CN103635472B - 丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂 - Google Patents

丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂 Download PDF

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Abstract

本申请提供了具有式I化合物，其为ERK激酶抑制剂，其中Z、Z1、Z2、Z3、R3a、R3b和Rb如在本申请中定义。本申请还披露了组合物和用于治疗过度增殖性疾病的方法。

Description

丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂
相关申请的相互引用
本申请要求2011年2月28日提交的美国专利61/447,587的优先权，将其内容通过引用的方式并入本申请。
技术领域
本发明涉及抑制激酶且用于通过抑制通常在癌组织中活动过度或者过表达的信号转导途径来治疗过度增殖性疾病(hyperproliferative disease)和肿瘤性疾病的化合物。本发明化合物为ERK的选择性抑制剂。本发明还涉及用本发明范围内的化合物治疗癌症或者过度增殖性疾病的方法。
背景技术
牵涉肿瘤生长、进展和转移的过程通过在癌细胞中具有活化的信号转导途径来介导。所述ERK途径在调节哺乳动物细胞生长中起到关键作用，其通过由配体结合细胞表面受体酪氨酸激酶(RTK′s)诸如erbB家族PDGF、FGF和VEGF受体酪氨酸激酶来中继胞外信号。RTK的活化诱导了开始于Ras活化的磷酸化事件级联。Ras的活化导致Raf(即丝氨酸-苏氨酸激酶)的募集和活化。然后活化的Raf使得MEK1/2磷酸化并活化，继而其使得ERK1/2磷酸化并活化。当活化时，ERK1/2磷酸化若干下游靶标，所述靶标牵涉于众多细胞内事件中，包括细胞支架变化和转录激活。所述ERK/MAPK途径对于细胞增殖而言是最重要的途径之一，且认为所述ERK/MAPK途径在许多肿瘤中被频繁激活。Ras基因位于ERK1/2的上游，其在若干癌症包括结肠直肠癌、黑素瘤、乳腺癌和胰腺肿瘤中突变。高Ras活性伴随有许多人类肿瘤中的ERK活性升高。此外，BRAF(即Raf家族的丝氨酸-苏氨酸激酶)的突变与增加的激酶活性相关。BRAF突变已经鉴定于黑素瘤(60％)、甲状腺癌(大于40％)和结肠直肠癌。这些观察表明ERK1/2信号转导途径对于在广谱的人类肿瘤中的抗癌疗法而言是引人注目的途径(M.Hohno and J.Pouyssegur,Prog.in Cell Cycle Res.2003 5:219)。
所述ERK途径也已经被引证作为用于治疗疼痛和炎症的有前景的治疗靶标(Ma,Weiya and Remi Quirion.“The ERK/MAPK pathway,as a target for the treatment ofneuropathic pain”Expert Opin.Ther.Targets.2005 9(4):699-713,and Sommer,Claudia and Frank Birklein.“Resolvins and inflammatory pain”F1000 MedicineReports 20113:19)。
因此，ERK活性(即ERK1和ERK2活性)的小分子抑制剂将用于治疗广谱的癌症，例如黑素瘤、胰腺癌、甲状腺癌、结肠直肠癌、肺癌、乳腺癌和卵巢癌，以及用于治疗疼痛和炎症，诸如关节炎、腰背痛、炎性肠病和风湿病。本发明实现了这样的贡献。
发明内容
对于可用于癌症和过度增殖性病症的新的且新颖的治疗剂而言存在持续需求。Raf/MEK/ERK途径是重要的信号转导途径，其在许多癌组织中频繁地过表达和/或者活动过度。新的药物化合物的设计和开发是关键的。在本发明的一个方面提供了式I化合物，其中：
Z为N且Z3为CH2或者C＝O；或者Z为CRg且Z3为O；
Z1独立为CH或者N；
Z2为(a)NRaCR1R2Y；(b)式II，其中X为O、(CH2)1-3或者CH2NReCH2；(c)CH2CR1R2Y；(d)式III；(e)CH2CH(NRhRi)Ar；(f)CH2NRjAr，其中Rj为C1-6烷基或者羟基C1-6烷基且Ar为任选取代的苯基；(g)式IV；(h)CH2NRhRi；或者(i)式IIc，其中X1为(CH2)2-3；
Re为氢、C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基-C1-3烷基、卤代C1-3烷基、C1-3酰基、苄基、氰基C1-3烷基或者C1-3烷基磺酰基；
Y为C3-6环烷基、芳基、芳基C1-3烷基、苯氧基甲基或者杂芳基，其中所述杂芳基选自苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、吲哚基、N-C1-3烷基-吲哚基、嘧啶基、吡啶基、噁唑基和噻唑基；
Y1为–Ar、–OAr、-S(O)0-2Ar或者–NRgAr，其中Ar为任选取代的苯基；
R1和R2独立选自(a)氢，(b)C1-10烷基，(c)卤代C1-6烷基，(d)C3-7环烷基，(e)C1-10杂烷基，其任选进一步被芳基或者苄基取代，(f)(CH2)1-3OC(＝O)Rf，其中Rf为C1-6烷基、C1-6杂烷基或者C1-3烷氧基-C1-3烷基，(g)(CH2)1-3NRcRd，其中Rc和Rd独立为氢、C1-6烷基、C(＝O)Rg、S(＝O)2C1-3烷基、羟基C2-4烷基、C1-3烷氧基-C1-3烷基、C3-7环烷基-C1-3烷基、吡啶基或者嘧啶基，(h)氰基-C1-3烷基，(i)C1-3烷基磺酰基-C1-3烷基，(j)氨基甲酰基，(k)N-C1-3烷基-氨基甲酰基，(l)N,N-二C1-3烷基氨基甲酰基，(m)任选取代的杂芳基或者杂芳基-C1-3烷基，其中所述杂芳基选自吡啶基、2-氧代-1,2-二氢吡啶基、6-氧代-1,6-二氢吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡唑基、N-C1-3烷基-吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噁二唑基、吲哚基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、三唑基、N-C1-3烷基-三唑基和三嗪基，(n)杂环基或者杂环基-C1-3烷基，其中所述杂环基选自吡咯烷基、N-C1-3烷基-吡咯烷基、N-C1-3酰基-吡咯烷基、氮杂环丁烷基、N-C1-3烷基-氮杂环丁烷基、吗啉基、哌啶基和N-C1-3烷基-哌啶基，其中所述杂环基任选被1-3个独立选自下述的基团取代：C1-6烷基、卤素、羟基、苯基和氧代；R1和R2与它们所连接的碳一起形成环状胺，其任选被1-3个C1-6烷基取代；或者R1和Ra与它们所连接的原子一起形成环状胺，其任选被1-3个独立选自下述的基团取代：C1-6烷基、卤素、羟基、苯基、苄基或者氧代；以及(o)(2-甲氧基乙氧基)甲基；
R3a和R3b独立为氢、卤素或者羟基；
Ra为(a)氢或者C1-3烷基，或者(b)R1和Ra与它们所连接的原子一起形成环状胺，其任选被1-3个独立选自下述的基团取代：C1-6烷基、卤素、羟基、苯基、苄基和氧代；
Rb选自(a)氢，(b)C1-10烷基，(c)卤代C1-6烷基，(d)任选取代的芳基或者芳基-C1-6烷基，(e)任选取代的杂芳基或者杂芳基-C1-6烷基，其中所述杂芳基选自异噁唑基、吡啶基、吡啶酮基、N-C1-3烷基-吡啶酮基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、N-C1-6烷基-吡唑基、N-苄基吡唑基、噻唑基、N-C1-6烷基三唑基和2-氧代-四氢喹啉-6-基，(f)杂环基或者杂环基-C1-6烷基，其中所述杂环基选自四氢吡喃基、四氢呋喃基、氧杂环丁烷基、哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、N-C1-6烷基哌啶基和N-C1-6烷基-2-氧代-吡咯烷基，(g)C3-7环烷基或者C3-7环烷基-C1-6烷基，其中所述环烷基任选被羟基或者卤素取代，(h)C1-6杂烷基，(i)C1-6酰基和(j)羟基C1-6烷基；
每个Rg独立为氢或者C1-3烷基；
每个Rh和Ri与它们所连接的氮原子一起形成吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、N-甲基-哌嗪基或者吗啉基环，其各自任选取代有苯基环，所述苯基环任选取代有卤素或者卤代C1-3烷基；
每个所述芳基和每个所述杂芳基任选被1-5个独立选自下述的基团取代：C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤素、羟基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷基硫基、卤代C1-6烷基硫基、C1-6酰基氨基、氰基、硝基、任选取代的芳基氧基或者氰基C1-3烷基；
每个所述杂环基任选取代有C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-3烷基或者卤素；
每个所述环烷基任选被1-4个独立选自下述的基团取代：C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、氰基或者氧代；且
每个所述杂烷基任选被苯基、苄基或者卤代C1-3烷基取代。
本发明还涉及如上所述的化合物的互变异构体、立体异构体和药用盐。
本发明还涉及用于治疗过度增殖性疾病的方法，其通过向有此需要的患者给予治疗有效量的式I化合物。所述化合物可单独给予或者与其它抗-过度增殖性化合物或者化学治疗性化合物共同给予。
本发明还涉及用于抑制细胞内ERK蛋白激酶活性的方法，包括用有效减弱或者消除ERK激酶活性的量的式I化合物处理细胞。
本发明还涉及药物组合物，包含式I化合物和至少一种药用载体、稀释剂或者赋形剂。
具体实施方式
本申请使用的术语“一个”或者“一种”实体是指一个或者多个所述实体；例如，化合物是指一个或者多个化合物或者至少一个化合物。由此，术语“一个”(或者“一种”)、“一个或者多个”和“至少一个”可在本申请交替使用。
短语″如本申请以上所定义″是指如在发明内容中提供的每个基团的最广的定义或者最广的要求。在如下提供的所有其它实施方案中，可存在于每个实施方案且并未明确限定的取代基保留在发明内容中提供的最广的定义。
如在本说明书中使用，无论是在过渡短语还是在权利要求的主体中，术语″包括″和″包含″应该理解为具有开放式的含义。也就是说，术语应该与短语″具有至少″或者″包括至少″进行同义地理解。当在方法的背景下使用时，术语″包括″是指所述方法至少包括所述步骤，但是可包括额外的步骤。当在化合物或者组合物的背景下使用时，术语″包含″是指所述化合物或者组合物至少包含所述特征或者组分，但是也可包括额外的特征或者组分。
本申请使用的术语″独立地″表明变量在任何一种不与存在或者不存在具有相同化合物中的相同或者不同定义的变量相关的情况下应用。因此，在其中R″出现两次且如″独立地碳或者氮″定义的化合物中，两个R″均可为碳，两个R″均可为氮，或者一个R″可为碳且另一个为氮。
当任何变量(例如R1、R4a、Ar、X1或者Het)在描绘或者描述本发明采用或者要求的化合物的任何部分或者式中出现不止一次时，其在每次出现时的定义独立于其在其它每次出现时的定义。同样的，仅在所述化合物可获得稳定的化合物时才允许取代基和/或者变量的组合。
在化学键末端的符号″*″或者划过化学键的″------″各自是指官能团或其它化学部分与作为部分的分子剩余部分的连接点。因此，例如：
划至环系的化学键(与在特定顶点连接的情况相反)表明所述化学键可连接至任何适当的环原子。
本申请使用的术语“任选的”或者“任选地”是指随后描述的事件或者情况可能(但是不需要)出现，且描述的内容包括其中所述事件或者情况出现的实例以及其中所述事件或者情况不出现的实例。例如，“任选取代的”是指所述任选取代的部分可掺入氢或者取代基。
本申请使用的术语″约″是指大约地、在一定范围内、粗略地或者大约。当所述术语″约″与数值范围联用时，其通过将界限延伸至高于且低于所阐述的数值来修饰所述范围。一般而言，本申请使用的术语″约″将数值修饰高于且低于所述的值达20％的变化。
如在本申请所使用，对于变量的数值范围的描述意在表明本发明可采用等于该范围内的任何值的变量来实施。因此，对于内在离散的变量而言，所述变量可等于所述数值范围的任何整数值，包括所述范围的终末点。类似地，对于内在连续的变量而言，所述变量可等于所述数值范围的任何真实值，包括所述范围的终末点。作为实例，针对内在离散的变量而言，作为具有0-2之间的值所描述的变量可为0、1或者2，且对于内在连续的变量而言，其可为0.0、0.1、0.01、0.001或者任何其它真实值。
式I化合物显示互变异构现象。互变异构化合物可作为两个或者多个相互转化的种类存在。质子移变互变异构体(prototropic tautomer)由两个原子之间的共价连接的氢原子的迁移获得。互变异构体通常平衡存在且对于分离单个互变异构体的尝试通常产生化学和物理性质与化合物的混合物一致的混合物。平衡的位置取决于分子内的化学特征。例如，在许多脂族醛和酮诸如乙醛中，酮式占优势；而在酚中，烯醇式占优势。常见的质子移变互变异构体包括酮/烯醇酰胺/亚胺酸和脒互变异构体。后两种在杂芳基和杂环基中是特别常见的。本发明涵盖本申请所述的化合物的所有互变异构形式。
本领域技术人员应该认识到某些式I化合物可含有一个或者多个手性中心且因此以两种或者多种立体异构体形式存在。这些异构体的外消旋化合物、单独的异构体和在一个对映异构体中富集的混合物以及存在两个手性中心时的非对异构体和特定非对映异构体特别富集的混合物均在本发明的范围内。本领域技术人员还应该认识到托烷环的取代可为内向构型或者外型构型，且本发明涵盖这两种构型。本发明包括式I化合物的所有单独的立体异构体(例如对映异构体)、外消旋混合物或者部分拆分的混合物，且在适当时，包括式I化合物的单独的互变异构形式。
式I化合物可含有碱性中心且适当的酸加成盐由可形成无毒盐的酸来形成。无机酸的盐的实例包括盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐。有机酸的盐的实例包括乙酸盐、富马酸盐、扑酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、碳酸盐、碳酸氢盐、樟脑磺酸盐、D和L-乳酸盐、D和L-酒石酸盐、乙磺酸盐、甲磺酸盐、丙二酸盐、乳清酸盐、葡庚糖酸盐、甲基硫酸盐、硬脂酸盐、葡糖醛酸盐、2-萘磺酸盐、甲苯磺酸盐、羟苯酰苯酸盐、烟酸盐、羟乙基磺酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、枸橼酸盐、葡萄糖酸盐、琥珀酸盐、糖二酸盐、苯甲酸盐、乙磺酸盐和扑酸盐。有关适当盐的综述，参见Berge et al,J.Pharm.Sci.,1977 66:1-19 and G.S.Paulekuhn et al.J.Med.Chem.200750:6665。
除非另作定义，本申请使用的技术和科学术语具有本发明所属领域的技术人员通常所理解的含义。本申请对于各种方法学和物质的引用对于本领域技术人员而言是已知的。阐述药理学的一般原理的标准参考工具包括Goodman和Gilman的The PharmacologicalBasis of Therapeutics,10th Ed.,McGraw Hill Companies Inc.,New York(2001)。在制备这些化合物中使用的起始物质和试剂通常可由商业供应商获得，诸如Aldrich ChemicalCo.，或者通过本领域技术人员已知的方法按照在参考文献中阐述的操作来制备。物质、试剂以及在如下说明书和实施例中引用参考文献的物质可由商业来源获得，除非另作说明。一般合成操作已经描述于如下论文中，诸如Fieser and Fieser’s Reagents for OrganicSynthesis；Wiley&Sons:New York,Volumes 1-21；R.C.LaRock,Comprehensive OrganicTransformations,2nd edition Wiley-VCH,New York 1999；Comprehensive OrganicSynthesis,B.Trost and I.Fleming(Eds.)vol.1-9 Pergamon,Oxford,1991；Comprehensive Heterocyclic Chemistry,A.R.Katritzky and C.W.Rees(Eds)Pergamon,Oxford 1984,vol.1-9；Comprehensive Heterocyclic Chemistry II,A.R.Katritzky andC.W.Rees (Eds)Pergamon,Oxford 1996,vol.1-11；和Organic Reactions,Wiley&Sons:New York,1991,Volumes 1-40，且对于本领域技术人员而言是熟知的。
本申请所述的定义可联系在一起以形成化学相关的组合，诸如“杂烷基芳基”、“卤代烷基杂芳基”、“芳基烷基杂环基”、“烷基羰基”、“烷氧基烷基”等。当术语“烷基”用作紧随另一个术语的词尾时，诸如“苯基烷基”或者“羟基烷基”，这意指如上定义的烷基取代有1-2个选自其它特别命名的基团的取代基。因此，例如“苯基烷基”是指具有1-2个苯基取代基的烷基，且因此包括苄基和苯基乙基。“烷基氨基烷基”为具有1-2个烷基氨基取代基的烷基。“羟基烷基″包括2-羟基乙基、2-羟基丙基、1-(羟基甲基)-2-甲基丙基、2-羟基丁基、2,3-二羟基丁基、2-(羟基甲基)、3-羟基丙基等。因此，如本申请所使用，术语“羟基烷基”用于定义如下定义的杂烷基的亚组。术语-(芳)烷基是指未取代的烷基或者芳烷基。术语(杂)芳基或者(het)芳基是指芳基或者杂芳基部分。
本申请单独使用或者与其它基团组合使用的术语“烷基”是指含有1-10个碳原子的具有未支化链或者支化链的，饱和、单价烃残基。术语“低级烷基”是指含有1-6个碳原子的直链或者支链的烃残基。本申请使用的″C1-6烷基″是指由1-6个碳构成的烷基。烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、新戊基、己基和辛基。
本申请使用的术语“卤代烷基”是指如上定义的未支化的或者支化的链烷基，其中1、2、3或者多个氢原子被卤素取代。实例为1-氟甲基、1-氯甲基、1-溴甲基、1-碘甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氯甲基、1-氟乙基、1-氯乙基、2-氟乙基、2-氯乙基、2-溴乙基、2,2-二氯乙基、3-溴丙基或者2,2,2-三氟乙基。
本申请使用的术语″氟C1-6烷基″是指如上定义的未支化的或者支化的链烷基，其中1、2、3或者多个氢原子被氟取代。
本申请使用的术语″卤代烷氧基″是指基团–OR，其中R为如本申请定义的卤代烷基。本申请使用的术语″卤代烷基硫基″是指基团-SR，其中R为如本申请定义的卤代烷基。
本申请使用的术语″卤素″或者″卤代″是指氟、氯、溴或者碘。
本申请使用的术语″羟基烷基″和″烷氧基烷基″是指其中在不同碳原子上的1-3个氢原子分别被羟基或者烷氧基代替的本申请定义的烷基。C1-3烷氧基-C1-6烷基部分是指1-3个氢原子被C1-3烷氧基代替且所述烷氧基的连接点为氧原子的C1-6烷基取代基。
术语″烷基硫基″或者“烷基硫烷基”是指-S-烷基，其中烷基如在本申请定义，诸如甲基硫基、乙基硫基、正丙基硫基、异丙基硫基、正丁基硫基、己基硫基，包括它们的异构体。本申请使用的″低级烷基硫基″是指具有如前定义的″低级烷基″的烷基硫基。本申请使用的″C1-10烷基硫基″是指-S-烷基，其中烷基为C1-10。“芳基硫基”是指–S-芳基，其中芳基如本申请定义。“苯基硫基”为“芳基硫基”部分，其中芳基为苯基。
本申请使用的术语″烷基磺酰基″和″芳基磺酰基″是指式-S(＝O)2R的基团，其中R分别为烷基或者芳基，且烷基和芳基如本申请定义。本申请使用的术语C1-3烷基磺酰基酰氨基是指基团RSO2NH-，其中R为如本申请定义的C1-3烷基。
本申请使用的术语″烷基磺酰基烷基″是指基团R′R″-，其中R′为本申请定义的烷基磺酰基部分，且R″为本申请定义的亚烷基，其理解为所述芳基烷基部分的连接点将在亚烷基上。
本申请使用的术语″杂烷基″是指如本申请定义的烷基，其中一个或者两个氢原子已经被独立选自-ORa和-NRbRc的取代基代替，其理解为所述杂烷基的连接点经过碳原子。Ra为氢或者烷基且Rb和Rc彼此独立为氢、酰基、烷基，或者Rb和Rc与它们连接的氮一起形成环状胺。羟基烷基、烷氧基烷基、氨基烷基、烷基氨基烷基和二烷基氨基烷基部分为术语″杂烷基″所涵盖的亚组。代表性的实例包括但不限于2-羟基乙基、3-羟基丙基、2-羟基-1-羟基甲基乙基、2,3-二羟基丙基、1-羟基甲基乙基、3-羟基丁基、2,3-二羟基丁基、2-羟基-1-甲基丙基、2-氨基乙基、3-甲基氨基丙基等。
术语″环状胺″是指饱和的碳环，其含有3-6个碳原子，其中所述碳原子的至少一个被选自N、O和S的杂原子代替，例如哌啶、哌嗪、吗啉、硫吗啉、二-氧代-硫吗啉、吡咯烷、吡唑啉、咪唑烷和氮杂环丁烷，其中所述环状碳原子任选被一个或者多个选自卤素、羟基、苯基、低级烷基、低级烷氧基的取代基取代，或者碳上的2个氢原子均被氧代(＝O)代替。当所述环状胺为哌嗪时，一个氮原子可任选被C1-6烷基、C1-6酰基或者C1-6烷基磺酰基取代。
本申请使用的术语“环烷基”是指含有3-8个碳原子的饱和的碳环，即环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基或者环辛基。本申请使用的″C3-7环烷基″是指由碳环中的3-7个碳构成的环烷基。
本申请使用的术语“环烷基烷基”是指基团R′R″-，其中R′为如本申请定义的环烷基，且R″为如本申请定义的亚烷基，其理解为所述环烷基烷基的连接点将位于所述亚烷基上。环烷基烷基的实例包括但不限于环丙基甲基、环己基甲基或者环戊基乙基。C3-7环烷基-C1-3烷基是指基团R′R″，其中R′为如本申请定义的C3-7环烷基且R″为C1-3亚烷基。
本申请使用的术语“芳基”是指含有6-10个碳原子的单价芳族碳环基，其由一个单独环组成，或者由一个或者多个稠合环(其中至少一个环在本质上为芳族的)组成。芳基可任选取代有一个或者多个、优选1-3个独立选自下述的取代基：羟基、硫基、氰基、烷基、烷氧基、低级卤代烷氧基、烷基硫基、卤素、卤代烷基、羟基烷基、硝基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、氨基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、烷基磺酰基、芳基亚硫酰基、烷基氨基磺酰基、芳基氨基磺酰基、烷基磺酰基酰氨基、芳基磺酰基酰氨基、氨基甲酰基、烷基氨基甲酰基、二烷基氨基甲酰基、芳基氨基甲酰基、烷基羰基氨基和芳基羰基氨基，除非另作说明。可选择地，芳基环的两个相邻原子可取代有亚甲二氧基或者亚乙二氧基。芳基的实例包括但不限于苯基、萘基、茚满基、蒽醌基、四氢萘基、3,4-亚甲二氧基苯基、1,2,3,4-四氢喹啉-7-基、1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基等。二环芳基的连接点位于碳环芳族环上。
本申请使用的术语″芳基烷基″或者″芳烷基″是指基团R′R″-，其中R′为如本申请定义的芳基，且R″为如本申请定义的亚烷基，其理解为所述芳基烷基部分的连接点将位于亚烷基上。″任选取代的芳基-C1-3烷基″是指其中所述亚烷基链具有1-3个碳且所述芳基为任选取代的化合物。本申请使用的术语″苄基″是指C6H5CH2基团。
本申请使用的术语″亚烷基″是指具有1-10个碳原子的二价饱和的直链烃基(例如(CH2)n)或者具有2-10个碳原子的支链饱和的二价烃基(例如-CHMe-或者-CH2CH(i-Pr)CH2-)，除非另作说明。C0-4亚烷基是指饱和1-4个碳原子的直链或者支链饱和的二价烃基，或者在C0的情况下，略去所述亚烷基。除了亚甲基的情况之外，亚烷基的自由价键不与相同原子链接。亚烷基的实例包括但不限于亚甲基、亚乙基、亚丙基、2-甲基-亚丙基、1,1-二甲基-亚乙基、亚丁基和2-乙基亚丁基。
本申请使用的术语″氨基″、″烷基氨基″和″二烷基氨基″分别是指-NH2、-NHR和-NR2，且R为如上定义的烷基。连接至二烷基部分的氮的两个烷基可为相同或者不同的。本申请使用的术语″氨基烷基″、″烷基氨基烷基″和″二烷基氨基烷基″分别是指NH2(亚烷基)n-、RHN(亚烷基)n-和R2N(亚烷基)n-，其中R为烷基，且亚烷基和烷基均如本申请定义且n为亚烷基链中的碳原子数目。本申请使用的术语″C1-10烷基氨基″是指烷基氨基部分，其中烷基为C1-10。本申请使用的C1-10烷基-氨基-C2-6烷基″是指C1-10烷基氨基(亚烷基)2-6，其中烷基为C1-10且亚烷基为(CH2)2-6。当所述亚烷基含有三个或者更多个碳原子时，所述亚烷基可为直链的例如-(CH2)4-，或者支链的例如-(CMe2CH2)-。本申请使用的术语″苯基氨基″是指-NHPh，其中Ph表示任选取代的苯基。
本申请使用的术语“酰基”或者″烷酰基″是指式-C(＝O)R的基团，其中R为氢或者如本申请定义的低级烷基。本申请使用的术语″烷基羰基″是指式C(＝O)R的基团，其中R为如本申请定义的烷基。术语C1-6酰基或者″烷酰基″是指含有1-6个碳原子的基团-C(＝O)R。C1酰基或者″烷酰基″为甲酰基，其中R＝H，且C6酰基是指己酰基，当所述烷基链是未支化的时。本申请使用的术语″芳基羰基″或者″芳酰基″是指式C(＝O)R的基团，其中R为芳基；本申请使用的术语″苯甲酰基″为″芳基羰基″或者″芳酰基″，其中R为苯基。
本申请使用的术语“酰基氨基”是指式-NHC(＝O)R的基团，其中R为如本申请定义的氢或者低级烷基。C1-6酰基-氨基是指酰基氨基，其中所述C(＝O)R部分含有1-6个碳原子。
术语氰基-C1-3烷基是指C1-3烷基部分，其中氢原子被氰基代替。
本申请使用的术语″氨基甲酰基″是指基团-CONH2。词头″N-烷基氨基甲酰基″和″N,N-二烷基氨基甲酰基″分别是指基团CONHR′或者CONR′R″，其中R′和R″独立为本申请定义的烷基。词头N-芳基氨基甲酰基″是指基团CONHR′，其中R′为本申请定义的芳基。
本申请使用的术语″杂芳基”或者″杂芳族基团″是指具有5-12个环原子的单环或者二环基团，其具有至少一个芳族环(每个环含有4-8个原子)，掺入一个或者多个N、O或者S杂原子，且剩余的环原子为碳，其理解为所述杂芳基的连接点在芳族环上。如本领域技术人员所熟知的，杂芳基环具有弱于它们的全-碳配对物的芳族特性。因此，针对本发明的目的，杂芳基仅需要具有某种程度的芳族特性。杂芳基部分的实例包括具有5-6个环原子和1-3个杂原子的单环芳族杂环基，包括(除非另作限制)吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、三唑啉基、噻二唑基和噁二唑啉基，其可任选取代有一个或者多个、优选一个或者两个选自下述的取代基：羟基、氰基、C1-6烷基、芳基、芳基C1-3烷基、C1-6烷氧基、硫基、低级卤代烷氧基、C1-6烷基硫基、卤素、卤代C1-6烷基、C1-6烷基亚硫酰基、C1-6烷基磺酰基、卤素、氨基、C1-6烷基氨基、C1-6二烷基氨基、氨基-C1-3烷基、C1-3烷基氨基烷基、C1-3二烷基氨基-C1-3烷基、硝基、C1-6烷氧基羰基、氨基甲酰基、C1-3烷基氨基甲酰基、C1-3二烷基氨基甲酰基、芳基氨基甲酰基、C1-6烷基羰基氨基和芳基羰基氨基。二环部分的实例包括但不限于喹啉基、异喹啉基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噻唑基和苯并异噻唑基。二环部分可在环上是任选取代的。
术语″杂芳基烷基″或者″杂芳烷基″是指式R′R″-的基团，其中R′为如本申请定义的任选取代的杂芳基，且R″为如本申请定义的亚烷基，其理解为所述杂芳基的连接点将在亚烷基上。杂芳基烷基的实例包括但不限于2-咪唑基甲基、3-吡咯基乙基、4-吡啶基甲基和5-嘧啶基甲基。
本申请使用的术语″杂环基″或者″杂环″是指单价的饱和环状基团，其由一个或者两个环构成，优选由1-2个环构成，每个环具有3-8个原子，其掺入一个或者多个环杂原子(选自N、O或者S(＝O)0-2)，且剩余的环原子为碳。所述杂环基部分可任选独立取代有一个或者多个、优选一个或者两个选自下述的取代基：羟基、氧代、氰基、低级烷基、低级烷氧基、低级卤代烷氧基、C1-6烷基硫基、卤素、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、硝基、C1-6烷氧基羰基、C1-6酰基、氨基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基磺酰基、芳基磺酰基、C1-6烷基氨基磺酰基、芳基氨基磺酰基、C1-6烷基磺酰基酰氨基、芳基磺酰基酰氨基、C1-6烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、C1-6烷基羰基氨基或者芳基羰基氨基，除非另作说明。杂环基的实例包括但不限于氮杂环丁烷基、吡咯烷基、六氢氮杂基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、噁唑烷基、噻唑烷基、异噁唑烷基、吗啉基、哌嗪基、哌啶基、四氢吡喃基、硫吗啉基、奎宁环基和咪唑啉基，除非具体限定。
术语″杂环烷基″(或者″杂环基烷基″)是指式R′R″-的基团，其中R′为如本申请定义的杂环基，且R″为如本申请定义的亚烷基，且所述杂环烷基的连接点在亚烷基上。杂环烷基的实例包括但不限于1-哌嗪基甲基或者2-吗啉代甲基。
本申请使用的术语“氧代”是指“＝O”(即在连接至碳原子时得到羰基的双键氧)，其中进一步理解为这等同于两个羟基连接至相同的碳。
术语“治疗(treat)”或“治疗(treatment)”是指治疗性处置，其中目的是减缓(减轻)不期望的生理学变化或障碍如癌的扩散。出于本发明的目的，有益的或期望的临床结果包括但不限于缓解症状、减小病变程度、稳定(即不是恶化)疾病状态、延迟或减缓疾病进展、改善或缓和疾病状态以及好转(部分好转或完全好转)，无论这些结果是可检测的还是不可检测的。“治疗(treatment)”还可表示与未接受治疗的期望存活相比延长的存活。
术语“治疗有效量”表示(i)治疗本申请描述的具体疾病、病症或障碍的本发明化合物的量，(ii)削弱、改善或消除本申请描述的具体疾病、病症或障碍的一种或多种症状的本发明化合物的量，或(iii)预防或延迟本申请描述的具体疾病、病症或障碍的一种或多种症状的发作的本发明化合物的量。在癌症的情况中，治疗有效量的药物可降低癌细胞的数量；减小肿瘤尺寸；抑制(即在一定程度上减慢以及优选停止)癌细胞渗入周围器官中；抑制(即在一定程度上减缓且优选终止)瘤转移；在一定程度上抑制肿瘤生长；和/或在一定程度上缓解与癌症相关的一种或多种症状。如果药物可预防癌细胞的生长和/或杀死现存的癌细胞，其可能是细胞生长抑制性的(cytostatic)和/或细胞毒性的。对于癌症治疗而言，可例如通过评价疾病进展时间(TTP)和/或确定应答率(RR)来测量功效。
术语″癌症(cancer)″和″癌的(cancerous)″是指或描述哺乳动物中特征典型为未调节的细胞生长的生理学情况。″肿瘤″包含一种或多种癌细胞。癌症的实例包括但不限于癌瘤(carcinoma)、淋巴瘤、母细胞瘤、肉瘤以及白血球过多症或淋巴样恶性肿瘤。所述癌症的更具体的实例包括鳞状细胞癌(例如上皮鳞状细胞癌)，肺癌，包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌(″NSCLC″)、肺腺癌(adenocarcinoma of the lung)和肺鳞状细胞癌(squamouscarcinoma of the lung)，腹膜癌，肝细胞癌，胃癌(gastric or stomach cancer)，包括胃肠癌，胰腺癌，成胶质细胞瘤，子宫颈癌，卵巢癌，肝癌(liver cancer)，膀胱癌，肝细胞瘤(hepatoma)，乳癌(breast cancer)，结肠癌，直肠癌，结肠直肠癌，子宫内膜癌或子宫癌，唾液腺癌，肾癌或肾脏癌，前列腺癌，外阴癌(vulval cancer)，甲状腺癌，肝脏癌(hepaticcarcinoma)，肛门癌，阴茎癌，以及头颈癌。
″化学治疗剂″是可用于治疗癌症的化合物。化学治疗剂的实例包括Erlotinib(TARCEVAGenentech/OSI Pharm.)、硼替佐米(Bortezomib)(VELCADEMillenniumPharm.)、氟维司群(FASLODEXAstraZeneca)、Sutent(Pfizer/Sugen)、来曲唑(FEMARANovartis)、甲磺酸伊马替尼(GLEEVECNovartis)、Finasunate(Novartis)、奥沙利铂(EloxatinSanofi)、5-FU(5-氟尿嘧啶)、甲酰四氢叶酸(Leucovorin)、雷怕霉素(Sirolimus,RAPAMUNEWyeth)、拉帕替尼(Lapatinib)(TYKERBgSK572016,glaxo Smith Kline)、Lonafarnib(SCH 66336)、索拉非尼(Bayer Labs)和Gefitinib(IRESSAAstraZeneca)、AG1478；烷化剂如塞替派(thiotepa)和CYTOXAN环磷酰胺；磺酸烷基酯(alkyl sulfonate)如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡(piposulfan)；氮丙啶如benzodopa、卡波醌、meturedopa和uredopa；乙撑亚胺(ethylenimine)和甲基氨基吖啶(甲基amelamine)，包括六甲密胺、三亚胺嗪(triethylenemelamine)、三亚乙基磷酰胺(triethylenephosphoramide)、三亚乙基硫化磷酰胺(triethylenethiophosphoramide)和trimethylomelamine；番荔枝内酯(acetogenin)(尤其是布拉它辛(bullatacin)和布拉它辛酮(bullatacinone))；喜树碱(包括合成性类似物托泊替康(topotecan))；苔藓抑素(bryostatin)；callystatin；CC-1065(包括其阿多来新(adozelesin)、卡折来新(carzelesin)和比折来新(bizelesin)合成性类似物)；cryptophycins(特别是cryptophycin 1和cryptophycin 8)；多拉司他汀(dolastatin)；duocarmycin(包括合成性类似物KW-2189和CB1-TM1)；eleutherobin；pancratistatin；sarcodictyin；spongistatin；氮芥如苯丁酸氮芥、萘氮芥、氯磷酰胺(chlorophosphamide)、雌莫司汀、异环磷酰胺、双氯乙基甲胺(mechlorethamine)、盐酸氧氮芥(mechlorethamine oxide hydrochloride)、美法仑、新氮芥(novembichin)、苯芥胆甾醇(phenesterine)、泼尼莫司汀(prednimustine)、曲磷胺(trofosfamide)、尿嘧啶氮芥(uracil mustard)；硝基脲如卡莫司汀、氯脲菌素(chlorozotocin)、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫斯汀和雷莫司汀；抗生素如烯二炔(enediyne)抗生素(例如刺孢霉素(calicheamicin)尤其是刺孢霉素γ1I和刺孢霉素ωI1(Angew Chem.Intl.Ed.Engl.1994 33:183-186)；蒽环类抗生素(dynemicin)，包括dynemicin A；二膦酸盐(bisphosphonate)如氯膦酸盐(clodronate)；埃斯培拉霉素(esperamicin)；以及新抑癌蛋白生色团(neocarzinostatinchromophore)和相关色蛋白烯二炔抗生素生色团(enediyne antibiotic chromophore)、aclacinomysin、放线菌素(actinomycin)、authramycin、偶氮丝氨酸(azaserine)、博来霉素、放线菌素C(cactinomycin)、carabicin、去甲柔红霉素(carminomycin)、嗜癌素(carzinophilin)、色霉素(chromomycin)、放线菌素D(dactinomycin)、柔红霉素(daunorubicin)、地拖比星(detorubicin)、6-重氮基-5-氧代-L-正亮氨酸(6-diazo-5-氧代-L-norleucine)、ADRIAMYCIN(多柔比星)、吗啉代-多柔比星、氰基吗啉代-多柔比星、2-吡咯啉子基-多柔比星和去氧多柔比星、表柔比星(epirubicin)、依索比星、伊达比星、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素如丝裂霉素C、麦考酚酸(mycophenolic acid)、诺拉霉素(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycins)、培洛霉素(peplomycin)、泊非霉素(porfiromycin)、嘌罗霉素(puromycin)、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链黑霉素(streptonigrin)、链佐星(streptozocin)、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司(ubenimex)、净司他丁(zinostatin)、佐柔比星；抗代谢物如甲氨喋呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物如二甲叶酸、甲氨喋呤、喋罗呤(pteropterin)、三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤类似物如氟达拉滨(fludarabine)、6-巯嘌呤、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)；嘧啶类似物如安西他滨(ancitabine)、阿扎胞苷(azacitidine)、6-氮鸟苷(6-azauridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、二脱氧尿苷(dideoxyuridine)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、伊诺他滨(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)；雄激素如卡普睾酮(calusterone)、丙酸甲雄烷酮(dromostanolonepropionate)、环硫雄醇(epitiostanol)、美雄烷(mepitiostane)、睾内酯(testolactone)；抗肾上腺素(anti-adrenal)如氨鲁米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)、曲洛司坦(trilostane)；叶酸补充剂(folic acid replenisher)如亚叶酸(frolinic acid)；醋葡醛内酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamideglycoside)；氨基乙酰丙酸(aminolevulinic acid)；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶(amsacrine)；bestrabucil；比生群(bisantrene)；伊达曲杀(edatraxate)；地磷酰胺(defofamine)；秋水仙胺(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；elfornithine；依利醋铵(elliptinium acetate)；埃坡霉素(epothilone)；依托格鲁(etoglucid)；硝酸镓(gallium nitrate)；羟基脲(hydroxyurea)；香菇多糖(lentinan)；氯尼达明(lonidainine)；美登醇(maytansinoid)如美登素(maytansine)和安丝菌素(ansamitocin)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；mopidanmol；根瘤菌剂(nitraerine)；喷司他丁(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；洛索蒽醌(losoxantrone)；鬼臼酸(podophyllinicacid)；2-乙基肼；丙卡巴肼(procarbazine)；PSK多糖复合物(JHS Natural Products,Eugene,OR)；雷佐生(razoxane)；根霉素(rhizoxin)；西佐喃(sizofiran)；锗螺胺(spirogermanium)；细交链孢菌酮酸(tenuazonic acid)；三亚胺醌(triaziquone)；2,2’,2”-三氯三乙胺；单端孢菌毒素(trichothecene)(尤其是T-2毒素、verracurin A、杆孢菌素A和anguidine)；乌拉坦；长春地辛；达卡巴嗪(dacarbazine)；甘露莫司汀(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴卫矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；gacytosine；阿糖胞苷(arabinoside)(″Ara-C″)；环磷酰胺；塞替派；紫杉烷例如TAXOL(紫杉醇；Bristol-Myers Squibb Oncology,Princeton,N.J.)、ABRAXANETM(Cremophor-free)、紫杉醇的白蛋白工程化纳米微粒制剂(albumin-engineered nanoparticleformulations of paclitaxel)(American Pharmaceutical Partners,Schaumberg,Ill.)和(docetaxel,doxetaxel；Sanofi-Aventis)；chloranmbucil；GEMZAR(吉西他滨)；6-硫代鸟嘌呤；巯嘌呤；甲氨喋呤；铂类似物如顺铂和卡铂；长春碱；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌；长春新碱；NAVELBINE(长春瑞滨)；诺消灵(novantrone)；替尼泊苷(teniposide)；伊达曲杀(edatrexate)；柔红霉素；氨基喋呤；卡培他滨(XELODA)；伊班膦酸盐(ibandronate)；CPT-11；拓扑异构酶抑制剂RFS2000；二氟甲基鸟氨酸(difluoromethylornithine)(DMFO)；类视黄醇(retinoid)如视黄酸(retinoic acid)；以及上述任何物质的药用盐、酸和衍生物。
以下物质也包括在″化学治疗剂″的定义中：(i)用于调节或抑制激素对肿瘤的作用的抗激素药物，如抗雌激素药物(anti-estrogen)和选择性雌激素受体调节剂(selective estrogen receptor modulator,SERM)，包括例如他莫昔芬(包括NOLVADEX枸橼酸他莫昔芬)、雷洛昔芬、屈洛昔芬、4-羟基他莫昔芬、曲沃昔芬(trioxifene)、雷洛西芬(keoxifene)、LY117018、奥那司酮(onapristone)和FARESTON(枸橼酸托米芬(toremifine citrate))；(ii)抑制芳香酶(调节肾上腺中雌激素产生)的芳香酶抑制剂，例如4(5)-咪唑、氨鲁米特、MEGASE(醋酸甲地孕酮(megestrol acetate))、AROMASIN(依西美坦(exemestane)；Pfizer)、formestanie、法倔唑(fadrozole)、RIVISOR(伏氯唑(vorozole))、FEMARA(来曲唑；Novartis)和ARIMIDEX(阿那曲唑(anastrozole)；AstraZeneca)；(iii)抗雄激素药物(anti-androgen)，如氟他胺、尼鲁米特(nilutamide)、比卡鲁胺(bicalutamide)、醋酸亮丙瑞林(leuprolide)和戈舍瑞林(goserelin)以及曲沙他滨(troxacitabine)(1,3-二氧杂环戊烷核苷胞嘧啶类似物)；(iv)蛋白激酶抑制剂；(v)脂激酶抑制剂；(vi)反义寡核苷酸，特别是抑制异常细胞增殖中所涉及的信号转导途径中的基因表达的那些反义寡核苷酸，例如PKC-α、Ralf和H-Ras；(vii)核酶如VEGF表达抑制剂(例如ANGIOZYME)和HER2表达抑制剂；(viii)疫苗如基因治疗疫苗，例如ALLOVECTINLEUVECTIN和VAXIDPROLEUKINrIL-2；拓扑异构酶1抑制剂如LURTOTECANABARELIXrmRH；(ix)抗血管生成药物如贝伐单抗(AVASTINGenentech)；以及(x)上述任何物质的药用盐、酸和衍生物。
在本发明的一个实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z为N且Z3为CH或者C＝O；或者Z为CRg且Z3为O；Z1独立为CH或者N；Z2为(a)NRaCR1R2Y；(b)式II，
其中X为(CH2)1-3或者CH2NReCH2；或者(c)CH2CR1R2Y；Re为氢、C1-3烷基、羟基C1-3烷基、卤代C1-3烷基、C1-3酰基或者C1-3烷基磺酰基；Y为C3-6环烷基、芳基、芳基C1-3烷基或者杂芳基，其中所述杂芳基选自苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、吲哚基、N-C1-3烷基-吲哚基、嘧啶基、吡啶基、噁唑基和噻唑基；Y1为–Ar、–OAr、-S(O)0-2Ar或者–NRgAr，其中Ar为任选取代的苯基；R1和R2独立选自(a)氢，(b)C1-10烷基，(c)卤代C1-6烷基，(d)C3-7环烷基，(e)C1-10杂烷基，其任选进一步被芳基或者苄基取代，(f)(CH2)1-3OC(＝O)Rf，其中Rf为C1-6烷基、C1-6杂烷基或者C1-3烷氧基-C1-3烷基，(g)(CH2)1-3NRcRd，其中Rc和Rd独立为氢、C1-6烷基、C(＝O)Rg、S(＝O)2C1-3烷基、羟基C2-4烷基、C1-3烷氧基-C1-3烷基、C3-7环烷基-C1-3烷基、吡啶基或者嘧啶基，(h)氰基-C1-3烷基，(i)C1-3烷基磺酰基-C1-3烷基，(j)氨基甲酰基，(k)N-C1-3烷基-氨基甲酰基，(l)N,N-二C1-3烷基氨基甲酰基；(m)任选取代的杂芳基或者杂芳基-C1-3烷基，其中所述杂芳基选自吡啶基、2-氧代-1,2-二氢吡啶基、6-氧代-1,6-二氢吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡唑基、N-C1-3烷基-吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噁二唑基、吲哚基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、三唑基、N-C1-3烷基-三唑基和三嗪基，和(n)杂环基或者杂环基-C1-3烷基，所述杂环基选自吡咯烷基、N-C1-3烷基-吡咯烷基、N-C1-3酰基-吡咯烷基、氮杂环丁烷基、N-C1-3烷基-氮杂环丁烷基、吗啉基、哌啶基和N-C1-3烷基-哌啶基，且其中所述杂环任选被1-3个独立选自下述的基团取代：C1-6烷基、卤素、羟基、苯基和氧代；或者R1和R2与它们所连接的碳一起形成环状胺，其任选被1-3个C1-6烷基取代；或者R1和Ra与它们所连接的原子一起形成环状胺，其任选被1-3个独立选自下述的基团取代：C1-6烷基、卤素、羟基、苯基、苄基或者氧代；R3a和R3b独立为氢、卤素或者羟基；Ra为(a)氢或者C1-3烷基，或者(b)R1和Ra与它们所连接的原子一起形成环状胺，其任选被1-3个独立选自下述的基团取代：C1-6烷基、卤素、羟基、苯基、苄基或者氧代；Rb选自(a)氢，(b)C1-10烷基，(c)卤代C1-6烷基，(d)任选取代的芳基或者芳基-C1-6烷基，(e)任选取代的杂芳基或者杂芳基-C1-6烷基，其中所述杂芳基选自异噁唑基、吡啶基、吡啶酮基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、N-烷基-吡唑基、N-苄基吡唑基、噻唑基、N-C1-6烷基三唑基和2-氧代-四氢喹啉-6-基，(f)杂环基或者杂环基-C1-6烷基，其中所述杂环基选自四氢吡喃基、四氢呋喃基、氧杂环丁烷基、哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、N-C1-6烷基哌啶基和N-C1-6烷基-2-氧代-吡咯烷基，(g)C3-7环烷基或者C3-7环烷基-C1-6烷基，其中所述环烷基任选被羟基或者卤素取代，(h)C1-6杂烷基，(i)C1-6酰基和(j)羟基C1-6烷基；每个Rg独立为氢或者C1-3烷基；其中：每个所述芳基和每个所述杂芳基任选被1-5个独立选自下述的基团取代：C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤素、羟基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷基硫基、卤代C1-6烷基硫基、C1-6酰基氨基、氰基、硝基或者任选取代的芳基氧基；每个所述杂环基任选取代有C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-3烷基或者卤素；每个所述环烷基任选被1-4个独立选自下述的基团取代：C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、氰基或者氧代；每个所述杂烷基任选被取代苯基、苄基或者卤代C1-3烷基。
在本发明的一个实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中R1、R2、R3a、R3b、Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf、Rg、Y、Y1、Z、Z1、Z2、Z3如本申请以上所定义。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为NRaCR1R2Ar；Z3为CH2；Ar为任选取代的苯基；R1、R3a、R3b和Ra为氢；R2为氢、C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-3烷氧基-C1-6烷基、(CH2)1-3NRcRd、吡咯烷-2-基、N-C1-3烷基吡咯烷-2-基或者杂芳基；且Rb为(a)C1-10烷基，(b)卤代C1-6烷基，(c)羟基C1-6烷基，(d)C4-6环烷基，其任选被羟基取代，或者(e)杂环基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为NRaCR1R2Ar；Z3为CH2；Ar为任选取代的苯基；R1、R3a、R3b和Ra为氢；R2为吡唑基、N-C1-3烷基吡唑基、噁二唑基或者N-C1-3烷基、三唑基；且Rb为(a)C1-10烷基，(b)卤代C1-6烷基，(c)羟基C1-6烷基，(d)C4-6环烷基，其任选被羟基取代，或者(e)杂环基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为NRaCR1R2Ar；Z3为CH2；Ar为任选取代的苯基；R1、R3a、R3b和Ra为氢；R2为吡唑基、N-C1-3烷基吡唑基、噁二唑基、三唑基或者N-C1-3烷基三唑基；且Rb为四氢吡喃基、羟基C1-6烷基或者卤代C1-6烷基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为NRaCR1R2Ar；Z3为CH2；Ar为被1-3个选自下述的基团取代的苯基：卤素、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基或者卤代C1-6烷氧基；R1、R3a、R3b和Ra为氢；R2为吡唑基、N-C1-3烷基吡唑基、噁二唑基、三唑基或者N-C1-3烷基三唑基；且Rb为四氢吡喃基、羟基C1-6烷基或者卤代C1-6烷基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为NRaCR1R2Ar；Z3为CH2；Ar为任选取代的苯基；R1、R3a、R3b和Ra为氢；R2吡咯烷基或者N-C1-3烷基-吡咯烷基；Rb为(a)C1-10烷基，(b)卤代C1-6烷基，(c)羟基C1-6烷基，(d)C4-6环烷基，其任选被羟基取代，或者(e)杂环基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为NRaCR1R2Ar；Z3为CH2；Ar为任选取代的苯基；R1、R3a、R3b和Ra为氢；R2为吡咯烷基或N-C1-3烷基-吡咯烷基，所述吡咯烷基任选取代有1-3个独立选自下述的基团：C1-6烷基、卤素、羟基和氧代；且Rb为(a)C1-10烷基，(b)卤代C1-6烷基，(c)羟基C1-6烷基，(d)C4-6环烷基，其任选被羟基取代，或者(e)杂环基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为NRaCR1R2Ar；Z3为CH2；Ar为任选取代的苯基；R1、R3a、R3b和Ra为氢；R2为吡咯烷基或者N-C1-3烷基-吡咯烷基；Rb为四氢吡喃基、羟基C1-6烷基或者卤代C1-6烷基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为NRaCR1R2Ar；Z3为CH2；Ar为取代有1-3个选自下述的取代基的苯基：卤素、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基或者卤代C1-6烷氧基；R1、R3a、R3b和Ra为氢；R2为吡咯烷基或者N-C1-3烷基-吡咯烷基；Rb为四氢吡喃基、羟基C1-6烷基或者卤代C1-6烷基。
在本发明另外的实施方案提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为NRaCR1R2Ar；Z3为CH2；Ar为任选取代的杂芳基；R1、R3a、R3b和Ra为氢；R2为氢、C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-3烷氧基-C1-6烷基、(CH2)1-3NRcRd、吡咯烷-2-基、N-C1-3烷基吡咯烷-2-基或者杂芳基，其中所述杂芳基选自吡啶基、2-氧代-1,2-二氢吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡唑基、N-C1-3烷基-吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噁唑基、吲哚基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、三唑基和三嗪基；且Rb为(a)C1-10烷基，(b)卤代C1-6烷基，(c)羟基C1-6烷基，(d)C4-6环烷基，其任选被羟基取代，或者(e)杂环基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为NRaCR1R2Ar；Z3为CH2；Ar为任选取代的杂芳基，其中所述杂芳基选自吡啶基、2-氧代-1,2-二氢吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡唑基、N-C1-3烷基-吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噁二唑基、吲哚基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、三唑基和三嗪基；R1、R3a、R3b和Ra为氢；R2为氢、C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-3烷氧基-C1-6烷基、(CH2)1-3NRcRd、吡咯烷-2-基、N-C1-3烷基吡咯烷-2-基或者杂芳基；且Rb为C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基或者四氢吡喃基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为式IIY1为–Ar、–OAr、-S(O)0-2Ar或者–NRgAr，其中Ar为任选取代的苯基；Z3为CH2；R3a和R3b为氢。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为式II；X为CH2NReCH2；Re为氢或者C1-6烷基；Y1为Ar；Ar为任选取代的苯基；Z3为CH2；R3a和R3b为氢；且Rb为(a)C1-10烷基，(b)卤代C1-6烷基，(c)羟基C1-6烷基，(d)C4-6环烷基，其任选被羟基取代，或者(e)杂环基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为式II；X为CH2NReCH2；Re为氢或者C1-6烷基；Y1为Ar；Ar为任选取代的苯基；Z3为CH2；R3a和R3b为氢；且Rb为C1-10烷基、卤代C1-10烷基、羟基C1-6烷基或者四氢吡喃基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为式II；X为CH2NReCH2；Re为氢或者C1-6烷基；Y1为Ar；Ar为被1-3个选自下述的基团取代的苯基：卤素、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基或者卤代C1-6烷氧基；Z3为CH2；R3a和R3b为氢；且Rb为C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基或者四氢吡喃基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为式II；X为CH2NReCH2；Re为氢或者C1-6烷基；Y1为-OAr；Ar为任选取代的苯基；Z3为CH2；R3a和R3b为氢；且Rb为(a)C1-10烷基，(b)卤代C1-6烷基，(c)羟基C1-6烷基，(d)C4-6环烷基，其任选被羟基取代，或者(e)杂环基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为式II；X为CH2NReCH2；Re为氢或者C1-6烷基；Y1为-OAr；Ar为任选取代的苯基；Z3为CH2；R3a和R3b为氢；且Rb为C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基或者四氢吡喃基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为式II；X为CH2NReCH2；Re为氢或者C1-6烷基；Y1为-S(O)0-2Ar；Ar为任选取代的苯基；Z3为CH2；R3a和R3b为氢；且Rb为C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基或者四氢吡喃基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为式II；X为CH2NReCH2；Re为氢或者C1-6烷基；Y1为-SAr；Ar为任选取代的苯基；Z3为CH2；R3a和R3b为氢；Rb为C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基或者四氢吡喃基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为式II；X为CH2NReCH2；Re为氢或者C1-6烷基；Y1为–NRgAr；Ar为任选取代的苯基；Z3为CH2；R3a和R3b为氢；且Rb为C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基或者四氢吡喃基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为式II；X为CH2NReCH2；Re为氢或者C1-6烷基；Y1为–NRgAr；Rg为氢；Ar为任选取代的苯基；Z3为CH2；R3a和R3b为氢；且Rb为C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基或者四氢吡喃基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为式II；X为(CH2)1-34；Z3为CH2；Y1为Ar；Ar为任选取代的苯基；R3a和R3b为氢；且Rb为C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基或者四氢吡喃基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为式II；Z3为CH2；X为(CH2)3；Y1为Ar；Ar为任选取代的苯基；R3a和R3b为氢；且Rb为(a)C1-10烷基，(b)卤代C1-6烷基，(c)羟基C1-6烷基，(d)C4-6环烷基，其任选被羟基取代，或者(e)杂环基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z和Z1为N；Z2为式II；Z3为CH2；X为(CH2)3；Y1为-OAr；Ar为任选取代的苯基；R3a和R3b为氢；Rb为(a)C1-10烷基，(b)卤代C1-6烷基，(c)羟基C1-6烷基，(d)C4-6环烷基，其任选被羟基取代，或者(e)杂环基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z为N且Z1为CH。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z为N；Z1为CH；且Z2为NRaCR1R2Ar。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z为N；Z1为CH；Z2为式II；X为CH2NReCH2；且Re为氢或者C1-6烷基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z为N；Z1为CH且Z2为CH2CR1R2Y。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z为N；Z1为CH；Z2为NRaCR1R2Ar；Z3为CH2；Ar为任选取代的苯基；R1、R3a、R3b和Ra为氢；R2为氢、C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-3烷氧基-C1-6烷基、(CH2)1-3NRcRd、吡咯烷-2-基、N-C1-3烷基吡咯烷-2-基或者杂芳基，其中所述杂芳基选自吡啶基、2-氧代-1,2-二氢吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡唑基、N-C1-3烷基-吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噁二唑基、吲哚基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、三唑基和三嗪基；且Rb为(a)C1-10烷基，(b)卤代C1-6烷基，(c)羟基C1-6烷基，(d)C4-6环烷基，其任选被羟基取代，或者(e)杂环基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z为N；Z1为CH；Z2为NRaCR1R2Ar；Z3为CH2；Ar为任选取代的苯基；R1、R3a、R3b和Ra为氢；R2为氢、C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-3烷氧基-C1-6烷基、(CH2)1-3NRcRd、吡咯烷-2-基、N-C1-3烷基吡咯烷-2-基或者杂芳基，其中所述杂芳基选自吡啶基、2-氧代-1,2-二氢吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡唑基、N-C1-3烷基-吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噁二唑基、吲哚基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、三唑基和三嗪基；且Rb为C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基或者四氢吡喃基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z3为O；Z为CRg；且R3a和R3b为氢。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z3为O；Z为CRg；Z1为N；Z2为NRaCR1R2Ar；R3a、R3b和Rg为氢；R2为C1-10烷基、卤代C1-6烷基或者羟基C1-6烷基；Ar为任选取代的苯基；且Rb为(a)C1-10烷基，(b)卤代C1-6烷基，(c)羟基C1-6烷基，(d)C4-6环烷基，其任选被羟基取代，或者(e)杂环基。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中Z3为O；Z为CRg；R3a、R3b和Rg为氢；Z1为N；Z2为式II；X为CH2NReCH2；Ar为任选取代的苯基；且Rb为(a)C1-10烷基，(b)卤代C1-6烷基，(c)羟基C1-6烷基，(d)C4-6环烷基，其任选被羟基取代，或者(e)杂环基。
在另外的实施方案中，Z为N且Z3为CH。
在另外的实施方案中，Z为CH且Z3为O。
在另外的实施方案中，Z为N且Z3为C＝O。
在另外的实施方案中，Z选自CH和N。在另外的实施方案中，Z为CH。在另外的实施方案中，Z为N。
在另外的实施方案中，Z1选自CH和N。在另外的实施方案中，Z1为CH。在另外的实施方案中，Z1为N。
在另外的实施方案中，R3a和R3b独立选自氢、卤素和羟基。在另外的实施方案中，R3a和R3b为氢。在另外的实施方案中，R3a为氢且R3b为羟基。在另外的实施方案中，R3a和R3b为F。
在另外的实施方案中，Z2为NRaCR1R2Y。在某些实施方案中，Ra为氢或者甲基。在某些实施方案中，R1选自氢、C1-10烷基、C3-7环烷基、(CH2)1-3OC(＝O)Rf、(CH2)1-3NRcRd、氰基-C1-3烷基、C1-3烷基磺酰基-C1-3烷基、N-C1-3烷基-氨基甲酰基、任选取代的杂芳基或者杂芳基-C1-3烷基，其中所述杂芳基选自吡啶基、6-氧代-1,6-二氢吡啶基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基和三唑基以及任选取代的杂环基或者杂环基-C1-3烷基，其中所述杂环基选自吡咯烷基、吗啉基和哌啶基，其中所述烷基、杂环基和杂芳基任选取代有卤素、OH、乙酰基、C1-3烷基或者C1-3烷氧基，且其中所述烷氧基任选取代有C1-3烷氧基。在某些实施方案中，Rc和Rd独立选自氢、C1-6烷基、C(＝O)Re、S(＝O)2C1-3烷基、C1-3烷氧基-C1-3烷基、C3-7环烷基-C1-3烷基和嘧啶基，其中所述烷基任选取代有OH。在某些实施方案中，Re为C1-3烷基。在某些实施方案中，Re为甲基。在某些实施方案中，Rc和Rd独立选自氢、甲基、乙基、异丁基、2-羟基乙基、2-甲氧基乙基、C(＝O)CH3、S(＝O)2CH3、环丙基甲基、嘧啶-2-基和嘧啶-4-基。在某些实施方案中，Rf选自C1-6烷基和C1-3烷氧基-C1-3烷基，其中所述烷基任选取代有NH2。在某些实施方案中，Rf选自甲基、CH(NH2)CH(CH3)2和甲氧基甲基。在某些实施方案中，R1为(S)构型。某些实施方案中，R1为(R)构型。在某些实施方案中，R1选自氢、甲基、乙基、异丙基、CH2CF3、CF3、CH2OH、CH(OH)CH3、CH2CH2OH、CH2OCH3、C(CH3)2OH、CH2OCH2CH2OCH3、CH(OH)CH2CH3、CH2OCH2CH3、CH2OCH(CH3)2、CH(OH)CH2OH、CH2CH2OCH3、CH(CH3)OCH3、环丙基、环戊基、CH2OC(＝O)CH3、CH2OC(＝O)C(CH3)3、CH2OC(＝O)CH(NH2)CH(CH3)2、CH2OC(＝O)CH2OCH3、CH2CH2NH2、CH2NH2、CH2CH2NHCH3、CH2NHCH3、CH2NHCH2CH3、CH2NHCH2CH(CH3)2、CH2NHCH2CH2OH、CH2NHCH2CH2OCH3、CH2NHC(＝O)CH3、CH2NHS(＝O)2CH3、CH2NHCH2(环丙基)、CH2NH(嘧啶-4-基)、CH2CH2NHC(＝O)CH3、CH2CH2CN、CH2CN、CH2CH2SO2CH3、C(＝O)NHCH3、6-氧代-1,6-二氢吡啶-2-基、6-甲氧基吡啶-2-基、2H-吡唑-3-基、2-甲基-2H-吡唑-3-基、1-甲基-1H-吡唑-4-基、1-甲基-1H-吡唑-3-基、1H-吡唑-4-基、苯并噁唑-2-基、苯并噻唑-2-基、噁唑-4-基、噁唑-5-基、2-甲基噁唑-5-基、异噁唑-5-基、噁二唑-2-基、[1,3,4]噁二唑-2-基、5-甲基-[1,3,4]噁二唑-2-基、3-甲基-[1,3,4]噁二唑-5-基、(4H-[1,2,4]三唑-3-基)甲基、吡咯烷-2-基、吡咯烷-1-基甲基、1-甲基吡咯烷-2-基、5,5-二甲基吡咯烷-2-基、1-乙酰基-吡咯烷-2-基、吡咯烷-2-基甲基、吗啉-2-基、哌啶-2-基、哌啶-2-基甲基和哌啶-4-基。在某些实施方案中，R2为氢或者C1-10烷基。在某些实施方案中，R2为(S)构型。在某些实施方案中，R2为(R)构型。在某些实施方案中，R2为氢或者甲基。在某些实施方案中，R1和R2与它们所连接的碳一起形成环状胺，其任选被1-3个C1-6烷基取代。在某些实施方案中，R1和R2与它们所连接的碳一起形成环状胺，其任选被1-3个C1-6烷基取代，其中所述环状胺选自哌啶基和吡咯烷基。在某些实施方案中，R1和R2与它们所连接的碳一起形成环状胺，其任选被1-3个C1-6烷基取代，其中所述环状胺选自哌啶-4-基、吡咯烷-3-基和1-甲基哌啶-4-基。在某些实施方案中，R1和Ra与它们所连接的碳一起形成环状胺，其中所述环状胺选自吡咯烷基、氮杂环丁烷基、吗啉基、哌啶基和哌嗪基。
在某些实施方案中，Y为芳基或者杂芳基，其任选取代有C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷基硫基、卤代C1-6烷基硫基、C1-6酰基氨基和氰基，其中所述杂芳基选自苯并噻唑基、苯并咪唑基、吲哚基、嘧啶基、吡啶基、噁唑基和噻唑基。在某些实施方案中，Y为芳基或者杂芳基，其任选取代有卤素、甲基、CF3、OCH3、OCF3、OCHF2、OCH3CF3、SCH3、SCF3、NHC(＝O)CH3、C(CH3)2CN或者CN，其中所述杂芳基选自苯并噻唑基、苯并咪唑基、吲哚基、嘧啶基、吡啶基、噁唑基和噻唑基。在某些实施方案中，Y为芳基，其任选取代有F、Cl、甲基、CF3、OCH3、OCF3、OCHF2、SCH3、SCF3、NHC(＝O)CH3、C(CH3)2CN或者CN。在某些实施方案中，Y为杂芳基，其任选取代有甲基、F、Cl、OCH3或者CF3，其中所述杂芳基选自苯并噻唑基、苯并咪唑基、吲哚基、嘧啶基、吡啶基、噁唑基和噻唑基。在某些实施方案中，Y选自苯基、3-氯-4-氟苯基、3,4-二氯苯基、4-氯-3-氟苯基、4-氯苯基、3-氯苯基、4-三氟甲基苯基、4-氟苯基、3-氟-4-三氟甲基苯基、3,4-二氟苯基、2-氟-3-三氟甲基苯基、3,4,5-三氟苯基、3-氯-5-氟苯基、4-氯-3-三氟甲氧基苯基、2,4-二氯苯基、4-氯-3-三氟甲基苯基、4-三氟甲基苯基、4-氯-2-氟苯基、2,3-二氯苯基、3-氯-4-三氟甲氧基苯基、4-氯-2,5-二氟苯基、3-氯-4-三氟甲基苯基、2-氯-4-三氟甲基苯基、4-氯-3-甲基苯基、4-三氟甲基硫基苯基、3-氯-4-甲氧基苯基、3-氯-4-甲基苯基、4-二氟甲氧基苯基、3-乙酰基氨基苯基、4-氰基苯基、4-甲基硫基苯基、3-氟-4-甲氧基苯基、4-甲基-3-三氟甲基苯基、4-(氰基-二甲基-甲基)苯基、4-氯-3-甲氧基苯基、3-氟-4-三氟甲氧基苯基、2-氟-4-三氟甲基苯基、4-氰基-3-氟苯基、4-氟-3-甲氧基苯基、3-氰基-4-氟苯基、3-氰基苯基、2,5-二氟苯基、2,2,2-三氟乙氧基苯基、3-氯-4-氰基苯基、4-氰基-3-三氟甲基苯基、3,4-二氰基苯基、4-氰基-3-甲基苯基、1H-吲哚-6-基、1H-吲哚-2-基、1H-吲哚-5-基、1H-吲哚-7-基、1-甲基-1H-吲哚-6-基、5-氟-1H-吲哚-2-基、1H-苯并咪唑-2-基、1-苯并噻唑-2-基、2-三氟甲基嘧啶-5-基、5-氯嘧啶-2-基、嘧啶-5-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、吡啶-4-基、6-甲氧基吡啶-3-基、5-氟吡啶-3-基、6-三氟甲基吡啶-3-基、6-甲氧基吡啶-2-基、6-甲基吡啶-3-基、噁唑-5-基和噻唑-2-基。在某些实施方案中，Y选自苯基、3-氯-4-氟苯基、3,4-二氯苯基、4-氯-3-氟苯基、4-氯苯基、3-氯苯基、4-三氟甲基苯基、4-氟苯基、3-氟-4-三氟甲基苯基、3,4-二氟苯基、2-氟-3-三氟甲基苯基、3,4,5-三氟苯基、3-氯-5-氟苯基、4-氯-3-三氟甲氧基苯基、2,4-二氯苯基、4-氯-3-三氟甲基苯基、4-三氟甲基苯基、4-氯-2-氟苯基、2,3-二氯苯基、3-氯-4-三氟甲氧基苯基、4-氯-2,5-二氟苯基、3-氯-4-三氟甲基苯基、2-氯-4-三氟甲基苯基、4-氯-3-甲基苯基、4-三氟甲基硫基苯基、3-氯-4-甲氧基苯基、3-氯-4-甲基苯基、4-二氟甲氧基苯基、3-乙酰基氨基苯基、4-氰基苯基、4-甲基硫基苯基、3-氟-4-甲氧基苯基、4-甲基-3-三氟甲基苯基、4-(氰基-二甲基-甲基)苯基、4-氯-3-甲氧基苯基、3-氟-4-三氟甲氧基苯基、2-氟-4-三氟甲基苯基、4-氰基-3-氟苯基、4-氟-3-甲氧基苯基、3-氰基-4-氟苯基、3-氰基苯基、2,5-二氟苯基、2,2,2-三氟乙氧基苯基、3-氯-4-氰基苯基、4-氰基-3-三氟甲基苯基、3,4-二氰基苯基和4-氰基-3-甲基苯基。在某些实施方案中，Y选自1H-吲哚-6-基、1H-吲哚-2-基、1H-吲哚-5-基、1H-吲哚-7-基、1-甲基-1H-吲哚-6-基、5-氟-1H-吲哚-2-基、1H-苯并咪唑-2-基、1-苯并噻唑-2-基、2-三氟甲基嘧啶-5-基、5-氯嘧啶-2-基、嘧啶-5-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、吡啶-4-基、6-甲氧基吡啶-3-基、5-氟吡啶-3-基、6-三氟甲基吡啶-3-基、6-甲氧基吡啶-2-基、6-甲基吡啶-3-基、噁唑-5-基和噻唑-2-基。
在另外的实施方案中，Z2为式(II)，其中X为(CH2)1-3或者CH2NReCH2。在某些实施方案中，X为CH2。在某些实施方案中，X为CH2NReCH2。在某些实施方案中，Re选自氢、C1-3烷基、羟基C1-3烷基和卤代C1-3烷基。在某些实施方案中，Re选自氢、甲基、乙基、2-羟基乙基、2,2,2-三氟乙基和2,2-二氟乙基。在某些实施方案中，Y1选自苯基、4-三氟甲基苯基、4-氯苯基、3,4-二氯苯基、3,4-二氟苯基、3-氟-4-三氟甲基苯基、3-氟苯基、4-氯-3-氟苯基和4-二氟甲氧基苯基。在某些实施方案中，Y1为(S)构型。在某些实施方案中，Y1为(R)构型。在另外的实施方案中，Z2为式(IIa)。在另外的实施方案中，Z2为式(IIb)。
在另外的实施方案中，Z2为CH2CR1R2Y。在某些实施方案中，R1选自氢、C1-10烷基和(CH2)1-3NRcRd。在某些实施方案中，Rc和Rd为氢。在某些实施方案中，R1选自氢、甲基、丙基和CH2NH2。在某些实施方案中，R2为氢。在某些实施方案中，Y选自3,4-二氯苯基、2,4-二氯苯基、4-氟苯基、3-氟苯基、4-氯-2-氟苯基、3,4-二氟苯基、4-氯苯基、4-氯-3-氟苯基、3-氯-4-氟苯基、4-三氟甲基苯基和3-氟-4-三氟甲基苯基。
在另外的实施方案中，Z3选自CH和O。在另外的实施方案中，Z3为CH。在另外的实施方案中，Z3为O。
在另外的实施方案中，Rb选自氢、C1-10烷基、任选取代的芳基或者芳基-C1-6烷基、任选取代的杂芳基或者杂芳基-C1-6烷基，其中所述杂芳基选自异噁唑基、吡啶基、吡啶酮基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、噻唑基、三唑基、N-C1-6烷基-吡唑基、N-苄基吡唑基、N-C1-6烷基三唑基和2-氧代-四氢喹啉-6-基；杂环基或者杂环基-C1-6烷基，其中所述杂环基选自四氢吡喃基、四氢呋喃基、哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、-C1-6烷基-哌啶基和N-C1-6烷基-2-氧代-吡咯烷基；和C3-7环烷基或者C3-7环烷基-C1-6烷基；其中所述烷基、芳基、杂芳基、杂环基和环烷基任选取代有OH、氧代(除了不在芳族环上)、卤素、CN、C1-4烷基、C1-4羟基烷基、C1-6烷氧基、苄基、苯基、C3-7环烷基、3-6元杂环基或者5-6元杂芳基，其中所述苯基、环烷基、杂环基和杂芳基任选取代有卤素或者C1-4烷基。在另外的实施方案中，Rb为(S)构型。在另外的实施方案中，Rb为(R)构型。在另外的实施方案中，Rb选自氢、甲基、乙基、异丙基、叔丁基、异丁基、2-羟基乙基、1-羟基甲基丙基、2-羟基-1-甲基-乙基、2-甲氧基-1-甲基-乙基、2-羟基丙基、2-羟基-1-羟基甲基-乙基、乙酰基、2,2,2-三氟-1-甲基-乙基、2,2,2-三氟-1-羟基甲基-乙基、2-氟-1-甲基-乙基、2-氟-1-氟甲基-乙基、2,2,2-三氟乙基、3,3,3-三氟丙基、环丙基甲基、2-吗啉-4-基-乙基、2,2-二氟-1-甲基-乙基、4-氟苯基、3-氯-4-氟苯基、4-氯-3-氟苯基、2-邻甲苯基、4-氟-2-甲基苯基、2-氯苯基、2-氯-4-氟苯基、4-氟-2-三氟甲基苯基、4-氰基-2-氟苯基、嘧啶-5-基、4-甲基嘧啶-5-基、2-甲基嘧啶-4-基、6-甲基嘧啶-4-基、2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基、3,5-二甲基异噁唑-4-基、2-甲基吡啶-4-基、4-氯吡啶-2-基、2-甲基吡啶-3-基、2-甲基吡啶-4-基、2-乙氧基吡啶-4-基、2-环丙基吡啶-4-基、1-甲基-1H-吡唑-4-基、1-乙基-1H-吡唑-4-基、1-甲基-1H-吡唑-3-基、2-乙基-2H-吡唑-3-基、1-苄基-1H-吡唑-4-基、2-甲基-2H-吡唑-3-基、2-异丙基-2H-吡唑-3-基、1-甲基-1H-吡唑-5-基、1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基、4-甲基噻唑-2-基、1-甲基-1H-[1,2,4]三唑-3-基、5-氯吡嗪-2-基、四氢吡喃-4-基、四氢吡喃-3-基、2-甲基-四氢吡喃-4-基、2,2-二甲基-四氢吡喃-4-基、2-羟基甲基四氢吡喃-4-基、3-氟四氢吡喃-4-基、1-甲基哌啶-4-基、1-甲基-5-氧代-吡咯烷-3-基、四氢呋喃-3-基、环戊基、3-羟基环戊基、3,3-二氟环戊基、4-羟基环己基、3,3-二氟环丁基、3-羟基环丁基和4,4-二氟环己基。在另外的实施方案中，Rb为(S)-2-羟基-1-甲基-乙基。在另外的实施方案中，Rb为(S)-1-羟基甲基-丙基。在另外的实施方案中，Rb为(1S,3S)-3-羟基环戊基。在另外的实施方案中，Rb为四氢吡喃-4-基。在另外的实施方案中，Rb选自(S)-2-羟基-1-甲基-乙基、(S)-1-羟基甲基-丙基、(1S,3S)-3-羟基环戊基和四氢吡喃-4-基。
在本发明另外的实施方案中提供了选自表I或者II的化合物或者表I或者II的化合物的药用盐。
在本发明另外的实施方案中提供了选自表I的化合物或其药用盐。
在本发明另外的实施方案中提供了选自表II的化合物或其药用盐。
在本发明另外的实施方案中提供了式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其选自下述化合物：
2-(2-氟-1-甲基-乙基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[1-(3,4-二氯-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺,
2-(3,3,3-三氟-丙基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸4-氰基-3-氟-苄基酰胺,
2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(1S,2R)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-丙基]-酰胺,
2-(3-羟基-环丁基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-酰胺,
2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[4-(3,4-二氟-苯基)-1-甲基-吡咯烷-3-基]-酰胺,
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺,
(R)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢-喹唑啉-7-羧酸[(R)-1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-酰胺;
(S)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢-喹唑啉-7-羧酸[(R)-1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢-喹唑啉-7-羧酸[1-(4-氯-3-氟-苯基)-乙基]-酰胺;
7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-3,4-二氢-1H-[2,6]二氮杂萘-2-羧酸[(S)-1-(3,4-二氯-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-3,4-二氢-1H-[2,6]二氮杂萘-2-羧酸[(S)-1-(4-氯-3-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-3,4-二氢-1H-[2,6]二氮杂萘-2-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
(R)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢-喹唑啉-7-羧酸[(S)-1-(4-氯-3-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
(S)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢-喹唑啉-7-羧酸[(S)-1-(4-氯-3-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
(R)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-6,7-二氢-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(4-氯-3-氟-苯基)-丙基]-酰胺;
(R)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-6,7-二氢-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(4-二氟甲氧基-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(4,4-二氟-环己基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸甲基-(1-苯基-乙基)-酰胺;
2-(2-甲基-四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(4-氟-苯基)-丙基]-酰胺;
2-(4,4-二氟-环己基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(4-氯-3-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(4,4-二氟-环己基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(2-甲基-四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[1-(4-氯-3-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(2-甲基-四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(4-二氟甲氧基-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸(4-苯基-哌啶-4-基)-酰胺;
2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[4-(4-氯-3-氟-苯基)-哌啶-4-基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(3-氯-4-氰基-苯基)-乙基]-酰胺;
2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-吡啶-3-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(4-氰基-3-氟-苯基)-乙基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸3,4-二氰基-苄基酰胺;
7-甲基-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢-喹唑啉-7-羧酸[1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-酰胺;
7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-3,4-二氢-1H-[2,6]二氮杂萘-2-羧酸[(R)-1-(3,4-二氯-苯基)-3-羟基-丙基]-酰胺;
7-甲基-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢-喹唑啉-7-羧酸[1-(4-氯-3-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
(R)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-6,7-二氢-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-丙基]-酰胺;
(R)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-6,7-二氢-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(3-氟-4-三氟甲氧基-苯基)-丙基]-酰胺;
2-(2,2-二甲基-四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[1-(4-氯-3-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(2,2-二甲基-四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(4-二氟甲氧基-苯基)-丙基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(3-氟-4-三氟甲氧基-苯基)-丙基]-酰胺;
2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[4-(3,4-二氯-苯基)-1-甲基-哌啶-4-基]-酰胺;
2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-(4-氯-3-氟-苯基)-(R)-哌啶-2-基-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(4-氰基-3-甲基-苯基)-乙基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(3-氯-4-氰基-苯基)-丙基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(4-氰基-3-氟-苯基)-丙基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(4-氰基-2-氟-苯基)-丙基]-酰胺;
2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-吡啶-3-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙基]-酰胺;
(R)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢-喹唑啉-7-羧酸[(R)-1-(4-二氟甲氧基-苯基)-丙基]-酰胺;
(S)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢-喹唑啉-7-羧酸[(R)-1-(4-二氟甲氧基-苯基)-丙基]-酰胺;
(R)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢-喹唑啉-7-羧酸[(R)-1-(3-氟-4-三氟甲氧基-苯基)-丙基]-酰胺;
(S)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢-喹唑啉-7-羧酸[(R)-1-(3-氟-4-三氟甲氧基-苯基)-丙基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸{(R)-1-[4-(2,2,2-三氟-乙氧基)-苯基]-丙基}-酰胺;
2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(4-氯-3-氟-苯基)-2-(R)-哌啶-2-基-乙基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(4-氰基-3-甲基-苯基)-丙基]-酰胺;
2-((S)-2-羟基-1-甲基-乙基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(4-氯-3-氟-苯基)-2-(R)-哌啶-2-基-乙基]-酰胺;
2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-(6-氧代-1,6-二氢-吡啶-2-基)-甲基]-酰胺;
2-((1S,3S)-3-羟基-环戊基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-(3-氯-4-氟-苯基)-环丙基-甲基]-酰胺;
2-(四氢-呋喃-3-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[4-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-1-甲基-吡咯烷-3-基]-酰胺;
2-((1S,3S)-3-羟基-环戊基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-(3-氯-4-氟-苯基)-环戊基-甲基]-酰胺;
(2-吡啶-2-基-吡咯烷-1-基)-[2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-甲酮;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(3S,4R)-4-(4-氯-3-氟-苯基)-吡咯烷-3-基]-酰胺;
7-(四氢-吡喃-4-基氨基)-3,4-二氢-1H-[2,6]二氮杂萘-2-羧酸[(3S,4R)-4-(4-氯-3-氟-苯基)-吡咯烷-3-基]-酰胺;
(R)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-6,7-二氢-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-(4-氯-3-氟-苯基)-(R)-吡咯烷-2-基-甲基]-酰胺;
3-{1-[2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羰基]-吡咯烷-2-基}-苄腈;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-(3,4-二氯-苯基)-(S)-吡咯烷-2-基-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-(4-氯-3-氟-苯基)-(S)-吗啉-2-基-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-(4-氯-3-氟-苯基)-(R)-吗啉-2-基-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-(4-氯-3-氟-苯基)-(R)-吗啉-2-基-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-(4-氯-3-氟-苯基)-(R)-吗啉-2-基-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-(4-氯-3-氟-苯基)-(R)-哌啶-2-基-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(3-氯-4-氟-苯基)-哌啶-4-基-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(4-氯-3-氟-苯基)-2-(R)-哌啶-2-基-乙基]-酰胺;
2-(1-甲基-1H-[1,2,4]三唑-3-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-酰胺;
2-(4-甲基-噻唑-2-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-酰胺;
2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-酰胺;
2-(2-甲基-2H-吡唑-3-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-酰胺;
2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-3,4-二氢-1H-[2,6]二氮杂萘-2-羧酸[(R)-1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-酰胺;
2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-(4-氯-3-氟-苯基)-噁唑-4-基-甲基]-酰胺;
2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-(4-氯-3-氟-苯基)-噁唑-4-基-甲基]-酰胺;
2-(3,5-二甲基-异噁唑-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(3,4-二氯-苯基)-(2H-吡唑-3-基)-甲基]-酰胺;
2-(2-乙基-2H-吡唑-3-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-酰胺;
2-(2-羟基-1-甲基-乙基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(3,4-二氯-苯基)-(2H-吡唑-3-基)-甲基]-酰胺;
2-(3,5-二甲基-异噁唑-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[3-氨基-1-(3,4-二氯-苯基)-丙基]-酰胺;
2-(2-羟基-1-甲基-乙基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(4-氯-3-氟-苯基)-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-甲基]-酰胺;
2-(2-异丙基-2H-吡唑-3-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(4-氯-3-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(2-异丙基-2H-吡唑-3-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(3,5-二甲基-异噁唑-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-甲基氨基-乙基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-(4-氯-3-氟-苯基)-[1,3,4]噁二唑-2-基-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-(4-氯-3-氟-苯基)-[1,3,4]噁二唑-2-基-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(3,4-二氯-苯基)-噁唑-5-基-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(4-氯-3-氟-苯基)-噁唑-5-基-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-(4-氯-3-氟-苯基)-噁唑-5-基-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-(4-氯-3-氟-苯基)-异噁唑-5-基-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(3,4-二氯-苯基)-(2H-吡唑-3-基)-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(4-氯-3-氟-苯基)-(5-甲基-[1,3,4]噁二唑-2-基)-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(4-氯-3-氟-苯基)-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(3,4-二氯-苯基)-2-(4H-[1,2,4]三唑-3-基)-乙基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(4-氯-3-氟-苯基)-(2-甲基-噁唑-5-基)-甲基]-酰胺;
(R)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-6,7-二氢-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-(4-氯-3-氟-苯基)-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(3-氟-4-三氟甲氧基-苯基)-噁唑-5-基-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-(3-氟-4-三氟甲氧基-苯基)-噁唑-5-基-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-(4-氯-3-氟-苯基)-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(4-氯-3-氟-苯基)-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-甲基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-(4-氯-3-氟-苯基)-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-甲基]-酰胺;
2-(5-氯-吡嗪-2-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-酰胺;
2-(嘧啶-5-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(5-氯-吡嗪-2-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(4-氯-吡啶-2-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(2-甲基-嘧啶-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-酰胺;
2-(6-甲基-嘧啶-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(4-氯-3-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(6-甲基-嘧啶-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(2-甲基-嘧啶-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(4-氯-3-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(2-甲基-嘧啶-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(4-甲基-嘧啶-5-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(2-氯-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(4-氯-3-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(4-氟-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(4-氯-3-氟-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(2-氯-4-氟-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(4-氯-3-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(2-甲基-吡啶-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(2-甲基-吡啶-3-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
7-(4-氟-苯基氨基)-3,4-二氢-1H-[2,6]二氮杂萘-2-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
7-(2-甲基-吡啶-4-基氨基)-3,4-二氢-1H-[2,6]二氮杂萘-2-羧酸[(R)-1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-酰胺;
2-邻甲苯基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(4-氯-3-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(4-氟-2-甲基-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(4-氯-3-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(4-氟-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(1S,2S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-丙基]-酰胺;
2-(4-氟-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[3-氨基-1-(3,4-二氯-苯基)-丙基]-酰胺;
2-(4-氟-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-甲基氨基-乙基]-酰胺;
2-(4-氰基-2-氟-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(4-氯-3-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-(嘧啶-4-基氨基)-乙基]-酰胺;
2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-(6-甲氧基-吡啶-2-基)-甲基]-酰胺;
7-(2-环丙基-吡啶-4-基氨基)-3,4-二氢-1H-[2,6]二氮杂萘-2-羧酸[(R)-1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-酰胺;
2-(4-氟-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[3-(4-氯-苯基)-吡咯烷-3-基]-酰胺;
2-(2-氯-4-氟-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(3S,4R)-4-(4-氯-3-氟-苯基)-吡咯烷-3-基]-酰胺;
2-(4-氟-2-甲基-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(3S,4R)-4-(3-氟-苯基)-吡咯烷-3-基]-酰胺;
2-邻甲苯基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(3S,4R)-4-(3,4-二氟-苯基)-吡咯烷-3-基]-酰胺;
2-(4-氟-2-甲基-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(3S,4R)-4-(4-氯-3-氟-苯基)-吡咯烷-3-基]-酰胺;
2-(2-氯-4-氟-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-(4-氯-3-氟-苯基)-(S)-吡咯烷-2-基-甲基]-酰胺;
2-(2-氯-4-氟-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(3S,4R)-4-(4-氯-3-氟-苯基)-1-甲基-吡咯烷-3-基]-酰胺;
2-(4-氟-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(3S,4R)-4-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-吡咯烷-3-基]-酰胺;
2-(4-氟-2-三氟甲基-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(3S,4R)-4-(4-氯-3-氟-苯基)-吡咯烷-3-基]-酰胺;
2-(2-氧代-1,2,3,4-四氢-喹啉-6-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基]-酰胺;
2-(1-苄基-1H-吡唑-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-酰胺;
2-((S)-2-羟基-1-甲基-乙基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸(苯并噻唑-2-基甲基)-酰胺;
2-((S)-2-羟基-1-甲基-乙基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸(苯并噁唑-2-基甲基)-酰胺;
2-((S)-2-羟基-1-甲基-乙基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸(1H-苯并咪唑-2-基甲基)-酰胺;
2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸(1H-吲哚-2-基甲基)-酰胺;
2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸(1H-吲哚-6-基甲基)-酰胺;
2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸(5-氟-1H-吲哚-2-基甲基)-酰胺;
2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸(1-苯并噻唑-2-基-乙基)-酰胺;
2-((S)-2-羟基-1-甲基-乙基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸(1H-吲哚-6-基甲基)-酰胺;
2-((S)-2-羟基-1-甲基-乙基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸(1H-吲哚-5-基甲基)-酰胺;
2-((S)-2-羟基-1-甲基-乙基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸(1H-吲哚-7-基甲基)-酰胺;
2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[1-(1H-苯并咪唑-2-基)-乙基]-酰胺;
2-((S)-2-羟基-1-甲基-乙基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸(1-甲基-1H-吲哚-6-基甲基)-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸(1H-吲哚-6-基甲基)-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸(5-氟-1H-吲哚-2-基甲基)-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(1H-吲哚-6-基)-乙基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-1-(1H-吲哚-6-基)-乙基]-酰胺;
2-(4-氟-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸(1-苯并噻唑-2-基-乙基)-酰胺;
2-(4-氟-苯基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[1-(1H-苯并咪唑-2-基)-乙基]-酰胺；
(R)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-6,7-二氢-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶-7-羧酸[(S)-(4-氯-3-氟-苯基)-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-甲基]-酰胺；
(R)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-6,7-二氢-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶-7-羧酸[(R)-1-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-丙基]-酰胺;
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(3R,4R)-4-(4-氯-3-氟-苯氧基)-1-甲基-吡咯烷-3-基]-酰胺；
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[(3S,4S)-4-(4-氯-3-氟-苯氧基)-1-甲基-吡咯烷-3-基]-酰胺。
在本发明另外的实施方案中提供了抑制细胞内ERK蛋白激酶活性的方法，包括用式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐处理所述细胞，其中R1、R2、R3a、R3b、Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf、Rg、Y、Y1、Z、Z1、Z2、Z3如上在本申请中定义。
在本发明另外的实施方案中提供了有此需要的患者中抑制ERK蛋白激酶活性的方法，包括向所述患者给予式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐的步骤，其中R1、R2、R3a、R3b、Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf、Rg、Y、Y1、Z、Z1、Z2、Z3如上在本申请中定义。
在本发明另外的实施方案中提供了有此需要的患者中治疗或者减缓过度增殖性疾病的严重度的方法，包括向所述患者给予式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐，其中R1、R2、R3a、R3b、Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf、Rg、Y、Y1、Z、Z1、Z2、Z3如上在本申请中定义。
在本发明另外的实施方案中提供了治疗或者减缓过度增殖性疾病的严重度的方法，包括给予式I化合物或其药用盐，其中所述过度增殖性疾病选自腺瘤、膀胱癌、脑癌、乳腺癌、结肠癌、表皮癌、滤泡性癌、生殖泌尿道癌、成胶质细胞瘤、霍奇金病、头颈癌、肝癌、角化棘皮瘤、肾癌、大细胞癌、白血球过多症、肺腺癌、肺癌、淋巴疾病、黑素瘤和非黑素瘤皮肤癌、骨髓增生异常综合征、成神经细胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、卵巢癌、乳头状癌、胰腺癌、前列腺癌、直肠癌、肉瘤、小细胞癌、睾丸癌、畸胎癌、甲状腺癌和未分化癌。
在另外的实施方案中，所述过度增殖性疾病为黑素瘤。
在另外的实施方案中，所述过度增殖性疾病为胰腺癌。
在另外的实施方案中，所述过度增殖性疾病为甲状腺癌。
在另外的实施方案中，所述过度增殖性疾病为结肠直肠癌。
在另外的实施方案中，所述过度增殖性疾病为肺癌。
在另外的实施方案中，所述过度增殖性疾病为乳腺癌。
在另外的实施方案中，所述过度增殖性疾病为卵巢癌。
在另外的实施方案中，所述过度增殖性疾病为急性骨髓性白血病。
在另外的实施方案中，所述过度增殖性疾病为慢性骨髓单核细胞性白血病。
在另外的实施方案中，所述过度增殖性疾病为慢性髓细胞性白血病。
在另外的实施方案中，所述过度增殖性疾病为多发性骨髓瘤。
在另外的实施方案中，所述过度增殖性疾病为髓细胞性白血病。
在本发明另外的实施方案中提供了治疗或者减缓过度增殖性疾病的严重度的方法，包括共同给予式I化合物或其药用盐与至少一种用于治疗或者改善过度增殖性疾病的其它化学治疗剂。
在本发明另外的实施方案中提供了治疗或者减缓炎性疾病的严重度的方法，包括给予式I化合物或其药用盐。
在本发明另外的实施方案中提供了治疗或者减缓疼痛的严重度的方法，包括给予式I化合物或其药用盐。
在某些实施方案中，所述炎性疾病可选自关节炎、腰背痛、炎性肠病和风湿病。
在本发明另外的实施方案中提供了组合物，包含式I化合物或其药用盐以及至少一种药用载体、赋形剂或者稀释剂。
通常使用的缩写包括：乙酰基(Ac)、含水(aq.)、气氛(Atm)、2,2′-二(二苯基膦基)-1,1′-联萘(BINAP)、叔丁氧基羰基(Boc)、二-叔丁基焦碳酸酯或者Boc酐(BOC2O)、苄基(Bn)、丁基(Bu)、化学文摘社登记号码(CASRN)、苄基氧基羰基(CBZ或者Z)、羰基二咪唑(CDI)、1,5-二氮杂二环[4.3.0]壬-5-烯(DBN)、1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)、N,N′-二环己基碳二亚胺(DCC)、1,2-二氯乙烷(DCE)、二氯甲烷(DCM)、偶氮二羧酸二乙酯(DEAD)、偶氮二羧酸二异-丙酯(DIAD)、二异-丁基氢氧化铝(DIBAL或者DIBAL-H)、二异-丙基乙基胺(DIPEA)、二苯基磷酰基叠氮化物(DPPA)、N,N-二甲基乙酰胺(DMA)、4-N,N-二甲基氨基吡啶(DMAP)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)、乙基(Et)、乙酸乙酯(EtOAc)、乙醇(EtOH)、2-乙氧基-2H-喹啉-1-羧酸乙酯(EEDQ)、乙醚(Et2O)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU)、乙酸(HOAc)、1-羟基-7-氮杂-苯并三唑(HOAt)、1-N-羟基苯并三唑(HOBt)、高效液相色谱(HPLC)、异丙醇(IPA)、二异丙基氨基锂(LDA)、甲醇(MeOH)、熔点(mp)、MeSO2-(甲磺酰基或者Ms)、甲基(Me)、乙腈(MeCN)、间氯过氧苯甲酸(MCPBA)、质谱(ms)、甲基叔丁基醚(MTBE)、N-甲基吗啉(NMM)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、苯基(Ph)、丙基(Pr)、异丙基(i-Pr)、磅/平方英寸(psi)、吡啶(pyr)、室温(rt或者RT)、饱和的(satd.)、叔丁基二甲基甲硅烷基或者t-BuMe2Si(TBDMS)、四丁基氟化铵(TBAF)、三乙胺(TEA或者Et3N)、三氟甲磺酸酯或者CF3SO2-(Tf)、三氟乙酸(TFA)、O-苯并三唑-1-基-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(TBTU)、薄层色谱法(TLC)、四氢呋喃(THF)、四甲基乙二胺(TMEDA)、三甲基甲硅烷基或者Me3Si(TMS)、对甲苯磺酸一水合物(TsOH或者pTsOH)、4-Me-C6H4SO2-或者甲苯磺酰基(Ts),N-乌拉坦-N-羧酸酐(UNCA)。常规命名法包括词头正(n-)、异(i-)、仲(sec-)、叔(tert-)和新-，当与烷基部分一起使用时具有它们的常规含义(J.Rigaudy andD.P.Klesney,Nomenclature in Organic Chemistry,IUPAC 1979 Pergamon Press,Oxford.)。
化合物和制备
本发明范围内的代表性化合物的实例提供于下表中。提供如下实施例和制备以使得本领域技术人员能够更清楚地理解且实施本发明。它们不应被认为是限制本发明的范围，而应仅仅作为其示例说明和代表。
如果在描绘的结构与由该结构给出的命名之间存在偏差，则以描绘的结构为准。此外，如果结构或者结构的部分的立体化学并未用例如粗体或者虚线标明，则所述结构或者结构的部分应该理解为涵盖其所有的立体异构体。本申请使用如下编号系统。
本发明范围内的其它代表性化合物汇集于表II中。使用如下实施例中大量描述的方法来制备表II中的化合物。
本发明的化合物可通过如下所述的示例性合成反应方案和实施例中所述的各种方法来制备。在制备这些化合物中使用的起始物质和试剂通常可由商业供应商获得，诸如Aldrich Chemical Co.，或者通过本领域技术人员已知的方法按照在参考文献中阐述的操作来制备，所述参考文献诸如Fieser and Fieser’s Reagents for Organic Synthesis；Wiley&Sons:New York,Volumes1-21；R.C.LaRock,Comprehensive OrganicTransformations,2nd edition Wiley-VCH,New York 1999；Comprehensive OrganicSynthesis,B.Trost and I.Fleming(Eds.)vol.1-9 Pergamon,Oxford,1991；Comprehensive Heterocyclic Chemistry,A.R.Katritzky and C.W.Rees(Eds)Pergamon,Oxford 1984,vol.1-9；Comprehensive Heterocyclic Chemistry II,A.R.Katritzky andC.W.Rees(Eds)Pergamon,Oxford 1996,vol.1-11；and Organic Reactions,Wiley&Sons:New York,1991,Volumes 1-40。下述合成反应方案仅仅作为某些方法的示例说明，可通过该方法合成本发明的化合物，并且可进行对于这些合成反应方案的各种改变且将其向已经参考本申请所含内容的本领域技术人员提议。
如果期望，可使用常规技术分离和纯化合成反应方案的起始物质和中间体。典型地，所述分离涉及多相萃取、由溶剂或者溶剂混合物结晶、蒸馏、升华或者色谱分离。色谱可涉及任何数目的方法，包括，例如：反相和正相；尺寸排阻(size exclusion)；离子交换；高压、中压和低压液相色谱法和装置；小规模分析；模拟移动床(SMB)色谱和制备性薄层色谱法或者厚层色谱法，以及小规模薄层色谱法和快速色谱法的技术。所述物质可使用常规方法包括物理常数和光谱数据进行表征。
除非另作相反的说明，否则本申请所述的反应优选在惰性气氛下在大气压在约-78℃至约150℃、更优选约0℃至约125℃且最优选和便利地约室温(或者环境温度)例如约20℃的反应温度范围进行。
在制备本发明化合物的方法中，有利的是相互分离反应产物和/或者由起始物质分离反应产物。通过本领域常用的技术将每个步骤或者一系列步骤的期望产物分离和/或者纯化(之后为分离)至同质性的期望程度。
分离的适当方法的选择取决于所涉及的物质的性质。例如，在蒸馏和升华中的沸点和分子量、在色谱法中存在或者不存在极性官能团、在多相萃取中酸性和碱性介质中的物质的稳定性等。本领域技术人员将应用最可能实现期望分离的技术。
非对映异构体混合物可在其物理化学差异的基础上通过本领域技术人员熟知的方法诸如色谱法和/或者分级结晶分离为其单独的非对映异构体。对映异构体可通过如下来分离：通过与适当的旋光化合物(例如手性助剂诸如手性醇或者Mosher酰基氯)反应将对映异构体混合物转化为非对映异构体混合物，分离所述非对映异构体且将单独的非对映异构体转化(例如水解)为相应的纯的对映异构体。也可通过使用手性HPLC柱来分离对映异构体。
单一的立体异构体，例如，基本上不含其立体异构体的对映异构体，可通过以下方式获得：使用诸如形成非对映异构体的方法，用光学活性的拆分剂来拆分外消旋混合物(Eliel,E.and Wilen,S.″Stereochemistry of Organic Compounds,″John Wiley&Sons,Inc.,New York,1994；Lochmuller,C.H.,J.Chromatogr.,1975 113(3):283-302)。本发明的手性化合物的外消旋混合物可通过任何合适的方法分开和分离，所述方法包括：(1)与手性化合物形成离子性非对映异构的盐，然后通过分级结晶或其它方法分离，(2)与手性衍生试剂形成非对映异构的化合物，分离所述非对映异构体，然后转化为纯的立体异构体，和(3)在手性条件下直接分离基本上纯的或富含的立体异构体。(参见，例如DrugStereochemistry,Analytical Methods and Pharmacology,Irving W.Wainer,Ed.,Marcel Dekker,Inc.,New York 1993)。
在条件(1)的情况下，非对映异构的盐可通过以下方式形成：使对映异构纯的手性碱如马钱子碱(brucine)、奎宁、麻黄碱、番木鳖碱(strychnine)、α-甲基-β-苯基乙胺(安非他明)等与带有酸性官能团的不对称化合物如羧酸和磺酸反应。可通过分级结晶或离子色谱法诱导非对映异构体的盐分离。对于氨基化合物的光学异构体的分离而言，加入手性羧酸或磺酸如樟脑磺酸、酒石酸、扁桃酸或乳酸可引起非对映异构体的盐的形成。
可供选择地，通过方法(2)，使待拆分的底物与手性化合物的一种对映异构体反应，形成非对映异构对(E.Eliel and S.Wilen,Stereochemistry of Organic Compounds,John Wiley&Sons,Inc.,1994,p.322)。非对映异构化合物可通过以下方式形成：使不对称化合物与对映异构纯的手性衍生试剂如薄荷基衍生物反应，接着分离非对映异构体，然后水解得到纯的或富集的对映异构体。确定光学纯度的方法涉及制备外消旋混合物的手性酯，如在碱的存在下制备薄荷基酯例如(-)氯甲酸薄荷基酯，或Mosher酯，乙酸α-甲氧基-α-(三氟甲基)苯基酯(Jacob III.J.Org.Chem.,1982 47:4165)，然后就两种阻转异构的对映异构体或非对映异构体的存在而分析1H NMR光谱。阻转异构化合物的稳定的非对映异构体可遵循分离阻转异构的萘基-异喹啉(WO 96/15111)的方法通过正相和反相色谱分开和分离。通过方法(3)，两种对映异构体的外消旋混合物可使用手性固定相通过色谱来分离(″Chiral Liquid Chromatography″1989 W.J.Lough,Ed.,Chapman and Hall,New York；Okamoto,J.Chromatogr.,1990 513:375-378)。富集的或纯化的对映异构体可通过用于区分带有不对称碳原子的其它手性分子的方法(如旋光性或圆二色性)来区分。
外消旋混合物通过超临界液相色谱来分离，其使用Mettler Toledo MG II色谱，使用5μm AS-H SFC 21.2x250mm柱或者AD-H SFC柱，使用含有0.1％TFA的MeOH或者IPA作为共溶剂。典型的条件包括50g/min的流速、40℃的柱温。运行时间通常为5-10分钟。
下述方案中描述的一些化合物带有广义的取代基；然而，本领域技术人员应该立刻认识到R基团的性质可改变以获得本发明所包含的各种化合物。此外，反应条件为示例性的且可供选择的条件为熟知的。下述实施例中的反应顺序不意在限制如在权利要求中阐述的本发明的范围。
本发明的化合物通过在方案A中描述的一般操作来制备。必需的5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺片段A-3b通过取代的胍和4-((二甲基氨基)亚甲基)-3-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(A-9)的缩合来制备，后者通过3-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(CASRN 98977-36-7)和叔丁氧基-N,N,N′,N′-四甲基甲二胺(CASRN 5815-08-7)的缩合来制备。本发明化合物的2-位通常被仲胺取代，并且N-取代的胍类容易获得，这导致了引入本发明所含取代基的灵活性。A-2的合成通过将1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐(A-1,R″＝H)或者相应的二-CBZ衍生物(A-1；R″＝CBZ)用伯胺处理而容易地完成。伯胺的结构多样性集合可由商业来源容易地获得或者通过允许广度的2-位取代的文献制备来获得。在A-2和A-9缩合后，在酸性条件下使用标准方案将Boc保护基团移去，得到5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺衍生物(A-3b)。
方案A
将哌啶酰化得到脲(A-3R′＝C(＝O)NRaCR1R2Y)可通过如下来完成：将伯胺或者仲胺(A-4)用CDI处理从而得到N-取代的1H-吡唑-1-甲酰胺(A-5)，随后将其用A-3b处理得到脲A-8。制备活化的酰化剂的可供选择的途径为将适当取代的羧酸A-6用DPPA转化为相应的酰基叠氮化物，其可随后通过Curtius重排转化为异氰酸酯A-7。反应活性的异氰酸酯将容易地与A-3b反应得到A-8(K.Ninomiya et al.Tetrahedron 1974 30:2151；V.V.Sureshbabu et al.Tetrahedron Lett.2008 49:1408)。
本发明范围内的酰胺(A-3,R′＝C(＝O)CH2CR1R2Y)而不是脲的化合物可使用已经针对肽合成而开发且大量使用的活化的羧酸衍生物来制备。
活化的羧酸包括酰基氯或者对称的或者混合的酸酐，其与胺在溶剂(诸如DMF、DCM、THF)中在存在或者不存在作为共溶剂的水的情况下在0℃-60℃的温度且通常在碱(诸如Na2CO3、NaHCO3、K2CO3、DIPEA、TEA或者吡啶)的存在下反应。使用本领域技术人员熟知的标准试剂诸如亚硫酰氯、草酰氯、磷酰氯等将羧酸转化为其酰基氯。所述试剂可在碱(诸如DIPEA、TEA或者吡啶)的存在下使用。
可供选择地，可通过将羧酸用EDC、DCC、BOP、PyBrOP或者2-氟-1-甲基吡啶鎓对甲苯磺酸盐(Mukaiyama试剂)等任选地在改性剂(诸如HOBt)的存在下在存在或者不存在碱(诸如NMM、TEA或者DIPEA)的情况下在惰性溶剂(诸如DMF或者DCM)中在0℃-60℃的温度处理来将羧酸原位转化为活化的酸。可供选择地，所述反应可在HATU或者HOAt以及TEA或者DIPEA的存在下在DMF、DCM或者THF中进行。有关胺酰化的综述，参见J.March,suprapp.417-425；H.G.Benz,Synthesis of Amides and Related Compounds inComprehensive Organic Synthesis,E.Winterfeldt,ed.,vol.6,Pergamon Press,Oxford1991 pp.381-411；see R.C.Larock,Comprehensive Organic Transformations–A Guideto Functional Group Preparations,1989,VCH Publishers Inc.,New York；pp.972-976。
本发明范围内的5,6,7,8-四氢-2,6-二氮杂萘-3-胺化合物由7-氯-3,4-二氢-2,6-二氮杂萘-2(1H)-羧酸叔丁酯(B-1)(CASRN 1060816-50-3，购自Anichem Inc.)制备。在3-位引入期望的胺通过钯催化的胺化来完成。随后移去Boc得到吡啶，其可进一步如上所述进行修饰。
通过置换(杂)芳基环上的离去基团来引入伯胺或者仲胺可通过胺和B-1的Buchwald-Hartwig钯催化的交叉偶联来完成(J.P.Wolfe and S.L.Buchwald J.Org.Chem2000 65:1144-1157 and Acc.Chem.Res.1998 31:805-818；J.P.Wolfe et al.J.Org.Chem2000 65:1158；J.F.Hartwig Angew.Chem.Int.Ed.1998 37:2046-2067)。典型的条件包括Pd(dppf)Cl2，在碱(例如叔丁醇钠或者Cs2CO3)的存在下以及非质子溶剂。典型的离去基团包括卤素和三氟甲磺酸酯基且最适的离去基团将取决于精确的反应物。
本发明范围内的化合物需要取代的胺A-4，所述胺任选具有手性。这些胺可使用在方案C中所述的一般方法来制备。芳基格氏或者芳基锂试剂与手性N-叔丁基亚硫酰基亚胺(C-2)的加成直接得到手性胺(C-3)(D.A.Cogan et al.,Tetrahedron 1999 55:8883-89040)。所述亚胺继而可由大量的容易制备或者购买的醛获得。可供选择地，可使1-芳基-1-乙酮衍生物(C-4b)与(R)-1-甲基-3,3-二苯基六氢吡咯并[1,2-c][1,3,2]氧氮杂硼杂环戊二烯(borole)和硼烷二乙基苯胺进行手性氢化物还原(步骤4)(A.M.Salunkhe andE.R.Burkhardt Tetrahedron Lett.1997 38(9)1523-1526 and 38(9)1519-1522,；andE.J.Corey et al.,J.Am.Chem.Soc.1987 109:5551)，得到手性醇，然后其经采用Mitsunobu条件的Gabriel合成而转化为相应的胺以引入酞酰亚胺部分(步骤5&6)。
Mitsunobu条件(D.L.Hughes,The Mitsunobu Reaction,in Organic Reactions,Volume 42,1992,John Wiley&Sons,New York；pp.335-656)包括使醇用膦诸如三烷基膦如三丁基膦((n-Bu)3P)、三苯基膦(Ph3P)等以及重氮化合物如DEAD、DIAD或者偶氮二羧酸二叔丁酯的混合物在所述转化常用的惰性溶剂(诸如THF、甲苯、DCM)中活化。对于所采用的溶剂的性质并无特别性质，条件是其对所涉及的反应或者试剂不具有不良作用且其可在至少一定程度溶解所述试剂。所述反应可在范围为环境温度至所采用的溶剂的回流温度的宽范围温度来进行。
可供选择地，有用的手性氨基醇中间体可通过氨基酸(例如C-6)的氢化物还原(hydride reduction)来制备。手性氨基酸的可利用度提供了丰富的合成片段，其可引入本发明范围内的化合物中(R.M.Williams,Synthesis of optically Active α–AminoAcids,Vol 7 of Organic Chemistry Series；Baldwin,J.E.；Magnus,P.D.(Eds.)；Pergamon Press,Oxford 1989)。所得的氨基醇(C-7a)可为N-或者O-保护的以进一步修饰所述片段。O-甲硅烷基化的胺的缩合得到本发明范围内的羟基甲基取代的衍生物，且脱保护的醇允许对R1取代基进行额外的修饰。如下的实施例提供了所述醇的进一步修饰的实例。
4-芳基-1-苄基-吡咯啉-3-羧酸由可容易获得的取代的苯甲醛D-1与丙二酸进行Knoevenagel缩合制备，得到取代的丙烯酸。相应的酰基氯与(R)-4-苯基噁唑烷-2-酮的缩合引入了手性助剂，这在亚甲基化偶氮甲碱的1,3-偶极加成后得到手性D-4。酰胺的水解得到羧酸，其可转化为异氰酸酯且与胺缩合并脱保护得到本发明范围内的化合物。
本发明范围内的化合物(其中Z2为3-氨基-4-芳基-吡咯烷衍生物)可容易地由N-保护的4-芳基-吡咯烷-3-羧酸使用Schmidt重排来制备(参见例如实施例68)。
2-(取代的)氨基-6,7-二氢-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶-7-羧酸通过在方案E中所述的步骤来制备。(S)-4-(三乙基甲硅烷基氧基)丁-1,1,4-三羧酸4-乙酯·1,1-二甲酯(E-2b)通过如下来制备：E-1的开环，同时伴随末端羟基用碘的置换且随后将所述碘用丙二酸二甲酯置换。主要的合成得到非常一般性的方法以制备嘧啶环，其用于制备E-4。一个片段为β-二羰基化合物。羰基包括酮、醛、羧酸衍生物或者腈。第二种三原子片段为脒、脲、硫脲或者胍。能够进行该反应的等价范围导致了取代的嘧啶制备中的显著灵活性(D.J.Brown,Pyrimidines and their benzo Derivatives in Comprehensive HeterocyclicChemistry,A.J.Boulton and A.McKillop(ed)vol.3 part 2b,chap.2.13,PergamonPress,Oxford 1984 pp.57-157；D.J.Brown,The Pyrimidines,Supplement II in TheChemistry of Heterocyclic Compounds,A.Weissberger and E.C.Taylor(ed),WileyInterscience,New York 1985,pp.21-62)。
E-4的环化得到期望的6,7-二氢-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶骨架，其通过采用Mitsunobu方法来完成。残留的羟基取代基通过氯化和氢化裂解的两步方法来移去得到E-5c。酯的水解以及将所得酸转化为期望酰胺如上所述来进行。
对于本发明范围内某些化合物有用的中间体1-烷基-3-芳基氧基-4-氨基-吡咯烷(F-6c)由2,5-二氢-1H-吡咯-1-羧酸叔丁酯(F-1,CASRN 73286-70-1)制备。F-1的环氧化以及随后的开环得到反式羟基醚F-3a。3-羟基部分的转化通过氧化以及用L-三仲丁基硼氢化钠(selectride)的再还原来完成，得到所必需的顺式异构体F-3b。N-甲基化可通过Boc的酸催化的脱保护以及随后的还原胺化以引入烷基取代基来完成。最终，4-氨基通过由以下组成的三步顺序反应来引入：醇的甲磺酰化、甲磺酰基氧基取代基用叠氮化物的置换以及最终对叠氮化物进行还原。后续反应可采用Staudinger方法(使用Ph3P)来方便地完成，尽管也可采用其它方法。本领域技术人员应该认识到其它方法可被修改以制备期望中间体。将F-6c引入至最终产物可通过如前所述的操作来完成。本领域技术人员应该认识到所述顺序反应可用于制备相应的硫醚以及它们的氧化产物，其通过用苯硫酚代替步骤2中的苯酚。类似地，使用叠氮化物的F-2的开环以及随后的还原和所得的胺的芳基化，得到相应的芳基胺。
如上所述的方案提供了一般方法，其已经应用于本发明涵盖的化合物。如下的实施例含有另外的详细内容，其用于引入具体化合物所具备的各种结构特征。
生物学活性
式I化合物的ERK活性的活性确定可由众多直接和间接检测方法来实现。针对本申请所述的某些示例性化合物的ERK抑制测定对其进行测定(实施例77)。实施例I-1至I-150的ERK结合活性的范围小于1nM(纳摩尔)至约10μM(微摩尔)。基于细胞的功能测定(实施例79)用于确定ERK抑制剂对下游信号转导的作用。针对这些测定的代表性的数值可出现于实施例77的表2中。
式I的示例性化合物的细胞毒性或者细胞生长抑制活性通过如下测量：在细胞生长培养基中建立了增殖的的哺乳动物肿瘤细胞系，加入式I化合物，培养所述细胞达约6h至约5d的时间；且测量细胞存活率(实施例78)。基于细胞的体外测定用于测量存活率，即增殖(IC50)、细胞毒性(EC50)。
剂量&给药
本发明提供了含有本发明化合物以及至少一种治疗惰性载体、稀释剂或者赋形剂的药物组合物或者药物，以及使用本发明化合物制备所述组合物和药物的方法。在一个实例中，具有期望纯度的式I化合物可通过使其与生理学可接受的载体(即在环境温度和适当pH在剂型中采用的剂量和浓度时对受试者不具有毒性的载体)混合来配制。所述制剂的pH主要取决于所述化合物的具体用途和浓度，但其典型的范围为约3至约8。在一个实例中，将式I化合物在乙酸盐缓冲液(pH 5)中配制。在另外的实施方案中，式I化合物是无菌的。所述化合物可作为例如固体或者无定形组合物、作为冻干制剂或者作为水溶液来储存。
本发明的组合物将按照与良好医学实践一致的方式来配制、确定剂量和给药。在此背景下考虑的因素包括所治疗的具体病症、所述病症的严重性、所治疗的具体患者、个体患者的临床情况、病症的起因、药物的递送位点、给药方法、给药的时间表和医学实践者已知的其它因素。所给药的化合物的“有效量”将由这些考虑因素控制，并且是抑制ERK活性所需的最小量。典型地，所述量可低于对于正常细胞或者作为整体的患者而言具有毒性的量。
取决于用于给药药物的方法，用于施用的药物组合物(或制剂)可按多种方式包装。一般地，用于分配的物品包括容器，容器内存放有适当形式的药物制剂。合适的容器是本领域技术人员公知的，并且包括以下物质，如瓶(塑料的和玻璃的)、小袋(sachet)、安瓿、塑料袋、金属圆筒等。容器还可包括防止不慎重取得包装中的内含物的的防干扰装置(tamper-proof assemblage)。此外，在容器上具有描述容器中的内含物的标签。所述标签还可包括适当的注意事项。
可制备缓释制剂。缓释制剂的合适实例包括含有式I化合物的的固态疏水性聚合物的半渗透性基质，其中基质以成形的物品形式(例如薄膜或微胶囊)存在。缓释基质的实例包括聚酯、水凝胶(例如，聚(甲基丙烯酸2-羟基乙酯)或聚(乙烯醇))、聚交酯、L-谷氨酸和γ-乙基-L-谷氨酸的共聚物、非降解性乙烯-乙酸乙烯酯、降解性乳酸-羟乙酸共聚物如LUPRON DEPOTTM(由乳酸-羟乙酸共聚物和醋酸亮丙瑞林组成的可注射微球)和聚-D-(-)-3-羟基丁酸。
治疗人类患者的剂量的范围可为约0.1mg至约1000mg的式I化合物。典型剂量可为约1mg至约300mg的化合物。剂量可一天一次(QID)给药、一天两次(BID)给药或者更频繁地给药，这取决于药代动力学和药效学性质，包括具体化合物的吸收、分布、代谢和排泄。此外，毒性因素可影响剂量和给药方案。当口服给药时，可每日一次或者频率更低地摄入丸剂、胶囊剂或者片剂，以摄入达特定时间。所述给药方案可重复众多次治疗循环。
本发明化合物可通过任何适当的途径给药，包括口服、局部(包括口腔和舌下)、直肠、阴道、经皮、肠胃外、皮下、腹膜内、肺内、皮内、鞘内和硬膜外和鼻内，且如果对于局部治疗而言是期望的，则进行病灶内给药。肠胃外输注包括肌内、静脉内、动脉内、腹膜内或者皮下给药。
本发明化合物可以任何便于给药的形式给药，例如片剂、粉末剂、胶囊剂、溶液剂、分散剂、混悬剂、糖浆剂、喷雾剂、栓剂、凝胶剂、乳剂、贴剂等。所述组合物可含有在药物制剂中常规的组分，例如稀释剂、载体、pH改性剂、增甜剂、填充剂和另外的活性剂。
典型的制剂通过使得本发明化合物与载体或者赋形剂混合来制备。适当的载体和赋形剂对于本领域技术人员而言是熟知的，且详细描述于例如Ansel,Howard C.,et al.,Ansel’s Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2004；Gennaro,Alfonso R.,et al.Remington:TheScience and Practice of Pharmacy.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2000；and Rowe,Raymond C.Handbook of Pharmaceutical Excipients.Chicago,Pharmaceutical Press,2005。所述制剂也可包含一种或者多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、助悬剂、防腐剂、抗氧化剂、不透明剂(opaquing agent)、助流剂、加工助剂(processing aid)、着色剂、增甜剂、芳香剂、矫味剂、稀释剂和提供药物(即本发明化合物或其药物组合物)优质外观或辅助药物产品(即药品)制造的其它已知添加剂。
对于口服给药，含有各种赋形剂诸如枸橼酸的片剂可与各种崩解剂诸如淀粉、海藻酸和某些络合硅酸盐以及粘合剂诸如蔗糖、明胶和阿拉伯胶一起采用。此外，润滑剂诸如硬脂酸镁、月桂硫酸钠和滑石通常用于压片的目的。相似类型的固体组合物也可以软和硬填充的明胶胶囊来采用。因此优选的物质包括乳糖或者奶糖(milk sugar)以及高分子量的聚乙二醇。当含水混悬剂或者醑剂对于口服给药而言是期望的时，其中的活性化合物可与各种增甜剂或者矫味剂、着色物质或者染料以及如果期望的乳化剂或者助悬剂和稀释剂诸如水、乙醇、丙二醇、丙三醇或者它们的组合一起混合。
适当的口服剂型的实例为片剂，其含有约25mg、50mg、100mg、250mg或者500mg的本发明化合物以及约90-30mg的无水乳糖、约5-40mg的交联羧甲纤维素钠、约5-30mg的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)K30和约1-10mg的硬脂酸镁。首先使得粉末状成分混合在一起，然后使其与PVP溶液混合。可将所得的组合物干燥、制粒、与硬脂酸镁混合并使用常规仪器压制为片剂剂型。气雾剂制剂的实例可通过如下来制备：将本发明的化合物(例如5-400mg)溶解于适当的缓冲溶液例如磷酸盐缓冲液中，加入张力调节剂(tonicifier)例如盐诸如氯化钠(如果期望)。可例如使用0.2微米的滤器将溶液滤过以除去杂质和污染物。
在一个实施方案中，药物组合物也包含至少一种额外的抗增殖药物。
因此，实施方案包括药物组合物，其包含式I化合物或其立体异构体或药用盐。在另外的实施方案中包括药物组合物，其包含式I化合物或其立体异构体或药用盐以及药用载体或者赋形剂。
本发明还提供了兽用组合物，因此其含有上文定义的至少一种活性成分及兽用载体。兽用载体是可用于给药所述组合物这一目的物质并可以是固态、液态或气态物质，这些物质在兽医领域中要么是惰性的要么是可接受的且与所述活性成分是相容的。这些兽用组合可通过肠胃外、口服或任意其它期望的途径来给药。
联用治疗
式I化合物可单独使用或与其它治疗药物联用，用来治疗本申请描述的疾病或病症，如过度增殖性病症(例如，癌症)。在某些实施方案中，式I化合物与具有抗过度增殖性质或用于治疗过度增殖性病症(例如，癌症)的第二种化合物在药物组合制剂或给药方案中作为联用治疗联用。药物组合制剂或给药方案的第二种化合物优选具有对式I化合物的补充活性，由此它们不彼此不利地影响。联用治疗可提供“协同(synergy)”及提供“协同作用(synergistic)”，即，当活性成分一起使用时实现的作用大于分别使用这些化合物导致的作用的总和。
联用治疗可作为同时或先后方案给药。当先后给药时，组合物可按两次或多次给药方式给药。联用给药包括使用分开的制剂或单一的药物制剂同时给药，和以任一顺序先后给药，其中优选的是存在两种(或所有)活性药物同时发挥其生物活性的一段时间。
任何上述同时给药药物的合适剂量是目前所用的剂量，并且由于新鉴定的药物和其它化疗剂或治疗的联用作用(协同)，所述剂量可降低。
因此本发明的联用治疗包括给药至少一种式I化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、代谢产物或药用盐以及使用至少一种其它癌症治疗方法。可对一种或者多种式I化合物和一种或者多种其它药用活性化学治疗剂的量以及给药的相对时限进行选择以实现期望的联用治疗效果。
制品
在本发明的另一实施方案中，其提供了含有用于治疗上文描述的疾病和病症的物质的制品或者“试剂盒”。在一个实施方案中，所述试剂盒包含容器，所述容器包含式I化合物或其立体异构体、互变异构体或药用盐。所述试剂盒还可包含附在容器上或容器中的标签或包装说明书。术语“包装说明书”用来指通常包括在治疗产品的市售包装中的说明书，其含有关于适应症、用法、剂量、给药、禁忌症和/或注意事项的信息，这些信息涉及所述治疗产品的使用。合适的容器包括，例如，瓶、小瓶、注射器、发泡包装(blister pack)等。容器可从多种材料(如玻璃或塑料)形成。容器可装有有效治疗所述病症的式I化合物或其制剂，并可具有无菌入口(例如，容器可为静脉注射溶液袋或具有可由皮下注射针头刺穿的塞子的小瓶)。在组合物中至少一种活性药物是式I化合物。可供选择地或另外地，所述制品还可包含第二种容器，所述容器包含药用缓冲液，如抑菌性注射用水(BWFI)、磷酸盐缓冲生理盐水、林格氏溶液和葡萄糖溶液。试剂盒还可包括从商业和使用者角度看是期望的其它物质，包括其它缓冲液、稀释剂、滤器、针头和注射器。
在另外的实施方案中，试剂盒适于递送固态口服形式的式I化合物，如片剂或胶囊剂。这样的试剂盒优选包括多个单位剂量。这样的试剂盒的一个实例是“泡罩包装”。泡罩包装在包装工业中是公知的，并且广泛用于包装药物单位剂量形式。
根据一实施方案，试剂盒可包含(a)在其中含有式I化合物的第一个容器；以及任选地(b)在其中含有第二种药物制剂的第二个容器，其中所述第二种药物制剂包含具有抗过度增殖活性的第二种化合物。可供选择地或另外地，所述试剂盒还可包含第三个容器，其包含药用缓冲液，如抑菌性注射用水(BWFI)、磷酸盐缓冲生理盐水、林格氏溶液和葡萄糖溶液。其还可包括从商用和使用者角度来看是期望的其它物质，包括其它缓冲液、稀释剂、滤器、针头和注射器。
下述实施例示例说明了本发明范围内的化合物的制备和生物学评价。提供了如下的这些实施例和制备以使得本领域技术人员能够更清楚地理解并实施本发明。它们不应被理解为限制本发明的范围，而是仅仅作为其的示例说明和代表。
实施例1
N-((3,4-二氯苯基)(噁唑-5-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢 吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-1)
步骤1：将噁唑-5-甲醛(1.0g,10.30mmol)、2-甲基丙烷-2-亚硫酰胺(2.247g,18.54mmol；CASRN 146374-27-8)和四乙氧基钛(8.460g,37.09mmol)置于THF(15mL)中并加热至65℃且保持12小时。将反应混合物冷却并倾倒至水中。将固体滤出并将滤液用EtOAc萃取。分离各层并将有机层浓缩。将所得的残留物经SiO2色谱法纯化(20-25％EtOAc/己烷)，得到(E)-2-甲基-N-(噁唑-5-基亚甲基)丙烷-2-亚硫酰胺(20,1.211g,6.047mmol,58.70％的收率)。
步骤2：向干燥的烧瓶中加入20(1.211g,6.047mmol)并加入甲苯(5mL)。将反应混合物冷却至-78℃并加入(3,4-二氯苯基)溴化镁(18.14mL,9.071mmol,0.5M在THF中)。将反应混合物温热至-10℃且保持15分钟。加入饱和NH4Cl并将反应混合物用DCM萃取。分离有机层，干燥，滤过，并浓缩。将所得的残留物溶解于DCM(10mL)中然后加入4N HCl在二噁烷中的溶液(15.12mL,60.47mmol)并将溶液搅拌30分钟。将反应混合物逐滴加至搅拌的乙醚溶液中。将所得的固体滤过并用乙醚洗涤，得到(3,4-二氯苯基)(噁唑-5-基)甲胺盐酸盐(22,1.24g,4.436mmol,73.35％的收率)。
步骤3:向1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐(65.2g,445mmol)在DMF(200mL)中的搅拌溶液中在RT在氮气下先后加入DIPEA(103mL,593mmol)和四氢-2H-吡喃-4-胺(30g,297mmol；CASRN38041-19-9)并将反应混合物搅拌3天。加入Et2O(100mL)，并将反应混合物搅拌10分钟，然后使得反应混合物沉降并弃去所述乙醚层。该操作重复三次且在沉降30分钟后形成固体。将固体滤出并用Et2O淋洗并在高真空干燥得到35g,(95％的纯度,78％的收率)1-(四氢-2H-吡喃-4-基)胍(24)，其为浅黄色固体：MS m/z(APCI-pos)M+1＝144.1。
步骤4:将24(15.0g,105mmol)和21(26.6g,105mmol,CASRN871726-72-6,对于一般操作，参见Z.Guo et al.WO2005/121130)以及EtOH(150mL)的溶液搅拌并加热至45℃。然后加入乙醇钠(78.2mL,210mmol,21wt％在EtOH中)，并将反应混合物在45℃搅拌18小时，冷却并浓缩。加入DCM(400mL)并将混合物用盐水(200mL)洗涤。将有机馏分分离，干燥(Na2SO4)，滤过，并浓缩得到27g(95％的纯度,75％的收率)2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(26)，其为粘稠的红色油状物MS m/z(APCI-pos)M+1＝335.0。
步骤5:向圆底烧瓶中加入26(27.5g,82.2mmol)、DCM(100mL)和MeOH(25mL)并保持在氮气下。加入HCl在二噁烷中的4N溶液(103mL,411mmol)并将所得的溶液搅拌18小时。将反应混合物浓缩并重新混悬于DCM(150mL)。加入甲醇化NH3溶液(25mL,7N)和另外的DCM(100mL)。将沉淀的盐滤过并将滤液浓缩得到棕色固体，将其与Et2O/MeOH(95:5)搅拌1小时。将精细的浅棕色固体沉淀并经滤过回收得到15g,(99％的纯度,77％的收率)N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺(28):MS m/z(APCI-pos)M+1＝235.2。
步骤6:将(3,4-二氯苯基)(噁唑-5-基)甲胺盐酸盐(22,183mg,0.779mmol)、TEA(326μL,2.34mmol)和DCM(5mL)的溶液在RT搅拌10分钟。加入CDI(158mg,0.974mmol)并将反应混合物在RT搅拌1小时。将28(211mg,0.779mmol)、TEA(326μL,2.34mmol)和THF(2mL)的溶液搅拌10分钟然后加至溶液中并将所得的混合物在RT搅拌2小时。将反应混合物倾倒至水中，并用DCM萃取。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过，并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用MeOH/DCM梯度(2-5％MeOH/DCM)洗脱)。将回收的产物进一步经法相柱色谱法纯化(SP4,0-55％MeCN:水)，得到82mg(20.9％)N-((3,4-二氯苯基)(噁唑-5-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(30):1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,1H),7.86(s,1H),7.43(m,2H),7.17(dd,1H),6.93(s,1H),6.30(d,1H),5.09(d,1H),4.88(d,1H),4.37(s,2H),4.05-3.95(m,3H),3.68(m,2H),3.54(t,2H),2.70(t,2H),2.01(d,2H),1.59-1.46(m,2H)；LCMS(ACPI-pos)m/z505.5(M+H)+。
将(S)-N-((3,4-二氯苯基)(噁唑-5-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5, 6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-1)(81mg,0.16mmol)经色谱法在手性Tech IC柱(4.6mmx250mm)上拆分(用40％EtOH/己烷洗脱，流速为1mL/min)。收集第一个峰得到27mg(33％)I-1:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,1H),7.86(s,1H),7.43(m,2H),7.17(dd,1H),6.93(s,1H),6.30(d,1H),5.09(d,1H),4.88(d,1H),4.37(s,2H),4.05-3.95(m,3H),3.68(m,2H),3.54(t,2H),2.70(t,2H),2.01(d,2H),1.59-1.46(m,2H)；LCMS(ACPI-pos)m/z505.5(M+H)+
将N-((4-氯-3-氟苯基)(噁唑-5-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二 氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-51)类似地制备，除了在步骤2中将(3,4-二氯苯基)溴化镁用(4-氯-3-氟苯基)溴化镁代替之外，得到119mg(32.4％)I-51:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,1H),7.86(s,1H),7.39(t,1H),7.14(dd,1H).7.06(d,1H),6.93(s,1H),6.31(d,1H),5.11(d,1H),4.89(d,1H),4.37(s,2H),4.05-3.95(m,3H),3.66(m,2H),3.53(dt,2H),2.69(t,2H),2.01(m,2H),1.59-1.46(m,2H)；LCMS(ACPI-pos)m/z 487.1(M+H)+。
(S)-N-((4-氯-3-氟苯基)(噁唑-5-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6- 二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-2)通过将N-((4-氯-3-氟苯基)(噁唑-5-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(117mg)在手性Tech IA柱(22mmx250mm)上进行手性色谱法(用40％EtOH/己烷洗脱，流速为22mL/min)来制备。收集第一个峰得到57mg(48％)I-2:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,1H),7.86(s,1H),7.39(t,1H),7.14(dd,1H).7.06(d,1H),6.93(s,1H),6.31(d,1H),5.11(d,1H),4.89(d,1H),4.37(s,2H),4.05-3.95(m,3H),3.66(m,2H),3.53(dt,2H),2.69(t,2H),2.01(m,2H),1.59-1.46(m,2H)；LCMS(ACPI-pos)m/z 487.1(M+H)+。
将(R)-N-(1-(3,4-二氯苯基)乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶 并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-39)类似地制备，除了在步骤6中将22用185代替之外。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:7至500:18)洗脱)，得到0.120g(36.1％)I-39:MS m/z(APCI-pos)M+1＝450。
将(R)-N-(1-(4-氯-3-氟苯基)乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡 啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-40)类似地制备，除了在步骤6中将22用140代替之外。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:10至500:15)洗脱)，得到0.100g(31.2％)I-40:MS m/z(APCI-pos)M+1＝434。
实施例2
N-((4-氯-3-氟苯基)(1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨 基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-3).
(4-氯-3-氟-苯基)-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-甲基胺(32)由1-甲基-1H-吡唑-3-甲醛(CASRN 27258-32-8)根据在实施例1步骤1和2中所述的操作制备，除了使用(4-氯-3-氟苯基)溴化镁代替步骤2中的(3,4-二氯苯基)溴化镁之外。
N-((4-氯-3-氟苯基)(1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺根据在实施例1步骤3-6中的操作制备，除了在步骤6中，将22用32代替，得到136mg(20％)I-3:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(s,1H),7.30(m,2H),7.15(m,2H),5.98(m,3H),4.87(d,1H),4.43(s,2H),4.07-3.95(m,3H),3.89(s,3H),3.75(m,1H),3.66-3.51(m,3H),2.68(m,2H),2.03(d,2H),1.53(m,2H)；LCMS(ACPI-pos)m/z 500.0(M+H)+。
(S)-N-((4-氯-3-氟苯基)(1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基 氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-4)通过将I-3在手性TechnologiesAS-H SFC柱(21.2x250mm)上拆分(用20％MeOH/己烷洗脱，流速为50mL/min)来制备，得到I-4:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(s,1H),7.30(m,2H),7.15(m,2H),5.98(m,3H),4.87(d,1H),4.43(s,2H),4.07-3.95(m,3H),3.89(s,3H),3.75(m,1H),3.66-3.51(m,3H),2.68(m,2H),2.03(d,2H),1.53(m,2H)；LCMS(ACPI-pos)m/z 500.0(M+H)+。
实施例3
N-((4-氯-3-氟苯基)(1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨 基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-5)
标题化合物根据在实施例2中的操作来制备，除了使用由1-甲基-1H-吡唑-4-甲醛(CASRN 25016-11-9)制备的(4-氯-3-氟-苯基)-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-甲基胺(34)代替32之外，得到207mg(35％)I-5:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,1H),7.35(m,2H),7.14(d,1H),7.09(m,2H),6.05(d,1H),4.90(dd,2H),4.34(s,2H),4.05-3.95(m,3H),3.86(s,3H),3.75-3.59(m,2H),3.54(t,2H),2.67(t,2H),2.01(d,2H),1.53(m,2H)；LCMS(ACPI-pos)m/z500.0(M+H)+。
(S)-N-((4-氯-3-氟苯基)(1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基 氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-6)通过将I-5在手性Tech IA柱(22mmx250mm)上拆分(用40％EtOH/己烷洗脱，流速为18mL/min)来制备。第一个峰得到88mg(44％)I-6:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,1H),7.35(m,2H),7.14(d,1H),7.09(m,2H),6.05(d,1H),4.90(dd,2H),4.34(s,2H),4.05-3.95(m,3H),3.86(s,3H),3.75-3.59(m,2H),3.54(t,2H),2.67(t,2H),2.01(d,2H),1.53(m,2H)；LCMS(ACPI-pos)m/z500.0(M+H)+。
实施例4
N-((4-氯-3-氟苯基)(1H-吡唑-4-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6- 二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-7)
步骤1:N-((1H-吡唑-4-基)亚甲基)-2-甲基丙烷-2-亚硫酰胺(36,2.58g62％)由1H-吡唑-4-甲醛根据在实施例1步骤1中的操作制备。
步骤2:向36(1.47g,7.378mmol)、Boc2O(1.932g,8.852mmol)和TEA(2.056mL,14.75mmol)在MeCN(30mL)中的溶液中加入DMAP(0.09012g,0.7377mmol)并将所得的溶液搅拌1小时。加入水并将反应混合物用乙醚萃取。分离有机层，干燥，滤过并浓缩。将粗残留物经SiO2纯化(用40％EtOAc/己烷洗脱)得到2.14g(96.9％)(E)-4-((叔丁基亚硫酰基亚氨基)甲基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯(38)。
步骤3:(4-氯-3-氟苯基)(1H-吡唑-4-基)甲胺(40)由38根据在实施例1步骤2中的操作制备，除了将(3,4-二氯苯基)溴化镁用(4-氯-3-氟苯基)溴化镁代替之外。
标题化合物根据在实施例1步骤6中的操作通过将28和40缩合来制备，得到50mg(4％)I-7:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,1H),7.41(s,2H),7.36(t,1H),7.15(d,1H),7.10(d,1H),6.12(d,1H),4.96(d,1H),4.90(s,1H),4.35(m,2H),4.05-3.95(m,3H),3.75-3.59(m,2H),3.53(dt,2H),2.69(t,2H),2.01(d,2H),1.54(m,2H)；LCMS(ACPI-pos)m/z 486.4(M+H)+。
将(S)-N-((4-氯-3-氟苯基)(1H-吡唑-4-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨 基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-8)在手性Tech IC柱(4.6mmx250mm)上经色谱法拆分(用40％EtOH/己烷洗脱，流速为1mL/min)，得到17mg(35％)I-8:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,1H),7.41(s,2H),7.36(t,1H),7.15(d,1H),7.10(d,1H),6.12(d,1H),4.96(d,1H),4.90(s,1H),4.35(m,2H),4.05-3.95(m,3H),3.75-3.59(m,2H),3.53(dt,2H),2.69(t,2H),2.01(d,2H),1.54(m,2H)；LCMS(ACPI-pos)m/z 486.4(M+H)+。
实施例5
N-((4-氯-3-氟苯基)(1,3,4-噁二唑-2-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)- 5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-9)
步骤1:在0℃向2-氨基-2-(4-氯-3-氟苯基)乙酸(5.00g,24.56mmol)在MeOH(30mL)中的溶液中逐滴加入亚硫酰氯(5.37mL,73.67mmol)并将反应混合物搅拌18小时。将反应混合物浓缩并将固体用Et2O研磨得到6.580g(105％)2-氨基-2-(4-氯-3-氟苯基)乙酸甲酯盐酸盐(42)，其没有进一步纯化即可使用。
步骤2:2-(4-氯-3-氟苯基)-2-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)乙酸甲酯(44)由42根据在实施例步骤6中的操作制备得到650mg(40％)44。
步骤3:向44(610mg,1.28mmol)和THF(5mL)的溶液中加入MeOH(1mL)，随后逐滴加入1M NaOH(5105μL,5.11mmol)。将反应混合物搅拌1小时，冷却至0℃并用1N HCl酸化至pH3。将混合物用10％MeOH在DCM(25mL)中的溶液萃取两次。合并有机层并浓缩得到270mg(45.6％)2-(4-氯-3-氟苯基)-2-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)乙酸(46)，其没有进一步纯化即可使用。
步骤4:向46(270mg,0.582mmol)和EDCI(139mg,0.728mmol)和CHCl3(10mL)的溶液中加入甲酰肼(41.9mg,0.698mmol)并将反应混合物在RT搅拌2小时。加入水并将混合物用DCM萃取。分离有机层并浓缩。将粗残留物经SiO2色谱法纯化(用MeOH/DCM梯度(6-8％MeOH)洗脱)得到119mg(36.4％)N-(1-(4-氯-3-氟苯基)-2-(2-甲酰基肼基)-2-氧代乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(48)。
步骤5:向48(119mg,0.212mmol)和MeCN(2mL)的溶液中加入DIPEA(164mg,1.27mmol)和PPh3(99.9mg,0.381mmol)并将溶液搅拌5分钟。加入全氯乙烷(65.1mg,0.275mmol)并将反应混合物搅拌3小时。将反应混合物浓缩并在EtOAc和H2O之间分配。分离有机层并将水相用EtOAc萃取。合并有机层并浓缩。将粗产物经反相色谱法(SP4)纯化(用MeCN/H2O梯度(5-95％MeCN)洗脱)，得到50.0mg(48.4％)I-9:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.39(s,1H),8.08(s,1H),7.41(t,1H),7.21(dd,1H),7.14(d,1H),6.35(d,1H),5.83(d,1H),4.90(d,1H),4.43(s,2H),4.05-3.95(m,3H),3.77-3.60(m,2H),3.55(t,2H),2.70(m,2H),2.03(d,2H),1.53(m,2H)；LCMS(ACPI-pos)m/z 488.2(M+H)+。
实施例6
(S)-N-((3,4-二氯苯基)(1H-吡唑-5-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5, 6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-10)
步骤1:N-((3,4-二氯苯基)(1H-吡唑-5-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(50)由1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-甲醛(CASRN 957483-88-4)根据实施例1步骤1-6制备，得到94mg(14％)50。
步骤2:将标题化合物在手性Technologies AS-H SFC(21.2x250mm)柱上经色谱法拆分(用20％MeOH/己烷洗脱，流速为50mL/min)得到I-10:1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(s,1H),7.57(d,1H),7.45(d,1H),7.24(dd,1H),7.12(s,1H),6.07(m,2H),5.96(bs,1H),4.90(d,1H),4.41(m,2H),4.08-3.95(m,3H),3.74(m,1H),3.63(m,1H),3.54(dt,2H),2.67(m,2H),2.01(d,2H),1.52(m,2H)；LCMS(ACPI-pos)m/z 504.4(M+H)+。
实施例7
(S)-N-((4-氯-3-氟苯基)(1-甲基-1H-吡唑-5-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基 氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-11)
步骤1:N-((4-氯-3-氟苯基)(1-甲基-1H-吡唑-5-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(52)由1-甲基-1H-吡唑-5-甲醛根据实施例1步骤1-6所述的操作制备，除了在步骤2中使用(4-氯-3-氟苯基)溴化镁代替(3,4-二氯苯基)溴化镁之外，得到190mg(28％)52。
步骤2:将标题化合物在手性Technologies AS-H SFC(21.2x250mm)柱上经色谱法拆分(用20％MeOH/己烷洗脱，流速为50mL/min)得到I-11:1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(s,1H),7.57(m,2H),7.43(dd,1H),7.28(d,1H),7.25(dd,1H),6.91(d,1H),6.21(d,1H),5.79(d,1H),4.43(q,2H),3.92-3.81(m,3H),3.73(s,3H),3.61(m,2H),3.35(dt,2H),2.55(t,2H),1.79(d,2H),1.47(m,2H)；LCMS(ACPI-pos)m/z 500.5(M+H)+。
实施例8
(S)-N-((4-氯-3-氟苯基)(异噁唑-5-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5, 6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-12)
(4-氯-3-氟苯基)(噁唑-5-基)甲胺由5-异噁唑甲醛(CASRN 16401-14-2)根据在实施例1步骤1和2中的操作制备，除了在步骤2中将(3,4-二氯苯基)溴化镁用4-氯-3-氟苯基)溴化镁(53)代替之外。N-((4-氯-3-氟苯基)(异噁唑-5-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(54)根据实施例1步骤1-6的操作制备(204mg,51％)，除了使用53代替22:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.24(d,1H),8.09(s,1H),7.39(t,2H),7.15(dd,1H),7.07(d,1H),6.38(d,1H),6.17(d,1H),5.29(d,1H),4.89(d,1H),4.38(s,2H),4.05-3.95(m,3H),3.73(m,2H),3.58(dt,2H),2.69(t,2H),2.02(d,2H),1.54(m,2H)；LCMS(ACPI-pos)m/z 487.2(M+H)+。
步骤2:采用在实施例2中的操作将标题化合物经手性色谱法拆分得到41mg(16％)I-12:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.24(d,1H),8.09(s,1H),7.39(t,2H),7.15(dd,1H),7.07(d,1H),6.38(d,1H),6.17(d,1H),5.29(d,1H),4.89(d,1H),4.38(s,2H),4.05-3.95(m,3H),3.73(m,2H),3.58(dt,2H),2.69(t,2H),2.02(d,2H),1.54(m,2H)；LCMS(ACPI-pos)m/z487.2(M+H)+。
实施例9
(S)-N-((3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)(噁唑-5-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基 氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-13)
步骤1:将4-溴-2-氟-1-(三氟甲氧基)苯(582g,2247mmol)、Mg(54.6g,2247mmol)和碘在THF(10mL)中的混悬液回流加热2小时。将反应混合物冷却至0℃并加至冷却至0℃的(E)-2-甲基-N-(噁唑-5-基亚甲基)丙烷-2-亚硫酰胺(300g,1498mmol,实施例1步骤1)在甲苯(10mL)中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌30分钟。将反应混合物用水淬灭并用DCM萃取。将有机层浓缩得到粗的N-((3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)(噁唑-5-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚硫酰胺(55)，其没有进一步纯化即可使用。
步骤2:向55(570g,1.5mol)和DCM(10mL)的溶液加入HCl(3.74mL,1.5mol)并将溶液搅拌30分钟。将反应混合物逐滴加至乙醚的搅拌溶液中。将固体滤过并用Et2O洗涤得到223mg(47.6％)(3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)(噁唑-5-基)甲胺盐酸盐(56)。
步骤3:N-((3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)(噁唑-5-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(58)由56根据在实施例1步骤6中的操作制备得到78mg(21％)58。
步骤4:将标题化合物在手性Technologies AS-H SFC(21.2x250mm)柱上经手性色谱法拆分(用20％MeOH/己烷洗脱，流速为50mL/min)。收集第一个峰得到I-13:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(s,1H),7.80(s,1H),7.30(t,1H),7.20(d,1H),7.13(d,1H),6.95(s,1H),6.35(d,1H),5.13(d,1H),4.90(d,1H),4.38(s,2H),4.38(s,2H),4.05-3.95(m,3H),3.70(m,2H),2.53(t,2H),2.10(t,2H),2.02(d,2H),1.55(m,2H)；LCMS(ACPI-pos)m/z537.1(M+H)+。
实施例10
(S)-N-(1-(4-氯-3-氟苯基)-2-羟基乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二 氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-14)
步骤1:向冷却至0℃的2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙酸乙酯(59,20.0g,91.59mmol)、N,O-二甲基羟基胺盐酸盐(18.76g,192.3mmol)和THF(800mL)的溶液中经加料漏斗逐滴加入异丙基氯化镁(183.2mL,366.4mmol)并将反应混合物搅拌3小时。将反应混合物用饱和NH4Cl淬灭并用EtOAc萃取。将有机层干燥，滤过并浓缩。将粗产物经过SiO2填料纯化(用20％EtOAc/己烷洗脱)得到15.12g(70.7％)2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(60)。
步骤2:向冷却至0℃的60(15.12g,64.79mmol)和THF(50mL)的溶液中逐滴加入(4-氯-3-氟苯基)溴化镁(226.8mL,113.4mmol)并将溶液在0℃搅拌2小时。加入饱和NH4Cl并将反应混合物用DCM萃取。分离有机层，干燥，滤过并浓缩。将粗产物经过SiO2填料纯化(用5％EtOAc/己烷洗脱)得到18.36g(93.6％)2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(4-氯-3-氟苯基)乙酮(62)。
步骤3:将(R)-1-甲基-3,3-二苯基六氢吡咯并[1,2-c][1,3,2]氧氮杂硼杂环戊二烯(4.861mL,4.861mmol)和甲硼烷二乙基苯胺(8.615mL,48.61mmol)在MTBE(325mL)中的溶液在RT制备然后加热至40℃且保持15分钟。历时15分钟经加料漏斗将62(14.72g,48.61mmol)的MTBE(250mL)溶液逐滴加至上述溶液中并将反应混合物在40℃搅拌30分钟。将反应混合物冷却并逐滴加入MeOH(15mL)、随后加入1M HCl(50mL)。将反应混合物倾倒至水(150mL)中并用DCM(2x150mL)萃取。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法(Biotoge65)纯化(用EtOAc/己烷梯度(2至5％EtOAc)洗脱)得到16.50g(91.1％)(R)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(4-氯-3-氟苯基)乙醇(64)。
步骤4:向冷却至0℃的64(13.50g,44.28mmol)和THF(150mL)的溶液中加入异二氢吲哚-1,3-二酮(7.167g,48.71mmol)和PPh3(17.42g,66.42mmol)，随后逐滴加入DEAD(26.15mL,66.42mmol)在甲苯中的40％溶液。将反应混合物温热至RT并搅拌20小时。将反应混合物浓缩并溶解于Et2O中(可能需要超声)。将固体滤过并将滤液浓缩。将粗残留物经SiO2色谱法(Biotage65)纯化(用10％EtOAc/己烷洗脱)得到14.35g(74.67％)(S)-2-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(4-氯-3-氟苯基)乙基)异二氢吲哚-1,3-二酮(66)。
步骤5:向66(14.35g,33.07mmol)和THF/MeOH(1:1,400mL)的溶液中加入肼一水合物(4.138g,82.67mmol)并将反应混合物加热至60℃且保持3小时。将反应混合物用THF稀释并滤过。将固体弃去并将滤液浓缩并将残留物溶解于乙醚(200mL)中。将有机层用水(100mL)洗涤两次。然后将有机层干燥，滤过并浓缩。将粗产物经SiO2(Biotage 65)纯化(用EtOAc/己烷梯度(30-40％EtOAc)洗脱)得到8.85g(88.1％)(S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(4-氯-3-氟苯基)乙胺(68)。
步骤6:(S)-N-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(4-氯-3-氟苯基)乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(70)由68根据在实施例1步骤6中所述的操作制备(1.236g,60％)。
步骤7:向70(1.236g,2.191mmol)在15％MeOH/DCM(75mL)中的溶液中缓慢加入HCl(2.19mL,8.763mmol)并将反应混合物在RT搅拌20分钟。缓慢加入饱和NH4Cl并将所得的溶液用DCM萃取。分离有机层并浓缩。将粗残留物经SiO2色谱法纯化(用MeOH/DCM梯度(4-5％MeOH)洗脱)得到0.841g(85.3％)I-14:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,1H),7.38(t,1H),7.14(dd,1H),7.08(d,1H),5.28(d,1H),4.97(m,1H),4.89(d,1H),4.39(s,2H),4.06-3.90(m,4H),3.86(m,1H),3.76-3.60(m,2H),3.55(dt,2H),2.69(t,2H),2.26(t,1H),2.02(d,2H),1.53(m,2H)；LCMS(ACPI-pos)m/z 450.0(M+H)+。
(S)-N-(1-(3,4-二氯苯基)-2-羟基乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-43)
(R)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3,4-二氯苯基)乙醇(69)由59根据在步骤1-5中的操作制备，除了在步骤2中将(4-氯-3-氟苯基)溴化镁用(3,4-二氯苯基)溴化镁代替之外。69和28的缩合根据在实施例1步骤6中所述的操作进行，得到(S)-N-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3,4-二氯苯基)乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(69a)。
向69a(0.175g,0.301mmol)和DCM(3mL)的溶液中加入6M HCl(0.0110g,0.301mmol)在IPA中的溶液并将反应混合物搅拌2小时，然后倾倒至饱和Na2CO3水溶液中并用DCM萃取。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:30至500:45)洗脱)得到0.030g(21.3％)I-43:MS m/z(APCI-pos)M+1＝466。
实施例11
N-((S)-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)((R)-吡咯烷-2-基)甲基)-2-(异丙基氨基)- 5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-15)
N′-异丙基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺盐酸盐(72)步骤a:在RT在氮气下向丙-2-胺(11.6mL,136mmol)和DMF(70mL)的溶液中加入DIPEA(23.8mL,136mmol)，随后加入吡唑胍(20g,136mmol)。将反应混合物搅拌过夜然后将烧瓶配备有短径蒸馏顶部且将溶剂和残留的DIPEA在60℃在高真空除去。通过将油状物用氯仿(100mL)搅拌来将残留的DMF有效除去。将N-异丙基胍油性析出并浮至顶部。将CHCl3溶液用分液漏斗除去并弃去。获得34g(69,96％的纯度,93％的收率)，其为橙色油状物，其为1:1的氯仿溶剂化物，将其在高真空浓缩且没有进一步纯化即可使用。
步骤b:向21(11.0g,43.25mmol)、EtOH(25mL)和乙醇钠(40.37mL,108.1mmol)的溶液中加入2-异丙基胍盐酸盐-氯仿(1:1络合物,11.12g,43.25mmol)在EtOH(150mL)中的溶液并将溶液在RT搅拌18小时。将溶液真空浓缩并将残留物混悬于水(500mL)中并通过加入饱和NH4Cl水溶液(500mL)将水溶液中和。将溶液用EtOAc(3x250mL)萃取。将合并的萃取物干燥(Na2SO4)，滤过并真空浓缩得到11.6g(78％,85％的纯度)的2-(N′-异丙基-胍基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(70)。
步骤c:在氮气气氛下向70(15.0g,43.6mmol)、DCM(40mL)和MeOH(40mL)的溶液中加入4N HCl在二噁烷中的溶液(50.3mL,210mmol)并将所得的溶液在40℃搅拌18小时。将溶液真空浓缩得到11.4g(90％的纯度,95％的收率)72，其为硬的暗红色固体:MS m/z(APCI-pos)M+1＝193.1。
步骤1:向冷却至-15℃的(R)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-羧酸(11.93g,55.42mmol)和DCM(70mL)的溶液中加入NMM(5.79g,57.3mmol)、氯甲酸乙酯(12.03g,110.8mmol)和DCM(50mL)的溶液并将混合物搅拌15分钟。加入另外的NMM(11.59g,114.5mmol)，随后分批加入O,N-二甲基羟基胺盐酸盐(10.81g,110.8mmol)。将反应混合物在RT搅拌18小时。将反应混合物倾倒至水中并用DCM萃取。将有机层干燥，滤过，并浓缩并将粗残留物经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/己烷(1:1)洗脱)得到9.74g(68.03％)(R)-2-(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(74)。
步骤2:历时10分钟向冷却至-78℃的4-溴-2-氟-1-(三氟甲基)苯(4.854g,19.98mmol)和乙醚(50mL)的溶液中缓慢加入丁基锂(7.990mL,19.98mmol)。将反应混合物经插管转移至冷却至-78℃的74(4.30g,16.65mmol)在THF(50mL)中的溶液中。在加入所有芳基锂之后将反应混合物搅拌10分钟。将反应混合物用水淬灭并用DCM萃取。将有机层浓缩并将粗产物经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/己烷(1-5％EtOAc)洗脱)。通过该纯化并未除去紧密运行的杂质。运行SiO2柱(用Et2O/己烷梯度(1-3％Et2O)洗脱)。杂质仍然存在且最终将化合物在SP4反相柱色谱法上纯化(用MeCN/水梯度(65-100％MeCN)洗脱)得到2.105g(33.2％)(R)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯甲酰基)-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(76)。
步骤3:向冷却至0℃的76(1.797mg,0.004973mmol)和MeOH(50mL)的溶液中加入NaBH4(0.1882mg,0.004973mmol)并将反应混合物在0℃搅拌1小时。将冰缓慢加至将反应混合物中并将所得的混合物搅拌10分钟。将混合物用DCM萃取并浓缩得到粗的(R)-2-((4-氯-3-(三氟甲基)苯基)(羟基)甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(78)，其没有进一步纯化即可使用。
步骤4:(R)-2-((S)-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(80)由78根据在实施例10步骤4中的操作制备，得到1.036g(42％)80。
步骤5:(R)-2-((S)-氨基(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(82)由80根据实施例10步骤5所述的操作制备：收率596mg(78％)。
步骤6:(R)-2-((S)-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)(2-(异丙基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(84)由82和72根据在实施例1步骤6中所述的操作制备，除了将26用72代替得到150mg(58％)84。
步骤7:向84(149mg,0.257mmol)和DCM(2mL)的溶液中加入TFA(19.8μL,0.257mmol)并将反应混合物在RT搅拌7小时。将反应混合物真空浓缩并将所得的残留物在DCM和饱和NaHCO3之间分配。将混合物搅拌15分钟。分离有机层，干燥，滤过，并浓缩得到82mg(66.5％)I-15:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,1H),7.53(t,1H),7.21(m,2H),5.52(d,1H),4.79(m,2H),4.38(m,2H),4.11(m,1H),3.72(m,1H),3.58(m,1H),3.46(m,1H),2.89(m,2H),2.66(t,2H),1.75-1.59(m,3H),1.47(m,1H),1.23(d,6H)；LCMS(ACPI-pos)m/z 481.2(M+H)+。
N-((S)-(3,4-二氯苯基)((R)-吡咯烷-2-基)甲基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡 啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-49)类似地制备，除了在步骤2中将4-溴-2-氟-1-(三氟甲基)苯用4-溴-3,4-二氯-苯代替之外。将产物经SiO2色谱法纯化(用含有1％NH4OH的DCM/MeOH(500:30至500:50)洗脱)得到0.120g(29.2％)I-49:MS m/z(APCI-pos)M+1＝463。
N-((S)-((S)-1-乙酰基吡咯烷-2-基)(4-氯-3-氟苯基)甲基)-2-(异丙基氨基)- 5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-87)
N-((S)-(4-氯-3-氟苯基)((S)-吡咯烷-2-基)甲基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺盐酸盐(83)如上所述制备，除了在步骤2中将4-溴-2-氟-1-(三氟甲基)苯用4-溴-1-氯-2-氟苯代替之外。
将83和Ac2O(6.45μL,0.0683mmol)、TEA(25.9μL,0.186mmol)和DCM(5mL)的溶液搅拌1小时，然后倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:10)洗脱)得到0.020g(65.9％)I-87:MSm/z(APCI-pos)M+1＝489。
(R)-N-(1-(4-氟苯基)乙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7 (8H)-甲酰胺(I-81)
向冷却至0℃的(R)-1-(4-氟苯基)乙胺(0.122g,0.874mmol,CASRN374898-01-8)和DCM的溶液中先后加入TEA(0.366mL,2.62mmol)和CDI(0.142g,0.874mmol)并将溶液搅拌30分钟。将溶液加至DCM(5mL)、72(0.200g,0.874mmol)和TEA(0.366mL,2.62mmol)的溶液中并搅拌18小时。将反应混合物倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(20:1)洗脱)得到0.010g(3.2％)I-81:MS m/z(APCI-pos)M+1＝358。
(R)-N-(1-(3,4-二氯苯基)乙基)-2-(1-甲基哌啶-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并 [3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-83)
N-(1-甲基哌啶-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺二盐酸盐(73)根据在实施例1步骤3-5中的操作制备，除了在步骤3中将四氢-2H-吡喃-4-胺用1-甲基哌啶-4-代替在外。标题化合物根据在实施例1步骤6中的操作制备，除了将28用73代替且将22用185代替之外。将粗产物经SiO2色谱法纯化(DCM/MeOH(含有1％NH4OH)梯度(500:40))得到0.300g(69.1％)I-81:MS m/z(APCI-pos)M+1＝463。
(R)-N-(1-(3,4-二氯苯基)乙基)-2-(2-吗啉代乙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4- d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-88)
N-(2-吗啉代乙基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺二盐酸盐(109)根据在实施例1步骤3-5中的操作制备，除了在步骤3中将四氢-2H-吡喃-4-胺用2-吗啉代乙胺代替之外。标题化合物根据在实施例1步骤6中的操作制备，除了将28用109代替且将22用185代替之外。将粗产物经SiO2色谱法纯化(DCM/MeOH梯度(500:15至500:25))得到0.120g(25.0％)I-88:MS m/z(APCI-pos)M+1＝479。
实施例12
(S)-N-(1-(3,4-二氯苯基)-2-羟基乙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3, 4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-16)
步骤1:向冷却至0℃的1-(3,4-二氯苯基)-2-羟基乙酮(11.86g,57.843mmol,CASRN 113337-38-5)、咪唑(5.91g,86.764mmol)和DMAP(0.71g,5.7843mmol)在DMF(100mL)中的溶液中缓慢加入叔丁基氯二甲基甲硅烷(10.898g,72.304mmol)并将反应混合物在RT搅拌18小时。加入水并将混合物用乙醚萃取。将有机层干燥，滤过，并浓缩。将粗残留物经过SiO2填料纯化(用EtOAc/己烷梯度(10-50％EtOAc)洗脱)得到12.15g(82.0％)2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3,4-二氯苯基)乙酮(84)。将84转化为(S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(4-氯-3-氟苯基)乙胺(85)根据在实施例10步骤3-5中的操作进行，除了在步骤3中将2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(4-氯-3-氟苯基)乙酮(62)用84代替之外。标题化合物由85根据在实施例10步骤6和7中的操作制备，除了在步骤6中使用72代替26且使用85代替68之外，得到136mg(56％)I-16:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(s,1H),7.42(m,2H),7.18(d,1H),5.32(m,1H),4.95(m,1H),4.81(d,1H),4.38(s,2H),4.10(m,1H),3.92(m,1H),3.83(m,1H),3.75-3.60(m,2H),2.67(t,2H),2.55(bs,1H),1.22(d,6H)；LCMS(ACPI-pos)m/z 426.4(M+H)+。
实施例13
(S)-3-(4-氯-3-氟-苯基)-1-(2-异丙基氨基-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶- 7-基)-4-甲基氨基-丁-1-酮(I-17)
步骤1:向4-氯-3-氟苯甲醛(10g,63.07mmol)和乙酸铵(4.861g,63.07mmol)在HOAc(50mL)中的溶液中加入硝基甲烷(14.12mL,252.3mmol)并将反应混合物加热至回流(120℃油浴)且保持18小时。将反应混合物冷却并用水稀释。将反应混合物滤过并将固体经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/己烷梯度(0-5％EtOAc)洗脱)得到1.736g(13.65％)(E)-1-氯-2-氟-4-(2-硝基乙烯基)苯(86)。
步骤2:向冷却至-78℃的LDA的THF溶液(9.70mL,17.46mmol,1.8M在THF中)和THF(40mL)的溶液中逐滴加入(S)-3-乙酰基-4-苄基噁唑烷-2-酮(3.827g,17.46mmol)在THF中的溶液。将反应混合物在-78℃搅拌1小时。然后逐滴加入(E)-1-氯-2-氟-4-(2-硝基乙烯基)苯(3.06g,15.18mmol)在THF(40mL)中的溶液并将反应混合物在-78℃搅拌1小时。将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液淬灭并用DCM萃取。将溶液蒸发并将粗产物经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/己烷梯度(20-50％EtOAc)洗脱)得到2.673g产物。合并混合的馏分并使用相似条件重新进行色谱法纯化得到另外的330mg产物。合并的批次获得3.003g(47.0％)(S)-4-苄基-3-((S)-3-(4-氯-3-氟苯基)-4-硝基丁酰基)噁唑烷-2-酮(88).
步骤3:向88(1.55g,3.68mmol)在EtOAc/EtOH(1:1,50mL)中的溶液中加入兰尼镍混悬液(0.316g,3.68mmol)并将反应混合物用氮气净化然后置于40psi的氢气下且保持20小时。加入第二等份的兰尼镍混悬液(1mL)并将反应混合物置于氢气压力下且保持另外的24小时。加入第三等份的兰尼镍混悬液(1mL)并将反应混合物置于45psi的氢气压力下且保持24小时。将反应混合物经填料滤过并将滤液浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/己烷梯度(10-30％EtOAc)洗脱)得到400mg(50.8％)(S)-4-(4-氯-3-氟苯基)吡咯烷-2-酮(90)。
步骤4:将90(621mg,2.91mmol)、Boc2O(761mg,3.49mmol)、DMAP(35.5mg,0.291mmol)和MeCN(10mL)的溶液在RT搅拌1小时。将反应混合物浓缩并用Et2O稀释。将有机相用1N HCl、随后盐水萃取。将有机层干燥，滤过并真空浓缩得到912mg(100％)(S)-4-(4-氯-3-氟苯基)-2-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(92)，其无需额外纯化即可使用。
步骤5:向92(912mg,2.91mmol)在THF/H2O(2:1；15mL)中的溶液中加入固体LiOH(209mg,8.72mmol)。将反应混合物在RT搅拌18小时。将反应混合物用1M HCl酸化至约pH 2-3，然后用EtOAc萃取两次。将合并的EtOAc层干燥(Na2SO4)，滤过并浓缩得到902mg(93.5％)(S)-4-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-氯-3-氟苯基)丁酸(100)，其没有进一步纯化即可使用。
步骤6:将粉末状KOH(1525mg,27.19mmol)加至DMSO(3mL)中并将所得的混合物在RT搅拌5分钟。向该溶液中加入100(902mg,2.719mmol)随后立即加入碘甲烷(1.35mL,21.75mmol)。将所得的混合物在RT搅拌5小时。将反应混合物用EtOAc稀释并先后用H2O、2MHCl和盐水洗涤。将有机层干燥，滤过，并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用10:1DCM/EtOAc洗脱)。将由此得到的不纯产物在相似条件下重新进行色谱法纯化得到586mg(59.90％)(S)-4-(叔丁氧基羰基(甲基)氨基)-3-(4-氯-3-氟苯基)丁酸甲酯(102)。
步骤7:向102(632mg,1.756mmol)在4:1THF/H2O(5mL)中的溶液中加入3M LiOH水溶液(5.855mL,17.56mmol)。将反应混合物在RT搅拌4小时。将水溶液用2N HCl酸化至约pH2-3然后用EtOAc萃取两次。将合并的萃取物干燥(Na2SO4)，滤过，并浓缩得到598mg(98.46％)(S)-4-(叔丁氧基羰基(甲基)氨基)-3-(4-氯-3-氟苯基)丁酸(104)。
步骤8:向72(102mg,0.401mmol)和104(126mg,0.364mmol)和HATU(152mg,0.401mmol)在DMF(5mL)中的溶液中加入DIPEA(190μL,1.09mmol)。将反应混合物在RT搅拌18小时。将反应混合物用EtOAc稀释并用1M HCl、饱和NaHCO3水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)，滤过并浓缩。将粗产物经反相柱色谱法(SP4)纯化(用MeCN/H2O梯度(5-95％MeCN)洗脱)得到102mg(53.8％)(S)-2-(4-氯-3-氟苯基)-4-(2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-基)-4-氧代丁基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(106)。
步骤9:向106(106mg,0.204mmol)在MeOH(2mL)和少量DCM中的溶液中加入4M HCl在二噁烷中的溶液(764μL,3.06mmol)。将反应混合物在RT搅拌4小时。将反应混合物浓缩并经反相柱色谱法(SP4)纯化(用MeCN/H2O梯度(0-80％MeCN)洗脱)得到50.7mg(54.5％)I-17:LCMS(ACPI-pos)m/z 420.3(M+H)+。
实施例14
N-((1S,2S)-1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2-羟基丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6- 二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-18)
步骤1:将(S)-2-羟基丙酸甲酯(30.0g,288mmol)和吡咯烷(22.5g,317mmol)在RT搅拌3天。将粗产物经过SiO2填料纯化(用80％EtOAc/己烷洗脱)得到41.1g(99.6％)(S)-2-羟基-1-(吡咯烷-1-基)丙-1-酮(108)。
步骤2:向108(41.1g,287.0mmol)、咪唑(29.31g,430.6mmol)和DMAP(3.507g,28.70mmol)在DMF(100mL)中的溶液中缓慢加入叔丁基氯二甲基甲硅烷(54.08g,358.8mmol)并将反应混合物在RT搅拌18小时。加入水并将混合物用Et2O萃取。将有机层干燥，滤过，并浓缩。将所得的残留物经过SiO2填料纯化(用EtOAc/己烷梯度(10-50％EtOAc)洗脱)得到56.93g(77.04％)(S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(吡咯烷-1-基)丙-1-酮(110)。
步骤3:历时10分钟向冷却至-78℃的4-溴-2-氟-1-(三氟甲基)苯(4.93g,20.3mmol)在THF(50mL)中的溶液中缓慢加入丁基锂(8.11mL,20.3mmol,2.5M在己烷中)。将反应混合物经插管转移至冷却的110(4.35g,16.9mmol)在THF(50mL)中的溶液(-78℃)中。在加入所有芳基锂之后将反应混合物搅拌10分钟。将反应混合物用H2O淬灭并用DCM萃取。将有机层浓缩并将所得的残留物经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/己烷梯度(1-5％EtOAc)洗脱)得到不纯的(S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)丙-1-酮(112)，其没有进一步纯化即可使用。
步骤4:向冷却至0℃的112(1.374g,3.921mmol)和Et2O(20mL)的溶液中加入硼氢化锌溶液(8.46mL,1.176mmol)并将反应混合物搅拌2小时。缓慢加入水并将混合物用乙醚萃取。将有机层用水和盐水洗涤然后干燥，滤过，并浓缩得到(1R,2S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)丙-1-醇(114)，其无需另外纯化即可使用。
步骤5:N-((1S,2R)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(116)由114根据在实施例10步骤4-6中所述的操作制备，除了在步骤6中使用72代替28之外，得到116，其无需另外纯化即可使用。
步骤6:向冷却至0℃的116(533mg,0.936mmol)和THF(10mL)的溶液中加入TBAF(1.310mL,1.31mmol)并将反应混合物在RT搅拌45分钟。将反应混合物倾倒至水中并用DCM萃取。将有机层浓缩并将粗产物经SiO2色谱法纯化(用1％MeOH/DCM洗脱)得到269mg(63.1％)I-18:LCMS(ACPI-pos)m/z 420.3(M+H)+。
实施例15
N-((1S,2R)-1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2-羟基丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6- 二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-19)
步骤1:向冷却至0℃的I-18(30.3mg,0.06653mmol)和THF(50mL)的溶液中加入4-硝基苯甲酸(22.24mg,0.1331mmol)和PPh3(26.17mg,0.09979mmol)，随后逐滴加入DEAD(39.28μL,0.09979mmol,40％在甲苯中的溶液)。将反应混合物温热至RT并搅拌20小时然后浓缩干燥。将粗产物经反相柱色谱法纯化(用MeCN/H2O梯度(5-95％MeCN)洗脱)得到不纯的产物，其没有进一步纯化即可用于步骤2中。
步骤2:在RT向(1S,2R)-4-硝基苯甲酸1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1-(2-(异丙基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)丙-2-酯(40mg,0.040mmol)在MeOH(1mL)中的溶液中加入2M K2CO3(40μL,0.079mmol)。将溶液在RT搅拌30分钟。加入水并将反应混合物用DCM萃取。将有机层浓缩并将所得的残留物经反相柱色谱法(SP4)纯化(用MeCH/H2O梯度(5-95％MeCN)洗脱)。将回收的产物进一步经SiO2色谱法纯化(用MeOH/EtOAc(1-3％MeOH)洗脱)得到0.6mg(3.3％)I-19:LCMS(ACPI-pos)m/z 420.3(M+H)+。
实施例16
N-((S)-1-(3-氯-4-氟苯基)-2-羟基乙基)-5-羟基-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-20)
步骤1:将2-(苄基氨基)乙酸乙酯(40g,207mmol)和NaHCO3(20.9g,248mmol)在THF(400mL)和水(30mL)中的溶液加热至50℃。加入1-氯丙-2-酮(23.9g,259mmol)并将反应混合物在50℃搅拌2天。加入水并将溶液用己烷萃取。分离有机层，干燥，滤过，并浓缩得到粗的2-(苄基(2-氧代丙基)氨基)乙酸乙酯(118)，其没有进一步纯化。
步骤2:将118(51.6g,207.0mmol)、Boc2O(47.43g,217.3mmol)和Pd/C(3.5g,32.89mmol)和IPA(200mL)的混悬液在氢气(15psi)下搅拌18小时。将反应混合物经过CELITE填料滤过并将滤液浓缩。将粗产物经过SiO2填料纯化(用EtOAc/己烷梯度(20-25％EtOAc)洗脱)得到26.41g(49.21％)2-(叔丁氧基羰基(2-氧代丙基)氨基)乙酸乙酯(120)。
步骤3:历时1.5小时经加料漏斗向叔丁醇钾(112.0mL,112.0mmol)的冷却的溶液(0℃)中加入120(26.41g,101.9mmol)在乙醚(200mL)中的溶液。将混合物搅拌另外的3小时。将沉淀物滤出并用乙醚洗涤。将固体溶解于水中并将pH用HOAc调节至约4。将固体滤过，用水洗涤，并干燥得到13.16g(60.6％)3,5-二氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(122)。
步骤4:向122(12.39g,58.11mmol)在甲苯(120mL)中的溶液中加入1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺(11.62mL,87.16mmol)并将反应混合物加热至80℃且保持30分钟然后在50℃加热1小时。将反应混合物浓缩得到16.5g(105％)粗的4-((二甲基氨基)亚甲基)-3,5-二氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(124)，其无需另外纯化即可使用。
步骤5:向124(1.88g,5.04mmol)和DIPEA(0.905mL,5.05mmol)在甲苯(10mL)中的溶液中加入69(1.80g,5.04mmol)并回流搅拌1.5小时。将反应混合物浓缩并混悬于水(250mL)中且加入饱和NH4Cl(250mL)。将混合物用EtOAc(3x250mL)萃取。合并有机层，干燥，滤过并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用2％MeOH/DCM洗脱)得到0.605g(27.8％)2-(异丙基氨基)-5-氧代-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(126)。
步骤6:向冷却至0℃的126(400mg,1.31mmol)在MeOH(1mL)中的溶液中缓慢加入NaBH4(49.4mg,1.31mmol)并将反应混合物在RT搅拌15分钟。将反应混合物用水淬灭并将混合物用DCM萃取。将有机层干燥，滤过并浓缩得到400mg(99％)5-羟基-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(128)，其没有进一步纯化即可使用。
步骤7:将128(400mg,1.30mmol)和4N HCl在二噁烷(4mL)中的溶液搅拌1小时。将反应混合物浓缩得到粗的2-(异丙基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-5-醇盐酸盐(130)，其无需另外纯化即可使用。
步骤8:N-((S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3-氯-4-氟苯基)乙基)-5-羟基-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(132)由130根据在实施例1步骤6中的操作制备，除了用(S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3-氯-4-氟苯基)乙胺代替22且用72代替28之外，得到170mg(34.3％)132。
步骤9:向冷却至0℃的132(35mg,0.0650mmol)在THF(1mL)中的溶液中加入TBAF(91μL,0.0911mmol)并将反应混合物在RT搅拌2小时。将反应混合物浓缩并将所得的残留物在反相柱(SP4)上纯化(用MeCN/H2O梯度(5-95％MeCN)洗脱)得到17.2mg(62.4％)I-20:LCMS(ACPI-pos)m/z 424.1(M+H)+。
实施例17
N-((R)-1-(4-氯-3-氟苯基)乙基)-2-((S)-1-羟基丙-2-基氨基)-5,6-二氢吡啶 并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-21)
步骤a:在RT在氮气气氛下向1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐(29.27g,199.7mmol)和DMF(100mL)的溶液中先后加入DIPEA(46.38mL,266.3mmol)和(S)-2-氨基丙-1-醇(10.00g,133.1mmol)在DMF(15mL)中的溶液并将反应混合物搅拌过夜。加入Et2O(150mL)，并搅拌10分钟。弃去乙醚并真空浓缩得到19.8g(98％)(S)-1-(1-羟基丙-2-基)胍(134)，其为橙色油状物，其没有进一步纯化即可使用：MS m/z(APCI-pos)M+1＝118.1。
步骤b:向500mL闪烁瓶中加入21(49.18g,131.5mmol)、EtOH(100mL)和134(19.75g,131.5mmol)然后在45℃搅拌10分钟。当溶液变得均匀时，加入乙醇钠(98.18mL,263.0mmol,21％在EtOH中)并将反应混合物在50℃搅拌18小时。将粗产物浓缩并重新混悬于EtOAc中。将有机相用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，滤过并浓缩得到45g(99％,90％的纯度)(S)-2-(1-羟基丙-2-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(136)，其为橙色固体：MS m/z(APCI-pos)M+1＝309.1。
步骤c:向136(39.5g,128mmol)、DCM(100mL)和MeOH(100mL)的溶液中加入HCl在二噁烷中的4N溶液(160mL,640mmol)并搅拌18小时。将反应混合物浓缩得到红色油状物。将残留物吸收于DCM/7N甲醇化NH3(100mL,9:1)中并将混合物超声5分钟。将无机盐沉淀物经滤过移除并用相同的溶剂洗涤。将滤液浓缩得到粘稠的红色油状物。将粗产物经SiO2色谱法(Biotage 40M)纯化(用DCM/7N甲醇化NH3(7:1)洗脱)。将回收的浅棕色油状物结晶，形成21.2g(95％)(S)-2-(5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基氨基)丙-1-醇(138)，其为棕色固体：MS m/z(APCI-pos)M+1＝209.1。
(R)-1-(4-氯-3-氟-苯基)-乙基胺(140)由1-(4-氯-3-氟苯基)乙酮(CASRN151945-84-5)根据在实施例10步骤3-5中所述的操作制备。140和138的缩合根据在实施例1步骤6中的操作进行，除了用138代替28之外，得到88mg(23％)I-21:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(s,1H),7.34(t,1H),7.12(dd,1H),7.06(d,1H),5.06(d,1H),4.99(t,1H),4.68(d,1H),4.34(s,2H),4.09(m,1H),3.75(dd,1H),3.70-3.58(m,3H),2.66(t,2H),1.48(d,3H),1.25(d,3H)；LCMS(APCI+)m/z 408.1(M+H)+。
N-((R)-1-(4-氯-2,5-二氟苯基)乙基)-2-((S)-1-羟基丙-2-基氨基)-5,6-二氢 吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-22)类似地制备，除了使用(4-氯-2,5-二苯基)乙酮代替1-(4-氯-3-氟苯基)乙酮之外，收率：89mg(26％)。
N-((R)-1-(4-氯-3-氟苯基)丙基)-2-((S)-1-羟基丙-2-基氨基)-5,6-二氢吡啶 并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-38)
(R)-1-(4-氯-3-氟苯基)丙-1-胺盐酸盐(139)根据在实施例1步骤1和2中所述的操作制备，除了在步骤1中将噁唑-5-甲醛用4-氯-3-氟苯甲醛代替之外。(R)-1-(4-氯-3-氟苯基)丙-1-胺和138的缩合根据实施例1步骤6进行，除了将28用代替138且将22用1-(4-氯-3-氟苯基)丙-1-胺代替之外。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:40)洗脱)得到0.30g(75％)I-38:1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ8.06(s,1H),7.51-7.47(t,1H),7.34(d,1H),7.17(d,1H),6.95(d,1H),6.53(d,1H),4.64-4.55(m,2H),4.38-4.26(m,2H),3.93-3.90(m,1H),3.59-3.55(m,2H),3.46-3.31(m,1H),3.29-3.24(m,1H),2.55-2.50(m,2H),1.76-1.63(m,1H),1.08(d,3H),0.84(t,3H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝422。
N-((R)-1-(3,4-二氯苯基)乙基)-2-((S)-1-羟基丙-2-基氨基)-5,6-二氢吡啶并 [3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-44)
185和138的缩合根据实施例1步骤6进行，除了将28用138代替且将22用185代替。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:15至500:25)洗脱)得到0.004g(1.31％)I-44:MS m/z(APCI-pos)M+1＝424。
(S)-N-(3,4-二氯苄基)-2-(1-羟基丙-2-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶- 7(8H)-甲酰胺(I-90)类似地制备，除了使用用于(R)-1-(4-氯-3-氟苯基)丙-1-胺盐酸盐的3,4-二氯苄基胺代替140之外：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.03(s,1H),7.37(m,2H),7.14(m,1H),5.37(dd,1H),5.23(d,1H),4.38(d,2H),4.32(s,2H),4.21(宽单峰,1H),4.06(m,1H),3.64(m,4H),2.63(dd,2H),1.21(d,3H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝410.5。
N-(3-氯-4-氰基苄基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧 啶-7(8H)-甲酰胺(I-94)类似地制备，除了使用4-(氨基甲基)-2-氯苄腈盐酸盐(CASRN202522-15-4)代替140且使用28代替138之外：1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.09(s,1H),7.90(d,J＝8.0Hz,1H),7.59(s,1H),7.47–7.33(m,2H),6.92(d,J＝7.8Hz,1H),4.38–4.28(m,4H),3.85(d,J＝11.2Hz,3H),3.59(d,J＝5.0Hz,2H),3.36(t,J＝11.6Hz,2H),2.57(s,2H),1.80(d,J＝12.1Hz,2H),1.48(dd,J＝20.0,10.9Hz,2H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝427.1。
(R)-N-(1-苯基丙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧 啶-7(8H)-甲酰胺(I-95)类似地制备，除了使用(R)-1-苯基丙-1-胺代替140且使用28代替138之外：1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.07(s,1H),7.34–7.24(m,4H),7.18(t,J＝6.7,1H),6.91(d,J＝8.1,2H),4.58(dd,J＝14.8,8.4,1H),4.42–4.23(m,2H),3.88(dd,J＝19.1,11.1,3H),3.65–3.51(m,2H),3.36(dd,J＝9.3,7.5,2H),2.53(t,J＝6.2,2H),1.85–1.58(m,4H),1.47(qd,J＝11.9,4.2,2H),0.84(t,J＝7.3,3H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝396.2。
(R)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-N-(1-(4-(三氟甲基)苯基)丙基)-5,6-二氢吡 啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-96)类似地制备，除了使用(R)-1-(4-(三氟甲基)苯基)丙-1-胺盐酸盐代替140且使用28代替138之外：1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.07(s,1H),7.65(d,J＝7.8Hz,2H),7.53(d,J＝7.9Hz,2H),7.01(d,J＝7.7Hz,1H),6.88(d,J＝7.9Hz,1H),4.65(dd,J＝14.8,7.3Hz,1H),4.33(q,J＝18.0Hz,2H),3.85(d,J＝11.9Hz,3H),3.59(t,J＝9.5Hz,2H),3.36(t,J＝11.5Hz,2H),2.53(d,J＝9.9Hz,2H),1.72(ddd,J＝20.4,18.9,8.4Hz,4H),1.48(dd,J＝20.4,11.1Hz,2H),0.87(t,J＝7.2Hz,3H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝464.2。
(R)-N-(1-(4-氯苯基)乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-97)类似地制备，除了使用(R)-1-(4-氯苯基)乙胺代替140且使用28代替138之外：1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.07(s,1H),7.34(s,4H),6.97(d,J＝7.5Hz,1H),6.88(d,J＝7.8Hz,1H),4.83(t,J＝6.9Hz,1H),4.32(s,2H),3.85(d,J＝11.3Hz,3H),3.56(t,J＝5.0Hz,2H),3.36(t,J＝11.7Hz,2H),2.53(d,J＝5.3Hz,2H),1.80(d,J＝11.9Hz,2H),1.57–1.43(m,2H),1.36(d,J＝7.0Hz,3H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝416.1。
(R)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-N-(1-(4-(三氟甲基)苯基)乙基)-5,6-二氢吡 啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-98)类似地制备，除了使用(R)-1-(4-(三氟甲基)苯基)乙胺盐酸盐代替140且使用28代替138之外：1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.08(s,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,2H),7.54(d,J＝8.0Hz,2H),7.07(d,J＝7.5Hz,1H),6.89(d,J＝7.7Hz,1H),4.98–4.84(m,1H),4.41–4.27(m,2H),3.85(d,J＝11.1Hz,3H),3.58(s,2H),3.37(t,J＝9.2Hz,2H),2.55(s,2H),1.80(d,J＝13.1Hz,2H),1.48(dd,J＝21.8,9.7Hz,2H),1.40(d,J＝7.1Hz,3H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝450.2。
N-(4-氰基-3-(三氟甲基)苄基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并 [3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-99)类似地制备，除了使用4-氰基-3-三氟甲基-苄基胺(由4-溴-3-(三氟甲基)苯甲醛制备,CASRN 101066-58-4)代替140且使用28代替138之外：1HNMR(400MHz,DMSO)δ8.10(d,J＝9.2Hz,2H),7.87(s,1H),7.76(d,J＝7.9Hz,1H),7.44(t,J＝5.4Hz,1H),6.91(d,J＝7.9Hz,1H),4.40(d,J＝5.4Hz,2H),4.34(s,2H),3.85(d,J＝11.3Hz,3H),3.58(t,J＝5.4Hz,2H),3.36(t,J＝11.5Hz,2H),2.57(t,J＝5.4Hz,2H),1.80(d,J＝12.2Hz,2H),1.48(td,J＝15.6,4.0Hz,2H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝461.1。
(R)-N-(1-(4-氟苯基)丙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3, 4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-100)类似地制备，除了使用(R)-1-(4-氟苯基)丙-1-胺(CASRN374898-01-8)代替140且使用28代替138之外：1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.07(s,1H),7.34(dd,J＝8.6,5.7Hz,2H),7.10(t,J＝8.9Hz,2H),6.91(d,J＝8.0Hz,2H),4.57(dd,J＝15.0,8.3Hz,1H),4.40–4.25(m,2H),3.95–3.81(m,3H),3.66–3.49(m,2H),3.36(dd,J＝11.9,10.1Hz,2H),2.56–2.52(m,2H),1.85–1.59(m,4H),1.47(qd,J＝12.3,4.3Hz,2H),0.83(t,J＝7.3Hz,3H)；m/z(APCI-pos)M+1＝414.2。
(R)-N-(1-(4-氟苯基)乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3, 4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-101)类似地制备，除了使用1-(4-氟苯基)乙胺代替140且使用28代替138之外。使用手性SFC色谱法分离对映异构体得到(R)-N-(1-(4-氟苯基)乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(10％的收率)和(S)-N-(1-(4-氟苯基)乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(15％的收率):1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.08(s,1H),7.35(dd,J＝8.6,5.7,2H),7.10(t,J＝8.9,2H),6.97(d,J＝7.8,1H),6.91(d,J＝7.8,1H),4.84(p,J＝7.1,1H),4.32(s,2H),3.87(dd,J＝16.1,13.2,3H),3.56(t,J＝5.6,2H),3.40–3.35(m,2H),2.57–2.52(m,2H),1.79(d,J＝12.6,2H),1.56–1.41(m,2H),1.36(d,J＝7.1,3H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝400.2。
(R)-N-(1-苯基乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧 啶-7(8H)-甲酰胺(I-102)类似地制备，除了使用(R)-1-苯基乙胺代替140且使用138代替138之外：1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.07(s,1H),7.30(dt,J＝15.1,7.4,4H),7.18(t,J＝7.0,1H),6.95(d,J＝7.8,1H),6.88(d,J＝7.9,1H),4.85(p,J＝7.0,1H),4.33(s,2H),3.85(d,J＝11.9,3H),3.57(t,J＝5.6,2H),3.36(dd,J＝12.5,10.8,2H),2.53(dd,J＝10.1,4.5,2H),1.79(d,J＝12.6,2H),1.48(ddd,J＝15.7,12.1,4.5,2H),1.37(d,J＝7.1,3H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝382.2。
N-((R)-1-(3-氯-4-氟苯基)乙基)-2-((S)-1-羟基丙-2-基氨基)-5,6-二氢吡啶 并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-147)类似地制备，除了使用(R)-1-(3-氯-4-氟苯基)乙胺代替140之外。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用2.5％MeOH/EtOAc洗脱)得到102mg(51％)I-147，其为白色固体：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.84(s,1H),7.35-7.38(m,1H),7.18-7.23(m,1H),7.06-7.11(m,1H),6.23(s,1H),4.95-5.02(m,1H),4.62(d,1H,J＝7.0Hz),4.45(s,2H),3.90-3.98(m,1H),3.71-3.75(m,1H),3.52-3.57(m,3H),2.75(t,2H,J＝5.9Hz),1.48(d,3H,J＝7.1Hz),1.22(d,3H,J＝6.5Hz)；MS(APCI-pos)M+1＝407.5。
实施例18
N-((S)-1-(3,4-二氯苯基)-2,2,2-三氟乙基)-2-((S)-1-羟基丙-2-基氨基)-5, 6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-23)
步骤1:将二氯{(S)-(-)-2,2’-二[二(3,5-二甲苯基)膦基]-1,1’-联萘}[(2S)-(-)-1,1-二(4-甲氧基Ph)-3-Me-1,2-丁二胺]Ru(II)(0402g,0.0329mmol)加至IPA(80mL)、1-(3,4-二氯苯基)-2,2,2-三氟乙酮(8.00g,32.9mmol,CASRN 125733-43-9)、甲苯(15mL)和叔丁醇钾(0.658ml,0.658mmol)在tert-BuOH中的溶液中，所述溶液已经通过使得氮气鼓泡经过小瓶而脱气。将烧杯置于高压灭菌器中并通过使用氮气循环的三次真空填充将其净化。将氢气引入150psi压力的高压灭菌器中，然后通过缓慢释放截止阀将压力减小至20psi。在重复该操作三次后，将高压灭菌器加压至240psi(将氢气再填充至200psi，然后压力下降至160psi)。将反应混合物在RT剧烈搅拌64小时。释放压力并除去溶剂。将残留物溶解于乙醚(200mL)中，用盐水(100mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，滤过并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/己烷(2:1)洗脱)得到7.31g(90.6％)固体(R)-1-(3,4-二氯苯基)-2,2,2-三氟乙醇(142)。
步骤2:历时30分钟向冷却至-10℃的142(7.10g,29.0mmol)和2,6-二甲基吡啶(4.97g,46.4mmol)在环己烷(20mL)中的溶液中加入三氟甲磺酸酐(12.3g,43.5mmol)。将反应混合物在0℃搅拌90分钟，用H2O淬灭并将混合物用DCM萃取。将有机层干燥，滤过并浓缩得到(R)-三氟甲磺酸1-(3,4-二氯苯基)-2,2,2-三氟乙酯(144)，其无需另外纯化即可使用。
步骤3:将144(10.9g,28.9mmol)、K2CO3(5.99g,43.4mmol)和(3,4-二甲氧基苯基)甲胺(6.77g,40.5mmol)在环己烷(200mL)中的溶液加热至65℃且保持24小时。加入水并将有机层浓缩并将粗产物经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/己烷(5至20％EtOAc)洗脱)得到4.11g(36.1％)1-(3,4-二氯苯基)-N-(3,4-二甲氧基苄基)-2,2,2-三氟乙胺(146)。
步骤4:向146(4.11g,10.43mmol)在DCM(50mL)中的溶液中加入TFA(2.410ml,31.28mmol)并将反应混合物在RT搅拌18小时。将反应混合物浓缩并溶解于DCM中。加入HCl溶液(20mL,2M Et2O)并将溶剂由固体弃去。将固体溶解于15％MeOH/DCM中并加入饱和NaHCO3。分离有机层并浓缩。将残留物用EtOAc研磨并使其静置。将所得的固体滤过得到1.904g(74.8％)1-(3,4-二氯苯基)-2,2,2-三氟乙胺(148)。
步骤5:将148(1.00g,4.01mmol)、氯甲酸4-硝基苯酯(0.9085g,4.507mmol)和吡啶(0.7131g,9.015mmol)在DCM(10mL)中的溶液搅拌30分钟。加入水并将反应混合物用DCM萃取。将有机层浓缩并经SiO2色谱法纯化(用20％EtOAc/己烷洗脱)得到1.511g(90.0％)1-(3,4-二氯苯基)-2,2,2-三氟乙基氨基甲酸4-硝基苯酯(150)。
步骤7:将(S)-2-(5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基氨基)丙-1-醇(138,0.215g,1.03mmol)、TBDMS-Cl(0.171g,1.14mmol)和TEA(0.216ml,1.55mmol)和DCM(5mL)的溶液搅拌18小时，倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过，并浓缩得到粗产物，将其经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:50)洗脱)得到0.220g(66.1％)(S)-N-(1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丙-2-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺(152)。
步骤8:(S)-N-(1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丙-2-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺(152)和150的缩合根据在实施例1步骤6中的操作进行，除了使用152代替28并使用150代替22之外，得到89mg(72％)2-((S)-1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丙-2-基氨基)-N-((S)-1-(3,4-二氯苯基)-2,2,2-三氟乙基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(154)。
步骤9:向154(111mg,0.187mmol)在DCM和TBAF(187μL,0.187mmol)中的溶液中并将溶液在RT搅拌3小时。将反应混合物用水淬灭并用DCM萃取。将有机层干燥，滤过并浓缩。将粗产物在SP4反相柱色谱法纯化(用MeCN/H2O梯度(5-90％MeCN)洗脱)得到26.7mg(29.8％)I-23:LCMS(APCI+)m/z 480.5(M+H)+。
2-((S)-2-羟基-1-甲基-乙基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸 [(R)-1-(3-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙基]-酰胺(I-64)可根据在实施例1步骤6中所述的操作制备，除了使用152代替28并使用143代替22，得到I-64:MS m/z(APCI-pos)M+1＝442。1-(4-三氟甲基-3-氟苯基)乙酮(CASRN 204339-72-0)可由4-三氟甲基-3-氟苯甲醛根据在实施例1步骤1-3中的操作制备。(R)-1-(4-三氟甲基-3-氟-苯基)-乙基胺(143)可由1-(4-三氟甲基-3-氟苯基)乙酮(143a,CASRN 237761-81-8)根据在实施例10步骤3-5中所述的操作制备。
2-((S)-2-羟基-1-甲基-乙基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸 [(R)-1-(3-氯-5-氟-苯基)-乙基]-酰胺(I-65)可根据在实施例1步骤6中所述的操作制备，除了使用152代替28并使用145代替22，得到I-64:MS m/z(APCI-pos)M+1＝408。(R)-1-(5-氯-3-氟-苯基)-乙基胺(145)可由1-(5-氯-3-氟苯基)乙酮(CASRN 842140-52-7)根据在实施例10步骤3-5中所述的操作制备。
实施例19
N-((R)-1-(3,4-二氯苯基)丙基)-2-((S)-1-羟基丙-2-基氨基)-5,6-二氢吡啶并 [3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-24)
步骤1:向冷却至0℃的THF(100mL)和2,2′-氧基二(N,N-二甲基乙胺)(9.18g,57.3mmol)的溶液中加入乙基溴化镁(19.1mL,57.3mmol,3N在THF中)并搅拌10分钟。将溶液冷却至-60℃并历时10分钟逐滴加入3,4-二氯苯甲酰基氯(10.0g,47.7mmol)在THF(20mL)中的溶液。将反应混合物搅拌1小时，通过加入饱和NH4Cl进行淬灭并用EtOAc萃取。将合并的萃取物干燥(Na2SO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法(Biotage 40M)纯化(用EtOAc/己烷梯度(2-10％EtOAc)洗脱)得到6.0g(85％,53％的纯度)1-(3,4-二氯苯基)丙-1-酮(156)，其为澄清油状物，其无需另外纯化即可使用。
步骤2:向250mL圆底烧瓶中加入MTBE(35mL)，然后将(R)-1-甲基-3,3-二苯基六氢吡咯并[1,2-c][1,3,2]氧氮杂硼杂环戊二烯(2.51mL,2.51mmol)和甲硼烷二乙基苯胺(4.45mL,25.1mmol)的溶液在RT加热至40℃。逐滴加入156(6.00g,25.1mmol)在MTBE(20mL)中的溶液并将反应混合物在40℃搅拌3小时。将反应混合物冷却至RT然后缓慢加入MeOH(5mL)，随后加入1M HCl并将反应混合物搅拌18小时。除去水并将残留的有机相干燥(Na2SO4)，滤过并浓缩得到浅灰色油状物。将粗产物经SiO2色谱法(SNAP100)纯化(用EtOAc/己烷(1:3)洗脱)得到3.45g(66％)(S)-1-(3,4-二氯苯基)丙-1-醇(158)，其为澄清油状物。
步骤3:向冷却至0℃的158(3.45g,16.5mmol)和THF(45mL)的溶液中加入异二氢吲哚-1,3-二酮(2.67g,18.1mmol)和PPh3(6.49g,24.7mmol)，随后逐滴加入纯的DIAD(6.67g,33.0mmol)。将反应混合物温热至RT并搅拌18小时。将反应混合物与NaOH2N(50mL)和DCM(50mL)搅拌2小时(乳液)，然后用DCM萃取。将合并的有机馏分干燥(Na2SO4)，滤过，并浓缩。将残留物用己烷/EtOAc(1:1)研磨并将析出的POPh3滤过。将滤液浓缩并进行色谱法(Isolera)纯化(用己烷/EtOAc(9:1)洗脱)得到2.05g(32％)(R)-2-(1-(3,4-二氯苯基)丙基)异二氢吲哚-1,3-二酮(160)。
步骤4:在RT向160(2.05g,5.21mmol)和THF:MeOH(1:1,40mL)的溶液中加入肼一水合物(1.31mL,26.1mmol)并将反应混合物加热至50℃并搅拌24小时。加入THF(20mL)并将析出的酞酰亚胺滤过并弃去。将滤液用盐水洗涤，用DCM萃取并合并有机相，干燥(Na2SO4)，滤过并浓缩得到1.18g(89％)(R)-1-(3,4-二氯苯基)丙-1-胺(162)，其为粘稠的黄色油状物。Mosher酰胺的19F NMR表明93％的ee(基于在-69.28和-69.31的峰)。
步骤5:向小瓶中加入CDI(0.584g,3.60mmol)、162(0.735g,3.60mmol)、DIPEA(1.88mL,10.8mmol)、DCM(7mL)和DMF(2mL)。将溶液搅拌30分钟并加入138(0.750g,3.60mmol)、DIPEA(1.88mL,10.8mmol)在DCM(3mL)中的溶液。将反应混合物搅拌18小时，用盐水(4mL)洗涤并将有机相真空浓缩。将残留物混悬于EtOAc中并用盐水(2x50mL)洗涤，然后浓缩。将粗产物在反相液相色谱柱(Horizen C18 biotage 40M)上纯化(用MeCN/H2O(1:1)洗脱)。将产物用～50％MeCN/50％水洗脱，得到0.905g(55％)I-24，其为浅黄色固体：1HNMR(400MHz,CD3OD)(s,1H),7.44(m,1H),7.39(d,1H),7.19(d,1H),4.58(m,1H),4.39(m,2H),4.04(m,1H),3.61(m,4H),2.61(t,3H),1.77(m,2H),1.16(d,3H),0.89(t,3H)；MSm/z(APCI-pos)M+1＝438.1。
N-((R)-1-(3,4-二氯苯基)-2-甲基丙基)-2-((S)-1-羟基丙-2-基氨基)-5,6-二 氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-32)类似地制备，除了在步骤1中使用异丙基溴化镁代替乙基溴化镁之外，得到0.70g(95％)1-(3,4-二氯苯基)-2-甲基丙-1-胺:m/z(APCI-pos)M+1＝217.8。
1-(3,4-二氯苯基)-2-甲基丙-1-胺和138缩合得到I-32。将粗产物经反相色谱法(SP4 C18 Biotage 40M柱，用MeCN/H2O梯度(在约50％MeCN洗脱)纯化得到(73mg)标题化合物。实现手性HPLC分离(使用Tech IC柱,4.6mmX250mm,1mL/min,220nM，用己烷/EtOH(6:4)洗脱，流速为1mL/min)。峰在4.7min和5.9min洗脱。将回收的油状物再次在SP4 Biotage25M柱纯化(用MeCN/H2O梯度(0-70％MeCN)洗脱，30倍柱体积)得到0.010g(32％)I-32，其为白色固体：1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.00(s,1H),7.45(m,1H),7.39(d,1H),7.20(m,1H),6.81(d,1H),4.35(m,3H),4.03(m,1H),3.60(m,2H),3.51(m,2H),3.31(s,2H),2.60(t,2H),2.01(m,1H),1.16(d,3H),1.01(d,3H),0.71(d,3H)；m/z(APCI-pos)M+1＝452.1。
实施例20
N-(1-(3,4-二氯苯基)-3,3,3-三氟丙基)-2-((S)-1-羟基丙-2-基氨基)-5,6-二 氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-34)
向40mL小瓶中加入CDI(0.584g,3.60mmol)、1-(3,4-二氯苯基)-3,3,3-三氟丙-1-胺(0.929g,3.60mmol)、DIPEA(1.88mL,10.8mmol)、DCM(7mL)和DMF(2mL)。将混合物搅拌30分钟，然后加入138(0.750g,3.60mmol)和DIPEA(1.88mL,10.8mmol)在DCM(3mL)中的溶液并将混合物搅拌18小时。将反应混合物用盐水(4mL)洗涤并将有机相分离并浓缩。将残留物重新混悬于EtOAc中并用盐水(2x50mL)洗涤并真空浓缩。将粗产物经反相色谱法(HorizenC18 Biotage 40M)纯化(用MeCN/H2O梯度(在50％MeCN洗脱)洗脱)得到925mg，将其经手性HPLC色谱法分离并如在实施例19中重新纯化，得到0.212g(23％)I-34，其为白色固体：1HNMR(400MHz,CD3OD)δ8.06(s,1H),7.55(m,1H),7.49(d,1H),7.31(m,1H),5.20(m,1H),4.41(q,2H),4.06(m,1H),3.65(t,2H),3.56(m,2H),2.79(m,4H),1.20(d,3H)；m/z(APCI-pos)M+1＝492.0。
实施例21
N-((R)-1-(3,4-二氯苯基)丙基)-2-((1S,3S)-3-羟基环戊基氨基)-5,6-二氢吡 啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-25)
步骤1:在RT在氮气下向(1S,3S)-3-氨基环戊醇(9.00g,89.0mmol)(由ASIDPharmaceuticals获得)在DMF(45mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(31.0mL,178mmol)，随后加入1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐(14.7g,133mmol)。在搅拌过夜后，加入Et2O(150mL)并将反应混合物搅拌10分钟。弃去Et2O并在高真空浓缩得到21g(99％)1-((1S,3S)-3-羟基环戊基)胍(164)，其为深橙色油状物：MS m/z(APCI-pos)M+1＝144.1。
步骤2:将21(10.99g,41.90mmol)、EtOH(10mL)和1-((1S,3S)-3-羟基环戊基)胍(10.0g,41.90mmol)的溶液在45℃搅拌10分钟。当溶液为均匀时，加入乙醇钠(31.29mL,83.81mmol,21％在EtOH中)并将反应混合物在45℃搅拌18小时。将粗物质浓缩并重新混悬于EtOAc中。将有机相用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，滤过并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法(Biotage 25M)纯化(用EtOAc/MeOH(9:1)洗脱)得到10.9g(50％)2-((1S,3S)-3-羟基环戊基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(166)，其为黄色泡沫状物：MSm/z(APCI-pos)M+1＝335.1。
步骤3:向166(10.85g,21.09mmol)、DCM(100mL)和MeOH(10mL)的溶液中加入HCl/二噁烷(26.36mL,105.4mmol,4N溶液在二噁烷中)并将反应混合物搅拌18小时。将溶液浓缩得到红色油状物。向残留物中加入DCM/甲醇化NH3(100mL,9:1,7N)，并将混合物超声5分钟。将滤液浓缩得到粘稠的红色油状物。将粗产物经SiO2色谱法(Biotage 40M)纯化(用DCM/7N甲醇化:NH3(4:1，然后9:1的溶液)洗脱)得到4.1g(80％)(1S,3S)-3-(5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基氨基)环戊醇(168)，其为浅棕色油状物：MS m/z(APCI-pos)M+1＝235.2。
步骤4:标题化合物根据实施例1步骤6制备，除了将22用168代替。将粗产物经制备性TLC(2.0mm厚度)纯化(用EtOAc/MeOH(9:1)展开)并洗脱出产物，其具有约0.6的Rf，得到白色固体0.026g(24％的收率)I-25:1H NMR(400MHz,CDCl3)(s,1H),7.38(m,2H),7.16(m,1H),5.00(m,1H),4.91(m,1H),4.73(m,1H),4.50(m,2H),4.33(s,2H),3.64(m,2H),3.48(s,1H),2.64(m,2H),2.4-1.4(m,8H),0.91(t,3H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝464.1。
N-((R)-1-(3,4-二氯苯基)乙基)-2-((1S,3S)-3-羟基环戊基氨基)-5,6-二氢吡 啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-42)
185和168的缩合根据实施例1步骤6进行，除了将28用168代替并将22用185代替。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:15至500:30)洗脱)得到0.066g(61.3％)I-42:MA m/z(APCI-pos)M+1＝450。
N-((R)-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)丙基)-2-((1S,3S)-3-羟基环戊基氨基)-5, 6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-37)
(R)-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)丙-1-胺(167)可根据在实施例19步骤1-4中所述的操作制备，除了在步骤1中使用3-氟-4-三氟甲基-苯甲酰基氯代替3,4-二氯苯甲酰基氯。167和168的缩合根据实施例19步骤5进行，除了将162用167代替并将132用168代替。将产物在制备性SiO2TLC板(1.0mm厚度)上纯化(用EtOAc/MeOH(9:1)展开)得到0.030g(48％)I-42，其为白色固体：1H NMR(400MHz,CDCl3)(s,1H),7.53(t,1H),7.17(m,2H),5.03(m,2H),4.80(m,1H),4.49(m,2H),4.35(s,2H),3.65(m,2H),2.65(t,2H),2.13(m,4H),1.81(m,2H),1.68(m,2H),1.44(m,1H),0.93(t,3H)；m/z(APCI-pos)M+1＝482.1。
N-((R)-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-((1S,3S)-3-羟基环戊基氨基)-5, 6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-52)类似地制备。将粗产物将反相色谱法(12MHorizen C18柱)分离(用MeCN/H2O(产物用约25％MeCN洗脱)洗脱)得到0.059g(48％)I-52，其为白色固体：1H NMR(400MHz,CD3OD)(s,1H),7.55(t,1H),7.25(m,2H),6.97(d,1H),4.93(m,1H),4.40(m,3H),4.31(m,1H),3.61(m,2H),2.60(t,2H),2.17(m,1H),2.00(m,2H),1.68(m,1H),1.56(m,1H),1.45(m,4H)；m/z(APCI-pos)M+1＝468.2。
实施例22
N-((R)-1-(3,4-二氯苯基)乙基)-2-((1R,4R)-4-羟基环己基氨基)-5,6-二氢吡 啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-26)
(1R,4R)-4-(5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基氨基)环己醇(170)根据实施例21步骤1-3制备，除了使用(1R,4R)-4-氨基环己醇代替(1S,3S)-3-氨基环戊醇。
N-((R)-1-(3,4-二氯苯基)乙基)-2-((1R,4R)-4-羟基环己基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-26)由170根据在实施例1步骤6中所述的操作制备。收率29.1mg(8％)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(s,1H),7.40(m,2H),7.17(dd,1H),5.48(m,1H),4.78(d,1H),4.66(d,1H),4.33(s,2H),3.78(m,1H),3.71-3.58(m,3H),2.66(t,2H),2.13(d,2H),2.01(d,2H),1.43(m,4H),1.43(m,2H),1.26(m,2H)；LCMS(APCI+)m/z 466.5(M+H)+。
实施例23
(R)-N-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)丙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢 吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-27)
(R)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)丙-1-胺由4-(二氟甲氧基)苯甲醛根据在实施例1步骤1和2中的操作制备。(R)-1-(4(二氟甲氧基)苯基)丙-1-胺和28的缩合根据实施例1步骤6进行。将产物经反相色谱法(SP4 C18)纯化(用MeCN/H2O梯度(1至60％MeCN)洗脱，30倍柱体积)，得到0.113g(56％)I-27:1H NMR(400MHz,CDCl3)(s,1H),7.30(d,2H),7.08(d,2H),6.48(t,1H),5.02(d,1H),4.89(m,2H),4.34(s,2H),4.02(m,3H),3.62(m,4H),2.66(m,2H),2.03(m,2H),1.81(m,2H),0.92(m,2H),0.90(t,3H))；MS m/z(APCI-pos)M+1＝462.1。
实施例24
(R)-N-(1-(3,4-二氯苯基)-3-甲氧基丙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6- 二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-28)
步骤1:在氮气气氛下以保持内部温度在20℃的速率(加入10分钟)向冷却至0℃的(R)-3-氨基-3-(3,4-二氯苯基)丙酸(10.0g,42.7mmol,CASRN909709-44-0)和THF(57.0mL,42.7mmol)的溶液中逐滴加入LiAlH4(32.0mL,32.0mmol,1M在THF中的溶液)。将反应混合物在0℃搅拌1小时，然后温热至RT并搅拌过夜。将反应混合物用2M HCl(20mL)淬灭然后先后加入2M NaOH(30mL)和盐水(50mL)。将白色固体经过CELITE滤过除去并用THF(100mL)和EtOAc(50mL)淋洗。将有机相干燥(Na2SO4)，滤过并浓缩得到5.25g(56％)(R)-3-氨基-3-(3,4-二氯苯基)丙-1-醇(172)，其为浅黄色油状物，其没有进一步纯化即可使用：MS m/z(APCI-pos)M+1＝220.0。
步骤2:向172(5.00g,22.7mmol)、NaOH(2M aq)(34.1mL,68.2mmol)在THF(50mL,22.7mmol)中的溶液中加入Boc2O(5.45g,25.0mmol)并将反应混合物搅拌在RT过夜。加入另外的NaOH(2M aq)(34.1ml,68.2mmol)，将pH稳定在约12。加入另外的Boc2O(3.0g)并将pH保持在约12。3小时后，加入Et2O并将有机相干燥(Na2SO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法(SNAP 100)纯化(用EtOAc/己烷(1:1)洗脱)得到3.40g(41％)(R)-1-(3,4-二氯苯基)-3-羟基丙基氨基甲酸叔丁酯(174)，其为黄色固体：ee约90％(手性HPLC，使用OJ柱)。
步骤3:向冷却至0℃且保持在氮气气氛下的174(2.22g,6.93mmol)和THF(30mL)的溶液中加入NaH(0.333g,8.32mmol,60％在矿物油中)。移去冰浴并将溶液搅拌30分钟，然后加入MeI(0.519mL,8.32mmol)并将黄色溶液搅拌过夜。将反应混合物用H2O稀释并用Et2O萃取。将合并的萃取物干燥(Na2SO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法(SNAP50)纯化(用己烷/EtOAc(4:1)洗脱)，得到0.660g(28％)(R)-1-(3,4-二氯苯基)-3-甲氧基丙基氨基甲酸叔丁酯(176)，其为浅黄色油状物。
步骤4:根据在施例1步骤5中的操作对176进行脱保护，得到0.375g(80％)(R)-1-(3,4-二氯苯基)-3-甲氧基丙-1-胺(178):m/z(APCI-pos)M+1＝234.0。
步骤5:178和28的缩合根据实施例1步骤6进行。将粗产物加载至SiO2柱上并用MeOH/DCM(1:4)洗脱，然后再次在反相柱(SP4 C18)上纯化(用MeCN/H2O梯度(1-70％MeCN)洗脱)得到0.013g(12％)I-28，其为白色固体：1H NMR(400MHz,CDCl3)(s,1H),7.36(m,2H),7.13(m,1H),6.29(d,2H),4.93(m,2H),4.36(q,2H),3.99(m,3H),3.57(m,6H),3.38(s,3H),2.67(t,2H),2.07(m,2H),1.90(m,1H),1.55(m,2H)；m/z(APCI-pos)M+1＝494.1。
实施例25
(R)-N-(1-(3,4-二氯苯基)乙基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基氨基)-5,6-二氢吡啶 并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-29)
步骤1:在RT在氮气下经注射器向(E)-(1H-吡唑-1-基)亚甲二基二氨基甲酸苄酯(1.95g,5.15mmol,CASRN 152120-55-3)在THF(10mL)中的搅拌溶液中加入DIPEA(2.24mL,12.9mmol)。将混合物搅拌2小时然后加入1-甲基-1H-吡唑-5-胺(0.500g,5.15mmol)并搅拌3天。将反应混合物用EtOAc稀释为50mL，并先后用2N HCl(2x50mL)、饱和NaHCO3水溶液(2x50mL)和盐水(1x50mL)洗涤。将有机相分离，干燥(MgSO4)，滤过并浓缩得到1.00g(90％的纯度,43％)(Z)-(苄基氧基羰基氨基)(1-甲基-1H-吡唑-5-基氨基)亚甲基氨基甲酸苄酯(180)，其为白色固体，其没有进一步纯化即可使用:MS m/z(APCI-pos)M+1＝408.3。
步骤2:在RT向180(1.00g,2.45mmol)在EtOH/THF(1:1,35mL)中的搅拌溶液中加入Pearlman催化剂(0.172g,0.245mmol)。对混合物进行真空/净化(使用氢气)循环三次，然后保持在1个气压的氢气囊下。搅拌过夜后，使用EtOH使反应混合物经过GF/F滤纸滤过，并将滤液浓缩得到0.31g(90％)1-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)胍(182)，其为无色玻璃状物，其没有进一步纯化即可使用:MS m/z(APCI-pos)M+1＝140.0。
步骤3:向密封压力管中加入在RT用氮气冲洗的182(0.310g,2.23mmol)在THF/EtOH(1:1,10mL)中的溶液并加入21(0.567g,2.23mmol)。将溶液温热至100℃且保持24小时。将反应混合物冷却至RT并浓缩得到0.556g(70％)2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯，其为白色玻璃状固体：MS m/z(APCI-pos)M+1＝331.1。
步骤4:向2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(0.556g,1.68mmol)在DCM/EtOH 5mL,1:1)中的溶液中加入4N HCl在二噁烷中的溶液(4.21ml,16.8mmol)并将溶液搅拌18小时。将反应混合物浓缩得到橙色固体，将其通过与7N NH3/MeOH搅拌来中和并用DCM洗涤。将沉淀物滤过并经SiO2色谱法(SNAP25)纯化(用MeOH/DCM梯度(0-20％MeOH)洗脱)得到0.223g(75％的纯度,44％的收率)N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺(184)，其为浅黄色固体：MS m/z(APCI-pos)M+1＝231.2。
步骤5:向小瓶中加入(R)-1-(3,4-二氯苯基)乙胺(185,0.046g,0.24mmol,CASRN150520-10-8)、CDI(0.040g,0.24mmol)、DIPEA(0.085ml,0.49mmol)和DCM(1mL)，密封并搅拌30分钟。加入184(0.075g,0.24mmol)、DIPEA(0.085ml,0.49mmol)和DCM(1mL)的溶液。将反应混合物搅拌5小时，用盐水(4mL)洗涤，并加载至制备性SiO2TLC(1.0mm厚度)上。将板用EtOAc/MeOH(95:5)展开，得到0.0041g(4％)I-29:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.21(s,1H),7.48(m,3H),7.19(m,1H),6.76(s,1H),6.27(s,1H),4.97(m,1H),4.76(m,1H),4.38(s,2H),3.76(s,3H),3.69(m,2H),2.73(m,2H),1.49(m,3H)；m/z(APCI-pos)M+1＝446.0。
(R)-N-(1-(3,4-二氯苯基)乙基)-2-(1-乙基-1H-吡唑-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶 并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-30)类似地制备，除了在步骤1中将1-甲基-1H-吡唑-5-胺用1-乙基-1H-吡唑-4-胺代替之外。将I-30在制备性SiO2 TLC(1.0mm厚度)上纯化并用EtOAc/MeOH(95:5)展开得到0.0185g(12％)产物，其为澄清玻璃状物：1H NMR(400MHz,CDCl3)(s,1H),7.82(s,1H),7.50(s,1H),7.42(m,1H),7.38(d,1H),7.19(m,1H),7.03(s,1H),4.94(m,2H),4.43(s,1H),4.15(q,2H),3.67(m,2H),2.70(t,2H),1.49(m,6H)；m/z(APCI-pos)M+1＝460.1。
(R)-N-(1-(3,4-二氯苯基)乙基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-31)类似地制备，除了在步骤1中将1-甲基-1H-吡唑-5-胺用1-甲基-1H-吡唑-4-胺代替之外。将I-31经SiO2色谱法(Biotage)纯化(用MeOH/EtOAc(5/95)洗脱)得到82mg(86％)I-31。
实施例26
N-((R)-1-(3,4-二氯苯基)-3-羟基丙基)-2-((S)-1-羟基丙-2-基氨基)-5,6-二 氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-33)
步骤1:向圆底烧瓶中加入(R)-3-氨基-3-(3,4-二氯苯基)丙-1-醇(9.25g,42.0mmol,CASRN 147611-61-8)、DMAP(0.513g,4.20mmol)和DCM(84.1mL)，然后加入TBDMS-Cl(6.65g,44.1mmol)和DCM(10mL)的溶液。将反应混合物在RT搅拌2天。将反应混合物倾倒至水中并用DCM萃取。将有机萃取物干燥(Na2SO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:8至500:10)洗脱)得到10.2g(72％)(R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3,4-二氯苯基)丙-1-胺(186):m/z(APCI-pos)M+1＝334.0。
手性ee分析使用Mosher酰胺进行(将胺与Mosher酰基氯、DIPEA和CDCl3搅拌15分钟)。与外消旋化合物相比较，在-69.26和-69.33峰的19F NMR分析表明ee为81％。得到(R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3,4-二氯苯基)丙-1-胺10.2,(100％的纯度,72％的收率)。
步骤2:向小瓶中加入186(0.161g,0.480mmol)、CDI(0.0779g,0.480mmol)、DIPEA(0.167ml,0.960mmol)和DCM(1mL)。将溶液搅拌30分钟然后加入(S)-2-(5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基氨基)丙-1-醇(0.100g,0.480mmol)、DIPEA(0.167ml,0.960mmol)和DCM(1mL)的溶液并将溶液搅拌过夜。将反应混合物用盐水(4mL)洗涤并加载至制备性SiO2TLC(1.0mm厚度)上并用DCM/MeOH(9:1)展开。将产物洗脱，得到83mg产物，其为甲硅烷基醚，将其用DCM/MeOH(4:1.5mL)稀释并加入4N HCl/二噁烷溶液并将反应混合物搅拌4小时。除去可挥发的溶剂并将粗产物在制备性SiO2板上纯化并用DCM/7M甲醇化NH3(9:1)展开且洗脱。将回收的物质进一步癌Biotage 12M Horizen C18柱上纯化(用MeCN/H2O(～20-25％(H2O/MeCN)洗脱)得到0.045g(20％)I-33:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.99(s,1H),7.46(m,1H),7.38(d,1H),7.23(m,1H),4.91(m,1H),4.79(s,2H),4.36(q,2H),4.03(m,1H),3.53(m,6H),2.59(m,2H),1.94(m,2H),1.16(d,3H)；m/z(APCI-pos)M+1＝454.1。
实施例27
(R)-N-(1-(3,4-二氯苯基)乙基)-2-(2-乙氧基吡啶-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并 [3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-35)
N-(2-乙氧基吡啶-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺(186)根据在实施例25步骤1-4中所述的操作制备，除了在步骤1中将1-甲基-1H-吡唑-5-胺用2-乙氧基吡啶-4-胺代替之外。
向小瓶中加入185(0.105g,0.553mmol)、CDI(0.0896g,0.553mmol)和DCM(2mL)并搅拌30分钟。向溶液中加入186(0.150g,0.553mmol)和DIPEA(0.193ml,1.11mmol)并将所得的反应混合物搅拌3天。将反应混合物用盐水(4mL)洗涤，并将有机相浓缩并加载至制备性SiO2板(1.0mm厚度)上，将其用EtOAc/MeOH(95:5)展开并洗脱得到0.038g(13％)I-35:1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.23(s,1H),7.96(d,1H),7.73(s,1H),7.44(m,1H),7.35(d,1H),7.29(m,1H),7.20(m,1H),6.95(m,1H),5.40(d,1H),5.00(m,1H),4.49(s,1H),4.36(q,2H),3.68(m,2H),2.72(d,2h),1.49(d,3H),1.39(t,3H)；m/z(APCI-pos)M+1＝487.2。
实施例28
(R)-N-(1-(3,4-二氯苯基)乙基)-2-(2-甲基吡啶-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并 [3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-36)
2-氨基-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(187)根据在实施例1步骤4中所述的操作制备，除了将24用胍代替之外。
步骤1:向试管中加入187(300mg,1.20mmol)、Pd(dba)2(34.5mg,0.0599mmol)、Binap-rac(74.6mg,0.120mmol)、4-氯-2-甲基吡啶(229mg,1.80mmol)和NaO-tert-Bu(230mg,2.40mmol)和甲苯(3mL)，密封，用氮气脱气5分钟，然后加热至90℃且保持4小时。将反应混合物冷却并经填料滤过。将滤液浓缩并经反相柱色谱法(SP4)纯化(用MeCN/H2O梯度(5-85％MeCN)洗脱)得到136mg(33.2％)2-(2-甲基吡啶-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(188)。
步骤2:将188(136mg,0.398mmol)和TFA(2mL)的溶液搅拌15分钟。将反应混合物浓缩得到N-(2-甲基吡啶-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺(190)，其无需另外纯化即可使用。
步骤3:190和185的缩合根据在实施例1步骤6中的操作进行得到70mg(72％)I-36:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.35(d,1H),8.29(s,1H),7.44-7.35(m,3H),7.19(dd,1H),7.14(s,1H),5.00(m,1H),4.74(d,1H),4.50(s,2H),3.70(m,2H),2.78(t,2H),2.54(s,3H),1.50(d,3H)；LCMS(APCI+)m/z461.1(M+H)+。
实施例29
(S)-N-(1-(3,4-二氯苯基)-2-甲氧基乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6- 二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-41)
步骤1:向冷却至0℃的2-甲氧基乙酰基氯(10g,92.1mmol)和DCM(100mL)的溶液中加入N,O-二甲基羟基胺盐酸盐(9.89g,101mmol)和TEA(38.5mL,276mmol)并将反应混合物温热至RT并搅拌18小时。将反应混合物倾倒至H2O中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并浓缩得到粗产物，将其经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:50)洗脱)得到12g(97.8％)N,2-二甲氧基-N-甲基乙酰胺。
步骤2:向冷却至-78℃的4-溴-1,2-二氯苯(2.04g,9.01mmol)和乙醚(5mL)的溶液中以稳流形式加入n-BuLi(3.61ml,9.01mmol)并将反应混合物搅拌10分钟，然后经插管插入至N,2-二甲氧基-N-甲基乙酰胺(1.0g,7.51mmol)和乙醚(10mL)的溶液中，将其搅拌另外的20分钟。将反应混合物用水淬灭并用EtOAc萃取。将有机馏分干燥，滤过并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用己烷/EtOAc(9:1)洗脱)得到1.30g(79.0％)1-(3,4-二氯苯基)-2-甲氧基乙酮，其为白色固体(192)。
步骤3:将(R)-1-甲基-3,3-二苯基六氢吡咯并[1,2-c][1,3,2]氧氮杂硼杂环戊二烯(0.593ml,0.593mmol)和甲硼烷二乙基苯胺(1.05ml,5.93mmol)和MTBE(15mL)的溶液在RT制备，然后加热至40℃。然后将192(1.30g,5.93mmol)和MTBE(15mL)逐滴加至上述溶液中并将反应混合物在40℃搅拌30分钟。将反应混合物用MeOH淬灭，随后加入1M HCl并将所得的混合物倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过，并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用己烷/EtOAc梯度(6:1至4:1)洗脱)得到1.25g(95.3％)(R)-1-(3,4-二氯苯基)-2-甲氧基乙醇(194)。
步骤4:在RT向194(1.25g,5.65mmol)和THF(10mL)的溶液中先后加入异二氢吲哚-1,3-二酮(0.915g,6.22mmol)和PPh3(2.22g,8.48mmol)，随后逐滴加入DEAD(3.34mL,8.48mmol)。将反应混合物温热至RT，搅拌20小时，然后浓缩干燥。加入乙醚(300mL)，并将所得的固体滤过且弃去。然后将滤液倾倒至水中，并用DCM萃取。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM洗脱)得到1.9g(96.0％)(S)-2-(1-(3,4-二氯苯基)-2-甲氧基乙基)异二氢吲哚-1,3-二酮(196)。
步骤5:在RT向196(2.0g,5.7mmol)和THF:MeOH(1:1,20mL)的溶液中加入肼一水合物(2.9g,57mmol)并将反应混合物加热至50℃且保持18小时。将反应混合物冷却至RT，滤过，并将滤液倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过，并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:30)洗脱)得到1.1g(88％)(S)-1-(3,4-二氯苯基)-2-甲氧基乙胺，其为灰白色固体(198)。
步骤7:198和28的缩合根据在实施例1步骤6中所述的操作进行，得到0.110g(31％)I-41。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:10至500:15)洗脱)：MS m/z(APCI-pos)M+1＝480。
(S)-N-(1-(4-氯-3-氟苯基)-2-甲氧基乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6- 二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-45)类似地制备，除了在步骤1中将4-溴-1,2-二氯苯用4-溴-1-氯-2-氟-苯代替之外，得到(S)-1-(4-氯-3-氟苯基)-2-甲氧基乙胺(197)。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:10至500:15洗脱)):MS m/z(APCI-pos)M+1＝464。
N-((S)-1-(3,4-二氯苯基)-2-甲氧基乙基)-2-((S)-1-羟基丙-2-基氨基)-5,6- 二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-48)类似地制备，除了在步骤1中将28用138代替之外。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:15至500:25)洗脱):m/z(APCI-pos)M+1＝454。
N-((S)-1-(4-氯-3-氟苯基)-2-甲氧基乙基)-2-((S)-1-羟基丙-2-基氨基)-5,6- 二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-55)类似地制备，除了在步骤1中将28用138代替且在步骤7中将198用197代替之外。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:5至500:25)洗脱)得到0.205g(47.7％)I-55:MS m/z(APCI-pos)M+1＝438。
实施例30
(S)-N-(1-(3-氯-4-氟苯基)-2-羟基乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二 氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-46)
在RT向(S)-N-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3-氯-4-氟苯基)乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(0.250g,0.443mmol)和THF(5mL)的溶液中加入TBAF(0.532mL,0.532mmol)并将反应混合物在RT搅拌1小时，倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:20至500:30)洗脱)得到0.100g(50.2％)I-46:1HNMR(400MHz,d6-DMSO)δ8.08(s,1H),7.52(d,1H),7.32(d,2H),6.91-6.86(m,2H),4.85(宽单峰,1H),4.74(m,1H),4.40-4.30(m,2H),3.87-3.84(m,3H),3.58-3.54(m,4H),3.38-3.31(m,2H),2.56-2.54(m,2H),1.81-1.78(m,2H),1.53-1.46(m,2H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝450。
实施例31
(S)-乙酸2-(3-氯-4-氟苯基)-2-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢吡 啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)乙酯(I-47)
在RT向I-46(0.150g,0.333mmol)和DCM(5mL)的溶液中先后加入TEA(0.139mL,1.00mmol)和Ac2O(0.0346mL,0.367mmol)并将反应混合物在RT搅拌1小时，然后倾倒至水中，并用DCM萃取。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/己烷(500:20)洗脱)得到0.150g(91.5％)I-47:MS m/z(APCI-pos)M+1＝492。
(S)-特戊酸2-(3-氯-4-氟苯基)-2-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢 吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)乙酯(I-67)
在RT向I-46(0.100g,0.222mmol)、TEA(0.0929mL,0.667mmol)和DCM(5mL)的溶液中先后加入特戊酸酐(0.0496mL,0.244mmol)和DMAP(0.0272g,0.222mmol)。将反应混合物加热至50℃且保持5小时，然后冷却至RT，然后倾倒至水中，并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:10)洗脱)得到0.060g(50.5％)I-67:MS m/z(APCI-pos)M+1＝534。
实施例32
(R)-N-(1-(3,4-二氯苯基)乙基)-5,5-二氟-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6- 二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-50)
步骤1:在RT在氮气下向S-甲基异硫脲半硫酸盐(methyl carbamimidothioatehemisulfate)(14.72g,52.89mmol,CASRN 867-44-7)在EtOH(105mL)中的搅拌的混悬液中经移液管加入纯的DIPEA(20.10mL,115.4mmol)。将混合物加热至80℃且保持30分钟，然后经移液管加入4-[(二甲基氨基)亚甲基]-3,5-二氧代-1-哌啶羧酸1,1-二甲基乙酯(201,12.90g,48.08mmol,CASRN 478623-90-4)在无水EtOH(45mL)中的溶液并在80℃加热3小时。然后将反应混合物冷却至RT并在Rotovap中部分浓缩。将混合物在EtOAc和饱和NaHCO3水溶液(400mL,1:1)之间分配。分离各层并将有机相用盐水(1x200mL)洗涤。分离有机层，干燥(MgSO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物用DCM加载至SiO2柱(Biotage 65M)上并用EtOAc/己烷(15/85)洗脱。收集含有产物的馏分并浓缩得到3.3g(23％)2-(甲基硫基)-5-氧代-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(200)，其为淡黄色固体。
步骤2:在RT在氮气下向200(3.3g,11.2mmol)在DCM(66mL)中的搅拌溶液中加入纯的固体MCPBA(6.91g,28.0mmol,工业级,65-70wt％)。4小时后，将反应混合物用10％硫代硫酸钠溶液(0.63M,110mL)淬灭并搅拌30分钟。然后将混合物用DCM/饱和NaHCO3水溶液(1:1)稀释至400mL并振摇。分离各层(形成乳液)并将水相用DCM(2x100mL)萃取。分离合并的有机相，干燥(MgSO4)，滤过并浓缩得到2.7g(73％)2-(甲基磺酰基)-5-氧代-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(202)，其为黄色固体。
步骤3:在RT在加盖的聚乙烯小瓶中向202(2.0g,6.110mmol)在DCE(18mL)中的搅拌溶液中经注射器加入纯的Deoxofluor(1.239mL,6.721mmol)。将反应混合物温热至50℃并搅拌过夜。冷却至RT后，在搅拌的同时将反应混合物倾倒至冰冷的饱和NaHCO3水溶液(50mL)中。15分钟后，pH仍然为碱性的(约pH＝9)。将混合物用DCM(50mL)稀释并搅拌另外的5分钟。分离各层(乳液)并将水相用DCM(1x50mL)萃取。将合并的有机相用饱和NaHCO3水溶液(1x100mL)洗涤，分离，干燥(MgSO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法(Biotage40M柱)纯化。将粗物质用DCM加载至柱上并用EtOAc/己烷(3/7)洗脱，得到淡黄色泡沫状物。将泡沫状物用EtOAc/己烷(1/1)研磨并将所得的固体滤出并在高真空干燥得到850mg(40％)5,5-二氟-2-(甲基磺酰基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(204)，其为白色固体。
步骤4:在RT在氮气下向204(349mg,1mmol)在IPA(3mL)中的搅拌的混悬液中经注射器先后加入纯的DIPEA(174μL,1mmol)和纯的四氢-2H-吡喃-4-胺(101mg,1mmol)。将混合物加热至90℃且变为均匀的。持续加热60分钟，然后冷却至RT，用EtOAc稀释为30mL且先后用10％枸橼酸溶液(2x30mL)和饱和NaHCO3水溶液(2x30mL)洗涤。分离有机相，干燥(MgSO4)，滤过并浓缩得到澄清油状物。油状物用己烷/EtOAc(4/1)研磨同时进行超声处理，得到沉淀物，将其滤过并用己烷/EtOAc(4/1)淋洗。回收母液并重新沉淀。合并两批沉淀物得到215mg(58％)5,5-二氟-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(206)，其为白色固体。
步骤5:在RT在氮气下向206(215mg,0.5805mmol)在DCM(4mL)中的搅拌溶液中经移液管加入5M HCl在IPA中的溶液(1.161mL,5.805mmol)。搅拌过夜后，将反应混合物经Rotovap和高真空浓缩干燥得到106mg(100％)5,5-二氟-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺盐酸盐(208)，其无需另外纯化即可使用。
步骤6:208和185的浓缩根据在实施例25步骤5中的操作进行。将粗产物用EtOAc/己烷(1/1)加载至小SiO2重力柱(1x2cm)并洗脱得到4mg(47％)I-50，其为黄色泡沫状物:1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.56(宽单峰,1H),7.40(s,1H),7.39(d,1H),7.16(dd,1H),5.28(宽单峰,1H),4.95(m,1H),4.79(d,1H),4.45(宽单峰,1H),4.08(宽单峰,1H),3.98(m,4H),3.94(m,2H),3.55(m,2H),2.01(m,2H),1.55(m,2H),1.48(d,3H)；m/z(APCI-pos)M+1＝487.3。
(S)-N-(1-(4-氯-3-氟苯基)-2-甲氧基乙基)-5,5-二氟-2-(四氢-2H-吡喃-4-基 氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-51)
向197(0.0854g,0.293mmol)和DCM(5mL)的溶液中先后加入TEA(0.123mL,0.880mmol)和CDI(0.0476g,0.293mmol)并将溶液在RT搅拌30分钟。向溶液中逐滴加入TEA(0.123mL,0.880mmol)、208(0.090g,0.293mmol)和DCM(5mL)的溶液。将反应混合物搅拌18小时，然后倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用2％MeOH/DCM洗脱)得到0.060g(40.9％)I-51:MS m/z(APCI-pos)M+1＝499。
(S)-N-(1-(3-氯-4-氟苯基)-2-羟基乙基)-5,5-二氟-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨 基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-53).
(S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3-氯-4-氟苯基)乙胺(210)根据在实施例10步骤1-5中所述的操作制备，除了在步骤2中将(4-氯-3-氟苯基)溴化镁用(3-氯-4-氟苯基)溴化镁代替。
根据在实施例1步骤6中的操作，由208和210的缩合，得到(S)-N-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3-氯-4-氟苯基)乙基)-5,5-二氟-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(212)，除了将28用208代替且将22用210代替。根据在实施例10步骤7中的操作，脱除212的甲硅烷基保护基团。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:30至500:40)洗脱)得到0.070g(86.5％)I-53:MS m/z(APCI-pos)M+1＝486。
实施例33
(S)-2-氨基-3-甲基丁酸((S)-2-(3-氯-4-氟苯基)-2-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨 基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)乙基)酯(I-54)
步骤1:在RT向I-46(0.100g,0.222mmol)和(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(0.0531g,0.244mmol)和DCM(5mL)的溶液中加入DMAP(0.0543g,0.445mmol)和DCC(0.0504g,0.244mmol)并将反应混合物在RT搅拌1小时，然后倾倒至水中，并用DCM萃取。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:15)洗脱)得到0.130g(90.1％)(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸((S)-2-(3-氯-4-氟苯基)-2-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)乙基)酯(214)。
步骤2:向214(0.130g,0.200mmol)和DCM(5mL)的溶液中加入HCl(0.334mL,2.00mmol)，并将反应混合物搅拌2小时，然后倾倒至饱和NaHCO3水溶液并用DCM萃取。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:40至500:50)洗脱)得到0.090g(81.9％)I-54:MS m/z(APCI-pos)M+1＝549。
(S)-2-甲氧基乙酸2-(3-氯-4-氟苯基)-2-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6,7, 8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)乙酯(I-56)类似地制备，除了在步骤1中将(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸用2-甲氧基乙酸代替并且省略步骤2之外。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:15)洗脱)得到0.120g(76.6％)I-56:MS m/z(APCI-pos)M+1＝522。
实施例34
N-((R)-1-(4-氯-3-氟苯基)丙基)-2-((S)-1-羟基丁-2-基氨基)-5,6-二氢吡啶 并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-57)
(S)-2-(5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基氨基)丁-1-醇盐酸盐(216)根据在实施例17步骤1-3中所述的方法制备，除了在步骤1中将(S)-2-氨基丙-1-醇用(S)-2-氨基丁-1-醇代替。在高真空干燥后，所述方法得到216，其为吸湿性固体。
步骤1:在RT向139(0.173g,0.773mmol)和DCM(5mL)的溶液中加入TEA(0.235g,2.32mmol)和CDI(0.125g,0.773mmol)并将反应混合物在RT搅拌30分钟。向该溶液中逐滴加入216(0.200g,0.773mmol)、TEA(0.235g,2.32mmol)和DCM(5mL)的溶液并将所得的溶液搅拌4小时，然后倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:40)洗脱)得到0.050g(14.8％)I-57:MSm/z(APCI-pos)M+1＝436。
实施例35
N-((R)-1-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)丙基)-2-((S)-1-羟基丙-2-基氨基)-5, 6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-58)
步骤1:在RT向3-氯-4-(三氟甲氧基)苯甲醛(2.8g,12mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚硫酰胺(2.7g,22mmol)和THF(25mL)的溶液中加入四乙氧基钛(9.3mL,45mmol)并将反应混合物加热至65℃且保持12小时。将反应混合物冷却至RT，加入水(100mL)并将固体滤过且弃去。将滤液用EtOAc萃取，将有机馏分干燥，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:10)洗脱)得到3.8g(98％)(R,E)-N-(3-氯-4-(三氟甲氧基)亚苄基)-2-甲基丙烷-2-亚硫酰胺(218)。
步骤2:向冷却至-78℃的218(3.8g,12mmol)和THF(40mL)的溶液中逐滴加入乙基溴化镁(5.8mL,17mmol)在乙醚中的溶液并将溶液搅拌1小时，用水淬灭，并用Et2O萃取。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/己烷梯度(35-40％EtOAc)洗脱)得到3.5g(84％)(R)-N-((R)-1-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亚硫酰胺(220)。
步骤3:向220(3.5g,9.8mmol)和DCM(10mL)的溶液中加入4N HCl在二噁烷中的溶液(17mL,68mmol)并将反应混合物在RT搅拌30分钟。加入Et2O，并将反应混合物搅拌10分钟并滤过，用乙醚洗涤并干燥得到2.5g(88％)(R)-1-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)丙-1-胺盐酸盐(222)，其为白色固体。
步骤4:222和138的缩合根据在实施例1步骤6中的操作进行，除了将22用222代替并将28用138代替。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/己烷梯度(45-50％EtOAc)洗脱)得到0.12g(28.5％)I-58:MS m/z(APCI-pos)M+1＝488。
实施例36
(R)-N-(1-(3-氯-4-氟苯基)-2-氰基乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二 氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-59)
步骤1:在RT向(S)-1-(3-氯-4-氟苯基)-2-羟基乙基氨基甲酸叔丁酯(0.75g,2.59mmol)和DCM(15mL)的溶液中加入TEA(0.541mL,3.88mmol)和MsCl(0.210mL,2.72mmol)。将反应混合物在RT搅拌1小时，然后倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:5)洗脱)得到0.8g(84％)(S)-甲磺酸2-(叔丁氧基羰基氨基)-2-(3-氯-4-氟苯基)乙酯(224)。
步骤2:向224(1.5g,4.1mmol)和THF/丙酮(24mL,5:1)的溶液中加入NaI(3.1g,20mmol)并将反应混合物在RT搅拌过夜。将反应混合物倾倒至水中并用EtOAc萃取。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩得到1.6g(98％)(S)-1-(3-氯-4-氟苯基)-2-碘乙基氨基甲酸叔丁酯，其没有进一步纯化即可使用。
步骤3:向碘化物(1.6g,4.0mmol)和DMSO(10mL)的溶液中加入NaCN(0.22g,4.4mmol)并将反应混合物加热至80℃且保持18小时。将反应混合物冷却至RT，加入水并将溶液用EtOAc萃取。将有机馏分干燥，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用己烷/EtOAc(4:1)洗脱)得到0.75g(63％)(R)-1-(3-氯-4-氟苯基)-2-氰基乙基氨基甲酸叔丁酯(226)。
步骤4:向226(0.350g,1.17mmol)在二噁烷(5mL)中的溶液中加入4NHCl在二噁烷中的溶液(2.93mL,11.7mmol)并在RT搅拌1小时，然后浓缩干燥，得到0.2g(72.6％)(R)-3-氨基-3-(3-氯-4-氟苯基)丙腈盐酸盐(228)，其没有进一步纯化即可使用。
步骤5:228和28的缩合根据在实施例1步骤6中的操作进行，除了将22用228代替。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用10％MeOH/DCM洗脱)得到0.035g(8.96％)I-59:MS m/z(APCI-pos)M+1＝488:MS m/z(APCI-pos)M+1＝459。
实施例37
N-((S)-1-(3,4-二氯苯基)-2-羟基乙基)-2-(1-氟丙-2-基氨基)-5,6-二氢吡啶 并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-60)
步骤1:向苯基甲胺(5.63g,52.6mmol)和1-氟丙-2-酮(4.0g,52.6mmol)和DCE(50mL)的溶液中加入NaBH(OAc)3(15.6g,73.6mmol)和HOAc(3.01mL,52.6mmol)并将反应混合物封盖并在RT搅拌3小时。然后将反应混合物倾倒至水中，并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:5至500:10)洗脱)得到6.2g(70.5％)N-苄基-1-氟丙-2-胺(230)。
步骤2:将230(2.5g,15mmol)、Pd/C(3.2g,1.5mmol)和MeOH(30mL)的混悬液在氢气(H2填充的气囊)下搅拌5小时。向溶液中加入6M HCl(12mL,75mmol)在IPA中的溶液并将反应混合物搅拌5分钟。将反应混合物滤过并浓缩干燥得到1.5g(88％)1-氟丙-2-胺盐酸盐(232)。
步骤3:向试管中加入(Z)-(1H-吡唑-1-基)亚甲基二氨基甲酸苄酯(4.2g,11mmol)、DIPEA(3.9mL,22mmol)和THF(20mL)，然后加入1-氟丙-2-胺盐酸盐(1.4g,12mmol)。将反应混合物密封并加热至60℃且保持2小时，然后冷却至RT，倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM洗脱)得到4.8g(＞100％)(Z)-(苄基氧基羰基氨基)(1-氟丙-2-基氨基)亚甲基氨基甲酸苄酯(234).
步骤4:将234(4.8g,12mmol)、Pd(OH)2/C(0.87g,1.2mmol)和EtOH/THF(95％,1:1,60mL)的混悬液在RT在氢气气氛(H2填充的气囊)下搅拌18小时。将反应混合物滤过，用THF洗涤，并浓缩得到1.4g(95％)1-(1-氟丙-2-基)胍(236)。
步骤5和6:2-(1-氟丙-2-基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羰基氨基甲酸叔丁酯(238)可由236和21根据在实施例1步骤4和5中所述的操作制备。
步骤7:N-((S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3,4-二氯苯基)乙基)-2-(1-氟丙-2-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(240)可由238和185根据在实施例1步骤6中所述的操作制备，除了将22用185代替且将28用238代替。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:7)洗脱)。
步骤8:在RT向240(0.500g,0.898mmol)和DCM(5mL)的溶液中加入6M HCl在IPA中的溶液(1.50mL,8.98mmol)并将反应混合物搅拌1小时，然后浓缩干燥。将残留物在Na2CO3水溶液和DCM之间分配。将有机馏分干燥，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:30至500:35)洗脱)得到0.34g(85.6％)I-60，其为非对映异构体的混合物：MS m/z(APCI-pos)M+1＝442。外消旋混合物经手性超临界液相色谱法拆分。
实施例38
N-((S)-(3,4-二氯苯基)((R)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲基)-2-(异丙基氨基)-5,6- 二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-61)
根据实施例11步骤1和2，将(R)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-羧酸转化为(R)-2-(3,4-二氯苯甲酰基)-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯，不同的是在步骤2中将4-溴-1-(三氟甲基)苯用1-溴-3,4-二氯苯代替。将酮用(R)-1-甲基-3,3-二苯基六氢吡咯并[1,2-c][1,3,2]氧氮杂硼杂环戊二烯还原且与异二氢吲哚-1,3-二酮缩合可根据实施例11步骤4和5的操作进行，得到(R)-2-((S)-(3,4-二氯苯基)(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(242)。
步骤1:向242(0.120g,0.252mmol)和DCM(1mL)中加入5M HCl在IPA中的溶液(10mL)并将反应混合物搅拌1小时，然后浓缩干燥得到0.086g(82.7％)2-((S)-(3,4-二氯苯基)((R)-吡咯烷-2-基)甲基)异二氢吲哚-1,3-二酮盐酸盐(242)。
步骤2:向242(0.400g,0.972mmol)和DCE(10mL)的溶液中在RT加入TEA(0.295g,2.91mmol)和甲醛(0.631g,7.77mmol)并将反应混合物搅拌10分钟，之后加入NaBH(OAc)3(0.824g,3.89mmol)。将反应混合物在RT搅拌2小时。将反应混合物倾倒至饱和Na2CO3水溶液中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用己烷/EtOAc梯度(3:1至1:1)洗脱)得到0.3g(79.3％)2-((S)-(3,4-二氯苯基)((R)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲基)异二氢吲哚-1,3-二酮(244)。
步骤3:向244(0.40g,1.03mmol)和MeOH:THF(1:1,10mL)的溶液中加入肼一水合物(0.514g,10.3mmol)并将反应混合物在50℃搅拌18小时。将反应混合物倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:50)洗脱)得到0.130g(48.8％)(S)-(3,4-二氯苯基)((R)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲胺(246)。
步骤4:246和138的缩合根据在实施例1步骤6中的操作进行，除了将28用138代替且将22用246代替。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:20至500:25)洗脱)得到0.100g(41.8％)I-61:m/z(APCI-pos)M+1＝477。
实施例39
N-((1S,2S)-1-(3,4-二氯苯基)-2,3-二羟基丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡 啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-62)
步骤1:向(S)-2-甲基丙烷-2-亚硫酰胺(4.7g,39mmol)和DCM(15mL)的溶液中在RT加入无水CuSO4(14g,85mmol)，随后加入(R)-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-2-甲醛(6.0g,35mmol)和DCM(20mL)。将反应混合物在RT搅拌3天，然后经硅藻土滤过，用DCM洗涤并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用己烷/EtOAc(9:1至7:1)洗脱)得到4.7g(49％)(S,Z)-N-((S)-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-2-基亚甲基)-2-甲基丙烷-2-亚硫酰胺(248)。
步骤2:向冷却至-78℃的248(2.0g,7.3mmol)和甲苯(30mL)的溶液中加入(3,4-二氯苯基)溴化镁(29mL,15mmol)并温热至0℃且保持30分钟。将反应混合物倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用己烷/EtOAc梯度(4:1至1:1)洗脱)得到1.8g(59％)(S)-N-((S)-(3,4-二氯苯基)((S)-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-2-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚硫酰胺(250)，其经1H NHR显示似乎为约10:1的非对映异构体混合物。
步骤3:向250(1.8g,4.3mmol)和DCM(5mL)的溶液中加入HCl在IPA中的溶液(7.1mL,43mmol)并将反应混合物搅拌1小时。将反应混合物浓缩干燥并加入4M HCl在二噁烷的溶液(5当量)和H2O(1mL)，使得环己基酮基断裂。将反应混合物搅拌1小时，然后浓缩干燥得到1.1g(94％)(2S,3S)-3-氨基-3-(3,4-二氯苯基)丙烷-1,2-二醇盐酸盐(252)。
步骤4:向252(0.50g,1.83mmol)和DCM(5mL)的溶液中在RT加入TEA(1.28mL,9.17mmol)，随后加入TBDMSOTf(1.05mL,4.59mmol)并将反应混合物搅拌30分钟。将反应混合物倾倒至NaHCO3水溶液中并用DCM萃取。将合并的萃取物干燥(MgSO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用己烷/EtOAc/DCM(8:1:1)洗脱)得到0.280g(32.9％)(1S,2S)-2,3-二-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3,4-二氯苯基)丙-1-胺(254)。
步骤5:254和138的缩合根据在实施例1步骤6中的操作进行，除了将28用138代替并将22用254代替。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:5)洗脱)得到0.240g(60.5％)N-((1S,2S)-2,3-二-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3,4-二氯苯基)丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(256)。
步骤6:向256(0.240g,0.351mmol)和DCM(2mL)的溶液中加入6NHCl在IPA中的溶液(0.586mL,3.51mmol)并将反应混合物在RT搅拌1小时，然后倾倒至饱和Na2CO3水溶液中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:30至500:50)洗脱)得到0.078g(48.8％)I-62:MS m/z(APCI-pos)M+1＝454。
N-((1S,2S)-1-(4-氯-3-氟苯基)-2,3-二羟基丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢 吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-63)类似地制备，除了在步骤2中将(3,4-二氯苯基)溴化镁用(3-氟-4-氯苯基)溴化镁代替之外，得到I-63:MS m/z(APCI-pos)M+1＝438。
实施例40
(S)-N-(1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-2-(甲基氨基)乙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺盐酸盐(I-66)
步骤1:将(R)-1-甲基-3,3-二苯基六氢吡咯并[1,2-c][1,3,2]氧氮杂硼杂环戊二烯(0.83mL,1.4mmol)和甲硼烷二乙基苯胺(2.5mL,14mmol)在MTBE(25mL)中的溶液在RT制备并加热至40℃。将2-溴-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酮(143a,4.0g,14mmol,CASRN54429-22-3)和MTBE(30mL)的溶液逐滴加至上述溶液中并将反应混合物在40℃搅拌30分钟。将反应混合物通过加入MeOH、随后加入1M HCl进行淬灭，然后将反应混合物倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/己烷(9:1)洗脱)得到3.2g(79％)(R)-2-溴-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙醇(258)。
步骤2:向258(1.0g,3.5mmol)和THF(20mL)的溶液中在RT加入甲胺(2.7g,35mmol,40％在水中的溶液)并将反应混合物密封并在RT搅拌24小时。然后将反应混合物浓缩得到0.83g(100％)(R)-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-2-(甲基氨基)乙醇(260)，其没有进一步纯化即可使用。
步骤3:向260(0.80g,3.4mmol)和THF:H2O(2:1,18mL)的溶液中在RT加入Boc2O(0.81g,3.7mmol)和THF(5mL)的溶液并将反应混合物在RT搅拌。加入K2CO3(0.47g,3.4mmol)直到反应完成，然后倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物用SiO2色谱法纯化(用己烷/EtOAc梯度(9:1至3:1)洗脱)得到0.9g(79％)(R)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-2-羟基乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(262)。
步骤4:向冷却至0℃的262(0.98g,2.91mmol)和THF(30mL)的溶液中先后加入异二氢吲哚-1,3-二酮(0.470g,3.20mmol)和PPh3(1.14g,4.36mmol)，随后加入DEAD(1.72mL,4.36mmol)和THF(10mL)的溶液。将反应混合物温热至RT并搅拌过夜。将反应混合物浓缩干燥，加入Et2O(300mL)并将所得的固体滤过且弃去。然后将滤液倾倒至水中，并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM:MeOH(500:2)洗脱)得到0.99g(73.1％)(S)-2-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(264)。
步骤5:向264(0.4g,0.86mmol)和THF:MeOH(10mL,1:1)的溶液中加入肼一水合物(0.43g,8.6mmol)并将反应混合物在RT搅拌48小时。然后将反应混合物用THF稀释并滤过。将固体弃去，并将滤液浓缩除去THF，然后倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:20)洗脱)得到0.28g(97％)(S)-2-氨基-2-(3-氟-4-(三氟甲基-苯基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(266)。
步骤6:(S)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-2-(2-(异丙基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(268)根据在实施例1步骤6中所述的操作，除了使用266代替28并使用72代替22之外，得到I-64。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:8)洗脱)得到0.180g(64.2％)(S)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-2-(2-(异丙基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(268)。
步骤7:向268(0.075g,0.14mmol)和DCM(3mL)的溶液中在RT加入TFA(2mL)并将反应混合物在RT搅拌1小时，然后浓缩干燥。接下来将所得的产物溶解于最少量的DCM(使用MeOH增加溶解性)中并在搅拌的同时加至1M HCl在乙醚中的溶液中。将所得的固体滤过，用乙醚洗涤并干燥得到0.050g(75％)I-66:MS m/z(APCI-pos)M+1＝455。
(S)-N-(1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-2-(甲基氨基)乙基)-2-(4-氟苯基氨基)- 5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺盐酸盐(I-68)
2-(4-氟苯基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺(270)可根据实施例1步骤3-5制备，除了在步骤3中将四氢-2H-吡喃-4-胺用4-氟-苯胺代替之外。266和270的缩合可根据在本发明实施例步骤6和7中的操作进行，除了在步骤6中使用270代替72之外，得到I-68:MS m/z(APCI-pos)M+1＝507。
实施例41
N-((R)-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-((S)-1-羟基丁-2-基氨基)-5,6- 二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-69)
(S)-2-(5,6,7,8-四氢-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基氨基)-丁-1-醇(272)可根据实施例1步骤3-5制备，除了在步骤3中将四氢-2H-吡喃-4-胺用(S)-1-羟基丁-2-基胺代替。143和272的缩合可根据在实施例40步骤6和7中的操作进行，除了在步骤6中使用272代替72且使用143代替266之外，得到I-69:MS m/z(APCI-pos)M+1＝456。
N-((S)-1-(4-氯-3-氟苯基)-2-甲氧基乙基)-2-((S)-1-羟基丁-2-基氨基)-5,6- 二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-71)类似地制备，除了使用197代替143之外:MSm/z(APCI-pos)M+1＝452。
实施例42
N-(1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-3-羟基丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-70)
步骤1:将3-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛(4.8g,25mmol)、丙二酸(2.6g,25mmol)、乙酸铵(0.85g,50mmol)和EtOH(30mL)的溶液在80℃加热18小时。将反应混合物冷却，用Et2O(50mL)稀释并滤过得到2.0g(16％)3-氨基-3-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)丙酸(274)，其为白色固体，其没有进一步纯化即可使用。
步骤2:在氮气下在0℃向274(2.0g,8.0mmol)和THF(25mL)的搅拌的混悬液中逐滴加入1M LiAlH4在THF中的溶液(12mL,12mmol)并将反应混合物在0℃在冰浴中搅拌1.5小时。通过将反应混合物小心加至在冰浴中冷却并适当通风的罗谢尔盐的饱和溶液(50mL)中来将冷的反应混合物进行淬灭。将所得的混合物搅拌18小时，同时随着冰浴溶解缓慢温热至RT。将混合物用EtOAc(50mL)稀释并经硅藻土滤过除去固体，将其用EtOAc淋洗若干次。分离各相并将水相重新用EtOAc(30mL萃取)。将合并的有机萃取物用盐水(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用5％7N NH3在MeOH在DCM中的溶液(500mL预先洗涤柱，随后500mL洗脱剂，然后500mL7.5％7N NH3在MeOH在DCM中的溶液)洗脱)得到0.43g(22％)3-氨基-3-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)丙-1-醇(276)。
步骤3:将276(0.200g,0.843mmol)、TBDMS-Cl(0.153g,1.01mmol)、DIPEA(0.294mL,1.69mmol)、DMAP(0.0103g,0.0843mmol)和DCM(6mL)的溶液在RT搅拌1小时，然后倾倒至H2O中，并用DCM萃取。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:5)洗脱)得到0.210g(70.9％)3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)丙-1-胺(278)。
步骤4:278和72的缩合根据在实施例1步骤6中所述的操作进行，除了使用278代替28且使用72代替22之外。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:5)洗脱)得到0.123g(28.1％)N-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(280)。
步骤5:在0℃向280(0.100g,0.176mmol)和THF(5mL)的溶液中加入TBAF(0.228mL,0.228mmol)并将反应混合物在RT搅拌2小时，然后倾倒至水中，并用DCM萃取。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:15至500:25)洗脱)得到0.032g(40.0％)I-70:MS m/z(APCI-pos)M+1＝456。
N-(1-(4-氯-3-氟苯基)-3-羟基丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d] 嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-74)类似地制备，除了在步骤1中将3-氟-4-三氟甲基苯甲醛用4-氯-3-氟苯甲醛代替之外，得到I-74:MS m/z(APCI-pos)M+1＝422。
实施例43
(R)-N-(3-氨基-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢 吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-72)
步骤1:向加热至50℃的258(0.8g,2.8mmol)和EtOH:水(4:1)的溶液中加入NaCN(0.20g,4.2mmol)并将反应混合物在50℃搅拌过夜。然后将反应混合物冷却并浓缩干燥然后在H2O和EtOAc之间分配。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用己烷/EtOAc梯度(4:1至3:1)洗脱)得到0.5g(77％)(S)-3-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-3-羟基丙腈(282)。
步骤2:向282(0.5g,2.1mmol)和THF(10mL)的溶液中加入BH3-SMe2(2.1mL,4.3mmol)并将反应混合物在65℃搅拌8小时。将反应混合物倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/MeOH/NH4OH(90/9/1)洗脱)得到0.48g(94％)(S)-3-氨基-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)丙-1-醇(284)。
步骤3:在RT向284(0.48g,2.0mmol)和THF/水(9mL,2:1)的溶液中加入Boc2O(0.49g,2.2mmol)在THF中的溶液(5mL)并将反应混合物在RT搅拌1小时。将反应混合物倾倒至水中，并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:5)洗脱)得到0.60g(88％)(S)-3-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-3-羟基丙基氨基甲酸叔丁酯(286)。
步骤4:向冷却至0℃的286(0.600g,1.78mmol)和THF(15mL)的溶液中加入异二氢吲哚-1,3-二酮(0.288g,1.96mmol)和PPh3(0.700g,2.67mmol)，随后逐滴加入DEAD(0.420mL,2.67mmol)在THF(6mL)中的溶液。将反应混合物温热至RT并搅拌20小时。将反应混合物浓缩，用乙醚研磨并滤过。将所得的滤液倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用己烷/EtOAc(4:1)洗脱)得到0.350g(42.4％)(R)-3-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)-3-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)丙基氨基甲酸叔丁酯(288)。
步骤5:向288(0.350g,0.750mmol)和MeOH:THF(6mL,1:1)的溶液中加入肼一水合物(0.188mL,3.75mmol)并将反应混合物加热至50℃且保持4天。然后将反应混合物倾倒至水中，并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:20)洗脱)得到0.150g(59.4％)(R)-3-氨基-3-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)丙基氨基甲酸叔丁酯(290)。
步骤7:290和72的缩合根据在实施例1步骤6中所述的操作进行，除了使用290代替28且使用72代替22之外。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:8至500:15)洗脱)得到0.090g(39.0％)(R)-3-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-3-(2-(异丙基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)丙基氨基甲酸叔丁酯(292)。
步骤8:在RT向292(0.090g,0.16mmol)和DCM(3mL)的溶液中加入TFA(1mL)并将反应混合物在RT搅拌1小时，然后浓缩干燥。接下来将所得的产物溶解于最少量的DCM(使用MeOH辅助溶解)中并加至1M HCl在乙醚中的搅拌溶液中。将所得的固体滤过，用乙醚洗涤并干燥得到0.060g(75％)I-72:MS m/z(APCI-pos)M+1＝455。
(R)-N-(3-乙酰氨基-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6- 二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-85)
向I-72(0.048g,0.0978mmol)和DCM(5mL)的溶液中在RT加入TEA(0.0409mL,0.293mmol)和Ac2O(0.0102mL,0.108mmol)并将反应混合物搅拌1小时，倾倒至水中，并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:10至500:20)洗脱)得到0.020g(41.2％)I-85:MS m/z(APCI-pos)M+1＝497。
实施例44
(S)-N-(1-(3,4-二氯苯基)-2-甲氧基乙基)-2-(2-羟基乙基氨基)-5,6-二氢吡啶 并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-73)
2-(5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基氨基)乙醇(294)根据在实施例17步骤a-c中的操作制备，除了在步骤1中将(S)-2-氨基-丙-1-醇用氨基乙醇代替之外。294和198的缩合得到I-73根据在实施例1步骤6中的操作进行，除了将28用294代替且将22用198代替:MS m/z(APCI-pos)M+1＝440。
实施例45
(R)-N-(1-(3,4-二氯苯基)乙基)-2-(1,3-二羟基丙-2-基氨基)-5,6-二氢吡啶并 [3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-75)
步骤1:向1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐(12g,82mmol)和DMF(40mL)的溶液中在RT加入DIPEA(19mL,110mmol)和2-氨基丙烷-1,3-二醇(5.0g,55mmol)并将反应混合物搅拌过夜。加入Et2O(15mL)并将反应混合物搅拌10分钟，之后使得反应混合物沉降并弃去所述乙醚层。将残留的粗油状物在高真空浓缩得到7.3g(100％)1-(1,3-二羟基丙-2-基)胍(296)，其含有残留的DMF。
步骤2和3:四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基氨基)丙烷-1,3-二醇盐酸盐(298)根据在实施例1步骤4和5中所述的操作制备，除了在步骤4中将24用296代替之外。将产物浓缩干燥并真空干燥得到298，其为吸湿性固体。
步骤4:298和185的缩合根据在实施例1步骤6中所述的操作进行，除了使用298代替28且使用185代替22之外。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:30-500:50)洗脱)得到I-75:MS m/z(APCI-pos)M+1＝440。
(R)-2-(1,3-二羟基丙-2-基氨基)-N-(1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-5,6- 二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-82)类似地制备，除了将185用143代替之外。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:20至500:30)洗脱)得到0.200g(57.0％)I-82:MS m/z(APCI-pos)M+1＝458。
实施例46
N-((S)-1-(3,4-二氯苯基)-2-羟基乙基)-2-(1,1,1-三氟丙-2-基氨基)-5,6-二 氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-76)
N-(1,1,1-三氟丙-2-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺(300)根据在实施例1步骤3-5中的操作制备，除了在步骤3中将四氢-2H-吡喃-4-胺用1,1,1-三氟-2-氨基-丙烷代替且在脱保护后1H-吡唑-1-甲脒的二-CBZ衍生物得到外消旋的N-(2,2,2-三氟-1-甲基-乙基)-胍之外。
步骤1:向85(0.104g,0.325mmol)和DCM(5mL)的溶液中在RT加入TEA(0.136mL,0.975mmol)和CDI(0.0527g,0.325mmol)并将反应混合物在RT搅拌30分钟，然后加至300(0.080g,0.325mmol)、TEA(0.136ml,0.975mmol)和DCM(5mL)的溶液中并将所得的溶液搅拌4小时。将反应混合物倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:7)洗脱)得到0.160g(83.1％)N-((S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3,4-二氯苯基)乙基)-2-(1,1,1-三氟丙-2-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(302)。
步骤2:向302(0.160g,0.270mmol)和DCM(5mL)的溶液中在RT加入6M HCl在IPA中的溶液(0.450mL,2.70mmol)并将反应混合物搅拌1小时。将反应混合物倾倒至饱和Na2CO3水溶液中，并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:20至500:30)洗脱)得到0.010g(7.74％)I-76:MSm/z(APCI-pos)M+1＝478。
N-((4-氯-3-氟苯基)(噁唑-5-基)甲基)-2-((R)-1,1,1-三氟丙-2-基氨基)-5,6- 二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-84)
(4-氯-3-氟苯基)(噁唑-5-基)甲胺根据实施例1步骤1和2的操作制备，除了在步骤2中将(3,4-二氯苯基)溴化镁用4-氯-3-氟苯基)溴化镁代替之外。300和22的缩合根据在实施例1步骤6中所述的操作进行，除了使用300代替28之外。将粗产物经反相柱色谱法纯化(用MeCN/H2O(5-95％MeCN)洗脱)得到0.160g(45.3％)I-84:MS m/z(APCI-pos)M+1＝499。
实施例47
N-(1-(3,4-二氟苯基)-3-羟基丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d] 嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-77)
步骤1:在氮气下向冷却至0℃的3-氨基-3-(3,4-二氟苯基)丙酸盐酸盐(17g,72mmol,＜30％的纯度)在THF(100mL)中的搅拌的混悬液中逐滴加入LiAlH4在THF中的1M溶液(215mL,215mmol)。将反应混合物在0℃在冰浴中搅拌1.5小时。向冰冷的溶液中小心加入冰冷的饱和罗谢尔盐水溶液(300mL)。将所得的混合物搅拌18小时，随着冰浴溶解而缓慢温热至RT。将混合物用EtOAc(500mL)稀释，并经硅藻土滤过，除去固体，将其用EtOAc淋洗若干次。分离各相并将水相重新用EtOAc(200mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(200mL)洗涤，干燥(MgSO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法(Biotage Flash 65)纯化(用5％MeOH(含有7N NH3)/DCM(1L预先洗涤柱，随后1L洗脱)，然后10％MeOH(含有7N NH3)在DCM(1L)中的溶液洗脱)得到0.92g(6％)3-氨基-3-(3,4-二氟苯基)丙-1-醇(304)。
步骤2:将304(0.400g,2.14mmol)、TBDMS-Cl(0.386g,2.56mmol)、DIPEA(0.744mL,4.27mmol)、DMAP(0.0261g,0.214mmol)和DCM(10mL)的溶液在RT搅拌1小时，然后倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:7)洗脱)得到0.45g(69.9％)3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3,4-二氟苯基)丙-1-胺(306)。
306和72的缩合根据在实施例1步骤6中所述的操作进行，除了使用72代替28且使用306代替22之外。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:5至500:8)洗脱)得到0.11g(31.9％)N-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(3,4-二氟苯基)丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(308)。将甲硅烷基用TBAF移去，根据在实施例42步骤5中所述的操作进行。将产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:15-500:25)洗脱)得到0.010g(12.8％)I-77:MS m/z(APCI-pos)M+1＝406。
实施例48
N-(1-(4-氯-3-氟苯基)-3-(甲基氨基)丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并 [3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-78)
步骤1:向冷却至0℃的I-74(0.050g,0.119mmol和DCM(5mL)的溶液中先后加入TEA(0.0496mL,0.356mmol)和MsCl(9.17μL,0.119mmol)并将反应混合物在0℃搅拌1小时。将反应混合物倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过并真空浓缩得到0.59g(99.6％)3-(4-氯-3-氟苯基)-3-(2-(异丙基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)丙基甲磺酸酯(310)，其没有进一步纯化即可使用。
步骤2:向310(0.059g,0.12mmol)和THF(3mL)的溶液中加入甲胺(0.092g,1.2mmol,40％水溶液)并将反应混合物在45℃搅拌1小时。将溶液浓缩，倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:30)洗脱)得到3mg(5.8％)I-78:MS m/z(APCI-pos)M+1＝435。
实施例49
N-((S)-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-2-甲氧基乙基)-2-((S)-1-羟基丁-2-基氨 基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-79)
步骤1:将(R)-1-甲基-3,3-二苯基六氢吡咯并[1,2-c][1,3,2]氧氮杂硼杂环戊二烯(0.83mL,1.4mmol)和甲硼烷二乙基苯胺(2.5mL,14mmol)在MTBE(25mL)中的溶液在RT制备并加热至40℃。然后将2-溴-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酮(4.0g,14mmol)和MTBE(30mL)的溶液逐滴加至上述溶液中并将反应混合物在40℃搅拌30分钟。然后加入MeOH，随后加入1M HCl并将反应混合物倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过并浓缩得到粗产物，将其经SiO2色谱法纯化(用己烷/EtOAc(9:1)洗脱)得到3.2g(79％)(R)-2-溴-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙醇。
步骤2:将(R)-2-溴-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙醇(3.0g,10mmol)、K2CO3(2.9g,21mmol)和丙酮(50mL)的混合物在RT搅拌18小时，然后倾倒至H2O中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用己烷/EtOAc(9:1)洗脱)得到2.0g(93％)(R)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)环氧乙烷(312).
步骤3:向312(0.600g,2.91mmol)和MeOH(1mL)的溶液中加入NaOMe(11.6mL,5.82mmol)在MeOH中的溶液并将反应混合物在RT搅拌3天，然后倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:10)洗脱)得到0.630g(90.9％)(R)-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-2-甲氧基乙醇(314)，其污染有少量的区域异构环氧化物开环产物。
步骤4和5:314向(S)-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-2-甲氧基乙胺(316,0.630g,2.65mmol)的转化类似于在实施例10步骤4和5中所述的操作进行。
步骤6:316和272的缩合根据在实施例1步骤6中所述的操作进行，除了使用272代替28且使用316代替22之外。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:15至500:25)洗脱)得到0.085g(45.3％)I-79:MS m/z(APCI-pos)M+1＝486。
实施例50
N-((S)-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-2-(甲基氨基)乙基)-2-((S)-1-羟基丙-2- 基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺盐酸盐(I-80)
步骤1:向冷却至0℃的(S)-2-氨基-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.220g,0.654mmol)和DCM(5mL)的溶液中先后加入TEA(0.365mL,2.62mmol)和CDI(0.106g,0.654mmol)。将反应混合物搅拌30分钟，然后在RT加至138(0.160g,0.654mmol)、TEA(0.365mL,2.62mmol)和DCM(5mL)的溶液中并将所得的溶液在RT搅拌18小时。将溶液倾倒至水中，并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:10至500:20)洗脱)得到0.100g(26.8％)(S)-2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-2-(2-((S)-1-羟基丙-2-基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(318)。
步骤2:向318(0.100g,0.175mmol)和DCM(5mL)的溶液中在RT加入TFA(2mL)并将反应混合物在RT搅拌1小时，然后浓缩干燥。接下来将粗产物溶解于最少量的DCM(使用MeOH辅助溶解)中并加至1M HCl在乙醚中的搅拌溶液中。将所得的固体滤过，用乙醚洗涤并干燥得到0.070g(78.8％)I-80:MS m/z(APCI-pos)M+1＝471。
实施例51
N-((S)-((S)-5,5-二甲基吡咯烷-2-基)(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)甲基)-2-(四 氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-86)
步骤1:向2-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酸(5g,22.509mmol,CASRN209991-64-0)在DCM(112mL,22.509mmol)中的溶液中加入草酰氯(2.94mL,33.8mmol)和3滴DMF。将溶液在RT搅拌过夜并浓缩干燥得到5.2g(88.2％)2-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰基氯。
步骤2:向(R)-4-苄基噁唑烷-2-酮(4.0615g,22.921mmol)和无水THF(100mL)的搅拌溶液中在-78℃加入n-BuLi(15.0mL,24.012mmol)。将反应混合物搅拌25分钟，然后在-78℃加入2-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰基氯(5.2517g,21.829mmol)在无水THF(50mL)中的溶液。将该溶液搅拌90分钟，然后用H2O淬灭并用EtOAc稀释。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/己烷梯度(5-20％EtOAc)洗脱)得到2.5g(30.8％)(R)-4-苄基-3-(2-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酰基)噁唑烷-2-酮(318)。
步骤3:向冷却至-78℃的318(12.35g,32.39mmol)和无水DCM(300mL)的溶液中加入TiCl4(34.01ml,34.01mmol)。向冷却的溶液中加入DIPEA(0.59mL,3.40mmol)。将反应混合物在-78℃搅拌15分钟，然后加入5-甲氧基-2,2-二甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(13.37g,58.3mmol)在DCM(50mL)中的溶液。将反应混合物温热至-10℃(丙酮/冰)且保持2小时。将反应混合物用NH4Cl淬灭并分离各层，干燥并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/己烷梯度(5％-10％)洗脱)得到16.21g(86.5％)(S)-5-((S)-2-((R)-4-苄基-2-氧代噁唑烷-3-基)-1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)-2-氧代乙基)-2,2-二甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(320)。
步骤4:向LiOH-H2O(0.3177g,7.570mmol)在THF/水(2:1,240mL)中的溶液中加入30％H2O2(0.91mL,9.46mmol)并将溶液在RT搅拌10分钟。将溶液冷却至0℃并加入320(2.19g,3.785mmol)在THF(10mL)中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌2小时，然后温热至RT并搅拌过夜。然后将反应混合物冷却至0℃并用1M Na2SO3(10mL)处理并搅拌10分钟，然后温热至RT并搅拌10分钟。将反应混合物浓缩并用EtOAc(2x20mL)萃取。将水相用H2SO4酸化至pH为约1-2并用DCM(2x20mL)萃取。将有机萃取物浓缩并将粗产物经C18制备性MPLC(Analogix200g C18柱)纯化得到1.321g(83.2％)(S)-2-((S)-1-(叔丁氧基羰基)-5,5-二甲基吡咯烷-2-基)-2-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酸(322)。
步骤5:向冷却0℃的322(0.341g,0.813mmol)和苯(8mL)的溶液中加入TEA(0.154mL,1.11mmol)和二苯基磷酰基叠氮化物(0.239mL,1.11mmol)并将反应混合物在RT搅拌1小时，然后回流3小时。然后将反应混合物冷却至RT并加入28(0.200g,0.739mmol)、TEA(0.154mL,1.11mmol)和DMF(3mL)的溶液且在RT搅拌18小时。将反应混合物倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(500:10)洗脱)得到0.360g(74.9％)(S)-5-((S)-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)甲基)-2,2-二甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(324)。
步骤6:向324(0.380g,0.584mmol)和DCM(5mL)的溶液中加入6MHCl在IPA中的溶液(0.973mL,5.84mmol)并将反应混合物搅拌1小时，然后倾倒至Na2CO3中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:40至500:50)洗脱)得到0.210g(65.3％)I-86:MS m/z(APCI-pos)M+1＝551。
实施例52
N-((1S,2R)-1-(3-氯-4-氟苯基)-2-羟基丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶 并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-89)
步骤1:在氮气下向冷却至0℃的(S)-2-氨基-2-(3-氯-4-氟苯基)乙醇盐酸盐(1.89g,9.97mmol,CASRN 496856-52-1)在MeOH(18mL)中的搅拌溶液中先后加入TEA(4.17mL,29.9mmol)和(Boc)2O(2.18g,9.97mmol)在MeOH(2mL)中的溶液。使得反应混合物达到RT且保持过夜。将溶液部分浓缩，用DCM稀释为50mL并先后用2N HCl(2x50mL)和饱和NaHCO3水溶液(2x50mL)洗涤。分离合并的有机萃取物，干燥(MgSO4)，滤过并浓缩得到2.55g(85％)(S)-1-(3-氯-4-氟苯基)-2-羟基乙基氨基甲酸叔丁酯(326)，其为白色固体。
步骤2:在氮气下向冷却至0℃的326(1.134g,3.914mmol)和DCM(8mL)的搅拌溶液中先后加入均为固体的NaHCO3(0.9864g,11.74mmol)和戴斯-马丁(Dess-Martin)高碘剂(2.490g,5.871mmol)。3小时后，经TLC显示反应完成约50％。将反应混合物温热至RT且保持1小时，然后将反应混合物用Et2O(10mL)稀释并倾倒至含有亚硫酸氢钠(15gm)的冰冷的饱和NaHCO3水溶液(50mL)中。搅拌15分钟后，分离各层并将水相用Et2O(2x30mL)萃取。将合并的有机萃取物先后用饱和NaHCO3水溶液(2x50mL)和盐水(1x50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，滤过并浓缩得到0.814g(72％)(S)-1-(3-氯-4-氟苯基)-2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯(328)，其为黄色泡沫状物。
步骤3:在氮气下向冷却至-78℃的新鲜制备的328(1.2g,4.171mmol)在Et2O(20mL)中的搅拌溶液中经注射器逐滴加入MeMgBr(2.781mL,8.342mmol,3M的Et2O溶液)。随着格氏试剂加入的进行，所得的混悬液变为粘稠的，且最终变为不能搅拌。加入Et2O(20mL)辅助搅拌并将反应混合物温热至0℃。将反应混合物在0℃搅拌2小时，然后倾倒至搅拌的饱和NH4Cl(50mL)水溶液中。分离各层并将水相用Et2O(1x50mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(1x100mL)洗涤，干燥(MgSO4)，滤过并浓缩为澄清的油状物。将粗产物加载至SiO2柱(Biotage 40M)并用EtOAc/己烷(25/75)洗脱。较高Rf的物质为残留的乙醛。将较低Rf的物质分离并浓缩，得到354mg(28％)的(1S,2S)-1-(3-氯-4-氟苯基)-2-羟基丙基氨基甲酸叔丁酯和(1S,2R)-1-(3-氯-4-氟苯基)-2-羟基丙基氨基甲酸叔丁酯的5:1混合物(330)，其为澄清油状物。
步骤4:在RT在氮气下向330(354mg,1.165mmol)在THF(5.5mL)中的搅拌溶液中经注射器逐滴加入4-硝基苯甲酸(194.8mg,1.165mmol)，随后加入Ph3P(305.7mg,1.165mmol)且最终纯的DIAD(225.7μL,1.165mmol)。可检测到轻微的放热。1小时后，加入另外的0.5当量的4-硝基苯甲酸、三苯基膦和DIAD，之后将反应混合物搅拌另外的1小时。将反应混合物用最少量的DCM直接加载至SiO2柱(Biotage 40S)柱上并用己烷/EtOAc(9/1)洗脱。将含有产物的馏分快速洗脱且其为不纯的。合并馏分并浓缩为黄色固体。将粗产物在超声的同时用Et2O研磨得到粉末状物，将其滤出并用乙醚淋洗，得到300mg(57％)的主要非对映异构体(1S,2R)-4-硝基苯甲酸1-(叔丁氧基羰基氨基)-1-(3-氯-4-氟苯基)丙-2-酯(332)。手性HPLC分析显示针对外消旋物质的两个清楚拆分的峰以及针对在此制备的物质的仅一个峰，其估计的ee＞95％。
步骤5:在RT在氮气下向332(103mg,0.227mmol)在DCM(2.2mL)中的搅拌溶液中加入TFA(1mL)。2小时后，将反应混合物在Rotovap和高真空浓缩干燥。将粗略推定的TFA盐重新溶解于DCM(5mL)中并用10％Na2CO3水溶液(5mL)快速搅拌。5分钟后，分离有机相，干燥(MgSO4)，滤过并浓缩得到80mg(100％)(1S,2R)-4-硝基苯甲酸1-氨基-1-(3-氯-4-氟苯基)丙-2-酯(334)，其为黄色油状物，其无需另外纯化即可使用。
步骤6:向334(80mg,0.227mmol)在DCM(1.1mL)中的搅拌溶液中在RT在氮气下经注射器先后加入纯的CDI(40.5mg,0.249mmol)、纯的DIPEA(79.0μL,0.454mmol)。30分钟后，加入作为固体的洁净的72(43.6mg,0.227mmol)。搅拌过夜后，LC/MS显示针对期望产物的主要的LC和MS峰。将反应混合物用DCM稀释为30mL并用10％枸橼酸(2x30mL)和饱和NaHCO3水溶液(2x30mL)洗涤。将有机相干燥(MgSO4)，滤过并浓缩得到116mg(90％)(1S,2R)-4-硝基苯甲酸1-(3-氯-4-氟苯基)-1-(2-(异丙基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)丙-2-酯(336)，其为黄色固体，其没有进一步纯化即可使用。
步骤7:向336(116mg,0.203mmol)在MeOH(2mL)中的搅拌溶液中在RT在氮气下加入作为固体的洁净的K2CO3(112mg,0.813mmol)。30分钟后，将反应混合物用DCM稀释为30mL且用H2O(1x30mL)洗涤。分离有机相，干燥(MgSO4)，滤过并浓缩为黄色油状物，将其加载至SiO2柱(Biotage 12M)上并用EtOAc洗脱得到46mg(54％)I-89，其为灰白色固体。
N-((1S,2R)-1-(3-氯-4-氟苯基)-2-羟基丁基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶 并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-91)类似地制备，除了在步骤3中使用乙基溴化镁代替甲基溴化镁之外:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06(s,1H),7.42(dd,1H),7.23(m,1H),7.09(m,1H),5.62(d,1H),4.83(m,2H),4.35(s,2H),4.11(m,2H),3.85(m,1H),3.64(dd,2H),2.64(dd,2H),1.39(m,1H),1.22(d,6H)；MSm/z(APCI-pos)M+1＝436.5。
实施例53
N-((R)-1-(3,4-二氯苯基)乙基)-2-(1,1,1-三氟-3-羟基丙-2-基氨基)-5,6-二 氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-92)
步骤1:向2-氨基-3,3,3-三氟丙酸(250mg,1.75mmol,CASRN17463-43-3)在二噁烷(9mL)和1M Na2CO3(9mL)中的搅拌溶液中在0℃在氮气下加入作为固体的洁净的Boc2O(381mg,1.75mmol)。2小时后，将凝胶状混合物在Rotovap中部分浓缩，然后用EtOAc(30mL)和30mL2N HCl(pH＜3)稀释。将混合物简单搅拌并分离各层。将有机相用盐水(1x30mL)洗涤，干燥(MgSO4)，滤过并浓缩得到294mg(69％)2-(叔丁氧基羰基氨基)-3,3,3-三氟丙酸(338)，其为澄清油状物，其无需另外纯化即可使用。
步骤2:向338(294mg,1.209mmol)在THF(10mL)中的搅拌溶液中在0℃在氮气下经注射器先后加入纯的NMM(159.5μL,1.451mmol)和纯的氯甲酸乙酯(138.7μL,1.451mmol)。45分钟后，将所得的混悬液经GF/F滤纸用THF滤过并将滤液分离并在0℃在氮气下搅拌。加入NaBH4(45.74mg,1.209mmol)在H2O(2mL)中的溶液并移去冷却浴。约15分钟后，将反应混合物浓缩并将残留物在搅拌的同时重新混悬于Et2O(30mL)和H2O(30mL)中。搅拌5分钟后，分离各层并将有机相用盐水(1x30mL)洗涤。将有机相(MgSO4)，滤过并浓缩得到240mg(86％)1,1,1-三氟-3-羟基丙-2-基氨基甲酸叔丁酯(340)，其为白色固体。
步骤3:向340(240mg,1.047mmol)在DCM(3mL)中的搅拌溶液中在0℃在氮气下加入固体咪唑(71.29mg,1.047mmol)，随后经注射器加入纯的叔丁基氯二苯基甲硅烷(272.3μL,1.047mmol)。4小时后，将反应混合物用DCM稀释为30mL并用2N HCl(2x30mL)和饱和NaHCO3水溶液(2x30mL)洗涤。分离有机相，干燥(MgSO4)，滤过并浓缩得到460mg(94％)3-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)-1,1,1-三氟丙-2-基氨基甲酸叔丁酯，其为白色固体(342)。
步骤4:向342(229mg,0.490mmol)在DCM(3.3mL)中的搅拌溶液中在0℃在氮气下经移液管加入纯的TFA(1.6mL)。1小时后，将反应混合物在Rotovap中在高真空浓缩，然后重新溶解于DCM(30mL)和1M Na2CO3(30mL)的混合物中。将混合物搅拌5分钟并分离各层。将水相用DCM(1x20mL)萃取。将有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过并浓缩得到180mg(100％)3-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)-1,1,1-三氟丙-2-胺，其为黄色油状物(344)。
步骤5:向344(180mg,0.490mmol)在THF(1.5mL)中的搅拌溶液中在RT在氮气下加入固体(1H-吡唑-1-基)亚甲基二氨基甲酸苄酯(186mg,0.490mmol)。搅拌过夜后，将反应混合物用DCM稀释为30mL并用2N HCl(2x30mL)和饱和NaHCO3水溶液(2x30mL)洗涤。将有机相干燥(MgSO4)，滤过并浓缩为黄色泡沫状物。将粗产物经SiO2色谱法(Biotage 25S柱)纯化(用己烷/EtOAc(4/1)洗脱)得到210mg(63％)(Z)-11,11-二甲基-3-氧代-1,10,10-三苯基-7-(三氟甲基)-2,9-二氧杂-4,6-二氮杂-10-硅杂十二烷-5-亚基氨基甲酸苄酯(346)，其为澄清油状物。
步骤6:向346(210mg,0.310mmol)在95％EtOH/THF(5mL,1:1)中的搅拌溶液中加入Pearlman催化剂(21.8mg,0.0310mmol)。使得混悬液经过使用氢气的真空/净化循环三次，然后在1个氢气大气压保持过夜。然后将混合物经GF/F滤纸用95％乙醇滤过并将滤液浓缩得到127mg(100％)1-(3-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)-1,1,1-三氟丙-2-基)胍(348)，其为白色固体。
步骤7:向348(1.37g,3.35mmol)在无水EtOH(10mL)中的搅拌溶液中在RT在氮气下加入洁净固体的固体21(0.851g,3.35mmol)。将反应混合物在加盖的反应瓶中密封，加热至80℃并搅拌60小时。将反应混合物冷却至RT并在Rotovap中在高真空浓缩得到黄色泡沫状物。将粗产物加载至预先用EtOAc/己烷(3/7)平衡的SiO2柱(Biotage 40M)并洗脱。在第一个水合茚三酮(ninhydrin)阳性斑点洗脱出后，洗脱剂变为EtOAc/己烷(1/1)且第二个水合茚三酮阳性斑点洗脱出。收集含有产物的馏分并分开浓缩得到淡黄色泡沫状物。高Rf水合茚三酮阳性斑点相应于TBDPS保护的产物且得到150mg(8％)2-(3-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)-1,1,1-三氟丙-2-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(350)和250mg(21％)2-(1,1,1-三氟-3-羟基丙-2-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(352)。
步骤8:向352(53mg,0.15mmol)在DCM(750μL)中的搅拌溶液中在RT在氮气下加入TFA(750μL)。将溶液搅拌2小时，然后在Rotovap中在高真空浓缩。将残留物重新溶解于DCM(10mL)中并用1M Na2CO3(10mL)快速搅拌5分钟。分离各层并将水相用DCM(2x10mL)萃取。将合并的萃取物干燥(MgSO4)，滤过并浓缩得到29mg(76％)3,3,3-三氟-2-(5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基氨基)丙-1-醇(354)，其为黄色泡沫状物。
步骤9:向185(21.0mg,0.111mmol)在DCM(1mL)中的搅拌溶液中在RT在氮气下经注射器先后加入纯的DIPEA(38.5μL,0.221mmol)，随后加入作为固体的洁净的CDI(17.9mg,0.111mmol)。搅拌30分钟后，将溶液经移液管加至含有固体354(29mg,0.111mmol)的烧瓶中。将反应混合物在RT在氮气下搅拌过夜。将反应混合物用DCM稀释为30mL并先后用2N HCl(2x30mL)和饱和NaHCO3水溶液(2x30mL)洗涤。将有机相干燥(MgSO4)，滤过并浓缩为黄色泡沫状物。将粗产物经SiO2色谱法(Biotage 12S)纯化(用EtOAc洗脱)。收集含有产物的馏分并浓缩得到10mg(19％)I-92，其为黄色残留物:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(s,1H),7.39(m,2H),7.17(dd,1H),5.57(d,1H),4.97(m,1H),4.91(m,1H),4.75(d,1H),4.36(s,2H),3.96(m,2H),3.65(m,2H),2.69(dd,2H),1.48(d,6H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝478.5。
实施例54
N-(4-(3,4-二氯苯基)哌啶-4-基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-93)
步骤1:向2-(3,4-二氯苯基)乙腈(3.50g,18.8mmol,CASRN 3218-49-3)和15-冠-5(0.414g,1.88mmol)在DMF(75mL)中的搅拌溶液中在0℃在氮气下加入两批NaH(1.88g,47.0mmol,60％在矿物油中分散)。将反应混合物温热至RT并搅拌35分钟，然后重新冷却至0℃。加入NaI(2.82g,18.8mmol)，随后经注射器加入新鲜制备的二-(2-氯乙基)氨基甲酸叔丁酯(4.56g,18.8mmol)在DMF(10mL)中的溶液。将反应混合物温热至RT并搅拌过夜。然后将反应混合物在搅拌的同时倾倒至冰冷的饱和NH4Cl溶液(250mL)中并将混合物用EtOAc(2x250mL)萃取。将合并的萃取物干燥(MgSO4)，滤过并浓缩。将粗产物加载至SiO2柱(Biotage 40L)并用己烷/EtOAc(6/1)洗脱得到4.54g(68％)4-氰基-4-(3,4-二氯苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(356)，其为灰白色固体。
步骤2:将356(4.54g,12.78mmol)和浓HCl(106.5mL,1278mmol)的溶液加热至回流并搅拌过周末。然后将反应混合物冷却至RT，转移至分液漏斗中，并用Et2O(1x200mL)洗涤。将水层在Rotovap中在高真空浓缩。将所得的固体溶解于10％NaOH(20.45g,51.12mmol)中。向溶液中加入二噁烷(30mL)，随后加入Boc2O(2.929g,13.42mmol)。搅拌过夜后，将反应混合物用H2O(100mL)稀释并用乙醚(1x100mL)洗涤。将水层用固体KHSO4酸化，然后用DCM(200mL)萃取。将合并的萃取物干燥(MgSO4)，滤过，浓缩并在高真空干燥得到1.98g(41％)1-(叔丁氧基羰基)-4-(3,4-二氯苯基)哌啶-4-羧酸(358)，其为白色泡沫状物。
步骤3:向358(187mg,0.4997mmol)在DMF(1.5mL)中的搅拌溶液中在RT在氮气下经注射器加入纯的TEA(167.1μL,1.199mmol)，随后经注射器加入纯的DPPA(129.6μL,0.5996mmol)。将溶液在RT搅拌2小时然后温热至60℃。在60℃保持3小时后，将反应混合物冷却至RT并用EtOAc稀释为30mL。将有机萃取物用H2O(3x30mL)和盐水(1x30mL)洗涤。将有机相干燥(MgSO4)，滤过并浓缩得到170mg(91％)4-(3,4-二氯苯基)-4-异氰酸基哌啶-1-羧酸叔丁酯(360)，其为澄清油状物。
步骤4:在加盖的反应瓶中向360(133mg,0.358mmol)在THF(1.8mL)中的搅拌溶液中在RT加入DIPEA(125μL,0.716mmol)，随后加入固体72(81.9mg,0.358mmol)。反应混合物最初为混悬液，但历时约30分钟变为棕色溶液。搅拌过夜后，将反应混合物用EtOAc稀释为30mL并先后用10％枸橼酸溶液(2x30mL)、饱和NaHCO3水溶液(2x30mL)和盐水(1x30mL)洗涤。将有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过并浓缩为澄清的油状物。将粗产物加载至SiO2柱(Biotage 12M)上并用EtOAc/己烷(3/2)洗脱得到102mg(50％)4-(3,4-二氯苯基)-4-(2-(异丙基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(362)，其为黄色泡沫状物。
步骤5:在加盖的反应瓶中向362(102mg,0.1810mmol)在DCM(1.8mL)中的搅拌溶液中在RT加入MeOH(180μL)，随后加入4M HCl在二噁烷中的溶液(452.5μL,1.810mmol)。2小时后，将反应混合物用Et2O(5mL)稀释，产生粗的黄色沉淀物。将固体滤出并用大量乙醚洗涤得到80mg(80％)I-93，其为淡黄色固体，将其在高真空干燥:MS m/z(APCI-pos)M+1＝463.4。
实施例55
(R)-N-(3-氰基-1-(3,4-二氯苯基)丙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二 氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-103)
步骤1:向174(1.327g,4.144mmol)在THF(30mL)中的搅拌溶液中在0℃加入TEA(0.6931mL,4.973mmol)和MsCl(0.3528mL,4.559mmol)并将溶液在0℃搅拌1小时。将混合物用EtOAc稀释，用稀HCl溶液、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，干燥(MgSO4)并浓缩得到1.51克(91％)(R)-甲磺酸3-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(3,4-二氯苯基)丙酯(364)。产物可能含有一些相应的氯化物。
步骤2:向364(750mg,1.88mmol)在THF(25mL)和丙酮(5mL)中的搅拌溶液中在RT加入NaI(1411mg,9.41mmol)并继续搅拌过夜。将混合物倾倒至水中，用EtOAc萃取，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并浓缩得到810mg(100％)(R)-1-(3,4-二氯苯基)-3-碘丙基氨基甲酸叔丁酯(366)。
步骤3:向366(810mg,1.88mmol)在DMSO(4mL)中的搅拌溶液中在RT加入NaCN(102mg,2.07mmol)并将所得的混合物在80℃搅拌过夜。将混合物倾倒至水中，用EtOAc萃取，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并浓缩。将产物经SiO2色谱法纯化(用20％EtOAc/己烷洗脱)得到534mg(86％)(R)-3-氰基-1-(3,4-二氯苯基)丙基氨基甲酸叔丁酯(368)。
步骤4:向368(534mg,1.62mmol)在DCM(5mL)中的搅拌溶液中加入4M HCl(811μL,3.24mmol)在二噁烷中的溶液并继续搅拌12小时。将混合物用乙醚稀释，滤过并干燥得到225mg(52％)(R)-4-氨基-4-(3,4-二氯苯基)丁腈盐酸盐(370)，其为白色固体。
步骤5:370和28的缩合根据在实施例1步骤6中的操作进行，除了将22用370代替之外。将粗产物经反相色谱法(Biotage SP4 C18)纯化(用MeCN/H2O梯度(5-95％MeCN)洗脱)得到49mg(46％)I-103，其为灰白色固体:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(s,1H),7.45(d,1H),7.40(s,1H),7.17(d,1H),5.00(dd,1H),4.89(d,1H),4.80(d,1H),4.38(d,1H),4.32(d,1H),3.98(m,2H),3.97-4.05(m,1H),3.60(t,2H),3.54(t,2H),2.68(t,2H),2.41(t,2H),2.18(m,2H),2.02(宽二重峰,2H),1.53(m,2H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝489.1。
(R)-N-(3-氰基-1-(3,4-二氯苯基)丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3, 4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-104)类似地制备，除了使用72代替28之外。将粗产物经反相色谱法(Biotage SP4 C18)纯化(用MeCN/H2O梯度(5-95％MeCN)洗脱)得到72mg(61％)I-104，其为灰白色固体:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(s,1H),7.45(d,1H),7.40(d,1H),7.17(d,1H),5.00(m,1H),4.80(d,1H),4.76(d,1H),4.36(d,1H),4.31(d,1H),4.09(m,1H),3.66(t,2H),2.67(t,2H),2.40(t,2H),2.21(m,1H),2.15(m,1H),1.22(d,6H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝447.1。
实施例56
(R)-N-(1-(3,4-二氯苯基)-3-(甲基磺酰基)丙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨 基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-105)
步骤1:将366(810mg,1.88mmol)和甲硫醇钠(158mg,2.26mmol)在DMSO(4mL)中的溶液在50℃搅拌过夜。将混合物倾倒至水中，用EtOAc萃取，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并真空浓缩得到395mg(60％)(R)-1-(3,4-二氯苯基)-3-(甲基硫基)丙基氨基甲酸叔丁酯(372)。
步骤2:向372(660mg,1.88mmol)在DCM(20mL)中的搅拌溶液中在0℃加入MCPBA(1393mg,5.65mmol)并继续在RT搅拌24小时。加入NaOH稀溶液并将混合物用DCM萃取两次，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用10％EtOAc/己烷洗脱)得到609mg(84％)(R)-1-(3,4-二氯苯基)-3-(甲基磺酰基)丙基氨基甲酸叔丁酯(374)，其为白色固体。
步骤3:向374(395mg,1.03mmol)在DCM(5mL)中的搅拌溶液中加入4M HCl在二噁烷中的溶液(1.03mL,4.13mmol)并继续搅拌过夜。将混合物用乙醚稀释，滤过，干燥并浓缩得到248mg(75％)(R)-1-(3,4-二氯苯基)-3-(甲基磺酰基)丙-1-胺盐酸盐(376)，其为白色固体。
步骤4:376和28的缩合根据在实施例1步骤6中的操作进行，除了将22用376代替之外。将粗产物经反相色谱法(Biotage SP4 C18)纯化(用MeCN/H2O梯度(5-95％MeCN)洗脱)得到I-105，其为白色固体:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(s,1H),7.43(d,1H),7.42(宽单峰,1H),7.17(dd,1H),5.44(d,1H),5.01(m,1H),4.93(d,1H),4.36(s,1H),3.98(m,2H),3.97-4.05(m,1H),3.64(m,2H),3.54(m,2H),3.12(t,2H),2.97(s,3H),2.67(t,2H),2.35(m,2H),2.01(宽二重峰,2H),1.53(m,2H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝542.1。
(R)-N-(1-(3,4-二氯苯基)-3-(甲基磺酰基)丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡 啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-106)类似地制备，除了使用72代替28之外。将粗产物经反相色谱法(Biotage SP4 C18)纯化(用MeCN/H2O梯度(5-95％MeCN)洗脱)得到52mg(60％)I-106，其为灰白色固体:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(s,1H),7.41-7.44(m,2H),7.17(d,1H),5.31(d,1H),5.01(m,1H),4.80(d,1H),4.35(s,2H),4.10(m,1H),3.64(t,2H),3.11(t,2H),2.96(s,3H),2.66(t,2H),2.35(m,2H),1.23(d,6H)；m/z(APCI-pos)M+1＝500.1。
实施例57
N-(1-(1H-吲哚-6-基)乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3, 4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-107)
标题化合物根据在实施例1步骤6中的操作制备，除了将22用1-(1H-吲哚-6-基)乙胺(30.8mg,0.192mmol,Sphinx Scientific)代替之外。将反应混合物经SiO2色谱法纯化(用MeOH/EtOAc梯度(0-1％MeOH)洗脱)。将回收的固体经反相柱色谱法(Biotage SP4 C18)重新纯化(用MeCN/H2O梯度(5-95％MeCN)洗脱)得到36mg(44％)I-107其为粉色固体:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.44(宽单峰,1H)8.05(s,1H),7.60(d,1H),7.38(s,1H),7.19(m,1H),7.11(d,1H),6.51(m,1H),5.16(m,1H),4.92(d,1H),4.78(d,1H),4.34(d,1H),4.29(d,1H),3.97(m,1H),3.94-4.04(m,2H),3.64(t,2H),3.52(t,2H),2.68(t,2H),2.00(宽二重峰,2H),1.58(d,3H),1.51(m,2H)；m/z(APCI-pos)M+1＝421.1。
对映异构体经手性HPLC分离得到(R)-N-(1-(1H-吲哚-6-基)乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺和(S)-N-(1-(1H-吲哚-6-基)乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺。
实施例58
(R)-N-(3-氰基-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)丙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)- 5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-108)
步骤1:向4-(二氟甲氧基)苯甲醛(10g,58mmol)和(S)-2-甲基丙烷-2-亚硫酰胺(13g,105mmol)在THF(50mL)中的搅拌溶液中加入Ti(OEt)4(43mL,209mmol)并将反应混合物在RT搅拌过夜。将混合物倾倒至盐水(400mL)中并搅拌10分钟，滤过，并将滤过的固体用另外的THF/EtOAc淋洗。分离有机层，并将水层用另外的EtOAc萃取。将合并的萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并浓缩。将残留物干法加载并经过SiO2填料(用EtOAc/己烷梯度(10-15％EtOAc)洗脱)得到16g(100％)(S,E)-N-(4-(二氟甲氧基)亚苄基)-2-甲基丙烷-2-亚硫酰胺(378)，其为淡黄色液体。
步骤2:向二异丙基胺(16.70mL,119.1mmol)在THF(80mL)中的搅拌溶液中在0℃逐滴加入2.5M正丁基锂(48.82mL,122.0mmol)并继续搅拌15分钟。将溶液冷却至-78℃并逐滴加入乙酸甲酯(9.219mL,116.2mmol)并继续搅拌30分钟。在-78℃将Ti(O-iPr)3Cl(58.30mL,244.1mmol)在THF(20mL)中的溶液逐滴引入并继续搅拌45分钟。然后逐滴加入378(16g,58.12mmol)在THF(20mL)中的溶液并继续搅拌3小时。在-78℃将反应混合物通过逐滴加入饱和NH4Cl水溶液进行淬灭并温热至RT。将混合物用EtOAc萃取三次，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/己烷梯度(20-60％EtOAc)洗脱)得到8.67g(43％)(R)-3-(4-(二氟甲氧基)苯基)-3-((S)-1,1-二甲基乙基亚硫酰氨基)丙酸甲酯(380)，其为低熔点的白色固体，以及9.67g不纯的物质。
步骤3:向380(8.98g,25.7mmol)在MeOH(60mL)和DCM(30mL)中的搅拌溶液中加入4M HCl在二噁烷中的溶液(12.9mL,51.4mmol)并在RT继续搅拌60分钟。用干燥的氮气流除去HCl且在旋转蒸发器上除去大部分溶剂。将乙醚加至残留物中并将沉淀的白色固体滤过得到7.23g(100％)(R)-3-氨基-3-(4-(二氟甲氧基)苯基)丙酸甲酯盐酸盐(382)，经手性HPLC显示其为约95％ee。
步骤4:向382(7.2g,25.6mmol)在DCM(50mL)中的搅拌的混合物中在RT加入Boc2O(5.86g,26.8mmol)和TEA(3.92mL,28.1mmol)并继续搅拌6小时。将混合物浓缩并将残留物经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/己烷梯度(10-30％EtOAc)洗脱)得到9g(100％(R)-3-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-(二氟甲氧基)苯基)丙酸甲酯(384)，其含有少量溶剂。
步骤5:在-78℃向384(7.1g,20.6mmol)在THF(150mL)中的搅拌的混合物中逐滴加入1M LiAlH4(30.8mL,30.8mmol)并继续搅拌3-4小时。将混合物用THF稀释，通过分批加入Na2SO4十水合物进行淬灭并滤过。将固体用另外的THF淋洗，并将滤液浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用50％EtOAc/己烷洗脱)得到3.58g(55％)(R)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-3-羟基丙基氨基甲酸叔丁酯(386)，其为澄清的粘稠液体，经手性HPLC显示其为约95％ee。
步骤6:向386(550mg,1.73mmol)在DCM(20mL)中的搅拌溶液中在0℃加入TEA(290μL,2.08mmol)和MeSO2Cl(148μL,1.91mmol)并在0℃继续搅拌1小时。将混合物用EtOAc稀释，先后用水、稀HCl溶液、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并浓缩得到685mg(100％)(R)-甲磺酸3-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-(二氟甲氧基)苯基)丙酯(388)，其含有一些相应的氯化物。
步骤7:向388在DMSO(5mL)中的搅拌溶液中加入NaCN(92.0mg,1.88mmol)和NaI(25.6mg,0.171mmol)并将混合物在85℃加热过夜。冷却至RT后，将混合物用H2O(100mL)稀释，搅拌30分钟并滤过得到褐色固体。将固体经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/己烷梯度(0-25％EtOAc)洗脱)得到261mg(47％)(R)-3-氰基-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)丙基氨基甲酸叔丁酯(390)，其为白色固体。
步骤8:向390在DCM(5mL)中的搅拌溶液中加入4M HCl在二噁烷中的溶液(400μL,1.60mmol)并继续搅拌过夜。将混合物浓缩并用乙醚研磨得到204mg(87％)(R)-4-氨基-4-(4-(二氟甲氧基)苯基)丁腈盐酸盐(292)，得到白色固体。
步骤9:292和28的缩合根据在实施例1步骤6中的操作进行，除了将22用292代替之外。将粗产物经反相色谱法(Biotage SP4 C18)纯化(用MeCN/H2O梯度(5-95％MeCN)洗脱)得到67mg(60％)I-108，其为白色固体:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(s,1H),7.32(d,2H),7.13(d,2H),6.51(t,1H),5.01(m,1H),4.96(d,1H),4.92(d,1H),4.37(d,1H),4.31(d,1H),3.97(m,1H),3.94-4.04(m,2H),3.65(t,2H),3.53(m,2H),2.68(t,2H),2.00(宽二重峰,2H),1.58(d,3H),1.51(m,2H)；m/z(APCI-pos)M+1＝487.2。
实施例59
2-((S)-2-羟基-1-甲基-乙基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸 (2-三氟甲基-嘧啶-5-基甲基)-酰胺(I-109)
(S)-2-(1-羟基丙-2-基氨基)-N-((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)甲基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-109)根据在实施例17中的操作通过将138和((2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)甲基)胺(CASRN 608515-92-0)缩合来制备；MSm/z(APCI-pos)M+1＝412.2。
实施例60
N-(3-氨基-1-(3,4-二氯苯基)丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d] 嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-110)
步骤1:历时30分钟向3-(3,4-二氯苯基)-3-氧代丙腈(5.16g,24.1mmol,CASRN4640-68-0)在EtOH(115mL)中的溶液中缓慢加入NaBH4(0.912g,24.1mmol)。将反应混合物在RT搅拌3小时，浓缩为固体并在NH4Cl水溶液和EtOAc之间分配。分离各相并将有机萃取物用盐水洗涤，干燥，滤过并浓缩。将粗的3-(3,4-二氯苯基)-3-羟基丙腈在THF(90mL)中吸收，在0℃浴中冷却并历时30分钟加入BH3-THF(1M,75.5mL)。将反应混合物回流加热2.5小时，冷却至0℃并用H2O淬灭。将反应混合物用DCM萃取三次并将合并的有机相干燥，滤过并浓缩。将粗产物溶解于DCM中，然后加入1MHCl/二噁烷。将溶液用Et2O稀释并将所得的沉淀物经滤过收集，用Et2O洗涤，并在高真空干燥得到4.41g(72％)3-氨基-1-(3,4-二氯苯基)丙-1-醇盐酸盐(294)，其为固体:1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.53(d,1H),7.46(d,1H),7.28(dd,1H),4.79(m,1H),3.05(m,2H),1.95(m,2H)。
步骤2:向294(4.41g,17.2mmol)在二噁烷(40mL)和5N NaOH(8.59mL)中的溶液中在0℃经加料漏斗逐滴加入Boc2O(5.63g,25.8mmol)在二噁烷(40mL)中的溶液。将反应混合物在RT搅拌4小时，然后用EtOAc稀释。分离各相并将有机相先后用NaHCO3洗涤，然后用盐水洗涤三次，干燥，滤过并浓缩为澄清的玻璃状物。将粗产物溶解于THF(100mL)中并加入异二氢吲哚-1,3-二酮(2.78g,18.9mmol)和PPh3(7.17g,25.8mmol)并将所得的溶液冷却至0℃。向溶液中逐滴加入DEAD(4.49mL,25.8mmol)，并将反应混合物在搅拌的同时温热至RT过夜。将混合物真空浓缩并将残留物经SiO2色谱法纯化(用己烷/EtOAc(4:1)洗脱)得到4.71g(61％)3-(3,4-二氯苯基)-3-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)丙基氨基甲酸叔丁酯(296)，其为无色玻璃状物:LRMS(APCI pos)m/e＝348.9(M-Boc)。
步骤3:向296(4.71g,10.5mmol)在MeOH中的溶液中加入肼(0.336g,10.5mmol)并将反应混合物在RT搅拌过夜。将粘稠的白色混悬液吸收于热的MeOH中，超声，滤过并用MeOH洗涤。将滤液浓缩得到2.98g(89％)3-氨基-3-(3,4-二氯苯基)丙基氨基甲酸叔丁酯(298)，其为淡黄色泡沫状物:LRMS(APCI pos)m/e＝319.0(M+H)。
步骤4:向298(35mg,0.11mmol)在DCM(2mL)中的溶液中加入DIPEA(0.032mL,0.18mmol)，随后加入CDI(15mg,0.091mmol)并将混合物搅拌30分钟。向所得的溶液中加入72(21mg,0.091mmol)并将反应混合物在RT搅拌5小时。将反应混合物用H2O(15mL)稀释，用DCM(2x15mL)萃取，干燥(MgSO4)，滤过并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用MeOH/DCM(5:95)洗脱)得到29mg(59％)3-(3,4-二氯苯基)-3-(2-(异丙基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)丙基氨基甲酸叔丁酯(300)，其为淡黄色固体:LRMS(APCI pos)m/e＝537.1(M+H)。
步骤5:向300(29mg,0.0540mmol)在DCM(2mL)中的溶液中加入TFA(1mL,13.0mmol)。将反应混合物在RT搅拌30分钟，浓缩，并在DCM(15mL)和饱和NaHCO3水溶液(15mL)之间分配。分离各相并将水相用DCM萃取(15mL)。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过并浓缩。将粗产物在制备性SiO2TLC板(0.5mm)上纯化(用MeOH/DCM/NH4OH(9/90/1)展开)得到11mg(47％)I-110，其为无色玻璃状物:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(s,1H),7.63(宽单峰,1H),7.39(d,1H),7.36(d,J＝8.2Hz,1H),7.15(dd,1H),4.97(m,1H),4.83(d,1H),4.38(m,2H),4.10(m,1H),3.70(m,1H),3.60(m,1H),2.89(宽单峰,2H),2.64(t,2H)1.97(m,1H),1.81(m,1H),1.21(d,6H)；LRMS(APCI pos)m/e＝437.1(M+H)。
实施例61
N-((1H-吲哚-2-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4- d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-114)
向(1H-吲哚-2-基)甲胺盐酸盐(50mg,0.27mmol,CASRN 21109-25-1)和DCM(2.5mL)的溶液中在RT先后加入TEA(50μL,0.36mmol)和CDI(44mg,0.27mmol)并将反应混合物在RT搅拌30分钟。将该溶液加至28(55mg,0.229mmol)和TEA(95.7μL,0.687mmol)在DCM(5mL)中的溶液中并将混合的溶液搅拌过夜。将该溶液直接加载至SiO2色谱柱上并用梯度己烷/EtOAc(0-10％EtOAc)洗脱得到57mg(61.1％)I-114:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.28(s,1H),8.07(s,1H),7.54(d,1H,J＝7.8Hz),7.34(d,1H,J＝7.1Hz),7.12-7.17(m,1H),7.04-7.08(m,1H),6.31-6.32(m,1H),4.99-5.03(m,1H),4.87(d,1H,J＝7.7Hz),4.50(d,2H,J＝5.9Hz),4.34(s,2H),3.94-4.04(m,3H),3.65-3.69(m,2H),3.49-3.56(m,2H),2.66-2.71(m,2H),1.98-2.04(m,2H),1.46-1.57(m,2H)；MS(APCI-pos)M+1＝407.4。
实施例62
3-(3-氯-4-氟苯基)-4-羟基-1-(2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶- 7(8H)-基)丁-1-酮(I-112)
步骤1:向在-10℃浴中冷却的2-(3-氯-4-氟苯基)乙酸(1g,5.303mmol)在THF(40mL)中的溶液中缓慢加入1M二(三甲基甲硅烷基)氨基锂在THF(11.67mL,11.67mmol)中的溶液。将反应混合物搅拌30分钟，然后逐滴加入烯丙基溴(1.147mL,13.26mmol)并将反应混合物在RT搅拌2小时。将反应混合物在0.5M HCl(50mL)和EtOAc(50mL)之间分配。分离各相，将水相用EtOAc(50mL)萃取，并将合并的有机萃取物用饱和NaCl水溶液(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，滤过并浓缩得到1.28g(105％)2-(3-氯-4-氟苯基)戊-4-烯酸(308)，其为黄色油状物:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38(dd,1H),7.19(m,1H),7.10(t,1H),5.68(m,1H),5.07(m,2H),3.62(t,1H),2.79(m,1H),2.50(m,1H)。
步骤2:向308(1.165g,5.095mmol)在THF(40mL)中的溶液中加入1MLiAlH4在THF中的溶液(10.19mL,10.19mmol)并将反应混合物在氮气下在RT搅拌1小时。将反应混合物用H2O(0.4mL)、1M NaOH(0.4mL)、然后H2O(1.2mL)淬灭，滤过，用THF淋洗，并浓缩得到642mg(59％)2-(3-氯-4-氟苯基)戊-4-烯-1-醇(310)，其为黄色油状物；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.26(m,1H),7.09(m,2H),5.68(m,1H),5.03(m,2H),3.79(m,2H),2.85(m,1H),2.47(m,1H),2.33(m,1H)。
步骤3:向冷却至0℃的310(642mg,2.99mmol)和DIPEA(0.781mL,4.49mmol)在DCM(25mL)中的溶液中加入TBDMSCl(473mg,3.14mmol)和DMAP(37mg,0.30mmol)。在RT保持6小时后，将反应混合物用H2O(50mL)稀释，分离各相并将水相用DCM(50mL)萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用己烷洗脱)得到514mg(52％)叔丁基(2-(3-氯-4-氟苯基)戊-4-烯基氧基)二甲基甲硅烷，其为无色油状物(312):1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.24(m,1H),7.04(m,2H),5.67(m,1H),4.98(m,2H),3.67(d,2H),2.77(m,1H),2.54(m,1H),2.31(m,1H),0.85(s,9H),-0.05(d,2H)。
步骤4:向312(400mg,1.22mmol)在THF(10mL)和水(10mL)的溶液中加入OsO4(0.762mL,0.0608mmol,2.5％在叔-BuOH中的溶液)。将反应混合物搅拌10分钟，然后加入NaIO4(650mg,3.04mmol)并将反应混合物在RT搅拌过夜。将反应混合物经硅藻土滤过并用THF淋洗。将滤液在EtOAc(50mL)和H2O(50mL)之间分配，分离各相并将水相用EtOAc(50mL)萃取。将合并的有机萃取物用饱和NaCl水溶液(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，滤过并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用20％EtOAc/己烷洗脱)得到302mg(75％)4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-(3-氯-4-氟苯基)丁醛(314)，其为黄色油状物:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.74(s,1H),7.28(m,1H),7.08(m,2H),3.74(m,1H),3.61(m,1H),3.38(m,1H),2.94(m,1H),2.70(m,1H),0.87(s,9H),-0.02(s,6H)。
步骤5:向314(302mg,0.913mmol)在叔-BuOH(20mL)和H2O(5mL)中的溶液中加入2M2-甲基-2-丁烯在THF中的溶液(4.56mL,9.13mmol)然后加入NaH2PO4(1.204g,10.0mmol)。将反应混合物搅拌5分钟，然后加入NaClO2(495mg,5.48mmol)并将反应混合物在RT搅拌过夜。将反应混合物在EtOAc(50mL)和0.5M HCl(30mL)之间分配，分离各相并将水相用EtOAc(50mL)萃取。将合并的有机萃取物用饱和NaCl水溶液(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，滤过并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用10％EtOAc/己烷洗脱)得到270mg(85％)4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-(3-氯-4-氟苯基)丁酸(316)，其为灰色结晶固体:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.27(dd,J＝2.3,7.1Hz,1H),7.08(m,2H),3.74(m,1H),3.61(m,1H),3.26(m,1H),2.91(m,1H),2.61(m,1H),0.86(s,9H),-0.03(d,J＝1.6Hz,6H)；MS LRMS(APCI neg)m/e＝345.1(M-H)。
步骤6:向316(30mg,0.086mmol)在MeCN(3mL)中的溶液中先后加入72(15mg,0.079mmol)、NMM(0.026ml,0.24mmol)和HATU(36mg,0.094mmol)。将反应混合物在RT搅拌1小时。将反应混合物用DCM(15mL)和H2O(15mL)稀释，分离各相并将水相用DCM(15mL)萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用5％MeOH/DCM洗脱)得到44mg(105％)4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-(3-氯-4-氟苯基)-1-(2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-基)丁-1-酮(318)，其为无色残留物:LRMS(APCI pos)m/e＝521.2(M+H)。
步骤7:向318(36mg,0.069mmol)在THF(1mL)中的溶液中加入TBAF水合物(25mg,0.090mmol)并将反应混合物在RT搅拌1小时。将反应混合物在DCM(10mL)和H2O(10mL)之间分配，分离各相并将水相用DCM(10mL)萃取。将合并的有机相干燥(MgSO4)，滤过并浓缩。将粗产物在制备性SiO2TLC板(0.5mm板)上纯化(用10％MeOH/DCM展开)得到19mg(68％)I-112，其为无色树胶状物:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.04(d,J＝11.7Hz,1H),7.29(m,1H),7.13(m,1H),7.07(m,1H),4.92(dd,1H),4.57(s,1H),4.37(m,1H),4.09(m,1H),3.80(m,3H),3.66(t,3H),3.43(m,1H),2.90(m,1H),2.74(m,1H),2.66(m,1H),2.60(m,1H),1.22(t,6H)；19F NMR(376MHz,CDCl3)δ-118.4；LRMS(APCI pos)m/e＝407.0(M+H)。
实施例63
(S)-3-(4-氯苯基)-1-(2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)- 基)-4-(甲基氨基)丁-1-酮(I-113)
步骤1:(S)-4-(叔丁氧基羰基(甲基)氨基)-3-(4-氯苯基)丁酸(320,CASRN78215-13-1)和72的缩合根据在实施例62步骤6中所述的操作进行，除了将316用320代替得到28mg(89％)(S)-2-(4-氯苯基)-4-(2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-基)-4-氧代丁基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(322)，其为淡黄色残留物:LRMS(APCI,pos)m/e＝502.2(M+H)。
步骤2:向322(28mg,0.056mmol)在MeOH(2mL)中的溶液中加入4MHCl在二噁烷中的溶液(0.6mL,2.4mmol)并将反应混合物在RT搅拌4小时。将反应混合物用DCM(25mL)和饱和NaHCO3水溶液(25mL)稀释，分离各相并将水相用10％MeOH/DCM(25mL)萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过并浓缩。将粗产物在制备性SiO2 TLC板(0.5mm)上纯化(用MeOH/DCM/NH4OH(9/90/1)展开)得到6mg(25％)I-113，其为淡黄色残留物:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.04(s,0.6H),8.02(s,0.4H),7.15-7.30(m,4H),4.80(m,1H),4.52(s,1H),4.34(m,1H),4.09(m,1H),3.74(m,1H),3.59(m,1H),3.47(m,1H),2.79-2.92(m,3H),2.51-2.73(m,3H),2.42(s,1.2H),2.39(s,2.8H),1.87(宽单峰,2H),1.22(m,6H)；LRMS(M+H)(APCI pos)m/e＝402.1。
实施例64
(R)-N-(1-(4-氯苯基)-3-羟基丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d] 嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-154)
步骤1:向(R)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙酸(710mg,3.56mmol,CASRN131690-61-4)在THF(30mL)中的混悬液中在氮气下在0℃缓慢加入1MLiAlH4在Et2O中的溶液(5.33mL,5.33mmol)。将反应混合物在0℃搅拌90分钟。将反应混合物用H2O(0.2mL)、15％NaOH(0.2mL)、然后H2O(0.6mL)淬灭并在RT搅拌过夜。将混合物滤过，用THF淋洗，并浓缩得到593mg(90％)(R)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇(324)，其为无色油状物:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.32(d,2H),7.24(d,2H),4.25(t,1H),4.13(m,1H),3.79(m,2H),1.85(m,2H),1.65(宽单峰,2H)；LRMS(APCI,pos)m/e＝185.9(M+H)。
步骤2:324的甲硅烷基化根据在实施例62步骤3中所述的操作进行，除了将310用324(243mg,1.31mmol)代替之外，得到383mg(98％)(R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(4-氯苯基)丙-1-胺(328)，其为无色油状物:LRMS(APCI pos)m/e＝300.0(M+H)。
步骤3:(S)-4-(叔丁氧基羰基(甲基)氨基)-3-(4-氯苯基)丁酸(328)和72的缩合根据在实施例62步骤6中所述的操作进行，除了将316用328代替之外，得到90mg(87％)(R)-N-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(4-氯苯基)丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(324)，其为淡黄色粘稠油状物:LRMS(APCI pos)m/e＝518.6(M+H)。
步骤4:324的脱甲硅烷基化根据在实施例62步骤7中所述的操作进行得到32mg(46％)I-154，其为黄色玻璃状物:LRMS(APCI pos)m/e＝404.3(M+H)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(s,1H),7.31(d,2H),7.26(d,2H),5.47(m,1H),5.12(m,1H),4.94(m,1H),4.34(s,2H),4.09(m,1H),3.59-3.75(m,4H),2.66(t,2H),2.11(m,1H),1.84(m,1H),1.22(d,6H)。
N-(1-(3,4-二氯苯基)-3-羟基丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d] 嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-115)类似地制备，除了在步骤1中将(R)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙酸用3-氨基-3-(3,4-二氯苯基)丙酸代替之外得到I-115，其为淡黄色泡沫状物:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(s,1H),7.40(m,2H),7.17(dd,1H),5.69(d,1H),5.09(m,1H),4.37(m,2H),4.12(m,1H),3.60-3.76(m,4H),2.67(t,2H),2.11(m,1H),1.85(m,1H),1.23(d,6H)；LRMS(APCI pos)m/e＝438.4(M+H)。
实施例65
(R)-N-(3-氨基-1-(4-氯苯基)丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d] 嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-116)
步骤1:(R)-1-(4-氯苯基)-3-羟基丙基氨基甲酸叔丁酯(326)由(R)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇((S)-异构体为CASRN 886061-26-3)根据在实施例60步骤2中的操作制备。产物为无色浆状物:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.32(d,2H),7.24(d,2H),5.04(宽的多重峰,1H),4.88(宽单峰,1H),3.69(m,2H),2.04(m,1H),1.80(m,1H),1.44(s,9H)；LRMS(APCIpos)m/e＝185.9(M-Boc片段)。
步骤2:向326(861mg,3.013mmol)在THF(25mL)中的溶液中在0℃加入PPh3(1.185g,4.519mmol)，然后加入DIAD(0.5836mL,3.013mmol)并将溶液搅拌15分钟，然后加入二苯基磷酰基叠氮化物(0.974mL,4.519mmol)。在RT保持22小时后，将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(50mL)淬灭，分离各相并将水相用EtOAc(50mL)萃取。将合并的有机萃取物用饱和NaCl水溶液(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，滤过并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用己烷洗脱)得到720mg(77％)(R)-3-叠氮基-1-(4-氯苯基)丙基氨基甲酸叔丁酯(328)，其为白色固体：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.32(d,2H),7.21(d,2H),4.91(m,1H),4.75(m,1H),3.31(m,2H),1.98(m,2H),1.41(s,9H)。
步骤3:向328(620mg,1.99mmol)在DCM(10ml)中的溶液中加入TFA(5mL,64.9mmol)。将反应混合物在RT搅拌45分钟，浓缩，在DCM(15mL)和饱和NaHCO3水溶液(15mL)之间分配，分离各相并将水相用10％MeOH/DCM(15mL)萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过并浓缩得到414mg粗的淡黄色油状物。将粗的油状物部分(314mg)经SiO2色谱法纯化(用5％MeOH/DCM洗脱)，得到137mg(33％)(R)-3-叠氮基-1-(4-氯苯基)丙-1-胺(330)，其为褐色油状物:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.32(d,2H),7.26(d,2H),4.04(t,1H),3.36(m,1H),3.22(m,1H),1.89(m,2H),1.55(宽单峰,2H)；LRMS(APCI pos)m/e＝210.9(M+H)。
步骤4:330和72的缩合根据在实施例62步骤6中所述的操作进行，除了将316用330代替得到226mg(81％)(R)-N-(3-叠氮基-1-(4-氯苯基)丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(332)，其为黄色固体:LRMS(APCI pos)m/e＝429.4(M+H)。
步骤5:向332(53mg,0.12mmol)在THF(2mL)和H2O(2mL,0.12mmol)中的溶液中加入PPh3(65mg,0.25mmol)。将反应混合物在50℃油浴中搅拌2小时。将反应混合物部分浓缩然后在制备性TLC板(0.5mm)上纯化(用MeOH/DCM/NH4OH(9/90/1)展开)得到32mg(64％)I-116，其为淡黄色玻璃状物:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(s,1H),7.40(宽单峰,1H),7.23-7.29(m,4H),5.01(m,1H),4.79(d,1H),4.37(m,2H),4.10(m,1H),3.69(m,1H),3.61(m,1H),2.85(m,2H),2.64(t,2H),1.95(m,1H),1.80(m,1H),1.22(d,6H)；LRMS(APCI pos)m/e＝403.3(M+H)。
(R)-N-(3-氨基-1-(3-氯苯基)丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d] 嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-118)类似地制备，除了在步骤1中将(R)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇用(R)-3-氨基-3-(3-氯苯基)丙-1-醇代替之外，得到20mg(71％)I-118，其为黄色固体:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(s,1H),7.48(d,1H),7.17-7.28(m,3H),5.02(m,1H),4.80(d,1H),4.38(m,2H),4.11(m,1H),3.60-3.72(m,2H),2.85(m,2H),2.65(t,2H),1.96(m,1H),1.85(宽单峰,2H),1.81(m,1H),1.22(d,6H)；LRMS(APCI pos)m/e＝403.2(M+H)。
(R)-N-(3-氨基-1-(4-(三氟甲基)苯基)丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并 [3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-119)类似地制备，除了在步骤1中将(R)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇用(R)-3-氨基-3-(4-(三氟甲基)苯基)丙-1-醇代替之外，得到8mg(42％)I-119，其为橙色油状物:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(s,1H),7.64(d,1H),7.56(d,2H),7.42(d,2H),5.07(m,1H),4.82(d,1H),4.39(m,2H),4.10(m,1H),3.57-3.74(m,2H),2.88(m,2H),2.65(t,2H),2.24(宽单峰,2H),2.01(m,1H),1.83(m,1H),1.22(d,6H)；19F NMR(376MHz,CDCl3)δ-62.8；LRMS(APCI pos)m/e＝437.3(M+H)。
实施例66
(R)-N-(1-(4-氯苯基)-3-(甲基氨基)丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并 [3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-117)
使得PS-PPh3(278mg,2.28mmol/g,0.634mmol)和THF(5mL)的混悬液静置5分钟，然后加入332(136mg,0.317mmol)在THF(1mL)中的溶液。将混悬液在RT搅拌4小时，然后加入MeI(0.0593mL,0.951mmol)。将混合物在RT搅拌17小时，经玻璃料漏斗滤过并将树脂用THF(5×10mL)和DCM(5×10mL)洗涤。将树脂转移至压力管中并在MeOH(8mL)中混悬且加入KOH(178mg,3.17mmol)在MeOH(2mL)中的溶液。将混合物加热至65℃且保持4小时，冷却至RT，滤过并将树脂用DCM(4×3mL)和MeOH(2×3mL)洗涤。将滤液和洗涤液合并并浓缩为白色固体。将粗产物在DCM和稀NaHCO3水溶液之间分配并将水层用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并浓缩。将粗产物在制备性TLC板(0.5mm)上纯化(用MeOH/DCM/NH4OH(9/90/1)展开)得到50mg(38％)I-117，其为淡黄色泡沫状物:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06(s,1H),7.72(宽单峰,1H),7.22-7.28(m,4H),4.95(m,1H),4.80(d,1H),4.37(m,2H),4.10(m,1H),3.69(m,1H),3.60(m,1H),2.72(m,2H),2.65(t,2H),2.48(s,3H),2.05(m,1H),1.80(m,1H),1.22(d,6H)；LRMS(APCI pos)m/e＝417.4(M+H)。
实施例67
N-(1-(3,4-二氯苯基)-3-(甲基氨基)丙基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-111)
向3-(3,4-二氯苯基)-3-(2-(异丙基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)丙基氨基甲酸叔丁酯(89mg,0.17mmol)在THF(5mL)中的溶液中在氮气下加入BH3.THF络合物(0.36mL,0.36mmol)并将反应混合物在氮气下回流加热19小时。将反应混合物冷却至RT，用MeOH(10mL)淬灭，并回流加热1小时。将反应混合物浓缩，然后在DCM(25mL)和饱和NaHCO3水溶液(25mL)之间分配。分离各相，将水相用DCM(25ml)萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过并浓缩。将粗产物在制备性SiO2TLC(1mm)板上纯化(用MeOH/DCM/NH4OH(9/90/1)展开)得到11mg(15％)I-111，其为白色固体：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(s,1H),7.36(m,2H),7.13(dd,1H),4.91(m,1H),4.80(d,1H),4.37(m,2H),4.10(m,1H),3.69(m,1H),3.61(m,1H),2.64-2.75(m,4H),2.48(s,3H),2.02(m,1H),1.73(m,1H),1.22(dd,6H)；LRMS(APCI pos)m/e＝451.1(M+H)。
实施例68
N-((3S,4R)-4-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)吡咯烷-3-基)-2-(异丙基氨基)-5,6- 二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-148)
步骤1:将3-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛(12.8g,66.9mmol)、丙二酸(7.65g,73.5mmol)和吡啶(8.11mL,100mmol)的混合物加热至100℃并振摇6小时。冷却后，将残留物与3M HCl(100mL)振摇1小时并将沉淀物滤过，用H2O洗涤并干燥得到14.1g(90.2％)(E)-3-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)丙烯酸(334)，其为白色固体，其没有进一步纯化即可使用。
步骤2:向334(2.07g,8.84mmol)、甲苯(25mL)和草酰氯(1.54mL,17.7mmol)的混悬液中加入一滴DMF。将混合物振摇过夜并蒸发得到2.23g(99.9％)(E)-3-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)丙烯酰氯(336)，其为琥珀色油状物，其无需纯化即可使用。
步骤3:历时15分钟向在干冰/丙酮浴中冷却至-78℃的(R)-4-苯基噁唑烷-2-酮(1.40g,8.58mmol)和无水THF(25mL)的溶液中逐滴加入1M二-(三甲基甲硅烷基)氨基锂在THF(8.75mL,8.75mmol)中的溶液并将混合物在-78℃振摇15分钟。向所得的溶液中缓慢加入336(2.23g,8.83mmol)和THF(5mL)的溶液并将混合物在-78℃振摇1小时，然后温热至RT。搅拌另外的2小时后，将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液(50mL)淬灭并搅拌1小时。将混合物用EtOAc(200mL)稀释，先后用H2O和EtOAc洗涤，干燥(MgSO4)，滤过并蒸发得到3.18g(97.7％)的粗的(R,E)-3-(3-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)丙烯酰基)-4-苯基噁唑烷-2-酮(338)，其为褐色固体，其无需纯化即可使用。
步骤4:将338(2.10g,5.54mmol)和N-(甲氧基甲基)-N-(三甲基甲硅烷基甲基)苄基胺(1.98mL,7.75mmol)溶解于甲苯(25mL)中并冷却至0℃。历时15分钟缓慢加入TFA(0.0427mL,0.554mmol)和苯(1mL)的溶液并将混合物搅拌4小时。将混合物先后用饱和NaHCO3水溶液洗涤，用水洗涤两次，干燥，滤过并蒸发。将粗残留物经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/己烷梯度(20-40％EtOAc)洗脱)得到1.62g(57.1％)(R)-3-((3S,4R)-1-苄基-4-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)吡咯烷-3-羰基)-4-苯基噁唑烷-2-酮(340)，其为白色泡沫状固体。
步骤5:向冷却至0℃的1M LiOH溶液(8.20mL,8.20mmol)中加入30％过氧化氢(1.06mL,10.2mmol)。将混合物在0℃搅拌10分钟，然后历时15分钟加至冷却至0℃的340(2.10g,4.10mmol)在THF(15mL)中的溶液。将混合物在0℃搅拌4小时，然后加入2M亚硫酸钠(10mL)并将混合物搅拌30分钟。将pH用2M KHSO4调节为约5-6并将混合物用3:1CHCl3/IPA的50mL部分萃取三次。将合并的有机萃取物合并，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，滤过并蒸发。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用MeOH/DCM梯度(5-10％MeOH)洗脱)得到1.28g(85.0％)(3S,4R)-1-苄基-4-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)吡咯烷-3-羧酸(342)，其为白色固体:MS m/z(APCI-neg)M-1＝366。
步骤6:向342(0.175g,0.476mmol)和甲苯(5mL)的溶液中加入DIPEA(0.166mL,0.953mmol)，随后加入二苯基磷酰基叠氮化物(0.154mL,0.715mmol)。将混合物在RT搅拌30分钟然后缓慢加热至100℃并搅拌3小时。将72(109mg,0.476mmol)加至冷却的混合物中并将混合物搅拌过夜。将粗产物加载至SiO2柱上并用MeOH/DCM梯度(1-3％MeOH)洗脱得到0.160g(60.3％)N-((3S,4R)-1-苄基-4-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)吡咯烷-3-基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(344)，其为褐色固体。
步骤7:向344(0.160g,0.287mmol)和MeOH(10mL)的溶液中加入Pd/C(10％Degussa,50％湿的,100mg)。将混合物在氢气气氛下搅拌过夜(氢气填充的气囊)。滤出催化剂并将滤液蒸发得到0.130(97％)I-148:MS m/z(APCI-pos)M+1＝467。
实施例69
N-((3S,4R)-4-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-1-甲基吡咯烷-3-基)-2-(异丙基氨 基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-120)
向I-148(0.045g,0.0965mmol)和MeOH(2mL)的溶液中加入甲醛(0.0359mL,0.482mmol)。将混合物搅拌1小时，然后历时10分钟缓慢加入1M NaBH4在THF中的溶液(0.579mL,0.579mmol)。将混合物搅拌2小时，然后通过加入1M NaOH溶液进行淬灭。搅拌15分钟后，将混合物用CHCl3/IPA(3:1)混合物萃取两次。将合并的萃取物用饱和NaHCO3水溶液洗涤，干燥(MgSO4)，滤过并蒸发。将残留物经SiO2色谱法纯化(用MeOH/DCM梯度(5-10％)洗脱，加入0.1M氨水)得到0.020g(43.1％)I-120，其为白色固体:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(s,1H),7.52(t,1H),7.20(m,2H),4.98(d,1H),4.81(d,1H),4.41(m,1H),4.31(s,2H),4.09(m,1H),3.63(m,2H),3.25(m,2H),2.85-2.63(m,4H),2.40-2.37(m,4H),1.22(d,6H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝481。
N-((3S,4R)-4-(3,4-二氟苯基)-1-甲基吡咯烷-3-基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二 氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-121)根据在实施例68和69中的操作制备，除了在实施例68步骤1中将3-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛用3,4-二氟-苯甲醛代替之外，得到I-121:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06(s,1H),7.16-7.03(m,3H),5.00(d,1H),4.84(d,1H),4.37(m,1H),4.31(s,2H),4.10(m,1H),3.63(m,2H),3.26-3.14(m,2H),2.77(m,2H),2.64(m,2H),2.38(s,3H),2.32(t,1H),1.22(d,6H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝431。
N-((3S,4R)-4-(3-氟苯基)-1-甲基吡咯烷-3-基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡 啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-122)根据在实施例68和69中的操作制备，除了在实施例68步骤1中将3-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛用3-氟-苯甲醛代替得到I-121:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06(s,1H),7.26(m,1H),7.09-6.90(m,3H),5.02(d,1H),4.82(d,1H),4.43(s,1H),4.31(s,2H),4.10(m,1H),3.62(m,2H),3.32-3.20(m,2H),2.84(m,2H),2.64(m,2H),2.40(s,3H),2.37(t,1H),1.22(d,6H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝413。
N-((3S,4R)-4-(3,4-二氟苯基)-1-乙基吡咯烷-3-基)-2-(异丙基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-123)根据在实施例68和69中的操作制备，除了在实施例68步骤1中将3-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛用3,4-二氟-苯甲醛代替且在实施例69的操作中将甲醛用乙醛代替之外，得到I-123:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.05(s,1H),7.15-7.02(m,3H),5.64(d,1H),4.87(d,1H),4.48(m,1H),4.34(s,2H),4.10(m,1H),3.63(m,2H),3.42(m,1H),3.28(m,1H),3.01(m,1H),2.86(m,1H),2.68-2.56(m,4H),2.38(t,1H),2.07(s,1H),1.22(d,6H),1.17(t,3H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝445。
N-((3S,4R)-4-(4-氯-3-氟苯基)-1-甲基吡咯烷-3-基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基 氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-124)根据在实施例68和69中的操作制备，除了在实施例68步骤6中将72用28代替且在实施例68步骤1中将3-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛用3-氟-4-氯-苯甲醛代替之外，得到I-124:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06(s,1H),7.28(t,1H),7.11(d,1H),7.04(d,1H),5.04-4.96(m,2H),4.39(bs,1H),4.32(s,2H),3.98(m,3H),3.64-3.50(m,4H),3.28-3.16(m,2H),2.78(m,2H),2.65(m,2H),2.38(s,3H),2.32(t,1H),2.02(d,2H),1.54(m,2H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝489。
N-((3S,4R)-4-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-1-甲基吡咯烷-3-基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-125)根据在实施例68和69中的操作制备，除了在实施例68步骤6中将72用28代替之外，得到I-124:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(s,1H),7.52(t,1H),7.20(m,2H),5.01-4.89(m,2H),4.42(bs,1H),4.32(s,2H),3.99(m,3H),3.65-3.51(m,4H),3.28-3.22(m,2H),2.80(m,2H),2.65(m,2H),2.40(s,3H),2.36(t,1H),2.02(d,2H),1.54(m,2H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝523。
N-((3S,4R)-4-(3,4-二氟苯基)-1-甲基吡咯烷-3-基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨 基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-126)根据在实施例68和69中的操作制备，除了在实施例68步骤6中将72用28代替且在实施例68步骤1中将3-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛用3,4-二氟-苯甲醛代替之外，得到I-124:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(s,1H),7.16-7.02(m,3H),4.89(m,2H),4.37(m,1H),4.32(s,2H),3.99(m,3H),3.64-3.50(m,4H),3.25(m,1H),3.15(m,1H),2.78(m,2H),2.65(m,2H),2.38(s,3H),2.31(t,1H),2.02(d,2H),1.52(m,2H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝473。
N-((3S,4R)-4-(3-氟苯基)-1-甲基吡咯烷-3-基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)- 5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-127)根据在实施例68和69中的操作制备，除了在实施例68步骤6中将72用28代替且在实施例68步骤1中将3-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛用3-氟-苯甲醛代替之外，得到I-127:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06(s,1H),7.25(m,1H),7.09-6.88(m,3H),5.02-4.93(m,2H),4.23(m,1H),4.32(s,2H),3.98(m,3H),3.64-3.50(m,4H),3.30-3.18(m,2H),2.78(m,2H),2.65(m,2H),2.38(s,3H),2.32(t,1H),2.00(d,2H),1.54(m,2H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝455。
N-((S)-1,1,1-三氟丙-2-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺((S)-300)和N-((R)-1,1,1-三氟丙-2-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺((R)-300)根据在实施例1步骤3-5中的操作制备，除了在步骤3中分别将四氢-2H-吡喃-4-胺用(S)-1,1,1-三氟-2-氨基-丙烷(CASRN 125278-10-6)代替且用(R)-1,1,1-三氟-2-氨基-丙烷(CASRN779303-24-1)代替之外。
N-((3S,4R)-4-(4-氯-3-氟苯基)-1-甲基吡咯烷-3-基)-2-((S)-1,1,1-三氟丙- 2-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-128)根据在实施例68和69中的操作制备，除了在实施例68步骤6中将72用(S)-300代替且在实施例68步骤1中将3-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛用4-氯-3-氟-苯甲醛代替得到I-128:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(s,1H),7.30(t,1H),7.11(d,1H),7.04(d,1H),5.27(d,1H),5.01(d,1H),4.92(m,1H),4.38(m,1H),4.33(s,2H),3.63(t,2H),3.25(t,1H),3.17(m,1H),2.78(m,2H),2.65(m,2H),2.38(s,3H),2.32(t,1H),1.38(d,3H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝501。
N-((3S,4R)-4-(4-氯-3-氟苯基)-1-甲基吡咯烷-3-基)-2-((R)-1,1,1-三氟丙- 2-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-129)根据在实施例68和69中的操作制备，除了在实施例68步骤6中将72用(R)-300代替且在实施例68步骤1中将3-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛用4-氯-3-氟-苯甲醛代替得到I-129:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(s,1H),7.30(t,1H),7.11(d,1H),7.04(d,1H),5.08(d,1H),4.95(d,1H),4.92(m,1H),4.38(m,1H),4.34(s,2H),3.63(m,2H),3.25(t,1H),3.17(m,1H),2.78(m,2H),2.67(t,2H),2.38(s,3H),2.32(t,1H),1.38(d,3H)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝501。
实施例70
(S)-(2-苯基吡咯烷-1-基)(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4- d]嘧啶-7(8H)-基)甲酮(I-130)
向冷却至0℃的三光气(0.0127g,0.0427mmol)和THF的溶液中加入DIPEA(0.0446mL,0.256mmol)并将反应混合物在0℃搅拌5分钟。向溶液中加入浆状物28(0.020g,0.0854mmol)和DIPEA(0.0446mL,0.256mmol)在THF中的溶液并将反应混合物在0℃搅拌20分钟。加入(S)-2-苯基吡咯烷盐酸盐(0.0157g,0.0854mmol,CASRN 56523-58-1)并将反应混合物在RT搅拌24小时。将溶液在EtOAc和0.1N HCl之间分配并将水层用EtOAc萃取。将合并的萃取物先后用水(两次)、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，滤过并浓缩为油状物。将粗产物经SiO2色谱法纯化得到0.014g(41％)(I-130)，其为固体:MS m/z(APCI-pos)M+1＝408.2。
(R)-(2-苯基吡咯烷-1-基)(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4- d]嘧啶-7(8H)-基)甲酮(I-131)类似地制备，除了将(S)-2-苯基吡咯烷盐酸盐用(R)-2-苯基吡咯烷盐酸盐(CASRN 56523-48-9)代替之外:MS m/z(APCI-pos)M+1＝408.2。
(2-(4-氯苯基)吡咯烷-1-基)(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3, 4-d]嘧啶-7(8H)-基)甲酮(I-132)类似地制备，除了将(S)-2-苯基吡咯烷盐酸盐用2-(4-氯苯基)吡咯烷(CASRN 38944-14-3)代替之外:MS m/z(APCI-pos)M+1＝442.2,444.2。
(2-(3-氯苯基)吡咯烷-1-基)(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3, 4-d]嘧啶-7(8H)-基)甲酮(I-132)类似地制备，除了将(S)-2-苯基吡咯烷盐酸盐用2-(3-氯苯基)吡咯烷(CASRN 298690-74-1)代替之外:MS m/z(APCI-pos)M+1＝442.2,444.2.
(2-(4-氟苯基)吡咯烷-1-基)(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3, 4-d]嘧啶-7(8H)-基)甲酮(I-134)类似地制备，除了将(S)-2-苯基吡咯烷盐酸盐用2-(4-氟苯基)吡咯烷(CASRN 72215-06-9)代替之外:MS m/z(APCI-pos)M+1＝426.2。
(2-苯基氮杂环丁烷-1-基)(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4- d]嘧啶-7(8H)-基)甲酮(I-135)类似地制备，除了将(S)-2-苯基吡咯烷盐酸盐用2-苯基氮杂环丁烷(CASRN 473443-15-1)代替之外:MS m/z(APCI-pos)M+1＝394.2。
(R)-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-基)甲酮(I-136)类似地制备，除了将(S)-2-苯基吡咯烷盐酸盐用(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(CASRN 1218935-60-4)代替之外:MSm/z(APCI-pos)M+1＝444.2。
(2-苄基吡咯烷-1-基)(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧 啶-7(8H)-基)甲酮(I-137)类似地制备，除了将(S)-2-苯基吡咯烷盐酸盐用2-苄基-吡咯烷(CASRN 3584091-6)代替之外:MS m/z(APCI-pos)M+1＝422.2。
(2-(吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并 [3,4-d]嘧啶-7(8H)-基)甲酮(I-138)类似地制备，除了将(S)-2-苯基吡咯烷盐酸盐用2-(3-吡啶-2-基)吡咯烷(CASRN 67209-89-6)代替之外:MS m/z(APCI-pos)M+1＝422.2。
(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-基)(2-(噻 唑-2-基)吡咯烷-1-基)甲酮(I-139)类似地制备，除了将(S)-2-苯基吡咯烷盐酸盐用2-(噻唑-2-基)吡咯烷(CASRN 524674-17-7)代替之外:MS m/z(APCI-pos)M+1＝415.0。
(2-苯基-哌啶-1-基)-[2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d] 嘧啶-7-基]-甲酮(I-140)类似地制备，除了将(S)-2-苯基吡咯烷盐酸盐用2-苯基-哌啶(CASRN 3466-80-6)代替之外:MS m/z(APCI-pos)M+1＝422.3。
(2-苯基哌嗪-1-基)(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧 啶-7(8H)-基)甲酮(I-141)类似地制备，除了将(S)-2-苯基吡咯烷盐酸盐用3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(CASRN 502649-25-4)代替之外。
在0℃将3-苯基-4-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.0446g,0.0853mmol)溶解于3:1DCM/TFA中，然后在室温搅拌45分钟。将溶液浓缩，加入0.1mL 7NNH3/MeOH并将溶液浓缩。加入DCM并将固体经滤过除去。将母液浓缩得到(2-苯基哌嗪-1-基)(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-基)甲酮:MS m/z(APCI-pos)M+1＝423.4。
(3-苯基吗啉代)(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7 (8H)-基)甲酮(I-142)类似地制备，除了将(S)-2-苯基吡咯烷盐酸盐用2-苯基-吗啉(CASRN138713-44-7)代替之外:MS m/z(APCI-pos)M+1＝424.3。
(2-苯基哌嗪-1-基)(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧 啶-7(8H)-基)甲酮(I-143)
步骤1:向冷却至-78℃的(R)-2-(2-氧代乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(A.Furstnerand J.W.L.Kennedy,Chem.--Eur.J.2006 12(28):7398-7410)在THF中的溶液中加入(3-氯-4-氟苯基)溴化镁(0.720mL,0.360mmol)并将反应混合物温热至RT且保持1小时。将反应混合物用水淬灭并用EtOAc萃取。将有机层用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，滤过并浓缩得到油状物，将其经SiO2色谱法纯化得到0.0745g(72％)(2R)-2-(2-(3-氯-4-氟苯基)-2-羟基乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(301)，其为澄清油状物。
步骤2:向冷却至0℃的301(0.0754g,0.219mmol)、异二氢吲哚-1,3-二酮(0.0387g,0.263mmol)和PPh3(0.127g,0.482mmol)在THF中的溶液中加入DEAD(0.0760mL,0.482mmol)并将反应混合物温热至RT并搅拌过夜。将反应混合物用水淬灭并用EtOAc萃取。将有机层用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，滤过并浓缩为油状物。将粗的油状物经SiO2色谱法纯化得到0.0507g(49％)(2R)-2-(2-(3-氯-4-氟苯基)-2-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(303)，其为澄清油状物。
步骤3:向303(0.0507g,0.1072mmol)和THF/MeOH(1:1)的溶液中加入肼一水合物(0.080mL,1.072mmol)并将反应混合物在RT搅拌3天。形成粘稠的白色沉淀物，将其经硅藻土滤过。将溶液浓缩并经SiO2色谱法纯化得到0.0214g(58％)(2R)-2-(2-氨基-2-(3-氯-4-氟苯基)乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(305)，其为澄清油状物。
步骤4:(2R)-2-(2-(3-氯-4-氟苯基)-2-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(309)如在实施例70中所述制备，除了将(S)-2-苯基吡咯烷盐酸盐用305代替之外，且粗产物无需纯化即可使用。
步骤5:将在0℃的309和DCM/TFA(3:1)的溶液在RT搅拌45分钟。将溶液浓缩，加入0.1mL7N NH3/MeOH并将溶液重新浓缩。加入DCM并将固体经滤过除去。将母液浓缩得到0.0193g(62％，两步)I-143，其为澄清油状物:MS m/z(APCI-pos)M+1＝503.4,505.4。
实施例71
N-((R)-(4-氯-3-氟苯基)((R)-吗啉-2-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)- 5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺和N-((S)-(4-氯-3-氟苯基)((S)-吗啉-2-基) 甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺混合物(I-144)
步骤1:向在冰/盐中冷却的NMM(300μL)在DCM(10mL)中的溶液中加入氯甲酸乙酯(0.5210mL,5.449mmol)。向该溶液中缓慢加入4-(叔丁氧基羰基)吗啉-2-羧酸(0.63g,2.724mmol)。将反应混合物在冷却的同时搅拌20分钟，然后加入NMM(600μL)，随后将N-甲基甲氧基胺盐酸盐(0.5315g,5.449mmol)缓慢加至冷却搅拌的溶液中。将混合物温热至RT并搅拌过夜，然后用DCM稀释并用水洗涤。将DCM干燥(MgSO4)，滤过，并蒸发得到1.1g不纯的2-(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)吗啉-4-羧酸叔丁酯(302)，其为无色油状物，其无需另外纯化即可使用。
步骤2:向冷却至-78℃的粗的302(1.1g,4.0mmol)在THF(10mL)中的溶液中缓慢加入0.5M(4-氯-3-氟苯基)溴化镁在THF中的溶液(8.0mL,4.0mmol)。将混合物缓慢温热至RT。1小时后，将反应混合物用水稀释并用EtOAc萃取。将EtOAc用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，滤过，并蒸发得到1.15g黄色油状物。将粗产物经SiO2色谱法(Biotage 50g SNAP柱)纯化(用己烷/EtOAc(4:1)洗脱)得到0.70g(51％)2-(4-氯-3-氟苯甲酰基)吗啉-4-羧酸叔丁酯(304)，其为无色油状物，含有少量杂质。
步骤3:向在冰中冷却的304(0.70g,2.0mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中加入NaBH4(0.077g,2.0mmol)并将溶液在0℃搅拌。20分钟后，将反应混合物用H2O稀释并用DCM萃取。将DCM用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，滤过，并蒸发得到0.68g无色油状物。将粗产物经SiO2色谱法(50g Biotage SNAP柱)纯化(用己烷/EtOAc(2:1)洗脱)。馏分30-36含有0.10g(14.3％)的白色固体，其暂时名为(R)-2-((S)-(4-氯-3-氟苯基)(羟基)甲基)吗啉-4-羧酸叔丁酯和(S)-2-((R)-(4-氯-3-氟苯基)(羟基)甲基)吗啉-4-羧酸叔丁酯的混合物(306a)。馏分42-50含有0.23g(32.9％)的无色油状物，其暂时名为(S)-2-((S)-(4-氯-3-氟苯基)(羟基)甲基)吗啉-4-羧酸叔丁酯和(R)-2-((R)-(4-氯-3-氟苯基)(羟基)甲基)吗啉-4-羧酸叔丁酯的混合物(306b)。
步骤4:向在冰中冷却的306b(0.10g,0.2892mmol)在THF(5mL)中的溶液中加入酞酰亚胺(0.04680g,0.3181mmol)和PS-三苯基膦(0.22g,0.4338mmol,1.99mmol/g)，随后在0℃逐滴加入DEAD(68.31μL,0.4338mmol)。5小时后，将反应混合物用EtOAc稀释，滤过，先后用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，滤过，并蒸发得到0.19g(138.3％)的(R)-2-((R)-(4-氯-3-氟苯基)(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)甲基)吗啉-4-羧酸叔丁酯和(S)-2-((S)-(4-氯-3-氟苯基)(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)甲基)吗啉-4-羧酸叔丁酯的不纯混合物(308b)，其为固化的无色油状物。
步骤5:向308b在THF/MeOH(5mL,1:1)中的混合物中加入肼一水合物(0.1399mL,2.885mmol)。将混合物在RT搅拌2.5天。将反应混合物滤过并将残留物用一些THF洗涤。将滤液蒸发得到0.15g淡黄色半固体，将其用EtOAc研磨并滤过。将滤液浓缩并经SiO2色谱法(10g Biotage SNAP柱)纯化(用DCM/MeOH(10:1)洗脱)。馏分5-8含有0.10g不纯的产物，将其溶解于EtOAc中并先后用2部分的水、盐水洗涤，然后干燥(MgSO4)，滤过并蒸发得到82mg(82.44％)的(R)-2-((R)-氨基(4-氯-3-氟苯基)甲基)吗啉-4-羧酸叔丁酯和(S)-2-((S)-氨基(4-氯-3-氟苯基)甲基)吗啉-4-羧酸叔丁酯的混合物(310b)，其为无色薄膜状物，其污染有DEAD副产物。
步骤6:向在冰中冷却的310b(0.082g,0.238mmol)在DCM(3mL)中的混合物中加入TEA(99.4μL,0.713mmol)和CDI(0.0386g,0.238mmol)。将混合物搅拌20分钟，然后加入28(0.0557g,0.238mmol)在DCM(3mL)中的溶液并在RT搅拌过夜。将反应混合物在水和DCM之间分配。将DCM用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，滤过，并蒸发得到0.13g无色薄膜状物。将粗产物经SiO2色谱法(10g Biotage SNAP柱)纯化(用DCM/MeOH(10:1)洗脱)。馏分3-6含有0.084g(58.4％)的(R)-2-((R)-(4-氯-3-氟苯基)(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)甲基)吗啉-4-羧酸叔丁酯和(S)-2-((S)-(4-氯-3-氟苯基)(2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)甲基)吗啉-4-羧酸叔丁酯的混合物(312b)，其为黄色油状物。
步骤7:向312b(0.084g,0.139mmol)在DCM(2mL)中的混合物中加入TFA(0.30mL,0.389mmol)。将混合物在RT搅拌30分钟。将反应混合物蒸发并将残留物用饱和NaHCO3水溶液处理并用DCM萃取。将水层用另一部分的DCM萃取。将合并的DCM萃取物干燥(MgSO4)，滤过，并蒸发得到76mg淡黄色固体。将粗产物经SiO2色谱法(10g Biotage SNAP柱)纯化(用DCM/MeOH/NH4OH(90/10/1)洗脱)。馏分7-10含有0.281g(40.1％)的混合物I-144，其为黄色薄膜状物。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.06(s,1H),7.45-7.36(m,1H),7.31-7.26(m,1H),7.18-7.15(m,1H),4.79-4.76(m,1H),4.43(dd,2H),4.00-3.87(m,5H),3.78-3.47(m,5H),2.81-2.72(m,1H),2.68-2.63(m,2H),2.60-2.56(m,2H),(2.42-2.53(m,1H),1.98-1.92(m,2H),1.61-1.50(m,2H)；MS m/z 505.3(LC/MS阳性离子化)[M+1]。
N-((R)-(4-氯-3-氟苯基)((S)-吗啉-2-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺和N-((S)-(4-氯-3-氟苯基)((R)-吗啉-2-基)甲基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺的混合物与306a类似地制备，得到标题化合物0.0683g(51.2％)，其为黄色薄膜状物:1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.05(s,1H),7.39-7.35(m,1H),7.28-7.25(m,1H),7.17-7.13(m,1H),4.79-4.77(d,1H),4.45-4.36(m,2H),4.00-3.93(m,3H),3.84-3.79(m,1H),3.76-3.71(m,1H),3.65-3.62(m,2H),3.55-3.47(m,3H),3.01-2.97(m,1H),2.74-2.70(m,2H),2.66-2.62(m,2H),2.47-2.41(m,1H),1.97-1.91(m,2H),1.61-1.50(m,2H)；MS m/z505.3(LC/MS阳性离子化)[M+1]。
实施例72
N-((3S,4R)-4-(4-氯-3-氟苯基)-1-甲基吡咯烷-3-基)-2-(4-氟-2-甲基苯基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-145)
步骤1:将(Z)-(1H-吡唑-1-基)亚甲二基二氨基甲酸苄酯(9.071g,23.97mmol)、4-氟-2-甲基苯胺(2.664mL,23.97mmol)、TEA(0.3341mL,2.397mmol)和THF(15mL)的溶液在45℃搅拌12小时。将反应混合物用THF(30mL)稀释并在剧烈搅拌的同时用MeOH(250mL)处理。将所得的沉淀物滤过并用MeOH(50mL)洗涤三次得到8.4g(80.5％)(Z)-(苄基氧基羰基氨基)(4-氟-2-甲基苯基氨基)亚甲基氨基甲酸苄酯(314)，其为白色粉末状物。
步骤2:向314(8.4g,19.3mmol)在THE(160mL)和MeOH(40mL)中的溶液中加入5％Pd/C(6.16g,2.89mmol)。将反应混合物用氮气净化若干次，然后用氢气填充并搅拌24小时。然后将反应混合物滤过并将滤液浓缩得到1.98g(69.4％)1-(4-氟-2-甲基苯基)胍(316)，其为白色固体：MS(APCI-pos)M+1＝168.1。
步骤3:将316(1.98g,11.8mmol)和21(4.52g,17.8mmol)和正丁醇(24mL)的溶液在80℃加热20小时。将反应混合物真空浓缩，然后溶解于DCM中并经SiO2色谱法纯化(用DCM洗脱)得到2.08g(49.0％)2-(4-氟-2-甲基苯基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(318)，其为白色固体：MS(APCI-pos)M+1＝359.0。
步骤4:向318(2.08g,5.80mmol)在DCM(1mL)中的溶液中加入4MHCl在二噁烷中的溶液(14.5mL,58.0mmol)并搅拌1小时。然后将反应混合物真空浓缩得到1.8g(96％)N-(4-氟-2-甲基苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-胺盐酸盐(320):MS(APCI-pos)M+1＝259.2。
步骤5:将320(86mg,0.23mmol)和TEA(98μL,0.70mmol)在THF(1mL)中的溶液用(3R,4S)-3-(4-氯-3-氟苯基)-4-异氰酸基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(80mg,0.23mmol)在甲苯(1mL)中的溶液处理。将反应混合物在RT搅拌48小时。真空浓缩后，将残留物经SiO2色谱法纯化(用DCM/EtOAc梯度(0-50％EtOAc)洗脱)得到(3R,4S)-3-(4-氯-3-氟苯基)-4-(2-(4-氟-2-甲基苯基氨基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-甲酰氨基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(322)。
步骤6:将322(70mg,0.117mmol)在DCM(810μL)中的溶液用TFA(90.0μL,1.17mmol)处理并在RT搅拌2小时。然后将反应混合物真空浓缩并用DCM(1mL)稀释并用饱和NaHCO3水溶液(1mL)洗涤，然后直接经SiO2色谱法纯化并用MeOH/EtOAc梯度(0-10％MeOH)洗脱得到50mg(86％)N-((3S,4R)-4-(4-氯-3-氟苯基)吡咯烷-3-基)-2-(4-氟-2-甲基苯基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(324):MS(APCI-pos)M+1＝499.1。
步骤7:向324(20mg,0.0401mmol)在MeOH(1mL)中的溶液中加入甲醛水溶液(11.9μL,0.160mmol)。搅拌1小时后，历时15分钟逐滴加入三乙酰氧基硼氢化钠(42.5mg,0.200mmol)在THF(1mL)中的溶液。搅拌1小时后，将混合物用EtOAc(3mL)稀释然后用饱和NaHCO3水溶液(2mL)洗涤。将有机层真空浓缩，然后经SiO2色谱法纯化(用MeOH/EtOAc梯度(0-10％MeOH)洗脱)得到18mg(83％)I-145:1H NMR(CDCl3)δ8.17(s,1H),7.76-7.81(m,1H),7.28-7.33(m,1H),7.10-7.14(m,1H),7.03-7.07(m,1H),6.92-6.96(m,2H),6.57(s,1H),4.92(d,1H,J＝7.83Hz),4.35-4.41(m,3H),3.61-3.72(m,2H),3.22-3.28(m,1H),3.12-3.19(m,1H),2.69-2.82(m,4H),2.38(s,3H),2.31-2.35(m,1H),2.29(s,3H)；MS(APCI-pos)M+1＝513.2。
实施例73
2-(4-氟-2-甲基苯基氨基)-N-((3S,4R)-4-(3-氟苯基)-1-甲基吡咯烷-3-基)-5, 6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-146)
标题化合物根据在实施例72中的操作制备，除了使用N-(3S,4R)-1-苄基-4-(3-氟苯基)吡咯烷-3-羧酸代替实施例72的N-boc类似物之外。该吡咯烷的脱苄基化根据在实施例68步骤7中的操作进行，且吡咯烷的N-甲基化根据在实施例69中的操作进行。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用MeOH/DCM梯度(3-5％MeOH)洗脱)得到0.048g(66.6％)I-146，其为澄清的玻璃状固体:1H NMR(CDCl3)δ8.16(s,1H),7.74-7.79(m,1H),7.22-7.28(m,1H),7.06-7.09(m,1H),6.98-7.03(m,1H),6.87-6.95(m,3H),6.67(s,1H),5.01(d,1H,J＝7.8Hz),4.40-4.46(m,1H),4.38(s,2H),3.60-3.71(m,2H),3.25-3.31(m,1H),3.15-3.22(m,1H),2.75-2.83(m,2H),2.67-2.72(m,2H),2.38(s,3H),2.30-2.35(m,1H),2.28(s,3H)；MS(APCI-pos)M+1＝479.2。
实施例74
N-((R)-1-(3,4-二氯苯基)乙基)-7-((S)-1-羟基丙-2-基氨基)-3,4-二氢-2,6-二氮杂萘-2(1H)-甲酰胺(I-149)
步骤1:向小瓶中加入7-氯-3,4-二氢-2,6-二氮杂萘-2(1H)-羧酸叔丁酯(175mg,0.651mmol,CASRN 1060816-50-3)、Pd2(dba)3(29.8mg,0.0326mmol)、Binap-rac(40.5mg,0.0651mmol)、(S)-2-氨基丙-1-醇(97.8mg,1.30mmol)和NaO-tert-Bu(125mg,1.30mmol)和甲苯(3mL)，密封，用氮气脱气5分钟，然后加热至90℃且保持4小时。将反应混合物冷却并经硅藻土填料滤过。将滤液浓缩并将所得的残留物经反相色谱法(SP4)纯化(用MeCN/H2O梯度(5-95％ACN)洗脱)得到56mg(28％)(S)-7-(1-羟基丙-2-基氨基)-3,4-二氢-2,6-二氮杂萘-2(1H)-羧酸叔丁酯(326)。
步骤2:将326(56mg,0.18mmol)和TFA(2mL)的溶液在RT搅拌45分钟。将反应混合物浓缩得到粗的(S)-2-(5,6,7,8-四氢-2,6-二氮杂萘-3-基氨基)丙-1-醇2,2,2-三氟乙酸盐(328)，其没有进一步纯化即可在下一步中使用。
步骤3:N-((R)-1-(3,4-二氯苯基)乙基)-7-((S)-1-羟基丙-2-基氨基)-3,4-二氢-2,6-二氮杂萘-2(1H)-甲酰胺由328根据在实施例1步骤6中的操作制备，除了使用(R)-1-(3,4-二氯苯基)乙胺代替22之外，得到32mg(41％)I-149:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.85(s,1H),7.40(m,2H),7.17(m,1H),6.23(s,1H),4.98(m,1H),4.62(m,1H),4.45(s,2H),4.40(bs,1H),3.94(m,1H),3.73(dd,1H),3.55(m,3H),2.75(m,2H),1.48(d,3H),1.23(d,3H)；m/z(APCI-pos)M+1＝423.3。
实施例75
(R)-N-((S)-1-(4-氯-3-氟苯基)-2-羟基乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-6,7-二氢-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶-7-甲酰胺(I-150)(方案E)
(S)-2-羟基-4-碘丁酸乙酯
历时20分钟向冷却至0℃的(S)-3-羟基二氢呋喃-2(3H)-酮(10g,98.0mmol)、EtOH(4.51g,98.0mmol)和DCM(70mL)的溶液中在氮气下经加料漏斗加入TMS-I(19.6g,98.0mmol)。将反应混合物在0℃搅拌1小时，然后温热至RT且保持3小时。将混合物在H2O(100mL)和DCM之间分配。将有机萃取物先后用NaHCO3、1％NaHSO3和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，滤过并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法(SNAP 50)纯化(首先用己烷/EtOAc(1:1)洗脱，然后用EtOAc(100％)洗脱)得到18.3g(65％)(S)-2-羟基-4-碘丁酸乙酯(392)，其为浅黄色油状物。
(S)-4-碘-2-(三乙基甲硅烷基氧基)丁酸乙酯:向冷却至0℃并保持在氮气下的392(15.5g,60.1mmol)、2,6-二甲基吡啶(21.0ml,180mmol)和DCM(125mL)的溶液中逐滴加入三氟甲磺酸三乙基甲硅烷基酯(17.5g,66.1mmol)。将反应混合物在0℃搅拌1小时，然后温热至RT并搅拌18小时。将反应混合物通过加入饱和NH4Cl水溶液进行淬灭并用DCM萃取。将有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，滤过并浓缩。将粗产物经SiO2色谱法(SNAP 100)纯化(用EtOAc/己烷(9:1)洗脱)得到18.9g(76％)(S)-4-碘-2-(三乙基甲硅烷基氧基)丁酸乙酯(396)，其为黄色油状物。
步骤1:将丙二酸二甲酯(6.155ml,53.72mmol)、(S)-4-碘-2-(三乙基甲硅烷基氧基)丁酸乙酯(10.00g,26.86mmol)和THF(100mL)的溶液冷却至-78℃并保持在氮气下。历时5分钟向溶液中分批加入氢化钠(2.149g,53.72mmol,60％在矿物油中分散)并将所得的混合物在-78℃搅拌3小时。将反应混合物温热至RT并搅拌48小时。将反应混合物通过加入H2O进行淬灭并用EtOAc萃取。将有机萃取物干燥(Na2SO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/己烷(4:1)洗脱)得到4.2g,(41％)(S)-4-(三乙基甲硅烷基氧基)丁烷-1,1,4-三羧酸4-乙酯·1,1-二甲酯(398)。
步骤2:将398(3.75g,9.46mmol)、24(1.63g,11.4mmol)、EtOH(30mL)和NaOEt(3.86g,11.4mmol)的溶液加热至85℃并搅拌过夜。将反应混合物冷却至RT并通过加入4NHCl在二噁烷中的溶液(2.37mL,9.46mmol)淬灭反应混合物并将溶液浓缩。将粗产物经反相色谱法(Biotage 40M C18，使用C18进样器，使用水加载)纯化(用MeCH/H2O色谱法(0-60％MeCN)洗脱，经30倍柱体积)得到1.25g(37％)(S)-4-(4,6-二羟基-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)嘧啶-5-基)-2-羟基丁酸乙酯(400):MS m/z(APCI-pos)M+1＝342.1。
步骤3:向烧瓶中加入PPh3(0.807g,3.08mmol)、无水THF(20mL)和DEAD(0.655g,3.08mmol)。将溶液在氮气下搅拌10分钟，然后加入400、THF(5mL)和DMF(5mL)的溶液并将溶液搅拌18小时。将溶液真空浓缩得到橙色油状物。将粗产物经反相色谱法(SP4 biotage40M C18，使用C18Biotage 40进样器)纯化并用MeCN/H2O梯度(0-60％MeCN)洗脱得到浅黄色油状物，将其在高真空固化。将粗产物重新经SiO2色谱法(SNAP 25)纯化(用DCM/MeOH(95:5)洗脱)得到0.42g(60％)(R)-4-羟基-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-6,7-二氢-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶-7-羧酸乙酯(402)，其为澄清油状物:m/z(APCI-pos)M+1＝324.0。
步骤4:将402(0.500g,1.55mmol)和POCl3(2.83mL,30.9mmol)的溶液加热至100℃且保持3小时，然后在高真空浓缩除去过量的POCl3。加入水并将所得的混合物超声2分钟。将混合物用DCM萃取，干燥(Na2SO4)，滤过并浓缩得到0.52g(78％)(R)-4-氯-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-6,7-二氢-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶-7-羧酸乙酯(404):MS m/z(APCI-pos)M+1＝342.0。
步骤5:使得404(0.525g,1.23mmol)和EtOAc(15mL)的溶液经历真空/氮气净化循环，然后加入Pd/C(0.392g,0.369mmol,10％Degussa)并将溶液在氢气(氢气囊)下搅拌2小时。将混合物滤过并将固体用EtOAc洗涤并将滤液经过0.45微米玻璃料，然后浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用MeOH/DCM(5:95)洗脱)得到0.32g(77％)(R)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-6,7-二氢-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶-7-羧酸乙酯(406)，其为澄清油状物:MSm/z(APCI-pos)M+1＝308.1。
步骤6:将406(0.310g,1.01mmol)、THF(5mL)、LiOH.H2O(0.0508g,1.21mmol)和水(1mL)的溶液搅拌3小时。向溶液中加入4N HCl在二噁烷中的溶液(0.303mL,1.21mmol)并浓缩得到0.31g(95％)(R)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-6,7-二氢-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶-7-羧酸(408)，其没有进一步纯化即可使用:MS m/z(APCI-pos)M+1＝280.1。
步骤7:向小瓶中加入408(0.050g,0.15mmol)、HATU(0.069g,0.18mmol)、68(0.055g,0.18mmol)、DIPEA(1mL)、DCM(2mL)和DMF(1mL)并搅拌18小时。向溶液中加入饱和Na2CO3水溶液(5mL)，并将混合物搅拌5分钟。将有机相用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经SiO2色谱法(SNAP 25)纯化(用DCM/MeOH(95:5)洗脱)得到0.041g(43％)(R)-N-((S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1-(4-氯-3-氟苯基)乙基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-6,7-二氢-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶-7-甲酰胺(410):MS m/z(APCI-pos)M+1＝565.0。
步骤8:将410(0.041g,0.071mmol)、DCM/MeOH(4:1,3mL)和4N HCl在二噁烷(1mL)中的溶液搅拌10分钟。将反应混合物通过加入饱和Na2CO3水溶液(5mL)进行淬灭并将溶液搅拌5分钟。将有机相干燥(Na2SO4)，滤过并真空浓缩。将粗产物经反相色谱法(SP4C18，加载有Biotage 12M进样器)纯化并用MeCH/H2O梯度(0-60％MeCN)洗脱(经30倍柱体积)得到0.017g(52％)I-150:1H NMR(400MHz,CDCl3)(s,1H),7.54(d,1H),7.35(t,1H),7.17(m,1H),7.09(m,1H),5.14(d,1H),5.07(m,1H),4.71(m,1H),3.96(m,3H),3.88(m,2H),3.53(m,2H),2.67(m,2H),2.46(m,1H),2.01(m,3H),1.51(m,2H)。19F NMR(400MHz,CDCl3)(m)；MS m/z(APCI-pos)M+1＝451.0。
实施例76
2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸[4-(4-氯- 3-氟-苯氧基)-1-甲基-吡咯烷-3-基]-酰胺(I-151)(方案F)
步骤1:向2H-吡咯-1(5H)-羧酸叔丁酯(25.0g,0.148mol,CASRN73286-70-1)和DCM(300mL)的溶液中加入MCPBA(38.2g,0.221mol)。将混合物在RT搅拌12小时。将混合物先后用Na2HSO3(10％,500mL)和饱和NaHCO3(3x200mL)洗涤。将有机相干燥(Na2SO4)，滤过并真空浓缩得到25g(81％)6-氧杂-3-氮杂-二环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁酯(412)，其为棕色油状物。
步骤2:将412(2.4g,13mmol)、4-氯-3-氟苯酚(3.8g,26mmol)、Cs2CO3(10.6g,32.5mmol)、18-冠-6(20mg)和EtOH(25mL)的混合物回流加热12小时。将溶剂真空除去并将残留物在H2O(100mL)和EtOAc(3x100mL)之间分配。将合并的有机相用水(3x100mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。将残留物经SiO2色谱法纯化(用EtOAc/石油醚(1:2)洗脱)得到1.9g(54％)反式-(±)-3-(4-氯-3-氟苯氧基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(414)，其为白色固体：LC-MS(ESI)m/z 276(M+H-56)。
步骤3:向414(0.200g,0.603mmol)和EtOAc(20mL)的溶液中加入2-碘酰苯甲酸(0.675g,2.41mmol)并将所得的溶液回流加热过夜。将反应混合物冷却至RT并将白色固体滤出并将滤液真空浓缩得到0.16g(80％)3-(4-氯-3-氟苯氧基)-4-氧代-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(416):LC-MS(ESI)m/z 274(M+H-56)。
步骤4:向冷却至-78℃的416(1.6g,4.9mmol)和无水THF(50mL)的溶液中逐滴加入L-三仲丁基硼氢化锂(1.0M,15mL)，然后将反应混合物在-78℃搅拌3小时。将反应混合物用H2O(30mL)淬灭。将混合物用EtOAc(3x100mL)萃取并将萃取物用盐水(3x30mL)洗涤。将有机相干燥(Na2SO4)，滤过并浓缩。LC-MS显示约9:1的两个异构体。将残留物经反相柱色谱法纯化(使用MeCN/5％NH4OH水溶液(0-35％))得到0.56g(35％)顺式-(±)-3-(4-氯-3-氟苯氧基)-4-羟基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(418).LC-MS(ESI)m/z 276(M+H-56)。
步骤5:向418(0.560g,1.69mmol)和MeOH(10mL)的溶液中加入甲醇化HCl溶液(4N,5mL)。将混合物在RT搅拌3小时并将溶剂真空除去。将残留物用饱和NaHCO3水溶液(20mL)中和并用DCM/IPA(3:1,3x100mL)萃取得到0.35g(90％)顺式-(±)-4-(4-氯-3-氟苯氧基)吡咯烷-3-醇(420)，其为黄色油状物。
步骤6:向420(0,35g,1.52mmol)和MeOH(5mL)的溶液中加入HCHO(37％在水中的溶液,0.42mL,15.2mmol)。将混合物在RT搅拌2小时，然后加入NaCNBH3(1.43g,22.8mmol)。将反应混合物在RT搅拌3小时。将反应混合物用NH4OH水溶液(50mL)淬灭并将混合物用EtOAc(3x10mL)萃取。将合并的有机相用水(3x50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩得到0.830g顺式-(±)-4-(4-氯-3-氟苯氧基)-1-甲基吡咯烷-3-醇，其为棕色油状物(422)，其没有进一步纯化即可用于下一步中:LC-MS(ESI)m/z 246(M+H)。
步骤7:向422(0.830g,3.38mmol)和DCM(10mL)的溶液中加入TEA(1.2mL,8.1mmol)。将溶液冷却至0℃并逐滴加入MsCl(0.300mL,4.05mmol)并将混合物在RT搅拌3小时。将反应混合物用DCM(50mL)稀释，然后用H2O(50mL)淬灭。将混合物用DCM(3x50mL)萃取并将萃取物先后用H2O(3x50mL)和盐水(30mL)洗涤。将有机相干燥并真空浓缩得到400mg粗的顺式-(±)-甲磺酸4-(4-氯-3-氟苯氧基)-1-甲基吡咯烷-3-酯(424)，其没有进一步纯化即可在下一步中使用:LC-MS(ESI)m/z324(M+H)。
步骤8:向424(400mg,1.24mmol)和DMF(2.0mL)的溶液中加入叠氮化钠(0.806g,12.4mmol)。将混合物在90℃加热过夜。将混合物冷却，用H2O(30mL)稀释并用EtOAc(3x50mL)萃取。将合并的萃取物用水(3x30mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，滤过并真空浓缩得到300mg反式-(±)-3-叠氮基-4-(4-氯-3-氟苯氧基)-1-甲基吡咯烷(426)，其没有进一步纯化即可在下一步中使用:LC-MS(ESI)m/z 271(M+H)。
步骤9:向426(0.480g,1.77mmol)、PPh3(0.930g,3.54mmol)和THF(10mL)的溶液中加入H2O(1.0mL)。将所得的混合物在55℃加热3小时。将溶剂真空除去。将残留物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH(5:1DCM/MeOH，然后1:1)洗脱)得到85mg(21％，历时5步)反式-(±)-4-(4-氯-3-氟苯氧基)-1-甲基吡咯烷-3-胺(428):LC-MS(ESI)m/z 245(M+H)。
步骤10:向428(0.085g,0.347mmol)和DCM(15mL)的溶液中加入TEA(1mL)和CDI(0.149g,0.919mmol)。将混合物在RT搅拌1小时，然后加入28(0.081g,0.35mmol)。将反应混合物在RT搅拌2小时。将溶剂真空除去并将残留物经制备性反相HPLC纯化得到31mg(28％)I-151，其为白色固体：LC-MS(ESI)m/z 505(M+H)。
实施例77
2-((2S,4S)-2-羟基甲基-四氢-吡喃-4-基氨基)-5,8-二氢-6H-吡啶并[3,4-d]嘧 啶-7-羧酸[(R)-1-(4-氯-3-氟-苯基)-乙基]-酰胺(I-155)
步骤1:向(2S,4S)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-3,4-二氢-2H-吡喃-4-醇(430,3.565g,14.59mmol)(由(2R,3S,4R)-2-(羟基甲基)-3,4-二氢-2H-吡喃-3,4-二醇根据在S.V.Govindan and P.L.Fuchs,J.Org.Chem.198853:2953-2959中的操作制备)和DCM(25mL)的溶液中加入分子筛(7g)，随后加入N-甲基吗啉N-氧化物(3.418g,29.17mmol)和四丙基过钌酸铵(0.2563g,0.7293mmol)。将反应混合物在RT搅拌1.5小时。将混合物经过SiO2填料并用DCM洗脱。将滤液浓缩并将所得的残留物经SiO2色谱法纯化(用25％EtOAc/己烷洗脱)得到3.097g(87.6％)432。
步骤2:将432(3.097g,12.78mmol)、Pd/C(0.5439g,0.2555mmol)和EtOAc(30mL)的混悬液搅拌并保持在氢气囊压力达18小时。将反应混合物经CELITE填料滤过并浓缩。将所得的残留物经SiO2色谱法纯化(用20％EtOAc/己烷洗脱)得到2.035g(65.17％)434。
步骤3:向434(1.885g,7.713mmol)和苯基甲胺(0.9470mL,8.484mmol)和DCE(40mL)的溶液中加入NaBH(OAc)3(2.288g,10.80mmol)并将反应混合物搅拌1小时。将反应混合物倾倒至水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物用NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，滤过并浓缩。将所得的残留物经SiO2纯化(用DCM/MeOH梯度(0-3％MeOH)洗脱)得到(2S,4S)-N-苄基-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-4-胺(438a,1.686g,65.15％的收率)和反式(2S,4R)-N-苄基-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-4-胺(436a,1.04g,40.18％的收率)的混合物。
步骤4:向436a(1.04g,3.10mmol)和EtOH(20mL)的溶液中加入Pd/C(0.660g,0.310mmol)并将反应混合物搅拌并保持在氢气囊压力达18小时。将混合物经ZapCap膜滤器滤过。将滤液浓缩得到664mg(87.3％)436b，其没有进一步纯化即可使用。
类似地将438a转化为(2S,4S)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)四氢-2H-吡喃-4-胺(438b)。
步骤5:438b和21的缩合可根据在实施例1步骤1中所述的操作进行得到440。Boc的水解(步骤6)得到440以及与(S)-(4-氯-3-氟苯基)(1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲胺(140)的缩合可根据在实施例17的操作进行得到I-155。
实施例78
N-((S)-(3,4-二氯苯基)(噁唑-5-基)甲基)-2-((3S,4S)-3-氟四氢-2H-吡喃-4- 基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺(I-156)
步骤1:在3L圆底烧瓶中向冷却至0℃的1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮鎓二环[2.2.2]辛烷二-四氟硼酸盐(147g,414mmol,Selectfluor)和MeCN/H2O(1:1,800mL)的溶液中逐滴加入4-甲氧基-3,6-二氢-2H-吡喃(446,45.0g,394mmol,CASRN 17327-22-9)和MeCN(120mL)的溶液。将反应混合物在冰浴中搅拌30分钟，之后移去冰浴并将反应混合物搅拌另外的1小时。然后将固体NaCl(200g)以及DCM(300mL)加至反应混合物中。然后缓慢加入饱和Na2CO3溶液直到pH＝10。将混合物转移至4L分液漏斗中并在DCM中萃取三次。然后将水层置于使用DCM的连续的液-液萃取器中并加热至58℃且保持18小时。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，滤过并在20℃在Rotovap上浓缩。将粗产物经SiO2色谱法纯化(用DCM/MeOH梯度(500:3-500:5DCM:MeOH)洗脱)得到30g(64.4％)3-氟二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮(448)。
步骤2:向冷却至0℃的448(30g,254mmol)和DCE(800mL)的溶液中加入苯基甲胺(29.8ml,267mmol)并将溶液搅拌10分钟。向反应混合物中加入NaBH(OAc)3(75.4g,356mmol)，随后逐滴加入冰HOAc(14.5mL,254mmol)。将反应混合物搅拌2小时，然后倾倒至1M NaOH中并用DCM萃取。将合并的有机馏分干燥(MgSO4)，滤过并浓缩。将粗产物经反相柱色谱法纯化(使用MeCN/H2O梯度(0-40％MeCN))得到39g(73.4％)外消旋的顺式产物[分别为(3S,4S)-和(3R,4R)-N-苄基-3-氟四氢-2H-吡喃-4-胺450a和450b]。
对映异构体可经色谱法在Chiralpak IC,5x25cm柱上分离(用10％IPA(0.1％NH4OH)/90％CO2洗脱，流速为300mL/min且温度为40℃)。反压为100巴。
步骤3:向450a(3.7g,18mmol)和MeOH(40mL)的溶液中在RT加入Pd/C(3.8g,1.8mmol)并将所得的混悬液在氢气下搅拌18小时。滤出催化剂，用MeOH洗涤。将溶剂浓缩得到2.1g(100％)(3S,4S)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-胺(452):H1NMR(400MHz,CDCl3)δ4.58-4.44(m,1H),4.19-4.09(m,1H),4.05-3.95(m,1H),3.56-3.38(m,2H),2.96-2.84(m,1H),1.88-1.77(m,1H),1.72-1.65(m,1H)。
N-((S)-(3,4-二氯苯基)(噁唑-5-基)甲基)-2-((3S,4S)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-甲酰胺可根据在实施例1中的操作制备，除了在步骤3中将四氢-2H-吡喃-4-胺用452代替之外，得到I-156。
实施例79
ERK-2酶测定
在酶测定中使用人ERK-2(分裂素激活的激酶1)对化合物进行测试，所述ERK-2重组表达为大肠杆菌中的N-末端6-His融合蛋白且相应于aa8-360。所用的底物为荧光Omnia肽S/T17(Invitrogen Carlsbad,CA；Cat.KNZ1171C)。将测试化合物在DMSO中以3倍连续稀释进行稀释，达到100x终浓度。除了化合物之外，测定还含有50mM HEPES[pH 7.3]、10mMMgCl2、1mM DTT、0.005％Triton-X100、5nM ERK-2酶、6.25μM S/T17肽底物和25μM ATP(符合观察的Km)，总反应体积为25μL。所述测定在环境温度在白色384-孔聚丙烯板(Nunc,IncNaperville,IL；Cat.267462)中进行，在Envision板读取器(PerkinElmer,Inc.Waltham,MA)上每50秒收集数据，总计约30分钟；激发波长340nm/发射波长495nm。将由每孔所收集的数据拟合为直线且所得的比率用于计算控制百分数。将控制百分数对化合物浓度进行绘图且使用四参数拟合来确定IC50值。表2含有本申请披露的化合物的代表性数据。代表性数据在表2(如下)中。
实施例80
细胞增殖/存活测定
使用来自Promega的细胞滴定-蓝色细胞存活率测定对与ERK化合物孵育三天(72小时)后的存活细胞进行定量。
材料和方法：将HCT116细胞以1,000个细胞/孔的密度铺板于96孔微孔板中。在37℃/5％CO2使得细胞附着于微孔板上过夜。过夜附着后，然后将稀释的化合物以0.5％DMSO的终浓度加至细胞中。在37℃/5％CO2保持三天(72小时)后，使用来自Promega的细胞滴定-蓝色细胞存活率测定来确定存活细胞的数目。简单来说，将细胞滴定-蓝色试剂加至细胞中并孵育1小时。然后使用荧光微孔板读取器读取荧光(560nm激发/590nm发射)。扣除来自高浓度ERK-抑制的孔的背景。代表性数据在表III(如下)中。
实施例81
细胞P90RSK(Ser380)磷酸化测定
通过按照体外细胞机制测定来确定抑制PMA-刺激的P90RSK(Ser380)磷酸化，该测定包括使得细胞与化合物孵育1.5小时且定量固定细胞上的荧光pP90RSK(Ser380)信号以及标准化为GAPDH信号。
材料和方法：HepG2细胞由ATCC获得且生长于补充有10％胎牛血清的DMEM中。将细胞以35,000个细胞/孔铺板于96-孔板中并使其在37℃/5％CO2附着过夜。然后以0.5％DMSO的终浓度加入稀释的化合物。化合物孵育1.5小时后，通过加入100ng/mL的终浓度的PMA((12-)十四酸佛波酯(-13-)乙酸盐)来刺激细胞；所述PMA刺激为在37℃/5％CO2的30分钟孵育。PMA孵育30分钟后，将细胞用PBS洗涤并在室温固定于3.7％甲醛在PBS中的溶液中达15-20分钟。随后再在PBS中洗涤，然后在100％MeOH中在室温透化10-15分钟。在透化孵育后，将细胞在PBS/0.05％Tween-20中洗涤，随后在Odyssey阻断缓冲剂(LI-CORBiosciences)中阻断达至少1个小时。将对于磷酸化的P90RSK(Ser380)(细胞信号传导#9335,兔单克隆)和GAPDH(Fitzgerald 10R-G109a,小鼠单克隆)的抗体加至细胞中并在4℃孵育过夜。pP90RSK(Ser380)抗体以1:250稀释来使用；GAPDH以1:10,000稀释来使用。在用PBS/0.05％Tween-20洗涤后，使得细胞与荧光标记的第二抗体(抗兔-Alexa Flour680,Invitrogen Cat#A21109；抗小鼠-IRDye800CW,Rockland Inc.Cat#610-131-121)孵育1小时。两个第二抗体均以1:1000稀释来使用。然后洗涤细胞并在两种波长下使用Odyssey红外成像系统(LI-COR Biosciences)进行荧光分析。将磷酸化的P90RSK(Ser380)信号标准化为GAPDH信号。代表性数据在表III(如下)中。
实施例82
用于经若干种途径给药的本发明化合物的药物组合物如在该实施例中所述来制备。
用于口服给药的组合物(A)
将成分混合并分配至各自含有约100mg的胶囊中；一个胶囊将接近于总体每日剂量。
用于口服给药的组合物(B)
将成分混合并使用诸如甲醇的溶剂制粒。然后将该制剂干燥并用适当的压片机形成片剂(含有约20mg活性化合物)。
用于口服给药的组合物(C)
将成分混合，形成用于口服给药的混悬剂。
肠胃外制剂(D)
将活性成分溶解于注射用水部分。然后在搅拌的同时加入足量的氯化钠，使得溶液等渗。将溶液用剩余的注射用水补足重量，经0.2微米膜滤器滤过并在无菌条件下包装。
栓剂制剂(E)
将成分融解在一起并在蒸气浴上混合，且倾倒至含有2.5g总重量的模具中。
局部制剂(F)
将除了水之外的所有成分混合并在搅拌的同时加热至约60℃。然后在剧烈搅拌的同时在约60℃加入足量的水，使得成分乳化，然后加入适量的约100g的水。
在前述说明书或者随附的权利要求书中披露的以其特定形式或者按照用于执行所披露的功能的方式表达的特征，或者用于获得所披露的结果的方法或者操作，在适当时，可分开地或者以所述特征的任何组合而被采用，从而以其不同的形式来实现本发明。
已经详细地通过示例说明和实施例来描述前述的本发明，以达到清楚和能够理解的目的。对于本领域技术人员显而易见的是变化和改变可在随附的权利要求书的范围内来实施。因此，应该理解的是上述描述意在示例说明而不是进行限制。因此，本发明的范围不应参照上述说明来确定，而是应该参照随附的权利要求书以及与所述权利要求所授权的等价物的整个范围来确定。
本申请参考的专利、公开的申请以及科学文献确立了本领域技术人员的知识体系且将其全部内容通过引用的方式并入本申请，就如同将其各自特别地且单独地指定为通过引用的方式并入本申请。在本申请引用的任何参考文献以及本说明书的特定教导之间存在的任何冲突应该以后者优先来解决。同样的，在本领域所理解的词汇或者短语的定义以及如在本说明书中特别教导的所述词汇或者短语的定义之间存在的任何冲突应该以后者优先来解决。

Claims (26)

1.式I化合物或其互变异构体、立体异构体或药用盐
其中：
Z为N且Z3为CH2；或者Z为CRg且Z3为O；
Z1独立为CH或者N；
Z2为(a)NRaCR1R2Y；(b)式II其中X为CH2NReCH2；或者(c)CH2CR1R2Y；
Re为氢、C1-3烷基、氰基C1-3烷基；
Y为芳基、芳基C1-3烷基或者杂芳基，其中所述芳基为苯基，所述杂芳基选自苯并噁唑基、吲哚基、嘧啶基、吡啶基和噻唑基；
Y1为–Ar，其中Ar为任选取代的苯基；其中所述任选取代的苯基为任选取代有一个或者多个独立选自下述的取代基的苯基：烷基和卤素；其中所述烷基含有1-10个碳原子；
R1和R2独立选自(a)氢，(b)C1-10烷基，(c)卤代C1-6烷基，(e)C1-10杂烷基，(f)(CH2)1-3OC(＝O)Rf，其中Rf为C1-6烷基、C1-6杂烷基，(g)(CH2)1-3NRcRd，其中Rc和Rd独立为氢、C1-6烷基、C(＝O)Rg、S(＝O)2C1-3烷基、C1-3烷氧基-C1-3烷基或者嘧啶基，(h)氰基-C1-3烷基，(i)C1-3烷基磺酰基-C1-3烷基，(m)任选取代的杂芳基，其中所述杂芳基选自2-氧代-1,2-二氢吡啶基、6-氧代-1,6-二氢吡啶基、吡唑基、N-C1-3烷基-吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基，(n)杂环基或者杂环基-C1-3烷基，所述杂环基选自吡咯烷基、N-C1-3烷基-吡咯烷基、N-C1-3酰基-吡咯烷基、吗啉基，且其中所述杂环任选被1-3个独立选自下述的取代基取代：C1-6烷基，以及(o)(2-甲氧基乙氧基)甲基；
或者R1和R2与它们所连接的碳一起形成环状胺，其任选被1-3个C1-6烷基取代；
或者R1和Ra与它们所连接的原子一起形成环状胺，其中一个碳原子可任选被NRg或O代替；
R3a和R3b独立为氢、卤素或者羟基；
Ra为(a)氢或者C1-3烷基，或者(b)R1和Ra与它们所连接的原子一起形成环状胺；
Rb选自(b)C1-10烷基，(c)卤代C1-6烷基，(d)任选取代的芳基或者芳基-C1-6烷基，其中所述芳基为苯基，(e)任选取代的杂芳基或者杂芳基-C1-6烷基，其中所述杂芳基选自异噁唑基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基，(f)杂环基，其中所述杂环基选自四氢吡喃基、哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、N-C1-6烷基哌啶基和N-C1-6烷基-2-氧代-吡咯烷基，(g)C3-7环烷基或者C3-7环烷基-C1-6烷基，其中所述环烷基任选被羟基或者卤素取代，(h)C1-6杂烷基，和(j)羟基C1-6烷基；
每个Rg独立为氢或者C1-3烷基；
其中：
每个所述芳基和每个所述杂芳基任选被1-5个独立选自下述的基团取代：C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、卤代C1-6烷氧基和氰基；
每个所述杂环基任选取代有C1-6烷基；
杂烷基是指一个或者两个氢原子已经被独立选自-ORa和-NRbRc的取代基代替的烷基，其中Ra、Rb和Rc彼此独立为氢和C1-6烷基，且每个所述杂烷基任选被苯基、苄基或者卤代C1-3烷基取代；以及
所述环状胺是指饱和的碳环，其含有3-6个碳原子。
2.权利要求1的化合物，其中：
Z和Z1为N；
Z2为NRaCR1R2Ar；
Z3为CH2；
R1、R3a、R3b和Ra为氢；
Ar为任选取代的苯基，其任选取代有1-5个独立选自下述的取代基：C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、卤代C1-6烷氧基和氰基；
R2为氢、C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-3烷氧基-C1-6烷基、(CH2)1-3NRcRd、吡咯烷-2-基、N-C1-3烷基吡咯烷-2-基或者杂芳基；其中所述杂芳基选自2-氧代-1,2-二氢吡啶基、6-氧代-1,6-二氢吡啶基、吡唑基、N-C1-3烷基-吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基；且
Rb为C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、任选被羟基取代的C4-6环烷基，或者杂环基；其中所述杂环基选自四氢吡喃基、哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、N-C1-6烷基哌啶基和N-C1-6烷基-2-氧代-吡咯烷基。
3.权利要求2的化合物，其中R2为吡唑基、N-C1-3烷基吡唑基或噁二唑基。
4.权利要求3的化合物，其中Rb为四氢吡喃基、羟基C1-6烷基或者卤代C1-6烷基。
5.权利要求1的化合物，其中R1为氢且R2为吡咯烷基或者N-C1-3烷基-吡咯烷基。
6.权利要求5的化合物，其中Rb为四氢吡喃基、羟基C1-6烷基或者卤代C1-6烷基。
7.权利要求1的化合物，其中：
Z和Z1为N；
Z3为CH2；
Z2为NRaCR1R2Ar；
R1和Ra为氢；
Ar为任选取代的杂芳基；其中所述杂芳基选自苯并噁唑基、吲哚基、嘧啶基、吡啶基和噻唑基；
R2为氢、C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-3烷氧基-C1-6烷基、(CH2)1-3NRcRd、吡咯烷-2-基、N-C1-3烷基吡咯烷-2-基或者杂芳基；其中所述杂芳基选自2-氧代-1,2-二氢吡啶基、6-氧代-1,6-二氢吡啶基、吡唑基、N-C1-3烷基-吡唑基、噁唑基、异噁唑基和噁二唑基；
R3a和R3b为氢；且
Rb为C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、任选被羟基取代的C4-6环烷基，或者杂环基，其中所述杂环基选自四氢吡喃基、哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、N-C1-6烷基哌啶基和N-C1-6烷基-2-氧代-吡咯烷基；
其中任选取代的杂芳基为可任选取代有一个或者多个选自下述的取代基的杂芳基：C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、卤代C1-6烷氧基和氰基。
8.权利要求1的化合物，其中：
Z和Z1为N；
Z2为II；
Z3为CH2；
R3a和R3b为氢；且
Rb为C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、任选被羟基取代的C4-6环烷基，或者杂环基，其中所述杂环基选自四氢吡喃基、哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、N-C1-6烷基哌啶基和N-C1-6烷基-2-氧代-吡咯烷基。
9.权利要求8的化合物，其中X为CH2NReCH2，Y1为Ar且Ar为任选取代的苯基，所述任选取代的苯基为任选取代有一个或者多个独立选自下述的取代基的苯基：C1-6烷基、和卤素。
10.权利要求9的化合物，其中Rb为四氢吡喃基、羟基C1-6烷基或者卤代C1-6烷基。
11.权利要求1的化合物，其中Z为N且Z1为CH。
12.权利要求11的化合物，其中：
Z2为NRaCR1R2Ar；
R1、Ra、R3a和R3b为氢；
R2为C1-10烷基、卤代C1-6烷基或者羟基C1-6烷基；
Ar为任选取代的苯基；且
Rb为C1-10烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、任选被羟基取代的C4-6环烷基，或者杂环基，其中所述杂环基选自四氢吡喃基、哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、N-C1-6烷基哌啶基和N-C1-6烷基-2-氧代-吡咯烷基，
所述任选取代的苯基为任选取代有1-5个独立选自下述的取代基的苯基：C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、卤代C1-6烷氧基和氰基。
13.权利要求12的化合物，其中Rb为四氢吡喃基、羟基C1-6烷基或者卤代C1-6烷基。
14.权利要求1的化合物，其中Z3为O，Z为CRg，且R3a和R3b为氢。
15.化合物或其药用盐，所述化合物选自：
16.权利要求1-15中任一项的化合物在制备用于抑制细胞内ERK蛋白激酶活性的药物中的用途。
17.权利要求1-15中任一项的化合物在制备用于抑制有此需要的患者中ERK蛋白激酶活性的药物中的用途。
18.权利要求1-15中任一项的化合物在制备用于通过抑制ERK蛋白激酶活性来治疗或者减缓有此需要的患者中过度增殖性疾病的严重度的药物中的用途。
19.权利要求18的用途，其中所述过度增殖性疾病选自腺瘤、膀胱癌、脑癌、乳腺癌、结肠癌、表皮癌、滤泡性癌、生殖泌尿道癌、成胶质细胞瘤、霍奇金病、头颈癌、肝癌、角化棘皮瘤、肾癌、大细胞癌、白血球过多症、肺腺癌、肺癌、淋巴疾病、黑素瘤和非黑素瘤皮肤癌、骨髓增生异常综合征、成神经细胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、卵巢癌、乳头状癌、胰腺癌、前列腺癌、直肠癌、肉瘤、小细胞癌、睾丸癌、畸胎癌、甲状腺癌和未分化癌。
20.权利要求18的用途，其中所述过度增殖性疾病选自黑素瘤、胰腺癌、甲状腺癌、结肠直肠癌、肺癌、乳腺癌和卵巢癌。
21.权利要求18的用途，其中所述过度增殖性疾病选自急性骨髓性白血病、慢性骨髓单核细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病、多发性骨髓瘤和髓细胞性白血病。
22.权利要求18的用途，其中将化合物与用于治疗或者改善过度增殖性疾病的至少一种其它化学治疗剂共同给药。
23.组合物，包含权利要求1-15中任一项的化合物和至少一种药用载体、赋形剂或者稀释剂。
24.权利要求1-15中任一项的化合物在制备用于通过抑制ERK蛋白激酶活性来治疗或者减缓有此需要的患者中炎性疾病的严重度的药物中的用途。
25.权利要求24的用途，其中所述炎性疾病选自关节炎、腰背痛、炎性肠病和风湿病。
26.权利要求18的用途，其中所述过度增殖性疾病为实体瘤。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9133187B2 (en) 2011-02-28 2015-09-15 Array Biopharma Inc. Serine/threonine kinase inhibitors
AU2012272898A1 (en) 2011-06-24 2013-04-11 Amgen Inc. TRPM8 antagonists and their use in treatments
MY157429A (en) 2011-06-24 2016-06-15 Amgen Inc Trpm8 antagonists and their use in treatments
BR112014002675A2 (pt) 2011-08-04 2017-02-21 Array Biopharma Inc "quinazolina como inibidores de serina/treonina quinase, seus usos, e composição"
JP6298766B2 (ja) * 2011-12-27 2018-03-20 バイオ−ファーム ソリューションズ カンパニー リミテッド てんかんの予防または治療に使用するためのフェニルカルバメート化合物
CN106349217B (zh) 2012-03-01 2020-08-28 阵列生物制药公司 丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂
US8952009B2 (en) 2012-08-06 2015-02-10 Amgen Inc. Chroman derivatives as TRPM8 inhibitors
RU2644947C2 (ru) 2012-08-27 2018-02-15 Аррэй Байофарма Инк. Ингибиторы серин/треонин киназы для лечения гиперпролиферативных заболеваний
IN2015DN01328A (zh) * 2012-09-19 2015-07-03 Novartis Ag
JP2015533151A (ja) 2012-10-16 2015-11-19 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト セリン／スレオニンキナーゼ阻害剤
US20160159808A1 (en) * 2013-07-24 2016-06-09 Takeda Pharmaceutical Company Limited Heterocyclic compound
US9532987B2 (en) 2013-09-05 2017-01-03 Genentech, Inc. Use of a combination of a MEK inhibitor and an ERK inhibitor for treatment of hyperproliferative diseases
PE20160886A1 (es) 2013-12-06 2016-09-14 Genentech Inc Inhibidores de serina/treonina cinasa
BR112016015236B1 (pt) 2013-12-30 2023-11-14 Array Biopharma Inc. Composto, composições farmacêuticas, usos de um composto e método in vitro de inibição da atividade da proteína quinase erk
CN105848723B (zh) * 2013-12-30 2019-08-02 基因泰克公司 丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂
WO2017180581A1 (en) 2016-04-15 2017-10-19 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for cancer
CN109843856B (zh) * 2016-05-18 2023-05-02 米拉蒂治疗股份有限公司 Kras g12c抑制剂
WO2019051296A1 (en) 2017-09-08 2019-03-14 Genentech, Inc. DIAGNOSTIC AND THERAPEUTIC METHODS OF CANCER
US11053217B2 (en) 2017-09-29 2021-07-06 Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation Optically active pyrrolidine compound and method for producing same
WO2019094311A1 (en) 2017-11-08 2019-05-16 Merck Sharp & Dohme Corp. Prmt5 inhibitors
WO2019158579A1 (en) 2018-02-13 2019-08-22 Vib Vzw Targeting minimal residual disease in cancer with rxr antagonists
US20220213119A1 (en) 2019-03-28 2022-07-07 Jiangsu Hengrui Medicine Ca, Lid. Thienoheterocyclic derivative, preparation method therefor and medical use thereof
EP3950690A4 (en) 2019-03-29 2022-12-07 Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co., Ltd. PYRROLOHETEROCYCLIC DERIVATIVE, PROCESS FOR PRODUCTION THEREOF AND APPLICATION THEREOF IN MEDICINE
EP3978498A1 (en) 2019-05-24 2022-04-06 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. Substituted fused bicyclic derivative, preparation method therefor, and application thereof in medicines
WO2020238791A1 (zh) * 2019-05-24 2020-12-03 江苏恒瑞医药股份有限公司 氢化吡啶并嘧啶类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
CN111170929A (zh) * 2019-12-12 2020-05-19 北京达因高科儿童药物研究院有限公司 一种由末端烯烃制备β-氨基醇的方法
WO2022064009A1 (en) 2020-09-25 2022-03-31 Janssen Pharmaceutica Nv Cyclin-dependent kinase 7 (cdk7) non-covalent inhibitors
CN116437915A (zh) 2020-09-29 2023-07-14 江苏恒瑞医药股份有限公司 一种吡咯并杂环类衍生物的晶型及其制备方法
CN115040522B (zh) * 2022-06-30 2024-02-06 牡丹江医学院 一种用于治疗肺癌的药物及其制备方法
WO2024088296A1 (zh) * 2022-10-25 2024-05-02 上海拓界生物医药科技有限公司 哌啶并嘧啶类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002087513A2 (en) * 2001-05-01 2002-11-07 Bristol-Myers Squibb Company Fused heterocyclic inhibitors of phosphodiesterase (pde) 7
WO2004007468A1 (en) * 2002-07-15 2004-01-22 Merck & Co., Inc. Piperidino pyrimidine dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment of diabetes

Family Cites Families (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU693475B2 (en) 1993-10-01 1998-07-02 Novartis Ag Pyrimidineamine derivatives and processes for the preparation thereof
WO1995009851A1 (en) 1993-10-01 1995-04-13 Ciba-Geigy Ag Pharmacologically active pyrimidineamine derivatives and processes for the preparation thereof
US5543523A (en) 1994-11-15 1996-08-06 Regents Of The University Of Minnesota Method and intermediates for the synthesis of korupensamines
CN1328277C (zh) 1996-12-05 2007-07-25 安姆根有限公司 取代的嘧啶酮和吡啶酮化合物和它们的应用
US6602872B1 (en) 1999-12-13 2003-08-05 Merck & Co., Inc. Substituted pyridazines having cytokine inhibitory activity
MXPA02008240A (es) 2000-02-25 2002-11-29 Hoffmann La Roche Moduladores del receptor de adenosina.
WO2003030909A1 (en) 2001-09-25 2003-04-17 Bayer Pharmaceuticals Corporation 2- and 4-aminopyrimidines n-substtituded by a bicyclic ring for use as kinase inhibitors in the treatment of cancer
MXPA04011470A (es) 2002-05-21 2005-02-14 Amgen Inc Compuestos heterociclicos sustituidos y metodos de uso.
US7419978B2 (en) * 2003-10-22 2008-09-02 Bristol-Myers Squibb Company Phenyl-aniline substituted bicyclic compounds useful as kinase inhibitors
TW200533357A (en) 2004-01-08 2005-10-16 Millennium Pharm Inc 2-(amino-substituted)-4-aryl pyrimidines and related compounds useful for treating inflammatory diseases
AU2005232745A1 (en) 2004-04-13 2005-10-27 Astellas Pharma Inc. Polycyclic pyrimidines as potassium ion channel modulators
PE20060426A1 (es) 2004-06-02 2006-06-28 Schering Corp DERIVADOS DE ACIDO TARTARICO COMO INHIBIDORES DE MMPs, ADAMs, TACE Y TNF-alfa
US7429604B2 (en) 2004-06-15 2008-09-30 Bristol Myers Squibb Company Six-membered heterocycles useful as serine protease inhibitors
CA2578122A1 (en) 2004-08-27 2006-03-02 Gpc Biotech Ag Pyrimidine derivatives
GB0420722D0 (en) 2004-09-17 2004-10-20 Addex Pharmaceuticals Sa Novel allosteric modulators
GB0428514D0 (en) 2004-12-31 2005-02-09 Prosidion Ltd Compounds
TW200716594A (en) 2005-04-18 2007-05-01 Neurogen Corp Substituted heteroaryl CB1 antagonists
WO2007028022A2 (en) * 2005-09-01 2007-03-08 Renovis, Inc. Novel compounds as p2x7 modulators and uses thereof
US7572809B2 (en) 2005-12-19 2009-08-11 Hoffmann-La Roche Inc. Isoquinoline aminopyrazole derivatives
JP2009528280A (ja) 2006-02-16 2009-08-06 シェーリング コーポレイション Ｅｒｋインヒビターとしてのピロリジン誘導体
WO2007125405A2 (en) 2006-05-01 2007-11-08 Pfizer Products Inc. Substituted 2-amino-fused heterocyclic compounds
DE102006035202A1 (de) 2006-07-29 2008-01-31 Lanxess Deutschland Gmbh Konservierungsmittel auf Basis von Carbonsäureanhydriden
KR20090052884A (ko) 2006-08-23 2009-05-26 화이자 프로덕츠 인크. Ｇｓｋ-3 억제제로서의 피리미돈 화합물
US7897762B2 (en) * 2006-09-14 2011-03-01 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Kinase inhibitors useful for the treatment of proliferative diseases
WO2008039882A1 (en) 2006-09-30 2008-04-03 Sanofi-Aventis U.S. Llc A combination of niacin and a prostaglandin d2 receptor antagonist
CN101568529A (zh) 2006-12-22 2009-10-28 诺瓦提斯公司 作为cdk抑制剂、用于治疗癌症、炎症和病毒感染的杂芳基-杂芳基化合物
JP5363350B2 (ja) * 2007-03-19 2013-12-11 武田薬品工業株式会社 Ｍａｐｋ／ｅｒｋキナーゼ阻害剤
WO2009011904A1 (en) * 2007-07-19 2009-01-22 Renovis, Inc. Compounds useful as faah modulators and uses thereof
CA2698511C (en) 2007-09-04 2016-10-11 The Scripps Research Institute Substituted pyrimidinyl-amines as protein kinase inhibitors
MX2010005033A (es) 2007-11-06 2010-05-27 Du Pont Aminas heterociclicas fungicidas.
US20090246198A1 (en) 2008-03-31 2009-10-01 Takeda Pharmaceutical Company Limited Mapk/erk kinase inhibitors and methods of use thereof
MX360970B (es) 2008-06-27 2018-11-23 Avila Therapeutics Inc Compuestos de heteroarilo y usos de los mismos.
NZ589962A (en) 2008-06-27 2012-12-21 Novartis Ag Inhibitors of stearoyl-CoA desaturase and uses thereof
US8940891B2 (en) 2008-12-08 2015-01-27 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the prostacyclin (PGI2) receptor useful for the treatment of disorders related thereto
US9133187B2 (en) 2011-02-28 2015-09-15 Array Biopharma Inc. Serine/threonine kinase inhibitors
BR112014002675A2 (pt) 2011-08-04 2017-02-21 Array Biopharma Inc "quinazolina como inibidores de serina/treonina quinase, seus usos, e composição"
CN106349217B (zh) 2012-03-01 2020-08-28 阵列生物制药公司 丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂
RU2644947C2 (ru) 2012-08-27 2018-02-15 Аррэй Байофарма Инк. Ингибиторы серин/треонин киназы для лечения гиперпролиферативных заболеваний

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002087513A2 (en) * 2001-05-01 2002-11-07 Bristol-Myers Squibb Company Fused heterocyclic inhibitors of phosphodiesterase (pde) 7
WO2004007468A1 (en) * 2002-07-15 2004-01-22 Merck & Co., Inc. Piperidino pyrimidine dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment of diabetes

Also Published As

Publication number Publication date
KR20140014190A (ko) 2014-02-05
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CA2828478C (en) 2019-12-31
US9133187B2 (en) 2015-09-15
RU2013143839A (ru) 2015-04-10
MX2013009877A (es) 2014-02-11
MX339873B (es) 2016-06-15

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