CN100457140C - 含有拉米夫定的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含有拉米夫定的药物组合物，其特征是它由下列主要原料为组分组成：虎杖50-300重量份，茵陈0-300重量份，五味子0-400重量份，拉米夫定20-300重量份。本发明的复方制剂以中医辨证论治理论指导设计，采用科学组方，将拉米夫定和相关中药提取物有效组合，综合了中药和西药的优点，发挥协同抗病毒作用又相互弥补单用药的不足点，共同针对乙肝疾病进行多靶点，多角度、多层次治疗。它能有效抑制HBV病毒，快速降低谷丙转氨酶(ALT)水平，改善黄疸症状，保肝利胆，减小HBV病毒变异，调节机体免疫，恢复肝功能和阻止并逆转肝纤维化的发生。

Description

含有拉米夫定的药物组合物

技术领域

本发明涉及一种治疗乙型肝炎的药物组合物，具体地说是一种含有拉米夫定的中药药物组合物。

背景技术

慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染是一个严重的全球性健康问题，据估计全球约有3.5亿人长期感染乙肝病毒。而我国是病毒性肝炎的高发区，平均年发病率约200万左右，有资料表明我国目前已约1.2亿人携带HBV病毒。如何研制疗效确切的治疗乙肝的药物已成为我国医药学家重点任务。国家科技部、国家中医药管理局重大课题“中医现代化科技发展战略研究”中明确强调应“重点进行中医对乙肝抗病毒复制、调节免疫功能、减轻肝细胞损伤、改善肝功能，尤其是中医抗肝纤维化、防治早期肝硬变的疗效及综合方案研究。”

目前乙型肝炎的治疗常以抗病毒治疗药物为主，如干扰素、核苷类似物等，但疗效均不尽人意。临床应用最广的抗病毒药物拉米夫定，虽然其可以快速有效抑制乙肝病毒(HBV)复制，但整体疗效还远远低于人们的预期效果。尤其是其副作用、停药后复发率高和易引起病毒变异的缺点影响了该药物使用。相比之下中医药治疗显示出较为明显优势。实验研究证明，很多中草药或专方确有非常独特的疗效，例如，虎杖提取物，茵陈中的绿原酸、香豆素、黄酮，苦参中的苦参碱和氧化苦参碱、五味子中的五味子乙素(联苯双酯)、猪苓中的猪苓多糖等，在抗病毒、免疫调节、保肝利胆、降低转氨酶等方面表现出较佳疗效。但传统中药因服用剂量较大，见效缓慢，周期长，不能很好控制药物药效成分等问题难以满足人们的要求。

近年来中西药合用在临床上应用日渐广泛，尤其是在抗艾滋病，肿瘤，心血管病，流感，肝炎，胃病等方面，其治疗效果往往优于单一的药物治疗，2003年的SARS风暴使中西药联用的优势引起了世界瞩目，同时也引起了中西医药界高度重视和前所未有的共识。国家药品监督管理局也对此高度重视，并即将出台相关的政策法规，补充中药加西药联合开发的复方制剂为中药注册分类第六类中的第4种新药.因此，本发明采用先进的科学技术对中药虎杖、茵陈、五味子和西药拉米夫定加以综合开发利用，采用联合治疗方法，科学组方，将其研制开发成治疗乙肝疾病的安全、高效、可控、稳定、方便的新型中西药复方制剂。

发明内容

本发明的目的是提供一种治疗慢性乙肝的复方制剂，这种药物不仅具有高效迅速的抑制HBV病毒作用，快速降低谷丙转氨酶(ALT)水平，改善患者黄疸症状而且还有保肝利胆、调节免疫、减小HBV病毒变异，恢复肝功能和阻止肝纤维化的发生。

本发明的目的可以采取以下方法来实现：

一种含有拉米夫定的药物组合物，其特征是它由下列主要原料为组分组成、或者是由下列主要原料的水提取物作活性成分和药学上可接受的附加剂组成、或者是由下列主要原料的醇提取物作活性成分和药学上可接受的附加剂组成：

虎杖50-300重量份，茵陈0-300重量份，五味子0-400重量份，拉米夫定20-300重量份。

其特征是配方优选为：虎杖水提取物200重量份，茵陈水提取物150重量份，五味子水提取物300重量份，拉米夫定100重量份。

其剂型可以是任何一种药剂学上所说的剂型，例如胶囊、片剂、颗粒、口服液、滴丸、水针剂或者粉针剂。

所述的五味子是五味子素或五味子甲素。

所述的茵陈是茵陈总黄酮。

还包括白黎芦醇苷20-300重量份。

本发明所述的复方制剂正是采用拉米夫定和一些中药提取物的组合药物来治疗慢性乙型肝炎。本发明所筛选的中药提取物分别是：虎杖提取物、茵陈提取物、五味子提取物。以下是对这些物质的介绍：

拉米夫定(Lamivudine)是具有强大抑制病毒复作用的新一代核苷类药物。继用于治疗HIV后，国药品监督管理局及美国FDA在1998年底又批准该药用于治疗慢性乙型肝炎。其化学名为(2R-顺式)-4-氨基-1-(2-羟甲基-1，3-氧硫杂环戊-5-基)嘧啶-2-酮，分子式为C₈H₁₁N₃O₃S，分子量为229，拉米夫定可在HBV感染细胞和正常细胞内代谢生成拉米夫定三磷酸盐，通过降低HBV依赖RNA的DNA多聚酶的生物活性，抑制HBVDNA的合成，减少受累肝细胞的拷贝数，并通过逆转机体T细胞的低反应状态，恢复T细胞活性，保护正常肝细胞，同时促使受累肝细胞的翻转。阻断病毒DNA的合成，迅速抑制HBV复制，其抑制作用可持续于整个治疗过程。

虎杖提取物是从蓼科虎杖中提取的，其有效成分主要是蒽醌类、黄酮类、白藜芦醇苷、水溶性多糖和鞣质等成分。其蒽醌类化合物大黄素有强抗病毒作用，基础实验研究也证明，虎杖提取物对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)及乙型肝炎病毒(HBV)均有很好的抑制效果，并能增加肝功能血流量，促进肝细胞修复和再生，达到保护肝损害作用。其中的鞣质成分，还能提高巨噬细胞吞噬功能，增强机体的免疫调节能力。

茵陈提取物是从中药茵陈中提取的，有效成分主要有茵陈黄酮、绿原酸、槲皮黄素、异鼠李黄素和茵陈水溶性多肽等，茵陈提取物能使肝细胞活力明显提高，要很好的保肝作用，另外茵陈还能清热利湿快速退黄，有效解除黄疸症状，同时具较强的清除和抑制超氧阴离子自由基的作用，可阻断肝细胞脂质过氧化，抑制肝组织纤维连接素表达，减轻肝纤维化程度的作用。

五味子提取物是从中药五味子中提取的，有效成分主要有五味子素、五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲和五味子醇乙等，其中五味子甲素的分子式为C₂₄H₃₂O₆。五味子提取物具有显著的肝细胞损伤拮抗作用，阻断多种病毒对肝细胞膜的损伤，并能有效降低谷丙转氨酶(ALT)水平，调节T淋巴细胞分化、成熟以维持自身免疫的稳定，可增强肝脏解毒功能，有利于肝细胞功能修复。

本发明的复方制剂以中医辨证论治理论指导设计，采用科学组方，将拉米夫定和相关中药提取物有效组合，综合了中药和西药的优点，发挥协同抗病毒作用又相互弥补单用药的不足点，共同针对乙肝疾病进行多靶点，多角度、多层次治疗。本发明的复方制剂具有以下积极效用：有效抑制HBV病毒，快速降低谷丙转氨酶(ALT)水平，改善黄疸症状，保肝利胆，减小HBV病毒变异，调节机体免疫，恢复肝功能和阻止并逆转肝纤维化的发生。

具体实施方式

下面结合实施例详细描述本发明的实现方案。

实施例1：

虎杖水提取物        200mg，

茵陈水提取物        150mg，

五味子水提取物      300mg，

拉米夫定            100mg。

按上述配方依照现有技术的药物生产方法添加适当药用辅料制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液等。

实施例2：

虎杖水提取物        200mg，

五味子水提取物      300mg，

拉米夫定            100mg。

按上述配方依照现有技术的药物生产方法添加适当药用辅料制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液等。

实施例3：

虎杖水提取物        200mg，

五味子水提取物      300mg，

拉米夫定            100mg。

按上述配方依照现有技术的药物生产方法添加适当药用辅料制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液等。

实施例4：

白黎芦醇苷          100mg，

茵陈总黄酮          100mg，

五味子甲素          50mg，

拉米夫定            50mg。

按上述配方依照现有技术的药物生产方法添加适当药用辅料制成冻干粉针剂、水针剂或口服液。

实施例5：

白黎芦醇苷          100mg，

五味子素            80mg，

拉米夫定            50mg。

按上述配方依照现有技术的药物生产方法添加适当药用辅料制成冻干粉针剂、水针剂或口服液。

实施例6：

虎杖醇提取物        300mg，

拉米夫定            50mg。

按上述配方依照现有技术的药物生产方法添加适当药用辅料制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液等。

实施例7：

五味子素            80mg，

拉米夫定            50mg。

按上述配方依照现有技术的药物生产方法添加适当药用辅料制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液等。

实施例8：

虎杖醇提取物        300mg，

五味子甲素          50mg，

拉米夫定            50mg。

按上述配方依照现有技术的药物生产方法添加适当药用辅料制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液等。

实施例9：

虎杖醇提取物        200mg，

茵陈总黄酮          100mg，

五味子甲素          50mg，

拉米夫定            50mg。

按上述配方依照现有技术的药物生产方法添加适当药用辅料制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液等。

选用拉米夫定组、虎杖提取物组、配方一组(虎杖提取物+茵陈提取物+五味子提取物+拉米夫定)进行的几项主要动物试验对比，其实验结果如下：

实验例1：

对CCl₄致小鼠肝损伤中血清ALT、AST的影响

1、实验方法：

将小鼠随机分为5组，每组15只。设计拉米夫定组、虎杖提取物组、配方一组三个对照组，按人体推荐量的10倍设剂量组，0.25g/kg，将胶囊内容物用蒸馏水配至所需浓度；另外设空白对照组和CCl₄阳性对照组。五个剂量组按0.02ml/g体重经口灌胃给予受试物；空白对照组和CCl₄阳性对照组给予蒸馏水。动物每周称重两次，以调整受试物剂量，自由饮食饮水，于实验第30天将各组动物隔夜禁食16小时。CCl₄阳性对照组及各剂量组动物按0.01ml/g体重1次灌胃给予32mg/kg的CCl₄染毒，以精制玉米油为溶剂；空白对照组给予玉米油32mg/kg；各受试组用CCl₄染毒4小时后继续给予受试样品。给予CCl₄24小时后摘眼球取血，分离血清，测定ALT、AST，同时处死动物。

2、实验结果：CCl₄阳性对照组小鼠的ALT、AST含量比空白对照组高，经T检验，差异有显著性(P＜0.05)。拉米夫定组、虎杖提取物组、配方一组的ALT值、AST值与CCl₄阳性对照组比较均有下降，经方差分析，差异均呈显著性(P＜0.05)。本实验中小鼠经CCl₄染毒后，CCl₄对照组中央静脉周围肝细胞大面积坏死，血清ALT、AST大大增加，表明小鼠CCl₄肝细胞损伤模型复制成功。实验组肝细胞坏死程度及血清ALT、AST虽高于空白对照组，但较CCl₄对照组病变明显减轻，差异经统计有显著性，说明配方一组比拉米夫定组、虎杖提取物组对CCl4所致小鼠肝损伤更具有保护作用。结果见表1。

                  表1 各组小鼠ALT、AST检验结果(x±s)

*表示与CCl₄阳性对照组比较，P＜0.05

实验例2：

对DHBV感染樱桃谷鸭血清DHBV-DNA的影响：

1、实验方法：将樱桃谷鸭雏鸭随机分为5组，每组7只。用DHBV感染樱桃谷鸭雏鸭，在感染后第13天即用药前(T0)、用药第7天(T7)、用药第14天(T14)和停药后第5天(P5)，自鸭腿胫静脉取血，分离血清，-70℃保存待检。

2、实验结果：樱桃谷鸭感染后14天血清DHBV-DNA全部阳性。在整个实验过程中，生理盐水对照组鸭血清DHBV-DNA水平无明显波动，(P＞0.05)。拉米夫定组、虎杖提取物组、配方1组在T7、T14无论与给药前还是与生理盐水对照组相比，都能及显著的降低DHBV-DNA(P＜0.001)；结果见表2。

         表2：对樱桃谷鸭DHBV-DNA的抑制作用检验结果(mean±sd)

给药后不同时间(T7、T14)和停药(P5)A值(杂交斑点吸光值)与同组给药前(T0)A值比较*P＜0.05，**P＜0.01；与病毒组比较：#P＜0.05，##P＜0.01。

实验例3：

对腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响：

1、实验方法：将小鼠随机分为5组，每组10只。设计拉米夫定组、虎杖提取物组、配方一组三个对照组，另外设空白对照组和模型对照组。空白对照组和模型对照组口服自来水0.2ml/d/只.其他三个实验组分别灌胃给药，各组连续给药5天，第4，5天，除空白对照组外其他各组在皮下注射醋酸氢化泼尼松5mg/kg(0.1ml/只)，除空白对照组外其他各组均在第4天腹腔注射灭菌糖元2ml/只。用乙醇颅内注射法处死小鼠，将配好的hank’s液2ml注入小鼠腹腔，轻揉腹部60下，使hank’s液充分洗涤腹腔，以便获取更多的巨噬细胞，再将腹部剪开一小孔，吸取腹内洗液于试管中，最后只留0.6ml，滴入2滴鸡红细胞悬液放入0.4cm长，0.2cm宽小玻璃条于试管中，37℃水浴培育30分钟，每隔10分钟摇动一次，取出玻璃条，用PBS洗涤3次，令其自然干燥，甲醇固定8分钟，用姬姆萨染液染15分钟，用自来水冲洗3次，自然干燥后，在高倍镜下计100个细胞，记录其中吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数和所吞噬的鸡红细胞，计算吞噬率。

2、实验结果：从下表可以看出，模型对照组无论是吞噬百分率或吞噬指数均低于空白对照组，说明注射激素可以使小鼠腹腔吞噬细胞吞噬功能下降。

拉米夫定组、虎杖提取物组、配方一组三个对照组吞噬百分率及吞噬指数，均高于模型对照组，数据表明，拉米夫定组、虎杖提取物组、配方一组有提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能作用.与拉米夫定组、虎杖提取物组比较，配方一组的非特异性免疫增强作用略高。结果见表3。

                     表3：对腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

各组与模型组比较：*P＜0.05，**P＜0.01

Claims (1)

1、一种含有拉米夫定的药物组合物，其特征是它由下列原料添加适当辅料制成胶囊、片剂、颗粒剂或口服液：

虎杖水提取物200重量份，茵陈水提取物150重量份，五味子水提取物300重量份，拉米夫定100重量份。