验表明：黄芩苷对HAV的三种抗原(乙肝表面抗原、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒的核心抗原)有较显著的抑制作用，临床对治疗迁延型、慢性肝炎有效，其中对肝功能如谷丙转氨酶(SGPT)等异常有一定改善作用，但治疗后有16.7％SGPT反跳现象，宜联合用药；黄芩苷对病毒性肝炎疗效也较好，其作用机制可能与抗病毒、抗炎、免疫调节等作用有关，这有待进一步研究证实。 

氧化苦参碱(Oxymatrine)是自中药苦参中提取分离的单体化合物，CAS号为16837-52-8，分子式C15H24N202，分子量264.36，熔点162～163℃(水合物)，207℃(无水物)。近年来临床上发现氧化苦参碱具有直接抗乙型肝炎病毒作用(可抑制HepG2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg，可抑制乙肝病毒转基因小鼠抗原的表达)，能抑制胶原活动度和防治肝纤维化，可阻断肝细胞异常凋亡，对实验性小鼠肝衰竭具有保护作用，因此可用于治疗慢性肝炎。氧化苦参碱具还有较好的抗过敏、抗炎作用以及调节免疫和升高白细胞作用，升高白细胞作用及抑制自身免疫可应用于自身免疫性肝炎及白细胞及血小板减少的治疗。研究发现其作用机制是直接抑制HepG2.2.15细胞表达HBV DNA，即在病毒复制水平抑制了HBV的合成，但究竟作用于病毒复制过程的哪一环节有待进一步研究证实。 

替诺福韦酯(Tenofovir Disoproxil Fumarate，即富马酸替诺福韦二吡呋酯)，CAS号为202138-50-9，分子式C19H30N5010P·C4H404，分子量635.52。由美国Gilead Science公司开发，临床可用于治疗艾滋病和乙型肝炎，乙肝及艾滋病合并感染者，可将其作为一线药物使用，商品名为Viread，为300mg片剂。替诺福韦酯是一种新型核苷酸类逆转录酶抑制剂，以与核苷类逆转录酶抑制剂类似的方法抑制逆转录酶，从而具有潜在的抗HIV一1的活性。其可通过直接竞争性地与天然脱氧核糖底物相结合而抑制病毒聚合酶，及通过插入DNA中终止DNA链。在体外，本品可有效对抗多种病毒，包括那些对核苷类逆转录酶抑制剂耐药的毒株。在体外，本品对野生型HIV-1的IC50为1.6微摩尔，对HIV-2为4.9微摩尔，对HBV为1.1微摩尔。 

黄芪甲苷、黄芩苷和氧化苦参碱的制备方法已有文献报道，黄芪药材经过水提醇沉或直接醇提、正丁醇萃取、柱层析、精制等步骤，即制得黄芪甲苷；黄芩药材经过水提酸沉、醇洗、精制等步骤，即制得黄芩苷；苦参药材经过醇提酸洗、二氯甲烷提取、氯仿溶解、乙醚沉淀、丙酮重结晶等步骤，即制得氧化苦参碱；替诺福韦酯来源于化学合成，美国GileadSciences公司的替诺福韦酯在国内已批准进口上市。 

发明内容

本发明的药物组合物，其特征在于其中含有黄芪甲苷、黄芩苷、氧化苦参碱、替诺福韦酯的两种、或三种、或四种。 

本发明的组合物，其特征在于其中各组分的重量百分比为：黄芪甲苷10％～90％和黄芩苷10％～90％，或黄芪甲苷10％～90％和氧化苦参碱10％～90％，或黄芪甲苷10％～90％和替诺福韦酯10％～90％，或黄芩苷10％～90％和替诺福韦酯10％～90％，或氧化苦参碱10％～90％和替诺福韦酯10％～90％。 

本发明的组合物，其特征在于其中各组分的重量百分比为：黄芪甲苷5％～90％、黄芩苷5％～90％和氧化苦参碱5％～90％，或黄芪甲苷5％～90％、黄芩苷5％～90％和替诺福韦酯5％～90％，或黄芪甲苷5％～90％、氧化苦参碱5％～90％和替诺福韦酯5％～90％，或黄芩苷5％～90％、氧化苦参碱5％～90％和替诺福韦酯5％～90％。 

本发明的组合物，其特征在于其中各组分的重量百分比为：黄芪甲苷3％～91％、黄芩苷3％～91％、氧化苦参碱3％～91％、替诺福韦酯3％～91％。 

本发明的组合物，其特征在于其中各组分的重量百分比为：黄芪甲苷10％～70％、黄芩苷10％～70％、氧化苦参碱10％～70％、替诺福韦酯10％～70％。 

本发明的组合物，其特征在于其中各组分的重量百分比为：黄芪甲苷20％～40％，黄芩苷20％～40％，氧化苦参碱20％～40％，替诺福韦酯20％～40％。 

本发明的药物组合物在制备治疗乙型肝炎药物制剂中的应用，其中所述的药物制剂为片剂、胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、口腔速崩制剂、缓控释制剂、冻干粉针等药学上可接受的剂型。本发明的药物组合物，加上适宜的药用辅料(包括填充剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂等)，可制成上述药物制剂。 

本发明的目的是提供一种药物组合物及其在制备治疗乙型肝炎药物制剂中的应用。体外药效学实验表明，本发明的药物组合物具有明显的抗乙型肝炎病毒的活性，且无细胞毒性作用。本发明的药物组合物通过中西药结合，协同增强抗乙型肝炎病毒的活性，开发成治疗乙型肝炎药物，可望达到疗效更好、剂量更小、副作用更少，复发率低以及耐药相关病毒变异发生率更低的医疗效果。 

具体实施方式

以下实施例旨在对本发明进一步解释说明，有关技术条件等并不限定本发明的变化范围。 

实施例1：抗乙型肝炎病毒的作用 

1.1材料与方法： 

1.1.1体外细胞模型：HepG22.2.1.5 

1.1.2MTT法检测样品对细胞的毒性 

1.1.3EIA法(HBsAg和HBeAg诊断试剂盒)检测样品对HBsAg和HBeAg的抑制作用 

1.1.4实验药物分为：(1)黄芪甲苷+黄芩苷组；(2)黄芪甲苷+氧化苦参碱组；(3)黄芪甲苷+替诺福韦酯组；(4)黄芩苷+替诺福韦酯组；(5)氧化苦参碱+替诺福韦酯组；(6)黄芪甲苷+黄芩苷+氧化苦参碱组；(7)黄芪甲苷+黄芩苷+替诺福韦酯组；(8)黄芪甲苷+氧化苦参碱+替诺福韦酯组；(9)黄芩苷+氧化苦参碱+替诺福韦酯组；(10)黄芪甲苷+黄芩苷+氧化苦参碱+替诺福韦酯组。 

1.1.5对照药物分为：(11)黄芪甲苷组；(12)黄芩苷组；(13)氧化苦参碱组；(14)替诺福韦酯组。 

1.2实验结果： 

与黄芪甲苷组、黄芩苷组、氧化苦参碱组和替诺福韦酯组比较，各组实验药物对HBsAg与HBeAg均具有良好的协同增强抑制作用且未见细胞毒性，见表1。本发明提供的药物组合物活性制成治疗乙型肝炎的药物，可用于乙肝病人的治疗。经检索，迄今未见所述药物组合物用作治疗乙型肝炎的药物的报道。 

表1各组药物抗乙型肝炎病毒的实验结果 

实施例2：胶囊剂 

处方1：将黄芪甲苷1g、黄芩苷1.8g、乳糖20g、PVP10g、硬脂酸镁0.3g、微粉硅胶0.5g混合均匀，过筛，灌装胶囊100粒，即得。 

处方2：将黄芪甲苷1g、氧化苦参碱2g、乳糖20g、淀粉10g、PVP5g、硬脂酸镁0.3g、微粉硅胶0.5g混合均匀，过筛，灌装胶囊100粒，即得。 

处方3：将黄芪甲苷1g、替诺福韦酯1g、乳糖20g、淀粉10g、PVP5g、硬脂酸镁0.3g、微粉硅胶0.5g混合均匀，过筛，灌装胶囊100粒，即得。 

处方4：将黄芪甲苷1g、黄芩苷1.8g、替诺福韦酯1g、乳糖20g、淀粉10g、PVP5g、硬脂酸镁0.3g、微粉硅胶0.5g混合均匀，过筛，灌装胶囊100粒，即得。 

处方5：将黄芩苷1.8g、氧化苦参碱2g、替诺福韦酯1g、乳糖20g、淀粉10g、PVP5g、硬脂酸镁0.3g、微粉硅胶0.5g混合均匀，过筛，灌装胶囊100粒，即得。 

处方8：将黄芪甲苷1g、黄芩苷1.8g、氧化苦参碱2g、替诺福韦酯1g、乳糖20g、淀粉10g、PVP5g、硬脂酸镁0.3g、微粉硅胶0.5g混合均匀，过筛，灌装胶囊100粒，即得。 

实施例3：片剂 

处方1：将黄芩苷1.8g、替诺福韦酯1g、乳糖20g、淀粉10g、PVP5g混合制粒，再外加(硬脂酸镁0.3、微粉硅胶0.5)，混合均匀，压成100片，即得。 

处方2：将氧化苦参碱2g、替诺福韦酯1g、乳糖20g、淀粉10g、PVP5g混合制粒，再外加(硬脂酸镁0.3、微粉硅胶0.5)，混合均匀，压成100片，即得。 

处方3：将黄芪甲苷1g、氧化苦参碱2g、替诺福韦酯1g、乳糖20g、淀粉10g、PVP5g混合制粒，再外加(硬脂酸镁0.3、微粉硅胶0.5)，混合均匀，压成100片，即得。 

处方4：将黄芪甲苷1g、黄芩苷1.8、氧化苦参碱2g、乳糖20g、淀粉10g、PVP5g混合制粒，再外加(硬脂酸镁0.3、微粉硅胶0.5)，混合均匀，压成100片，即得。 

处方5：将黄芪甲苷1g、黄芩苷1.8、氧化苦参碱2g、替诺福韦酯1g、乳糖20g、淀粉10g、PVP5g混合制粒，再外加(硬脂酸镁0.3、微粉硅胶0.5)，混合均匀，压成100片，即得。 

实施例4：软胶囊 

处方1：将黄芪甲苷1g、黄芩苷1.8、氧化苦参碱2g、辛癸酸三苷酯6g、羟苯乙酯0.03g混合均匀，装入100粒软胶囊，即得。 

处方2：将黄芪甲苷1g、黄芩苷1.8、替诺福韦酯1g、辛癸酸三苷酯6g、羟苯乙酯0.03g混合均匀，装入100粒软胶囊，即得。 

实施例5：分散片 

将黄芪甲苷1g、黄芩苷1.8、甘露醇7g、乳糖7g、微晶纤维素3g、交联聚乙烯吡咯烷酮2g、低取代羟丙纤维素1g、微粉硅胶0.5g、硬脂酸镁0.15g、固体香精0.008g，过筛、混合均匀，压成100片，即得。 

实施例21：冻干粉针 

处方1：将氧化苦参碱2g、替诺福韦酯1g、0.5g聚山梨酯和注射用水100.0ml混溶，滤过，灭菌，冷冻干燥，即得。 

处方2：将氧化苦参碱2g、替诺福韦酯1g、0.5g丙二醇和注射用水100.0ml混溶，滤过，灭菌，冷冻干燥，即得。 

Claims (7)

1.一种药物组合物，其特征在于其中含有黄芪甲苷、黄芩苷、氧化苦参碱、替诺福韦酯的两种、或三种、或四种。

2.按权利要求1所述的组合物，其特征在于其中各组分的重量百分比为：黄芪甲苷10％～90％和黄芩苷10％～90％，或黄芪甲苷10％～90％和氧化苦参碱10％～90％，或黄芪甲苷10％～90％和替诺福韦酯10％～90％，或黄芩苷10％～90％和替诺福韦酯10％～90％，或氧化苦参碱10％～90％和替诺福韦酯10％～90％。

3.按权利要求1所述的组合物，其特征在于其中各组分的重量百分比为：黄芪甲苷5％～90％、黄芩苷5％～90％和氧化苦参碱5％～90％，或黄芪甲苷5％～90％、黄芩苷5％～90％和替诺福韦酯5％～90％，或黄芪甲苷5％～90％、氧化苦参碱5％～90％和替诺福韦酯5％～90％，或黄芩苷5％～90％、氧化苦参碱5％～90％和替诺福韦酯5％～90％。

4.按权利要求1所述的组合物，其特征在于其中各组分的重量百分比为：黄芪甲苷3％～91％、黄芩苷3％～91％、氧化苦参碱3％～91％、替诺福韦酯3％～91％。

5.按权利要求1或4所述的组合物，其特征在于其中各组分的重量百分比为：黄芪甲苷10％～70％、黄芩苷10％～70％、氧化苦参碱10％～70％、替诺福韦酯10％～70％。

6.按权利要求1或4或5所述的组合物，其特征在于其中各组分的重量百分比为：黄芪甲苷20％～40％，黄芩苷20％～40％，氧化苦参碱20％～40％，替诺福韦酯20％～40％。

7.权利要求1～6所述的药物组合物在制备治疗乙型肝炎药物制剂中的应用，其中所述的药物制剂为片剂、胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、口腔速崩制剂、缓控释制剂、冻干粉针等药学上可接受的剂型。