CN113645971A - 化合物及其用途 - Google Patents

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R·G·瓦斯瓦尼
N·J·安东尼
D·S·米兰
S·E·R·席勒
K·J·威尔逊
D·S·黄
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Foghorn Therapeutics Inc
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Fuhong Treatment Co
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Abstract

本公开的特征是可用于治疗BAF复合物相关病症的化合物。

Description

化合物及其用途
背景
本发明涉及可用于调节BRG1或BRM相关因子(BAF)复合物的化合物。特别地，本发明涉及可用于治疗与BAF复合物功能相关的病症的化合物。
染色质调控对于基因表达至关重要，并且ATP依赖性染色质重塑是发生这种基因表达的机制。人转化/蔗糖非发酵性(SWI/SNF)染色质重塑复合物(也称为BAF复合物)具有两种SWI2样ATP酶，称为BRG1(Brahma相关基因1)和BRM(Brahma)。转录激活因子BRG1(也称为ATP依赖性染色质重塑剂SMARCA4)由19号染色体上的SMARCA4基因编码。BRG1在一些癌症肿瘤中过表达，并且是癌细胞增殖所需的。BRM(也称为可能的全局转录激活因子SNF2L2和/或ATP依赖性染色质重塑剂SMARCA2)由9号染色体上的SMARCA2基因编码，并且已被证明对以BRG1功能突变丧失为特征的细胞中的肿瘤细胞生长至关重要。BRG和/或BRM的失活导致细胞中的下游效应，包括细胞周期停滞和肿瘤抑制。
发明内容
本发明的特征是可用于调节BAF复合物的化合物。在一些实施方案中，所述化合物可用于治疗与BAF复合物的改变相关的病症，例如与BRG1和BRM蛋白中的一者或两者的改变相关的病症。单独或与其他药物活性剂组合的本发明化合物可用于治疗此类病症。
一方面，本发明的特征在于具有以下结构的化合物：
Figure BDA0003284159120000021
其中R1不存在、是任选取代的H、任选取代的C1-C6酰基、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C8环烷基、任选取代的C1-C6杂烷基、任选取代的C2-C9杂环基或–SO2R6；
Figure BDA0003284159120000023
是5元或6元杂亚芳基；
R2和R5中的每一者独立地是H或任选取代的C1-C6烷基；
R3是H或任选取代的C1-C6烷基；并且R4是H、任选取代的C1-C6烷基或任选取代的C1-C6杂烷基；或者R3和R4与它们各自所连接的碳原子一起形成任选取代的C3-C6环烷基；
R6是任选取代的C1-C6烷基或–NR7R8；
R7和R8独立地是任选取代的C1-C6烷基；
Het是任选取代的5元杂亚芳基、任选取代的6元杂亚芳基，或
Figure BDA0003284159120000022
A是任选取代的C6-C10亚芳基、任选取代的C2-C9亚杂环基，或任选取代的C2-C9杂亚芳基；
L不存在、是-O-、任选取代的C1-C6亚烷基、任选取代的C1-C6杂亚烷基、任选取代的C2-C6亚烯基、任选取代的C2-C6杂亚烯基、任选取代的C2-C6亚炔基、任选取代的C2-C6杂亚炔基、任选取代的C2-C9亚杂环基、任选取代的C2-C9杂环基C1-C6亚烷基、任选取代的C2-C9杂亚芳基或任选取代的C2-C9杂芳基C1-C6亚烷基；并且
B是H、卤素、氰基、任选取代的C6-C10芳基、任选取代的C3-C10环烷基、任选取代的C2-C9杂环基、或任选取代的C2-C9杂芳基，或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，
Figure BDA0003284159120000032
是6元杂亚芳基。在一些实施方案中，
Figure BDA0003284159120000033
是5元杂亚芳基。
在一些实施方案中，
Figure BDA0003284159120000034
是
Figure BDA0003284159120000035
其中X、Y和Z中的每一者独立地是N或CH。
在一些实施方案中，式A的化合物具有式I的结构：
Figure BDA0003284159120000031
其中X、Y和Z中的每一者独立地是N或CH；
R1是H、任选取代的C1-C6酰基、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C1-C6杂烷基、任选取代的C3-C8环烷基、任选取代的C2-C9杂环基或–SO2R6；
R2、R3和R5中的每一者独立地是H或任选取代的C1-C6烷基；
R4是H、任选取代的C1-C6烷基，或任选取代的C1-C6杂烷基；
R6是任选取代的C1-C6烷基或–NR7R8；
R7和R8中的每一者独立地是任选取代的C1-C6烷基；
Het是任选取代的5元杂亚芳基、任选取代的6元杂亚芳基，或
Figure BDA0003284159120000041
A是任选取代的C6-C10亚芳基、任选取代的C2-C9亚杂环基，或任选取代的C2-C9杂亚芳基；
L不存在、是-O-、任选取代的C1-C6亚烷基、任选取代的C1-C6杂亚烷基、任选取代的C2-C6亚烯基、任选取代的C2-C6杂亚烯基、任选取代的C2-C6亚炔基、任选取代的C2-C6杂亚炔基、任选取代的C2-C9亚杂环基、任选取代的C2-C9杂环基C1-C6亚烷基、任选取代的C2-C9杂亚芳基或任选取代的C2-C9杂芳基C1-C6亚烷基；并且
B是H、卤素、氰基、任选取代的C6-C10芳基、任选取代的C3-C10环烷基、任选取代的C2-C9杂环基、或任选取代的C2-C9杂芳基，或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，X、Y和Z是CH；X是N，并且Y和Z是CH；Z是N，并且X和Y是CH；Y是N，并且X和Z是CH；X是CH，并且Y和Z是N；Z是CH，并且X和y是N；Y是CH，并且X和Z是N；或者X、Y和Z是N。
在一些实施方案中，式I的化合物具有式Ia的结构：
Figure BDA0003284159120000042
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，式I的化合物具有式Ib的结构：
Figure BDA0003284159120000051
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，式I的化合物具有式Ic的结构：
Figure BDA0003284159120000052
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，式I的化合物具有式Id的结构：
Figure BDA0003284159120000053
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，
Figure BDA0003284159120000054
是
Figure BDA0003284159120000055
其中X’是O或S；Y’是N或CH；并且Z’是N或CH。
在一些实施方案中，式A的化合物具有式II的结构：
Figure BDA0003284159120000056
其中
W’是C或N；
X’是O、S或N-CH3；
Y’是N或CH；
Z’是N或CH；
R1不存在、是H、任选取代的C1-C6酰基、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C1-C6杂烷基、任选取代的C3-C8环烷基、任选取代的C2-C9杂环基，或–SO2R6；
R2、R3和R5中的每一者独立地是H或任选取代的C1-C6烷基；
R4是H、任选取代的C1-C6烷基，或任选取代的C1-C6杂烷基；
R6是任选取代的C1-C6烷基或–NR7R8；
R7和R8中的每一者独立地是任选取代的C1-C6烷基；
Het是任选取代的5元杂亚芳基、任选取代的6元杂亚芳基，或
Figure BDA0003284159120000061
A是任选取代的C6-C10亚芳基、任选取代的C2-C9亚杂环基，或任选取代的C2-C9杂亚芳基；
L不存在、是-O-、任选取代的C1-C6亚烷基、任选取代的C1-C6杂亚烷基、任选取代的C1-C6亚烯基、任选取代的C2-C6杂亚烯基、任选取代的C2-C6亚炔基、任选取代的C2-C6杂亚炔基、任选取代的C2-C9亚杂环基、任选取代的C2-C9杂环基C1-C6亚烷基、任选取代的C2-C9杂亚芳基或任选取代的C2-C9杂芳基C1-C6亚烷基；并且
B是H、卤素、氰基、任选取代的C6-C10芳基、任选取代的C3-C10环烷基、任选取代的C2-C9杂环基或任选取代的C2-C9杂芳基，
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，X'是O，Y'是CH并且Z'是N；X'是S，Y'是CH并且Z'是N；X'是O，Y'是N并且Z'是CH；X'是S，Y'是N并且Z'是CH；X'是O，Y'是N并且Z'是N；或者X'是S，Y'是N并且Z'是N。
在一些实施方案中，式II化合物具有式IIa的结构：
Figure BDA0003284159120000071
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，式II化合物具有式IIb的结构：
Figure BDA0003284159120000072
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，R2是H。
在一些实施方案中，R5是H。在其他实施方案中，R5是任选取代的C1-C6烷基，例如甲基。
在一些实施方案中，R3是H。在一些实施方案中，R3是任选取代的C1-C6烷基，例如，R3是甲基。
在其他实施方案中，R4是H。在其他实施方案中，R4是任选取代的C1-C6烷基，例如甲基、叔丁基、异丙基、异丁基或叔戊基。在进一步的实施方案中，R4是任选取代的C1-C6杂烷基，例如，
Figure BDA0003284159120000081
Figure BDA0003284159120000082
或
Figure BDA0003284159120000083
在一些实施方案中，R4是
Figure BDA0003284159120000084
在一些实施方案中，R3是H，并且R4是
Figure BDA0003284159120000085
在一些实施方案中，R3和R4与它们各自所连接的碳原子一起形成任选取代的C3-C6环烷基。
在一些实施方案中，R3和R4与它们各自所连接的碳原子一起形成C3-C6环烷基。
在一些实施方案中，R3和R4与它们各自所连接的碳原子一起形成
Figure BDA0003284159120000086
在一些实施方案中，Het是任选取代的5元杂亚芳基。
在一些实施方案中，Het是
Figure BDA0003284159120000087
在进一步的实施方案中，Het是
Figure BDA0003284159120000088
在一些实施方案中，Het是任选取代的6元杂亚芳基。
在一些实施方案中，Het是
Figure BDA0003284159120000089
在一些实施方案中，Het是
Figure BDA00032841591200000810
在一些实施方案中，L不存在。在一些实施方案中，L是–O-。在一些实施方案中，L是任选取代的C1-C6亚烷基，例如，L是
Figure BDA0003284159120000091
Figure BDA0003284159120000092
在进一步的实施方案中，L是任选取代的C1-C6杂亚烷基，例如，L是
Figure BDA0003284159120000093
Figure BDA0003284159120000094
在一些实施方案中，L是。在特定的实施方案中，L是任选取代的C1-C6亚烯基，例如
Figure BDA00032841591200000910
在进一步的实施方案中，L是任选取代的C2-C6杂亚烯基。在其他实施方案中，L是任选取代的C2-C6亚炔基，例如，L是
Figure BDA0003284159120000095
在另外的实施方案中，L是任选取代的C2-C6杂亚炔基，例如，L是
Figure BDA0003284159120000096
在一些实施方案中，L是任选取代的C2-C9亚杂环基，例如，L是
Figure BDA0003284159120000097
Figure BDA0003284159120000098
在进一步的实施方案中，L是任选取代的C2-C9杂环基C1-C6亚烷基，例如，L是
Figure BDA0003284159120000099
在其他实施方案中，L是任选取代的C2-C9杂亚芳基。在其他实施方案中，L是任选取代的C2-C9杂芳基C1-C6亚烷基。
在一些实施方案中，A是任选取代的C6-C10亚芳基，例如，
Figure BDA0003284159120000101
在其他实施方案中，A是任选取代的C2-C9杂亚芳基，例如，
Figure BDA0003284159120000102
在进一步的实施方案中，A是任选取代的C2-C9亚杂环基，例如，
Figure BDA0003284159120000103
Figure BDA0003284159120000111
在一些实施方案中，A是
Figure BDA0003284159120000121
在一些实施方案中，A是
Figure BDA0003284159120000122
在一些实施方案中，A是
Figure BDA0003284159120000123
在一些实施方案中，B是H。在其他实施方案中，B是氰基。在进一步的实施方案中，B是任选取代的C6-C10芳基，例如，
Figure BDA0003284159120000124
在另外的实施方案中，B是任选取代的C2-C9杂环基，例如，
Figure BDA0003284159120000125
Figure BDA0003284159120000126
Figure BDA0003284159120000131
Figure BDA0003284159120000141
Figure BDA0003284159120000142
在一些实施方案中，R9a、R9b、R9c和R9d中的每一者独立地是H、卤素、羟基、任选取代的C1-6烷基或任选取代的C1-6杂烷基。在其他实施方案中，X是O或C(R10)2；y可以是0、1、2、3、4、5、6、7或8；并且每个R10独立地是H、卤素、氰基、氨基、羟基、烯丙基、杂烯丙基、任选取代的C1-6烷基、任选取代的C1-6杂烷基，或者两者与它们所连接的碳结合形成C＝O。
在一些实施方案中，B是吗啉代。在一些实施方案中，B是
Figure BDA0003284159120000143
在一些实施方案中，B是
Figure BDA0003284159120000144
在其他实施方案中，B是任选取代的C2-C9杂芳基，例如，
Figure BDA0003284159120000145
Figure BDA0003284159120000151
在进一步的实施方案中，B是任选取代的C3-C10环烷基，例如，
Figure BDA0003284159120000152
Figure BDA0003284159120000161
在某些实施方案中，R1是H。在其他实施方案中，R1是任选取代的C1-C6酰基，例如乙酰基。在进一步的实施方案中，R1是任选取代的C1-C6烷基，例如甲基、叔丁基、异丙基或
Figure BDA0003284159120000165
在其他实施方案中，R1是任选取代的C1-C6杂烷基，例如，
Figure BDA0003284159120000162
Figure BDA0003284159120000163
在一些实施方案中，R1是任选取代的C2-C9杂环基，例如，
Figure BDA0003284159120000164
在进一步的实施方案中，R1是–SO2R6。在一些实施方案中，R6是任选取代的C1-C6烷基，例如甲基、异-丙基或
Figure BDA0003284159120000166
在一些实施方案中，R6是–NR7R8。在一些实施方案中，R7是甲基。在一些实施方案中，R8是甲基。
在一些实施方案中，所述化合物是表1中化合物1-827中的任一种。在一些实施方案中，所述化合物或其药学上可接受的盐具有表1中化合物1-421中的任一种的结构。
在一些实施方案中，所述化合物是表1中化合物1-156中的任一种。在其他实施方案中，所述化合物是表1中化合物157-421中的任一种。在一些实施方案中，所述化合物是表1中化合物422-827中的任一种。
在一些实施方案中，所述化合物是表1中化合物1-776中的任一种。在一些实施方案中，所述化合物是表1中化合物777-819中的任一种。在一些实施方案中，所述化合物是表1中化合物820-827中的任一种。
表1.本发明的化合物
Figure BDA0003284159120000171
Figure BDA0003284159120000181
Figure BDA0003284159120000191
Figure BDA0003284159120000201
Figure BDA0003284159120000211
Figure BDA0003284159120000221
Figure BDA0003284159120000231
Figure BDA0003284159120000241
Figure BDA0003284159120000251
Figure BDA0003284159120000261
Figure BDA0003284159120000271
Figure BDA0003284159120000281
Figure BDA0003284159120000291
Figure BDA0003284159120000301
Figure BDA0003284159120000311
Figure BDA0003284159120000321
Figure BDA0003284159120000331
Figure BDA0003284159120000341
Figure BDA0003284159120000351
Figure BDA0003284159120000361
Figure BDA0003284159120000371
Figure BDA0003284159120000381
Figure BDA0003284159120000391
Figure BDA0003284159120000401
Figure BDA0003284159120000411
Figure BDA0003284159120000421
Figure BDA0003284159120000431
Figure BDA0003284159120000441
Figure BDA0003284159120000451
Figure BDA0003284159120000461
Figure BDA0003284159120000471
Figure BDA0003284159120000481
Figure BDA0003284159120000491
Figure BDA0003284159120000501
Figure BDA0003284159120000511
Figure BDA0003284159120000521
Figure BDA0003284159120000531
Figure BDA0003284159120000541
Figure BDA0003284159120000551
Figure BDA0003284159120000561
Figure BDA0003284159120000571
Figure BDA0003284159120000581
Figure BDA0003284159120000591
Figure BDA0003284159120000601
Figure BDA0003284159120000611
Figure BDA0003284159120000621
Figure BDA0003284159120000631
Figure BDA0003284159120000641
另一方面，本发明的特征是一种药物组合物，其包含上述化合物中的任一种和药学上可接受的赋形剂。
在另一方面，本发明的特征是一种降低细胞中的BAF复合物的活性的方法，所述方法包括使所述细胞与有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物接触。
在一些实施方案中，所述细胞是癌细胞。
在另一方面，本发明的特征是一种治疗有需要的受试者的BAF复合物相关病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物。
在一些实施方案中，所述BAF复合物相关病症是癌症。
在另一方面，本发明的特征是一种抑制BRM的方法，所述方法包括使细胞与有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物接触。在一些实施方案中，所述细胞是癌细胞。
在另一方面，本发明的特征是一种抑制BRG1的方法，所述方法包括使细胞与有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物接触。在一些实施方案中，所述细胞是癌细胞。
在另一方面，本发明的特征是一种抑制BRM和BRG1的方法，所述方法包括使细胞与有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物接触。在一些实施方案中，所述细胞是癌细胞。
在另一方面，本发明的特征是一种治疗有需要的受试者的BRG1功能丧失性突变相关病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物。
在一些实施方案中，所述BRG1功能丧失性突变相关病症是癌症。在其他实施方案中，所述受试者被确定为患有BRG1功能丧失性病症，例如被确定为患有BRG1功能丧失性癌症(例如，所述癌症已被确定为包括具有BRG1功能丧失的癌细胞)。
在另一方面，本发明的特征是一种诱导细胞的细胞凋亡的方法，所述方法包括使所述细胞与有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物接触。在一些实施方案中，所述细胞是癌细胞。
在另一方面，本发明的特征是一种治疗有需要的受试者的癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物。
在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症是非小细胞肺癌、结肠直肠癌、膀胱癌、原发不明癌症、神经胶质瘤、乳腺癌、黑素瘤、非黑素瘤皮肤癌、子宫内膜癌、食道胃癌、胰腺癌、肝胆管癌、软组织肉瘤、卵巢癌、头颈癌、肾细胞癌、骨癌、非霍奇金淋巴瘤、小细胞肺癌、前列腺癌、胚胎肿瘤、生殖细胞瘤、宫颈癌、甲状腺癌、唾液腺癌、胃肠神经内分泌肿瘤、子宫肉瘤、胃肠道间质瘤、CNS癌症、胸腺肿瘤、肾上腺皮质癌、阑尾癌、小肠癌或阴茎癌。
在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症是非小细胞肺癌、结肠直肠癌、膀胱癌、原发不明癌症、神经胶质瘤、乳腺癌、黑素瘤、非黑素瘤皮肤癌、子宫内膜癌或阴茎癌。
在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症是耐药性癌症或对先前疗法没有反应(例如，维莫非尼、达卡巴嗪、CTLA4抑制剂、PD1抑制剂、干扰素疗法、BRAF抑制剂、MEK抑制剂、放射疗法、替莫唑胺、伊立替康、CAR-T疗法、赫赛汀、帕妥珠单抗(perjeta)、他莫昔芬、希罗达、多西紫杉醇、铂剂(如卡铂)、紫杉烷类(如紫杉醇和多西他赛)、ALK抑制剂、MET抑制剂、爱宁达、白蛋白结合型紫杉醇、
Figure BDA0003284159120000661
吉西他滨、阿瓦斯汀、海乐卫(halaven)、来那替尼、PARP抑制剂、ARN810、mTOR抑制剂、托泊替康、健择(gemzar)、VEGFR2抑制剂、叶酸受体拮抗剂、登西珠单抗(demcizumab)、福布瑞汀(fosbretabulin)或PDL1抑制剂)。
在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症具有或已被确定具有BRG1突变。在任何前述方法的一些实施方案中，所述BRG1突变是纯合的。在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症不具有或已被确定不具有表皮生长因子受体(EGFR)突变。在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症不具有或已被确定不具有间变性淋巴瘤激酶(ALK)驱动突变。在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症具有或已被确定具有KRAS突变。在任何前述方法的一些实施方案中，所述BRG1突变位于蛋白质的ATP酶催化结构域中。在任何前述方法的一些实施方案中，所述BRG1突变是BRG1的C端处的缺失。
在另一方面，本公开提供了一种治疗有需要的受试者的BAF相关病症(例如，癌症或病毒感染)的方法。所述方法包括使细胞与有效量的前述化合物中的任一种或其药学上可接受的盐或任何前述药物组合物接触。在一些实施方案中，所述病症是病毒感染，所述病毒感染是被以下病毒感染：逆转录病毒科如慢病毒(例如，人免疫缺陷病毒(HIV)和δ-逆转录病毒属(例如，人T细胞白血病病毒I(HTLV-I)、人T细胞白血病病毒II(HTLV-II))、嗜肝DNA病毒科(例如，乙型肝炎病毒(HBV))、黄病毒科(例如，丙型肝炎病毒(HCV))、腺病毒科(例如，人腺病毒)、疱疹病毒科(例如，人巨细胞病毒(HCMV)、爱泼斯坦-巴尔病毒、单纯疱疹病毒1(HSV-1)、单纯疱疹病毒2(HSV-2)、人疱疹病毒6(HHV-6)、疱疹病毒K*、CMV、水痘-带状疱疹病毒)、乳头瘤病毒科(例如，人乳头瘤病毒(HPV、HPVE1))、细小病毒科(例如，细小病毒B19)、多瘤病毒科(例如，JC病毒和BK病毒)、副粘病毒科(例如，麻疹病毒)、披膜病毒科(例如，风疹病毒)。在一些实施方案中，所述疾病症是科芬-西里斯(Coffin Siris)、神经纤维瘤病(例如，NF-1、NF-2或神经鞘瘤病)或多发性脑膜瘤。
在另一方面，本公开提供了一种用于治疗有需要的受试者的病毒感染的方法。所述方法包括向所述受试者施用有效量的前述化合物中的任一种或其药学上可接受的盐或任何前述药物组合物。在一些实施方案中，所述病毒感染是被以下病毒感染：逆转录病毒科如慢病毒(例如，人免疫缺陷病毒(HIV)和δ-逆转录病毒属(例如，人T细胞白血病病毒I(HTLV-I)、人T细胞白血病病毒II(HTLV-II))、嗜肝DNA病毒科(例如，乙型肝炎病毒(HBV))、黄病毒科(例如，丙型肝炎病毒(HCV))、腺病毒科(例如，人腺病毒)、疱疹病毒科(例如，人巨细胞病毒(HCMV)、爱泼斯坦-巴尔病毒、单纯疱疹病毒1(HSV-1)、单纯疱疹病毒2(HSV-2)、人疱疹病毒6(HHV-6)、疱疹病毒K*、CMV、水痘-带状疱疹病毒)、乳头瘤病毒科(例如，人乳头瘤病毒(HPV、HPV E1))、细小病毒科(例如，细小病毒B19)、多瘤病毒科(例如，JC病毒和BK病毒)、副粘病毒科(例如，麻疹病毒)或披膜病毒科(例如，风疹病毒)。
在另一方面，本发明的特征是一种治疗有需要的受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物。
在另一方面，本发明的特征是一种减少有需要的受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症的肿瘤生长的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物。
在另一方面，本发明的特征是一种抑制受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症的转移进展的方法，所述方法包括施用有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物。
在另一方面，本发明的特征是一种抑制受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症的转移定殖的方法，所述方法包括施用有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物。
在另一方面，本发明的特征是一种降低黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症细胞中的BRG1和/或BRM的水平和/或活性的方法，所述方法包括使所述细胞与有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物接触。
在任何上述方面的一些实施方案中，黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液细胞在受试者体内。
在任何上述方面的一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使BRG1的水平和/或活性降低至少5％(例如，6％、7％、8％、9％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％)。在一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使BRG1的水平和/或活性降低至少50％(例如，55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％)。在一些实施方案中，所述化合物的有效量使BRG1的水平和/或活性降低至少90％(例如，91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)。
在一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使BRG1的水平和/或活性降低至少5％(例如6％、7％、8％、9％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％)保持至少12小时(例如，14小时、16小时、18小时、20小时、22小时、24小时、30小时、36小时、48小时、72小时或更长时间)。在一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使BRG1的水平和/或活性降低至少5％(例如，6％、7％、8％、9％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％)保持至少4天(例如，5天、6天、7天、14天、28天或更长时间)。
在任何上述方面的一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使BRM的水平和/或活性降低至少5％(例如，6％、7％、8％、9％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％)。在一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使BRM的水平和/或活性降低至少50％(例如，55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％)。在一些实施方案中，所述化合物的有效量使BRM的水平和/或活性降低至少90％(例如，91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)。
在一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使BRM的水平和/或活性降低至少5％(例如6％、7％、8％、9％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％)保持至少12小时(例如，14小时、16小时、18小时、20小时、22小时、24小时、30小时、36小时、48小时、72小时或更长时间)。在一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使BRM的水平和/或活性降低至少5％(例如，6％、7％、8％、9％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％)保持至少4天(例如，5天、6天、7天、14天、28天或更长时间)。
在一些实施方案中，所述受试者患有癌症。在一些实施方案中，所述癌症表达BRG1和/或BRM蛋白，和/或所述细胞或受试者已被鉴定为表达BRG1和/或BRM。在一些实施方案中，所述癌症表达BRG1蛋白，和/或所述细胞或受试者已被鉴定为表达BRG1。在一些实施方案中，所述癌症表达BRM蛋白，和/或所述细胞或受试者已被鉴定为表达BRM。在一些实施方案中，所述癌症是黑素瘤(例如，葡萄膜黑素瘤、粘膜黑素瘤或皮肤黑素瘤)。在一些实施方案中，所述癌症是前列腺癌。在一些实施方案中，所述癌症是血液学癌症，例如多发性骨髓瘤、大细胞淋巴瘤、急性T细胞白血病、急性骨髓性白血病、骨髓异常增生综合征、免疫球蛋白Aλ骨髓瘤、弥漫性混合型组织细胞和淋巴细胞淋巴瘤、B细胞淋巴瘤、急性淋巴母细胞白血病(例如，T细胞急性淋巴母细胞白血病或B细胞急性淋巴母细胞白血病)、弥漫性大细胞淋巴瘤或非霍奇金淋巴瘤。在一些实施方案中，所述癌症是乳腺癌(例如，ER阳性乳腺癌、ER阴性乳腺癌、三阳性乳腺癌或三阴性乳腺癌)。在一些实施方案中，所述癌症是骨癌(例如，尤文氏肉瘤)。在一些实施方案中，所述癌症是肾细胞癌(例如，小眼转录因子(MITF)家族易位性肾细胞癌(tRCC))。在一些实施方案中，所述癌症是转移性癌症(例如，癌症已扩散至肝脏)。转移性癌症可包括表现出迁移细胞的迁移和/或侵袭的细胞和/或包括表现出内皮募集和/或血管生成的细胞。在其他实施方案中，迁移性癌症是细胞迁移癌症。在其他实施方案中，细胞迁移癌症是非转移性细胞迁移癌症。转移性癌症可以是经由接种腹膜、胸膜、心包或蛛网膜下腔的表面而扩散的癌症。或者，转移性癌症可以是经由淋巴系统扩散的癌症，或者是血源性扩散的癌症。在一些实施方案中，降低BRG1和/或BRM的水平和/或活性的剂的有效量是有效抑制癌症向肝转移定殖的量。
在一些实施方案中，所述癌症在GNAQ中具有突变。在一些实施方案中，所述癌症在GNA11中具有突变。在一些实施方案中，所述癌症在PLCB4中具有突变。在一些实施方案中，所述癌症在CYSLTR2中具有突变。在一些实施方案中，所述癌症在BAP1中具有突变。在一些实施方案中，所述癌症在SF3B1中具有突变。在一些实施方案中，所述癌症在EIF1AX中具有突变。在一些实施方案中，所述癌症具有TFE3易位。在一些实施方案中，所述癌症具有TFEB易位。在一些实施方案中，所述癌症具有MITF易位。在一些实施方案中，所述癌症具有EZH2突变。在一些实施方案中，所述癌症具有SUZ12突变。在一些实施方案中，所述癌症具有EED突变。
在一些实施方案中，所述方法还包括向所述受试者施用抗癌疗法或使所述细胞与抗癌疗法接触，所述抗癌疗法例如化学治疗剂或细胞毒性剂、免疫疗法、外科手术、放射疗法、热疗法或光凝固法。在一些实施方案中，所述抗癌疗法是化学治疗剂或细胞毒性剂，例如抗代谢药、抗有丝分裂剂、抗肿瘤抗生素、天冬酰胺特异性酶、双膦酸盐、抗肿瘤药、烷化剂、DNA修复酶抑制剂、组蛋白脱乙酰酶抑制剂、皮质类固醇、去甲基化剂、免疫调节剂、janus相关激酶抑制剂、磷酸肌醇3-激酶抑制剂、蛋白酶体抑制剂或酪氨酸激酶抑制剂。
在一些实施方案中，本发明的化合物与用于治疗葡萄膜黑素瘤的另一种抗癌疗法如外科手术、MEK抑制剂和/或PKC抑制剂组合使用。例如，在一些实施方案中，所述方法还包括在施用本发明的化合物之前、之后或与施用本发明的化合物同时进行外科手术。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用本发明的化合物之前、之后或与施用本发明的化合物同时施用MEK抑制剂和/或PKC抑制剂。
在一些实施方案中，所述抗癌疗法和本发明的化合物在彼此的28天内并且各自以一起有效治疗受试者的量施用。
在一些实施方案中，所述受试者或癌症具有和/或已被鉴定为具有BRG1功能丧失性突变。在一些实施方案中，所述受试者或癌症具有和/或已被鉴定为具有BRM功能丧失性突变。
在一些实施方案中，所述癌症对一种或多种化学治疗剂或细胞毒性剂具有抗性(例如，所述癌症已诸如通过遗传标记物被确定为对化学治疗剂或细胞毒性剂具有抗性，或可能对化学治疗剂或细胞毒性剂具有抗性，如对化学治疗剂或细胞毒性剂没有反应的癌症)。在一些实施方案中，所述癌症对一种或多种化学治疗剂或细胞毒性剂没有反应。在一些实施方案中，所述癌症对达卡巴嗪、替莫唑胺、顺铂、曲奥舒凡、福莫司汀、IMCgp100、CTLA-4抑制剂(例如，伊匹单抗)、PD-1抑制剂(例如，纳武单抗或派姆单抗)、PD-L1抑制剂(例如，阿特珠单抗、阿维鲁单抗或德瓦鲁单抗)、有丝分裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制剂(例如，司美替尼、比美替尼或曲美替尼)和/或蛋白激酶C(PKC)抑制剂(例如，索曲妥林(sotrastaurin)或IDE196)具有抗性或没有反应。
在一些实施方案中，所述癌症对先前施用的用于治疗葡萄膜黑素瘤的治疗剂如MEK抑制剂或PKC抑制剂具有抗性或没有反应。例如，在一些实施方案中，所述癌症对有丝分裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制剂(例如，司美替尼、比美替尼或曲美替尼)和/或蛋白激酶C(PKC)抑制剂(例如，索曲妥林或IDE196)具有抗性或没有反应。
化学术语
本文所采用的术语仅仅出于描述特定实施方案的目的，并且不意图是限制性的。
对于任何以下化学定义，原子符号后的数字表示存在于特定化学部分中的所述元素的原子总数。应理解，根据需要，可存在其他原子，如H原子或如本文所述的取代基，以满足原子的化合价。例如，未取代的C2烷基具有式–CH2CH3。当与本文所定义的基团一起使用时，提及碳原子数包括乙缩醛和缩酮基团中的二价碳，但不包括酰基、酯、碳酸酯或氨基甲酸酯基团中的羰基碳。提及杂芳基中的氧、氮或硫原子的数目仅包括形成杂环的一部分的那些原子。
如本文所用的术语“酰基”表示通过如本文所定义的羰基连接至母体分子基团的H或烷基，并且由甲酰基(即，羧基醛基团)、乙酰基、三氟乙酰基、丙酰基和丁酰基举例说明。示例性未取代的酰基包括1至6个、1至11个或1至21个碳。
如本文所用的术语“烷基”是指具有1至20个碳原子(例如，1至16个碳原子、1至10个碳原子、1至6个碳原子或1-3个碳原子)的支链或直链单价饱和脂族烃基。
亚烷基是二价烷基。如本文单独或与其他基团组合使用的术语“烯基”是指具有碳-碳双键且具有2至20个碳原子(例如，2至16个碳原子、2至10个碳原子、2至6个碳原子或2个碳原子)的直链或支链烃残基。
如本文单独或与其他基团组合使用的术语“炔基”是指具有碳-碳三键且具有2至20个碳原子(例如，2至16个碳原子、2至10个碳原子、2至6个碳原子或2个碳原子)的直链或支链烃残基。
如本文所用，术语“氨基”表示–N(RN1)2，其中每个RN1独立地是H、OH、NO2、N(RN2)2、SO2ORN2、SO2RN2、SORN2、N-保护基团、烷基、烷氧基、芳基、芳基烷基、环烷基、酰基(例如，乙酰基、三氟乙酰基或本文所述的其他酰基)，其中这些列举的RN1基团中的每一个可任选地被取代；或两个RN1组合形成亚烷基或杂亚烷基，并且其中每个RN2独立地是H、烷基或芳基。本发明的氨基可以是未取代的氨基(即，–NH2)或取代的氨基(即，–N(RN1)2)。
如本文所用，术语“芳基”是指具有至少一个芳环的6至12个碳原子的芳族单或多碳环基团。此类基团的实例包括但不限于苯基、萘基、1,2,3,4-四氢萘基、1,2-二氢萘基、茚满基和1H-茚基。“亚芳基”是二价芳基。
如本文所用，术语“芳基烷基”表示被芳基取代的烷基。示例性未取代的芳基烷基是7至30个碳(例如，7至16个或7至20个碳，如C1-C6烷基C6-C10芳基、C1-C10烷基C6-C10芳基或C1-C20烷基C6-C10芳基)，如苄基和苯乙基。在一些实施方案中，烷基和芳基各自均可进一步被如本文针对相应基团所定义的1、2、3或4个取代基取代。
如本文所用，术语“叠氮基”表示–N3基团。
如本文所用，术语“桥联多环烷基”是指具有1至3个桥的5至20个碳的桥联多环基团。
如本文所用，术语“氰基”表示-CN基团。
如本文所用，术语“碳环基”是指其中环由碳原子形成的非芳族C3-C12单环、双环或三环结构。碳环基结构包括环烷基和不饱和碳环基基团。
如本文所用，术语“环烷基”是指具有3至10个、优选3至6个碳原子的饱和、非芳族且单价的单或多碳环基团。此术语进一步有诸如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、降冰片基和金刚烷基举例说明。
如本文所用，术语“卤代基”是指氟(氟代)、氯(氯代)、溴(溴代)或碘(碘代)基团。
如本文所用，术语“杂烷基”是指其中一个或多个组成碳原子已被氮、氧或硫取代的如本文所定义的烷基。在一些实施方案中，杂烷基可进一步被如本文针对烷基所描述的1、2、3或4个取代基取代。杂烷基的实例是“烷氧基”，如本文所用，烷氧基是指烷基-O-(例如，甲氧基和乙氧基)。杂亚烷基是二价杂烷基。如本文所用，术语“杂烯基”是指其中一个或多个组成碳原子已被氮、氧或硫取代的如本文所定义的烯基。在一些实施方案中，杂烯基可进一步被如本文针对烯基所描述的1、2、3或4个取代基取代。杂烯基的实例是“烯氧基”，如本文所用，烯氧基是指烯基-O-。杂亚烯基是二价杂烯基。如本文所用，术语“杂炔基”是指其中一个或多个组成碳原子已被氮、氧或硫取代的如本文所定义的炔基。在一些实施方案中，杂炔基可进一步被如本文针对炔基所描述的1、2、3或4个取代基取代。杂炔基的实例是“炔氧基”，如本文所用，炔氧基是指炔基-O-。杂亚炔基是二价杂炔基。
如本文所用，术语“杂芳基”是指具有至少一个芳环的5至12个原子的芳族单或多环基团，所述芳环含有1、2或3个选自氮氧和硫的环原子，其中剩余的环原子是碳。杂芳基的一个或两个环碳原子可被羰基取代。杂芳基的实例是吡啶基、吡唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、咪唑基、噁唑基和噻唑基。“杂亚芳基”是二价杂芳基。
如本文所用，术语“杂芳基烷基”表示被杂芳基取代的烷基。示例性未取代的杂芳基烷基是7至30个碳(例如，7至16个碳或7至20个碳，如C1-C6烷基C2-C9杂芳基、C1-C10烷基C2-C9杂芳基或C1-C20烷基C2-C9杂芳基)。在一些实施方案中，烷基和杂芳基各自均可进一步被如本文针对相应基团所定义的1、2、3或4个取代基取代。
如本文所用，术语“杂环基”是指具有至少一个非芳环的具有3至12个原子的单或多环基团，所述环含有1、2、3或4个选自N、O或S的环原子，并且没有包含任何N、O或S原子的芳环。杂环基的实例包括但不限于吗啉基、硫代吗啉基、呋喃基、哌嗪基、哌啶基、吡喃基、吡咯烷基、四氢吡喃基、四氢呋喃基和1,3-二噁烷基。“亚杂环基”是二价杂环基。
如本文所用，术语“杂环基烷基”表示被杂环基取代的烷基。示例性未取代的杂环基烷基是7至30个碳(例如，7至16个或7至20个碳，如C1-C6烷基C2-C9杂环基、C1-C10烷基C2-C9杂环基或C1-C20烷基C2-C9杂环基)。在一些实施方案中，烷基和杂环基各自均可进一步被如本文针对相应基团所定义的1、2、3或4个取代基取代。
如本文所用，术语“羟烷基”表示被-OH基团取代的烷基。
如本文所用，术语“羟基”表示-OH基团。
如本文所用，术语“N-保护基团”表示在合成过程中意图保护氨基免于发生不希望的反应的那些基团。常用的N-保护基团在Greene,“Protective Groups in OrganicSynthesis,”第3版(John Wiley&Sons,NewYork,1999)中公开。N-保护基团包括但不限于酰基、芳酰基或氨基甲酰基，如甲酰基、乙酰基、丙酰基、新戊酰基、叔丁基乙酰基、2-氯乙酰基、2-溴乙酰基、三氟乙酰基、三氯乙酰基、邻苯二甲酰基、邻硝基苯氧基乙酰基、α-氯丁酰基、苯甲酰基、4-氯苯甲酰基、4-溴苯甲酰基、4-硝基苯甲酰基和手性助剂，如受保护的或未受保护的D、L或D、L-氨基酸，如丙氨酸、亮氨酸和苯丙氨酸；含磺酰基的基团，如苯磺酰基和对甲苯磺酰基；氨基甲酸酯形成基团，如苄氧基羰基、对氯苄氧基羰基、对甲氧基苄氧基羰基、对硝基苄氧基羰基、2-硝基苄氧基羰基、对溴苄氧基羰基、3,4-二甲氧基苄氧基羰基、3,5-二甲氧基苄氧基羰基、2,4-20二甲氧基苄氧基羰基、4-甲氧基苄氧基羰基、2-硝基-4,5-二甲氧基苄氧基羰基、3,4,5-三甲氧基苄氧基羰基、1-(对联苯基甲酰基)-1-甲基乙氧基羰基、α,α-二甲基-3,5-二甲氧基苄氧基羰基、二苯甲基氧基羰基、叔丁氧基羰基、二异丙基甲氧基羰基、异丙氧基羰基、乙氧基羰基、甲氧基羰基、烯丙氧基羰基、2,2,2,-三氯乙氧基羰基、苯氧基羰基、4-硝基苯氧基羰基、芴基-9-甲氧基羰基、环戊氧基羰基、金刚烷基氧基羰基、环己基氧基羰基和苯硫基羰基；芳基烷基，如苄基、三苯基甲基和苄氧基甲基；以及甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基。优选的N-保护基团是alloc、甲酰基、乙酰基、苯甲酰基、新戊酰基、叔丁基乙酰基、丙氨酰基、苯磺酰基、苄基、叔丁氧基羰基(Boc)和苄氧基羰基(Cbz)。
如本文所用，术语“硝基”表示–NO2基团。
如本文所用，术语“氧代”表示＝O基团。
如本文所用，术语“巯基”表示-SH基团。
烷基、烯基、炔基、杂烷基、杂烯基、杂炔基、碳环基(例如，环烷基)、芳基、杂芳基和杂环基可被取代或未被取代。除非另有说明，否则当被取代时，通常将存在1至4个取代基。取代基包括，例如：烷基(例如，未取代的和取代的，其中取代基包括本文所述的任何基团，例如芳基、卤代基、羟基)、芳基(例如，取代的和未取代的苯基)、碳环基(例如，取代的和未取代的环烷基)、卤代基(例如，氟)、羟基、杂烷基(例如，取代的和未取代的甲氧基、乙氧基或硫代烷氧基)、杂芳基、杂环基、氨基(例如，NH2或单或二烷基氨基)、叠氮基、氰基、硝基、氧代、磺酰基或巯基。芳基、碳环基(例如，环烷基)、杂芳基和杂环基也可被烷基(未取代的和取代的，如芳基烷基(例如，取代的和未取代的苄基))取代。
本发明的化合物可具有一个或多个不对称碳原子，并且可以光学纯的对映异构体、对映异构体的混合物例如像外消旋体、光学纯的非对映异构体、非对映异构体的混合物、非对映异构外消旋体或非对映异构外消旋体的混合物形式存在。光学活性形式可例如通过拆分外消旋体、通过不对称合成或不对称色谱法(使用手性吸附剂或洗脱剂的色谱法)获得。即，某些公开的化合物可以各种立体异构体形式存在。立体异构体是仅在其空间排列上不同的化合物。对映异构体是成对的立体异构体，它们的镜像不可重叠，最常见的原因是它们含有不对称取代的碳原子，所述碳原子充当手性中心。“对映异构体”是指为彼此的镜像并且不可重叠的一对分子中的一者。非对映异构体是与镜像无关的立体异构体，最常见的原因是它们含有两个或更多个不对称取代的碳原子，并且表示一个或多个手性碳原子周围的取代基构型。化合物的对映异构体可例如通过使用一种或多种熟知的技术和方法，例如像手性色谱法和基于其的分离方法，从外消旋体分离对映异构体来制备。本领域技术人员可容易地确定从外消旋混合物中分离本文所述的化合物的对映异构体的适当技术和/或方法。“外消旋体”或“外消旋混合物”是指含有两种对映异构体的化合物，其中此类混合物未表现出光学活性；即，它们不会旋转偏振光的平面。“几何异构体”是指在与碳-碳双键、环烷基环或桥联双环系统有关的取代基原子的取向方面不同的异构体。碳-碳双键每一侧的原子(除H外)可呈E(取代基在碳-碳双键的相对侧)或Z(取代基在同一侧)构型。“R”、“S”、“S*”、“R*”、“E”、“Z”、“顺式”和“反式”表示相对于核心分子的构型。所公开的化合物中的某些可以阻转异构体形式存在。阻转异构体是由于围绕单键的旋转受阻而产生的立体异构体，其中旋转的空间应变屏障足够高以允许构象异构体的分离。本发明的化合物可通过异构体特异性合成而制备为单独的异构体或由异构体混合物拆分。常规拆分技术包括使用光学活性酸形成异构体对的每种异构体的游离碱的盐(随后进行分步结晶和游离碱的再生)、使用光学活性胺形成异构体对的每种异构体的酸形式的盐(随后进行分步结晶和游离酸的再生)、使用光学纯酸、胺或醇形成异构体对的每种异构体的酯或酰胺(随后进行色谱分离和除去手性助剂)，或使用各种众所周知的色谱方法解析起始材料或最终产物的异构体混合物。当通过结构命名或描绘所公开化合物的立体化学时，所述命名或描绘的立体异构体相对于其他立体异构体是至少60重量％、70重量％、80重量％、90重量％、99重量％或99.9重量％。当通过结构命名或描绘单一对映异构体时，所描绘或命名的对映异构体是至少60重量％、70重量％、80重量％、90重量％、99重量％或99.9重量％光学纯的。当通过结构命名或描绘单一非对映异构体时，所描绘或命名的非对映异构体是至少60重量％、70重量％、80重量％、90重量％、99重量％或99.9％重量纯的。光学纯度百分比是对映体的重量相对于对映体的重量加上其光学异构体的重量的比率。按重量计的非对映异构体纯度是一种非对映异构体的重量相对于所有非对映异构体的重量的比率。当通过结构命名或描绘所公开化合物的立体化学时，所述命名或描绘的立体异构体相对于其他立体异构体是按摩尔分数计至少60％、70％、80％、90％、99％或99.9％纯的。当通过结构命名或描绘单一对映异构体时，所描绘或命名的对映异构体是按摩尔分数计至少60％、70％、80％、90％、99％或99.9％纯的。当通过结构命名或描绘单一非对映异构体时，所描绘或命名的非对映异构体是按摩尔分数计至少60％、70％、80％、90％、99％或99.9％纯的。按摩尔分数计的纯度百分比是对映体的摩尔数相对于对映体的摩尔数加上其光学异构体的摩尔数的比率。类似地，按摩尔分数计的纯度百分比是非对映异构体的摩尔数相对于非对映异构体的摩尔数加上其异构体的摩尔数的比率。当通过结构命名或描绘所公开的化合物而未指示立体化学并且所述化合物具有至少一个手性中心时，应理解所述名称或结构涵盖所述化合物的不含相应光学异构体的任一对映异构体、所述化合物的外消旋体混合物或相对于其相应的光学异构体富含一种对映异构体的混合物。当所公开的化合物通过结构命名或描绘而未指示立体化学并且具有两个或更多个手性中心时，应理解，所述名称或结构涵盖不含其他非对映异构体的非对映异构体、不含其他非对映异构体对的许多非对映异构体、非对映异构体的混合物、非对映异构体对的混合物、其中一种非对映异构体相对于其他一种或多种非对映异构体富集的非对映异构体的混合物或其中一种或多种非对映异构体相对于其他非对映异构体富集的非对映异构体的混合物。本发明包括所有这些形式。
本公开的化合物还包括中间体或终化合物中存在的原子的所有同位素。“同位素”是指具有相同原子序数但不同质量数的原子，这是由原子核中不同的中子数量导致的。例如，氢的同位素包括氚和氘。
除非另有说明，否则本文描述的结构也意味着包括差异仅在于存在一个或多个同位素富集的原子的化合物。可以掺入本发明化合物的示例性同位素包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素，诸如2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、32P、33P、35S、18F、36Cl、123I和125I。同位素标记的化合物(例如，用3H和14C标记的那些)可用于化合物或底物组织分布测定。氚化(即，3H)和碳-14(即，14C)同位素由于其易于制备和可检测性而有用。另外，用更重的同位素诸如氘(即，2H)取代可以提供因更高的代谢稳定性(例如，延长的体内半衰期或降低的剂量要求)而导致的某些治疗有利方面。在一些实施方案中，一个或多个氢原子被2H或3H取代，或者一个或多个碳原子被富含13C或14C的碳取代。正电子发射同位素诸如15O、13N、11C和18F可用于正电子发射断层摄影术(PET)研究，以检查底物受体的占用率。同位素标记化合物的制备是本领域技术人员已知的。例如，同位素标记的化合物通常可以通过遵循类似于本文所述的针对本发明化合物所公开的程序，通过用同位素标记的试剂代取代非同位素标记的试剂来制备。
除非另外定义，否则本文所用的所有技术和科学术语均具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的相同的含义。本文描述了用于在本公开中使用的方法和材料；也可使用本领域中已知的其他合适的方法和材料。所述材料、方法以及实施例仅是说明性的并且不意图是限制性的。本文提及的所有公布、专利申请、专利、序列、数据库条目和其他参考文献均以引用的方式整体并入。在冲突的情况下，以包括定义在内的本说明书为准。
定义
在本申请中，除非上下文另有明确说明，否则(i)术语“一个/种”可被理解为是指“至少一个/种”；(ii)术语“或”可被理解为是指“和/或”；并且(iii)术语“包含(comprising)”和“包括(including)”可被理解为涵盖逐项列出的组分或步骤，无论是它们本身呈现还是与一直或多种其他组分或步骤一起呈现。
如本文所用，术语“约”和“大约”是指在所描述的值以上或以下10％以内的值。例如，术语“约5nM”表示4.5至5.5nM的范围。
如本文所用，术语“施用”是指将组合物(例如，化合物或包含如本文所述的化合物的制剂)施用至受试者或系统。可通过任何适当的途径向动物受试者(例如，人)施用。例如，在一些实施方案中，施用可以是支气管(包括通过支气管滴注)、经颊、肠内、真皮内、动脉内、皮内、胃内、髓内、肌内、鼻内、腹膜内、鞘内、肿瘤内、静脉内、心室内、粘膜、鼻、口服、直肠、皮下、舌下、局部、气管(包括通过气管内滴注)、经皮、阴道和玻璃体。
如本文所用，术语“BAF复合物”是指人细胞中的BRG1或HBRM相关因子复合物。
如本文所用，术语“BAF复合物相关病症”是指由BAF复合物的活性水平引起或影响的病症。
如本文所用，术语“BRG1功能丧失性突变”是指BRG1中导致蛋白质活性降低的突变(例如，BRG1活性降低至少1％，例如BRG1活性降低2％、5％、10％、25％、50％或100％)。示例性BRG1功能丧失性突变包括但不限于纯合的BRG1突变和BRG1的C端处的缺失。
如本文所用，术语“BRG1功能丧失性病症”是指表现出BRG1活性降低(例如，BRG1活性降低至少1％，例如BRG1活性降低2％、5％、10％、25％、50％或100％)。
术语“癌症”是指由恶性赘生性细胞的增殖所引起的疾患，如肿瘤、赘生物、癌、肉瘤、白血病和淋巴瘤。
如本文所用，“组合疗法”或“组合施用”是指将两种(或多种)不同的剂或治疗作为针对特定疾病或疾患的限定治疗方案的一部分施用至受试者。治疗方案定义了每种剂的剂量和施用周期，以使单独剂对受试者的作用重叠。在一些实施方案中，两种或更多种剂的递送是同时或并行的，并且所述剂可共同配制。在一些实施方案中，两种或更多种剂不是共同配制的，并且作为处方方案的一部分以顺序方式施用。在一些实施方案中，两种或更多种剂或治疗的组合施用使得与病症相关的症状或其他参数的减少大于在单独递送的一种剂或治疗或在不存在所述剂的情况下观察到的减少。两种治疗的作用可部分累加、完全累加或大于累加(例如，协同作用)。顺序或实质上同时施用每种治疗剂可通过包括但不限于经口途径、静脉内途径、肌肉内途径以及通过粘膜组织直接吸收的任何适当的途径来实现。可通过相同途径或通过不同途径施用治疗剂。例如，可通过静脉内注射施用组合的第一治疗剂，同时可口服施用组合的第二治疗剂。
“确定蛋白质或RNA的水平”是指通过本领域已知的方法直接或间接地检测蛋白质或RNA。“直接确定”是指执行过程(例如，对样品进行测定或测试，或如本文所定义的术语“分析样品”)以获得物理实体或值。“间接确定”是指从一方或来源(例如，直接获取物理实体或值的第三方实验室)接收所述物理实体或值。测量蛋白质水平的方法通常包括但不限于蛋白质印迹、免疫印迹、酶联免疫吸附测定(ELISA)、放射免疫测定(RIA)、免疫沉淀、免疫荧光、表面等离子体共振、化学发光、荧光极化、磷光、免疫组织化学分析、基质辅助激光解吸/电离飞行时间(MALDI-TOF)质谱法、液相色谱(LC)-质谱法、微细胞术、显微、荧光活化细胞分选(FACS)和流式细胞术，以及基于蛋白质性质的测定，包括但不限于酶活性或与其他蛋白质配偶体的相互作用。测量RNA水平的方法是本领域已知的，包括但不限于定量聚合酶链反应(qPCR)和RNA印迹分析。
蛋白质或RNA的水平“降低”或“水平增加”是指与参考相比，蛋白质或RNA水平分别降低或增加(例如降低或增加约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％、约150％、约200％、约300％、约400％、约500％或更多；与参考相比，降低或增加超过约10％、约15％、约20％、约50％、约75％、约100％或约200％；降低或增加小于约0.01倍、约0.02倍、约0.1倍、约0.3倍、约0.5倍、约0.8倍或更少；或增加超过约1.2倍、约1.4倍、约1.5倍、约1.8倍、约2.0倍、约3.0倍、约3.5倍、约4.5倍、约5.0倍、约10倍、约15倍、约20倍、约30倍、约40倍、约50倍、约100倍、约1000倍或更多)。蛋白质的水平可以质量/体积(例如，g/dL、mg/mL、μg/mL、ng/mL)或相对于样品中总蛋白质的百分比表示。
“降低BAF复合物的活性”是指降低与BAF复合物有关的活性的水平或相关的下游效应。降低BAF复合物的活性的非限制性实例是Sox2活化。BAF复合物的活性水平可使用本领域已知的任何方法来测量，例如，Kadoch等人Cell,2013,153,71-85中描述的方法，所述文献的方法以引用的方式并入本文。
如本文所用，术语“抑制BRM”是指阻断或降低蛋白质的ATP酶催化结合结构域或布罗莫结构域的水平或活性。BRM抑制可使用本领域已知的方法来确定，例如，BRMATP酶测定、Nano DSF测定或BRM荧光素酶细胞测定。
如本文所用，术语“LXS196”，也称为IDE196，是指具有以下结构的PKC抑制剂：
Figure BDA0003284159120000831
或其药学上可接受的盐。
如本文所用，术语“药物组合物”表示含有与药学上可接受的赋形剂一起配制并适合施用于哺乳动物例如人的本文所述化合物的组合物。通常，作为用于治疗哺乳动物疾病的治疗方案的一部分，在政府监管机构的批准下制造或销售药物组合物。可将药物组合物配制例如用于以单位剂型(例如片剂、胶囊、囊片、软胶囊或糖浆剂)口服施用；用于局部施用(例如，呈乳膏、凝胶、洗剂或软膏形式)；用于静脉内施用(例如，呈无微粒栓的无菌溶液形式并在适合静脉内使用的溶剂系统中)；或以任何其他药学上可接受的制剂。
如本文所用的“药学上可接受的赋形剂”是指除了本文描述的化合物以外的任何成分(例如，能够悬浮或溶解活性化合物的媒介物)并且在患者中具有大致上无毒和非炎症性的特性。赋形剂可包括例如：抗粘剂、抗氧化剂、粘合剂、包衣、压缩助剂、崩解剂、染料(颜料)、软化剂、乳化剂、填充剂(稀释剂)、成膜剂或包衣、调味剂、香料、助流剂(流动增强剂)、润滑剂、防腐剂、印刷油墨、吸附剂、悬浮剂或分散剂、甜味剂以及水合作用的水。示例性赋形剂包括但不限于：丁羟甲苯(BHT)、碳酸钙、磷酸钙(二碱的)、硬脂酸钙、交联羧甲纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、柠檬酸、交联聚维酮、半胱氨酸、乙基纤维素、明胶、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乳糖、硬脂酸镁、麦芽糖醇、甘露醇、甲硫氨酸、甲基纤维素、对羟基苯甲酸甲酯、微晶纤维素、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚维酮、预胶凝淀粉、对羟基苯甲酸丙酯、棕榈酸视黄酯、虫胶、二氧化硅、羧甲基纤维素钠、柠檬酸钠、羟基乙酸淀粉钠、山梨醇、淀粉(玉米)、硬脂酸、蔗糖、滑石、二氧化钛、维生素A、维生素E、维生素C以及木糖醇。
如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指化合物的任何药学上可接受的盐，例如式I的任何化合物。本文所述任何化合物的药学上可接受的盐可包括在合理医学判断范围内适合用于与人和动物的组织接触而没有过度的毒性、激性、过敏性反应并且与合理的利益/风险比相称的那些盐。药学上可接受的盐是本领域众所周知的。例如，药学上可接受的盐描述于：Berge等人,J.Pharmaceutical Sciences 66:1-19,1977和PharmaceuticalSalts:Properties,Selection,and Use,(P.H.Stahl和C.G.Wermuth编辑),Wiley-VCH,2008中。盐可在本文所述化合物的最终分离和纯化过程中原位制备，或通过使游离碱基团与合适的有机酸反应而单独地制备。
本发明的化合物可具有可电离的基团，以便能够制备为药学上可接受的盐。这些盐可以是涉及无机或有机酸的酸加成盐，或者在酸性形式的本发明化合物的情况下，所述盐可由由无机或有机碱制备。通常，将化合物制备为药学上可接受的盐或用作制备为药学上可接受的酸或碱的加成产物的药学上可接受的盐。合适的药学上可接受的酸和碱以及用于制备适当的盐的方法是本领域众所周知的。盐可由药学上可接受的无毒酸和碱，包括无机和有机酸和碱制备。代表性酸加成盐包括乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐、十一酸盐和戊酸盐。代表性碱金属盐或碱土金属盐包括钠、锂、钾、钙和镁，以及无毒的铵、季铵和胺阳离子，包括但不限于铵、四甲铵、四乙铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺和乙胺。
“参考”是指用于比较蛋白质或RNA水平的任何有用的参考。参考可以是用于比较目的的任何样品、标准品、标准曲线或水平。参考可以是正常参考样品或参考标准或水平。“参考样品”可以是例如对照，例如预先确定的阴性对照值，如“正常对照”或取自同一受试者的先前样品；来自正常健康受试者的样品，如正常细胞或正常组织；来自未患疾病的受试者的样品(例如，细胞或组织)；来自被诊断患有疾病、但尚未用本发明化合物治疗的受试者的样品；来自已通过本发明化合物治疗的受试者的样品；或已知正常浓度下的纯化蛋白或RNA(例如，本文所述的任一种)的样品。“参考标准或水平”是指源自参考样品的值或数字。“正常对照值”是指示非疾病状态的预先确定的值，例如，在健康对照受试者中预期的值。通常，正常对照值被表示为范围(“介于X与Y之间”)、高阈值(“不高于X”)或低阈值(“不低于X”)。对于特定生物标记物，具有在正常对照值内的测量值的受试者通常被称为对于所述生物标记物“在正常限值内”。正常参考标准或水平可以是从未患疾病或病症(例如，癌症)的正常受试者；已经用本发明化合物治疗的受试者得到的值或数字。在优选的实施方案中，参考样品、标准或水平通过以下标准中的至少一者与样品受试者样品匹配：年龄、体重、性别、疾病阶段和总体健康。在正常参考范围内的纯化的蛋白质或RNA(例如，本文所述的任一种)的水平的标准曲线也可用作参考。
如本文所用，术语“受试者”是指可例如出于实验、诊断、预防和/或治疗目的向其施用根据本发明的组合物的任何生物体。典型的受试者包括任何动物(例如，哺乳动物，如小鼠、大鼠、兔、非人灵长类动物和人)。受试者可寻求或需要治疗、要求治疗、正在接受治疗、将接受治疗、或者是针对特定疾病或疾患在受过训练的专业人员护理下的人或动物。
如本文所用，术语“治疗(treat)”、“治疗(treated)”或“治疗(treating)”是指治疗性治疗或目的是减缓(减轻)不需要的生理状疾患、病症或疾病或获得有益或所需的临床结果的任何措施。有益或所需的临床结果包括但不限于症状的减轻；疾患、病症或疾病的程度减小；疾患、病症或疾病的状态稳定(即，没有恶化)；疾患、病症或疾病进展的发作延迟或减缓；疾患、病症或疾病状态的改善或缓解(无论是部分还是全部)；至少一个可测量的物理参数的改善，不一定是患者可辨别的；或疾患、病症或疾病的增强或改善。治疗包括在没有过度水平的副作用的情况下引发临床上显著的应答。治疗还包括与不接受治疗情况下的预期存活期相比存活期延长。本发明化合物还可用于例如在处于发展病症的风险增加的受试者中“预防性地”治疗或“预防”所述病症。
如本文所用，术语“变体”和“衍生物”可互换使用，并且是指本文所述的化合物、肽、蛋白质或其他物质的天然存在的、合成的和半合成的类似物。本文所述的化合物、肽、蛋白质或其他物质的变体或衍生物可保留或改善原始材料的生物活性。
本发明的一个或多个实施方案的细节在以下说明中给出。本发明的其他特征、目的和优点将是从说明书和权利要求书清楚的。
附图说明
图1是说明BRG1/BRM抑制剂(化合物A)对几种癌细胞系的细胞增殖的抑制的图。
图2A是说明BRG1/BRM抑制剂(化合物A)、MEK抑制剂(司美替尼)和PKC抑制剂(LXS196)对葡萄膜黑素瘤细胞系92-1的细胞增殖的抑制的图。
图2B是说明BRG1/BRM抑制剂(化合物A)、MEK抑制剂(司美替尼)和PKC抑制剂(LXS196)对葡萄膜黑素瘤细胞系MP41的细胞增殖的抑制的图。
图3是说明BRG1/BRM抑制剂(化合物67)对几种癌细胞系的细胞增殖的抑制的图。
图4是说明由用BRG1/BRM抑制剂(化合物67)治疗的癌细胞系的剂量-反应曲线计算的曲线下面积(AUC)的图。
图5是说明BRG1/BRM抑制剂(化合物67)对葡萄膜黑素瘤和非小细胞肺癌细胞系的细胞增殖的抑制的图。
图6A是说明BRG1/BRM抑制剂(化合物67)、MEK抑制剂(司美替尼)和PKC抑制剂(LXS196)对葡萄膜黑素瘤细胞系92-1的细胞增殖的抑制的图。
图6B是说明BRG1/BRM抑制剂(化合物67)、MEK抑制剂(司美替尼)和PKC抑制剂(LXS196)对葡萄膜黑素瘤细胞系MP41的细胞增殖的抑制的图。
图7A是说明PKC抑制剂(LXS196)对亲代和PKC抑制剂难治性葡萄膜黑素瘤细胞系的细胞增殖的抑制的图。
图7B是说明BRG1/BRM抑制剂(化合物67)对亲代和PKC抑制剂难治性葡萄膜黑素瘤细胞系的细胞增殖的抑制的图。
图8A是说明BRG1/BRM抑制剂(化合物320)对移植有葡萄膜黑素瘤细胞系的小鼠的肿瘤生长的抑制的图。
图8B是移植有葡萄膜黑素瘤细胞系并给予BRG1/BRM抑制剂(化合物320)的小鼠的肿瘤尺寸的示意图。
图8C是说明移植有葡萄膜黑素瘤细胞系并给予BRG1/BRM抑制剂(化合物320)的小鼠的体重变化的图。
具体实施方式
本公开的特征是可用于抑制BRG1和/或BRM的化合物。这些化合物可用于调节BAF复合物的活性，例如，用于治疗BAF相关病症，如癌症。本文所述的示例性化合物包括具有根据式A的结构的化合物：
Figure BDA0003284159120000881
其中R1是H、任选取代的C1-C6酰基、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C8环烷基、任选取代的C1-C6杂烷基、任选取代的C2-C9杂环基或–SO2R6；
Figure BDA0003284159120000882
是5元或6元杂亚芳基；R2、R3和R5中的每一者独立地是H或任选取代的C1-C6烷基；R4是H、任选取代的C1-C6烷基，或任选取代的C1-C6杂烷基；R6是任选取代的C1-C6烷基或–NR7R8；R7和R8独立地是任选取代的C1-C6烷基；Het是任选取代的5元或6元杂亚芳基；A是任选取代的C6-C10亚芳基、任选取代的C2-C9亚杂环基，或任选取代的C2-C9杂芳基；L不存在、是-O-、任选取代的C1-C6亚烷基、任选取代的C1-C6亚烯基、任选取代的C1-C6杂亚烷基、任选取代的C2-C9杂环基C1-C6亚烷基，或任选取代的C2-C9杂芳基C1-C6亚烷基；并且B是H、卤素、氰基、任选取代的C6-C10芳基、任选取代的C3-C10环烷基、任选取代的C2-C9杂环基、或任选取代的C2-C9杂芳基，或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，所述化合物或其药学上可接受的盐具有式I的结构：
Figure BDA0003284159120000891
其中X、Y和Z中的每一者独立地是N或CH；R1是H、任选取代的C1-C6酰基、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C1-C6杂烷基、任选取代的C2-C9杂环基或–SO2R6；R2、R3和R5中的每一者独立地是H或任选取代的C1-C6烷基；R4是H、任选取代的C1-C6烷基或任选取代的C1-C6杂烷基；R6是任选取代的C1-C6烷基或–NR7R8；R7和R8中的每一者独立地是任选取代的C1-C6烷基；Het是5元或6元杂亚芳基；Het是5元或6元杂亚芳基；A是任选取代的C6-C10亚芳基、任选取代的C2-C9亚杂环基，或任选取代的C2-C9杂亚芳基；L不存在、是-O-、任选取代的C1-C6亚烷基、任选取代的C1-C6亚烯基、任选取代的C1-C6杂亚烷基、任选取代的C2-C9杂环基C1-C6亚烷基，或任选取代的C2-C9杂芳基C1-C6亚烷基；并且B是氢、卤素、氰基、任选取代的C6-C10芳基、任选取代的C3-C10环烷基、任选取代的C2-C9杂环基、或任选取代的C2-C9杂芳基，或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，所述化合物或其药学上可接受的盐具有式II的结构：
Figure BDA0003284159120000892
其中X’是O或S；Y’是N或CH；Z’是N或CH；R1是H、任选取代的C1-C6酰基、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C1-C6杂烷基、任选取代的C3-C8环烷基、任选取代的C2-C9杂环基或–SO2R6；R2、R3和R5中的每一者独立地是H或任选取代的C1-C6烷基；R4是H、任选取代的C1-C6烷基，或任选取代的C1-C6杂烷基；R6是任选取代的C1-C6烷基或–NR7R8；R7和R8中的每一者独立地是任选取代的C1-C6烷基；Het是5元或6元杂亚芳基；A是任选取代的C6-C10亚芳基、任选取代的C2-C9亚杂环基，或任选取代的C2-C9杂亚芳基；L不存在、是-O-、任选取代的C1-C6亚烷基、任选取代的C1-C6亚烯基、任选取代的C1-C6杂亚烷基、任选取代的C2-C9杂环基C1-C6亚烷基，或任选取代的C2-C9杂芳基C1-C6亚烷基；并且B是H、卤素、氰基、任选取代的C6-C10芳基、任选取代的C3-C10环烷基、任选取代的C2-C9杂环基、或任选取代的C2-C9杂芳基，或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，所述化合物是表1中化合物1-827中的任一种。在一些实施方案中，所述化合物或其药学上可接受的盐具有表1中化合物1-421中的任一种的结构。在一些实施方案中，所述化合物或其药学上可接受的盐具有表1中化合物1-156中的任一种的结构。在一些实施方案中，所述化合物或其药学上可接受的盐具有表1中化合物157-421中的任一种的结构。在一些实施方案中，所述化合物是表1中化合物422-827中的任一种。
在一些实施方案中，所述化合物是表1中化合物1-776中的任一种。在一些实施方案中，所述化合物是表1中化合物777-819中的任一种。在一些实施方案中，所述化合物是表1中化合物820-827中的任一种。
本文描述了其他实施方案以及用于合成这些化合物的产生的示例性方法。
药物用途
本文描述的化合物可用于本发明的方法，并且尽管不受理论的束缚，但据信发挥其调节BAF复合物的水平、状态和/或活性的能力，即通过抑制哺乳动物的BAF复合物中的BRG1和/或BRM蛋白的活性。BAF复合物相关病症包括但不限于BRG1功能丧失性突变相关的病症。
本发明的一个方面涉及治疗有需要的受试者的与BRG1功能丧失性突变相关的病症的方法，所述病症如癌症(例如，非小细胞肺癌、结肠直肠癌、膀胱癌、原发不明癌症、神经胶质瘤、乳腺癌、黑素瘤、非黑素瘤皮肤癌、子宫内膜癌或阴茎癌)。在一些实施方案中，以有效产生以下中的一者或多者(例如，两者或更多者、三者或更多者、四者或更多者)的量和时间施用化合物：(a)减小肿瘤大小，(b)降低肿瘤生长的速率，(c)肿瘤细胞死亡增加，(d)肿瘤进展减少，(e)转移数量减少，(f)转移率降低，(g)肿瘤复发减少，(h)受试者存活期增加，(i)受试者的无进展存活期增加。
治疗癌症可使得肿瘤的大小或体积减小。例如，在治疗之后，相对于治疗前的大小，肿瘤大小减小5％或更大(例如，10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或更大)。肿瘤大小可通过任何可重复的测量手段来测量。例如，可将肿瘤的大小测量为肿瘤的直径。
治疗癌症可进一步使得肿瘤数量减少。例如，在治疗之后，相对于治疗前的数量，肿瘤数量减少5％或更多(例如，10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或更多)。可通过任何可重复的测量手段来测量肿瘤的数量，例如，可通过对肉眼或在指定放大倍数(例如，2x、3x、4x、5x、10x或50x)下可见的肿瘤进行计数来测量肿瘤的数量。
治疗癌症可使得远离原生肿瘤位点的其他组织或器官的转移性结节的数量减少。例如，在治疗后，相对于治疗前的数量，转移性结节的数量减少5％或更多(例如，10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或更多)。转移性结节的数量可通过任何可重复的测量手段进行测量。例如，可通过对肉眼或在指定的放大倍数(例如，2x、10x或50x)下可见的转移性结节进行计数来测量转移性结节的数量。
与未治疗的受试者群体相比，治疗癌症可使得根据本发明治疗的受试者群体的平均存活时间增加。例如，平均存活时间增加超过30天(超过60天、90天或120天)。群体的平均存活时间的增加可通过任何可重复的手段来测量。群体的平均存活时间的增加可例如通过在开始用本发明的化合物治疗之后计算群体的平均存活长度来测量。群体的平均存活时间的增加也可例如通过在用本发明的药学上可接受的盐治疗第一轮完成后计算群体的平均存活长度来测量。
与未治疗的群体相比，治疗癌症还可使得接受治疗的受试者群体的死亡率降低。例如，死亡率降低超过2％(例如，超过5％、10％或25％)。可通过任何可重复的手段来测量接受治疗的受试者群体的死亡率的降低，例如，通过在开始用本发明的药学上可接受的盐治疗后计算每单位时间内群体的疾病相关死亡的平均数量来测量。群体的死亡率的降低也可例如通过在用本发明的药学上可接受的盐治疗第一轮完成后计算每单位时间内群体的疾病相关死亡的平均数量来测量。
可通过本发明治疗的示例性癌症包括但不限于，非小细胞肺癌、小细胞肺癌、结肠直肠癌、膀胱癌、神经胶质瘤、乳腺癌、黑素瘤、非黑素瘤皮肤癌、子宫内膜癌、食道胃癌、胰腺癌、肝胆癌、软组织肉瘤、卵巢癌、头颈癌、肾细胞癌、骨癌、非霍奇金淋巴瘤、前列腺癌、胚胎肿瘤、生殖细胞瘤、宫颈癌、甲状腺癌、唾液腺癌、胃肠神经内分泌肿瘤、子宫肉瘤、胃肠道间质瘤、CNS癌症、胸腺肿瘤、肾上腺皮质癌、阑尾癌、小肠癌和阴茎癌。
组合制剂及其用途
本发明的化合物可与一种或多种治疗剂组合。特别地，所述治疗剂可以是治疗或预防性地治疗本文所述的任何癌症的治疗剂。
组合疗法
本发明的化合物可单独或与另外的治疗剂(例如，治疗癌症或与癌症相关的症状的其他剂)组合或与其他类型的治疗组合使用以治疗癌症。在组合治疗中，一种或多种治疗性化合物的剂量可从单独施用时的标准剂量减少。例如，剂量可根据药物组合和排列经验性地确定，或者可通过等效线图解分析推导(例如，Black等人,Neurology 65:S3-S6,2005)。在这种情况下，在组合时化合物的剂量应提供治疗作用。
在一些实施方案中，第二治疗剂是化学治疗剂(例如，可用于治疗癌症的细胞毒性剂或其他化合物)。这些包括烷化剂、抗代谢药、叶酸类似物、嘧啶类似物、嘌呤类似物和相关的抑制剂、长春花生物碱、表鬼臼毒素、抗生素、L-天冬酰胺酶、拓扑异构酶抑制剂、干扰素、铂配位络合物、蒽二酮取代的尿素、甲基肼衍生物、肾上腺皮质抑制剂、肾上腺皮质类固醇、孕激素、雌激素、抗雌激素、雄激素、抗雄激素以及促性腺激素释放激素类似物。还包括5-氟尿嘧啶(5-FU)、亚叶酸(LV)、伊立替康、奥沙利铂、卡培他滨、紫杉醇和多西他赛。化学治疗剂的非限制性实例包括烷化剂，如噻替派和环磷酰胺；烷基磺酸酯，如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮杂环丙烷，如苯佐多巴(benzodopa)、卡波醌、米特多巴和尤利多巴；乙烯亚胺和甲基蜜胺，包括六甲蜜胺、三亚乙基蜜胺、三亚乙基磷酰胺、三亚乙基硫代磷酰胺和三羟甲基蜜胺；多聚乙酰(尤其是布拉他辛和布拉他辛酮)；喜树碱(包括合成类似物托泊替康)；苔藓抑素；海绵他汀；CC-1065(包括其阿多来新、卡折来新和比折来新合成类似物)；念珠藻素(特别是念珠藻素1和念珠藻素8)；尾海兔素；倍癌霉素(包括合成类似物、KW-2189和CB1-TM1)；艾榴塞洛素(eleutherobin)；水鬼蕉碱；匍枝珊瑚醇；海绵抑素(spongistatin)；氮芥，如苯丁酸氮芥、萘氮芥、氯磷酰胺、雌莫司汀、异环磷酰胺、氮芥、氮芥氧化物盐酸盐、美法仑、新恩比兴、苯芥胆甾醇、泼尼莫司汀、曲磷胺和尿嘧啶氮芥；亚硝基脲，如卡莫司汀、氯脲霉素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀和雷莫司汀；抗生素，如烯二炔抗生素(例如，卡奇霉素，尤其卡奇霉素γII和卡奇霉素ωII(参见例如，Agnew,Chem.Intl.Ed Engl.33:183-186(1994))；达内霉素，包括达内霉素A；二膦酸盐，如氯膦酸盐；埃斯培拉霉素；以及新制癌菌素生色团和相关色蛋白烯二炔抗生素生色团)、阿克拉霉素、放线菌素、安曲霉素、重氮丝氨酸、博莱霉素、放线菌素C、卡柔比星、洋红霉素、嗜癌菌素、色霉素、更生霉素、道诺霉素、地托比星、6-重氮基-5-氧代基-L-正亮氨酸、
Figure BDA0003284159120000945
(阿霉素，包括吗啉代-阿霉素、氰基吗啉代-阿霉素、2-吡咯啉并-阿霉素和去氧阿霉素)、表柔比星、依索比星、伊达比星、麻西罗霉素、丝裂霉素(如丝裂霉素C)、霉酚酸、诺拉霉素、橄榄霉素、培洛霉素、泊非霉素、嘌呤霉素、三铁阿霉素、罗多比星、链黑菌素、链佐星、杀结核菌素、乌苯美司、净司他丁、佐柔比星；抗代谢药，如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，如二甲叶酸、氨甲蝶呤、蝶罗呤、三甲曲沙；嘌呤类似物，如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物，如安西他滨、阿扎胞苷、6-氮杂尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、双去氧尿苷、去氧氟尿苷、依诺他滨、氟尿苷；雄激素，如卡普睾酮、屈他雄酮丙酸酯、环硫雄醇、美雄烷、睾内酯；抗肾上腺素药，如氨鲁米特、米托坦、曲洛斯坦；叶酸补充剂，如亚叶酸；醋葡醛内酯；醛磷酰胺糖苷；氨基乙酰丙酸；恩尿嘧啶；安吖啶；倍曲布西；比生群；依达曲沙；德福法明；秋水仙胺；地吖醌；依氟鸟氨酸；依利醋铵；埃博霉素；依托格鲁；硝酸镓；羟基脲；香菇多糖；氯尼达明；美登木素生物碱，如美登素和安丝菌素；米托胍腙；米托蒽醌；莫哌达醇；二胺硝吖啶(nitraerine)；喷司他丁；蛋氨氮芥；吡柔比星；洛索蒽醌；鬼臼酸；2-乙基酰肼；丙卡巴肼；
Figure BDA0003284159120000941
多糖复合物(JHS Natural Products,Eugene,Oreg.)；雷佐生；根霉素(rhizoxin)；西佐喃；锗螺胺；细交链孢菌酮酸；三亚胺醌；2,2',2"-三氯三乙胺；单端孢霉烯族毒素(特别是T-2毒素、疣孢菌素A、杆孢菌素A和蛇形菌素)；乌拉坦；长春地辛；达卡巴嗪；甘露莫司汀；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；哌泊溴烷；加西托星(gacytosine)；阿糖胞苷(“Ara-C”)；环磷酰胺；噻替派；紫杉烷类，如
Figure BDA0003284159120000942
紫杉醇(Bristol-Myers Squibb Oncology,Princeton,N.J.)，
Figure BDA0003284159120000943
无克列莫佛的白蛋白工程化紫杉醇纳米颗粒制剂(American Pharmaceutical Partners,Schaumberg,Ill.)和
Figure BDA0003284159120000944
多西他赛(Rhone-Poulenc Rorer,Antony,France)；苯丁酸氮芥；
Figure BDA0003284159120000951
吉西他滨；6-硫鸟嘌呤；巯基嘌呤；氨甲蝶呤；铂配位络合物，如顺铂、奥沙利铂和卡铂；长春花碱；铂；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌；长春新碱；
Figure BDA0003284159120000952
长春瑞滨；诺安托；替尼泊苷；依达曲沙；道诺霉素；氨蝶呤；希罗达；伊班膦酸盐；伊立替康(例如，CPT-11)；拓扑异构酶抑制剂RFS 2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；类视黄醇，如视黄酸；卡培他滨；以及上述任一者的药学上可接受的盐、酸或衍生物。可在混合物中使用两种或更多种化学治疗剂，以与本文所述的第一治疗剂组合施用。组合化学疗法的合适的给药方案是本领域已知的，并且描述于例如Saltz等人(1999)ProcASCO 18:233a和Douillard等人(2000)Lancet 355:1041-7中。
在一些实施方案中，第二治疗剂是治疗剂，其是用于癌症治疗的生物制剂，如细胞因子(例如，干扰素或白介素(例如，IL-2))。在一些实施方案中，生物制剂是抗血管生成剂，如抗VEGF剂，例如贝伐珠单抗
Figure BDA0003284159120000953
在一些实施方案中，生物制剂是基于免疫球蛋白的生物制剂，例如单克隆抗体(例如，人源化抗体、完全人抗体、Fc融合蛋白或其功能片段)，所述单克隆抗体激动靶标以刺激抗癌应答或拮抗对癌症而言重要的抗原。此类剂包括Rituxan(利妥昔单抗)；Zenapax(达克珠单抗)；Simulect(巴利昔单抗)；Synagis(帕利珠单抗)；Remicade(英夫利昔单抗)；Herceptin(曲妥珠单抗)；Mylotarg(吉妥珠单抗奥佐米星)；Campath(阿仑单抗)；Zevalin(替伊莫单抗)；Humira(阿达木单抗)；Xolair(奥马珠单抗)；Bexxar(托西莫单抗-I-131)；Raptiva(依法利珠单抗)；Erbitux(西妥昔单抗)；Avastin(贝伐珠单抗)；Tysabri(那他珠单抗)；Actemra(托珠单抗)；Vectibix(帕尼单抗)；Lucentis(兰尼单抗)；Soliris(依库珠单抗)；Cimzia(培化赛妥珠单抗)；Simponi(戈利木单抗)；Ilaris(康纳单抗)；Stelara(优特克单抗)；Arzerra(奥法木单抗)；Prolia(地诺单抗)；Numax(莫维珠单抗)；ABThrax(雷西巴单抗)；Benlysta(贝利木单抗)；Yervoy(伊匹单抗)；Adcetris(本妥西单抗维多汀)；Perjeta(帕妥珠单抗)；Kadcyla(阿多-曲妥珠单抗恩他新)；以及Gazyva(奥比妥珠单抗)。还包括抗体-药物缀合物。
第二剂可以是非药物治疗的治疗剂。例如，第二治疗剂是放射疗法、冷冻疗法、热疗和/或肿瘤组织的手术切除。
第二剂可以是检查点抑制剂。在一个实施方案中，检查点的抑制剂是抑制性抗体(例如，单特异性抗体，如单克隆抗体)。所述抗体可以是例如人源化或完全人源的。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是融合蛋白，例如Fc-受体融合蛋白。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是与检查点蛋白相互作用的剂，例如抗体。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是与检查点蛋白的配体相互作用的剂，如抗体。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是CTLA-4的抑制剂(例如，抑制性抗体或小分子抑制剂)(例如，抗CTLA4抗体，如伊匹单抗/Yervoy或曲美木单抗)。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是PD-1的抑制剂(例如，抑制性抗体或小分子抑制剂)(例如，纳武单抗/
Figure BDA0003284159120000961
派姆单抗/
Figure BDA0003284159120000962
匹地利珠单抗/CT-011)。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是PDL1的抑制剂(例如，抑制性抗体或小分子抑制剂)(例如，MPDL3280A/RG7446；MEDI4736；MSB0010718C；BMS936559)。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是PDL2的抑制剂(例如，抑制性抗体或Fc融合体或小分子抑制剂)(例如，PDL2/Ig融合蛋白，如AMP 224)。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是B7-H3(例如，MGA271)、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-15049、CHK1、CHK2、A2aR、B-7家族配体或其组合的抑制剂(例如，抑制性抗体或小分子抑制剂)。
在本文所述的任何组合实施方案中，第一治疗剂和第二治疗剂以任一顺序同时或顺序施用。第一治疗剂可在第二治疗剂之前或之后立即、至多1小时、至多2小时、至多3小时、至多4小时、至多5小时、至多6小时、至多7小时、至多8小时、至多到9小时、至多10小时、至多11小时、至多12小时、至多13小时、14小时、至多16小时、至多17小时、至多18小时、至多19小时、至多20小时、至多21小时、至多22小时、至多23小时、至多24小时或至多1-7、1-14、1-21或1-30天施用。
药物组合物
优选地，将本发明的化合物配制成药物组合物，以适于体内施用的生物相容性形式向哺乳动物、优选向人施用。因此，在一方面，本发明提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含与合适的稀释剂、载体或赋形剂混合的本发明的化合物。
本发明的化合物可以游离碱的形式、以盐、溶剂合物的形式以及以前药形式使用。所有形式均在本发明的范围内。如本领域技术人员所理解的，根据本发明的方法，所描述的化合物或其盐、溶剂合物或前药可根据所选择的施用途径以多种形式施用至患者。本发明的化合物可例如通过口服、胃肠外、经颊、舌下、经鼻、直肠、贴剂、泵或透皮施用来施用，并且相应地配制药物组合物。胃肠外施用包括静脉内、腹膜内、皮下、肌内、经上皮、经鼻、肺内、鞘内、直肠和局部施用方式。胃肠外施用可通过在选定的时间段内连续输注来进行。
本发明的化合物可例如与惰性稀释剂或与可吸收的可食用载体一起口服施用，或者其可被包封在硬壳或软壳明胶胶囊中，或者其可被压制成片剂，或者其可直接与饮食的食物一起并入。对于口服治疗性施用，本发明的化合物可与赋形剂混合并以可摄入片剂、口含片剂、锭剂、胶囊、酏剂、混悬剂、糖浆和糯米纸囊剂的形式使用。本发明的化合物也可胃肠外施用。本发明化合物的溶液可在合适地与诸如羟丙基纤维素的表面活性剂混合的水中制备。还可在甘油、液体聚乙二醇、DMSO及其有或无醇的混合物中以及在油中制备分散液。在正常储存和使用条件下，这些制剂可含有防腐剂以防止微生物生长。用于选择和制备合适制剂的常规程序和成分描述于例如Remington’s Pharmaceutical Sciences(2003,第20版)和1999年出版的The United States Pharmacopeia:The National Formulary(USP24NF19)中。适于可注射用途的药物形式包括无菌水溶液或分散液和用于临时制备无菌可注射溶液或分散液的无菌粉末。在所有情况下，所述形式都必须是无菌的，并且必须是流体性的达到可经由注射器容易注射的程度。经鼻施用的组合物可方便地配制成气雾剂、滴剂、凝胶剂和粉末。气雾剂制剂通常包括活性物质在生理上可接受的水性或非水性溶剂中的溶液或精细悬浮液，并且通常以无菌形式以单剂量或多剂量形式存在于密封容器中，所述容器可采取药筒或重新装填的形式用于雾化装置。或者，密封的容器可以是一体的分配装置，如单剂量鼻吸入器或配备有意图在使用后丢弃的计量阀的气雾剂分配器。当剂型包括气雾剂分配器时，它将含有推进剂，所述推进剂可以是压缩气体(如压缩空气)或有机推进剂(如氟氯烃)。气雾剂剂型也可采用泵雾化器的形式。适用于经颊或舌下施用的组合物包括片剂、锭剂和软锭剂，其中活性成分与载体如糖、阿拉伯胶、或黄芪胶、明胶和甘油一起配制。用于直肠施用的组合物方便地呈含有常规栓剂基质如可可脂的栓剂形式。本文所述的化合物可肿瘤内施用，例如以肿瘤内注射的形式。肿瘤内注射是直接注射到肿瘤脉管系统中，并且特别考虑用于离散的、实体的、可及的肿瘤。局部、区域或全身性施用也可以是适当的。本文所述的化合物可有利地通过向肿瘤施用例如以大约1cm间隔隔开的注射或多次注射而接触。在外科手术的情况下，本发明可在术前使用，例如使不能手术的肿瘤经受切除。在适当的情况下，也可应用连续施用，例如，通过将导管植入肿瘤或肿瘤脉管系统中。
如本文所述，本发明的化合物可单独或与药学上可接受的载体组合施用至动物(例如人)，其比例由化合物的溶解度和化学性质、所选择的施用途径以及标准药学实践确定。
剂量
本发明化合物和/或包含本发明化合物的组合物的剂量可根据许多因素而变化，所述因素如化合物的药效学性质；施用方式；接受者的年龄、健康状况和体重；症状的性质和程度；治疗的频率和同时治疗的类型(如果有的话)；以及化合物在待治疗动物中的清除率。本领域技术人员可基于上述因素确定合适的剂量。本发明的化合物可最初以适合的剂量施用，所述剂量可根据临床反应根据需要进行调整。一般来说，当将本发明的化合物以例如介于0.05mg与3000mg之间的每日剂量(以固体形式测量)施用至人时，可获得令人满意的结果。剂量范围包括例如介于10-1000mg(例如，50-800mg)之间。在一些实施方案中，施用50、100、150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950或1000mg的化合物。
或者，可使用患者的体重来计算剂量的量。例如，向患者施用的化合物或其药物组合物的剂量可在0.1-100mg/kg(例如，0.1-50mg/kg，0.25-25mg/kg)的范围内。在示例性非限制性实施方案中，剂量可在0.5-5.0mg/kg(例如，0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5或5.0mg/kg)或5.0-20mg/kg(例如，5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20mg/kg)的范围内。
实施例
以下缩写在整个以下实施例中使用。
2-bipy 2-(2-吡啶基)吡啶
Ac 乙酰基
ACN或MeCN 乙腈
AcOH 乙酸
Ac2O 乙酸酐
AlMe3 三甲基铝
aq. 含水的
BINAP 2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘
Bn 苄基
Boc 叔丁氧基羰基
BPin 4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基
B2pin2 4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧
杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷
Bu或n-Bu 丁基
CDI 1,1'-羰基二咪唑
DAST (二乙基氨基)三氟化硫
DBU 1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯
DCE或1,2-DCE 1,2-二氯乙烷
DCM 二氯甲烷
dcpp 1,3-双(二环己基膦基)丙烷
DIAD 偶氮二甲酸二异丙酯
DIPEA或DIEA N.N-二异丙基乙胺
DMAP 4-(二甲基氨基)吡啶
DME 1,2-二甲氧基乙烷
DMF N.N-二甲基甲酰胺
DMSO 二甲基亚砜
EA或EtOAc 乙酸乙酯
EDCI N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐
酸盐
EEDQ 2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氢喹啉
eq 当量
Et3N或TEA 三乙胺
EtOH 乙醇
FA 甲酸
Fmoc 9-芴基甲氧基羰基
Fmoc-OSuc N-琥珀酰亚胺基碳酸9-芴基甲酯
h或hr 小时
HATU 1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并
[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐
HOBt或HOBT 1-羟基苯并三唑水合物
iPr 异丙基
iPrMgCl 异丙基氯化镁
KHMDS 双(三甲基甲硅烷基)酰胺钾
KOAc或AcOK 乙酸钾
LDA 二异丙基氨基锂
LED 发光二极管
MeMgBr 甲基溴化镁
MeNH2 甲基胺
MeOH 甲醇
Me4t-BuXphos 二叔丁基-[2,3,4,5-四甲基-6-(2,4,6-三异丙基
苯基)苯基]磷烷
MsCl 甲磺酰氯
MTBE 叔丁基甲基醚
NaHMDS 双(三甲基甲硅烷基)酰胺钠
NaOtBu 或 叔丁醇钠
t-BuONa
NBS N-溴代琥珀酰亚胺
n-BuLi 正丁基锂
NMP 1-甲基-2-吡咯烷酮
OAc 乙酸盐
Pd/C 碳载钯
PdCl2(dtbpf) 或 二氯[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]钯(II)
Pd(dtbpf)Cl2
PdCl2(dppf) 或 [1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)
Pd(dppf)Cl2
Pd2(dba)3 三(二亚苄基丙酮)二钯(0)
Pd(PPh3)4 四(三苯基膦)钯(0
Pd(PPh3)2Cl2 二氯双(三苯基膦)钯(II)
PE 石油醚
PPh3 三苯基膦
Pr 正丙基
Py 吡啶
rac 外消旋的
Rf 保持系数
r.t.或rt 室温
RuPhos Precat 甲磺酸盐(2-二环己基膦基-2',6’-二-异-丙氧
G4 基-1,1’-联苯基)(2’-甲基氨基-1,1’-联苯基-2-基)钯(II)
sat. 饱和的
SFC 超临界流体色谱
TBAF 四丁基氟化铵
TBDPS 叔丁基二苯基甲硅烷基
TBS 叔丁基二甲基甲硅烷基
t-Bu 叔丁基
t-BuOK 叔丁醇钾
tBuXphos-Pd-G3 [2-(2-氨基苯基)苯基]-甲基磺酰基氧基,二叔
或tBuXphos Pd 丁基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷钯
G3或
t-BuXphos-Pd
(gen 3)
TCFH 氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸盐
TFA 三氟乙酸
Tf2O 三氟甲磺酸酐
THF 四氢呋喃
TLC 薄层色谱
TMS 三甲基甲硅烷基
TMSCHN2 (重氮甲基)三甲基甲硅烷
TsOH 对甲苯磺酸
Ts 对甲苯磺酰基
Xantphos-Pd-G3 [2-(2-氨基苯基)苯基]-甲基磺酰基氧基-钯；
(5-二苯基磷烷基-9,9-二甲基-呫吨-4-基)-二
苯基磷烷
实施例1.N-(2-((4-(3-(2-((二甲基氨基)甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物1)的制备
Figure BDA0003284159120001021
步骤1：4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120001022
向1-(3-溴苯基)乙酮(473g,2.38mol,313.25mL)和硫脲(361.78g,4.75mol)的混合物中加入I2(603.14g,2.38mol,478.68mL,1当量)。将混合物在110℃下搅拌16小时。冷却后，用MTBE(5L)研磨反应混合物，然后过滤除去任何未反应的碘和苯乙酮。将滤饼放入冰水(4L)中，并用25％NH3.H2O处理至pH～9-10。将悬浮液在25℃下搅拌15分钟，然后过滤，用水(1L)洗涤，得到湿固体。将湿固体溶解在EtOAc(4L)中，并用饱和NaHCO3(1Lx 2)和盐水(1L)洗涤。将EtOAc经Na2SO4过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物在25℃下用PE/EA＝100:1(4L)研磨3小时，然后过滤悬浮液，滤饼用PE(1L)洗涤，在真空下干燥，得到呈粉红色固体的中间体B(450g,1.69mol，71.20％产率，95.93％纯度)。LCMS(ESI)m/z[M+H+]＝254.9；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.98-7.97(m,1H),7.80-7.77(m,1H),7.43-7.42(m,1H),7.34-7.30(m,1H),7.15(s,1H),7.10(s,2H)。
步骤2：N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120001031
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸(82.40g,470.34mmol)、HATU(178.84g,470.34mmol)和DIEA(151.97g,1.18mol,204.81mL)在DCM(1000.00mL)中的溶液中加入中间体B(100.00g,391.95mmol)，将混合物在30℃下搅拌16小时。用饱和柠檬酸(500mL x 4)和盐水(500mL)洗涤反应混合物，将反应混合物经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物用MeOH(200.0mL)研磨，过滤，在真空下干燥，得到呈白色固体的中间体D(100g,241.89mmol，61.71％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝413.8。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.29(s,1H),8.09-8.09(m,1H),7.89(d,J＝7.6Hz,1H),7.76(s,1H),7.52-7.49(m,1H),7.41-7.37(m,1H),7.16-7.13(m,1H),3.87-3.81(m,2H),1.39(s,9H)。
步骤3：2-氨基-N-(4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120001041
将中间体D(10g,24.25mmol)于HCl/二噁烷(100mL)中的混合物在30℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩，得到呈白色固体的中间体E(8.4g，粗HCl)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝313.8。
步骤4：N-(2-((4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120001042
向中间体E(8.4g,24.09mmol,HCl)、1-甲磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](5.47g,28.91mmol)于DCM(100mL)中的溶液中加入HATU(10.99g,28.91mmol)和DIEA(18.68g,144.56mmol,25.18mL)。混合物在20℃下搅拌16小时。然后过滤反应混合物，用MTBE(50mL x 2)洗涤，得到滤饼，将滤饼在真空下干燥，得到呈白色固体的中间体G(10g,20.58mmol，85.43％产率)，其不经纯化用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝484.8。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.40-12.35(m,1H),8.69-8.66(m,1H),8.11-8.10(m,1H),7.92-7.90(m,1H),7.85-7.84(m,1H),7.78(s,1H),7.53-7.51(m,1H),7.42-7.38(m,1H),7.32-7.30(m,1H),6.78-6.77(m,1H),4.14(d,J＝6.0Hz,2H),3.57(s,3H)。
步骤5：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(中间体I)的制备
Figure BDA0003284159120001051
向中间体G(1.5g，3.10mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(1.18g，4.65mmol)于二噁烷(15mL)中的溶液中加入Pd(dppf)Cl2(227.07mg,310.33μmol)和KOAc(913.69mg,9.31mmol)。然后将混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入水(100mL)中，并用EtOAc(100mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，通过硅胶过滤并浓缩，得到残余物。将残余物用溶液(PE:EA＝1:1,20mL)研磨，过滤并在真空中浓缩，得到呈棕色固体的中间体I(6.5g,12.00mmol，96.71％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝531.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.45(s,1H),8.67(t,J＝6.0Hz,1H),8.29(s,1H),8.01(br d,J＝7.6Hz,1H),7.84(s,1H),7.65(s,1H),7.62(d,J＝7.2Hz,1H),7.44(t,J＝7.6Hz,1H),7.31(t,J＝2.8Hz,1H),6.78(d,J＝1.6Hz,1H),4.14(d,J＝6.0Hz,2H),3.57(s,3H),1.31(s,12H)。
步骤6：N-(2-((4-(3-(2-((二甲基氨基)甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物1)的制备
Figure BDA0003284159120001061
向1-(4-溴-2-吡啶基)-N,N-二甲基-甲胺(30mg,139.48μmol)、中间体I(88.78mg,167.37μmol)、K3PO4(118.42mg,557.91μmol)于二噁烷(1.5mL)/H2O(0.2mL)中的混合物中加入1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(9.09mg,13.95μmol)，然后在N2下将反应混合物在100℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(10mL)稀释，并用EtOAc(10mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL x 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.05％氢氧化氨v/v)-乙腈]；B％：22％-52％)纯化并冻干，得到呈黄色固体的化合物1(12.36mg,22.49μmol，16.12％产率，98％纯度)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝539.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.45(s,1H),8.70-8.59(m,2H),8.28(s,1H),8.01(d,J＝8Hz,1H),7.85-7.74(m,4H),7.66-7.58(m,2H),7.32-7.31(m,1H),6.79-6.77(m,1H),4.15(d,J＝5.6Hz,2H),3.68(s,2H),3.57(s,3H),2.29(s,6H)。
实施例2. 1-异丙基-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物2)的制备
Figure BDA0003284159120001071
步骤1：1-异丙基-1H-吡咯-3-羧酸甲酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001072
在25℃下向1H-吡咯-3-羧酸甲酯(500mg,4.00mmol)于DMF(10mL)中的溶液中加入NaH(239.74mg,5.99mmol，纯度为60％)，然后在该温度下搅拌混合物1小时，然后加入2-碘丙烷(679.29mg,4.00mmol,399.58μL)。将所得混合物在此温度下搅拌1小时，然后用NH4Cl(3mL)猝灭，用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL x 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色油状物的中间体C(0.49g,1.22mmol，30.43％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝168.1。
步骤2：1-异丙基-1H-吡咯-3-羧酸(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120001081
向中间体C(200mg,1.20mmol)于MeOH(1mL)和H2O(3mL)中的溶液中加入NaOH(96.00mg,2.40mmol)，然后将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩，然后通过反相(FA条件)纯化，并在减压下浓缩以除去乙腈。然后将残余物用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈白色固体的中间体D(68mg,435.89μmol,36.32％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝154.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79-11.48(m,1H),7.44-7.42(m,1H),6.89-6.87(m,1H),6.35(dd,J＝2.0,2.8Hz,1H),4.39-4.24(m,1H),1.41-1.34(m,6H)。
步骤3：4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)噻唑-2-胺(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120001082
在N2下向4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺(20g,78.39mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(21.90g,86.23mmol)和Pd(dppf)Cl2(2g,2.73mmol)于二噁烷(300mL)中的溶液中加入KOAc(23.08g,235.17mmol)，将混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物用水(300mL)稀释，并用EtOAc(200mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(400mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈棕色固体的粗中间体H(23.69g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝303.2。
步骤4：4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-胺(中间体J)的制备
Figure BDA0003284159120001091
向中间体H(23g,76.11mmol)、3-溴-1-甲基-吡唑(12.25g,76.11mmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(3g,4.60mmol)于二噁烷(200mL)和水(50mL)中的溶液中加入K3PO4(48.47g,228.33mmol)，将混合物在80℃下搅拌4小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝3:1-2:1)纯化，并在减压下浓缩，得到呈灰色固体的中间体J(15g,58.52mmol,76.89％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝257.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.25-8.24(m,1H),7.73-7.63(m,3H),7.38-7.34(m,1H),7.08-6.06(m,3H),6.69-6.68(m,1H),3.89(s,3H)。
步骤5：(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体L)的制备
Figure BDA0003284159120001092
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸(4.10g,23.41mmol)、DIEA(6.05g,46.82mmol,8.15mL)和HATU(8.90g,23.41mmol)于DCM(40mL)中的溶液中加入中间体J(4g,15.61mmol)，将混合物在30℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(FA)纯化，并冻干，得到呈棕色固体的中间体L(2g,4.44mmol,28.45％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝414.1。
步骤6：2-氨基-N-(4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120001101
将中间体L(2g,4.84mmol)于4M HCl/二噁烷(20mL)中的溶液在30℃下搅拌1hr。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物用MTBE(50.0mL)研磨，然后过滤并在减压下浓缩，得到呈棕色固体的中间体E(2g，粗品，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝313.9；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.80(s,1H),8.51(s,3H),8.39(s,1H),7.82-7.72(m,4H),7.47-7.43(m,1H),6.74-6.73(m,1H),3.93-3.90(m,5H)。
步骤7：1-异丙基-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物2)的制备
Figure BDA0003284159120001102
将中间体D(65mg,424.34μmol)、中间体E(199.47mg,636.51μmol)、HOBt(114.68mg,848.69μmol)、EDCI(162.69mg,848.69μmol)和DIEA(164.53mg,1.27mmol,221.74μL)于DMF(2mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应混合物在真空中浓缩。将残余物通过反相(碱性条件)纯化并冻干，得到呈黄色固体的化合物2(64mg,142.69μmol,33.62％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝449.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.40(s,1H),8.39(s,1H),8.18-8.16(m,1H),7.83-7.68(m,4H),7.48-7.40(m,2H),6.88-6.86(m,1H),6.73(d,J＝2.2Hz,1H),6.48(dd,J＝2.0,2.8Hz,1H),4.32(m,1H),4.10(d,J＝5.6Hz,2H),3.91(s,3H),1.39(d,J＝6.8Hz,6H)。
实施例3. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-咪唑-4-甲酰胺(化合物3)的制备
Figure BDA0003284159120001111
步骤1：3-(二甲基氨基)-2-异氰基丙烯酸(Z)-乙酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001112
在0℃下向2-异氰基乙酸乙酯(1g,8.84mmol,970.87μL)于EtOH(10mL)中的溶液中滴加1,1-二甲氧基-N,N-二甲基-甲胺(2.11g,17.68mmol,2.35mL)，将混合物在30℃下在N2下搅拌16小时。将反应混合物浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝30/1至10:1)纯化并浓缩，得到呈棕色油状物的中间体C(1g，粗品)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝169.2。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.34-7.31(s,1H),4.20-4.13(m,2H),3.31-3.24(m,6H),1.29-1.25(m,3H)。
步骤2：1-(叔丁基)-1H-咪唑-4-羧酸乙酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120001121
将中间体C(1g,5.95mmol)和2-甲基丙烷-2-胺(1.30g,17.84mmol,1.87mL)的混合物在140℃下搅拌24小时。将反应混合物浓缩，得到残余物。将粗产物通过反相HPLC(0.1％NH3·H2O)纯化，将溶液用EtOAc(20mL x 3)萃取，将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥并过滤。将滤液浓缩，得到呈黄色油状物的中间体D(200mg,847.00μmol,14.25％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝197.3。
步骤3：1-(叔丁基)-1H-咪唑-4-羧酸(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120001122
向中间体D(80mg,407.65μmol)于H2O(1mL)和EtOH(1mL)中的溶液中加入NaOH(16.30mg,407.65μmol)，将混合物在30℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩，得到呈黄色固体的中间体E(60mg，粗品)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝169.1。
步骤4：(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体I)的制备
Figure BDA0003284159120001131
向3-(2-氨基噻唑-4-基)苄腈(7g,34.78mmol)和2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸(9.14g,52.17mmol)于吡啶(140mL)中的溶液中加入EDCI(20.00g,104.35mmol)，将混合物在30℃下搅拌2小时。将反应混合物浓缩，得到残余物。将残余物倒入柠檬酸水溶液(200mL)中，将溶液在30℃下搅拌30分钟。混合物用EtOAc(100mL x 3)萃取，将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4干燥并过滤。浓缩滤液，得到残余物。将残余物用EtOAc(20mL)研磨，然后过滤并在真空下干燥，得到呈白色固体的中间体I(6.6g,15.98mmol,45.93％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H-56]+＝303.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.39-12.31(m,1H),8.34-8.29(m,1H),8.25-8.18(m,1H),7.88-7.84(m,1H),7.81-7.76(m,1H),7.70-7.62(m,1H),7.24-7.12(m,1H),3.94-3.80(m,2H),1.48-1.32(m,9H)。
步骤5：2-氨基-N-(4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120001132
将中间体I(6.6g,18.19mmol)于HCl/二噁烷(70mL)中的混合物在30℃下搅拌2小时。将反应混合物浓缩，得到残余物。将残余物用MTBE(10mL)研磨，然后过滤并在真空下干燥，得到呈白色固体的中间体F(6.1g，粗品，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝258.9。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.27(s,1H),8.20(d,J＝8.0Hz,1H),7.66-7.64(m,2H),7.60-7.56(m,1H),4.02(s,2H)。
步骤6：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-咪唑-4-甲酰胺(化合物3)的制备
Figure BDA0003284159120001141
向中间体E(60mg,356.73μmol)和中间体F(52.58mg,178.37μmol,HCl盐)于DCM(2mL)中的溶液中加入HATU(81.38mg,214.04μmol)和DIEA(115.26mg,891.83μmol,155.34μL)，将混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.225％FA)-乙腈]；B％：22％-52％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物3(33.52mg,82.06μmol,46.01％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝409.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.39(s,1H),8.32(s,1H),8.23-8.21(m,2H),7.89-7.86(m,3H),7.78(d,J＝7.6Hz,1H),7.67-7.63(m,1H),4.17(d,J＝6.0Hz,2H),1.53(s,9H)。
实施例4. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物4)的制备
Figure BDA0003284159120001151
步骤1：1H-吡咯-3-羧酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001152
在80℃下，在20分钟内向1H-吡咯-3-羧酸(500mg,4.50mmol)于甲苯(15mL)中的混合物中滴加1,1-二叔丁氧基-N,N-二甲基甲胺(3.66g,18.00mmol,4.32mL)。将反应混合物在80℃下搅拌10分钟。将反应混合物冷却至室温(30℃)，用EtOAc(40mL)稀释，用H2O(60mL)洗涤，并用EtOAc(60mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相柱(NH3.H2O条件)纯化并冻干，得到呈黄色固体的中间体C(450mg,2.69mmol,59.80％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.52(br s,1H),7.37-7.35(m,1H),6.74-6.72(m,1H),6.62-6.60(m,1H),1.56(s,9H)。
步骤2：1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-羧酸叔丁酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120001153
在0℃下在N2下向中间体C(620mg,3.71mmol)于THF(25mL)中的溶液中缓慢加入KHMDS(1M,7.42mL)。将反应混合物在0℃下在N2下搅拌30分钟。然后在0℃下在N2下向反应混合物中缓慢加入甲磺酰氯(509.71mg,4.45mmol,344.40μL)。将反应混合物升温至30℃，并在30℃下在N2下搅拌16小时。将反应混合物缓慢倒入H2O(60mL)中，并用EtOAc(60mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相柱(NH3.H2O条件)纯化，得到呈黄色固体的中间体E(510mg,2.01mmol,54.19％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+Na]+＝268.2。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.65-7.64(m,1H),7.09-7.08(m,1H),6.72-6.71(m,1H),3.21(s,3H),1.56(s,9H)。
步骤3：1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120001161
在30℃下向中间体E(560mg,2.28mmol)于DCM(25mL)中的溶液中缓慢加入TFA(3.85g,33.77mmol,2.5mL)。将反应混合物在30℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相柱(FA条件)纯化，得到呈白色固体的中间体F(310mg,1.57mmol,68.57％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝190.0。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.77-7.76(m,1H),7.24-7.22(m,1H),6.71-6.70(m,1H),3.37(s,3H)。
2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120001171
步骤4：4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-胺(中间体J)的制备
Figure BDA0003284159120001172
在N2条件下向4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺(10g,39.20mmol)、4-吡啶基硼酸(14.45g,117.59mmol)和K2CO3(16.25g,117.59mmol)于二噁烷(120mL)和水(30mL)中的溶液中加入Pd(dppf)Cl2(1g,1.37mmol)，将混合物在100℃下搅拌4小时。将用反应混合物水(500mL)稀释，并用EtOAc(500mL)萃取，在减压下浓缩得到残余物。将残余物通过从DCM/MTBE＝1:20(200mL)中结晶来纯化，过滤，得到呈棕色固体的中间体J(9.5g,36.33mmol,92.69％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝254.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.66(d,J＝6.0Hz,2H),8.19(s,1H),7.90(d,J＝8.0Hz,1H),7.76-7.70(m,2H),7.68(d,J＝8.0Hz,1H),7.52(t,J＝8.0Hz,1H),7.21(s,1H),7.11(s,2H)。
步骤5：N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体L)的制备
Figure BDA0003284159120001181
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸(9.85g,56.25mmol)、HATU(21.39g,56.25mmol)和DIPEA(14.54g,112.51mmol)于DCM(200mL)中的溶液中加入中间体C(9.5g,37.50mmol,1当量)，将混合物在30℃下搅拌16小时。形成沉淀。过滤反应混合物，得到黄色固体。将粗产物用EtOAc(300.0mL)和MeOH(50.0mL)研磨，在真空下干燥，得到呈白色固体的中间体L(11g,25.89mmol,69.03％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝411.3。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.32(br s,1H),8.69-8.67(m,2H),8.30(s,1H),8.01(d,J＝7.8Hz,1H),7.83(s,1H),7.80-7.76(m,3H),7.64-7.60(m,1H),7.20-7.15(m,1H),3.88(d,J＝6.4Hz,2H),1.44(s,9H)。
步骤6：2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120001182
向中间体L(11g,26.80mmol)于MeOH(20mL)中的溶液加入4M HCl/EtOAc(20mL)。将混合物在20℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过用EtOAc(200mL)和MTBE(50mL)研磨纯化，并在真空中干燥，得到呈浅黄色固体的中间体G(12g,HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝311.3。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.92(d,J＝6.8Hz,2H),8.52-8.47(m,3H),8.22(d,J＝8.0Hz,1H),7.94(m,J＝8.4Hz,1H),7.75-7.66(m,2H),4.04(s,2H)。
步骤7：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物4)的制备
Figure BDA0003284159120001191
在30℃下向中间体F(248.74mg,1.31mmol)于DCM(15mL)中的混合物中加入DIPEA(708.01mg,5.48mmol,954.19μL)、HATU(624.88mg,1.64mmol)和2-氨基-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(380mg,1.10mmol,HCl盐)。将反应混合物在30℃下搅拌13小时。将反应混合物过滤，并用DCM(50mL)和MeOH(20mL)洗涤滤饼，得到黄色固体(600mg)。将黄色固体用EtOH(50mL)在30℃下研磨15分钟，过滤得到黄色固体(270mg)。将黄色固体用MeCN(20mL)和10滴TFA在30℃下研磨20分钟，过滤得到呈白色固体的化合物4(257.10mg,419.77μmol,38.31％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝481.9；1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.46(s,1H),8.85(d,J＝5.2Hz,2H),8.71-8.69(m,1H),8.40(s,1H),8.13-8.08(m,3H),7.89-7.84(m,3H),7.68-7.64(m,1H),7.33-7.31(m,1H),6.78-6.77(m,1H),4.15(d,J＝5.6Hz,2H),3.58(s,3H)。
实施例5.(S)-1-(甲基磺酰基)-N-(4-(甲基硫代)-1-氧代-1-((4-苯基噻唑-2-基)氨基)丁烷-2-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物5)的制备
Figure BDA0003284159120001201
步骤1：(4-(甲基硫代)-1-氧代-1-((4-苯基噻唑-2-基)氨基)丁烷-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001202
向(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-4-甲基硫烷基-丁酸(5.0g,20.05mmol)于DCM(20.0mL)中的溶液中加入EEDQ(6.20g,25.07mmol)，然后向混合物中加入4-苯基噻唑-2-胺(2.95g,16.71mmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时。加入10％柠檬酸(800.0mL)，将反应混合物用EtOAc(200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝50/1至8:1)纯化，得到呈白色固体的中间体C(5.8g,14.23mmol,85.16％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝408.0；ee％＝100％。
步骤2：(S)-2-氨基-4-(甲基硫代)-N-(4-苯基噻唑-2-基)丁酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120001211
向中间体C(5.8g,14.23mmol)于DCM(20.0mL)的溶液中加入TFA(4.0mL)。将混合物在10℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩以除去DCM。将粗产物中间体D(7g，粗品，TFA盐)冻干，并不经进一步纯化为白色固体即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝307.9；ee％＝100％。
步骤3：(S)-1-(甲基磺酰基)-N-(4-(甲基硫代)-1-氧代-1-((4-苯基噻唑-2-基)氨基)丁烷-2-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物5)的制备
Figure BDA0003284159120001212
在30℃下向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](300mg,1.59mmol)和中间体D(487.50mg,1.59mmol)于DCM(10mL)中的溶液中加入DIPEA(614.81mg,4.76mmol,828.59μL)、EDCI(455.97mg,2.38mmol)和HOBt(321.39mg,2.38mmol)。将反应混合物在30℃下搅拌3小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相柱(FA条件)纯化并冻干，得到呈白色固体的化合物5(507.03mg,1.05mmol,66.35％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝478.9；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.93-7.85(m,3H),7.42-7.35(m,3H),7.30(d,J＝7.2Hz,1H),7.28-7.24(m,1H),6.84-6.82(m,1H),4.90-4.88(m,1H),3.36(s,3H),2.73-2.57(m,2H),2.31-2.11(m,5H)；ee％＝100％。
实施例6. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(1-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物6)的制备
Figure BDA0003284159120001221
步骤1：(2-((4-溴噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001222
在25℃下向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸(14.68g,83.78mmol)和4-溴噻唑-2-胺(10g,55.85mmol)于吡啶(150mL)中的溶液中加入EDCI(53.54g,279.27mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用EtOAc(50mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(石油醚/EtOAc＝1:0至0:1)纯化，得到固体。将固体用MTBE(20mL)研磨，过滤并在真空中干燥，得到呈白色固体的中间体C(8g,21.65mmol,38.77％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝336.1/338.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.44(s,1H),7.29(s,1H),7.17(s,1H),6.59-6.56(m,1H),3.84(d,J＝6.4Hz,2H),1.39(s,9H)。
步骤2：2-氨基-N-(4-溴噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120001231
将中间体C(5g,14.87mmol)于HCl/二噁烷(4M,50mL)中的溶液在25℃下搅拌2小时。过滤反应混合物，将固体在真空下干燥，得到呈黄色固体的中间体D(4.2g,HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝236.2/238.2。
步骤3：N-(2-((4-溴噻唑-2-基)氨基)-2-氧乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120001232
将1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](1.67g,8.81mmol)、DIEA(2.85g,22.01mmol)和HATU(4.19g,11.01mmol)于DCM(20mL)中的溶液在25℃下搅拌5分钟。然后在25℃下加入中间体D(2g,7.34mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤，得到棕色固体。将固体用DCM(5mL)研磨，然后用DMSO(5mL)溶解，通过反相HPLC(FA)重新纯化，浓缩并用EtOAc(20mL x 2)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并浓缩，得到呈白色固体的中间体F(550mg,1.31mmol,17.83％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝407.1/409.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.54(br s,1H),8.69-8.67(m,1H),7.83-7.83(m,1H),7.33-7.28(m,2H),6.76-6.75(m,1H),4.10(d,J＝5.8Hz,2H),3.57(s,3H)。
步骤4：4-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡唑-1-基]吡啶(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120001241
向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(500mg,2.58mmol)和4-氟吡啶(375.28mg,2.81mmol,1.09当量，HCl)于DMF(5mL)中的溶液中加入Cs2CO3(1.68g,5.15mmol)。然后将混合物在100℃下搅拌16小时。将反应混合物用盐水(10mL)稀释，然后用EtOAc(5mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色油状物的中间体G(1.5g，粗品)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)[M+H]+＝272.1。
步骤5：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(1-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物6)的制备
Figure BDA0003284159120001242
向中间体F(100mg,245.54μmol)和中间体G(332.86mg,1.23mmol)于二噁烷/H2O＝4/1(5mL)中的溶液中加入K3PO4(156.36mg,736.62μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(32.01mg,49.11μmol)。将混合物在75℃下在N2下搅拌16小时。向混合物中加入H2O(0.5mL)并从混合物中沉淀出黄色固体，过滤固体国，得到粗产物。将粗产物通过反相(0.1％FA条件)纯化并冻干，得到呈白色固体的化合物6(11.15mg,20.62μmol,8.40％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝472.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.41(br s,1H),8.98(s,1H),8.68-8.66(m,3H),8.22(s,1H),7.90-7.88(m,2H),7.85-7.84(m,1H),7.41(s,1H),7.32-7.32(m,1H),6.78-6.78(m,1H),4.22-4.07(m,2H),3.66-3.50(m,3H)。
实施例7. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物7)的制备
Figure BDA0003284159120001251
步骤1：N-(2-((4-溴噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(叔丁基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120001252
向1-叔丁基吡咯-3-羧酸[根据实施例34中的方法所制备](73.62mg,440.29μmol)于DCM(4mL)中的溶液中加入EDCI(105.50mg,550.36μmol)、DIEA(189.68mg,1.47mmol,255.63μL)和HOBt(74.37mg,550.36μmol)。然后加入2-氨基-N-(4-溴噻唑-2-基)乙酰胺[根据实施例6中的方法所制备](100mg,366.90μmol,HCl盐)。将混合物在25℃下搅拌2小时。加入水(20mL)，并将反应混合物用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱(EtOAc/石油醚梯度)纯化并浓缩的，得到呈白色固体形式的中间体D(120mg,303.55μmol,82.73％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝387.0。
步骤2：2-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)异喹啉-1(2H)-酮(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120001261
将7-溴-2-甲基-异喹啉-1-酮(300mg,1.26mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(351.98mg,1.39mmol)、KOAc(371.00mg,3.78mmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(82.12mg,126.01μmol)于二噁烷(4mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于80℃下搅拌2小时。加入水(20mL)，并将反应混合物用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色固体的中间体H(300mg，粗品)，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝286.2。
步骤3：2-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120001262
向中间体H(80mg,280.56μmol)于MeOH(5mL)中的溶液中加入Pd/C(10mg,280.56μmol,10％纯度)。将混合物在H2(15psi)下于25℃下搅拌12小时。将反应混合物过滤并在减压下浓缩，得到呈白色固体的中间体E(70mg，粗品)，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝287.8。
步骤4：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物7)的制备
Figure BDA0003284159120001271
将N-(2-((4-溴噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(叔丁基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(50mg,129.78μmol)、中间体E(48.45mg,168.71μmol)、K3PO4(82.64mg,389.34μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(16.92mg,25.96μmol)于二噁烷(2mL)和H2O(0.5mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于80℃下搅拌2小时。加入水(20mL)，并将反应混合物用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.05％氢氧化氨v/v)-乙腈]；B％：28％-58％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物7(7mg,15.04μmol,11.59％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝466.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.36(s,1H),8.46(d,J＝2.0Hz,1H),8.17-8.14(m,1H),7.98-7.95(m,1H),7.65(s,1H),7.52-7.50(m,1H),7.35(d,J＝8.0Hz,1H),6.97-6.95(m,1H),6.47-6.46(m,1H),4.09(d,J＝5.6Hz,2H),3.58-3.55(m,2H),3.04-2.98(m,5H),1.50(s,9H)。
实施例8. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(1-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物8)的制备
Figure BDA0003284159120001281
步骤1：N-(2-((4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(叔丁基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001282
向2-氨基-N-[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]乙酰胺(根据实施例1中的方法所制备)(2.09g,5.98mmol,HCl盐)于DCM(20mL)中的溶液中加入EDCI(1.72g,8.97mmol)、DIEA(3.86g,29.90mmol,5.21mL)和HOBt(1.21g,8.97mmol)。将混合物在25℃下搅拌30分钟，然后在25℃加入1-叔丁基吡咯-3-羧酸[根据实施例34中的方法所制备](1g,5.98mmol)，搅拌16小时。将混合物冷却至25℃，并在40℃下在减压下浓缩。将残余物倒入冰水(20mL)中。将水相用EtOAc(20mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到残余物。将残余物通过硅胶柱色谱(石油醚/EtOAc＝1:0,0:1))纯化，浓缩，得到呈黄色固体的中间体C(1.5g,3.25mmol,54.36％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝463.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.37(s,1H),8.24-8.17(m,1H),8.12(d,J＝1.6Hz,1H),7.95-7.88(m,1H),7.78(s,1H),7.57-7.49(m,2H),7.41(s,1H),6.99-6.97(m,1H),6.48-6.47(m,1H),4.13-4.07(m,2H),1.50(s,9H)。
步骤2：1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120001291
中间体C(500mg,1.08mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(825.59mg,3.25mmol),Pd(dppf)Cl2(158.59mg,216.74μmol),KOAc(319.08mg,3.25mmol)于二噁烷(5mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于80℃下搅拌4小时。将混合物冷却至25℃，并在40℃下在减压下浓缩。将残余物倒入冰水(10mL)中。将水相用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到残余物。将残余物通过硅胶色谱(石油醚/EtOAc＝10/1,0/1)纯化，浓缩，得到呈黄色固体的中间体E(500mg,973.57μmol,89.84％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝509.4。
步骤3：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(1-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物8)的制备
Figure BDA0003284159120001292
在25℃下在N2下向1-(3-溴吡唑-1-基)-2-甲基-丙-2-醇(50mg，228.23μmol)和中间体E(116.04mg，228.23μmol)在二噁烷(1.2mL)和H2O(0.3mL)中的混合物中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(29.75mg,45.65μmol)和K3PO4(145.34mg,684.69μmol)。将反应混合物加热至75℃，并在75℃下搅拌2小时。将混合物冷却至25℃，并在40℃下在减压下浓缩。将残余物倒入冰水(10mL)中。将水相用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到残余物。将残余物通过反相HPLC(FA)纯化并冻干，得到呈黄色固体的化合物8(20.86mg,39.67μmol,17.38％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝521.3；1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.39-8.30(m,1H),7.87-7.79(m,1H),7.75-7.67(m,2H),7.60-7.56(m,1H),7.46-7.40(m,2H),6.98-6.93(m,1H),6.73-6.67(m,1H),6.60-6.54(m,1H),4.27-4.20(m,2H),4.18-4.12(m,2H),1.57(s,9H),1.22(s,6H)。
实施例9.N-(2-((4-(3-(2-氨基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物9)的制备
Figure BDA0003284159120001301
步骤1：N-(2-((4-(3-(2-氨基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物9)的制备
Figure BDA0003284159120001311
在N2下向N-(2-((4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例1中的方法所制备](50mg，96.26μmol)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-胺(31.78mg,144.40μmol)于二噁烷(2mL)和H2O(0.2mL)中的溶液中加入K3PO4(61.30mg,288.79μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(12.55mg,19.25μmol)。将反应混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入水中(5mL)，将溶液用EtOAc(5mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥并过滤。浓缩滤液，得到残余物。将残余物通过预制型HPLC(流动相：[水(0.225％FA)-乙腈]；B％：15％-36％)纯化，得到呈白色固体的化合物9(4.95mg,9.97μmol,10.36％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝497.1。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.78-12.43(m,1H),8.69-8.67(m,1H),8.25(s,1H),8.16(s,1H),7.99(d,J＝5.6Hz,1H),7.98(s,1H),7.85-7.83(m,1H),7.75(s,1H),7.56-7.55(m,2H),7.30(s,1H),6.81(dd,J＝1.6,5.4Hz,1H),6.77(d,J＝1.6Hz,1H),6.73(s,1H),5.98(s,2H),4.14(d,J＝6.0Hz,2H),3.56(s,3H)。
实施例10.N-(2-((4-(3-顺式-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物10)的制备
Figure BDA0003284159120001321
步骤1：(2-((4-(3-顺式-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001322
N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(400mg,970.17μmol)(根据实施例1中的方法所制备)、顺式-2,6-二甲基吗啉代(167.61mg,1.46mmol)、[2-(2-氨基苯基)苯基]-甲基磺酰基氧基钯；二叔丁基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷(77.07mg,97.02μmol)和t-BuONa(279.71mg,2.91mmol)于二噁烷(4mL)中脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于60℃下搅拌12小时。加入水(20mL)，并将反应混合物用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱(10-60％乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱剂)纯化，真空在中浓缩，得到呈黄色油状生物制品的中间体C(200mg,362.77μmol,37.39％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝447.3。
步骤2：2-氨基-N-(4-(3-顺式-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120001331
向中间体C(180mg,403.08μmol)于MeOH(2mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(2mL)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到呈黄色固体的中间体D(160mg，粗品，HCl盐)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝347.2。
步骤3：N-(2-((4-(3-顺式-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物10)的制备
Figure BDA0003284159120001332
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](47.43mg,250.71μmol)于DMF(2mL)中的溶液中加入EDCI(60.08mg,313.39μmol)、DIEA(108.01mg,835.71μmol,145.57μL)和HOBt(42.35mg,313.39μmol)，然后加入中间体D(80mg,208.93μmol,HCl盐)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.075％TFA)-乙腈]；B％：30％-60％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物10(40mg,60.79μmol,29.10％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝518.3。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.35(s,1H),8.67-8.65(m,1H),7.84(s,1H),7.61(s,1H),7.44(s,1H),7.36-7.30(m,2H),7.29-7.24(m,1H),6.93(d,J＝8.0Hz,1H),6.79-6.75(m,1H),4.13(d,J＝5.6Hz,2H),3.78-3.67(m,2H),3.62(d,J＝11.0Hz,2H),3.57(s,3H),2.32-2.25(m,2H),1.17(d,J＝6.0Hz,6H)；ee％＝100％。
实施例11.(S)-N-(2-((4-(3-(3-甲氧基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物11)的制备
Figure BDA0003284159120001341
步骤1：3-甲氧基哌啶-1-羧酸(S)-叔丁酯(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120001342
在0℃下向(3S)-3-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(2g,9.94mmol)于THF(20mL)中的溶液中加入NaH(794.91mg,19.87mmol,60％纯度)，并在0℃下搅拌30分钟，然后向混合物中加入MeI(2.12g,14.91mmol,927.95μL)，并在25℃下搅拌2小时。将混合物倒入NH4Cl水溶液(80mL)中，然后用EtOAc(30mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(25mL x 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黑褐色油状物的中间体B(2.14g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+Na]+＝237.9。
步骤2：(S)-3-甲氧基哌啶(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001351
将中间体B(1.78g g,8.27mmol)于HCl/二噁烷(4M,12.82mL)中的溶液在25℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空中浓缩，得到呈黑色棕色固体的中间体C(1.2g，粗品，HCl盐)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ3.63(s,1H),3.39(s,3H),3.27(s,1H),3.22-3.12(m,2H),3.05-3.00(m,1H),2.01-1.94(m,2H),1.76-1.66(m,2H)。
步骤3：(2-((4-(3-(3-甲氧基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120001352
将N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(根据实施例1中的方法所制备)(250mg,606.35μmol)、中间体C(137.92mg,909.53μmol,HCl盐)、t-BuONa(233.08mg,2.43mmol)和[2-(2-氨基苯基)苯基]-甲基磺酰基氧基-钯；二叔丁基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷(48.17mg,60.64μmol)于二噁烷(5mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在70℃下在N2下搅拌3小时。将反应混合物用水(100mL)稀释，并用EtOAc(150mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(45mL x 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝20/1至1:1)纯化，并在真空中浓缩，得到呈白色固体的中间体D(340mg,723.30μmol,59.64％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝447.5。
步骤4：(S)-2-氨基-N-(4-(3-(3-甲氧基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120001361
将中间体D(300mg,671.80μmol)于HCl/二噁烷(4M，3mL)中的混合物在25℃下在N2下搅拌0.5小时。将反应混合物在真空中浓缩，得到呈棕色固体的中间体E(300mg，粗品，HCl盐)，其直接用于下一步骤。
步骤5：(S)-N-(2-((4-(3-(3-甲氧基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物11)的制备
Figure BDA0003284159120001362
向中间体E(60mg,156.70μmol,HCl盐)、1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](35.57mg,188.04μmol)和DIEA(101.26mg,783.48μmol,136.46μL)于DCM(2mL)中的溶液中加入HOBt(25.41mg,188.04μmol)和EDCI(90.12mg,470.09μmol)，将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩，得到残余物。将残余物通过预制型HPLC(流动相：[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：20％-40％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物11(88.55mg,140.19μmol,89.47％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝518.4。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.12-8.00(m,2H),7.83(s,1H),7.62-7.51(m,3H),7.28-7.27(m,1H),6.81-6.80(m,1H),4.26(s,2H),3.80-3.72(m,3H),3.64-3.59(m,1H),3.55-3.51(m,1H),3.48(s,3H),3.38(s,3H),2.28-2.20(m,1H),2.04-1.99(m,1H),1.95-1.87(m,2H)；ee％＝100％。
实施例12.N-(2-((4-(1-甲基-2-氧代-1,2-二氢喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物12)的制备
Figure BDA0003284159120001371
步骤1：7-溴-1-甲基喹啉-2(1H)-酮(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120001372
在0℃下向7-溴-1H-喹啉-2-酮(500mg,2.23mmol)于DMF(5mL)中的溶液中加入NaH(107.11mg,2.68mmol,60％纯度)，并在0℃下搅拌0.5小时。然后在0℃下加入MeI(610mgmg,4.30mmol,267.54μL)，并在25℃下搅拌1.5小时。通过加入水(2mL)猝灭反应混合物，然后用EtOAc(15mL)稀释，并用EtOAc(10mL x 2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈棕色固体的中间体B(400mg,1.68mmol,75.29％产率)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.91(d,J＝9.6Hz,1H),7.74(s,1H),7.67(d,J＝8.4Hz,1H),7.46-7.44(m,1H),6.65(d,J＝9.2Hz,1H),3.60(s,3H)。
步骤2：1-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹啉-2(1H)-酮(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120001381
向中间体B(400mg,1.68mmol)于二噁烷(5mL)中的溶液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(639.96mg,2.52mmol)以及KOAc(494.67mg,5.04mmol)和Pd(dppf)Cl2(122.93mg,168.01μmol)。将混合物在80℃下搅拌2小时。将混合物用水(3mL)稀释，并用EtOAc(20mL x 2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥并在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝20/1至1:1)纯化并浓缩，得到呈白色固体的中间体D(204mg,715.43μmol,42.58％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝286.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.82(s,1H),7.69-7.65(m,2H),7.56(d,J＝7.6Hz,1H),6.76(d,J＝9.6Hz,1H),3.80(s,3H),1.39(s,12H)。
步骤3：(2-((4-(1-甲基-2-氧代-1,2-二氢喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120001391
向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(根据实施例6中的方法所制备)(160mg,475.90μmol)、中间体D(203.55mg,713.85μmol),K3PO4(303.05mg,1.43mmol)于二噁烷(3mL)和H2O(0.6mL)中的混合物中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(31.02mg,47.59μmol)脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于80℃下搅拌2小时。将残余物用H2O(10mL)稀释，并用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱(PE：EtOAc＝1:1至0:1)纯化并浓缩，得到呈浅黄色固体的中间体F(140mg,336.90μmol,70.79％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝415.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.35(s,1H),7.97(s,1H),7.90-7.88(m,2H),7.80-7.73(m,2H),7.16-7.13(m,1H),6.59(d,J＝9.6Hz,1H),3.86(d,J＝6.4Hz,2H),3.66(s,3H),1.38(s,9H)。
步骤4：2-氨基-N-(4-(1-甲基-2-氧代-1,2-二氢喹啉-7-基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120001392
向中间体F(40mg,96.51μmol)于二噁烷(0.5mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M,241.27μL)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到呈黄色固体的中间体G(35mg，粗品，HCl盐)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝315.0。
步骤5：N-(2-((4-(1-甲基-2-氧代-1,2-二氢喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物12)的制备
Figure BDA0003284159120001401
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](22.65mg,119.72μmol)于DMF(0.5mL)中的溶液中加入EDCI(28.69mg,149.65μmol)、HOBt(20.22mg,149.65μmol)、DIEA(38.68mg,299.30μmol,52.13μL)和中间体G(35mg,99.77μmol,HCl盐)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用H2O(5mL)稀释，并用EtOAc(5mL x 3)萃取。将合并的有机层用饱和盐水(5mL x 3)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过预制型HPLC(流动相：[水(0.05％氢氧化氨v/v)-乙腈]；B％：10％-40％)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物12(12.98mg,26.30μmol,26.36％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝486.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.63(s,1H),8.06-7.98(m,1H),7.95-7.73(m,5H),7.31(s,1H),6.78(s,1H),6.60(d,J＝9.2Hz,1H),4.13(d,J＝4.4Hz,2H),3.68(s,3H),3.57(s,3H)。
实施例13.N-(2-((4-(3-(2-((2-(二甲氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物13)的制备
Figure BDA0003284159120001411
在30℃下在N2下向1-甲基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(根据实施例1中的方法所制备)(75mg,141.40μmol)和2-[(4-溴-2-吡啶基)-甲基-氨基]-N,N-二甲基乙酰胺(38.48mg,141.40μmol)于二噁烷(1.6mL)和H2O(0.4mL)中的混合物中加入Et3N(42.92mg,424.19μmol,59.04μL)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(9.22mg,14.14μmol)。将反应混合物加热至70℃，并在70℃下在N2下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相柱(中性条件)纯化，得到呈黄色固体的化合物13(39.01mg,64.90μmol,45.90％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝596.2。1H NMR(400MHz,DMSO-d67)δ12.41(br s,1H),8.73-8.61(m,1H),8.21(s,1H),8.12(d,J＝5.2Hz,1H),7.97(d,J＝7.6Hz,1H),7.85(s,1H),7.80(s,1H),7.68(d,J＝7.6Hz,1H),7.61-7.52(m,1H),7.36-7.27(m,1H),6.92-6.83(m,2H),6.79-6.77(m,1H),4.51(s,2H),4.15(d,J＝5.6Hz,2H),3.57(s,3H),3.12-3.00(m,6H),2.81(s,3H)。
实施例14. 1-(4-(3-(2-(2-(1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)苯基)吡啶-2-基)环丙烷羧酸(化合物14)的制备
Figure BDA0003284159120001421
步骤1：2-(4-溴吡啶-2-基)乙酸叔丁酯(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120001422
在-70℃下向4-溴-2-甲基-吡啶(1.4g,8.14mmol)于THF(20mL)中的溶液中滴加LDA(2M,4.88mL)。加入后，将混合物在此温度下搅拌1小时。然后在-70℃下滴加Boc2O(1.95g,8.95mmol,2.06mL)。将所得混合物在25℃下搅拌11小时。将反应混合物通过添加水(30mL)猝灭，并用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL x 3)洗涤，经Na2O4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(FA)纯化，并冻干，得到呈黄色油状物的中间体B(500mg,1.84mmol,22.58％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.38(d,J＝5.4Hz,1H),7.50(d,J＝1.6Hz,1H),7.37(dd,J＝1.8,5.4Hz,1H),3.74(s,2H),1.47(s,9H)。
步骤2：1-(4-溴吡啶-2-基)环丙烷羧酸叔丁酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120001423
在25℃下向中间体B(450mg,1.65mmol)于DMF(5mL)中的溶液中加入NaH(198.43mg,4.96mmol,60％纯度)。加入后，将混合物在此温度下搅拌1小时，然后在25℃下滴加1,2-二溴乙烷(621.28mg,3.31mmol,249.51μL)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物通过添加水(10mL)猝灭，并用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL x 3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(FA)纯化，并冻干，得到呈黄色油状物的中间体D(400mg,1.34mmol,81.13％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H-56]+＝242.0。
步骤3：1-(4-(3-(2-(2-(1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)苯基)吡啶-2-基)环丙烷羧酸叔丁酯(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120001431
将中间体D(200mg,670.75μmol)、1-甲基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(根据实施例1中的方法所制备)(391.36mg,737.83μmol)、K3PO4(427.14mg,2.01mmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(43.72mg,67.08μmol)于二噁烷(2mL)H2O(0.5mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于80℃下搅拌12小时。将反应混合物通过添加水(10mL)猝灭，并用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用NaCl(10mL x 3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(FA)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的中间体F(200mg,321.69μmol,47.96％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝622.4。
步骤4：1-(4-(3-(2-(2-(1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)苯基)吡啶-2-基)环丙烷羧酸(化合物14)的制备
Figure BDA0003284159120001441
将中间体F(100mg,160.84μmol)、TFA(183.39mg,1.61mmol,119.09μL)于DCM(1mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于25℃下搅拌1小时。将混合物浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(FA)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物14(43mg,76.02μmol,47.27％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝566.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.66-12.27(m,1H),8.72-8.70(m,1H),8.57(d,J＝5.4Hz,1H),8.28(s,1H),8.02(d,J＝8.0Hz,1H),7.88-7.83(m,3H),7.76(d,J＝8.2Hz,1H),7.65-7.57(m,2H),7.32(dd,J＝2.4,3.4Hz,1H),6.78(dd,J＝1.6,3.4Hz,1H),4.15(d,J＝5.8Hz,2H),3.58(s,3H),1.61-1.46(m,4H)。
实施例15. 2-(甲基(4-(3-(2-(2-(1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)苯基)吡啶-2-基)氨基)乙酸(化合物15)和N-(2-((4-(3-(2-(甲基(2-(甲基氨基)-2-氧代乙基)氨基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物16)的制备
Figure BDA0003284159120001451
步骤1：2-(甲基(4-(3-(2-(2-(1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)苯基)吡啶-2-基)氨基)乙酸(化合物15)的制备
Figure BDA0003284159120001452
在30℃下在N2下向1-甲基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(根据实施例1中的方法所制备)(100mg,188.53μmol)和2-[(4-溴-2-吡啶基)-甲基-氨基]-N-甲基乙酰胺(48.66mg,188.53μmol)二噁烷(2mL)和H2O(0.5mL)的混合物中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(12.29mg,18.85μmol)和Et3N(57.23mg,565.59μmol,78.72μL)。将反应混合物加热至70℃，并在70℃下在N2下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相柱(FA条件)纯化，得到呈绿色固体的化合物15(60mg,97.62μmol,51.78％产率，FA盐)。该产物是水解副产物。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝569.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70-8.67(m,1H),8.22(s,1H),8.15(d,J＝5.2Hz,1H),7.98(d,J＝7.6Hz,1H),7.88-7.80(m,2H),7.69(d,J＝7.6Hz,1H),7.60-7.54(m,1H),7.35-7.30(m,1H),6.97-6.85(m,2H),6.79-6.77(m,1H),4.29(s,2H),4.15(d,J＝6.0Hz,2H),3.57(s,3H),3.21-3.06(m,2H)。
步骤2：N-(2-((4-(3-(2-(甲基(2-(甲基氨基)-2-氧代乙基)氨基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物16)的制备
Figure BDA0003284159120001461
在30℃下向化合物101(60mg,97.62μmol,FA盐)于DMF(1mL)中的混合物中加入EDCI(28.07mg,146.43μmol)、HOBt(19.78mg,146.43μmol)、DIPEA(63.08mg,488.10μmol,85.01μL)和甲胺(31.84mg,471.58μmol,35.78μL,HCl盐)。将反应混合物在30℃下搅拌14小时。将反应混合物过滤，得到黑色溶液。将黑色溶液通过反相柱(中性条件)纯化，得到呈黄色固体的化合物16(26.92mg,44.88μmol,45.97％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝582.2；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.42(s,1H),8.69-8.66(m,1H),8.21(s,1H),8.15(d,J＝5.6Hz,1H),7.98(d,J＝7.6Hz,1H),7.86-7.84(m,1H),7.79(s,1H),7.78-7.73(m,1H),7.69(d,J＝7.6Hz,1H),7.59-7.55(m,1H),7.33-7.31(m,1H),6.95-6.92(m,1H),6.87(s,1H),6.79-6.77(m,1H),4.20(s,2H),4.16(d,J＝6.0Hz,2H),3.57(s,3H),3.13(s,3H),2.60(d,J＝4.8Hz,3H)。
实施例16.N-(2-((4-(3-(2-((二甲基氨基)甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物17)的制备
Figure BDA0003284159120001471
在N2下向4-溴-2-甲基-1H-咪唑(30mg,186.34μmol)和1-甲基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(根据实施例1中的方法所制备)(98.84mg,186.34μmol)于二噁烷(2mL)/H2O(0.2mL)中的溶液中加入K3PO4(118.66mg,559.01μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(12.14mg,18.63μmol)。将混合物在100℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(10mL)稀释，并用EtOAc(12mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL x 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：22％-52％)纯化，并冻干，得到呈灰色固体的化合物17(11.21mg,22.90μmol,12.29％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝485.0；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.22-8.21(m,1H),8.01-7.99(m,1H),7.83-7.82(m,1H),7.78(s,1H),7.63-7.60(m,1H),7.56-7.51(m,2H),7.28-7.26(m,1H),6.81-6.79(m,1H),4.25(s,2H),3.37(s,3H),2.70(s,3H)。
实施例17.N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物18)的制备
Figure BDA0003284159120001472
将4-溴-1-甲基-咪唑(36.42mg,226.23μmol)、1-甲基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(根据实施例1中的方法所制备)(100mg,188.53μmol)、K3PO4(120.05mg,565.59μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(24.57mg,37.71μmol)于二噁烷(2mL)和H2O(0.5mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于80℃下搅拌12小时。加入水(20mL)，并将反应混合物用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.075％TFA)-乙腈]；B％：12％-42％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物18(18.25mg,30.49μmol,16.17％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝485.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.41(s,1H),9.05(s,1H),8.69-8.68(m,1H),8.28(s,1H),8.13(s,1H),7.95(d,J＝8.0Hz,1H),7.85-7.84(m,1H),7.71-7.68(m,2H),7.60-7.56(m,1H),7.32-7.31(m,1H),6.78-6.76(m,1H),4.15(d,J＝5.6Hz,2H),3.90(s,3H),3.57(s,3H)。
实施例18.N-(2-((4-(3-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物19)的制备
Figure BDA0003284159120001481
步骤1：1-(4-溴吡啶-2-基)-4-甲基哌嗪(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001482
向4-溴-2-氟吡啶(500mg,2.84mmol)和1-甲基哌嗪(313.03mg,3.13mmol,346.66μL)于DMSO(5mL)中的溶液中加入DIPEA(1.10g,8.52mmol,1.48mL)，然后将混合物在130℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入水(50.0mL)中，并用EtOAc(30.0mL x 3)萃取。将合并的有机物用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并将滤液蒸发至干燥，得到呈黄色油状物的中间体C(720mg，粗品)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.93(d,J＝5.6Hz,1H),7.00(d,J＝1.2Hz,1H),6.83-6.81(m,1H),3.56-3.54(m,4H),2.56-2.49(m,4H),2.33(s,3H)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝258.0。
步骤2：N-(2-((4-(3-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物19)的制备
Figure BDA0003284159120001491
将1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(根据实施例1中的方法所制备)(60mg,113.12μmol)、中间体C(86.92mg,339.35μmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(14.74mg,22.62μmol)和K3PO4(96.05mg,452.47μmol)加入到二噁烷(1.5mL)和H2O(0.3mL)中，将混合物用N2吹扫3次，然后在80℃下搅拌2小时。将反应混合物过滤并将滤液蒸发至干燥。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：8％-38％)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物19(33.80mg,48.72μmol,43.07％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝580.2；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.25-8.24(m,2H),8.01(d,J＝8.0Hz,1H),7.84-7.83(m,1H),7.68-7.66(m,1H),7.56-7.52(m,2H),7.29-7.28(m,2H),7.20-7.18(m,1H),6.82-6.80(m,1H),4.26(s,2H),3.86-3.34(m,11H),2.98(s,3H)。
实施例19.N-(2-((4-(3-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物20)的制备
Figure BDA0003284159120001501
步骤1：N1-(4-溴吡啶-2-基)-N2,N2-二甲基乙烷-1,2-二胺(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001502
将4-溴-2-氟-吡啶(1g,5.68mmol)和N',N'-二甲基乙烷-1,2-二胺(525.94mg,5.97mmol,651.72μL)于NMP(5mL)中的溶液在80℃下搅拌2小时。将混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用水(5mL x 3)和盐水(5mL x 2)洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体C(1.2g,4.92mmol,86.50％产率)。粗产物不经进一步纯化即直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝246.2。
步骤2：N-(2-((4-(3-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物20)的制备
Figure BDA0003284159120001511
向中间体C(60mg,245.77μmol)、1-甲基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(根据实施例1中的方法所制备)(108.64mg,204.81μmol)、K3PO4(130.42mg,614.43μmol)于二噁烷(3mL)和水(0.5mL)中的溶液中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(26.70mg,40.96μmol)。将混合物在90℃下搅拌2小时。将反应物通过硅胶垫，并用EtOAc(30mL)、MeOH(30mL)和DMF(2mL)洗涤该垫。将合并的有机层用水(5mL x 3)和盐水(5mL x2)洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过制备型HPLC(FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物20(40mg,64.98μmol,31.73％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝568.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.43(br s,1H),8.70-8.67(m,1H),8.21-8.17(m,2H),8.07(d,J＝5.4Hz,1H),7.96(d,J＝7.6Hz,1H),7.86-7.85(m，1H),7.78(s,1H),7.64-7.52(m,2H),7.32-7.30(m,1H),6.86-6.80(m,2H),6.79-6.77(m,1H),6.53-6.42(m,1H),4.15(d,J＝5.8Hz,2H),3.58(s,3H),3.43(br d,J＝5.8Hz,2H),2.58-2.54(m,2H),2.29(s,6H)。
实施例20.N-(2-((4-(3-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物21)的制备
Figure BDA0003284159120001521
步骤1：N-(2-((4-(3-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物21)的制备
Figure BDA0003284159120001522
在30℃下向1-甲磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(根据实施例1中的方法所制备)(100mg,188.53μmol)和N’-(4-溴-2-吡啶基)-N,N,N'-三甲基-乙烷-1,2-二胺(40.56mg,157.11μmol)于二噁烷(2mL)和H2O(0.5mL)中的混合物中加入K3PO4(100.05mg,471.33μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(10.24mg,15.71μmol)。将反应混合物加热至75℃，并在75℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.225％FA)-乙腈]；B％：25％-55％)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物21(47.01mg,73.26μmol,46.63％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝582.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.41(br s,1H),8.70-8.67(m,1H),8.21(s,2H),8.17(d,J＝5.2Hz,1H),7.97(d,J＝8.0Hz,1H),7.86-7.85(m,1H),7.79(s,1H),7.69(d,J＝8.0Hz,1H),7.61-7.52(m,1H),7.33-7.31(m,1H),6.89-6.87(m,1H),6.83(s,1H),6.79-6.77(m,1H),4.16(d,J＝5.6Hz,2H),3.75-3.71(m,2H),3.57(s,3H),3.09(s,3H),2.54(s,2H),2.27(s,6H)。
实施例21. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(6-甲基嘧啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物22)的制备
Figure BDA0003284159120001531
步骤1：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(6-甲基嘧啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物22)的制备
Figure BDA0003284159120001532
将1-叔丁基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(根据实施例8中的方法所制备)(100mg,196.68μmol)、4-溴-6-甲基-嘧啶(51.04mg,295.02μmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(12.82mg,19.67μmol)、K3PO4(125.25mg,590.04μmol)于二噁烷(2mL)和H2O(0.4mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于100℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(10mL)稀释，并用EtOAc(5mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经Na2SO4干燥，通过硅胶过滤并在减压下浓缩,得到残余物。将残余物用MTBE(5mL)在20℃下研磨10分钟。然后将混合物过滤，用MTBE(3mL)洗涤，得到棕色固体。然后将固体溶解在H2O/CH3CN(4:1,30mL)中，然后冻干，得到呈棕色固体的化合物22(67.24mg,138.96μmol,70.65％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝475.3；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ9.05(d,J＝0.8Hz,1H),8.69(s,1H),8.08-8.06(m,2H),7.95(s,1H),7.58-7.54(m,3H),6.96-6.94(m,1H),6.58-6.57(m,1H),4.24(s,2H),2.61(s,3H),1.56(s,9H)ppm。
实施例22. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(2-甲基嘧啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物23)的制备
Figure BDA0003284159120001541
步骤1：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(2-甲基嘧啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物23)的制备
Figure BDA0003284159120001542
将1-叔丁基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(根据实施例8中的方法所制备)(50mg,98.34μmol),、4-溴-2-甲基-嘧啶(25.52mg,147.51μmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(6.41mg,9.83μmol)、K3PO4(62.62mg,295.02μmol)于二噁烷(1mL)和H2O(0.2mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于100℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(5mL)稀释，并用EtOAc(3mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(3mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物用MTBE(3mL)在20℃下研磨10分钟。然后将混合物过滤，用MTBE(3mL)洗涤，得到黄色固体。将固体溶解在H2O/CH3CN(4:1,30mL)中，然后冻干，得到呈黄色固体的化合物23(20.96mg,44.17μmol,44.91％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝475.3；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.73-8.70(m,2H),8.08(d,J＝7.6Hz,2H),7.84(d,J＝5.2Hz,1H),7.59-7.55(m,3H),6.96-6.95(m,1H),6.58-6.57(m,1H),4.24(s,2H),2.76(s,3H),1.57(s,9H)。
实施例23.N-(2-((4-(3-(2-(氨基甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(叔丁基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物24)的制备
Figure BDA0003284159120001551
步骤1：((4-溴吡啶-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120001552
将(4-溴-2-吡啶基)甲胺(200mg,894.86μmol,HCl盐)、Boc2O(234.36mg,1.07mmol,246.70μL)、TEA(271.65mg,2.68mmol,373.66μL)于DCM(3mL)中的混合物在25℃下搅拌4小时。将反应物用水(5mL)稀释，并用DCM(2mL x 3)萃取，将合并的有机层在真空中浓缩。将残余物通过反相HPLC(0.1％FA条件)纯化，并冻干，得到呈白色固体的中间体G(150mg,475.36μmol,53.12％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝289.0。
步骤2：((4-(3-(2-(2-(1-(叔丁基)-1H-吡咯-3-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)苯基)吡啶-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(中间体I)的制备
Figure BDA0003284159120001561
将1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺[根据8中的方法所制备](50mg,98.34μmol)、中间体G(33.89mg,118.01μmol)、K3PO4(62.62mg,295.02μmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(6.41mg,9.83μmol)于二噁烷(0.5mL)和H2O(0.25mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于80℃下搅拌14小时。将用反应物水(5mL)稀释，过滤得到固体。将固体用DMSO(1mL)溶解，用反相HPLC(0.1％FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色油状物的中间体I(15mg,22.17μmol,22.54％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝589.2。
步骤3：N-(2-((4-(3-(2-(氨基甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(叔丁基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物24)的制备
Figure BDA0003284159120001571
向中间体I(15mg,22.17μmol)于MeOH(0.1mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(0.2mL)。将混合物在25℃下搅拌6小时。将反应混合物在真空中浓缩。将粗产物通过反相HPLC(0.1％FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物24(1.65mg,2.90μmol,13.07％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝489.1。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.61-8.59(m,1H),8.19(s,1H),7.93(d,J＝7.6Hz,1H),7.70(s,1H),7.66-7.59(m,2H),7.48-7.43(m,3H),6.87-6.85(m,1H),6.48-6.47(m,1H),4.26(s,2H),4.14(s,2H),1.46(s,9H)。
实施例24. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(1-(2-甲氧基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物25)的制备
Figure BDA0003284159120001572
步骤1：3-溴-1-(2-甲氧基-2-甲基丙基)-1H-吡唑(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120001581
在0℃下向1-(3-溴吡唑-1-基)-2-甲基-丙-2-醇(200mg,912.91μmol)和MeI(259.15mg,1.83mmol,113.66μL)于DMF(2mL)中的混合物中分批加入NaH(43.82mg,1.10mmol,60％纯度)。将反应混合物升温至25℃，并在25℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入饱和NH4Cl水溶液(5mL)中，并用EtOAc(5mL x 3)萃取。将有机相用盐水(5mL x2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相柱(FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色油状物的中间体B(90mg,386.09μmol,42.29％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝233.9。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.41(d,J＝2.4Hz,1H),6.28(d,J＝2.0Hz,1H),4.10(s,2H),3.25(s,3H),1.16(s,6H)。
步骤2：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(1-(2-甲氧基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物25)的制备
Figure BDA0003284159120001582
在25℃下在N2下向中间体B(22.92mg,98.34μmol)和1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺[根据8中的方法所制备](50mg,98.34μmol)于二噁烷(0.8mL)和H2O(0.2mL)中的混合物中加入K3PO4(62.62mg,295.02μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(6.41mg,9.83μmol)。将反应混合物加热至75℃，并在75℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入H2O(2mL)中，并用EtOAc(2mL x 5)萃取，将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过硅胶柱色谱(PE/EtOAc＝3/1-EtOAc)(TLC：EtOAc,Rf＝0.7)纯化，得到黄色固体。将黄色固体通过反相柱(FA条件)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物25(3.51mg,6.04μmol,6.15％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝535.2；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.50(s,1H),8.34(s,1H),7.83(d,J＝8.0Hz,1H),7.71(d,J＝7.6Hz,1H),7.65(d,J＝2.4Hz,1H),7.59-7.58(m,1H),7.47-7.39(m,2H),6.96-6.94(m,1H),6.68(d,J＝2.0Hz,1H),6.58-6.57(m,1H),4.24(s,2H),4.21(s,2H),3.30(br s,3H),1.57(s,9H),1.19(s,6H)。
实施例25. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(5-(羟基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物26)的制备
Figure BDA0003284159120001591
步骤1：3-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-羧酸甲酯(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120001592
向3-溴-1H-吡唑-5-羧酸甲酯(500mg,2.44mmol)和MeI(1.73g,12.19mmol,759.16μL)于DMF(5mL)中的溶液中加入K2CO3(505.61mg,3.66mmol)，将混合物在60℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(50Ml)稀释，并用EtOAc(50mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝3/1至1:1)纯化，并浓缩，得到呈白色固体的中间体B(330mg,1.51mmol,61.77％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝220.8；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.99(s,1H),4.06(s,3H),3.84(s,3H)。
步骤2：(3-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)甲醇(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001601
在0℃下向LiAlH4(110.90mg,2.92mmol)于THF(4mL)中的溶液中加入中间体B(320mg,1.46mmol)于THF(2mL)中的溶液，然后将混合物升温至30℃，并在30℃下搅拌1小时。将反应混合物通过在0℃添加10mLEtOAc猝灭，然后用水(0.11mL)、15％NaOH溶液(0.11mL)、水(0.4mL)和2g Na2SO4稀释，然后过滤。将合并的有机层在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝3/1至2:1)纯化，并在减压下浓缩，得到呈白色固体的中间体C(110mg,575.84μmol,39.42％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝191.1；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.26(s,1H),5.37-5.34(m,1H),4.45(d,J＝5.6Hz,2H),3.74(s,3H)。
步骤3：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(5-(羟基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物26)的制备
Figure BDA0003284159120001611
在N2下向1-叔丁基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(根据实施例8中的方法所制备)(100mg,196.68μmol)、中间体C(45.09mg,236.02μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(12.82mg,19.67μmol)于二噁烷(1mL)和水(0.25mL)的溶液中加入K3PO4(125.25mg,590.04μmol)，将混合物在80℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(10mL)稀释，并用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝0:1)(PE/EtOAc＝0:1,Rf＝0.6)纯化，并在减压下浓缩，得到呈白色固体的化合物26(23.60mg,47.29μmol,24.04％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝493.4；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.31-8.30(m,1H),7.84-7.82(m,1H),7.69(d,J＝8.0Hz,1H),7.59-7.58(m,1H),7.43-7.39(m,2H),6.96-6.94(m,1H),6.64(s,1H),6.58-6.57(m,1H),4.67(s,2H),4.24(s,2H),3.93(s,3H),1.56(s,9H)。
实施例26. 1-(1-甲氧基-2-甲基丙-2-基)-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物27)的制备
Figure BDA0003284159120001621
步骤1：1-(1-甲氧基-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-1H-吡咯-3-羧酸叔丁酯(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120001622
在0℃下向1-(2-甲氧基-2-氧代-乙基)吡咯-3-羧酸叔丁酯(500mg,2.09mmol)MeI(1.19g,8.36mmol,520.38μL)于THF(5mL)中的溶液中加入NaHMDS(1M,10.45mL)。加入后，将所得混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物通过添加水(10mL)猝灭，并用EtOAc(10mL x3)萃取。将合并的有机层用NaCl(10mL x 3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色油状物的中间体B(440mg，粗品)，其不经进一步纯化即直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H-56]+＝212.1。
步骤2：2-(3-(叔丁氧基羰基)-1H-吡咯-1-基)-2-甲基丙酸(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001623
向中间体B(400mg,1.50mmol)于H2O(2mL)和MeOH(6mL)中的溶液中加入NaOH(119.71mg,2.99mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将残余物通过反相(FA条件)纯化，并冻干，得到呈浅黄色油状物的中间体C(224mg,809.27μmol,54.08％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H-56]+＝198.1。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.19-13.08(m,1H),7.38-7.36(m,1H),6.93-6.91(m,1H),6.35-6.34(m,1H),1.71(s,6H),1.48(s,9H)。
步骤3：1-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-1H-吡咯-3-羧酸叔丁酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120001631
在0℃下向中间体C(200mg,789.60μmol)、Et3N(119.85mg,1.18mmol,164.85μL)于THF(2mL)中的溶液中加入氯甲酸异丁酯(129.41mg,947.52μmol,124.43μL)。加入后，将混合物在此温度下搅拌1小时，然后在0℃下滴加于MeOH(0.4mL)中的NaBH4(268.83mg,7.11mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物通过添加水(10mL)猝灭，并用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL x 3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(FA条件)纯化，并冻干，得到呈白色固体的中间体E(170mg,710.38μmol,89.97％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H-56]+＝184.1。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.37-7.35(m,1H),6.96-6.90(m,1H),6.31(dd,J＝1.8,3.0Hz,1H),5.06-5.53(m,1H),3.48(d,J＝5.4Hz,2H),1.48(s,9H),1.42(s,6H)。
步骤4：1-(1-甲氧基-2-甲基丙-2-基)-1H-吡咯-3-羧酸叔丁酯(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120001632
在25℃下向中间体E(90mg,376.08μmol)于THF(1mL)中的溶液中加入MeI(106.76mg,752.16μmol,46.83μL)，然后在0℃下加入NaH(30.09mg,752.16μmol,60％纯度)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物通过添加水(3mL)猝灭，并用EtOAc(2mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(2mL x 3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色油状物的中间体F(130mg，粗品)，其不经进一步纯化即直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H-56]+＝198.1。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.29(m,1H),6.71-6.70(m,1H),6.45(dd,J＝1.8,3.0Hz,1H),3.35(s,2H),3.21(s,3H),1.49-1.43(m,15H)。
步骤5：1-(1-甲氧基-2-甲基丙-2-基)-1H-吡咯-3-羧酸(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120001641
将中间体F(130mg,513.15μmol)于HCl/二噁烷(4M,1.28mL)中的溶液在25℃下搅拌2小时。将混合物在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体G(50mg，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝198.1。
步骤6：1-(1-甲氧基-2-甲基丙-2-基)-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物27)的制备
Figure BDA0003284159120001651
将中间体G(50mg,253.51μmol)、2-氨基-N-[4-[3-(1-甲基吡唑-3-基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺(根据实施例2中的方法所制备)(119.17mg,340.63μmol,HCl盐)、DIEA(163.82mg,1.27mmol,220.78μL)、EDCI(97.20mg,507.02μmol)和HOBt(68.51mg,507.02μmol)于DMF(2mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于25℃下搅拌1小时。将反应混合物通过添加水(10mL)猝灭，并用EtOAc(3mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(3mL x 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(TFA条件)纯化，并冻干，得到呈棕色油状物的化合物27(11mg,21.88μmol,8.63％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝493.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.39(s,1H),8.38(s,1H),8.21-8.20(m,1H),7.85-7.64(m,4H),7.53-7.40(m,2H),6.95-6.94(m,1H),6.73(d,J＝2.2Hz,1H),6.51-6.44(m,1H),4.10(br d,J＝6.0Hz,2H),3.90(s,3H),3.22-3.20(m,3H),1.48-1.43(m,6H)。
实施例27. 1-(2-羟基-2-甲基丙基)-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺的制备(化合物28)的制备
Figure BDA0003284159120001661
步骤1：1-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-吡咯-3-羧酸(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001662
向1-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-1H-吡咯-3-羧酸叔丁酯[根据实施例26中描述的方法所制备](50mg,208.93μmol)于二噁烷(0.5mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M,522.34μL)，然后将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到呈棕色固体的中间体C(23mg，粗品)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝184.1。
步骤2：1-(2-羟基-2-甲基丙基)-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺的制备(化合物28)的制备
Figure BDA0003284159120001663
将中间体C(20mg,109.17μmol)、2-氨基-N-[4-[3-(1-甲基吡唑-3-基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺(根据实施例2中的方法所制备)(51.32mg,146.69μmol,HCl盐)、DIEA(42.33mg,327.50μmol,57.05μL)、HOBt(29.50mg,218.34μmol)和EDCI(41.86mg,218.34μmol)于DMF(1mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于25℃下搅拌12小时。将反应混合物在真空中浓缩。将残余物通过制备型HPLC(FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物28(8mg,15.74μmol,14.42％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝479.2；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.81-11.85(m,1H),8.45(s,1H),8.39(s,1H),8.20-8.18(m,1H),7.84-7.67(m,4H),7.46-7.44(m,1H),7.32(s,1H),6.76-6.71(m,2H),6.48-6.44(m,1H),4.66(br s,1H),4.10(d,J＝6.0Hz,2H),3.91(s,3H),3.80(s,2H),1.06(s,6H)。
实施例28. 1-(2-甲氧基-2-甲基丙基)-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺的制备(化合物29)的制备
Figure BDA0003284159120001671
步骤1：1-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-吡咯-3-羧酸叔丁酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120001672
在0℃下向1-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-羧酸叔丁酯[根据实施例27所述的方法所制备](500mg,2.09mmol)于THF(3mL)中的溶液中加入MeMgBr(3M,2.79mL)。加入后，将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应混合物用NH4Cl(3mL)猝灭，然后用EtOAc(10mL x3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱(0-50％的乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱剂，40mL/分钟)纯化，并浓缩，得到呈浅黄色固体的中间体D(202mg,774.62μmol,37.07％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H-56]+＝184.1。
步骤2：1-(2-甲氧基-2-甲基丙基)-1H-吡咯-3-羧酸叔丁酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120001681
在0℃下向中间体D(50mg,208.93μmol)于DMF(1mL)中的溶液中加入NaH(16.71mg,417.87μmol,60％纯度)。加入后，将混合物在该温度下搅拌1小时，然后在0℃下加入MeI(44.48mg,313.40μmol,19.51μL)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物通过添加水(2mL)猝灭，并用EtOAc(5mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL x 3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色油状物的中间体E(50mg，粗品)，其不经进一步纯化即直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H-56]+＝198.1。
步骤3：1-(2-甲氧基-2-甲基丙基)-1H-吡咯-3-羧酸(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120001682
将中间体E(50mg,132.24μmol)于HCl/二噁烷(4M,330.59μL)中的混合物在25℃下搅拌12小时。将混合物在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体F(40mg，粗品)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝198.1。
步骤4：1-(2-甲氧基-2-甲基丙基)-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺的制备(化合物29)的制备
Figure BDA0003284159120001691
将中间体F(40mg,202.81μmol)、2-氨基-N-[4-[3-(1-甲基吡唑-3-基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺(根据实施例2中的方法所制备)(127.11mg,363.34μmol,HCl盐)、EDCI(77.76mg,405.62μmol)、HOBt(54.81mg,405.62μmol)和DIEA(131.06mg,1.01mmol,176.62μL)于DMF(1mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于25℃下搅拌1小时。将反应混合物通过添加水(2mL)猝灭，并用EtOAc(1mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(3mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(FA)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物29(12mg,24.12μmol,11.89％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝493.4。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.53-12.25(m,1H),8.39(s,1H),8.22-8.20(m,1H),7.83-7.68(m,4H),7.46-7.44(m,1H),7.29-7.27(m,1H),6.79-6.70(m,2H),6.51-6.39(m,1H),4.10(br d,J＝5.8Hz,2H),3.91(s,5H),3.17(s,3H),1.06(s,6H)。
实施例29. 1-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物30)的制备
Figure BDA0003284159120001701
步骤1：1-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-1H-吡咯-3-羧酸(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120001702
将1-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-1H-吡咯-3-羧酸叔丁酯[根据实施例26中所述的方法所制备](70mg,292.51μmol)、HCl/二噁烷(4M,731.27μL)的混合物脱气，然后将混合物在N2气氛下于25℃下搅拌12小时。将混合物在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体氢(50mg，粗品)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝184.1。
步骤2：1-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物30)的制备
Figure BDA0003284159120001711
将中间体H(50mg，272.92μmol)、2-氨基-N-[4-[3-(1-甲基吡唑-3-基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺(根据实施例2中的方法所制备)(128.29mg,409.38μmol)、DIEA(176.36mg,1.36mmol,237.68μL)、EDCI(104.64mg,545.84μmol)和HOBt(73.75mg,545.84μmol)于DMF(1mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于25℃下搅拌1小时。将反应混合物通过添加水(5mL)猝灭，并用EtOAc(3mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(3mL x2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(FA条件)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物30(10mg,20.90μmol,7.66％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝479.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.50-12.25(m,1H),8.39(s,1H),8.17-8.15(m,1H),7.87-7.65(m,4H),7.54-7.39(m,2H),6.94-6.92(m,1H),6.73(d,J＝2.4Hz,1H),6.51-6.42(m,1H),5.08-5.06(m,1H),4.10(d,J＝6.0Hz,2H),3.91(s,3H),3.49(d,J＝5.4Hz,2H),1.44(s,6H)。
实施例30.N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-甲基-1H-咪唑-5-甲酰胺(化合物31)的制备
Figure BDA0003284159120001712
步骤1：N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-甲基-1H-咪唑-5-甲酰胺(化合物31)的制备
Figure BDA0003284159120001721
向3-甲基咪唑-4-羧酸(24.41mg,193.56μmol)于DCM(1mL)中的溶液中加入HATU(88.32mg,232.28μmol)和DIEA(125.09mg,967.87μmol,168.58μL)，并将混合物在25℃下搅拌5分钟。然后加入2-氨基-N-[4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基]乙酰胺(根据实施例3中的方法所制备)(50mg,169.63μmol,HCl盐)，并将混合物在25℃下搅拌1小时。形成白色固体，通过过滤收集所形成的沉淀。将固体用MeOH(2mL)研磨，然后过滤并在真空中干燥，得到呈白色固体的化合物31(27.74mg,75.38μmol,44.44％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝367.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71-8.68(m,1H),8.33-8.32(m,1H),8.24-8.21(m,1H),7.87(s,1H),7.80-7.77(m,2H),7.67-7.64(m,2H),4.14(d,J＝6.0Hz,2H),3.80(s,3H)。
实施例31.N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(化合物32)的制备
Figure BDA0003284159120001722
步骤1：N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(化合物32)的制备
Figure BDA0003284159120001731
向2-氨基-N-[4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基]乙酰胺(根据实施例3中的方法所制备)(50mg,169.63μmol,HCl盐)于DCM(3mL)中的溶液中加入2-甲基吡唑-3-羧酸(21.39mg,169.63μmol)、HOBt(22.92mg,169.63μmol)、DIEA(65.77mg,508.89μmol,88.64μL)和EDCI(39.02mg,203.56μmol)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物浓缩至干燥，得到残余物。将残余物用MeOH(5mL)在25℃下研磨30分钟，过滤并在真空中干燥，得到呈白色固体的化合物32(22.07mg,59.42μmol,35.03％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝367.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.50(br s,1H),8.93-8.91(m,1H),8.37-8.30(m,1H),8.27-8.21(m,1H),7.89(s,1H),7.83-7.76(m,1H),7.70-7.63(m,1H),7.50(d,J＝2.0Hz,1H),6.94(d,J＝2.0Hz,1H),4.19-4.17(m,2H),4.06(s,3H)。
实施例32.N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物33)的制备
Figure BDA0003284159120001741
步骤1：N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物33)的制备
Figure BDA0003284159120001742
在25℃下向1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](21.97mg,116.14μmol)、EDCI(33.40mg,174.22μmol)、HOBt(23.54mg,174.22μmol)和DIPEA(45.03mg,348.43μmol,60.69μL)于DMF(0.5mL)中的溶液中加入2-氨基-N-[4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基]乙酰胺(根据实施例3中的方法所制备)(30mg,116.14μmol)。将反应混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物倒入水(2mL)中，并过滤，得到呈白色固体的粗所需化合物。将残余物溶解在DMSO(2mL)中，并通过制备型HPLC(流动相：[水(0.225％FA)-乙腈]；B％：40％-70％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物33(21.25mg,44.29μmol,38.14％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝430.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.43(br s,1H),8.67-8.65(m,1H),8.32(s,1H),8.23(d,J＝8.0Hz,1H),7.88-7.82(m,2H),7.79(d,J＝7.8Hz,1H),7.67-7.65(m,1H),7.31-7.30(m,1H),6.77-6.76(m,1H),4.14(d,J＝5.6Hz,2H),3.57(s,3H)。
实施例33.N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(2-氰基丙-2-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物34)的制备
Figure BDA0003284159120001751
步骤1：1-(氰基甲基)-1H-吡咯-3-羧酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001752
将1H-吡咯-3-羧酸叔丁酯(500mg,2.99mmol)、2-溴乙腈(430.42mg,3.59mmol,239.12μL)和苄基三丁基氯化铵(93.28mg,299.03μmol)于THF(10mL)中的混合物在N2气氛下于0℃下搅拌，然后加入NaH(179.42mg,4.49mmol,60％纯度)，并将反应混合物升温至25℃，并再搅拌2小时。将反应混合物倒入NH4Cl(15mL)中，并用EtOAc(15mL x 2)萃取，将合并的有机层用盐水(10mL x mL x 2)洗涤，然后在真空中浓缩，得到残余物。将残余物用反相HPLC(0.1％FA)纯化，将溶液EtOAc(15mL x 2)萃取，在真空中浓缩，得到呈黑褐色油状物的中间体C(304mg,1.36mmol,45.35％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H-56]+＝150.9；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.29-7.28(m,1H),6.68-6.67(m,1H),6.63-6.62(m,1H),4.82(s,2H),1.55(s,9H)。
步骤2：1-(2-氰基丙-2-基)-1H-吡咯-3-羧酸叔丁酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120001761
在0℃下向中间体C(304mg,1.36mmol)和MeI(769.93mg,5.42mmol,337.69μL)于THF(8mL)中的溶液中加入NaHMDS(1M,6.78mL)，然后将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物通过在25℃下添加NH4Cl(25mL)猝灭，然后用水(10mL)稀释，并用EtOAc(10mL x2)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL x 3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(0.1％FA)纯化，然后将溶液用EtOAc(10mL x 2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈棕色油状物的中间体D(285mg,1.12mmol,82.52％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H-56]+＝178.9。
步骤3：1-(2-氰基丙-2-基)-1H-吡咯-3-羧酸(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120001762
将中间体D(100mg,426.82μmol)溶解在HCl/二噁烷(4M,1mL)中，并将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩，得到呈棕色油状物的中间体E(76mg，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝178.9。
步骤4：N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(2-氰基丙-2-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物34)的制备
Figure BDA0003284159120001771
向中间体E(72.54mg,407.11μmol)、HATU(154.80mg,407.11μmol)和DIEA(175.39mg,1.36mmol,236.37μL)于DCM(2mL)中的溶液中加入2-氨基-N-[4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基]乙酰胺(根据实施例3中的方法所制备)(80mg,271.41μmol,HCl盐)，然后将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：46％-58％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物34(12.28mg,29.05μmol,10.70％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝419.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.40(s,1H),8.39-8.32(m,2H),8.23-8.21(m,1H),7.86(s,1H),7.80-7.78(m,1H),7.68-7.64(m,2H),7.15-7.14(m,1H),6.61-6.60(m,1H),4.12(d,J＝6.0Hz,2H),1.95(s,6H)。
实施例34. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物35)的制备
Figure BDA0003284159120001772
步骤1：1-(叔丁基)-1H-吡咯-3-甲醛(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001781
将2,5-二甲氧基四氢呋喃-3-甲醛(800mg,4.99mmol,707.96μL)和2-甲基丙-2-胺(365.30mg,4.99mmol,524.86μL)于CH3COOH(25mL)中的溶液在120℃下搅拌2小时。将混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(10mL x mL x 3)萃取。将合并的有机层用水(5mL x mL x3)和盐水(5mL x mL x 2)洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈黄色固体的中间体C(800mg，粗品)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝152.0；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.67(s,1H),7.39-7.38(m,1H),6.80-6.79(m,1H),6.57-6.56(m,1H),1.49(s,9H)。
步骤2：1-(叔丁基)-1H-吡咯-3-羧酸的制备(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120001782
将KMnO4(1.25g,7.94mmol)分批加入到中间体C(800mg,5.29mmol)于丙酮(40mL)和水(8mL)中的冷却(0℃)悬浮液中。每次少量添加都是在氧化剂的紫色消失后进行的。添加完成后，将混合物在30℃下搅拌2小时。将过量的高锰酸钾用38％的亚硫酸氢钠溶液猝灭，溶液用HCl(6N)酸化至pH＝4-5。将混合物用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用水(10mL×3)和盐水(10mL×2)洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过反相闪蒸(FA条件)纯化，并用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用水(10mL x 3)和盐水(10mL x 2)洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈白色固体的中间体D(400mg，粗品)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝168.0；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.53-7.42(m,1H),6.77-6.71(m,1H),6.56-6.55(m,1H),1.48(s,9H)。
步骤3：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物35)的制备
Figure BDA0003284159120001791
向中间体D(34.04mg,203.56μmol)于DCM(3mL)中的溶液中加入HATU(96.75mg,254.44μmol)和DIEA(65.77mg,508.89μmol,88.64μL)。然后加入2-氨基-N-[4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基]乙酰胺(根据实施例3中的方法所制备)(50mg,169.63μmol,HCl盐)。将混合物在30℃下搅拌2小时。将混合物用DCM(30mL)稀释，并用水(5mL x 3)和盐水(5mL x 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(10mMNH4HCO3)-乙腈乙腈]；B％：25％-55％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物35(6mg,14.72μmol,8.68％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝408.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.36(br s,1H),8.33(s,1H),8.24(d,J＝8.4Hz,1H),8.18(s,1H),7.87(s,1H),7.80(d,J＝7.8Hz,1H),7.70-7.63(m,1H),7.52-7.51(m,1H),6.98-6.96(m,1H),6.48-6.47(m,1H),4.10(d,J＝5.6Hz,2H),3.29(s,2H),1.50(s,9H)。
实施例35. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(化合物36)的制备
Figure BDA0003284159120001801
步骤1：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(化合物36)的制备
Figure BDA0003284159120001802
向2-氨基-N-[4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基]乙酰胺(根据实施例3中的方法所制备)(50mg,169.63μmol,HCl盐)和1-叔丁基吡唑-3-羧酸(34.24mg,203.56μmol)于DCM(2mL)中的溶液中加入HATU(77.40mg,203.56μmol)和DIEA(109.62mg,848.15μmol,147.73μL)，将混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物倒入MeOH(2mL)中，将溶液过滤，得到固体，将固体在真空下干燥，得到呈白色固体的化合物36(15.63mg,37.81μmol,22.29％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝409.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.44(s,1H),8.33-8.22(m,3H),7.94(d,J＝2.4Hz,1H),7.88(s,1H),7.80(d,J＝7.6Hz,1H),7.68-7.65(m,1H),6.65(d,J＝2.4Hz,1H),4.19(d,J＝6.0Hz,2H),1.58(s,9H)。
实施例36. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(化合物37)的制备
Figure BDA0003284159120001811
步骤1：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(化合物37)的制备
Figure BDA0003284159120001812
向2-氨基-N-[4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基]乙酰胺(根据实施例3中的方法所制备)(50mg,193.57μmol)和1-叔丁基吡唑-4-羧酸(39.07mg,232.29μmol)于DCM(2mL)中的溶液中加入HATU(88.32mg,232.29μmol)和DIEA(125.09mg,967.87μmol,168.59μL)，将混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.225％FA)-乙腈]；B％：29％-59％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物37(22.12mg,54.15μmol,27.98％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝409.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.42(s,1H),8.50-8.48(m,1H),8.32-8.31(m,2H),8.23-8.21(m,1H),7.88(d,J＝10.0Hz,2H),7.79(d,J＝7.6Hz,1H),7.67-7.64(m,1H),4.14(d,J＝6.0Hz,2H),1.53(s,9H)。
实施例37. 1-(2-氨基乙基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物38)的制备
Figure BDA0003284159120001821
步骤1：1-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-羧酸甲酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001822
在0℃下在N2下向1H-吡咯-3-羧酸甲酯(300mg,2.40mmol)于DMF(5mL)中的溶液中加入Cs2CO3(2.34g,7.19mmol)，并将混合物在0℃下搅拌0.5小时。然后加入(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯(805.94mg,3.60mmol)，并将混合物在80℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤，并将滤液蒸发至干燥。将残余物通过制备型HPLC(FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的中间体C(420mg,1.55mmol,64.64％产率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.34(s,1H),6.70-6.69(m,1H),6.49(br s,1H),4.01-3.98(m,2H),3.76(s,3H),3.36-3.33(m,2H),1.40(s,9H)。
步骤2：1-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-羧酸(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120001823
向中间体C(250mg,931.76μmol)于MeOH(1mL)中的溶液中加入NaOH水溶液(2M,559.06μL)，并将混合物在30℃下搅拌1小时。加入1.5ml HCl水溶液(1M)和水(30.0mL)，并将混合物用EtOAc(30.0mL x 3)萃取。将合并的有机物用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并将滤液蒸发至干燥，得到呈黄色油状物的中间体D(200mg,786.53μmol,84.41％产率)，其直接用于下一步骤。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.33(s,1H),6.70-6.69(m,1H),6.49(br s,1H),4.01-3.98(m,2H),3.36-3.33(m,2H),1.41(s,9H)。
步骤3：(2-(3-((2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酰基)-1H-吡咯-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120001831
向中间体D(50mg,196.63μmol)和2-氨基-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(根据实施例4中的方法所制备)(68.20mg,196.63μmol,HCl盐)于DMF(2mL)中的混合物中加入DIPEA(101.65mg,786.53μmol,137.00μL)。将混合物在30℃下搅拌15分钟，然后加入EDCI(56.54mg,294.95μmol)和HOBt(39.85mg,294.95μmol)，并在30℃下搅拌6小时。将反应溶液倒入H2O(3mL)中，并搅拌5分钟。通过过滤收集沉淀，并用MeOH(3mL)洗涤，在真空中干燥，得到呈白色固体的中间体F(90mg,163.00μmol,82.89％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝547.2。
步骤4：1-(2-氨基乙基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物38)的制备
Figure BDA0003284159120001841
向中间体F(40mg,73.17μmol)于DCM(0.5mL)中的混合物中加入TFA(166.87mg,1.46mmol,108.36μL)。将混合物在30℃下搅拌0.5小时。将反应混合物蒸发至干燥。将残余物在MTBE(5mL)中研磨，并搅拌5分钟。通过过滤收集沉淀，并用MTBE(5mL)洗涤，并在真空中干燥，得到呈黄色固体的化合物38(18.52mg,33.04μmol,45.15％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝447.1；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.85(d,J＝6.8Hz,2H),8.48-8.47(m,1H),8.36-8.34(m,2H),8.18(d,J＝8.0Hz,1H),7.90(d,J＝8.4Hz,1H),7.69-7.65(m,1H),7.62(s,1H),7.43-7.42(m,1H),6.86-6.85(m,1H),6.67-6.66(m,1H),4.29-4.26(m,4H),3.39-3.35(m,2H)。
实施例38.N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1-(哌啶-4-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物39)的制备
Figure BDA0003284159120001842
步骤1：4-(3-(甲氧羰基)-1H-吡咯-1-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001851
将1H-吡咯-3-羧酸甲酯(500mg,4.00mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(2.47g,7.99mmol)、乙酸铜(II)(870.95mg,4.80mmol)、2-(2-吡啶基)吡啶(624.10mg,4.00mmol)和Na2CO3(847.07mg,7.99mmol)于DMF(30mL)中的混合物在80℃下搅拌16小时。将混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(30mL x 3)萃取。将合并的有机层用水(15mL x 3)和盐水(15mL x 2)洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱(SiO2,PE:EtOAc＝20:1至1:1)纯化，得到呈黄色油状物的中间体C(360mg,1.18mmol,29.41％)。LCMS(ESI)m/z[M+H-56]+＝251.1；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.54-7.47(m,1H),6.89-6.85(m,1H),6.67-6.62(m,1H),5.77(br s,1H),4.09(br d,J＝2.8Hz,2H),3.83(s,3H),3.71-3.68(m,2H),2.64-2.50(m,2H),1.51(s,9H)。
步骤2：4-(3-(甲氧基羰基)-1H-吡咯-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120001852
向中间体C(300mg,979.25μmol)于MeOH(30mL)中的溶液中加入甲酸铵(617.48mg,9.79mmol)和Pd/C(200mg,10％纯度)。将混合物在70℃下搅拌16小时。将混合物用MeOH(30mL)稀释，并过滤除去Pd/C。将滤液在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体D(300mg，粗品)，其不经进一步纯化即直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+Na]+＝331.2；1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.29-7.28(m,1H),6.59-6.58(m,1H),6.54-6.48(m,1H),4.19(br d,J＝6.0Hz,2H),3.92-3.84(m,1H),3.72(s,3H),2.78-2.76(m,2H),1.98(br d,J＝12.0Hz,2H),1.78-1.68(m,2H),1.41(s,9H)。
步骤3：1-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-1H-吡咯-3-羧酸(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120001861
向中间体D(300mg,972.85μmol)于MeOH(10mL)中的溶液中加入水(10mL)和NaOH(38.91mg,972.85μmol)。将混合物在30℃下搅拌3小时。将混合物用水(50mL)稀释，并用EtOAc(10mL x 3)萃取。弃去有机层，用HCl(2M)处理水溶液，以将pH调节至6～7，然后用EtOAc(10mL x 5)萃取。将合并的有机层用水(5mL x 3)和盐水(5mL x 2)洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体E(140mg,475.63μmol,48.89％产率)，其不经进一步纯化即直接用于下一步。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36(br s,1H),6.58(br d,J＝17.2Hz,2H),4.21(br s,2H),3.92-3.86(m,1H),2.78-2.73(m,2H),1.98(br d,J＝11.4Hz,2H),1.81-1.65(m,2H),1.41(s,9H)。
步骤4：4-(3-((2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酰基)-1H-吡咯-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120001862
向中间体E(20mg,67.95μmol)于DMF(2mL)中的溶液中加入HATU(32.29mg,84.93μmol)和DIEA(21.95mg,169.87μmol)。然后加入2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺(根据实施例4中的方法所制备)(19.64mg,56.62μmol,HCl盐)。将混合物在30℃下搅拌2小时。将混合物倒入水(30mL)中，并用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用水(5mL x 3)和盐水(5mL x 2)洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体G(30mg，粗品)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝587.2。
步骤5：N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1-(哌啶-4-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物39)的制备
Figure BDA0003284159120001871
将中间体G(25mg,42.61μmol)于DCM(3mL)和TFA(0.5mL)中的混合物在30℃下搅拌2小时。将混合物用DCM(30mL)稀释，并在减压下浓缩。该操作重复了三次。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：5％-35％，9分钟)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物39(15.28mg,25.44μmol,59.70％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝487.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.39(s,1H),8.82(d,J＝6.4Hz,2H),8.73(br d,J＝10.0Hz,1H),8.46(br d,J＝10.0Hz,1H),8.38(s,1H),8.28-8.25(m,1H),8.07(d,J＝7.8Hz,1H),8.03(d,J＝6.2Hz,2H),7.88-7.83(m,2H),7.66-7.63(m,1H),7.42-7.41(m,1H),6.87-6.86(m,1H),6.55-6.54(m,1H),4.35-4.23(m,1H),4.12(br d,J＝5.6Hz,2H),3.43(br d,J＝12.8Hz,2H),3.13-2.99(m,2H),2.18(br d,J＝12.2Hz,2H),2.07-1.91(m,2H)。
实施例39. 1-((2-氨基乙基)磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物40)的制备
Figure BDA0003284159120001881
步骤1：2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙磺酸四丁基铵(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120001882
将2-氨基乙磺酸(1.25g,9.99mmol,1.25mL)溶于H2O(10mL)中，然后加入四丁基铵；氢氧化物(6.48g,9.99mmol,8.10mL,40％纯度)。然后滴加于丙酮(30mL)中的Boc2O(2.18g,9.99mmol,2.29mL)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物在减压下浓缩以除去丙酮。将水层用DCM(20mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈无色油状物的中间体B(4g，粗品)。
步骤2：(2-(氯磺酰基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001883
在20℃下在N2下向中间体B(1.8g,3.86mmol)于DCM(13mL)中的溶液中一次性加入三光气(457.79mg,1.54mmol)和DMF(28.19mg,385.67μmol,29.67μL)。将混合物在20℃下搅拌0.5小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物溶解在PE/EtOAc(2:1,v/v,5mL)中，然后通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝2:1)纯化，并在减压下浓缩，得到呈白色固体的中间体C(500mg，粗品)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.11(br s,1H),3.92-3.90(m,2H),3.80-3.76(m,2H),1.46(s,9H)。
步骤3：1-((2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)磺酰基)-1H-吡咯-3-羧酸甲酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120001891
在0℃下在N2下向THF(2mL)中的1H-吡咯-3-羧酸甲酯(100mg，799.20μmol)中加入NaH(95.89mg,2.40mmol,60％纯度)。将混合物在0℃下搅拌30分钟，然后将中间体C(233.73mg,959.04μmol)加入该溶液中，加热至20℃，并搅拌0.5小时。将反应混合物通过在20℃下添加20mLNH4Cl猝灭，并用EtOAc(20mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(30Ml)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将反应物通过反相(NH3·H2O)纯化，在减压下浓缩除去MeCN，并用EtOAc 30mL(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈浅黄色固体的中间体E(100mg,288.83μmol,36.14％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.72-7.71(m,1H),7.10-7.09(m,1H),6.78-6.77(m,1H),4.86(br s,1H),3.85(s,3H),3.52(br s,4H),1.41(s,9H)。
步骤4：1-((2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)磺酰基)-1H-吡咯-3-羧酸(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120001901
向中间体E(50mg,150.43μmol)于MeOH(0.2mL)和THF(0.1mL)中的溶液中加入NaOH(2M,225.65μL)。将混合物在25℃下搅拌0.5小时。将反应混合物用2N HCl酸化至pH＝6-7，然后将混合物在真空中浓缩，得到呈黄色固体的中间体F(50mg，粗品)。LCMS(ESI)m/z[M+H-100]+＝218.2。
步骤5：(2-((3-((2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酰基)-1H-吡咯-1-基)磺酰基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120001902
向中间体F(49.23mg,154.65μmol)、HATU(58.80mg,154.65μmol)和DIEA(99.94mg,773.26μmol,134.69μL)于DCM(0.6mL)中的溶液中加入2-氨基-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(根据实施例4中的方法所制备)(40mg,115.33μmol,HCl盐)。将混合物在25℃下搅拌2小时。然后将混合物在减压下浓缩，得到残余物。通过反相HPLC(0.1％NH3·H2O)纯化粗产物。将溶液在真空中浓缩以除去MeCN，然后用EtOAc(50mL x 3)萃取水层。将合并的有机相在真空中浓缩，得到呈黄色固体的中间体H(20mg,28.29μmol,21.95％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝611.2。
步骤6：1-((2-氨基乙基)磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物40)的制备
Figure BDA0003284159120001911
将中间体H(20mg,32.75μmol)于TFA(0.05mL)和DCM(0.5mL)中的混合物在N2气氛下于25℃下搅拌1小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：5％-35％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物40(6.76mg,13.24μmol,40.43％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝511.1；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.86-8.84(m,2H),8.47(s,1H),8.37-8.35(m,2H),8.18(d,J＝8.30Hz,1H),7.91-7.87(m,2H),7.69-7.65(m,1H),7.63(s,1H),7.36-7.35(m,1H),6.90-6.89(m,1H),4.28(s,2H),3.92-3.88(m,2H),3.33-3.30(m,2H)。
实施例40. 1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物41)的制备
Figure BDA0003284159120001912
步骤1：1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物41)的制备
Figure BDA0003284159120001921
向1-(叔丁基)-1H-吡咯-3-羧酸[根据实施例34中的方法所制备](36.16mg,216.24μmol)于DCM(3mL)中的溶液中加入HATU(82.22mg,216.24μmol)和DIEA(55.89mg,432.48μmol,75.33μL)。然后加入2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺[根据实施例4中的方法所制备](50mg,144.16μmol,HCl盐)。将混合物在30℃下搅拌2小时。将混合物用DCM(30mL)稀释，并用水(5mL x 3)和盐水(5mL x 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：25％-55％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物41(23.32mg,40.66μmol,28.20％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝460.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.36(s,1H),8.85(br d,J＝6.6Hz,2H),8.40(s,1H),8.21-8.16(m,1H),8.15-8.06(m,3H),7.90-7.83(m,2H),7.68-7.62(m,1H),7.53(s,1H),6.98-6.97(m,1H),6.50-6.46(m,1H),4.11(d,J＝6.0Hz,2H),1.50(s,9H)。
实施例41. 1-(1-氨基-2-甲基丙-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物42)的制备
Figure BDA0003284159120001931
步骤1：1-[2-(叔丁氧基羰基氨基)-1,1-二甲基-乙基]吡咯-3-羧酸甲酯(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120001932
在0℃下向1-(2-氰基丙-2-基)-1H-吡咯-3-羧酸甲酯[根据实施例33中的方法所制备](2g,9.47mmol,1当量)和NiCl2.6H2O(5.63g,23.67mmol)于MeOH(50mL)中的溶液中加入NaBH4(3.58g,94.69mmol)并搅拌1小时，然后向反应混合物中加入TEA(2.87g,28.41mmol,3.95mL)和Boc2O(4.13g,18.94mmol,4.35mL)，并在25℃下再搅拌2小时。将反应混合物用HCl水溶液(2M)酸化至pH＝5，用EtOAc(150mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝50/1至5:1)纯化，并在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体F(1.93g,6.19mmol,65.34％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H-100]+＝197.3。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.44(s,1H),6.76(s,1H),6.62(s,1H),4.30(s,1H),3.80(s,3H),3.41(s,2H),1.53(s,6H),1.40(s,9H)。
步骤2：1-[2-(叔丁氧基羰基氨基)-1,1-二甲基-乙基]吡咯-3-羧酸(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120001941
将中间体F(1.87g,6.31mmol)和NaOH(2M,6.31mL)于MeOH(20mL)中的溶液在25℃下搅拌2小时，然后向反应混合物中加入另一批NaOH(504.75mg,12.62mmol)。将反应混合物在55℃下再搅拌2小时。将反应混合物用HCl水溶液(2M)调节至pH＝6，并用EtOAc(50mL x3)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL x 3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物用反相HPLC(FA条件)纯化，将合并的级分用EtOAc(100mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(255mL x 3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色油状物的中间体G(1.47g,5.21mmol,82.51％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+23]+＝305.0。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.49(s,1H),6.89(d,J＝5.6Hz,1H),6.51(d,J＝5.2Hz,1H),3.32(s,2H),1.52(s,6H),1.39(s,9H)。
步骤3：(2-甲基-2-(3-((2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酰基)-1H-吡咯-1-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体I)的制备
Figure BDA0003284159120001942
向中间体G(97.68mg,345.99μmol)、EDCI(66.33mg,345.99μmol)、HOBt(46.75mg,345.99μmol)和DIEA(186.32mg,1.44mmol,251.10μL)于DCM(2mL)中的溶液中加入2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺[根据实施例4中的方法所制备](100mg,288.32μmol,HCl盐)，然后将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩，得到残余物。将残余物用MeOH(10mL)在25℃下研磨15分钟，然后过滤并在真空中干燥，得到呈白色固体的中间体I(70mg,110.84μmol,38.44％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝575.5。
步骤4：1-(1-氨基-2-甲基丙-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物42)的制备
Figure BDA0003284159120001951
将中间体I(68mg,118.32μmol)于HCl/二噁烷(1mL)中的溶液在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩，得到残余物。将残余物通过反相HPLC(0.1％FA)纯化，将级分冻干，得到呈白色固体的化合物42(26.23mg,48.87μmol,41.30％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝475.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69-8.68(m,2H),8.31-8.30(m,1H),8.23-8.20(m,2H),8.03-8.00(m,1H),7.83-7.76(m,4H),7.62-7.58(m,1H),7.50(s,1H),6.94(s,1H),6.51(s,1H),4.10(d,J＝6.0Hz,2H),2.83(s,2H),1.46(s,6H)。
实施例42. 1-异丙基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物43)的制备
Figure BDA0003284159120001961
步骤1：1-异丙基磺酰基吡咯-3-羧酸甲酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001962
在0℃下在N2下向1H-吡咯-3-羧酸甲酯(500mg,4.00mmol)于THF(20mL)中的溶液中缓慢加入KHMDS(1M,7.99mL)。将反应混合物在0℃下在N2下搅拌30分钟。然后在0℃下在N2下向反应混合物中缓慢加入丙烷-2-磺酰氯(683.82mg,4.80mmol,534.23μL)。将反应混合物升温至30℃，并在30℃下在N2下搅拌16小时。将反应混合物缓慢倒入H2O(100mL)中，并用EtOAc(100mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相柱(FA条件)纯化，并冻干，得到呈白色固体的中间体C(490mg,2.12mmol,53％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝232.0；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.70-7.69(m,1H),7.07-7.06(m,1H),6.75-6.74(m,1H),3.85(s,3H),3.49-3.39(m,1H),1.36(d,J＝6.8Hz,6H)。
步骤2：1-异丙基磺酰基吡咯-3-羧酸(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120001963
在25℃下向中间体C(490mg,2.12mmol)于THF(10mL)和MeOH(5mL)中的混合物中加入LiOH.H2O(266.73mg,6.36mmol)于H2O(5mL)中的溶液。将反应混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物通过添加HCl水溶液(1M)至pH＝4猝灭，并用EtOAc(20mL x 4)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相柱(FA条件)纯化，得到呈白色固体的中间体D(360mg,1.66mmol,78％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝218.0；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.80-7.79(m,1H),7.12-7.11(m,1H),6.80-6.79(m,1H),3.53-3.42(m,1H),1.39(d,J＝7.2Hz,6H)。
步骤3：1-异丙基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物43)的制备
Figure BDA0003284159120001971
在30℃下向中间体D(17.00mg,78.27μmol)于DCM(1mL)中的混合物中加入DIPEA(50.58mg,391.34μmol,68.16μL)、HATU(44.64mg,117.40μmol)和2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺[根据实施例4中的方法所制备](30mg,78.27μmol,2HCl盐)。将反应混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤，并将滤饼用DCM(5mL)和MeOH(2mL)洗涤，得到呈黄色固体的化合物43(8.59mg,15.85μmol,20％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝510.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.43(br s,1H),8.72-8.69(m,3H),8.31(s,1H),8.02(d,J＝8.0Hz,1H),7.83-7.82(m,2H),7.77-7.76(m,3H),7.62-7.58(m,1H),7.30-7.27(m,1H),6.80-6.79(m,1H),4.16(d,J＝5.6Hz,2H),3.91-3.85(m,1H),1.24(d,J＝6.8Hz,6H)。
实施例43. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(化合物44)的制备
Figure BDA0003284159120001981
步骤1：N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120001982
向1H-吡唑-4-羧酸(60mg,535.30μmol)、2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺[根据实施例4中的方法所制备](166.14mg,479.03μmol,HCl盐)和DIEA(345.92mg,2.68mmol,466.20μL)于DMF(3mL)中的混合物中加入HOBt(86.80mg,642.36μmol)和EDCI(123.14mg,642.36μmol)，然后将混合物在N2气氛下于25℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入水(5mL)中，过滤并在空气中干燥滤饼以得到粗产物。将粗产物用MeOH(3mL)在25℃下研磨30分钟，过滤并在真空中干燥，得到呈白色固体的中间体C(140mg,318.46μmol,59.49％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝405.0。
步骤2：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(化合物44)的制备
Figure BDA0003284159120001991
向中间体C(50mg,123.63μmol)于THF(2mL)中的溶液中加入TEA(100.08mg,989.01μmol,137.66μL)并逐滴MsCl(42.48mg,370.88μmol,28.71μL)。将混合物在25℃下搅拌0.5小时。将反应混合物用3mL水稀释，形成一些沉淀，过滤混合物得到滤饼，将其在空气中干燥，得到粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(流动相:[水(0.1％TFA)-乙腈；B％：13％-37％)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物44(35.18mg,57.20μmol,46.27％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝482.9；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.47(s,1H),8.95-8.92(m,1H),8.82-8.81(m,3H),8.37(s,1H),8.29(s,1H),8.08-8.05(m,3H),7.86-7.84(d,J＝8.8Hz,2H),7.66-7.62(m,1H),4.19-4.18(d,J＝6Hz,2H),3.64(s,3H)。
实施例44. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(化合物45)的制备
Figure BDA0003284159120001992
步骤1：1H-吡唑-3-羧酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002001
在80℃下向1H-吡唑-3-羧酸(600mg,5.35mmol)于甲苯(10mL)中的溶液中加入1,1-二叔丁氧基-N,N-二甲基甲胺(4.35g,21.41mmol,5.13mL)，将混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入水(50.0mL)中，并用EtOAc(50.0mL x 3)萃取。将合并的有机物用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并将滤液蒸发至干燥。向残余物中加入MTBE(10mL)并搅拌10分钟，然后过滤并在真空中干燥，得到呈黄色固体的中间体C(600mg,3.46mmol,64.64％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+Na]+＝191.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.77-13.34(m,1H),7.80-7.57(m,1H),6.72-6.64(m,1H),1.51(s,9H)。
步骤2：1-(甲基磺酰基)-1H-吡唑-3-羧酸叔丁酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002002
在0℃于N2下向中间体C(150mg,891.83μmol)于THF(3mL)中的溶液中加入TEA(270.73mg,2.68mmol,372.40μL)，将混合物在0℃下搅拌10分钟。然后加入MsCl(132.81mg,1.16mmol,89.74μL)，并将混合物在30℃下搅拌1小时。将反应混合物倒入冷的NH4Cl溶液(50.0mL)中，并用EtOAc(30mL x 3)萃取。将合并的有机物用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈黄色固体的中间体D(210mg，粗品)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H-56]+＝190.8。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.24(d,J＝2.8Hz,1H),6.88(d,J＝2.4Hz,1H),3.49(s,3H),1.60(s,9H)。
步骤3：1-(甲基磺酰基)-1H-吡唑-3-羧酸(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120002011
向中间体D(100mg,406.04μmol)于DCM(3mL)中的混合物中加入TFA(462.98mg,4.06mmol,300.63μL)。将混合物在30℃下搅拌1小时。将反应混合物蒸发至干燥，得到呈黄色固体的中间体E(75mg，粗品)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.27(d,J＝2.8Hz,1H),6.95(d,J＝2.8Hz,1H),3.51(s,3H)。
步骤4：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(化合物45)的制备
Figure BDA0003284159120002012
向中间体E(70mg,368.08μmol)和2-氨基-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺[根据实施例4中的方法所制备](140.43mg,404.89μmol,HCl盐)于DMF(1mL)中的混合物中加入DIPEA(190.29mg,1.47mmol,256.45μL)。将混合物在30℃下搅拌15分钟，然后加入EDCI(105.84mg,552.12μmol)和HOBt(74.60mg,552.12μmol)，并在30℃下搅拌1小时。将反应混合物倒入水(30.0mL)中，并用EtOAc(30.0mL x 3)萃取。将合并的有机物用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并将滤液蒸发至干燥。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.225％FA)-乙腈]；B％：10％-40％)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物45(45mg,85.14μmol,23.13％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝483.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.48(br s,1H),8.85-8.82(m,1H),8.68-8.67(m,2H),8.41(d,J＝2.8Hz,1H),8.30(s,1H),8.01(d,J＝8.0Hz,1H),7.82(s,1H),7.77-7.75(m,3H),7.61-7.57(m,1H),6.96(d,J＝2.8Hz,1H),4.20(d,J＝6.0Hz,2H),3.68(s,3H)。
实施例45. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-甲酰胺(化合物46)的制备
Figure BDA0003284159120002021
步骤1：N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-甲酰胺(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002022
向2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺[根据实施例4中的方法所制备](250mg,720.81μmol,HCl盐)和1H-咪唑-4-羧酸(105.03mg,937.05μmol)于DMF(4mL)中的混合物中加入DIEA(372.63mg,2.88mmol,502.19μL)、EDCI(207.27mg,1.08mmol)和HOBt(146.09mg,1.08mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌4小时。将混合物倒入水(30mL)中，以及通过过滤收集沉淀。将沉淀在MeOH(10mL)中研磨并搅拌5分钟。然后通过过滤收集沉淀，并用MTBE(2mL)洗涤，并于真空中干燥，得到呈黄色固体的中间体C(180mg,417.86μmol,57.97％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝405.2。
步骤2：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-甲酰胺(化合物46)的制备
Figure BDA0003284159120002031
在25℃下向中间体C(100mg,247.25μmol)于吡啶(2mL)中的混合物中缓慢加入MsCl(1.42g,12.36mmol,956.86μL)，然后将混合物在25℃下搅拌0.5小时。将混合物倒入水(50mL)中，通过过滤收集沉淀。将沉淀在MeOH(10mL)中研磨并搅拌5分钟。然后通过过滤收集沉淀，并用MTBE(3mL)洗涤，在真空中干燥，得到呈黄色固体的化合物46(56.32mg,115.20μmol,46.59％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝482.8；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.44(s,1H),8.70-8.68(m,2H),8.59-8.56(m,1H),8.32-8.30(m,2H),8.15(d,J＝1.2Hz,1H),8.02-8.00(m,1H),7.83(s,1H),7.80-7.76(m,3H),7.62-7.58(m,1H),4.15(d,J＝6.0Hz,2H),3.77(s,3H)。
实施例46. 1-(N,N-二甲基氨磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物47)的制备
Figure BDA0003284159120002032
步骤1：1-(N,N-二甲基氨磺酰基)-1H-吡咯-3-羧酸甲酯(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120002041
在0℃下向1H-吡咯-3-羧酸甲酯(100mg,799.20μmol)于THF(3mL)中的溶液中加入KHMDS(1M,1.60mL)。将混合物在0℃下在N2下搅拌30分钟。在N2下，在0℃下加入N,N-二甲基氨磺酰氯(137.71mg,959.04μmol,102.77μL)，并将混合物在20℃下搅拌16小时。将反应通过添加水(10mL)猝灭，并将所得混合物用EtOAc(15mLx2)萃取。将合并的有机相用水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩\，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝2/1)纯化，得到呈无色油状物的中间体B(60mg,258.34μmol,32.32％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝233.2；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.70(dd,J＝2.0Hz,1.6Hz,1H)7.07(dd,J＝3.2Hz,2.0Hz,1H),6.73(dd,J＝3.2Hz,1.6Hz,1H),3.86(s,3H),2.86(s,6H)。
步骤2：1-(N,N-二甲基氨磺酰基)-1H-吡咯-3-羧酸(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002042
向中间体B(50mg,215.28μmol)于MeOH(2mL)和H2O(2mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(18.07mg,430.56μmol)。将混合物在20℃下搅拌16小时。用1N HCl溶液将反应混合物的pH调节至4，并将所得混合物用EtOAc(15mLx2)萃取。将合并的有机相用水(5mL)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩，得到呈黄色固体的中间体C(35mg,160.38μmol,74.50％产率)。该产物不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝219.2；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.69(m,1H)7.00(dd,J＝3.2Hz,1.6Hz,1H),6.68(dd,J＝3.2Hz,1.6Hz,1H),2.79(s,6H)。
步骤3：1-(N,N-二甲基氨磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物47)的制备
Figure BDA0003284159120002051
向中间体C(30mg,137.47μmol)于DCM(3mL)中的溶液中加入DIPEA(53.30mg,412.41μmol,71.83μL)和HATU(62.72mg,164.96μmol)。将混合物在20℃下搅拌10分钟。加入2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺[根据实施例4中的方法所制备](47.68mg,137.47μmol，HCl盐)，并将混合物在20℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤，并将滤饼用DCM(10mL)洗涤，在真空中干燥，得到呈白色固体的化合物47(44.55mg,85.84μmol,62.44％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝511.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.44(br s,1H),8.72-8.64(m,3H),8.31(s,1H),8.02(d,J＝8.0.Hz,1H),7.86-7.80(m,2H),7.79-7.74(m,3H),7.65-7.56(m,1H),7.29(d,J＝3.2Hz,2.0Hz,1H),6.76(d,J＝3.2Hz,2.0Hz,1H),4.16(m,2H),2.81(s,6H)。
实施例47.N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物48)的制备
Figure BDA0003284159120002061
在30℃下向1H-吡咯-3-羧酸(20mg,180.02μmol)于DCM(2mL)中的混合物中加入DIPEA(116.33mg,900.10μmol,156.78μL)、HATU(102.67mg,270.03μmol)和2-氨基-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺[根据实施例4中的方法所制备](69.00mg,180.02μmol,2HCl盐)。将反应混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤，并将滤饼用DCM(10mL)和MeOH(3mL)洗涤，得到棕色固体，将所述棕色固体通过制备型HPLC(流动相：[水(10mMNH4HCO3)-乙腈]；B％：23％-53％)进一步纯化，得到呈白色固体的化合物48(2.03mg,4.89μmol,2.72％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝404.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.30(brs,1H),11.18(br s,1H),8.69-8.67(m,2H),8.31(s,1H),8.18-8.17(m,1H),8.02(d,J＝8.0Hz,1H),7.81(s,1H),7.77-7.75(m,3H),7.62-7.58(m,1H),7.36-7.35(m,1H),6.79-6.77(m,1H),6.51-6.50(m,1H),4.11(d,J＝6.0Hz,2H)。
实施例48. 1-甲基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物49)的制备
Figure BDA0003284159120002062
在30℃下向1-甲基-1H-吡咯-3-羧酸(10.82mg,86.50μmol)于DCM(1mL)中的混合物中加入DIPEA(55.89mg,432.48μmol,75.33μL)、HATU(49.33mg,129.75μmol)和2-氨基-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺[根据实施例4中的方法所制备](30mg,86.50μmol,HCl盐)。将反应混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤，并将滤饼用DCM(5mL)和MeOH(2mL)洗涤，得到黄色固体。将黄色固体通过制备型HPLC(流动相：[水(10mMNH4HCO3)-乙腈]；B％：23％-56％，11分钟)纯化，得到黄色固体。将黄色固体通过制备型HPLC(流动相:[水(0.225％FA)-乙腈]；B％：20％-50％)进一步纯化，得到呈白色固体的化合物49(9.2mg,19.44μmol,22.47％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝418.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.33(br s,1H),8.68(d,J＝6.0Hz,2H),8.30(s,1H),8.18-8.16(m,1H),8.01(d,J＝8.0Hz,1H),7.81(s,1H),7.76-7.74(m,3H),7.61-7.57(m,1H),7.28(s,1H),6.73-6.71(m,1H),6.47-6.46(m,1H),4.09(d,J＝5.6Hz,2H),3.64(s,3H)。
实施例49. 1-乙酰基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物50)的制备
Figure BDA0003284159120002071
步骤1：1-乙酰基-1H-吡咯-3-羧酸(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120002072
在0℃下在N2下向1H-吡咯-3-羧酸(50mg,450.05μmol)于DMF(2mL)溶液中加入NaH。将反应混合物在0℃下搅拌30分钟。在0℃下向反应混合物中滴加Ac2O(50.54mg,495.05μmol,46.37μL)。将反应混合物升温至30℃，并在30℃下搅拌16小时。将反应混合物缓慢倒入H2O(2mL)中。向混合物中加入HCl(2M)并调节pH＝2，得到红色溶液。将红色溶液通过反相柱(FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的中间体B(25mg,135.69μmol,30.15％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝154.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.91-7.90(m,1H),7.50-7.43(m,1H),6.56-6.55(m,1H),2.60(s,3H)。
步骤2：1-乙酰基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物50)的制备
Figure BDA0003284159120002081
在30℃下向中间体B(15mg,97.95μmol)于DCM(1mL)中的混合物中加入DIPEA(63.30mg,489.76μmol,85.31μL)、HATU(55.87mg,146.93μmol)和2-氨基-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺[根据实施例4中的方法所制备](33.97mg,97.95μmol,HCl盐)。将反应混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤，并将滤饼用DCM(5mL)和MeOH(2mL)洗涤，得到黄色固体。将黄色固体通过制备型HPLC(流动相:[水(0.225％FA)-乙腈]；B％：12％-36％)进一步纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物50(7.59mg,15.44μmol,15.76％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝446.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.25(br s,1H),8.69-8.67(m,2H),8.64-8.61(m,1H),8.44(br s,1H),8.31(s,1H),8.03-8.00(m,2H),7.82(s,1H),7.77-7.76(m,3H),7.62-7.58(m,1H),7.48-7.46(m,1H),6.71-6.70(m,1H),4.16(d,J＝5.6Hz,2H),2.61(s,3H)。
实施例50.N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-甲酰胺(化合物51)的制备
Figure BDA0003284159120002091
向1H-咪唑-4-羧酸(15mg,133.82μmol)和2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺[根据实施例4中的方法制备](46.41mg,133.82μmol,HCl盐)在DCM(1mL)中的混合物中加入DIEA(51.89mg,401.47μmol,69.93μL)和HATU(61.06mg,160.59μmol)。将所得混合物在30℃下搅拌1小时。通过过滤收集沉淀。将固体在MeOH(2mL)中制成浆液，并搅拌5分钟。通过过滤收集沉淀。然后将固体通过制备型HPLC(流动相：[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：1％-30％)进一步纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物51(5.44mg,13.45μmol,10.05％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝405.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.50(s,1H),8.87-8.82(m,3H),8.55(s,1H),8.40-8.38(m,1H),8.10-7.85(m,7H),7.67-7.63(m,1H),4.23(d,J＝5.6Hz,2H)。
实施例51. 1-甲基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-咪唑-4-甲酰胺(化合物52)的制备
Figure BDA0003284159120002092
向1-甲基-1H-咪唑-4-羧酸(21.82mg,172.99μmol)、HATU(65.78mg,172.99μmol)和DIEA(93.16mg,720.81μmol,125.55μL)于DCM(0.5mL)中的溶液中加入2-氨基-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺[根据实施例4中的方法所制备](50mg,144.16μmol,HCl盐)，将混合物在30℃下搅拌1小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物用MeOH(5.0mL)研磨，过滤，在真空中干燥，得到呈灰色固体的化合物52(32.73mg,77.90μmol,54.04％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝419.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.36(br s,1H),8.68-8.66(m,2H),8.30-8.29(m,1H),8.21-8.18(m,1H),8.01(d,J＝8.0Hz,1H),7.82(s,1H),7.76-7.74(m,3H),7.69-7.66(m,2H),7.61-7.57(m,1H),4.16(d,J＝6.0Hz,2H),3.70(s,3H)。
实施例52.N-(2-((4-(3’-(氨基甲基)-[1,1’-联苯基]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物53)的制备
Figure BDA0003284159120002101
步骤1：3-溴苄基氨基甲酸叔丁酯(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120002102
向(3-溴苯基)甲胺(3.7g,19.89mmol)于THF(20mL)中的溶液中加入NaHCO3(3.34g,39.77mmol,1.55mL)和Boc2O(4.77g,21.88mmol,5.03mL)，将混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤，得到滤液。将滤液浓缩，得到呈白色固体的中间体B(5.6g,16.67mmol,83.85％产率)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H-56]+＝231.9。
步骤2：3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基氨基甲酸叔丁酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002111
向中间体B(5.6g,16.67mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(5.08g,20.01mmol)于二噁烷(60mL)中的溶液中加入二氯1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁钯(II)二氯甲烷(1.36g,1.67mmol)和KOAc(4.91g,50.02mmol)，将混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入水(100mL)中，将溶液用EtOAc(100mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4干燥并过滤。浓缩滤液，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2石油醚/EtOAc＝1:0-10:1)纯化，并在真空中浓缩，得到呈白色固体的中间体D(5.5g,16.51mmol,98.98％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.58(s,1H),7.53(d,J＝6.8Hz,1H),7.35-7.32(m,3H),4.13(d,J＝6.0Hz,2H),1.39(s,9H),1.29(s,12H)。
步骤3：((3’-(2-(2-(1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)-[1,1’-联苯基]-3-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120002112
向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(根据实施例1中的方法所制备)(500mg,1.03mmol)和中间体D(413.64mg,1.24mmol)于二噁烷(5mL)和H2O(0.5mL)中的溶液中加入Pd(dppf)Cl2(75.69mg,103.44μmol)和K2CO3(428.89mg,3.10mmol)，将混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物浓缩，得到残余物。将粗产物通过反相HPLC(0.1％FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的中间体F(600mg，粗品)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝610.2。
步骤4：N-(2-((4-(3’-(氨基甲基)-[1,1’-联苯基]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物53)的制备
Figure BDA0003284159120002121
将中间体F(400mg,656.04μmol)于HCl/二噁烷(5mL)中的混合物在30℃下搅拌2小时。将反应混合物浓缩，得到残余物。将残余物用MTBE(2mL)研磨，然后过滤，得到黄色固体。将黄色固体通过两次制备型HPLC(流动相：[水(0.05％HCl)-乙腈]；B％：18％-38％)以及然后(流动相:[水(0.225％FA)-乙腈]；B％：10％-40％)纯化，将溶液冻干，得到呈白色固体的化合物53(68.49mg,134.40μmol,56.45％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝510.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69-8.67(m,1H),8.33(s,1H),8.20(s,1H),7.90(d,J＝8.0Hz,1H),7.85-7.83(m,1H),7.75(s,2H),7.64-7.60(m,2H),7.55-7.52(m,1H),7.49-7.45(m,1H),7.40-7.38(m,1H),7.32-7.30(m,1H),6.78(dd,J＝1.6,3.2Hz,1H),4.15(d,J＝5.6Hz,2H),3.92(s,2H),3.57(s,3H)。
实施例53. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(2-(哌嗪-1-基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物54)的制备
Figure BDA0003284159120002131
在N2下向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(根据实施例1中的方法所制备)(50mg,96.26μmol)和1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2-吡啶基]哌嗪(41.76mg,144.40μmol)于二噁烷(0.5mL)和H2O(0.05mL)中的溶液中加入K3PO4(61.30mg,288.79μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(12.55mg,19.25μmol)。将反应混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入水中(5mL)，将溶液用EtOAc(5mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥并过滤。浓缩滤液，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.225％FA)-乙腈]；B％：10％-34％)纯化，得到呈白色固体的化合物54(18.81mg,33.25μmol,34.54％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝566.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(br t,J＝5.6Hz,1H),8.67-8.26(m,3H),8.22-8.20(m,1H),7.85(s,1H),7.81(s,1H),7.71(br d,J＝7.6Hz,1H),7.62-7.52(m,1H),7.32(dd,J＝2.4,3.2Hz,1H),7.08(s,1H),6.99(d,J＝5.2Hz,1H),6.78-6.77(m,1H),4.15(d,J＝5.6Hz,2H),3.58(s,7H),2.88(br s,4H)。
实施例54.N-(2-((4-(3',5’-二甲基-[1,1’-联苯基]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物55)的制备
Figure BDA0003284159120002132
在25℃下在N2下向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(根据实施例1中的方法所制备)(100mg,206.89μmol)、(3,5-二甲基苯基)硼酸(62.06mg,413.77μmol)和K3PO4(131.74mg,620.66μmol)于二噁烷(0.8mL)和H2O(0.2mL)中的溶液中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(13.48mg,20.69μmol)。将反应混合物在80℃下在N2下搅拌16小时。将反应混合物倒入水(10mL)中，并用EtOAc(10mL x 3)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，然后浓缩，得到棕色固体。将棕色固体用DMSO(2mL)溶解，并通过反相HPLC(FA)纯化，然后浓缩并冻干，得到呈灰白色固体的化合物55(57.31mg,110.37μmol,53.35％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝509.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.40(br s,1H),8.67-8.66(m,1H),8.16(s,1H),7.87(d,J＝7.8Hz,1H),7.84-7.83(m,1H),7.75(s,1H),7.58(d,J＝7.8Hz,1H),7.53-7.46(m,1H),7.31(s,3H),7.02(s,1H),6.77-6.76(m,1H),4.14(d,J＝5.6Hz,2H),3.57(s,3H),2.35(s,6H)。
实施例55. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(3-甲基异噁唑-5-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物56)的制备
Figure BDA0003284159120002141
在N2气氛下向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-叔丁基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例8中的方法所制备](70mg,151.72μmol)于二噁烷(1mL)和水(0.2mL)中的溶液中加入3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)异噁唑(38.06mg,182.06μmol)和K3PO4(96.62mg,455.16μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(9.89mg,15.17μmol)。将混合物在100℃下搅拌2小时。将混合物用水(3mL)稀释，并用EtOAc(10mL x 3)萃取。将有机层经无水Na2SO4干燥并浓缩，得到残余物。将残余物通过反相HPLC(0.1％NH3·H2O)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物56(2.53mg,5.46μmol,3.60％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝464.3；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.29(s,1H),8.25(s,1H),7.88(d,J＝7.6Hz,1H),7.71(d,J＝7.6Hz,1H),7.57-7.55(m,1H),7.49-7.47(m,1H),7.23(s,1H),6.86-6.84(m,1H),6.47-6.45(m,3H),4.37(d,J＝6.0Hz,2H),2.38(s,3H),1.56(s,9H)。
实施例56.N-(2-((4-(3-(2-(N-甲基乙酰胺基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物57)的制备
Figure BDA0003284159120002151
步骤1：N-(4-溴吡啶-2-基)-N-甲基乙酰胺(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120002152
将4-溴-N-甲基吡啶-2-胺(200mg,1.07mmol)于乙酸酐(3.27g,32.03mmol,3mL)中的混合物在120℃下搅拌4小时。将混合物在50℃下在减压下浓缩，得到呈黄色油状物的中间体B(180mg,785.77μmol,73.48％产率)。所述油未经纯化即被下一步骤采用。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝229.1；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.33(d,J＝5.4Hz,1H),7.99(s,1H),7.54(d,J＝5.4Hz,1H),3.35(s,3H),2.10(s,3H)。
步骤2：(2-((4-(3-(2-(N-甲基乙酰胺基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002161
在25℃下在N2下向(2-氧代-2-((4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙酯)氨基甲酸叔丁酯[根据实施例57中的方法所制备](200mg,435.38μmol)和中间体B(129.66mg,566.00μmol)于二噁烷(10mL)和H2O(2mL)中的混合物中一次性加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(28.38mg,43.54μmol)和K3PO4(184.84mg,870.77μmol)。将混合物在75℃下在N2下搅拌12小时。将混合物倒入水(40mL)中，并搅拌5分钟。将水相用EtOAc(30mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体D(180mg,373.78μmol,85.85％产率)。所述油不经纯化直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝482.0。
步骤3：2-氨基-N-(4-(3-(2-(N-甲基乙酰胺基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120002162
在25℃下向中间体D(180mg,373.78μmol)于EA(5mL)中的混合物中一次性加入HCl/EtOAc(4M,93.45μL)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物过滤混，并将固体在真空中干燥，得到呈黑褐色固体的中间体E(100mg,239.28μmol,64.02％产率，HCl盐)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.59(d,J＝5.2Hz,1H),8.39-8.28(m,1H),8.04(d,J＝7.2Hz,1H),7.95(d,J＝3.2Hz,2H),7.82(d,J＝7.0Hz,1H),7.75(d,J＝4.4Hz,1H),7.66-7.57(m,1H),3.92(d,J＝4.8Hz,2H),3.35(s,3H),2.09(s,3H)。
步骤4：N-(2-((4-(3-(2-(N-甲基乙酰胺基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物57)的制备
Figure BDA0003284159120002171
在25℃下在N2下向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](16.30mg,86.14μmol)和DIEA(46.39mg,358.93μmol,62.52μL)于DCM(1mL)中的混合物中一次性加入HATU(40.94mg,107.68μmol)。将混合物在25℃下搅拌5分钟，然后向混合物中加入中间体E(30mg,71.79μmol,HCl)，并在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩，并将残余物通过反相柱(FA)纯化，然后冻干，得到呈灰白色固体的化合物57(11.70mg,19.22μmol,26.78％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝553.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(d,J＝5.2Hz,1H),8.29(s,1H),8.00(d,J＝7.8Hz,1H),7.86(s,1H),7.84-7.83(m,1H),7.81(s,1H),7.78(d,J＝7.8Hz,1H),7.68-7.66(m,1H),7.61-7.60(m,1H),7.32-7.31(m,1H),6.78-6.77(m,1H),4.14(s,2H),3.55(s,3H),3.33(s,3H),2.06(m,3H)。
实施例57. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物58)的制备
Figure BDA0003284159120002181
步骤1：(2-氧代-2-((4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002182
将N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(6g,14.55mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(4.06g,16.01mmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(948.45mg,1.46mmol)和KOAc(2.86g,29.10mmol)溶于二噁烷(60mL)中，将混合物用N2吹扫3次。然后将所得混合物在100℃下搅拌2小时。将反应混合物过滤，并将滤液蒸发至干燥，得到呈黑色油状物的中间体C(6.68g，粗品)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝460.3。
步骤2：(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120002183
将中间体C(6.68g,14.54mmol)、3-溴-1-甲基-吡唑(2.34g,14.54mmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(947.76mg,1.45mmol)和K3PO4(6.17g,29.08mmol)溶于二噁烷(50mL)和H2O(10mL)中，将混合物用N2吹扫三次。然后将所得混合物在80℃下搅拌4小时。将反应混合物用水(100mL)稀释，并用EtOAc(50mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝5/1至1:1)纯化，并在真空中浓缩，得到呈黄色固体的中间体E(3g,7.26mmol,49.89％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝414.1。
步骤3：2-氨基-N-(4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120002191
将中间体E(3g,7.26mmol)溶解在HCl/二噁烷(20mL)中。将混合物在30℃下搅拌1小时。将反应混合物蒸发至干燥，得到呈黄色固体的中间体F(4.2g，粗品，HCl盐)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝314.2。
步骤4：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物58)的制备
Figure BDA0003284159120002201
向1-叔丁基吡咯-3-羧酸[根据实施例34中的方法所制备](1.43g,8.58mmol)于DCM(20mL)中的混合物中加入HATU(2.61g,6.86mmol)和DIPEA(3.69g,28.58mmol,4.98mL)。将混合物在30℃下搅拌15分钟，然后加入中间体F(2g，5.72mmol，HCl盐)并搅拌1小时。将反应混合物倒入水(50.0mL)中，并用EtOAc(50.0mL x 3)萃取。将合并的有机物用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并将滤液蒸发至干燥。将残余物通过柱色谱(SiO2,DCM/MeOH＝100/1至80:1)纯化，并在真空中浓缩，得到白色固体的化合物58(1.5g,3.18mmol,55.64％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝463.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.39(s,1H),8.38(s,1H),8.19-8.16(m,1H),7.81(d,J＝8.0Hz,1H),7.76(d,J＝2.0Hz,1H),7.72(d,J＝7.6Hz,1H),7.68(s,1H),7.53-7.52(m,1H),7.46-7.42(m,1H),6.98-6.96(m,1H),6.73(d,J＝2.0Hz,1H),6.48-6.47(m,1H),4.10(d,J＝6.0Hz,2H),3.90(s,3H),1.49(s,9H)。
实施例58.(S)-N-(1-((4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-4-(甲基硫代)-1-氧代丁-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物59)的制备
Figure BDA0003284159120002211
步骤1：4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-胺(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002212
将4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺(1g,3.92mmol)、(2-甲基-4-吡啶基)硼酸(590.43mg,4.31mmol)、K2CO3(1.63g,11.76mmol)和Pd(dppf)Cl2(286.79mg,391.95μmol)于二噁烷(10mL)和H2O(3mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于80℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝3/1)纯化，并浓缩得到呈黄色固体的中间体C(1g,3.74mmol,95.43％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝268.2；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.57(d,J＝5.2Hz,1H),8.10-8.08(m,1H),7.85-7.83(m,1H),7.59-7.54(m,1H),7.53-7.47(m,1H),7.45(s,1H),7.40-7.38(m,1H),6.84(s,1H),5.04(br s,2H),2.66(s,3H)。
步骤2：(1-((4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-4-(甲基硫代)-1-氧代丁-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120002213
向中间体C(0.5g,1.87mmol)和2-(叔丁氧基羰基氨基)-4-甲基磺酰基-丁酸(699.45mg,2.81mmol)于DCM(8mL)中的溶液中加入EEDQ(924.97mg,3.74mmol)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝1/1)纯化，并且浓缩，得到呈黄色油状物的中间体E(0.74g,1.48mmol,79.35％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝499.1；100％ee值。
步骤3：(S)-2-氨基-N-(4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)-4-(甲基硫代)丁酰胺(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120002221
向中间体E(0.7g,1.40mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M,5mL)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩至干燥，得到呈黄色固体的中间体F(0.6g，粗品，HCl盐)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝399.0。
步骤4：(S)-N-(1-((4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-4-(甲基硫代)-1-氧代丁-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物59)的制备
Figure BDA0003284159120002222
向中间体F(200mg,459.76μmol,HCl盐)于DCM(3mL)中的溶液中加入1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](95.68mg,505.74μmol)、HOBt(62.12mg,459.76μmol)、DIEA(237.68mg,1.84mmol,320.32μL)和EDCI(105.76mg,551.72μmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物浓缩至干燥，得到残余物。将残余物用制备型HPLC(流动相：[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：18％-48％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物59(95.37mg,167.40μmol,36.41％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝570.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.53(s,1H),8.84(br s,1H),8.53-8.41(m,2H),8.33-8.07(m,3H),7.99-7.86(m,3H),7.70-7.68(m,1H),7.37-7.26(m,1H),6.79(dd,J＝3.2Hz,1.60Hz,1H),4.78-4.65(m,1H),3.58(s,3H),2.76(br d,J＝2.4Hz,3H),2.16-1.96(m,6H)；ee％＝100％。
实施例59.(S)-N-(3-甲氧基-1-((4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物60)的制备
Figure BDA0003284159120002231
步骤1：(3-甲氧基-1-((4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120002232
将4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-胺[根据实施例58中的方法所制备](950mg,3.55mmol)、2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲氧基-丙酸(934.84mg,4.26mmol)、EEDQ(1.76g,7.11mmol)于DCM(10mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于25℃下搅拌12小时。将反应混合物通过添加水(20mL)猝灭，并用EtOAc(20mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL x 3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(NH3OH)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的中间体E(1.3g,2.77mmol,78.08％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝469.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.43(s,1H),8.54(d,J＝5.2Hz,1H),8.29(s,1H),8.00(d,J＝7.8Hz,1H),7.83(s,1H),7.74(d,J＝7.8Hz,1H),7.67-7.48(m,3H),7.17(br d,J＝7.6Hz,1H),4.52(br d,J＝6.6Hz,1H),3.58(br d,J＝5.6Hz,2H),3.27(s,3H),2.56(s,3H),1.44-1.25(m,9H)。
步骤2：(S)-2-氨基-3-甲氧基-N-(4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)丙酰胺(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120002241
将中间体E(300mg,640.25μmol)于HCl/二噁烷(4M,1.60mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于25℃下搅拌2小时。将混合物浓缩以除去溶剂，得到呈黄色固体的中间体F(350mg，粗品，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝369.2。
步骤3：(S)-N-(3-甲氧基-1-((4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物60)的制备
Figure BDA0003284159120002251
将中间体F(250mg,617.42μmol,HCl盐)、1-甲磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](140.17mg,740.90μmol)、DIEA(398.97mg,3.09mmol,537.70μL)、HOBt(166.85mg,1.23mmol)和EDCI(236.72mg,1.23mmol)于DMF(3mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于25℃下搅拌12小时。向反应混合物中加入水(10mL)，用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL x 3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(FA)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物60(160mg,296.50μmol,48.02％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝540.2。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.48(d,J＝5.4Hz,1H),8.27-8.21(m,1H),8.13(s,1H),8.01-7.90(m,2H),7.76-7.68(m,2H),7.66-7.52(m,3H),7.28(dd,J＝2.2,3.4Hz,1H),6.79(dd,J＝1.8Hz,3.2Hz,1H),4.86-4.84(m,1H),3.79-3.63(m,2H),3.47(s,3H),3.29(s,3H),2.53(br s,3H)；ee％＝95.212％。
实施例60.(S)-N-(1-((4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-3-甲氧基-1-氧代丙-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物61)的制备
Figure BDA0003284159120002261
步骤1：4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-胺(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002262
向4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺(600mg,2.35mmol)和(2,6-二甲基-4-吡啶基)硼酸(532.56mg,3.53mmol)于二噁烷/H2O＝4/1(10mL)中的溶液中加入K3PO4(1.50g,7.06mmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(229.91mg,352.76μmol)。将混合物在75℃下在N2下搅拌4小时。将反应混合物用H2O(20mL)稀释，并用EtOAc(20mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝1/0至1:1)纯化，并在真空中浓缩，得到呈黄色固体的中间体C(400mg,1.42mmol,60.45％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝282.0；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.11(m,1H),7.83-7.81(m,1H),7.61(m,1H),7.50-7.48(m,1H),7.42(s,2H),6.96(s,1H),2.56(s,6H)。
步骤2：(1-((4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-3-甲氧基-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120002271
向(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲氧基-丙酸(397.37mg,1.81mmol)于DCM(5mL)中的溶液中加入EEDQ(597.63mg,2.42mmol)，将混合物在30℃下搅拌0.5小时。然后向混合物中加入中间体C(340mg,1.21mmol)。将混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物用H2O(10mL)稀释，并用EtOAc(10mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(0.1％FA条件)纯化，并浓缩除去乙腈，然后用EtOAc(20mL x 2)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到呈白色固体的中间体E(300mg,621.64μmol,51.45％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝483.1；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.88-9.80(m,1H),8.09(s,1H),7.87(d,J＝7.6Hz,1H),7.58-7.49(m,2H),7.25(d,J＝4.0Hz,3H),5.47-5.46(m,1H),4.55(br d,J＝2.0Hz,1H),3.98-3.95(m,1H),3.63-3.61(m,1H),3.44(s,3H),1.62(br s,6H),1.50(s,9H)。
步骤3：(S)-2-氨基-N-(4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)-3-甲氧基丙酰胺(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120002272
将中间体E(300mg,621.64μmol)于HCl/二噁烷(4M,5mL)中的溶液在30℃下搅拌0.5小时。将反应混合物直接浓缩，得到呈白色固体的中间体F(260mg,620.61μmol,99.83％产率，HCl盐)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝383.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.02-12.95(m,1H),8.65-8.62(m,3H),8.46(s,1H),8.20(s,2H),8.16(d,J＝8.4Hz,1H),8.00(s,1H),7.96-7.94(m,1H),7.73-7.69(m,1H),4.37(br d,J＝4.4Hz,1H),3.92-3.79(m,2H),3.32(s,3H),2.79(s,6H)。
步骤4：(S)-N-(1-((4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-3-甲氧基-1-氧代丙-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物61)的制备
Figure BDA0003284159120002281
向中间体F(150mg,358.05μmol,HCl盐)于DMF(2mL)中的溶液中加入1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](74.51mg,393.85μmol)和DIEA(231.37mg,1.79mmol,311.82μL)，然后向混合物中加入EDCI(102.96mg,537.07μmol)和HOBt(58.06mg,429.66μmol)。将混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物在真空中浓缩，然后将残余物通过反相(0.1％FA条件)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物61(109.15mg,182.01μmol,50.84％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝554.2；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.26(brd,J＝2.4Hz,1H),8.02-7.95(m,1H),7.91-7.90(m,1H),7.70-7.63(m,1H),7.54-7.47(m,4H),7.26-7.25(m,1H),6.83(m,1H),4.97-4.95(m,1H),3.88-3.82(m,2H),3.81-3.79(m,3H),3.44-3.42(m,3H),2.58(d,J＝1.6Hz,6H)；ee％＝100％。
实施例61.(S)-1-(叔丁基)-N-(3-甲氧基-1-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物62)的制备
Figure BDA0003284159120002291
步骤1：(3-甲氧基-1-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120002292
向4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-胺(根据实施例2中的方法所制备)(500mg,1.95mmol)和(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲氧基-丙酸(513.18mg,2.34mmol)于DCM(5mL)中的溶液中加入EEDQ(723.56mg,2.93mmol)，将混合物在30℃下搅拌12小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝3/1至2:1)纯化并浓缩，得到呈白色固体的中间体G(800mg,1.71mmol,87.84％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝458.4；ee％＝100％。
步骤2：(S)-2-氨基-3-甲氧基-N-(4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)丙酰胺(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120002301
将中间体G(0.8g,1.75mmol)于4M HCl/二噁烷(10mL)中的溶液在30℃下搅拌1小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到粗产物。将粗产物用MTBE(10mL)研磨，过滤并在真空中干燥，得到呈白色固体的中间体H(600mg,1.52mmol,87.12％产率，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝358.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.99(br s,1H),8.70-8.69(m,3H),8.39-8.38(m,1H),7.82-7.77(m,4H),7.46-7.43(m,1H),6.74-6.73(m,1H),4.34-4.32(m,1H),3.93-3.81(m,5H),3.31(m,3H)；ee％＝100％。
步骤3：(S)-1-(叔丁基)-N-(3-甲氧基-1-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物62)的制备
Figure BDA0003284159120002302
向1-叔丁基吡咯-3-羧酸[根据实施例34中的方法所制备](63.67mg,380.82μmol)、EDCI(97.34mg,507.76μmol)、HOBt(68.61mg,507.76μmol)和DIEA(164.06mg,1.27mmol,221.10μL)于DCM(1mL)中的溶液中加入中间体H(100mg,253.88μmol,HCl盐)，将混合物在30℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(FA)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物62(31.20mg,60.69μmol,23.90％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝507.4；1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.33-8.32(m,1H),7.84-7.82(m,1H),7.71-7.69(m,1H),7.64-7.61(m,2H),7.45-7.40(m,2H),6.95-6.94(m,1H),6.67-6.66(m,1H),6.61-6.59(m,1H),4.97-4.94(m,1H),3.95(s,3H),3.86-3.82(m,2H),3.43(s,3H),1.56(s,9H)；ee％＝100％。
实施例62.(S)-1-(叔丁基)-N-(3-甲氧基-1-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物63)的制备
Figure BDA0003284159120002311
步骤1：7-(2-氨基噻唑-4-基)-2-甲基异喹啉-1(2H)-酮(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120002312
将4-溴噻唑-2-胺(500mg,2.79mmol)、2-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)异喹啉-1(2H)-酮[根据实施例7中的方法所制备](955.59mg,3.35mmol)、K3PO4(1.78g,8.38mmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯的混合物(II)(182.01mg,279.27μmol)于二噁烷(8mL)和H2O(2mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于100℃下搅拌2小时。加入水(50mL)，并将反应混合物用EtOAc(200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将粗产物通过反相HPLC(0.1％NH3·H2O)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的中间体E(400mg,1.37mmol,48.98％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝258.3。
步骤2：(3-甲氧基-1-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120002321
向中间体E(330mg,1.28mmol)和(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲氧基-丙酸(337.40mg,1.54mmol)于DCM(20mL)中的溶液中加入EEDQ(475.72mg,1.92mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩以除去DCM。将粗产物用MeOH(20mL)在25℃下研磨10分钟，然后过滤并在真空中干燥，得到呈白色固体的中间体G(400mg,817.74μmol,63.76％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝459.0。
步骤3：(S)-2-氨基-3-甲氧基-N-(4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)丙酰胺(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120002322
向中间体G(200mg,436.18μmol)于二噁烷(2mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(2mL)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到呈棕色固体的中间体H(180mg，粗品，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝359.1。
步骤4：(S)-1-(叔丁基)-N-(3-甲氧基-1-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物63)的制备
Figure BDA0003284159120002331
向[根据实施例34中的方法所制备](50.81mg,303.89μmol)于DCM(2mL)中的溶液中加入EDCI(58.26mg,303.89μmol)、HOBt(41.06mg,303.89μmol)和DIEA(104.74mg,810.38μmol,141.15μL)，然后加入中间体H(80mg,202.60μmol,HCl盐)。将混合物在25℃下搅拌12小时。加入水(30mL)，并将反应混合物用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.075％TFA)-乙腈]；B％：35％-65％)再纯化，然后通过制备型TLC(SiO2,DCM：EtOAc＝2:1)再纯化，得到呈白色固体的化合物63(17mg,33.49μmol,16.53％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝508.4。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.51(s,1H),8.82(d,J＝2.0Hz,1H),8.22-8.20(m,1H),7.93(d,J＝7.6Hz,1H),7.78(s,1H),7.70(d,J＝8.4Hz,1H),7.63-7.61(m,1H),7.48(d,J＝7.2Hz,1H),6.96-6.95(m,1H),6.63(d,J＝6.8Hz,1H),6.51-6.50(m,1H),4.94-4.89(m,1H),3.75-3.67(m,2H),3.52(s,3H),3.32-3.31(m,3H),1.49(s,9H)；ee％＝89.392％。
实施例63.(S)-1-(叔丁基)-N-(3-甲氧基-1-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物64)的制备
Figure BDA0003284159120002341
步骤1：7-(2-氨基噻唑-4-基)-2-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002342
将2-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮[根据实施例7中的方法所制备](200mg,696.47μmol)、4-溴噻唑-2-胺(124.70mg,696.47μmol)、K3PO4(591.35mg,2.79mmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯的混合物(II)(45.39mg,69.65μmol)于二噁烷(2mL)和H2O(0.5mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于100℃下搅拌2小时。加入水(20mL)，并将反应混合物用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将粗产物用MeOH(10mL)在25℃下研磨10分钟，然后过滤并在真空中干燥，得到呈白色固体的中间体D(180mg,691.75μmol,99.32％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝260.1。
步骤2：(3-甲氧基-1-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120002343
向中间体D(110.86mg,427.50μmol)和(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲氧基-丙酸(103.09mg,470.25μmol)于DCM(2mL)中的溶液中加入EEDQ(158.57mg,641.25μmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩以除去DCM。将粗产物用MeOH(5mL)在25℃下研磨10分钟，然后过滤并在真空中干燥，得到呈棕色固体的中间体F(150mg,325.70μmol,76.19％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝461.4。
步骤3：(S)-2-氨基-3-甲氧基-N-(4-(2-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)丙酰胺(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120002351
向中间体F(100mg,217.13μmol)于MeOH(2mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(2mL)。将混合物在30℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到呈黄色固体的中间体G(80mg，粗品，HCl盐)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝361.2。
步骤4：(S)-1-(叔丁基)-N-(3-甲氧基-1-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物64)的制备
Figure BDA0003284159120002352
向[根据实施例34中的方法所制备](50.55mg,302.35μmol)于DMF(2mL)中的溶液中加入EDCI(57.96mg,302.35μmol)、HOBt(40.85mg,302.35μmol)和DIEA(104.20mg,806.27μmol,140.43μL)，然后加入中间体G(80mg,201.57μmol,HCl盐)。将混合物在25℃下搅拌12小时。加入水(30mL)，并将反应混合物用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.075％TFA)-乙腈]；B％：35％-65％)纯化，然后通过制备型TLC(SiO2,DCM：EtOAc＝2:1)再纯化，并浓缩，得到呈白色固体的化合物64(17mg,33.36μmol,16.55％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝510.3；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.48(s,1H),8.47(d,J＝2.0Hz,1H),7.98-7.91(m,2H),7.68(s,1H),7.62-7.61(m,1H),7.35(d,J＝8.0Hz,1H),6.96-6.95(m,1H),6.50-6.49(m,1H),4.93-4.88(m,1H),3.74-3.66(m,2H),3.58-3.55(m,2H),3.31(s,3H),3.05(s,3H),3.01-2.98(m,2H),1.49(s,9H)；ee％＝100％。
实施例64.(S)-N-(3-甲氧基-1-氧代-1-((4-(3-(嘧啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丙-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物65)
Figure BDA0003284159120002361
步骤1：(1-((4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)氨基)-3-甲氧基-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002371
将(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲氧基-丙酸(300mg,1.37mmol)、4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺(418.95mg,1.64mmol)、EEDQ(676.78mg,2.74mmol)于DCM(5mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于25℃下搅拌12小时。将反应混合物倒入H2O(10mL)中，然后用EtOAc(3mL x 4)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(FA)纯化，并冻干，得到呈白色胶状物的中间体C(410mg,843.62μmol,61.65％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝458.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.53-12.30(m,1H),8.11(s,1H),7.95-7.88(m,1H),7.79(s,1H),7.54-7.50(m,1H),7.41(s,1H),7.17(d,J＝6.8Hz,1H),4.50(d,J＝5.6Hz,1H),3.57(d,J＝5.2Hz,2H),3.27(s,4H),1.39(s,9H)。
步骤2：(3-甲氧基-1-氧代-1-((4-(3-(嘧啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丙-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120002372
将中间体C(300mg，657.39μmol)、三丁基(嘧啶-4-基)锡烷(363.99mg,986.08μmol),Pd(PPh3)2Cl2(46.14mg,65.74μmol)于二噁烷(3mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于100℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入KF水溶液(5mL)并搅拌30分钟，然后用EtOAc(2mL x 3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱(0-80％的乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱剂)纯化，并在减压下浓缩，得到呈浅黄色固体的中间体E(265mg,431.88μmol,65.70％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝456.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.52(s,1H),9.30(d,J＝1.2Hz,1H),8.92(d,J＝5.2Hz,1H),8.83-8.82(m,1H),8.19-8.15(m,2H),8.10(d,J＝8.4Hz,1H),7.84(s,1H),7.65-7.61(m,2H),7.22-7.17(m,1H),4.58-4.47(m,1H),3.58(d,J＝5.6Hz,2H),3.28(s,3H),1.40(s,9H)。
步骤3：(S)-2-氨基-3-甲氧基-N-(4-(3-(嘧啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)丙酰胺(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120002381
向中间体E(100mg,219.52μmol)于二噁烷(1mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M,548.81μL)，然后将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物在减压下浓缩得到残余物，将残余物用MTBE(6mL)洗涤并在真空中浓缩，得到呈浅黄色固体的中间体F(78mg，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝356.2。
步骤4：(S)-N-(3-甲氧基-1-氧代-1-((4-(3-(嘧啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丙-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物65)的制备
Figure BDA0003284159120002391
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](26.62mg,140.68μmol)和中间体F(50mg,140.68μmol)于DMF(0.3mL)中的溶液中加入HOBT(38.02mg,281.36μmol)、EDCI(53.94mg,281.36μmol)和DIEA(54.55mg,422.04μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌6小时。将反应混合物倒入水(5mL)中，并用EtOAc(5mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL x 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱(0-100％的乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱剂)纯化，然后通过制备型-HPLC(TFA条件)再纯化，并冻干，得到呈灰白色固体的化合物65(18mg,27.22μmol,19.35％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝527.2；1H NMR(400MHz,DMSO+D2O)δ9.27(d,J＝1.2Hz,1H),8.89(d,J＝5.2Hz,1H),8.79(s,1H),8.15-8.12(m,2H),8.09(d,J＝7.6Hz,1H),7.98-7.97(m,1H),7.79(s,1H),7.66-7.61(m,1H),7.31-7.28(m,1H),6.80-6.79(m,1H),4.94-4.89(m,1H),3.74-3.71(m,2H),3.54(s,3H),3.32(s,3H)；ee％＝100％。
实施例65.(S)-1-(叔丁基)-N-(3-甲氧基-1-氧代-1-((4-(3-(嘧啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丙-2-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物66)的制备
Figure BDA0003284159120002401
向(S)-2-氨基-3-甲氧基-N-(4-(3-(嘧啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)丙酰胺[根据实施例64的方法所制备](50mg,140.68μmol,HCl盐)和1-叔丁基吡咯-3-羧酸[根据实施例34的方法所制备](23.52mg,140.68μmol)于DMF(0.3mL)中的溶液中加入HOBt(38.02mg,281.36μmol)、EDCI(53.94mg,281.36μmol)和DIEA(54.54mg,422.04μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌6小时。将反应混合物倒入H2O(5mL)中，并用EtOAc(5mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL x 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱(0-100％的乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱剂，30mL/分钟)纯化并浓缩，得到呈灰白色固体的化合物66(20mg,39.64μmol,28.17％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝505.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.63-12.43(m,1H),9.30(s,1H),8.96-8.89(m,1H),8.83(s,1H),8.20-8.07(m,3H),7.97-7.91(m,1H),7.82(s,1H),7.69-7.59(m,2H),6.97(br s,1H),6.58-6.48(m,1H),4.96-4.91(m,1H),3.73-3.71(m,2H),2.70(d,J＝1.0Hz,3H),1.50(s,9H)；ee％＝94.616％。
实施例66.(S)-1-(甲基磺酰基)-N-(4-(甲基硫代)-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物67)的制备
Figure BDA0003284159120002411
向(2S)-2-氨基-4-甲基磺酰基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]丁酰胺(2g,4.75mmol,HCl盐)和1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](898.81mg,4.75mmol)于DMF(20mL)中的混合物中加入EDCI(1.37g,7.13mmol)、HOBt(962.92mg,7.13mmol)和DIEA(2.46g,19.00mmol,3.31mL)，并将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物倒入H2O(100mL)中，并通过过滤收集沉淀。将固体在MeOH(20mL)中研磨，并通过过滤收集沉淀。将固体溶解在DMSO(10mL)中，然后将混合物倒入MeOH(50mL)中，并通过过滤收集形成的沉淀，冻干，得到呈白色固体的化合物67(2.05g,3.66mmol,77.01％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝555.9；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),8.68-8.66(m,2H),8.46(d,J＝7.2Hz,1H),8.31-8.30(m,1H),8.02-8.00(m,1H),7.94-7.96(m,1H),7.83(s,1H),7.73-7.74(m,3H),7.61-7.57(m,1H),7.31-7.29(m,1H),6.79-6.77(m,1H),4.74-4.69(m,1H),3.57(s,3H),2.67-2.53(m,2H),2.13-2.01(m,5H)；ee％＝100％。
实施例67.N-[(1S)-1-甲基-2-氧代-2-[[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物68)的制备
Figure BDA0003284159120002421
步骤1：N-[(1S)-1-甲基-2-氧代-2-[[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120002422
在30℃下向-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-胺[根据实施例4中的方法所制备](205mg,809.25μmol)和(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)丙酸(153.12mg,809.25μmol)于DCM(7mL)中的混合物中加入EEDQ(400.24mg,1.62mmol)。将反应混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相柱(NH3.H2O条件)纯化，得到呈黄色固体的中间体E(80mg,188.45μmol)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝425.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.34(s,1H),8.69-8.67(m,2H),8.31(s,1H),8.02(d,J＝8.0Hz,1H),7.84(s,1H),7.77-7.75(m,3H),7.62-7.58(m,1H),7.26(d,J＝6.8Hz,1H),4.29-4.25(m,1H),1.39(s,9H),1.30-1.28(m,3H)。手性HPLC：OJ-3-MeOH(DEA)-5-40-3mL-35T,t＝1.744min,ee％＝100％。
步骤2：(2S)-2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]丙酰胺(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120002431
在30℃下向中间体E(80mg,188.45μmol)于二噁烷(2mL)中的混合物中加入HCl/二噁烷(4M,2mL)。将反应混合物在30℃下搅拌2小时。将反应混合物过滤并在真空中干燥，得到呈黄色固体的中间体F(75mg,172.20μmol,91％产率，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝325.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.89(br s,1H),9.00(d,J＝6.8Hz,2H),8.53(br s,2H),8.48(s,1H),8.43(d,J＝6.8Hz,2H),8.16(d,J＝7.6Hz,1H),8.02(s,1H),7.99(d,J＝8.4Hz,1H),7.73-7.69(m,1H),4.23-4.15(m,1H),1.51(d,J＝7.2Hz,3H)。
步骤3：N-[(1S)-1-甲基-2-氧代-2-[[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物68)的制备
Figure BDA0003284159120002432
在30℃下向中间体F(30mg,83.13μmol,HCl盐)和1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](15.73mg,83.13μmol)于DMF(1mL)中的混合物中加入DIPEA(53.72mg,415.67μmol,72.40μL)、EDCI(23.91mg,124.70μmol)和HOBt(16.85mg,124.70μmol)。将反应混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物在真空中浓缩，然后通过反相柱(NH3.H2O条件)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物68(12.52mg,25.26μmol,30％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝496.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.43(s,1H),8.68(d,J＝6.0Hz,2H),8.50(d,J＝6.4Hz,1H),8.30(s,1H),8.01(d,J＝8.0Hz,1H),7.95-7.94(m,1H),7.83(s,1H),7.77-7.75(m,3H),7.61-7.57(m,1H),7.30-7.29(m,1H),6.79-6.78(m,1H),4.68-4.61(m,1H),3.56(s,3H),1.43(d,J＝7.2Hz,3H)；ee％＝100％。
实施例68.(S)-N-(3-羟基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丙-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物69)的制备
Figure BDA0003284159120002441
步骤1：(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙酸(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120002442
在0℃下向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-羟基丙酸(1.0g，4.87mmol)和咪唑(663.10mg，9.75mmol)于DMF(10mL)中的溶液中滴加叔丁基-氯-二甲基-硅烷(770.71mg,5.12mmol,626.59μL)，将混合物在30℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(100.0mL)稀释，并用EtOAc(150mL)萃取。将有机层用水(400.0mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈淡黄色油状物的中间体B(700mg，粗品)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.32(br s,1H),4.35(br s,1H),4.11-4.08(m,1H),3.83-3.80(m,1H),1.47(s,9H),0.89(m,9H),0.08(d,J＝2.0Hz,6H)。
步骤2：(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丙-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002451
向4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-胺(根据实施例4中的方法所制备)(300mg,1.18mmol)和中间体B(567.50mg,1.78mmol)于DCM(10mL)中的溶液中加入EEDQ(439.29mg,1.78mmol)，将混合物在30℃下搅拌4小时。将混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝4/1至3:1)纯化，并在减压下浓缩，得到呈浅黄色油状物的中间体D(300mg,535.35μmol,45.37％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝555.3；ee＝100％。
步骤3：(S)-2-氨基-3-羟基-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)丙酰胺(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120002452
将中间体D(300mg,540.76μmol)于HCl/二噁烷(4M,3mL)中的溶液在30℃下搅拌0.25小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到粗产物。将粗产物用MTBE(5.0mL)研磨，过滤并在真空中干燥，得到呈白色固体的中间体E(200mg,520.09μmol,96.18％产率，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝341.1；ee＝95.398％。
步骤4：(S)-N-(3-羟基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丙-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物69)的制备
Figure BDA0003284159120002461
向中间体E(20mg,58.75μmol,HCl盐)、1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](9.04mg,47.78μmol)和DIEA(34.29mg,265.32μmol,46.21μL)于DCM(0.5mL)中的溶液中加入HATU(24.21mg,63.67μmol)，将混合物在30℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相:水(0.1％TFA)-乙腈；B％：18％-48％，9分钟)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物69(15.31mg,24.47μmol,41.65％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝512.1。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.42(s,1H),8.87(d,J＝6.4Hz,2H),8.42(s,1H),8.29(d,J＝7.2Hz,1H),8.19(br d,J＝6.0Hz,2H),8.10(d,J＝7.6Hz,1H),7.95-7.95(m,1H),7.90-7.87(m,2H),7.68-7.64(m,1H),7.31-7.30(m,1H),6.78(dd,J＝1.6,3.2Hz,1H),6.78-6.77(m,1H),4.75-4.70(m,1H),3.85-3.77(m,2H),3.57(s,3H)；ee＝100％。
实施例69.(S)-N-(3-甲氧基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丙-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物70)的制备
Figure BDA0003284159120002471
步骤1：(3-甲氧基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丙-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120002472
向4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-胺[根据实施例4中的方法所制备](12g,47.37mmol)和(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲氧基-丙酸(10.39g,47.37mmol)于DCM(500mL)中的溶液中加入EEDQ(23.43g,94.74mmol)。将混合物在20℃下搅拌16小时。将反应混合物浓缩，得到残余物。将残余物用MTBE(100mL)在20℃下研磨30分钟，并过滤，得到粗产物(6g，棕色固体)，将粗产物用DCM(10mL)在20℃下进一步研磨30分钟，并过滤，得到第一批产物(4.4g，白色固体)。将母液浓缩至干燥，并将残余物用柱色谱(SiO2,DCM:MeOH＝50:1)纯化，得到第二批产物(1.3g，白色固体)。因此，分两批获得呈白色固体的中间体E(5.7g,12.37mmol,26.12％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝455.0；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.25(brs,1H),8.81-8.70(m,2H),8.20(s,1H),7.95-7.87(m,1H),7.65-7.60(m,3H),7.59-7.53(m,1H),7.27(s,1H),5.49(br s,1H),4.60(br s,1H),3.98-3.97(m 1H),3.66-3.65(m,1H),3.46(s,3H),1.52(s,9H)；ee％＝100％。
步骤2：(S)-2-氨基-3-甲氧基-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)丙酰胺(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120002481
向中间体E(1.5g,3.30mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M,8.57mL)。将混合物在20℃下搅拌30分钟。将反应混合物浓缩，得到呈白色固体的中间体F(1.2g,3.07mmol,93.03产率，HCl盐)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝355.0。
步骤3：(S)-N-(3-甲氧基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丙-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物70)的制备
Figure BDA0003284159120002482
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](2.02g,10.69mmol)于DCM(20mL)中的溶液中加入中间体F(3.8g,9.72mmol,HCl盐)、DIPEA(6.28g,48.61mmol,8.47mL)、HOBt(1.31g,9.72mmol)和EDCI(2.80g,14.58mmol)。将混合物在20℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤，将固体用DCM(15mL)洗涤，并在真空中干燥，得到标题化合物(3.46g,6.41mmol,65.90％产率，ee％＝100％，白色固体)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝526.0；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.56(s,1H),8.71-8.64(m,2H),8.51(d,J＝7.2Hz,1H),8.32(s,1H),8.05-7.96(m,2H),7.85(s,1H),7.79-7.74(m,3H),7.62-7.61(m,1H),7.38-7.24(m,1H),6.81-6.80(m,1H),4.95-4.94(m,1H),3.78-3.69(m,2H),3.57(s,3H),3.30(br s,3H)；ee％＝100％。
实施例70.(S)-N-(4-羟基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物71)的制备
Figure BDA0003284159120002491
步骤1：(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丁酸(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120002492
在0℃下向(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-4-羟基-丁酸(1g,4.56mmol)和咪唑(621.04mg,9.12mmol)于DMF(10mL)中的溶液中滴加TBSCl(721.86mg,4.79mmol,586.88μL)。将混合物在25℃下搅拌2小时。加入水(20mL)，并将反应混合物用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱(0-95％的乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱剂)纯化，并在真空中浓缩，得到呈无色油状物的中间体B(900mg,2.70mmol,59.16％产率)。
步骤2：(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002501
向4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-胺[根据实施例4中的方法所制备](300mg,1.18mmol)和中间体B(592.42mg,1.78mmol)于DCM(12mL)中的溶液中加入EEDQ(585.71mg,2.37mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩以除去DCM。将残余物通过快速硅胶色谱(0-95％的乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱剂)纯化，在真空中浓缩，得到呈白色固体的中间体D(300mg,511.60μmol,43.20％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝569.3；ee％＝100％。
步骤3：(S)-2-氨基-4-羟基-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)丁酰胺(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120002502
向中间体D(220mg,386.78μmol)于二噁烷(3mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(3mL)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到呈白色固体的粗产物中间体E(140mg，粗品，HCl盐)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝355.2。
步骤4：(S)-N-(4-羟基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物71)的制备
Figure BDA0003284159120002511
向中间体E(70mg,179.08μmol,HCl盐)和1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](33.88mg,179.08μmol)于DCM(4mL)中的溶液中加入DIEA(69.43mg,537.24μmol,93.58μL)，然后加入HATU(136.18mg,358.16μmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩以除去DCM。将残余物通过制备型HPLC(流动相:[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：15％-45％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物71(23.76mg,37.15μmol,20.74％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝526.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.39(s,1H),8.84(s,2H),8.43-8.40(m,2H),8.09-8.07(d,J＝7.6Hz,3H),7.95-7.94(m,1H),7.86(s,2H),7.67-7.63(m,1H),7.31-7.29(m,1H),6.77-6.76(m,1H),4.71-4.66(m,1H),3.56(s,3H),3.53-3.52(m,2H),1.98-1.97(m,2H)；ee％＝96.562％。
实施例71.(S)-N-(4-甲氧基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物72)的制备
Figure BDA0003284159120002521
步骤1：(4-甲氧基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002522
在30℃下向4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-胺[根据实施例4中的方法所制备](300mg,1.18mmol)和(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-甲氧基丁酸(276.24mg,1.18mmol)于DCM(5mL)中的混合物中加入EEDQ(585.71mg,2.37mmol)。将混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物蒸发至干燥。将残余物通过制备型HPLC(FA条件)纯化，得到呈黄色固体的中间体C(330mg,704.27μmol,59.47％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝469.2。
步骤2：(S)-2-氨基-4-甲氧基-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)丁酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002523
将中间体C(100mg,213.42μmol)溶解在HCl/MeOH(1mL)中。将溶液在30℃下搅拌1小时。将反应混合物蒸发至干燥，得到呈黄色固体的中间体D(86mg，粗品，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝369.2。
步骤3：(S)-N-(4-甲氧基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物72)的制备
Figure BDA0003284159120002531
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](28.03mg,148.18μmol)于DCM(1mL)中的混合物中加入HATU(75.12mg,197.57μmol)和DIPEA(51.07mg,395.15μmol,68.83μL)。将混合物在30℃下搅拌15分钟，然后加入中间体D(40mg,98.79μmol,HCl盐)，并将溶液在30℃下搅拌1小时。将反应混合物倒入水(30.0mL)中，并用EtOAc(30.0mL x3)萃取。将合并的有机物用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并将滤液蒸发至干燥。将残余物通过制备型HPLC(FA条件)纯化,并冻干，得到呈白色固体的化合物72(12.42mg,21.00μmol,21.25％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝540.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(br s,1H),8.68-8.67(m,2H),8.47(d,J＝7.2Hz,1H),8.31(s,1H),8.02(d,J＝7.6Hz,1H),7.96-7.95(m,1H),7.84(s,1H),7.77-7.75(m,3H),7.62-7.58(m,1H),7.31-7.30(m,1H),6.78-6.77(m,1H),4.70-4.65(m,1H),3.57(s,3H),3.46(br s,2H),3.23(s,3H),2.12-2.07(m,1H),2.04-1.97(m,1H)；ee％＝100％。
实施例72.(S)-N-(3-甲基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物73)的制备
Figure BDA0003284159120002541
步骤1：(3-甲基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120002542
向4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-胺[根据实施例4中的方法所制备](582.99mg,2.30mmol)于DCM(10mL)中的溶液中加入EEDQ(1.14g,4.60mmol)，将混合物在30℃下搅拌0.5小时。然后向混合物中加入(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酸(500mg,2.30mmol)。将混合物在30℃下搅拌24小时。将反应混合物用H2O(10mL)稀释，并用EtOAc(10mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(0.1％FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的中间体E(310mg,684.98μmol,29.76％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝453.1。
步骤2：(S)-2-氨基-3-甲基-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)丁酰胺(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120002551
将中间体E(160.00mg,353.54μmol)于HCl/EA(4M,5mL)中的溶液在30℃下搅拌0.5小时。形成白色固体。通过过滤收集沉淀，将固体用EtOAc(5mL)洗涤，并在高真空下干燥，得到呈白色固体的中间体F(100mg,257.13μmol,72.73％产率，HCl盐)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝353.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.92(br s,1H),8.987(d,J＝6.4Hz,2H),8.52(br s,3H),8.47(s,1H),8.39(br d,J＝5.2Hz,2H),8.15(d,J＝7.6Hz,1H),8.01(s,1H),7.98(br d,J＝7.6Hz,1H),7.72-7.70(m,1H),3.94(br d,J＝4.4Hz,1H),2.29-2.20(m,1H),1.01-0.98(m,6H)。
步骤3：(S)-N-(3-甲基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物73)的制备
Figure BDA0003284159120002552
向中间体F(50mg,128.56μmol,HCl盐)于DMF(1mL)中的溶液中加入1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](26.76mg,141.42μmol)和DIEA(83.08mg,642.82μmol,111.96μL)，然后向混合物中加入EDCI(36.97mg,192.84μmol)和HOBT(20.85mg,154.28μmol)。将混合物在30℃下搅拌4小时。将反应混合物用H2O(2mL)稀释，并用EtOAc(2mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将反应物通过反相(0.1％FA条件)纯化，得到呈灰白色固体的化合物73(23.27mg,40.31μmol,31.35％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝524.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.48(br s,1H),8.69-8.67(m,2H),8.31-8.26(m,2H),8.04-8.01(m,2H),7.83(s,1H),7.78-7.76(m,3H),7.75-7.60(m,1H),7.29(m,1H),6.80(m,1H),4.54-4.50(m,1H),3.57(s,3H),2.24-2.15(m,1H),1.01-0.95(m,6H)；ee％＝100％。
实施例73.(S)-N-(3,3-二甲基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物74)的制备
Figure BDA0003284159120002561
步骤1：(3,3-二甲基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002562
在25℃下向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3,3-二甲基丁酸(500mg,2.16mmol)和EEDQ(534.59mg,2.16mmol)于DCM(5mL)中的溶液中加入4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-胺[根据实施例4中的方法所制备](273.82mg,1.08mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(10mL)稀释，然后用EtOAc(20mL x 3)萃取，浓缩得到黄色油状物。将所述油用MeOH(2mL)溶解，然后通过反相HPLC(FA)纯化，用EtOAc(20mL x 2)萃取，浓缩得到呈黄色油状物的中间体C(280mg,516.08μmol,47.75％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝467.1。
步骤2：2-(甲基氨基)-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002571
将中间体C(280mg,516.08μmol)于HCl/EtOAc(5mL)中的溶液在25℃下搅拌16小时。将反应混合物浓缩，得到呈黄色残余物的中间体D(200mg,437.24μmol,84.72％产率，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝367.1。
步骤3：(S)-N-(3,3-二甲基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物74)的制备
Figure BDA0003284159120002581
在25℃下向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](90.95mg,480.74μmol)以及HATU(137.09mg,360.55μmol)和DIEA(93.20mg,721.11μmol,125.60μL)于DMF(0.5mL)中的溶液中加入中间体D(100mg,240.37μmol)。将反应混合物在25℃下搅拌3小时。将反应物倒入水(10mL)中，然后用EtOAc(10mL x 2)萃取，并在真空中浓缩。将残余物通过反相HPLC(FA)纯化，冻干，得到呈白色固体的化合物74(2.19mg,3.75μmol,1.56％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝538.3；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.61(d,J＝6.0Hz,2H),8.33(s,1H),8.03(d,J＝7.8Hz,1H),7.94-7.93(m,1H),7.78(d,J＝6.0Hz,2H),7.71(br d,J＝7.2Hz,1H),7.60-7.53(m,2H),7.26-7.25(m,1H),6.84-6.83(m,1H),4.77(s,1H),3.37(s,3H),1.14(s,9H)；ee％＝100％。
实施例74.(S)-N-(4-甲基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)戊-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物75)的制备
Figure BDA0003284159120002591
步骤1：(4-甲基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)戊-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002592
向4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-胺[根据实施例4中的方法所制备](304.84mg,1.20mmol)于DCM(10mL)中的溶液中加入EEDQ(595.16mg,2.41mmol)，将混合物在30℃下搅拌0.5小时。然后加入(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-甲基戊酸(360.00mg,1.44mmol)。将混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物用H2O(10mL)稀释，并用EtOAc(10mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(0.1％FA条件)纯化，得到呈黄色固体的中间体C(300mg,642.96μmol,53.43％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝467.1。
步骤2：(S)-2-氨基-4-甲基-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)戊酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002601
将中间体C(300mg,642.96μmol)于HCl/EA(4M,5mL)中的溶液在30℃下搅拌0.5小时。将反应混合物直接浓缩，得到粗产物。将混合物用H2O(2mL)稀释，加入1N HCl以调节pH＝8，然后用EtOAc(5mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈白色固体的中间体D(70mg，粗品)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝367.3。
步骤3：(S)-N-(4-甲基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)戊-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物75)的制备
Figure BDA0003284159120002602
向中间体D(65mg,177.36μmol)于DMF(1mL)中的溶液中加入1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](36.91mg,195.10μmol)和DIEA(114.61mg,886.82μmol,154.46μL)，然后加入EDCI(51.00mg,266.05μmol)和HOBt(28.76mg,212.84μmol)。将混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物用H2O(2mL)稀释，并用EtOAc(2mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将反应物通过反相(0.1％FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物75(18.16mg,31.11μmol,17.54％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝538.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.51(br s,1H),8.68(d,J＝6.0Hz,2H),8.38(d,J＝7.6Hz,1H),8.31(s,1H),8.01(d,J＝8.0Hz,1H),7.97-7.96(m,1H),7.82(s,1H),7.77(br d,J＝6.0Hz,3H),7.59(m,1H),7.30-7.28(m,1H),6.79-6.78(m,1H),4.75-4.70(m,1H),3.58-3.55(m,3H),1.78-1.74(m,2H),1.60-1.57(m,1H),0.96-0.90(m,6H)；ee％＝100％。
实施例75.(S)-N-(4,4-二甲基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)戊-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物76)的制备
Figure BDA0003284159120002611
步骤1：(4,4-二甲基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)戊-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002612
在25℃下向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4,4-二甲基戊酸(300mg,1.22mmol)和EEDQ(302.42mg,1.22mmol)于DCM(3mL)中的溶液中加入4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-胺[根据实施例4中的方法所制备](154.90mg,611.46μmol)。然后将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(10mL)稀释，然后用EtOAc(20mL x 2)萃取，在真空中浓缩，得到黄色油状物。将所述油状物用MeOH(2mL)溶解，然后通过反相HPLC(FA)纯化，然后用EtOAc(20mL x 2)萃取，浓缩得到呈黄色固体的中间体C(200mg,382.84μmol,62.61％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝481.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.34(br s,1H),8.70-8.65(m,2H),8.31(s,1H),8.13(s,1H),8.01(d,J＝7.8Hz,1H),7.82(s,1H),7.79-7.73(m,3H),7.63-7.56(m,1H),4.43-4.31(m,1H),1.63-1.57(m,2H),1.41-1.34(m,9H),0.94(s,9H)；ee％＝100％。
步骤2：(S)-2-氨基-4,4-二甲基-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)戊酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002621
将中间体C(200mg,416.13μmol)于HCl/EtOAc(2mL)中的溶液在25℃下搅拌16小时。将反应混合物浓缩，得到呈黄色油状物的中间体D(150mg,334.81μmol,80.46％产率，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝381.1。
步骤3：(S)-N-(4,4-二甲基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)戊-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物76)的制备
Figure BDA0003284159120002631
在25℃下向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](74.58mg,394.21μmol)以及HATU(112.42mg,295.66μmol)和DIEA(76.42mg,591.32μmol,103.00μL)于DMF(0.5mL)中的溶液中加入中间体D(75mg,197.11μmol)。将反应混合物在25℃下搅拌3小时。将反应物倒入水(10mL)中，然后用EtOAc(10mL x 2)萃取，浓缩得到黄色液体。将液体通过反相HPLC(FA)纯化，冻干，得到呈白色固体的化合物76(10.07mg,16.85μmol,8.55％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝552.3；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.63-8.59(m,2H),8.31-8.30(m,1H),8.04-7.98(m,1H),7.87-7.86(m,1H),7.80-7.76(m,2H),7.71-7.70(m,1H),7.59-7.53(m,2H),7.26-7.25(m,1H),6.83-6.82(m,1H),4.92-4.88(m,1H),3.37(s,3H),1.96-1.83(m,2H),1.05(s,9H)；ee％＝100％。
实施例76.N-(4-(二甲基氨基)-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物77)的制备
Figure BDA0003284159120002641
步骤1：(3-((4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002642
向4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-胺[根据实施例4中的方法所制备](1.27g,4.97mmol)于甲苯(8mL)中的溶液中加入AlMe3(2M,2.48mL)。将反应混合物在100℃下搅拌0.5小时。在100℃下加入2-(叔丁氧基羰基氨基)丙-2-烯酸甲酯(1g,4.97mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌0.5小时。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶色谱柱(PE～PE/EA＝1/1)纯化，并浓缩，得到呈黄色固体的中间体C(450mg,896.16μmol,18.03％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝423.9。
步骤2：(1-((4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)氨基)-4-(二甲基氨基)-1-氧代丁-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120002651
向中间体C(400mg,942.70μmol)、2-(二甲氨基)乙酸(97.21mg,942.70μmol)、双[3,5-二氟-2-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]苯基]铱(1+)；4-叔丁基-2-(4-叔丁基-2-吡啶基)吡啶六氟磷酸盐(10.58mg,9.43μmol)、二氯化镍1,2-二甲氧基乙烷(1.04mg,4.71μmol)、4-叔丁基-2-(4-叔丁基-2-吡啶基)吡啶(1.52mg,5.66μmol)、双(三甲基甲硅烷基)甲硅烷基-三甲基-硅烷(234.41mg,942.70μmol,290.83μL)于DME(1mL)中的溶液中加入Na2CO3(199.83mg,1.89mmol)。将反应物搅拌并用34W蓝色LED灯照射(7cm远，用冷却风扇将反应温度保持在25℃下1小时)。将反应混合物浓缩，得到粗产物。将粗产物通过反相柱(FA)纯化，并冻干，得到呈白色固体的中间体E(200mg,345.87μmol,36.69％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝483.0。
步骤3：(4-(二甲基氨基)-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120002652
向中间体E(200mg,413.72μmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶(169.67mg,827.44μmol)、K3PO4(263.45mg,1.24mmol)于二噁烷(2mL)和H2O(0.4mL)中的溶液中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(26.96mg,41.37μmol)。然后将混合物在70℃下在N2下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，得到粗产物。将粗产物通过反相柱(FA)纯化，并冻干，得到呈白色固体的中间体G(100mg,177.02μmol,42.79％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝482.1。
步骤4：2-氨基-4-(二甲基氨基)-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)丁酰胺(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120002661
将中间体G(100mg,189.53μmol,FA盐)于HCl/EtOAc(2mL)中的溶液在25℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，得到呈白色固体的中间体H(80mg,153.89μmol,81.20％产率，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝382.1。
步骤5：N-(4-(二甲基氨基)-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物77)的制备
Figure BDA0003284159120002662
向中间体H(35mg，83.74μmol，HCl盐)、1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](19.01mg,100.49μmol)、EDCI(32.11mg,167.48μmol)、HOBt(22.63mg,167.48μmol)于DMF(0.5mL)中的溶液中加入DIEA(54.11mg,418.71μmol,72.93μL)。然后将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，得到粗产物。将粗产物通过反相柱(FA)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物77(25mg,41.76μmol,49.87％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝533.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71-8.66(m,2H),8.62(d,J＝7.2Hz,1H),8.32(s,1H),8.22(s,1H),8.02(d,J＝7.8Hz,1H),7.94(m,1H),7.83(s,1H),7.79-7.73(m,3H),7.64-7.56(m,1H),7.32(m,1H),6.78(m,1H),4.72-4.63(m,1H),3.58(s,3H),2.48(brs,2H),2.26(s,6H),2.10-2.01(m,1H),1.98-1.89(m,1H)。
实施例77.(S)-N-(4-(二甲基氨基)-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物78)和(R)-N-(4-(二甲基氨基)-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物79)的制备
Figure BDA0003284159120002671
将N-[3-(二甲基氨基)-1-[[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基甲酰基]丙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(18mg，32.57μmol)通过SFC纯化进行纯化并浓缩，得到呈灰白色固体的化合物78(7.44mg,13.46μmol,41.33％产率)和呈灰白色固体的化合物79(8.16mg,14.76μmol,45.33％产率)。
化合物78:LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝553.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70-8.66(m,2H),8.62(d,J＝7.2Hz,1H),8.32(s,1H),8.02(d,J＝7.8Hz,1H),7.93(m,1H),7.83(s,1H),7.80-7.74(m,3H),7.60(m,1H),7.31(m,1H),6.77(m,1H),4.72-4.62(m,1H),3.58(s,3H),2.39(m,2H),2.19(s,6H),2.01(m,1H),1.90(m,1H)；ee％＝79.7％。
化合物79:LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝553.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70-8.66(m,2H),8.62(d,J＝7.0Hz,1H),8.32(s,1H),8.02(d,J＝7.8Hz,1H),7.93(m,1H),7.83(s,1H),7.79-7.74(m,3H),7.64-7.57(m,1H),7.31(m,1H),6.77(m,1H),4.66(m,1H),3.58(s,3H),2.38(m,2H),2.18(s,6H),2.04-1.96(m,1H),1.94-1.86(m,1H)；ee％＝74.5％。
实施例78.(S)-1-(异丙基磺酰基)-N-(4-(甲基硫代)-1-氧代-1-((4-苯基噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物80)的制备
Figure BDA0003284159120002681
在25℃下向1-异丙基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例42中的方法所制备](25mg,115.08μmol)和(2S)-2-氨基-4-甲基磺酰基-N-(4-苯基噻唑-2-基)丁酰胺(根据实施例5中的方法所制备)(35.27mg,114.72μmol)于DCM(1mL)中的溶液中加入DIPEA(44.62mg,345.24μmol,60.13μL)、EDCI(33.09mg,172.62μmol)和HOBt(23.32mg,172.62μmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相柱(FA条件)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物80(26.32mg,51.95μmol,45％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝507.1。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.89(d,J＝7.6Hz,2H),7.86-7.85(m,1H),7.40-7.36(m,3H),7.31-7.27(m,1H),7.22-7.20(m,1H),6.85-6.84(m,1H),4.89-4.85(m,1H),3.68-3.62(m,1H),2.72-2.59(m,2H),2.27-2.13(m,5H),1.32(d,J＝6.8Hz,6H)。手性HPLC：Cellucoat-MeOH(DEA)-5-40-3mL-35T,t＝2.217min,ee％＝100％。
实施例79.N-(2-((4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物81)的制备
Figure BDA0003284159120002691
步骤1：(2-((4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002692
将N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯[根据实施例1中的方法所制备](1g,2.43mmol)、(2,6-二甲基-4-吡啶基)硼酸(549.25mg,3.64mmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(158.08mg,242.54μmol)、K3PO4(1.54g,7.28mmol)于二噁烷(18mL)和H2O(2mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于80℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝1:1至0:1)纯化，然后在真空中浓缩，得到呈黄色固体的中间体C(0.96g,2.19mmol,90.26％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝439.2；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.26(s,1H),7.97(d,J＝8.0Hz,1H),7.67-7.64(m,1H),7.54-7.50(m,2H),7.42(s,2H),3.99(s,2H),2.57(s,6H),1.48(s,9H)。
步骤2：2-氨基-N-(4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002701
将中间体C(0.96g,2.19mmol)于HCl/MeOH(4M,20mL)中的混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物用MTBE:MeOH＝20:1(20mL)在25℃下研磨0.5小时，然后通过过滤收集固体，用MTBE(10mL)洗涤，并在真空中干燥，得到呈白色固体的中间体D(900mg，粗品，HCl)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝339.3。
步骤3：N-(2-((4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物81)的制备
Figure BDA0003284159120002702
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](242.23mg,1.28mmol)、EDCI(245.45mg,1.28mmol)、HOBt(173.01mg,1.28mmol)和TEA(809.76mg,8.00mmol,1.11mL)于DCM(8mL)中的溶液中加入中间体D(400mg,1.07mmol,HCl盐)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将反应悬浮液用MeOH(3mL)稀释，然后通过过滤收集固体，用MeOH(1mL)洗涤，并在真空中干燥，得到呈白色固体的化合物81(231.39mg,454.06μmol,42.56％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝510.1；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.27-8026(m,1H),7.99-7.97(m,1H),7.84-7.83(m,1H),7.67-7.64(m,1H),7.54-7.51(m,2H),7.42(s,2H),7.28-7.27(m,1H),6.82-6.80(m,1H),4.26(s,2H),3.38(s,3H),2.57(s,6H)。
实施例80. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物82)的制备
Figure BDA0003284159120002711
步骤1：(2-氧代-2-((4-(3-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002712
向(2-((4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(根据实施例1中的方法所制备)(1.2g，2.91mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2-(三氟甲基)吡啶(953.68mg,3.49mmol)、K3PO4(1.85g,8.73mmol)于二噁烷(20mL)和H2O(4mL)中的溶液中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(189.69mg,291.05μmol)。然后将混合物在70℃下在N2下搅拌1小时。将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(50mL x 2)萃取，将有机层用盐水(50mL)洗涤，并经Na2SO4干燥，在真空中浓缩。将粗产物通过反相柱(FA)纯化，然后用EtOAc萃取，然后在真空中浓缩，得到呈黄色固体的中间体C(1.20g,2.39mmol,82.20％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝479.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.33(s,1H),8.87(d,J＝5.2Hz,1H),8.39(m,1H),8.26(d,J＝1.0Hz,1H),8.11(m,1H),8.07(d,J＝7.8Hz,1H),7.91-7.85(m,2H),7.64(m,1H),7.18(s,1H),3.33(s,2H),1.47-1.32(m,9H)。
步骤2：2-氨基-N-(4-(3-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002721
将中间体C(1.2g,2.51mmol)于HCl/EtOAc(20mL)中的溶液在25℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，得到粗产物。将粗产物通过用(PE:EtOAc＝1:1)在25℃下研磨30分钟，然后过滤进行纯化，并在真空中干燥，得到呈灰白色固体的中间体D(1g,2.28mmol,90.83％产率,HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝379.0。
步骤3：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物82)的制备
Figure BDA0003284159120002722
向中间体D(800mg,1.93mmol,HCl盐)、1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](401.33mg,2.12mmol)、EDCI(739.39mg,3.86mmol)、HOBt(521.17mg,3.86mmol)于DMF(10mL)中的溶液中加入DIEA(1.25g,9.64mmol,1.68mL)。然后将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物倒入水(30mL)中，并用EtOAc(20mL x 2)萃取，将有机层用盐水(30mL)洗涤并经Na2SO4干燥，在真空中浓缩。将粗产物用EtOAc:MeOH＝3:1(10mL)在25℃下研磨30分钟，然后过滤并在真空中干燥，得到呈白色固体的化合物82(500mg,905.30μmol,46.94％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝550.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.46(s,1H),8.87(d,J＝5.2Hz,1H),8.71(m,1H),8.39(s,1H),8.26(s,1H),8.16-8.03(m,2H),7.92-7.83(m,3H),7.64(m,1H),7.36-7.30(m,1H),6.79(m,1H),4.16(d,J＝5.6Hz,2H),3.59(s,3H)。
实施例81. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物83)的制备
Figure BDA0003284159120002731
步骤1：(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002732
在30℃下在N2下向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(根据实施例1中的方法所制备)(250mg,606.35μmol)和(1-甲基吡唑-4-基)硼酸(229.06mg,1.82mmol)于二噁烷(6mL)和H2O(1.5mL)中的混合物中加入K3PO4(386.12mg,1.82mmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(39.52mg,60.64μmol)。将反应混合物加热至75℃，并在75℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入H2O(20mL)中，并用EtOAc(20mL x 3)萃取，将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相柱(FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的中间体C(250mg,571.38μmol,94.23％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝414.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.28(br s,1H),8.16(s,1H),8.07-8.06(m,1H),7.89(s,1H),7.75-7.68(m,2H),7.54-7.48(m,1H),7.45-7.37(m,1H),7.16-7.14(m,1H),3.93-3.84(m,5H),1.41(s,9H)。
步骤2：2-氨基-N-(4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002741
在30℃下向中间体C(250mg,604.61μmol)于二噁烷(2mL)中的混合物中加入HCl/二噁烷(4M,2mL)。将反应混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤并在真空中干燥，得到呈黄色固体的中间体D(190mg,439.79μmol,72.74％产率，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝314.3。
步骤3：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物83)的制备
Figure BDA0003284159120002751
在30℃下向[根据实施例34中的方法所制备](28.68mg,171.51μmol)于DCM(1mL)中的混合物中加入DIEA(110.83mg,857.54μmol,149.37μL)、HATU(97.82mg,257.26μmol)和中间体D(60mg,171.51μmol,HCl盐)。将反应混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物用柠檬酸水溶液(2M,1mL)和饱和NaHCO3溶液(1mL)洗涤。将有机相在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相柱(FA)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物83(22.60mg,44.44μmol,25.91％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝463.0；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.32-8.25(m,1H),8.10-8.04(m,1H),7.98(s,1H),7.85(s,1H),7.74(d,J＝8.0Hz,1H),7.59-7.57(m,1H),7.51-7.46(m,1H),7.44(s,1H),7.41-7.34(m,1H),6.96-6.94(m,1H),6.59-6.57(m,1H),4.24(s,2H),3.94(s,3H),1.57(s,9H)。
实施例82. 1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(嘧啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物84)的制备
Figure BDA0003284159120002761
步骤1：(2-氧代-2-((4-(3-(嘧啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002762
将N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(500mg,1.21mmol)、三丁基(嘧啶-4-基)锡烷(805.77mg,2.18mmol),Pd(PPh3)2Cl2(85.12mg,121.27μmol)于二噁烷(5mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于100℃下搅拌4小时。将反应混合物倒入饱和KF水溶液(15mL)中并搅拌30分钟。然后将溶液用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱(SiO2,DCM：MeOH＝1:0至20:1)纯化并浓缩，得到呈白色固体的中间体C(450mg,1.05mmol,86.19％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝412.1；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.62-12.25(m,1H),9.29(s,1H),8.90(d,J＝5.6Hz,1H),8.81(s,1H),8.18-8.12(m,2H),8.08(d,J＝7.6Hz,1H),7.76(s,1H),7.63-7.59(m,1H),7.10(s,1H),3.86(d,J＝5.6Hz,2H),1.40(s,9H)。
步骤2：2-氨基-N-(4-(3-(嘧啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002771
向中间体C(250mg,607.57μmol)于二噁烷(2mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M,1.52mL)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物用MTBE(5mL)洗涤，并在真空中干燥，得到呈黄色固体的中间体D(200mg,517.51μmol,85.18％产率，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝312.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.32(d,J＝0.8Hz,1H),8.93(d,J＝5.6Hz,1H),8.83(s,1H),8.47(s,1H),8.22-8.14(m,2H),8.10(d,J＝8.0Hz,1H),7.90(s,1H),7.66-7.62(m,1H),3.92(d,J＝5.6Hz,2H)。
步骤3：1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(嘧啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物84)的制备
Figure BDA0003284159120002772
向1-叔丁基吡咯-3-羧酸[根据实施例34中的方法所制备](96.14mg,575.01μmol)于DCM(3mL)中的溶液中加入中间体D(200mg,575.01μmol,HCl盐)、EDCI(165.34mg,862.51μmol)、HOBt(116.54mg,862.51μmol)和DIEA(371.57mg,2.88mmol,500.77μL)。将混合物在25℃下搅拌2小时。反应后，加入MeOH(5mL)，形成白色固体。将混合物过滤，并将固体用MTBE(5mL x 2)洗涤，并在真空中干燥，得到呈灰白色固体的化合物84(74.22mg,159.61μmol,27.76％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝461.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.43(s,1H),9.30(d,J＝0.8Hz,1H),8.91(d,J＝5.6Hz,1H),8.82(s,1H),8.21-8.13(m,3H),8.09(d,J＝7.6Hz,1H),7.80(s,1H),7.84-7.60(m,1H),7.53-7.52(m,1H),6.98-6.96(m,1H),6.49-6.48(m,1H),4.11(d,J＝5.6Hz,2H),1.49(s,9H)。
实施例83.N-(2-((4-(3-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物85)的制备
Figure BDA0003284159120002781
步骤1：(2-((4-(3-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002782
在N2下向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(根据实施例1中的方法所制备)(300mg,727.62μmol)和(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉(125.70mg,1.09mmol)于2-甲基丁-2-醇(3mL)中的溶液中加入t-BuXPhos-Pd-G3(57.80mg,72.76μmol)和t-BuONa(209.78mg,2.18mmol)，将混合物在60℃下搅拌4小时。将混合物倒入水(20mL)中，将溶液用EtOAc(20mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并于真空中浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2,PE:EA＝10:1-5:1)纯化，并在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体C(300mg,639.42μmol,87.88％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝447.3。
步骤2：2-氨基-N-(4-(3-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002791
将中间体C(290mg,618.10μmol)于HCl/二噁烷(3mL)中的溶液在30℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，得到残余物。将残余物用MTBE(5mL)研磨，然后过滤并在真空下干燥，得到呈黄色固体的中间体D(200mg，粗品，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝347.2。
步骤3：N-(2-((4-(3-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物85)的制备
Figure BDA0003284159120002801
向中间体D(100mg,261.16μmol,HCl盐)和1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](59.29mg,313.39μmol)于DCM(2mL)中的溶液中加入EDCI(60.08mg,313.39μmol)、DIEA(168.77mg,1.31mmol,227.45μL)和HOBt(42.35mg,313.39μmol)，将混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物倒入水(5mL)中，将溶液用EtOAc(5mL x 3)萃取，将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥并过滤。浓缩滤液，得到残余物。将残余物通过反相HPLC(0.1％FA条件)纯化并冻干，得到呈白色固体的化合物85(62.71mg,117.54μmol,45.01％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝518.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.36(s,1H),8.67-8.64(m,1H),7.85-7.83(m,1H),7.60(s,1H),7.42(s,1H),7.32-7.30(m,2H),7.27-7.23(m,1H),6.90-6.88(m,1H),6.78-6.76(m,1H),4.13-4.09(m,2H),4.08-4.06(m,2H),3.56(s,3H),3.23-3.19(m,2H),2.90-2.86(m,2H),1.22(d,J＝6.8Hz,6H)。手性HPLC：OJ-3-MeOH(DEA)-40-3ML-35T.lcm,Rt＝1.971min；ee％＝87.63％.。
实施例84.N-(2-((4-(3-((2S,6S)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物86)的制备
Figure BDA0003284159120002811
步骤1：(2-((4-(3-((2S,6S)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002812
在N2下向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(根据实施例1中的方法所制备)(300mg,727.62μmol)、(2S,6S)-2,6-二甲基吗啉(125.70mg,1.09mmol)和t-BuONa(209.78mg,2.18mmol)于二噁烷(2.5mL)中的溶液中加入[2-(2-氨基苯基)苯基]-甲基磺酰氧基-钯；二叔丁基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷(57.80mg,72.76μmol)，将混合物在70℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(20mL)稀释，并用EtOAc(10mL x3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝2/1)纯化，并在减压下浓缩，得到呈白色固体的中间体C(90mg,192.71μmol,26.49％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝447.5。
步骤2：2-氨基-N-(4-(3-((2S,6S)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002821
将中间体C(90mg,201.54μmol)于4M HCl/二噁烷(2mL)中的溶液在30℃下搅拌1小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到呈黄色固体的中间体D(80mg，粗品，HCl盐)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤3：N-(2-((4-(3-((2S,6S)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物86)的制备
Figure BDA0003284159120002822
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](39.53mg,208.93μmol),EDCI(60.08mg,313.39μmol),HOBt(42.35mg,313.39μmol)和DIEA(135.01mg,1.04mmol,181.96μL)于DCM(1mL)中的溶液中加入中间体D(80mg,208.93μmol,HCl盐)，将混合物在30℃下搅拌1小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(FA)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物86(47.85mg,83.59μmol,40.01％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝518.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.38(br s,1H),8.69-8.66(m,1H),7.84-7.83(m,1H),7.61(s,1H),7.42(s,1H),7.33-7.24(m,3H),6.91-6.88(m,1H),6.77-6.76(m,1H),4.13-4.06(m,4H),3.57(s,3H),3.23-3.19(m,2H),2.90-2.86(m,2H),1.22(d,J＝6.4Hz,6H)；ee％＝100％。
实施例85.(S)-N-(2-((4-(3-(2-甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物87)的制备
Figure BDA0003284159120002831
步骤1：(2-((4-(3-(2-甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002832
在25℃下在N2下向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(根据实施例1中的方法所制备)(500mg,1.21mmol)、(2S)-2-甲基吗啉(245.32mg,2.43mmol)和t-BuONa(349.64mg,3.64mmol)于二噁烷(5mL)中的溶液中加入t-BuXPhos-Pd-G3(96.33mg,121.27μmol)。将反应混合物在70℃下在N2下搅拌2小时。将反应混合物用水(20mL)稀释，并用EtOAc(15mL x 3)萃取，将合并的有机层用无水Na2SO4干燥并浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(0-60％的乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱剂)纯化，并在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体C(300mg,549.67μmol,45.33％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝433.1；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.24-9.91(m,1H),7.39(s,1H),7.34-7.28(m,2H),7.15(s,1H),6.89-6.88(m,1H),5.14(s,1H),4.06-3.92(m,3H),3.86-3.73(m,2H),3.58-3.43(m,2H),2.87-2.86(m,1H),2.54-2.50(m,1H),1.48(s,9H),1.28-1.25(m,3H)。
步骤2：(S)-2-氨基-N-(4-(3-(2-甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002841
向中间体C(300mg,693.59μmol)于二噁烷(1.5mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(1.5mL)，然后将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物浓缩，得到呈黄色固体的中间体D(200mg,471.48μmol,67.98％产率，HCl盐)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝333.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.59(s,1H),7.45(s,1H),7.35-7.30(m,1H),7.29-7.23(m,1H),6.91-6.89(m,1H),5.68-5.14(m,2H),3.93-3.91(m,1H),3.70-3.59(m,3H),3.53(d,J＝12.0Hz,1H),3.40(s,2H),2.71-2.63(m,1H),2.39-2.31(m,1H),1.17(d,J＝6.0Hz,3H)。
步骤3：(S)-N-(2-((4-(3-(2-甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物87)的制备
Figure BDA0003284159120002851
将1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](50mg,264.29μmol)、EDCI(76.00mg,396.43μmol)、HOBt(53.57mg,396.43μmol)和DIEA(102.47mg,792.86μmol,138.10μL)于DMF(1mL)中的溶液在25℃下搅拌5分钟，然后加入中间体D(107.24mg,290.71μmol,HCl盐)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(10mL)稀释，并用EtOAc(10mL x 4)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并浓缩，得到黄色残余物。将残余物通过反相HPLC(FA)纯化，浓缩，并用EtOAc(10mL x 2)萃取。将合并的有机层在真空中浓缩。将残余物通过反相HPLC(FA)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物87(26.55mg,47.32μmol,17.90％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝504.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.37(br s,1H),8.67-8.66(m,1H),7.84-7.83(m,1H),7.61(s,1H),7.45(s,1H),7.37-7.23(m,3H),6.93-6.91(m,1H),6.77-6.75(m,1H),4.13(d,J＝5.6Hz,2H),3.94-3.93(m,1H),3.70-3.59(m,3H),3.57(s,3H),3.53(d,J＝12.0Hz,1H),2.73-2.67(m,1H),2.34(brs,1H),1.17(d,J＝6.4Hz,3H)；ee＝100％。
实施例86.(R)-N-(2-((4-(3-(2-甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物88)的制备
Figure BDA0003284159120002861
步骤1：(2-((4-(3-(2-甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸(R)-叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002862
向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(根据实施例1中的方法所制备)(500mg,1.21mmol)、(2R)-2-甲基吗啉(183.99mg,1.82mmol),t-BuONa(349.64mg,3.64mmol)于二噁烷(10mL)中的溶液中加入t-BuXPhos-Pd-G3(96.33mg,121.27μmol)。然后将混合物在80℃下在N2下搅拌3小时。将反应混合物倒入水(10mL)中，并用EtOAc(10mL x 2)萃取。将有机层用盐水(10mL)洗涤，并经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，得到粗产物。将粗产物通过反相柱(FA)纯化，将溶液用EtOAc(30mL)萃取，然后在真空中浓缩，得到呈无色油状物的中间体C(200mg,362.05μmol,29.85％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝433.1。
步骤2：(R)-2-氨基-N-(4-(3-(2-甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002863
将中间体碳C(200mg,462.39μmol)于HCl/EtOAc(2mL)中的溶液在25℃下搅拌0.5小时。将反应混合物浓缩。将残余物用EtOAc(5mL)在25℃下研磨10分钟，然后过滤并在真空中干燥，得到呈白色固体的中间体D(160mg,374.32μmol,80.95％产率，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝333.2。
步骤3：(R)-N-(2-((4-(3-(2-甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物88)的制备
Figure BDA0003284159120002871
向中间体D(100mg,271.09μmol,HCl盐)、1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](61.54mg,325.31μmol)、EDCI(103.94mg,542.18μmol)、HOBt(73.26mg,542.18μmol)于DMF(1mL)中的溶液中加入DIEA(175.18mg,1.36mmol,236.10μL)。然后将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，得到粗产物。将粗产物通过反相柱(FA)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物88(68.13mg,117.14μmol,43.21％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝504.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.37(s,1H),8.68-9.67(m,1H),7.86-7.85(m,1H),7.62(s,1H),7.46(s,1H),7.40-7.25(m,3H),6.94-6.93(m,1H),6.79-6.78(m,1H),4.14(d,J＝6.0Hz,2H),3.96-3.95(m,1H),3.74-3.61(m,3H),3.59-3.51(m,4H),2.75-2.65(m,1H),2.39-2.38(m,1H),1.18(d,J＝6.2Hz,3H)；ee％＝100％。
实施例87.N-(2-((4-(3-(2,2-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物89)的制备
Figure BDA0003284159120002881
步骤1：(2-((4-(3-(2,2-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002882
向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(根据实施例1中的方法所制备)(500mg,1.21mmol)、2,2-二甲基吗啉(209.51mg,1.82mmol)、t-BuONa(349.62mg,3.64mmol)于二噁烷(10mL)中的溶液中加入t-BuXPhos-Pd-G3(96.33mg,121.27μmol)。然后将混合物在80℃下在N2下搅拌3小时。将反应混合物倒入水(10mL)中，并用EtOAc(10mL x 2)萃取，将有机层用盐水(10mL)洗涤并浓缩，得到粗产物。将粗产物通过反相柱(FA)纯化，并冻干，得到呈无色油状物的中间体C(180mg,249.51μmol,20.57％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝447.1。
步骤2：2-氨基-N-(4-(3-(2,2-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002891
将中间体C(180mg,403.08μmol)于HCl/EtOAc(2mL)中的溶液在25℃下搅拌0.5小时。将反应混合物浓缩，得到粗产物。将粗产物用EtOAc(5mL)在25℃下研磨30分钟，然后过滤并在真空中浓缩，得到呈白色固体的中间体D(100mg,258.55μmol,64.14％产率，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝347.2。
步骤3：N-(2-((4-(3-(2,2-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物89)的制备
Figure BDA0003284159120002892
向中间体D(100mg,261.16μmol,HCl盐)、1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](59.29mg,313.39μmol)、EDCI(100.13mg,522.32μmol)、HOBt(70.58mg,522.32μmol)于DMF(1mL)中的溶液中加入DIEA(168.77mg,1.31mmol,227.45μL)。然后将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，得到粗产物。将粗产物通过反相(FA)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物89(62.57mg,108.23μmol,41.44％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝518.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.37(s,1H),8.73-8.63(m,1H),7.85(d,J＝1.6Hz,1H),7.62(s,1H),7.44(s,1H),7.37-7.23(m,3H),6.92(d,J＝8.0Hz,1H),6.78(m,1H),4.14(d,J＝5.6Hz,2H),3.83-3.75(m,2H),3.61-3.53(m,3H),3.14-3.07(m,2H),2.99(s,2H),1.26(s,6H)。
实施例88. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(顺式-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物90)的制备
Figure BDA0003284159120002901
向1-叔丁基吡咯-3-羧酸[根据实施例34中的方法所制备](41.92mg,250.71μmol)于DMF(2mL)中的溶液中加入EDCI(60.08mg,313.39μmol)、DIEA(108.01mg,835.71μmol,145.56μL)和HOBt(42.35mg,313.39μmol)，然后加入2-氨基-N-[4-[3-[顺式-2,6-二甲基吗啉-4-基]苯基]噻唑-2-基]乙酰胺(根据实施例10中的方法所制备)(80mg,208.93μmol,HCl盐)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩以除去DMF。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.075％TFA)-乙腈]；B％：38％-68％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物90(45mg,70.82μmol,33.90％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝496.4；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.30(s,1H),8.19-8.16(m,1H),7.61(s,1H),7.54-7.50(m,1H),7.45(s,1H),7.36-7.31(m,1H),7.29-7.24(m,1H),6.99-6.91(m,2H),6.48-6.46(m,1H),4.09-4.07(d,J＝6.0Hz,2H),3.77-3.69(m,2H),3.62(d,J＝10.4Hz,2H),2.33-2.24(m,2H),1.50-1.48(m,9H),1.17(d,J＝6.4Hz,6H)。
实施例89.N-(2-((4-(3-(4-(甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物91)的制备
Figure BDA0003284159120002911
步骤1：(2-((4-(3-(4-(甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002912
在N2下向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(根据实施例1中的方法所制备)(300mg,727.62μmol)、4-(甲氧基甲基)哌啶(141.01mg,1.09mmol)和t-BuONa(209.78mg,2.18mmol)于二噁烷(2.5mL)中的溶液中加入[2-(2-氨基苯基)苯基]-甲基磺酰基氧基-钯；二叔丁基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷(57.80mg,72.76μmol)，将混合物在70℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(20mL)稀释，并用EtOAc(10mL x3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝2/1)纯化，并在减压下浓缩，得到呈白色固体的中间体C(200mg,432.97μmol,59.50％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝461.4。
步骤2：2-氨基-N-(4-(3-(4-(甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002921
将中间体C(200mg,434.23μmol)于4M HCl/二噁烷(2mL)中的溶液在30℃下搅拌1小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到呈浅黄色固体的中间体D(180mg，粗品，HCl盐)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤3：N-(2-((4-(3-(4-(甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物91)的制备
Figure BDA0003284159120002922
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](38.13mg,201.54μmol)、EDCI(57.95mg,302.32μmol)、HOBt(40.85mg,302.32μmol)和DIEA(130.24mg,1.01mmol,175.53μL)于DCM(1mL)中的溶液中加入中间体D(80mg,201.54μmol,HCl)。将混合物在30℃下搅拌1小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(FA)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物91(34.32mg,58.82μmol,29.18％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝532.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.38(br s,1H),8.69-8.66(m,1H),7.84-7.83(m,1H),7.59(s,1H),7.46(s,1H),7.32-7.21(m,3H),6.90-6.88(m,1H),6.77-6.76(m,1H),4.12(d,J＝5.6Hz,2H),3.76-3.70(m,2H),3.57(s,3H),3.24-3.21(m,5H),2.68-2.65(m,2H),1.76-1.68(m,3H),1.33-1.23(m,2H)。
实施例90.(S)-N-(2-((4-(3-(3-(甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物92)的制备
Figure BDA0003284159120002931
步骤1：3-(甲氧基甲基)哌啶-1-羧酸(S)-叔丁酯(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120002932
在0℃下向(3S)-3-(羟基甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.00g,4.64mmol)于THF(15mL)中的溶液中加入NaH(557.34mg,13.93mmol,60％纯度)。加入后，将混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后在0℃下加入MeI(1.98g,13.93mmol,867.49μL)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。将反应物用NH4Cl水溶液(50mL)稀释，用EtOAc(20mL x 3)萃取，将合并的有机层经Na2SO4干燥，浓缩得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝10/1至8:1)纯化，并真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体B(1g,4.36mmol,93.88％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝230.1。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.84-3.72(m,2H),3.23(s,3H),3.19-3.14(m,2H),2.79-2.76(m,1H),1.65-1.54(m,3H),1.39(s,9H),1.33-1.15(m,3H)。
步骤2：(S)-3-(甲氧基甲基)哌啶盐酸盐(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002941
将中间体B(1000.00mg,4.36mmol)于HCl/二噁烷(10mL)中的溶液在25℃下搅拌1.5小时。将反应混合物浓缩，得到残余物。将残余物用MTBE(30mL)研磨，然后过滤并在真空中干燥，得到呈白色固体的中间体C(500mg,3.02mmol,69.21％产率，HCl盐)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.37-3.31(m,4H),3.29(s,3H),2.88-2.82(m,1H),2.72-2.66(m,1H),2.04(br s,1H),1.91(br d,J＝14.4Hz,1H),1.80(brd,J＝13.2Hz,1H),1.67-1.64(m,1H),1.27-1.21(m,1H)。
步骤3：(2-((4-(3-(3-(甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120002942
N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(根据实施例1中的方法所制备)(150mg,363.81μmol)、中间体C(94.01mg,727.62μmol,HCl盐)、t-BuONa(174.82mg,1.82mmol)和[2-(2-氨基苯基)苯基]-甲基磺酰氧基钯；二叔丁基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷((28.90mg,36.38μmol)于二噁烷(3mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在70℃下在N2下搅拌3小时。将反应物用水(15mL)稀释，用EtOAc(5mL x 3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝8/1至2:1)纯化，并在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体E(120mg,260.54μmol,71.61％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝461.2；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.43(br s,1H),7.30(s,1H),7.27-7.25(m,1H),7.15(s,1H),6.96(d,J＝8.0Hz,1H),5.14(d,J＝3.2Hz,1H),4.07(d,J＝4.0Hz,2H),3.77-3.74(m,1H),3.63(d,J＝12.0Hz,1H),3.38(s,3H),3.36-3.34(m,2H),2.81-280(m,1H),2.63-2.58(m,1H),1.87-1.79(m,2H),1.78-1.72(m,1H),1.51(s,9H),1.25-1.19(m,1H)。
步骤4：(S)-2-氨基-N-(4-(3-(3-(甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120002951
将中间体E(120.00mg,260.54μmol)于HCl/MeOH(3mL)中的溶液在25℃下搅拌1小时。将反应物在真空中浓缩。将残余物用MTBE(10mL)研磨，过滤，并在真空中干燥，得到呈黄色固体的中间体F(90mg,226.74μmol,87.03％产率，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝361.2；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.31(br d,J＝14.0Hz,1H),8.13-8.12(m,1H),7.71(d,J＝1.2Hz,1H),7.68(d,J＝5.6Hz,2H),4.05(s,2H),3.76-3.73(m,2H),3.58-3.55(m,1H),3.52-3.47(m,1H),3.36(s,6H),2.50-2.49(m,1H),2.17(d,J＝2.0Hz,2H),1.98(d,J＝12.4Hz,1H),1.59-1.55(m,1H)。
步骤5：(S)-N-(2-((4-(3-(3-(甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物92)的制备
Figure BDA0003284159120002961
在25℃下向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](25.17mg,133.02μmol)于DCM(0.5mL)中的溶液中加入EDCI(34.77mg,181.39μmol)、HOBt(24.51mg,181.39μmol)、DIPEA(62.52mg,483.71μmol,84.25μL)。加入后，将混合物在该温度下搅拌30分钟，然后在25℃下加入中间体F(43.59mg,120.93μmol,HCl盐)。将所得混合物再搅拌2小时。将反应混合物用水(5mL)稀释，并用DCM(3mL x 3)萃取。将合并的有机层用NH4Cl(5mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝6/1至3:1)纯化，并浓缩，得到呈黄色固体的化合物92(25mg,47.02μmol,38.89％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝532.2；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.86(s,1H),7.57(s,1H),7.36-7.34(m,2H),7.30-7.24(m,2H),6.96-6.94(m,1H),6.83-6.82(m,1H),4.27(s,2H),3.78-3.71(m,1H),3.64(d,J＝12.0Hz,1H),3.39(s,3H),3.39-3.36(m,5H),2.75-2.73(m,1H),2.57-2.51(m,1H),2.04-2.02(m,1H),1.84-1.81(m,2H),1.78-1.67(m,1H),1.22-1.18(m,1H)；ee％＝84.67％。
实施例91.N-(2-((4-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物93)的制备
Figure BDA0003284159120002971
步骤1：(2-((4-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002972
将Pd2(dba)3(41.84mg,72.76μmol)、二叔丁基-[2,3,4,5-四甲基-6-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷(69.96mg,145.52μmol)于甲苯(3mL)和二噁烷(0.6mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于120℃下搅拌3分钟。然后加入N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯[根据实施例1中的方法所制备](300mg,727.62μmol)、4-甲基-1H-咪唑(71.69mg,873.15μmol)和K3PO4(308.90mg,1.46mmol)并在120℃下搅拌5小时。将反应混合物过滤并将滤液蒸发至干燥。将残余物通过制备型HPLC(基本条件)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的中间体C(210mg,507.87μmol,69.80％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝414.3。
步骤2：2-氨基-N-(4-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120002981
将中间体C(100mg,241.84μmol)溶解在HCl/二噁烷(1mL)中。将混合物在30℃下搅拌1小时。将混合物蒸发至干燥，得到呈黄色固体的中间体D(75mg,214.39μmol,88.65％产率，HCl盐)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝314.3。
步骤3：N-(2-((4-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物93)的制备
Figure BDA0003284159120002982
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](40.56mg,214.39μmol)于DCM(1mL)中的混合物中加入HATU(108.69mg,285.85μmol)和DIPEA(110.83mg,857.54μmol,149.37μL)。将混合物在30℃下搅拌15分钟，然后加入中间体D(50mg,142.92μmol,HCl盐)，并在30℃下搅拌1小时。将反应混合物蒸发至干燥。向残余物中加入MeOH(5mL)并搅拌10分钟，通过过滤收集沉淀，并用MeOH(3mL)洗涤，在真空中干燥，得到呈黄色固体的化合物93(43.71mg,87.05μmol,60.91％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝485.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.43-12.38(m,1H),8.69-8.66(m,1H),8.18(d,J＝1.2Hz,1H),8.06(d,J＝1.2Hz,1H),7.87-7.83(m,3H),7.55-7.54(m,2H),7.48(s,1H),7.32-7.30(m,1H),6.78-6.76(m,1H),4.15(d,J＝6.0Hz,2H),3.57(s,3H),2.18(s,3H)。
实施例92.N-(2-((4-(3-(4-羟基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物94)的制备
Figure BDA0003284159120002991
步骤1：8-(3-溴苯基)-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120002992
向1,3-二溴苯(2g,8.48mmol,1.02mL)、1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(1.21g,8.48mmol,1.08mL)、t-BuONa(2.44g,25.43mmol)、BINAP(1.06g,1.70mmol)于甲苯(30mL)中的溶液中加入Pd2(dba)3(776.35mg,847.80μmol)。然后将混合物在90℃下在N2下搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱(SiO2,PE:EtOAc＝10:1至5:1)纯化，并浓缩，得到呈黄色油状物的中间体C(850mg,2.53mmol,29.86产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝298.0。
步骤2：1-(3-溴苯基)哌啶-4-酮(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120003001
将中间体C(800mg,2.68mmol)于甲酸(10mL)中的溶液在80℃下搅拌1小时。将反应混合物倒入水(20mL)中，并用EtOAc(20mL x 2)萃取，将有机层用盐水(20mL)洗涤，并经Na2SO4干燥并浓缩。将粗产物通过反相柱(FA)纯化，并冻干，得到呈黄色油状物的中间体D(550mg,2.16mmol,80.67％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝255.9。
步骤3：1-(3-溴苯基)哌啶-4-醇(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120003002
向中间体D(400mg,1.57mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中加入NaBH4(89.33mg,2.36mmol)。然后将混合物在25℃下搅拌0.5小时。将反应混合物倒入水(10mL)中，并用EtOAc(10mL x 2)萃取，将有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，并在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体E(350mg,1.36mmol,86.12％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝258.0。
步骤4：1-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)哌啶-4-醇(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120003011
向中间体E(350mg,1.37mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2’-双(1,3,2-二氧杂环戊硼烷)(693.99mg,2.73mmol)、KOAc(402.32mg,4.10mmol)于二噁烷(5mL)中的溶液中加入[1,1’-双(二叔丁基膦基)二茂铁](II)(89.06mg,136.64μmol)。然后将混合物在70℃下在N2下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，得到呈黄色油状物的中间体G(400mg,790.23μmol,57.83％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝304.1。
步骤5：(2-((4-(3-(4-羟基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体I)的制备
Figure BDA0003284159120003012
向(2-((4-溴噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯[根据实施例6中的方法所制备](100mg,297.44μmol)、中间体G(165.61mg,327.18μmol)、K3PO4(189.41mg,892.31μmol)在二噁烷(1mL)和H2O(0.2mL)中的溶液中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(19.39mg,29.74μmol)。然后将混合物在70℃下在N2下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，得到粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(FA)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的中间体I(120mg,252.74μmol,84.97％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝433.1。
步骤6：2-氨基-N-(4-(3-(4-羟基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体J)的制备
Figure BDA0003284159120003021
将中间体I(120mg,277.43μmol)于HCl/EtOAc(2mL)中的溶液在25℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，得到粗产物。将粗产物用PE:EA＝1:1(10mL)在25℃下研磨30分钟，然后过滤并在真空中干燥，得到呈白色固体的中间体J(85mg,193.70μmol,69.82％产率，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝333.1。
步骤7：N-(2-((4-(3-(4-羟基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物94)的制备
Figure BDA0003284159120003022
向中间体J(80mg,216.87μmol,HCl盐)、1-甲磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](45.13mg,238.56μmol)、EDCI(83.15mg,433.74μmol)、HOBt(58.61mg,433.74μmol)于DMF(2mL)中的溶液中加入DIEA(140.15mg,1.08mmol,188.88μL)。然后将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，得到粗产物。将粗产物通过反相(NH4OH)纯化并冻干，得到呈黄色固体的化合物94(53.77mg,106.77μmol,49.23％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝504.2。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.38(s,1H),8.69-8.67(m,1H),7.86-7.84(m,1H),7.61(s,1H),7.47(s,1H),7.33-7.31(m,1H),7.30-7.21(m,2H),6.91-6.90(m,1H),6.79-6.78(m,1H),4.70(d,J＝4.4Hz,1H),4.14(d,J＝6.0Hz,2H),3.70-3.62(m,1H),3.61-3.52(m,5H),2.96-2.82(m,2H),1.93-1.78(m,2H),1.55-1.42(m,2H)。
实施例93.N-[2-[[4-[3-(4-甲氧基-1-哌啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物95)的制备
Figure BDA0003284159120003031
步骤1：N-[2-[[4-[3-(4-甲氧基-1-哌啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003032
向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯[根据实施例1中的方法所制备](200mg,485.08μmol)和4-甲氧基哌啶(88.27mg,582.10μmol)于二噁烷(10mL)中的溶液中加入t-BuONa(186.47mg,1.94mmol)，然后将混合物脱气三次，然后加入[2-(2-氨基苯基)苯基]-甲基磺酰氧基-钯；二叔丁基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷(38.53mg,48.51μmol)。将混合物在90℃下搅拌6小时。将反应溶液在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱(SiO2,PE/EtOAc＝10/1-1/1)纯化，并浓缩得到呈黄色油状物的中间体C(140mg,313.51μmol,64.63％产率)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝447.2。
步骤2：2-氨基-N-[4-[3-(4-甲氧基-1-哌啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120003041
向中间体C(140mg,313.51μmol)于二噁烷(10mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M,10mL)，然后在25℃下搅拌该溶液0.5小时。将反应溶液在真空中浓缩。将残余物用MTBE洗涤，并在真空中干燥，得到呈白色固体的中间体D(120mg,313.39μmol,99.96％产率，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝347.2。
步骤3：N-[2-[[4-[3-(4-甲氧基-1-哌啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物95)的制备
Figure BDA0003284159120003042
向中间体D(60mg,156.70μmol)和1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](29.65mg,156.70μmol)于DCM(4mL)中的混合物中加入DIPEA(81.01mg,626.78μmol)，然后加入HATU(77.45mg,203.70μmol)。将溶液在25℃下搅拌12小时。将反应溶液在真空中浓缩。将残余物通过反相(CH3CN/H2O:0％～60％,FA)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物95(22mg,39.03μmol,24.91％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝518.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.28(s,1H),8.68-8.67(m,1H),7.85-7.84(m,1H),7.60(s,1H),7.47(s,1H),7.31-7.24(m,3H),6.95-6.85(m,1H),6.78-6.77(m,1H),4.14(d,J＝5.6Hz,2H),3.57-3.53(m,5H),3.31-3.30(m,1H),3.28(s,3H),2.96-2.90(m,2H),1.97-1.94(m,2H),1.54-1.49(m,2H)。
实施例94.N-(2-((4-(3-(4-甲氧基-4-甲基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物96)的制备
Figure BDA0003284159120003051
步骤1：(2-((4-(3-(4-甲氧基-4-甲基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003052
向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯[根据实施例1中的方法所制备](500mg,1.21mmol)、4-甲氧基-4-甲基-哌啶(301.35mg,1.82mmol,HCl盐)于二噁烷(10mL)中的混合物中加入-BuONa(582.71mg,6.06mmol)和[2-(2-氨基苯基)苯基]-甲基磺酰基氧基-钯；二叔丁基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷(96.33mg,121.27μmol)。在N2的保护下，将混合物在70℃下搅拌2小时。将混合物倒入水(100mL)中，并用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用水(10mL x 3)和盐水(10mL x2)洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱(SiO2,PE:EtOAc＝10:1～1:1)纯化，并浓缩得到粗产物。通过制备型TLC(PE:EA＝2:1,Rf＝0.4)纯化粗产物，得到呈黄色固体的中间体C(100mg,155.45μmol,12.82％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝461.3。
步骤2：2-氨基-N-(4-(3-(4-甲氧基-4-甲基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120003061
将中间体C(90mg,138.74μmol)于HCl/二噁烷(4M,2mL)中的混合物在30℃下搅拌2小时。将混合物用DCM(20mL)稀释，并在真空中浓缩。该操作重复了三次。将残余物用MTBE(5mL x 2)洗涤，并在真空中浓缩，得到呈黄色固体的中间体D(60mg,粗品，HCl盐)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝361.1。
步骤3：N-(2-((4-(3-(4-甲氧基-4-甲基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物96)的制备
Figure BDA0003284159120003071
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](26.21mg,138.56μmol)于DCM(5mL)中的溶液中加入HATU(71.84mg,188.95μmol)和DIEA(48.84mg,377.90μmol,65.82μL)。然后加入中间体D(50mg,125.97μmol,HCl盐)，将混合物在30℃下搅拌2小时。将混合物倒入水中(50mL)，并用DCM(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用水(10mL x 3)和盐水(10mL x 2)洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速(FA条件)纯化，并冻干，得到呈灰白色固体的化合物96(18.34mg,30.99μmol,24.60％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝532.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.35(s,1H),8.68-8.65(m,1H),8.14(s,1H),7.86-7.83(m,1H),7.60(s,1H),7.48(s,1H),7.34-7.21(m,3H),6.91(d,J＝8.0Hz,1H),6.78-6.77(m,1H),4.14(d,J＝5.6Hz,2H),3.57(s,3H),3.37(s,2H),3.14(s,3H),3.10-3.01(m,2H),1.79(d,J＝13.2Hz,2H),1.66-1.53(m,2H),1.15(s,3H)。
实施例95.(R)-1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(3-甲氧基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物97)的制备
Figure BDA0003284159120003081
步骤1：3-甲氧基哌啶-1-羧酸(R)-叔丁酯(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120003082
在0℃下向(3R)-3-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1g,4.97mmol)于THF(5mL)中的溶液中加入NaH(397.49mg,9.94mmol,60％纯度)。将混合物在0℃下搅拌30分钟。加入碘甲烷(1.06g,7.45mmol,463.97μL)，并将混合物在20℃下搅拌16小时。将反应混合物通过添加饱和NH4Cl溶液(15mL)猝灭，然后用EtOAc(10mL x 5)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL x3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色油状物的中间体B(0.9g,4.18mmol,84.14％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.02-3.68(m,1H),3.66-3.56(m,1H),3.40(s,3H),3.23-3.21(m,1H),3.07(br s,2H),2.02-1.91(m,1H),1.81-1.70(m,1H),1.53-1.39(m,10H),0.95-0.84(m,1H)。
步骤2：(R)-3-甲氧基哌啶(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003083
向中间体B(0.8g,3.72mmol)于MeOH(1mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M,8.00mL)。将混合物在20℃下搅拌30分钟。将反应混合物浓缩，得到呈黄色固体的中间体C(0.6g，粗品，HCl盐)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤3：(2-((4-(3-(3-甲氧基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸(R)-叔丁酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120003091
将N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯[根据实施例1中的方法所制备](200mg,485.08μmol)、中间体C(88.27mg,582.10μmol,HCl盐)、t-BuONa(233.08mg,2.43mmol)和t-BuXPhos Pd G3(38.53mg,48.51μmol)于二噁烷(5mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于100℃下搅拌16小时。将反应混合物浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2,石油醚/EtOAc＝1/1)纯化，得到呈黄色油状物的中间体E(130mg,291.11μmol,60.01％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝447.5。
步骤4：(R)-2-氨基-N-(4-(3-(3-甲氧基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120003092
向中间体E(0.12g,268.72μmol)于MeOH(1mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M,578.42μL)。将混合物在20℃下搅拌30分钟。将反应混合物浓缩，得到呈黄色固体的中间体F(125mg,粗品，HCl盐)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝347.0。
步骤5：(R)-1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(3-甲氧基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物97)的制备
Figure BDA0003284159120003101
向1-叔丁基吡咯-3-羧酸[根据实施例34中的方法所制备](31.44mg,188.04μmol)于DCM(2mL)中的溶液中加入2-氨基-N-[4-[3-[(3R)-3-甲氧基-1-哌啶基]苯基]噻唑-2-基]乙酰胺(60mg,156.70μmol,HCl盐)、DIPEA(81.01mg,626.80μmol,109.17μL)和HATU(89.37mg,235.05μmol)。将混合物在20℃下搅拌2小时。将反应混合物浓缩至干燥，得到残余物。将残余物通过制备型TLC(SiO2，石油醚/EtOAc＝1/1)纯化，得到粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：25％-45％)进一步纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物97(6.38mg,10.46μmol,6.68％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝496.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.28(s,1H),8.17-8.15(m,1H),7.61(s,1H),7.55-7.46(m,2H),7.40-7.20(m,2H),6.98-6.96(m,2H),6.48(dd,J＝2.8Hz,2.0Hz,1H),4.10-4.08(m,2H),3.70-3.68(m,1H),3.41-3.39(m,2H),3.33(s,3H),2.85-2.83(m,1H),2.77-2.75(m,1H),2.02-2.00(m,1H),1.82-1.80(m,1H),1.60-1.58(m,1H),1.50(s,9H),1.38-1.36(m,1H)；ee％＝100％。
实施例96.(S)-1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(3-甲氧基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物98)的制备
Figure BDA0003284159120003111
向2-氨基-N-[4-[3-[(3S)-3-甲氧基-1-哌啶基]苯基]噻唑-2-基]乙酰胺(根据实施例11中的方法所制备)(120mg,313.39μmol,HCl盐)、1-叔丁基吡咯-3-羧酸[根据实施例34中的方法制备](78.60mg,470.09μmol)和DIEA(202.51mg,1.57mmol,272.93μL)于DCM(0.5mL)中的溶液中加入HOBt(50.81mg,376.07μmol)和EDCI(180.23mg,940.18μmol)，将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩，得到残余物。将残余物通过预制型HPLC(流动相：[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：21％-51％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物98(78.98mg,129.55μmol,41.34％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝496.5；1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.09(s,1H),7.97(d,J＝8.0Hz,1H),7.61-7.53(m,3H),7.50(d,J＝8.0Hz,1H),6.97-6.95(m,1H),6.58-6.56(m,1H),4.23(s,2H),3.81-3.69(m,3H),3.48(d,J＝0.6Hz,5H),2.25-2.23(m,1H),2.08-1.96(m,1H),1.95-1.84(m,2H),1.57(d,J＝0.8Hz,9H)；ee％＝100％。
实施例97.N-[2-[[4-[3-(4-甲氧基-1-哌啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物99)的制备
Figure BDA0003284159120003121
步骤1：N-[2-[[4-(3-吗啉代苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003122
向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯[根据实施例1中的方法所制备](400mg,970.17μmol)和吗啉(126.78mg,1.46mmol)于叔戊醇(8mL)中的溶液中加入t-BuONa(372.95mg,3.88mmol)，然后加入[2-(2-氨基苯基)苯基]-甲基磺酰氧基-钯；二叔丁基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷(154.13mg,194.03μmol)，并将混合物脱气三次。将溶液在70℃下搅拌4小时。将反应溶液倒入NH4Cl水溶液(100mL)中，然后用EtOAc(200mL)萃取。将有机层用盐水(100mL)洗涤并干燥。将溶液在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱(SiO2,PE/EtOAc＝5/1-2/1)纯化，并浓缩得到呈黄色固体的中间体C(200mg,477.89μmol,49.26％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝419.2。
步骤2：2-氨基-N-[4-(3-吗啉代苯基)噻唑-2-基]乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120003131
向中间体C(200mg,477.89μmol)于二噁烷(5mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M,10mL)，然后将溶液在25℃下搅拌1小时。将反应溶液在真空中浓缩。将残余物用MBTE(50mL)洗涤。将固体在真空中干燥，得到呈黄色固体的中间体D(200mg,粗品，2HCl盐)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝319.2。
步骤3：1-甲基磺酰基-N-[2-[[4-(3-吗啉代苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物99)的制备
Figure BDA0003284159120003132
向中间体D(100mg,255.55μmol)和1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](58.02mg,306.66μmol)于DCM(5mL)中的溶液中加入DIPEA(165.14mg,1.28mmol)，然后加入EDCI(58.79mg,306.66μmol)和HOBt(41.44mg,306.66μmol)。将溶液在25℃下搅拌12小时。将反应溶液倒入柠檬酸水溶液(50mL)中，然后用EtOAc(100mL)萃取。将有机层用盐水(100mL)洗涤并干燥。将溶液在真空中浓缩。将残余物在MeOH(20mL)中研磨并过滤。将固体在真空中干燥，得到白色固体呈的化合物99(38mg,75.90μmol,29.70％％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝490.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.37(s,1H),8.68-8.65(m,1H),7.85-7.84(m,1H),7.61(s,1H),7.47(s,1H),7.35-7.28(m,3H),6.95-6.85(m,1H),6.78-6.77(m,1H),4.14(d,J＝5.6Hz,2H),3.78-3.76(m,4H),3.57(s,3H),3.17-3.14(m,4H)。
实施例98. 1-叔丁基-N-[2-[[4-(3-吗啉代苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物100)的制备
Figure BDA0003284159120003141
步骤1：N-[2-[[4-(3-吗啉代苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003142
向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯[根据实施例1中的方法所制备](400mg,970.17μmol)和吗啉(126.78mg,1.46mmol)于叔戊醇(8mL)中的溶液中加入t-BuONa(372.95mg,3.88mmol)，然后加入[2-(2-氨基苯基)苯基]-甲基磺酰氧基-钯；二叔丁基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷(154.13mg,194.03μmol)，并将混合物脱气三次。将溶液在70℃下搅拌4小时。将反应溶液倒入NH4Cl水溶液(100mL)中，然后用EtOAc(200mL)萃取。将有机层用盐水(100mL)洗涤并干燥。将溶液在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱(SiO2,PE/EtOAc＝5/1～2/1)纯化，并浓缩得到呈黄色固体的中间体C(200mg,477.89μmol,49.26％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝419.2。
步骤2：2-氨基-N-[4-(3-吗啉代苯基)噻唑-2-基]乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120003151
向中间体C(200mg,477.89μmol)于二噁烷(5mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M,10mL)，然后将溶液在25℃下搅拌1小时。将反应溶液在真空中浓缩。将残余物用TBME(50mL)洗涤。将固体在真空中干燥，得到呈黄色固体的中间体D(200mg,粗品，2HCl盐)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝319.2。
步骤3：1-叔丁基-N-[2-[[4-(3-吗啉代苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物100)的制备
Figure BDA0003284159120003152
向中间体D(100mg,255.55μmol)和1-叔丁基吡咯-3-羧酸[根据实施例34中的方法所制备]1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](58.02mg,306.66μmol)于DCM(5mL)中的溶液中加入DIPEA(165.14mg,1.28mmol)，然后加入EDCI(58.79mg,306.66μmol)和HOBt(41.44mg,306.66μmol)。将溶液在25℃下搅拌12小时。将反应溶液倒入柠檬酸水溶液(50mL)中，然后用EtOAc(100mL)萃取。将有机层用盐水(100mL)洗涤并干燥。将溶液在真空中浓缩。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：33％-63％)进一步纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物100(40mg,68.78μmol,26.91％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝468.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.30(s,1H),8.19-8.16(m,1H),7.61(s,1H),7.52-7.51(m,1H),7.48-7.47(m,1H),7.35-7.34(m,1H),7.28-7.36(m,1H),6.68-6.96(m,2H),6.48-6.47(m,1H),4.08(d,J＝5.6Hz,2H),3.78-3.76(m,4H),3.17-3.15(m,4H),1.49(s,9H)。
实施例99.N-(2-((4-(3-(2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚-6-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物101)的制备
Figure BDA0003284159120003161
步骤1：(2-((4-(3-(2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚-6-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003162
将N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯[根据实施例1中的方法所制备](500mg,1.21mmol)、2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚烷(275.28mg,1.46mmol，草酸酯)、t-BuONa(466.16mg,4.85mmol)和[2-(2-氨基苯基)苯基]-甲基磺酰基氧基-钯；(5-二苯基磷烷基-9,9-二甲基-呫吨-4-基)-二苯基-磷烷(115.01mg,121.27μmol)于二噁烷(5mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛下于80℃下搅拌5小时。加入水(20mL)，并将反应混合物用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将粗产物通过反相HPLC(0.1％FA条件)纯化。然后加入饱和NaHCO3(20mL)，并将反应混合物用EtOAc(50*2mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈白色固体的中间体C(150mg,331.00μmol,27.29％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝431.3。
步骤2：N-(4-(3-(2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚-6-基)苯基)噻唑-2-基)-2-氨基乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120003171
向中间体C(140mg,325.19μmol)于DCM(5mL)中的溶液中加入TFA(1mL)。将混合物在0℃下搅拌2小时。加入饱和NaHCO3(20mL)，并将反应混合物用EtOAc 100mL(50mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色固体的中间体D(80mg,粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝331.1。
步骤3：N-(2-((4-(3-(2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚-6-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物101)的制备
Figure BDA0003284159120003181
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](48.10mg,254.23μmol)于DMF(2mL)中的溶液中加入EDCI(60.92mg,317.79μmol)、DIEA(82.14mg,635.59μmol,110.71μL)和HOBt(42.94mg,317.79μmol)。然后加入中间体D(70mg,211.86μmol)。将混合物在25℃下搅拌25小时。将反应混合物用MeOH(2mL)稀释。将反应混合物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.075％TFA)-乙腈]；B％：25％-55％)纯化，并冻干得到粗产物，将产物在25℃下用MeOH(20mL)研磨，并通过过滤收集，得到呈黄色固体的化合物101(38mg,59.60μmol,28.13％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝502.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.39(s,1H),8.66-8.63(m,1H),7.85-7.83(m,1H),7.55(s,1H),7.35-7.28(m,1H),7.24-7.18(m,2H),6.96(s,1H),6.78-6.76(m,1H),6.42-6.35(m,1H),4.73(s,4H),4.13(d,J＝6.0Hz,2H),3.99(s,4H),3.57(s,3H)。
实施例100. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(2-(吡啶-4-基氧基)丙-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物102)的制备
Figure BDA0003284159120003191
步骤1：2-(3-溴苯基)丙-2-醇(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120003192
将1-(3-溴苯基)乙酮(2g，10.05mmol，1.32mL)的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后在0℃下加入MeMgBr/THF(3M,10.05mL)。将混合物在N2气氛下于25℃下搅拌2小时。加入水(80mL)，将反应混合物用EtOAc(200mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(80mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-20％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，并浓缩，得到呈无色油状物的中间体B(2g,9.30mmol,92.54％产率)。
步骤2：三苯基(吡啶-4-基)三氟甲磺酸鏻(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003193
根据以下参考文献中描述的方法合成三苯基(吡啶-4-基)三氟甲磺酸鏻：Hilton,M.C.；Ryan D.Dolewski,R.D.；McNally A.Journal of the American Chemical Society(2016)138(42),13806-13809
在-78℃下在N2下向吡啶(500mg,6.32mmol,510.20μL)于DCM(50mL)中的溶液中加入Tf2O(1.78g,6.32mmol,1.04mL)。将反应物搅拌30分钟，然后加入PPh3(1.82g,6.95mmol)。将混合物搅拌30分钟后，通过注射器滴加所述有机DBU(962.33mg,6.32mmol,952.80μL)，移去冷却浴，并在搅拌下使反应物升温至25℃(30分钟)。加入水(50mL x 3)，并将反应混合物用DCM(100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将粗产物用MTBE(40mL)在25℃下研磨10分钟，然后过滤并在真空中干燥，得到呈白色固体的中间体C(2.5g,5.11mmol,80.81％产率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.79-8.78(m,2H),7.98-7.80(m,3H),7.73-7.87(m,14H)。
步骤3：4-((2-(3-溴苯基)丙-2-基)氧基)吡啶(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120003201
在0℃下在N2下向中间体B(500mg,2.32mmol)于THF(5mL)中的溶液中加入NaH(139.47mg,3.49mmol,60％纯度)。将混合物搅拌30分钟，然后在0℃下加入中间体C(1.14g,2.32mmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时。加入水(20mL)，并将反应混合物用EtOAc(50mL x2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-90％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，并浓缩，得到呈黄色油状物的中间体E(120mg,410.72μmol,17.67％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.26-8.25(m,2H),7.55-7.53(m,1H),7.45-7.43(m,1H),7.33-7.31(m,1H),7.25-7.21(m,1H),6.52-6.50(m,2H),1.76(s,6H)。
步骤4：4-((2-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)丙-2-基)氧基)吡啶(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120003211
将中间体E(110mg,376.49μmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(286.82mg,1.13mmol)、KOAc(147.80mg,1.51mmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(24.54mg,37.65μmol)于二噁烷(4mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在80℃下在N2气氛下搅拌2小时。加入水(20mL)，并将反应混合物用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝20/1至1:1)纯化，并浓缩得到呈棕色油状物的中间体G(150mg,粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤5：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(2-(吡啶-4-基氧基)丙-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物102)的制备
Figure BDA0003284159120003212
将N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例6中的方法所制备](120mg,294.65μmol)、中间体G(119.60mg,352.57μmol)、K3PO4(250.18mg,1.18mmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(38.41mg,58.93μmol)于二噁烷(2mL)和H2O(0.5mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在100℃下在N2气氛下搅拌2小时。加入水(20m L)，并将反应混合物用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(10mMNH4HCO3)-乙腈]；B％：20％-50％)进一步纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物102(4.2mg,7.71μmol,2.62％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝540.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.33(s,1H),8.55(s,1H),8.20-8.18(m,2H),7.97(s,1H),7.83-7.80(m,2H),7.56(s,1H),7.44-7.40(m,1H),7.34(d,J＝7.6Hz,1H),7.30-7.29(m,1H),6.77-6.75(m,1H),6.59-6.58(m,2H),4.08(d,J＝5.2Hz,2H),3.57(s,3H),1.79(s,6H)。
实施例101. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(1-苯氧基乙基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物103)的制备
Figure BDA0003284159120003221
步骤1：1-(3-溴苯基)乙醇(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120003222
向1-(3-溴苯基)乙酮(1g,5.02mmol,662.25μL)于MeOH(10mL)中的溶液中加入NaBH4(380.14mg,10.05mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。加入2N HCl(20mL)和H2O(30mL)，并将反应混合物用EtOAc(100mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈无色油状物的中间体B(1.2g,粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.57(s,1H),7.44(d,J＝7.6Hz,1H),7.33-7.30(m,1H),7.27-7.23(m,1H),4.92-4.87(m,1H),1.97(s,1H),1.52(d,J＝6.4Hz,3H)。
步骤2：1-溴-3-(1-苯氧乙基)苯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120003231
向中间体B(1g,4.97mmol)于THF(10mL)中的溶液中加入苯酚(561.69mg,5.97mmol,524.94μL)和DIAD(1.01g,4.97mmol,967.03μL)，然后在0℃下在N2下加入PPh3(1.57g,5.97mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。加入水(50mL)，并将反应混合物用EtOAc(100mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-10％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，并浓缩，得到呈黄色油状物的中间体D(600mg,2.16mmol,43.53％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.55-7.54(m,1H),7.40-7.38(m,1H),7.32-7.30(m,1H),7.25-7.19(m,3H),6.93-6.89(m,1H),6.87-6.84(m,2H),5.29-5.24(m,1H),1.63(d,J＝6.4Hz,3H)。
步骤3：4,4,5,5-四甲基-2-(3-(1-苯氧基乙基)苯基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120003241
将中间体D(200mg,721.62μmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(219.89mg，865.94μmol)、KOAc(212.46mg，2.16mmol)和Pd(dppf)Cl2(52.80mg,72.16μmol)于二噁烷(2mL)中的混合物脱气并用吹扫3次，然后将混合物在80℃下在N2气氛下搅拌2小时。加入水(30mL)，并将反应混合物用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-20％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，并浓缩，得到呈黄色油状物的中间体F(100mg,308.43μmol,42.74％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤4：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(1-苯氧基乙基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物103)的制备
Figure BDA0003284159120003242
将N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例6中的方法所制备](50mg,122.77μmol)、中间体F(79.61mg,245.54μmol),K3PO4(78.18mg,368.31μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(16.00mg,24.55μmol)于二噁烷(2mL)和H2O(0.5mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在100℃下在N2气氛下搅拌2小时。加入水(20mL)，并将反应混合物用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.075％TFA)-乙腈]；B％：48％-78％)进一步纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物103(13mg,24.78μmol,20.18％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝525.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.39(s,1H),8.67-8.64(m,1H),7.96(s,1H),7.84-7.83(m,1H),7.77(d,J＝7.2Hz,1H),7.61(s,1H),7.41-7.35(m,2H),7.31-7.30(m,1H),7.22-7.18(m,2H),6.91(d,J＝8.0Hz,2H),6.86-6.83(m,1H),6.77-6.76(m,1H),5.53-5.49(m,1H),4.13(d,J＝6.0Hz,2H),3.56(s,3H),1.57(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例102. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(苯氧基甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物104)的制备
Figure BDA0003284159120003251
步骤1：1-溴-3-(苯氧甲基)苯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003252
向苯氧基钠(564.99mg,4.87mmol,856.68μL)于DMF(10mL)中的溶液中加入1-溴-3-(氯甲基)苯(500mg,2.43mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。加入水(50mL)，并将反应混合物用EtOAc(100mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-20％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，并浓缩得到呈无色油状物的中间体C(600mg,2.28mmol,93.71％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.63(s,1H),7.48(d,J＝8.0Hz,1H),7.39(d,J＝7.6Hz,1H),7.34-7.25(m,3H),7.00-6.98(m,3H),5.06(s,2H)。
步骤2：4,4,5,5-四甲基-2-(3-(苯氧甲基)苯基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120003261
将中间体C(200mg,760.08μmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(231.62mg,912.10μmol)、KOAc(223.79mg,2.28mmol)和Pd(dppf)Cl2(55.62mg,76.01μmol)于二噁烷(2mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在80℃下在N2气氛下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩以除去二噁烷。将残余物通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-20％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，并浓缩，得到呈黄色固体的中间体E(120mg,386.85μmol,50.90％产率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.82(s,1H),7.72-7.68(m,1H),7.58-7.53(m,1H),7.29-7.24(m,1H),7.31-7.23(m,2H),7.04-6.97(m,3H),5.06(s,2H),1.35(s,12H)。
步骤3：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(苯氧基甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物104)的制备
Figure BDA0003284159120003271
将N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例6中的方法所制备](50mg,122.77μmol)、中间体E(76.17mg,245.54μmol)、K3PO4(78.18mg,368.31μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(16.00mg,24.55μmol)于二噁烷(2mL)和H2O(0.5mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在100℃下在N2气氛下搅拌2小时。加入水(20mL)，并将反应混合物用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.075％TFA)-乙腈]；B％：48％-78％)进一步纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物104(16.19mg,31.71μmol,25.83％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝511.3；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.39(s,1H),8.67-8.65(m,1H),8.00(s,1H),7.85-7.83(m,2H)7.65(s,1H),7.46-7.39(m,2H),7.31-7.27(m,3H),7.03(d,J＝8.0Hz,2H),6.96-6.92(m,1H),6.77-6.76(m,1H),5.15(s,2H),4.13(d,J＝6.0Hz,2H),3.57(s,3H)。
实施例103.N-(2-((4-(3-((((1R,4R)-4-羟基环己基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物105)的制备
Figure BDA0003284159120003281
步骤1：(1R,4R)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环己醇(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120003282
向环己烷-1,4-二醇(3g,25.83mmol)和TBDPSCl(7.10g,25.83mmol,6.63mL)于DCM(60mL)和DMF(30mL)中的溶液中加入咪唑(1.76g,25.83mmol)于DCM(30mL)中的溶液。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(50mL)稀释，用DCM(30mL x 3),萃取，将合并的有机层用盐水洗涤，并经无水Na2SO4干燥并浓缩，得到白色固体。将固体分散在DCM(5mL)中并过滤，将滤液通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-30％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，浓缩得到呈浅黄色油物的中间体B(5.00g,11.28mmol,43.68％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.59-7.58(m,4H),7.47-7.39(m,6H),4.39(d,J＝4.4Hz,1H),3.66-3.59(m,1H),3.45-3.40(m,1H),1.75-1.66(m,4H),1.38-1.28(m,2H),1.09-1.03(m,2H),0.99(s,9H)。
步骤2：(((1R,4R)-4-((3-溴苄基)氧基)环己基)氧基)(叔丁基)二苯基硅烷(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120003291
在0℃下向NaH(676.84mg,16.92mmol,60％纯度)于THF(30mL)中的混合物中滴加中间体B(3g,8.46mmol,917.43μL)于THF(5mL)中的溶液，将反应混合物在0℃下搅拌15分钟，然后在0℃下滴加1-溴-3-(溴甲基)苯(3.17g,12.69mmol)于THF(5mL)中的溶液。将反应混合物升温至25℃，并搅拌4小时。将反应混合物用饱和NH4Cl(50mL)猝灭，并用EtOAc(20mLx 2)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并浓缩，得到黄色油状物。将油通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-20％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，浓缩得到呈黄色油状物的中间体D(3.30g,粗品)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.62-7.58(m,4H),7.53-7.49(m,1H),7.46-7.42(m,7H),7.27(d,J＝5.2Hz,2H),4.69(s,2H),3.79-3.69(m,1H),3.43-3.40(m,1H),1.95-1.86(m,2H),1.72(d,J＝9.8Hz,2H),1.43(br s,2H),1.32-1.21(m,2H),1.00(s,9H)。
步骤3：(1R,4R)-4-((3-溴苄基)氧基)环己醇(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120003292
将中间体D(200mg,381.99μmol)于TBAF/THF(1M,2mL)中的溶液在80℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(5mL)稀释，并用EtOAc(5mL x 2)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并浓缩，得到黄色油状物。将油用DCM(1mL)溶解，并通过硅胶色谱(PE/EA＝5/1至0/1)纯化，浓缩得到呈黄色油状物的中间体E(90mg,252.48μmol,66.09％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.49(s,1H),7.47-7.43(m,1H),7.32-7.29(m,2H),4.50(d,J＝4.0Hz,1H),4.48(s,2H),3.44-3.41(m,1H),3.31-3.26(m,1H),1.96-1.89(m,2H),1.83-1.74(m,2H),1.32-1.23(m,2H),1.20-1.12(m,2H)。
步骤4：(1R,4R)-4-((3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)环己醇(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120003301
在25℃下在N2下向中间体E(90mg，315.59μmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(104.18mg,410.27μmol)和KOAc(92.92mg,946.78μmol)于二噁烷(1mL)中的溶液中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(20.57mg,31.56μmol)。将反应混合物在80℃下在N2下搅拌3小时。将反应混合物用水(5mL)稀释，并用EtOAc(3mL x 3)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并浓缩，得到呈黑褐色油状的中间体G(100mg，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝333.0。
步骤5：N-(2-((4-(3-((((1R,4R)-4-羟基环己基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物105)的制备
Figure BDA0003284159120003311
在25℃下在N2下向入N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例6中的方法所制备](61.29mg,150.49μmol)、中间体G(100mg,300.99μmol)和K3PO4(95.83mg,451.48μmol)于二噁烷(0.8mL)和H2O(0.2mL)中的溶液中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(9.81mg,15.05μmol)。将反应混合物在75℃下在N2下搅拌4小时。将反应混合物用水(5mL)稀释，并用EtOAc(4mL x 3)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并浓缩，得到黑褐色油状物。将油用DCM(2mL)溶解，并通过制备型TLC(EA)纯化，浓缩得到白色残余物。将残余物用DMSO(1mL)溶解，并通过制备型HPLC(FA)纯化，浓缩并冻干，得到呈白色固体的化合物105(3.00mg,5.37μmol,3.57％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝533.1；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.90(s,1H),7.84-7.83(m,1H),7.81(d,J＝7.6Hz,1H),7.39(s,1H),7.38-7.34(m,1H),7.31-7.26(m,2H),6.81-6.80(m,1H),4.58(s,2H),4.26(s,2H),3.66-3.55(m,1H),3.48-3.40(m,1H),3.38(s,3H),2.13-2.04(m,2H),1.99-1.91(m,2H),1.43-1.26(m,4H)。
实施例104. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基甲氧基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物106)的制备
Figure BDA0003284159120003321
步骤1：4-((3-溴苯氧基)甲基)吡啶(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003322
在30℃下向3-溴苯酚(300mg,1.73mmol)和4-(溴甲基)吡啶(357.95mg,2.08mmol)于DMF(5mL)中的混合物中加入Cs2CO3(1.13g,3.47mmol)。将反应混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物倒入H2O(30mL)中，并用EtOAc(30mL x3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL x 3)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝5/1-3/1)纯化，并浓缩，得到呈黄色油状物的中间体C(300mg,1.08mmol,62.23％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝266.0；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.68-8.58(m,2H),7.35(d,J＝6.0Hz,2H),7.15(s,3H),6.91(s,1H),5.09(s,2H)。
步骤2：4-((3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯氧基)甲基)吡啶(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120003331
在30℃下在N2下向中间体C(300mg,1.14mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(346.12mg,1.36mmol)于二噁烷(5mL)中的混合物中加入KOAc(334.43mg,3.41mmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(74.03mg,113.59μmol)。将反应混合物加热至75℃，并在75℃下在N2下搅拌4小时。将反应混合物过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝5/1-1/1)纯化，并在真空中浓缩，得到呈棕色油状物的中间体E(310mg,897.76μmol,79.04％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝312.1；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.63(d,J＝6.0Hz,2H),7.46(d,J＝7.2Hz,1H),7.39(br d,J＝6.0Hz,3H),7.35-7.30(m,1H),7.11-7.05(m,1H),5.13(s,2H),1.36(s,12H)。
步骤3：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基甲氧基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物106)的制备
Figure BDA0003284159120003332
在30℃下在N2下向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例6中的方法所制备](60mg,147.32μmol)和中间体E(91.69mg,294.65μmol)于二噁烷(1.2mL)和H2O(0.3mL)中的混合物中加入K3PO4(93.82mg,441.97μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(9.60mg,14.73μmol)。将反应混合物加热至75℃，并在75℃下搅拌2小时。将反应混合物过滤，并将滤饼用MeOH(5mL)洗涤，得到黄色固体。将黄色固体通过反相柱(FA条件)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物106(21.13mg,37.89μmol,25.72％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝512.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.38(br s,1H),8.66(s,1H),8.63-8.57(m,2H),7.83-7.85(m,1H),7.66(s,1H),7.59-7.55(m,1H),7.52(d,J＝8.0Hz,1H),7.47(d,J＝6.0Hz,2H),7.38-7.34(m,1H),7.32-7.30(m,1H),7.00-6.97(m,1H),6.78-6.76(m,1H),5.24(s,2H),4.14(d,J＝5.6Hz,2H),3.57(s,3H)。
实施例105. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-((吡啶-2-基氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物107)的制备
Figure BDA0003284159120003341
步骤1：2-((3-溴苄基)氧基)吡啶(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003351
在25℃下向(3-溴苯基)甲醇(5g,26.73mmol,3.21mL)和2-氟吡啶(3.89g,40.10mmol,3.45mL)于甲苯(100mL)中的混合物中一次性加入KOH(6.00g,106.93mmol)和18-冠-6(7.77g,29.41mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将混合物倒入冰水(200mL)中，搅拌2分钟。将水相用EtOAc(100mL x 2)萃取。将合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体C(6.2g,23.47mmol,87.81％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝264.0；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.15-8.13(m,1H),7.75-7.67(m,1H),7.62(s,1H),7.45-7.42(m,2H),7.29(d,J＝16.8Hz,1H),6.97-6.95(m,1H),6.88(d,J＝8.4Hz,1H),5.35(s,2H)。
步骤2：2-((3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)吡啶(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120003352
在25℃下在N2下向中间体C(2g,7.57mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(2.31g,9.08mmol)于二噁烷(20mL)中的混合物中一次性加入KOAc(1.49g,15.14mmol)和Pd(dppf)Cl2(276.95mg,378.50μmol)。将混合物在100℃下搅拌4小时。将混合物在真空中浓缩。将残余物通过柱(PE/EA＝10/1)纯化，并浓缩，得到呈黄色油状物的中间体E(2.5g，粗品)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝312.1；1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.16-8.04(m,1H),7.83(s,1H),7.71-7.69(m,2H),7.57-7.55(m,1H),7.44-7.34(m,1H),6.97-6.87(m,1H),6.88-6.87(m,1H),5.36(s,2H),1.36(s,12H)。
步骤3：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-((吡啶-2-基氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物107)的制备
Figure BDA0003284159120003361
在25℃下在N2下向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例6中的方法所制备](100mg,245.54μmol)和中间体E(229.22mg,736.62μmol)于二噁烷(5mL)和H2O(1mL)中的混合物中一次性加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(16.00mg,24.55μmol)和K3PO4(104.24mg,491.08μmol)。将混合物在75℃下搅拌4小时。将混合物倒入水(30mL)中，并用EtOAc(30mL x 2)萃取。将合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过反相柱(FA)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物107(33.94mg,60.62μmol,24.69％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝512.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.42(br s,1H),8.70-8.67(m,1H),8.22-8.18(m,1H),8.00(s,1H),7.89-7.85(m,2H),7.75-7.73(m,1H),7.65(s,1H),7.48-7.38(m,2H),7.32-7.29(m,1H),7.01-6.99(m,1H),6.91(d,J＝8.2Hz,1H),6.78-6.76(m,1H),5.40(s,2H),4.14(d,J＝5.6Hz,2H),3.58(s,3H)。
实施例106. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-((吡啶-4-基氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物108)的制备
Figure BDA0003284159120003371
步骤1：4-((3-溴苄基)氧基)吡啶(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003372
在25℃下向3-溴苯基)甲醇(500mg,2.67mmol,320.51μL)和4-氟吡啶(389.33mg,4.01mmol)于甲苯(5mL)中的溶液中加入KOH(599.95mg,10.69mmol)和18-冠-6(777.26mg,2.94mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物倒入水(20mL)中，并用EtOAc(20mL x 2)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，浓缩，得到呈黄色油状物的中间体C(800mg,粗品)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝263.9；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.42-8.38(m,2H),7.68-7.67(m,1H),7.58-7.53(m,1H),7.47(d,J＝8.0Hz,1H),7.40-7.34(m,1H),7.06-7.02(m,2H),5.20(s,2H)。
步骤2：4-((3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)吡啶(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120003381
在25℃下在N2下向中间体C(800mg,3.03mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(1.54g,6.06mmol)和KOAc(891.81mg,9.09mmol)于二噁烷(8mL)中的溶液中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(197.41mg,302.90μmol)。将反应混合物在70℃下在N2下搅拌16小时。将反应混合物用EtOAc(2mL)稀释。将混合物通过硅胶色谱(PE/EA＝10/1to 3/1)纯化并浓缩，得到呈黑褐色固体的中间体E(350mg,1.00mmol,33.17％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝312.2；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.40(br s,1H),7.91(s,1H),7.76(s,1H),7.64(d,J＝7.2Hz,1H),7.58(d,J＝7.6Hz,1H),7.42-7.41(m,1H),7.04(d,J＝4.6Hz,2H),5.21(s,2H),1.29(s,12H)。
步骤3：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-((吡啶-4-基氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物108)的制备
Figure BDA0003284159120003382
在25℃下在N2下向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例6中的方法所制备](100mg,245.54μmol)、中间体E(342.14mg,982.17μmol)和K3PO4(156.36mg,736.62μmol)于二噁烷(0.8mL)和H2O(0.2mL)中的溶液中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(16.00mg,24.55μmol)。将反应混合物在80℃下在N2下搅拌16小时。将反应混合物用水(10mL)稀释，并用EtOAc(10mL x 3)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并浓缩，得到棕色固体。将固体用DMSO(2mL)溶解，然后通过反相HPLC(FA)纯化，浓缩并冻干，得到呈黄色固体的化合物108(14.77mg,26.06μmol,10.61％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝512.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.53-12.32(m,1H),8.69-8.68(m,1H),8.41(d,J＝5.6Hz,2H),8.25(br s,1H),8.00(s,1H),7.91-7.83(m,2H),7.66(s,1H),7.50-7.40(m,2H),7.33-7.29(m,1H),7.06(d,J＝5.6Hz,2H),6.77(brs,1H),5.25(s,2H),4.13(d,J＝6.0Hz,2H),3.57(s,3H)。
实施例107.N-(2-((4-(2-甲基-3-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物109)的制备
Figure BDA0003284159120003391
步骤1：2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,2-二氢异喹啉-3(4H)-酮(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003392
将6-溴-2-甲基-1,4-二氢异喹啉-3-酮(50mg,208.25μmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(58.17mg,229.07μmol)、Pd(dppf)Cl2(15.24mg,20.82μmol)和KOAc(40.88mg,416.50μmol)溶于二噁烷(0.5mL)中，将混合物用N2吹扫3次。然后将所得混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(5mL)稀释，并用EtOAc(5mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色固体的中间体C(50mg，粗品)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝288.2。
步骤2：N-(2-((4-(2-甲基-3-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物109)的制备
Figure BDA0003284159120003401
将中间体C(45mg,156.71μmol)、N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例6中的方法所制备](63.82mg,156.71μmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(10.21mg,15.67μmol)和K3PO4(66.53mg,313.41μmol)溶于二噁烷(0.5mL)和H2O(0.1mL)中，将混合物用N2吹扫3次。然后将所得混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(5mL)稀释，并用EtOAc(5mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到产物。将残余物通过制备型HPLC(FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物109(16.13mg,32.09μmol,20.48％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝488.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.43(br d,J＝3.2Hz,1H),8.69-8.67(m,1H),7.84-7.83(m,1H),7.77-7.72(m,2H),7.60(s,1H),7.32-7.30(m,2H),6.77-6.76(m,1H),4.53(s,2H),4.13(br d,J＝6.0Hz,2H),3.57(s,5H),2.97(s,3H)。
实施例108. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-((4-(3-(氧杂环丁-3-基甲氧基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物110)的制备
Figure BDA0003284159120003411
步骤1：3-((3-溴苯氧基)甲基)氧杂环丁烷(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120003412
向3-溴苯酚(300mg,1.73mmol)和3-(碘甲基)氧杂环丁烷(343.34mg,1.73mmol)于DMF(3mL)中的溶液中加入K2CO3(718.96mg,5.20mmol)，将混合物在30℃下搅拌2小时。将混合物用水(20mL)稀释，并用EtOAc(20mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(FA)纯化，并冻干，得到呈浅黄色油状物的中间体B(300mg,1.23mmol,71.03％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝243.0。
步骤2：4,4,5,5-四甲基-2-(3-(氧杂环丁-3-基甲氧基)苯基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120003421
在N2下向中间体B(100mg,411.36μmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(125.35mg,493.63μmol)和Pd(dppf)Cl2(60.20mg,82.27μmol)于二噁烷(2mL)中的溶液中加入KOAc(121.12mg,1.23mmol)，将混合物在80℃下搅拌1小时。将反应混合物用水10mL稀释，并用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黑褐色油物的中间体D(110mg,粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝291.3。
步骤3：1-(甲基磺酰基)-N-(2-((4-(3-(氧杂环丁-3-基甲氧基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物110)的制备
Figure BDA0003284159120003431
在N2下向中间体D(106.87mg,368.31μmol)、N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例7中的方法所制备](50mg,122.77μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(16.00mg,24.55μmol)于二噁烷(1mL)和水(0.25mL)中的溶液中加入K3PO4(78.18mg,368.31μmol)，将混合物在80℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(10mL)稀释，并用EtOAc 30mL(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝0:1)纯化，并在减压下浓缩，得到呈灰色固体的化合物110(8.88mg,17.90μmol,14.58％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝491.2。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.37(s,1H),8.68-8.65(m,1H),7.84-7.83(m,1H),7.67(s,1H),7.50-7.49(m,2H),7.36-7.30(m,2H),6.93-6.91(m,1H),6.77-6.76(m,1H),4.74-4.71(m,2H),4.46-4.43(m,2H),4.25(d,J＝6.4Hz,2H),4.13(d,J＝6.0Hz,2H),3.57(s,3H),3.44-3.37(m,1H)。
实施例109. 4-氨基-N-(2-氧代-2-((4-(1-(吡啶-4-基)哌啶-3-基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺(化合物111)的制备
Figure BDA0003284159120003441
步骤1：5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120003442
在25℃下向3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(1g,3.23mmol)于DCM(10mL)中的混合物中一次性加入TFA(15.40g,135.06mmol,10.00mL)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物在真空中浓缩，得到呈无色油状物的中间体B(1.3g，粗品，TFA盐)，其用于下一步，其不经进一步纯化即用于下一步骤。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.72(br s,2H),6.58-6.57(m,1H),3.58-3.58(m,2H),3.16-3.14(m,2H),2.35-2.33(m,2H),1.21(s,12H)。
步骤2：5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,6-二氢-2H-1,4’-联吡啶(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120003451
向4-氟吡啶(150mg,1.12mmol,HCl盐)和中间体B(362.91mg,1.12mmol,TFA盐)于二噁烷(10mL)中的混合物中一次性加入Cs2CO3(1.10g,3.37mmol)。将混合物在120℃下搅拌12小时。将混合物倒入冰水(20mL)中，并用EtOAc(20mL)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体D(300mg,粗品)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝287.3。
步骤3：(2-((4-(5,6-二氢-2H-[1,4’-联吡啶]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120003452
在25℃下在N2下向中间体D(191.52mg,669.23μmol)和(2-((4-溴噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯[根据实施例6中的方法所制备](150mg,446.16μmol)于二噁烷(10mL)和H2O(2mL)中的混合物中一次性加入K3PO4(189.41mg,892.31μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(29.08mg,44.62μmol)。将混合物在75℃下在N2下搅拌12小时。将混合物倒入水(40mL)中并搅拌5分钟。将水相用EtOAc(30mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过反相柱(FA)纯化，得到呈淡黄色固体的中间体F(30mg,72.20μmol,16.18％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝416.1；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.15-8.13(m,2H),7.09(s,1H),6.95-6.90(m,2H),6.76(s,1H),4.24(d,J＝2.0Hz,2H),3.96(s,2H),3.65-3.62(m,2H),2.54-2.46(m,2H),1.48(s,9H)。
步骤4：(2-氧代-2-((4-(1-(吡啶-4-基)哌啶-3-基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120003461
在N2下向中间体F(55mg,132.37μmol)于MeOH(5mL)中的溶液中加入Pd/C(30mg,10％纯度)。将悬浮液在真空下脱气，并用H2吹扫数次。将混合物25℃下在H2(15psi)下搅拌1小时。将反应混合物过滤，并将滤液在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体G(50mg,119.75μmol,90.47％产率)，其不经纯化即直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝418.0。
步骤5：2-氨基-N-(4-(1-(吡啶-4-基)哌啶-3-基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120003462
在25℃下向中间体G(50mg,119.75μmol)于EtOAc(0.5mL)中的溶液中一次性加入HCl/EtOAc(4M,149.69μL)。将混合物在25℃下搅拌10分钟。将混合物浓缩，得到呈淡黄色固体的中间体H(50mg,粗品，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝318.3。
步骤6：1H-吡咯-3-羧酸叔丁酯(中间体L)的制备
Figure BDA0003284159120003471
在30℃下于1小时内向丙-2-烯酸叔丁酯(69.42g,541.65mmol,78.62mL)和1-(异氰基甲基磺酰基)-4-甲苯(105.75g,541.65mmol)于THF(1300mL)中的混合物中缓慢加入NaH(25.97g,649.37mmol,60％纯度)。将反应混合物加热至70℃，并在70℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入饱和NH4Cl水溶液(1500mL)中，并用EA(3x800mL)萃取。将合并的有机相用盐水(2x500mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过硅胶柱色谱(石油醚/EtOAc＝20:1-3:1)(TLC:PE/EA＝3/1,Rf＝0.6)纯化，得到呈黄色固体的中间体L(41.5g,235.70mmol,43％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+Na]+＝180.4；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.36(br s,1H),7.35-7.25(m,1H),6.71-6.62(m,1H),6.59-6.49(m,1H),1.48(s,9H)。
步骤7：1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸叔丁酯(中间体M)的制备
Figure BDA0003284159120003472
在0℃下在N2下向中间体L(40.5g,242.22mmol)于THF(1500mL)中的溶液中缓慢加入NaHMDS(1M,484.44mL)。将反应混合物在0℃下在N2下搅拌30分钟。然后在0℃下在N2下向反应混合物中缓慢加入甲磺酰氯(41.62g,363.33mmol,28.12mL)。将反应混合物升温至30℃，并在30℃下在N2下搅拌16小时。将反应混合物缓慢倒入饱和NH4Cl水溶液(1500mL)中，并用EA(3x1000mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2x600mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝10/1)(TLC:PE/EA＝3/1,Rf＝0.55)纯化，得到黄色固体。将黄色固体用MTBE(100mL)在20℃下研磨20分钟，过滤并在真空下干燥，得到呈白色固体的中间体M(25.7g,104.77mmol,43％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.66-7.64(m,1H),7.10-7.08(m,1H),6.73-6.71(m,1H),3.21(s,3H),1.56(s,9H)。
步骤8：1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸(中间体I)的制备
Figure BDA0003284159120003481
在15℃下向中间体M(25.7g,104.77mmol)于二噁烷(100mL)中的混合物中加入HCl/二噁烷(4M，400mL)。将反应混合物在15℃下搅拌14小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。残余物用MTBE(150mL)在15℃下研磨16小时。将混合物过滤并在真空中干燥，得到呈白色固体的中间体I(18.7g,98.84mmol,94％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝189.8；1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.78-7.77(m,1H),7.25-7.23(m,1H),6.72-6.70(m,1H),3.37(s,3H)。
步骤9：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(1-(吡啶-4-基)哌啶-3-基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物111)的制备
Figure BDA0003284159120003482
在25℃下向中间体H(25mg,70.65μmol,HCl盐)和1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸(13.37mg,70.65μmol)于DMF(2mL)中的混合物中一次性加入EDCI(20.31mg,105.98μmol)、DIEA(45.65mg,353.25μmol,61.53μL)和HOBt(14.32mg,105.98μmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应溶液在真空中浓缩，然后通过制备型HPLC(流动相：[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：11％-34％)纯化并冻干，得到呈黄色固体的化合物111(10.12mg,16.79μmol,23.77％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝489.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.25(s,1H),8.69-8.67(m,1H),8.22(d,J＝7.4Hz,2H),7.84-7.83(m,1H),7.33-7.29(m,1H),7.22(d,J＝7.4Hz,2H),6.95(s,1H),6.76-6.75(m,1H),4.36-4.28(m,1H),4.21(d,J＝13.4Hz,1H),4.10(d,J＝5.6Hz,2H),3.56(s,3H),3.29-3.21(m,2H),2.97-2.86(m,1H),2.15-2.03(m,1H),1.93-1.81(m,2H),1.60(d,J＝13.2Hz,1H)。
实施例110.N-(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物112)的制备
Figure BDA0003284159120003491
步骤1：(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003492
在30℃下在N2下向(2-((4-溴噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯[根据实施例6中的方法所制备](100mg，297.44μmol)(根据实施例6中的方法所制备)和2-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)异喹啉-1(2H)-酮(270.37mg,594.88μmol)于二噁烷(3mL)和H2O(0.75mL)中的混合物中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(19.39mg,29.74μmol)和K3PO4(189.41mg,892.32μmol)。将反应混合物加热至75℃，并在75℃下在N2下搅拌2小时。将反应混合物过滤，得到残余物。将残余物通过反相柱(FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的中间体C(60mg,130.54μmol,43.89％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝415.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.38(br s,1H),8.81(s,1H),8.22-8.19(m,1H),7.78(s,1H),7.71(d,J＝8.0Hz,1H),7.49(d,J＝7.2Hz,1H),7.17-7.14(m,1H),6.64(d,J＝7.2Hz,1H),3.88(d,J＝6.0Hz,2H),3.53(s,3H),1.41(s,9H)。
步骤2：2-氨基-N-(4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120003501
在30℃下向中间体C(60mg,144.76μmol)于二噁烷(1mL)中的混合物中加入HCl/二噁烷(4M,1mL)。将反应混合物在30℃下搅拌1小时。将反应混合物过滤，并将固体在真空中干燥，得到呈黄色固体的中间体D(50mg,120.25μmol,83.07％产率，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝315.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.84(br s,1H),8.81(d,J＝1.6Hz,1H),8.36(br s,2H),8.23-8.20(m,1H),7.87(s,1H),7.72(d,J＝8.4Hz,1H),7.50(d,J＝7.6Hz,1H),6.65(d,J＝7.2Hz,1H),3.94-3.92(m,2H),3.53(s,3H)。
步骤3：N-(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物112)的制备
Figure BDA0003284159120003511
在30℃下向中间体D(40mg,114.02μmol,HCl盐)和1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](21.57mg,114.02μmol)于DMF(1mL)中的混合物中加入EDCI(32.79mg,171.03μmol)、HOBt(23.11mg,171.03μmol)和DIPEA(44.21mg,342.05μmol,59.58μL)。将反应混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物通过反相柱(FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物112(11.27mg,22.92μmol,20.10％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝486.0。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),8.82(d,J＝1.6Hz,1H),8.69-8.66(m,1H),8.21-8.19(m,1H),7.85-7.84(m,1H),7.77(s,1H),7.70(d,J＝8.4Hz,1H),7.48(d,J＝7.2Hz,1H),7.32-7.30(m,1H),6.78-6.77(m,1H),6.63(d,J＝7.2Hz,1H),4.15(d,J＝6.0Hz,2H),3.57(s,3H),3.52(s,3H)。
实施例111. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(1-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物113)的制备
Figure BDA0003284159120003521
向N-(2-((4-溴噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例6中的方法所制备](80mg,196.43μmol)和4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)吡啶(266.29mg,982.17μmol)于二噁烷/H2O＝4/1(5mL)中的溶液中加入K3PO4(125.09mg,589.30μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(25.60mg,39.29μmol)。将混合物在75℃下在N2下搅拌4小时。将该反应混合物用H2O(10mL)稀释，并用EtOAc(10mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(0.1％FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物113(10.17mg,18.61μmol,9.48％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝472.3；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.85-12.31(m,1H),8.76(d,J＝2.8Hz,1H),8.68-8.66(m,3H),7.91-7.90(m,2H),7.86-7.85(m,1H),7.67(s,1H),7.32(m,1H),6.97(d,J＝2.8Hz,1H),6.78(m,1H),4.15(d,J＝6.0Hz,2H),3.58(s,3H)。
实施例112. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(1-(2,2,2-三氟乙基)哌啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物114)的制备
Figure BDA0003284159120003522
步骤1：4-(3-溴苯基)哌啶(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120003531
在30℃下向中间体A(5g,14.69mmol)于EtOAc(30mL)中的溶液中加入HCl/EtOAc(4M,30mL)。将反应混合物在30℃下搅拌1小时。将反应混合物过滤并在真空中干燥，得到呈白色固体的中间体B(3.9g,14.10mmol,95.95％产率，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝240.2。
步骤2：4-(3-溴苯基)-1-(2,2,2-三氟乙基)哌啶(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120003532
在30℃下向中间体B(500mg,1.81mmol,HCl盐)于DMF(5mL)中的混合物中加入Cs2CO3(1.47g,4.52mmol)和三氟甲磺酸2,2,2-三氟乙酯(839.12mg,3.62mmol)。将反应混合物加热至100℃，并在100℃下搅拌14小时。将反应混合物倒入水(50mL)中，然后用EtOAc(50mL x 3)萃取，将合并的有机相用盐水(50mL x 3)洗涤并在减压下浓缩，得到呈黄色油状物的中间体D(770mg,1.58mmol,87.56％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝322.0。
步骤3：4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-1-(2,2,2-三氟乙基)哌啶(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120003541
在30℃下向中间体D(670mg,2.08mmol)和4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2’-双(1,3,2-二氧杂环戊硼烷)(633.73mg,2.50mmol)于二噁烷(12mL)中的混合物中加入KOAc(612.32mg,6.24mmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(135.54mg,207.97μmol)。将反应混合物加热至70℃，并在70℃下在N2下搅拌4小时。将反应混合物倒入水(40mL)中，并用EtOAc(30mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈棕色油状物的中间体F(1.2g,粗品)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝370.2。
步骤4：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(1-(2,2,2-三氟乙基)哌啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物114)的制备
Figure BDA0003284159120003542
在30℃下在N2下向N-(2-((4-溴噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例6中的方法所制备](50mg,122.77μmol)和4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-1-(2,2,2-三氟乙基)哌啶(135.99mg,368.31μmol)于二噁烷(1.6mL)和H2O(0.4mL)中的混合物中加入K3PO4(78.18mg,368.31μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(8.00mg,12.28μmol)。将反应混合物加热至70℃，并在70℃下在N2下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.225％FA)-乙腈]；B％：8％-38％)纯化，并冻干，得到呈灰白色固体的化合物114(6.65mg,10.27μmol,8.36％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝570.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.37(br s,1H),8.68-8.65(m,1H),8.43(br s,1H),7.83(,J＝7.6Hz,2H),7.72(br d,J＝7.6Hz,1H),7.64(s,1H),7.39-7.28(m,2H),7.21(d,J＝7.6Hz,1H),6.77(d,J＝1.6Hz,1H),4.13(d,J＝6.0Hz,2H),3.56(s,3H),3.24-3.16(m,1H),3.03(d,J＝11.6Hz,2H),2.45-2.42(m,2H),1.82-1.64(m,4H)。
实施例113.N-(2-((4-(3-(2-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物115)的制备
Figure BDA0003284159120003551
步骤1：1-(3-溴苯基)-2-甲基-1H-咪唑(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003561
向1,3-二溴苯(1.5g,6.36mmol,765.31μL)、2-甲基-1H-咪唑(522.06mg,6.36mmol)和CuO(151.74mg,1.91mmol,24.01μL)于DMSO(15mL)中的溶液中加入K2CO3(2.11g,15.26mmol)，混合物在145℃下搅拌48小时。将反应混合物用水(50mL)稀释，并用EtOAc(50mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝1:1)纯化，并在减压下浓缩，得到呈浅黄色油状物的中间体C(850mg,3.47mmol,54.52％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝237.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.72-7.70(m,1H),7.68-7.59(m,1H),7.51-7.44(m,2H),7.32(s,1H),6.91(s,1H),2.29(s,3H)。
步骤2：(3-(2-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基)硼酸(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120003562
在N2下向中间体C(500mg,2.11mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(1.61g,6.33mmol)和Pd(dppf)Cl2(154.31mg,210.89μmol)于二噁烷(10mL)中的溶液中加入KOAc(620.90mg,6.33mmol)，将混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2,EtOA/MeOH＝20:1)纯化，并在减压下浓缩，得到呈浅黄色油状的中间体E(150mg,542.03μmol,25.70％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝203.3。
步骤3：N-(2-((4-(3-(2-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物115)的制备
Figure BDA0003284159120003571
在N2下向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例6中的方法所制备](100mg,245.54μmol)、中间体E(135.90mg,491.08μmol)和1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(16.00mg,24.55μmol)于二噁烷(2mL)和水(0.5mL)中的溶液中加入K3PO4(156.36mg,736.62μmol)，将混合物在80℃下搅拌1小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(FA)纯化，并冻干，得到呈棕色固体的化合物115(59.73mg,112.58μmol,45.85％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝485.2；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.06(d,J＝8.4Hz,1H),7.98(s,1H),7.83-7.82(m,1H),7.62-7.56(m,2H),7.38-7.34(m,2H),7.28-7.26(m,1H),7.14(s,1H),6.81-6.79(m,1H),4.25(s,2H),3.37(s,3H),2.42(s,3H)。
实施例114.N-(2-((4-(3-(甲基(苯基)氨基甲酰基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物116)的制备
Figure BDA0003284159120003581
步骤1：3-溴-N-甲基-N-苯基苯甲酰胺(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003582
向3-溴苯甲酸(300mg,1.49mmol)于DCM(1mL)中的混合物中加入HATU(851.19mg,2.24mmol)和DIPEA(578.65mg,4.48mmol,779.85μL)。将混合物在30℃下搅拌15分钟，然后加入N-甲基苯胺(191.90mg,1.79mmol,194.43μL)，并在30℃下搅拌1小时。将反应混合物倒入水(50.0mL)中，并用EtOAc(50.0mL x 3)萃取。将合并的有机物用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并将滤液蒸发至干燥，得到呈黄色固体的中间体C(400mg,1.32mmol,88.22％产率)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝290.0。
步骤2：N-甲基-N-苯基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120003583
将中间体C(200mg,689.29μmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(192.54mg,758.22μmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(44.92mg,68.93μmol)和KOAc(135.30mg,1.38mmol)溶于二噁烷(2mL)，并将混合物用N2吹扫3次。然后将所得混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物过滤，并将滤液蒸发至干燥，得到呈黑色油状物的中间体E(220mg,粗品)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝338.1。
步骤3：N-(2-((4-(3-(甲基(苯基)氨基甲酰基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物116)的制备
Figure BDA0003284159120003591
将N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(根据实施例6中的方法所制备)(50mg,122.77μmol)、中间体E(82.80mg,245.54μmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(8.00mg,12.28μmol)和K3PO4(78.18mg,368.31μmol)溶于二噁烷(1mL)和H2O(0.2mL)中，将混合物用N2吹扫3次。然后将所得混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物过滤，并将滤液蒸发至干燥。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.225％FA)-乙腈]；B％：35％-65％)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物116(15.32mg,28.21μmol,22.98％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝538.0；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.87(s,1H),7.84-7.80(m,2H),7.29-7.26(m,4H),7.24-7.16(m,5H),6.81-6.80(m,1H),4.25(s,2H),3.50(s,3H),3.38(s,3H)。
实施例115. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基氨基甲酰基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物117)的制备
Figure BDA0003284159120003601
步骤1：3-溴-N-(吡啶-4-基)苯甲酰胺(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003602
向3-溴苯甲酸(300mg,1.49mmol)于DCM(3mL)中的混合物中加入HATU(851.19mg,2.24mmol)和DIPEA(578.65mg,4.48mmol,779.85μL)。将混合物在30℃下搅拌15分钟，然后加入吡啶-4-胺(140.46mg,1.49mmol,250.82μL)，并在30℃下搅拌1小时。将反应混合物倒入水(50.0mL)中，并用EtOAc(50.0mL x 3)萃取。将合并的有机物用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并将滤液蒸发至干燥，得到呈黄色固体的中间体C(410mg,粗品)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝279.1。
步骤2：N-(吡啶-4-基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酰胺(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120003611
将中间体C(400mg,1.44mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(733.09mg,2.89mmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(94.08mg,144.34μmol)和KOAc(424.98mg,4.33mmol)溶于二噁烷(5mL)中，将混合物用N2吹扫3次。然后将所得混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物过滤，并将滤液蒸发至干燥，得到呈的黑色油状物的中间体E(400mg,粗品)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝325.1。
步骤3：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基氨基甲酰基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物117)的制备
Figure BDA0003284159120003612
将N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(根据实施例6中的方法所制备)(50mg,122.77μmol)、中间体E(79.60mg,245.54μmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(8.00mg,12.28μmol)和K3PO4(78.18mg,368.31μmol)溶于二噁烷(1mL)和H2O(0.2mL)中，将混合物用N2吹扫3次。然后将所得混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物过滤，并将滤液蒸发至干燥。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.075％TFA)-乙腈]；B％：12％-42％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物117(2.01mg,3.15μmol,2.56％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝525.0；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.66(d,J＝7.2Hz,2H),8.57-8.56(m,1H),8.36(d,J＝7.2Hz,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),7.95(d,J＝8.0Hz,1H),7.85-7.84(m,1H),7.64-7.60(m,1H),7.58(s,1H),7.29-7.28(m,1H),6.82-6.81(m,1H),4.27(s,2H),3.39-3.37(m,3H)。
实施例116. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(((1-甲基氮杂环丁-3-基)氧)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物118)的制备
Figure BDA0003284159120003621
步骤1：3-((3-溴苄基)氧基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003631
在0℃下向1-(叔丁氧基羰基)-3-羟基氮杂环丁烷(3g,17.32mmol)于THF(50mL)中的溶液中加入NaH(1.39g,34.64mmol,60％纯度)并搅拌0.5小时，然后在0℃下加入1-溴-3-(溴甲基)苯(4.33g,17.32mmol)。将混合物在30℃下搅拌4小时。将反应混合物在0℃下用NH4Cl水溶液(50mL)猝灭，并用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过快速柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝1:0至1:1)纯化，并浓缩得到呈无色油状物的中间体C(4g,11.69mmol,67.48％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H-56]+＝286.0；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.51(s,1H),7.47-7.46(m,1H),7.45-7.24(m,2H),4.43(s,2H),4.32-4.31(m,1H),4.11-4.07(m,2H),3.90-3.88(m,2H),1.45(s,9H)。
步骤2：3-((3-溴苄基)氧基)-1-甲基氮杂环丁烷(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120003632
在0℃下向中间体C(500mg,1.46mmol)于THF(5mL)中的溶液中加入LiAlH4/THF(1M,4.38mL)，并在80℃下搅拌2小时。将该反应混合物通过添加H2O(0.17mL)来猝灭，然后用15％NaOH溶液(0.51mL)稀释。将反应混合物过滤并将滤液在减压下浓缩，得到呈无色油状物的中间体D(290mg,1.13mmol,77.49％产率)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝256.0；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.22(m,4H),4.44-4.40(m,2H),4.18-4.15(m,1H),3.64-3.61(m,2H),2.94-2.90(m,2H),2.37-2.36(m,3H)。
步骤3：1-甲基-3-((3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)氮杂环丁烷(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120003641
向中间体D(290mg,1.13mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(345.01mg,1.36mmol)于二噁烷(3mL)中的溶液中加入KOAc(222.23mg,2.26mmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(73.79mg,113.22μmol)。将混合物在80℃下在N2下搅拌2小时。将反应混合物用H2O(10mL)稀释，并用EtOAc(10mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色油状物的中间体F(300mg,粗品)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝304.2。
步骤4：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(((1-甲基氮杂环丁-3-基)氧)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物118)的制备
Figure BDA0003284159120003651
向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-叔丁基-吡咯-3-甲酰胺(根据实施例7中的方法所制备)(100mg,259.55μmol)和中间体F(157.39mg,519.10μmol)于二噁烷/H2O＝(4/1,2mL)中的溶液中加入K3PO4(165.29mg,778.66μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(33.83mg,51.91μmol)。将混合物在80℃下在N2下搅拌2小时。将反应混合物用H2O(5mL)稀释，并用EtOAc(5mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(0.1％FA条件)纯化，并冻干，得到粗产物。然后将粗产物通过制备型TLC(DCM/MeOH/NH3·H2O＝10/1/1)再纯化，并浓缩，得到呈白色固体的化合物118(11.01mg,22.14μmol,8.53％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝482.1；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.88(s,1H),7.81(d,J＝7.6Hz,1H),7.58-7.57(m,1H),7.38-7.28(m,2H),7.28(d,J＝7.6Hz,1H),6.95-6.94(m,1H),6.57-6.56(m,1H),4.49(s,2H),4.24-4.20(m,4H),3.65-3.61(m,2H),3.12-3.09(m,2H),2.38(s,3H),1.55(s,9H)。
实施例117. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(((1-甲基-1H-吡唑-3-基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物119)的制备
Figure BDA0003284159120003661
步骤1：3-((3-溴苄基)氧基)-1-甲基-1H-吡唑(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003662
在0℃下向1-甲基吡唑-3-醇(500mg,5.10mmol)于无水DMF(10mL)中的溶液中加入NaH(407.70mg,10.19mmol,429.15μL,60％纯度)，搅拌30分钟后，然后加入1-溴-3-(溴甲基)苯(1.27g,5.10mmol)。将反应混合物升温至25℃，并搅拌16小时。在搅拌下将反应混合物倒入饱和NH4Cl(60mL)中，然后用EtOAc(20mL x 3)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，浓缩得到黄色油。将黄色油通过反相HPLC(FA)纯化，并萃取，得到呈黄色油状物的中间体C(120mg,426.77μmol,8.37％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝269.0。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.61(s,1H),7.51-7.48(m,1H),7.48(d,J＝2.4Hz,1H),7.41(s,1H),7.37-7.30(m,1H),5.68(d,J＝2.4Hz,1H),5.11(s,2H),3.66(s,3H)。
步骤2：1-甲基-3-((3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)-1H-吡唑(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120003671
将中间体C(110mg,411.80μmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(156.86mg,617.70μmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(53.68mg,82.36μmol),KOAc(121.24mg,1.24mmol)于二噁烷(3mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在75℃下在N2气氛下搅拌2小时。将混合物冷却至25℃，并在40℃下在减压下浓缩。将残余物倒入冰水(10mL)中。将水相用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈黑色油状物的中间体E(120mg,粗品)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝315.4。
步骤3：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(((1-甲基-1H-吡唑-3-基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物119)的制备
Figure BDA0003284159120003681
在25℃下在N2下向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-叔丁基-吡咯-3-甲酰胺(80mg,207.64μmol)[根据实施例7中的方法所制备]和中间体E(97.86mg,311.46μmol)于二噁烷(1.2mL)和H2O(0.3mL)中的混合物中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(27.07mg,41.53μmol)和K3PO4(132.23mg,622.93μmol)。将反应混合物加热至75℃，并在75℃下搅拌2小时。将混合物冷却至25℃，并在减压下浓缩。将残余物倒入冰水(10mL)中。将水相用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到残余物。将残余物用反相HPLC(FA)纯化，得到粗产物，将所述粗产物通过制备型TLC(EA)再纯化，并浓缩，得到呈白色固体的化合物119(7.9mg,15.88μmol,7.65％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝493.3。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.01-7.93(m,1H),7.86-7.81(m,1H),7.58(s,1H),7.43-7.32(m,4H),6.98-6.92(m,1H),6.57-6.56(m,1H),5.71(d,J＝2.4Hz,1H),5.16(s,2H),4.23(s,2H),3.72(s,3H),1.56(s,9H)。
实施例118. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物120)的制备
Figure BDA0003284159120003691
将N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-叔丁基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例7中的方法所制备](75mg,194.66μmol)、(3-甲氧基苯基)硼酸(59.16mg,389.33μmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(12.69mg,19.47μmol)和K3PO4(123.96mg,583.99μmol)溶于二噁烷(1mL)和H2O(0.2mL)中，将混合物用N2吹扫3次。然后将所得混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(5mL)稀释，并用EtOAc(5mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到产物。将残余物通过制备型HPLC(FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物120(40.28mg,97.65μmol,50.16％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝413.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.30(br s,1H),8.16-8.13(m,1H),7.63(s,1H),7.51-7.45(m,3H),7.35-7.31(m,1H),6.97-6.95(m,1H),6.90-6.88(m,1H),6.47-6.46(m,1H),4.09(d,J＝5.6Hz,2H),3.80(s,3H),1.49(s,9H)。
实施例119.N-(2-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物121)的制备
Figure BDA0003284159120003692
步骤1：N-(2-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物121)的制备
Figure BDA0003284159120003701
将N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(根据实施例6中的方法所制备)(75mg,184.16μmol)、(3-甲氧基苯基)硼酸(55.97mg,368.31μmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(12.00mg,18.42μmol)和K3PO4(117.27mg,552.47μmol)溶于二噁烷(1mL)和H2O(0.2mL)中，将混合物用N2吹扫3次。然后将所得混合物在80℃下搅拌2小时。将残余物在MeOH/H2O(2/1,5mL)中浆化，并搅拌5分钟。通过过滤收集沉淀，并用MeOH(3mL)洗涤，然后在真空中干燥，得到呈黄色固体的化合物121(50.31mg,115.79μmol,62.88％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝434.9；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.38(s,1H),8.67-8.64(m,1H),7.84(s,1H),7.65(s,1H),7.49-7.45(m,2H),7.35-7.30(m,2H),6.91-6.88(m,1H),6.78-6.77(m,1H),4.14(br d,J＝6.0Hz,2H),3.80(s,3H),3.57(s,3H)。
实施例120. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(氧杂环丁-3-基甲氧基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物122)的制备
Figure BDA0003284159120003711
步骤1：3-((3-溴苯氧基)甲基)氧杂环丁烷(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120003712
向3-溴苯酚(300mg,1.73mmol)和3-(碘甲基)氧杂环丁烷(343.34mg,1.73mmol)于DMF(3mL)中的溶液中加入K2CO3(718.96mg,5.20mmol)，将混合物在30℃下搅拌2小时。将混合物用水(20mL)稀释，并用EtOAc(20mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(FA)纯化，并冻干，得到呈浅黄色油状物的中间体B(300mg,1.23mmol,71.03％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝243.0。
步骤2：4,4,5,5-四甲基-2-(3-(氧杂环丁-3-基甲氧基)苯基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120003721
在N2下向中间体B(100mg,411.36μmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(125.35mg,493.63μmol)和Pd(dppf)Cl2(60.20mg,82.27μmol)于二噁烷(2mL)中的溶液中加入KOAc(121.12mg,1.23mmol)，将混合物在80℃下搅拌1小时。将反应混合物用水10mL稀释，并用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黑褐色油物的中间体D(110mg,粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝291.3。
步骤3：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(氧杂环丁-3-基甲氧基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物122)的制备
Figure BDA0003284159120003722
在N2下向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-叔丁基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例7中的方法所制备](50mg,129.78μmol)、中间体D(75.31mg，259.55μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(8.46mg,12.98μmol)于二噁烷(1.2mL)和水(0.3mL)的溶液中加入K3PO4(82.64mg,389.33μmol)，将混合物在80℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(5mL)稀释，并用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型TLC(EA,Rf＝0.4)纯化，并在减压下浓缩，得到呈白色固体的化合物122(19.92mg,42.44μmol,32.70％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝469.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.28(s,1H),8.17-8.14(m,1H),7.66(s,1H),7.50(br d,J＝9.6Hz,3H),7.35-7.31(m,1H),7.96-6.91(m,2H),6.47(br s,1H),4.74-4.71(m,2H),4.46-4.43(m,2H),4.25(d,J＝6.8Hz,2H),4.08(br d,J＝5.6Hz,2H),3.40-3.39(m,1H),1.49(s,9H)。
实施例121. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物123)的制备
Figure BDA0003284159120003731
将N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-叔丁基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例7中的方法所制备](40mg,103.82μmol)、2-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)异喹啉-1-酮[根据实施例7中的方法所制备](38.49mg,134.97μmol)、K3PO4(66.11mg,311.46μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(13.53mg,20.76μmol)于二噁烷(2mL)和H2O(0.5mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在80℃下在N2气氛下搅拌2小时。加入水(20mL)，并将反应混合物用EtOAc(50mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：35％-55％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物123(3mg,5.19μmol,5.00％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝464.2。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.42(s,1H),8.81(d,J＝1.6Hz,1H),8.21-8.16(m,2H),7.76(s,1H),7.71(d,J＝8.4Hz,1H),7.52-7.51(m,1H),7.48(d,J＝7.2Hz,1H),6.97-6.96(m,1H),6.64(d,J＝7.2Hz,1H),6.48-6.47(m,1H),4.11(d,J＝5.6Hz,2H),3.53(s,3H),1.50(s,9H)。
实施例122. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(2-甲基-3-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物124)的制备
Figure BDA0003284159120003741
步骤1：2-(3-溴苯基)-N-甲基乙酰胺(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120003742
向2-(3-溴苯基)乙酸(2g,9.30mmol)于吡啶(10mL)中的混合物中加入甲胺(1.57g,23.25mmol,HCl盐)。将混合物在30℃下搅拌15分钟，然后加入EDCI(3.57g,18.60mmol)，并在30℃下搅拌1小时。将反应混合物倒入100mL饱和柠檬酸溶液中，并用EtOAc(50.0mL x 3)萃取。将合并的有机层用水(100mL)和盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并将滤液蒸发至干燥，得到呈黄色固体的中间体B(2.1g,粗品)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝230.1。
步骤2：6-溴-2-甲基-1,2-二氢异喹啉-3(4H)-酮(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003751
在N2下将P2O5(1.12g,7.89mmol,487.06μL)加入到MsOH(12.14g,126.27mmol,8.99mL)中，将混合物在25℃下搅拌16小时，然后将中间体B(1.8g,7.89mmol)和多聚甲醛(284.10mg,9.47mmol)加入到混合物中，然后加热至80℃，并搅拌2小时。将反应混合物用NaOH水溶液调节至pH＝8，并用EtOAc(30.0mL x 3)萃取。将合并的有机层用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并将滤液蒸发至干燥。将残余物通过制备型HPLC(FA条件)纯化，然后通过制备型TLC(SiO2，PE/EA＝1:2)纯化，得到呈黄色固体的中间体C(800mg,3.33mmol,42.22％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝240.1。
步骤3：2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,2-二氢异喹啉-3(4H)-酮(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120003752
将中间体C(100mg，416.50μmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(116.34mg,458.15μmol)、Pd(dppf)Cl2(30.48mg,41.65μmol)和KOAc(81.75mg,833.00μmol)溶于二噁烷(0.5mL)中，将混合物用N2吹扫3次。然后将所得混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(5mL)稀释，并用EtOAc(5mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色固体的中间体E(115mg，粗品)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝288.3。
步骤4：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(2-甲基-3-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物124)的制备
Figure BDA0003284159120003761
N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-叔丁基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例7中的方法所制备](100mg,259.55μmol)、中间体E(111.80mg,389.33μmol)、K3PO4(110.19mg,519.10μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(16.92mg,25.96μmol)溶于二噁烷(1.5mL)和H2O(0.3mL)中，将混合物用N2吹扫3次。然后将所得混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(5mL)稀释，并用EtOAc(5mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到产物。将残余物通过制备型HPLC(FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物124(25.22mg,52.55μmol,20.24％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝466.3。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.30(br s,1H),8.17-8.14(m,1H),7.78-7.72(m,2H),7.59(s,1H),7.51(s,1H),7.31(d,J＝8.0Hz,1H),6.96(s,1H),6.47(s,1H),4.53(s,2H),4.09(d,J＝6.0Hz,2H),3.57(s,2H),2.98(s,3H),1.49(s,9H)。
实施例123. 1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(((四氢-2H-吡喃-4-基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物125)的制备
Figure BDA0003284159120003771
步骤1：4-((3-溴苄基)氧基)四氢-2H-吡喃(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003772
在0℃下向四氢吡喃-4-醇(245.18mg,2.40mmol,240.38μL)于THF(5mL)中的混合物中缓慢加入NaH(120.02mg,3.00mmol,60％纯度)。将反应混合物在0℃下搅拌30分钟。然后在0℃下向反应混合物中缓慢加入1-溴-3-(溴甲基)苯(500mg,2.00mmol)于THF(1mL)中的溶液。将反应混合物升温至25℃，并在25℃下搅拌16小时。将反应混合物倒入饱和NH4Cl水溶液(20mL)中，并用EtOAc(15mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝20/1-5/1)纯化，并浓缩，得到呈无色油状物的中间体C(270mg,895.01μmol,44.74％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝273.0；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.52(s,1H),7.42(d,J＝7.6Hz,1H),7.29(s,1H),7.25-7.19(m,1H),4.54(s,2H),4.00-3.95(m,2H),3.62-3.57(m,1H),3.49-3.42(m,2H),1.99-1.90(m,2H),1.73-1.61(m,2H)。
步骤2：4,4,5,5-四甲基-2-(3-(((四氢-2H-吡喃-4-基)氧基)甲基)苯基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120003781
在25℃下在N2下向中间体C(270mg,995.76μmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(303.43mg,1.19mmol)于二噁烷(5mL)中的混合物中加入KOAc(293.18mg,2.99mmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(64.90mg,99.58μmol)。将反应混合物加热至75℃，并在75℃下在N2下搅拌4小时。将反应混合物过滤并在减压下浓缩，得到呈棕色油状物的中间体E(500mg,粗品)，其直接用于下一步骤。
步骤3：1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(((四氢-2H-吡喃-4-基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物125)的制备
Figure BDA0003284159120003782
在25℃下在N2下向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-叔丁基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例6中的方法所制备](50mg,129.78μmol)和中间体E(123.89mg,389.33μmol)于二噁烷(1.2mL)和H2O(0.3mL)中的混合物中加入K3PO4(82.64mg,389.33μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(8.46mg,12.98μmol)。将反应混合物加热至75℃，并在75℃下在N2下搅拌2小时。将反应混合物过滤，并将滤液在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相柱(FA条件)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物125(5.46mg,10.99μmol,8.47％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝497.1；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.91(s,1H),7.81(d,J＝7.6Hz,1H),7.58-7.57(m,1H),7.42-7.34(m,2H),7.33-7.27(m,1H),6.96-6.94(m,1H),6.58-6.56(m,1H),4.62(s,2H),4.23(s,2H),3.96-3.90(m,2H),3.70-3.66(m,1H),3.50-3.43(m,2H),2.03-1.92(m,2H),1.67-1.53(m,11H)。
实施例124. 1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(1-((四氢-2H-吡喃-4-基)氧基)乙基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物126)的制备
Figure BDA0003284159120003791
步骤1：4-(1-(3-溴苯基)乙氧基)四氢-2H-吡喃(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003801
在20℃下向四氢吡喃-4-醇(0.5g,4.90mmol,490.20μL)和1-(3-溴苯基)乙醇(984.32mg,4.90mmol)的混合物中加入TsOH.H2O(93.13mg,489.57μmol)。将混合物在120℃下搅拌3小时。将反应混合物冷却至20℃，并通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝5/1)纯化，并且浓缩，得到呈黄色油状物的中间体C(0.7g,2.45mmol,50.14％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.50(s,1H),7.42(br d,J＝7.6Hz,1H),7.28-7.21(m,2H),4.58-4.56(m,1H),3.95-3.93(m,2H),3.50-3.29(m,3H),2.00-1.86(m,1H),1.79-1.70(m,1H),1.68-1.58(m,2H)1.44-1.42(m,3H)。
步骤2：4,4,5,5-四甲基-2-(3-(1-((四氢-2H-吡喃-4-基)氧基)乙基)苯基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120003802
将中间体C(300mg,1.05mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(320.57mg,1.26mmol)、KOAc(206.48mg,2.10mmol)、Pd(dppf)Cl2(76.97mg,105.20μmol)于二噁烷(5mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在80℃下在N2气氛下搅拌3小时。将反应混合物在减压下浓缩以除去溶剂。将残余物用水(30mL)稀释，并用EtOAc(15mL x 3)萃取。将合并的有机层用水(10mL x3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈棕色油状物的中间体E(0.4g,粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤3：1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(1-((四氢-2H-吡喃-4-基)氧基)乙基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物126)的制备
Figure BDA0003284159120003811
将中间体E(170mg,511.68μmol)、N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-叔丁基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例7中的方法所制备](98.57mg,255.84μmol)、K3PO4(325.84mg,1.54mmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(66.70mg,102.34μmol)于二噁烷(3mL)和H2O(1mL)中混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在80℃下在N2气氛下搅拌3小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝1/1)纯化，并浓缩，得到呈黄色固体的化合物126(80mg,156.66μmol,30.62％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝511.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.31(br s,1H),8.18-8.16(m,1H),7.90(s,1H),7.79(d,J＝8.0Hz,1H),7.62(s,1H),7.53-7.51(m,1H),7.41(d,J＝7.8Hz,1H),7.30(d,J＝7.8Hz,1H),6.98(m,1H),6.48(dd,J＝2.8Hz,1.6Hz,1H),4.71-4.70(m,1H),4.11-4.10(m,2H),3.83-3.72(m,2H),3.42-3.37(m,2H),3.26-3.25(m,1H),1.93-1.91(m,1H),1.68-1.66(m,1H),1.50(s,9H),1.46-1.39(m,2H),1.38-1.36(m,3H)。
实施例125. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(((1-甲基哌啶-4-基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物127)的制备
Figure BDA0003284159120003821
步骤1：4-((3-溴苄基)氧基)-1-甲基哌啶(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003822
在0℃下向1-甲基哌啶-4-醇(691.23mg,6.00mmol,701.76μL)于THF(10mL)中的溶液中加入NaH(320.06mg,8.00mmol,60％纯度)并搅拌0.5小时，然后在0℃下向混合物中加入1-溴-3-(溴甲基)苯(1g,4.00mmol)。将混合物在30℃下搅拌4小时。将反应混合物在0℃下用NH4Cl水溶液(20mL)稀释，并用EtOAc(20mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(0.1％FA条件)纯化，浓缩以除去乙腈。将溶液用EtOAc(20mL x 2)萃取，将有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到呈无色油状物的中间体C(350mg,1.23mmol,30.78％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝286.0。
步骤2：1-甲基-4-((3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)哌啶(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120003831
向中间体C(350mg,1.23mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(375.29mg,1.48mmol)于二噁烷(5mL)中的溶液中加入KOAc(241.73mg,2.46mmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(80.27mg,123.16μmol)。将混合物在80℃下在N2下搅拌2小时。将反应混合物用H2O(10mL)稀释，并用EtOAc(10mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色油状物的中间体E(570mg,粗品)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝332.0。
步骤3：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(((1-甲基哌啶-4-基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物127)的制备
Figure BDA0003284159120003841
向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-叔丁基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例7中的方法所制备](80mg,207.64μmol)和中间体E(206.35mg,622.93μmol)于二噁烷/H2O＝(4/1,2mL)中的溶液中加入K3PO4(132.23mg,622.93μmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(27.07mg,41.53μmol)。将混合物在80℃下在N2下搅拌2小时。将反应混合物用H2O(20mL)稀释，并用EtOAc(20mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(0.1％FA条件)纯化，并浓缩以除去乙腈，然后用EtOAc(20mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到粗产物。将粗产物通过制备型TLC(DCM/MeOH＝10/1,Rf＝0.1)纯化，并浓缩，得到呈的白色固体化合物127(17.44mg,34.15μmol,16.45％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝510.5；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.88(s,1H),7.81-7.79(m,1H),7.57-7.56(m,1H),7.37-7.35(m,2H),7.35-7.30(m,1H),6.93-6.64(m,1H),6.57-6.56(m,1H),4.59(s,2H),4.22(s,2H),3.71-3.69(m,1H),3.20-3.14(m,2H),2.92(br s,2H),2.67(s,3H),2.05-1.93(m,4H),1.54(s,9H)。
实施例126. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(((3,3-二氟-1-甲基哌啶-4-基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物128)的制备
Figure BDA0003284159120003851
步骤1：4-((3-溴苄基)氧基)-3,3-二氟-1-甲基哌啶(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003852
在0℃下向3,3-二氟-1-甲基-哌啶-4-醇(500mg,3.31mmol)于DMF(3mL)中的溶液加入NaH(264.61mg,6.62mmol,60％％纯度)。在0℃下搅拌15分钟后，在0℃下滴加1-溴-3-(溴甲基)苯(826.74mg,3.31mmol)于DMF(2mL)中的溶液。将反应混合物升温至加25℃，并在25℃下搅拌14小时。将反应混合物用饱和NH4Cl(40mL)猝灭，并用EtOAc(20mL x 2)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并浓缩，得到黄色油。将油通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0～60％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，浓缩得到呈黄色油状物的中间体C(800mg,2.49mmol,75.17％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝320.0；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.52(s,1H),7.44-7.42(m,1H),7.35-7.29(m,1H),7.29-7.23(m,1H),4.74-4.62(m,2H),3.77-3.62(m,1H),2.88-2.73(m,1H),2.71-2.54(m,2H),2.46-2.36(m,1H),2.31(s,3H),1.98-1.87(m,2H)。
步骤2：3,3-二氟-1-甲基-4-((3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)哌啶(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120003861
在25℃下在N2下向中间体C(400mg,1.25mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(634.51mg,2.50mmol)和KOAc(367.84mg,3.75mmol)于二噁烷(4mL)中的溶液中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(81.42mg,124.93μmol)。将反应混合物在80℃下在N2下搅拌3小时。将反应混合物倒入水(10mL)中，并用EtOAc(10mL x 2)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并浓缩，得到呈黑褐色油状物的中间体E(800mg,粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝368.2。
步骤3：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(((3,3-二氟-1-甲基哌啶-4-基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物128)的制备
Figure BDA0003284159120003871
在25℃下在N2下向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-叔丁基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例7中的方法所制备](50mg,129.78μmol)、中间体E(95.32mg,259.55μmol)和K3PO4(82.64mg,389.33μmol)于二噁烷(0.8mL)和H2O(0.2mL)中的溶液中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(8.46mg,12.98μmol)。将反应混合物在80℃下在N2下搅拌4小时。将反应混合物用水(5mL)稀释，并用EtOAc(5mL x 3)萃取。将合并的有机层浓缩，得到棕色油。将油用DMSO(1mL)溶解，并通过反相HPLC(FA)纯化，浓缩并冻干，得到棕色固体。将固体用MeOH(1mL)溶解并通过制备型HPLC(流动相：[水(0.05％氢氧化氨v/v)-乙腈]；B％：37％-67％)纯化，浓缩并冻干，得到呈白色固体的化合物128(14.18mg,25.78μmol,19.87％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝546.4；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.90(s,1H),7.83(d,J＝7.6Hz,1H),7.58-7.57(m,1H),7.41-7.36(m,2H),7.33-7.29(m,1H),6.97-6.93(m,1H),6.57-6.56(m,1H),4.76-4.71(m,2H),4.23(s,2H),3.72-3.70(m,1H),2.89-2.75(m,1H),2.71-2.54(m,2H),2.45-2.35(m,1H),2.31(s,3H),1.98-1.88(m,2H),1.57(s,9H)。
实施例127. 1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(((四氢呋喃-3-基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物129)的制备
Figure BDA0003284159120003881
步骤1：3-((3-溴苄基)氧基)四氢呋喃(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003882
在0℃下向四氢呋喃-3-醇(1g,11.35mmol,917.43μL)于无水THF(7mL)中的溶液中加入NaH(907.92mg,22.70mmol,60％纯度)，搅拌15分钟后，在0℃下滴加1-溴-3-(溴甲基)苯(2.84g,11.35mmol)于THF(3mL)中的溶液。将反应混合物升温至25℃，并搅拌3小时。在搅拌下将反应混合物倒入饱和NH4Cl(60mL)中，然后用EtOAc(20mL x 3)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，浓缩得到黄色油。将油用DCM(5mL)溶解，然后通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0～40％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，并浓缩，得到呈浅黄色油状物的中间体C(2.5g,9.68mmol,85.31％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.53-7.50(m,1H),7.50-7.45(m,1H),7.35-7.28(m,2H),4.52-4.42(m,2H),4.23-4.17(m,1H),3.74-3.71(m,2H),3.70-3.64(m,2H),1.97-1.91(m,2H)。
步骤2：4,4,5,5-四甲基-2-(3-(((四氢呋喃-3-基)氧基)甲基)苯基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120003883
在25℃下在N2下向中间体C(500mg,1.94mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(592.57mg,2.33mmol)和KOAc(572.54mg,5.83mmol)于二噁烷(1mL)中的溶液中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(126.74mg,194.46μmol)。将反应混合物在80℃下在N2下搅拌4小时。将反应混合物过滤并将滤液浓缩，得到呈棕色油状物的中间体E(1.50g,粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤3：1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(((四氢呋喃-3-基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物129)的制备
Figure BDA0003284159120003891
在25℃下在N2下向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-1-叔丁基-吡咯-3-甲酰胺[根据实施例7中的方法所制备](50mg,129.78μmol)、中间体E(78.95mg,259.55μmol)和K3PO4(82.64mg,389.33μmol)于二噁烷(0.8mL)和H2O(0.2mL)中的溶液中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(8.46mg,12.98μmol)。将反应混合物在75℃下在N2下搅拌16小时。将反应混合物浓缩，得到棕色油。将油用DMSO(2mL)溶解并通过制备型HPLC(FA)纯化，浓缩并用EtOAc(20mL x 2)萃取，将合并的有机层用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到黄色油。将油用EtOAc(1mL)溶解并通过制备型TLC(EA,Rf＝0.3)再纯化，浓缩得到黄色油。将油用MeOH(0.5mL)溶解并用H2O(20mL)稀释，然后冻干，得到呈黄色树胶的化合物129(24.67mg,51.12μmol,39.39％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝483.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.41-12.23(m,1H),8.17-8.15(m,1H),7.87(s,1H),7.81(d,J＝7.8Hz,1H),7.61(s,1H),7.52-7.50(m,1H),7.40-7.38(m,1H),7.28(d,J＝7.5Hz,1H),6.97-6.95(m,1H),6.47-6.46(m,1H),4.56-4.46(m,2H),4.26-4.19(m,1H),4.08(d,J＝6.0Hz,2H),3.80-3.73(m,2H),3.72-3.65(m,2H),2.01-1.93(m,2H),1.49(s,9H)。
实施例128.N-(2-((4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物130)的制备
Figure BDA0003284159120003901
步骤1：6-溴-2-甲基-3,4-二氢-1H-异喹啉(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120003902
在25℃下向6-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉(500mg,2.36mmol)于HCOOH(5mL)中的溶液中加入37％的HCHO水溶液(1.91g,23.58mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌3小时。向反应混合物中加入NaOH(1M)以调节pH至10，然后用EtOAc(20mL x 2)萃取，浓缩得到呈黄色油状物的中间体B(400mg,1.64mmol,69.51％产率)。LCMS(ESI)m/z[M]+＝226.1/228.1。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.26-7.24(m,1H),7.23(d,J＝2.0Hz,1H),6.90(d,J＝8.0Hz,1H),3.52(s,H),2.94-2.87(m,2H),2.67-2.65(m,2H),2.46(s,3H)。
步骤2：(3,3-二甲基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120003911
在25℃下在N2下向中间体B(400mg,1.77mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(898.45mg,3.54mmol)和KOAc(520.85mg,5.31mmol)于二噁烷(4mL)中的溶液中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(115.30mg,176.90μmol)。将反应混合物在80℃下在N2下搅拌2小时。将反应混合物倒入水(20mL)中。将混合物用EA(20mL x3)萃取，浓缩得到呈黑褐色油状物的中间体D(900mg,粗品)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝274.2。
步骤3：(3,3-二甲基-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁-2-基)氨基甲酸(S)-叔丁酯(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120003912
在25℃下在N2下向(2-((4-溴噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯[根据实施例6中的方法所制备](147.69mg,439.27μmol)、中间体D(400mg,878.55μmol)和K3PO4(279.73mg,1.32mmol)于二噁烷(1.6mL)和H2O(0.4mL)中的溶液加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(28.63mg,43.93μmol)。将反应混合物在80℃下在N2下搅拌16小时。将反应混合物倒入水(20mL)中，然后用EtOAc(20mL x 3)萃取，将合并的有机层浓缩，得到黑褐色残余物。残余物用MeOH(3mL)溶解，并通过反相HPLC(FA)纯化，浓缩，然后加入NaOH(1M)调节pH至10，用EtOAc(20mL x 2)萃取，浓缩得到呈黄色固体的中间体F(40mg,98.14μmol,22.34％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝403.2。
步骤4：2-氨基-N-(4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120003921
将中间体F(40mg,99.38μmol)于HCl/二噁烷(0.5mL)中的溶液在25℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，得到呈黄色固体的中间体G(20mg,54.18μmol,54.52％产率，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝303.0。
步骤5：N-(2-((4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物130)的制备
Figure BDA0003284159120003922
将1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](13.40mg,70.83μmol)、HATU(33.66mg,88.53μmol)和DIEA(22.88mg,177.07μmol,30.84μL)于DMF(0.5mL)中的溶液在25℃下搅拌5分钟，然后在25℃下加入中间体D(20mg,59.02μmol,HCl盐)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(5mL)稀释，然后用EtOAc(5mL x 2)萃取。将合并的有机层浓缩，得到黄色液体。将液体用MeOH(2mL)稀释，然后通过反相HPLC(FA)纯化，冻干，得到呈黄色固体的化合物130(3.56mg,7.26μmol,12.30％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝474.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.53-12.21(m,1H),8.67-8.66(m,1H),8.26(s,1H),7.84-7.83(m,1H),7.65(s,1H),7.53(s,1H),7.31-7.30(m,1H),7.09(d,J＝8.0Hz,1H),6.77-6.76(m,1H),4.13(d,J＝6.0Hz,2H),3.57(s,3H),3.50(br s,2H),2.86(d,J＝6.0Hz,2H),2.62(br s,2H),2.35(s,3H)。
实施例129. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(1-甲基-1H-吲唑-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物131)的制备
Figure BDA0003284159120003931
步骤1：(2-((4-(1-甲基-1H-吲唑-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120003932
向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(根据实施例6中的方法所制备)(300mg,892.31μmol)、1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吲唑(345.49mg，1.34mmol)、K3PO4(757.63mg,3.57mmol)于二噁烷(5mL)/H2O(1mL)的混合物中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(58.16mg,89.23μmol)，将混合物在85℃下在N2气氛下搅拌2小时。将反应混合物用水(15mL)稀释，并用EtOAc(25mL x2)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL x 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相(0.1％FA条件)纯化，将级分冻干，得到呈黑褐色油状物的中间体C(266mg,679.67μmol,76.17％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝388.2。
步骤2：2-氨基-N-(4-(1-甲基-1H-吲唑-6-基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120003941
将中间体C(260mg,671.05μmol)于HCl/二噁烷(3mL)中的溶液在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩，得到呈灰色固体的中间体D(210mg,粗品，HCl盐)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝287.9。
步骤3：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(1-甲基-1H-吲唑-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物131)的制备
Figure BDA0003284159120003942
向1-叔丁基吡咯-3-羧酸[根据实施例34中的方法所制备](92.95mg,555.90μmol)、EDCI(213.13mg,1.11mmol)、DIEA(239.49mg,1.85mmol,322.76μL)和HOBt(60.09mg,444.72μmol)于DCM(4mL)中的混合物中加入中间体D(120mg,370.60μmol,HCl盐)，将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：38％-68％)纯化，将级分冻干，得到呈白色固体的化合物131(32.94mg,75.46μmol,20.36％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝437.1；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.10(s,1H),7.98(m,1H),7.77-7.71(m,2H),7.59-7.52(m,2H),6.97-6.95(m,1H),6.59-6.57(m,1H),4.25(s,2H),4.09(s,3H),1.57(s,9H)。
实施例130.N-(2-((4-(1-甲基-1H-吲唑-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物132)的制备
Figure BDA0003284159120003951
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](35.06mg,185.30μmol)、HATU(88.07mg,231.62μmol)和DIEA(99.79mg,772.08μmol,134.48μL)于DCM(2mL)中的溶液中加入2-氨基-N-[4-(1-甲基吲唑-6-基)噻唑-2-基]乙酰胺[根据实施例129中的方法所制备](50mg,154.42μmol,HCl盐)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：27％-57％)纯化。将所述级分冻干，得到呈灰白色固体的化合物132(38.97mg,84.99μmol,55.04％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝458.9；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.43(s,1H),8.70-8.67(m,1H),8.11-8.03(m,2H),7.85-7.78(m,2H),7.74-7.69(m,2H),7.32-7.31(m,1H),6.78-6.77(m,1H),4.16-4.07(m,5H),3.57(s,3H)。
实施例131. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(1-甲基-2-氧代-1,2-二氢喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物133)的制备
Figure BDA0003284159120003961
向1-叔丁基吡咯-3-羧酸[根据实施例34中的方法所制备](28.60mg,171.05μmol)于DMF(0.6mL)中的溶液中加入DIEA(55.26mg,427.57μmol,74.47μL)、EDCI(40.98mg,213.77μmol)、HOBt(28.89mg,213.81μmol)和2-氨基-N-[4-(1-甲基-2-氧代-7-喹啉基)噻唑-2-基]乙酰胺(50mg,101.48μmol,HCl盐)(根据实施例12中的方法所制备)。将混合物在25℃下搅拌14小时。将反应混合物用H2O(5mL)稀释，并用EtOAc(5mL x 3)萃取。将合并的有机层用饱和盐水(5mL x 3)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相HPLC(碱性条件)纯化并冻干，得到呈黄色固体形式的化合物133(11.30mg,24.38μmol,24.02％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝464.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.10(s,1H),8.00(s,1H),7.90(d,J＝9.2Hz,1H),7.87-7.72(m,3H),7.52(s,1H),6.97(s,1H),6.60(d,J＝9.2Hz,1H),6.50-6.45(m,1H),4.07(d,J＝6.0Hz,2H),3.68(s,3H),1.49(s,9H)。
实施例132. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(1,3-二甲基-2-氧代-1,2,3,4-四氢喹唑啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物134)的制备
Figure BDA0003284159120003962
步骤1：7-溴-1,3-二甲基-3,4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120003971
在0℃下向7-溴-3,4-二氢-1H-喹唑啉-2-酮(180mg,792.75μmol)于DMF(3mL)中的溶液中加入NaH(95.12mg,2.38mmol,60％纯度)。将混合物在25℃下搅拌10分钟。然后加入MeI(337.57mg,2.38mmol,148.06μL)。将混合物在25℃下搅拌0.5小时。将混合物倒入H2O(10mL)中，并用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-30％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，并在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体B(150mg,587.98μmol,74.17％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝257.0；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.10-7.02(m,1H),6.96-6.82(m,2H),4.27(d,J＝1.6Hz,2H),3.24(d,J＝2.8Hz,3H),3.09-2.92(m,3H)。
步骤2：1,3-二甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120003972
将中间体B(130mg,509.58μmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(258.80mg,1.02mmol)、乙酸钾(150.03mg,1.53mmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(33.21mg,50.96μmol)于二噁烷(3mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在80℃下在N2气氛下搅拌1小时。将混合物倒入水(3mL)中，并用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-35％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，并在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体D(140mg,463.31μmol,90.92％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝303.2。
步骤3：(2-((4-(1，3-二甲基-2-氧代-1,2,3,4-四氢喹唑啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120003981
将N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯[根据实施例6中的方法所制备](100mg,297.44μmol)、中间体D(134.82mg,446.16μmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(19.39mg,29.74μmol)、K3PO4(189.41mg,892.32μmol)于二噁烷(3mL)和H2O(1mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在80℃下在N2气氛下搅拌0.5小时。将反应混合物倒入H2O(10mL)中，并用(15mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-30％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，并在真空中浓缩，得到呈白色固体的中间体F(50mg,115.87μmol,38.96％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝432.1。
步骤4：2-氨基-N-(4-(1,3-二甲基-2-氧代-1,2,3,4-四氢喹唑啉-7-基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120003982
将中间体F(50mg,115.87μmol)于HCl/二噁烷(4M,1mL)中的溶液在25℃下搅拌0.5小时。将反应混合物在真空中浓缩。将残余物用EtOAc(5mL)洗涤，过滤并在真空中干燥，得到呈浅黄色固体的中间体G(40mg,108.74μmol,93.84％产率，HCl盐)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝332.1。
步骤5：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(1,3-二甲基-2-氧代-1,2,3,4-四氢喹唑啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物134)的制备
Figure BDA0003284159120003991
向中间体G(40mg,108.74μmol,HCl盐)和1-叔丁基吡咯-3-羧酸[根据实施例34中的方法所制备](21.82mg,130.49μmol)于DMF(3mL)中的溶液中加入EDCI(31.27mg,163.11μmol)、HOBt(22.04mg,163.11μmol)和DIEA(70.27mg,543.70μmol,94.70μL)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物倒入H2O(30mL)中并搅拌，将混合物过滤。将固体通过制备型HPLC(流动相：[水(0.225％FA)-乙腈]；B％：32％-62％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物134(25.19mg,52.42μmol,48.20％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝481.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.59-12.13(m,1H),8.18-8.16(m,1H),7.67(s,1H),7.55-7.49(m,2H),7.42(d,J＝1.2Hz,1H),7.20(d,J＝7.8Hz,1H),6.98-6.97(m,1H),6.48-6.47(m,1H),4.39(s,2H),4.08(d,J＝6.0Hz,2H),3.26(s,3H),2.91(s,3H),1.49(s,9H)。
实施例133.(S)-1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(((四氢呋喃-3-基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物135)和(R)-1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(((四氢呋喃-3-基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物136)的制备
Figure BDA0003284159120004001
步骤1：3-((3-溴苄基)氧基)四氢呋喃(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120004002
在0℃下向四氢呋喃-3-醇(2g,22.70mmol,1.83mL)于无水THF(15mL)中的溶液中加入NaH(1.82g,45.40mmol,60％纯度)，搅拌0.5小时后，在0℃下滴加1-溴-3-(溴甲基)苯(5.67g,22.70mmol)于THF(5mL)中的溶液。将反应混合物升温至25℃，并搅拌3小时。在搅拌下将反应混合物倒入饱和NH4Cl(80mL)中，然后用EtOAc(30mL x 3)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，浓缩得到黄色油。将油用DCM(5mL)溶解，然后通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-40％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，浓缩得到呈浅黄色油状物的中间体C(5.00g,17.50mmol,77.10％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.51(s,1H),7.47-7.46(m,1H),7.35-7.28(m,2H),4.51-4.42(m,2H),4.22-4.17(m,1H),3.79-3.73(m,1H),3.73-3.70(m,1H),3.70-3.64(m,2H),1.98-1.91(m,2H)。
步骤2：4,4,5,5-四甲基-2-(3-(((四氢呋喃-3-基)氧基)甲基)苯基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120004011
在25℃下在N2下向中间体C(2.5g,9.72mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(2.96g,11.67mmol)和KOAc(2.86g,29.17mmol)于二噁烷(3mL)中的溶液中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(633.69mg,972.29μmol)。将反应混合物在80℃下在N2下搅拌3小时。将反应混合物用水(10mL)稀释，并用EtOAc(40mL)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并浓缩，得到呈棕色油状物的中间体E(4g,粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤3：(2-氧代-2-((4-(3-(((四氢呋喃-3-基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120004012
在25℃下在N2下向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯[根据实施例6中的方法所制备](800mg,2.38mmol)、中间体E(868.58mg,2.86mmol)和K3PO4(1.52g,7.14mmol)于二噁烷(8mL)于二噁烷(8mL)和H2O(2mL)中的溶液中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(155.08mg,237.95μmol)。将反应混合物在80℃下搅拌16小时。将反应混合物倒入水(20mL)中，并用EtOAc(15mL x 3)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并浓缩，得到棕色油。将油通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-70％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，并浓缩，得到呈黄色油状物的中间体G(600mg,1.37mmol,57.54％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝434.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.29(s,1H),7.87(s,1H),7.80(d,J＝8.0Hz,1H),7.63(s,1H),7.40-7.38(m,1H),7.28(d,J＝7.6Hz,1H),7.16-7.14(m,1H),4.54-4.47(m,2H),4.25-4.20(m,1H),3.93(s,1H),3.88-3.82(m,2H),3.80-3.73(m,2H),3.72-3.64(m,2H),1.97-1.94(m,1H),1.40(s,9H)。
步骤4：2-氨基-N-(4-(3-(((四氢呋喃-3-基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120004021
向中间体G(600mg,1.38mmol)于二噁烷(3mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(3mL)，并将溶液在25℃下搅拌2小时。将反应混合物过滤，并固体在真空中干燥，得到呈黄色固体的中间体H(420mg,1.06mmol,76.36％产率，HCl盐)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝334.3；1H NMR(400MHz,D2O)δ7.77-7.72(m,2H),7.47-7.41(m,2H),7.38-7.33(m,1H),4.55-4.54(m,1H),4.56(s,1H),4.39-4.34(m,1H),4.09(s,2H),3.92-3.86(m,2H),3.86-3.77(m,1H),3.74-3.68(m,1H),2.12-2.01(m,2H)。
步骤5：1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(((四氢呋喃-3-基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(中间体J)的制备
Figure BDA0003284159120004031
将1-叔丁基吡咯-3-羧酸[根据实施例34中的方法所制备](189.87mg,1.14mmol)、EDCI(326.53mg,1.70mmol)、HOBt(230.16mg,1.70mmol)和DIEA(440.28mg,3.41mmol,593.38μL)于DMF(4mL)中的溶液中在25℃下搅拌5分钟，然后在25℃下加入中间体H(420mg,1.14mmol,HCl盐)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(5mL)稀释，用EtOAc(5mL x 3)萃取，然后浓缩得到棕色油。将油用DCM(3mL)稀释，并通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-80％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，并浓缩得到呈黄色油状物的中间体J(250mg,513.16μmol,45.19％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝483.3；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.90(s,1H),7.81(d,J＝8.0Hz,1H),7.58-7.57(m,1H),7.41-7.35(m,2H),7.31-7.27(m,1H),6.97-6.93(m,1H),6.57-6.56(m,1H),4.61-4.52(m,2H),4.29-4.28(m,1H),4.23(s,2H),3.95-3.86(m,2H),3.85-3.75(m,2H),2.11-2.01(m,2H),1.57(s,9H)；49.894％。
步骤6：(S)-1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(((四氢呋喃-3-基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物135)和(R)-1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(((四氢呋喃-3-基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物136)的制备
Figure BDA0003284159120004032
将中间体J(250mg，518.03μmol)通过手性SFC分离，得到呈灰白色固体的化合物135(64.86mg,128.96μmol,24.89％产率)和呈灰白色固体的化合物136(58.57mg,115.25μmol,22.25％产率)。
化合物135：LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝483.2；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.90(s,1H),7.81(d,J＝7.6Hz,1H),7.58-7.57(m,1H),7.41-7.35(m,2H),7.31-7.26(m,1H),6.95-6.94(m,1H),6.59-6.55(m,1H),4.60-4.53(m,2H),4.29-4.28(m,1H),4.23(s,2H),3.95-3.85(m,2H),3.84-3.76(m,2H),2.11-2.01(m,2H),1.57(s,9H)；ee％＝100％。
化合物136：LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝483.1；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.89(s,1H),7.81(d,J＝7.6Hz,1H),7.58-7.57(m,1H),7.40-7.33(m,2H),7.31-7.26(m,1H),6.95-6.94(m,1H),6.57-6.55(m,1H),4.60-4.52(m,2H),4.29-4.28(m,1H),4.23(s,2H),3.94-3.85(m,2H),3.84-3.75(m,2H),2.11-2.00(m,2H),1.56(s,9H)；ee％＝96.29％。
实施例134.N-(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物137)的制备
Figure BDA0003284159120004041
步骤1：7-溴-2-甲基异喹啉-1(2H)-酮(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120004051
在30℃下在N2下向7-溴异喹啉-1(2H)-酮(1g,4.46mmol)于DMF(25mL)中的混合物中一次性加入Cs2CO3(2.18g,6.69mmol)和MeI(950.26mg,6.69mmol,416.78μL)。将反应混合物在50℃下搅拌16小时。将混合物倒入水(150mL)中。将水相用EtOAc(75mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(50mL x 2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈黄色固体的中间体B(1.05g,4.24mmol,94.97％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝240.0；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.58(d,J＝2.0Hz,1H),7.73-7.70(m,1H),7.39(d,J＝8.4Hz,1H),7.10(d,J＝7.6Hz,1H),6.46(d,J＝7.6Hz,1H),3.61(s,3H)。
步骤2：2-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)异喹啉-1(2H)-酮(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120004052
在30℃下在N2下向中间体B(1.05g,4.41mmol)和4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2’-双(1,3,2-二氧杂环戊硼烷)(1.34g,5.29mmol)于二噁烷(25mL)中的混合物中加入KOAc(1.30g,13.23mmol)[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(287.44mg,441.03μmol)。将反应混合物加热至100℃，并在100℃下在N2下搅拌4小时。将反应混合物在真空中浓缩，得到残余物。将残余物通过硅胶柱色谱(石油醚/EtOAc＝3/1至1/1)纯化，得到呈黄色油状物的中间体D(2g，粗品)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝286.1；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.91(br s,1H),8.01(d,J＝7.6Hz,1H),7.49-7.47(m,1H),7.10-7.09(m,1H),6.48-6.46(m,1H),3.61(s,3H),1.60(s,12H)。
步骤3：2-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120004061
在30℃下向中间体D(1g,2.46mmol)于EtOH(200mL)中的溶液中加入Pd/C(250mg,10％纯度)。将反应混合物加热至50℃，并在50℃下在H2(15psi)下搅拌15小时。将反应混合物过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色油状的中间体E(900mg,粗品)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝288.1；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.53(s,1H),7.84-7.82(m,1H),7.17(d,J＝7.6Hz,1H),3.57-3.54(m,2H),3.16(s,3H),3.02-3.00(m,2H),1.34(s,12H)。
步骤4：(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120004062
在30℃下在N2下向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯[根据实施例6中的方法所制备](100mg,297.44μmol)和2-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮[根据实施例7中的方法所制备](211.08mg,594.88μmol)于二噁烷(3mL)和H2O(0.75mL)中的混合物中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(19.39mg,29.74μmol)和K3PO4(189.41mg,892.32μmol)。将反应混合物加热至75℃，并在75℃下在N2下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相柱(FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的中间体G(140mg,265.35μmol,89.21％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝417.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.34(br s,1H),8.45(s,1H),7.97(d,J＝7.2Hz,1H),7.65(s,1H),7.34(d,J＝7.6Hz,1H),7.14(br s,1H),3.86(d,J＝5.6Hz,2H),3.58-3.55(m,2H),3.04(s,3H),3.02-2.98(m,2H),1.39(s,9H)。
步骤5：2-氨基-N-(4-(2-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120004071
在30℃下向中间体G(140mg,336.14μmol)于EtOAc(2mL)中的混合物中加入HCl/EtOAc(4M,2mL)。将反应混合物在30℃下搅拌1小时，然后过滤。将固体在真空中干燥，得到呈黄色固体的中间体H(80mg,218.01μmol,64.86％产率，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝317.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.78(br s,1H),8.46(d,J＝2.0Hz,1H),8.31(br s,2H),7.99-7.97(m,1H),7.76(s,1H),7.36(d,J＝8.4Hz,1H),3.93-3.90(m,2H),3.59-3.56(m,2H),3.05(s,3H),3.02-2.99(m,2H)。
步骤6：N-(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物137)的制备
Figure BDA0003284159120004081
在30℃下向中间体H(50mg,158.04μmol,HCl盐)和1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](29.90mg,158.04μmol)于DMF(1mL)中的混合物中加入EDCI(45.44mg,237.06μmol)、HOBt(32.03mg,237.06μmol)和DIPEA(61.27mg,474.12μmol,82.58μL)。将反应混合物在30℃下搅拌16小时。将反应混合物通过反相柱(FA条件)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的化合物137(13.11mg,26.89μmol,17.01％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝488.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.44(br s,1H),8.68-8.65(m,1H),8.46(d,J＝2.0Hz,1H),7.98-7.95(m,1H),7.84-7.83(m,1H),7.66(s,1H),7.35(d,J＝8.0Hz,1H),7.32-7.30(m,1H),4.14(d,J＝6.0Hz,2H),3.58-3.53(m,5H),3.04(s,3H),3.01-2.98(m,2H)。
实施例135.N-(2-((4-(3-(4-氨基四氢-2H-吡喃-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物138)的制备
Figure BDA0003284159120004091
步骤1：2-氨基-N-(4-(3-(4-叠氮四氢-2H-吡喃-4-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120004092
在0℃下向N-[2-[[4-[3-(4-羟基四氢吡喃-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯[根据实施例138中的方法所制备](30mg,69.20μmol)于DCM(4mL)中的溶液中加入NaN3(9.00mg,138.40μmol)。然后在0℃下滴加TFA(1.54g,13.51mmol,1mL)。将混合物在20℃下搅拌16小时。加入水(5mL)和饱和NH4OH溶液(10mL)。将所得混合物过滤，并将滤饼用水(1mL)洗涤，并在真空中干燥，得到呈黄色固体的中间体B(22mg,粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝359.0。
步骤2：N-(2-((4-(3-(4-叠氮四氢-2H-吡喃-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120004101
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](10.57mg,55.87μmol)于DCM(3mL)中的溶液中加入DIPEA(21.66mg,167.62μmol,29.20μL)和HATU(25.49mg,67.05μmol)。将反应混合物在20℃下搅拌10分钟。加入中间体B(20.03mg,55.87μmol)，并将混合物在20℃下搅拌16小时。将反应混合物倒入水(10mL)中，并所得混合物用EtOAc(15mLx2)萃取。将合并的有机相用水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩，得到呈黄色油状物的中间体D(23mg,粗品)。粗产物不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝530.1。
步骤3：N-(2-((4-(3-(4-氨基四氢-2H-吡喃-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物138)的制备
Figure BDA0003284159120004102
向中间体D(20mg,37.76μmol)于THF(2mL)和H2O(0.2mL)中的溶液中加入PPh3(19.81mg,75.53μmol)。将反应混合物在20℃下搅拌16小时。然后将反应混合物在50℃下搅拌16小时。将反应混合物浓缩至干燥，得到残余物。将残余物加入HCl/二噁烷(4M,0.5mL)和EtOAc(5mL)中，形成HCl盐。将混合物过滤，并将滤饼用EtOAc(5mL)洗涤，得到粗产物(10mg,黄色油)。将粗产物通过制备型HPLC(流动相:[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：15％-45％)纯化，并冻干，得到呈黄色固体的标题化合物(4.45mg,7.21μmol,19.08％产率，TFA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝504.1；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.18(s,1H),8.06-7.96(m,1H),7.87-7.85(m,1H),7.62-7.56(m,2H),7.53(s,1H),7.30(dd,J＝3.2Hz,1.6Hz,1H),6.83(dd,J＝3.2Hz,1.6Hz,1H),4.28(s,2H),3.98-3.96(m,2H),3.64-3.53(m,2H),3.40(s,3H),2.67-2.65(m,2H),2.19-2.17(m,2H)。
实施例136.N-(2-((4-(3-(2-羟基丙基-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物139)的制备
Figure BDA0003284159120004111
步骤1：(2-((4-(3-乙酰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120004112
在N2下向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯[根据实施例6中的方法所制备](300mg,892.31μmol)、(3-乙酰基苯基)硼酸(438.93mg，2.68mmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(116.31mg,178.46μmol)于二噁烷(3mL)和H2O(0.5mL)中的混合物中加入K3PO4(568.22mg,2.68mmol)。然后将所得混合物在80℃下搅拌2小时。加入EtOAc(30mL)和水(10mL)。将混合物用EtOAc(50mL)萃取。将有机层在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱(SiO2,PE/EA＝5/1至2/1)纯化，并在真空中浓缩，得到呈黄色固体的中间体C(280mg,738.33μmol,82.74％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝376.2。
步骤2：(2-((4-(3-(2-羟基丙-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120004121
在0℃下在N2条件下向中间体碳(120mg,319.62μmol)于THF(1.5mL)中的溶液中加入MeMgBr(3M,639.25μL)。将混合物在30℃下搅拌2小时。将反应混合物通过在0℃下添加NH4Cl溶液(50mL)猝灭，然后用EtOAc(30mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色固体的中间体D(120mg,粗品)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝392.2。
步骤3：2-氨基-N-(4-(3-(2-羟基丙-2-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120004122
将中间体D(50mg,127.72μmol)溶解在HCl/二噁烷(1mL)中。将混合物在30℃下搅拌1小时。将反应混合物蒸发至干燥。将残余物通过制备型HPLC(FA条件)纯化，并冻干，得到呈白色固体的中间体E(40mg,115.00μmol,90.04％产率，FA盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝292.1。
步骤4：N-(2-((4-(3-(2-羟基丙基-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物139)的制备
Figure BDA0003284159120004131
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](22.43mg,118.56μmol)于DCM(1mL)中的混合物中加入HATU(67.62mg,177.83μmol)和DIPEA(61.29mg,474.22μmol,82.60μL)。将混合物在30℃下搅拌15分钟，然后加入中间体E(40mg,118.56μmol,FA盐)，并在30℃下搅拌1小时。将反应混合物倒入水(30.0mL)中，并用EtOAc(30.0mL x 3)萃取。将合并的有机物用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并将滤液蒸发至干燥。将残余物通过制备型TLC(SiO2,DCM:MeOH＝10:1)纯化，得到呈白色固体的化合物139(53.83mg,115.21μmol,97.18％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝463.1；1H NMR(400MHz,Methanol)δ8.06-8.05(m,1H),7.84-7.83(m,1H),7.74(d,J＝7.6Hz,1H),7.45-7.43(m,1H),7.37-7.32(m,2H),7.28-7.27(m,1H),6.81-6.80(m,1H),4.25(s,2H),3.38(s,3H),1.56(s,6H)。
实施例137.N-(2-((4-(3-(叔丁基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物140)的制备
Figure BDA0003284159120004141
步骤1：甲基(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120004142
在N2下向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯[根据实施例6中的方法所制备](200mg,594.88μmol)、(3-(叔丁基)苯基)硼酸(317.73mg,1.78mmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(38.77mg,59.49μmol)于二噁烷(2mL)和水(0.5mL)中的溶液中加入K3PO4(378.82mg,1.78mmol)，将混合物在100℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝5/1)纯化，并在减压下浓缩，得到呈白色固体的中间体C(150mg,364.69μmol,61.31％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝390.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.25(s,1H),7.93(s,1H),7.69-7.62(m,2H),7.37-7.34(m,2H),7.15-7.12(m,1H),3.86(d,J＝6.0Hz,2H),1.40(s,9H),1.32(s,9H)。
步骤2：2-氨基-N-(4-(3-(叔丁基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120004151
向中间体C(150mg,385.10μmol)在EtOAc(2mL)中的溶液中加入4M HCl/EtOAc(2mL)，将混合物在30℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物用EtOAc(5.0mL)和MTBE(5.0mL)研磨，过滤并在真空中干燥，得到呈白色固体的中间体D(200mg，粗品，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝290.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.71(brs,1H),8.43(br s,3H),7.93(s,1H),7.71-7.67(m,2H),7.39-7.34(m,2H),3.93-3.88(m,2H),1.32(s,9H)。
步骤3：N-(2-((4-(3-(叔丁基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物140)的制备
Figure BDA0003284159120004152
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](29.03mg,153.44μmol)、HATU(70.01mg,184.13μmol)和DIEA(99.16mg,767.21μmol,133.63μL)于DCM(1mL)中的溶液中加入中间体D(50mg,153.44μmol,HCl盐)，将混合物在30℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：48％-78％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物140(37.50mg,80.61μmol,52.53％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝461.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.38(s,1H),8.67-8.64(m,1H),7.93-7.92(m,1H),7.84-7.83(m,1H),7.70-7.66(m,1H),7.62(s,1H),7.37-7.34(m,2H),7.31-7.30(m,1H),6.78-6.76(m,1H),4.13(d,J＝6.0Hz,2H),3.57(s,3H),1.32(s,9H)。
实施例138.N-(2-((4-(3-(4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物141)的制备
Figure BDA0003284159120004161
步骤1：4-(3-溴苯基)四氢二-2H-吡喃-4-醇(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120004162
在N2保护下在-10℃下向1-溴-3-碘代苯(0.566g,2.00mmol,254.95μL)于THF(6mL)中的溶液中加入异丙基氯化镁(2M,1.20mL)。将混合物在-10℃下搅拌30分钟。加入四氢吡喃-4-酮(200.30mg,2.00mmol,183.76μL)。在升温至20℃的同时搅拌混合物1小时。将反应混合物通过加入水(10mL)猝灭，并将所得混合物用EtOAc(15mL x 2)萃取。将合并的有机相用水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩，得到呈黄色油状物的中间体C(0.52g,粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.68(m,1H),7.45-7.39(m,2H),7.26-7.22(m,1H),3.97-3.84(m,4H),2.22-2.10(m,2H),1.68-1.66(m,2H)。
步骤2：4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)四氢-2H-吡喃-4-醇(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120004171
将中间体C(0.5g,1.94mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(592.56mg,2.33mmol)、Pd(dppf)Cl2(142.29mg,194.46μmol)和KOAc(572.53mg,5.83mmol)于二噁烷(10mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在80℃下在N2气氛下搅拌16小时。将反应混合物通过加入水(10mL)猝灭，并将所得混合物用EtOAc(15mL x 2)萃取。将合并的有机相用水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩，得到呈黄色油状物的中间体E(0.55g,粗品)。粗产物不经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.76(d,J＝7.2Hz,1H),7.65-7.60(m,1H),7.45-7.37(m,2H),4.02-3.86(m,4H),2.26-2.24(m,2H),1.77-1.69(m,2H),1.37(s,12H)。
步骤3：(2-((4-(3-(4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120004172
将N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯[根据实施例6中的方法所制备]氨基甲酸酯(200mg,594.88μmol)、中间体E(542.86mg,1.78mmol),K3PO4(378.82mg,1.78mmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(38.77mg,59.49μmol)于二噁烷(6mL)和H2O(2mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在80℃下在N2气氛下搅拌2小时。将反应混合物浓缩至干燥，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/EtOAc＝1/1)纯化，并在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体G(230mg,530.54μmol,89.19％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝434.0。
步骤4：2-氨基-N-(4-(3-(4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120004181
向中间体G(25mg,57.67μmol)于DCM(1mL)中的溶液中加入TFA(770.00mg,6.75mmol,0.5mL)。将混合物在20℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩至干燥，得到呈黄色固体的中间体H(26mg,粗制，TFA盐)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤5：N-(2-((4-(3-(4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物141)的制备
Figure BDA0003284159120004182
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](10.57mg,55.87μmol)于DCM(3mL)中的溶液中加入DIPEA(21.66mg,167.62μmol,29.20μL)和HATU(25.49mg,67.05μmol)。将反应混合物在20℃下搅拌10分钟。然后加入中间体H(25mg,55.87μmol,TFA盐)，将混合物在20℃下搅拌16小时。将反应混合物浓缩至干燥，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.1％TFA)-乙腈]；B％：24％-54％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物141(3.39mg,6.72μmol,12.02％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝505.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.42(s,1H),8.69-6.87(m,1H),8.08(s,1H),7.87-7.83(m,1H),7.76(d,J＝7.6Hz,1H),7.64(s,1H),7.49-7.44(m,1H),7.42-7.36(m,1H),7.34-7.30(m,1H),6.79-6.77(m,1H),4.15-4.13(m,2H),3.85-3.72(m,4H),3.58(s,3H),2.05-1.98(m,2H),1.57(m,2H)。
实施例139. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((6-(3-(吡啶-4-基)苯基)吡啶-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物156)的制备
Figure BDA0003284159120004191
步骤1：(2-((6-溴吡啶-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120004192
在0℃下向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸(5g,28.54mmol)于DMF(50mL)中的溶液中加入HATU(13.02g,34.25mmol)、DIPEA(11.07g,85.63mmol,14.91mL)并搅拌0.5小时。然后向混合物中加入6-溴吡啶-2-胺(4.94g,28.54mmol)，并在25℃下搅拌2.5小时。将反应混合物用水(100mL)稀释，并用EA(100mL x 2)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(200mL x 2)洗涤，并经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物。将粗产物通过反相柱色谱(0.1％FA)纯化，并冻干，得到呈棕色固体的中间体C(2.83g,8.16mmol,28.34％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝331.8；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.63(br s,1H),8.19(d,J＝8.4Hz,1H),7.58(m,1H),7.24(d,J＝7.6Hz,1H),5.19(br s,1H),4.01(br d,J＝5.6Hz,2H),1.4(s,9H)。
步骤2：4-(3-溴苯基)吡啶(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120004201
在N2下向1-溴-3-碘代苯(5.1g,18.03mmol,2.30mL)和4-吡啶基硼酸(2.22g,18.03mmol)于甲苯(50mL)、EtOH(25mL)和H2O(25mL)中的混合物中加入K2CO3(6.23g,45.07mmol)和Pd(PPh3)4(2.08g,1.80mmol)。将反应混合物在80℃下在N2下搅拌17小时。将反应混合物倒入水(100mL)中，然后用EA(100mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-50％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，得到呈黄色油状物的中间体G(1.33g,3.81mmol,21.12％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝234.0；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.73-8.64(m,2H),7.79-7.78(m,1H),7.61-7.54(m,2H),7.50-7.46(m,2H),7.39-7.38(m,1H)。
步骤3：4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)吡啶(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120004202
向中间体G(1.33g,5.68mmolg)于二噁烷(13mL)中的溶液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(2.89g,11.36mmol)、乙酸钾(1.67g,17.04mmol)和Pd(dppf)Cl2(415.72mg,568.15μmol)。将反应混合物在N2气氛下搅拌并于120℃回流17小时。将反应混合物浓缩，得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱(洗脱剂为30-80％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，得到呈黑棕色油状物的中间体D(1.7g,5.44mmol,95.78％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝282.1。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.66(d,J＝4.8Hz,2H),8.09(s,1H),7.89-7.88(m,1H),7.76-7.71(m,1H),7.59-7.56(m,2H),7.53-7.48(m,1H),1.38(s,12H)。
步骤4：(2-氧代-2-((6-(3-(吡啶-4-基)苯基)吡啶-2-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体I)的制备
Figure BDA0003284159120004211
在25℃下在N2气氛下向中间体C(1g,3.03mmol)于二噁烷H2O(V/V＝4/1)(20mL)中的溶液中加入中间体D(1.28g,4.54mmol)、K3PO4(1.93g,9.09mmol)和[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(197.39mg,302.87μmol)。然后将反应混合物在60℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(40mL)稀释，并用EA(20mL x 3)萃取。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-100％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，得到呈黄色固体的中间体I(700mg,1.73mmol,57.14％产率，100％纯度)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝405.1；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.78-8.72(m,3H),8.27(s,1H),8.17(m,1H),8.00(d,J＝8.0Hz,1H),7.82(m,1H),7.68(m,1H),7.61-7.55(m,4H),5.27(br s,1H),4.04(brs,2H),1.49(s,9H)。
步骤5：2-氨基-N-(6-(3-(吡啶-4-基)苯基)吡啶-2-基)乙酰胺(中间体J)的制备
Figure BDA0003284159120004221
将中间体I(700mg,1.73mmol)加入HCl/二噁烷(10mL)中，并在25℃下搅拌2小时。将反应混合物过滤，并收集固体。将粗产物用EtOAc(10mL)研磨10分钟。将固体过滤，并在减压下干燥，得到呈白色固体的中间体J(740mg,粗品，HCl盐)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝305.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.13(s,1H),9.04(d,J＝6.4Hz,2H),8.65(s,1H),8.56(d,J＝6.8Hz,2H),8.48(br s,3H),8.34(d,J＝8.0Hz,1H),8.11-8.10(m,1H),7.99-7.97(m,3H),7.76(m,1H),3.89(br s,2H)。
步骤6：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((6-(3-(吡啶-4-基)苯基)吡啶-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物156)的制备
Figure BDA0003284159120004222
在25℃下向1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-羧酸[根据实施例4中的方法所制备](20mg,105.71μmol)和中间体J(36.03mg,105.71μmol,HCl盐)于DMF(1mL)中的溶液中加入EDCI(40.53mg,211.43μmol)、HOBt(28.57mg,211.43μmol)和DIEA(68.31mg,528.57μmol,92.07μL)。将反应混合物在25至30℃下搅拌16小时。将反应混合物在无需后处理的情况下直接纯化。将反应混合物通过反相HPLC(0.1％NH3·H2O)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物156(16.64mg,34.88μmol,32.99％产率)。LCMS(ESI)m/z[M+H]+＝476.3。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.60(s,1H),8.69-8.66(m,2H),8.61-8.60(m,1H),8.48(s,1H),8.19(d,J＝8.0Hz,1H),8.05(br d,J＝8.0Hz,1H),7.95-7.80(m,7H),7.70-7.64(m,1H),7.33-7.29(m,1H),6.79-6.78(m,1H),4.15-4.14(m,2H),3.57(s,3H)。
实施例140.本发明化合物的制备
下面表2和表2a中的化合物是从合适的普通中间体([N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯])开始并利用下面流程1之后的实施例10中描述的合成方案合成的。
方案1：
Figure BDA0003284159120004231
表2：
Figure BDA0003284159120004232
Figure BDA0003284159120004241
Figure BDA0003284159120004251
Figure BDA0003284159120004261
Figure BDA0003284159120004271
Figure BDA0003284159120004281
Figure BDA0003284159120004291
Figure BDA0003284159120004301
Figure BDA0003284159120004311
Figure BDA0003284159120004321
Figure BDA0003284159120004331
Figure BDA0003284159120004341
Figure BDA0003284159120004351
Figure BDA0003284159120004361
Figure BDA0003284159120004371
Figure BDA0003284159120004381
Figure BDA0003284159120004391
Figure BDA0003284159120004401
Figure BDA0003284159120004411
表2a.
化合物编号 LC-MS数据(m/z)
168 522.2
175 503.2
180 522.3
实施例141.本发明化合物的制备
下面表3和表3a中的化合物是从合适的普通中间体([N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯])开始并利用实施例10中描述的合成方案(包括下面方案2中的手性SFC分离)合成的。
方案2：
Figure BDA0003284159120004421
表3.
Figure BDA0003284159120004422
Figure BDA0003284159120004431
Figure BDA0003284159120004441
Figure BDA0003284159120004451
Figure BDA0003284159120004461
表3a.
化合物编号 LC-MS数据(m/z)
585 524.3
586 524.3
实施例142.N-[2-[[4-[3-[(3S,4S)-4-羟基-3-甲基-1-哌啶基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物183)和N-[2-[[4-[3-[(3R,4R)-4-羟基-3-甲基-1-哌啶基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物182)的制备
Figure BDA0003284159120004471
步骤1：N-[2-[[4-[3-(4-羟基-3-甲基-1-哌啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120004472
向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(1.20g,2.91mmol)于1,4-二噁烷(12mL)中的溶液中加入3-甲基哌啶-4-醇盐酸盐(1.32g,8.73mmol)和t-BuONa(1.96g,20.37mmol)。搅拌10分钟后，向混合物中加入t-BuXphos-Pd(gen 3)(0.231g,0.291mmol)，并将混合物加热至60℃，持续1小时。将反应混合物冷却至室温，用水(30mL)稀释，并用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯1:0至7:1)纯化，得到呈黄色固体的中间体C(0.600g,1.21mmol,41.55％产率，90％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝447.1；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.19-9.81(m,1H),7.45-7.38(m,1H),7.32-7.28(m,1H),7.26-7.22(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.95-6.88(m,1H),5.20-5.02(m,1H),4.04-3.89(m,3H),3.79-3.61(m,1H),3.40-3.15(m,2H),3.02-2.80(m,1H),2.54-2.45(m,1H),1.84(s,2H),1.63-1.55(m,2H),1.52-1.46(m,9H),1.13-1.00(m,3H)。
步骤2：2-氨基-N-[4-[3-(4-羟基-3-甲基-1-哌啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120004481
向中间体C(0.660g,1.48mmol)于1,4-二噁烷(2mL)中的冷却(10℃)溶液中加入4MHCl的1,4-二噁烷溶液(6mL)。将混合物升温至室温并搅拌。1小时后，将混合物在真空中浓缩，得到呈黄色固体的中间体D(0.700g)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝347.1。
步骤3：N-(2-((4-(3-((3R,4R)-4-羟基-3-甲基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺和N-(2-((4-(3-((3S,4R)-4-羟基-3-甲基哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(中间体E和F)的制备
Figure BDA0003284159120004491
向中间体D(0.700g,1.83mmol)、1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸(0.346g,1.83mmol)、EDCI(0.526g,2.74mmol)和HOBt(0.371g,2.74mmol)于DMF(7mL)中的冷却溶液(10℃)中加入DIPEA(0.955mL,5.48mmol)。将混合物在20℃下搅拌16小时，然后用水(20mL)稀释。将所得混合物用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将所得固体通过制备型HPLC(流动相:[水(0.225％FA)-乙腈]；B％：10％-40％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的外消旋反式异构体中间体E(0.190g,0.337mmol,18.44％产率，100％纯度)和呈白色固体的外消旋顺式异构体中间体F(0.130g,0.231mmol,12.62％产率，100％纯度)。
步骤4：反式-外消旋-3-甲基-1-(3-(2-(2-(1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)苯基)哌啶-4-基乙酸酯(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120004492
向外消旋反式异构体中间体E(0.100g,0.193mmol)于二氯甲烷(1mL)中的溶液中加入乙酸酐(0.077mL,0.773mmol)、DMAP(0.047g,0.386mmol)和三乙胺(0.054mL,0.386mmol)。2小时后，将反应混合物用水(2mL)稀释，并用二氯甲烷(2mL x 2)萃取，将合并的有机层浓缩，得到黄色油。将油用二氯甲烷溶解，通过快速硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝1:0至2:5)纯化，并浓缩，得到呈黄色固体的中间体G(0.065g,0.107mmol,55.47％产率，92.3％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝560.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.36(s,1H),8.67-8.64(m,1H),7.85-7.84(m,1H),7.61(s,1H),7.47(s,1H),7.32-7.30(m,2H),7.29-7.25(m,1H),6.94-6.92(m,1H),6.78-6.77(m,1H),4.54-4.52(m,1H),4.14(d,J＝6.0Hz,2H),3.75-3.70(m,2H),3.57(s,3H),2.89-2.86(m,1H),2.56(s,1H),2.05(s,3H),2.03-2.01(m,1H),1.99-1.87(m,1H),1.66-1.62(m,1H),0.94(d,J＝6.4Hz,3H)。
步骤5：[(3S,4S)-3-甲基-1-[3-[2-[[2-[(1-甲基磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯基]-4-哌啶基]乙酸酯和[(3R,4R)-3-甲基-1-[3-[2-[[2-[(1-甲基磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯基]-4-哌啶基]乙酸酯(中间体H和I)的制备
Figure BDA0003284159120004501
将中间体G(64.87mg，115.92umol)通过手性SFC分离。将其浓缩，得到呈棕色固体的中间体H(15mg,24.45umol,21.09％产率，91.2％纯度)和呈棕色固体的中间体I(10mg,17.42umol,15.0％产率，97.5％纯度)。
中间体H：LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝560.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.36(br s,1H),8.67-8.64(m,1H),7.84(s,1H),7.60(s,1H),7.47(s,1H),7.31-7.30(m,2H),7.26-7.24(m,1H),6.93(d,J＝7.2Hz,1H),6.77(d,J＝1.2Hz,1H),4.53-4.51(m,1H),4.14(d,J＝6.0Hz,2H),3.74-3.69(m,2H),3.56(s,3H),2.88-2.82(m,1H),2.57-2.50(m,1H),2.06-2.04(m,3H),2.01-1.96(m,1H),1.85-1.80(m,1H),1.61-1.60(m,1H),0.93(d,J＝6.8Hz,3H)；ee％＝100％。
中间体I：LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝560.1.；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.35(br s,1H),8.67-8.64(m,1H),7.84-7.80(m,1H),7.60(s,1H),7.46(s,1H),7.31-7.29(m,2H),7.26-7.24(m,1H),6.90(d,J＝8.0Hz,1H),6.77-6.76(m,1H),4.52-4.51(m,1H),4.13(d,J＝5.2Hz,2H),3.73(d,J＝11.2Hz,2H),3.56(s,3H),2.85-2.82(m,1H),2.60(s,1H),2.04(s,3H),1.99-1.97(m,1H),1.86-1.82(m,1H),1.60-1.57(m,1H),0.93(d,J＝6.4Hz,3H)；ee％＝98.16％。
步骤6：N-[2-[[4-[3-[(3S,4S)-4-羟基-3-甲基-1-哌啶基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物183)的制备
Figure BDA0003284159120004511
向中间体H(0.015g,0.027mmol)于MeOH(0.2mL)中的溶液中加入TsOH·H2O(0.015g,0.080mmol)。将反应混合物在40℃下搅拌16小时。将反应混合物随后用水(5mL)稀释，并用乙酸乙酯(3mL x 3)萃取。将合并的有机层浓缩，得到黄色残余物。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.225％FA)-乙腈]；B％：9％-39％)纯化。将合适的级分冻干，得到呈灰白色固体的化合物183(0.001g,0.003mmol,9.88％产率，100％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝518.4；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.84-7.83(m,1H),7.56-7.55(m,1H),7.35-7.32(m,2H),7.28-7.24(m,2H),6.95-6.92(m,1H),6.81-6.80(m,1H),4.25(s,2H),3.75-3.72(m,1H),3.67-3.63(m,1H),3.37(s,3H),3.31-3.19(m,1H),2.81-2.80(m,1H),2.48-2.42(m,1H),2.01-1.97(m,1H),1.72-1.62(m,2H),1.07(d,J＝6.8Hz,3H)；ee％＝98.61％。
步骤7：N-[2-[[4-[3-[(3R,4R)-4-羟基-3-甲基-1-哌啶基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物182)的制备
Figure BDA0003284159120004521
化合物182是使用上述类似方法合成的。使用了以下数量的试剂：中间体I(0.010g,0.018mmol)、MeOH(0.2mL)和TsOH·H2O(0.010g,0.054mmol)。化合物182(1.17mg,2.26umol,12.65％产率，100％纯度)以灰白色固体的形式分离。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝518.4；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.84-7.83(m,1H),7.55-7.54(m,1H),7.35-7.32(m,2H),7.28-7.24(m,2H),6.95-6.93(m,1H),6.81-6.80(m,1H),4.25(s,2H),3.75-3.72(m,1H),3.68-6.64(m,1H),3.37(s,3H),3.23-3.22(m,1H),2.81-2.80(m,1H),2.48-2.42(m,1H),2.01-1.97(m,1H),1.70-1.65(m,2H),1.07(d,J＝6.4Hz,3H)；ee％＝98.14％。
实施例143. 1-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-1H-吡唑-3-羧酸的制备
Figure BDA0003284159120004522
步骤1：1-(2-甲氧基-1,1-二甲基-2-氧代-乙基)吡唑-3-羧酸(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120004531
向2-溴-2-甲基丙酸甲酯(5.77mL,44.61mmol)和1H-吡唑-3-羧酸(5.00g,44.61mmol)于DMF(50mL)中的溶液中加入Cs2CO3(29.07g,89.22mmol)。将混合物在60℃下搅拌1小时。将混合物用水(100mL)稀释，并用EtOAc(100mL)萃取。将水相用4M HCl水溶液酸化至pH～3-4，然后用二氯甲烷(100mL x 2)萃取。将有机层在真空中浓缩。将所得油通过反相制备型HPLC(流动相:[水(0.225％FA)-ACN]；B％：5％-35％)纯化，并冻干，得到呈黄色油状物的中间体C(2.30g,9.32mmol,20.90％产率，86.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝213.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.69(s,1H),8.02(d,J＝2.4Hz,1H),6.73(d,J＝2.4Hz,1H),5.75(s,1H),3.64(s,3H),1.80(s,6H)。
步骤2：1-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-1H-吡唑-3-羧酸(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120004532
向中间体C(0.200g,0.943mmol)在THF(1.2mL)、MeOH(0.4mL)和水(0.4mL)的混合物中的溶液中加入NaBH4(0.071g,1.88mmol)。搅拌1小时后，将混合物用饱和NH4Cl水溶液(10mL)猝灭并浓缩。将粗产物通过反相HPLC(0.1％FA)纯化粗产物并浓缩，得到呈黄色胶状物的中间体D(0.060g,0.313mmol,33.18％产率，96.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝185.1。
实施例144. 1-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶和2-甲基-4,5,6,7-四氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶的制备
Figure BDA0003284159120004541
根据WO2015200677 A2中描述的方法制备1-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶和2-甲基-4,5,6,7-四氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶。1-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶和2-甲基-4,5,6,7-四氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶被分离为呈黄色固体的不可分离的混合物(405mg，粗品，HCl)，其不经进一步纯化即可使用。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝138.0。
实施例145.本发明化合物的制备
下表4中的化合物是根据下面的方案3和按照实施例10中建立的方案从合适的起始羧酸、受保护的(手性或非手性)氨基酸、胺和杂环羧酸开始合成的。
方案3：
Figure BDA0003284159120004542
表4.
Figure BDA0003284159120004551
Figure BDA0003284159120004561
Figure BDA0003284159120004571
Figure BDA0003284159120004581
实施例146.N-[2-[[4-[3-[(顺式)-2,6-二甲基吗啉-4-基]苯基]-5-氟-噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物181)的制备
Figure BDA0003284159120004591
步骤1：4-(3-溴苯基)-5-氟-噻唑-2-胺(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120004592
向4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺(2.00g,7.84mmol)于乙腈(40mL)的冷却(0℃)溶液中加入SelectfluorTM(3.05g,8.62mmol)。将混合物在30℃下搅拌16小时，随后浓缩得到残余物。将残余物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝10:1至3:1)纯化。将溶液浓缩，得到呈棕色固体形式的中间体B(0.900g,3.08mmol,39.2％产率，93.3％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[Br81M+H]+＝274.8。
步骤2：N-[2-[[4-(3-溴苯基)-5-氟-噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120004593
向中间体B(0.800g,2.93mmol)和2-N-Boc-甘氨酸(0.564g,3.22mmol)于二氯甲烷(8mL)中的溶液中加入HATU(1.34g,3.51mmol)和DIEA(2.55mL,14.65mmol,)。将混合物在30℃下搅拌16小时，随后浓缩得到残余物。将粗产物通过反相HPLC(0.1％FA)纯化，得到呈黄色固体形式的中间体D(0.600g,1.35mmol,46.2％产率，97.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[Br81M+H]+＝432.1。
步骤3：N-[2-[[4-[3-[(顺式)-2,6-二甲基吗啉-4-基]苯基]-5-氟-噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120004601
向中间体D(0.300g,0.697mmol)和顺式-2,6-二甲基吗啉(0.161g,1.39mmol)于2-甲基丁-2-醇(3mL)中的溶液中加入t-BuXphos-Pd(gen 3)(0.055g,0.070mmol)和t-BuONa(0.134g,1.39mmol)。将混合物在60℃下在N2(g)下搅拌。4小时后，将反应混合物冷却至室温，倒入水(5mL)中，并用乙酸乙酯(5mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩得到残余物。将残余物通过制备型TLC(SiO2，二氯甲烷：MeOH＝10:1)纯化。将所得固体用二氯甲烷：MeOH＝10:1(20mL)研磨，将悬浮液过滤，并将滤液浓缩，得到呈白色固体的中间体F(0.120g,0.254mmol,36.41％产率，98.3％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝465.3。
步骤4：2-((4-(3-((顺式)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)-5-氟噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙-1-氯化铵(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120004602
将中间体F(0.120g,0.258mmol)于4M的于1,4-二噁烷中的HCl(1.5mL)中的混合物在30℃下搅拌2小时。随后将反应混合物浓缩，得到残余物。将残余物用MTBE(5mL)研磨，将悬浮液过滤，并将滤饼在真空中干燥，得到呈黄色固体的中间体G(0.090g,0.222mmol,85.91％产率，98.85％纯度，HCl)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝365.2。
步骤5：N-[2-[[4-[3-[(顺式)-2,6-二甲基吗啉-4-基]苯基]-5-氟-噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物181)的制备
Figure BDA0003284159120004611
向中间体G(0.090,0.225mmol)和1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸(0.056g,0.296mmol)于二氯甲烷(2mL)中的溶液中加入EDCI(0.057g,0.296mmol)、HOBt(0.040g,0.296mmol)和DIEA(0.215mL,1.23mmol)。将所得混合物在30℃下搅拌16小时，随后浓缩得到固体。将固体通过反相HPLC(0.1％FA)纯化，并将合适的级分冻干，得到呈白色固体的化合物181(0.057g,0.104mmol,42.5％产率，99.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝536.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.45(br s,1H),8.68-8.65(m,1H),7.84-7.83(m,1H),7.34-7.30(m,3H),7.30-7.21(m,1H),6.99-6.95(m,1H),6.77-6.75(m,1H),4.12-4.08(m,2H),3.73-3.67(m,2H),3.58-3.56(m,5H),2.32-2.26(m,2H),1.17(d,J＝6.4Hz,6H)。
实施例147. 1-(3-甲基氧杂环丁-3-基)吡咯-3-羧酸的制备
Figure BDA0003284159120004621
步骤1：呋喃-3-羧酸甲酯(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120004622
小心地向呋喃-3-羧酸(170g,1.52mol)于MeOH(1200mL)中的溶液中加入浓H2SO4(60mL)。将混合物在80℃下搅拌1小时，然后冷却至室温。将反应混合物在减压下浓缩以除去溶剂。将残余物倒入饱和NaHCO3水溶液(1000mL)中，并用MTBE(300mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色油状物的中间体B(170g,1.35mol,88.88％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.02(d,J＝0.8Hz,1H),7.43-7.42(m,1H),6.75(d,J＝1.6Hz,1H),3.84(s,3H)。
步骤2：2,5-二甲氧基-2,5-二氢呋喃-3-羧酸甲酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120004623
向中间体B(50.00g,396.48mmol)于MeOH(3.6L)中的溶液中加入H2SO4(40mL)。将所述混合物用等静压石墨阳极和石墨阴极以3A的电流密度电解，并在-10℃下搅拌。搅拌16小时后，将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液中和至pH～7，并过滤。将滤液在真空中部分浓缩以除去MeOH，并将所得水层用乙酸乙酯(3x300mL)萃取。将合并的有机层用盐水(300mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色油状物的中间体C(65.00g,345.42mmol,87.12％％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.03-6.89(m,1H),5.99-5.96(m,1H),5.74-5.62(m,1H),3.76-3.71(m,3H),3.31(d,J＝1.6Hz,4H),3.27-3.26(m,2H)。
步骤3：2,5-二甲氧基四氢呋喃-3-羧酸甲酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120004631
向中间体C(35.00g,185.99mmol)于MeOH(400mL)中的混合物中加入10％Pd/C(3.5g)。将混合物脱气并用H2(g)(3x)吹扫，随后将混合物在25℃下在H2(g)气球下搅拌16小时。将混合物过滤并浓缩，得到呈黄色油状物的中间体D(35.00g)，其直接用于下一步骤。
步骤4：1-(3-甲基氧杂环丁-3-基)吡咯-3-羧酸甲酯(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120004632
向中间体D(35.00g,184.02mmol)于AcOH(240mL)中的溶液中滴加3-甲基氧杂环丁-3-胺(20.00g,229.57mmol)。将混合物在90℃下搅拌。搅拌16小时后，将反应混合物浓缩以除去过量的AcOH。将所得酸性残余物用水(500mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液碱化至(pH～8)，并用乙酸乙酯(500mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到油状物。将所述油状物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝1/0至1/1)纯化，得到呈黄色油状的中间体F(24.00g)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝196.2.；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.47-7.45(m,1H),6.85-6.83(m,1H),6.69-6.67(m,1H),5.00-4.97(m,2H),4.71-4.68(m,2H),3.84-3.81(m,3H),1.93(d,J＝6.0Hz,3H)。
步骤5：1-(3-甲基氧杂环丁-3-基)吡咯-3-羧酸(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120004641
向中间体F(24.00g,122.94mmol)于1:1的MeOH/THF(150mL)混合物中的溶液中加入4M NaOH(4M,153.69mL)。将混合物在80℃下搅拌。搅拌16小时后，将反应混合物部分浓缩以除去THF和MeOH。将混合物用H2O(200mL)稀释，并用乙酸乙酯(500mL)萃取。将水层用饱和柠檬酸水溶液酸化(pH～5)，直至固体沉淀。将固体过滤，得到呈白色固体的中间体G(12.00g,66.23mmol,53.87％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝182.1；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.52-7.51(m,1H),6.93-6.91(m,1H),6.59-6.58(m,1H),4.96(d,J＝6.4Hz,2H),4.70(d,J＝6.8Hz,2H),1.85(s,3H)。
实施例148.本发明化合物的制备
下表5中的化合物是按照下面的方案4从普通起始材料2-氨基-N-(4-溴噻唑-2-基)乙酰胺、合适的杂环羧酸和硼酸酯或硼酸开始合成的。在适当的情况下，将SFC纯化用于分离对映异构体。
方案4：
Figure BDA0003284159120004651
表5.
Figure BDA0003284159120004652
Figure BDA0003284159120004661
Figure BDA0003284159120004671
Figure BDA0003284159120004681
Figure BDA0003284159120004691
Figure BDA0003284159120004701
Figure BDA0003284159120004711
Figure BDA0003284159120004721
Figure BDA0003284159120004731
Figure BDA0003284159120004741
Figure BDA0003284159120004751
Figure BDA0003284159120004761
实施例149.本发明化合物的制备
下表6中的化合物是利用实施例12中描述的合成方案，从合适的普通中间体((2-((4-溴噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯)、相应的硼酸酯和杂环羧酸开始合成的。在适当的情况下，将SFC纯化用于分离对映异构体。
表6
Figure BDA0003284159120004762
Figure BDA0003284159120004771
Figure BDA0003284159120004781
Figure BDA0003284159120004791
Figure BDA0003284159120004801
Figure BDA0003284159120004811
Figure BDA0003284159120004821
实施例150.顺式-4-[3-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-2,6-二甲基-吗啉的制备
Figure BDA0003284159120004822
步骤1：顺式-4-(3-溴-5-氟-苯基)-2,6-二甲基吗啉(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120004823
将1,3-二溴-5-氟苯(6g,23.63mmol,2.97mL)、顺式-2,6-二甲基吗啉(2.72g,23.63mmol)、Pd2(dba)3(2.16g,2.36mmol)、BINAP(2.94g,4.73mmol)、Cs2CO3(23.10g,70.90mmol)于甲苯(60mL)中的混合物在80℃下在N2下搅拌16小时。将反应混合物用水(50mL)稀释，并用EA(50mL*3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝100/1至5/1)纯化。将溶液在减压下浓缩，得到呈黄色油状物的中间体C(4g,13.59mmol,57.5％产率，97.9％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[81Br M+H]+＝289.7。
步骤2：顺式-4-[3-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-2,6-二甲基-吗啉(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120004831
顺式-4-[3-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-2,6-二甲基-吗啉的合成遵循Ar-Br或HetAr-Br的硼基化的一般方案。将以下量的中间体C(5g,17.35mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(6.87g,27.05mmol)、1,4-二噁烷(50mL)、Pd(dppf)Cl2(1.52g,2.08mmol)和KOAc(6.13g,62.46mmol)用于产生呈黄色油状物的中间体E(5.3g,15.62mmol,90.0％产率，98.8％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝336.1；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.10(d,J＝2.4Hz,1H),6.84-6.82(m,1H),6.79-6.75(m,1H),3.79-3.72(m,2H),3.54(d,J＝11.6Hz,2H),2.35-2.30(m,2H),1.34(s,12H),1.23(d,J＝6.4Hz,6H)。
实施例151. 4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷的制备
Figure BDA0003284159120004832
步骤1：2-(4-溴-2-氟苯基)-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120004841
搅拌2-(4-溴-2-氟-苯基)乙酸(9.00g,38.62mmol)、N-甲氧基甲胺盐酸盐(11.30g,115.86mmol)、EDCI(11.11g,57.93mmol)和DMAP(7.08g,57.93mmol)于二氯甲烷(180mL)中的混合物。搅拌12小时后，将反应混合物用水(100mL)稀释，并将水层用乙酸乙酯(30mL x 2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥并浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝0/1至1/0)纯化，并在真空中浓缩，得到呈无色油状的中间体C(10.00g,28.97mmol,75.0％％产率，80.0％纯度)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.55-7.49(m,1H),7.40-7.35(m,1H),7.32-7.24(m,1H),3.79(s,2H),3.72(s,3H),3.12(s,3H)。
步骤2：1-(4-溴-2-氟-苯基)丙-2-酮(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120004842
向中间体C(10.00g,36.22mmol)于THF(100mL)中的冷却(0℃)溶液中滴加3M的溴(甲基)镁溶液(60.36mL)。搅拌1.5小时后，将反应混合物用MeOH(10.0mL)和1M HCl溶液(100mL)的混合物猝灭。将混合物用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取，将有机层浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝0/1至1/3)纯化，得到呈黄色油状的中间体D(3.40g,14.71mmol,40.6％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.32-7.22(m,2H),7.06(d,J＝8.0Hz,1H),3.71(s,2H),2.23(s,3H)。
步骤3：1-(4-溴-2-氟-苯基)丙-2-醇(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120004851
向中间体D(3.40g,14.71mmol)于MeOH(34mL)的溶液中加入NaBH4(1.11g,29.43mmol)。将混合物在20℃下搅拌0.5小时，随后用饱和NH4Cl水溶液(20mL)猝灭，并用乙酸乙酯(20mL x 2)萃取。将有机层在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体E(2.90g,9.95mmol,67.7％产率，80.0％纯度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.26-7.20(m,2H),7.15-7.09(m,1H),4.10-3.99(m,1H),2.83-2.67(m,2H),1.24(d,J＝6.4Hz,3H)。
步骤4：6-溴-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120004852
将中间体E(2.90g,12.44mmol)和t-BuOK(4.19g,37.33mmol)于THF(60mL)中的混合物在60℃下加热1小时。将混合物冷却至室温，用水(40mL)稀释，并用EtOAc(10mL x 4)萃取。将有机层在真空中浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-40％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，并在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体F(1.89g,7.98mmol,64.2％产率，90.0％纯度)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.14(d,J＝8.0Hz,1H),7.02-6.91(m,2H),5.03-4.89(m,1H),3.29-3.22(m,1H),2.77-2.69(m,1H),1.38(d,J＝6.4Hz,3H)。
步骤5：4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120004853
向中间体F(0.600g,2.82mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.787g,3.10mmol)于1，4-二噁烷(6mL)中的溶液中加入Pd(dtbf)Cl2(0.184g,0.282mmol)和KOAc(0.691g,7.04mmol)。将混合物在80℃下搅拌1小时。将反应混合物随后冷却至环境温度并过滤，并将滤液在减压真空下浓缩得到残余物。将残余物通过快速硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝0/1至1/3)纯化，得到呈黄色固体的中间体G(0.400g)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝261.1。
实施例152. 2-(4-氟-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷的制备
Figure BDA0003284159120004861
步骤1：2-(4-溴-2,6-二氟-苯基)乙醇(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120004862
向2-(4-溴-2,6-二氟-苯基)乙酸(1.00g,3.98mmol)于THF(10mL)中的溶液中加入CDI(0.969g,5.98mmol)。将混合物在15℃下搅拌12小时，然后滴加NaBH4(0.301g,7.97mmol)水溶液(10mL)。将混合物再搅拌1小时。将混合物用水(10mL)稀释混合物，并用乙酸乙酯(20mL x 2)萃取。将有机层在真空中浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝0/1至1/9)纯化，得到呈黄色油状物的中间体B(0.890g,3.57mmol,89.54％产率，95.0％纯度)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.45-7.32(m,2H),4.81(d,J＝5.6Hz,1H),3.613.48(m,2H),2.73(d,J＝6.8Hz,2H)。
步骤2：6-溴-4-氟-2,3-二氢苯并呋喃(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120004871
将中间体B(0.840g,3.54mmol)和t-BuOK(1.19g,10.63mmol)于THF(20mL)中的混合物在60℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(10mL)稀释，并用EtOAc(10mL x 3)萃取。将合并的有机层在真空中浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝0/1至2/5)纯化，并在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的中间体C(520mg,1.92mmol,54.1％产率，80.0％纯度)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.01-6.93(m,1H),6.89(d,J＝1.2Hz,1H),4.64(d,J＝8.8Hz,2H),3.18(d,J＝8.8Hz,2H)。
步骤3：2-(4-氟-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120004872
向中间体C(0.470g,2.17mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.605g,2.38mmol)于1,4-二噁烷(5mL)中的溶液中加入Pd(dtbf)Cl2(0.141g,0.217mmol)和KOAc(0.531g,5.41mmol)。将混合物在80℃下搅拌1小时，然后用EtOAc(50mL)稀释，并过滤。将滤液在真空中浓缩，得到呈棕色固体的中间体E(0.550g)，其不经进一步纯化即可使用。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝265.1。
实施例153. 2-[3-(1-氟环丁基)苯基]-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷的制备
Figure BDA0003284159120004881
步骤1：1-(3-溴苯基)环丁醇(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120004882
向1,3-二溴苯(1.53mL,12.72mmol)于THF(30mL)中的冷却(-70℃)溶液中加入2.5M n-BuLi(5.09mL)溶液。30分钟后，加入环丁酮(0.855mL,11.45mmol)，并将混合物在-70℃下再搅拌2小时。将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(100mL)猝灭，并使其升温至室温。将混合物用MTBE(50mL x 3)萃取，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至5/1)纯化，将溶液浓缩得到呈黄色油状物的中间体C(1.40g,6.16mmol,48.48％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.52-7.52(m,1H),7.31-7.27(m,2H),7.13-7.09(m,1H),2.43-2.37(m,2H),2.26-2.19(m,2H),1.96-1.87(m,1H),1.64-1.56(m,1H)。
步骤2：1-溴-3-(1-氟环丁基)苯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120004883
向中间体C(0.800g,3.52mmol)于DCM(8mL)的冷却(0℃)溶液中加入DAST(0.465mL,3.52mmol)。30分钟后，加入饱和NaHCO3水溶液，并将混合物用DCM(5mL x 3)萃取，将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝1:0)纯化，将溶液浓缩得到呈黄色油状物的中间体D(0.650g,2.84mmol,80.54％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.53(s,1H),7.40-7.29(m,2H),7.22-7.15(m,1H),2.65-2.52(m,2H),2.51-2.39(m,2H),2.08-1.98(m,1H),1.75-1.61(m,1H)。
步骤3：2-[3-(1-氟环丁基)苯基]-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120004891
向中间体D(0.300g,1.31mmol)于1,4-二噁烷(3mL)中的溶液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.400g,1.57mmol)、Pd(dtbf)Cl2(0.083g,0.131mmol)和KOAc(0.386g,3.93mmol)，将混合物在80℃下搅拌2小时。向混合物中加入硅胶(1g)和MTBE(20mL)，将溶液过滤，并将滤液浓缩，得到呈棕色油状物的中间体F(0.360g)。
实施例154.(7-氟-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)硼酸的制备
Figure BDA0003284159120004892
步骤1：1-溴-2-(2-溴乙氧基)-3-氟-苯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120004893
向2-溴-6-氟-苯酚(2.00g,10.47mmol)和1,2-二溴乙烷(1.58mL,20.94mmol)于乙腈(20mL)中的溶液中加入K2CO3(1.45g,10.47mmol)。将混合物在60℃下搅拌。16小时后，将混合物浓缩，并用水(30mL)稀释。将混合物用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取，并将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝1:0至1:3)纯化，得到呈无色油状物的中间体C(2.90g,7.79mmol,74.4％产率，80.0％纯度)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.40-7.30(m,1H),7.12-7.04(m,1H),7.01-6.88(m,1H),4.39(d,J＝6.8Hz,2H),3.67(d,J＝6.8Hz,2H)。
步骤2：7-氟-2,3-二氢苯并呋喃(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120004901
向中间体C(2.40g,8.06mmol)于THF(60mL)中的冷却(-65℃)溶液中加入2.5M n-BuLi溶液(3.87mL)。将混合物搅拌1小时，随后用水(3mL)猝灭，并升温至室温。将水层用EtOAc(30mL*3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝1:0至1:3)纯化，得到呈无色油状物的中间体D(0.800g,4.63mmol,57.5％产率，80.0％纯度)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.09-7.04(m,1H),7.03-6.95(m,1H),6.86-6.75(m,1H),4.62(d,J＝8.8Hz,2H),3.24(d,J＝8.8Hz,2H)。
步骤3：(7-氟-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)硼酸(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120004902
向2,2,6,6-四甲基哌啶(0.232mL,1.37mmol)于THF(0.5mL)中的冷却(-75℃)溶液中加入2.5mL n-BuLi溶液(0.57mL)。将混合物搅拌30分钟，然后加入硼酸三异丙酯(0.330mL,1.43mmol)。将反应混合物再搅拌30分钟，然后加入中间体D(0.180g,1.30mmol)于THF(0.5mL)中的溶液。混合物在-75℃下在N2下搅拌3小时。3小时后，将反应混合物用1MHCl(1mL)和MeOH(2mL)猝灭。将所得溶液升温至室温，并在真空中浓缩。将混合物通过反相HPLC(0.1％甲酸)纯化，得到呈黄色固体的中间体F(0.040g,0.118mmol,9.1％产率，53.7％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝183.1。
实施例155. 2-[3-(氟甲氧基)苯基]-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷的制备
Figure BDA0003284159120004911
步骤1：2-(3-溴苯氧基)乙酸乙酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120004912
向3-溴苯酚(1.00g,5.78mmol)和2-溴乙酸乙酯(0.956mL,8.67mmol)于DMF(10mL)中的溶液中加入K2CO3(1.60g,11.56mmol)。随后将反应混合物在80℃下加热。16小时后，将混合物冷却至室温，倒入水(50mL)中，并用乙酸乙酯(50mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝200/1至50/1)纯化并浓缩，得到呈无色油状物的中间体C(1.50g,5.79mmol,100.00％产率，100％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝260.9.；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.18-7.12(m,2H),7.08-7.07(m,1H),6.87-6.84(m,1H),4.61(s,2H),4.31-4.26(m,2H),1.32-1.29(m,3H)。
步骤2：2-(3-溴苯氧基)乙酸(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120004921
向中间体C(1.50g,5.79mmol)于EtOH(6mL)、THF(6mL)和H2O(3mL)的混合物中的混合物中加入NaOH(694.67mg,17.37mmol)。搅拌1小时后，将反应混合物用1M HCl酸化至pH～4-5。将水层用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取。将合并的有机物用盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并将滤液蒸发至干燥，得到呈白色固体的中间体D(1.30g)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.05(s,1H),7.26-7.22(m,1H),7.15-7.12(m,2H),6.95-6.92(m,1H),4.72(s,2H)。
步骤3：1-溴-3-(氟甲氧基)苯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120004922
在N2下向中间体D(400mg,1.73mmol)、Selectfluor(1.23g,3.46mmol)和AgNO3(0.059g,0.346mmol)的混合物中加入H2O(15mL)。将混合物在55℃下加热。10小时后，将混合物冷却至环境温度，倒入水(30mL)中，并用二氯甲烷(30mL x 3)萃取。将合并的有机物用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到呈黄色固体的中间体E(0.290g,1.41mmol,81.70％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.36-7.30(m,3H),7.15-7.12(m,1H),5.95(s,1H),5.82(s,1H)。
步骤4：2-[3-(氟甲氧基)苯基]-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120004931
向中间体E(0.100g,0.488mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.130g,0.512mmol)于1,4-二噁烷(1mL)中的混合物中加入Pd(dtbf)Cl2(0.032g,0.049mmol)和KOAc(0.096g,0.976mmol)。将所得混合物在80℃下搅拌。2小时后，将反应混合物冷却至环境温度，倒入水(20mL)中，并用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到呈黄色固体的中间体G(0.111g)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝368.3。
实施例156.顺式-4-[3-环丙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-2,6-二甲基-吗啉的制备
Figure BDA0003284159120004932
步骤1：1,3-二溴-5-环丙基-苯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120004933
向1,3,5-三溴苯(8.00g,25.41mmol)和Pd(PPh3)4(1.47g,1.27mmol)于THF(16mL)中的冷却(0℃)溶液中加入0.5M溴(环丙基)镁(50.83mL)的溶液。将反应混合物升温至70℃。4小时后，将混合物冷却至环境温度，并用饱和NH4Cl水溶液(100mL)猝灭。将所得混合物用乙酸乙酯(100mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱(石油醚)纯化，并在减压下浓缩，得到呈白色固体的中间体C(5.00)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.64(s,1H),7.15(d,J＝1.6Hz,2H),1.90-1.80(m,1H),1.07-0.99(m,2H),0.75-0.69(m,2H)。
步骤2：顺式-4-(3-溴-5-环丙基苯基)-2,6-二甲基吗啉(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120004941
向中间体C(2.50g,9.06mmol)、顺式-2,6-二甲基吗啉(0.521g,4.53mmol)、BINAP(0.564g 0.906mmol)和Cs2CO3(4.43g,13.59mmol)于甲苯(20mL)中的溶液中加入Pd2(dba)3(0.415g,0.453mmol)。将反应混合物在80℃下加热。12小时后，将溶液冷却至室温并浓缩。将残余物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到呈浅黄色油状物的中间体E(0.300g 0.851mmol,18.8％产率，88.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝310.1。
步骤3：顺式-4-[3-环丙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]-2,6-二甲基-吗啉(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120004942
向中间体E(0.200g,0.645mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.181g,0.710mmol)于1,4-二噁烷(2mL)中的溶液中加入Pd(dppf)Cl2(0.047g,0.064mmol)和KOAc(0.190g,1.93mmol)。随后将反应混合物在80℃下加热。1小时后，将反应混合物冷却至室温并减压。将残余物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到呈浅黄色油状物的中间体G(0.200g,粗品)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝358.4。
实施例157. 1-甲基-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2,3,4,5-四氢-1-苯并吖庚因的制备
Figure BDA0003284159120004951
步骤1：7-溴四氢萘-1-酮肟(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120004952
向7-溴四氢萘-1-酮(4.00g,17.77mmol)和NH2OH·HCl(2.47g,35.54mmol)于EtOH(40mL)中的溶液中加入NaOAc(2.92g,35.54mmol)，并将混合物在70℃下搅拌。2小时后，将混合物冷却至环境温度，部分浓缩，并在水(40mL)与乙酸乙酯(50mL)之间分配。将有机层分离并蒸发，得到呈黄色固体的中间体B(4.00g,15.49mmol,87.2％产率，93.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝240.0。
步骤2：8-溴-1,3,4,5-四氢-1-苯并吖庚因-2-酮(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120004961
将P2O5(4.00g,28.18mmol)于CH3SO3H(40mL)中的溶液在90℃下搅拌1小时。将混合物冷却至50℃，并分4批加入中间体B(4.00g,16.66mmol)。将混合物在80℃下加热。12小时后，将混合物冷却至室温，缓慢倒入冰水(200mL)中，并用乙酸乙酯(50mL)萃取。将有机层分离，经Na2SO4干燥并蒸发。将残余物通过快速硅胶色谱(石油醚乙酸乙酯＝10/1至1/1)纯化，并将所得溶液蒸发，得到棕色固体。将固体用(石油醚乙酸乙酯＝1/1，10mL)研磨并过滤。将固体在真空下干燥，得到呈纯固体的中间体C(0.800g,3.33mmol,20.0％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(s,1H),7.29-7.19(m,2H),7.14(d,J＝2.0Hz,1H),2.66(d,J＝7.2Hz,2H),2.20-2.04(m,4H)。
步骤3：8-溴-1-甲基-4,5-二氢-3H-1-苯并吖庚因-2-酮(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120004962
向中间体C(0.150g,0.625mmol)和K2CO3(0.259g,1.87mmol)于DMF(3mL)中的混合物中加入MeI(0.078mL,1.25mmol)。5小时后，向混合物中加入水(5mL)并用乙酸乙酯(5mL x3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝10/1至5/1)纯化，得到呈白色固体的中间体D(0.090g,0.354mmol,56.7％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝254.0；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.33-7.32(m,1H),7.31-7.27(m,1H),7.08-7.06(m,1H),3.34(s,3H),2.70-2.66(m,2H),2.37-2.27(m,2H),2.22-2.10(m,2H)。
步骤4：8-溴-1-甲基-2,3,4,5-四氢-1-苯并吖庚因(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120004971
向中间体D(0.090g,0.354mmol)于THF(3mL)中的冷却(10℃)混合物中加入1mL的BH3·THF溶液(1.06mL)。将混合物加热至70℃。2小时后，将混合物冷却至环境温度，缓慢加入MeOH，直到沸腾停止。将混合物浓缩并通过制备型TLC(石油醚/乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到呈无色油状物的中间体E(0.050g,0.202mool,57.0％产率，97.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝240.0；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.02-7.00(m,1H),6.97-6.93(m,2H),2.96-2.90(m,2H),2.86(s,3H),2.77-2.70(m,2H),1.81-1.71(m,2H),1.64-1.57(m,2H)。
步骤5：1-甲基-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2,3,4,5-四氢-1-苯并吖庚因(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120004972
向中间体E(0.050g,0.208mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.063g,0.250mmol)于1,4-二噁烷(1mL)中的溶液中加入KOAc(0.041g,0.416mmol)和Pd(dppf)Cl2(0.077g,0.104mmol)。将混合物在80℃下加热。2小时后，向混合物中加入水(5mL)并用乙酸乙酯(5mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过制备型TLC(石油醚/乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到呈白色固体的中间体F(0.040g,0.134mmol,64.2％产率，96.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝288.1。
实施例158. 2-(二氟甲基)-4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]三唑的制备
Figure BDA0003284159120004981
步骤1：4-(3-溴苯基)-2H-三唑(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120004982
向3-溴苯甲醛(3.14mL,27.02mmol)、硝基甲烷(2.19mL,40.54mmol)、叠氮化钠(2.11g,32.43mmol)于DMSO(60mL)中的冷却(10℃)混合物中加入AlCl3(0.360g,2.70mmol)。将反应混合物随后在70℃下加热。8小时后，向混合物中加入水(100mL)并用乙酸乙酯(50mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将固体通过快速色谱(石油醚/乙酸乙酯＝10:1至5:1)纯化，得到呈白色固体的中间体C(2.60g,11.02mmol,40.8％产率，95.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[79Br M+H]+＝224.0.；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.01-8.00(m,1H),7.98(s,1H),7.77-7.75(m,1H),7.54-7.50(m,1H),7.37-7.30(m,1H)。
步骤2：4-(3-溴苯基)-2-(二氟甲基)三唑(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120004983
向中间体C(0.800g,3.57mmol)于DMF(10mL)中的冷却(10℃)混合物中加入NaH(0.286g,7.14mmol,60.0％纯度)。将混合物在10℃下搅拌0.5小时，然后向混合物中鼓入氯代(二氟)甲烷(g)30分钟。将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(10mL)猝灭，并用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝10/1至5/1)纯化，得到呈无色油状物的中间体D(0.170g,0.620mmol,17.37％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝276.0。
除了中间体D之外，还分离出呈白色固体的中间体E(0.180g,0.657mmol,18.39％％产率)和呈无色油状物的中间体F(0.170g,0.620mmol,17.37％产率)。
4-(3-溴苯基)-1-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑(中间体E)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.19(s,1H),8.05-8.04(m,1H),7.85-7.78(m,1H),7.77-7.44(m,2H),7.39-7.30(m,1H)。
5-(3-溴苯基)-1-(二氟甲基)-1H-1,2,3-三唑(中间体F)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.81(s,1H),7.79-7.62(m,3H),7.52-7.47(m,1H),7.43-7.36(m,1H)。
步骤3：2-(二氟甲基)-4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]三唑(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120004991
向中间体D(0.070g,0.255mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.130g,0.511mmol)于1,4-二噁烷(2mL)中的溶液中加入KOAc(0.063g,0.639mmol)和Pd(dppf)Cl2(0.093g,0.128mmol)。将混合物在80℃下加热。2小时后，将混合物用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过快速色谱(石油醚/乙酸乙酯＝10:1至5:1)纯化，得到呈无色油状物的中间体G(0.080g,0.249mmol,97.54％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝322.2.；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.25(s,1H),8.14(s,1H),7.99-7.96(m,1H),7.88-7.86(m,1H),7.56-7.37(m,2H),1.38(s,12H)。
实施例159. 2-环丙基-4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]三唑的制备
Figure BDA0003284159120005001
步骤1：4-(3-溴苯基)-2-环丙基-三唑(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120005002
在10℃下向4-(3-溴苯基)-2H-三唑(0.500g,2.23mmol)于1,2-二氯乙烷(6mL)中的混合物中加入环丙基硼酸(0.383g,4.46mmol)、Cu(OAc)2(0.405g,2.23mmol)、2-(2-吡啶基)吡啶(0.349g,2.23mmol)、Na2CO3(0.473g,4.46mmol)，加入后，将混合物在60℃下在O2(15psi)气氛下搅拌1小时。过滤出混合物，并浓缩滤液，得到粗产物。将残余物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝10/1至5/1)纯化，得到呈无色油状物的中间体C(0.250g,0.909mmol,40.7％产率，96.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[79Br M+H]+＝264.0；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92-7.90(m,1H),7.78-7.72(m,1H),7.66-7.64(m,1H),7.42-7.41(m,1H),7.25-7.23(m,1H),4.05-3.97(m,1H),1.42-1.33(m,2H),1.15-1.05(m,2H)。
步骤2：2-环丙基-4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]三唑(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120005011
向中间体C(0.200g,0.757mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.385g,1.51mmol)于1,4-二噁烷(1mL)中的溶液中加入KOAc(0.149g,1.51mmol)和Pd(dppf)Cl2(0.277g,0.379mmol)。将混合物在80℃下加热。2小时后，将反应混合物冷却至室温，并加入水(10mL)。将混合物用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过快速色谱(石油醚/乙酸乙酯＝10:1至5:1)纯化，得到呈白色固体的中间体E(0.180g,0.578mmol,76.39％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝312.2.；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(s,1H),7.91-7.89(m,1H),7.85(s,1H),7.81-7.76(m,1H),7.47-7.41(m,1H),4.06-4.00(m,1H),1.43-1.39(m,2H),1.37(s,12H),1.17-1.09(m,2H)。
实施例160.顺式-2,6-二甲基-4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)吗啉的制备
Figure BDA0003284159120005012
步骤1：顺式-4-(4-溴吡啶-2-基)-2,6-二甲基吗啉(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120005013
向4-溴-2-氟-吡啶(0.500g,2.84mmol)于DMSO(5mL)中的溶液中加入DIEA(2.47mL,14.21mmol)和顺式-2,6-二甲基吗啉(0.655g,5.68mmol)。将混合物在120℃加热12小时，然后用水(30mL)稀释。将混合物用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝15/1至8:1)纯化，得到呈黄色油状物的中间体C(0.500g,1.75mmol,61.66％产率)。；LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝273.0.；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.99(d,J＝5.6Hz,1H),6.79-6.75(m,2H),4.03-4.00(m,2H),3.71-3.68(m,2H),2.56-2.50(m,2H),1.27-1.26(m,6H)。
步骤2：顺式-2,6-二甲基-4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)吗啉(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120005021
向中间体C(0.200g,0.738mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.225g,0.885mmol)于1,4-二噁烷(3mL)中的溶液中加入KOAc(217.17mg,2.21mmol)和Pd(dppf)Cl2(53.97mg,73.76umol)。将混合物在80℃下加热。2小时后，将反应物用水(15mL)稀释，并用乙酸乙酯(5mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到呈棕色油状物的中间体E(0.200g,0.629mmol,85.21％产率)，其不经进一步纯化直接使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.22-8.21(m,1H),7.01(s,1H),6.98(d,J＝4.8Hz,1H),4.12-4.08(m,2H),3.73-3.72(m,2H),2.55-2.49(m,2H),1.35(s,12H),1.29(m,3H),1.28-1.27(m,3H)。
实施例161. 2-甲基-1-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯氧基)丙-2-醇的制备
Figure BDA0003284159120005031
步骤1：1-(3-溴苯氧基)-2-甲基丙-2-醇(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120005032
向3-溴苯酚(1.00g,5.78mmol)于丙酮(10mL)中的冷却(0℃)溶液中加入K2CO3(0.959g,6.94mmol)和2,2-二甲基环氧乙烷(1.54mL,17.34mmol)。将混合物在60℃下加热。搅拌16小时后，将反应混合物浓缩。将残余物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(15mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过反相柱纯化并冻干，得到呈黄色油状物的中间体C(0.400g,1.63mmol,28.23％产率)。；LCMS(ESI)m/z:[M-OH]+＝227.0.；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.20-7.04(m,3H),6.92-6.80(m,1H),3.77(s,2H),1.34(s,6H)。
步骤2：2-甲基-1-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯氧基)丙-2-醇(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120005033
向中间体C(0.200g,0.816mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.311g,1.22mmol)于1,4-二噁烷(3mL)中的溶液中加KOAc(0.240g,2.45mmol)和Pd(dtbf)Cl2(0.053g,0.082mmol)。将混合物在70℃下加热。1小时后，将反应混合物冷却至室温，倒入水中(10mL)，用乙酸乙酯(5mL x 2)萃取。将有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩，得到呈黄色固体的中间体E(0.200g,0.448mmol,54.95％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z:[M-OH]+＝275.1。
实施例162. 2-(4-氟苯并呋喃-6-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷的制备
Figure BDA0003284159120005041
步骤1：乙酸3-溴-5-氟苯酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120005042
向3-溴-5-氟苯酚(15.00g,78.53mmol)在二氯甲烷(50mL)中的溶液中加入DIEA(41.04mL,235.60mmol)和乙酰氯(8.41mL,117.80mmol)。30分钟后，加入饱和NaHCO3水溶液(10mL)，将混合物用二氯甲烷(100mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过SiO2柱(石油醚/乙酸乙酯＝50:1至10:1)纯化，得到呈白色油状物的中间体C(16.00g,68.66mmol,87.43％产率)。；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.17-7.09(m,2H),6.86-6.83(m,1H),2.31-2.27(m,3H)。
步骤2：1-(4-溴-2-氟-6-羟基-苯基)乙烯酮(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120005051
向中间体C(14.00g,60.08mmol)于二氯甲烷(100mL)中的冷却(0℃)溶液中加入AlCl3(24.03g,180.23mmol,9.85mL)。将反应混合物搅拌30分钟，然后在真空中浓缩。将所得半固体残余物在140℃下加热。3小时后，向混合物中加入水(50mL)并用乙酸乙酯(100mLx 2)萃取。将合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过SiO2柱(石油醚/乙酸乙酯＝50:1至10:1)纯化，得到呈黄色固体的中间体D(7.00g,30.04mmol,50.00％产率)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ12.89(s,1H),7.23-7.00(m,1H),6.85-6.78(m,1H),2.68(d,J＝7.2Hz,3H)。
步骤3：2-溴-1-(4-溴-2-氟-6-羟基-苯基)乙烯酮(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120005052
将中间体D(5.00g,21.46mmol)和CuBr2(9.58g,42.91mmol,2.01mL)于乙酸乙酯(50mL)和CHCl3(50mL)中的溶液在60℃下加热16小时。将混合物冷却至室温，过滤，并将滤液在真空中浓缩，得到呈黄色固体的中间体E(6.50g)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ12.28(s,1H),7.08-7.04(m,1H),6.89-6.86(m,1H),4.53(d,J＝3.6Hz,2H)。
步骤4：6-溴-4-氟-苯并呋喃-3-酮(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120005053
向中间体E(6.50g,20.84mmol)于DMF(120mL)中的溶液中加入K2CO3(4.32g,31.26mmol)。将所得悬浮液搅拌30分钟，然后加入水(30mL)。将两相混合物用乙酸乙酯(50mL x 2)萃取。将合并的有机相用盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过SiO2柱(石油醚/乙酸乙酯＝50:1至5:1)纯化，得到呈黄色固体的中间体F(2.00g,8.66mmol,41.55％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.16(d,J＝0.8Hz,1H),6.93(d,J＝8.0Hz,1H),4.67(s,2H)。
步骤5：6-溴-4-氟-苯并呋喃(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120005061
向中间体F(0.300g,1.30mmol)于MeOH(3.0mL)中的冷却(0℃)溶液中加入NaBH4(98.26mg,2.60mmol)。搅拌1小时后，将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(3mL)猝灭，并用EtOAc(10mL x 2)萃取。将合并的有机层在真空中浓缩，得到呈黄色固体的中间体仲醇(0.300g)。
向乙醇(0.300g)于TFA(3.0mL)中的溶液中加入Et3SiH(0.415mL,2.60mmol)。将溶液在60℃下加热2小时。将混合物用水(2mL)猝灭，并用EtOAc(2mL x 2)萃取。将合并的有机层在真空中浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到呈黄色油状物的中间体G(0.090g,0.377mmol,29.0％产率，90.0％纯度)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.11(d,J＝2.0Hz,1H),7.86-7.85(m,1H),7.44-7.40(m,1H),7.13-7.12(m,1H)。
步骤6：2-(4-氟苯并呋喃-6-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(中间体I)的制备
Figure BDA0003284159120005062
向中间体G(0.070g,0.326mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.091g，0.358mmol)于1,4-二噁烷(0.5mL)中的溶液中加入Pd(dtbf)Cl2(0.021g,0.033mmol)和KOAc(0.080g,0.814mmol)。将混合物在80℃下加热。1小时后，将混合物冷却至环境温度，用乙酸乙酯(50mL)稀释，并过滤。将浓缩滤液，得到呈棕色固体的中间体I(0.080g)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝263.1。
实施例163. 1-甲基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-[[(3R)-四氢呋喃-3-基]甲氧基]苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物304)和1-甲基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-[[(3S)-四氢呋喃-3-基]甲氧基]苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物303)的制备
Figure BDA0003284159120005071
步骤1：3-[(3-溴苯氧基)甲基]四氢呋喃(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120005072
向3-溴苯酚(0.700g,4.05mmol)、3-(溴甲基)四氢呋喃(0.734g,4.45mmol)和Cs2CO3(2.64g,8.09mmol)于DMF(10mL)中的溶液中加入KI(0.269g,1.62mmol)。将混合物在70℃下搅拌。16小时后，将反应混合物倒入水(10mL)中，并用乙酸乙酯(10mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，并经Na2SO4干燥并浓缩。将粗产物通过反相HPLC纯化，通过萃取得到呈无色油状物的中间体C(0.350g,1.30mmol,32.13％产率，95.5％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[79Br M+H]+＝257.0。
步骤2：4,4,5,5-四甲基-2-[3-(四氢呋喃-3-基甲氧基)苯基]-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120005081
向中间体C(0.350g,1.36mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.691g,2.72mmol)于1,4-二噁烷(5mL)中的溶液中加入KOAc(0.401g,4.08mmol)和Pd(dtbf)Cl2(0.089g,0.136mmol)。将混合物在70℃下搅拌。1小时后，将反应混合物浓缩，得到呈黄色油状物的中间体E(0.350g,0.833mmol,61.20％产率，72.4％纯度)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝305.1。
步骤3：N-[2-氧代-2-[[4-[3-(四氢呋喃-3-基甲氧基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120005082
向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(0.250g,0.744mmol)、中间体E(0.339g,1.12mmol)、K3PO4(0.474g,2.23mmol)于1,4-二噁烷(0.5mL)和H2O(0.1mL)中的溶液中加入Pd(dtbpf)Cl2(0.048g,0.074mmol)。然后将混合物在70℃下搅拌。1小时后，将反应混合物冷却至环境温度并浓缩。将粗产物通过反相HPLC纯化，得到呈无色油状物的中间体G(0.220g,0.448mmol,60.19％产率，88.2％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝434.0。
步骤4：氯化2-氧代-2-((4-(3-((四氢呋喃-3-基)甲氧基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙-1-铵(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120005091
将中间体G(0.210g,0.484mmol)于HCl/二噁烷(3mL,4M)中的溶液在25℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，得到呈白色固体的中间体H(150mg,361.75umol,74.68％产率，89.2％纯度，HCl)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝334.1。
步骤5：1-甲基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(四氢呋喃-3-基甲氧基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(中间体J)的制备
Figure BDA0003284159120005092
向中间体H(0.150g,0.406mmol)、1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸(0.084g,0.446mmol)、EDCI(0.155g,0.811mmol)、HOBt(0.110g,0.811mmol)于DMF(2mL)中的溶液中加入DIEA(0.350mL,2.03mmol)。将混合物在25℃下搅拌1小时，然后浓缩。将粗产物通过反相HPLC柱纯化并冻干，得到呈白色固体的中间体J(0.100g,0.198mmol,48.87％产率，100％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝505.2。
步骤6：1-甲基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-[[(3R)-四氢呋喃-3-基]甲氧基]苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物304)和1-甲基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-[[(3S)-四氢呋喃-3-基]甲氧基]苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物303)的制备
Figure BDA0003284159120005101
将中间体J(0.100g,0.198mmol)通过SFC纯化并冻干，得到呈白色固体的化合物304(0.021g,0.041mmol,20.73％产率，100％纯度)和呈白色固体的化合物303(0.026g,0.051mmol,25.86％产率，100％纯度)。
化合物304：LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝505.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.40(brs,1H),8.68-8.66(m,1H),7.86-7.84(m,1H),7.66(s,1H),7.55-7.44(m,2H),7.40-7.29(m,2H),6.92-6.90(m,1H),6.79-6.77(m,1H),4.14(d,J＝6.0Hz,2H),4.04-3.90(m,2H),3.86-3.74(m,2H),3.71-3.64(m,1H),3.61-3.53(m,4H),2.70-2.65(m,1H),2.12-1.99(m,1H),1.69-1.67(m,1H)；ee％＝100％。
化合物303：LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝505.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.36(brs,1H),8.68-8.66(m,1H),7.86-7.84(m,1H),7.66(s,1H),7.54-7.44(m,2H),7.37-7.27(m,2H),6.92-6.90(m,1H),6.79-6.77(m,1H),4.14(d,J＝6.0Hz,2H),4.03-3.91(m,2H),3.85-3.76(m,2H),3.71-3.65(m,1H),3.60-3.54(m,4H),2.70-2.67(m,1H),2.11-1.97(m,1H),1.76-1.63(m,1H)；ee％＝96.33％。
实施例164. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(6-(顺式-2,6-二甲基吗啉基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物320)的制备
Figure BDA0003284159120005111
步骤1：6-氟吡啶-2-碳酰氯(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120005112
向6-氟吡啶-2-羧酸(50.00g,354.36mmol)于二氯甲烷(500mL)和N,N-二甲基甲酰胺(0.26mL,3.54mmol)中的冷却(0℃)溶液中加入草酰氯(155.10mL,1.77mol)。在完全加入草酰氯后，将反应混合物升温至室温并再搅拌0.5小时。将混合物在真空中浓缩，得到呈白色固体的中间体B(56.50g)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤2：2-氯-1-(6-氟-2-吡啶基)乙烯酮(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120005113
向中间体B(56.00g,351.00mmol)于1,4-二噁烷(800mL)中的冷却(0℃)混合物中滴加2M三甲基甲硅烷基重氮甲烷于己烷(351mL)中的溶液。将所得反应混合物在25℃下搅拌10小时。将反应混合物随后用4M HCl的1,4-二噁烷溶液(500mL)猝灭。搅拌2小时后，将反应溶液在真空中浓缩，得到油状物。将残余物用饱和NaHCO3水溶液(500mL)稀释，并用乙酸乙酯(200mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(300mL x 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈白色固体的中间体C(35.50g)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝173.8。
步骤3：4-(6-氟-2-吡啶基)噻唑-2-胺(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120005121
在室温下向中间体C(35.50g,204.53mmol)和硫脲(14.01g,184.07mmol)于MeOH(250mL)和H2O(250mL)的混合物中的溶液中加入NaF(3.56g,84.82mmol)。搅拌0.5小时后，将反应混合物在真空下部分浓缩以除去MeOH，并将所得溶液用2M HCl水溶液酸化至pH～3。15分钟后，将溶液用乙酸乙酯(200mL x 3)萃取，弃去有机层，并将水相用NaHCO3(500mL)碱化并搅拌30分钟，然后用乙酸乙酯(325mL*3)萃取，将合并的有机层用盐水(225mL*3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物用石油醚(300mL)研磨，并在25℃下搅拌10分钟并过滤。将所得固体在真空下干燥，得到呈白色固体的中间体E(28.00g,143.43mmol,70.13％产率，100％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝195.8；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00-7.96(m,1H),7.72(d,J＝7.2Hz,1H),7.24(s,1H),7.16(s,2H),7.02(d,J＝8.0Hz,1H)。
步骤4：N-[2-[[4-(6-氟-2-吡啶基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120005122
向N-Boc-甘氨酸(5.92g,33.81mmol)、HATU(12.86g,33.81mmol)和DIEA(15.89g,122.94mmol,21.41mL)于二氯甲烷(100mL)中的溶液中加入中间体E(6.00g,30.74mmol)。搅拌2小时后，将反应混合物浓缩，随后用水(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(60mL x 4)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL x 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物用石油醚和MeOH(40mL)的1:1混合物研磨。在25℃下搅拌20分钟后，将悬浮液过滤，将滤饼用MTBE(20mL)洗涤，并在真空中干燥，得到呈白色固体的中间体G(7.70g,21.63mmol,70.4％产率，99.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝353.1。
步骤5：氯化2-((4-(6-氟吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙-1-铵(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120005131
在25℃下将中间体G(5.40g,15.32mmol)于4M的于1,4-二噁烷中的HCl(35mL)中的溶液搅拌1.5小时。将混合物在真空中浓缩，得到呈白色固体的中间体H(4.42g)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝252.9。
步骤6：1-叔丁基-N-[2-[[4-(6-氟-2-吡啶基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]吡咯-3-甲酰胺(中间体J)的制备
Figure BDA0003284159120005132
向中间体H(3.00g,10.39mmol)、1-叔丁基吡咯-3-羧酸(1.74g,10.39mmol)和DIEA(6.71g,51.95mmol,9.05mL)于二氯甲烷(40mL)中的溶液中依次加入HOBt(1.68g,12.47mmol)和EDCI(2.39g,12.47mmol)。搅拌4小时后，将混合物在真空中浓缩。将残余物用水(250mL)稀释，并用乙酸乙酯(200mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(300mL x 3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将所得固体用MTBE/乙酸乙酯(400mL)的1:1混合物研磨，30分钟后，将悬浮液过滤。将固体用MTBE(85mL x 3)洗涤，然后在真空下干燥，得到呈白色固体的中间体J(3.10g,7.64mmol,73.6％产率，99.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝402.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.40(s,1H),8.18-8.15(m,1H),8.09-8.08(m,1H),7.87-7.83(m,2H),7.52(s,1H),7.11(d,J＝8.0Hz,1H),6.97(m,1H),6.47(s,1H),4.10(d,J＝5.6Hz,2H),1.49(s,9H)。
步骤7：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(6-(顺式-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物320)的制备
Figure BDA0003284159120005141
向中间体J(0.100g,0.249mmol)于DMSO(1mL)中的溶液中加入DIEA(0.130mL,0.747mmol)和顺式-2,6-二甲基吗啉(0.057g,0.498mmol)，并将混合物在120℃下搅拌。12小时后，将溶液冷却至室温，并将反应混合物用MeOH(3mL)稀释。将残余物通过制备型HPLC(流动相：[水(0.075％TFA)-ACN]；B％：30％-60％)纯化。收集合适的级分并冻干，得到呈白色固体的化合物320(0.079g,0.129mmol,51.94％％产率，100％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝497.5；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.27(s,1H),8.17-8.14(m,1H),7.75(s,1H),7.63-7.59(m,1H),7.51(s,1H),7.25(d,J＝7.2Hz,1H),6.96(s,1H),6.79(d,J＝8.8Hz,1H),6.47(s,1H),4.24(d,J＝12.4Hz,2H),4.08(d,J＝5.6Hz,2H),3.64-3.61(m,2H),2.44-2.38(m,2H),1.49(s,9H),1.18(d,J＝5.6Hz,6H)。
实施例165.本发明化合物的制备
表7中的下列化合物是从合适的普通中间体([1-叔丁基-N-[2-[[4-(6-氟-2-吡啶基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]吡咯-3-甲酰胺])开始，并利用实施例164中描述的一般合成方案合成的。在适当的情况下，将SFC纯化用于分离对映异构体。
表7.
Figure BDA0003284159120005151
Figure BDA0003284159120005161
Figure BDA0003284159120005171
Figure BDA0003284159120005181
Figure BDA0003284159120005191
Figure BDA0003284159120005201
Figure BDA0003284159120005211
Figure BDA0003284159120005221
Figure BDA0003284159120005231
Figure BDA0003284159120005241
Figure BDA0003284159120005251
Figure BDA0003284159120005261
Figure BDA0003284159120005271
实施例166.本发明化合物的制备
下表8中的下列化合物是按照下面方案5所示的合成方案，从合适的普通中间体(2-氨基-N-(4-(6-氟吡啶-2-基)噻唑-2-基)乙酰胺盐酸盐)、合适的杂环羧酸和胺开始合成的。
方案5：
Figure BDA0003284159120005272
表8.
Figure BDA0003284159120005273
Figure BDA0003284159120005281
实施例167.本发明化合物的制备
下表9中的下列化合物是按照下面方案6所示的合成路线，由合适的起始6元杂环羧酸、胺和5元杂环羧酸开始合成的。在适当的情况下，将SFC纯化用于分离对映异构体。
方案6：
Figure BDA0003284159120005291
表9.
Figure BDA0003284159120005292
Figure BDA0003284159120005301
Figure BDA0003284159120005311
Figure BDA0003284159120005321
Figure BDA0003284159120005331
Figure BDA0003284159120005341
Figure BDA0003284159120005351
Figure BDA0003284159120005361
实施例168. 1-(3-甲基氧杂环丁-3-基)-1H-吡唑-3-羧酸的制备
Figure BDA0003284159120005362
步骤1：2-(3-碘-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙二酸二乙酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120005363
向3-碘-1H-吡唑(2.00g,10.31mmol)于DMF(20mL)中的溶液中加入K2CO3(2.85g,20.62mmol)和2-溴-2-甲基丙二酸二乙酯(3.13g,12.37mmol,2.35mL)。将混合物在80℃下搅拌1.5小时。然后将反应混合物用H2O(50mL)处理，用乙酸乙酯(50mL*3)萃取。将有机层蒸发，得到呈黄色油状物的中间体C(4.00g,9.62mmol,93.3％产率，88.1％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝367.1.；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.53(d,J＝2.4Hz,1H),6.48(d,J＝2.4Hz,1H),4.29-4.24(m,4H),2.11(s,3H),1.31-1.26(m,6H)。
步骤2：2-(3-碘-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120005371
向中间体C(4.00g,10.92mmol)于MeOH(20mL)中的溶液中加入NaBH4(0.620g,16.39mmol)。将混合物在20℃下搅拌12小时。将反应混合物用1N HCl(于水中)(3mL)猝灭，然后浓缩得到残余物。将残余物通过反相HPLC纯化，得到呈无色油状物的中间体D(1.10g,3.31mmol,30.3％产率，85.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝283.0.；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.43(d,J＝2.4Hz,1H),6.47(d,J＝2.4Hz,1H),4.02-3.95(m,2H),3.94-3.88(m,2H),1.47(s,3H)。
步骤3：4-甲基苯磺酸3-羟基-2-(3-碘-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120005372
向中间体D(1.00g,3.55mmol)于THF(10.0mL)中的溶液中加入三乙胺(0.987mL,7.09mmol)和TsCl(0.743g,3.90mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应混合物推入水(20mL)中，并用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取。将有机相浓缩，得到呈黄色油状物的中间体E(1.50g,2.06mmol,58.2％产率，60.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝437.0。
步骤4：3-碘-1-(3-甲基氧杂环丁-3-基)-1H-吡唑(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120005373
向中间体E(1.50g,3.44mmol)于THF(10mL)中的溶液中加入钾；2-甲基丙-2-醇(1.16g,10.31mmol)。将混合物在20℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空中浓缩得到残余物。将残余物通过反相HPLC(FA)纯化，得到呈黄色固体的中间体F(0.450g,1.70mmol,49.56％产率，100％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝265.0.；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.35(d,J＝2.4Hz,1H),6.49(d,J＝2.4Hz,1H),5.14(d,J＝6.4Hz,2H),4.64(d,J＝6.8Hz,2H),1.93(s,3H)。
步骤5：1-(3-甲基氧杂环丁-3-基)-1H-吡唑-3-羧酸(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120005381
向中间体F(0.100g,0.379mmol)、二环己基(3-二环己基磷烷基丙基)二四氟硼酸鏻(0.023g,0.038mmol)和K2CO3(0.079g,0.568mmol)于DMSO(1mL)和H2O(0.5mL)的混合物中加入Pd(OAc)2(0.004g,0.019mmol)，将悬浮液在真空下脱气并用CO气球吹扫数次。然后混合物在CO(15psi)下于100℃下搅拌12小时。将反应混合物过滤，并将滤液通过反相HPLC纯化，得到呈白色固体的中间体G(60mg,329.35umol,86.97％产率，100％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M-H]+＝181.1；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.86(d,J＝2.4Hz,1H),6.83(d,J＝2.4Hz,1H),5.15(d,J＝6.8Hz,2H),4.70(d,J＝6.8Hz,2H),1.92(s,3H)。
实施例169. 1-(1-甲基环丙基)吡唑-3-羧酸的制备
Figure BDA0003284159120005391
步骤1：3-溴-1-(丙-1-烯-2-基)-1H-吡唑(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120005392
将Cu(OAc)2(4.94g,27.22mmol)和2-(2-吡啶基)吡啶(8.50g,54.43mmol)于1,2-DCE(40mL)中的混合物在70℃下搅拌30分钟。向悬浮液中加入3-溴-1H-吡唑(4.00g,27.22mmol)、二氟(丙-1-烯-2-基-l2-fluoraneyl)硼烷、钾盐(8.05g,54.43mmol)和Na2CO3(2.88g,27.22mmol)。将混合物在70℃下在O2(15Psi)下搅拌16小时。将反应混合物倒入H2O(200mL)中，并用乙酸乙酯(200mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(乙酸乙酯/石油醚＝0:1至1:3)纯化，得到呈白色油状物的中间体C(3.30g,16.94mmol,62.3％产率，96..0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝186.9.；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.56(d,J＝2.8Hz,1H),6.35(d,J＝2.4Hz,1H),5.34(s,1H),4.70(s,1H),2.25(d,J＝0.8Hz,3H)。
步骤2：3-溴-1-(1-甲基环丙基)-1H-吡唑(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120005393
在N2气氛下向TFA(7.92mL,106.93mmol)于二氯甲烷(20mL)中的冷却(0℃)溶液中滴加1M的ZnEt2溶液(106.93mL)。30分钟后，滴加CH2l2溶液(8.63mL,106.93mmol)，再搅拌30分钟。向混合物中加入中间体C(2.00g,10.69mmol)于二氯甲烷(5mL)中的溶液，并将混合物逐渐升温至室温。搅拌16小时后，将反应混合物倒入饱和NH4Cl水溶液(200mL)中，并用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(乙酸乙酯/石油醚＝0:1至1:3)纯化，得到呈黄色油状物的中间体D(0.250g,1.24mmol,11.63％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝201.0.；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37(d,J＝2.4Hz,1H),6.21(d,J＝2.0Hz,1H),1.60(s,3H),1.28-1.20(m,2H),0.94-0.86(m,2H)。
步骤3：1-(1-甲基环丙基)吡唑-3-羧酸(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120005401
将中间体D(0.250g,1.24mmol)、二环己基(3-二环己基磷烷基丙基)二四氟硼酸鏻(0.228g,0.373mmol)、Pd(OAc)2(0.084g,0.373mmol)和K2CO3(0.343g,2.49mmol)的混合物稀释在DMSO(2mL)和H2O(1mL)中。将混合物脱气并用CO(3x)吹扫，并在100℃下在CO(15psi)下搅拌16小时。将反应混合物倒入H2O(10mL)中，并用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取。将水相用1N HCl(5mL)酸化至pH～2，并用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到呈黄色油状物的中间体E(0.140g,0.804mmol,64.65％％产率，95.4％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝167.1。
实施例170. 1-(1-氰基-1-甲基-乙基)咪唑-4-羧酸的制备
Figure BDA0003284159120005411
步骤1：1H-咪唑-4-羧酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120005412
将1H-咪唑-4-羧酸(2.50g,22.30mmol)于甲苯(40mL)中的溶液在80℃下搅拌，加入1,1-二叔丁氧基-N,N-二甲基-甲胺(6.80g,33.46mmol,8.02mL)。3小时后，将反应物用水(250mL)稀释，并用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝10/1至3/1)纯化，将级分浓缩，得到呈黄色固体的中间体C(0.550g,3.27mmol,14.66％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.94-12.51(m,1H),7.80-7.48(m,2H),1.50(s,9H)。
步骤2：1-(氰基甲基)咪唑-4-羧酸叔丁酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120005413
向中间体C(0.550g,3.27mmol)于THF(10mL)中的冷却(15℃)溶液中加入NaH(0.157g,3.92mmol,60％纯度)。30分钟后，加入2-溴乙腈(0.262mL,3.92mmol)。将混合物升温至室温并搅拌2小时。将反应物用水(200mL)稀释，并用乙酸乙酯(50mL x 3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至3/1)纯化，得到呈黄色固体的中间体E(0.520g,2.51mmol,76.74％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.64-7.61(m,2H),5.03-5.00(m,2H),1.58(s,9H)。
步骤3：1-(1-氰基-1-甲基-乙基)咪唑-4-羧酸叔丁酯(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120005421
向中间体E(0.400g,1.93mmol)于THF(8mL)中的冷却(0℃)溶液中分批加入NaH(0.386g,9.65mmol，60％纯度)。将混合物在25℃下搅拌1小时，然后加入MeI(0.721mL,11.58mmol)。12小时后，将反应物缓慢倒入饱和NH4Cl水溶液(20mL)中，并用乙酸乙酯(5mLx 3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至1/1)纯化，得到呈黄色固体的中间体F(0.100g,0.397mmol,20.54％产率，93.3％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝236.1.；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.71-7.64(m,2H),1.94(s,6H),1.52(s,9H)。
步骤4：1-(1-氰基-1-甲基-乙基)咪唑-4-羧酸(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120005422
向中间体F(0.050g,0.213mmol)于二氯甲烷(0.7mL)中的溶液中加入TFA(0.157mL,2.13mmol)并搅拌2小时。将混合物浓缩，得到呈黄色固体的中间体G(0.034g,0.190mmol,89.29％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝180.0。
实施例171.本发明化合物的制备
下表10中的下列化合物是利用实施例62和63中描述的一般合成方案，从合适的普通中间体(4-溴噻唑-2-胺)、合适的杂环羧酸、N-Boc氨基酸和硼酸酯或酸开始合成的。在适当的情况下，将SFC纯化用于分离对映异构体。
表10
Figure BDA0003284159120005431
Figure BDA0003284159120005441
Figure BDA0003284159120005451
Figure BDA0003284159120005461
Figure BDA0003284159120005471
Figure BDA0003284159120005481
Figure BDA0003284159120005491
Figure BDA0003284159120005501
实施例172.本发明化合物的制备
表11中的下列化合物是利用实施例61中描述的一般合成方案，从合适的普通中间体(4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)噻唑-2-胺)、杂芳基卤化物、N-Boc氨基酸和合适的杂环羧酸开始合成的。
表11.
Figure BDA0003284159120005511
Figure BDA0003284159120005521
实施例173.本发明化合物的制备
下表12中的下列化合物是从普通起始材料4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺)和适当的手性N-Boc氨基酸、杂环羧酸和硼酸酯开始合成的，包括按照下面方案7所示的合成路线进行的手性分离。在适当的情况下，将SFC纯化用于分离对映异构体。
方案7：
Figure BDA0003284159120005531
表12
Figure BDA0003284159120005532
Figure BDA0003284159120005541
实施例174.N-[(1S)-2-[[4-[3-(2,6-二甲基嘧啶-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-1-(甲氧基甲基)-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物358)的制备
Figure BDA0003284159120005542
步骤1：N-[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]-N-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120005543
向4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺(1.00g,3.92mmol)于吡啶(10mL)中的溶液中加入(Boc)2O(1.08mL,4.70mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时，然后加入另外的(Boc)2O(1.80mL,7.84mmol)和DMAP(0.048g,0.392mmol)。再搅拌2小时后，将混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取。将合并的有机层用饱和柠檬酸溶液(15mL x 3)洗涤，经无水Na2SO4干燥，并浓缩，得到呈棕色固体的中间体B(1.70g,3.73mmol,95.25％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z:[81Br M+H]+＝457.0。
步骤2：N-[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120005551
将中间体B(1.60g,3.51mmol)、K2CO3(0.971g,7.03mmol)于MeOH(16mL)中的混合物搅拌2小时。将反应混合物用水(30mL)稀释，并用乙酸乙酯(50mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/0至10:1)纯化，得到呈白色固体的中间体C(0.950g,2.67mmol,76.11％产率)。LCMS(ESI)m/z:[79Br M+H]+＝355.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.59(s,1H),8.06-8.05(m,1H),7.90-7.86(m,1H),7.71(s,1H),7.51-7.48(m,1H),7.40-7.38(m,1H),1.49(s,9H)。
步骤3：N-[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120005552
在N2气氛下向4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(1.50g,5.91mmol)于1,4-二噁烷(6mL)中的溶液中加入中间体C(0.700g,1.97mmol)以及KOAc(0.580g,5.91mmol)和Pd(dppf)Cl2(144.18mg,197.04umol)。随后将混合物在80℃下搅拌。搅拌2小时后，将反应混合物用水(5mL)稀释，并用乙酸乙酯(20mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至1:1)纯化，得到呈白色固体的中间体E(2.15g,1.34mmol,67.8％产率，25.0％纯度，通过1H NMR)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.24(s,1H),7.98-7.96(m,1H),7.63-7.56(m,2H),7.44-7.40(m,1H),1.49(s,9H),1.31(s,12H)。
步骤4：N-[4-[3-(2,6-二甲基嘧啶-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120005561
在N2气氛下向4-氯-2,6-二甲基-嘧啶(0.744g,5.22mmol)于1,4-二噁烷(20mL)和水(4mL)中的溶液中加入中间体E(2.10g,5.22mmol)、K3PO4(3.32g,15.66mmol)和Pd(dtbpf)Cl2(0.340g,0.522mmol)。随后将混合物在80℃下搅拌。2小时后，将反应混合物用水(5mL)稀释，并用乙酸乙酯(20mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将所得残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至0/1)纯化，得到呈白色固体的中间体G(0.550g,1.44mmol,27.55％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝383.4.；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.64(s,1H),8.64(t,J＝1.6Hz,1H),8.08(d,J＝7.6Hz,1H),8.02-7.99(m,1H),7.80(s,1H),7.71(s,1H),7.57(t,J＝8.0Hz,1H),2.64(s,3H),1.49(s,9H),1.06(s,3H)。
步骤5：4-[3-(2,6-二甲基嘧啶-4-基)苯基]噻唑-2-胺(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120005562
将中间体G(0.500g,1.31mmol)于4M的HCl于1,4-二噁烷中的溶液(10mL)中的混合物在25℃下搅拌12小时。向混合物中加入MeOH(5mL)并在60℃下搅拌。2小时后，将混合物冷却至环境温度并浓缩。将残余物用水(5mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液碱化至pH～10，并将水层用乙酸乙酯(10mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并浓缩，得到呈白色固体的中间体H(0.250g,0.885mmol,67.73％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝283.3。
步骤6：N-[(1S)-2-[[4-[3-(2,6-二甲基嘧啶-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-1-(甲氧基甲基)-2-氧代乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体J)的制备
Figure BDA0003284159120005571
向(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲氧基-丙酸(0.252g,1.15mmol)和中间体H(0.250g,0.885mmol)于二氯甲烷(25mL)中的溶液中加入EEDQ(0.328g,1.33mmol)。搅拌12小时后，用水(2mL)稀释反应物，并用1N HCl酸化至pH～6。将含水混合物用乙酸乙酯(30mLx 2)萃取。将合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液(15mL x 2)洗涤。然后将合并的有机层用无水Na2SO4干燥并浓缩。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至1/1)纯化，得到呈白色固体的中间体J(0.220g,0.437mmol,49.3％产率，96.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝484.4；ee％＝100％。
步骤7：氯化(S)-1-((4-(3-(2,6-二甲基嘧啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-3-甲氧基-1-氧代丙-2-铵(中间体K)的制备
Figure BDA0003284159120005572
将中间体J(0.100g,0.208mmol)于4M HCl的1,4-二噁烷溶液(2mL，4M)中的混合物在25℃下搅拌0.5小时。将混合物浓缩，得到呈白色固体的中间体K(0.087g)，其不经进一步纯化用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝384.4。
步骤8：N-[(1S)-2-[[4-[3-(2,6-二甲基嘧啶-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-1-(甲氧基甲基)-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物358)的制备
Figure BDA0003284159120005581
将1-甲磺酰基吡咯-3-羧酸(0.043g,0.227mmol)、中间体K(0.087g,0.227mmol),HOBt(0.092g,0.682mmol),EDCI(0.131g,0.682mmol)和DIPEA(0.119mL,0.682mmol)于二氯甲烷(1mL)中的混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(3mL)稀释，并用二氯甲烷(3mL x 2)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型TLC(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝0:1)纯化，得到呈白色固体的化合物358(0.024g,0.043mmol,19.06％产率，100％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝555.4.；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.70-8.69(m,1H),8.08-8.04(m,2H),7.92-7.91(m,1H),7.72(s,1H),7.58-7.56(m,2H),7.27-7.26(m,1H),6.86-6.85(m,1H),4.98-4.95(m,1H),3.89-3.81(m,2H),3.44(s,3H),3.38(s,3H),2.72(s,3H),2.57(s,3H)。
实施例175.N-[(1S)-1-(甲氧基甲基)-2-[[4-[3-(2-甲基嘧啶-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物357)的制备
Figure BDA0003284159120005591
步骤1：N-[(1S)-1-(甲氧基甲基)-2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120005592
在N2气氛下向4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.144g,0.569mmol)于1,4-二噁烷(1mL)中的溶液中加入N-[(1S)-2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-1-(甲氧基甲基)-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(0.150g,0.284mmol)以及K3PO4(0.181g,0.853mmol)和Pd(dtbf)Cl2(0.019g,0.028mmol)。搅拌2小时后，将混合物用水(3mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并浓缩。将残余物通过柱色谱(SiO2石油醚/乙酸乙酯＝10/1至0/1)纯化，得到呈白色固体的中间体C(0.070g,0.090mmol,31.7％产率，74.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝575.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.56(s,1H),8.49(d,J＝7.6Hz,1H),8.30(s,1H),7.99-7.98(m,2H),7.67(s,1H),7.62(d,J＝7.2Hz,1H),7.45-7.46(m,1H),7.30-7.28(m,1H),6.80-6.79(m,1H),4.95-4.90(m,1H),3.78-3.66(m,2H),3.56(s,3H),1.32(s,12H)。
步骤2：N-[(1S)-1-(甲氧基甲基)-2-[[4-[3-(2-甲基嘧啶-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物357)的制备
Figure BDA0003284159120005601
在N2气氛下向4-溴-2-甲基-嘧啶(0.032g,0.183mmol)于1,4-二噁烷(1mL)和水(0.2mL)中的溶液中加入中间体C(0.070g,0.122mmol)、K3PO4(0.078g,0.366mmol)和Pd(dtbpf)Cl2(0.008g,0.012mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时，然后用水(3mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。将有机层用无水Na2SO4干燥并浓缩。将残余物通过制备型TLC(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝0:1)纯化，得到呈白色固体的化合物357(0.025g,0.045mmol,37.24％产率，98％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝541.3；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.85-8.84(m,2H),8.21-8.16(m,3H),7.91-7.90(m,1H),7.63-7.60(m,2H),7.27-7.26(m,1H),6.85-6.84(m,1H),4.97-4.94(m,1H),3.88-3.80(m,2H),3.43(s,3H),3.37(s,3H),2.87(s,3H)；ee％＝100％。
实施例176.N-[2-[[6-[3-[(顺式)-2,6-二甲基吗啉-4-基]苯基]-2-吡啶基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物374)的制备
Figure BDA0003284159120005611
N-[2-[[6-[3-[(顺式)-2,6-二甲基吗啉-4-基]苯基]-2-吡啶基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺是利用实施例139中所述的一般合成方案，从适当的普通中间体((顺式)-2,6-二甲基-4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]吗啉)和杂环羧酸开始合成的。
LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝512.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.51(s,1H),8.63-8.56(m,1H),8.00(d,J＝8.0Hz,1H),7.88-7.81(m,2H),7.68-7.63(m,1H),7.62-7.58(m,1H),7.50-7.46(m,1H),7.36-7.29(m,2H),7.06-6.99(m,1H),6.80-6.75(m,1H),4.14(d,J＝4.8Hz,2H),3.78-3.64(m,4H),3.57(s,3H),2.36-2.27(m,2H),1.18(d,J＝6.0Hz,6H)。
实施例177.本发明化合物的制备
下面表13中的下列化合物是利用下面方案8中所示的一般合成方案从合适的氨基噻唑、顺式-二甲基吗啉、手性N-Boc氨基酸和杂环羧酸合成的。在适当的情况下，将SFC纯化用于分离对映异构体。
方案8：
Figure BDA0003284159120005621
表13
Figure BDA0003284159120005622
Figure BDA0003284159120005631
Figure BDA0003284159120005641
Figure BDA0003284159120005651
Figure BDA0003284159120005661
Figure BDA0003284159120005671
实施例178.N-[2-[[4-[3-(3,6-二氢-2H-吡喃-5-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物396)、1-甲基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-[(3R)-四氢吡喃-3-基]苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物420)和1-甲基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-[(3S)-四氢吡喃-3-基]苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物419)的制备
Figure BDA0003284159120005681
步骤1：N-[2-[[4-[3-(3,6-二氢-2H-吡喃-5-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物396)的制备
Figure BDA0003284159120005682
将N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(0.500g,1.03mmol)、2-(3,6-二氢-2H-吡喃-5-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.217g,1.03mmol)、K3PO4(0.659g,3.10mmol)和Pd(dtbpf)Cl2(0.067g,0.103mol)于1,4-二噁烷(10mL)和H2O(1mL)中的混合物脱气并用N2(3x)吹扫。将所得混合物在70℃下搅拌。12小时后，将混合物反应冷却至室温，并缓慢加入水(20mL)，直至固体从溶液中沉淀出来。将固体过滤并用水洗涤。将固体通过反相HPLC纯化。然后将溶液用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色固体的化合物396(0.250g,0.478mmol,46.2％产率，93.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝487.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.40(s,1H),8.69-8.67(m,1H),7.89(s,1H),7.86-7.84(m,1H),7.81(d,J＝7.6Hz,1H),7.71(s,1H),7.43-7.38(m,1H),7.35-7.31(m,2H),6.79-6.77(m,1H),6.36-6.35(m,1H),4.48(d,J＝2.0Hz,2H),4.14(d,J＝5.6Hz,2H),3.77-3.75(m,2H),3.58(s,3H),2.31-2.27(m,2H)。
步骤2：1-甲磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-(3-四氢吡喃-3-基苯基)噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物776)的制备
Figure BDA0003284159120005691
在N2(g)下向N-[2-[[4-[3-(3,6-二氢-2H-吡喃-5-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(0.170g,0.349mmol)于MeOH(3mL)和DMF(3mL)中的溶液中加入10％Pd/C(0.020g,0.349mmol)。将悬浮液在真空下进行三个脱气和用H2吹扫的循环。将混合物在40℃下在H2(15psi)下搅拌。12小时后，将反应混合物过滤，并在减压下部分浓缩以除去MeOH。将粗产物通过制备型反相HPLC纯化，并在减压下浓缩除去乙腈，并冻干，得到呈白色固体的化合物776(0.036g,0.073mmol,20.88％产率，99％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝489.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.39(s,1H),8.68-8.66(m,1H),7.86-7.84(m,1H),7.80(s,1H),7.75(d,J＝7.6Hz,1H),7.64(s,1H),7.38-7.36(m,1H),7.33-7.31(m,1H),7.23(d,J＝7.6Hz,1H),6.78(m,1H),4.14(d,J＝5.6Hz,2H),3.92-3.85(m,2H),3.58(s,3H),3.40(s,2H),2.84-2.82(m,1H),2.00-1.96(m,1H),1.81-1.76(m,1H),1.70-1.68(m,2H)。
步骤3：1-甲基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-[(3R)-四氢吡喃-3-基]苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物420)和1-甲基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-[(3S)-四氢吡喃-3-基]苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物419)的制备
Figure BDA0003284159120005701
将1-甲基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-(3-四氢吡喃-3-基苯基)噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(0.086g,0.176mmol)通过SFC分离(流动相:[0.1％NH4OH MeOH]；B％：70％-70％)纯化，随后通过反相制备型HPLC进行再纯化，得到呈白色固体的化合物420(0.026g,0.054mmol,33.53％产率，100％纯度)和呈白色固体的化合物419(0.029g,0.059mmol,36.73％产率，100％纯度)。
化合物420：LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝489.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.39(s,1H),8.68-8.66(m,1H),7.86-7.84(m,1H),7.81(s,1H),7.75(d,J＝7.6Hz,1H),7.64(s,1H),7.39-7.34(m,1H),7.33-7.31(m,1H),7.23(d,J＝7.6Hz,1H),6.79-6.77(m,1H),4.14(d,J＝6.0Hz,2H),3.91-3.85(m,2H),3.58(s,3H),3.40-3.36(m,2H),2.84-2.82(m,1H),1.98(d,J＝13.6Hz,1H),1.81-1.73(m,1H),1.71-1.65(m,2H)；ee％＝100％。
化合物419:LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝489.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.38-12.35(m,1H),8.68-8.66(m,1H),7.86-7.84(m,1H),7.81(s,1H),7.75(d,J＝7.6Hz,1H),7.64(s,1H),7.38-7.36(m,1H),7.33-7.31(m,1H),7.23(d,J＝7.6Hz,1H),6.79-6.77(m,1H),4.14(d,J＝5.6Hz,2H),3.92-3.85(m,2H),3.58(s,3H),3.44-3.36(m,2H),2.84-2.82(m,1H),2.00-1.96(m,1H),1.81-1.73(m,1H),1.71-1.68(m,2H)；ee％＝100％。
实施例179.本发明化合物的制备
下表14中的下列化合物是利用实施例178中描述的一般合成方案，从适当的普通中间体(N-(2-((4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺)和适当的硼酸酯开始合成的。
表14
Figure BDA0003284159120005711
Figure BDA0003284159120005721
实施例180.本发明化合物的制备
下表15中的下列化合物是使用实施例178中描述的一般合成方案，从起始(S)-N-(1-((4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)氨基)-3-甲氧基-1-氧代丙-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺以及合适的硼酸酯开始合成的。
表15
Figure BDA0003284159120005722
Figure BDA0003284159120005731
实施例181.N-(2-((4-(6-((顺式)-2,6-二甲基-3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物350)的制备
Figure BDA0003284159120005732
下表16中的下列化合物是利用实施例161中描述的一般合成方案，由N-(2-((4-(6-溴吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺和合适的硼酸酯合成的。
LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝516.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.14(s,1H),8.69-8.68(m,1H),7.88-7.83(m,3H),7.82-7.78(m,1H),7.51-7.46(m,1H),7.34-7.29(m,1H),6.79-6.76(m,1H),6.76-6.74(m,1H),4.46-4.35(m,1H),4.14(d,J＝6.0Hz,2H),3.77-3.71(m,1H),3.58-3.55(m,3H),2.69-2.66(m,1H),2.26-2.14(m,1H),1.34-1.21(m,6H)。
实施例182.N-(2-((4-(3-((反式)-4-羟基环己基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物386)和N-(2-((4-(3-((顺式)-4-羟基环己基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物387)的制备
Figure BDA0003284159120005741
步骤1：4-[3-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)苯基]噻唑-2-胺(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120005742
向4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺(0.800g,3.14mmol)、2-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(1.25g,4.70mmol)、K3PO4(2.00g,9.41mmol)于1,4-二噁烷(10mL)和H2O(2mL)中的溶液中加入Pd(dtbpf)Cl2(0.204g,0.314mmol)。随后将混合物在70℃下搅拌。1小时后，将反应混合物冷却至环境温度并倒入水(20mL)中。将所得两相溶液用乙酸乙酯(20mL x 2)萃取，并将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩。将粗产物通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10:1至3:1)纯化，得到呈白色固体的中间体C(0.950g,2.95mmol,94.1％产率，97.7％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝315.1。
步骤2：4-[3-(2-氨基噻唑-4-基)苯基]环己-3-烯-1-酮(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120005751
将中间体C(0.905g,3.02mmol)于甲酸(10mL)中的溶液在60℃下搅拌1小时。将反应混合物冷却至环境温度并倒入水中(10mL)。将水层用乙酸乙酯(10mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩。将粗产物通过反相HPLC纯化，通过冻干，得到呈黄色固体的中间体D(0.600g,2.21mmol,73.2％产率，99.6％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝271.1。
步骤3：4-[3-(2-氨基噻唑-4-基)苯基]环己酮(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120005752
向中间体D(0.600g,2.22mmol)于乙酸乙酯(6mL)中的溶液中加入20％Pd(OH)2(0.200g)。将混合物在60℃下在H2(50psi)下搅拌4d。将反应混合物过滤并将滤液浓缩，得到呈黄色固体的中间体E(0.500g,1.72mmol,77.67％产率，93.9％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝273.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.80(s,1H),7.69(d,J＝7.6Hz,1H),7.35-7.34(m,1H),7.25(d,J＝7.6Hz,1H),7.07(d,J＝7.6Hz,3H),3.12(d,J＝12.0Hz,1H),2.64-2.62(m2H),2.40-2.31(m,2H),2.24-2.11(m,2H),1.96-1.94(m,2H)。
步骤4：N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4-氧代环己基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120005761
向中间体E(0.470g,1.73mmol)、N-Boc-甘氨酸(0.363g,2.07mmol)、[氯(二甲基氨基)亚甲基]-二甲基六氟磷酸铵(0.726g,2.59mmol)于乙腈(5mL)中的溶液中加入N-甲基咪唑(0.413mL,5.18mmol)。将混合物在25℃下搅拌16小时，随后过滤并浓缩。将粗产物通过反相HPLC纯化，通过萃取得到呈黄色固体的中间体G(0.400g,0.880mmol,51.0％产率，94.5％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝430.1.；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.34-9.56(m,1H),7.64(s,1H),7.58-7.56(m,1H),7.31-7.29(m,1H),7.15(d,J＝7.6Hz,1H),7.08(s,1H),5.11(s,1H),3.97(s,2H),3.07-2.96(m,1H),2.49-2.40(m,4H),2.26-2.14(m,2H),1.99-1.90(m,2H),1.42(s,9H)。
步骤5：N-[2-[[4-[3-(4-羟基环己基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120005762
向中间体G(0.390g,0.908mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中加入NaBH4(0.051g,1.36mmol)。在室温下搅拌1小时后，将反应混合物倒入水(10mL)中，并用乙酸乙酯(10mL x2)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩。将粗产物通过反相HPLC纯化，在冻干后，得到呈白色固体的中间体H(0.300,0.681mmol,75.03％产率，98.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝432.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.29(s,1H),7.77(s,1H),7.70(d,J＝7.6Hz,1H),7.62(s,1H),7.34-7.30(m,1H),7.18(d,J＝5.6Hz,2H),4.60(s,1H),3.86(d,J＝6.0Hz,2H),3.50-3.43(m,1H),1.94(d,J＝9.6Hz,2H),1.81(d,J＝13.2Hz,2H),1.57-1.48(m,2H),1.46-1.35(m,9H),1.33-1.28(m,2H)。
步骤6：氯化2-((4-(3-(4-羟基环己基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙-1-铵(中间体I)的制备
Figure BDA0003284159120005771
中间体H(0.300g,0.695mmol)于4M HCl的1,4-二噁烷溶液(3mL)中的溶液。在室温下搅拌1小时后，将反应混合物浓缩，得到呈白色固体的中间体I(0.255g)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝332.1。
步骤7：N-[2-[[4-[3-(4-羟基环己基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(中间体K)的制备
Figure BDA0003284159120005772
向中间体I(0.250g,0.680mmol)、1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸(0.154g,0.815mmol)、EDCI(0.261g,1.36mmol)、HOBt(0.184g,1.36mmol)于DMF(0.5mL)中的溶液中加入DIEA(0.592mL,3.40mmol)。在室温下搅拌1小时后，将反应混合物过滤，并将滤液通过反相HPLC纯化，在冻干后，得到呈白色固体的中间体K(0.150g,0.276mmol,40.58％产率，92.4％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝503.0。
步骤8：N-(2-((4-(3-((反式)-4-羟基环己基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物386)和N-(2-((4-(3-((顺式)-4-羟基环己基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物387)的制备
Figure BDA0003284159120005781
将中间体K(150mg,298.44umol)通过制备型HPLC(FA)纯化，通过冻干，得到呈白色固体的化合物386(78.31mg,155.81umol,52.21％产率，100％纯度)，以及通过冻干，得到呈白色固体的化合物387(6.52mg,12.51umol,4.19％产率，96.4％纯度)。
化合物386:LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝503.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.41(s,1H),8.71-8.70(m,1H),7.86-7.84(m,1H),7.78(s,1H),7.73-7.67(m,1H),7.62(s,1H),7.38-7.29(m,2H),7.18(d,J＝7.6Hz,1H),6.79-6.77(m,1H),4.88-4.36(m,1H),4.15(d,J＝6.0Hz,2H),3.58(s,3H),3.51-3.46(m,1H),2.50-2.45(m,1H),2.02-1.89(m,2H),1.87-1.72(m,2H),1.54-1.52(m,2H),1.39-1.25(m,2H)。
化合物387:LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝503.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.48(s,1H),8.70-8.69(m,1H),7.86-7.85(m,2H),7.70(d,J＝7.6Hz,1H),7.62(s,1H),7.39-7.29(m,2H),7.17(d,J＝7.6Hz,1H),6.78-6.76(m,1H),4.43(s,1H),4.14(d,J＝5.6Hz,2H),3.93(s,1H),3.58(s,3H),2.55(s,1H),1.98-1.71(m,4H),1.63-1.45(m,4H)。
实施例183. 4-(1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-基)-N-(4-(3-(1-(氧杂环丁-3-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)-4-氧代丁酰胺(化合物389)的制备
Figure BDA0003284159120005791
步骤1：(2-((4-(3-(1-(氧杂环丁-3-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120005792
将1-(氧杂环丁烷-3-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(0.520g,1.81mmol)、N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(0.998g,2.17mmol)、Pd(dtbpf)Cl2(0.118g,0.181mmol)和K3PO4(1.15g,5.43mmol)于1,4-二噁烷(8mL)和H2O(2mL)的混合物中的混合物脱气并用N2(3x)吹扫。随后将混合物在80℃下在恒定N2气氛下搅拌。2小时后，将混合物冷却至室温，然后加入水(100mL)。将混合物用乙酸乙酯(100mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并将滤液浓缩得到固体。将粗产物用MTBE(20mL)研磨，搅拌10分钟，并过滤。收集固体，得到呈白色固体的中间体C(0.700g,1.46mmol,80.5％产率，98.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝471.2。
步骤2：氯化2-((4-(3-(1-(氧杂环丁-3-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙-1-铵(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120005801
向中间体C(0.080g,0.170mmol)于二氯甲烷(2mL)中的冷却(0℃)溶液中加入TFA(0.2mL)。搅拌2小时后，加入饱和NaHCO3水溶液(40mL)，并将反应混合物用二氯甲烷(40mLx 3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色固体的中间体D(0.050g,0.135mmol,79.39％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝371.1。
步骤3：4-(1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-基)-N-(4-(3-(1-(氧杂环丁-3-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)-4-氧代丁酰胺(化合物389)的制备
Figure BDA0003284159120005802
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸(0.025g,0.130mmol)于二氯甲烷(2mL)中的溶液中加入HOBt(0.022g,0.162mmol)、DIEA(0.056mL,323.91umol)、EDCI(0.031g,0.162mmol)，并加入中间体D(0.040g,0.108mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时，然后过滤。收集滤饼，并将固体用MeOH(4mL)在20℃下研磨10分钟并过滤。将所得固体冻干，得到呈白色固体的化合物389(0.008g,0.015mmol,13.5％产率，98.5％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝542.1；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.39(s,1H),8.67-8.64(m,1H),7.96(s,1H),7.84(s,1H),7.78-7.77(m,1H),7.68(s,1H),7.40(d,J＝4.8Hz,2H),7.31-7.30(m,1H),6.77(s,1H),6.21(s,1H),4.61-4.58(m,2H),4.53-4.50(m,2H),4.14(d,J＝5.6Hz,2H),3.57(s,4H),3.02(s,2H),2.53(s,2H),2.52-2.50(m,2H)。
实施例184.N-(2-((4-(3-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(叔丁基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物397)的制备
Figure BDA0003284159120005811
步骤1：N-(2-((4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(叔丁基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120005812
向2-氨基-N-[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]乙酰胺(2.09g,5.98mmol)于二氯甲烷(20mL)中的溶液中加入EDCI(1.72g,8.97mmol)、DIEA(3.86g,29.90mmol,5.21mL)和HOBt(1.21g,8.97mmol)。将混合物在25℃下搅拌30分钟，然后加入1-叔丁基吡咯-3-羧酸(1.00g,5.98mmol)。16小时后，将混合物在减压下浓缩。将残余物倒入冰水(20mL)中并搅拌。将水相用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝1:0至0:1)纯化，得到呈黄色固体的中间体C(1.50g,3.25mmol,54.36％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝463.0；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.37(s,1H),8.24-8.17(m,1H),8.12(d,J＝1.6Hz,1H),7.95-7.88(m,1H),7.78(s,1H),7.57-7.49(m,2H),7.41(s,1H),6.99-6.97(m,1H),6.48-6.47(m,1H),4.13-4.07(m,2H),1.50(s,9H)。
步骤2：N-(2-((4-(3-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(叔丁基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物397)的制备
Figure BDA0003284159120005821
将N-({[4-(3-溴苯基)-1,3-噻唑-2-基]氨基甲酰基}甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.050g,0.11mmol)、2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬烷(0.018g,0.13mmol)、磷酸钾(0.069g,0.32mmol)和RuPhos预催化剂G4(0.011g,0.090mmol)在密封管中悬浮于于1,4-二噁烷(1mL)中。将反应混合物随后在90℃下加热过夜。将反应物冷却至室温，并通过硅藻土垫过滤。将滤液并在真空中浓缩，并将粗产物通过硅胶色谱(乙酸乙酯:庚烷＝2:3至4:5)纯化，得到呈浅黄色粉末的标题化合物(12.1mg,22％)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝508.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.24(s,1H),8.12(s,1H),7.56(s,1H),7.52–7.42(m,2H),7.28(d,J＝7.7Hz,1H),7.22(t,J＝7.8Hz,1H),6.95(t,J＝2.7Hz,1H),6.89(d,J＝9.6Hz,1H),6.45(dd,J＝3.0,1.7Hz,1H),4.34(s,4H),4.07(d,J＝5.9Hz,2H),3.14–3.08(m,4H),1.91–1.85(m,4H),1.48(s,9H)。
实施例185.本发明化合物的制备
下面表16中的下列化合物是利用实施例1中描述的合成方案由合适的普通中间体(1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺)开始合成的。
表16
Figure BDA0003284159120005831
Figure BDA0003284159120005841
实施例186. 2-溴-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪的制备
Figure BDA0003284159120005842
步骤1：2-溴-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120005851
向6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-胺(0.150g,1.08mmol)和CuBr(0.155g,1.08mmol)于乙腈(1.5mL)中的冷却(0℃)溶液中加入亚硝酸叔丁酯(0.256mL,2.16mmol)。将混合物在50℃下搅拌5小时，然后加入H2O(3mL)。将所得溶液用乙酸乙酯(3mLx 2)萃取。将合并的有机层在减压下浓缩。将残余物用MeOH(2mL)稀释，并通过反相HPLC(0.1％甲酸)纯化，得到呈黄色固体的中间体B(0.050g,0.214mmol,19.9％产率，87.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[81Br M+H]+＝204.8；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.20(s,1H),4.75(s,2H),4.10-4.02(m,4H)。
实施例187.本发明化合物的制备
下面表17中的下列化合物是利用实施例8中描述的合成方案，由合适的普通中间体1-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺开始合成的。
表17
Figure BDA0003284159120005852
Figure BDA0003284159120005861
实施例188.N-[2-[[4-[3-[2-(氮杂环丁-1-基)嘧啶-4-基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物408)的制备
Figure BDA0003284159120005862
将N-[2-[[4-[3-(2-氯嘧啶-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(0.020g,0.039mmol)、Cs2CO3(0.038g,0.116mmol)和氮杂环丁烷(0.026mL,386.86umol)于DMF(0.5mL)中的悬浮液在60℃下搅拌。8小时后，将混合物冷却至环境温度，并加入水(5mL)。将含水混合物用乙酸乙酯(5mL x 3)萃取。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化并冻干，得到呈白色固体的化合物408(0.012g,0.020mmol,51.33％产率，100％纯度，甲酸盐)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝538.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.46-12.38(m,1H),8.68-8.67(m,1H),8.57(s,1H),8.43-8.42(d,J＝5.2Hz,1H),8.05-8.02(m,2H),7.85(s,1H),7.77(s,1H),7.58-7.57(m,1H),7.33-7.32(m,1H),7.26-7.25(d,J＝5.2Hz,1H),6.79-6.78(m,1H),4.17-4.11(m,6H),3.58(s,2H),3.60-3.56(m,1H),2.38-2.37(m,2H)。
实施例189.本发明化合物的制备
表18中的下列化合物是利用实施例57中描述的一般合成方案，由普通中间体(2-氧代-2-((4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯、合适的芳基卤化物和杂环羧酸开始合成的。
表18
Figure BDA0003284159120005871
Figure BDA0003284159120005881
实施例190.N-(2-((4-(3-(3-氯-6-甲基吡啶-2-基)-4-甲基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物401)的制备
按照方案9，使用合适的起始材料并利用实施例57中描述的一般合成方案制备N-(2-((4-(3-(3-氯-6-甲基吡啶-2-基)-4-甲基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺。
方案9：
Figure BDA0003284159120005891
LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝544.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.38-12.09(m,1H),8.67-8.64(m,1H),7.94(d,J＝8.4Hz,1H),7.88-7.86(m,1H),7.84-7.83(m,1H),7.74(d,J＝1.6Hz,1H),7.63(s,1H),7.38-7.33(m,2H),7.31-7.29(m,1H),6.77-6.76(m,1H),4.12(d,J＝6.0Hz,2H),3.56(s,3H),2.51(s,3H),2.09(s,3H)。
实施例191. 2-(4-(3-(2-(2-(1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)苯基)吡啶-2-基)乙酸钠(化合物421)的制备
Figure BDA0003284159120005892
2-(4-(3-(2-(2-(1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)苯基)吡啶-2-基)乙酸钠是利用实施例14中描述的一般合成方案，由普通中间体1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺、合适的芳基卤化物开始合成的。
LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝540.3；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ18.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.24(s,2H),7.92(d,J＝7.6Hz,1H),7.84-7.82(m,1H),7.65(s,1H),7.59(d,J＝7.6Hz,1H),7.51-7.45(m,2H),7.34-7.27(m,2H),6.79-6.78(m,1H),3.95(d,J＝2.8Hz,2H),3.55(s,3H),3.47(s,2H)。
实施例192. 2-甲基-2-[3-[3-[2-[[2-[(1-甲基磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯基]吡唑-1-基]丙酸(化合物217)和N-[2-[[4-[3-[1-[1,1-二甲基-2-(甲基氨基)-2-氧代-乙基]吡唑-3-基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物414)的制备
Figure BDA0003284159120005901
步骤1：2-(3-溴吡唑-1-基)乙酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120005902
向3-溴-1H-吡唑(1.00g,6.80mmol)于DMF(10mL)中的溶液中加入2-溴乙酸叔丁酯(1.51mL,10.21mmol)、K2CO3(2.82g,20.41mmol)。将反应物在50℃下搅拌3小时，然后加入饱和NH4Cl水溶液(10mL)。将混合物用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL x 3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(乙酸乙酯/石油醚梯度＝0:1至1:3)纯化，得到呈无色油状物的中间体C(1.50g,5.74mmol,84.43％产率，100％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[79Br M-56+H]+＝205.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.75(d,J＝2.4Hz,1H),6.41(d,J＝2.4Hz,1H),4.95(s,2H),1.43(s,9H)。
步骤2：2-(3-溴吡唑-1-基)-2-甲基丙酸叔丁酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120005911
向2-(3-溴吡唑-1-基)乙酸叔丁酯(0.550g,2.11mmol)于THF(5mL)中的冷却(-60℃)溶液中加入2M的LDA(2M，2.63mL)于THF中的溶液。使混合物逐渐升温至环境温度，在25℃下搅拌30分钟，并再次冷却至-60℃。随后加入MeI(0.328mL,5.27mmol)于THF(0.5mL)中的溶液，并使混合物逐渐升温至室温。搅拌1小时后，将混合物通过加入饱和NH4Cl水溶液(5mL)猝灭，并用乙酸乙酯(5mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL*3)洗涤，经Na2SO4干燥，并浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(乙酸乙酯/石油醚＝0:1至1:1)纯化，得到呈无色油状物的中间体D(0.350g,1.16mmol,55.2％产率，96.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[79Br M-56+H]+＝233.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.91(d,J＝2.4Hz,1H),6.42(d,J＝2.4Hz,1H),1.71(s,6H),1.34(s,9H)。
步骤3：2-甲基-2-[3-[3-[2-[[2-[(1-甲基磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯基]吡唑-1-基]丙酸叔丁酯(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120005921
将1-甲基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(0.580g,1.09mmol)、中间体D(0.350g,1.16mmol)、Pd(dtbpf)Cl2(0.143g,0.219mmol)、K3PO4(0.696g,3.28mmol)于1,4-二噁烷(5mL)和H2O(1mL)中的混合物脱气并用N2(3x)吹扫。将混合物在80℃下在N2气氛下搅拌2小时。随后将混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤。将有机相在减压下浓缩。将残余物用乙酸乙酯(20mL)和石油醚(5mL)的混合物研磨10分钟，并过滤。将所得固体在减压下干燥，得到呈白色固体的中间体F(0.500g,0.751mmol,68.7％产率，92.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝613.5；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.43(br s,1H),8.70-8.68(m,1H),8.33(s,1H),7.95(d,J＝2.4Hz,1H),7.87-7.80(m,2H),7.75(d,J＝7.6Hz,1H),7.69(s,1H),7.47-7.45(m,1H),7.33-7.31(m,1H),6.83-6.75(m,2H),4.16(d,J＝5.6Hz,2H),3.58(s,3H),1.79(s,6H),1.35(s,9H)。
步骤4：2-甲基-2-[3-[3-[2-[[2-[(1-甲基磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯基]吡唑-1-基]丙酸(化合物217)的制备
Figure BDA0003284159120005922
向中间体F(0.500g,0.816mmol)于二氯甲烷(10mL)中的溶液中加入TFA(2.5mL，33.77mmol)。搅拌16小时后，将反应混合物在减压下浓缩以除去溶剂。将残余物用乙酸乙酯(20mL)研磨并过滤，得到呈白色固体的化合物217(0.460g,0.808mmol,99.05％产率，97.8％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝557.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.48(s,1H),8.71-8.69(m,1H),8.36(s,1H),7.97(d,J＝2.4Hz,1H),7.88-7.79(m,2H),7.75-7.73(m,1H),7.70(s,1H),7.47-7.45(m,1H),7.33-7.31(m,1H),6.79(d,J＝2.4Hz,2H),4.16-4.14(m,2H),3.58(s,3H),1.81(s,6H)。
步骤5：N-[2-[[4-[3-[1-[1,1-二甲基-2-(甲基氨基)-2-氧代-乙基]吡唑-3-基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物414)的制备
Figure BDA0003284159120005931
向2-甲基-2-[3-[3-[2-[[2-[(1-甲基磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯基]吡唑-1-基]丙酸(0.050g,0.089mmol)于DMF(1mL)中的溶液中加入DIPEA(0.235mL,0.001mmol)和甲胺盐酸盐(0.061g,0.898mmol)。将溶液搅拌5分钟，然后加入HATU(0.102g,0.269mmol)。搅拌16小时后，向混合物中缓慢加入水(3mL)，并剧烈搅拌，直至形成沉淀物。将所得固体过滤并通过制备型HPLC纯化。将所得溶剂浓缩以除去ACN，然后冻干，得到呈白色固体的化合物414(0.008g,0.014mmol,15.7％产率，98.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝570.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.45(s,1H),8.69-8.67(m 1H),8.38-8.36(m,1H),7.92(d,J＝2.8Hz,1H),7.87-7.85(m,1H),7.84-7.82(m,1H),7.78-7.74(m,1H),7.70(s,1H),7.48-7.46(m,1H),7.35-7.30(m,2H),6.85-6.74(m,2H),4.15(d,J＝6.0Hz,2H),3.58(s,3H),2.59(d,J＝4.4Hz,3H),1.76(s,6H)。
实施例193.本发明化合物的制备
表19中的下列化合物是利用实施例192中描述的一般合成方案由合适的羧酸开始合成的。
表19
Figure BDA0003284159120005941
实施例194.N-[2-[[4-[6-[(顺式)-2,6-二甲基四氢吡喃-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺的制备(化合物329)的制备
Figure BDA0003284159120005951
步骤1：(2-((4-(6-((顺式)-2,6-二甲基-3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120005952
向2-顺式-2,6-二甲基-3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.277g,1.16mmol)、(2-((4-(6-溴吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.400g,0.968mmol)于1,4-二噁烷(4mL)和H2O(1mL)的混合物中的溶液中加入K3PO4(0.411g,1.94mmol)、Pd(dtbpf)Cl2(0.063g,0.097mmol)。将混合物加热至60℃，并搅拌1小时。随后将反应混合物冷却至室温，并用水(10mL)稀释。将水层用乙酸乙酯(10mLx 3)萃取，并将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至1/1)纯化，得到呈白色固体的中间体C(0.400g,0.855mmol,88.3％产率，95.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝445.2；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.01-9.67(m,1H),7.85-7.79(m,2H),7.77-7.70(m,1H),7.34(d,J＝7.6Hz,1H),6.68(s,1H),5.22(s,1H),4.50(d,J＝4.0Hz,1H),4.11-4.03(m,2H),2.74-2.63(m,1H),2.47-2.31(m,1H),1.52(s,10H),1.41(d,J＝6.4Hz,6H)。
步骤2：(2-((4-(6-((顺式)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁基酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120005961
在N2气氛下向中间体C(0.050g,0.112mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中加入10％Pd/C。将悬浮液脱气并用H2(3x)吹扫。将混合物在25℃下在H2(15Psi)下搅拌12小时，随后过滤并浓缩，得到呈棕色油状物的中间体D(0.050g)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝447.2。
步骤3：氯化2-((4-(6-((顺式)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基-1-铵(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120005962
将中间体D(0.020g,0.045mmol)于4M HCl的1,4-二噁烷溶液(0.2mL)中的混合物在25℃下搅拌30分钟。随后将混合物浓缩，得到呈白色固体的中间体E(0.017g)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝347.1。
步骤4：N-[2-[[4-[6-[(顺式)-2,6-二甲基四氢吡喃-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物329)的制备
Figure BDA0003284159120005971
向中间体E(0.015g,0.039mmol)、1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸(0.010g,0.051mmol)于DMF(0.5mL)中的溶液中加入EDCI(0.015g,0.078mmol)、HOBt(0.011g,0.078mmol)和DIEA(0.041mL,0.235mmol)。将混合物搅拌1小时，然后用MeOH(1mL)稀释。将反应溶液通过反相制备型HPLC(流动相:[水(0.225％FA)-ACN]；B％：23％-53％)纯化，冻干后，得到呈白色固体的化合物329(0.010g,0.018mmol,46.9％产率，95.0％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝518.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71-8.63(m,1H),7.86-7.75(m,4H),7.37-7.29(m,1H),7.21(d,J＝7.2Hz,1H),6.77(d,J＝3.2Hz,1H),4.14(d,J＝5.6Hz,2H),3.61-3.56(m,5H),3.01(d,J＝12.0Hz,1H),1.87-1.81(m,2H),1.45-1.36(m,2H),1.16(d,J＝6.4Hz,6H)。
实施例195. 1-(3-甲基氧杂环丁-3-基)-N-[2-[[4-[6-(1-甲基吡唑-3-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物327)的制备
Figure BDA0003284159120005972
步骤1：N-[2-[[4-[6-(1-甲基吡唑-3-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120005981
向1-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡唑(0.242g,1.16mmol)和(2-((4-(6-溴吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.400g,0.968mmol)于1,4-二噁烷(4mL)和水(0.8mL)的混合物中的混合物中一次性加入Pd(dtbpf)Cl2(0.063g,0.097mmol)和KOAc(0.0285g,2.90mmol)。随后将混合物在75℃下搅拌。2小时后，将混合物冷却至室温，与等规模的另一批合并，并加入到水(10mL)中。将水层用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过反相柱纯化，得到呈白色固体的中间体C(0.300g,0.646mmol,66.8％产率，89.3％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝415.1。
步骤2：氯化2-((4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙-1-铵(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120005982
在25℃下向中间体C(0.300g,0.724mmol)于1,4-二噁烷(2mL)中的溶液中加入4MHCl的1,4-二噁烷溶液(5.71mL)。搅拌15分钟后，浓缩该溶液，得到呈黄色固体的中间体D(0.180g,0.513mmol,70.89％产率)，其不经进一步纯化用于下一步骤。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.09-12.54(m,1H),8.51(s,2H),8.04(s,1H),7.97-7.89(m,1H),7.88-7.81(m,3H),6.96(d,J＝2.4Hz,1H),3.99-3.90(m,5H)。
步骤3：1-(3-甲基氧杂环丁-3-基)-N-[2-[[4-[6-(1-甲基吡唑-3-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物327)的制备
Figure BDA0003284159120005991
向中间体D(0.080g,0.228mmol)、HOBt(0.046g,0.342mmol)、EDCI(0.066g,0.342mmol)和1-(3-甲基氧杂环丁-3-基)吡咯-3-羧酸(0.050g,0.274mmol)于DMF(4mL)中的溶液中加入DIEA(0.199mL,1.14mmol)。3小时后，将混合物与等规模的另一批合并，并加入到水(15mL)中。将混合物用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过反相HPLC纯化，冻干后，得到呈灰白色固体的化合物327(0.072g,0.151mmol,66.4％产率，99.7％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝478.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.49-12.19(m,1H),8.29-8.28(m,1H),7.97-7.87(m,2H),7.86-7.78(m,3H),7.57-7.56(m,1H),7.02-7.01(m,1H),6.95(d,J＝2.4Hz,1H),6.58-6.57(m,1H),4.84(d,J＝6.8Hz,2H),4.62(d,J＝6.8Hz,2H),4.12(d,J＝5.6Hz,2H),3.93(s,3H),1.79(s,3H)。
实施例196.N-[2-[[4-[6-(4-甲氧基-3-吡啶基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-(3-甲基氧杂环丁-3-基)吡咯-3-甲酰胺(化合物262)的制备
N-[2-[[4-[6-(4-甲氧基-3-吡啶基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-(3-甲基氧杂环丁-3-基)吡咯-3-甲酰胺是利用实施例195中描述的合成方案由合适的普通中间体((2-((4-(6-溴吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯)和相应的硼酸酯开始合成的。
LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝505.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.42(s,1H),9.19(s,1H),8.82(d,J＝6.8Hz,1H),8.30-8.24(m,1H),8.13(s,1H),8.09-7.98(m,3H),7.96-7.91(m,1H),7.72(d,J＝6.8Hz,1H),7.58-7.54(m,1H),7.03-7.00(m,1H),6.58-6.55(m,1H),4.84(d,J＝6.8Hz,2H),4.63(d,J＝6.8Hz,2H),4.16(s,3H),4.12(d,J＝5.6Hz,2H),1.79(s,3H)。
实施例197.N-(2-((4-(3-((3-甲基氧杂环丁-3-基)乙炔基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物361)的制备
Figure BDA0003284159120006001
向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(0.050g,0.103mmol)、CuI(0.002g,0.10mmol)、TEA(0.043mL,0.310mmol)于DMF(1mL)中的溶液中加入Pd(PPh3)2Cl2(0.007g,0.010mmol)和3-乙炔基-3-甲基-氧杂环丁烷(0.050g,0.0517mmol)。将混合物在100℃下搅拌2小时，随后冷却至室温，并用水(3mL)稀释，用乙酸乙酯(6mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(4mL x 2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过反相HPLC(0.1％NH4OH)纯化，得到呈棕色固体的化合物361(0.046g,0.090mmol,43.47％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝499.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝12.26-12.00(m,1H),8.69-8.68(m,1H),7.99(s,1H),7.90(d,J＝7.6Hz,1H),7.85(s,1H),7.75(s,1H),7.48-7.40(m,1H),7.40-7.35(m,1H),7.32-7.31(m,1H),6.77-6.76(m,1H),4.76(d,J＝5.6Hz,2H),4.45(d,J＝5.6Hz,2H),4.14(d,J＝5.6Hz,2H),3.57(s,3H),1.65(s,3H)。
实施例198.本发明化合物的制备
表20中的化合物是利用实施例197中描述的合成方案由合适的普通中间体(N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺)和相应的炔烃开始合成的。
表20
Figure BDA0003284159120006011
实施例199. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(6-(3-甲氧基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物362)的制备
Figure BDA0003284159120006021
步骤1：N-(2-((4-(6-溴吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(叔丁基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120006022
向1-叔丁基吡咯-3-羧酸(0.258g,1.54mmol)、EDCI(0.329g,1.72mmol)、HOBt(0.232g,1.72mmol)、DIEA(1.79mL,10.30mmol)于二氯甲烷(12mL)中的溶液中加入中间体A(0.600g,1.72mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时，然后浓缩。将所得油状物用水(60mL)稀释，并用乙酸乙酯(35mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL x 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将所得固体用MTBE(20mL)研磨，过滤，并将固体用额外的MTBE洗涤。将所得固体干燥，得到呈白色固体的中间体C(0.500g,1.06mmol,61.76％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝463.9。
步骤2：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(6-(3-甲氧基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物362)的制备
Figure BDA0003284159120006031
在恒定的N2(g)流下向中间体C(0.160g,0.346mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(0.024g,0.035mmol)、CuI(0.007g,0.035mmol)、TEA(0.145mL,1.04mmol)于DMF(3mL)中的混合物中加入3-甲氧基-3-甲基-丁-1-炔(0.085mL,1.73mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌。3小时后，将混合物冷却至环境温度，用二氯甲烷通过二氧化硅垫过滤并浓缩。将残余物通过反相HPLC(流动相：[水(0.05％氢氧化氨v/v)-ACN]；B％：38％-58％)纯化，冻干后，得到呈灰白色固体的化合物362(0.062g,0.124mmol,35.86％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝480.4；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.53-11.96(m,1H),8.16-8.13(m,1H),7.93-7.87(m,2H),7.81(s,1H),7.52-7.51(m,1H),7.48-7.44(m,1H),6.97-6.95(m,1H),6.49-6.47(m,1H),4.08(d,J＝5.6Hz,2H),3.37-3.35(m,3H),1.51-1.48(m,15H)。
实施例200. 1-叔丁基-N-[2-[[4-[6-(2-甲基三唑-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物382)的制备
Figure BDA0003284159120006032
步骤1：2-溴-6-(2H-三唑-4-基)吡啶(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120006041
在25℃下向6-溴吡啶-2-甲醛(5.00g,26.88mmol),NaN3(21.10g,32.26mmol)和硝基甲烷(2.46g,40.32mmol,2.18mL)于DMSO(60mL)中的溶液中分批加入AlCl3(0.358g,2.69mmol,146.90uL)。完成AlCl3的添加后，将混合物在70℃下搅拌。将反应物搅拌12小时，随后冷却至环境温度并用水(100mL)稀释。将混合物用乙酸乙酯(50mL x 3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(乙酸乙酯/石油醚＝0:1至1:1)纯化，得到呈黄色固体的中间体B(2.50g,11.11mmol,41.33％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝225.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.03-7.99(m,1H),7.91-7.76(m,2H),7.67-7.55(m,2H)。
步骤2：2-溴-6-(2-甲基三唑-4-基)吡啶(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120006042
在25℃下向中间体B(2.20g,9.78mmol)于DMF(20mL)中的溶液中分批加入NaH(0.587g,14.66mmol,60％纯度)。将混合物搅拌30分钟，然后加入MeI(0.730mL,11.73mmol)。在另外30分钟后，将反应混合物用水(30mL)稀释，并用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL x 3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(乙酸乙酯/石油醚＝0:1至1:3)纯化。收集合适的级分，得到呈白色固体的中间体C(1.20g,5.02mmol,51.35％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝239.1.；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16(s,1H),7.85(d,J＝7.6Hz,1H),7.63-7.58(m,1H),7.43(d,J＝8.0Hz,1H),4.27(s,3H)。
此外，还将2-溴-6-(1-甲基三唑-4-基)吡啶(0.700g,2.93mmol,29.95％产率)以白色固体形式单独分离。
步骤3：2-(1-乙氧基乙烯基)-6-(2-甲基三唑-4-基)吡啶(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120006051
将中间体C(1.10g,4.60mmol)、三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(4.66mL,13.80mmol),Pd(PPh3)2Cl2(0.323g,0.461mmol)于1,4-二噁烷(10mL)中的混合物在100℃下搅拌2小时。随后将反应混合物冷却至环境温度，用KF(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL x3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈棕色油状物的中间体E(1.20g)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝231.1。
步骤4：2-溴-1-[6-(2-甲基三唑-4-基)-2-吡啶基]乙烯酮(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120006052
将中间体E(1.10g,4.78mmol)、NBS(1.70g,9.55mmol)于THF(20mL)和H2O(1mL)中的混合物在25℃下搅拌。1小时后，将反应混合物用水(20mL)稀释，并用乙酸乙酯(20mL x3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱(乙酸乙酯/石油醚＝0:1至1:3)纯化，并浓缩得到呈黄色油状物的中间体F(1.00g,3.56mmol,74.47％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.20(s,1H),8.16-8.13(m,1H),8.06-8.03(m,1H),7.97-7.92(m,1H),4.95(s,2H),4.29(s,3H)。
步骤5：4-[6-(2-甲基三唑-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-胺(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120006061
将中间体F(0.900g,3.20mmol)、硫脲(0.268g,3.52mmol)于EtOH(10mL)中的混合物在80℃下搅拌。12小时后，将所得固体过滤并用EtOH洗涤，得到呈白色固体的中间体H(0.800g,3.10mmol,96.74％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝259.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.47(s,1H),8.05-7.99(m,1H),7.96-7.92(m,1H),7.88(d,J＝7.6Hz,1H),7.67(s,1H),4.26(s,3H)。
步骤6：N-[2-[[4-[6-(2-甲基三唑-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体J)的制备
Figure BDA0003284159120006062
将中间体H(0.200g,0.774mmol)、N-Boc-甘氨酸(0.271g,1.55mmol)、DIEA(0.405mL,2.32mmol)、HATU(0.589g,1.55mmol)于DMF(2mL)中的混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将所得固体用乙酸乙酯(5mL)研磨，搅拌，过滤并干燥，得到呈白色固体的中间体J(0.180g,0.433mmol,55.95％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝416.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.39(s,1H),8.04(s,1H),8.02-7.97(m,1H),7.91-7.89(m,1H),7.85-7.82(m,1H),7.21-7.17(m,1H),4.26(s,3H),3.89(d,J＝6.0Hz,2H),1.41(s,9H)。
步骤7：氯化2-((4-(6-(2-甲基-2H-1,2,3-三唑-4-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙-1-铵(中间体K)的制备
Figure BDA0003284159120006071
向N-[2-[[4-[6-(2-甲基三唑-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(0.180g,0.433mmol)于1,4-二噁烷(1mL)中的溶液中加入4M HCl的1,4-二噁烷溶液(1.08mL)。将反应混合物在25℃下搅拌12小时，随后浓缩，得到呈白色固体的中间体K(0.160g)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝316.1。
步骤8：1-叔丁基-N-[2-[[4-[6-(2-甲基三唑-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物382)的制备
Figure BDA0003284159120006072
将中间体K(0.160g,0.455mmol)、1-叔丁基吡咯-3-羧酸(0.114g,0.682mmol)、DIEA(0.396mL，2.27mmol)、EDCI(0.174g,0.910mmol)和HOBt(0.123g,0.910mmol)于DMF(2mL)中的混合物在25℃下搅拌12小时。将反应混合物随后用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL x 3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将所得固体用乙酸乙酯(5mL)研磨，过滤，干燥，得到呈白色固体的化合物382(0.103g,0.216mmol,47.46％产率，97.33％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝465.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.46-12.24(m,1H),8.39(s,1H),8.22-8.18(m,1H),8.03(s,1H),8.02-7.96(m,1H),7.94-7.89(m,1H),7.85-7.82(m,1H),7.54-7.52(m,1H),6.99-6.97(m,1H),6.50-6.48(m,1H),4.26(s,3H),4.12(d,J＝5.6Hz,2H),1.50(s,9H)。
实施例201.本发明化合物的制备
表21中的下列化合物是从使用相应的α-溴-酮或α-氯-酮、氨基酸和杂环羧酸开始合成的，并且如果需要，使用实施例200中描述的合成方案进行SFC分离。
表21
Figure BDA0003284159120006081
Figure BDA0003284159120006091
Figure BDA0003284159120006101
Figure BDA0003284159120006111
实施例202.本发明化合物的制备
下面表22中的化合物是遵循下面方案10，利用实施例10中描述的合成方案，由合适的普通中间体([N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯])开始合成的。
方案10：
Figure BDA0003284159120006112
表22
Figure BDA0003284159120006121
实施例203.本发明化合物的制备
下表23中的下列化合物是按照下面方案11所示的合成路线，由合适的起始6元杂环羧酸、胺和5元杂环羧酸开始合成的。在适当的情况下，将SFC纯化用于分离对映异构体。
方案11：
Figure BDA0003284159120006122
表23
Figure BDA0003284159120006131
实施例204.本发明化合物的制备
表24中的下列化合物是利用实施例61中描述的一般合成方案，由合适的普通中间体(4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)噻唑-2-胺)、杂芳基卤化物、N-Boc氨基酸和合适的杂环羧酸开始合成的。
表24
Figure BDA0003284159120006132
Figure BDA0003284159120006141
实施例205. 1-(2,2-二氟环丙基)-1H-吡咯-3-羧酸的制备
Figure BDA0003284159120006142
步骤1：1-乙烯基-1H-吡咯-3-羧酸甲酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120006143
在25℃下向到1H-吡咯-3-羧酸甲酯(2.00g,15.98mmol)和三氟(乙烯基)硼酸钾(4.28g,31.97mmol)于1,2-二氯乙烷(60mL)中的溶液中加入2-(2-吡啶基)吡啶(2.50g,15.98mmol)和乙酸铜(II)(2.90g,15.98mmol)、Na2CO3(3.39g,31.97mmol)。将悬浮液经三个循环的脱气和利用O2(g)的吹扫。将反应混合物在70℃下在O2(g)气氛下搅拌。1小时后，将混合物冷却至室温，并用水(50mL)洗涤。将所得水层用乙酸乙酯(3x70mL)萃取，并将有机层浓缩。将所得油状物通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至1/1)纯化，并浓缩，得到呈黄色油状物的中间体C(1.2g,7.94mmol,49.67％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝152.1；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.49(d,J＝1.6Hz,1H),6.89-6.85(m,1H),6.83-6.77(m,1H),6.65-6.64(m,1H),5.26-5.21(m,1H),4.83-4.80(m,1H),3.82(s,3H)。
步骤2：1-(2,2-二氟环丙基)-1H-吡咯-3-羧酸甲酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120006151
向中间体C(1.20g,7.94mmol)和NaF(0.033g,0.793mmol)于苯甲酸甲酯(12mL)中的溶液中滴加2,2-二氟-2-氟磺酰基乙酸三甲基甲硅烷酯(7.82mL,39.69mmol)。随后将混合物加热至105℃。2小时后，将混合物冷却至室温，并用水(10mL)洗涤。将所得水层用乙酸乙酯(3x30mL)萃取并浓缩。将所得油状物通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至1/1)纯化，并浓缩，得到呈黄色油状物的中间体E(0.150g,0.746mmol,9.39％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝202.0；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.34(m,1H),7.35(s,1H),6.68(d,J＝2.4Hz,1H),6.61-6.60(m,1H),3.93-3.85(m,1H),3.81(s,3H),2.11-1.99(m,1H),1.98-1.87(m,1H)。
步骤3：1-(2,2-二氟环丙基)-1H-吡咯-3-羧酸(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120006152
向中间体D(0.100g,0.497mmol)于MeOH(1mL)和H2O(1mL)中的溶液中加入LiOH·H2O(0.042g,0.994mmol)，并将混合物加热至50℃。12小时后，将混合物冷却至室温，并用1M.HCl水溶液(0.50mL)将混合物酸化至pH 5～6。将所得酸性水层用乙酸乙酯萃取三次并浓缩，得到呈黄色油状物的中间体F(120mg,粗品)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝188.0。
实施例206. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(6-(顺式-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)-5-氟噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物520)的制备
Figure BDA0003284159120006161
步骤1：(2-((5-氟-4-(6-氟吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120006162
在0℃下向N-[2-[[4-(6-氟-2-吡啶基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.00g,5.68mmol)于CH3CN(20mL)中的混合物中加入
Figure BDA0003284159120006164
(1.81g,5.11mmol)。24小时后，将混合物用水(50mL)稀释，并用乙酸乙酯(50mL)萃取。将有机层分离并蒸发。将固体通过反相HPLC(0.1％FA条件)纯化。将溶液浓缩，得到呈白色固体的中间体B(0.560g,1.51mmol,26.64％产率，100％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝371.0；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.87-7.81(m,1H),7.68-7.66(m,1H),6.87-6.84(m,1H),4.14(s,2H),1.54-1.42(m,9H)。
步骤2：(2-((4-(6-(顺式-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)-5-氟噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120006163
在20℃下向中间体B(0.350g,0.945mmol)和顺式-2,6-二甲基吗啉(0.218g,1.89mmol)于DMSO(4mL)中的混合物中加入K2CO3(0.392g,2.83mmol)，并将混合物在80℃下搅拌。2小时后，将混合物冷却至室温，并与相同反应规模的另一批合并。向混合物中加入水(10mL)，并将水层用乙酸乙酯(3x10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将所得油状物通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝3/1至1/1)纯化，得到呈黄色固体的中间体D(0.110g,0.163mmol,17.25％产率，69％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝466.2。
步骤3：甲酸2-((4-(6-(顺式-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)-5-氟噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙-1-铵(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120006171
向中间体D(0.110g,0.236mmol)的混合物中加入4M HCl的1,4-二噁烷溶液(2mL)。将混合物在20℃下搅拌。2小时后，将混合物浓缩得到粗产物。将粗产物通过反相HPLC(0.1％FA条件)纯化。将溶液冻干，得到呈白色固体的中间体E(0.025g,0.061mmol,25.72％产率，100％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝366.1。
步骤4：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(6-(顺式-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)-5-氟噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物520)的制备
Figure BDA0003284159120006181
向1-叔丁基吡咯-3-羧酸(0.011g,0.061mmol)于DMF(1mL)中的混合物中加入EDCI(0.023g,0.122mmol)、HOBt(-0.016g,0.122mmol)、DIPEA(0.053mL,0.304mmol)。10分钟后，加入中间体E(0.025g,0.061mmol)。将混合物在20℃下搅拌15小时，然后加入水(5mL)。将反应混合物用乙酸乙酯(3x5mL)萃取，将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将固体通过制备型HPLC(流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：45％-75％)纯化，将溶液冻干，得到呈白色固体的化合物520(0.002g,0.0046mmol,7.60％产率，99％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝515.1；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ7.64-7.56(m,2H),7.20(d,J＝7.6Hz,1H),6.98-6.93(m,1H),6.71(d,J＝8.4Hz,1H),6.57-6.56(m,1H),4.25(s,1H),4.22(s,1H),4.20(s,2H),3.78-3.66(m,2H),2.50-2.44(m,2H),1.57(s,9H),1.24-1.23(m,6H)。
实施例207.N-(2-((4-(6-(顺式-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-((S)-3-甲基四氢呋喃-3-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺和N-(2-((4-(6-(顺式-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-((R)-3-甲基四氢呋喃-3-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物491和490)的制备
Figure BDA0003284159120006191
步骤1：中间体6N-[2-[[4-[6-[顺式-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-(3-甲基四氢呋喃-3-基)吡咯-3-甲酰胺(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120006192
在25℃下向中间体A(0.200g,1.02mmol)和中间体B(0.392g,1.13mmol)于DMF(4mL)中的溶液加入EDCI(0.393g,2.05mmol)、HOBt(0.277g,2.05mmol)、DIEA(0.36mL,2.05mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时，然后加入水(5mL)。将所得混合物用乙酸乙酯(3x5mL)萃取，并将合并的有机层浓缩。将残余物通过制备型HPLC(流动相:[水(0.225％FA)-ACN]；B％：32％-65％)纯化，并冻干，得到呈白色固体的中间体C(0.250g,0.429mmol,41.86％产率，90％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝525.2。
步骤2：N-(2-((4-(6-((顺式-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-((S)-3-甲基四氢呋喃-3-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺和N-(2-((4-(6-(顺式-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-((R)-3-甲基四氢呋喃-3-基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物491和490)的制备
Figure BDA0003284159120006201
将中间体C(0.250g,0.429mmol)通过SFC分离，得到两个峰。将第一峰浓缩并冻干，得到呈灰白色固体的化合物491(0.080g,0.145mmol,30.40％产率，95％纯度)(Rt＝2.447分钟)。将第二峰浓缩并冻干，得到呈灰白色固体的化合物490(0.080g,0.145mmol,30.40％产率，95％纯度)。
化合物491:LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝525.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.29(s,1H),8.23-8.20(m,1H),7.76(s,1H),7.68-7.59(m,1H),7.53-7.52(m,1H),7.26(d,J＝7.2Hz,1H),6.97-6.96(m,1H),6.80(d,J＝8.8Hz,1H),6.51-6.50(m,1H),4.26(d,J＝12.8Hz,2H),4.09(d,J＝6.0Hz,2H),4.00(d,J＝8.8Hz,1H),3.95-3.85(m,2H),3.76(d,J＝9.2Hz,1H),3.69-3.57(m,2H),2.46-2.37(m,3H),2.29-2.15(m,1H),1.59(s,3H),1.19(d,J＝6.0Hz,6H)。
化合物490：LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝525.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.30(s,1H),8.28-8.18(m,1H),7.76(s,1H),7.64-7.60(m,1H),7.53-7.52(m,1H),7.26(d,J＝7.2Hz,1H),6.97-6.96(m,1H),6.80(d,J＝8.4Hz,1H),6.51-6.50(m,1H),4.26(d,J＝11.6Hz,2H),4.09(d,J＝6.0Hz,2H),4.00(d,J＝9.2Hz,1H),3.94-3.87(m,2H),3.76(d,J＝8.4Hz,1H),3.69-3.58(m,2H),2.46-2.37(m,3H),2.29-2.17(m,1H),1.59(s,3H),1.19(d,J＝6.0Hz,6H)。
实施例208.本发明化合物的制备
表25中的化合物是利用实施例207(化合物491和490)中描述的合成方案，由合适的杂环羧酸和相应的伯胺盐酸盐开始合成的。
表25
Figure BDA0003284159120006211
实施例209.本发明化合物的制备
下面表26中的下列化合物是利用下面方案12中所示的一般合成方案，由合适的溴-吡啶或杂芳基酮、氨基酸和杂环羧酸合成的。在适当的情况下，将SFC纯化用于分离对映异构体。
方案12：
Figure BDA0003284159120006221
表26
Figure BDA0003284159120006222
Figure BDA0003284159120006231
Figure BDA0003284159120006241
实施例210.N-(2-((3'-(顺式-2,6-二甲基吗啉代)-2-氟-[1,1’-联苯基]-3-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物477)的制备
Figure BDA0003284159120006242
步骤1：(2-((3-溴-2-氟苯基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120006251
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸(553.17mg,3.16mmol)于DCM(6mL)中的溶液中加入HATU(1.40g,3.68mmol)和DIEA(1.02g,7.89mmol,1.38mL)。将混合物在25℃下搅拌1小时，直至混合物的颜色变成棕色。然后向混合物中加入3-溴-2-氟-苯胺(500.00mg,2.63mmol)，然后将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物与另一批合并。将合并的反应混合物用水(15mL x 1)洗涤，并用EtOAc(15mL x 3)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到残余物。将残余物通过硅胶柱色谱(石油醚:乙酸乙酯＝1:0-3:1)纯化，得到呈无色油状物的中间体C(580mg,1.37mmol,26.03％产率，82％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M-99]+＝247.0。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.76-8.72(d,J＝2.0Hz,1H),8.21(s,2H),8.14-8.04(m,2H),7.81(s,1H),7.70-7.67(m,1H),7.64-7.56(d,J＝8.0Hz,1H),7.22-7.17(d,J＝6.0Hz,1H),4.52-4.45(d,J＝6.0Hz,2H),3.92-3.84(m,2H),3.17(s,3H),2.72-2.68(m,2H),2.46-2.43(m,4H),1.51(s,6H),1.41(s,9H)ppm。
步骤2：(2-((3'-(顺式-2,6-二甲基吗啉代)-2-氟-[1,1’-联苯基]-3-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120006252
在25℃下在N2下向中间体C(537.91mg,1.28mmol)和顺式-2,6-二甲基-4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]吗啉(270mg,851.12umol)于二噁烷(6mL)和H2O(0.6mL)中的溶液中加入[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(55.47mg,85.11umol)和K3PO4(632.32mg,2.98mmol)。然后将反应混合物在80℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(15mL x 1)洗涤并用EtOAc(20mL x 3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到残余物。将残余物通过硅胶柱色谱(石油醚:乙酸乙酯＝1:0-5:1)得到呈无色油状物的中间体E(500mg,粗品)。
LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝458.2。
步骤3：2-氨基-N-(3’-(顺式-2,6-二甲基吗啉代)-2-氟-[1,1’-联苯基]-3-基)乙酰胺(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120006261
在25℃下向中间体E(440mg,961.67umol)于CH2Cl2(10mL)中的溶液中加入CF3COOH(4.62g,40.52mmol,3.00mL)。然后将反应混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物与另一批合并。将合并的有机层在0℃下用饱和NaHCO3(10mL)和NaHCO3固体猝灭至pH＝8-9。然后将混合物用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈棕色油状物的中间体F(240mg,598.96umol,62.28％产率，89.2％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝358.1。
步骤4：N-(2-((3'-(顺式-2,6-二甲基吗啉代)-2-氟-[1,1’-联苯基]-3-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物477)的制备
Figure BDA0003284159120006271
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸(116.45mg,615.52umol)于DMF(2mL)中的溶液中加入HATU(297.87mg,783.39umol)和DIEA(216.96mg,1.68mmol,292.40uL)，然后将混合物在25℃下搅拌20分钟。然后向混合物中加入中间体6(200mg,499.13umol)。将反应混合物在25℃下搅拌4小时。将反应混合物与另一批合并。将合并的有机层过滤。将滤液通过制备型HPLC(流动相：[水(10mM NH4HCO3)-ACN]；B％：33％-63％)纯化，以得到于MeCN/H2O中的产物溶液。然后将溶液冻干，得到呈白色固体的化合物477(120mg,227.02umol,45.48％产率，100％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝529.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.87(s,1H),8.65-8.62(d,J＝6.0Hz,1H),7.92-7.84(m,2H),7.33-7.30(m,2H),7.24-7.22(m,2H),7.05-6.90(m,2H),6.93-6.85(m,1H),6.79-6.78(m,1H),4.11-4.10(d,J＝6.0Hz,2H),3.73-3.68(m,2H),3.66-3.63(d,J＝120Hz,2H),3.57(s,1H),2.31-2.26(m,2H),1.17-1.16(d,J＝6.0Hz,6H)。
实施例211. 1-(3-甲基氧杂环丁-3-基)-N-[2-[[4-[6-(6-甲基吡嗪-2-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物523)的制备
1-(3-甲基氧杂环丁-3-基)-N-[2-[[4-[6-(6-甲基吡嗪-2-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]吡咯-3-甲酰胺是利用实施例82中描述的合成方案，由N-[2-[[4-(6-溴-2-吡啶基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯以及相应的锡烷和杂环羧酸开始合成的。
表27
Figure BDA0003284159120006281
实施例212. 1-(双环[1.1.1]戊-1-基)-1H-1,2,4-三唑-3-羧酸的制备
Figure BDA0003284159120006282
步骤1：2-(2-(双环[1.1.1]戊-1-基)肼基)-2-亚氨基乙酸乙酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120006283
向3-双环[1.1.1]戊烷基肼二盐酸盐(1.00g,7.43mmol)和2-乙氧基-2-亚氨基乙酸乙酯(1.19g,8.17mmol)于MeOH(8mL)中的冷却(0℃)混合物中加入NaHCO3(1.87g,22.29mmol)。搅拌1小时后，将混合物过滤，得到中间体C(1.20g)于MeOH中的溶液，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝198.1。
步骤2：1-(双环[1.1.1]戊-1-基)-1H-1,2,4-三唑-3-羧酸乙酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120006284
将中间体C(1.20g,6.08mmol)于MeOH中的溶液和原甲酸三甲酯(6.67mL,60.84mmol)于甲苯(8mL)中的溶液在100℃下搅拌。1小时后，将混合物冷却至室温并浓缩。向所得油状物中加入水(10mL)并用二氯甲烷(3x10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过反相HPLC(0.1％FA条件)纯化。收集合适的级分并浓缩，直至除去CH3CN。将水溶液用二氯甲烷(3x10mL)萃取，并将合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到呈棕色固体的中间体D(0.300g,1.30mmol,21.41％产率，90％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝208.1；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(s,1H),4.52-4.43(m,2H),2.76-2.70(m,1H),2.40(s,6H),1.46-1.41(m,3H)。
步骤3：1-(双环[1.1.1]戊-1-基)-1H-1,2,4-三唑-3-羧酸(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120006291
将中间体D(0.300g,1.45mmol)、LiOH·H2O(0.304g,7.24mmol)于THF(3mL)和水(0.5mL)中的混合物在室温下搅拌。15小时后，将混合物用乙酸乙酯(3x5mL)萃取，并将水层用1M HCl水溶液酸化(pH 3)。将酸性水层用乙酸乙酯(3x5mL)萃取，并将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到呈白色固体的中间体E(0.200g)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝180.1。
实施例213.(S)-N-(1-((4-(3-(4-(二氟甲基)哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-3-甲氧基-1-氧代丙-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物557)的制备
Figure BDA0003284159120006301
步骤1：N-[4-[3-[4-(二氟甲基)-1-哌啶基]苯基]噻唑-2-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120006302
在N2(g)下向N-[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基甲酸叔丁酯(0.500g,1.41mmol)、4-(二氟甲基)哌啶盐酸盐(0.483g,2.81mmol)和t-BuXPhos Pd G3(0.119g,0.150mmol)于1,4-二噁烷(5mL)中的溶液中加入t-BuONa(0.541g,5.63mmol)。将混合物在70℃下搅拌。3小时后，将反应混合物冷却至室温，并用水(50mL)稀释。将两相混合物用乙酸乙酯(2x50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝6:1)纯化，并在减压下浓缩，得到呈浅黄色固体的中间体C(0.250g,0.534mmol,37.95％产率，87.50％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝410.1。
步骤2：4-[3-[4-(二氟甲基)-1-哌啶基]苯基]噻唑-2-胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120006311
向中间体C(0.240g,0.586mmol)于二氯甲烷(2mL)中的溶液中加入TFA(0.20mL,2.70mmol)。将混合物在30℃下搅拌2小时，并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物用饱和NaHCO3水溶液(50mL)稀释，并用乙酸乙酯(2x50mL)萃取，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈浅黄色油状物的中间体8(0.180g)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤3：N-[(1S)-2-[[4-[3-[4-(二氟甲基)-1-哌啶基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-1-(甲氧基甲基)-2-氧代乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120006312
向中间体D(0.180g,0.582mmol)和(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲氧基丙酸(0.153g,0.698mmol)于二氯甲烷(6mL)中的溶液中加入EEDQ(0.216g,0.873mmol)。将混合物在30℃下搅拌2小时，并将反应混合物在减压下浓缩得到残余物。将残余物通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝2:1)纯化，并在减压下浓缩，得到呈浅黄色油状物的中间体F(0.220g,0.427mmol,73.32％产率，99％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝511.2。
步骤4：氯化(S)-1-((4-(3-(4-(二氟甲基)哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-3-甲氧基-1-氧代丙-2-铵(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120006321
向中间体F(0.220g,0.431mmol)于1,4-二噁烷中的溶液中加入4M HCl的1,4-二噁烷溶液(5mL)。搅拌2小时后，将反应混合物在减压下浓缩，得到呈浅黄色油状物的中间体G(0.200g)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝410.9。
步骤5：(S)-N-(1-((4-(3-(4-(二氟甲基)哌啶-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-3-甲氧基-1-氧代丙-2-基)-1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物557)的制备
Figure BDA0003284159120006322
向中间体11(0.200g,0.447mmol)、1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸(0.102g,0.537mmol)、EDCI(0.129g,0.671mmol)和DIEA(0.40mL,2.24mmol)于二氯甲烷(2mL)中的溶液中加入HOBt(0.091g,0.671mmol)。将混合物在30℃下搅拌2小时，随后在减压下浓缩所得残余物。将残余物通过反相(FA)纯化，并将适当的级分在减压下浓缩以除去MeCN，并冻干，得到呈白色固体的化合物557(0.123g,0.209mmol,46.80％产率，99.11％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝582.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.51(s,1H),8.52(d,J＝7.2Hz,1H),8.05-7.90(m,1H),7.76-7.60(m,2H),7.49(d,J＝2.0Hz,1H),7.41-7.26(m,2H),7.23-7.04(m,1H),6.79-6.78(m,1H),6.22-5.81(m,1H),4.94-4.91(m,1H),3.82-3.76(m,2H),3.73-3.67(m,2H),3.56(s,3H),3.31(s,3H),3.07-2.89(m,2H),2.12-2.03(m,1H),1.85(d,J＝12.4Hz,2H),1.75-1.49(m,2H)；ee％＝100％。
实施例214.本发明化合物的制备
下表28中的化合物是按照实施例213(化合物557)中描述的合成方案，由合适的起始材料N-[4-(3-溴苯基)-5-氟-噻唑-2-基]氨基甲酸叔丁酯和胺开始合成的。
表28
Figure BDA0003284159120006331
实施例215. 1-(1-氰基环丙基)-N-[2-[[4-[3-(环丙氧基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物554)的制备
Figure BDA0003284159120006332
步骤1：1-[3-(环丙氧基)苯基]乙烯酮(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120006341
向1-(3-羟基苯基)乙酮(20.00g,146.90mmol)、NaI(3.30g,22.03mmol)、溴环丙烷(25.89mL,323.18mmol)于DMSO(50mL)中的溶液中加入Cs2CO3(119.66g,367.25mmol)。将混合物在140℃下搅拌。12小时后，将混合物冷却至室温，并用水(600mL)稀释。将混合物用MTBE(200mL)萃取，并将合并的有机层蒸发。将残余物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝30/1至10/1，SiO2)纯化，并蒸发，得到呈黄色油状物的中间体3(13.00g,67.87mmol,46.20％产率，92％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝177.1。
步骤2：4-[3-(环丙氧基)苯基]噻唑-2-胺(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120006342
向中间体C(13.00g,73.78mmol)和硫脲(11.23g,147.55mmol)于EtOH(130mL)中的溶液中加入I2(18.72g,73.78mmol,14.86mL)。将反应混合物在80℃下搅拌10小时，然后冷却至室温，并通过加入饱和Na2S2O3水溶液(200mL)猝灭。将含水混合物用乙酸乙酯(3x200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到油状物。将油状物通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-60％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，并在减压下浓缩，得到呈红色固体的中间体E(12.00g,49.07mmol,66.52％产率，95％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝232.9；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.51-7.45(m,1H),7.43-7.36(m,1H),7.29-7.27(m,1H),7.05(s,2H),7.01(s,1H),6.95-6.91(m,1H),3.94-3.81(m,1H),0.89-0.55(m,4H)。
步骤3：N-[2-[[4-[3-(环丙氧基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120006351
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸(0.452g,2.58mmol)于二氯甲烷(5mL)中的混合物中加入HATU(1.23g,3.23mmol)和N,N-二异丙基乙胺(1.12mL,6.46mmol)。向混合物中加入中间体E(0.500g,2.15mmol)，并在30℃下搅拌。2小时后，将混合物与另外两批(或等规模)一起倒入水中(50mL)，并用DCM(3x15mL)萃取。将合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液(3x10mL)、饱和柠檬酸水溶液(3x10mL)、盐水(10mL*2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈黄色固体的中间体G(1.50g)，其不经进一步纯化即直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝390.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.27(s,1H),7.64(s,1H),7.59-7.55(m,1H),7.50(d,J＝7.6Hz,1H),7.36-7.32(m,1H),7.18-7.15(m,1H),7.03-6.98(m,1H),3.93-3.77(m,3H),1.45-1.38(m,9H),0.85-0.77(m,2H),0.72-0.65(m,2H)。
步骤4：2-((4-(3-环丙氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙-1-氨基三氟乙酸盐(中间体I)的制备
Figure BDA0003284159120006352
将中间体G(1.50g,3.85mmol)和TFA(3mL)于二氯甲烷(10mL)中的混合物在25℃下搅拌2小时。随后将混合物用二氯甲烷(30mL)稀释，然后在真空中浓缩。将该操作又重复了三次。将所得油状物用MTBE(10mL)研磨，得到白色固体。将固体过滤并在减压下干燥，得到呈白色固体的中间体H(1.20g)，其不经进一步纯化直接用于下一步。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝290.2。
步骤5：1-(1-氰基环丙基)-N-[2-[[4-[3-(环丙氧基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物554)的制备
Figure BDA0003284159120006361
向1-(1-氰基环丙基)吡咯-3-羧酸(0.131g,0.744mmol)于二氯甲烷(3mL)中的混合物中加入EDCI(0.178g,0.930mmol)、HOBt(0.126g,0.930mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.324mL,1.86mmol)。向混合物中加入中间体H(0.250g,0.620mmol)，并在30℃下搅拌2小时。将混合物倒入水(30mL)中，并用二氯甲烷(3x10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过反相快速(FA(0.1％)条件)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物554(127.33mg,284.53umol,45.91％产率，100％纯度)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝448.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.35(s,1H),8.38-8.35(m,1H),7.64(s,1H),7.60-7.59(m,2H),7.50(d,J＝7.6Hz,1H),7.37-7.33(m,1H),7.08-7.07(m,1H),7.02-6.99(m,1H),6.56-6.55(m,1H),4.11(d,J＝5.6Hz,2H),3.91-3.86(m,1H),1.86-1.79(m,2H),1.79-1.72(m,2H),0.84-0.78(m,2H),0.72-0.66(m,2H)。
实施例216.本发明化合物的制备
下表29中的化合物是按照实施例215(化合物554)中描述的合成方案，由合适的芳基酮、N-Boc氨基酸和杂环羧酸开始合成的。
表29
Figure BDA0003284159120006371
实施例217.本发明化合物的制备
下表30中的化合物是利用实施例109中描述的合成方案，从2-氨基-N-(4-溴噻唑-2-基)乙酰胺、合适的杂环羧酸和硼酸酯开始合成的。在适当的情况下，将SFC纯化用于分离对映异构体。
表30
Figure BDA0003284159120006372
Figure BDA0003284159120006381
实施例218.本发明化合物的制备
表31中的化合物是利用实施例32中描述的合成方案，由合适的普通中间体(4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯和相应的氨基酸和杂环羧酸开始合成的。
表31
Figure BDA0003284159120006382
实施例219.本发明化合物的制备
表32中的下列化合物是利用实施例61中描述的一般合成方案，由合适的普通中间体4-(3-溴-5-氟-苯基)噻唑-2-胺、杂芳基卤化物、N-Boc氨基酸和合适的杂环羧酸开始合成的。
表32.
Figure BDA0003284159120006391
实施例220.本发明化合物的制备
表33中的下列化合物是利用实施例5中描述的一般合成方案，由适当的普通中间体4-苯基噻唑-2-胺、N-Boc氨基酸和适当的杂环羧酸开始合成的。
表33.
Figure BDA0003284159120006392
实施例221.本发明化合物的制备
表34中的下列化合物是利用实施例58或实施例59中描述的一般合成方案，由合适的普通中间体4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺、硼酸酯或三氟硼酸酯、N-Boc氨基酸和合适的杂环羧酸开始合成的。
表34.
Figure BDA0003284159120006401
实施例222. 3-氧杂双环[4.1.0]庚-6-基三氟硼酸钾的制备
Figure BDA0003284159120006402
3-氧杂双环[4.1.0]庚-6-基三氟硼酸钾是根据Hobbs等人在J.Med.Chem.62(15):6972-6984(2019)中所描述的方案合成的。1H NMR(400MHz,D2O)δ3.97-3.82(m,2H),3.56-3.44(m,1H),3.24-3.20(m,1H),1.80-1.77(m,1H),1.60-1.46(m,1H),0.80-0.70(m,1H),0.51-0.48(m,1H),0.12(s,1H)。
实施例223.本发明化合物的制备
表35中的下列化合物是利用实施例79中描述的一般合成方案，由合适的普通中间体N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯、硼酸酯或三氟硼酸酯和合适的杂环羧酸开始合成的。
表35.
Figure BDA0003284159120006411
实施例224. 1-叔丁基-N-[2-[[4-[6-[(3S,4R)-3-氟-4-甲基-1-哌啶基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物702)的制备
Figure BDA0003284159120006412
将N-[2-[[4-(6-溴-2-吡啶基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-叔丁基-吡咯-3-甲酰胺(0.040g,0.087mmol)、(3S,4R)-3-氟-4-甲基-哌啶盐酸盐(0.040g,0.260mmol)、[2-(2-氨基苯基)苯基]-甲基磺酰基氧基-钯；二叔丁基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷(0.007g,0.009mmol)和t-BuONa(0.037g,0.389mmol)于1,4-二噁烷(0.4mL)中的混合物脱气并用N2(g)吹扫(3次)。将混合物在60℃下搅拌。2小时后，将反应混合物冷却至室温，并通过加入水(1mL)猝灭。将两相混合物用乙酸乙酯(3x2mL)萃取。将合并的有机层浓缩。将油状物最初通过制备型TLC(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)纯化，然后随后通过制备型HPLC(FA(0.1％)条件)纯化。将洗脱液冻干，得到呈灰白色固体的化合物702(0.002g,0.004mmol,5.02％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝499.4；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.69(s,1H),7.57-7.49(m,2H),7.32(d,J＝7.6Hz,1H),6.83(m,1H),6.62(d,J＝8.4Hz,1H),6.47-6.41(m,1H),4.77-4.62(m,2H),4.37-4.32(m,2H),4.31-4.09(m,2H),2.92-2.82(m,2H),1.86-1.82(m,1H),1.55(s,9H),1.39-1.32(m,1H),1.12(d,J＝6.0Hz,3H)。
实施例225.本发明化合物的制备
表36中的下列化合物是利用实施例224(化合物702)中描述的一般合成方案，由适当的普通中间体([1-叔丁基-N-[2-[[4-(6-溴-2-吡啶基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]吡咯-3-甲酰胺])开始合成的。
表36.
Figure BDA0003284159120006421
Figure BDA0003284159120006431
实施例226. 1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(5-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物143)的制备
Figure BDA0003284159120006432
步骤1：2-溴-5-甲基-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120006433
将3-溴-1H-吡唑-5-羧酸(1.00g,5.24mmol)、2-氯-N-甲基-乙胺盐酸盐(1.02g,7.85mmol)、N,N-二异丙基乙胺(4.56mL,26.18mmol)、EDCI(1.51g,7.85mmol)和HOBt(1.06g,7.85mmol)于DMF(10mL)中的混合物脱气并用N2(g)吹扫(3次)。将混合物在25℃下搅拌12小时，然后用水(10mL)稀释。将混合物的含水混合物用乙酸乙酯(3x10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3x10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将油状物通过反相(FA(0.1％)条件)纯化并冻干，得到呈黄色固体的中间体C(0.510g,2.22mmol,42.34％产率)。LCMS(ESI)m/z:[81BrM+H]+＝232.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.84(s,1H),4.41-4.33(m,2H),3.80-3.76(m,2H),3.32(s,3H)。
步骤2：2-(3-(2-氨基噻唑-4-基)苯基)-5-甲基-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120006441
中间体C(0.500g,2.17mmol)、中间体D(0.788g,2.61mmol),K3PO4(1.38g,6.52mmol)、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(0.142g,0.217mmol)于1,4-二噁烷(5mL)和水(0.5mL)的混合物中的混合物。将反应混合物经历三个循环的脱气和利用N2(g)的吹扫，随后在80℃下搅拌。1小时后，将反应混合物冷却至室温，并通过加入水(10mL)猝灭。将两相混合物用乙酸乙酯(3x10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3x10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将油状物通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝3/1至1/3)纯化，并在真空中浓缩，得到呈黄色固体的中间体E(0.380g,1.17mmol,53.74％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝326.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.34(s,1H),7.79-7.69(m,2H),7.43-7.39(m,1H),7.26(s,1H),7.18-7.05(m,3H),4.48-4.40(m,2H),3.87-3.78(m,2H),3.04(s,3H)。
步骤3：4-(3-(5-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)苯基)噻唑-2-胺(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120006451
向中间体E(0.100g,0.307mmol)于THF(1mL)中的冷却(0℃)溶液中加入LiAlH4(0.023g,0.615mmol)。1小时后，将反应混合物通过加入30％NaOH(0.1mL)猝灭，并过滤出所得固体。将滤液在减压下浓缩，得到呈黄色固体的中间体F(0.100克)，直不经进一步纯化即直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝312.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.26-8.24(m,1H),7.73-7.60(m,2H),7.37(m,1H),7.09(d,J＝13.4Hz,3H),6.48(s,1H),4.15-4.13(m,2H),3.61(s,2H),2.88-2.84(m,2H),2.41(s,3H)。
步骤4：(2-((4-(3-(5-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120006452
将中间体F(0.080g,0.257mmol)、2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸(0.540g,3.08mmol)和EDCI(0.246g,1.28mmol)于吡啶(1mL)中的混合物在60℃下搅拌。24小时后，将混合物冷却至室温并倒入水(20mL)中。将两相溶液用乙酸乙酯(3x10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3x10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过反相(FA(0.1％)条件)纯化并冻干，得到呈黄色固体的中间体H(0.090g,0.169mmol,65.73％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝469.2；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.93-9.70(m,1H),8.18-8.13(m,1H),7.70-7.62(m,2H),7.39-7.32(m,1H),7.17-7.13(m,1H),6.32-6.19(m,1H),5.20-4.96(m,1H),4.23-4.19(m,2H),4.03-3.93(m,2H),3.67-3.58(m,2H),2.91-2.83(m,2H),2.48-2.41(m,3H),1.42(s,9H)。
步骤5：氯化2-((4-(3-(5-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基-1-铵(中间体I)的制备
Figure BDA0003284159120006461
向中间体H(0.090g,0.192mmol)于乙酸乙酯中的溶液中加入4M HCl的EtOAc溶液(1.5mL)。将反应混合物搅拌30分钟，并随后在真空中浓缩，得到呈浅黄色固体的中间体H(0.085g)，其不经纯化即可用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝369.2。
步骤6：1-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-(5-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物143)的制备
Figure BDA0003284159120006462
向1-叔丁基吡咯-3-羧酸(0.047g,0.278mmol)、EDCI(0.053g,0.278mmol)、HOBt(0.038g,0.278mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.161mL,0.926mmol)于DMF(0.7mL)中的溶液中加入中间体H(0.075g,0.185mmol)。搅拌2小时后，将混合物倒入水(2mL)中，并将所得固体过滤。将固体用MeOH(1mL)洗涤，并进一步干燥。将固体用快速色谱(洗脱剂为20％～100％石油醚:乙酸乙酯，然后是0-35％乙酸乙酯:MeOH)纯化，并浓缩，得到呈黄色固体的化合物143(0.019g,0.036mmoll,19.27％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝518.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.58-11.97(m,1H),8.39(s,1H),8.18(s,1H),7.81(d,J＝7.6Hz,1H),7.73-7.66(m,2H),7.53(s,1H),7.48-7.40(m,1H),6.98(d,J＝2.0Hz,1H),6.56-6.43(m,2H),4.20-4.08(m,4H),3.63(s,2H),2.89-2.87(m,2H),2.42(s,3H),1.50(s,9H)。
实施例227.本发明化合物的制备
表37中的下列化合物是利用实施例226(化合物143)中描述的一般合成方案，由适当的普通中间体2-(3-(2-氨基噻唑-4-基)苯基)-5-甲基-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮、必需氨基酸和杂环开始合成的。
表37.
Figure BDA0003284159120006471
实施例228.本发明化合物的制备
表38中的下列化合物是利用实施例184中描述的一般合成方案，由合适的普通中间体N-({[4-(3-溴苯基)-1,3-噻唑-2-基]氨基甲酰基}甲基)氨基甲酸叔丁酯和合适的胺开始合成的。
表38.
Figure BDA0003284159120006481
实施例229.本发明化合物的制备
表39中的下列化合物是利用实施例195中描述的一般合成方案，由合适的普通中间体N-[2-[[4-[6-(1-甲基吡唑-3-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯和合适的杂环羧酸开始合成的。
表39.
Figure BDA0003284159120006482
实施例230. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(2-(吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物146)的制备
Figure BDA0003284159120006491
步骤1：1-(2-氨基噻唑-4-基)-2-溴乙酮(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120006492
向1-(2-氨基噻唑-4-基)乙酮(1.50g,10.55mmol)于CHCl3(15mL)中的溶液中加入Br2(0.60mL,11.61mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌。2小时后，将反应混合物冷却至室温，并在减压下浓缩以除去CHCl3。将残余物用水(5mL)稀释，并用饱和NaHCO3水溶液碱化(pH～8)。将含水混合物用乙酸乙酯(2x15mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过反相HPLC(0.1％NH3·H2O条件)纯化并冻干，得到呈粉红色固体的中间体B(1.00g,4.52mmol,42.87％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝223.1；1H NMR(400MHz,DMSO)δ7.44(s,1H),2.41(s,2H)。
步骤2：4-(2-(吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)噻唑-2-胺(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120006493
将中间体B(1.00g,4.52mmol)、吡啶-4-甲酰胺(0.603g,4.98mmol)、K2CO3(1.25g,9.05mmol)于THF(10mL)中的混合物在60℃下搅拌。2小时后，将异源反应混合物冷却至室温，过滤并将滤液在真空中浓缩。将残余物通过反相HPLC(0.1％NH3·H2O)纯化并冻干，得到呈白色固体的中间体D(0.220g,0.904mmol,19.99％产率)。LCMS(ESI)m/z＝[M+H]+＝244.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70-8.69(m,2H),8.27(s,2H),8.20-8.19(m,2H),7.40(s,3H)。
步骤3：(2-氧代-2-((4-(2-(吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120006501
将中间体D(0.200g,0.822mmol)、2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸(0.216g,1.23mmol)、HOBt(0.333g,2.47mmol)、EDCI(0.473g,2.47mmol)于DMF(2mL)中的混合物在25℃下搅拌。2小时后，将反应混合物用水(2mL)稀释，并用乙酸乙酯(2x5mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2x4mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过反相HPLC(0.1％NH3·H2O)纯化，并冻干，得到呈白色固体的中间体F(0.030g,0.064mmol,7.75％产率)。LCMS(ESI)m/z＝[M+H]+＝401.3。
步骤4：氯化2-氧代-2-((4-(2-(吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)噻唑-2-基)氨基)乙基-1-铵(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120006502
向中间体F(0.010g,0.025mmol)于1,4-二噁烷(0.5mL)中的溶液中加入4M HCl的1,4-二噁烷溶液(0.062mL)。2小时后，将混合物在真空中浓缩，得到呈白色固体的中间体G(0.008g)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z＝[M+H]+＝301.0。
步骤5：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(2-(吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物146)的制备
Figure BDA0003284159120006511
向中间体G(0.007g,0.021mmol)、1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸(0.008g,0.042mmol)于DMF(0.5mL)中的溶液中加入HOBt(0.008g,0.062mmol)、EDCI(0.012g,0.062mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.018mL,0.104mmol)。2小时后，将反应混合物用水(3mL)稀释，并将水层用乙酸乙酯(2x10mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将粗产物通过反相HPLC(0.1％NH3·H2O)纯化，并冻干，得到呈白色固体的化合物146(0.003g,0.006mmol,27.75％产率)。LCMS(ESI)m/z＝[M+H]+＝472.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.75-8.73(m,2H),8.68-8.66(m,1H),8.30-8.28(m,2H),7.87-7.85(m,1H),7.33-7.32(m,1H),6.80-6.79(m,1H),5.83-5.82(m,2H),4.17(d,J＝6.0Hz,2H),3.58(s,3H)。
实施例231.本发明化合物的制备
表40中的下列化合物是利用实施例4中描述的一般合成方案从合适的硫脲开始合成的。
表40.
Figure BDA0003284159120006512
Figure BDA0003284159120006521
实施例232. 1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(2-(吡啶-4-基)乙基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物151)的制备
Figure BDA0003284159120006522
步骤1：N-[2-氧代-2-[[4-[3-[(E)-2-(4-吡啶基)乙烯基]苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120006523
将N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(0.100g,0.243mmol)、4-乙烯基吡啶(0.262mL,2.43mmol),Pd(OAc)2(0.005g,0.025mmol)、三-邻甲苯基膦(0.015g,0.049mmol)和三乙胺(0.101mL,0.728mmol)于NMP(1mL)中的混合物脱气并用N2(g)吹扫。随后将混合物在140℃下搅拌。2小时后，将反应混合物冷却至室温，并倒入水中(10mL)。通过过滤收集所得固体，并依次用MeOH(3mL)和乙酸乙酯(2mL)洗涤，并真空中干燥，得到呈灰色固体的中间体C(0.175g,0.378mmol,77.91％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝437.4。
步骤2：氯化(E)-2-氧代-2-((4-(3-(2-(吡啶-4-基)乙烯基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙-1-铵(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120006531
向中间体C(0.170g,0.389mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中加入浓HCl(12M,1mL)。在25℃下搅拌2小时后，将所得固体随后过滤，并将滤液在减压下浓缩，得到呈黄色固体的中间体D(0.160g)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝337.3。
步骤3：氯化2-氧代-2-((4-(3-(2-(吡啶-4-基)乙基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙-1-铵(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120006532
在N2(g)下向中间体D(0.080g,0.238mmol)于MeOH(5mL)和水(1mL)中的溶液中加入Pd/C(0.050g,10％纯度)。将悬浮液在真空下脱气，并用H2(g)吹扫三次。将混合物在25℃的H2(g)气氛下搅拌16小时。将反应混合物随后在
Figure BDA0003284159120006533
上过滤，并将滤液在减压下浓缩，得到呈黄色固体的中间体E(0.050g)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝339.3。
步骤4：1-(甲基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(2-(吡啶-4-基)乙基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-1H-吡咯-3-甲酰胺(化合物151)的制备
Figure BDA0003284159120006541
向中间体E(0.030g,0.080mmol)、N,N-二异丙基乙胺(0.070mL,0.400mmol)和1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸(0.018g,0.096mmol)于DMF(1mL)中的溶液中加入EDCI(0.023g,0.120mmol)和HOBt(0.016g,0.120mmol)。将混合物在25℃下搅拌4小时，并随后在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(TFA条件，C18；流动相:[水(0.1％TFA)-ACN]；B％：11％-41％，10分钟)纯化，并冻干，得到呈灰白色固体的化合物151(0.024g,0.039mmol,48.59％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝510.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.38(s,1H),8.75-8.67(m,3H),7.84-7.72(m,5H),7.59(s,1H),7.36-7.31(m,2H),7.20(d,J＝7.6Hz,1H),6.77-6.76(m,1H),4.13(d,J＝6.0Hz,2H),3.57(s,3H),3.21-3.17(m,2H),3.05-3.01(m,2H)。
实施例233.本发明化合物的制备
表41中的下列化合物是利用实施例232(化合物151)中描述的一般合成方案，由合适的普通氯化(E)-2-氧代-2-((4-(3-(2-(吡啶-4-基)乙烯基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙-1-铵和合适的杂环羧酸开始合成的。
表41.
Figure BDA0003284159120006551
实施例234. 4-[2-[[2-[(1-甲基磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]哌啶-1-羧酸丙酯(化合物765)的制备
Figure BDA0003284159120006552
步骤1：4-(2-氨基噻唑-4-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120006553
在25℃下在N2(g)下向4-溴噻唑-2-胺(5.00g,27.93mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(8.64g,27.93mmol)和K3PO4(17.78g,83.78mmol)于1,4-二噁烷(40mL)和水(10mL)的混合物中的悬浮液中加入Pd(dtbpf)Cl2(1.82g,2.79mmol)。将反应混合物在80℃下在N2下搅拌12小时。将反应混合物冷却至室温，用水(200mL)稀释，并用乙酸乙酯(3x100mL)萃取。将合并的有机层浓缩，得到黄色油状物。将油状物用乙酸乙酯(1mL)溶解，并倒入石油醚(15mL)中，得到棕色沉淀。将异源混合物过滤，并将固体通过快速硅胶色谱(洗脱剂为0-60％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化。将洗脱液浓缩，得到呈黄色油状物的中间体3(5.10g,18.13mmol,64.90％产率)。
LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝282.2。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ6.42(br s,1H),6.28(s,1H),5.09(s,2H),4.11-4.06(m,2H),3.60(d,J＝5.2Hz,2H),2.41(s,2H),1.47(s,9H)。
步骤2：4-[2-[[2-(9H-芴-9-基甲氧羰基氨基)乙酰基]氨基]噻唑-4-基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120006561
在25℃下向2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙酸(5.39g,18.13mmol)、HATU(10.34g,27.19mmol)和N,N-二异丙基乙胺(7.03g,54.38mmol，9.47mL)在二氯甲烷(50mL)中的混合物中加入中间体3(5.10g,18.13mmol)。5小时后，将反应混合物用水(50mL)稀释，并用二氯甲烷(2x20mL)萃取。将合并的有机层浓缩，得到棕色油状物。将油状物通过反相HPLC(FA(0.1％)条件)纯化。将洗脱液浓缩以除去CH3CN，并用乙酸乙酯(2x20mL)萃取。将合并的有机层浓缩，得到黄色固体，将其通过快速色谱(洗脱剂为0-60％乙酸乙酯/石油醚梯度)再纯化。将洗脱液浓缩，得到呈黄色固体的中间体5(9.00g,14.45mmol,79.71％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝561.5；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ10.14-9.58(m,1H),7.78-7.76(m,2H),7.60(d,J＝5.6Hz,2H),7.42-7.27(m,4H),6.72(s,1H),6.49-6.45(m,1H),5.58(s,1H),4.51-4.45(m,2H),4.26-4.22(m,1H),4.12-4.10(m,2H),3.64-3.61(m,2H),2.47(s,2H),1.49(s,9H)。
步骤3：4-[2-[[2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙酰基]氨基]噻唑-4-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120006562
将中间体5(9.00g,12.84mmol)和Pd(OH)2(4.50g,6.41mmol,20％纯度)于乙酸乙酯(90mL)中的混合物脱气并用H2(g)吹扫。将混合物在30℃下在H2(15psi)搅拌。48小时后，将反应混合物过滤至
Figure BDA0003284159120006572
上，并将滤液浓缩，得到黑色油状物。将油状物通过快速色谱(洗脱剂为0-60％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化。将洗脱液浓缩，得到呈黄色固体的中间体6(6.00g,10.14mmol,78.93％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝563.2；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.11(s,1H),7.90(d,J＝7.6Hz,2H),7.73-7.69(m,3H),7.42-7.40(m,2H),7.35-7.31(m,2H),6.80(s,1H),4.31-4.30(m,2H),4.25(d,J＝6.4Hz,1H),4.00-3.98(m,2H),3.89(d,J＝6.4Hz,2H),2.85-2.76(m,3H),1.89(d,J＝10.8Hz,2H),1.46-1.39(m,11H)。
步骤4：4-[2-[(2-氨基乙酰基)氨基]噻唑-4-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120006571
将中间体6(4.00g,7.11mmol)于哌啶(4mL)和DMF(40mL)中的混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物倒入水(200mL)中，得到浅黄色沉淀。将所得沉淀过滤，并将滤液用乙酸乙酯(5x50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3x100mL)洗涤并浓缩，得到黄色固体。将固体用MTBE(20mL)研磨，得到呈白色固体的中间体7(1.251g,3.47mmol,48.83％产率)。LCMS(ESI)m/z；[M+H]+＝341.2；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.78(s,1H),5.24(s,2H),4.00(d,J＝2.8Hz,2H),3.51-3.36(m,2H),2.88-2.71(m,3H),1.88(d,J＝11.2Hz,2H),1.47-1.39(m,11H)。
步骤5：4-[2-[[2-[(1-甲基磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(中间体I)的制备
Figure BDA0003284159120006581
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸(0.183g,0.969mmol)于二氯甲烷(2mL)中的溶液中加入EDCI(0.253g,1.32mmol)、HOBt(0.179g,1.32mmol)、N,N-二异丙基乙胺(0.767mL,4.41mmol)和中间体7(0.300g,0.881mmol)。2小时后，将混合物用水(20mL)稀释，并用二氯甲烷(2x20mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速(石油醚/乙酸乙酯＝1/0至0/1)纯化，并浓缩，得到呈白色固体的中间体9(0.350g,0.662mmol,75.13％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝512.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.18(s,1H),8.64-8.62(m,1H),7.87-7.80(m,1H),7.30-7.29(m,1H),6.80(s,1H),6.76-6.75(m,1H),4.08(d,J＝6.0Hz,2H),4.00(d,J＝11.6Hz,2H),3.56(s,3H),2.90-2.72(m,3H),1.89(d,J＝10.8Hz,2H),1.50-1.45(m,1H),1.44-1.42(m,1H),1.40(s,9H)。
步骤6：1-甲基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-(4-哌啶基)噻唑-2-基]氨基]乙基]吡咯-3-甲酰胺(中间体J)的制备
Figure BDA0003284159120006582
向中间体9(0.070g,0.137mmol)于1,4-二噁烷(1mL)中的溶液中加入4M HCl的1,4-二噁恶烷溶液(0.244mL)。1小时后，将反应混合物在减压下浓缩，得到呈浅黄色固体的中间体10(0.060g,0.133mmol,96.87％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝412.1。
步骤7：4-[2-[[2-[(1-甲基磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]哌啶-1-羧酸丙酯(化合物765)的制备
Figure BDA0003284159120006591
在0℃下向中间体10(0.030g,0.067mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.058mL,0.335mmol)于二氯甲烷(1mL)中的溶液中加入氯甲酸丙酯(0.008mL,0.074mmol)。1小时后，将反应物用饱和NaHCO3水溶液(5mL)猝灭并用二氯甲烷(2x5mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(流动相:[水(10mMNH4HCO3)-ACN]；B％：18％-48％)纯化。将合适的级分在减压下浓缩以除去CH3CN，然后冻干，得到呈白色固体的化合物765(0.005g,0.010mmol,15.67％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝498.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68-8.61(m,1H),7.83-7.82(m,1H),7.35-7.26(m,1H),6.80(s,1H),6.76-6.75(m,1H),4.11-3.99(m,4H),3.96-3.93(m,2H),3.56(s,3H),3.01-2.74(m,3H),1.95-1.87(m,2H),1.64-1.38(m,4H),0.91-0.87(m,3H)。
实施例235.本发明化合物的制备
表42中的下列化合物是利用实施例234(化合物765)中描述的一般合成方案，利用普通起始材料4-溴噻唑-2-胺和适当的硼酸酯开始合成的，然后进行SFC分离。
表42.
Figure BDA0003284159120006592
实施例236.本发明化合物的制备
表43中的下列化合物是利用实施例6中描述的一般合成方案，利用合适的N-Boc氨基酸、杂环羧酸和硼酸酯开始合成的，然后进行SFC分离。
表43.
Figure BDA0003284159120006601
实施例237.N-[2-[[4-[6-[(4R)-3,3-二氟-4-(甲基氨基)-1-哌啶基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物763)的制备
Figure BDA0003284159120006611
步骤1：(4R)-3,3-二氟-4-[[(1R)-1-苯乙基]氨基]哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备(中间体C)
Figure BDA0003284159120006612
向3,3-二氟-4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(8.00g,34.01mmol)、(1R)-1-苯基乙胺(6.58mL,51.01mmol)于二氯甲烷(160mL)中的混合物中加入NaBH(OAc)3(28.83g,136.04mmol)。12小时后，将混合物在真空中浓缩以除去过量的二氯甲烷。将油状物用水(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(3x80mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2x100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝100/1至3/1)纯化，得到呈无色油状物的中间体C(4.30g,11.12mmol,32.69％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝341.1。
步骤2：(4R)-3,3-二氟-4-[甲基-[(1R)-1-苯乙基]氨基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(中间体D)的制备
Figure BDA0003284159120006621
向中间体C(4.00g,11.75mmol)、多聚甲醛(3.53g,117.51mmol)于MeOH(80mL)中的混合物中加入NaBH3CN(3.69g,58.75mmol)。12小时后，将混合物在真空中浓缩以除去MeOH。将所得混合物用水(50mL)稀释，并用乙酸乙酯(2x50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2x60mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝100/1至10/1)纯化，得到呈无色油状物的中间体D(4.10g,11.57mmol,98.44％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝355.1；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.38-7.28(m,4H),7.27-7.21(m,1H),4.27-4.01(m,3H),2.98-2.83(m,1H),2.82-2.49(m,2H),2.46(d,J＝2.8Hz,3H),2.00-1.85(m,1H),1.62-1.52(m,1H),1.45(s,9H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H)。
步骤3：(4R)-3,3-二氟-N-甲基-N-[(1R)-1-苯乙基]哌啶-4-胺(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120006622
向中间体D(4.10g,11.57mmol)于1,4-二噁烷中的溶液中加入4M HCl的1,4-二噁烷溶液(40mL)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物在真空中浓缩以除去MeOH，将所得混合物用饱和NaHCO3水溶液(50mL)稀释。将水层用乙酸乙酯(2x50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2x60mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈棕色油状物的中间体E(2.70g)。
步骤4：(4R)-1-(6-溴-2-吡啶基)-3,3-二氟-N-甲基-N-[(1R)-1-苯乙基]哌啶-4-胺(中间体G)的制备
Figure BDA0003284159120006631
将中间体E(3.10g,12.19mmol)、2,6-二溴吡啶(5.78g,24.38mmol)、N,N-二异丙基乙胺(6.37mL,36.57mmol)于DMSO(35mL)中的混合物在120℃下在N2(g)下搅拌8小时。将反应混合物用水(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(3x100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2x150mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝50/1至3/1)纯化，得到呈无色油状物的中间体F(3.50g,8.53mmol,69.98％产率)。LCMS(ESI)m/z；[79BrM+H]+＝410.0；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.39-7.27(m,5H),7.26-7.22(m,1H),6.77(d,J＝7.6Hz,1H),6.54(d,J＝8.4Hz,1H),4.49-4.32(m,2H),4.08(m,1H),3.08-2.96(m,1H),2.96-2.84(m,1H),2.74(m,1H),2.46(d,J＝2.8Hz,3H),2.02(m,1H),1.66-1.57(m,1H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H)。
步骤5：1-[6-[(4R)-3,3-二氟-4-[甲基-[(1R)-1-苯乙基]氨基]-1-哌啶基]-2-吡啶基]乙烯酮(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120006632
将中间体G(3.00g,7.31mmol)、三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(3.70mL,10.97mmol)、二氯钯；三苯基膦(0.513g,0.731mmol)于1,4-二噁烷(30mL)中的混合物脱气并用N2(g)吹扫(3次)。将反应混合物在100℃下在N2(g)下搅拌4小时。将反应混合物冷却至室温，并通过加入2N HCl(40mL)猝灭。搅拌2小时后，将混合物用饱和Na2CO3水溶液(40mL)碱化，然后加入饱和KF水溶液(20mL)。1小时后，将混合物过滤，并将滤液用乙酸乙酯(2x50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将油状物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝50/1至3/1)纯化，并浓缩，得到呈黄色固体的中间体I(1.70g,3.87mmol,52.92％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝374.2。
步骤6：4-[6-[(4R)-3,3-二氟-4-[甲基-[(1R)-1-苯乙基]氨基]-1-哌啶基]-2-吡啶基]噻唑-2-胺(中间体J)的制备
Figure BDA0003284159120006641
将中间体I(1.60g,4.28mmol)、硫脲(0.652g,8.57mmol)、I2(1.09g,4.28mmol)于i-PrOH(16mL)中的混合物脱气并用N2(g)吹扫(3次)。将混合物在100℃下搅拌6小时。将反应混合物冷却至室温，并用饱和NaHCO3水溶液(40mL)稀释。将水层用乙酸乙酯(3x40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2x50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将固体通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝20/1至2/1)纯化，并浓缩，得到呈白色固体的中间体J(1.10g,2.56mmol，59.77％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝430.1。
步骤7：N-[2-[[4-[6-[(4R)-3,3-二氟-4-[甲基-[(1R)-1-苯乙基]氨基]-1-哌啶基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体L)的制备
Figure BDA0003284159120006651
向中间体J(0.650g,1.51mmol)、2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸(0.398g,2.27mmol)和1-甲基咪唑(0.362mL,4.54mmol)于CH3CN(6mL)中的混合物中加入[氯(二甲基氨基)亚甲基]-二甲基铵；六氟磷酸盐(0.637g,2.27mmol)，并将混合物在室温下搅拌。4小时后，将反应混合物用水(50mL)稀释，并用乙酸乙酯(2x30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2x40mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到固体。将固体用MeOH(30mL)研磨，过滤并在空气中干燥，得到呈白色固体的中间体L(0.750g,1.28mmol,84.47％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝587.3。
步骤8：N-[2-[[4-[6-[(4R)-3,3-二氟-4-(甲基氨基)-1-哌啶基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体M)的制备
Figure BDA0003284159120006652
向中间体L(0.300g,0.511mmol)于MeOH(30mL)和甲酸(0.500mL,511.34umol)中的溶液中加入Pd/C(0.050g,0.511mmol,10％纯度)，将混合物脱气并用H2(g)吹扫(3次)。将所得悬浮液在25℃下在H2(50psi)下搅拌。12小时后，将反应混合物用N2(g)吹扫并过滤。将滤液用饱和NaHCO3(20mL)稀释，并将所得溶液部分浓缩以除去MeOH。将水层用乙酸乙酯(3x30mL)萃取。将合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈白色固体的中间体M(0.190g)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝483.1。
步骤9：N-[(4R)-1-[6-[2-[[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酰基]氨基]噻唑-4-基]-2-吡啶基]-3,3-二氟-4-哌啶基]-N-甲基-氨基甲酸9H-芴-9-基甲酯(中间体N)的制备
Figure BDA0003284159120006661
在25℃下搅拌中间体M(0.190g,0.394mmol)、FmocOSu(0.199g,0.591mmol)、NaHCO3(0.099g,1.18mmol)于THF(1.5mL)和水(1.5mL)中的混合物。6小时后，将反应混合物用乙酸乙酯(20mL)稀释。将有机层用水(2x15mL)、盐水(15mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝20/1至1/1)纯化，并浓缩得到呈白色固体的中间体N(0.120g,0.167mmol,42.38％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝705.3。
步骤10：氯化(R)-2-((4-(6-(4-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)(甲基)氨基)-3,3-二氟哌啶-1-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基-1-铵(中间体O)的制备
Figure BDA0003284159120006662
向中间体N(0.120g,0.170mmol)于1,4-二噁烷中的混合物中加入4M HCl的1,4-二噁烷溶液(15mL)。将混合物在室温下搅拌1小时，随后在真空中浓缩，得到呈黄色固体的中间体O(0.109g,0.179mmol,100.00％产率)，其直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝605.0。
步骤11：中间体16N-[(4R)-3,3-二氟-1-[6-[2-[[2-[(1-甲基磺酰基吡咯-3-羰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]-2-吡啶基]-4-哌啶基]-N-甲基-氨基甲酸9H-芴-9-基甲酯(中间体Q)的制备
Figure BDA0003284159120006671
向中间体O(0.109g,0.170mmol)、1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸(0.039g,0.204mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.178mL,1.02mmol)于二氯甲烷(2mL)中的溶液中加入EDCI(0.039g,0.204mmol)和HOBt(0.028g,0.204mmol)。将反应混合物随后在25℃下搅拌。8小时后，将反应混合物用水(15mL)稀释，并用乙酸乙酯(2x15mL)萃取。将合并的有机相用盐水(2x15mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到残余物。将残余物通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝50/1至1/1)纯化，并浓缩，得到呈白色固体的中间体Q(0.080g,0.103mmol,60.65％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝776.3。
步骤12：N-[2-[[4-[6-[(4R)-3,3-二氟-4-(甲基氨基)-1-哌啶基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-1-甲基磺酰基-吡咯-3-甲酰胺(化合物763)的制备
Figure BDA0003284159120006672
向中间体Q(0.080g,0.103mmol)于THF中的溶液中加入2M二甲胺于THF(4.00mL)中的溶液。将反应混合物在25℃下搅拌8小时，然后在真空中浓缩。将粗产物用MTBE(10mL)研磨，搅拌30分钟并过滤。将滤饼在空气中干燥，得到呈白色固体的化合物763(0.040g,0.069mmol,66.46％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝554.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.45-12.26(m,1H),8.68(m,1H),7.84(m,1H),7.76(s,1H),7.62(m,1H),7.31(m,1H),7.26(d,J＝7.2Hz,1H),6.89(d,J＝8.8Hz,1H),6.77(m,1H),4.45-4.29(m,1H),4.13(d,J＝5.6Hz,2H),4.06-3.94(m,1H),3.66-3.56(m,4H),3.31-3.26(m,2H),3.03-2.89(m,1H),2.41(s,3H),2.01-1.92(m,1H),1.64-1.51(m,1H)。
实施例238.本发明化合物的制备
表44中的下列化合物是利用实施例237(化合物763)中描述的一般合成方案，由合适的普通中间体3,3-二氟-4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯和合适的1-苯基乙胺对映异构体开始合成的。
表44.
Figure BDA0003284159120006681
Figure BDA0003284159120006691
实施例239. 1-甲基磺酰基-N-[2-[[4-[6-(3-氧杂双环[4.1.0]庚-6-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物750)的制备
Figure BDA0003284159120006692
步骤1：N-[4-(6-溴-2-吡啶基)噻唑-2-基]-N-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(中间体B)的制备
Figure BDA0003284159120006693
向4-(6-溴-2-吡啶基)噻唑-2-胺(5.00g,19.52mmol)于二氯甲烷(50mL)中的溶液中加入DMAP(0.239g,1.95mmol)和Boc2O(11.21mL,48.80mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌。16小时后，将混合物用二氯甲烷(100mL)稀释，并用H2O(70mL)洗涤。将有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈棕色油状物的中间体B(8.90g,19.50mmol,99.90％产率)。LCMS(ESI)m/z:[79BrM+H]+＝456.0。
步骤2：N-[4-(6-溴-2-吡啶基)噻唑-2-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure BDA0003284159120006701
将中间体B(8.90g,19.50mmol)和K2CO3(8.09g,58.51mmol)于MeOH(90mL)中的悬浮液在40℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，并过滤除去固体，随后将滤液在真空中浓缩。将残余物通过硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝20/1至5/1)纯化，得到呈白色固体的中间体C(5.60g,15.27mmol,78.30％产率)。LCMS(ESI)m/z:[79BrM+H]+＝356.0；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.19(s,1H),7.87-7.85(m,1H),7.75(s,1H),7.60-7.56(m,1H),7.38-7.36(m,1H)。
步骤3：N-[(4S)-1-[6-[2-[(2-氨基乙酰基)氨基]噻唑-4-基]-2-吡啶基]-3,3-二氟-4-哌啶基]-N-甲基-氨基甲酸9H-芴-9-基甲酯(中间体E)的制备
Figure BDA0003284159120006702
在25℃下向中间体C(0.900g,2.53mmol)和二氟-[(Z)-3-氧杂双环[4.1.0]庚-6-基次硼烷基-氟烷基]钾(0.670g,3.28mmol)于甲苯(9mL)和水(1.8mL)的混合物中的溶液中加Cs2CO3(1.65g,5.05mmol)和Pd(dppf)Cl2(0.184g,0.253mmol)。将两相混合物随后在110℃下搅拌。16小时后，将混合物冷却至室温并倒入水(50mL)中。将两相混合物用乙酸乙酯(3x30mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝5/1至1/1)(TLC:PE/EA＝1/1)纯化，得到呈黄色固体的中间体5(0.120g,0.305mmol,12.08％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝374.1。
步骤4：4-[6-(3-氧杂双环[4.1.0]庚-6-基)-2-吡啶基]噻唑-2-胺(中间体F)的制备
Figure BDA0003284159120006711
向中间体E(0.220g,0.589mmol)于二氯甲烷(3mL)中的冷却(0℃)溶液中加入TFA(11.00mL,13.51mmol)。随后将反应混合物升温至室温并搅拌1小时。将混合物缓慢倒入饱和NaHCO3水溶液(30mL)中，并用乙酸乙酯(3x30mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。在相同的条件下制备类似规模的后续批次。将批料合并，通过硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝5/1至1/1)纯化，得到呈黄色固体的中间体F(0.360g,1.32mmol,89.43％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝274.0。
步骤5：N-[2-[[4-[6-(3-氧杂双环[4.1.0]庚-6-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体H)的制备
Figure BDA0003284159120006712
在30℃下向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸(0.288g,1.65mmol)和中间体F(0.300g,1.10mmol)于CH3CN(5mL)中的溶液中加入1-甲基咪唑(0.262mL,3.29mmol)和[氯(二甲基氨基)亚甲基]-二甲基-铵；六氟磷酸盐(0.462g,1.65mmol)。搅拌1小时后，将混合物倒入水(30mL)中，并用乙酸乙酯(3x20mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过快速色谱(石油醚/乙酸乙酯＝5/1至1/1)纯化，得到呈黄色固体的中间体H(0.480g,0.896mmol,81.67％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝431.2；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ9.58(s,1H),7.75-7.73(m,1H),7.73-7.71(m,1H),7.68-7.64(m,1H),7.15-7.13(m,1H),5.15(s,1H),4.09-4.01(m,4H),3.67-3.51(m,1H),3.50-3.48(m,1H),2.68-2.65(m,1H),2.16-1.85(m,1H),1.85-1.51(m,1H),1.40(s,9H),1.39-1.38(m,1H),1.11-1.08(m,1H)。
步骤6：2-氨基-N-[4-[6-(3-氧杂双环[4.1.0]庚-6-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]乙酰胺(中间体I)的制备
Figure BDA0003284159120006721
将中间体H(0.480g,1.11mmol)于二氯甲烷(4.5mL)中的冷却(0℃)溶液加入TFA(1.50mL,20.26mmol)。将混合物升温至30℃，并搅拌1小时。随后将反应混合物缓慢倒入饱和NaHCO3水溶液(40mL)中，并用乙酸乙酯(4x30mL*4)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈黄色固体的中间体I(0.360g,0.817mmol,73.29％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝331.1。
步骤7：1-甲基磺酰基-N-[2-[[4-[6-(3-氧杂双环[4.1.0]庚-6-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]吡咯-3-甲酰胺(化合物750)的制备
Figure BDA0003284159120006731
向1-甲基磺酰基吡咯-3-羧酸(0.057g,0.303mmol)、中间体I(0.100g,0.303mmol)、EDCI(0.087g,0.454mmol)、HOBt(0.061g,0.454mmol)于DMF(1mL)中的溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(0.158mL,0.908mmol)。将反应混合物在室温下搅拌。1小时后，将混合物倒入水(20mL)中，并将所得沉淀过滤。将固体在室温下用MeOH(15mL)研磨10分钟并过滤。将滤饼在减压下干燥，得到呈灰白色固体的化合物750(0.048g,0.092mmol,30.28％产率)。LCMS(ESI)m/z:[M+H]+＝502.4；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.42(s,1H),8.71-8.69(m,1H),7.86-7.85(m,1H),7.80-7.78(m,2H),7.72-7.70(m,1H),7.32-7.29(m,1H),7.29-7.27(m,1H),6.79-6.78(m,1H),4.15-3.95(m,2H),3.95-3.94(m,1H),3.86-3.84(m,1H),3.58-3.57(m,4H),3.57-3.55(m,1H),2.68-2.63(m,1H),1.35-1.34(m,1H),1.34-1.33(m,1H),1.04-1.03(m,1H),1.03-1.02(m,1H)。
实施例240.本发明化合物的制备
表45中的下列化合物是遵照实施例239(化合物750)中描述的一般合成方案，利用合适的N-Boc氨基酸、杂环羧酸，由普通的中间体4-[6-(3-氧杂双环[4.1.0]庚-6-基)-2-吡啶基]噻唑-2-胺开始合成的，如果需要，接着进行SFC分离。
表45.
Figure BDA0003284159120006741
实施例241.BRM和BRG-1的ATP酶催化活性的测定
通过使用ADP-GloTM(Promega,V9102)的体外生化测定来测量BRM或BRG-1的ATP酶催化活性。一旦反应完成，就分两步进行ADP-GloTM激酶测定。第一步是耗尽反应中任何未消耗的ATP。第二步是将反应产物ADP转化为ATP，所述ATP将被萤光素酶用来产生发光，并被发光读取器(诸如Envision)检测到。
检测反应混合物(10μL)含有30nM的BRM或BRG-1、20nM的鲑鱼精子DNA(来自Invitrogen，UltraPureTM鲑鱼精子DNA溶液，目录号15632011)和ATP酶检测缓冲液中的400μM ATP，该缓冲液由20mM Tris、pH 8、20mM MgCl2、50mMNaCl、0.1％吐温-20和1mM新鲜DTT(PierceTM DTT(二硫苏糖醇)，目录号20290)组成。通过将2.5μL ATP酶溶液加入到2.5μLATP/DNA酸溶液中，在低体积白色Proxiplate-384plus板(PerkinElmer，目录号6008280)上起始反应，并在室温下培养1小时。然后加入试剂盒中提供的5μL ADP-GloTM试剂，反应物在室温下培养40分钟。然后加入试剂盒中提供的10μL激酶检测试剂，以将ADP转化为ATP，并且反应物在室温下培养60分钟。最后，用读板光度仪(诸如Envision)收集发光测量值。
BRM和BRG-1是从纯度大于90％的前五种昆虫细胞系合成的。本文描述的ATP酶催化活性测定中化合物1-827的IP50数据如下表46所示。
表46.本发明化合物的BRM和BRG1抑制数据
Figure BDA0003284159120006751
Figure BDA0003284159120006761
Figure BDA0003284159120006771
Figure BDA0003284159120006781
Figure BDA0003284159120006791
Figure BDA0003284159120006801
Figure BDA0003284159120006811
Figure BDA0003284159120006821
Figure BDA0003284159120006831
Figure BDA0003284159120006841
Figure BDA0003284159120006851
Figure BDA0003284159120006861
Figure BDA0003284159120006871
Figure BDA0003284159120006881
Figure BDA0003284159120006891
Figure BDA0003284159120006901
Figure BDA0003284159120006911
Figure BDA0003284159120006921
Figure BDA0003284159120006931
Figure BDA0003284159120006941
Figure BDA0003284159120006951
Figure BDA0003284159120006961
“+”表示抑制效果≥1μM；
“++”表示抑制效果≥0.1μM；
“+++”表示抑制效果≥0.01μM，
“++++”表示抑制效果<0.01μM
实施例242.化合物A的合成
BRG1/BRM抑制剂化合物A具有以下结构：
Figure BDA0003284159120006971
如下述方案13所示合成化合物A。
方案13.化合物A的合成
Figure BDA0003284159120006972
化合物A存在的情况下的BRM或BRG-1的ATP酶催化活性通过使用ADP-GloTM(Promega,V9102)的体外生化测定来测量。一旦反应完成，就分两步进行ADP-GloTM激酶测定。第一步是耗尽反应中任何未消耗的ATP。第二步是将反应产物ADP转化为ATP，所述ATP将被萤光素酶用来产生发光，并被发光读取器(诸如Envision)检测到。
检测反应混合物(10μL)含有30nM的BRM或BRG1、20nM的鲑鱼精子DNA(来自Invitrogen，UltraPureTM鲑鱼精子DNA溶液，目录号15632011)和ATP酶检测缓冲液中的400μM ATP，该缓冲液由20mM Tris、pH 8、20mM MgCl2、50mMNaCl、0.1％吐温-20和1mM新鲜DTT(PierceTM DTT(二硫苏糖醇)，目录号20290)组成。通过将2.5μL ATP酶溶液加入到2.5μLATP/DNA酸溶液中，在低体积白色Proxiplate-384plus板(PerkinElmer，目录号6008280)上起始反应，并在室温下培养1小时。然后加入试剂盒中提供的5μL ADP-GloTM试剂，反应物在室温下培养40分钟。然后加入试剂盒中提供的10μL激酶检测试剂，以将ADP转化为ATP，并且反应物在室温下培养60分钟。最后，用读板光度仪(诸如Envision)收集发光测量值。
BRM和BRG1是从纯度大于90％的前五种昆虫细胞系合成的。在试验中发现化合物A对BRM的IP50为10.4纳米，对BRG1的IP50为19.3纳米。
实施例243.BRG1/BRM ATP酶抑制对葡萄膜黑素瘤和血液肿瘤细胞株生长的影响
程序：将葡萄膜黑素瘤细胞系(92-1、MP41、MP38、MP46)、前列腺癌细胞系(LNCAP)、肺癌细胞系(NCI-H1299)和永生化胚胎肾细胞系(HEK293T)接种到96孔板中，该孔板具有生长培养基(见表47)。BRG1/BRMATP酶抑制剂化合物A溶解在DMSO中，并在铺板时以0-10微摩尔的浓度梯度加入细胞中。细胞在37摄氏度培养3天。处理三天后，从细胞中取出培养基，向细胞中加入30微升TrypLE(Gibco)10分钟。从平板上分离细胞，并加入170微升生长培养基重新悬浮。对来自两个DMSO处理的对照孔的细胞进行计数，并且在实验开始时，将最初数量的细胞重新接种到含有新鲜化合物的平板上，在37摄氏度下再接种四天。在第7天，如上所述收获细胞。在第3天和第7天，通过添加细胞滴度glo(Promega)来测量相对细胞生长，并在Envision读板仪(Perkin Elmer)上测量发光。使用Graphpad Prism计算每种细胞系生长被抑制50％的化合物浓度(GI50)，并绘制如下。对于多发性骨髓瘤细胞系(OPM2、MM1S、LP1)、ALL细胞系(TALL1、JURKAT、RS411)、DLBCL细胞系(SUDHL6、SUDHL4、DB、WSUDLCL2、PFEIFFER)、AML细胞系(OCIAML5)、MDS细胞系(SKM1)、卵巢癌细胞系(OV7、TYKNU)、食管癌细胞系(KYSE150)、横纹肌样瘤细胞系(RD、G402、G401、HS729、A204)、肝癌细胞系(HLF、HLE、PLCRPF5)和肺癌细胞系(SW1573、NCIH2444)，实施上述方法并进行以下修改：将细胞置于96孔板中，第二天，将BRG1/BRM ATP酶抑制剂化合物A溶解在DMSO中，并以0-10微摩尔的浓度梯度加入细胞中。在第3天和第7天细胞分裂时，将细胞分裂成新的96孔板，并在重新铺板后4小时加入新鲜化合物。
表47列出了测试的细胞系和使用的生长培养基。
表47.细胞系和生长培养基
细胞系 来源 生长培养基
92-1 SIGMA RPMI1640+20％FBS
A204 ATCC McCoy′s 5A+10％FBS
DB ATCC RPMI1640+10％FBS
G401 ATCC McCoy′s 5A+10％FBS
G402 ATCC McCoy′s 5A+10％FBS
HEK293T ATCC DMEM+10％FBS
HLE JCRB DMEM+10％FBS
HLF JCRB DMEM+10％FBS
HS729 ATCC DMEM+10％FBS
JURKAT ATCC RPMI1640+10％FBS
KYSE150 DSMZ RPMI1640/Ham′s F12+10％FBS
LNCAP ATCC RPMI1640+10％FBS
LP1 DSMZ IMDM+20％FBS
MM1S ATCC RPMI1640+10％FBS
MP38 ATCC RPMI1640+20％FBS
MP41 ATCC RPMI1640+20％FBS
MP46 ATCC RPMI1640+20％FBS
NCIH1299 ATCC RPMI1640+10％FBS
NCIH2444 ATCC RPMI1640+20％FBS
OCIAML5 DSMZ alpha-MEM+20％FBS+10ng/ml GM-CSF
OPM2 DSMZ RPMI1640+10％FBS
OV7 ECACC DMEM/Ham′s F12(1∶1)+2mM谷氨酰胺+10％FBS+0.5ug/ml氢化可的松+10ug/ml胰岛素
PFEIFFER ATCC RPMI1640+10％FBS
PLCPRF5 ATCC EMEM+10％FBS
RD ATCC DMEM+10％FBS
RS411 ATCC RPMI1640+10％FBS
SKM1 JCRB RPMI1640+10％FBS
SUDHL4 DSMZ RPMI1640+10％FBS
SUDHL6 ATCC RPMI1640+20％FBS
SW1573 ATCC DMEM+10％FBS
TALL1 JCRB RPMI1640+10％FBS
TYKNU JCRB EMEM+20％FBS
WSUDLCL2 DSMZ RPMI1640+10％FBS
结果：如图1所示，葡萄膜黑素瘤和血液肿瘤细胞系对BRG1/BRM抑制比其他受试细胞系更敏感。葡萄膜黑素瘤和血液癌细胞系的抑制维持到第7天。
实施例244.葡萄膜黑素瘤细胞系中BRG1/BRM抑制剂与临床PKC和MEK抑制剂的比较
程序：葡萄膜黑素瘤细胞系，92-1或MP41，在生长培养基的存在下，在96孔板中培养(见表47)。BAF ATP酶抑制剂(化合物A)，PKC抑制剂(LXS196；MedChemExpress)，或MEK抑制剂(司美替尼；Selleck Chemicals)溶解在DMSO中，并在电镀时以0至10微摩尔的浓度梯度加入到细胞中。细胞在37摄氏度培养3天。处理三天后，用细胞滴定度发光仪(Promega)测量细胞生长，在Envision读板仪(Perkin Elmer)上读取发光。
结果：如图2A和图2B所示，化合物A显示出与临床PKC和MEK抑制剂相当的葡萄膜黑素瘤细胞生长抑制作用。此外，发现化合物A比临床PKC和MEK抑制剂导致更快的抑制开始。
实施例245.BRG1/BRM ATP酶抑制对葡萄膜黑素瘤、血液学癌、前列腺癌、乳腺癌和尤文肉瘤细胞系生长的影响
程序：还如上所述用化合物67测试了实施例243中描述的所有细胞系。此外，还对以下细胞系进行了如下测试。简而言之，对于尤文氏肉瘤细胞系(CADOES1，RDES，SKES1)、视网膜母细胞瘤细胞系(WERIRB1)、ALL细胞系(REH)、AML细胞系(KASUMI1)、前列腺癌细胞系(PC3，DU145，22RV1)、黑素瘤细胞系(SH4，SKMEL28，WM115，COLO829，SKMEL3，A375)、乳腺癌细胞系(MDAMB415，CAMA1，MCF7，BT474，HCC1419，DU4475，BT549)、B-ALL细胞系(SUPB15)、CML细胞系(K562、MEG01)、伯基特淋巴瘤细胞系(RAMOS2G64C10、DAUDI)、套细胞淋巴瘤细胞系(JEKO1、REC1)、膀胱癌细胞系(HT1197)和肺癌细胞系(SBC5)，实施上述方法并进行以下修改：将细胞置于96孔板中，第二天，将BRG1/BRMATP酶抑制剂化合物67溶解在DMSO中，并以0-10微摩尔的浓度梯度加入细胞中。在第3天和第7天细胞分裂时，将细胞分裂成新的96孔板，并在重新铺板后4小时加入新鲜化合物。
表48列出了测试的细胞系和使用的生长培养基。
表48.细胞系和生长培养基
细胞系 来源 生长培养基
22RV1 ATCC RPMI1640+10％FBS
A375 ATCC DMEM+10％FBS
BT474 ATCC Hybricare培养基+1.5g/L碳酸氢钠+10％FBS
BT549 ATCC RPMI1640+0.023IU/ml胰岛素+10％FBS
CADOES1 DSMZ RPMI1640+10％FBS
CAMA1 ATCC EMEM+10％FBS
COLO829 ATCC RPMI1640+10％FBS
DAUDI ATCC RPMI1640+10％FBS
DU145 ATCC EMEM+10％FBS
DU4475 ATCC RPMI1640+10％FBS
HCC1419 ATCC RPMI1640+10％FBS
HT1197 ATCC EMEM+10％FBS
JEKO1 ATCC RPMI1640+20％FBS
K562 ATCC IMDM+10％FBS
KASUMI1 ATCC RPMI1640+10％FBS
MCF7 ATCC EMEM+0.01mg/ml牛胰岛素+10％FBS
MDAMB415 ATCC Leibovitz′s L-15+2mM L-谷氨酰胺+10mcg/ml胰岛素+10mcg/ml谷胱甘肽+15％FBS
MEG01 ATCC RPMI1640+10％FBS
PC3 ATCC F-12K+10％FBS
RAMOS2G64C10 ATCC RPMI1640+10％FBS
RDES ATCC RPMI1640+15％FBS
REC1 ATCC RPMI1640+10％FBS
REH ATCC RPMI1640+10％FBS
SBC5 JCRB EMEM+10％FBS
SH4 ATCC DMEM+10％FBS
SKES1 ATCC McCoy′s 5A+15％FBS
SKMEL28 ATCC EMEM+10％FBS
SKMEL3 ATCC McCoy′s 5A+15％FBS
SUPB15 ATCC IMDM+4mM L-谷氨酰胺+1.5g/L碳酸氢钠+0.05mM 2-巯基乙醇+20％FBS
WERIRB1 ATCC RPMI1640+10％FBS
WM115 ATCC EMEM+10％FBS
结果：如图3所示，葡萄膜黑素瘤、血液学癌、前列腺癌、乳腺癌和尤因肉瘤细胞系对BRG1/BRM抑制比其他受试细胞系更敏感。对葡萄膜黑素瘤、血液学癌症、前列腺癌、乳腺癌和尤因肉瘤细胞系的抑制维持到第7天。
实施例246.BRG1/BRM ATP酶抑制对癌细胞株生长的影响。
程序：如前所述(“高通量鉴定条形码肿瘤细胞系混合物中的基因型特异性癌症脆弱性”，Yu等人，Nature Biotechnology 34，419-423，2016)，使用PRISM(在混合物中同时分析相对抑制作用)进行混合细胞生存力测定，并进行以下修改。细胞系从癌细胞系百科全书(CCLE)集合中获得，并适应于不含酚红、补充有10％热灭活胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培养基，以便将独特的感染和汇集方案应用于如此大的细胞系概要。使用杀稻瘟菌素作为选择标记，执行慢病毒旋转感染方案，在每个细胞系中引入24个核苷酸的条形码，所有细胞系的估计多重感染(MOI)为1。然后将超过750个稳定条形码的PRISM癌细胞系按照25个池中的倍增时间汇集在一起。对于筛选实施，代替如前所述在每个孔中铺板25个细胞系池(Yu等人)，分别使用T25烧瓶(100，000个细胞/烧瓶)或6孔板(50，000个细胞/孔)将所有贴壁或所有悬浮细胞系池铺板在一起。细胞以8点3倍剂量反应用DMSO或化合物处理，一式三份，从最高浓度10μM开始作为检测稳健性的对照，细胞用两种先前验证的化合物平行处理，分别使用最高浓度为2.5μM和0.039μM的pan-Raf抑制剂AZ-628和蛋白酶体抑制剂硼替佐米。
用化合物处理3天后，裂解细胞，提取基因组DNA，通过PCR扩增条形码，并用下一代测序检测。通过将处理过的样品中的细胞系特异性条形码计数与DMSO对照和第0天对照中的计数进行比较来确定细胞生存力。对每个细胞系拟合剂量-反应曲线，计算曲线下的相应面积(AUC)并与所有细胞系的中值AUC进行比较(图4)。AUC低于中位数的细胞系被认为是最敏感的。
实施例247.BRG1/BRM ATP酶抑制剂对葡萄膜黑素瘤细胞系生长的影响。
程序：将葡萄膜黑素瘤细胞系(92-1、MP41、MP38、MP46)和非小细胞肺癌细胞(NCIH1299)接种到含有生长培养基的96孔板中(见表47)。将BRG1/BRMATP酶抑制剂，化合物67，溶解在DMSO中，并在铺板时以0-10微摩尔的浓度梯度加入细胞中。细胞在37℃下培养3天。处理三天后，用细胞滴定度发光仪(Promega)测量细胞生长，在Envision读板仪(PerkinElmer)上读取发光。
结果：如图5所示，化合物67导致葡萄膜黑素瘤细胞系的有效生长抑制。
实施例248.葡萄膜黑素瘤细胞系中BRG1/BRM抑制剂与临床PKC和MEK抑制剂的比较
程序：葡萄膜黑素瘤细胞系，92-1或MP41，在生长培养基的存在下，在96孔板中培养(见表47)。BAF ATP酶抑制剂(化合物67)，PKC抑制剂(LXS196；MedChemExpress)和MEK抑制剂(司美替尼；Selleck Chemicals)溶解在DMSO中，并在电镀时以0至10微摩尔的浓度梯度加入到细胞中。细胞在37℃下培养3天。处理三天后，用细胞滴定度发光仪(Promega)测量细胞生长，在Envision读板仪(Perkin Elmer)上读取发光。
结果：如图6A和图6B所示，与临床PKC和MEK抑制剂相比，化合物67对葡萄膜黑素瘤细胞的生长抑制显示出更强的作用。此外，发现化合物67比临床PKC和MEK抑制剂导致更快的生长抑制开始。
实施例249.BRG1/BRM ATP酶抑制剂可有效抑制PKC抑制剂抗性细胞的生长。
程序：MP41葡萄膜黑素瘤细胞对PKC抑制剂(LXS196；MedChemExpress)，通过在含有浓度不断增加的化合物的生长培养基(见表47)中长期培养，最高可达1微摩尔。3个月后，亲代MP41细胞和PKC抑制剂(PKCi)抗性细胞对PKC抑制剂(LXS196)或BRG1/BRM ATP酶抑制剂(化合物67)的敏感性在7天生长抑制试验中进行测试，如实施例2所述。
结果：而PKCi抗性细胞可以耐受比亲代MP41细胞系更高浓度的LXS196生长(图7A)，BRG1/BRM三磷酸腺苷酶抑制剂(化合物67)仍然导致对PKCi抗性和亲代细胞系的强烈生长抑制(图7B)。PKCi抗性细胞对化合物67比亲代MP41细胞更敏感(图7B)。
实施例250.BRG1/BRM ATP酶抑制剂在体内引起葡萄膜黑素瘤肿瘤生长抑制。
程序：将裸鼠(Envigo)与50％Matrigel中的5x10692-1葡萄膜黑素瘤细胞皮下移植到腋窝区域。肿瘤生长至平均约200mm3，此时将小鼠分组并开始给药。通过管饲载体(20％2-羟丙基-β-环糊精)或增加化合物320的剂量，小鼠每天给药一次。在3周内测量肿瘤体积和体重，并根据体重调整剂量，以达到mg/kg的适当剂量。此时，处死动物，解剖肿瘤并成像。
结果：用化合物320治疗以剂量依赖性方式导致肿瘤生长抑制，在最高剂量(50mg/kg)下观察到肿瘤消退。(图8A和图8B)。所有治疗均耐受良好，未观察到体重下降(图8C)。
其他实施方案
虽然已经结合本发明的特定实施例描述了本发明，但是应当理解，本发明能够进行进一步的修改，并且本申请旨在覆盖本发明的任何变化、使用或修改，这些变化、使用或修改通常遵循本发明的原理，并且包括在本发明所属领域的已知或习惯实践范围内的对本公开的偏离，并且可以应用于上文阐述的基本特征，并且在权利要求的范围内。
其他实施方案在权利要求中。

Claims (167)

1.一种具有以下结构的化合物：
Figure FDA0003284159110000011
其中
R1是H、任选取代的C1-C6酰基、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C8环烷基、任选取代的C1-C6杂烷基、任选取代的C2-C9杂环基或-SO2R6；
Figure FDA0003284159110000012
是5元或6元杂亚芳基；
R2和R5中的每一者独立地是H或任选取代的C1-C6烷基；
R3是H或任选取代的C1-C6烷基；并且R4是H、任选取代的C1-C6烷基或任选取代的C1-C6杂烷基；或者R3和R4与它们各自所连接的碳原子一起形成任选取代的C3-C6环烷基；
R6是任选取代的C1-C6烷基或-NR7R8；
R7和R8独立地是任选取代的C1-C6烷基；
Het是任选取代的5元杂亚芳基、任选取代的6元杂亚芳基或
Figure FDA0003284159110000013
A是任选取代的C6-C10亚芳基、任选取代的C2-C9亚杂环基，或任选取代的C2-C9杂亚芳基；
L不存在、是-O-、任选取代的C1-C6亚烷基、任选取代的C1-C6杂亚烷基、任选取代的C2-C6亚烯基、任选取代的C2-C6杂亚烯基、任选取代的C2-C6亚炔基、任选取代的C2-C6杂亚炔基、任选取代的C2-C9亚杂环基、任选取代的C2-C9杂环基C1-C6亚烷基、任选取代的C2-C9杂亚芳基或任选取代的C2-C9杂芳基C1-C6亚烷基；并且
B是H、卤素、氰基、任选取代的C6-C10芳基、任选取代的C3-C10环烷基、任选取代的C2-C9杂环基或任选取代的C2-C9杂芳基，
或其药学上可接受的盐。
2.如权利要求1所述的化合物，其中
Figure FDA0003284159110000021
是6元杂亚芳基。
3.如权利要求1所述的化合物，其中
Figure FDA0003284159110000022
是5元杂亚芳基。
4.如权利要求3所述的化合物，其中
Figure FDA0003284159110000023
是
Figure FDA0003284159110000024
其中X、Y和Z中的每一者独立地是N或CH。
5.如权利要求4所述的化合物，其中所述式A的化合物具有式I的结构：
Figure FDA0003284159110000025
其中
X、Y和Z中的每一者独立地是N或CH；
R1是H、任选取代的C1-C6酰基、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C1-C6杂烷基、任选取代的C3-C8环烷基、任选取代的C2-C9杂环基或-SO2R6；
R2、R3和R5中的每一者独立地是H或任选取代的C1-C6烷基；
R4是H、任选取代的C1-C6烷基，或任选取代的C1-C6杂烷基；
R6是任选取代的C1-C6烷基或-NR7R8；
R7和R8中的每一者独立地是任选取代的C1-C6烷基；
Het是任选取代的5元杂亚芳基、任选取代的6元杂亚芳基，或
Figure FDA0003284159110000031
A是任选取代的C6-C10亚芳基、任选取代的C2-C9亚杂环基，或任选取代的C2-C9杂亚芳基；
L不存在，是-O-、任选取代的C1-C6亚烷基、任选取代的C1-C6杂亚烷基、任选取代的C2-C6亚烯基、任选取代的C2-C6杂亚烯基、任选取代的C2-C6亚炔基、任选取代的C2-C6杂亚炔基、任选取代的C2-C9亚杂环基、任选取代的C2-C9杂环基C1-C6亚烷基、任选取代的C2-C9杂亚芳基或任选取代的C2-C9杂芳基C1-C6亚烷基；并且
B是H、卤素、氰基、任选取代的C6-C10芳基、任选取代的C3-C10环烷基、任选取代的C2-C9杂环基或任选取代的C2-C9杂芳基，
或其药学上可接受的盐。
6.如权利要求5所述的化合物，其中X、Y和Z中的每一者是CH。
7.如权利要求6所述的化合物，其中所述式I的化合物具有式Ia的结构：
Figure FDA0003284159110000041
或其药学上可接受的盐。
8.如权利要求5所述的化合物，其中X是N，并且Y和Z中的每一者是CH。
9.如权利要求8所述的化合物，其中所述式I化合物具有式Ib的结构：
Figure FDA0003284159110000042
或其药学上可接受的盐。
10.如权利要求5所述的化合物，其中Z是N，并且X和Y中的每一者是CH。
11.如权利要求10所述的化合物，其中所述式I的化合物具有式Ic的结构：
Figure FDA0003284159110000043
或其药学上可接受的盐。
12.如权利要求5所述的化合物，其中Y是N，并且X和Z中的每一者是CH。
13.如权利要求8所述的化合物，其中式I的化合物具有式Id的结构：
Figure FDA0003284159110000051
或其药学上可接受的盐。
14.如权利要求5所述的化合物，其中X是CH，并且Y和Z中的每一者是N。
15.如权利要求5所述的化合物，其中X是CH，并且每个Y和Z是N。
16.如权利要求5所述的化合物，其中Y是CH，并且每个X和Z是N。
17.如权利要求5所述的化合物，其中X、Y和Z中的每一者是N。
18.如权利要求3所述的化合物，其中
Figure FDA0003284159110000052
是
Figure FDA0003284159110000053
其中
X′是O或S；
Y’是N或CH；并且
Z’是N或CH。
19.如权利要求18所述的化合物，其中式A的化合物具有式II的结构：
Figure FDA0003284159110000061
其中
X′是O或S；
Y’是N或CH；
Z’是N或CH；
R1是H、任选取代的C1-C6酰基、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C1-C6杂烷基、任选取代的C3-C8环烷基、任选取代的C2-C9杂环基或-SO2R6；
R2、R3和R5中的每一者独立地是H或任选取代的C1-C6烷基；
R4是H、任选取代的C1-C6烷基，或任选取代的C1-C6杂烷基；
R6是任选取代的C1-C6烷基或-NR7R8；
R7和R8中的每一者独立地是任选取代的C1-C6烷基；
Het是任选取代的5元杂亚芳基、任选取代的6元杂亚芳基，或
Figure FDA0003284159110000062
A是任选取代的C6-C10亚芳基、任选取代的C2-C9亚杂环基，或任选取代的C2-C9杂亚芳基；
L不存在、是-O-、任选取代的C1-C6亚烷基、任选取代的C1-C6杂亚烷基、任选取代的C1-C6亚烯基、任选取代的C2-C6杂亚烯基、任选取代的C2-C6亚炔基、任选取代的C2-C6杂亚炔基、任选取代的C2-C9亚杂环基、任选取代的C2-C9杂环基C1-C6亚烷基、任选取代的C2-C9杂亚芳基或任选取代的C2-C9杂芳基C1-C6亚烷基；并且
B是H、卤素、氰基、任选取代的C6-C10芳基、任选取代的C3-C10环烷基、任选取代的C2-C9杂环基或任选取代的C2-C9杂芳基，
或其药学上可接受的盐。
20.如权利要求19所述的化合物，其中X’是O，Y’是CH，并且Z’是N。
21.如权利要求20所述的化合物，其中式II的化合物具有式IIa的结构：
Figure FDA0003284159110000071
或其药学上可接受的盐。
22.如权利要求19所述的化合物，其中X’是S，Y’是CH，并且Z’是N。
23.如权利要求22所述的化合物，其中式II的化合物具有式IIb的结构：
Figure FDA0003284159110000072
Figure FDA0003284159110000081
或其药学上可接受的盐。
24.如权利要求19所述的化合物，其中X′是O，Y′是N，并且Z′是CH。
25.如权利要求19所述的化合物，其中X’是S，Y’是N，并且Z’是CH。
26.如权利要求19所述的化合物，其中X’是O，Y’是N，并且Z’是N。
27.如权利要求19所述的化合物，其中X’是S，Y’是N，并且Z’是N。
28.如权利要求1至27中任一项所述的化合物，其中R2是H。
29.如权利要求1至28中任一项所述的化合物，其中R5是H。
30.如权利要求1至28中任一项所述的化合物，其中R5是任选取代的C1-C6烷基。
31.如权利要求30所述的化合物，其中R5是甲基。
32.如权利要求1至31中任一项所述的化合物，其中R3是H。
33.如权利要求1至31中任一项所述的化合物，其中R3是任选取代的C1-C6烷基。
34.如权利要求33所述的化合物，其中R3是甲基。
35.如权利要求1至34中任一项所述的化合物，其中R4是H。
36.如权利要求1至34中任一项所述的化合物，其中R4是任选取代的C1-C6烷基。
37.如权利要求36所述的化合物，其中R4是甲基、叔丁基、异丙基、异丁基或叔戊基。
38.如权利要求1至34中任一项所述的化合物，其中R4是任选取代的C1-C6杂烷基。
39.如权利要求38所述的化合物，其中R4是
Figure FDA0003284159110000091
Figure FDA0003284159110000092
40.如权利要求1至31中任一项所述的化合物，其中R3和R4与它们各自所连接的碳原子一起形成任选取代的C3-C6环烷基。
41.如权利要求40所述的化合物，其中R3和R4与它们各自所连接的碳原子一起形成C3-C6环烷基。
42.如权利要求41所述的化合物，其中R3和R4与它们各自所连接的碳原子一起形成
Figure FDA0003284159110000093
43.如权利要求1至42中任一项所述的化合物，其中Het是任选取代的5元杂亚芳基。
44.如权利要求43所述的化合物，其中Het是
Figure FDA0003284159110000094
45.如权利要求43所述的化合物，其中Het是
Figure FDA0003284159110000095
46.如权利要求1至42中任一项所述的化合物，其中Het是任选取代的6元杂亚芳基。
47.如权利要求46所述的化合物，其中Het是
Figure FDA0003284159110000101
48.如权利要求1至42中任一项所述的化合物，其中Het是
Figure FDA0003284159110000102
49.如权利要求1至48中任一项所述的化合物，其中L不存在。
50.如权利要求1至48中任一项所述的化合物，其中L是-O-。
51.如权利要求1至48中任一项所述的化合物，其中L是任选取代的C1-C6亚烷基。
52.如权利要求51所述的化合物，其中L是
Figure FDA0003284159110000103
Figure FDA0003284159110000104
53.如权利要求1至51中任一项所述的化合物，其中L是任选取代的C1-C6杂亚烷基。
54.如权利要求53所述的化合物，其中L是
Figure FDA0003284159110000105
Figure FDA0003284159110000106
55.如权利要求1至51中任一项所述的化合物，其中L是任选取代的C2-C6亚烯基。
56.如权利要求55所述的化合物，其中L是
Figure FDA0003284159110000111
57.如权利要求1至51中任一项所述的化合物，其中L是任选取代的C2-C6杂亚烯基。
58.如权利要求1至51中任一项所述的化合物，其中L是任选取代的C2-C6亚炔基。
59.如权利要求58所述的化合物，其中L是
Figure FDA0003284159110000112
Figure FDA0003284159110000113
60.如权利要求1至51中任一项所述的化合物，其中L是任选取代的C2-C6杂亚炔基。
61.如权利要求60所述的化合物，其中L是
Figure FDA0003284159110000114
62.如权利要求1至51中任一项所述的化合物，其中L是任选取代的C2-C9亚杂环基。
63.如权利要求62所述的化合物，其中L是
Figure FDA0003284159110000115
Figure FDA0003284159110000116
64.如权利要求1至51中任一项所述的化合物，其中L是任选取代的C2-C9杂环基C1-C6亚烷基。
65.如权利要求64所述的化合物，其中L是
Figure FDA0003284159110000117
66.如权利要求1至51中任一项所述的化合物，其中L是任选取代的C2-C9杂亚芳基。
67.如权利要求1至51中任一项所述的化合物，其中L是任选取代的C2-C9杂芳基C1-C6亚烷基。
68.如权利要求1至67中任一项所述的化合物，其中A是任选取代的C6-C10亚芳基。
69.如权利要求68所述的化合物，其中A是
Figure FDA0003284159110000121
Figure FDA0003284159110000122
70.如权利要求69所述的化合物，其中A是
Figure FDA0003284159110000123
71.如权利要求1至67中任一项所述的化合物，其中A是任选取代的C2-C9杂亚芳基。
72.如权利要求71所述的化合物，其中A是
Figure FDA0003284159110000124
Figure FDA0003284159110000125
Figure FDA0003284159110000131
73.如权利要求72所述的化合物，其中A是
Figure FDA0003284159110000132
74.如权利要求1至67中任一项所述的化合物，其中A是任选取代的C2-C9亚杂环基。
75.如权利要求74所述的化合物，其中A是
Figure FDA0003284159110000133
Figure FDA0003284159110000134
Figure FDA0003284159110000141
76.如权利要求1至75中任一项所述的化合物，其中B是H。
77.如权利要求1至75中任一项所述的化合物，其中B是氰基。
78.如权利要求1至58中任一项所述的化合物，其中B是卤素。
79.如权利要求78所述的化合物，其中B是F或Cl。
80.如权利要求1至75中任一项所述的化合物，其中B是任选取代的C6-C10芳基。
81.如权利要求80所述的化合物，其中B是
Figure FDA0003284159110000151
Figure FDA0003284159110000152
82.如权利要求1至75中任一项所述的化合物，其中B是任选取代的C3-C10环烷基。
83.如权利要求1至75中任一项所述的化合物，其中B是任选取代的C2-C9杂环基。
84.如权利要求83所述的化合物，其中B是
Figure FDA0003284159110000153
Figure FDA0003284159110000154
85.如权利要求83所述的化合物，其中B是
Figure FDA0003284159110000155
Figure FDA0003284159110000156
86.如权利要求83所述的化合物，其中B是
Figure FDA0003284159110000157
并且R9a、R9b、R9c和R9d中的每一者独立地是H、卤素、羟基、任选取代的C1-6烷基或任选取代的C1-6杂烷基。
87.如权利要求86所述的化合物，其中B是
Figure FDA0003284159110000158
Figure FDA0003284159110000161
88.如权利要求83所述的化合物，其中B是
Figure FDA0003284159110000162
X是O或C(R10)2；y可以0、1、2、3、4、5、6、7或8；并且每个R10独立地是H、卤素、氰基、氨基、羟基、烯丙基、杂烯丙基、任选取代的C1-6烷基、任选取代的C1-6杂烷基，或者两者与它们所连接的碳结合形成C＝O。
89.如权利要求83所述的化合物，其中B是
Figure FDA0003284159110000163
Figure FDA0003284159110000164
90.如权利要求88所述的化合物，其中B是
Figure FDA0003284159110000165
Figure FDA0003284159110000166
Figure FDA0003284159110000171
91.如权利要求88所述的化合物，其中B是
Figure FDA0003284159110000172
92.如权利要求83所述的化合物，其中B是
Figure FDA0003284159110000181
Figure FDA0003284159110000182
93.如权利要求1至75中任一项所述的化合物，其中B是任选取代的C2-C9杂芳基。
94.如权利要求93所述的化合物，其中B是
Figure FDA0003284159110000183
Figure FDA0003284159110000191
95.如权利要求1至75中任一项所述的化合物，其中B是任选取代的C3-C8环烷基。
96.如权利要求95所述的化合物，其中B是
Figure FDA0003284159110000192
Figure FDA0003284159110000193
97.如权利要求1至96中任一项所述的化合物，其中R1是H。
98.如权利要求1至96中任一项所述的化合物，其中R1是任选取代的C1-C6酰基。
99.如权利要求98所述的化合物，其中R1是乙酰基。
100.如权利要求1至96中任一项所述的化合物，其中R1是任选取代的C1-C6烷基。
101.如权利要求100所述的化合物，其中R1是甲基、叔丁基、异丙基或
Figure FDA0003284159110000201
102.如权利要求1至96中任一项所述的化合物，其中R1是任选取代的C1-C6杂烷基。
103.如权利要求102所述的化合物，其中R1是
Figure FDA0003284159110000202
Figure FDA0003284159110000203
104.如权利要求1至96中任一项所述的化合物，其中R1是任选取代的C2-C9杂环基。
105.如权利要求104所述的化合物，其中R1是
Figure FDA0003284159110000204
Figure FDA0003284159110000205
106.如权利要求1至96中任一项所述的化合物，其中R1是-SO2R6。
107.如权利要求106所述的化合物，其中R6是任选取代的C1-C6烷基。
108.如权利要求107所述的化合物，其中R6是甲基、异-丙基或
Figure FDA0003284159110000211
109.如权利要求106所述的化合物，其中R6是-NR7R8。
110.如权利要求109所述的化合物，其中R7是甲基。
111.如权利要求109或110所述的化合物，其中R8是甲基。
112.如权利要求1至111中任一项所述的化合物，其中所述化合物具有表1中化合物1-827中的任一种的结构。
113.如权利要求1至111中任一项所述的化合物，其中所述化合物具有表1中化合物1-421中的任一种的结构。
114.如权利要求1至111中任一项所述的化合物，其中所述化合物具有表1中化合物422-827中的任一种的结构。
115.如权利要求1至111中任一项所述的化合物，其中所述化合物具有表1中化合物1-776中的任一种的结构。
116.如权利要求1至111中任一项所述的化合物，其中所述化合物具有表1中化合物777-819中的任一种的结构。
117.如权利要求1至111中任一项所述的化合物，其中所述化合物具有表1中化合物820-827中的任一种的结构。
118.一种药物组合物，其包含如权利要求1至117中任一项所述的化合物和药学上可接受的赋形剂。
119.一种降低细胞中的BAF复合物的活性的方法，所述方法包括使所述细胞与有效量的如权利要求1至117中任一项所述的化合物或如权利要求118所述的药物组合物接触。
120.如权利要求119所述的方法，其中所述BAF复合物在癌细胞中。
121.一种治疗有需要的受试者的BAF复合物相关病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1至117中任一项所述的化合物或如权利要求118所述的药物组合物。
122.如权利要求121所述的方法，其中所述BAF复合物相关病症是癌症或病毒感染。
123.一种抑制BRM的方法，所述方法包括使细胞与有效量的如权利要求1至117中任一项所述的化合物或如权利要求118所述的药物组合物接触。
124.如权利要求123所述的方法，其中所述细胞是癌细胞。
125.一种治疗有需要的受试者的BRG1功能丧失性突变相关病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1至117中任一项所述的化合物或如权利要求118所述的药物组合物。
126.如权利要求125所述的方法，其中所述BRG1功能丧失性突变相关病症是癌症。
127.一种诱导细胞的细胞凋亡的方法，所述方法包括使所述细胞与有效量的如权利要求1至117中任一项所述的化合物或如权利要求118所述的药物组合物接触。
128.如权利要求127所述的方法，其中所述细胞是癌细胞。
129.一种治疗有需要的受试者的癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1至117中任一项所述的化合物或如权利要求118所述的药物组合物。
130.如权利要求120、122、124、126和128中任一项所述的方法，其中所述癌症是非小细胞肺癌、结肠直肠癌、膀胱癌、原发不明癌症、神经胶质瘤、乳腺癌、黑素瘤、非黑素瘤皮肤癌、子宫内膜癌、食道胃癌、胰腺癌、肝胆管癌、软组织肉瘤、卵巢癌、头颈癌、肾细胞癌、骨癌、非霍奇金淋巴瘤、小细胞肺癌、前列腺癌、胚胎肿瘤、生殖细胞瘤、宫颈癌、甲状腺癌、唾液腺癌、胃肠神经内分泌肿瘤、子宫肉瘤、胃肠道间质瘤、CNS癌症、胸腺肿瘤、肾上腺皮质癌、阑尾癌、小肠癌或阴茎癌。
131.如权利要求120、122、124、126和128中任一项所述的方法，其中所述癌症是非小细胞肺癌、结肠直肠癌、膀胱癌、原发不明癌症、神经胶质瘤、乳腺癌、黑素瘤、非黑素瘤皮肤癌、子宫内膜癌或阴茎癌。
132.如权利要求120、122、124、126和128中任一项所述的方法，其中所述癌症是非小细胞肺癌。
133.如权利要求120、122、124、126和128中任一项所述的方法，其中所述癌症是软组织肉瘤。
134.一种治疗有需要的受试者的病毒感染的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1至117中任一项所述的化合物或如权利要求118所述的药物组合物。
135.如权利要求134所述的方法，其中所述病毒感染是被逆转录病毒科、嗜肝DNA病毒科、黄病毒科、腺病毒科、疱疹病毒科、乳头瘤病毒科、细小病毒科、多瘤病毒科、副粘病毒科或披膜病毒科的病毒感染。
136.一种治疗有需要的受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1至117中任一项所述的化合物或如权利要求118所述的药物组合物。
137.一种减少有需要的受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症的肿瘤生长的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1至117中任一项所述的化合物或如权利要求118所述的药物组合物。
138.一种抑制受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症的转移进展的方法，所述方法包括施用有效量的如权利要求1至117中任一项所述的化合物或如权利要求118所述的药物组合物。
139.一种抑制受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症的转移定殖的方法，所述方法包括施用有效量的如权利要求1至117中任一项所述的化合物或如权利要求118所述的药物组合物。
140.一种降低黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症细胞中的BRG1和/或BRM的水平和/或活性的方法，所述方法包括使所述细胞与有效量的如权利要求1至117中任一项所述的化合物或如权利要求118所述的药物组合物接触。
141.如权利要求140所述的方法，其中所述细胞在受试者体内。
142.如权利要求136至141中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症是转移性的。
143.如权利要求136至142中任一项所述的方法，其中所述方法还包括向所述受试者施用抗癌疗法或使所述细胞与抗癌疗法接触。
144.如权利要求143所述的方法，其中所述抗癌疗法是化学治疗剂或细胞毒性剂、免疫疗法、外科手术、放射疗法、热疗法或光凝固法。
145.如权利要求143所述的方法，其中所述抗癌疗法是外科手术。
146.如权利要求143所述的方法，其中所述抗癌疗法是化学治疗剂或细胞毒性剂。
147.如权利要求146所述的方法，其中所述化学治疗剂或细胞毒性剂是抗代谢药、抗有丝分裂剂、抗肿瘤抗生素、天冬酰胺特异性酶、双膦酸盐、抗肿瘤药、烷化剂、DNA修复酶抑制剂、组蛋白脱乙酰酶抑制剂、皮质类固醇、去甲基化剂、免疫调节剂、janus相关激酶抑制剂、磷酸肌醇3-激酶抑制剂、蛋白酶体抑制剂或酪氨酸激酶抑制剂。
148.如权利要求146或147所述的方法，其中所述一种或多种化学治疗剂或细胞毒性剂是达卡巴嗪、替莫唑胺、顺铂、曲奥舒凡、福莫司汀、IMCgp150、CTLA-4抑制剂、PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂、有丝分裂原活化蛋白激酶抑制剂和/或蛋白激酶C抑制剂。
149.如权利要求143至148中任一项所述的方法，其中所述抗癌疗法和如权利要求1至117中任一项所述的化合物或如权利要求118所述的药物组合物在彼此之间的28天内并且各自以一起有效治疗所述受试者的量施用。
150.如权利要求136至149中任一项所述的方法，其中所述受试者或癌症具有和/或已被鉴定为具有BRG1功能丧失性突变。
151.如权利要求136至149中任一项所述的方法，其中所述受试者或癌症具有和/或已被鉴定为具有BRM功能丧失性突变。
152.如权利要求136至151中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症对一种或多种化学治疗剂或细胞毒性剂的施用没有响应或在一种或多种化学治疗剂或细胞毒性剂的施用后进展。
153.如权利要求136至152中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症对一种或多种化学治疗剂具有抗性或被预测为对一种或多种化学治疗剂具有抗性。
154.如权利要求152或153所述的方法，其中所述一种或多种化学治疗剂或细胞毒性剂是达卡巴嗪、替莫唑胺、顺铂、曲奥舒凡、福莫司汀、IMCgp150、CTLA-4抑制剂、PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂、有丝分裂原活化蛋白激酶抑制剂和/或蛋白激酶C抑制剂。
155.如权利要求136至154中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症是黑素瘤。
156.如权利要求155所述的方法，其中所述黑素瘤是葡萄膜黑素瘤。
157.如权利要求155所述的方法，其中所述黑素瘤是粘膜黑素瘤。
158.如权利要求155所述的方法，其中所述黑素瘤是皮肤黑素瘤。
159.如权利要求136至154中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症是血液学癌症。
160.如权利要求159所述的方法，其中所述血液学癌症是多发性骨髓瘤、大细胞淋巴瘤、急性T细胞白血病、急性骨髓性白血病、骨髓异常增生综合征、免疫球蛋白Aλ骨髓瘤、弥漫性混合型组织细胞和淋巴细胞淋巴瘤、B细胞淋巴瘤、急性淋巴母细胞白血病、弥漫性大细胞淋巴瘤或非霍奇金淋巴瘤。
161.如权利要求136至154中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症是前列腺癌。
162.如权利要求136至154中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症是乳腺癌。
163.如权利要求162所述的方法，其中所述乳腺癌是ER阳性乳腺癌、ER阴性乳腺癌、三阳性乳腺癌或三阴性乳腺癌。
164.如权利要求136至154中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症是骨癌。
165.如权利要求164所述的方法，其中所述骨癌是尤文氏肉瘤。
166.如权利要求136至154中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌症是肾细胞癌。
167.如权利要求166所述的方法，其中所述肾细胞癌是小眼转录因子(MITF)家族易位性肾细胞癌。
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