CN103687582B - 含有从酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物的多聚磷酸组合物及其制作方法 - Google Patents

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Abstract

本发明的目的在于，提供一种多聚磷酸组合物，其具有较高的细胞增殖促进能力、对细胞的渗透性以及促进细胞存活能力，还有，能促进毛发增长以及维持毛发的生长期。另外，本发明的目的还在于，提供一种安全性高且包含天然合成的多聚磷酸的多聚磷酸组合物以及包含天然合成的多聚磷酸的多聚磷酸组合物的制作方法。根据本发明能够制作出包含从酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物的多聚磷酸组合物。包含从酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物的多聚磷酸组合物对细胞具有较高的渗透性。还有，通过将多聚磷酸组合物涂抹在皮肤、牙龈及头皮上，能够使该多聚磷酸组合物有效地促进细胞增殖、细胞存活、毛发增长以及维持毛发的成长期。

Description

含有从酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物的多聚磷酸组合物及其制作方法
技术领域
本发明涉及一种含有从酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物的多聚磷酸组合物及其制作方法。
背景技术
人们公知通过使磷酸发生聚合反应，容易化学合成多聚磷酸。多聚磷酸例如用于化妆品、育发剂、口腔清洗剂、食品添加剂、医疗用品及医疗制剂。一般来讲，多聚磷酸通过加热磷酸的方法、在磷酸中添加五氧化二磷并使其溶解的方法这样的化学合成的方法制作而成（专利文献1）。
化学合成的多聚磷酸能够使像细胞增殖因子这样的细胞内的蛋白质保持稳定（非专利文献1）。还有，多聚磷酸具有促进组织修复能力，能够用于促进外伤、烧伤的治疗、牙周疾病的治疗、促进术后治疗等（专利文献2）。另外，人们公知多聚磷酸具有促进血管新生的作用（专利文献3）。还有，人们公知多聚磷酸通过缩短肠的上皮细胞的间隙来防止有害物质和病原菌进入肠内，调节肠道功能（非专利文献2）。
但是，由于化学合成的多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物的分子形状较大，因而会出现如下问题：对细胞的渗透能力低，通过少量涂抹或投药的方式难以促进细胞增殖。另外，由于化妆品、育发剂、口腔清洗剂及食品、食品添加剂长时间通过涂抹于皮肤以及口腔内或经口腔摄取的方式来使用，因而使含有成分倾向于使用天然材料。因此，人们希望化妆品、育发剂、口腔清洗剂、食品、食品添加剂及营养补充剂使用由微生物天然合成的多聚磷酸，而不是使用化学合成的多聚磷酸。
【专利文献1】日本发明专利公开公报特表2004-537490号
【专利文献2】日本发明专利公开公报特开2007-54080号
【专利文献3】日本发明专利公开公报特开2007-169171号
【非专利文献1】Shibaetal,,J.Biol.Chem.278，26788-26792（2003）
【非专利文献2】Segawaetal,,PLosONE，6，e23278（2011）
发明内容
本发明的目的在于，提供一种多聚磷酸组合物，其具有较高的细胞增殖促进能力、对细胞的渗透性以及促进细胞存活能力，还有，能促进毛发增长以及维持毛发的生长期。本发明的目的还在于，提供一种多聚磷酸组合物，其通过缩短肠的上皮细胞的间隙来防止有害物质和病原菌进入肠内，调节肠道功能。另外，本发明的目的还在于，提供一种多聚磷酸组合物，其具有较高的安全性，含有天然合成的多聚磷酸。
本发明的目的在于，提供一种多聚磷酸组合物的制作方法，该多聚磷酸组合物具有较高的细胞增殖促进能力、对细胞的渗透性以及促进细胞存活能力，还有，能促进毛发增长以及维持毛发的生长期。
为了解决上述问题，本发明的申请者经反复努力研究的结果为，能够制作出包含从酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物的多聚磷酸组合物。
本发明的第1方面涉及一种包含从酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物的多聚磷酸组合物。包含从酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物的多聚磷酸组合物对细胞具有较高的渗透力。还有，通过将多聚磷酸组合物涂抹在皮肤、牙龈及头皮上，能够使该多聚磷酸组合物有效地促进细胞增殖、细胞存活、毛发增长以及维持毛发的成长期。
本发明的第1方面的优选方式为：酵母菌为芽殖酵母。芽殖酵母是自古以来作为食用而使用的酵母菌。使用芽殖酵母能够有效地得到包含多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物的多聚磷酸组合物。还有，使用芽殖酵母能够得到对细胞具有较高的渗透力的多聚磷酸组合物。还有，通过将多聚磷酸组合物涂抹在皮肤、牙龈及头皮上，能够使该多聚磷酸组合物有效地促进细胞增殖、细胞存活、毛发增长以及维持毛发的成长期。
本发明的第1方面的优选方式为：提取液还包含酵母菌的细胞构成物质和蛋白质水解物中的至少一种。由于多聚磷酸组合物中含有细胞构成物质和蛋白质水解物，因而使该多聚磷酸组合物能够含有来自酵母菌的营养成分。从而使多聚磷酸组合物具有促进细胞增殖的能力、对细胞的渗透性以及促进细胞存活的能力，还有，能够有效地促进毛发的增长，维持毛发的成长期。
本发明的第1方面的优选方式为：提取液还包含维生素和矿物质中的至少一种。由于多聚磷酸组合物中含有维生素和矿物质，因而使多聚磷酸具有促进细胞增殖的能力、对细胞的渗透性以及促进细胞存活的能力，还有，能够更有效地促进毛发的增长，维持毛发的成长期。
本发明的第1方面的优选方式为：多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物以多聚磷酸组合物的总质量的0.01%以上70%以下的比例包含在该多聚磷酸组合物中。由于多聚磷酸组合物中含有有效量的多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物，因而使多聚磷酸具有促进细胞增殖的能力、对细胞的渗透性以及促进细胞存活的能力，还有，能够更有效地促进毛发的增长，维持毛发的成长期。
本发明的第1方面的优选方式为：多聚磷酸的聚合度为20以上300以下。聚合度为20以上300以下的多聚磷酸具有水溶性的特性，且具有使细胞成长因子保持稳定以及活化该细胞成长因子的能力。由于多聚磷酸的聚合度为20以上300以下，因而使其具有水溶性的性质。从而使多聚磷酸组合物能够促进皮肤和头皮细胞的增殖，活化细胞。
本发明的第1方面的优选方式为：多聚磷酸呈最大直径为10nm以上1000nm以下的形状。由于多聚磷酸具有纳米粒子水平的大小，因而使多聚磷酸组合物容易渗透到皮肤和头皮的细胞中。
本发明的第1方面的优选方式为：酵母菌通过与乳酸菌共同培养而得到。如实施例所示，在酵母菌与乳酸菌共同培养的情况下，多聚磷酸的累积能力得到提高。因此，在酵母菌通过与乳酸菌共同培养而得到的情况下，多聚磷酸的浓度得到提高，从而能够得到优良的多聚磷酸组合物。
本发明的第2方面涉及一种化妆品。该化妆品中含有有效量的作为有效成分的从酵母菌中提取出的多聚磷酸组合物。将有效量的多聚磷酸组合物混合到化妆品中，能够使化妆品促进细胞增殖和细胞存活。
本发明的第3方面涉及一种育发剂。该育发剂中含有有效量的作为有效成分的从酵母菌中提取出的多聚磷酸组合物。将有效量的多聚磷酸组合物混合到育发剂中，能够使育发剂促进毛发增长，维持毛发的生长期。
本发明的第4方面涉及一种口腔清洁剂。该口腔清洁剂中含有有效量的作为有效成分的从酵母菌中提取出的多聚磷酸组合物。将有效量的多聚磷酸组合物混合到口腔清洁剂中，能够使口腔清洁剂有效地通过抑制炎症，预防牙周病，以及通过再生促进效果使牙槽骨再生。与本发明的上述内容不同的其他方面涉及一种食品、食品添加剂、营养补充剂及整肠剂。人们公知多聚磷酸通过缩短肠的上皮细胞的间隙来防止有害物质和病原菌进入到肠内，调节肠道功能。因此，通过将由酵母而生成的多聚磷酸组合物作为食品、食品添加剂或营养补充剂来使用，能够提供具有调节肠道功能的产品。
本发明的第5方面涉及一种多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物含有物的制作方法。该方法包括获得酵母菌块的工序、获得酵母菌培养液的工序、获得酵母菌沉淀物的工序、获得酵母菌悬浮（悬浊）液的工序、获得酵母菌提取液的工序、获得多聚磷酸组合物的工序。获得酵母菌块的工序为：在1℃以上10℃以下的温度条件下静置酵母菌，获得酵母菌块。获得酵母菌培养液的工序为：用含有磷酸盐的培养液来培养酵母菌块，获得含有多聚磷酸的酵母菌培养液。获得酵母菌沉淀物的工序为：离心分离酵母菌培养液，获得沉淀物，获得酵母菌悬浮液的工序为：使作为沉淀物而得到的酵母菌悬浊在液体中，获得酵母菌被悬浊后的酵母菌悬浮液。获得酵母菌提取液的工序为：通过对酵母菌悬浮液进行加热处理，从酵母菌体内提取出多聚磷酸，获得酵母菌提取液。获得多聚磷酸组合物的工序为：将酵母菌提取液离心分离为含有多聚磷酸的上清液和含有酵母菌体组分的沉淀物，获得上清液的多聚磷酸组合物。按照上述工序能够制作出所期望的多聚磷酸组合物。本发明所涉及的制作方法中的培养方法由1个工序构成，这使得培养时间大幅缩短。所得到的多聚磷酸组合物具有促进细胞增殖的能力、对细胞的渗透性以及促进细胞存活的能力，还有，能够更有效地促进毛发的增长，维持毛发的成长期。
本发明的第5方面的优选方式为：获得酵母菌提取液的工序为：在60℃以上80℃以下、20分钟以上40分钟以下的范围内进行加热处理，获得所述多聚磷酸和蛋白质水解物。在60℃以上80℃以下的条件下进行一定时间以上的加热处理，能够获得蛋白质水解物。除含有多聚磷酸外，还含有蛋白质水解物的多聚磷酸组合物具有促进细胞增殖的能力、对细胞的渗透性以及促进细胞存活的能力，还有，能够更有效地促进毛发的增长，维持毛发的成长期。
本发明的与上述内容不同的其他方面涉及一种含多聚磷酸酵母和含有像这样的含多聚磷酸酵母的营养补充剂（食品、食品添加剂、整肠剂）。该含多聚磷酸酵母如下制作而成。具体的条件可以在适当地改变先前所说明的方法后进行使用。利用含有乳酸菌和磷酸盐的培养液来培养酵母菌块，得到含有多聚磷酸的酵母菌培养液。接着，对酵母菌培养液进行离心分离，得到酵母菌沉淀物。然后，使用该酵母菌沉淀物来得到包含多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物的任何一种的含多聚磷酸酵母。
发明效果
根据本发明，能够提供一种多聚磷酸组合物，其具有较高的细胞增殖促进能力、对细胞的渗透性以及促进细胞存活能力，还有，能促进毛发增长以及维持毛发的生长期。另外，本发明能够提供一种包含在酵母菌体内天然合成的多聚磷酸且具有良好安全性的多聚磷酸组合物。
还有，根据本发明，能够提供一种多聚磷酸组合物，其具有较高的细胞增殖促进能力、对细胞的渗透性以及促进细胞存活能力，还有，能促进毛发增长以及维持毛发的生长期。另外，本发明能够提供一种包含有效量的作为有效成分的多聚磷酸、酵母或酵母提取物的食品、食品添加剂、营养补充剂及整肠剂，该多聚磷酸、酵母或酵母提取物能使肠管细胞保持健康，并能调节肠道功能。本发明的制作方法能够有效地得到多聚磷酸组合物。
附图说明
图1表示从酵母菌中加热提取出的多聚磷酸的分子量的分布。
图2表示从酵母菌中提取出的多聚磷酸例子的电子显微镜照片。
图3表示含有从酵母菌中提取出的多聚磷酸的多聚磷酸组合物对成纤维细胞的增殖促进能力。
图4为表示利用从酵母菌中提取出的多聚磷酸进行处理的人工皮肤的甲臜（Formazan）的生成的照片。
图5表示从酵母菌中提取出的多聚磷酸对毛发的增长促进效果。
图6表示毛发的增长期、退化期、无变化的毛囊的例子。
图7表示从酵母菌中提取出的多聚磷酸对毛发的生成期的维持效果。
具体实施方式
本发明的第1方面涉及一种含有从酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物的多聚磷酸组合物。含有从酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物的多聚磷酸组合物对细胞的渗透力较高。还有，将多聚磷酸组合物涂抹在皮肤、牙龈及头皮上，从而使该多聚磷酸组合物有效地促进细胞增殖、细胞存活、毛发生成以及维持毛发的成长期。
多聚磷酸组合物为含有多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸溶剂化物的组合物。多聚磷酸组合物可以采用液体、浓缩液、粉体、固体物这样的各种形状。由于多聚磷酸组合物要与化妆品、育发剂、口腔清洗剂等药剂混合，因而优选具有水溶性的多聚磷酸组合物。另外，多聚磷酸组合物中出含有多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸溶剂化物外，还可以含有细胞构成物质、蛋白质水解物、维生素及矿物质中的至少一个。另外，多聚磷酸组合物中所含有的物质并不局限于上述物质，还可以包含其他有效成分。
酵母菌为真核单细胞微生物。酵母菌在最外层具有细胞壁，该细胞壁以多糖类的葡聚糖、甘露聚糖为主要成分。在细胞壁的正下方有细胞膜，且存在各种接受体、运输泵。芽殖酵母为真核生物，具有核膜和核。除此之外，芽殖酵母具有细胞质、线粒体及微管这样的细胞器官。酵母菌一般可以大致区分为芽殖酵母和裂殖酵母。本发明所使用的酵母菌一般只要是被称为酵母菌的物质，便没有特别限定，可以适当地使用芽殖酵母、裂殖酵母。
本发明的优选方式为：酵母菌为芽殖酵母。芽殖酵母自古以来便被用于加工食品。芽殖酵母可以使食品发酵，将食品中的糖分解为酒精。酵母菌自古以来被用于制作啤酒和面包、酱这样的食品，作为食用而使用时的安全性自古以来便已被确定。芽殖酵母为通过出芽而增殖的酵母菌。芽殖酵母例如优选酵母属（Saccharomyces）、有孢圆酵母属（Torulasupora）、球拟酵母属（Torulopsis）、假丝酵母属（mycotorula）、念珠菌属（Candida）、红酵母属（Rhodotorula）、比赤酵母属（Pichia）。在本发明中，使用芽殖酵母能够有效地得到含有多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸溶剂化物的多聚磷酸组合物。还有，使用芽殖酵母能够得到通过皮肤和头皮细胞有效地发挥作用的多聚磷酸组合物。
还有，作为优选方式，共同培养酵母菌和乳酸菌。通过共同培养使酵母菌受到乳酸菌或其生成的代谢物质的影响，从而使多聚磷酸的累积剂量增加。
微生物具有将磷酸摄入到微生物内，合成多聚磷酸的能力。微生物由于具有利用三磷酸腺苷（ATP）合成多聚磷酸的酶，因而能够从摄入的酸中合成多聚磷酸。由于酵母菌为微生物，因而如上所述，该酵母菌具有将磷酸摄入到微生物内，合成多聚磷酸的能力。
通过使用含有磷酸的培养液来培养酵母菌，使酵母菌将磷酸摄入到该酵母菌体内。优选培养液为pH3～6，根据目的在于产生酵母菌的蛋白质的特性，pH也可以为3～8。优选培养温度20℃以上～35℃以下。培养液可以以高浓度包含镁、钙、锌这样的矿物质成分以及维生素B2、维生素B6、维生素C、泛酸（维生素B5）、叶酸这样的维生素类。维生素和矿物质相对于培养液中的总质量，各可以为0.1%～3%。酵母菌可以将矿物质成分和维生素类摄入到培养液中存在的维生素和矿物质酵母菌体内。
摄入到酵母菌体内的磷酸通过酵母菌所具有的合成酶被合成为多聚磷酸。这样使酵母菌体内含有多聚磷酸。合成后的多聚磷酸的聚合度根据酵母菌的种类和多聚磷酸的合成酶的种类的不同而不同。如果为同一种酵母菌的话，酵母菌所具有的合成酶也为同一种，因而能使所得到的多聚磷酸的聚合度处于一定的范围内。还有，通过调节酵母菌的培养温度和培养时间来控制酶的活性，从而可以得到具有所期望的聚合度的多聚磷酸。
在酵母菌体内合成的多聚磷酸可以通过对酵母菌进行热休克，破坏酵母菌体的方式来提取。优选加热条件为温度在60℃以上80℃以下，时间在20分以上40分以下。通过加热处理，可以破坏酵母菌的细胞壁和细胞膜，得到含有由酵母菌合成的多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物的酵母菌提取液。在提取液中，当细胞壁和细胞膜被破坏时，可以提取出一部分酵母菌的细胞壁、细胞膜、线粒体、核膜、核内物质及微管这样的细胞构成物质。
所得到的酵母菌提取液被离心分离为含有多聚磷酸的上清液和含有酵母菌体组分的沉淀物，得到多聚磷酸组合物。当细胞片段的大小为一定以上的大小时，细胞片段在离心分离酵母菌提取液的工序中沉淀，去除。但是，微小的细胞构成物质却完好的残留在提取液的上清液上。因此，多聚磷酸组合物除含有多聚磷酸外，还含有一部分酵母菌的细胞构成物质。还有，在酵母菌的细胞构成物质、酵母菌所生成的蛋白质被酶分解后，酵母菌提取液中含有蛋白质水解物。在这种情况下，多聚磷酸组合物除含有多聚磷酸和一部分细胞构成物质外，还含有蛋白质水解物。由于多聚磷酸组合物中含有细胞构成物质和蛋白质水解物，因而使多聚磷酸组合物可以含有来自酵母菌的营养成分。
如上所述，当培养液以高浓度包含镁、钙、锌这样的矿物质成分以及维生素B2、维生素B6、维生素C、泛酸（维生素B5）、叶酸这样的维生素类时，酵母菌体内除含有多聚磷酸外，还含有矿物质成分和维生素类。因此，通过加热处理使从酵母菌提取出的提取液除包含多聚磷酸外，还包含酵母菌体内含有的维生素类和矿物质成分。
酵母菌的细胞构成物质、蛋白质水解物、维生素及矿物质成为皮肤和头皮细胞的营养源，有利于细胞的维持或成长。因此，在将这些物质添加到化妆品、育发剂、口腔清洗剂中时，这些物质作为有效成分发挥作用。还有，通过酵母菌的细胞构成物质、蛋白质水解物、维生素及矿物质与多聚磷酸的相互作用，能够提高多聚磷酸的细胞增殖促进能力和对皮肤的渗透性。
多聚磷酸可以为直链多聚磷酸、侧链多聚磷酸、环状多聚磷酸、作为高级支链（网孔状）的磷酸聚合物（超磷酸），也可以为这些物质的混合物和这些物质的衍生物。直链多聚磷酸具有如下结构：通过正磷酸的脱水缩合使2个以上的PO4四面体共有顶点的氧原子，而连接成直链状。侧链多聚磷酸具有直侧链导入有有机基团的结构。
多聚磷酸以H2O和P2O5为构成分子，由Hn+2（PnO3n+1）或（HPO3）n表示成直链状或环状。这里，聚合后的磷酸的个数由n表示。多聚磷酸中主要有20～100聚合度的多聚磷酸（中链多聚磷酸）、100～1000聚合度的多聚磷酸（长链多聚磷酸）。在本发明中，多聚磷酸的聚合度为20～100，优选50～250，更优选80～200。聚合度在20以上300以下的多聚磷酸为水溶性，其通过使成纤维细胞生长因子这样的细胞成长因子保持稳定来促进细胞的增殖。
本发明的多聚磷酸组合物中含有多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物。
多聚磷酸的盐是指多聚磷酸的盐、尤其是药学上所容许的多聚磷酸的盐。作为多聚磷酸的盐，优选碱金属盐，更优选钠盐。在本说明书中，多聚磷酸的盐中不仅可以含有无水盐还可以含有含水盐。这些盐例如在溶液内产生电离，发挥与多聚磷酸相同的功能。
多聚磷酸的溶剂化物是指多聚磷酸的溶剂化物的溶剂化物。溶剂化物例如为水合物。另外，本发明的多聚磷酸组合物有时在酵母菌体内或提取液中吸收水分，与其所吸收的水分形成水合物。形成像这样的水合物的情况也包含在多聚磷酸的溶剂化物的形成情况中。这些溶剂化物能在溶液内产生电离，发挥与多聚磷酸相同的功能。
本发明中使用的多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物可以为1种，但也可以为多种混合物。多种多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物中包含聚合度或分子结构不同的多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物以及金属离子不同的多聚磷酸盐。
在本发明中，多聚磷酸以多聚磷酸组合物的总质量的的0.01%以上70%以下，优选0.02%以上50%以下，还优选0.1%以上50%以下的比例包含在该多聚磷酸组合物中。多聚磷酸可以为多聚磷酸的盐或者多聚磷酸的溶剂化物，相对于多聚磷酸组合物的多聚磷酸的含有率为这3种多聚磷酸的总质量的含有率。通过多聚磷酸组合物中包含有效量的多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物，能够有效地促进细胞的增殖、皮肤细胞的存活、毛发的增长，维持毛发的生长期，调节肠道功能。
本发明中所得到的多聚磷酸在酵母菌体内合成，包含在该酵母菌体内。多聚磷酸为了在酵母菌体内保持稳定，而以折叠的结构存在。处于折叠状态的多聚磷酸呈最大直径在10nm以上1000nm以下，优选30nm以上800nm以下，还优选50nm以上500nm以下的形状。由于本发明中所得到的多聚磷酸为纳米级水平的粒子的大小，因而其具有良好的对皮肤表面的渗透性。另外，由于多聚磷酸呈上述形状，因而使其容易渗透到头皮和皮肤上的油脂成分层中，具有较高的渗透性。另外，折叠结构是指多聚磷酸凝集的粒子形状，该形状包含球形、椭圆形、圆柱形、四边形、凹凸的块状这样的各种形状。
本发明的第2方面涉及一种化妆品。该化妆品中包含有效量的作为有效成分的从酵母菌中提取出的多聚磷酸组合物。
本发明所涉及的化妆品包含作为有效成分的多聚磷酸组合物。多聚磷酸组合物以液体、浓缩液、粉体、固体物的状态被添加到化妆品中。多聚磷酸以化妆品的总质量的0.01%以上70%以下，优选0.02%以上50%以下，还优选0.1%以上50%以下的比例包含在该化妆品中。
在本发明所涉及的化妆品中还可以添加其他已知的有效成分。例如，在化妆水中添加离子交换水等用于向角质层提供水分的纯净水；乙醇、丙醇这样的用于溶解油溶性水分，带来清凉感觉的酒精；甘油、PEG及玻尿酸这样的用于角质层保湿的保湿剂；酯油、植物油这样的用于提高保湿性和使用感的润肤剂（防止水分蒸发的油成分）；聚氧乙烯油醇醚这样的用于可溶化原料成分的增溶剂；柠檬酸、乳酸及氨基酸这样的用于调整产品的pH值的缓冲剂；香兰素，橙香精，柠檬香精，牛奶味，香叶醇，芳樟醇这样的用于添加香味的香料；对羟基苯甲酸甲酯、苯氧乙醇这样的用于抑制微生物，防止腐败的防腐剂；用于着色的着色剂；金属离子螯合剂及紫外线吸收剂这样的用于防止褪色和变色的防褪色剂；收敛剂、杀菌剂、活化剂、消炎剂及美白剂这样的药剂。可以从这些化妆水的有效成分中选择出1种或2种以上进行添加。
化妆品一般在清洁皮肤后涂抹在皮肤表面上，以使皮肤保持健康。化妆品例如为化妆水、乳液、霜、发胶、精华露（精华液）及面膜。含有作为有效成分的多聚磷酸组合物的化妆品可以按照通常的方法制作而成。
化妆水的基本功能为对皮肤的角质层提供水分和保湿成分，化妆水还具有使皮肤变水嫩的功能。化妆水的有效成分最好能渗透到角质层中，因而优选对皮肤具有较高的渗透能力的有效成分。如上所述，在酵母菌体内合成的多聚磷酸具有纳米级水平的大小。因此，在酵母菌体内合成的多聚磷酸对皮肤具有较高的渗透能力，能促进细胞增殖，提高皮肤细胞的存活效果。从而能够保证皮肤细胞处于健康状态。
本发明的第3方面涉及一种育发剂。在该育发剂中包含作为有效成分的从酵母菌中提取出的多聚磷酸组合物。
本发明涉及的育发剂包含作为有效成分的多聚磷酸组合物。多聚磷酸组合物以液体、浓缩液、粉体、固体物的状态被添加到育发剂中。多聚磷酸以育发剂的总质量的0.01%以上70%以下，优选0.02%以上50%以下，还优选0.1%以上50%以下的比例包含在该育发剂中。育发剂在1天1次到10次的范围内被施用时，其换算成多聚磷酸组合物的重量时为0.01g以上10g以下（优选0.1g以上5g以下）的量即可。
本发明所涉及的育发剂还可以添加其他已知的有效成分。例如，月桂提取物及叶绿素这样的生物细胞的活化剂；人参提取物、日本獐牙菜提取物、千金藤素、维生素E及其衍生物、γ-谷维素这样的用于促进末梢血管的血液流动的血液循环促进剂；辣椒酊、姜酊、斑蝥酊及烟酸苄酯这样的局部刺激剂；维生素A、B1、B2、B6、E及其衍生物、泛酸及其衍生物、生物素等维生素类；胱氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、色氨酸及氨基酸提取物这样的氨基酸类的用于对毛母细胞周围补充营养的营养剂；雌二醇及炔雌醇这样的对雄性激素具有拮抗作用的雌性激素；泛酸及其衍生物、胎盘素、尿囊素及光敏性物质301号这样的用于改善毛母细胞功能低下的发根活化剂；甘草酸二甲、β-甘草次酸、尿囊素及桧木醇这样的抗炎剂、甘油及吡咯烷酮羧酸这样的用于防止头皮干燥的保湿剂。可以从这些育发成分中选择出1种或2种进行添加。
育发剂一般具有促进毛发出现、促进毛发生长、育发、养发以及防止脱发的效果。育发剂一般被直接涂抹在头皮上。育发剂例如为液体剂、乳剂、霜、洗剂、发胶、泡沫及喷雾。另外，洗发水、护发素及护发膏中可以包含作为有效成分的多聚磷酸组合物。另外，还可以为将有效成分渗透到无纺布和棉布中的敷布。含有作为有效成分的多聚磷酸组合物的育发剂可以按照通常的方法制作而成。
育发剂的基本功能为持续活化头皮的毛囊细胞，促进毛发增长。为了使有效成分渗透到头皮的毛囊细胞中，优选对毛囊细胞具有较高的渗透能力的育发剂。如上所述，在酵母菌体内合成的多聚磷酸具有纳米级水平的大小。因此，在酵母菌体内合成的多聚磷酸对毛囊细胞的渗透能力较高，能够持续活化毛囊细胞。从而能够促进毛发的增长，将毛囊细胞维持在成长期的状态。
本发明的第4方面涉及一种口腔清洗剂。该口腔清洗剂中包含有效量的作为有效成分的从酵母菌中提取出的多聚磷酸组合物。
本发明所涉及的口腔清洗剂包含作为有效成分的多聚磷酸组合物。多聚磷酸组合物以液体、凝胶、膏、浓缩液、粉体、固体物的状态被添加到口腔清洗剂中。多聚磷酸相对于口腔清洗剂的总质量的0.01%以上70%以下，优选0.02%以上50%以下，还优选0.1%以上50%以下的比例包含在该口腔清洗剂中。口腔清洗剂在1天1次到10次的范围内被施用时，其换算成多聚磷酸组合物的重量时为0.01g以上10g以下（优选0.1g以上5g以下）的量即可。
本发明所涉及的口腔清洗剂还可以添加其他已知的口腔清洗成分。例如，聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、植酸、磷酸氢二钠、磷酸钠及沸石这样的清洁剂；过氧化氢、过氧化尿素、过氧化钙及亚氯酸钠这样的漂白剂；尿囊素、ε-氨基己酸、甘草酸二甲、β-甘草次酸、抗坏血酸、维生素E及薁磺酸钠这样的抗炎剂；异丙基甲基苯酚、盐酸洗必泰、三氯生、桧木醇、西吡氯铵、铜叶绿酸钠、苯扎氯铵、地喹氯铵、苄索氯铵、盐酸烷基二氨基乙基甘氨酸、盐酸吡哆醇、氯化溶菌酶及儿茶素这样的抗菌剂；聚氧乙烯月桂基醚及月桂酰肌氨酸钠这样的表面活性剂；薄荷醇、乳香提取物、玫瑰提取物、薄荷香精这样的香味料；氟化钠、单氟磷酸钠及氟化锡这样的氟化合物；尼泊金、苯氧乙醇及盐酸烷基二氨基乙基甘氨酸这样的防腐剂。可以从这些口腔清洁成分中选择出1种或2种以上进行添加。
口腔清洗剂一般会在口腔内滞留一定时间，净化口腔内部，防止干燥，带来清凉感觉等，或者具有口腔内疾病的预防或治疗效果。口腔清洗剂例如为牙膏、研磨剂、漱口水、喷雾式口腔内用清洁剂、含嗽剂及口腔清洁液。含有作为有效成分的口腔清洗剂可以按照通常的方法制作而成。
口腔清洗剂的基本功能为：促进口腔内的清洁以及包含牙槽骨的牙周组织和牙齿的健康。为了使有效成分渗透到牙周组织的细胞中，抑制牙龈炎症，优选对牙周袋具有较高渗透能力的口腔清洗剂。如上所述，在酵母菌内合成的多聚磷酸具有纳米级水平的粒子的大小。因此，在酵母菌内合成的多聚磷酸组合物对牙周组织的牙龈细胞和牙槽骨具有较高的渗透能力，能在促进牙龈细胞的增殖的同时抑制炎症的产生，促进牙槽骨的再生。
本发明的优选方面涉及一种包含有效量的上述任何一种作为有效成分的多聚磷酸组合物的食品。食品的种类并没有特别限定。只要是能发挥上面说明的任何一个功能的食品，包含能发挥其功能的量的多聚磷酸组合物即可。食品例如为饮料。饮料容易经口摄取本发明的多聚磷酸组合物。饮料例如为清凉饮料、茶、咖啡、红茶及乳酸饮料。食品在1天1次到10次的范围内被摄入时，其换算成多聚磷酸组合物的重量时为0.01g以上10g以下（优选0.1g以上5g以下）的量即可。
本发明优选方面涉及一种包含有效量的上述任何一种作为有效成分的多聚磷酸组合物的食品添加剂。为发挥上述多聚磷酸组合物的功能，在食品中添加适当的食品添加剂。
本发明的优选方面涉及一种包含有效量的上述任何一种作为有效成分的多聚磷酸组合物的营养补充剂。营养补充剂本身众所周知。即，通过在众所周知的载体（淀粉等）中混合本发明的多聚磷酸组合物，并使用压片机使该混合物成型，能够制作出营养补充剂。本发明所涉及的食品、食品添加剂或营养补充剂中包含多聚磷酸组合物。多聚磷酸以营养补充剂的总质量的0.01%以上50%以下，优选0.02%以上30%以下，还优选0.1%以上15%以下的比例包含在该营养补充剂中。营养补充剂可以适当地包含乳糖、低聚糖等糖类；糊精、纤维素等赋形剂；各种无机盐类、维生素类、胶原蛋白、玻尿酸、辅酵素Q10、α硫辛酸、各种植物提取物等各种有用成分；香料；糖精等。营养补充剂在1天1次到10次的范围内被提供给使用对象时，其换算成多聚磷酸组合物的重量时为0.01g以上10g以下（优选0.1g以上5g以下）的量即可。
本发明的优选方面涉及一种包含有效量的上述任何一种作为有效成分的多聚磷酸组合物的整肠剂。可以通过与上述营养补充剂相同的制作方法来制作整肠剂。整肠剂在1天1次到10次的范围内被提供给使用对象时，其换算成多聚磷酸组合物的重量时为0.01g以上10g以下（优选0.1g以上5g以下）的量即可。
本发明的其他方面涉及一种多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物含有物的制作方法。该方法包括获得酵母菌块的工序、获得酵母菌培养液的工序、获得酵母菌沉淀物的工序、获得酵母菌悬浮（悬浊）液的工序、获得酵母菌提取液的工序、获得多聚磷酸组合物的工序。获得酵母菌块的工序为：将酵母菌静置在1℃以上10℃以下的温度条件下，获得酵母菌块。获得酵母菌培养液的工序为：用含有磷酸盐的培养液对酵母菌块进行培养，获得包含含有多聚磷酸的酵母菌的培养液。获得酵母菌沉淀物的工序为：对酵母菌培养液进行离心分离，获得沉淀物。获得酵母菌悬浮液的工序为：使作为沉淀物而得到的酵母菌悬浊在液体中，获得酵母菌被悬浊后的悬浮液。获得酵母菌提取液的工序为：通过对酵母菌悬浮液进行加热处理，从酵母菌体内提取出多聚磷酸，获得酵母菌提取液。获得多聚磷酸组合物的工序为：将酵母菌提取液离心分离为含有多聚磷酸的上清液和酵母菌体组分的沉淀物，获得上清液的多聚磷酸组合物。
由酵母菌可以将磷酸摄入到酵母菌体内，在该菌体内合成多聚磷酸。在含有磷酸盐的培养液中培养酵母菌，使酵母菌将磷酸摄入到菌体内。作为将磷酸摄入到酵母菌体内，合成多聚磷酸的方法，人们一般公知将培养工序分为2个工序的方法。第1工序为：为了使酵母菌容易摄入磷酸，使用完全不含有磷酸的培养液来培养磷酸，使该酵母菌处于磷酸饥饿状态。第2工序为：使用丰富含有磷酸的培养液来培养酵母菌，使磷酸摄入到酵母菌体内。通过将培养工序分为2个工序，可以使酵母菌有效地将磷酸摄入到菌体内。但是，在上述方法中，由于培养液需要2种，因而需要对第1种的培养液中培养的菌体进行集菌，再用新的培养液进行培养。因此，现有的培养工序在操作方面和成本方面均存在问题。
本发明所涉及的制作方法中首先有获得酵母菌块的工序。获得酵母菌块的工序为：将酵母菌静置在1℃以上10℃以下的温度条件下，获得酵母菌块。在获得酵母菌块的工序中，在水分含量相对于酵母菌块的质量百分比为30%以上50%以下的条件下静置酵母菌。在获得酵母菌块的工序中，优选在1℃以上10℃以下的温度条件下，将酵母菌静置72小时以上。在获得酵母菌块的工序中，不需要培养基或培养液，在获得酵母菌块之后，不需要更换培养液。因此可简化培养工序步骤。还有，经过获得酵母菌块的工序，能够大幅缩短获得酵母菌培养液的工序中的培养时间。
获得酵母菌培养液的工序为：在含有磷酸盐的培养液中培养酵母菌块。培养液中可以以高浓度包含镁、钙及锌这样的矿物质成分；维生素B2、维生素B6、维生素C、泛酸及叶酸这样的维生素类。在本发明所涉及的制作方法中，由于要经过获得酵母菌块的工序，因而使获得酵母菌培养液的工序仅由1个工序构成。本发明所涉及的制作方法与现有的包括由2个工序构成的培养工序的制作工序相比，能够获得大约1.5倍量的多聚磷酸。还有，培养时间为1小时以上3小时以下，与现有的由2个工序构成的培养工序所花费培养时间相比，大幅缩短。还有，在矿物质成分和维生素类存在的培养液中培养酵母菌，不仅能够获得适用于化妆品、育发剂及口腔清洗剂的多聚磷酸组合物，还能够缩短培养时间。
优选培养液包含乳酸菌。优选乳酸菌被添加酵母菌质量的0.1%以上50%以下，也可以为0.5%以上20%以下，1%以上15%以下，2%以上10%以下。乳酸菌例如为干酪乳酸杆菌、嗜酸乳杆菌、短乳杆菌、德氏乳杆菌、发酵乳杆菌、瑞士乳杆菌、克菲尔乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、唾液乳杆菌、嗜热链球菌、乳酸乳球菌、乳酸乳杆菌、棉子糖乳球菌、明串珠球菌、肠膜明串珠菌中的1种或2种以上。乳酸菌可以事先添加在培养基中，也可以在培养中途慢慢地添加，还可以在培养中途添加。
获得酵母菌沉淀物的工序为：对培养酵母菌的液体进行离心分离，获得沉降后的酵母菌。离心分离在离心力为3000×g到15000×g，时间为3分钟到30分钟的条件下进行。离心分离可以按照通常的方法进行。
获得酵母菌悬浮液的工序为：利用细胞悬浮液的溶剂对由离心分离获得酵母菌的沉淀物进行悬浊处理。细胞悬浮液的溶剂可以试用蒸馏水、生理盐水、磷酸缓冲液、pH缓冲液这样的通常用于细胞悬浮的溶液。
获得酵母菌提取液的工序为：对酵母菌提取液加热。通过对酵母菌进行热休克，破坏细胞膜，使多聚磷酸溶出菌体外。热处理可以在温度60℃以上80℃以下，20分钟以上40分钟以下的时间内进行。优选进行热处理时，设定不会使合成的多聚磷酸分解的温度，时间条件。
获得多聚磷酸组合物的工序为：将酵母菌提取液离心分离为含有多聚磷酸的上清液和酵母菌体组分，获得多聚磷酸组合物。从菌体内溶出的多聚磷酸为水溶性，溶解于液体。因此，通过离心分离可以分离出酵母菌体的沉淀物和含有多聚磷酸的多聚磷酸组合物。离心分离后，可以回收上清液，获得多聚磷酸组合物。离心分离在离心力为5000×g到10000×g，时间为3分钟到30分钟的条件下进行。离心分离可以按照通常的方法进行。酵母菌提取液中除含有多聚磷酸外，还含有酵母菌的细胞构成物质、蛋白质的蛋白质水解物、维生素类及矿物质成分。酵母菌的细胞构成物质、蛋白质水解物、维生素及矿物质有利于皮肤和头皮细胞的维持或成长，且作为化妆品、育发剂及口腔内清洁剂的有效成分发挥作用。因此，优选在进行获得多聚磷酸组合物的工序中的离心分离时，除将多聚磷酸残留在上清液中外，还将这些物质残留在上清液中。因此，优选离心分离的条件为5000×g到10000×g这样的、由通常的离心分离机以可能较小的离心力进行分离。
本发明的优选方式为：获得酵母菌提取液的工序为：在60℃以上80℃以下，20分钟以上40分钟以下的范围内进行加热处理。上述多聚磷酸组合物的制作方法中的获得酵母菌提取液的工序为：在60℃以上80℃以下，优选65℃以上75℃以下，20分钟以上40分钟以下，优选25分钟以上35分钟以下的范围内进行加热处理。按照加热温度和加热时间的条件分解合成的多聚磷酸，优选加热处理时间为40分钟以下。还有，在获得酵母菌提取液的工序中，可以获得蛋白质水解物。通过对酵母菌体内的蛋白质进行加水分解，可以获得蛋白质水解物。因此，优选在80℃以下，进行一定时间以上的加热处理，以使酵母菌体内的水解酶不会失去活性。
在本发明中，虽然制作工序中包含在60℃以上80℃以下，20分钟以上40分钟以下的范围内进行加热处理的工序，但是却能够抑制不耐热的蛋白质和维生素类的变性。这是由于在从酵母菌中和多聚磷酸一起提取出蛋白质和维生素类时，多聚磷酸的纳米粒子内包含蛋白质和维生素类，并对其进行保护。从酵母菌中提取出的多聚磷酸具有使不耐热的成分保持稳定的功能。
本发明的与上述不同的其他方面涉及一种含多聚磷酸酵母以及包含像这样的含多聚磷酸酵母的营养补充剂（食品、食品添加剂、整肠剂）。该含多聚磷酸酵母可以如下制作而成。具体的条件可以在适当地改变先前所说明的方法后进行使用。利用含有乳酸菌和磷酸盐的培养液来培养酵母菌块，得到含有多聚磷酸的酵母菌培养液。接着，对酵母菌培养液进行离心分离，得到酵母菌沉淀物。然后，使用该酵母菌沉淀物来得到包含多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物的任何一种的含多聚磷酸酵母。此时，可以进行加热等处理，杀灭酵母菌（及乳酸菌）。由于只要含多聚磷酸酵母包含酵母菌和乳酸菌的尸体，其便能成为肠内细菌的食物，从而能够发挥更好的效果，并能容易制作出营养补充剂等。
实施例1
（使用酵母菌的菌体内的多聚磷酸的制作）
用于培养的酵母菌使用食品用鲜酵母（常规东方酵母，日本东方酵母工业株式会社制）。首先，在10℃以下将上述酵母菌保管3天，得到酵母菌块。接着，仅用表1中所记载的组合培养液B来培养酵母菌。培养时间和酵母菌体量如表2中的记载所示。酵母菌体量以相对于培养液量的菌体量的比例来表示。准备40mL培养液B，按照表2中所记载的比例将酵母菌放入该培养液B中。之后，对含有酵母菌的培养基在25℃下进行2小时的振荡培养。在振荡培养后，在离心力为4000×g的条件下对培养液进行1分钟的离心分离，回收酵母菌体的沉淀物。用蒸馏水对回收后的菌体进行1次清扫，并在-30℃的条件下进行保存。
【比较例1】
为使酵母菌处于磷酸饥饿状态，在完全不含有磷酸的培养液A中对该酵母菌进行培养。培养时间和酵母菌体量如表2中的记载所示。酵母菌体量以相对于各培养液量的菌体量的比例来表示。准备300mL的培养液A，将6g酵母菌放入该培养液A中。之后，在25℃的条件下，按照表2所记载的各时间对含有酵母菌的培养液进行振荡培养。在振荡培养后，在离心力为4000×g的条件下对培养液进行1分钟的离心分离，回收酵母菌体的沉淀物。接着，准备40mL放入培养液B，按照表2所记载的比例将回收后的酵母菌体放入该培养液B中。之后，在25℃的条件下，对含有酵母菌的培养液进行2小时的振荡培养。在振荡培养后，在离心力为4000×g的条件下对培养液进行1分钟的离心分离，回收酵母菌体的沉淀物。用蒸馏水对回收后的菌体进行1次清扫，并在-30℃的条件下进行保存。另外，使用琥珀酸缓冲液或磷酸缓冲液将培养液A和B调整到pH5.2。
【表1】
Table1
【表2】
Table2
（多聚磷酸含有量的比较测定）
在表2所示条件下培养酵母菌后，对菌体内的多聚磷酸的含有量进行评价。使用为最初放入的菌重量的2倍的蒸馏水对菌体进行悬浊处理，在80℃的温度下进行30分钟的加热处理。之后，在离心力为10000×g的条件下离心分离10分钟，然后，回收上清液作为提取液。在提取液中加入硝酸，以使最终浓度变为3.4%，在100℃的温度下，加热处理30分钟，从而使多聚磷酸完全加水分解。接着，添加钒钼酸试液，定量出磷酸量。根据定量出的磷酸量，计算出多聚磷酸量（多聚磷酸钾定量法食品添加剂药典广川书店）。所计算出的结果表示在表3中。从表3所示结果来看，在比较例1-1、1-2、1-3、1-4中，使用以磷酸残留量为1单位的摩尔数时，每1g酵母的多聚磷酸累积剂量为0.03～0.13mmol。对此，在不使用培养液A的实施例1-5、1-6、1-7中，每1g酵母的多聚磷酸累积剂量为0.10～0.22mmol，由此可得知累积剂量较多。在实施例1-5中，多聚磷酸含有量最多，为比较例1-3的1.5倍以上。另外，在实施例1-5、1-6、1-7中，培养时间较短，为2小时，还有，不需要更换培养液。在包含从酵母菌中提取出的多聚磷酸的多聚磷酸组合物中的制作方法中，实施例1的制作方法与比较例1的制作方法相比，具有良好的操作性，能够降低成本。
【表3】
Table3
每1g酵母的多聚磷酸累积剂量(mmol)
比较例1-1 0.03
比较例1-2 0.08
比较例1-3 0.14
比较例1-4 0.13
比较例1-5 0.22
比较例1-6 0.16
比较例1-7 0.10
实施例2
（多聚磷酸的提取方法的评价）
对从酵母菌中提取多聚磷酸的条件进行了研究。加热处理的温度（60～0℃）和时间（0～60分钟）按照表4中所记载的条件进行加热处理，比较多聚磷酸的提取率。在离心力为4000×g的条件下，对酵母菌的培养液进行1分钟的离心分离，回收酵母菌体的沉淀物。将回收后的酵母菌体在-20℃以下进行冻结。之后，溶解菌体，使其再次悬浊在蒸馏水中之后，每次向微管中注入50μL。注入、搅拌后，在离心力为8000×g的条件下，进行5分钟的离心分离，接着，将上清液作为提取液进行回收。以所得到的的提取液为试样，使用15%的聚丙烯酰胺凝胶对其进行电泳（150V、45分钟）。之后，使用0.05%的甲苯胺蓝对凝胶进行染色。将电泳的结果表示在图1中。通过电泳对所提取出的天然多聚磷酸的分子量分布进行了确认，当在80℃、40分钟以上的条件下进行加热处理时，可得知随着加热时间的增长，分子量的较大的分子种类则会变少。这是由于长时间的加热使多聚磷酸可能会被分解。由此可得知，在提取多聚磷酸时，优选在80℃、30分钟左右的条件下进行加热处理。
在按照上述方法得到的提取液中加入硝酸，以使最终浓度变为3.4%，在100℃的温度下，加热处理30分钟，从而使多聚磷酸完全加水分解。接着，添加钒钼酸试液，定量出磷酸量。根据定量出的磷酸量，计算出多聚磷酸量。将计算出的结果表示在表4中。从表4所示结果可得到在80℃下加热30分钟时最高的多聚磷酸的提取量。
【表4】
Table4
实施例3
（从酵母菌中提取出的多聚磷酸的形状）
对包含从酵母菌中提取出的多聚磷酸的多聚磷酸组合物进行冻结干燥，得到多聚磷酸提取液干燥粉末。使用扫面型电子显微镜对该干燥粉末的微观结构进行了观察。如图2所示，已确认有许多被认为是酵母细胞的构成成分干燥硬化的结构物和直径在1000纳米以下的粒子。由此可确认，从酵母中提取出的多聚磷酸作为具有纳米级直径的粒子存在。
实施例4
（从酵母菌中提取出的多聚磷酸组合物对成纤维细胞的增殖促进）
通过MTS法（CellTiter96AqueousOneSolutionCellProliferationAssaykit、普洛麦格公司制）评价了包含从酵母菌中提取出的多聚磷酸的多聚磷酸组合物对成纤维细胞的增殖带来的效果。按照实施例1-5的步骤来培养酵母。进行提取时，将这些菌体悬浮液向微量离心管中每次注入0.2mL，在80℃下加热处理30分钟。在离心力为10000×g的条件下离心分离10分钟，接着，回收上清液，得到提取液P。使用0.45μm的除菌过滤器分别对所得到的提取液P进行过滤灭菌，测定蛋白质浓度和磷酸量。磷酸量的测定结果：提取液P中的多聚磷酸浓度为91.1mM。另外，蛋白质浓度的测定结果：包含在提取液P中的蛋白质浓度为15.89mg/ml。
【比较例2】
在与提取液P的提取条件相同的条件下对仅用不含有多聚磷酸的培养液（按照比较1-3的步骤使用的培养液A）培养15小时的酵母进行加热处理，调制出基本不含有多聚磷酸的提取液Q。该提取液Q中的天然多聚磷酸浓度为0.65mM，蛋白质浓度为9.84mg/ml。
（成纤维细胞增殖促进的比较）
下面，将提取液P和Q添加到正常人的胸部真皮细胞（HDF、美国CAI公司制）的培养液中，利用MTS法（CellTiter96AqueousOneSolutionCellProliferationAssaykit、普洛麦格公司制）评价了促进细胞增殖的效果。将细胞放入96孔板中，以达到3000cells/well，用包含10%FBS（胎牛血清）的D-MEM培养基培养24小时。之后，用包含1%FBS的D-MEM培养基将细胞培养1个晚上。将细胞培养液更换成添加了包含多聚磷酸的各提取液的D-MEM培养基，分别在24小时、48小时、69小时后进行MTS反应，从该反应开始起95分钟后，用酶标仪测定出OD492nm。调制出蛋白质浓度达到0.174mg/ml的各提取液。在这种情况下，提取液P的多聚磷酸浓度在培养基中为1mM。提取液Q的多聚磷酸浓度在培养基中为5mM。添加了提取液P的培养基的多聚磷酸浓度是添加了提取液Q的培养基的多聚磷酸浓度的大约87倍。另外，对以从酵母菌中提取出的多聚磷酸浓度在提取液中达到0.2mM的方式进行添加的物质进行了评价。
作为比较例，评价了没有在培养基中添加多聚磷酸的情况和在培养基中添加了1mM浓度的不是来自酵母而是化学合成的中链多聚磷酸钠（化学成分多聚磷酸、平均磷酸聚合度大约为60）的情况。成纤维细胞增殖促进的比较结果表示在表5中。
【表5】
Table5
（）内的数字表示将各时间内的无处理（比较例2-3）的数值设定为1时的增值倍率
表5表示各实施例及比较例的内容和其各自的细胞增殖率（490nm处的吸光度）。图3为将这些值绘制成图后的折线图。实施例4-1中的增值率最高，且得知包含浓度为1mM的从酵母菌中提取出的多聚磷酸的提取液具有非常高的促进细胞增殖的活性。另外，可得知实施例4-2的包含浓度为0.2mM的从酵母菌中提取出的多聚磷酸的提取液也具有较高的促进细胞增殖的活性。并且，可得知该增殖促进能力依赖于多聚磷酸的含有量。另外，在基本不含有多聚磷酸的比较例2-1中，与含有多聚磷酸的相比，增殖促进能力较低。另外，可得知添加了从酵母菌中提取出的多聚磷酸的情况与添加了相同浓度的化学合成多聚磷酸的情况相比，增殖促进率大约高1.5倍～2倍。从上述内容可得知，从酵母菌中提取出的多聚磷酸与现有的化学合成多聚磷酸相比，具有良好的细胞增殖促进能力。
实施例5
（从酵母菌中提取出的多聚磷酸对人工皮肤的渗透性）
使用人工皮肤（TESTSKINLSE-high东洋纺）对化学合成多聚磷酸和从酵母菌中提取出的多聚磷酸的渗透性进行了比较。在人工皮肤的角质层的表面添加0.1ml的浓度为20mM的各种多聚磷酸水溶液，在人工皮肤的下部加入1.2ml的TBS（浓度20mMTris-HClpH7.5、浓度137mMNaCl），在37℃的条件下保温24小时。之后，定量出渗透到人工皮肤的下部（真皮的下部）的溶解在TBS中的多聚磷酸量。定量方法为：与实施例1相同，通过钒钼酸试剂定量出磷酸量，并根据该定量出的磷酸量的值计算出多聚磷酸量。将对人工皮肤的渗透性的比较结果表示在表6中。从表6的结果可确认，在添加了从酵母菌中提取出的多聚磷酸的人工皮肤中，从酵母菌中提取出的多聚磷酸能渗透化学合成多聚磷酸的约1.2倍的量。从而可得知，从酵母菌中提取出的多聚磷酸比化学合成多聚磷酸容易渗透到皮肤中。
【表6】
Table6
渗透量（μM）
化学合成多聚磷酸 0.053
从酵母菌中提取出的多聚磷酸 0.109
实施例6
（从酵母菌中提取出的多聚磷酸的细胞存活效果）
在人工皮肤（TESTSKINLSE-high东洋纺）的角质层的表面添加0.1ml的浓度为20mM或100mM的各种多聚磷酸水溶液，另外，作为比较例，在人工皮肤的角质层的表面添加0.1ml的TBS。在人工皮肤的下部添加1.2ml的TBS，在37℃的条件保温70小时之后，利用MTT法对人工皮肤细胞的生存率进行了评价。MTT（3-（4,5-dimethylthiazol-2-yl)–diphenyltetrazoliumbromide）溶解在TBS中，浓度为0.333mg/ml，将1.2ml的人工皮肤的下层液体更换成溶解有MTT的TBS，在37℃的条件下保温4小时之后，确认到有不溶性的甲臜生成。该结果表示在图4中。还有，之后，回收人工皮肤，利用0.3ml的异丙醇溶解人工皮肤中析出的甲臜，测定出595nm处的吸光度。该结果表示在表7中。
【表7】
Table7
图4为表示通过MTT法根据活细胞的线粒体的还原能力而生成的甲臜的析出量的照片。用肉眼可确认，在添加培养了浓度为20mM或100mM的从酵母菌中提取出的多聚磷酸的人工皮肤中有甲臜生成。另外，可确认，利用浓度为100mM的从酵母菌中提取出的多聚磷酸进行处理时，甲臜的生成较为明显。从表7中结果来看，在利用浓度为20mM的从酵母菌中提取出的多聚磷酸进行处理时，甲臜的生成量为0.1499。在利用浓度为100mM的从酵母菌中提取出的多聚磷酸进行处理时，甲臜的生成量为0.8089。由此可得知，在利用浓度为100mM的从酵母菌中提取出的多聚磷酸进行处理时，细胞的生存率较高。对此，在利用化学合成多聚磷酸处理70小时时，用肉眼则基本不能确认到甲臜的生成（图4）。另外，在利用浓度为20mM的化学合成多聚磷酸进行处理时，甲臜的生成量为0.0963。在利用浓度为100mM的化学合成多聚磷酸进行处理时，甲臜的生成量为0.1911。在利用TBS进行处理时，人工皮肤的甲臜生成量为0.0208，由此可得知，即使在化学合成多聚磷酸的情况下，细胞的生存率多少有点高，但是，与利用菌体内多聚磷酸进行处理时的情况相比，其生存率则较低。
实施例7
（毛囊的器官培养对毛发增长的促进效果）
对化学合成多聚磷酸和从酵母菌中提取出的多聚磷酸的毛发增长的促进效果进行了比较。从植发手术时所提取出的人的头皮组织中离析出单一毛囊组织，分别在包含平均链长为60以上的中链多聚磷酸（5mM）的培养液和包含来自酵母的菌体内多聚磷酸（5mM）的培养液中，对离析出的毛囊培养12天。在培养时，经过一段时间后，测量毛发的长度，并将该毛发的整体长度表示在图5中。从图5所示结果可得知，用包含从来自酵母的酵母菌中提取出的多聚磷酸的培养液所培养的毛囊与用包含中链多聚磷酸的培养培养的毛囊相比，毛发的增长度较大。
实施例8
（对通过毛囊的器官培养而得到的成长期的毛囊的比率的评价）
使用毛囊对毛发的成长期的毛囊的比率进行了评价。采用与实施例7相同的方法，离析出单一毛囊组织，分别在包含化学合成多聚磷酸（5mM）的培养液和包含从酵母菌中提取出的多聚磷酸（5mM）的培养液中对离析出的毛囊培养12天。之后，如图6所示，通过器官的培养，将毛发成长得到确认的毛囊作为成长期的毛囊，将毛发成长未得到确认且毛发脱落的毛囊作为退化期的毛囊，另外，将完全看不到变化的毛囊作为无变化的毛囊，通过各种多聚磷酸的处理来观察各毛囊的比率是否有变化。将对毛囊的成长期、退化期、无变化期的评价结果表示在图6中。该结果的比率表示在图7中。在用从酵母菌中提取出的多聚磷酸所处理的毛囊到培养的第4天，87%为成长期，即使在第6天，62%也为成长期，则毛发成长期的比率较高，与此相对，用化学合成多聚磷酸所处理的毛囊中，在培养的第2天，62%为成长期，在第4天，62%为成长期，在第6天50%为成长期，则处于成长期的毛囊的比例随着时间的推移而减小。因此可得知，利用从酵母菌中提取出的多聚磷酸来处理毛囊时，能使该毛囊成长期被保持的时间较长，且能活化毛囊。
实施例9
（通过与乳酸菌的混合培养而引起的多聚磷酸的生产量的增加）
将乳酸菌（LactobacillusCasei）按酵母菌的重量的2.5%（实施例9-1）或5%（实施例9-2）的比例与酵母菌（常规东方酵母，日本东方酵母工业株式会社制）混合，利用实施例1-5的方法进行了多聚磷酸累积处理。作为比较例，调制出仅用酵母使多聚磷酸累积的物质（比较例9-1）和仅用乳酸菌使多聚磷酸累积的物质，对从这些物质中提取得到的多聚磷酸的量进行了比较。该结果表示在表8中。与比较例9-1相比，在混合培养乳酸菌的实施例9-1中，多聚磷酸的累积剂量增加到106.3%，在实施例9-2中，多聚磷酸的累积剂量增加到121.7%。仅用乳酸菌（比较例9-2）而得到的多聚磷酸的累积剂量在测定限制值以下，由此可认为，通过加入乳酸菌，使酵母菌自身的多聚磷酸累积能力得到了提高。因此，对乳酸菌和酵母菌进行混合培养能够提高多聚磷酸的生产能力。
【表8】
Table8

Claims (6)

1.一种育发剂，所述育发剂包含作为有效组分的有效量的多聚磷酸组合物，其中，所述多聚磷酸组合物包含从酵母菌中提取出的提取液，
所述提取液包含多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物，
所述多聚磷酸、多聚磷酸的盐或多聚磷酸的溶剂化物以所述多聚磷酸组合物的总质量的0.01％以上70％以下的比例包含在所述多聚磷酸组合物中,
所述酵母菌为芽殖酵母,
所述酵母菌的培养工序为在1℃以上10℃以下静置酵母菌72小时以上，得到酵母菌块；以及用含有磷酸盐的培养液来培养所述酵母菌块，获得含有多聚磷酸的酵母菌培养液；
所述提取液的提取工序为：在60℃以上80℃以下、20分钟以上40分钟以下的范围内进行加热处理。
2.根据权利要求1所述的育发剂，其中，
所述提取液还包含酵母菌的细胞构成物质和蛋白质水解物中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的育发剂，其中，
所述提取液还包含维生素和矿物质中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的育发剂，其中，
所述多聚磷酸的聚合度为20以上300以下。
5.根据权利要求1所述的育发剂，其中，
所述多聚磷酸呈最大直径为10nm以上1000nm以下的形状。
6.根据权利要求1所述的育发剂，其中，
所述酵母菌通过与乳酸菌共同培养而获得。
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