CN115484948A - 化合物及其用途 - Google Patents

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CN115484948A CN202180025803.0A CN202180025803A CN115484948A CN 115484948 A CN115484948 A CN 115484948A CN 202180025803 A CN202180025803 A CN 202180025803A CN 115484948 A CN115484948 A CN 115484948A
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N·J·安东尼
R·G·瓦斯瓦尼
D·S·米兰
S·E·R·席勒
K·J·威尔逊
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Fuhong Treatment Co
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Abstract

本公开内容的特征在于可用于治疗与BAF复合物功能相关的病症的化合物。

Description

化合物及其用途
背景
本发明涉及可用于调节BRG1或BRM相关因子(BAF)复合物的化合物。特别地，本发明涉及可用于治疗与BAF复合物功能相关的病症的化合物。
染色质调控对于基因表达至关重要，并且ATP依赖性染色质重塑是发生这种基因表达的机制。人转化/蔗糖非发酵性(SWI/SNF)染色质重塑复合物(也称为BAF复合物)具有两种SWI2样ATP酶，称为BRG1 (Brahma相关基因1)和BRM (Brahma)。转录激活因子BRG1 (也称为ATP依赖性染色质重塑剂SMARCA4)由19号染色体上的SMARCA4基因编码。BRG1在一些癌症肿瘤中过表达，并且是癌细胞增殖所需的。BRM (也称为可能的全局转录激活因子SNF2L2和/或ATP依赖性染色质重塑剂SMARCA2)由9号染色体上的SMARCA2基因编码，并且已被证明对以BRG1功能突变丧失为特征的细胞中的肿瘤细胞生长至关重要。BRG和/或BRM的失活导致细胞中的下游效应，包括细胞周期停滞和肿瘤抑制。
发明内容
本发明的特征是可用于调节BAF复合物的化合物。在一些实施方案中，所述化合物可用于治疗与BAF复合物的改变相关的病症，例如与BRG1和BRM蛋白中的一者或两者的改变相关的病症。单独或与其他药物活性剂组合的本发明化合物可用于治疗此类病症。
在一个方面，本发明的特征在于具有以下结构的化合物：
Figure 10815DEST_PATH_IMAGE001
其中m为0、1、2、3或4；
n为0、1、2、3或4；
R1 为任选取代的C3-C6 支化烷基，或R1与R2 以及它们所连接的原子组合形成5-至7-元环；
各R2 独立地为卤素、羟基、硫醇、任选取代的C1-C6 烷基、任选取代的C1-C6 杂烷基、或任选取代的氨基，或一个R2与另一R2 以及它们所连接的原子组合形成5-至7-元环；
R3和R5 独立地为氢或任选取代的C1-C6 烷基；
R4 为氢、任选取代的C1-C6 烷基、任选取代的C1-C6 杂烷基、任选取代的C1-C6烷基C6-C10 芳基、或任选取代的C1-C6烷基C2-C9 杂芳基；
Het 为5-或6-元杂环；
R6 为氢、卤素、氰基、任选取代的C1-C6 烷氧基、任选取代的C1-C6 杂烷基、羧基、任选取代的酰胺、任选取代的C2-C9 杂芳基、任选取代的C2-C9 杂环基或任选取代的C6-C10 芳基；和
R7 为氰基、卤素、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基，
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，R3 为氢。在一些实施方案中，R5 为氢。在一些实施方案中， R4为氢。在一些实施方案中，R4 为任选取代的C1-C6 杂烷基（例如
Figure 987342DEST_PATH_IMAGE002
或
Figure 767080DEST_PATH_IMAGE003
。在一些实施方案中，R4 为任选取代的C1-C6 烷基（例如甲基)。
在一些实施方案中，Het为
Figure 162289DEST_PATH_IMAGE004
。在一些实施方案中，Het为
Figure 976661DEST_PATH_IMAGE005
。
在一些实施方案中，R1 为异丙基。在一些实施方案中，R1为
Figure 861441DEST_PATH_IMAGE006
。在一些实施方案中，R1为
Figure 128474DEST_PATH_IMAGE007
。在一些实施方案中，R1为
Figure 327374DEST_PATH_IMAGE008
。在一些实施方案中，R1为
Figure 996253DEST_PATH_IMAGE009
。在一些实施方案中，R1为
Figure 51933DEST_PATH_IMAGE010
。在一些实施方案中，m为0。在一些实施方案中，m为1。在一些实施方案中，m为2。
在一些实施方案中，至少一个R2 为任选取代的C1-C6 烷基或卤素。在一些实施方案中，R2 为甲基。在一些实施方案中，R2 为任选取代的C1-C6 杂烷基（例如
Figure 806263DEST_PATH_IMAGE011
)。在一些实施方案中，R2 为任选取代的氨基（例如–NH2)。
在一些实施方案中，R1与R2 以及它们所连接的原子组合形成5-至7-元环。在一些实施方案中，所述化合物具有如下式Ia的结构：
Figure 543275DEST_PATH_IMAGE012
。
在一些实施方案中，n为0。在一些实施方案中，n为1。在一些实施方案中，至少一个R7 为氰基。在一些实施方案中，R6 为氢。在一些实施方案中，R6 为氰基。在一些实施方案中，R6 为任选取代的C1-C6 杂烷基（例如
Figure 66660DEST_PATH_IMAGE013
或
Figure 558821DEST_PATH_IMAGE014
)。在一些实施方案中，R6 为羧基。在一些实施方案中，R6 为任选取代的C2-C9 杂芳基（例如
Figure 800447DEST_PATH_IMAGE015
,
Figure 75570DEST_PATH_IMAGE016
,
Figure 719041DEST_PATH_IMAGE017
,
Figure 116524DEST_PATH_IMAGE018
,
Figure 845446DEST_PATH_IMAGE019
,
Figure 924260DEST_PATH_IMAGE020
Figure 422238DEST_PATH_IMAGE021
。
在一些实施方案中，R6 为任选取代的C2-C9 杂芳基（例如
Figure 256202DEST_PATH_IMAGE022
,
Figure 206840DEST_PATH_IMAGE023
,
Figure 89345DEST_PATH_IMAGE024
Figure 441829DEST_PATH_IMAGE025
。
在一些实施方案中，R6 为任选取代的C2-C9 杂环基（例如
Figure 446694DEST_PATH_IMAGE026
或
Figure 884629DEST_PATH_IMAGE027
)。在一些实施方案中，R6 为任选取代的C6-C10 芳基（例如3,5-二氰基-苯基、3-羟甲基-5-氰基-苯基、3-氰基-苯基、3-羟甲基-5-三氟甲基-苯基、3-氯-苯基、3,5-二氯-苯基、3-氨基甲基-苯基、
Figure 305246DEST_PATH_IMAGE028
或4-氨基甲基-苯基)。
在一些实施方案中，所述化合物为表1a中的化合物12-47的任一个。在一些实施方案中，所述化合物为表1b中的化合物110-129的任一个。
Figure 777816DEST_PATH_IMAGE029
Figure 953582DEST_PATH_IMAGE030
Figure 878813DEST_PATH_IMAGE031
Figure 103121DEST_PATH_IMAGE032
在一个方面，本发明的特征在于具有以下结构的化合物：
Figure 164618DEST_PATH_IMAGE033
其中o为0、1、2、3或4；
p为0、1、2、3、4或5；
R8和R9 独立地为氢或任选取代的C1-C6 烷基，或R9与R10 以及它们所连接的原子组合形成5-至8-元环；
各R10 独立地为卤素、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基，或R10与R9 以及它们所连接的原子组合形成5-至8-元环；
R11和R13 独立地为氢或任选取代的C1-C6 烷基；
R12 为氢、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基；
Het 为任选取代的C2-C9 杂芳基；和
各R14 独立地为任选取代的酰胺、氰基、任选取代的C1-C6 杂烷基、羧基、任选取代的C2-C9 杂芳基、任选取代的C2-C9 杂环基或任选取代的C6-C10 芳基；
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，R11 为氢。在一些实施方案中，R13 为氢。在一些实施方案中，R12 为氢。在一些实施方案中，R8 为任选取代的C1-C6 烷基（例如甲基)。在一些实施方案中，R9 为任选取代的C1-C6 烷基（例如甲基)。在一些实施方案中，o为0。
在一些实施方案中，R9与R10 以及它们所连接的原子组合形成5-至8-元环。在一些实施方案中，所述化合物具有以下式IIa的结构：
Figure 514215DEST_PATH_IMAGE034
其中虚线为任选的双键。
在一些实施方案中，Het为
Figure 926742DEST_PATH_IMAGE035
。
在一些实施方案中，p为1。在一些实施方案中，R14 为任选取代的酰胺（例如R14为
Figure 954741DEST_PATH_IMAGE036
)。在一些实施方案中，R14 为羧基。在一些实施方案中，R14 为任选取代的C2-C9杂芳基（例如
Figure 136323DEST_PATH_IMAGE037
Figure 325996DEST_PATH_IMAGE038
Figure 288136DEST_PATH_IMAGE039
。
在一些实施方案中，所述化合物为表2a中的化合物1-11的任一个。在一些实施方案中，所述化合物为表2b中的化合物130或131的任一个。
Figure 854247DEST_PATH_IMAGE040
Figure 155915DEST_PATH_IMAGE041
在一个方面，本发明的特征在于具有以下结构的化合物：
Figure 516489DEST_PATH_IMAGE042
其中E 为氢、羟基、氨基、氰基、任选取代的C1-C6 烷基、任选取代的C1-C6 羟烷基、任选取代的C1-C6 氨基烷基、任选取代的甲硅烷基、任选取代的C2-C9 杂环基或任选取代的C3-C8 环烷基；
D 为任选取代的C6-C10 芳基或任选取代的C2-C9 杂芳基；
R19和R21 独立地为氢或任选取代的C1-C6 烷基；
各R20 独立地为氢、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基，或两个R20基团与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基；
Het 为任选取代的C2-C9 杂芳基；
A 为任选取代的C6-C10 芳基或任选取代的C2-C9 杂芳基；和
R23 独立地为氢、氰基、任选取代的C1-C6 烷基、任选取代的C1-C6 烷氧基、任选取代的酰胺、任选取代的C1-C6 杂烷基、任选取代的C3-C8 环烷基、任选取代的C2-C9 杂芳基、任选取代的C2-C9 杂环基或任选取代的C6-C10 芳基，或R23与R22 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C2-C9 杂环基；
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，E 为氢。在一些实施方案中，E 为羟基。在一些实施方案中，E为氨基，即-NH2。在一些实施方案中，E 为氰基。在一些实施方案中，E 为任选取代的C1-C6烷基，例如叔丁基。在一些实施方案中，E 为任选取代的C1-C6 羟烷基，例如
Figure 965925DEST_PATH_IMAGE043
,
Figure 335726DEST_PATH_IMAGE044
,
Figure 226322DEST_PATH_IMAGE045
或
Figure 23377DEST_PATH_IMAGE046
。在一些实施方案中，E 为任选取代的C1-C6 氨基烷基，例如
Figure 632213DEST_PATH_IMAGE047
或
Figure 868022DEST_PATH_IMAGE048
。在一些实施方案中，E 为任选取代的甲硅烷基，例如三甲基甲硅烷基。在一些实施方案中，E 为任选取代的C2-C9 杂环基, 例如,
Figure 878703DEST_PATH_IMAGE049
,
Figure 846659DEST_PATH_IMAGE050
,
Figure 942791DEST_PATH_IMAGE051
,
Figure 716712DEST_PATH_IMAGE052
,
Figure 581900DEST_PATH_IMAGE053
或
Figure 720757DEST_PATH_IMAGE054
。在一些实施方案中，E 为任选取代的C3-C8 环烷基, 例如,
Figure 304185DEST_PATH_IMAGE055
,
Figure 553901DEST_PATH_IMAGE056
,
Figure 601492DEST_PATH_IMAGE057
或
Figure 911250DEST_PATH_IMAGE058
。
在一些实施方案中，D 为任选取代的C6-C10 芳基。在一些实施方案中，D 为任选取代的C6-C10 单环芳基, 例如,
Figure 981974DEST_PATH_IMAGE059
,
Figure 35381DEST_PATH_IMAGE060
,
Figure 937478DEST_PATH_IMAGE061
,
Figure 418138DEST_PATH_IMAGE062
或
Figure 710579DEST_PATH_IMAGE063
。在一些实施方案中，D 为任选取代的C6-C10 多环芳基, 例如,
Figure 567677DEST_PATH_IMAGE064
,
Figure 324280DEST_PATH_IMAGE065
,
Figure 975841DEST_PATH_IMAGE066
,
Figure 21158DEST_PATH_IMAGE067
,
Figure 416367DEST_PATH_IMAGE068
,
Figure 965160DEST_PATH_IMAGE069
,
Figure 136026DEST_PATH_IMAGE070
或
Figure 403060DEST_PATH_IMAGE071
。在一些实施方案中，D 为任选取代的C2-C9 杂芳基。在一些实施方案中，D为任选取代的C2-C9 单环杂芳基, 例如,
Figure 601960DEST_PATH_IMAGE072
或
Figure 5259DEST_PATH_IMAGE073
。在一些实施方案中，D为任选取代的C2-C9 多环杂芳基, 例如,
Figure 326519DEST_PATH_IMAGE074
,
Figure 80849DEST_PATH_IMAGE075
,
Figure 817860DEST_PATH_IMAGE076
Figure 341246DEST_PATH_IMAGE077
Figure 833407DEST_PATH_IMAGE078
Figure 809453DEST_PATH_IMAGE079
。
在一些实施方案中，Het为
Figure 350156DEST_PATH_IMAGE080
。
在一些实施方案中，至少一个R20 为氢（优选两个R20 为氢)。
在一些实施方案中，式IIIa的化合物为具有以下结构的化合物：
Figure 993627DEST_PATH_IMAGE081
。
在一些实施方案中，R20 为任选取代的C1-C6 杂烷基（例如
Figure 328793DEST_PATH_IMAGE082
)。在一些实施方案中，R20 为任选取代的C1-C6 烷基（例如甲基)。在一些实施方案中，r为0。
在一些实施方案中，A 为任选取代的C6-C10 芳基, 例如,
Figure 120032DEST_PATH_IMAGE083
或
Figure 198846DEST_PATH_IMAGE084
。在一些实施方案中，A 为任选取代的C6-C10 杂芳基, 例如,
Figure 696824DEST_PATH_IMAGE085
,
Figure 202891DEST_PATH_IMAGE086
,
Figure 481426DEST_PATH_IMAGE087
。
在一些实施方案中，R23 为氢。在一些实施方案中，R23 为氰基。在一些实施方案中，R23 为任选取代的C1-C6 烷基, 例如, 甲基。在一些实施方案中，R23 为任选取代的C3-C8环烷基, 例如,
Figure 363931DEST_PATH_IMAGE088
。在一些实施方案中，R23 为任选取代的C1-C6 杂烷基（例如
Figure 716415DEST_PATH_IMAGE089
)。在一些实施方案中，R23 为任选取代的C2-C9 杂芳基（例如
Figure 658963DEST_PATH_IMAGE090
Figure 96898DEST_PATH_IMAGE091
Figure 579832DEST_PATH_IMAGE092
Figure 52401DEST_PATH_IMAGE093
。在一些实施方案中，R23 为任选取代的C2-C9 杂环基（例如
Figure 900272DEST_PATH_IMAGE094
,
Figure 825502DEST_PATH_IMAGE095
或
Figure 112127DEST_PATH_IMAGE096
)。在一些实施方案中，R23 为任选取代的C6-C10 芳基（例如3,5-二-氰基-苯基、3-羟甲基-5-三氟甲基-苯基、3-氯-苯基、3-氰基-苯基、3,5-二-氯-苯基、3-氨基甲基-苯基或3-羟甲基-5-氰基-苯基)。
在一些实施方案中，r为0。在一些实施方案中，R23与R22 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C2-C9 杂环基。
在一个方面，本发明的特征在于具有以下结构的化合物：
Figure 439203DEST_PATH_IMAGE097
其中q和r独立地为0、1、2、3或4；
R15 为任选取代的C1-C6 烷基或卤素，或R15与R17 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基；
R16 为任选取代的C1-C6 烷基、任选取代的C1-C6 全氟烷基，或R16与R18 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基，或R16与R15 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基；
R17 为氰基、任选取代的氨基、羟基、任选取代的C1-C6 烷基、任选取代的C1-C6 羟烷基、任选取代的C1-C6 氨基烷基或
Figure 723554DEST_PATH_IMAGE098
，或R17与R18 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基；
X1为O或–N-OH；
各R18 独立地为卤素、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基，或R18与R16 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基，或R18与R17 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9杂环基；
R19、R21、R24和R25 独立地为氢或任选取代的C1-C6 烷基；
R20 为氢、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基；
Het 为任选取代的C2-C9 杂芳基；和
各R22 独立地为羟基、卤素、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基，或R22与R23 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C2-C9 杂环基；
R23 独立地为氢、氰基、任选取代的C1-C6 烷氧基、任选取代的酰胺、任选取代的C1-C6 杂烷基、任选取代的C2-C9 杂芳基、任选取代的C2-C9 杂环基或任选取代的C6-C10 芳基，或R23与R22 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C2-C9 杂环基；
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，r为0或1。在一些实施方案中，R19 为氢。在一些实施方案中，R21 为氢。
在一些实施方案中，Het为
Figure 136081DEST_PATH_IMAGE099
。
在一些实施方案中，R20 为氢。在一些实施方案中，R20 为任选取代的C1-C6 杂烷基（例如
Figure 960818DEST_PATH_IMAGE100
)。在一些实施方案中，R20 为任选取代的C1-C6 烷基（例如甲基)。在一些实施方案中，q为0。在一些实施方案中，q为1。在一些实施方案中，q为2。在一些实施方案中，各R18 为任选取代的C1-C6烷基（例如甲基或乙基)。在一些实施方案中，R18与R16 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基。在一些实施方案中，R18与R16 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基。
在一些实施方案中，所述化合物具有以下结构：
Figure 142400DEST_PATH_IMAGE101
。
在一些实施方案中，R18与R16 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C2-C9杂环基。
在一些实施方案中，所述化合物具有以下结构：
Figure 597652DEST_PATH_IMAGE102
。
在一些实施方案中，所述化合物具有以下结构：
Figure 497475DEST_PATH_IMAGE103
。
在一些实施方案中，所述化合物具有以下结构：
Figure 63586DEST_PATH_IMAGE104
。
在一些实施方案中，R18与R17 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8环烷基。
在一些实施方案中，所述化合物具有以下结构：
Figure 164921DEST_PATH_IMAGE105
。
在一些实施方案中，R16 为任选取代的C1-C6 烷基（例如甲基或乙基)。在一些实施方案中，R16 为任选取代的C1-C6 全氟烷基（例如三氟甲基)。在一些实施方案中，R16与R15 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基。在一些实施方案中，R16与R15 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基。
在一些实施方案中，所述化合物具有以下结构：
Figure 791075DEST_PATH_IMAGE106
。
在一些实施方案中，R16与R15 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C2-C9杂环基。
在一些实施方案中，所述化合物具有以下结构：
Figure 178194DEST_PATH_IMAGE107
。
在一些实施方案中，所述化合物具有以下结构：
Figure 282416DEST_PATH_IMAGE108
。
在一些实施方案中，R15 为任选取代的C1-C6 烷基（例如甲基)。在一些实施方案中，R17 为氰基。在一些实施方案中，R17 为任选取代的氨基（例如–NH2)。在一些实施方案中，R17 为羟基。在一些实施方案中，R17 为任选取代的C1-C6烷基（例如甲基、乙基或异丙基)。在一些实施方案中，R17 为任选取代的C1-C6 羟烷基 (例如,–CH2OH)。在一些实施方案中，R17为任选取代的C1-C6 氨基烷基（例如–CH2NH2)。在一些实施方案中，R17为
Figure 500908DEST_PATH_IMAGE109
。在一些实施方案中，X1为O。在一些实施方案中，X1为–N-OH。
在一些实施方案中，R24 为氢。在一些实施方案中，R25 为氢。在一些实施方案中，R23 为氢。在一些实施方案中，R23 为氰基。在一些实施方案中，R23 为任选取代的C1-C6 杂烷基（例如
Figure 297963DEST_PATH_IMAGE110
)。在一些实施方案中，R23 为任选取代的C2-C9 杂芳基（例如
Figure 906798DEST_PATH_IMAGE111
Figure 80291DEST_PATH_IMAGE112
Figure 90972DEST_PATH_IMAGE113
。在一些实施方案中，R23 为任选取代的C2-C9 杂环基（例如
Figure 121245DEST_PATH_IMAGE114
)。在一些实施方案中，R23 为任选取代的C6-C10 芳基（例如3,5-二-氰基-苯基、3-羟甲基-5-三氟甲基-苯基、3-氯-苯基、3-氰基-苯基、3,5-二-氯-苯基、或 3-羟甲基-5-氰基-苯基)。
在一些实施方案中，r为0。在一些实施方案中，R23与R22 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C2-C9 杂环基。
在一些实施方案中，所述化合物具有以下结构：
Figure 217377DEST_PATH_IMAGE115
。
在一些实施方案中，所述化合物为表3a中化合物48-109的任一个。在一些实施方案中，所述化合物为表3b中化合物132-268的任一个。在一些实施方案中，所述化合物为表3c中化合物269-444的任一个。
Figure 663402DEST_PATH_IMAGE116
Figure 794169DEST_PATH_IMAGE117
Figure 995343DEST_PATH_IMAGE118
Figure 578771DEST_PATH_IMAGE119
Figure 828487DEST_PATH_IMAGE120
Figure 813760DEST_PATH_IMAGE121
Figure 123519DEST_PATH_IMAGE122
Figure 256560DEST_PATH_IMAGE123
Figure 309967DEST_PATH_IMAGE124
Figure 149747DEST_PATH_IMAGE125
Figure 630407DEST_PATH_IMAGE126
Figure 985165DEST_PATH_IMAGE127
Figure 842262DEST_PATH_IMAGE128
Figure 536549DEST_PATH_IMAGE129
Figure 188110DEST_PATH_IMAGE130
Figure 295743DEST_PATH_IMAGE131
Figure 690953DEST_PATH_IMAGE132
Figure 239746DEST_PATH_IMAGE133
Figure 327787DEST_PATH_IMAGE134
Figure 657137DEST_PATH_IMAGE135
Figure 590458DEST_PATH_IMAGE136
另一方面，本发明的特征是一种药物组合物，其包含上述化合物中的任一种和药学上可接受的赋形剂。
在另一方面，本发明的特征是一种降低细胞中的BAF复合物的活性的方法，所述方法包括使所述细胞与有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物接触。
在一些实施方案中，所述细胞是癌细胞。
在另一方面，本发明的特征是一种治疗有需要的受试者的BAF复合物相关病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的前述化合物中的任一种(例如BRM/BRG1双抑制剂化合物或BRM-选择性化合物)或其药物组合物。
在一些实施方案中，所述BAF复合物相关病症是癌症。
在另一方面，本发明的特征是一种抑制BRM的方法，所述方法包括使细胞与有效量的前述化合物中的任一种(例如BRM/BRG1双抑制剂化合物或BRM-选择性化合物)或其药物组合物接触。
在一些实施方案中，所述细胞是癌细胞。
在另一方面，本发明的特征是一种抑制BRG1的方法，所述方法包括使细胞与有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物接触。在一些实施方案中，所述细胞是癌细胞。
在另一方面，本发明的特征是一种抑制BRM和BRG1的方法，所述方法包括使细胞与有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物接触。在一些实施方案中，所述细胞是癌细胞。
在另一方面，本发明的特征是一种治疗有需要的受试者的BRG1功能丧失性突变相关病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的前述化合物中的任一种(例如BRM/BRG1双抑制剂化合物或BRM-选择性化合物)或其药物组合物。
在一些实施方案中，所述BRG1功能丧失性突变相关病症是癌症。在其他实施方案中，所述受试者被确定为患有BRG1功能丧失性病症，例如被确定为患有BRG1功能丧失性癌症(例如，所述癌症已被确定为包括具有BRG1功能丧失的癌细胞)。
在另一方面，本发明的特征是一种诱导细胞的细胞凋亡的方法，所述方法包括使所述细胞与有效量的前述化合物中的任一种(例如BRM/BRG1双抑制剂化合物或BRM-选择性化合物)或其药物组合物接触。
在一些实施方案中，所述细胞是癌细胞。
在另一方面，本发明的特征是一种治疗有需要的受试者的癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的前述化合物中的任一种(例如BRM/BRG1双抑制剂化合物或BRM-选择性化合物)或其药物组合物。
在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症是非小细胞肺癌、结肠直肠癌、膀胱癌、原发不明癌症、神经胶质瘤、乳腺癌、黑素瘤、非黑素瘤皮肤癌、子宫内膜癌、食道胃癌、胰腺癌、肝胆管癌、软组织肉瘤、卵巢癌、头颈癌、肾细胞癌、骨癌、非霍奇金淋巴瘤、小细胞肺癌、前列腺癌、胚胎肿瘤、生殖细胞瘤、宫颈癌、甲状腺癌、唾液腺癌、胃肠神经内分泌肿瘤、子宫肉瘤、胃肠道间质瘤、CNS癌症、胸腺肿瘤、肾上腺皮质癌、阑尾癌、小肠癌或阴茎癌。
在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症是非小细胞肺癌、结肠直肠癌、膀胱癌、原发不明癌症、神经胶质瘤、乳腺癌、黑素瘤、非黑素瘤皮肤癌、子宫内膜癌或阴茎癌。
在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症是耐药性癌症或对先前疗法没有反应(例如，维莫非尼、达卡巴嗪、CTLA4抑制剂、PD1抑制剂、干扰素疗法、BRAF抑制剂、MEK抑制剂、放射疗法、替莫唑胺、伊立替康、CAR-T疗法、Herceptin®, Perjeta®、他莫昔芬、Xeloda®、多西紫杉醇、铂剂(如卡铂)、紫杉烷类(如紫杉醇和多西他赛)、ALK抑制剂、MET抑制剂、Alimta®, Abraxane®、Adriamycin®、吉西他滨、Avastin®, Halaven®、来那替尼、PARP抑制剂、ARN810、mTOR抑制剂、托泊替康、Gemzar®、VEGFR2抑制剂、叶酸受体拮抗剂、登西珠单抗(demcizumab)、福布瑞汀(fosbretabulin)或PDL1抑制剂)。
在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症具有或已被确定具有BRG1突变。在任何前述方法的一些实施方案中，所述BRG1突变是纯合的。在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症不具有或已被确定不具有表皮生长因子受体(EGFR)突变。在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症不具有或已被确定不具有间变性淋巴瘤激酶(ALK)驱动突变。在任何前述方法的一些实施方案中，所述癌症具有或已被确定具有KRAS突变。在任何前述方法的一些实施方案中，所述BRG1突变位于蛋白质的ATP酶催化结构域中。在任何前述方法的一些实施方案中，所述BRG1突变是BRG1的C端处的缺失。
在另一方面，本公开提供了一种治疗有需要的受试者的BAF相关病症(例如，癌症或病毒感染)的方法。所述方法包括使细胞与有效量的前述化合物中的任一种(例如BRM/BRG1双抑制剂化合物或BRM-选择性化合物)或其药学上可接受的盐或任何前述药物组合物接触。在一些实施方案中，所述病症是病毒感染，所述病毒感染是被以下病毒感染：逆转录病毒科如慢病毒(例如，人免疫缺陷病毒(HIV)和δ-逆转录病毒属(例如，人T细胞白血病病毒I (HTLV-I)、人T细胞白血病病毒II (HTLV-II))、嗜肝DNA病毒科(例如，乙型肝炎病毒(HBV))、黄病毒科(例如，丙型肝炎病毒(HCV))、腺病毒科(例如，人腺病毒)、疱疹病毒科(例如，人巨细胞病毒(HCMV)、爱泼斯坦-巴尔病毒、单纯疱疹病毒1 (HSV-1)、单纯疱疹病毒2(HSV-2)、人疱疹病毒6 (HHV-6)、疱疹病毒K*、CMV、水痘-带状疱疹病毒)、乳头瘤病毒科(例如，人乳头瘤病毒(HPV、HPV E1))、细小病毒科(例如，细小病毒B19)、多瘤病毒科(例如，JC病毒和BK病毒)、副粘病毒科(例如，麻疹病毒)、披膜病毒科(例如，风疹病毒)。在一些实施方案中，所述疾病症是科芬-西里斯(Coffin Siris)、神经纤维瘤病(例如，NF-1、NF-2或神经鞘瘤病)或多发性脑膜瘤。
在另一方面，本公开提供了一种用于治疗有需要的受试者的病毒感染的方法。所述方法包括向所述受试者施用有效量的前述化合物中的任一种(例如BRM/BRG1双抑制剂化合物或BRM-选择性化合物)或其药学上可接受的盐或任何前述药物组合物。在一些实施方案中，所述病毒感染是被以下病毒感染：逆转录病毒科如慢病毒(例如，人免疫缺陷病毒(HIV)和δ-逆转录病毒属(例如，人T细胞白血病病毒I (HTLV-I)、人T细胞白血病病毒II(HTLV-II))、嗜肝DNA病毒科(例如，乙型肝炎病毒(HBV))、黄病毒科(例如，丙型肝炎病毒(HCV))、腺病毒科(例如，人腺病毒)、疱疹病毒科(例如，人巨细胞病毒(HCMV)、爱泼斯坦-巴尔病毒、单纯疱疹病毒1 (HSV-1)、单纯疱疹病毒2 (HSV-2)、人疱疹病毒6 (HHV-6)、疱疹病毒K*、CMV、水痘-带状疱疹病毒)、乳头瘤病毒科(例如，人乳头瘤病毒(HPV、HPV E1))、细小病毒科(例如，细小病毒B19)、多瘤病毒科(例如，JC病毒和BK病毒)、副粘病毒科(例如，麻疹病毒)或披膜病毒科(例如，风疹病毒)。
在上述任何方面的一些实施方案中，所述化合物为BRM-选择性化合物。在一些实施方案中，所述BRM-选择性化合物抑制BRM的水平和/或活性为所述化合物抑制BRG1的水平和/或活性的至少10倍和/或所述化合物与BRM结合为所述化合物与BRG1结合至少10倍。例如，在一些实施方案中，BRM-选择性化合物的 IC50或IP50为针对BRG1的 IC50或IP50的至多1/10。在上述任何方面的一些实施方案中，所述化合物为BRM/BRG1双抑制剂化合物。在一些实施方案中，所述BRM/BRG1双抑制剂化合物针对BRM 和BRG1具有类似活性（例如所述化合物针对BRM和BRG1的活性在10倍以内（例如低于5-倍，低于2-倍)。在一些实施方案中，BRM/BRG1双抑制剂化合物的活性大于针对BRM的活性。在一些实施方案中，BRM/BRG1双抑制剂化合物的活性大于针对BRG1的活性。例如，在一些实施方案中，BRM/BRG1双抑制剂化合物针对BRM的IC50或IP50为针对BRG1的IC50或IP50的10倍以内。
在另一方面，本发明的特征是一种治疗有需要的受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物。
在另一方面，本发明的特征是一种减少有需要的受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌的肿瘤生长的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物。
在另一方面，本发明的特征是一种抑制受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌的转移进展的方法，所述方法包括施用有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物。
在另一方面，本发明的特征是一种抑制受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌的转移定殖的方法，所述方法包括施用有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物。
在另一方面，本发明的特征是一种降低黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌细胞中的BRG1和/或BRM的水平和/或活性的方法，所述方法包括使所述细胞与有效量的前述化合物中的任一种或其药物组合物接触。
在任何上述方面的一些实施方案中，黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液细胞在受试者体内。
在任何上述方面的一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使BRG1的水平和/或活性降低至少5%(例如，6%、7%、8%、9%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%)。在一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使BRG1的水平和/或活性降低至少50%(例如，55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%)。在一些实施方案中，所述化合物的有效量使BRG1的水平和/或活性降低至少90%(例如，91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%)。
在一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使BRG1的水平和/或活性降低至少5%(例如6%、7%、8%、9%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%)保持至少12小时(例如，14小时、16小时、18小时、20小时、22小时、24小时、30小时、36小时、48小时、72小时或更长时间)。在一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使BRG1的水平和/或活性降低至少5%(例如，6%、7%、8%、9%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%)保持至少4天(例如，5天、6天、7天、14天、28天或更长时间)。
在任何上述方面的一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使BRM的水平和/或活性降低至少5%(例如，6%、7%、8%、9%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%)。在一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使BRM的水平和/或活性降低至少50%(例如，55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%)。在一些实施方案中，所述化合物的有效量使BRM的水平和/或活性降低至少90%(例如，91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%)。
在一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使BRM的水平和/或活性降低至少5%(例如6%、7%、8%、9%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%)保持至少12小时(例如，14小时、16小时、18小时、20小时、22小时、24小时、30小时、36小时、48小时、72小时或更长时间)。在一些实施方案中，与参考相比，所述化合物的有效量使BRM的水平和/或活性降低至少5%(例如，6%、7%、8%、9%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%)保持至少4天(例如，5天、6天、7天、14天、28天或更长时间)。
在一些实施方案中，所述受试者患有癌症。在一些实施方案中，所述癌症表达BRG1和/或BRM蛋白，和/或所述细胞或受试者已被鉴定为表达BRG1和/或BRM。在一些实施方案中，所述癌症表达BRG1蛋白，和/或所述细胞或受试者已被鉴定为表达BRG1。在一些实施方案中，所述癌症表达BRM蛋白，和/或所述细胞或受试者已被鉴定为表达BRM。在一些实施方案中，所述癌症是黑素瘤(例如，葡萄膜黑素瘤、粘膜黑素瘤或皮肤黑素瘤)。在一些实施方案中，所述癌症是前列腺癌。在一些实施方案中，所述癌症是血液学癌症，例如多发性骨髓瘤、大细胞淋巴瘤、急性T细胞白血病、急性骨髓性白血病、骨髓异常增生综合征、免疫球蛋白Aλ骨髓瘤、弥漫性混合型组织细胞和淋巴细胞淋巴瘤、B细胞淋巴瘤、急性淋巴母细胞白血病(例如，T细胞急性淋巴母细胞白血病或B细胞急性淋巴母细胞白血病)、弥漫性大细胞淋巴瘤或非霍奇金淋巴瘤。在一些实施方案中，所述癌症是乳腺癌(例如，ER阳性乳腺癌、ER阴性乳腺癌、三阳性乳腺癌或三阴性乳腺癌)。在一些实施方案中，所述癌症是骨癌(例如，尤文肉瘤)。在一些实施方案中，所述癌症是肾细胞癌(例如，小眼转录因子(MITF)家族易位性肾细胞癌(tRCC))。在一些实施方案中，所述癌症是转移性癌症(例如，癌症已扩散至肝脏)。转移性癌症可包括表现出迁移细胞的迁移和/或侵袭的细胞和/或包括表现出内皮募集和/或血管生成的细胞。在其他实施方案中，迁移性癌症是细胞迁移癌症。在其他实施方案中，细胞迁移癌症是非转移性细胞迁移癌症。转移性癌症可以是经由接种腹膜、胸膜、心包或蛛网膜下腔的表面而扩散的癌症。或者，转移性癌症可以是经由淋巴系统扩散的癌症，或者是血源性扩散的癌症。在一些实施方案中，降低BRG1和/或BRM的水平和/或活性的药剂的有效量是有效抑制癌症向肝转移定殖的量。
在一些实施方案中，所述癌症在GNAQ中具有突变。在一些实施方案中，所述癌症在GNA11中具有突变。在一些实施方案中，所述癌症在PLCB4中具有突变。在一些实施方案中，所述癌症在CYSLTR2中具有突变。在一些实施方案中，所述癌症在BAP1中具有突变。在一些实施方案中，所述癌症在SF3B1中具有突变。在一些实施方案中，所述癌症在EIF1AX中具有突变。在一些实施方案中，所述癌症具有TFE3易位。在一些实施方案中，所述癌症具有TFEB易位。在一些实施方案中，所述癌症具有MITF易位。在一些实施方案中，所述癌症具有EZH2突变。在一些实施方案中，所述癌症具有SUZ12突变。在一些实施方案中，所述癌症具有EED突变。
在一些实施方案中，所述方法还包括向所述受试者施用抗癌疗法或使所述细胞与抗癌疗法接触，所述抗癌疗法例如化学治疗剂或细胞毒性剂、免疫疗法、外科手术、放射疗法、热疗法或光凝固法。在一些实施方案中，所述抗癌疗法是化学治疗剂或细胞毒性剂，例如抗代谢药、抗有丝分裂剂、抗肿瘤抗生素、天冬酰胺特异性酶、双膦酸盐、抗肿瘤药、烷化剂、DNA修复酶抑制剂、组蛋白脱乙酰酶抑制剂、皮质类固醇、去甲基化剂、免疫调节剂、janus相关激酶抑制剂、磷酸肌醇3-激酶抑制剂、蛋白酶体抑制剂或酪氨酸激酶抑制剂。
在一些实施方案中，本发明的化合物与用于治疗葡萄膜黑素瘤的另一种抗癌疗法如外科手术、MEK抑制剂和/或PKC抑制剂组合使用。例如，在一些实施方案中，所述方法还包括在施用本发明的化合物之前、之后或与施用本发明的化合物同时进行外科手术。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用本发明的化合物之前、之后或与施用本发明的化合物同时施用MEK抑制剂和/或PKC抑制剂。
在一些实施方案中，所述抗癌疗法和本发明的化合物在彼此的28天内并且各自以一起有效治疗受试者的量施用。
在一些实施方案中，所述受试者或癌症具有和/或已被鉴定为具有BRG1功能丧失性突变。在一些实施方案中，所述受试者或癌症具有和/或已被鉴定为具有BRM功能丧失性突变。
在一些实施方案中，所述癌症对一种或多种化学治疗剂或细胞毒性剂具有抗性(例如，所述癌症已诸如通过遗传标记物被确定为对化学治疗剂或细胞毒性剂具有抗性，或可能对化学治疗剂或细胞毒性剂具有抗性，如对化学治疗剂或细胞毒性剂没有反应的癌症)。在一些实施方案中，所述癌症对一种或多种化学治疗剂或细胞毒性剂没有反应。在一些实施方案中，所述癌症对达卡巴嗪、替莫唑胺、顺铂、曲奥舒凡、福莫司汀、IMCgp100、CTLA-4抑制剂(例如，伊匹单抗)、PD-1抑制剂(例如，纳武单抗或派姆单抗)、PD-L1抑制剂(例如，阿特珠单抗、阿维鲁单抗或德瓦鲁单抗)、有丝分裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制剂(例如，司美替尼、比美替尼或曲美替尼)和/或蛋白激酶C (PKC)抑制剂(例如，索曲妥林(sotrastaurin)或IDE196)具有抗性或没有反应。
在一些实施方案中，所述癌症对先前施用的用于治疗葡萄膜黑素瘤的治疗剂如MEK抑制剂或PKC抑制剂具有抗性或没有反应。例如，在一些实施方案中，所述癌症对有丝分裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制剂(例如，司美替尼、比美替尼或曲美替尼)和/或蛋白激酶C(PKC)抑制剂(例如，索曲妥林或IDE196)具有抗性或没有反应。
化学术语
本文所采用的术语仅仅出于描述特定实施方案的目的，并且不意图是限制性的。
对于任何以下化学定义，原子符号后的数字表示存在于特定化学部分中的所述元素的原子总数。应理解，根据需要，可存在其他原子，如H原子或如本文所述的取代基，以满足原子的化合价。例如，未取代的C2烷基具有式–CH2CH3。当与本文所定义的基团一起使用时，提及碳原子数包括缩醛和缩酮基团中的二价碳，但不包括酰基、酯、碳酸酯或氨基甲酸酯基团中的羰基碳。提及杂芳基中的氧、氮或硫原子的数目仅包括形成杂环的一部分的那些原子。
如本文所用的术语“酰基”表示通过如本文所定义的羰基连接至母体分子基团的H或烷基，并且由甲酰基(即，甲醛基)、乙酰基、三氟乙酰基、丙酰基和丁酰基举例说明。示例性未取代的酰基包括1至6个、1至11个或1至21个碳。
如本文所用的术语“烷基”是指具有1至20个碳原子(例如，1至16个碳原子、1至10个碳原子、1至6个碳原子或1-3个碳原子)的支链或直链单价饱和脂族烃基。
亚烷基是二价烷基。如本文单独或与其他基团组合使用的术语“烯基”是指具有碳-碳双键且具有2至20个碳原子(例如，2至16个碳原子、2至10个碳原子、2至6个碳原子或2个碳原子)的直链或支链烃残基。
如本文单独或与其他基团组合使用的术语“炔基”是指具有碳-碳三键且具有2至20个碳原子(例如，2至16个碳原子、2至10个碳原子、2至6个碳原子或2个碳原子)的直链或支链烃残基。
如本文所用，术语“氨基”表示–N(RN1)2，其中每个RN1独立地是H、OH、NO2、N(RN2)2、SO2ORN2、SO2RN2、SORN2、N-保护基团、烷基、烷氧基、芳基、芳基烷基、环烷基、酰基(例如，乙酰基、三氟乙酰基或本文所述的其他酰基)，其中这些列举的RN1基团中的每一个可任选地被取代；或两个RN1组合形成亚烷基或杂亚烷基，并且其中每个RN2独立地是H、烷基或芳基。本发明的氨基可以是未取代的氨基(即，–NH2)或取代的氨基(即，–N(RN1)2)。
如本文所用，术语“芳基”是指具有至少一个芳环的6至12个碳原子的芳族单或多碳环基团。此类基团的实例包括但不限于苯基、萘基、1,2,3,4-四氢萘基、1,2-二氢萘基、茚满基和1H-茚基。
如本文所用，术语“芳基烷基”表示被芳基取代的烷基。示例性未取代的芳基烷基是7至30个碳(例如，7至16个或7至20个碳，如C1-C6烷基C6-C10芳基、C1-C10烷基C6-C10芳基或C1-C20烷基C6-C10芳基)，如苄基和苯乙基。在一些实施方案中，烷基和芳基各自均可进一步被如本文针对相应基团所定义的1、2、3或4个取代基取代。
如本文所用，术语“叠氮基”表示–N3基团。
如本文所用，术语“桥联多环烷基”是指具有1至3个桥的5至20个碳的桥联多环基团。
如本文所用，术语“氰基”表示-CN基团。
如本文所用，术语“碳环基”是指其中环由碳原子形成的非芳族C3-C12单环、双环或三环结构。碳环基结构包括环烷基和不饱和碳环基基团。
如本文所用，术语“环烷基”是指具有3至10个、优选3至6个碳原子的饱和、非芳族且单或多碳环基团。环烷基可以为单价或二价的。此术语进一步由诸如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、降冰片基和金刚烷基等基团举例说明。当如此规定时，如本文所用，术语“环烷基”也可以是指稠合至芳环的非芳族和单-或多碳环环系。
如本文所用，术语“卤代基”是指氟(氟代)、氯(氯代)、溴(溴代)或碘(碘代)基团。
如本文所用，术语“杂烷基”是指其中一个或多个组成碳原子已被氮、氧或硫取代的如本文所定义的烷基。在一些实施方案中，杂烷基可进一步被如本文针对烷基所描述的1、2、3或4个取代基取代。杂烷基的实例是“烷氧基”，如本文所用，烷氧基是指烷基-O-(例如，甲氧基和乙氧基)。杂亚烷基是二价杂烷基。如本文所用，术语“杂烯基”是指其中一个或多个组成碳原子已被氮、氧或硫取代的如本文所定义的烯基。在一些实施方案中，杂烯基可进一步被如本文针对烯基所描述的1、2、3或4个取代基取代。杂烯基的实例是“烯氧基”，如本文所用，烯氧基是指烯基-O-。杂亚烯基是二价杂烯基。如本文所用，术语“杂炔基”是指其中一个或多个组成碳原子已被氮、氧或硫取代的如本文所定义的炔基。在一些实施方案中，杂炔基可进一步被如本文针对炔基所描述的1、2、3或4个取代基取代。杂炔基的实例是“炔氧基”，如本文所用，炔氧基是指炔基-O-。杂亚炔基是二价杂炔基。
如本文所用，术语“杂芳基”是指具有至少一个芳环的5至12个原子的芳族单或多环基团，所述芳环含有1、2或3个选自氮、氧和硫的环原子，其中剩余的环原子是碳。杂芳基的一个或两个环碳原子可被羰基取代。杂芳基的实例是吡啶基、吡唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、咪唑基、噁唑基和噻唑基。
如本文所用，术语“杂芳基烷基”表示被杂芳基取代的烷基。示例性未取代的杂芳基烷基是7至30个碳(例如，7至16个碳或7至20个碳，如C1-C6烷基C2-C9杂芳基、C1-C10烷基C2-C9杂芳基或C1-C20烷基C2-C9杂芳基)。在一些实施方案中，烷基和杂芳基各自均可进一步被如本文针对相应基团所定义的1、2、3或4个取代基取代。
如本文所可互换使用地，术语“杂环”和“杂环基”是指具有至少一个环的具有3至12个原子的单或多环基团，所述环含有1、2、3或4个选自N、O或S的环原子。杂环基可以为非芳族的，其中没有环为芳族的。或者，杂环基可以为芳族的。芳族杂环基可以是指本文中所述的杂芳基。杂环基的实例包括但不限于吗啉基、硫代吗啉基、呋喃基、哌嗪基、哌啶基、吡喃基、吡咯烷基、四氢吡喃基、四氢呋喃基和1,3-二噁烷基。
如本文所用，术语“杂环基烷基”表示被杂环基取代的烷基。示例性未取代的杂环基烷基是7至30个碳(例如，7至16个或7至20个碳，如C1-C6烷基C2-C9杂环基、C1-C10烷基C2-C9杂环基或C1-C20烷基C2-C9杂环基)。在一些实施方案中，烷基和杂环基各自均可进一步被如本文针对相应基团所定义的1、2、3或4个取代基取代。
如本文所用，术语“羟烷基”表示被-OH基团取代的烷基。
如本文所用，术语“羟基”表示-OH基团。
如本文所用，术语“N-保护基团”表示在合成过程中意图保护氨基免于发生不希望的反应的那些基团。常用的N-保护基团在Greene, “Protective Groups in OrganicSynthesis,” 第3版(John Wiley & Sons, New York, 1999)中公开。N-保护基团包括但不限于酰基、芳酰基或氨基甲酰基，如甲酰基、乙酰基、丙酰基、新戊酰基、叔丁基乙酰基、2-氯乙酰基、2-溴乙酰基、三氟乙酰基、三氯乙酰基、邻苯二甲酰基、邻硝基苯氧基乙酰基、α-氯丁酰基、苯甲酰基、4-氯苯甲酰基、4-溴苯甲酰基、4-硝基苯甲酰基和手性助剂，如受保护的或未受保护的D、L或D、L-氨基酸，如丙氨酸、亮氨酸和苯丙氨酸；含磺酰基的基团，如苯磺酰基和对甲苯磺酰基；氨基甲酸酯形成基团，如苄氧基羰基、对氯苄氧基羰基、对甲氧基苄氧基羰基、对硝基苄氧基羰基、2-硝基苄氧基羰基、对溴苄氧基羰基、3,4-二甲氧基苄氧基羰基、3,5-二甲氧基苄氧基羰基、2,4-20二甲氧基苄氧基羰基、4-甲氧基苄氧基羰基、2-硝基-4,5-二甲氧基苄氧基羰基、3,4,5-三甲氧基苄氧基羰基、1-(对联苯基)-1-甲基乙氧基羰基、α,α-二甲基-3,5-二甲氧基苄氧基羰基、二苯甲基氧基羰基、叔丁氧基羰基、二异丙基甲氧基羰基、异丙氧基羰基、乙氧基羰基、甲氧基羰基、烯丙氧基羰基、2,2,2,-三氯乙氧基羰基、苯氧基羰基、4-硝基苯氧基羰基、芴基-9-甲氧基羰基、环戊氧基羰基、金刚烷基氧基羰基、环己基氧基羰基和苯硫基羰基；芳基烷基，如苄基、三苯基甲基和苄氧基甲基；以及甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基。优选的N-保护基团是alloc、甲酰基、乙酰基、苯甲酰基、新戊酰基、叔丁基乙酰基、丙氨酰基、苯磺酰基、苄基、叔丁氧基羰基(Boc)和苄氧基羰基(Cbz)。
如本文所用，术语“硝基”表示–NO2基团。
如本文所用，术语“巯基”表示-SH基团。
烷基、烯基、炔基、杂烷基、杂烯基、杂炔基、碳环基(例如，环烷基)、芳基、杂芳基和杂环基可被取代或未被取代。除非另有说明，否则当被取代时，通常将存在1至4个取代基。取代基包括，例如：烷基(例如，未取代的和取代的，其中取代基包括本文所述的任何基团，例如芳基、卤代基、羟基)、芳基(例如，取代的和未取代的苯基)、碳环基(例如，取代的和未取代的环烷基)、卤代基(例如，氟)、羟基、杂烷基(例如，取代的和未取代的甲氧基、乙氧基或硫代烷氧基)、杂芳基、杂环基、氨基(例如，NH2或单或二烷基氨基)、叠氮基、氰基、硝基或巯基。芳基、碳环基(例如，环烷基)、杂芳基和杂环基也可被烷基(未取代的和取代的，如芳基烷基(例如，取代的和未取代的苄基))取代。
本发明的化合物可具有一个或多个不对称碳原子，并且可以光学纯的对映异构体、对映异构体的混合物例如像外消旋体、光学纯的非对映异构体、非对映异构体的混合物、非对映异构外消旋体或非对映异构外消旋体的混合物形式存在。光学活性形式可例如通过拆分外消旋体、通过不对称合成或不对称色谱法(使用手性吸附剂或洗脱剂的色谱法)获得。即，某些公开的化合物可以各种立体异构体形式存在。立体异构体是仅在其空间排列上不同的化合物。对映异构体是成对的立体异构体，它们的镜像不可重叠，最常见的原因是它们含有不对称取代的碳原子，所述碳原子充当手性中心。“对映异构体”是指为彼此的镜像并且不可重叠的一对分子中的一者。非对映异构体是与镜像无关的立体异构体，最常见的原因是它们含有两个或更多个不对称取代的碳原子，并且表示一个或多个手性碳原子周围的取代基构型。化合物的对映异构体可例如通过使用一种或多种熟知的技术和方法，例如手性色谱法和基于其的分离方法，从外消旋体分离对映异构体来制备。本领域技术人员可容易地确定从外消旋混合物中分离本文所述的化合物的对映异构体的适当技术和/或方法。“外消旋体”或“外消旋混合物”是指含有两种对映异构体的化合物，其中此类混合物未表现出光学活性；即，它们不会旋转偏振光的平面。“几何异构体”是指在与碳-碳双键、环烷基环或桥联双环系统有关的取代基原子的取向方面不同的异构体。碳-碳双键每一侧的原子(除H外)可呈E(取代基在碳-碳双键的相对侧)或Z(取代基在同一侧取向)构型。“R”、“S”、“S*”、“R*”、“E”、“Z”、“顺式”和“反式”表示相对于核心分子的构型。所公开的化合物中的某些可以阻转异构体形式存在。阻转异构体是由于围绕单键的旋转受阻而产生的立体异构体，其中旋转的空间应变屏障足够高以允许构象异构体的分离。本发明的化合物可通过异构体特异性合成而制备为单独的异构体或由异构体混合物拆分。常规拆分技术包括使用光学活性酸形成异构体对的每种异构体的游离碱的盐(随后进行分步结晶和游离碱的再生)、使用光学活性胺形成异构体对的每种异构体的酸形式的盐(随后进行分步结晶和游离酸的再生)、使用光学纯酸、胺或醇形成异构体对的每种异构体的酯或酰胺 (随后进行色谱分离和除去手性助剂)，或使用各种众所周知的色谱方法拆分起始材料或最终产物的异构体混合物。当通过结构命名或描绘所公开化合物的立体化学时，所述命名或描绘的立体异构体相对于其他立体异构体是至少60重量%、70重量%、80重量%、90重量%、99重量%或99.9重量%。当通过结构命名或描绘单一对映异构体时，所描绘或命名的对映异构体是至少60重量%、70重量%、80重量%、90重量%、99重量%或99.9重量%光学纯的。当通过结构命名或描绘单一非对映异构体时，所描绘或命名的非对映异构体是至少60重量%、70重量%、80重量%、90重量%、99重量%或99.9%重量纯的。光学纯度百分比是对映异构体的重量相对于对映异构体的重量加上其光学异构体的重量的比率。按重量计的非对映异构体纯度是一种非对映异构体的重量相对于所有非对映异构体的重量的比率。当通过结构命名或描绘所公开化合物的立体化学时，所述命名或描绘的立体异构体相对于其他立体异构体是按摩尔分数计至少60%、70%、80%、90%、99%或99.9%纯的。当通过结构命名或描绘单一对映异构体时，所描绘或命名的对映异构体是按摩尔分数计至少60%、70%、80%、90%、99%或99.9%纯的。当通过结构命名或描绘单一非对映异构体时，所描绘或命名的非对映异构体是按摩尔分数计至少60%、70%、80%、90%、99%或99.9%纯的。按摩尔分数计的纯度百分比是对映异构体的摩尔数相对于对映异构体的摩尔数加上其光学异构体的摩尔数的比率。类似地，按摩尔分数计的纯度百分比是非对映异构体的摩尔数相对于非对映异构体的摩尔数加上其异构体的摩尔数的比率。当通过结构命名或描绘所公开的化合物而未指示立体化学并且所述化合物具有至少一个手性中心时，应理解所述名称或结构涵盖所述化合物的不含相应光学异构体的任一对映异构体、所述化合物的外消旋体混合物或相对于其相应的光学异构体富含一种对映异构体的混合物。当所公开的化合物通过结构命名或描绘而未指示立体化学并且具有两个或更多个手性中心时，应理解，所述名称或结构涵盖不含其他非对映异构体的非对映异构体、不含其他非对映异构体对的许多非对映异构体、非对映异构体的混合物、非对映异构体对的混合物、其中一种非对映异构体相对于其他一种或多种非对映异构体富集的非对映异构体的混合物或其中一种或多种非对映异构体相对于其他非对映异构体富集的非对映异构体的混合物。本发明包括所有这些形式。
除非另外定义，否则本文所用的所有技术和科学术语均具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的相同的含义。本文描述了用于在本公开中使用的方法和材料；也可使用本领域中已知的其他合适的方法和材料。所述材料、方法以及实施例仅是说明性的并且不意图是限制性的。本文提及的所有公布、专利申请、专利、序列、数据库条目和其他参考文献均以引用的方式整体并入。在冲突的情况下，以包括定义在内的本说明书为准。
定义
在本申请中，除非上下文另有明确说明，否则(i)术语“一个/种”可被理解为是指“至少一个/种”；(ii)术语“或”可被理解为是指“和/或”；并且(iii)术语“包含(comprising)”和“包括(including)”可被理解为涵盖逐项列出的组分或步骤，无论是它们本身呈现还是与一种或多种其他组分或步骤一起呈现。
如本文所用，术语“约”和“大约”是指在所描述的值以上或以下10%以内的值。例如，术语“约5 nM”表示4.5至5.5 nM的范围。
如本文所用，术语“施用”是指将组合物(例如，化合物或包含如本文所述的化合物的制剂)施用至受试者或系统。可通过任何适当的途径向动物受试者(例如，人)施用。例如，在一些实施方案中，施用可以是支气管(包括通过支气管滴注)、经颊、肠内、真皮内、动脉内、皮内、胃内、髓内、肌内、鼻内、腹膜内、鞘内、肿瘤内、静脉内、心室内、粘膜、鼻、口服、直肠、皮下、舌下、局部、气管(包括通过气管内滴注)、经皮、阴道和玻璃体。
如本文所用，术语“BAF复合物”是指人细胞中的BRG1或HBRM相关因子复合物。
如本文所用，术语“BAF复合物相关病症”是指由BAF复合物的活性水平引起或影响的病症。
如本文所用，术语“BRG1功能丧失性突变”是指BRG1中导致蛋白质活性降低的突变(例如，BRG1活性降低至少1%，例如BRG1活性降低2%、5%、10%、25%、50%或100%)。示例性BRG1功能丧失性突变包括但不限于纯合的BRG1突变和BRG1的C端处的缺失。
如本文所用，术语“BRG1功能丧失性病症”是指表现出BRG1活性降低(例如，BRG1活性降低至少1%，例如BRG1活性降低2%、5%、10%、25%、50%或100%)的病症。
术语“癌症”是指由恶性赘生性细胞的增殖所引起的疾患，如肿瘤、赘生物、癌、肉瘤、白血病和淋巴瘤。
如本文所用，“组合疗法”或“组合施用”是指将两种(或更多种)不同的药剂或治疗作为针对特定疾病或疾患的限定治疗方案的一部分施用至受试者。治疗方案定义了每种药剂的剂量和施用周期，以使单独药剂对受试者的作用重叠。在一些实施方案中，两种或更多种药剂的递送是同时或并行的，并且所述药剂可共同配制。在一些实施方案中，两种或更多种药剂不是共同配制的，并且作为处方方案的一部分以顺序方式施用。在一些实施方案中，两种或更多种药剂或治疗的组合施用使得与病症相关的症状或其他参数的减少大于在单独递送的一种药剂或治疗或在不存在其它药剂的情况下观察到的减少。两种治疗的作用可部分累加、完全累加或大于累加(例如，协同作用)。顺序或实质上同时施用每种治疗剂可通过包括但不限于经口途径、静脉内途径、肌肉内途径以及通过粘膜组织直接吸收的任何适当的途径来实现。可通过相同途径或通过不同途径施用治疗剂。例如，可通过静脉内注射施用组合的第一治疗剂，同时可口服施用组合的第二治疗剂。
“确定蛋白质或RNA的水平”是指通过本领域已知的方法直接或间接地检测蛋白质或RNA。“直接确定”是指执行过程(例如，对样品进行测定或测试，或如本文所定义的术语“分析样品”)以获得物理实体或值。“间接确定”是指从一方或来源(例如，直接获取物理实体或值的第三方实验室)接收所述物理实体或值。测量蛋白质水平的方法通常包括但不限于蛋白质印迹、免疫印迹、酶联免疫吸附测定(ELISA)、放射免疫测定(RIA)、免疫沉淀、免疫荧光、表面等离子体共振、化学发光、荧光极化、磷光、免疫组织化学分析、基质辅助激光解吸/电离飞行时间(MALDI-TOF)质谱法、液相色谱(LC)-质谱法、微细胞术、显微、荧光活化细胞分选(FACS)和流式细胞术，以及基于蛋白质性质的测定，包括但不限于酶活性或与其他蛋白质配偶体的相互作用。测量RNA水平的方法是本领域已知的，包括但不限于定量聚合酶链反应(qPCR)和RNA印迹分析。
蛋白质或RNA的水平“降低”或“水平增加”是指与参考相比，蛋白质或RNA水平分别降低或增加(例如降低或增加约5%、约10%、约15%、约20%、约25%、约30%、约35%、约40%、约45%、约50%、约55%、约60%、约65%、约70%、约75%、约80%、约85%、约90%、约95%、约100%、约150%、约200%、约300%、约400%、约500%或更多；与参考相比，降低或增加超过约10%、约15%、约20%、约50%、约75%、约100%或约200%；降低或增加小于约0.01倍、约0.02倍、约0.1倍、约0.3倍、约0.5倍、约0.8倍或更少；或增加超过约1.2倍、约1.4倍、约1.5倍、约1.8倍、约2.0倍、约3.0倍、约3.5倍、约4.5倍、约5.0倍、约10倍、约15倍、约20倍、约30倍、约40倍、约50倍、约100倍、约1000倍或更多)。蛋白质的水平可以质量/体积(例如，g/dL、mg/mL、μg/mL、ng/mL)或相对于样品中总蛋白质的百分比表示。
“降低BAF复合物的活性”是指降低与BAF复合物有关的活性的水平或相关的下游效应。降低BAF复合物的活性的非限制性实例是Sox2活化。BAF复合物的活性水平可使用本领域已知的任何方法来测量，例如，Kadoch等人Cell, 2013, 153, 71-85中描述的方法，所述文献的方法以引用的方式并入本文。
如本文所用，术语“抑制BRM”是指阻断或降低蛋白质的ATP酶催化结合结构域或布罗莫结构域的水平或活性。BRM抑制可使用本领域已知的方法来确定，例如，BRM ATP酶测定、Nano DSF测定或BRM荧光素酶细胞测定。
如本文所用，术语“药物组合物”表示含有与药学上可接受的赋形剂一起配制并适合施用于哺乳动物例如人的本文所述化合物的组合物。通常，作为用于治疗哺乳动物疾病的治疗方案的一部分，在政府监管机构的批准下制造或销售药物组合物。可将药物组合物配制例如用于以单位剂型(例如片剂、胶囊、囊片、软胶囊或糖浆剂)口服施用；用于局部施用(例如，呈乳膏、凝胶、洗剂或软膏形式)；用于静脉内施用(例如，呈无微粒栓的无菌溶液形式并在适合静脉内使用的溶剂系统中)；或以任何其他药学上可接受的制剂。
如本文所用的“药学上可接受的赋形剂”是指除了本文描述的化合物以外(例如，能够悬浮或溶解活性化合物的媒介物)并且在患者中具有大致上无毒和非炎症性的特性的任何成分。赋形剂可包括例如：抗粘剂、抗氧化剂、粘合剂、包衣、压缩助剂、崩解剂、染料(颜料)、软化剂、乳化剂、填充剂(稀释剂)、成膜剂或包衣、调味剂、香料、助流剂(流动增强剂)、润滑剂、防腐剂、印刷油墨、吸附剂、悬浮剂或分散剂、甜味剂以及水合作用的水。示例性赋形剂包括但不限于：2,6-二叔丁基羟基甲苯(BHT)、碳酸钙、磷酸钙(磷酸氢钙)、硬脂酸钙、交联羧甲纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、柠檬酸、交联聚维酮、半胱氨酸、乙基纤维素、明胶、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乳糖、硬脂酸镁、麦芽糖醇、甘露醇、甲硫氨酸、甲基纤维素、对羟基苯甲酸甲酯、微晶纤维素、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚维酮、预胶凝淀粉、对羟基苯甲酸丙酯、棕榈酸视黄酯、虫胶、二氧化硅、羧甲基纤维素钠、柠檬酸钠、羟基乙酸淀粉钠、山梨醇、淀粉(玉米)、硬脂酸、蔗糖、滑石、二氧化钛、维生素A、维生素E、维生素C以及木糖醇。
如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指化合物，例如式I-III的任何化合物的任何药学上可接受的盐。本文所述任何化合物的药学上可接受的盐可包括在合理医学判断范围内适合用于与人和动物的组织接触而没有过度的毒性、激性、过敏性反应并且与合理的利益/风险比相称的那些。药学上可接受的盐是本领域众所周知的。例如，药学上可接受的盐描述于：Berge等人, J. Pharmaceutical Sciences 66:1-19, 1977和Pharmaceutical Salts: Properties, Selection,和Use, (P.H. Stahl和C.G. Wermuth编辑), Wiley-VCH, 2008中。盐可在本文所述化合物的最终分离和纯化过程中原位制备，或通过使游离碱基团与合适的有机酸反应而单独地制备。
本发明的化合物可具有可电离的基团，以便能够制备为药学上可接受的盐。这些盐可以是涉及无机或有机酸的酸加成盐，或者在酸性形式的本发明化合物的情况下，所述盐可以由无机或有机碱制备。通常，将化合物制备为药学上可接受的盐或用作制备为药学上可接受的酸或碱的加成产物的药学上可接受的盐。合适的药学上可接受的酸和碱以及用于制备适当的盐的方法是本领域众所周知的。盐可由药学上可接受的无毒酸和碱，包括无机和有机酸和碱制备。代表性酸加成盐包括乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖醛酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐、十一酸盐和戊酸盐。代表性碱金属盐或碱土金属盐包括钠、锂、钾、钙和镁，以及无毒的铵、季铵和胺阳离子，包括但不限于铵、四甲铵、四乙铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺和乙胺。
“参考”是指用于比较蛋白质或RNA水平的任何有用的参考。参考可以是用于比较目的的任何样品、标准品、标准曲线或水平。参考可以是正常参考样品或参考标准或水平。“参考样品”可以是例如对照，例如预先确定的阴性对照值，如“正常对照”或取自同一受试者的先前样品；来自正常健康受试者的样品，如正常细胞或正常组织；来自未患疾病的受试者的样品(例如，细胞或组织)；来自被诊断患有疾病、但尚未用本发明化合物治疗的受试者的样品；来自已通过本发明化合物治疗的受试者的样品；或已知正常浓度下的纯化蛋白或RNA(例如，本文所述的任一种)的样品。“参考标准或水平”是指源自参考样品的值或数字。“正常对照值”是指示非疾病状态的预先确定的值，例如，在健康对照受试者中预期的值。通常，正常对照值被表示为范围(“介于X与Y之间”)、高阈值(“不高于X”)或低阈值(“不低于X”)。对于特定生物标记物，具有在正常对照值内的测量值的受试者通常被称为对于所述生物标记物“在正常限值内”。正常参考标准或水平可以是从未患疾病或病症(例如，癌症)的正常受试者；已经用本发明化合物治疗的受试者得到的值或数字。在优选的实施方案中，参考样品、标准或水平通过以下标准中的至少一者与样品受试者样品匹配：年龄、体重、性别、疾病阶段和总体健康。在正常参考范围内的纯化的蛋白质或RNA(例如，本文所述的任一种)的水平的标准曲线也可用作参考。
如本文所用，术语“受试者”是指可例如出于实验、诊断、预防和/或治疗目的向其施用根据本发明的组合物的任何生物体。典型的受试者包括任何动物(例如，哺乳动物，如小鼠、大鼠、兔、非人灵长类动物和人)。受试者可寻求或需要治疗、要求治疗、正在接受治疗、将未接受治疗、或者是针对特定疾病或疾患在受过训练的专业人员护理下的人或动物。
如本文所用，术语“治疗(treat)”、“治疗(treated)”或“治疗(treating)”是指治疗性治疗或目的是减缓(减轻)不需要的生理状疾患、病症或疾病或获得有益或所需的临床结果的任何措施。有益或所需的临床结果包括但不限于症状的减轻；疾患、病症或疾病的程度减小；疾患、病症或疾病的状态稳定(即，没有恶化)；疾患、病症或疾病进展的发作延迟或减缓；疾患、病症或疾病状态的改善或缓解(无论是部分还是全部)；至少一个可测量的物理参数的改善，不一定是患者可辨别的；或疾患、病症或疾病的增强或改善。治疗包括在没有过度水平的副作用的情况下引发临床上显著的应答。治疗还包括与不接受治疗情况下的预期存活期相比存活期延长。本发明化合物还可用于例如在处于发展病症的风险增加的受试者中“预防性地”治疗或“预防”所述病症。
如本文所用，术语“变体”和“衍生物”可互换使用，并且是指本文所述的化合物、肽、蛋白质或其他物质的天然存在的、合成的和半合成的类似物。本文所述的化合物、肽、蛋白质或其他物质的变体或衍生物可保留或改善原始材料的生物活性。
本发明的一个或多个实施方案的细节在以下说明中给出。本发明的其他特征、目的和优点将是从说明书和权利要求书清楚的。
附图说明
图1是说明BRG1/BRM抑制剂(化合物A)对几种癌细胞系的细胞增殖的抑制的图。
图2A和2B是说明BRG1/BRM抑制剂(化合物A)、MEK抑制剂(司美替尼)和PKC抑制剂(LXS196)对葡萄膜黑素瘤细胞的细胞增殖的抑制的图。
图3是说明BRG1/BRM抑制剂(化合物B)对几种癌细胞系的细胞增殖的抑制的图。
具体实施方式
本公开的特征是可用于抑制BRG1和/或BRM的化合物。这些化合物可用于调节BAF复合物的活性，例如，用于治疗BAF相关病症，如癌症。本文所述的示例性化合物包括具有根据式I-IIIa的结构的化合物：
Figure 259337DEST_PATH_IMAGE137
其中m为0、1、2、3或4；
n为0、1、2、3或4；
R1 为任选取代的C3-C6支化烷基；
各R2 独立地为任选取代的C1-C6 烷基, 任选取代的C1-C6 杂烷基, 或任选取代的氨基；
R3和R5 独立地为氢或任选取代的C1-C6 烷基；
R4 为氢, 任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基；
Het 为5-或6-元杂环；
R6 为氢、氰基、任选取代的C1-C6 杂烷基、羧基、任选取代的C2-C9 杂芳基、任选取代的C2-C9 杂环基或任选取代的C6-C10 芳基；和
R7 为氰基、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基；
Figure 518280DEST_PATH_IMAGE138
其中o为0、1、2、3或4；
p为0、1、2、3、4或5；
R8和R9 独立地为氢或任选取代的C1-C6 烷基，或R9与R10 以及它们所连接的原子组合形成5-至8-元环；
各R10 独立地为卤素、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基，或R10与R9 以及它们所连接的原子组合形成5-至8-元环；
R11和R13 独立地为氢或任选取代的C1-C6 烷基；
R12 为氢、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基；
Het 为任选取代的C2-C9 杂芳基；和
各R14 独立地为任选取代的酰胺、氰基、任选取代的C1-C6 杂烷基、羧基、任选取代的C2-C9 杂芳基、任选取代的C2-C9 杂环基或C6-C10 芳基；
Figure 7030DEST_PATH_IMAGE139
其中q和r独立地为0、1、2、3或4；
R15 为任选取代的C1-C6 烷基或卤素，或R15与R17 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基；
R16 为任选取代的C1-C6 烷基、任选取代的C1-C6 全氟烷基，或R16与R18 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基，或R16与R15 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基；
R17 为氰基、任选取代的氨基、羟基、任选取代的C1-C6 烷基、任选取代的C1-C6 羟烷基、任选取代的C1-C6 氨基烷基或
Figure 69009DEST_PATH_IMAGE140
，或R17与R18 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基；
X1为O或–N-OH；
各R18 独立地为卤素、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基，或R18与R16 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基，或R18与R17 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9杂环基；
R19、R21、R24,和R25 独立地为氢或任选取代的C1-C6 烷基；
R20 为氢、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基；
Het 为任选取代的C2-C9 杂芳基；和
各R22 独立地为羟基、卤素、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基，或R22与R23 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C2-C9 杂环基；
R23 独立地为氢、氰基、任选取代的C1-C6 杂烷基、任选取代的C2-C9 杂芳基、任选取代的C2-C9 杂环基或任选取代的C6-C10 芳基，或R23与R22 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C2-C9 杂环基；或
Figure 592394DEST_PATH_IMAGE141
其中E 为氢、羟基、氨基、氰基、任选取代的C1-C6 烷基、任选取代的C1-C6 羟烷基、任选取代的C1-C6 氨基烷基、任选取代的甲硅烷基、任选取代的C2-C9 杂环基或任选取代的C3-C8 环烷基；
D 为任选取代的C6-C10 芳基或任选取代的C2-C9 杂芳基；
R19和R21 独立地为氢或任选取代的C1-C6 烷基；
各R20 独立地为氢、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基，或两个R20基团与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基；
Het 为任选取代的C2-C9 杂芳基；
A 为任选取代的C6-C10 芳基或任选取代的C2-C9 杂芳基；和
R23 独立地为氢、氰基、任选取代的C1-C6 烷基、任选取代的C1-C6 烷氧基、任选取代的酰胺、任选取代的C1-C6 杂烷基、任选取代的C3-C8 环烷基、任选取代的C2-C9 杂芳基、任选取代的C2-C9 杂环基或任选取代的C6-C10 芳基，或R23与R22 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C2-C9 杂环基；
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，所述化合物或其药学上可接受的盐具有表2中的化合物1-11、表1a中的化合物12-47、表3a中的化合物48-109、表1b中的化合物110-129、表2b中的化合物130或131、表3b中的化合物132-268或表3c中的化合物269-444的任一个的结构。
在本文中描述其他实施方案以及制备这些化合物的示例性合成方法。
药物用途
本文描述的化合物可用于本发明的方法，并且尽管不受理论的束缚，但据信发挥其调节BAF复合物的水平、状态和/或活性的能力，即通过抑制哺乳动物的BAF复合物中的BRG1和/或BRM蛋白的活性。BAF复合物相关病症包括但不限于BRG1功能丧失性突变相关的病症。
本发明的一个方面涉及治疗有需要的受试者的与BRG1功能丧失性突变相关的病症的方法，所述病症如癌症(例如，非小细胞肺癌、结肠直肠癌、膀胱癌、原发不明癌症、神经胶质瘤、乳腺癌、黑素瘤、非黑素瘤皮肤癌、子宫内膜癌或阴茎癌)。在一些实施方案中，以有效产生以下中的一者或多者(例如，两者或更多者、三者或更多者、四者或更多者)的量和时间施用化合物：(a)减小肿瘤大小，(b)降低肿瘤生长的速率，(c)肿瘤细胞死亡增加，(d)肿瘤进展减少，(e)转移数量减少，(f)转移率降低，(g)肿瘤复发减少，(h)受试者存活期增加，(i)受试者的无进展存活期增加。
治疗癌症可使得肿瘤的大小或体积减小。例如，在治疗之后，相对于治疗前的大小，肿瘤大小减小5%或更大(例如，10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更大)。肿瘤大小可通过任何可重复的测量手段来测量。例如，可将肿瘤的大小测量为肿瘤的直径。
治疗癌症可进一步使得肿瘤数量减少。例如，在治疗之后，相对于治疗前的数量，肿瘤数量减少5%或更多(例如，10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多)。可通过任何可重复的测量手段来测量肿瘤的数量，例如，可通过对肉眼或在指定放大倍数(例如，2x、3x、4x、5x、10x或50x)下可见的肿瘤进行计数来测量肿瘤的数量。
治疗癌症可使得远离原生肿瘤位点的其他组织或器官的转移性结节的数量减少。例如，在治疗后，相对于治疗前的数量，转移性结节的数量减少5%或更多(例如，10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多)。转移性结节的数量可通过任何可重复的测量手段进行测量。例如，可通过对肉眼或在指定的放大倍数(例如，2x、10x或50x)下可见的转移性结节进行计数来测量转移性结节的数量。
与未治疗的受试者群体相比，治疗癌症可使得根据本发明治疗的受试者群体的平均存活时间增加。例如，平均存活时间增加超过30天(超过60天、90天或120天)。群体的平均存活时间的增加可通过任何可重复的手段来测量。群体的平均存活时间的增加可例如通过在开始用本发明的化合物治疗之后计算群体的平均存活长度来测量。群体的平均存活时间的增加也可例如通过在用本发明的药学上可接受的盐治疗第一轮完成后计算群体的平均存活长度来测量。
与未治疗的群体相比，治疗癌症还可使得接受治疗的受试者群体的死亡率降低。例如，死亡率降低超过2%(例如，超过5%、10%或25%)。可通过任何可重复的手段来测量接受治疗的受试者群体的死亡率的降低，例如，通过在开始用本发明的药学上可接受的盐治疗后计算每单位时间内群体的疾病相关死亡的平均数量来测量。群体的死亡率的降低也可例如通过在用本发明的药学上可接受的盐治疗第一轮完成后计算每单位时间内群体的疾病相关死亡的平均数量来测量。
可通过本发明治疗的示例性癌症包括但不限于，非小细胞肺癌、小细胞肺癌、结肠直肠癌、膀胱癌、神经胶质瘤、乳腺癌、黑素瘤、非黑素瘤皮肤癌、子宫内膜癌、食道胃癌、胰腺癌、肝胆癌、软组织肉瘤、卵巢癌、头颈癌、肾细胞癌、骨癌、非霍奇金淋巴瘤、前列腺癌、胚胎肿瘤、生殖细胞瘤、宫颈癌、甲状腺癌、唾液腺癌、胃肠神经内分泌肿瘤、子宫肉瘤、胃肠道间质瘤、CNS癌症、胸腺肿瘤、肾上腺皮质癌、阑尾癌、小肠癌和阴茎癌。
组合制剂及其用途
本发明的化合物可与一种或多种治疗剂组合。特别地，所述治疗剂可以是治疗或预防性地治疗本文所述的任何癌症的治疗剂。
组合疗法
本发明的化合物可单独或与另外的治疗剂(例如，治疗癌症或与癌症相关的症状的其他药剂)组合或与其他类型的治疗组合使用以治疗癌症。在组合治疗中，一种或多种治疗性化合物的剂量可从单独施用时的标准剂量减少。例如，剂量可根据药物组合和排列经验性地确定，或者可通过等效线图解分析推导(例如，Black等人, Neurology 65:S3-S6,2005)。在这种情况下，在组合时化合物的剂量应提供治疗作用。
在一些实施方案中，第二治疗剂是化学治疗剂(例如，可用于治疗癌症的细胞毒性剂或其他化合物)。这些包括烷化剂、抗代谢药、叶酸类似物、嘧啶类似物、嘌呤类似物和相关的抑制剂、长春花生物碱、表鬼臼毒素、抗生素、L-天冬酰胺酶、拓扑异构酶抑制剂、干扰素、铂配位络合物、蒽二酮取代的尿素、甲基肼衍生物、肾上腺皮质抑制剂、肾上腺皮质类固醇、孕激素、雌激素、抗雌激素、雄激素、抗雄激素以及促性腺激素释放激素类似物。还包括5-氟尿嘧啶(5-FU)、亚叶酸(LV)、伊立替康、奥沙利铂、卡培他滨、紫杉醇和多西他赛。化学治疗剂的非限制性实例包括烷化剂，如噻替派和环磷酰胺；烷基磺酸酯，如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮杂环丙烷，如苯佐多巴(benzodopa)、卡波醌、米特多巴和尤利多巴；乙烯亚胺和甲基蜜胺，包括六甲蜜胺、三亚乙基蜜胺、三亚乙基磷酰胺、三亚乙基硫代磷酰胺和三羟甲基蜜胺；多聚乙酰(尤其是布拉他辛和布拉他辛酮)；喜树碱(包括合成类似物托泊替康)；苔藓抑素；海绵他汀；CC-1065 (包括其阿多来新、卡折来新和比折来新合成类似物)；念珠藻素(特别是念珠藻素1和念珠藻素8)；尾海兔素；倍癌霉素(包括合成类似物、KW-2189和CB1-TM1)；艾榴塞洛素(eleutherobin)；水鬼蕉碱；匍枝珊瑚醇；海绵抑素(spongistatin)；氮芥，如苯丁酸氮芥、萘氮芥、氯磷酰胺、雌莫司汀、异环磷酰胺、氮芥、氮芥氧化物盐酸盐、美法仑、新恩比兴、苯芥胆甾醇、泼尼莫司汀、曲磷胺和尿嘧啶氮芥；亚硝基脲，如卡莫司汀、氯脲霉素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀和雷莫司汀；抗生素，如烯二炔抗生素(例如，卡奇霉素，尤其卡奇霉素γII和卡奇霉素ωII (参见例如，Agnew, Chem.Intl. Ed Engl. 33:183-186 (1994))；达内霉素，包括达内霉素A；二膦酸盐，如氯膦酸盐；埃斯培拉霉素；以及新制癌菌素生色团和相关色蛋白烯二炔抗生素生色团)、阿克拉霉素、放线菌素、安曲霉素、重氮丝氨酸、博莱霉素、放线菌素C、卡柔比星、洋红霉素、嗜癌菌素、色霉素、更生霉素、道诺霉素、地托比星、6-重氮基-5-氧代基-L-正亮氨酸、Adriamycin®(阿霉素，包括吗啉代-阿霉素、氰基吗啉代-阿霉素、2-吡咯啉并-阿霉素和去氧阿霉素)、表柔比星、依索比星、伊达比星、麻西罗霉素、丝裂霉素(如丝裂霉素C)、霉酚酸、诺拉霉素、橄榄霉素、培洛霉素、泊非霉素、嘌呤霉素、三铁阿霉素、罗多比星、链黑菌素、链佐星、杀结核菌素、乌苯美司、净司他丁、佐柔比星；抗代谢药，如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，如二甲叶酸、氨甲蝶呤、蝶罗呤、三甲曲沙；嘌呤类似物，如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物，如安西他滨、阿扎胞苷、6-氮杂尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、双去氧尿苷、去氧氟尿苷、依诺他滨、氟尿苷；雄激素，如卡普睾酮、屈他雄酮丙酸酯、环硫雄醇、美雄烷、睾内酯；抗肾上腺素药，如氨鲁米特、米托坦、曲洛斯坦；叶酸补充剂，如亚叶酸；醋葡醛内酯；醛磷酰胺糖苷；氨基乙酰丙酸；恩尿嘧啶；安吖啶；倍曲布西；比生群；依达曲沙；德福法明；秋水仙胺；地吖醌；依氟鸟氨酸；依利醋铵；埃博霉素；依托格鲁；硝酸镓；羟基脲；香菇多糖；氯尼达明；美登木素生物碱，如美登素和安丝菌素；米托胍腙；米托蒽醌；莫哌达醇；二胺硝吖啶(nitraerine)；喷司他丁；蛋氨氮芥；吡柔比星；洛索蒽醌；鬼臼酸；2-乙基酰肼；丙卡巴肼；PSK®多糖复合物(JHS Natural Products, Eugene, Oreg.)；雷佐生；根霉素(rhizoxin)；西佐喃；锗螺胺；细交链孢菌酮酸；三亚胺醌；2,2',2"-三氯三乙胺；单端孢霉烯族毒素(特别是T-2毒素、疣孢菌素A、杆孢菌素A和蛇形菌素)；乌拉坦；长春地辛；达卡巴嗪；甘露莫司汀；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；哌泊溴烷；加西托星(gacytosine)；阿糖胞苷(“Ara-C”)；环磷酰胺；噻替派；紫杉烷类，如Taxol®紫杉醇 (Bristol-Myers SquibbOncology, Princeton, N.J.)，ABraxane®，无克列莫佛的白蛋白工程化紫杉醇纳米颗粒制剂 (American Pharmaceutical Partners, Schaumberg, Ill.)和Taxotere®多西他赛(Rhone-Poulenc Rorer, Antony, France)；苯丁酸氮芥；Gemzar®吉西他滨；6-硫鸟嘌呤；巯基嘌呤；氨甲蝶呤；铂配位络合物，如顺铂、奥沙利铂和卡铂；长春花碱；铂；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌；长春新碱；Navelbine®长春瑞滨；诺安托；替尼泊苷；依达曲沙；道诺霉素；氨蝶呤；希罗达；伊班膦酸盐；伊立替康(例如，CPT-11)；拓扑异构酶抑制剂RFS 2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；类视黄醇，如视黄酸；卡培他滨；以及上述任一者的药学上可接受的盐、酸或衍生物。可在混合物中使用两种或更多种化学治疗剂，以与本文所述的第一治疗剂组合施用。组合化学疗法的合适的给药方案是本领域已知的，并且描述于例如Saltz等人(1999) Proc ASCO 18:233a和Douillard等人(2000) Lancet 355:1041-7中。
在一些实施方案中，第二治疗剂是治疗剂，其是用于癌症治疗的生物制剂，如细胞因子(例如，干扰素或白介素(例如，IL-2))。在一些实施方案中，生物制剂是抗血管生成剂，如抗VEGF剂，例如贝伐珠单抗(Avastin®)。在一些实施方案中，生物制剂是基于免疫球蛋白的生物制剂，例如单克隆抗体(例如，人源化抗体、完全人抗体、Fc融合蛋白或其功能片段)，所述单克隆抗体激动靶标以刺激抗癌应答或拮抗对癌症而言重要的抗原。此类剂包括Rituxan (利妥昔单抗)；Zenapax (达克珠单抗)；Simulect (巴利昔单抗)；Synagis (帕利珠单抗)；Remicade (英夫利昔单抗)；Herceptin (曲妥珠单抗)；Mylotarg (吉妥珠单抗奥佐米星)；Campath (阿仑单抗)；Zevalin (替伊莫单抗)；Humira (阿达木单抗)；Xolair(奥马珠单抗)；Bexxar (托西莫单抗-I-131)；Raptiva (依法利珠单抗)；Erbitux (西妥昔单抗)；Avastin (贝伐珠单抗)；Tysabri (那他珠单抗)；Actemra (托珠单抗)；Vectibix(帕尼单抗)；Lucentis (兰尼单抗)；Soliris (依库珠单抗)；Cimzia (培化赛妥珠单抗)；Simponi (戈利木单抗)；Ilaris (康纳单抗)；Stelara (优特克单抗)；Arzerra (奥法木单抗)；Prolia (地诺单抗)；Numax (莫维珠单抗)；ABThrax (雷西巴单抗)；Benlysta (贝利木单抗)；Yervoy (伊匹单抗)；Adcetris (本妥西单抗维多汀)；Perjeta (帕妥珠单抗)；Kadcyla (阿多-曲妥珠单抗恩他新)；以及Gazyva (奥比妥珠单抗)。还包括抗体-药物缀合物。
第二剂可以是非药物治疗的治疗剂。例如，第二治疗剂是放射疗法、冷冻疗法、热疗和/或肿瘤组织的手术切除。
第二剂可以是检查点抑制剂。在一个实施方案中，检查点的抑制剂是抑制性抗体(例如，单特异性抗体，如单克隆抗体)。所述抗体可以是例如人源化或完全人源的。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是融合蛋白，例如Fc-受体融合蛋白。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是与检查点蛋白相互作用的药剂，例如抗体。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是与检查点蛋白的配体相互作用的药剂，如抗体。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是CTLA-4的抑制剂(例如，抑制性抗体或小分子抑制剂) (例如，抗CTLA4抗体，如伊匹单抗/Yervoy或曲美木单抗)。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是PD-1的抑制剂(例如，抑制性抗体或小分子抑制剂) (例如，纳武单抗/Opdivo®；派姆单抗/Keytruda®；匹地利珠单抗/CT-011)。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是PDL1的抑制剂(例如，抑制性抗体或小分子抑制剂) (例如，MPDL3280A/RG7446；MEDI4736；MSB0010718C；BMS 936559)。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是PDL2的抑制剂(例如，抑制性抗体或Fc融合体或小分子抑制剂)(例如，PDL2/Ig融合蛋白，如AMP 224)。在一些实施方案中，检查点的抑制剂是B7-H3 (例如，MGA271)、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-15049、CHK1、CHK2、A2aR、B-7家族配体或其组合的抑制剂(例如，抑制性抗体或小分子抑制剂)。
在本文所述的任何组合实施方案中，第一治疗剂和第二治疗剂以任一顺序同时或顺序施用。第一治疗剂可在第二治疗剂之前或之后立即、至多1小时、至多2小时、至多3小时、至多4小时、至多5小时、至多6小时、至多7小时、至多8小时、至多到9小时、至多10小时、至多11小时、至多12小时、至多13小时、14小时、至多16小时、至多17小时、至多18小时、至多19小时、至多20小时、至多21小时、至多22小时、至多23小时、至多24小时或至多1-7、1-14、1-21或1-30天施用。
药物组合物
优选地，将本发明的化合物配制成药物组合物，以适于体内施用的生物相容性形式向哺乳动物、优选向人施用。因此，在一方面，本发明提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含与合适的稀释剂、载体或赋形剂混合的本发明的化合物。
本发明的化合物可以游离碱的形式、以盐、溶剂合物的形式以及以前药形式使用。所有形式均在本发明的范围内。如本领域技术人员所理解的，根据本发明的方法，所描述的化合物或其盐、溶剂合物或前药可根据所选择的施用途径以多种形式施用至患者。本发明的化合物可例如通过口服、胃肠外、经颊、舌下、经鼻、直肠、贴剂、泵或透皮施用来施用，并且相应地配制药物组合物。胃肠外施用包括静脉内、腹膜内、皮下、肌内、经上皮、经鼻、肺内、鞘内、直肠和局部施用方式。胃肠外施用可通过在选定的时间段内连续输注来进行。
本发明的化合物可例如与惰性稀释剂或与可吸收的可食用载体一起口服施用，或者其可被包封在硬壳或软壳明胶胶囊中，或者其可被压制成片剂，或者其可直接与饮食的食物一起并入。对于口服治疗性施用，本发明的化合物可与赋形剂混合并以可摄入片剂、口含片剂、锭剂、胶囊、酏剂、混悬剂、糖浆和糯米纸囊剂的形式使用。本发明的化合物也可胃肠外施用。本发明化合物的溶液可在合适地与诸如羟丙基纤维素的表面活性剂混合的水中制备。还可在甘油、液体聚乙二醇、DMSO及其有或无醇的混合物中以及在油中制备分散液。在正常储存和使用条件下，这些制剂可含有防腐剂以防止微生物生长。用于选择和制备合适制剂的常规程序和成分描述于例如Remington’s Pharmaceutical Sciences (2003, 第20版)和1999年出版的The United States Pharmacopeia: The National Formulary(USP 24 NF19)中。适于可注射用途的药物形式包括无菌水溶液或分散液和用于临时制备无菌可注射溶液或分散液的无菌粉末。在所有情况下，所述形式都必须是无菌的，并且必须是流体性的达到可经由注射器容易注射的程度。经鼻施用的组合物可方便地配制成气雾剂、滴剂、凝胶剂和粉末。气雾剂制剂通常包括活性物质在生理上可接受的水性或非水性溶剂中的溶液或精细悬浮液，并且通常以无菌形式以单剂量或多剂量形式存在于密封容器中，所述容器可采取药筒或重新装填的形式用于雾化装置。或者，密封的容器可以是一体的分配装置，如单剂量鼻吸入器或配备有意图在使用后丢弃的计量阀的气雾剂分配器。当剂型包括气雾剂分配器时，它将含有推进剂，所述推进剂可以是压缩气体(如压缩空气)或有机推进剂(如氟氯烃)。气雾剂剂型也可采用泵雾化器的形式。适用于经颊或舌下施用的组合物包括片剂、锭剂和软锭剂，其中活性成分与载体如糖、阿拉伯胶、黄芪胶、明胶和甘油一起配制。用于直肠施用的组合物方便地呈含有常规栓剂基质如可可脂的栓剂形式。本文所述的化合物可肿瘤内施用，例如以肿瘤内注射的形式。肿瘤内注射是直接注射到肿瘤脉管系统中，并且特别考虑用于离散的、实体的、可及的肿瘤。局部、区域或全身性施用也可以是适当的。本文所述的化合物可有利地通过向肿瘤施用例如以大约1 cm间隔隔开的注射或多次注射而接触。在外科手术的情况下，本发明可在术前使用，例如使不能手术的肿瘤经受切除。在适当的情况下，也可应用连续施用，例如，通过将导管植入肿瘤或肿瘤脉管系统中。
如本文所述，本发明的化合物可单独或与药学上可接受的载体组合施用至动物(例如人)，其比例由化合物的溶解度和化学性质、所选择的施用途径以及标准药学实践确定。
剂量
本发明化合物和/或包含本发明化合物的组合物的剂量可根据许多因素而变化，所述因素如化合物的药效学性质；施用方式；接受者的年龄、健康状况和体重；症状的性质和程度；治疗的频率和同时治疗的类型(如果有的话)；以及化合物在待治疗动物中的清除率。本领域技术人员可基于上述因素确定合适的剂量。本发明的化合物可最初以适合的剂量施用，所述剂量可根据临床反应根据需要进行调整。一般来说，当将本发明的化合物以例如介于0.05 mg与3000 mg之间的每日剂量(以固体形式测量)施用至人时，可获得令人满意的结果。剂量范围包括例如介于10-1000 mg(例如，50-800 mg)之间。在一些实施方案中，施用50、100、150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950或1000 mg的化合物。
或者，可使用患者的体重来计算剂量的量。例如，向患者施用的化合物或其药物组合物的剂量可在0.1-50 mg/kg(例如，0.25-25 mg/kg)的范围内。在示例性非限制性实施方案中，剂量可在0.5-5.0 mg/kg (例如，0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5或5.0 mg/kg)或5.0-20 mg/kg (例如，5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20 mg/kg)的范围内。
实施例
实施例1. 3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酸 (中间体B)和2-[[3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酰基]氨基]乙酸 (中间体E)的制备
Figure 756659DEST_PATH_IMAGE142
步骤1:3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酸 (中间体B)的制备
Figure 998284DEST_PATH_IMAGE143
在0℃下向3-氯磺酰基苯甲酸 (10 g, 45.32 mmol)在DCM (80 mL)中的溶液添加二甲胺 (2 M, 74.79 mL)。在20℃下搅拌该混合物1小时。将该混合物倾倒入水 (50mL)中并用EA (100 mL)萃取。丢弃有机层。向水相添加HCl水溶液(1N)以调节pH=4，然后用EA(100mL x 3)萃取，用盐水洗涤 (50mL)，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。用2-甲氧基-2-甲基丙烷 (20 mL)洗涤粗产物，然后过滤并在真空下干燥以提供作为粉红色固体的中间体B (8.1g, 35.33 mmol, 77.95%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=230.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 13.56 (s, 1H), 8.24 (d, J=8.0Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.99 (d, J=8.4Hz,1H), 7.82-7.78 (m, 1H), 2.62 (s, 6H) ppm。
步骤2:2-[[3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酰基]氨基]乙酸甲酯 (中间体D)的制备
Figure 601304DEST_PATH_IMAGE144
在20℃下向中间体B (2.5 g, 10.91 mmol)在DCM (25 mL)中的溶液添加 HATU(4.56 g, 12.00 mmol)和DIPEA (4.23 g, 32.72 mmol, 5.70 mL)，搅拌该混合物0.5小时。然后添加2-氨基乙酸甲酯 (1.64 g, 13.09 mmol, HCl盐)并在20℃ 下搅拌该混合物1.5小时。将该反应混合物倾倒入水 (30 mL)中并用EA (30 mL x 3)萃取。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, PE:EA=5:1至1:1) 并在真空下浓缩以提供作为黄色油的中间体D (3.4 g, 10.53 mmol, 96.55%收率) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=301.0. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 9.31-9.28 (m,1H), 8.22-8.18 (m, 2H), 7.94-7.92 (m, 1H), 7.92-7.79 (m, 1H), 4.06-4.05 (m,2H), 3.67 (s, 3H), 2.64 (s, 6H)。
步骤3:2-[[3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酰基]氨基]乙酸 (中间体E)的制备
Figure 979196DEST_PATH_IMAGE145
在20℃下向中间体D (3.4 g, 11.32 mmol)在MeOH (23 mL)中的溶液添加NaOH(905.60 mg, 22.64 mmol)在H2O (11 mL)中的溶液。在20℃下搅拌该混合物3小时。向该反应混合物添加HCl水溶液 (1 N)以调节pH=5并然后用EA (30 mL x 3)萃取。用盐水 (20mL)洗涤有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。用2-甲氧基-2-甲基丙烷 (15 mL)研磨粗产物，然后过滤并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体E (1.8 g, 6.22 mmol, 54.98%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=287.0. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.66 (br.s,1H), 9.21-9.19 (m, 1H), 8.22-8.18 (m, 2H), 7.93-7.91 (m, 1H), 7.80-7.78 (m,1H), 3.95 (d, J= 5.6 Hz, 2H), 2.64 (s, 6H)。
实施例2. N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体D)的制备和2-氨基-N-(4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)乙酰胺 (中间体E)的制备
Figure 579941DEST_PATH_IMAGE146
步骤1:4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺 (中间体B)的制备
Figure 43284DEST_PATH_IMAGE147
向1-(3-溴苯基)乙酮 (473 g, 2.38 mol, 313.25 mL)和硫脲 (361.78 g, 4.75mol)的混合物添加I2 (603.14 g, 2.38 mol, 478.68 mL, 1 eq)。在110℃下搅拌该混合物16小时。在冷却后，用MTBE (5 L)研磨该反应混合物, 并然后过滤以除去任何未反应的碘和苯乙酮。将滤饼放入冰水 (4 L)中并用 25% NH3.H2O处理至pH=9-10。在25℃下搅拌该悬浮液15分钟，然后过滤并用水 (1 L)洗涤以提供湿固体。将该湿固体溶解于EA (4 L)中并用饱和NaHCO3 (1 L x 2) 和盐水 (1 L)洗涤。经Na2SO4干燥该EA层，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。在25℃下用PE/EA=100:1 (4 L)研磨该残余物持续3小时，然后过滤该悬浮液，用PE (1 L)洗涤滤饼并在真空下干燥以提供作为粉红色固体的中间体B (450 g,1.69 mol, 71.20%收率, 95.93%纯度)。LCMS (ESI) m/z [79BrM+H+] = 254.9. 1H NMR(400MHz, DMSO-d6) δ = 7.98-7.97 (m, 1H), 7.80-7.77 (m, 1H), 7.43-7.42 (m,1H), 7.34 - 7.30 (m, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.10 (s, 2H)。
步骤2:N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体D)的制备
Figure 387677DEST_PATH_IMAGE148
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸 (82.40 g, 470.34 mmol)、HATU (178.84 g,470.34 mmol)和DIEA (151.97 g, 1.18 mol, 204.81 mL)在DCM (1000.00 mL)中的溶液添加中间体B (100.00 g, 391.95 mmol)，在30℃下搅拌该混合物16小时。用饱和柠檬酸(500 mL x 4) 和盐水 (500 mL)洗涤该反应混合物，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。用MeOH (200.0 mL)研磨该残余物，过滤并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体D (100 g, 241.89 mmol, 61.71%收率)。LCMS (ESI) m/z [81BrM+H]+= 413.8.1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.29 (s, 1H), 8.09 - 8.09 (m, 1H), 7.89 (d, J =7.6 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.52 - 7.49 (m, 1H), 7.41 - 7.37 (m, 1H), 7.16 -7.13 (m, 1H), 3.87 - 3.81 (m, 2H), 1.39 (s, 9H) ppm。
步骤3:2-氨基-N-(4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)乙酰胺 (中间体E)的制备
Figure 947972DEST_PATH_IMAGE149
在30℃下搅拌中间体D (10 g, 24.25 mmol)在HCl/二氧杂环己烷 (100 mL)中的混合物2小时。在真空下浓缩该反应混合物以提供作为白色固体的中间体E (8.4 g, 粗物质, HCl)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=313.8
实施例3. 2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (中间体F)的制备
Figure 454039DEST_PATH_IMAGE150
步骤1:4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-胺 (中间体C)的制备
Figure 670257DEST_PATH_IMAGE151
在N2下向4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺 (10 g, 39.20 mmol)、4-吡啶基硼酸 (14.45g, 117.59 mmol)和K2CO3 (16.25 g, 117.59 mmol)在二氧杂环己烷 (120 mL)和水(30mL)中的溶液添加Pd(dppf)Cl2 (1 g, 1.37 mmol)，在100℃下搅拌该混合物4小时。用水(500 mL)稀释该反应混合物，用EA (500 mL)萃取并在减压下浓缩以提供残余物。通过从DCM/MTBE=1:20 (200 mL)中结晶纯化该残余物并过滤以提供作为棕色固体的中间体C(9.5 g, 36.33 mmol, 92.69%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 254.2. 1H NMR (400MHz,DMSO-d6) δ 8.66 (d, J=6.0 Hz, 2H), 8.19 (s, 1H), 7.90 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.76- 7.70 (m, 2H), 7.68 (d,J=8.0 Hz, 1H), 7.52 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H),7.11 (s, 2H) ppm。
步骤2:N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体E)的制备
Figure 552763DEST_PATH_IMAGE152
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸 (9.85 g, 56.25 mmol)、HATU (21.39 g, 56.25mmol)和DIPEA (14.54 g, 112.51 mmol)在DCM (200 mL)中的溶液添加int C (9.5 g,37.50 mmol, 1 eq)，在30℃下搅拌该混合物16小时。形成沉淀物。过滤该反应混合物以提供黄色固体。用EA (300.0 mL)和MeOH (50.0 mL)研磨粗产物并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体E (11 g, 25.89 mmol, 69.03%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=411.3. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.32 (br s, 1H), 8.69 - 8.67 (m, 2H), 8.30(s, 1H), 8.01 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.80 - 7.76 (m, 3H), 7.64 -7.60 (m, 1H), 7.20 - 7.15 (m, 1H), 3.88 (d, J=6.4 Hz, 2H), 1.44 (s, 9H) ppm。
步骤3:2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (中间体F)的制备
Figure 967563DEST_PATH_IMAGE153
向中间体E (11 g, 26.80 mmol)在MeOH (20 mL)中的溶液添加4 M HCl/EtOAc(20 mL)。在20℃下搅拌该混合物2小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过用EA (200 mL)和MTBE (50 mL)研磨纯化残余物并在真空下干燥以提供作为浅黄色固体的中间体F (12 g, HCl盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 311.3. 1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ8.92 (d, J=6.8 Hz, 2H), 8.52 - 8.47 (m, 3H), 8.22 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.94 (m,J=8.4 Hz, 1H), 7.75 - 7.66 (m, 2H), 4.04 (s, 2H) ppm。
实施例4. 3-[2-[[2-[[3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酰基]氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]-N,N-二甲基-苯甲酰胺 (化合物 1)的制备
Figure 644532DEST_PATH_IMAGE154
步骤1:3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酸 (中间体B)的制备
Figure 82467DEST_PATH_IMAGE155
在0℃下向3-氯磺酰基苯甲酸 (10 g, 45.32 mmol)在DCM (80 mL)中的溶液添加二甲胺 (2 M, 74.79 mL)。在20℃下搅拌该混合物1小时。将该混合物倾倒入水 (50mL)中并用EA (100 mL)萃取。丢弃有机层。向水相添加HCl水溶液(1N)以调节pH=4，然后用EA(100mL x 3)萃取，用盐水 (50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。用2-甲氧基-2-甲基丙烷 (20 mL)洗涤粗产物，然后过滤并在真空下干燥以提供作为粉红色固体的中间体B (8.1g, 35.33 mmol, 77.95%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=230.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 13.56 (s, 1H), 8.24 (d, J=8.0Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.99 (d, J=8.4Hz,1H), 7.82-7.78 (m, 1H), 2.62 (s, 6H) ppm。
步骤2:N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体E)的制备
Figure 768663DEST_PATH_IMAGE156
向4-溴噻唑-2-胺 (3 g, 16.76 mmol)和2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸 (4.40 g,25.13 mmol)在吡啶 (30 mL)中的溶液添加EDCI (16.06 g, 83.78 mmol)。在15℃下搅拌该混合物16小时。在减压下浓缩该反应混合物以除去吡啶。用0.5N HCl (100 mL)稀释该残余物并用EA (50 mL x 3)萃取。用NaHCO3 (50 mL) 和盐水 (50 ml)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=7/1至3:1) 以提供作为白色固体的中间体E (2.2 g, 6.44 mmol, 38.40%收率) 。LCMS (ESI) m/z [79BrM+23]+=358.1。
步骤3:2-氨基-N-(4-溴噻唑-2-基)乙酰胺 (中间体F)的制备
Figure 975654DEST_PATH_IMAGE157
向中间体E (1.28 g, 3.80 mmol)在DCM (13 mL)中的溶液添加TFA (1.3 mL)。在25℃下搅拌该混合物1小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。用MTBE (10 mL)研磨该残余物。通过过滤收集固体并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体F (800 mg,2.28 mmol, 60.09%收率, TFA盐) 。LCMS (ESI) m/z [79BrM+23]+=258.1。
步骤4:N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酰胺 (中间体G)的制备
Figure 151420DEST_PATH_IMAGE158
向中间体B (576.22 mg, 2.51 mmol)在DCM (15 mL)中的溶液添加 HATU (1.30g, 3.43 mmol)和DIEA (1.77 g, 13.71 mmol, 2.39 mL)。在25℃下搅拌该混合物0.5小时。然后添加中间体F (800 mg, 2.28 mmol, TFA盐)并在25℃下搅拌该混合物16小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=1/1至0/1) 并在真空下浓缩以提供作为黄色固体的中间体G (850 mg, 1.90 mmol,83.16%收率) 。LCMS (ESI) m/z [81BrM+H]+=449.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ =12.61 (s, 1H), 9.31-9.28 (m, 1H), 8.25-8.21(m, 2H), 7.94 (d, J=8.0 Hz, 1H),7.81-7.77 (m, 1H), 7.30 (s, 1H), 4.20-4.19 (m, 1H), 2.64 (s, 6H) ppm。
步骤5:3-[2-[[2-[[3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酰基]氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]-N,N-二甲基-苯甲酰胺 (化合物 1)的制备
Figure 76651DEST_PATH_IMAGE159
在N2的保护下向中间体G (50 mg, 111.78 μmol)和中间体H (64.72 mg, 335.33μmol)在二氧杂环己烷 (3 mL)和H2O (0.3 mL)中的溶液添加Pd(t-Bu3P)2 (28.56 mg,55.89 μmol)和DIEA (72.23 mg, 558.88 μmol, 97.34 μL)。在100℃下搅拌该混合物2小时。在冷却至30℃后出现大量固体。过滤该混合物并在EA (3 mL)中研磨以获得粗产物。将该粗产物溶解在MeOH (1 mL)和DMSO (1 mL)中并通过制备型HPLC纯化 (柱: PhenomenexSynergi C18 150 x 25 x 10 μm；流动相: [水(0.1%TFA)-ACN]；B%: 30%-60%,9min) 并冻干以提供作为白色固体的化合物 1 (14.46 mg, 27.69 μmol, 24.77%收率)。LCMS (ESI)m/z [M+H]+=516.0. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.47 (s, 1H), 9.30-9.29 (m,1H), 8.23-8.27(m, 2H), 7.98-7.93 (m, 3H), 7.81-7.79 (m, 1H), 7.76 (s, 1H),7.52-7.50 (m, 1H), 7.35-7.33 (m, 1H), 4.25 (d, J=5.6 Hz, 2H), 3.01-2.94 (m,6H), 2.67 (s, 6H) ppm。
实施例5. 3-(N,N-二甲基氨磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 2)的制备
Figure 300959DEST_PATH_IMAGE160
向2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (根据实施例3中的方法制备) (50 mg, 144.16 μmol, HCl盐)和3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酸 (33.05 mg, 144.16μmol)在DCM (2 mL)中的溶液添加 HATU (65.78 mg, 172.99 μmol)和DIEA (93.16 mg,720.81 μmol, 125.55 μL)。在30℃下搅拌该混合物16小时。过滤该反应混合物以提供残余物。用MeOH (2 mL)研磨该残余物。过滤该混合物并在真空中干燥该固体以提供作为白色固体的化合物 2 (48.80 mg, 92.79 μmol, 64.36%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =522.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ= 12.49 (br s, 1H), 9.30-9.28 (m, 1H), 8.67-8.66 (m, 2H), 8.29 (s, 1H), 8.26-8.25 (m, 2H), 8.01 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.94-7.92 (m, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.797 (s, 1H), 7.76-7.74 (m, 3H), 7.59 (s, 1H),4.23 (d, J=5.6 Hz, 2H), 2.64 (s, 6H) ppm。
实施例6. 3-(二甲基氨磺酰基)-N-[2-氧代-2-[[4-[2-(1H-吡唑-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]苯甲酰胺 (化合物 3)的制备
Figure 628035DEST_PATH_IMAGE161
步骤1:N-[2-[[4-(2-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure 974702DEST_PATH_IMAGE162
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸 (1.65 g, 9.41 mmol)在DCM (100 mL)中的溶液添加HATU (4.47 g, 11.76 mmol)和DIEA (3.04 g, 23.52 mmol, 4.10 mL)和在30℃下搅拌该混合物30分钟。然后添加 4-(2-溴苯基)噻唑-2-胺 (2 g, 7.84 mmol)。在30℃下搅拌该混合物另外12小时。用DCM (50 mL)稀释该混合物并用水(10 mL x 3) 和盐水 (10 mL x2)洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过柱层析法纯化该粗产物 (SiO2,PE:EA=100:1~10:1) 并浓缩以提供作为黄色油的中间体C (2.80 g, 6.79 mmol, 86.63%收率)。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ= 12.10 (s, 1H), 7.56-7.48 (m, 2H), 7.33 (s,1H), 7.32-7.26 (m, 1H), 7.11-7.09 (m, 1H), 3.68 (br d, J=6.0 Hz, 2H), 1.23-1.10 (m, 9H) ppm。
步骤2:N-[2-氧代-2-[[4-[2-(1H-吡唑-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体E)的制备
Figure 121650DEST_PATH_IMAGE163
在N2的保护下向中间体C (25.00 mg, 60.64 μmol)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑-1-甲酸叔丁酯 (53.51 mg, 181.92 μmol)在二氧杂环己烷 (2 mL)和水(0.4 mL)中的溶液添加Pd(t-Bu3P)2 (6.20 mg, 12.13 μmol)和DIEA(23.51 mg, 181.92 μmol, 31.68 μL)。在100℃下搅拌该混合物2小时。用EA (30 mL)稀释合并的反应混合物然后通过二氧化硅过滤。用水 (5 mL x 3) 和盐水 (5 mL x 2)洗涤滤液，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的中间体E (110 mg, 粗物质)，其直接用于接下来的步骤 LCMS (ESI) m/z [M+H]+=400.0。
步骤3:2-氨基-N-[4-[2-(1H-吡唑-4-基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (中间体F)的制备
Figure 149649DEST_PATH_IMAGE164
在25℃下搅拌中间体E (100 mg, 250.33 μmol)在HCl/二氧杂环己烷 (4 M, 10mL)中的溶液2小时。在减压下浓缩该混合物。通过制备型HPLC纯化残余物 (柱:Phenomenex Synergi C18 150 x 25 x 10 μm；流动相: [水(0.05%HCl)-ACN]；B%: 5%-25%,10 min) 并冻干以提供作为浅黄色固体的中间体F (40 mg, 119.11 μmol, 47.58%收率, HCl盐)，其直接用于接下来的步骤。
步骤4:3-(二甲基氨磺酰基)-N-[2-氧代-2-[[4-[2-(1H-吡唑-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]苯甲酰胺 (化合物 3)的制备
Figure 331232DEST_PATH_IMAGE165
向中间体F (20.00 mg, 59.56 μmol, HCl盐)和3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酸 (根据实施例1中的方法制备) (15.02 mg, 65.51 μmol)在DCM (1 mL)中的溶液添加DIEA(23.09 mg, 178.67 μmol, 31.12 μL)和HATU (33.97 mg, 89.34 μmol)。在30℃下搅拌该混合物16小时。用DCM (20 mL)稀释该反应混合物和用饱和NaHCO3 溶液 (5 mL x 3)、饱和柠檬酸溶液 (5 mL x 3)、水 (5 mL x 3) 和盐水 (5 mL x 3)洗涤。然后经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物 (柱: Boston Prime C18 150 x 30mm x5 μm；流动相: [水(0.1%TFA)-ACN]；B%: 37%-57%,8 min) 并冻干以提供作为白色固体的化合物 3 (4.22 mg, 8.26 μmol, 13.88%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=511.2. 1H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (s, 1H), 9.31-9.28 (m, 1H), 8.26 - 8.23 (m, 2H),7.94 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.82 - 7.78 (m, 1H), 7.52 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.45 -7.38 (m, 3H), 7.32 - 7.28 (m, 2H), 6.96 (s, 1H), 4.20 (d, J=5.6 Hz, 2H), 2.66(s, 6H) ppm。
实施例7. 3-(二甲基氨磺酰基)-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(1H-吡唑-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]苯甲酰胺 (化合物 4)的制备
Figure 848801DEST_PATH_IMAGE166
步骤1:N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure 748623DEST_PATH_IMAGE167
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸 (1.65 g, 9.41 mmol)在DCM (100 mL)中的溶液添加HATU (4.47 g, 11.76 mmol)和DIEA (3.04 g, 23.52 mmol, 4.10 mL)和在30℃下搅拌该混合物30分钟。然后添加4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺 (2 g, 7.84 mmol)。在30℃下搅拌该混合物另外12小时。用DCM (200 mL)稀释该混合物和用H2O (50 mL x 3) 和盐水 (50mL x 2)洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过柱层析法纯化该粗产物(SiO2, PE: EA=100:1~10:1) 并浓缩以提供作为黄色油的中间体C (1.6 g, 3.88 mmol,49.50%收率)。1H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ = 8.10 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.87 (br d,J=7.8 Hz, 1H), 7.48-7.45 (m, 2H), 7.33-7.30 (m, 1H), 4.00 (s, 2H), 1.51-1.47(m, 9H) ppm。
步骤2:N-[2-氧代-2-[[4-[3-(1H-吡唑-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体E)的制备
Figure 314734DEST_PATH_IMAGE168
在N2的保护下向中间体C (100.00 mg, 242.54 μmol)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑 (141.19 mg, 727.62 μmol)在二氧杂环己烷 (3mL)和水(0.3 mL)中的溶液添加Pd(t-Bu3P)2 (24.79 mg, 48.51 μmol)和DIEA (94.04 mg,727.62 μmol, 126.74 μL)。在100℃下搅拌该混合物2小时。通过EA (50 mL)稀释该混合物并通过二氧化硅过滤。然后用水 (10 mL x 3) 和盐水 (10 mL x 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为灰色固体的中间体E (100 mg, 粗物质)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=400.0。
步骤3:2-氨基-N-[4-[3-(1H-吡唑-4-基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (中间体F)的制备
Figure 350823DEST_PATH_IMAGE169
在25℃下搅拌中间体E (100.00 mg, 250.33 μmol)在DCM (3 mL)和TFA (0.5mL)中的混合物2小时。将该混合物倾倒入水 (20 mL)中并用饱和NaHCO3 溶液处理至pH为7~8，然后用EA (5 mL x 5)萃取。用水 (5 mL x 3) 和盐水 (5 mL x 2)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过制备型HPLC纯化该固体 (柱: PhenomenexSynergi C18 150 x 25 x 10 μm；流动相: [水(0.05%HCl)-ACN]；B%: 5%-25%,10min) 并冻干以提供作为浅黄色固体的中间体F (30 mg, 100.22 μmol, 30.00%收率)。1H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.83 (br s, 1H), 8.44 (br s, 2H), 8.19-8.17 (m, 3H),7.88 (s, 1H), 7.79 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.65 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.51-7.47 (m,1H), 3.99-3.97 (m, 2H) ppm。
步骤4:3-(二甲基氨磺酰基)-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(1H-吡唑-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]苯甲酰胺 (化合物 4)的制备
Figure 976977DEST_PATH_IMAGE170
向中间体F (20.00 mg, 59.56 μmol)和3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酸 (根据实施例1中的方法制备) (15.48 mg, 65.51 μmol)在DCM (3 mL)中的溶液添加DIEA (23.09mg, 178.67 μmol, 31.12 μL)和HATU (33.97 mg, 89.34 μmol)。在30℃下搅拌该混合物16小时。用DCM (20 mL)稀释该反应混合物和用饱和NaHCO3 溶液 (5 mL x 3)、饱和柠檬酸溶液 (5 mL x 3)、水 (5 mL x 3) 和盐水 (5 mL x 3)洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物 (柱: Phenomenex Synergi C18 150 x 25 x 10μm；流动相: [水(0.1%TFA)-ACN]；B%: 28%-58%, 9min) 并冻干以提供作为白色固体的化合物 4 (7.76 mg, 15.20 μmol, 25.52%收率) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=511.1. 1H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ =12.50 (s, 1H), 9.33-9.30 (m, 1H), 8.28-8.24 (m, 2H),8.11 (br d, J=5.0 Hz, 3H), 7.95 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.83-7.79 (m, 1H), 7.74-7.72 (m, 2H), 7.57 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.44-7.40 (m, 1H), 4.25 (d, J=5.6 Hz,2H), 2.66 (s, 6H) ppm。
实施例8. 化合物N-(2-((4-(4-(1H-吡唑-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(N,N-二甲基氨磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 5)的制备
Figure 160833DEST_PATH_IMAGE171
步骤1:(2-((4-(4-(1H-吡唑-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 530635DEST_PATH_IMAGE172
在N2下向N-[2-[[4-(4-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(根据FG-A518中的方法制备) (300 mg, 691.97 μmol)在二氧杂环己烷 (4 mL)和H2O(0.4 mL)中的溶液添加4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(402.81 mg, 2.08 mmol)、DIEA (268.30 mg, 2.08 mmol, 361.59 μL) 和钯;三叔丁基磷烷 (176.82 mg, 345.99 μmol)。在100℃下搅拌该反应混合物2小时。将该反应混合物倾倒入水 (10 mL)和EA (10 mL)中。过滤该混合物并在真空中干燥滤饼以提供作为白色固体的中间体C (200 mg, 432.08 μmol, 62.44%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H] += 400.03. 1HNMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.95 (s, 1H), 12.26 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.96(s, 1H), 7.87 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.67 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.59 (s, 1H), 7.16-7.14 (m, 1H), 3.87 (d, J=6.0 Hz, 2H), 1.40 (s, 9H) ppm。
步骤2:N-(4-(4-(1H-吡唑-4-基)苯基)噻唑-2-基)-2-氨基乙酰胺 (中间体D)的制备
Figure 686809DEST_PATH_IMAGE173
向中间体C (180 mg, 388.87 μmol)在MeOH (2 mL)中的溶液添加HCl/二氧杂环己烷 (4 M, 2 mL)。在30℃下搅拌该混合物1小时。浓缩该反应混合物以提供残余物。用MTBE (2 mL)研磨该残余物然后过滤并在减压下干燥固体以提供作为白色固体的中间体D(120 mg, 339.80 μmol, 87.38%收率, HCl盐)。LCMS (ESI) m/z [M+Na] += 322.3。
步骤3:N-(2-((4-(4-(1H-吡唑-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(N,N-二甲基氨磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 5)的制备
Figure 483864DEST_PATH_IMAGE174
向3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酸 (根据实施例1中的方法制备) (12.81 mg, 55.87μmol)在DCM (0.5 mL)中的溶液添加HATU (25.49 mg, 67.04 μmol)、DIEA (36.10 mg,279.35 μmol, 48.66 μL)和中间体D (20 mg, 55.87 μmol, HCl盐)。在30℃下搅拌该混合物2小时并形成固体。过滤该反应混合物以提供固体。用MeOH (2 mL)研磨该固体，然后过滤并在真空中干燥该固体以提供作为白色固体的化合物 5 (9.72 mg, 18.49 μmol, 33.09%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H] += 511.3. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.97 (s,1H), 12.47 (s, 1H), 9.31-9.29 (m, 1H), 8.27-8.23 (m, 3H), 7.93 (d, J=7.8 Hz,2H), 7.89 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.81-7.79 (m, 1H), 7.67 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.62(s, 1H), 4.24 (d, J=6.0 Hz, 2H), 2.65 (m, 6H) ppm。
实施例9. 3-(N,N-二甲基氨磺酰基)-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 6)的制备
Figure 157947DEST_PATH_IMAGE175
步骤1:(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 65860DEST_PATH_IMAGE176
向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (根据实施例2中的方法制备) (100 mg, 242.54 μmol)、1-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑 (60.56 mg, 291.05 μmol)和K3PO4 (154.45 mg, 727.62 μmol)在二氧杂环己烷 (1 mL)和H2O (0.2 mL)中的溶液添加二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (15.81 mg, 24.25 μmol)。在75℃下在N2下搅拌该混合物16小时。过滤该反应混合物并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相HPLC (0.1% FA条件)纯化该残余物并冻干以提供作为黄色固体的中间体C (100 mg, 209.68 μmol, 86%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =414.1. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ= 9.93 (br s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.76-7.74(m, 2H), 7.46-7.40 (m, 2H), 7.24 (s, 1H), 6.60 (d, J=2.4 Hz, 1H), 4.05 (br s,2H), 3.98 (s, 3H), 1.48 (s, 9H) ppm。
步骤2:2-氨基-N-(4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺 盐酸盐 (中间体D)的制备
Figure 76541DEST_PATH_IMAGE177
向中间体C (100 mg, 209.68 μmol)在二氧杂环己烷 (1 mL)中的溶液添加二氧杂环己烷/HCl (4 M, 0.5 mL)。在30℃下搅拌该混合物3小时。通过过滤收集沉淀物, 用EA(5 mL)洗涤滤饼并在高真空下干燥以获得作为白色固体的中间体D (90 mg, 粗物质, HCl盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H] + =314.2. 1H NMR (400MHz, D2O) δ = 8.08-7.33 (m, 6H),6.71-6.11 (m, 1H), 4.10-4.08 (m, 2H), 3.89-3.87 (m, 3H) ppm。
步骤3:3-(N,N-二甲基氨磺酰基)-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 6)的制备
Figure 44497DEST_PATH_IMAGE178
向中间体D (90 mg, 257.26 μmol, HCl盐) 3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酸 (根据实施例1中的方法制备) (58.98 mg, 257.26 μmol)在DMF (1 mL)中溶液的添加 DIEA(224.05 μL, 1.29 mmol)和HATU (146.73 mg, 385.89 μmol)，和然后在40℃下搅拌该混合物16小时。用H2O (2 mL)稀释该反应混合物并用EA (3 mL x 2)萃取。用盐水 (3 mL)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥, 过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相 (0.1%FA条件)纯化该残余物并冻干以提供作为白色固体的化合物 6 (48.43 mg, 92.32 μmol,36%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H] + =525.0. 1H NMR (400MHz, MeOD) δ = 8.36 (d, J=1.6 Hz, 2H), 8.22-8.00 (m, 1H), 8.00-7.85 (m, 1H), 7.85-7.78(m, 1H), 7.78-7.71 (m, 2H), 7.71-7.64 (m, 1H), 7.64-7.62 (m, 2H), 7.46-7.44 (m, 1H), 6.69-6.67 (m, 1H), 4.37 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 2.76 (s, 6H) ppm。
实施例10. 3-(二甲基氨磺酰基)-N-[2-[[4-[3-(1-甲基吡唑-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]苯甲酰胺 (化合物 7)的制备
Figure 140629DEST_PATH_IMAGE179
步骤1:N-[2-[[4-[3-(1-甲基吡唑-4-基)苯基] 噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 914550DEST_PATH_IMAGE180
在N2的保护下向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (根据实施例2中的方法制备) (100.00 mg, 242.54 μmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑 (75.70 mg, 363.81 μmol)在二氧杂环己烷(8 mL)和水(2 mL)中的溶液添加Pd(dtbpf)Cl2 (15.81 mg, 24.25 μmol)和K3PO4 (15.44mg, 72.76 μmol)。在100℃下搅拌该混合物2小时。用EA (50 mL)稀释该反应混合物并用水(10 mL x 3)和盐水 (10 mL x 2)洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩以提供作为黄色固体的中间体C (100.00 mg, 粗物质)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z[M+H]+=413.9。
步骤2:2-氨基-N-[4-[3-(1-甲基吡唑-4-基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (中间体D)的制备
Figure 45317DEST_PATH_IMAGE181
向中间体C (100 mg, 241.84 μmol)在DCM (5 mL)中的溶液添加TFA (1 mL)。在30℃下搅拌该混合物2小时。用DCM (20 mL)稀释该混合物并在真空下浓缩并重复这个操作三次。通过MTBE (5 mL*2)洗涤该残余物并在真空下干燥以提供作为黄色油的中间体D(95.00 mg, 粗物质, TFA盐)，其直接用于接下来的步骤。
步骤3:3-(二甲基氨磺酰基)-N-[2-[[4-[3- (1-甲基吡唑-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]苯甲酰胺 (化合物 7)的制备
Figure 184174DEST_PATH_IMAGE182
向中间体D (80.00 mg, 187.18 μmol, TFA盐)和3-(二甲基氨磺酰基) 苯甲酸(47.20 mg, 205.90 μmol)在DCM (6 mL)中的溶液添加DIEA (72.57 mg, 561.53 μmol,97.81 μL)和HATU (106.76 mg, 280.77 μmol)。在30℃下搅拌该混合物16小时。将该混合物倾倒入水 (30 mL)中并用EA (5 mL x 3)萃取。用水 (5 mL x 2) 和盐水 (5 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物 (柱:Phenomenex luna C18 150 x 25 x 10u；流动相: [水(0.1%TFA)-ACN]；B%: 34%-61%, 10min) 并冻干以提供作为黄色固体的化合物 7 (11.30 mg, 19.71 μmol, 10.53%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=525.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.48 (s, 1H),9.30-9.27 (m, 1H), 8.28-8.24 (m, 2H), 8.16 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.95 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.83-7.79 (m, 1H), 7.74-7.71 (m, 2H), 7.52 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.43-7.39 (m, 1H), 4.25 (d, J=5.6 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H), 2.66(s, 6H) ppm。
实施例11. 4-[2-[[2-[[3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酰基]氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯甲酸 (化合物 8)的制备
Figure 502023DEST_PATH_IMAGE183
步骤1:4-[2-[[2-[[3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酰基]氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯甲酸甲酯 (中间体C)的制备
Figure 79635DEST_PATH_IMAGE184
在N2的保护下向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酰胺 (根据实施例4中的方法制备) (50 mg, 111.78 μmol)和(4-甲氧基羰基苯基)硼酸 (60.35 mg, 335.33 μmol)在二氧杂环己烷 (3 mL)和H2O (0.2 mL)中的溶液添加钯;三叔丁基磷烷 (28.56 mg, 55.89 μmol)和DIEA (28.89 mg, 223.55 μmol, 38.94μL, 2 eq)。在100℃下搅拌该混合物2小时。在冷却至30℃后形成大量固体。过滤该混合物并在EA (3mL)中研磨该固体，然后过滤并在真空下干燥以提供作为灰色固体的中间体C(25 mg, 粗物质)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=502.9。
步骤2:4-[2-[[2-[[3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酰基]氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯甲酸 (化合物 8)的制备
Figure 64909DEST_PATH_IMAGE185
向中间体C (20.00 mg, 39.80 μmol)在MeOH (2 mL)中的溶液添加水 (1 mL)和NaOH (1.59 mg, 39.80 μmol)。在30℃下搅拌该混合物2小时。用HCl (1M)调节该反应混合物的pH至5~6并形成大量固体。过滤该固体并在减压下干燥以提供作为白色固体的化合物8 (9.08 mg, 18.59 μmol, 46.70%收率) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=489.0. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.54 (br s, 1H), 9.31-9.28 (m, 1H), 8.27-8.24 (m, 2H),8.04-7.99 (m, 4H), 7.95 (br d, J=7.6 Hz, 1H), 7.83-7.79 (m, 2H), 4.25 (br d,J=5.6 Hz, 2H), 2.67 (s, 6H) ppm。
实施例12. 化合物N-(2-((4-(4-(1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(N,N-二甲基氨磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 9)的制备
Figure 374667DEST_PATH_IMAGE186
步骤1:N-[2-[[4-(4-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure 179812DEST_PATH_IMAGE187
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸 (1.65 g, 9.41 mmol)在DCM (20 mL)中的溶液添加 HATU (4.47 g, 11.76 mmol)、DIEA (3.04 g, 23.52 mmol)和4-(4-溴苯基)噻唑-2-胺(2 g, 7.84 mmol)。在30℃下搅拌该反应混合物12小时。将该反应混合物倾倒入水 (20ml)中，然后用EA (20 mL x 3)萃取。用盐水 (50 ml)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥并过滤。浓缩滤液以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, PE:EA=100:1-80:1-50:1-10:1-1:1) 然后浓缩以提供残余物。用MTBE(2 ml)研磨该残余物，然后过滤并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体C (1.2 g, 2.90 mmol, 36.97%收率)。LCMS (ESI) m/z[81BrM+H]+= 414.1. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.28 (s, 1H), 7.84 (d, J=8.8Hz, 2H), 7.69 (s, 1H), 7.63 (d, J=8.4 Hz, 2H), 3.86 (d, J=6.0 Hz, 2H), 1.40(s, 9H) ppm。
步骤2:N-[2-氧代-2-[[4-[4-(1H-吡唑-3-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体E)的制备
Figure 295536DEST_PATH_IMAGE188
在N2下向中间体C (100 mg, 241.52 μmol)在二氧杂环己烷 (5 mL)和H2O (0.5mL)中的溶液添加 1H-吡唑-3-基硼酸 (81.08 mg, 724.57 μmol)、DIEA (93.65 mg,724.57 μmol, 126.21 μL)和Pd(t-Bu3P)2 (24.69 mg, 48.30 μmol)。在100℃下搅拌该反应混合物2小时。将该反应混合物倾倒入水 (5 mL)中。用EA (5 mL x 3)萃取该溶液。用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥并过滤。浓缩滤液以提供残余物。用EA (2 mL)研磨该残余物，然后过滤并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体E (40 mg, 99.45μmol, 41.18%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=400.0。
步骤3:2-氨基-N-[4-[4-(1H-吡唑-3-基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (中间体F)的制备
Figure 135316DEST_PATH_IMAGE189
向中间体E (40 mg, 99.45 μmol, 1 eq)在DCM (5 mL)中的溶液添加TFA (1mL)。在30℃下搅拌该混合物2小时。在真空下浓缩该混合物以提供残余物。用MTBE (1 mL)研磨该残余物，然后过滤并在真空下干燥以提供作为黄色固体的中间体F (30 mg, 70.86μmol, 71.25%收率, 97.64%纯度, TFA)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 300.2。
步骤4:N-(2-((4-(4-(1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(N,N-二甲基氨磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 9)的制备
Figure 615976DEST_PATH_IMAGE190
向3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酸 (根据实施例1中的方法制备) (16.63 mg, 72.55μmol)在DMF (3 mL)中的溶液添加HATU (33.11 mg, 87.07 μmol)、DIEA (46.90 mg,362.85 μmol, 63.20 μL)和2-氨基-N-[4-[4-(1H-吡唑-3-基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺(30 mg, 69.78 μmol, TFA盐)。在30℃下搅拌该混合物12小时。将该反应混合物倾倒入水(5 mL)中。用EA (5 mL x 3)萃取该溶液，用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥并过滤。浓缩滤液以提供残余物。通过制备型HPLC纯化残余物 (柱: Phenomenex SynergiC18 150 x 25 x 10 μm；流动相: [水(0.225% FA)-ACN]；B%: 32%-53%, 7 min)。冻干该溶液以提供固体。用 EA (1 mL)研磨该固体，然后过滤并在真空下干燥以提供作为白色固体的化合物 9 (2.62 mg, 5.13 μmol, 7.35%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H] += 511.3. 1HNMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.88 (s, 1H), 12.44 (s, 1H), 9.27-9.25 (m, 1H),8.25 (s, 2H), 7.93- 7.87(m, 5H), 7.80- 7.76 (m, 2H), 7.62 (s, 1H), 6.73 (s,1H), 4.22 (d, J=6.0 Hz, 2H), 2.63 (s, 6H) ppm。
实施例13. 3-(二甲基氨磺酰基)-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(1H-吡唑-3-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]苯甲酰胺 (化合物 10)的制备
Figure 173996DEST_PATH_IMAGE191
步骤1:N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure 765514DEST_PATH_IMAGE192
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸 (82.40 mg, 470.34 μmol)在DCM (10 mL)中的溶液添加 HATU (223.55 mg, 587.93 μmol)和DIEA (151.97 mg, 1.18 mmol, 204.81 μL)和在30℃下搅拌该混合物30分钟。然后加入4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺 (100.00 mg, 391.95μmol)。在30℃下搅拌该混合物另外12小时，然后用DCM (50.0 mL)稀释。用H2O (10.0 mL x3) 和盐水 (10 mL x 2)洗涤该溶液，然后经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩以提供作为黄色油的中间体C (150 mg, 粗物质)，其直接用于接下来的步骤 LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 412.3
步骤2:N-[2-氧代-2-[[4-[3-(1H-吡唑-3-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体E)的制备
Figure 787697DEST_PATH_IMAGE193
在N2的保护下向中间体C (25.00 mg, 60.64 μmol)和1H-吡唑-3-基硼酸 (20.36mg, 181.92 μmol)在二氧杂环己烷 (2 mL)和H2O (0.2 mL)中的溶液添加Pd(t-Bu3P)2(9.30 mg, 18.19 μmol)和DIEA (23.51 mg, 181.92 μmol, 31.68 μL)。在100℃下搅拌该混合物2小时。将该混合物倾倒入水 (30 mL)中并用EA (5 mL x 5)萃取。用水 (5 mL x 3)和盐水 (5 mL x 2)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色固体的中间体E (65.00 mg, 粗物质)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=399.9。
步骤3:2-氨基-N-[4-[3-(1H-吡唑-3-基)苯基]噻唑-2-基] 乙酰胺 (中间体F)的制备
Figure 439258DEST_PATH_IMAGE194
在25℃下搅拌中间体E (65 mg, 162.72 μmol)在DCM (3 mL)和TFA (0.3 mL)中的混合物2小时。用DCM (20 ml)稀释该混合物并在真空下浓缩。重复这个操作三次。然后通过MTBE (5 mL x 2)洗涤该残余物并在真空下浓缩以提供作为黄色油的中间体F (70.00mg, 粗物质, TFA盐)，其直接用于接下来的步骤 LCMS (ESI) m/z [M+H]+=300.1。
步骤4:3-(二甲基氨磺酰基)-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(1H-吡唑-3-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]苯甲酰胺 (化合物 10)的制备
Figure 218995DEST_PATH_IMAGE195
向中间体F (70.00 mg, 169.34 μmol, TFA盐)和3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酸(根据实施例1中的方法制备) (42.70 mg, 186.27 μmol)在DCM (10 mL)中的溶液添加DIEA (65.66 mg, 508.02 μmol, 88.49 μL)和HATU (96.58 mg, 254.01 μmol)。在30℃下搅拌该混合物16小时。用DCM (20 mL)稀释该混合物并用水(10 mL x 3) 和盐水 (10 mL x2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物 (柱:Phenomenex Synergi C18 150 x 25 x 10 μm；流动相: [水(0.1%TFA)-ACN]；B%: 28%-58%,9min) 并冻干以提供作为灰白色固体的化合物 10 (21.26 mg, 41.64 μmol, 24.59%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=510.9. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ= 12.52 (s,1H), 9.30-9.28 (m, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.28-8.24 (m, 2H), 7.95 (d, J=7.6 Hz,1H), 7.84-7.81 (m, 2H), 7.76-7.74 (m, 2H), 7.71 (s, 1H), 7.49-7.45 (m, 1H),6.75 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.25 (d, J=6.0 Hz, 2H), 2.67 (s, 6H) ppm。
实施例14. 3-[2-[[2-[[3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酰基]氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯甲酸 (化合物 11)的制备
Figure 614205DEST_PATH_IMAGE196
步骤1:3-[2-[[2-[[3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酰基]氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯甲酸甲酯 (中间体C)的制备
Figure 490894DEST_PATH_IMAGE197
在N2的保护下向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酰胺 (根据实施例4中的方法制备) (30 mg, 67.07 μmol)和(3-甲氧基羰基苯基)硼酸 (36.21 mg, 201.21 μmol)在二氧杂环己烷 (2 mL)和H2O (0.1 mL)中的溶液添加Pd(t-Bu3P)2 (17.14 mg, 33.53 μmol)和DIEA (43.34 mg, 335.35 μmol, 58.41 μL)。在100℃下搅拌该混合物2小时。在冷却至30℃后形成大量固体。过滤该混合物并在EA (3mL)中研磨该固体，然后过滤并在真空下干燥以提供作为浅黄色固体的中间体C (15 mg, 29.85 μmol)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=502.9。
步骤2:3-[2-[[2-[[3-(二甲基氨磺酰基)苯甲酰基]氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯甲酸 (化合物 11)的制备
Figure 313356DEST_PATH_IMAGE198
向中间体C (15.00 mg, 29.85 μmol)在MeOH (2 mL)中溶液的添加H2O (1 mL)和NaOH (1.19 mg, 29.85 μmol)。在30℃下搅拌该混合物12小时，然后用MeOH (10 mL)稀释并用HCl (1M)处理至pH为5~6, 在真空下浓缩以提供粗产物。通过MeOH (1 mL)稀释该残余物并通过制备型HPLC纯化 (柱: Phenomenex Synergi C18 150 x 25 x 10 μm；流动相:[水(0.1%TFA) -ACN]；B%: 28%-58%,9min) 并冻干以提供作为灰白色固体的化合物 11(9.21 mg, 18.85 μmol, 63.16%收率) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=488.9. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 13.02 (br s, 1H), 12.53 (s, 1H), 9.31-9.29 (m, 1H), 8.55(s, 1H), 8.54-8.24 (m, 2H), 8.13 (br d, J=7.8 Hz, 1H), 7.94 (d, J=7.6 Hz,1H), 7.89 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.85-7.83 (m, 2H), 7.81-7.77 (m, 1H), 4.25 (d, J=5.6 Hz, 2H), 2.67 (s, 6H) ppm。
实施例15. N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体D)和2-氨基-N-(4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)乙酰胺 (中间体E)的制备
Figure 580390DEST_PATH_IMAGE199
步骤1:4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺 (中间体B)的制备
Figure 779290DEST_PATH_IMAGE200
向1-(3-溴苯基)乙酮 (473 g, 2.38 mol, 313.25 mL)和硫脲 (361.78 g, 4.75mol)的混合物添加I2 (603.14 g, 2.38 mol, 478.68 mL, 1 eq)。在110℃下搅拌该混合物16小时。在冷却后，用MTBE (5 L)研磨该反应混合物，并然后过滤以除去任何未反应的碘和苯乙酮。将滤饼放入冰水 (4 L)中并用 25% NH3.H2O处理至pH=9-10。在25℃下搅拌该悬浮液15分钟，然后过滤并用水 (1 L)洗涤以提供湿固体。将该湿固体溶解于EA (4 L)中并用饱和NaHCO3 (1 L x 2) 和盐水 (1L)洗涤。经Na2SO4干燥该EA层，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。在25℃下用PE/EA=100:1 (4 L)研磨该残余物3小时，然后过滤该悬浮液，用PE(1 L)洗涤滤饼并在真空下干燥以提供作为粉红色固体的中间体B (450 g, 1.69 mol,71.20%收率, 95.93%纯度)。LCMS (ESI) m/z [79BrM+H+] = 254.9. 1H NMR (400MHz,DMSO-d6) δ = 7.98-7.97 (m, 1H), 7.80-7.77 (m, 1H), 7.43-7.42 (m, 1H), 7.34 -7.30 (m, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.10 (s, 2H)。
步骤2:N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体D)的制备
Figure 510485DEST_PATH_IMAGE201
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸 (82.40 g, 470.34 mmol)、HATU (178.84 g,470.34 mmol)和DIEA (151.97 g, 1.18 mol, 204.81 mL)在DCM (1000.00 mL)中的溶液添加中间体B (100.00 g, 391.95 mmol)，在30℃下搅拌该混合物16小时。用饱和柠檬酸(500 mL x 4) 和盐水 (500 mL)洗涤该反应混合物，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。用MeOH (200.0 mL)研磨该残余物，过滤并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体D (100 g, 241.89 mmol, 61.71%收率)。LCMS (ESI) m/z [81BrM+H]+= 413.8.1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.29 (s, 1H), 8.09 - 8.09 (m, 1H), 7.89 (d, J =7.6 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.52 - 7.49 (m, 1H), 7.41 - 7.37 (m, 1H), 7.16 -7.13 (m, 1H), 3.87 - 3.81 (m, 2H), 1.39 (s, 9H) ppm。
步骤3:2-氨基-N-(4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)乙酰胺 (中间体E)的制备
Figure 503849DEST_PATH_IMAGE202
在30℃下搅拌中间体D (10 g, 24.25 mmol)在HCl/二氧杂环己烷 (100 mL)中的混合物2小时。在真空下浓缩该反应混合物以提供作为白色固体的中间体E (8.4 g, 粗物质, HCl)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=313.8。
实施例16. 2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (中间体F)的制备
Figure 258179DEST_PATH_IMAGE203
步骤1:4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-胺 (中间体C)的制备
Figure 260770DEST_PATH_IMAGE204
在N2下向4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺 (10 g, 39.20 mmol)、4-吡啶基硼酸 (14.45g, 117.59 mmol)和K2CO3 (16.25 g, 117.59 mmol)在二氧杂环己烷 (120 mL)和水(30mL)中的溶液添加Pd(dppf)Cl2 (1 g, 1.37 mmol)，在100℃下搅拌该混合物4小时。用水(500 mL)稀释该反应混合物，用EA (500 mL)萃取并在减压下浓缩以提供残余物。通过从DCM/MTBE=1:20 (200 mL)中结晶纯化该残余物并过滤以提供作为棕色固体的中间体C(9.5 g, 36.33 mmol, 92.69%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 254.2. 1H NMR (400MHz,DMSO-d6) δ 8.66 (d, J=6.0 Hz, 2H), 8.19 (s, 1H), 7.90 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.76- 7.70 (m, 2H), 7.68 (d,J=8.0 Hz, 1H), 7.52 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H),7.11 (s, 2H) ppm。
步骤2:N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体E)的制备
Figure 784155DEST_PATH_IMAGE205
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸 (9.85 g, 56.25 mmol)、HATU (21.39 g, 56.25mmol)和DIPEA (14.54 g, 112.51 mmol)在DCM (200 mL)中的溶液添加int C (9.5 g,37.50 mmol, 1 eq)，在30℃下搅拌该混合物16小时。形成沉淀物。过滤该反应混合物以提供黄色固体。用EA (300.0 mL)和MeOH (50.0 mL)研磨粗产物并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体E (11 g, 25.89 mmol, 69.03%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=411.3. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.32 (br s, 1H), 8.69 - 8.67 (m, 2H), 8.30(s, 1H), 8.01 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.80 - 7.76 (m, 3H), 7.64 -7.60 (m, 1H), 7.20 - 7.15 (m, 1H), 3.88 (d, J=6.4 Hz, 2H), 1.44 (s, 9H) ppm。
步骤3:2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (中间体F)的制备
Figure 10737DEST_PATH_IMAGE206
向中间体E (11 g, 26.80 mmol)在MeOH (20 mL)中的溶液添加4 M HCl/EtOAc(20 mL)。在20℃下搅拌该混合物2小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过用EA (200 mL)和MTBE (50 mL)研磨纯化残余物并在真空下干燥以提供作为浅黄色固体的中间体F (12 g, HCl盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 311.3. 1H NMR 1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ8.92 (d, J=6.8 Hz, 2H), 8.52 - 8.47 (m, 3H), 8.22 (d, J=8.0 Hz, 1H),7.94 (m, J=8.4 Hz, 1H), 7.75 - 7.66 (m, 2H), 4.04 (s, 2H) ppm。
实施例17. 3-(2-(2-(3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)苯甲酸甲酯 (化合物 12)的制备
Figure 252362DEST_PATH_IMAGE207
步骤1:3-(2-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙酰胺基)噻唑-4-基)苯甲酸甲酯 (中间体C)的制备
Figure 793065DEST_PATH_IMAGE208
向(2-((4-溴噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯 (400 mg, 1.19mmol)、(3-甲氧基羰基苯基)硼酸 (428.23 mg, 2.38 mmol)、H3PO4 (349.77 mg, 3.57mmol, 208.20 μL)在二氧杂环己烷 (5 mL)和H2O (1 mL)中的溶液添加二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (155.08 mg, 237.95 μmol)。然后在70℃下在N2下搅拌该混合物2小时。将该反应混合物倾倒入水 (20 mL)中并用EA (10 mL x 2)萃取，用盐水 (20 mL)洗涤有机层和经Na2SO4干燥，浓缩以提供粗产物。通过快速硅胶层析法纯化该粗产物 (PE:EA=10:1至3:1) 并在真空下浓缩以提供作为灰白色固体的中间体C (300 mg, 759.96 μmol,63.88%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 392.1. 1H NMR (400MHz, 氯仿-d) δ = 10.08(br s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.00 - 7.98 (m, 2H), 7.49 - 7.45 (m, 1H), 7.24 (s,1H), 5.53 - 5.12 (m, 1H), 4.15 - 4.10 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 1.50 (s, 9H)ppm。
步骤2:3-(2-(2-氨基乙酰胺基)噻唑-4-基)苯甲酸甲酯 (中间体D)的制备
Figure 170957DEST_PATH_IMAGE209
在25℃下搅拌中间体C (300 mg, 766.40 μmol)在HCl/EtOAc (4 M, 3 mL)中的溶液1小时。浓缩该反应混合物以提供作为白色固体的中间体C (240 mg, 719.74 μmol,93.91%收率, HCl盐)，其不经进一步的纯化即用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 292.1. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ= 12.83 (br s, 1H), 8.55 - 8.53 (m, 1H),8.38 (br s, 2H), 8.19 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.93 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.88 (s,1H), 7.63 - 7.61 (m, 1H), 3.98 - 3.85 (m, 5H) ppm。
步骤3:1-异丙基硫烷基-3-甲基-苯 (中间体H)的制备
Figure 831090DEST_PATH_IMAGE210
在0℃下向3-甲基苯硫醇 (10.0 g, 80.51 mmol, 9.62 mL)在THF (100.0 mL)中的溶液添加NaH (3.86 g, 96.62 mmol, 60%纯度)，然后将2-碘丙烷 (16.42 g, 96.62mmol, 9.66 mL)添加至该混合物，在20℃下搅拌该反应混合物1小时。将该反应混合物倾倒入NH4Cl水溶液(400.0 mL)中，用EtOAc (400.0 mL x 3)萃取。用盐水 (500.0 mL)洗涤合并的有机层，经[Na2SO4]干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为浅黄色油的中间体H (14.0g, 粗物质)。该残余物不经进一步纯化即用于接下来的步骤。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ 7.27 - 7.12 (m, 3H), 7.04 (br d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.48 – 3.42 (m, 1H), 2.28(s, 3H), 1.22 (d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm。
步骤4:3-异丙基磺酰基苯甲酸 (中间体E)的制备
Figure 294432DEST_PATH_IMAGE211
向中间体H (14.0 g, 84.19 mmol)和KMnO4 (53.22 g, 336.78 mmol)在水(400.0 mL)中的溶液添加NaOH (1.68 g, 42.10 mmol)，在90℃下搅拌该混合物6小时。将该反应混合物倾倒入饱和Na2SO3 (500.0 mL)中，然后加入1 N HCl (100.0 mL)。用EtOAc(500.0 mL x 3)萃取该混合物。用NaHCO3水溶液(500 mL x 2)洗涤合并的有机层。用1 NHCl酸化水层至pH=3.0，然后用EtOAc (500.0 mL x 3)萃取。用盐水 (500.0 mL)洗涤合并的有机层，经[Na2SO4]干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为白色固体的中间体E (13.0 g,54.30 mmol, 64.49%收率) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 229.0. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.58 (s, 1H), 8.32 - 8.27 (m, 2H), 8.11 - 8.08 (m, 1H), 7.83 – 7.79(m, 1H), 3.53 – 3.46 (m, 1H), 1.15 (d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm。
步骤5:3-(2-(2-(3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)苯甲酸甲酯 (化合物 12)的制备
Figure 638826DEST_PATH_IMAGE212
向中间体C (70 mg, 213.55 μmol, HCl盐)、中间体E (48.75 mg, 213.55 μmol)、EDCI (81.88 mg, 427.11 μmol)、HOBt (57.71 mg, 427.11 μmol)在DCM (1 mL)中的溶液添加DIEA (138.00 mg, 1.07 mmol, 185.99 μL)。然后在25℃下搅拌该混合物16小时。浓缩该反应混合物以提供粗产物。通过制备型HPLC (FA)纯化该粗产物并冻干以提供作为白色固体的化合物 12 (65.25 mg, 118.51 μmol, 55.50%收率) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 501.9. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ= 12.58 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 8.56 (m,1H), 8.39 (s, 1H), 8.28 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.19 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.06 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.92 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.87-7.79 (m, 2H), 7.61-7.59 (m, 1H),4.25 (d, J=5.6 Hz, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.58-3.46 (m, 1H), 1.19 (d, J=6.6 Hz,6H) ppm。
实施例18. 3-(异丙基磺酰基)-N-(2-((4-(3-(2-甲基嘧啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 13)的制备
Figure 871224DEST_PATH_IMAGE213
步骤1:N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 705188DEST_PATH_IMAGE214
在N2下向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(根据实施例15中的方法制备) (14.5 g, 35.17 mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷 (26.79 g, 105.51mmol)和Pd(dppf)Cl2 (2.57 g, 3.52 mmol)在二氧杂环己烷 (150 mL)中的溶液添加KOAc(10.35 g, 105.51 mmol)，在80℃下搅拌该混合物2小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=1/1) 并在减压下浓缩以提供作为白色固体的中间体C (11.5 g, 24.03 mmol, 68.34%收率) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 460.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.33 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.00(d, J=8.0 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.45-7.42 (m, 1H),7.16-7.13 (m, 1H), 3.85 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 1.40(s, 9H), 1.31 (s, 12H) ppm。
步骤2:N-[2-[[4-[3-(2-甲基嘧啶-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体E)的制备
Figure 655826DEST_PATH_IMAGE215
在N2下向中间体C (1.5 g, 3.27 mmol)、4-氯-2-甲基-嘧啶 (420.39 mg, 3.27mmol)和二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (213.12 mg, 327.00 μmol)在二氧杂环己烷 (15 mL)和水(3 mL)中的溶液添加K3PO4 (2.08 g, 9.81 mmol)，在80℃下搅拌该混合物2小时。用水 (100 mL)稀释该反应混合物并用EtOAc (100 mL x 3)萃取。用盐水 (300 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为棕色固体的中间体E(1.2 g, 2.82 mmol, 86.24%收率)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。LCMS (ESI)m/z [M+H]+= 426.1。
步骤3:2-氨基-N-[4-[3-(2-甲基嘧啶-4-基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (中间体F)的制备
Figure 538332DEST_PATH_IMAGE216
在30℃下搅拌中间体E (1.2 g, 2.82 mmol)在HCl/二氧杂环己烷 (20 mL)中的溶液1小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。用MTBE (10.0 mL)研磨该残余物，然后过滤并在真空下干燥以提供作为红色固体的中间体F (1 g, 2.76 mmol, 97.99%收率, HCl) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 326.1。
步骤4:3-(异丙基磺酰基)-N-(2-((4-(3-(2-甲基嘧啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 13)的制备
Figure 890815DEST_PATH_IMAGE217
向3-异丙基磺酰基苯甲酸 (50.47 mg, 221.09 μmol), HATU (100.88 mg,265.30 μmol)和DIEA (142.87 mg, 1.11 mmol, 192.55 μL)在DCM (1 mL)中的溶液添加中间体F (80 mg, 221.09 μmol, HCl)，在30℃下搅拌该混合物2小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。用MeOH (5.0 mL)和MTBE (5.0 mL)研磨该残余物，然后过滤并在真空下干燥以提供作为白色固体的化合物 13 (52.65 mg, 96.21 μmol, 43.52%收率) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 536.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.55 (br s, 1H),9.30 - 9.28 (m, 1H), 8.79 - 8.72 (m, 2H), 8.38 (s, 1H), 8.27 (d, J = 8.0 Hz,1H), 8.13 - 8.04 (m, 3H), 7.92 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.84 - 7.80 (m, 2H), 7.63- 7.59 (m, 1H), 4.25 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.53 - 3.46 (m, 1H), 2.71 (s, 3H),1.18 (d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例19. N-(2-((4-(3-((2S,6R)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 14)的制备
Figure 833364DEST_PATH_IMAGE218
步骤1:(2-((4-(3-((2S,6R)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 333615DEST_PATH_IMAGE219
将N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (根据实施例15中的方法制备) (1.5 g, 3.64 mmol)、(2S,6R)- 2,6-二甲基吗啉 (628.52 mg,5.46 mmol)、[2-(2-氨基苯基)苯基]-甲基磺酰基氧基-钯;二叔丁基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷 (289.00 mg, 363.81 μmol)和t-BuONa (1.05 g, 10.91 mmol)在二氧杂环己烷 (15 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在60℃下在N2 气氛下搅拌该混合物5小时。添加水(40 mL)并用EA (100 mL x 2)萃取该反应混合物。用盐水 (40 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (ISCO®; 40 g SepaFlash® 硅胶快速柱,以50 mL/min的10~60% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液) 并在真空下浓缩以提供作为白色固体的中间体C (800 mg, 1.61mmol, 44.32%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 447.4。
步骤2:2-氨基-N-(4-(3-((2S,6R)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺(中间体D)的制备
Figure 19811DEST_PATH_IMAGE220
向中间体C (700 mg, 1.57 mmol)在MeOH (5 mL)中的溶液添加HCl/二氧杂环己烷 (5 mL)。在25℃下搅拌该混合物2小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供作为黄色固体的中间体D (700 mg, 粗物质, HCl)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。LCMS(ESI) m/z [M+H]+= 347.2。
步骤3:N-(2-((4-(3-((2S,6R)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 14)的制备
Figure 226802DEST_PATH_IMAGE221
向3-异丙基磺酰基苯甲酸 (54.25 mg, 237.66 μmol)在DCM (2 mL)中的溶液添加EDCI (52.57 mg, 274.22 μmol)、DIEA (70.88 mg, 548.44 μmol, 95.53 μL)和HOBt(37.05 mg, 274.22 μmol)，然后添加中间体D (70 mg, 182.81 μmol, HCl)。在25℃下搅拌该混合物2小时。在减压下浓缩该反应混合物以除去DCM。通过制备型HPLC纯化残余物(TFA条件；柱: Luna C18 150 x 25 5u；流动相: [水(0.075%TFA)- ACN]；B%: 35%-65%,2min) 并冻干以提供产物, 其通过制备型TLC预纯化 (SiO2, DCM: MeOH = 10:1) 以提供作为白色固体的化合物 14 (17 mg, 30.28 μmol, 16.56%收率, 99.16%纯度)。LCMS(ESI) m/z [M+H]+= 557.3. 1H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ = 8.44 (s, 1H), 8.27 (d,J=8.0 Hz, 1H), 8.09 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.81-7.77 (m, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.38-7.36 (m, 2H), 7.29-7.25 (m, 1H), 6.93 (d, J=7.6 Hz, 1H), 4.34 (s, 2H), 3.85-3.80 (m, 2H), 3.58 (d, J=10.8 Hz, 2H), 3.44-3.37 (m, 1H), 2.39-2.33 (m, 2H),1.29 (d, J=6.8 Hz, 6H), 1.24 (d, J=6.0 Hz, 6H) ppm. 手性HPLC: Cellucoat-MeOH(DEA)-40-3mL-35T.lcm, Rt = 1.816 min, ee%=100%。
实施例20. 3-(羟甲基)-5-(异丙基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 15)的制备
Figure 340251DEST_PATH_IMAGE222
步骤1:3-(异丙基硫基)-5-甲基苯甲酸 (中间体B)的制备
Figure 327799DEST_PATH_IMAGE223
在-78℃下在N2下向3-溴-5-甲基-苯甲酸 (4 g, 18.60 mmol)在THF (50 mL)中的混合物逐滴添加n-BuLi (2.5 M, 16.37 mL)。在-78℃下搅拌该混合物30分钟，然后在-78℃下将2-(异丙基二硫烷基)丙烷 (2.94 g, 19.53 mmol, 3.11 mL)添加至该混合物。在25℃下搅拌该混合物10小时。用NH4Cl水溶液 (300mL)处理该混合物并用乙酸乙酯 (100mL x 2)萃取。用盐水 (100 mL x 1)洗涤合并的有机相，用无水 Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯至DCM/MeOH=5/1至5/1) 以提供作为黄色固体的中间体B (2.9 g, 13.79 mmol, 74.14%收率) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 211.1. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.89 - 7.80 (m, 1H), 7.74 - 7.63 (m,1H), 7.37 - 7.31 (m, 1H), 3.48 - 3.30 (m, 1H), 2.58 - 2.52 (m, 1H), 2.49 -2.43 (m, 1H), 2.33 - 2.26 (m, 1H), 2.36 - 2.25 (m, 2H), 1.26 - 1.17 (m, 7H)ppm。
步骤2:3-(异丙基磺酰基)-5-甲基苯甲酸 (中间体C)的制备
Figure 552107DEST_PATH_IMAGE224
向中间体B (2.3 g, 10.94 mmol)在MeOH (25 mL)和H2O (25 mL)中的溶液添加Oxone (10.09 g, 16.41 mmol)。然后在25℃下搅拌该混合物3小时。用水 (60 mL)稀释该反应混合物并用EA (60 mL x 2)萃取。用盐水 (60 mL x 1)洗涤合并的有机相，采用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。在25℃下用MTBE/PE =2/1(20 mL)研磨粗产物5分钟，过滤并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体C (1.7 g, 7.02 mmol, 64.15%收率) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 243.0。
步骤3:3-(异丙基磺酰基)-5-甲基苯甲酸甲酯 (中间体D)的制备
Figure 879183DEST_PATH_IMAGE225
在0℃下向中间体C (800 mg, 3.30 mmol)在MeOH (8 mL)中的溶液添加亚硫酰氯(785.63 mg, 6.60 mmol, 479.05 μL)。然后在80℃下搅拌该混合物溶液12小时。用NaHCO3(10 mL)将该混合物调节至 pH=9，然后用EA (15 mL x 3)萃取，经无水 Na2SO4干燥合并的有机相，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色固体的中间体D (880 mg, 粗物质)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。1H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ = 8.17 (s, 1H), 8.09(s, 1H), 7.84 (s, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.32 - 3.24 (m, 1H), 2.43 (s, 3H), 1.16(d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm。
步骤4:3-(溴甲基)-5-(异丙基磺酰基)苯甲酸甲酯 (中间体E)的制备
Figure 897955DEST_PATH_IMAGE226
在25℃下向甲基中间体D (880 mg, 3.43 mmol)在CCl4 (10 mL)中的溶液添加AIBN (16.91 mg, 103.00 μmol)和NBS (763.83 mg, 4.29 mmol)。然后在80℃下搅拌该混合物16小时。将该反应混合物倾倒入H2O (15 mL)中并用DCM (15 mL x 3)萃取，经无水Na2SO4干燥合并的有机相，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过制备型TLC纯化该残余物 (PE/EA=3/1) 以提供作为黄色固体的中间体E (540 mg, 1.61 mmol, 46.92%收率)。LCMS (ESI) m/z [81BrM+H]+= 337.0. 1H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ = 8.40 - 8.39 (m,J = 4 Hz, 1H), 8.38 - 8.37 (m, J = 4 Hz, 1H), 8.18 - 8.16 (m, 1H), 4.74 (s,2H), 3.98 (s, 3H), 3.42 - 3.34 (m, 1H), 1.28-1.26 (d, J = 8.0 Hz, 6H) ppm。
步骤5:3-(羟甲基)-5-(异丙基磺酰基)苯甲酸甲酯 (中间体F)的制备
Figure 372798DEST_PATH_IMAGE227
向中间体E (240 mg, 715.96 μmol)在二氧杂环己烷 (2 mL)和H2O (2 mL)中的溶液添加CaCO3 (286.64 mg, 2.86 mmol)。然后在100℃下搅拌该混合物8小时。向该反应混合物添加水 (5 mL) 并用EA (5 mL x 3)萃取，经无水 Na2SO4干燥合并的有机相，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯至PE/EA=10/1至5/1) 以提供作为黄色油的中间体F (100 mg, 367.22 μmol, 51.29%收率)。LCMS(ESI) m/z [M+H]+= 272.9. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.26 - 8.21 (m, 1H),8.21 - 8.19 (m, 1H), 8.19 - 8.06 (m, 1H), 5.63 - 5.60 (m, 1H), 4.68 (d, J =8.0 Hz, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.92 - 3.51 (m, 1H), 1.18 (d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm。
步骤6:3-(羟甲基)-5-(异丙基磺酰基)苯甲酸 (中间体G)的制备
Figure 400797DEST_PATH_IMAGE228
在25℃下向中间体F (100 mg, 367.22 μmol)在THF (1 mL)和MeOH (0.5 mL)中的溶液添加LiOH.H2O (77.05 mg, 1.84 mmol)在H2O (0.5 mL)中的溶液。然后在25℃下搅拌该混合物1小时。用HCl(1M)将该混合物调节至 pH=6，然后用EA (5 mL x 3)萃取，经无水Na2SO4干燥合并的有机相，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色固体的中间体G (60 mg,232.30 μmol, 63.26%收率)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z[81BrM+H]+= 337.0. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.23 (s, 1H), 8.18 (s, 1H),8.02 (s, 1H), 4.68 (s, 2H), 3.52 - 3.43 (m, 1H), 1.19 - 1.15 (m, 6H) ppm。
步骤7:3-(羟甲基)-5-异丙基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]苯甲酰胺 (化合物 15)的制备
Figure 582380DEST_PATH_IMAGE229
向中间体G (40 mg, 154.86 μmol)和2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (根据实施例16中的方法制备) (53.71 mg, 154.86 μmol, HCl)在DMF (2 mL)中的溶液添加DIEA (100.08 mg, 774.32 μmol, 134.87 μL)和HATU (88.33 mg, 232.30μmol)。在25℃下搅拌该混合物8小时。向该反应混合物添加水 (5 mL) 并用EA (5 mL x 3)萃取，经无水 Na2SO4干燥合并的有机相，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相柱(FA条件)纯化该粗产物 并冻干以提供作为白色固体的化合物 15 (29.46 mg, 49.37 μmol, 31.88%收率, 100%纯度, FA)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 551.1. 1H NMR (400 MHz,DMSO-d6) δ = 12.53 (s, 1H), 9.30-9.27 (m, 1H), 8.71 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 8.33(s, 1H), 8.24 (d, J = 12.8 Hz, 2H), 8.10-7.99 (m, 2H), 7.86-7.84 (m, 3H),7.83-7.82 (m, 1H), 7.63-7.61 (m, 1H),5.63-5.58 (br s, 1H), 4.69 (s, 2H), 4.24(m, 2H), 3.50-3.45 (m, 1H), 1.19 (d, J=6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例21. 3-(异丙基磺酰基)-4,5-二甲基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 16)的制备
Figure 37632DEST_PATH_IMAGE230
步骤1:3-溴-4,5-二甲基苯甲酸 (中间体B)的制备
Figure 671876DEST_PATH_IMAGE231
向3,4-二甲基苯甲酸 (2 g, 13.32 mmol)在TFA (50 mL)中的溶液添加NBS(2.37 g, 13.32 mmol)。在50℃下搅拌该混合物16小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。用EA (15 mL)稀释该残余物，然后过滤并在减压下浓缩以提供作为白色固体的中间体B (0.773 g, 2.90 mmol, 21.80%收率)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [81BrM+H]+= 231.0. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 11.20 - 10.95(m, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 2.57 (s, 3H), 2.37 (s, 10H) ppm。
步骤2:3-(异丙基硫基)-4,5-二甲基苯甲酸 (中间体C)的制备
Figure 300303DEST_PATH_IMAGE232
在-78℃下向中间体B (300 mg, 1.31 mmol)在THF (4 mL)中的溶液添加n-BμLi(2.5 M, 1.05 mL)和在N2气氛下搅拌该混合物0.5小时。然后向该混合物添加2-(异丙基二硫烷基)丙烷 (236.21 mg, 1.57 mmol, 250.49 μL)，将该反应混合物温热至0℃并在0℃下搅拌1 h。用水 (5mL)淬灭该混合物并用MTBE (5mL x 2)萃取。丢弃有机层并然后用2NHCl调节水相至pH=5并用EA (10 mL x 3)萃取，用盐水 (10 mL x 2)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩以提供作为浅黄色固体的中间体C (230 mg, 842.19 μmol, 64.31%收率, 82.139%纯度)，其不经纯化即用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=225.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.91 - 12.70 (m, 2H), 7.78 (d, J =1.2 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.69 - 7.65 (m, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.57 (d, J =4.4 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.44 - 3.37 (m, 1H), 2.36 - 2.33 (m,3H), 2.32 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.28 (s, 2H), 1.26 (d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm。
步骤3:3-(异丙基磺酰基)-4,5-二甲基苯甲酸 (中间体D)的制备
Figure 601971DEST_PATH_IMAGE233
向中间体C (230 mg, 1.03 mmol)在MeOH (2 mL)和H2O (2 mL)中的溶液添加Oxone (1.26 g, 2.05 mmol)。在20℃下搅拌该混合物16小时。添加水(10 mL)至该混合物中并然后用EA (15 mL x 3)萃取。用盐水 (10 mL x 2)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩以提供作为白色固体的中间体D (230 mg, 897.32 μmol, 87.52%收率)，其不经纯化即用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 257.1。
步骤4:3-(异丙基磺酰基)-4,5-二甲基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 16)的制备
Figure 228125DEST_PATH_IMAGE234
向中间体D (100 mg, 390.14 μmol)、EDCI (112.19 mg, 585.21 μmol)、HOBt(79.08 mg, 585.21 μmol)和DIEA (252.12 mg, 1.95 mmol, 339.78 μL)在DMF (1 mL)中的溶液添加2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (根据实施例16中的方法制备) (142.08 mg, 409.65 μmol, HCl)。在20℃下搅拌该混合物2小时。将该混合物添加至水 (10 mL)中并过滤。用MeOH (5 mL)洗涤该固体, 并然后在真空下干燥以提供作为白色固体的化合物 16 (104.26 mg, 180.05 μmol, 46.15%收率) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 549.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.16 (s, 1H), 8.72 - 8.65 (m, 2H),8.30 (m, 2H), 8.08 (s, 1H), 8.02 (m, 1H), 7.85 (s, 1H),7.77 (m , 3H), 7.61(m, 1H), 4.23 (m, 2H), 3.59 - 3.41 (m, 1H), 2.61 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 1.19(m, 6H) ppm。
实施例22. N-(2-((4-(3-((((1R,4R)-4-羟基环己基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 17)的制备
Figure 349665DEST_PATH_IMAGE235
步骤1:(1R,4R)-4-((3-溴苄基)氧基)环己醇 (中间体C)的制备
Figure 781783DEST_PATH_IMAGE236
在0℃下向环己烷-1,4-二醇 (2.0 g, 17.22 mmol)和NaH (826.38 mg, 20.66mmol, 60%纯度)在DMF (40 mL)中的溶液添加1-溴-3-(溴甲基)苯 (5.16 g, 20.66mmol)，在30℃下搅拌该混合物16小时。将该反应混合物倾倒入NH4Cl 溶液 (20 mL)中，用EA (20 mL x 3)萃取该溶液，用盐水 (50 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, PE:EA=10:1-3:1), 在真空下浓缩该溶液以提供作为黄色油的中间体C (1.0 g, 3.51 mmol, 20.37%收率) 。1H NMR(400 MHz, 甲醇-d4) δ = 7.50 (s, 1H), 7.41 (br d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.30 - 7.23(m, 2H), 4.51 (s, 2H), 3.64 - 3.54 (m, 1H), 3.43 - 3.35 (m, 1H), 2.05 (br d,J = 11.7 Hz, 2H), 1.96 - 1.89 (m, 2H), 1.38 - 1.28 (m, 4H) ppm。
步骤2:(1R,4R)-4-((3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苄基)氧基)环己醇 (中间体E)的制备
Figure 937958DEST_PATH_IMAGE237
在25℃下在N2下向中间体C (1 g, 3.51 mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷 (1.16 g, 4.56 mmol)在二氧杂环己烷 (10 mL)中的溶液添加二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (228.54mg, 350.66 μmol)和KOAc (1.03 g, 10.52 mmol)。在80℃下搅拌该混合物 3小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (PE/EA=1:1, Rf=0.5,SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=1/0至1:1) 以提供作为棕色油的中间体E (1.16 g, 粗物质) 。LCMS (ESI) m/z [M-115]+= 217.1。
步骤3:(2-((4-(3-((((1R,4R)-4-羟基环己基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体G)的制备
Figure 735012DEST_PATH_IMAGE238
在N2下向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (根据实施例4中的方法制备) (435.13 mg, 1.29 mmol)、中间体E (860 mg, 2.59 mmol)在二氧杂环己烷 (15 mL)和H2O (1.5 mL)中的溶液添加 K3PO4 (824.19 mg, 3.88 mmol)和二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (84.35 mg, 129.42 μmol)。在100℃下搅拌该混合物4小时。用水 (20 mL)稀释该反应混合物并用EA (30 mL x 3)萃取，用盐水 (40 mL x 2)洗涤合并的有机层和经无水 Na2SO4干燥。过滤该混合物并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (PE/EA=1:2, Rf=0.35, SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=5/1至3/1) 并然后在真空下浓缩以提供作为棕色固体的中间体G (650 mg, 1.27 mmol, 98.04%收率,90.106%纯度)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 462.1。
步骤4:2-氨基-N-(4-(3-((((1R,4R)-4-羟基环己基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺 (中间体H)的制备
Figure 343848DEST_PATH_IMAGE239
在20℃下搅拌中间体G (650.00 mg, 1.41 mmol)在HCl/二氧杂环己烷 (7 mL)中的溶液1小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。在20℃下用MTBE (10 mL)研磨该残余物5分钟。然后过滤该混合物，用MTBE (5 mL x 3)洗涤该固体，在真空下干燥以提供作为棕色固体的中间体H (500 mg, 粗物质, HCl)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 361.9。
步骤5:N-(2-((4-(3-((((1r,4r)-4-羟基环己基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 17)的制备
Figure 314078DEST_PATH_IMAGE240
向3-异丙基磺酰基苯甲酸 (75.78 mg, 331.99 μmol)、中间体H (100.00 mg,276.66 μmol, 1 eq)、DIEA (178.78 mg, 1.38 mmol, 240.94 μL)在DCM (1 mL)中溶液的添加 EDCI (63.64 mg, 331.99 μmol)、HOBt (44.86 mg, 331.99 μmol)。在20℃下搅拌该混合物16小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过反相HPLC (0.1% FA条件)纯化该残余物并然后冻干以提供作为黄色固体的化合物 17 (16.94 mg, 28.04 μmol,10.13%收率, 94.621%纯度)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 572.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.46 - 12.44 (m, 1H), 9.29 - 9.26 (m, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.27 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.85 - 7.78 (m, 3H), 7.62 (s, 1H),7.40 - 7.37 (m, 1H), 7.27 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.52 (s, 2H), 4.49 (d, J = 4.4Hz, 1H), 4.24 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.53 - 3.42 (m, 3H), 1.98 - 1.94 (m, 2H),1.82 - 1.78 (m, 2H), 1.28 - 1.16 (m, 8H) ppm。
实施例23. N-(2-((4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 18)的制备
Figure 324760DEST_PATH_IMAGE241
步骤1:N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure 357962DEST_PATH_IMAGE242
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸 (41.20 g, 235.17 mmol)、HATU (89.42 g,235.17 mmol)和DIEA (75.99 g, 587.93 mmol, 102.41 mL)在DCM (500 mL)中的溶液添加4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺 (50 g, 195.98 mmol)，在30℃下搅拌该混合物4小时。用饱和柠檬酸 (500 mL x 4)洗涤该反应混合物并然后用盐水 (500 mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。用MeOH (200 mL)研磨该残余物并过滤以提供固体，用PE/EA (200 mL, 10:1)重新研磨该固体并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体C(70 g, 166.38 mmol, 84.90%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 412.2. 1H NMR (400 MHz,DMSO-d6) δ = 12.29 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.90 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.77 (s,1H), 7.50 (s, 1H), 7.41-7.37 (m, 1H), 7.16-7.15 (m, 1H), 3.86 (d, J = 6.4 Hz,2H)1.39 (s, 9H) ppm。
步骤2:2-氨基-N-[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]乙酰胺 (中间体D)的制备
Figure 454094DEST_PATH_IMAGE243
在30℃下搅拌中间体C (14 g, 33.96 mmol)在4 M HCl/二氧杂环己烷 (50 mL)中的溶液2小时。在减压下浓缩该残余物以提供残余物。用MTBE (100 mL)研磨该残余物，过滤并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体D (12.1 g, 粗物质, HCl)。LCMS (ESI)m/z [M+H]+= 312.2
步骤3:N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-异丙基磺酰基-苯甲酰胺 (中间体F)的制备
Figure 165698DEST_PATH_IMAGE244
向3-异丙基磺酰基苯甲酸 (根据实施例17中的方法制备) (1.96 g, 8.60mmol)、EDCI (2.75 g, 14.34 mmol)、HOBt (1.94 g, 14.34 mmol)和DIEA (4.63 g,35.85 mmol, 6.24 mL)在DCM (30 mL)中的溶液添加中间体D (2.5 g, 7.17 mmol, HCl)，在30℃下搅拌该混合物4小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。用EtOAc (200mL)稀释该残余物并用饱和柠檬酸 (200 mL x 3) 和盐水 (200 mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。将该残余物纯化并用MeOH (20 mL)研磨，过滤并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体F (2.8 g, 5.31 mmol, 74.00%收率, 99%纯度)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 521.9. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.49 (s, 1H),9.31-9.28 (m, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.21-8.30 (m, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.04-8.03(m, 1H), 7.90-7.89 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.83-7.79 (m, 2H), 7.50-7.49 (d, J =7.6 Hz, 1H), 7.40-7.31 (m, 1H), 4.23 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.53-3.46 (m, 1H),2.52-2.51 (m, 6H), 1.18 (d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm。
步骤4:N-(2-((4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 18)的制备
Figure 30886DEST_PATH_IMAGE245
将中间体F (75 mg, 143.56 μmol)、(2,6-二甲基-4-吡啶基)硼酸 (43.35 mg,287.12 μmol)、二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (9.36 mg, 14.36 μmol)和K3PO4 (91.42 mg, 430.68 μmol)吸收到二氧杂环己烷 (1 mL)和H2O (0.2 mL)中，用N2吹扫该混合物三次。然后在80℃下搅拌所得混合物2小时。将该残余物在MeOH/H2O (2/1, 5mL)中制浆并搅拌5分钟。通过过滤收集沉淀物并用MeOH洗涤 (3mL)，然后在真空下干燥以提供作为棕色固体的化合物 18 (59.64 mg, 106.74 μmol, 74.35%收率, 98.2%纯度)。LCMS (ESI)m/z [M+H]+= 549.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.51 (s, 1H), 9.31-9.28 (m,1H), 8.38 (s, 1H), 8.28-8.26 (m, 2H), 8.05 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.98 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.84-7.80 (m, 2H), 7.71 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.58-7.54 (m, 1H),7.41 (s, 2H), 4.25 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.53-3.46 (m, 1H), 2.52-2.51 (m, 6H),1.19 (d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例24. 3-(异丙基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 19)的制备
Figure 232060DEST_PATH_IMAGE246
用N2将N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-异丙基磺酰基-苯甲酰胺 (根据实施例23中的方法制备) (75 mg, 143.56 μmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-(三氟甲基)吡啶 (39.20 mg, 143.56 μmol)、二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (4.68 mg, 7.18 μmol), K3PO4 (121.89 mg, 574.23 μmol)在二氧杂环己烷 (4 mL)和H2O (0.08 mL)中的混合物脱气三次，然后在80℃下在N2下搅拌该反应混合物2小时。用柱层析法过滤该反应混合物 (SiO2, 100% 乙酸乙酯)，在真空下浓缩有机相以提供残余物。通过制备型HPLC纯化残余物 (TFA条件: 柱: Phenomenex lunaC18 150 x 25 10u；流动相: [水(0.1%TFA)-ACN]；B%: 44%-74%,10min) 并然后冻干以提供作为灰白色固体的化合物 19 (33.86 mg, 56.37 μmol, 39.27%收率, 98%纯度, TFA)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 589.0. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.53 (s, 1H),9.32 -9.30 (m, 1H), 8.87 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.39 (d, J = 1.6 Hz, 2H), 8.31- 8.22 (m, 2H), 8.14 - 8.01 (m, 3H), 7.93 - 7.78 (m, 3H), 7.65 -7.63(m, 1H),4.25 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.49 (s, 1H), 1.19 (d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例25. 3-(异丙基磺酰基)-5-甲基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 20)的制备
Figure 815488DEST_PATH_IMAGE247
步骤1:3-异丙基硫烷基-5-甲基-苯甲酸 (中间体B)的制备
Figure 330783DEST_PATH_IMAGE248
在-78℃下在N2下向3-溴-5-甲基-苯甲酸 (1 g, 4.65 mmol)在THF (25 mL)中的混合物逐滴添加n-BμLi (2.5 M, 4.09 mL)。在-78℃下搅拌该混合物30分钟，然后添加2-(异丙基二硫烷基)丙烷 (698.95 mg, 4.65 mmol, 741.20 μL)。在25℃下搅拌该混合物1小时。用NH4Cl水溶液(100mL)淬灭该混合物并用乙酸乙酯 (50 mL x 2)萃取。用盐水 (50mL x 1)洗涤合并的有机相，采用无水 Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩以提供作为浅黄色油的中间体B (800 mg, 3.80 mmol, 81.81%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 211.1。
步骤2:3-异丙基磺酰基-5-甲基-苯甲酸 (中间体C)的制备
Figure 50478DEST_PATH_IMAGE249
在10℃下向中间体B (800 mg, 3.80 mmol)在DCM (10 mL)中的混合物一次性添加m-CPBA (1.93 g, 9.51 mmol, 85%纯度)。在25℃下搅拌该混合物1小时。将该反应溶液倾倒入H2O (20 mL)中并用DCM (20 mL x 2)萃取。用盐水 (10mL x 1)洗涤合并的有机相，用无水 Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过制备型TLC纯化该残余物 (DCM/MeOH=20/1)以提供作为白色固体的中间体C (100 mg, 412.73 μmol, 10.85%收率)。LCMS (ESI) m/z[M+H]+= 243.1. 1H NMR (400 MHz, MEOD) δ = 8.16 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.81 (s,1H), 3.27-3.20 (m, 1H), 2.42 (s, 3H), 1.16 (d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm。
步骤3:3-(异丙基磺酰基)-5-甲基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 20)的制备
Figure 422553DEST_PATH_IMAGE250
向中间体C (40 mg, 165.09 μmol)、HOBt (33.46 mg, 247.64 μmol)、EDCI(47.47 mg, 247.64 μmol)和2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (根据实施例3中的方法制备) (57.26 mg, 165.09 μmol, HCl)在DMF (2 mL)中的溶液添加DIEA(106.68 mg, 825.45 μmol, 143.78 μL)。然后在25℃下搅拌该混合物12小时。向该反应混合物添加水 (5 mL)和形成沉淀物。过滤该粗产物并通过反相柱(FA条件)纯化该固体并冻干以提供作为白色固体的化合物 20 (16.7 mg, 28.76 μmol, 17.42%收率, 100%纯度,FA)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 535.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.65 - 8.64(m, 2H), 8.27 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.00 (d, J = 7.6 Hz, 1H),7.85 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.76 - 7.60(m, 4H), 4.20 (s, 2H), 3.49 - 3.41 (m,1H), 2.49 (s, 3H), 1.17(d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例26. N-(2-((4-(3',5'-二氰基-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 21)的制备
Figure 493277DEST_PATH_IMAGE251
步骤1:3-异丙基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]苯甲酰胺 (中间体C)的制备
Figure 546684DEST_PATH_IMAGE252
向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-异丙基磺酰基-苯甲酰胺 (根据实施例23中的方法制备) (1.4 g, 2.68 mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷 (2.04 g, 8.04mmol)和Pd(dppf)Cl2 (196.08 mg, 267.98 μmol)在二氧杂环己烷 (14 mL)中的溶液添加KOAc (788.99 mg, 8.04 mmol)，在80℃下搅拌该混合物1小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=1/1至4/1) 并在减压下浓缩以提供作为粉红色固体的中间体C (1.2 g, 2.04 mmol, 76.27%收率, 97%纯度)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ =570.1. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.56 (s, 1H),9.33 - 9.31 (m, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.31-8.27 (m, 2H), 8.11-8.02 (m, 2H),7.84-7.82 (m, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.63-7.61 (m, 1H), 7.45-7.42 (m, 1H), 4.24(d, J = 5.2 Hz, 2H), 3.54 - 3.47 (m, 1H), 1.32 (s, 12H), 1.19 (d, J = 6.8 Hz,6H) ppm。
步骤2:N-(2-((4-(3',5'-二氰基-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 21)的制备
Figure 386464DEST_PATH_IMAGE253
向中间体C (50 mg, 87.80 μmol)和5-溴苯-1,3-二甲腈 (27.26 mg, 131.69 μmol)在二氧杂环己烷 (1 mL)和H2O (0.1 mL)中的溶液添加 K3PO4 (55.91 mg, 263.39 μmol)和二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (5.72 mg, 8.78 μmol)。在75℃下在N2下搅拌该混合物12小时。在水(10 mL)和乙酸乙酯 (5 mL x 3)之间分配该反应混合物。在减压下浓缩有机相。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=10/1至1/2) 以提供粗产物，其通过制备型HPLC纯化 (柱: Phenomenex Synergi C18 150 x 25 x 10um；流动相: [水(0.225%FA)- ACN]；B%: 50%-80%,9min) 并冻干以提供作为白色固体的化合物 21(10.02 mg, 17.41 μmol, 19.83%收率, 98.998%纯度) 。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ =570.3. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.66 - 12.35 (m, 1H), 9.37 - 9.18 (m,1H), 8.63 (d, J = 1.2 Hz, 2H), 8.48 (s, 1H), 8.37 (d, J = 19.2 Hz, 2H), 8.28(d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.04 (m, 2H), 7.89 - 7.79 (m, 3H), 7.62 - 7.60 (m, 1H),4.25 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 3.52 - 3.50(m, 1H), 1.20 (d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例27. N-(2-((4-(3-(2-氨基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 22)的制备
Figure 867124DEST_PATH_IMAGE254
向4-溴吡啶-2-胺 (25 mg, 144.50 μmol), 3-异丙基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]苯甲酰胺 (根据实施例26中的方法制备) (82.29 mg, 144.50 μmol)、K3PO4 (122.69 mg,578.00 μmol)在二氧杂环己烷 (4 mL)和H2O (0.8 mL)中的溶液添加二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (4.71 mg, 7.22 μmol)，将该混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在80℃下在N2 气氛下搅拌该混合物2小时。用柱层析法过滤该反应混合物 (SiO2, 乙酸乙酯),在真空下浓缩有机相以提供残余物。通过制备型HPLC预纯化该残余物 (TFA条件, 柱:Phenomenex luna C18 150 x 25 10u；流动相: [水(0.1%TFA)-ACN]；B%: 15%-45%,10min)并冻干以提供作为灰白色固体的化合物 22 (49.42 mg, 73.79 μmol, 51.06%收率, 97%纯度, TFA)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 536.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.54(s, 1H), 9.33-9.30(m, 1H), 8.38-8.26(m, 3H), 8.11-8.04(m, 5H), 7.85-7.80(m,2H), 7.73-7.63(m, 2H), 7.28-7.25(m, 2H), 4.24(d, J=5.6 Hz, 2H), 3.52-3.48(m,1H), 1.18(d, J=6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例28. N-(2-((4-(3'-氰基-5'-(羟甲基)-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 23)的制备
Figure 487461DEST_PATH_IMAGE255
步骤1:5-氰基-3'-(2-(2-(3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)-[1,1'-联苯]-3-甲酸 (中间体C)的制备
Figure 78979DEST_PATH_IMAGE256
在25℃下在N2下向3-异丙基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]苯甲酰胺 (根据实施例26中的方法制备) (125.98 mg, 221.21 μmol), 3-溴-5-氰基-苯甲酸 (50 mg, 221.21 μmol)和K3PO4 (140.87 mg, 663.64 μmol)在二氧杂环己烷 (0.8 mL)和H2O (0.2 mL)中的溶液添加二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (14.42 mg, 22.12 μmol)。在80℃下在N2下搅拌该反应混合物16小时。用水 (10 mL)稀释该反应混合物并用EA (10 mL x 3)洗涤。向水层添加HCl (1 M)以调节pH至4，并然后用EA (10 mL x 2)萃取，浓缩合并的有机层以提供作为黄色固体的中间体C (100 mg, 162.42 μmol, 73.42%收率, 95.61%纯度)。LCMS (ESI)m/z [M+H]+=589.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 14.60 - 12.96 (m, 1H), 12.53(s, 1H), 9.29 - 9.29 (m, 1H), 8.50 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 8.38 (s, 1H), 8.34 -8.24 (m, 3H), 8.03 - 7.99 (m, 2H), 7.89 - 7.75 (m, 3H), 7.63 - 7.56 (m, 1H),4.25 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 3.52 - 3.48 (m, 1H), 1.19 (d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm。
步骤2:N-(2-((4-(3'-氰基-5'-(羟甲基)-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 23)的制备
Figure 773266DEST_PATH_IMAGE257
在0℃下向中间体C (80 mg, 135.90 μmol)和Et3N (20.63 mg, 203.86 μmol,28.37 μL)在THF (1 mL)中的溶液逐滴添加氯甲酸异丁酯 (22.27 mg, 163.08 μmol,21.42 μL)。在25℃下搅拌该反应混合物1小时。然后在0℃下依次添加MeOH (0.2 mL)和NaBH4 (46.27 mg, 1.22 mmol)。将该反应混合物温热至25℃和在25℃下搅拌1小时。用水(10 mL)淬灭该反应混合物并用EA (10 mL x 2)萃取，在真空下浓缩合并的有机层。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (ISCO®；20 g SepaFlash® 硅胶快速柱,以35 mL/min的0~100% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液) 并浓缩以提供作为无色油的化合物 23 (49.36mg, 85.89 μmol, 63.20%收率, 100%纯度)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=575.4. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.51 (br s, 1H), 9.29 - 9.27 (m, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.30 -8.24 (m, 2H), 8.10 (s, 1H), 8.08 - 7.94 (m, 3H), 7.86 - 7.79 (m, 2H), 7.76(s, 1H), 7.71 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.60 - 7.54 (m, 1H), 5.50 - 5.48 (m, 1H),4.65 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 4.25 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.50 - 3.45 (m, 1H), 1.19(d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例29. N-(2-((4-(3'-氰基-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 24)的制备
Figure 690406DEST_PATH_IMAGE258
向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-异丙基磺酰基-苯甲酰胺 (根据实施例23中的方法制备) (50 mg, 95.71 μmol)和(3-氰基苯基)硼酸 (21.09mg, 143.56 μmol)在二氧杂环己烷 (1 mL)和H2O (0.1 mL)中的溶液添加K3PO4 (60.95mg, 287.12 μmol)和二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (6.24 mg, 9.57 μmol)。在N2下在80℃下搅拌该混合物12小时。在水(10 mL)和乙酸乙酯 (30 mL)之间分配该反应混合物。在减压下浓缩有机相。通过反相HPLC (FA条件)纯化该残余物并冻干以提供粗产物，其通过制备型HPLC预纯化 (柱: Phenomenex luna C18 150 x 25 x 10u；流动相: [水(0.1%TFA)- ACN]；B%: 44%-74%,10 min)并冻干以提供作为白色固体的化合物 24 (11.80 mg,20.73 μmol, 21.66%收率, 95.70%纯度) 。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ =545.3. 1H NMR(400MHz, DMSO+D2O) δ = 8.36 (s, 1H), 8.28 - 8.24 (m, 2H), 8.20 (s, 1H), 8.07-8.05 (m, 2H), 7.97 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.87 - 7.80 (m, 3H), 7.73 - 7.68 (m,2H), 7.60 - 7.55 (m, 1H), 4.24 (s, 2H), 3.49 - 3.44 (m, 1H), 1.18 (d, J = 6.8Hz, 6H) ppm。
实施例30. 3-(异丙基磺酰基)-N-(2-((4-(3-(2-(N-甲基乙酰胺基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 25)的制备
Figure 532461DEST_PATH_IMAGE259
步骤1:N-(4-溴吡啶-2-基)乙酰胺 (中间体B)的制备
Figure 927670DEST_PATH_IMAGE260
向4-溴吡啶-2-胺 (1 g, 5.78 mmol)在DCM (7.5 mL)和吡啶 (7.5 mL)中的溶液添加Ac2O (885.11 mg, 8.67 mmol, 812.03 μL)，在30℃下搅拌该混合物24小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。用水 (20 mL)稀释该残余物并用EtOAc (20 mL x 3)萃取。用盐水 (40 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为浅黄色固体的中间体B (1 g, 粗物质)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。LCMS(ESI) m/z [81BrM+H]+= 217.1。
步骤2:N-(4-溴吡啶-2-基)-N-甲基乙酰胺 (中间体C)的制备
Figure 742042DEST_PATH_IMAGE261
在N2下在0℃下向中间体B (0.5 g, 2.33 mmol)在DMF (10 mL)中的溶液添加NaH(139.49 mg, 3.49 mmol, 60%纯度)并在0℃下搅拌0.5 h，然后在0℃下将MeI (495.03mg, 3.49 mmol, 217.12 μL)添加至该混合物，将该混合物温热至25℃和在25℃下搅拌1小时。通过另外的水 (20 mL)淬灭该反应混合物，并用EtOAc (20 mL x 3)萃取。用盐水 (50mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=1/1) 并在减压下浓缩以提供作为浅黄色油的中间体C (300 mg, 1.30 mmol, 55.76%收率, 99%纯度) 。LCMS (ESI) m/z [79BrM+H]+= 229.1。
步骤3:3-(异丙基磺酰基)-N-(2-((4-(3-(2-(N-甲基乙酰胺基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 25)的制备
Figure 564505DEST_PATH_IMAGE262
在N2下向中间体C (40 mg, 174.62 μmol)、3-异丙基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]苯甲酰胺 (根据实施例26中的方法制备) (99.44 mg, 174.62 μmol)和二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (11.38 mg, 17.46 μmol)在二氧杂环己烷 (1.2 mL)和水(0.3 mL)中的溶液添加K3PO4 (111.20 mg, 523.85 μmol)，在80℃下搅拌该混合物1小时。用水 (5.0 mL)稀释该反应混合物并用EtOAc (10 mL x 3)萃取。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相(FA)纯化该残余物并冻干以提供作为灰白色固体的化合物 25 (38.77 mg, 60.30 μmol, 34.53%收率, 99.18%纯度, FA)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 592.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.52 (s, 1H),9.31 - 9.28 (m, 1H), 8.57 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.32 - 8.27 (m,2H), 8.07 - 8.02 (m, 2H), 7.89 - 7.78 (m, 4H), 7.69 (br d, J = 4.8 Hz, 1H),7.63 - 7.59 (m, 1H), 4.31 - 4.22 (m, 2H), 3.54 - 3.49 (m, 1H), 3.34 (br s,3H), 2.08 (s, 3H), 1.19 (d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例31. N-(2-((4-(3-(2-(羟甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 26)的制备
Figure 831538DEST_PATH_IMAGE263
向3-异丙基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]苯甲酰胺 (根据实施例26中的方法制备) (50mg, 87.80 μmol), (4-溴-2-吡啶基)甲醇 (24.76 mg, 131.70 μmol)在二氧杂环己烷 (2mL)和水(0.5 mL)中的混合物添加 二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (11.44 mg,17.56 μmol)和K3PO4 (55.91 mg, 263.40 μmol)。在100℃下搅拌该混合物2小时。将该混合物倾倒入水 (20 mL)中，然后用EA (5 mL x 3)萃取。用水 (10 mL x 3) 和盐水 (10 mLx 2)洗涤合并的有机层，然后经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物 (柱: Luna C18 150 x 25 5u；流动相: [水(0.075%TFA)-ACN]；B%: 15%- 45%,9min)并冻干以提供作为白色固体的化合物 26 (20.18 mg, 29.06 μmol, 33.09%收率, 95.7%纯度, TFA)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 551.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.55(s, 1H), 9.32-9.29 (m, 1H), 8.74 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.40 (d, J = 5.6 Hz,2H), 8.28 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.14 - 8.04 (m, 3H), 8.00 (d, J = 3.6 Hz, 1H),7.90 - 7.79 (m, 3H), 7.69-7.65 (m, 1H), 4.82 (s, 2H), 4.26 (d, J = 5.6 Hz,2H), 1.19 (d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例32. N-(2-((4-(3'-(羟甲基)-5'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 27)的制备
Figure 92755DEST_PATH_IMAGE264
在25℃下在N2下向3-异丙基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]苯甲酰胺 (根据实施例26中的方法制备) (122.82 mg, 215.66 μmol)、[3-溴-5-(三氟甲基)苯基]甲醇 (50.00 mg,196.05 μmol)和K3PO4 (124.85 mg, 588.16 μmol)在二氧杂环己烷 (0.8 mL)和H2O (0.2mL)中的溶液添加二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (12.78 mg, 19.61 μmol)。在80℃下搅拌该反应混合物16小时。用水 (10 mL)稀释该反应混合物并用EA (10 mL x 3)萃取，浓缩合并的有机层以提供黑褐色油。通过快速硅胶层析法纯化该油 (ISCO®；12 gSepaFlash® 硅胶快速柱, 以30 mL/min的0~100% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液), 在真空下浓缩以提供作为白色固体的化合物 27 (34.05 mg, 51.36 μmol, 26.20%收率,93.17%纯度)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=618.0. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.51(s, 1H), 9.29 - 9.28 (m, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.30 - 8.23 (m, 2H), 8.05 (d, J =7.8 Hz, 1H), 8.00 - 7.94 (m, 2H), 7.89 (s, 1H), 7.86 - 7.79 (m, 2H), 7.73 -7.67 (m, 2H), 7.61 - 7.54 (m, 1H), 5.49 - 5.48 (m, 1H), 4.69 (d, J = 5.6 Hz,2H), 4.25 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.50 - 3.46 (m, 1H), 1.17 (d, J = 6.8 Hz, 6H)ppm。
实施例33. N-(2-((4-(3'-氯-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 28)的制备
Figure 761634DEST_PATH_IMAGE265
在N2下向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-异丙基磺酰基-苯甲酰胺 (根据实施例23中的方法制备) (50 mg, 95.71 μmol)和(3-氯苯基)硼酸(29.93 mg, 191.41 μmol)在二氧杂环己烷 (1 mL)和H2O (0.1 mL)中的溶液添加K3PO4(60.95 mg, 287.12 μmol)和二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (6.24 mg, 9.57 μmol)。然后将该反应混合物加热至80℃并在80℃下搅拌12小时。向该反应混合物添加水(10 mL x 1)和EtOAc (15 mL) 并搅拌10分钟，在真空下浓缩有机层。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (ISCO®；10 g SepaFlash® 硅胶快速柱, 以40 mL/min的0~55% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液) 以提供粗产物，其通过反相快速预纯化 (0.1% FA条件) 并冻干以提供作为白色固体的化合物 28 (8.29 mg, 14.95 μmol, 15.62%收率, 99.9%纯度)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 554.3. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 10.88 (br s, 1H),8.41 (s, 1H), 8.29 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.07 - 8.02 (m, 2H), 7.85 - 7.79 (m,1H), 7.82 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.75 (m, 1H), 7.78 - 7.72 (m, 1H), 7.66 - 7.61(m, 1H), 7.67 - 7.61 (m, 1H), 7.54 (m, 2H), 7.59 - 7.49 (m, 1H), 7.44 - 7.36(m, 2H), 7.34 (s, 1H), 4.52 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.30 (m, 1H), 1.35 (d, J =7.2 Hz, 6H) ppm。
实施例34. 3-(异丙基磺酰基)-N-(2-((4-(3-(2-甲氧基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 29)的制备
Figure 754997DEST_PATH_IMAGE266
向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-异丙基磺酰基-苯甲酰胺 (根据实施例23中的方法制备) (50 mg, 95.71 μmol)、(2-甲氧基-4-吡啶基)硼酸(29.28 mg, 191.41 μmol)、K3PO4 (60.95 mg, 287.12 μmol)在二氧杂环己烷 (1 mL)和H2O (0.2 mL)中的溶液添加二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (6.24 mg, 9.57 μmol)。然后在70℃下在N2下搅拌该混合物0.5小时。浓缩该反应混合物以提供粗产物。通过反相柱(FA)纯化该粗产物并冻干以提供作为白色固体的化合物 29 (24.15 mg, 40.31 μmol, 42.12%收率, 99.6%纯度, FA)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 551.2. 1H NMR (400 MHz,DMSO-d6) δ = 12.53 (br s, 1H), 9.32 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.29 (d, J = 6.4Hz, 3H), 8.11 - 7.97 (m, 2H), 7.90 - 7.80 (m, 2H), 7.74 (d, J = 7.6 Hz, 1H),7.58 (m, 1H), 7.37 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 4.25 (d, J = 5.2 Hz,2H), 3.92 (s, 3H), 3.57 - 3.47 (m, 1H), 1.19 (d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm。
实施例35. N-(2-((4-(3',5'-二氯-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 30)的制备
Figure 509327DEST_PATH_IMAGE267
向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-异丙基磺酰基-苯甲酰胺 (根据实施例23中的方法制备) (50 mg, 95.71 μmol), (3,5-二氯苯基)硼酸(36.53 mg, 191.41 μmol), K3PO4 (60.95 mg, 287.12 μmol)在二氧杂环己烷 (1 mL)和H2O (0.2 mL)中的溶液添加二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (6.24 mg, 9.57 μmol)。然后在70℃下在N2下搅拌该混合物0.5小时。浓缩该反应混合物以提供粗产物。通过反相柱(FA)纯化该粗产物并冻干以提供作为白色固体的化合物 30 (10.27 mg, 17.45 μmol, 18.23%收率, 100%纯度)。LCMS (ESI) m/z [35ClM+H]+= 588.1. 1H NMR (400 MHz,DMSO-d6) δ = 12.52 (br s, 1H), 9.35 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.33 - 8.25 (m,2H), 8.08 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.01 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.88 -7.81 (m 3H), 7.74 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.58 (m, 1H), 4.27 (d, J= 5.6 Hz, 2H), 3.53 (m, 1H), 1.21 (d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例36. N-(2-((4-(3'-(氨基甲基)-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 31)的制备
Figure 308656DEST_PATH_IMAGE268
步骤1:N-[(3-溴苯基)甲基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体B)的制备
Figure 832041DEST_PATH_IMAGE269
向(3-溴苯基)甲胺 (50 g, 268.75 mmol)在THF (500 mL)中的溶液添加NaHCO3(45.15 g, 537.49 mmol)和Boc2O (64.52 g, 295.62 mmol)，在30℃下搅拌该混合物16小时。过滤该反应混合物并浓缩滤液以提供作为无色油的中间体B (76 g, 粗物质)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z= [81BrM+H-56]+ = 232.1。
步骤2:N-[[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]甲基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体D)的制备
Figure 261885DEST_PATH_IMAGE270
在N2下向中间体B (76 g, 265.58 mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷 (80.93 g, 318.70 mmol)在二氧杂环己烷 (800 mL)中的溶液添加KOAc (78.19 g, 796.75 mmol)和Pd(dppf)Cl2(19.43 g, 26.56 mmol)，在80℃下搅拌该混合物2小时。将该反应混合物倾倒入水 (1000mL)中，用EA (1000 mL x 3)萃取该溶液，用盐水 (2000 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥并过滤。在真空下浓缩滤液以提供作为黑色油的中间体D (88 g, 粗物质)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z= [M+H-56]+ = 278.3。
步骤3:N-[[3-[3-(2-氨基噻唑-4-基)苯基]苯基]甲基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体F)的制备
Figure 503511DEST_PATH_IMAGE271
向中间体D (78.37 g, 235.17 mmol)和4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺 (40 g, 156.78mmol)在二氧杂环己烷 (900 mL)和H2O (90 mL)中的溶液添加K2CO3 (65.00 g, 470.34mmol)和Pd(dppf)Cl2 (5.74 g, 7.84 mmol)，在80℃下搅拌该混合物2小时。浓缩该反应混合物以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=5:1-3:1)。在真空下浓缩该溶液以提供作为棕色固体的中间体F (26 g, 67.74 mmol, 43.21%收率)。1HNMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 8.06 (s, 1H), 7.79 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.55-7.45(m, 6H), 7.25 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.11-7.10 (m, 3H), 4.22 (br d, J = 5.6 Hz,2H), 1.40 (s, 9H) ppm. LCMS (ESI) m/z= [M+H-56]+ = 382.3。
步骤4:N-[2-[[4-[3-[3-[(叔丁氧基羰基氨基)甲基]苯基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸9H-芴-9-基甲酯 (中间体H)的制备
Figure 840951DEST_PATH_IMAGE272
向中间体F (1 g, 2.62 mmol)和2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙酸 (935.19mg, 3.15 mmol)在DCM (10 mL)中的溶液添加HATU (1.20 g, 3.15 mmol)和DIEA (1.69g, 13.11 mmol, 2.28 mL)，在30℃下搅拌该混合物16小时。将该反应混合物倾倒入水 (10mL)中，用EA (10 mL x 3)萃取，用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥并过滤。在真空下浓缩滤液以提供作为黄色油的中间体H (1.7 g, 粗物质)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z= [M+H-56]+ = 605.1。
步骤5:N-[[3-[3-[2-[(2-氨基乙酰基)氨基]噻唑-4-基]苯基]苯基]甲基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体I)的制备
Figure 484422DEST_PATH_IMAGE273
向中间体H (1 g, 1.51 mmol)在DCM (10 mL)中的混合物添加哌啶 (2 mL)，在30℃下搅拌该混合物1小时。浓缩该反应混合物以提供残余物。通过反相HPLC (0.1% FA条件)纯化该粗产物。用NaHCO3将洗脱物调节至pH=9，用EA (100 mL x 3)萃取，用盐水 (200 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥并过滤。浓缩滤液以提供作为黄色油的中间体I (200 mg,439.87 μmol, 29.07%收率)。LCMS (ESI) m/z= [M+H-56]+ = 439.3。
步骤6:((3'-(2-(2-(3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)-[1,1'-联苯]-3-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体K)的制备
Figure 819588DEST_PATH_IMAGE274
向中间体I (200 mg, 456.06 μmol)和3-异丙基磺酰基苯甲酸 (156.15 mg,684.08 μmol)在DCM (4 mL)中的溶液添加EDCI (104.91 mg, 547.27 μmol)、HOBt (73.95mg, 547.27 μmol)和DIEA (294.71 mg, 2.28 mmol, 397.18 μL)，在30℃下搅拌该混合物16小时。将该反应混合物倾倒入水 (5 mL)中，用EA (5 mL x 3)萃取该溶液，用盐水 (20mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥并过滤。浓缩滤液以提供作为黄色油的中间体K (290mg, 446.99 μmol, 98.01%收率)。LCMS (ESI) m/z= [M+H-56]+ = 593.3。
步骤7:N-(2-((4-(3'-(氨基甲基)-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 31)的制备
Figure 548510DEST_PATH_IMAGE275
在30℃下搅拌中间体K (290 mg, 446.99 μmol)在HCl/二氧杂环己烷 (3 mL)中的混合物1小时。浓缩该反应混合物以提供残余物 (250 mg)。通过制备型HPLC纯化该残余物 (50 mg) (柱: Xtimate C18 150 x 25mm x 5 um；流动相: [水(0.05% 氢氧化铵 v/v)-ACN]；B%: 32%-62%, 10 min), 冻干该溶液以提供作为白色固体的化合物 31 (10.45mg, 19.05 μmol, 4.26%收率)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ = 549.2. 1H NMR (400MHz,DMSO) δ = 9.33-9.26 (m, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.28 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.20 (s,1H), 8.04 (s, 1H), 7.90 (br d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.84-7.82 (m, 1H), 7.75 (brs, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.63-7.61 (m, 1H), 7.56-7.52 (m, 2H), 7.44-7.42 (m,1H), 7.36 (s, 1H), 4.24 (br d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.83-3.79 (m, 2H), 3.54-3.47(m, 1H), 1.19 (d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例37. (S)-3-(异丙基磺酰基)-N-(3-甲氧基-1-((4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)苯甲酰胺 (化合物 32)的制备
Figure 627324DEST_PATH_IMAGE276
步骤1:4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-胺 (中间体C)的制备
Figure 184689DEST_PATH_IMAGE277
将4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺 (1 g, 3.92 mmol)、(2-甲基-4-吡啶基)硼酸(805.13 mg, 5.88 mmol)、K2CO3 (1.63 g, 11.76 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (286.79 mg,391.95 μmol)在二氧杂环己烷 (10 mL)、H2O (3 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，并然后在80℃下在N2气氛下搅拌该混合物2小时。将该反应混合物倾倒入水 (30 mL)中并用EA (20 mL x 3)萃取，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=10/1至1:1) 并在真空下浓缩以提供作为黄色固体的中间体C (1 g, 3.74 mmol, 95.43%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =268.3. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ = 8.56-8.49 (m, 1H), 8.18-8.16 (m, 1H), 7.89 (d, J=8.0 Hz,1H), 7.71-7.63 (m, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.54-7.48 (m, 2H), 7.20 (s, 1H), 7.11(s, 2H), 2.55 (s, 3H) ppm。
步骤2:(S)-(3-甲氧基-1-((4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体E)的制备
Figure 956336DEST_PATH_IMAGE278
将中间体C (950 mg, 3.55 mmol), 2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲氧基-丙酸(934.84 mg, 4.26 mmol)、EEDQ (1.76 g, 7.11 mmol)在DCM (10 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在25℃下在N2 气氛下搅拌该混合物12小时。将该反应混合物倾倒入水 (20 mL)中，用EA (20 mL x 3)萃取。用NaCl (10 mL x 3)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相（碱）纯化该残余物并冻干以提供作为黄色固体的中间体E (1.3 g, 2.77 mmol, 78.08%收率) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =469.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 12.43 (s, 1H), 8.54 (d, J = 5.2 Hz, 1H),8.29 (s, 1H), 8.00 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.74 (d, J = 7.8 Hz,1H), 7.67-7.48 (m, 3H), 7.17 (br d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.52 (br d, J = 6.6 Hz,1H), 3.58 (br d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.27 (s, 3H), 2.56 (s, 3H), 1.44-1.25 (m,9H) ppm。
步骤3:(S)-2-氨基-3-甲氧基-N-(4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)丙酰胺 (中间体F)的制备
Figure 906974DEST_PATH_IMAGE279
将中间体E (300 mg, 640.25 μmol)在HCl/二氧杂环己烷 (4 M, 1.60 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在25℃下在N2 气氛下搅拌该混合物2小时。浓缩该混合物以提供作为黄色固体的中间体F (350 mg, 粗物质, HCl盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =369.2。
步骤4:(S)-3-(异丙基磺酰基)-N-(3-甲氧基-1-((4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)苯甲酰胺 (化合物 32)的制备
Figure 789480DEST_PATH_IMAGE280
将中间体F (90 mg, 222.27 μmol, HCl盐)、3-异丙基磺酰基苯甲酸 (101.47mg, 444.54 μmol)、DIEA (114.90 mg, 889.08 μmol, 154.86 μL)、HOBt (60.07 mg,444.54 μmol)和EDCI (85.22 mg, 444.54 μmol)在DMF (1 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在25℃下在N2 气氛下搅拌该混合物12小时。将该反应混合物倾倒入水 (10mL)中，用EA (10 mL x 3)萃取。用盐水 (10 mL x 3)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相(FA)纯化该残余物并冻干以提供作为黄色固体的化合物 32 (73 mg, 115.50 μmol, 51.96%收率, FA盐)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ =579.3. 1H NMR (400MHz, DMSO+D2O) δ = 8.51 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.39-8.37 (m,1H), 8.29-8.25 (m, 2H), 8.14 (s, 1H), 8.06-7.97 (m, 2H), 7.83-7.78 (m, 2H),7.75-7.71 (m, 1H), 7.65-7.53 (m, 3H), 5.02-4.95 (m, 1H), 3.85-3.75 (m, 2H),3.48 (m, 1H), 3.33 (s, 3H), 2.54 (s, 3H), 1.17 (d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例38. N-[2-[[4-[3-[4-(氨基甲基)苯基]-5-氰基-苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-异丙基磺酰基-苯甲酰胺 (化合物 33)的制备
Figure 204281DEST_PATH_IMAGE281
步骤1:2-氨基-N-(4-溴噻唑-2-基)乙酰胺 (中间体B)的制备
Figure 146829DEST_PATH_IMAGE282
在20℃下在N2下一次性向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (200 mg, 594.88 μmol)在二氧杂环己烷 (1 mL)中的混合物添加HCl/二氧杂环己烷 (4 M, 5 mL)。在20℃下搅拌该混合物1小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供作为白色固体的中间体B (162 mg, 594.39 μmol, 99.92%收率, HCl盐)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =237.8。
步骤2:N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-3-异丙基磺酰基-苯甲酰胺(中间体C)的制备
Figure 584763DEST_PATH_IMAGE283
在20℃下在N2下一次性向3-异丙基磺酰基苯甲酸 (201.00 mg, 880.57 μmol)和DIEA (303.49 mg, 2.35 mmol)在DCM (2 mL)中的混合物添加HATU (446.43 mg, 1.17mmol)。在20℃下搅拌该混合物15分钟，然后添加中间体B (160 mg, 587.05 μmol, HCl盐)并搅拌该混合物2小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过制备型HPLC纯化残余物 (TFA条件；柱: Phenomenex Synergi C18 150 x 25 x 10 um；流动相: [水(0.1%TFA)-ACN]；B%: 30%-60%, 4min) 并浓缩以得到作为白色固体的中间体C (120 mg,268.85 μmol, 45.80%收率)。1H NMR (400 MHz, MeOD) δ = 8.43-8.42 (m, 1H), 8.27-8.25 (m, 1H), 8.11-8.09 (m, 1H), 7.82-7.78 (m, 1H), 7.70 (s, 1H), 4.33 (s,2H), 3.44-3.39 (m, 1H), 1.30-1.24 (m, 7H) ppm。
步骤3:N-[(4-溴苯基)甲基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体H)的制备
Figure 5380DEST_PATH_IMAGE284
在20℃下在N2下一次性向(4-溴苯基)甲胺 (10 g, 53.75 mmol)和叔丁氧基羰基碳酸叔丁酯 (23.46 g, 107.50 mmol)在MeOH (50 mL)中的混合物添加Et3N (10.88 g,107.50 mmol)。在20℃下搅拌该混合物12小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=10/1) 并在真空下浓缩以提供作为白色固体的中间体H (12 g, 41.93 mmol, 78.02%收率)。LCMS (ESI) m/z [M-55]+ =229.9。
步骤4:N-[[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]甲基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体J)的制备
Figure 477950DEST_PATH_IMAGE285
在20℃下在N2下一次性向中间体H (5 g, 17.47 mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-
四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷 (5.32 g,20.97 mmol)在二氧杂环己烷 (30 mL)中的混合物添加Pd(dppf)Cl2 (255.69 mg, 349.45μmol)和KOAc (5.14 g, 52.42 mmol)。将该混合物加热至100℃ 并搅拌12小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=10/1) 并在真空下浓缩以提供作为白色固体的中间体J (5.6 g, 16.81 mmol, 96.18%收率)。LCMS (ESI) m/z [M-55]+ =278.1。
步骤5:N-[[4-(3-溴-5-氰基-苯基)苯基]甲基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体L)的制备
Figure 653716DEST_PATH_IMAGE286
将3,5-二溴苯甲腈 (6.58 g, 25.21 mmol)、中间体J (5.6 g, 16.81 mmol), Pd(dppf)Cl2 (245.93 mg, 336.11 μmol)和K2CO3 (6.97 g, 50.42 mmol)在二氧杂环己烷(20 mL)和H2O (5 mL)中的混合物脱气和然后在N2下加热至100℃持续2小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=10/1)并在真空下浓缩以提供作为白色固体的中间体L (1.3 g, 3.36 mmol, 19.97%收率)。1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.85 (s, 1H), 7.70-7.67 (m, 2H), 7.43 (d, J=8.0 Hz,2H), 7.33 (d, J=8.0 Hz, 2H), 4.31-4.30 (m, 2H), 1.38 (s, 9H) ppm。
步骤6:N-[[4-[3-氰基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]苯基]甲基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体F)的制备
Figure 578947DEST_PATH_IMAGE287
将中间体L (1.2 g, 3.10 mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷 (1.57 g, 6.20 mmol)、Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (126.52 mg, 154.93 μmol)和KOAc (912.32 mg, 9.30 mmol)在二氧杂环己烷(10mL)中的混合物脱气和然后在N2下加热至100℃ 并搅拌2小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=10/1) 并在真空下浓缩以提供作为白色固体的中间体F (1.1 g, 2.53 mmol, 81.73%收率)。
步骤7:N-[[4-[3-氰基-5-[2-[[2-[(3-异丙基磺酰基苯甲酰基)氨基]乙酰基]氨基]噻唑-4-基]苯基]苯基]甲基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体D)的制备
Figure 803255DEST_PATH_IMAGE288
将中间体F、中间体C (100 mg, 224.04 μmol)、K3PO4 (142.67 mg, 672.13 μmol)、环戊基(二苯基)磷烷;二叔丁基(环戊基)磷烷;铁 (23.05 mg, 44.81 μmol)在二氧杂环己烷 (4 mL)和H2O (1 mL)中的混合物脱气和然后在N2下加热至100℃ 持续12小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=1/1) 并浓缩以提供作为黄色固体的中间体D (70 mg, 88.31 μmol, 39.41%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+Na]+ =696.1。
步骤8:N-[2-[[4-[3-[4-(氨基甲基)苯基]-5-氰基-苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-异丙基磺酰基-苯甲酰胺 (化合物 33)的制备
Figure 864752DEST_PATH_IMAGE289
在20℃下在N2下一次性向中间体D (70 mg, 88.31 μmol)/DCM (10 mL)添加TFA(1 mL)。在20℃下搅拌该混合物1小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过制备型HPLC纯化残余物 (TFA条件；柱: Phenomenex Synergi C18 150 x 25 x 10 um；流动相: [水(0.1%TFA)-ACN]；B%: 27%-51%, 10 min) 并冻干以提供作为粉红色固体的化合物33 (42.28 mg, 61.48 μmol, 69.62%收率, TFA盐) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =574.3.1H NMR (400 MHz, DMSO – d6) δ = 12.54 (brs, 1H), 9.33-9.31 (m, 1H) 8.53-8.52(m, 1H), 8.39-8.28 (m, 1H), 8.35-8.34 (m, 1H), 8.29-8.27 (m, 1H), 8.16-8.15(m, 3H), 8.07-8.05 (m, 2H), 7.90 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.85-7.81 (m, 1H), 7.61(d, J = 8.0 Hz, 2H), 4.26 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 4.12 (s, 2H), 3.54-3.47 (m,1H), 1.19 (d, J = 8.0 Hz, 6H) ppm。
实施例39. (S)-N-(1-((4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-4-(甲硫基)-1-氧代丁烷-2-基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 34)的制备
Figure 211420DEST_PATH_IMAGE290
步骤1:4-(2-氨基噻唑-4-基)苯甲腈 (中间体C)的制备
Figure 623946DEST_PATH_IMAGE291
向4-(2-溴乙酰基)苯甲腈 (10 g, 44.63 mmol)、硫脲 (3.74 g, 49.10 mmol)在H2O (150 mL)/MeOH (150 mL)中的混合物添加NaF (93.70 mg, 2.23 mmol, 93.70 μL)，和然后在25℃下在N2 气氛下搅拌该混合物2小时。用水 (50 mL)稀释该反应混合物并用EtOAc (100 mL x 2)萃取。用盐水 (40 mL x 2)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色固体的中间体C (8.9 g, 粗物质), 并且不经进一步纯化即用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =202.1。
步骤2:(S)-(1-((4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-4-(甲硫基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体E)的制备
Figure 651945DEST_PATH_IMAGE292
将中间体C (1 g, 4.97 mmol)、(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-(甲硫基)丁酸(1.86 g, 7.45 mmol)和EEDQ (1.84 g, 7.45 mmol)在DCM (20 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在25℃下搅拌该混合物10小时。用水 (20 mL)稀释该反应混合物并用EtOAc (20 mL x 2)萃取。用盐水 (20 mL x 2)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至20:1) 并浓缩以提供作为黄色油的中间体E (1.22 g, 2.54 mmol, 51.08%收率)。LCMS(ESI) m/z[M+H]+=433.1. SFC: OJ-3-MeOH (DEA)-5-40-3 mL-35 T, Rt: 2.019 min,ee%=100%。
步骤3:(S)-2-氨基-N-(4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基)-4-(甲硫基)丁酰胺 (中间体F)的制备
Figure 833528DEST_PATH_IMAGE293
向中间体E (1.2 g, 2.77mmol)在DCM (10 mL)中的混合物添加TFA (2.31 g,20.26 mmol, 1.5 mL)，和然后在25℃下在N2 气氛下搅拌该混合物10小时。用NaHCO3 (15mL)稀释该反应混合物并用EtOAc (10 mL x 2)萃取。用盐水 (20 mL x 2)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的中间体F (715.00 mg, 1.83mmol, 65.90%收率) 。LCMS (ESI) m/z[M+H]+=333.0。
步骤4:(S)-N-(1-((4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-4-(甲硫基)-1-氧代丁烷-2-基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 34)的制备
Figure 85518DEST_PATH_IMAGE294
依次向3-(异丙基磺酰基)苯甲酸 (128.40 mg, 562.50 μmol)在DCM (5 mL)中的溶液添加 HATU (291.65 mg, 767.05 μmol)、DIEA (198.27 mg, 1.53 mmol, 267.21 μL)和中间体F (200 mg, 511.37 μmol)。在25℃下搅拌该混合物10小时。用水 (10 mL)稀释该反应混合物并用EtOAc (15 mL x 2)萃取。用盐水 (10 mL x 2)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=50/1至2:1) 并浓缩以提供作为灰白色固体的化合物 34 (240 mg, 424.55μmol, 83.02%收率)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ =543.2. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ =12.65 ( s, 1H), 9.12 (d, J=7.2 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.30 (d, J=8.0 Hz, 1H),8.10- 8.03 (m, 3H), 7.95 (s, 1H), 7.94-7.89 (m, 2H), 7.82-7.79 (m, 1H), 4.83-4.78 (m, 1H), 3.53-3.46 (m, 1H), 2.67-2.63 (m, 1H), 2.59-2.54 (m, 1H), 2.21-2.11 (m, 2H), 2.09-1.98 (m, 3H), 1.19-1.17 (m, 6H) ppm. SFC: Cellucoat-MeOH(DEA)-40-3 mL-35T, Rt: 0.979 min, ee%=100%。
实施例40. (S)-N-(1-((4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 35)的制备
Figure 985341DEST_PATH_IMAGE295
步骤1:(S)-(1-((4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 551451DEST_PATH_IMAGE296
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸 (705.13 mg, 3.73 mmol)在DCM (10 mL)中的溶液添加EEDQ (921.59 mg, 3.73 mmol)和4-(2-氨基噻唑-4-基)苯甲腈 (根据实施例39中的方法制备) (500 mg, 2.48 mmol)。在25℃下搅拌该混合物10小时。过滤该反应混合物以除去固体， 并用水 (10 mL)稀释滤液并用EtOAc (10 mL x 2)萃取。用盐水 (10 mLx 2)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=50/1至20:1) 并浓缩以得到作为黄色油的中间体C(914 mg, 2.23 mmol, 89.89%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =373.1. SFC: OD-3_5CM_MEOH (DEA)_5_40_3ML_AT35.M, ee%=100%, Rt: 1.407min。
步骤2:(S)-2-氨基-N-(4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基)丙酰胺 (中间体D)的制备
Figure 853120DEST_PATH_IMAGE297
向中间体C (900 mg, 2.42 mmol)在DCM (10 mL)中的溶液添加TFA (3.08 g,27.01 mmol, 2 mL)。在25℃下搅拌该混合物10小时。用NaHCO3 (15 mL)稀释该反应混合物并用EtOAc (10 mL x 2)萃取。用盐水 (20 mL x 2)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的中间体D (375 mg, 1.20 mmol, 49.58%收率)。LCMS(ESI) m/z[M+H]+=273.0。
步骤3:(S)-N-(1-((4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 35)的制备
Figure 276011DEST_PATH_IMAGE298
依次向3-(异丙基磺酰基)苯甲酸 (120.32 mg, 527.13 μmol)在DCM (4 mL)中的溶液添加HATU (273.31 mg, 718.81 μmol)、DIEA (185.80 mg, 1.44 mmol, 250.41 μL)和中间体D (150 mg, 479.21 μmol)。在25℃下搅拌该混合物10小时。用水 (10 mL)稀释该反应混合物并用EtOAc (15 mL x 2)萃取。用盐水 (10 mL x 2)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=20/1至3:1) 并浓缩以提供作为白色固体的化合物 35 (200 mg, 410.30 μmol, 85.62%收率)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ = 483.1. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ =12.56 (s, 1H), 9.14 (d, J=6.4 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.28 (d, J=8.0 Hz, 1H),8.09 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 8.04 (d, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.90 (d, J=8.4 Hz, 2H),7.82-7.78 (m, 1H), 4.77-4.70 (m, 1H), 3.53-3.46 (m, 1H), 1.49 (d, J=7.2 Hz,3H), 1.19-1.17 (m, 6H) ppm. SFC: OJ-3-MeOH (DEA)-5-40-3mL-35T.lcm, ee%=100%,Rt: 2.359 min。
实施例41. 3-异丙基磺酰基-N-[2-[[4-[3-(1,3,4-噁二唑-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]苯甲酰胺 (化合物 36)的制备
Figure 663130DEST_PATH_IMAGE299
步骤1:N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]-3-异丙基磺酰基-苯甲酰胺(中间体C)的制备
Figure 32931DEST_PATH_IMAGE300
向3-异丙基磺酰基苯甲酸 (45.23 mg, 198.13 μmol)在DCM (1 mL)中的混合物添加HATU (90.40 mg, 237.75 μmol)和DIEA (102.43 mg, 792.51 μmol)和在20℃下搅拌该混合物5分钟。然后添加2-氨基-N-(4-溴噻唑-2-基)乙酰胺 (54 mg, 198.13 μmol)并在30℃下搅拌该混合物1小时。添加水 (30 mL)并用EtOAc (40 mL x 2)萃取该混合物。用盐水洗涤合并的有机相，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。将该残余物在MeOH (4 mL)中制浆并搅拌10分钟并且通过过滤收集沉淀物, 用MTBE (2 mL)洗涤并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体C (45 mg, 98.88 μmol, 49.91%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 448.0。
步骤2:3-异丙基磺酰基-N-[2-[[4-[3-(1,3,4-噁二唑-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]苯甲酰胺 (化合物 36)的制备
Figure 923527DEST_PATH_IMAGE301
将中间体C (45 mg, 100.82 μmol), 2-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基] -1,3,4-噁二唑 (54.87 mg, 201.64 μmol)、二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (13.14 mg, 20.16 μmol)和K3PO4 (64.20 mg, 302.46 μmol)吸收在二氧杂环己烷 (2 mL)和H2O (0.2 mL)中并用N2吹扫该混合物三次。在100℃下搅拌所得混合物3小时。添加另外的2-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2- 二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1,3,4-噁二唑 (54.87 mg, 201.64 μmol)和二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (13.14 mg,20.16 μmol)和在100℃下搅拌该混合物另外的2小时。然后通过柱层析法过滤该混合物(SiO2, PE : EtOAc= 20:1-1:1, DCM : MeOH=10:1) 并在真空下浓缩洗脱物。通过制备型HPLC纯化残余物 (柱: Phenomenex Gemini 150 x 25mm x 10 um；流动相: [水(0.04%NH3H2O+10 mM NH4HCO3)-ACN]；B%: 26%-59%,10 min)。在真空下浓缩洗脱物并然后用EtOAc(40 mL x 2)萃取和用盐水洗涤合并的有机相，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过制备型HPLC进一步纯化该残余物 (柱: Waters Xbridge 150 x 25 5 u；流动相: [水(0.05% 氢氧化铵 v/v)- ACN]；B%: 18%-48%,10 min) 并冻干以提供作为黄色固体的化合物 36 (2.95 mg, 5.77 μmol, 5.72%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 512.2. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ= 12.50 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 9.17 (s, 1H), 8.59 (s, 1H),8.39-8.38 (m, 1H), 8.298.26 (m, 1H), 8.16-8.13 (m, 1H), 8.06-8.03 (m, 1H),7.95 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.83-7.79 (m, 1H), 7.77-7.63 (m, 2H), 4.17 (s, 2H),3.54-3.47 (m, 1H), 1.18 (d, J= 6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例42. N-[2-[[4-[3-氰基-5-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-异丙基磺酰基-苯甲酰胺 (化合物 37)的制备
Figure 782898DEST_PATH_IMAGE302
步骤1:3-溴-5-(4-吡啶基)苯甲腈 (中间体C)的制备
Figure 391734DEST_PATH_IMAGE303
将4-吡啶基硼酸 (0.5 g, 4.07 mmol)、3,5-二溴苯甲腈 (2.12 g, 8.14 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (595.28 mg, 813.55 μmol)和K3PO4 (2.59 g, 12.20 mmol)吸收在二氧杂环己烷 (10 mL)和H2O (1 mL)中和用N2吹扫该混合物三次。然后在100℃下搅拌该混合物3小时。添加水 (30 mL)和用EtOAc (30 mL x 2)萃取该混合物。用盐水洗涤合并的有机相，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩和通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, PE : EtOAc =50:1-2:1)。然后将固体在EtOAc (5 mL)中制浆并搅拌持续5分钟。通过过滤收集沉淀物并用MTBE (2 mL)洗涤，在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体C (450 mg, 1.74 mmol,42.70%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 258.9. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ= 8.75-8.74(m, 2H), 7.99-7.98 (m, 1H), 7.86-7.83 (m, 2H), 7.46-7.45 (m, 2H) ppm。
步骤2: 3-(4-吡啶基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯甲腈 (中间体E)的制备
Figure 565227DEST_PATH_IMAGE304
将中间体C (200 mg, 771.90 μmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷 (235.22 mg, 926.28 μmol)、Pd(dppf)Cl2 (112.96 mg, 154.38 μmol)和KOAc (227.27 mg, 2.32 mmol)吸收在二氧杂环己烷 (2 mL)中和用N2吹扫该混合物三次。然后在100℃下搅拌所得混合物2小时。在真空下浓缩该反应混合物以提供作为黑色油的中间体E (236 mg, 粗物质)，其不经纯化即用于接下来的步骤。
步骤3: N-[2-[[4-[3-氰基-5-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体G)的制备
Figure 575908DEST_PATH_IMAGE305
将 N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (125 mg,371.80 μmol)、中间体E (227.66 mg, 743.59 μmol)、二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (48.46 mg, 74.36 μmol)和K3PO4 (236.76 mg, 1.12 mmol)吸收在二氧杂环己烷 (4mL)和H2O (0.4 mL)中和用N2吹扫该混合物三次。在100℃下搅拌所得混合物3小时。添加水(40 mL)和用EtOAc (40 mL x 3)萃取该混合物。然后用盐水洗涤合并的有机相，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。将该残余物在MeOH (3 mL)中制浆并搅拌5分钟。最后，通过过滤收集沉淀物，用MTBE (2 mL)洗涤并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体G(45 mg, 103.33 μmol, 27.79%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 436.3。
步骤4: 2-氨基-N-[4-[3-氰基-5-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (中间体H)的制备
Figure 543864DEST_PATH_IMAGE306
向中间体G (55 mg, 126.29 μmol)在DCM (5 mL)中的溶液添加HCl/二氧杂环己烷 (4 M, 1 mL)和在20℃下搅拌该混合物1小时。然后在减压下除去溶剂以提供作为白色固体的中间体H (46 mg, 粗物质, HCl盐)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤 LCMS(ESI) m/z [M+Na]+ = 359.2。
步骤5: N-[2-[[4-[3-氰基-5-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-异丙基磺酰基-苯甲酰胺 (化合物 37)
Figure 702313DEST_PATH_IMAGE307
向3-异丙基磺酰基苯甲酸 (22.10 mg, 96.81 μmol)在DCM (1 mL)中的混合物添加HATU (44.17 mg, 116.18 μmol)和DIEA (50.05 mg, 387.26 μmol)和在20℃下搅拌该混合物5分钟。然后添加中间体H (36 mg, 96.81 μmol)并在30℃下搅拌该混合物另外的2小时。通过过滤收集沉淀物并将固体在DMSO (1 mL)和MeOH (4 mL)中制浆和搅拌10分钟。然后通过过滤收集沉淀物并然后用MTBE (3mL)洗涤并冻干以提供作为灰色固体的化合物37 (17.62 mg, 31.48 μmol, 25.40%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 546.3. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ= 12.58 (s, 1H), 9.34-9.31 (m, 1H), 8.73-8.71 (m, 2H), 8.61-8.59 (m, 1H), 8.43-8.38 (m, 2H), 8.27-8.26 (m, 2H), 8.07-8.04 (m, 2H), 7.85-7.80 (m, 3H), 4.25 (d, J= 5.6 Hz, 2H), 3.53-3.47 (m, 1H), 1.18 (d, J= 6.8 Hz,6H) ppm。
实施例43. N-[2-[[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-异丙基磺酰基-苯甲酰胺 (化合物 38)的制备
Figure 413917DEST_PATH_IMAGE308
步骤1: N-[2-[[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体B)的制备
Figure 279105DEST_PATH_IMAGE309
向4-(2-氨基噻唑-4-基)苯甲腈 (根据实施例39中的方法制备) (400 mg, 1.99mmol)在吡啶 (10 mL)中的溶液添加EDCI (1.14 g, 5.96 mmol)和2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸 (417.83 mg, 2.39 mmol)。在25℃下搅拌该混合物10小时。在真空下浓缩该反应混合物以除去溶剂，然后用水 (50 mL)稀释并用EtOAc (30 mL x 2)萃取。用柠檬酸溶液 (20mL)和盐水 (25 mL x 2)洗涤合并的有机层，经Na2SO4 干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至20:1) 并浓缩以提供作为白色固体的中间体B (500 mg, 1.35 mmol, 68.08%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =359.1
步骤2: 2-氨基-N-[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]乙酰胺 (中间体C)的制备
Figure 417962DEST_PATH_IMAGE310
向中间体B (500 mg, 1.40 mmol)在DCM (4 mL)中的溶液添加HCl/二氧杂环己烷(4 M, 4.17 mL)。在25℃下搅拌该混合物2小时。过滤该反应混合物以除去溶剂，用MBTE(10 mL)洗涤固体，在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体C (400 mg, 粗物质, HCl盐)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 259.1
步骤3: N-[2-[[4-(4-氰基苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-异丙基磺酰基-苯甲酰胺 (化合物 38)的制备
Figure 66637DEST_PATH_IMAGE311
依次向3-异丙基磺酰基苯甲酸 (185.86 mg, 814.22 μmol)在DCM (5 mL)中的溶液添加HATU (309.59 mg, 814.22 μmol)、DIEA (526.16 mg, 4.07 mmol)和中间体C (200mg, 678.52 μmol, HCl盐)。在25℃下搅拌该混合物12小时。过滤该反应混合物以除去溶剂, 并且通过MTBE (10 mL)洗涤滤饼，在真空下干燥以提供作为白色固体的化合物 38(230 mg, 456.52 μmol, 67.28%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 469.1. 1H NMR(400MHz, DMSO-d6) δ = 12.54 (s, 1H), 9.32-9.29 (m, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.26(d, J= 7.6, 1H), 8.09-8.04 (m, 3H), 7.94-7.89 (m, 3H), 7.83-7.79 (m, 1H),4.25 (d, J=5.6 Hz, 2H), 3.53-3.46 (m, 1H), 1.18 (d, J=6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例44. 3-异丙基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(3-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]苯甲酰胺 (化合物 39)的制备
Figure 316352DEST_PATH_IMAGE312
步骤1: N-[2-氧代-2-[[4-[3-(3-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 301626DEST_PATH_IMAGE313
向N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (根据实施例2中的方法制备) (100 mg, 242.54 μmol)和3-吡啶基硼酸 (89.44 mg, 727.62 μmol)在二氧杂环己烷 (10 mL)和水(2 mL)中的溶液添加Pd(dtbpf)Cl2 (31.62 mg, 48.51μmol)和K3PO4 (154.45 mg, 727.62 μmol)。用N2将该反应混合物脱气三次并在100℃下搅拌2小时。用EA (30 mL)稀释该混合物并通过二氧化硅过滤，然后用水 (10 mL x 3) 和盐水 (10 mL x 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的中间体C(125 mg, 粗物质)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=411.1。
步骤2: 2-氨基-N-[4-[3-(3-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (中间体D)的制备
Figure 611385DEST_PATH_IMAGE314
在30℃下搅拌中间体C (120.00 mg, 292.33 μmol)在HCl/二氧杂环己烷 (4 M,10 mL)中的溶液2小时。用DCM (20 mL)稀释该混合物并在真空下浓缩。重复这个操作三次。通过MTBE (5 mL x 2)洗涤该残余物并在真空下干燥以提供作为黄色固体的中间体D (120mg, 粗物质, HCl盐) ，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=311.0。
步骤3: 3-异丙基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(3-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]苯甲酰胺 (化合物 39)的制备
Figure 744426DEST_PATH_IMAGE315
向3-异丙基磺酰基苯甲酸 (7.35 mg, 32.20 μmol)在DCM (1 mL)中的溶液添加HATU (18.38 mg, 48.34 μmol)、DIEA (12.49 mg, 96.64 μmol, 16.83 μL)。然后添加中间体D (10 mg, 28.83 μmol, HCl盐)并在30℃下搅拌该混合物2小时。合并三批的混合物并用DCM (50 mL)稀释和用饱和NaHCO3 溶液 (5 mL x 2)、水 (5 mL x 3) 和盐水 (5 mLx 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物 (柱:Phenomenex Synergi C18 150 x 25 x 10um；流动相: [水(0.1%TFA)-ACN]；B%: 20%-40%,10 min) 并冻干以提供作为黄色固体的化合物 39 (5.86 mg, 9.23 μmol, 10.67%收率,TFA盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=521.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.51 (s,1H), 9.32-9.30 (m, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.70 (br d, J=5.6 Hz, 1H), 8.38-8.27(m, 4H), 8.07-7.99 (m, 2H), 7.85-7.81 (m, 2H), 7.75-7.73 (m, 2H), 7.63-7.59(m, 1H), 4.25 (br d, J=5.6 Hz, 2H), 1.19 (d, J=6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例45. 3-(异丙基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 40)的制备
Figure 797832DEST_PATH_IMAGE316
向3-异丙基磺酰基苯甲酸 (294.00 mg, 1.29 mmol)在DCM (20 mL)中的溶液添加HATU (735.20 mg, 1.93 mmol)、DIEA (499.60 mg, 3.87 mmol, 673.32 μL)。然后添加2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (400 mg, 1.15 mmol, HCl盐)并在30℃下搅拌该混合物2小时。用DCM (50 mL)稀释该混合物和用饱和NaHCO3 溶液 (5 mL x2)、水 (5 mL x 3) 和盐水 (5 mL x 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, DCM: MeOH = 100:1~10:1) 并浓缩以提供白色固体，其在DMSO(2 mL)和MeOH (200 mL)中重结晶以得到作为白色固体的化合物 40 (132 mg, 253.54 μmol, 21.98%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=521.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 12.51(br s, 1H), 9.31-9.28 (m, 1H), 8.68 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 8.39 (s, 1H), 8.33-8.25 (m, 2H), 8.07-8.01 (m, 2H), 7.87-7.80 (m, 2H), 7.77 (d, J = 6.2 Hz, 3H),7.65-7.56 (m, 1H), 4.26 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.54-3.48 (m, 1H), 1.19 (d, J =6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例46. 4-氨基-N-(2-((4-(3-(氨基甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 41)的制备
Figure 637612DEST_PATH_IMAGE317
步骤1: 3-(异丙基硫基)-4-硝基苯甲酸 (中间体B)的制备
Figure 118272DEST_PATH_IMAGE318
在60℃下搅拌3-氟-4-硝基-苯甲酸 (2 g, 10.80 mmol)、Na2CO3 (1.15 g, 10.80mmol)和丙烷-2- 硫醇钠(1.27 g, 12.97 mmol)在NMP (20 mL)中的溶液12小时。将该反应溶液冷却至20℃和然后添加水(30 mL)。用乙酸乙酯 (2 x 40 mL)萃取该反应溶液。丢弃有机层并用1N HCl 溶液处理水层至pH=3。形成沉淀物。通过过滤收集沉淀物, 用EA洗涤并在减压下干燥以提供作为黄色固体的中间体B (2.4 g, 8.06 mmol, 74.58%收率)。LCMS(ESI) m/z [M+H]+ = 242.0. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ= 13.82 (br s, 1H), 8.19(d, J=8.8 Hz, 1H), 8.09 (d, J=1.2 Hz, 1H), 7.87-7.86 (m, 1H), 3.75-3.74 (m,1H), 1.32 (s, 3H), 1.30 (s, 3H) ppm。
步骤2: 3-(异丙基磺酰基)-4-硝基苯甲酸 (中间体C)的制备
Figure 410713DEST_PATH_IMAGE319
向中间体B (617.28 mg, 2.07 mmol)在DCM (5 mL)中的溶液添加m-CPBA (1.07g, 5.27 mmol, 85%纯度)。在20℃下搅拌该反应12小时。用水 (5 mL)稀释该反应混合物并用DCM (3 x 8 mL)萃取。用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过硅胶层析法纯化该残余物 (SiO2, PE: EA= 20:1至2:1) 并浓缩以提供作为白色固体的中间体C (180 mg, 658.71 μmol, 31.78%收率) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =274.0. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ= 14.10 (br s, 1H), 8.47-8.46 (m, 1H), 8.43(d, J=1.6 Hz, 1H), 8.23 (d, J=8.0 Hz, 1H), 3.82-3.81 (m, 1H), 1.29 (s, 3H),1.27 (s, 3H) ppm。
步骤3: 4-氨基-3-(异丙基磺酰基)苯甲酸 (中间体D)的制备
Figure 330128DEST_PATH_IMAGE320
在N2 气氛下向中间体C (160 mg, 585.52 μmol)在MeOH (1 mL)中的溶液添加Pd/C (80 mg, 10%纯度)。用H2将悬浮液脱气并吹扫三次。在H2 (15 Psi)下在20℃下搅拌该混合物12小时。通过一块硅藻土过滤该反应混合物。用甲醇 (3 x 5 mL)洗涤滤饼。在减压下浓缩合并的有机层以提供作为白色固体的中间体D (130 mg, 432.84 μmol, 73.92%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 244.1. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 13.36-11.59(m, 1H), 8.04 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.85-7.84 (m, 1H), 6.89 (d, J=8.8 Hz, 1H),6.76 (br s, 2H), 3.41-3.32 (m, 1H), 1.18 (s, 3H), 1.17 (s, 3H) ppm。
步骤4: 4-氨基-N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (中间体E)的制备
Figure 24414DEST_PATH_IMAGE321
向中间体D (100 mg, 411.05 μmol)在DMF (1.2 mL)中的溶液添加HATU (234.44mg, 616.58 μmol)和DIEA (286.38 μL, 1.64 mmol)。在这个温度下搅拌该混合物15分钟。然后添加2-氨基-N-[4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基]乙酰胺 (根据实施例47中的方法制备)(121.16 mg, 411.05 μmol, HCl盐)至溶液。在30℃下搅拌该反应1.75小时。用水 (2 mL)稀释该反应溶液并用EA (3 x 3 mL)萃取。用盐水 (6 mL)洗涤合并的有机层、经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相HPLC纯化该残余物 (FA条件) 并冻干以提供作为白色固体的中间体E (90 mg, 184.26 μmol, 44.83%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 484.2。
步骤5: 4-氨基-N-(2-((4-(3-(氨基甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 41)的制备
Figure 675975DEST_PATH_IMAGE322
在0℃下向中间体E (50 mg, 103.40 μmol)在MeOH (0.5 mL)中的溶液添加二氯化镍六水合物(61.44 mg, 258.50 μmol)和NaBH4 (39.12 mg, 1.03 mmol)。在20℃下搅拌该反应2小时。将水 (0.1 mL)添加至该反应混合物。通过一块硅藻土过滤该混合物。用DMSO(1 mL)和MeOH (3 x 5 mL)洗涤滤饼。在减压下浓缩合并的滤液以提供残余物。通过反相HPLC (FA条件)纯化该残余物并冻干以提供作为白色固体的化合物 41 (11 mg, 20.61 μmol, 19.94%收率, FA盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 488.3. 1H NMR (400MHz, 甲醇-d4)δ= 8.51 (br s, 1H), 8.19 (d, J=2.4 Hz, 1H), 8.00-7.99 (m, 2H), 7.91-7.90 (m,1H), 7.52-7.46 (m, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.40 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.91 (d, J=8.4Hz, 1H), 4.27 (s, 2H), 4.16 (s, 2H), 3.41-3.40 (m, 1H), 1.31 (s, 3H), 1.29(s, 3H) ppm。
实施例47. 4-氨基-N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 42)的制备
Figure 721292DEST_PATH_IMAGE323
步骤1: (2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体B)的制备
Figure 178818DEST_PATH_IMAGE324
向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (根据实施例4中的方法制备) (200 mg, 594.88 μmol)在二氧杂环己烷 (2 mL)和H2O (0.5 mL)中的溶液添加(3-氰基苯基)硼酸 (131.12 mg, 892.31 μmol)、K3PO4 (378.82 mg, 1.78 mmol)和二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (38.77 mg, 59.49 μmol)。在120℃下在N2下搅拌该反应混合物2小时。过滤该混合物并在真空下浓缩滤液以提供残余物。通过反相HPLC (FA)纯化该残余物并冻干以提供作为黄色胶的中间体B (178 mg, 471.80 μmol, 79.31%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =359.1. 1H NMR (400MHz, 氯仿-d) δ= 9.81 (br s, 1H),8.16 (s, 1H), 8.03 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.63 - 7.58 (m, 1H), 7.55 - 7.48 (m,1H), 7.25 (s, 1H), 5.24 (br s, 1H), 4.11 (d, J=6.4 Hz, 2H), 1.53 (s, 9H) ppm。
步骤2: 2-氨基-N-(4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)乙酰胺 盐酸盐 (中间体C)的制备
Figure 727611DEST_PATH_IMAGE325
向中间体B (170 mg, 474.31 μmol)在二氧杂环己烷 (2 mL)中的溶液添加HCl/二氧杂环己烷 (4 M, 2 mL)。在20℃下搅拌该反应12小时。在真空下浓缩该反应混合物以提供作为白色固体的中间体C (138 mg, 粗物质, HCl盐)，其直接用于接下来的步骤。LCMS(ESI) m/z [M+H]+ = 259.1. 1H NMR (400MHz, 氧化氘) δ= 7.84 (m, 2H), 7.56 (br d,J=7.6 Hz, 1H), 7.44 (m, 1H), 7.32 (s, 1H), 4.12 (s, 2H), 4.17 - 4.08 (m, 1H)ppm。
步骤3: 4-氨基-N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 42)的制备
Figure 815653DEST_PATH_IMAGE326
向4-氨基-3-异丙基磺酰基-苯甲酸 (根据实施例47中的方法制备) (100 mg,411.05 μmol)在DMF (1.2 mL)中的溶液添加HATU (234.44 mg, 616.58 μmol)和DIEA(286.38 μL, 1.64 mmol)。在这个温度下搅拌该混合物15分钟。然后添加中间体C (121.16mg, 411.05 μmol, HCl盐)。在30℃下搅拌该反应1.75小时。用水 (2 mL)稀释该反应溶液并用EA (3 x 3 mL)萃取。用盐水 (6 mL)洗涤合并的有机层，经无水 Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相HPLC (FA条件)纯化该残余物并冻干以提供作为白色固体的化合物 42 (90 mg, 184.26 μmol, 44.83%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =484.1. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ= 12.54-12.33 (m, 1H), 8.81-8.80 (m, 1H),8.33-8.32 (m, 1H), 8.24-8.23 (m, 1H), 8.08 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.90-7.85 (m,2H), 7.80-7.79 (m, 1H), 7.69-7.63 (m, 1H), 6.90 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.61 (s,2H), 4.15 (d, J=5.6 Hz, 2H), 3.42-3.36 (m, 1H), 1.21 (s, 3H), 1.19 (s, 3H)ppm。
实施例48. 3-(2-(2-(3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)苯甲酸 (化合物 43)的制备
Figure 82686DEST_PATH_IMAGE327
步骤1: 3-(2-(2-(3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)苯甲酸甲酯 (中间体C)的制备
Figure 281586DEST_PATH_IMAGE328
向3-[2-[(2-氨基乙酰基)氨基]噻唑-4-基]苯甲酸甲酯 (60 mg, 183.05 μmol,HCl)在DCM (1 mL)中的溶液添加3-异丙基磺酰基苯甲酸 (41.78 mg, 183.05 μmol)、DIEA(159.41 μL, 915.23 μmol)，然后将EDCI (52.63 mg, 274.57 μmol)和HOBt (37.10 mg,274.57 μmol)添加至该混合物，和在30℃下搅拌该混合物2小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过反相 (0.1% FA条件)纯化该残余物并冻干以提供作为白色固体的中间体C (60 mg, 117.23 μmol, 64%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H] + =502.1. 1H NMR(400MHz, DMSO-d6) δ = 12.55 (br s, 1H), 9.30-9.27 (m, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.38(s, 1H), 8.27-8.25 (m, 1H), 8.17-8.15 (m, 1H), 8.05-8.03 (m, 1H), 7.91-7.89(m, 1H), 7.84-7.82 (m, 2H), 7.79-7.59 (m, 1H), 4.24 (d, J=5.6 Hz, 2H), 3.88(s, 3H), 3.50-3.48 (m, 1H), 1.19 (d, J=6.8 Hz, 6H) ppm。
步骤2: 3-(2-(2-(3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)苯甲酸(化合物 43)的制备
Figure 747203DEST_PATH_IMAGE329
向中间体C (60 mg, 119.62 μmol)在MeOH/H2O/THF=1/1/2 (1 mL)中的溶液添加LiOH.H2O (10.04 mg, 239.25 μmol)。在30℃下搅拌该混合物1小时。向该反应混合物添加HCl (1N) 以调节pH=4，形成白色沉淀物。通过过滤收集沉淀物并在真空下干燥以提供作为白色固体的化合物 43 (35.68 mg, 72.94 μmol, 61%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H] + =488.0. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 13.06 (br s, 1H), 12.55 (br s, 1H), 9.34-9.32 (m, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.29-8.27 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.14-8.13 (m, 1H), 8.05-8.04 (m, 1H), 7.90 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.88-7.82 (m, 1H),7.78 (s, 1H), 7.56 (m, 1H), 4.25-4.24 (m, 2H), 3.56-3.46 (m, 1H), 1.20 (d, J=6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例49. N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 44)的制备
Figure 6146DEST_PATH_IMAGE330
步骤1: (2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure 760475DEST_PATH_IMAGE331
在25℃下在N2下一次性向N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (根据实施例4中的方法制备) (150 mg, 446.16 μmol)和3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯甲腈 (122.65 mg, 535.39 μmol)在二氧杂环己烷 (3mL)和H2O (0.5 mL)中的混合物添加K3PO4 (284.11 mg, 1.34 mmol)和二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (58.16 mg, 89.23 μmol)。在120℃下搅拌该混合物1小时。浓缩该混合物。通过反相柱(FA)纯化该残余物并冻干以提供作为黄色固体的中间体C (110 mg,306.91 μmol, 68.79%收率) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 359.0. 1H NMR (400MHz,CDCl3) δ = 9.82 (br s, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.03 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.61-7.59(m, 1H), 7.53-7.49(m, 1H), 7.24(s, 1H), 5.25-5.22 (m, 1H), 4.11 ( d, J=5.6Hz, 2H), 1.52 (s, 9H) ppm。
步骤2: 2-氨基-N-(4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)乙酰胺 (中间体D)的制备
Figure 497487DEST_PATH_IMAGE332
在25℃下一次性向中间体C (110 mg, 306.91 μmol)在二氧杂环己烷 (1 mL)中的混合物添加HCl/二氧杂环己烷 (4 M, 383.63 μL)。在25℃下搅拌该混合物12小时。过滤该悬浮液并在真空中干燥滤饼以提供作为黄色固体的中间体D (60 mg, 196.00 μmol,63.86%收率, HCl盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 259.1。
步骤3: N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 44)的制备
Figure 83189DEST_PATH_IMAGE333
在25℃下一次性向3-异丙基磺酰基苯甲酸 (根据实施例17中的方法制备)(37.28 mg, 163.34 μmol)在DMF (0.5 mL)中的混合物添加DIEA (63.33 mg, 490.01 μmol, 85.35 μL)和HATU (93.16 mg, 245.00 μmol)。在25℃下搅拌该混合物30分钟，然后添加中间体D (50 mg, 163.34 μmol, HCl盐)。在25℃下搅拌该混合物0.5小时并然后在真空下浓缩。通过反相柱(FA)纯化该残余物并冻干以提供作为白色固体的化合物 44 (47.33mg, 99.97 μmol, 61.21%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 469.1. 1H NMR (400MHz,DMSO-d6) δ= 9.29 (br s, 1H), 8.35 (d, J=19.4 Hz, 2H), 8.25-8.22 (m, 2H), 8.05(J=7.8 Hz, 1H), 7.88 (s,1H), 7.82 - 7.78 (m, 2H), 7.78-7.66 (m, 1H), 4.25 (d,J=5.6 Hz, 2H), 3.50-3.48 (m, 1H), 1.19(d, J=6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例50. N-(2-((4-(3-(2-((二甲基氨基)甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 (化合物 45)的制备
Figure 513033DEST_PATH_IMAGE334
将3-异丙基磺酰基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]苯甲酰胺 (根据实施例26中的方法制备) (60mg, 105.36 μmol)、1-(4-溴-2-吡啶基)-N,N-二甲基-甲胺 (根据FG-A1629中的方法制备)(27.19 mg, 126.43 μmol)、二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (6.87 mg, 10.54 μmol)和K3PO4 (22.36 mg, 105.36 μmol)在二氧杂环己烷 (2 mL)和H2O (0.5 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在80℃下在N2 气氛下搅拌该混合物2小时。添加水(20 mL)并用EA (50 mL x 2)萃取该反应混合物。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相HPLC (0.1% FA条件)纯化该粗产物并冻干以提供作为黄色固体的化合物 45 (20 mg, 32.06 μmol, 30.43%收率, 100%纯度,FA)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 578.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.54 (s, 1H),9.31-928 (m, 1H), 8.58 (d, J=5.2 Hz, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.28-8.26 (m, 2H),8.18 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.05 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.01 (d, J=8.0 Hz, 1H)7.84-7.80 (m, 2H), 7.74 (s, 2H), 7.64-7.57 (m, 2H), 4.25 (d, J=5.6 Hz, 2H),3.61 (s, 2H), 2.24 (s, 6H), 1.19 (d, J=6.4 Hz, 6H) ppm。
实施例51. 3-(异丙基磺酰基)-4-甲基-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 46)的制备
Figure 489080DEST_PATH_IMAGE335
步骤1: 3-(异丙基硫基)-4-甲基苯甲酸 (中间体B)的制备
Figure 29782DEST_PATH_IMAGE336
在-78℃下在N2下向3-溴-4-甲基-苯甲酸 (1 g, 4.65 mmol)在THF (25 mL)中的溶液逐滴添加n-BμLi (2.5 M, 4.09 mL)和在-78℃下搅拌该混合物30分钟。然后在-78℃下逐滴添加溶解在THF (1 mL)中的2-异丙基硫烷基丙烷 (549.84 mg, 4.65 mmol,675.56 μL)。使所得混合物在-78℃下搅拌30 min和然后在25℃下持续另外的30分钟。用1N NaOH (30 mL)稀释该反应混合物和用EtOAc (40 mL)洗涤。丢弃有机层并用4M HCl将水层的pH调节至 ~3和然后用EtOAc (40 mL x 2)萃取。用盐水洗涤合并的有机相，经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色固体的中间体B (900 mg, 4.28 mmol,92.03%收率)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤 LCMS (ESI) m/z [M+H]+=211.2。
步骤2: 3-(异丙基磺酰基)-4-甲基苯甲酸 (中间体C)的制备
Figure 735570DEST_PATH_IMAGE337
在0℃下向中间体B (200 mg, 951.06 μmol)在MeOH (1 mL)中的溶液添加Oxone(877.02 mg, 1.43 mmol)/H2O (1 mL)和然后在25℃下搅拌该混合物2小时。将该混合物倾倒入饱和Na2SO3 (50 mL)中并搅拌30分钟和然后用EtOAc (30 mL)萃取。丢弃有机层并用2NHCl将水层的pH调节至 ~4和然后用EtOAc (40 mL x 2)萃取。用盐水洗涤合并的有机相，经无水 Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色固体的中间体C (160 mg, 621.73μmol, 65.37%收率)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤 LCMS (ESI) m/z [M+H]+=242.9。
步骤3: 3-(异丙基磺酰基)-4-甲基-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 46)的制备
Figure 70737DEST_PATH_IMAGE338
向中间体C (80 mg, 330.18 μmol)在DCM (1 mL)中的溶液添加HATU (150.65mg, 396.22 μmol)和DIEA (128.02 mg, 990.54 μmol, 172.53 μL)和在25℃下搅拌该混合物10分钟。然后 添加2-氨基-N-[4-[3-(1-甲基吡唑-3-基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺(115.51 mg, 330.18 μmol, HCl盐)并在25℃下搅拌该混合物另外的1小时。添加水(10mL)和用EtOAc (10 mL x 2)萃取该混合物。用盐水洗涤合并的有机相，经无水 Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物 (柱: Phenomenex luna C18 150 x 2510u；流动相: [水(0.1% TFA)-ACN]；B%: 33%-63%, 10 min) 并冻干以提供作为白色固体的化合物 46 (87.88 mg, 163.45 μmol, 49.50%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=538.0.1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 8.34-8.33 (m, 1H), 7.96 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.85-7.83 (m, 1H), 7.72-7.67 (m, 2H), 7.62 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.45-7.41 (m, 2H),7.34 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.66 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.31 (s, 2H), 3.95 (s, 3H),3.56-3.49 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 1.32 (d, J=6.4 Hz, 6H) ppm。
实施例52. 3-(异丙基磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 47)的制备
Figure 799658DEST_PATH_IMAGE339
在25℃下向3-(异丙基磺酰基)苯甲酸 (30 mg, 131.43 μmol)和2-氨基-N-(6-(3-(吡啶-4-基)苯基)吡啶-2-基)乙酰胺 (44.79 mg, 131.43 μmol, HCl盐)在DMF (1mL)中的溶液添加EDCI (50.39 mg, 262.85 μmol)、HOBt (35.52 mg, 262.85 μmol)和DIEA (84.93 mg, 657.13 μmol, 114.46 μL)。在25-30℃下搅拌该混合物16小时。在真空下浓缩该反应混合物。通过反相HPLC (0.1 % NH3•H2O)纯化该残余物并冻干以提供作为白色固体的化合物 47 (35.60 mg, 67.54 μmol, 51.39%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=515.4. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ = 8.63 (d, J=6.0 Hz, 2H), 8.48-8.47 (m, 2H),8.28-8.27 (m, 1H), 8.15-8.14 (m, 1H), 8.10-8.09 (m, 1H), 7.88-7.87 (m, 1H),7.84-7.76 (m, 5H), 7.74-7.73 (m, 1H), 7.66-7.60 (m, 1H), 4.34 (br s, 2H),3.40-3.36 (m, 1H), 1.28 (d, J=6.8 Hz, 6H) ppm。
实施例53. N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体D)和2-氨基-N-(4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)乙酰胺 (中间体E)的制备
Figure 878473DEST_PATH_IMAGE340
步骤1: 4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺 (中间体B)的制备
Figure 376450DEST_PATH_IMAGE341
向1-(3-溴苯基)乙酮 (473 g, 2.38 mol, 313.25 mL)和硫脲 (361.78 g, 4.75mol)的混合物添加I2 (603.14 g, 2.38 mol, 478.68 mL, 1 eq)。在110℃下搅拌该混合物16小时。在冷却后，用MTBE (5 L)研磨该反应混合物，并然后过滤以除去任何未反应的碘和苯乙酮。将滤饼放入冰水 (4 L)中并用25% NH3.H2O处理至pH=9-10。在25℃下搅拌该悬浮液15分钟，然后过滤并用水 (1 L)洗涤以提供湿固体。将该湿固体溶解于EA (4 L)中并用饱和NaHCO3 (1 Lx2) 和盐水 (1L)洗涤。经Na2SO4干燥该EA层，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。在25℃下用PE/EA=100:1 (4 L)研磨该残余物3小时，然后过滤该悬浮液，用PE洗涤滤饼 (1 L)并在真空下干燥以提供作为粉红色固体的中间体B (450 g, 1.69 mol,71.20%收率, 95.93%纯度)。LCMS (ESI) m/z [79BrM+H+] = 254.9. 1H NMR (400MHz,DMSO-d6) δ = 7.98-7.97 (m, 1H), 7.80-7.77 (m, 1H), 7.43-7.42 (m, 1H), 7.34 -7.30 (m, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.10 (s, 2H)
步骤2: N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体D)的制备
Figure 944835DEST_PATH_IMAGE342
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸 (82.40 g, 470.34 mmol)、HATU (178.84 g,470.34 mmol)和DIEA (151.97 g, 1.18 mol, 204.81 mL)在DCM (1000.00 mL)中的溶液添加中间体B (100.00 g, 391.95 mmol)，在30℃下搅拌该混合物16小时。用饱和柠檬酸(500 mLx4) 和盐水 (500 mL)洗涤该反应混合物，经Na2SO4干燥, 过滤并在减压下浓缩以提供残余物。用MeOH (200.0 mL)研磨该残余物，过滤并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体D (100 g, 241.89 mmol, 61.71%收率)。LCMS (ESI) m/z [81BrM+H]+= 413.8.1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.29 (s, 1H), 8.09 - 8.09 (m, 1H), 7.89 (d, J =7.6 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.52 - 7.49 (m, 1H), 7.41 - 7.37 (m, 1H), 7.16 -7.13 (m, 1H), 3.87 - 3.81 (m, 2H), 1.39 (s, 9H) ppm。
步骤3: 2-氨基-N-(4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)乙酰胺 (中间体E)的制备
Figure 161052DEST_PATH_IMAGE343
在30℃下搅拌中间体D (10 g, 24.25 mmol)在HCl/二氧杂环己烷 (100 mL)中的混合物2小时。在真空下浓缩该反应混合物以提供作为白色固体的中间体E (8.4 g, 粗物质, HCl)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=313.8
实施例54. 2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (中间体F)的制备
Figure 43558DEST_PATH_IMAGE344
步骤1: 4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-胺 (中间体C)的制备
Figure 396042DEST_PATH_IMAGE345
在N2下向4-(3-溴苯基)噻唑-2-胺 (10 g, 39.20 mmol)、4-吡啶基硼酸 (14.45g, 117.59 mmol)和K2CO3 (16.25 g, 117.59 mmol)在二氧杂环己烷 (120 mL)和水(30mL)中的溶液添加Pd(dppf)Cl2 (1 g, 1.37 mmol)，在100℃下搅拌该混合物4小时。用水(500 mL)稀释该反应混合物，用EA (500 mL)萃取并在减压下浓缩以提供残余物。通过从DCM/MTBE=1:20 (200 mL)中结晶纯化该残余物并过滤以提供作为棕色固体的中间体C(9.5 g, 36.33 mmol, 92.69%收率)。
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.66 (d, J=6.0 Hz, 2H), 8.19 (s, 1H), 7.90(d, J=8.0 Hz, 1H), 7.76 - 7.70 (m, 2H), 7.68 (d,J=8.0 Hz, 1H), 7.52 (t, J=8.0Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.11 (s, 2H) ppm. LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 254.2
步骤2: N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体E)的制备
Figure 421414DEST_PATH_IMAGE346
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸 (9.85 g, 56.25 mmol)、HATU (21.39 g, 56.25mmol)和DIPEA (14.54 g, 112.51 mmol)在DCM (200 mL)中的溶液添加中间体C (9.5 g,37.50 mmol, 1 eq)，在30℃下搅拌该混合物16小时。形成沉淀物。过滤该反应混合物以提供黄色固体。用EA (300.0 mL)和MeOH (50.0 mL)研磨粗产物并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体E (11 g, 25.89 mmol, 69.03%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=411.3. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.32 (br s, 1H), 8.69 - 8.67 (m, 2H), 8.30(s, 1H), 8.01 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.80 - 7.76 (m, 3H), 7.64 -7.60 (m, 1H), 7.20 - 7.15 (m, 1H), 3.88 (d, J=6.4 Hz, 2H), 1.44 (s, 9H) ppm。
步骤3: 2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (中间体F)的制备
Figure 859349DEST_PATH_IMAGE347
向中间体E (11 g, 26.80 mmol)在MeOH (20 mL)中的溶液添加4 M HCl/EtOAc(20 mL)。在20℃下搅拌该混合物2小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过用EA (200 mL)和MTBE (50 mL)研磨纯化残余物并在真空下干燥以提供作为浅黄色固体的中间体F (12 g, HCl盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 311.3. 1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ8.92 (d, J=6.8 Hz, 2H), 8.52 - 8.47 (m, 3H), 8.22 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.94 (m,J=8.4 Hz, 1H), 7.75 - 7.66 (m, 2H), 4.04 (s, 2H) ppm。
实施例55. (S)-3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(4-(甲硫基)-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁烷-2-基)苯甲酰胺 (化合物 48)的制备
Figure 279966DEST_PATH_IMAGE348
步骤1: 3-(2-氰基丙烷-2-基)苯甲酸 (中间体B)的制备
Figure 752536DEST_PATH_IMAGE349
在0℃下向3-(氰基甲基)苯甲酸甲酯 (5 g, 28.54 mmol)在THF (50 mL)中的溶液添加NaH (3.42 g, 85.62 mmol, 60%纯度)并在25℃下搅拌0.5小时。然后在0℃下添加MeI (12.15 g, 85.62 mmol, 5.33 mL)。在25℃下搅拌该混合物16小时。在0℃下用H2O(50 mL)淬灭该反应混合物并用EA (50 mL x 2)萃取。丢弃有机层并向水相添加1N HCl 以调节pH=5并用EA (50 mL x 2)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供作为无色油的中间体B (5 g, 26.43 mmol, 92.59%收率)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=190.1. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 8.20-8.10(m, 1H),8.10-8.08 (m, 1H), 7.81-7.79 (m, 1H), 7.56-7.52 (m, 1H), 1.84-1.75 (m, 6H)ppm。
步骤2: 3-(2-氰基丙烷-2-基)苯甲酸甲酯 (中间体C)的制备
Figure 600406DEST_PATH_IMAGE350
向中间体B (5 g, 26.43 mmol)在MeOH (50 mL)中的溶液添加H2SO4 (920.00 mg,9.38 mmol, 0.5 mL)。在60℃下搅拌该混合物8小时。浓缩该反应混合物以除去MeOH和用NaHCO3水溶液(20 mL)稀释并用EA (20 mLx2)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (ISCO；80 gSepaFlash 硅胶快速柱, 以60 mL/min的0~50% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液) 并浓缩以提供作为无色油的中间体C (5 g, 24.60 mmol, 93.10%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=204.1. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 8.12-8.01 (m, 1H), 8.01-7.99 (m, 1H), 7.52-7.50 (m, 1H), 7.48-7.46 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 1.76 (s, 6H) ppm。
步骤3: 3-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酸甲酯 (中间体D)的制备
Figure 587954DEST_PATH_IMAGE351
在0℃下向中间体C (3 g, 14.76 mmol)在MeOH (30 mL)中的溶液添加NiCl2.6H2O(8.77 g, 36.90 mmol)和NaBH4 (5.58 g, 147.61 mmol)并在30℃下搅拌16小时。然后添加二碳酸二叔丁酯 (9.66 g, 44.28 mmol, 10.17 mL)并搅拌另外的2小时。用H2O (40mL)稀释该反应混合物并用EA (40 mL x2)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供作为无色油的中间体D (7 g, 粗物质)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z= [M+H-Boc]+ =208.1. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 8.03-7.91 (m,1H), 7.90-7.88 (m, 1H), 7.57-7.56 (m, 1H), 7.43-7.41 (m, 1H), 3.95-3.92 (m,3H), 3.36-3.35 (m, 2H), 1.41-1.39 (m, 9H), 1.37-1.35 (m, 6H) ppm。
步骤4: 3-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酸 (中间体E)的制备
Figure 812262DEST_PATH_IMAGE352
向中间体D (7 g, 22.77 mmol)在THF/MeOH/H2O (50 mL)中的溶液添加LiOH.H2O(1.91 g, 45.55 mmol)。在30℃下搅拌该混合物16小时。用H2O (30 mL)稀释该反应混合物并用EA (30 mL x 2)萃取。丢弃有机层并用1N HCl将水相调节至pH=5 ，然后用EA (50 mLx 2)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色固体的中间体E (2.5 g, 8.52 mmol, 37.42%收率)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z=[M+H-55]+ =238.1. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 8.06-8.06 (m, 1H), 7.98-7.91 (m,1H), 7.63-7.61 (m, 1H), 7.47-7.43 (m, 2H), 3.43-3.31 (m, 2H), 1.42 (s, 9H),1.37 (s, 6H) ppm。
步骤5: (S)-(2-甲基-2-(3-((4-(甲硫基)-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁烷-2-基)氨基甲酰基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体G)的制备
Figure 139338DEST_PATH_IMAGE353
向(2S)-2-氨基-4-甲基硫烷基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]丁酰胺(100 mg, 237.54 μmol, HCl盐)在DMF (1 mL)中的溶液添加中间体E (69.68 mg, 237.54μmol)和DIEA (153.50 mg, 1.19 mmol, 206.87 μL)，然后将 EDCI (68.31 mg, 356.31 μmol)和HOBt (38.52 mg, 285.05 μmol)添加至该混合物。在30℃下搅拌该混合物16小时。用H2O (2 mL)稀释该反应混合物并用EA (2 mL x 2)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相纯化该反应 (0.1% FA条件) 并浓缩以除去ACN并用EA (10 mLx2)萃取，经无水 Na2SO4干燥有机层，过滤并浓缩以提供作为白色固体的中间体G (90 mg, 136.39 μmol, 57.42%收率) 。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ =660.1. 手性SFC: Rt=2.386 min, ee值 =100%, OJ-3_5CM_MEOH (DEA)_5_40_3ML_AT35.M
步骤6: (S)-3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(4-(甲硫基)-1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丁烷-2-基)苯甲酰胺 (化合物 48)的制备
Figure 423689DEST_PATH_IMAGE354
向中间体G (90 mg, 136.39 μmol)添加TFA (1.54 g, 13.51 mmol, 1 mL)在DCM(4 mL)中的溶液，然后在30℃下搅拌该混合物16小时。将该混合物浓缩并溶解于DMSO (2mL)中并通过制备型HPLC纯化 (柱: Luna C18 150x25 5 u；流动相: [水(0.075% TFA)-ACN]；B%: 12%-42%, 9 min) 并冻干以提供作为黄色油的化合物 48 (21.86 mg, 38.98 μmol, 28.58%收率)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ =560.3. 1H NMR (400MHz, DMSO+D2O) δ =8.85-8.83 (m, 2H), 8.40-8.33 (m, 1H), 8.32-8.30 (m, 2H), 8.13-8.11 (m, 1H),7.89-7.86 (m, 1H), 7.85-7.81 (m, 1H), 7.80-7.79 (m, 1H), 7.78-7.70 (m, 1H),7.69-7.68 (m, 1H), 7.67-7.49 (m, 1H), 7.48 - 7.46 (m, 1H), 4.77-4.74 (m, 1H),3.07-2.66 (m, 2H), 2.65-2.50 (m, 2H), 2.49-2.14 (m, 2H), 2.12-2.06 (m, 3H),1.35-1.32(m, 6H) ppm
手性SFC: Rt=2.360 min, ee值 =100%, OJ-3-MeOH (DEA)-5-40-3ML-35T.lcm。
实施例56. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-(2-甲氧基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 49)的制备
Figure 898532DEST_PATH_IMAGE355
步骤1: 2-氨基-N-(4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)乙酰胺 (中间体B)的制备
Figure 660952DEST_PATH_IMAGE356
在25℃下在N2 气氛下搅拌N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (根据实施例2中的方法制备) (5 g, 12.13 mmol)、HCl/二氧杂环己烷 (4 M, 15.16 mL)在二氧杂环己烷 (20 mL)中的混合物2小时。过滤掉固体并用 (10mLx3)MTBE洗涤。然后在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体B (4 g, 11.47 mmol,94.61%收率, HCl盐)，其直接用于接下来的步骤。1H NMR (400 MHz, DMSO) δ= 13.10-12.62 (m, 1H), 8.58 (br s, 3H), 8.10-8.09 (m, 1H), 7.99-7.77 (m, 2H), 7.56-7.32 (m, 2H), 3.93-3.92 (m, 2H) ppm。
步骤2: (2-(3-((2-((4-(3-溴苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代-乙基)氨基甲酰基)苯基)-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体D)的制备
Figure 842534DEST_PATH_IMAGE357
将中间体B (4 g, 11.47 mmol, HCl盐), 3-[2-(叔丁氧基羰基氨基)-1,1-二甲基-乙基]苯甲酸 (根据实施例55中的方法制备) (3.37 g, 11.47 mmol)、EDCI (3.30 g,17.21 mmol)、HOBt (2.33 g, 17.21 mmol)和DIEA (7.41 g, 57.36 mmol, 9.99 mL)在DMF (40 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在25℃下在N2 气氛下搅拌该混合物12小时。将该反应混合物倾倒入水中 (80 mL)，并用EA (30 mL x 2)萃取。用盐水 (30 mLx 2)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (ISCO；120 g SepaFlash 硅胶快速柱, 以80 mL/min的0~50% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液) 并浓缩以提供作为黄色固体的中间体D (5 g, 8.51 mmol,74.18%收率) 。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ =589.3。
步骤3: (2-(3-((2-((4-(3-(2-甲氧基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)苯基)-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体F)的制备
Figure 297787DEST_PATH_IMAGE358
将中间体D (100 mg, 170.20 μmol)、二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁(11.09 mg, 17.02 μmol)、K3PO4 (108.39 mg, 510.60 μmol)和(2-甲氧基吡啶-4-基)硼酸(39.05 mg, 255.30 μmol)在二氧杂环己烷 (1 mL)和H2O (0.2 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在80℃下在N2 气氛下搅拌该混合物1.5小时。在EA (50 mL)和饱和 NH4Cl水溶液 (50 mL)之间分配该反应混合物。分离有机相，用盐水 (50 mL)洗涤，经Na2SO4干燥,过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (ISCO；20SepaFlash 硅胶快速柱, 以35 mL/min的0~60% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液)并浓缩以提供作为白色固体的中间体F (100 mg, 160.78 μmol, 94.47%收率)。LCMS (ESI) m/z=[M+H]+ =616.3。
步骤4: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-(2-甲氧基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 49)的制备
Figure 259926DEST_PATH_IMAGE359
向中间体F (100 mg, 160.78 μmol)在DCM (2 mL)中的溶液添加TFA (952.87mg, 8.36 mmol, 618.75 μL)。在25℃下搅拌该混合物1小时。在减压下浓缩该反应混合物以除去溶剂以得到残余物。用H2O (10 mL)稀释该残余物并然后冻干以提供作为黄色固体的化合物 49 (99.07 mg, 156.36 μmol, 97.25%收率, TFA盐)。LCMS (ESI) m/z = [M+H]+ = 516.4. 1H NMR (400MHz, DMSO+D2O) δ = 8.31-8.25 (m, 2H), 8.01 (br d, J =8.0 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.85-7.80 (m, 2H), 7.74 (br d, J = 8.0 Hz, 1H),7.64 (br d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.59-7.57 (m, 1H), 7.55-7.47 (m, 1H), 7.37 (dd,J = 1.6, 5.6 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 4.22 (s, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.11 (s, 2H),1.39 (s, 6H) ppm。
实施例57. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3',5'-二氰基-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 50)的制备
Figure 826037DEST_PATH_IMAGE360
步骤1: N-[2-甲基-2-[3-[[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酰基]苯基]丙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure 862126DEST_PATH_IMAGE361
将N-[2-[3-[[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酰基]苯基]-2-甲基丙基]氨基甲酸叔丁酯 (根据实施例56中的方法制备) (2 g, 3.40 mmol)、KOAc (1.00 g, 10.21 mmol)、二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (443.72 mg, 680.82μmol)和4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷) (1.30 g,5.11 mmol)在二氧杂环己烷 (20 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在80℃下在N2 气氛下搅拌该混合物2小时。将该反应混合物倾倒入NH4Cl水溶液 (150 mL)和EA (150mL)中并用EA (150 mL x 2)萃取。用盐水 (150 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (ISCO®；80 gSepaFlash® 硅胶快速柱, 以60 mL/min的0~60% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液) 并在真空下浓缩以提供作为红色固体的中间体C (2 g, 2.68 mmol, 78.70%收率)。LCMS (ESI)m/z= [M+H]+ = 635.2. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.51 (s, 1H), 8.96-8.93 (m,1H), 8.31 (s, 1H), 8.03 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.73 (m, 1H), 7.68(s, 2H), 7.63-7.61 (m, 1H), 7.47-7.44 (m, 1H), 7.43-7.42 (m, 2H), 6.78-6.75(m, 1H), 4.21 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.16 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 1.34 (s, 12H),1.19 (s, 6H) ppm。
步骤2: (2-(3-((2-((4-(3',5'-二氰基-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)苯基)-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体E)的制备
Figure 488279DEST_PATH_IMAGE362
向中间体C (480 mg, 756.39 μmol)和5-溴苯-1,3-二甲腈 (156.59 mg, 756.39μmol)在二氧杂环己烷 (5 mL)和H2O (0.5 mL)中的溶液添加K3PO4 (481.67 mg, 2.27mmol)和二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (49.30 mg, 75.64 μmol)。在70℃下搅拌该混合物2小时。在水(10 mL)和乙酸乙酯 (15mL)之间分配该反应混合物。分离有机相并在减压下浓缩以提供残余物。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (ISCO®；40 g SepaFlash®硅胶快速柱, 以40 mL/min的0~60%乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液) 并浓缩以提供作为黄色油的中间体E (270 mg, 425.37 μmol, 56.24%收率)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ = 635.2
步骤3: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3',5'-二氰基-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 50)的制备
Figure 875398DEST_PATH_IMAGE363
向中间体E (270 mg, 425.37 μmol)在DCM (6.75 mL)中的溶液添加TFA (1.35mL)。在16℃下搅拌该混合物2小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过制备型HPLC纯化残余物 (柱: Phenomenex Synergi C18 150x25x10um；流动相: [水(0.1%TFA)-ACN]；B%: 28%-58%,10min) 并冻干以提供作为白色固体的化合物 50 (138.24 mg,212.54 μmol, 49.97%收率, 99.73%纯度, TFA)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ = 535.1. 1HNMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.49 (s, 1H), 8.98 (s, 1H), 8.62 (d, J = 1.6 Hz,2H), 8.49 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.03 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.88(s, 1H), 7.85 - 7.83 (m, 2H), 7.63 - 7.58 (m, 2H), 7.55 - 7.49 (m, 1H), 4.24(d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.16 - 3.08 (m, 2H), 1.40 (s, 6H) ppm. 19F NMR (377 MHz,DMSO-d6) δ= -73.64 - -73.79 (m, 1F)
实施例58. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3',5'-二氯-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 51)的制备
Figure 41938DEST_PATH_IMAGE364
步骤1: (2-(3-((2-((4-(3',5'-二氯-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)苯基)-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 198112DEST_PATH_IMAGE365
将N-[2-[3-[[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酰基]苯基]-2-甲基丙基]氨基甲酸叔丁酯 (100 mg, 170.20 μmol) (根据实施例56中的方法制备)、(3,5-二氯苯基)硼酸 (48.72 mg, 255.31 μmol)、二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (11.09 mg, 17.02 μmol)和K3PO4 (108.39 mg, 510.61 μmol)在二氧杂环己烷 (1 mL)和H2O (0.2 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在80℃下在N2 气氛下搅拌该混合物2小时。在饱和 NH4Cl 水溶液(5 mL)和EA (5 mL)之间分配该反应混合物。分离有机相，用盐水 (5 mL)洗涤。在减压下浓缩有机层以提供残余物。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (ISCO；SepaFlash 硅胶快速柱, 以35 mL/min的0~60% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液) 并浓缩以提供作为黄色固体的中间体C (80 mg, 99.14 μmol, 58.25%收率)。LCMS(ESI) m/z= [M+H]+ =653.2/655.1
步骤2: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3',5'-二氯-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 51)的制备
Figure 995167DEST_PATH_IMAGE366
向中间体C (65.19 mg, 80.78 μmol)在DCM (2 mL)中的溶液添加TFA (616.00mg, 5.40 mmol, 0.4 mL)。在25℃下搅拌该混合物1.5小时。在减压下浓缩该反应混合物以除去溶剂。通过制备型HPLC纯化残余物 (FA条件: 柱: Phenomenex Synergi C18150x25x10um；流动相: [水(0.225% FA)-ACN]；B%: 26%-56%,10 min) 并冻干以提供作为白色固体的化合物 51 (30.5 mg, 50.87 μmol, 62.98%收率, FA盐) 。LCMS (ESI) m/z=[M+H]+ =553.4. 1H NMR (400MHz, DMSO) δ = 9.06-9.04 (m, 1H), 8.26 (d, J = 10.6Hz, 2H), 7.99 (br d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.82 (d, J= 1.6 Hz, 2H), 7.78 (br d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.72 (br d, J = 7.2 Hz, 1H),7.68-7.63 (m, 1H), 7.62-7.53 (m, 2H), 7.51-7.43 (m, 1H), 4.22 (br d, J = 5.6Hz, 2H), 2.87 (s, 2H), 1.32 (s, 6H) ppm。
实施例59. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3'-氰基-5'-(羟甲基)-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 52)的制备
Figure 604003DEST_PATH_IMAGE367
步骤1: 3'-(2-(2-(3-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)-5-氰基-[1,1'-联苯]-3-甲酸 (中间体C)的制备
Figure 839812DEST_PATH_IMAGE368
在25℃下在N2下向N-[2-甲基-2-[3-[[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酰基]苯基]丙基]氨基甲酸叔丁酯 (根据实施例57中的方法制备) (100 mg, 157.58 μmol), 3-溴-5-氰基-苯甲酸(35.62 mg, 157.58 μmol)和K3PO4 (100.35 mg, 472.74 μmol)在二氧杂环己烷 (0.8 mL)和H2O (0.2 mL)中的溶液添加二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (10.27 mg, 15.76 μmol)。在80℃下在N2下搅拌该反应混合物5小时。用水 (10 mL)稀释该反应混合物并用EA(10 mL x 3)萃取。丢弃有机层并用HCl (1 M)调节水层的pH至4，并然后用EA (10 mLx2)萃取，在真空下浓缩合并的有机层以提供作为棕色油的中间体C (100 mg, 114.72 μmol,72.80%收率, 75%纯度)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=654.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ= 13.75 - 13.57 (m, 1H), 12.51 - 12.43 (m, 1H), 8.93 - 8.91 (m, 1H), 8.44 -8.44 (m, 1H), 8.30 - 8.29 (m, 1H), 8.01 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.92 - 7.89 (m,1H), 7.86 (s, 1H), 7.81 - 7.71 (m, 3H), 7.60 - 7.60 (m, 1H), 7.55 (d, J = 9.2Hz, 1H), 7.43 - 7.42 (m, 1H), 6.77 - 6.68 (m, 1H), 4.21 (d, J = 5.6 Hz, 2H),3.92 (s, 1H), 3.16 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 1.34 (s, 9H), 1.26 (s, 6H) ppm。
步骤2: (2-(3-((2-((4-(3'-氰基-5'-(羟甲基)-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)苯基)-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体D)的制备
Figure 850494DEST_PATH_IMAGE369
在0℃下向中间体C (100 mg, 114.72 μmol)和Et3N (17.41 mg, 172.09 μmol,23.95 u)在THF (1 mL)中的溶液逐滴添加氯甲酸异丁酯 (18.80 mg, 137.67 μmol,18.08 μL)。在25℃下搅拌该反应混合物1小时。然后在0℃下依次添加 MeOH (0.2 mL),和NaBH4 (39.06 mg, 1.03 mmol)。将该反应混合物温热至25℃和在25℃下搅拌1小时。用水(10 mL)淬灭该反应混合物并用EA (10 mLx2)萃取，浓缩合并的有机层以提供黄色残余物。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (ISCO®；12 g SepaFlash® 硅胶快速柱, 以35 mL/min的0~100% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液), 浓缩以提供作为浅黄色油的中间体D (30mg, 44.59 μmol, 38.86%收率, 95.08%纯度) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=640.5. 1H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.47 (br s, 1H), 8.93 - 8.92 (m, 1H), 8.26 (s, 1H),8.10 (s, 1H), 8.03 - 7.96 (m, 2H), 7.88 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.79 - 7.68(m, 3H), 7.61 - 7.52 (m, 2H), 7.47 - 7.37 (m, 1H), 6.77 - 6.68 (m, 1H), 5.55- 5.46 (m, 1H), 4.65 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.20 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.16 (d,J = 6.0 Hz, 2H), 1.33 (s, 9H), 1.25 (s, 6H) ppm。
步骤3: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3'-氰基-5'-(羟甲基)-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 52)的制备
Figure 818450DEST_PATH_IMAGE370
在25℃下搅拌中间体D (30 mg, 46.89 μmol)在DCM (1 mL)和TFA (0.5 mL)中的溶液2小时。在真空下浓缩该反应混合物。用MeOH和H2O稀释该残余物，然后冻干以提供作为灰色固体的化合物 52 (22.47 mg, 31.30 μmol, 66.75%收率, 91.05%纯度, TFA)。LCMS(ESI) m/z [M+H]+=540.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.49 (s, 1H), 8.99 -8.98 (m, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.99 - 7.94 (m, 2H),7.86 - 7.81 (m, 2H), 7.76 (s, 1H), 7.71 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.69 - 7.61 (m,4H), 7.60 - 7.55 (m, 1H), 7.54 - 7.49 (m, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.23 (d, J = 6.0Hz, 2H), 3.12 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 1.39 (s, 6H) ppm。
实施例60. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3'-(羟甲基)-5'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 53)的制备
Figure 914582DEST_PATH_IMAGE371
步骤1: (2-(3-((2-((4-(3'-(羟甲基)-5'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)苯基)-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 422923DEST_PATH_IMAGE372
向[3-溴-5-(三氟甲基)苯基]甲醇 (100 mg, 392.11 μmol)、N-[2-甲基-2-[3-[[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酰基]苯基]丙基]氨基甲酸叔丁酯 (根据实施例57中的方法制备)(248.83 mg, 392.11 μmol)和K3PO4 (249.69 mg, 1.18 mmol)在二氧杂环己烷 (2 mL)和H2O (0.2 mL)中的溶液添加二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (25.56 mg, 39.21 μmol)。然后在80℃下在N2下搅拌该混合物12小时。用水 (10 mL)稀释该反应混合物并用乙酸乙酯 (5 mL x3)萃取。在减压下浓缩合并的有机相以提供残余物。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (ISCO®；40 g SepaFlash® 硅胶快速柱, 以40 mL/min的0~50% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液) 并浓缩以提供作为黄色油的中间体C (70 mg, 102.53 μmol,26.15%收率)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ =683.5。
步骤2: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3'-(羟甲基)-5'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 53)的制备
Figure 553690DEST_PATH_IMAGE373
向中间体C (90 mg, 131.82 μmol)在DCM (1 mL)中的溶液添加TFA (1 mL)。在25℃下搅拌该混合物12小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过反相 (FA条件)纯化该残余物并冻干以提供作为粉红色固体的化合物 53 (32.99 mg, 46.84 μmol,35.53%收率, 98.91%纯度, TFA)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ =583.4. 1H NMR (400MHz,DMSO-d6) δ = 8.96 (s, 1H), 8.26 (s, 2H), 8.00 - 7.95 (m, 2H), 7.90 (m, 2H),7.83 (s, 1H), 7.77 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.73 - 7.68 (m, 2H), 7.61 - 7.56 (m,2H), 7.49 - 7.44 (m, 1H), 4.70 (s, 2H), 4.22 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 2.87 - 2.87(m, 1H), 2.86 (s, 1H), 2.87 - 2.83 (m, 1H), 1.32 (s, 6H) ppm。
实施例61. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3'-氯-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 54)的制备
Figure 692548DEST_PATH_IMAGE374
步骤1: (2-(3-((2-((4-(3'-氯-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)苯基)-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 275976DEST_PATH_IMAGE375
在N2下向N-[2-[3-[[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酰基]苯基]-2-甲基丙基]氨基甲酸叔丁酯 (根据实施例56中的方法制备) (100 mg,170.20 μmol)和(3-氯苯基)硼酸 (53.23 mg, 340.40 μmol)在二氧杂环己烷 (1 mL)和水(0.1 mL)中的溶液添加 K3PO4 (108.39 mg, 510.60 μmol)和二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (11.09 mg, 17.02 μmol)。然后将该反应混合物加热至80℃和在80℃下搅拌12小时。向该反应混合物添加水 (5 mLx1) 并用EtOAc (3 mLx3)萃取，在真空下浓缩合并的有机层。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (ISCO；40 g SepaFlash 硅胶快速柱, 以40 mL/min的0~94% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液) 并浓缩以提供作为黄色固体的中间体C (40mg, 63.12 μmol, 37.08%收率)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ = 619.4。
步骤2: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3'-氯-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 54)的制备
Figure 525692DEST_PATH_IMAGE376
在0℃下向中间体C (40 mg, 64.60 μmol)在DCM (3.5 mL)中的溶液添加TFA(1.54 g, 13.51 mmol, 1 mL)，然后在25℃下搅拌该反应混合物12小时。在真空下浓缩该反应混合物以除去DCM和TFA。通过反相 (FA条件)纯化该残余物并冻干以提供作为白色固体的化合物 54 (23.39 mg, 38.78 μmol, 60.04%收率, FA盐)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ = 519.0. 1H NMR (400MHz, DMSO) δ = 9.00-8.96 (m, 1H), 8.34-8.28 (m, 1H),8.23-8.21 (m, 1H), 7.96-7.91 (m, 2H), 7.83 (s, 1H), 7.79-7.76 (m, 2H), 7.71-7.65 (m, 2H), 7.59-7.52 (m, 3H), 7.48 -7.44 (m, 2H), 4.22-4.21 (d, J = 5.6Hz, 2H), 2.89-2.85 (m, 2H), 1.32 (s, 6H) ppm。
实施例62. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3'-氰基-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 55)的制备
Figure 573282DEST_PATH_IMAGE377
步骤1: (2-(3-((2-((4-(3'-氰基-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)苯基)-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 883041DEST_PATH_IMAGE378
向N-[2-[3-[[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酰基]苯基]-2-甲基丙基] 氨基甲酸叔丁酯 (根据实施例56中的方法制备) (100 mg, 170.20 μmol)和(3-异氰基苯基)硼酸 (37.51 mg, 255.30 μmol)在二氧杂环己烷 (1.5 mL)和H2O(0.1 mL)中的溶液添加K3PO4 (108.39 mg, 510.60 μmol)和二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (11.09 mg, 17.02 μmol)。在75℃下在N2下搅拌该混合物12小时。用水 (10 mL)稀释该反应混合物并用乙酸乙酯 (10 mLx3)萃取。在减压下浓缩有机相以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=20/1至1:1) 并在真空下浓缩以提供作为黄色固体的中间体C (90 mg, 147.60 μmol, 86.72%收率)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ =610.1. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.44 (s, 1H), 8.94 - 8.92 (m, 1H), 8.25(d, J = 12.8 Hz, 2H), 8.12 - 8.05 (m, 1H), 7.97 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.91 -7.82 (m, 3H), 7.78 - 7.67 (m, 3H), 7.61 - 7.51 (m, 2H), 7.46 - 7.37 (m, 1H),6.75 - 6.66 (m, 1H), 4.21 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.16 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 1.38- 1.22 (m, 18H) ppm
步骤2: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3'-氰基-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 55)的制备
Figure 953765DEST_PATH_IMAGE379
向中间体C (90.00 mg, 147.60 μmol)在DCM (2.25 mL)中的溶液添加TFA (0.45mL)。然后在30℃下搅拌该混合物2小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物并冻干以提供作为灰白色固体的化合物 55 (94.85 mg, 145.98 μmol, 98.90%收率, 95.98%纯度, TFA)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ =510.4. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.54 (s,1H), 9.06 - 9.01 (m, 1H), 8.31 (d, J = 12.8 Hz, 2H), 8.15 (bd, J = 8.0 Hz,1H), 8.06 - 8.00 (m, 2H), 7.96 - 7.88 (m, 3H), 7.81 - 7.75 (m, 2H), 7.72 -7.57 (m, 5H), 4.29 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.22 - 3.15 (m, 2H), 1.46 (s, 6H)ppm。
实施例63. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-(2-(N-甲基乙酰胺基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 56)的制备
Figure 7171DEST_PATH_IMAGE380
步骤1: (2-甲基-2-(3-((2-氧代-2-((4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酰基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(中间体C)的制备
Figure 912198DEST_PATH_IMAGE381
将N-[2-[3-[[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酰基]苯基]-2-甲基丙基]氨基甲酸叔丁酯 (2 g, 3.40 mmol) (根据实施例56中的方法制备)、KOAc (1.00 g, 10.21 mmol)、二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (443.72 mg, 680.82μmol)和4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷) (1.30 g,5.11 mmol)在二氧杂环己烷 (20 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在80℃下在N2 气氛下用搅拌该混合物2小时。通过添加NH4Cl水溶液 (150 mL)淬灭该反应混合物，和然后用EA (150 mL)稀释并用EA (150 mL x 2)萃取。用盐水 (150 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过快速硅胶层析法纯化该残余物(ISCO；80 g SepaFlash 硅胶快速柱, 以60 mL/min的0~60% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液) 并浓缩以提供作为红色固体的中间体C (2 g, 2.68 mmol, 78.70%收率)。LCMS (ESI)m/z [M+H]+=635.5。
步骤2: (2-甲基-2-(3-((2-((4-(3-(2-(N-甲基乙酰胺基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体E)的制备
Figure 392858DEST_PATH_IMAGE382
在N2下向N-(4-溴-2-吡啶基)-N-甲基-乙酰胺 (50 mg, 218.27 μmol) (根据FG-A1639中的方法制备)、中间体C (138.51 mg, 218.27 μmol)和二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (14.23 mg, 21.83 μmol)在二氧杂环己烷 (1.2 mL)和水(0.3 mL)中的溶液添加K3PO4 (138.99 mg, 654.81 μmol)，在80℃下搅拌该混合物2小时。用水 (10 mL)稀释该反应混合物并用EtOAc (10 mL x 3)萃取。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相(FA)纯化该残余物并在减压下浓缩以除去MeCN, 并用EtOAc (50 mL x 2)萃取。用盐水 (50 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为棕色油的中间体E (80 mg, 105.84 μmol, 48.49%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=657.6。
步骤3: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-(2-(N-甲基乙酰胺基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 56)的制备
Figure 685299DEST_PATH_IMAGE383
向中间体E (60 mg, 79.38 μmol)在DCM (1 mL)中的溶液添加TFA (90.51 mg,793.77 μmol, 58.77 μL)和在30℃下搅拌2小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过反相(FA)纯化该残余物并冻干以提供作为白色固体的化合物 56 (15.47 mg,24.98 μmol, 31.47%收率, FA盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=557.3. 1H NMR (400 MHz,MeOD) δ = 8.56-8.54 (m, 2H), 8.33 (s, 1H), 8.04-7.99 (m, 2H), 7.83-7.81 (m,2H), 7.75-7.73 (m, 2H), 7.67 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.59-7.51 (m, 3H), 4.34 (s,2H), 3.40 (s, 3H), 3.13 (s, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.46 (s, 6H) ppm。
实施例64. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-(2-(甲基氨基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 57)的制备
Figure 542397DEST_PATH_IMAGE384
在30℃下搅拌N-[2-[3-[[2-[[4-[3-[2-[乙酰基(甲基)氨基]-4-吡啶基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代乙基] 氨基甲酰基]苯基]-2-甲基-丙基]氨基甲酸叔丁酯 (60 mg,91.35 μmol)在4 M HCl/二氧杂环己烷 (2 mL)中的溶液1小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过反相(FA)纯化该残余物并冻干以提供作为白色固体的化合物 57(13.66 mg, 24.12 μmol, 26.40%收率, 99%纯度, FA)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 515.3.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.05 - 9.02 (m, 1H), 8.29 (s, 2H), 8.17 (s, 1H),8.07 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.96 - 7.92 (m, 2H), 7.79 - 7.77 (m, 2H), 7.61 -7.45 (m, 4H), 6.82 - 6.80 (m, 1H), 6.70 (s, 1H), 6.56 (d, J = 4.8 Hz, 1H),4.21 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 2.93 (s, 2H), 2.82 (d, J = 4.4 Hz, 3H), 1.33 (s,6H) ppm。
实施例65. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 58)的制备
Figure 299000DEST_PATH_IMAGE385
步骤1: (2-甲基-2-(3-((2-氧代-2-((4-(3-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酰基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 950561DEST_PATH_IMAGE386
向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-(三氟甲基)吡啶(60.00 mg, 219.73 μmol)、N-[2-[3-[[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酰基]苯基]-2-甲基-丙基]氨基甲酸叔丁酯 (根据实施例56中的方法制备)(107.58 mg, 183.11 μmol)在二氧杂环己烷 (3 mL)和H2O (0.3 mL)中的混合物添加K3PO4(155.47 mg, 732.44 μmol)和二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (11.93 mg, 18.31 μmol)，用N2将该混合物脱气三次，然后在85℃下在N2下搅拌2小时。在真空下浓缩该反应混合物以提供残余物，然后用水 (20 mL)稀释，用EA (35 mLx3)萃取，用盐水 (25 mLx2)洗涤合并的有机相，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相HPLC (0.1% FA条件)纯化该残余物，冻干级分以提供作为白色固体的中间体C (75 mg, 105.04 μmol,57.36%收率, 98%纯度, FA)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 654.6。
步骤2: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 58)的制备
Figure 995878DEST_PATH_IMAGE387
在25℃下在N2下搅拌中间体C (70 mg, 100.04 μmol, FA)在HCl/二氧杂环己烷(4 M, 2.80 mL)中的混合物0.5小时。在真空下浓缩该反应混合物以提供残余物。在25℃下用MTBE (20 mL)研磨粗产物15分钟，过滤并在真空下干燥固体以提供作为黄色固体的化合物 58 (56.10 mg, 95.08 μmol, 95.04%收率, 100%纯度, HCl)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 554.4. 1H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ = 8.78(d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.37-8.37(m,1H), 8.13(s, 1H), 8.08-8.05(m, 1H), 8.01-8.00(m, 2H), 7.86-7.84(m, 1H), 7.78-7.76(m, 1H), 7.71-7.68(m, 1H), 7.62-7.54(m, 3H), 4.34(s, 2H), 3.25(s, 2H),1.50(s, 6H) ppm。
实施例66. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-(2-氨基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 59)的制备
Figure 391087DEST_PATH_IMAGE388
步骤1: (2-(3-((2-((4-(3-(2-氨基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)苯基)-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 939880DEST_PATH_IMAGE389
向4-溴吡啶-2-胺 (35.99 mg, 208.01 μmol)、N-[2-甲基-2-[3-[[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酰基]苯基]丙基]氨基甲酸叔丁酯 (根据实施例57中的方法制备) (110 mg,173.34 μmol)在二氧杂环己烷 (4 mL)和H2O (0.4 mL)中的混合物添加 K3PO4 (147.18mg, 693.36 μmol)和二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (11.30 mg, 17.33 μmol)，用N2将该混合物脱气三次和然后在85℃下在N2下搅拌2小时。在真空下浓缩该反应混合物, 用水 (20 mL)稀释该残余物，用EA (35 mLx3)萃取，用盐水 (25 mLx2)洗涤合并的有机相，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相HPLC (0.1% FA条件)纯化该残余物并冻干以提供作为白色固体的中间体C (80 mg, 122.46 μmol, 70.65%收率, 99%纯度,FA) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 601.6。
步骤2: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-(2-氨基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 59)的制备
Figure 90238DEST_PATH_IMAGE390
在25℃下在N2下搅拌中间体C (80 mg, 123.69 μmol, FA)在HCl/二氧杂环己烷(4 M, 3 mL)中的混合物0.5小时。在真空下浓缩该反应以提供粗产物。在25℃下用 MTBE(15 mL)研磨粗产物15分钟，过滤并在真空中干燥该固体以提供作为黄色固体的化合物 59(63.25 mg, 115.41 μmol, 93.30%收率, 98%纯度, HCl)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=501.4. 1H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ = 8.30-8.29(m, 1H), 8.12(d, J=7.6, 1H),8.01-8.00(m, 1H), 7.94-7.92(m, 1H), 7.86-7.84(m, 1H), 7.72-7.68(m, 2H), 7.63-7.54(m, 3H), 7.29-7.28(m, 2H), 4.35(s, 2H), 3.26(s, 2H), 1.50(s, 6H) ppm。
实施例67. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-(2-(羟甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 60)的制备
Figure 357272DEST_PATH_IMAGE391
步骤1: (2-(3-((2-((4-(3-(2-(羟甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)苯基)-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 290593DEST_PATH_IMAGE392
向(4-溴-2-吡啶基)甲醇 (44.44 mg, 236.37 μmol)、N-[2-甲基-2-[3-[[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酰基]苯基]丙基]氨基甲酸叔丁酯 (根据实施例57中的方法制备) (100 mg,157.58 μmol)在二氧杂环己烷 (2 mL)中的混合物添加水(0.5 mL)、二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (20.54 mg, 31.52 μmol)和K3PO4 (100.35 mg, 472.74 μmol)。在100℃下搅拌该混合物2小时。将该混合物倾倒入水 (20 mL)中，然后用EA (5 mLx3)萃取。用水(10 mLx3) 和盐水 (10 mLx2)洗涤合并的有机层，然后经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为浅黄色固体的中间体C (95 mg, 154.29 μmol, 97.91%收率)，其不经进一步纯化即直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+= 616.4. 1H NMR (400MHz, 氯仿-d) δ = 8.72 - 8.60 (m, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.90 - 7.81 (m, 1H),7.76 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.67 - 7.47 (m, 6H), 7.46 - 7.37 (m, 1H), 7.24 (s,1H), 4.91 (s, 2H), 4.62 - 4.36 (m, 3H), 3.55 - 3.11 (m, 2H), 1.35 (s, 13H)ppm。
步骤2: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-(2-(羟甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 60)的制备
Figure 959471DEST_PATH_IMAGE393
在30℃下搅拌中间体C (90 mg, 146.17 μmol)在DCM (3 mL)和TFA (1 mL)中的混合物2小时。在减压下浓缩该混合物。通过制备型HPLC纯化残余物 (柱: Luna C18150x25 5u；流动相: [水(0.075%TFA)-ACN]；B%: 5%- 35%,9min) 并冻干以提供作为黄色固体的化合物 60 (32.60 mg, 51.03 μmol, 34.91%收率, 98.56%纯度, TFA)。LCMS(ESI) m/z= [M+H]+ = 516.3. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.54 (s, 1H), 9.01-8.98 (m, 1H), 8.74 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.14 - 8.07 (m, 2H),8.02 - 7.94 (m, 2H), 7.90 - 7.81 (m, 3H), 7.75 - 7.62 (m, 5H), 7.56 - 7.49(m, 1H), 4.82 (s, 2H), 4.24 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.13 (d, J = 5.6 Hz, 2H),1.40 (s, 6H) ppm。
实施例68. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-(2-((二甲基氨基)甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 61)的制备
Figure 280731DEST_PATH_IMAGE394
步骤1: 1-(4-溴吡啶-2-基)-N,N-二甲基甲胺 (中间体B)的制备
Figure 769481DEST_PATH_IMAGE395
在0℃下向4-溴吡啶-2-甲醛 (500 mg, 2.69 mmol)在DCE (5 mL)中的溶液添加Me2NH (2 M, 1.61 mL)，然后添加NaBH(OAc)3 (1.71 g, 8.06 mmol)。在25℃下搅拌该混合物12小时。添加饱和NaHCO3 (20 mL)并用EA (50 mL x 2)萃取该反应混合物。用盐水 (20mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为白色固体的中间体B(400 mg, 1.62 mmol, 60.19%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 215.0。
步骤2: (2-(3-((2-((4-(3-(2-((二甲基氨基)甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)苯基)-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体D)的制备
Figure 772073DEST_PATH_IMAGE396
将N-[2-甲基-2-[3-[[2-氧代-2-[[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]氨基甲酰基]苯基]丙基]氨基甲酸叔丁酯 (根据实施例57中的方法制备) (100 mg, 157.58 μmol)、中间体B (40.67 mg, 189.10 μmol)、二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (10.27 mg, 15.76 μmol)和K3PO4 (100.35 mg,472.74 μmol)在二氧杂环己烷 (2 mL)和H2O (0.5 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在80℃下在N2 气氛下搅拌该混合物2小时。添加水(20 mL)并用EA (50 mL x 2)萃取该反应混合物。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相HPLC (0.1% FA条件)纯化该粗产物并冻干以提供作为白色固体的中间体D (30 mg, 41.54 μmol, 26.36%收率, 89%纯度)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 643.6。
步骤3: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-(2-((二甲基氨基)甲基)吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 61)的制备
Figure 295458DEST_PATH_IMAGE397
向中间体D (30 mg, 46.67 μmol)在MeOH (2 mL)中的溶液添加HCl/MeOH (2mL)。在25℃下搅拌该混合物2小时。在减压下浓缩该反应混合物以除去MeOH。在25℃下用MTBE (20 mL)研磨粗产物10分钟，过滤并在真空下干燥以提供作为黄色固体的化合物 61(25.57 mg, 43.27 μmol, 92.71%收率, 98%纯度, HCl)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =543.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.50 (s, 1H), 10.51 (s, 1H), 9.07 (s,1H), 8.76 (d, J=5.2 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.09-8.03 (m, 2H), 7.98 (s, 1H),7.87 (d, J=3.2 Hz, 2H), 7.82 (d, J=6.4 Hz, 4H), 7.65-7.62 (m, 2H), 7.51-7.47(m, 1H), 4.53 (s, 2H), 4.23 (d, J=5.6 Hz, 2H), 3.10 (d, J=5.6 Hz, 2H), 2.84(s, 6H), 1.40 (s, 6H) ppm。
实施例69. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-((((1R,4R)-4-羟基环己基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 62)的制备
Figure 459723DEST_PATH_IMAGE398
步骤1: (2-(3-((2-((4-(3-((((1r,4r)-4-羟基环己基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)苯基)-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 763665DEST_PATH_IMAGE399
向2-氨基-N-[4-[3-[(4-羟基环己氧基)甲基]苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (根据实施例22中的方法制备) (100.00 mg, 276.66 μmol)、3-[2-(叔丁氧基羰基氨基)-1,1-二甲基-乙基]苯甲酸 (97.39 mg, 331.99 μmol)、DIEA (178.78 mg, 1.38 mmol, 240.94 μL)在DCM (1 mL)中的溶液添加 EDCI (63.64 mg, 331.99 μmol)和HOBt (44.86 mg, 331.99μmol)。在20℃下搅拌该混合物16小时。用水 (2 mL)稀释该反应混合物并用EA (3 mLx3)萃取。用盐水 (4 mLx2)洗涤合并的有机层和经无水 Na2SO4干燥。过滤该混合物并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相HPLC (0.1% FA条件)纯化该残余物。用EA (15 mLx3)萃取该溶液。用盐水 (20 mLx3)洗涤合并的有机层和经无水 Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为白色固体的中间体C (20 mg, 27.21 μmol, 9.84%收率, 86.65%纯度)。LCMS (ESI)m/z [M+H]+= 637.3。
步骤2: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-((((1r,4r)-4-羟基环己基)氧基)甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 62)的制备
Figure 304368DEST_PATH_IMAGE400
在20℃下搅拌中间体C (20.00 mg, 31.41 μmol)在HCl/二氧杂环己烷 (0.2 mL)中的溶液1小时。在20℃下用MTBE (2 mL)研磨该反应混合物5分钟。然后, 过滤该混合物并用MTBE (3 mLx3)洗涤以提供残余物。通过反相HPLC (0.1% FA条件)纯化该残余物并冻干以提供作为白色固体的化合物 62 (15 mg, 25.19 μmol, 80.21%收率, 97.865%纯度,FA)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 537.3. 1H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ = 8.50 (s, 1H),8.00 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.85 - 7.81 (m, 2H), 7.69 (, J = 8.8 Hz, 1H),7.57 - 7.53 (m, 1H), 7.40 - 7.36 (m, 2H), 7.30 - 7.28 (m, 1H), 4.59 (s, 2H),4.34 (s, 2H), 3.64 - 3.57 (m, 1H), 3.49 - 3.41 (m, 1H), 3.24 (s, 2H), 2.10 -2.07 (m, 2H), 1.97 - 1.94 (m, 2H), 1.50 (s, 6H), 1.44 - 1.30 (m, 4H) ppm。
实施例70. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-5-甲基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 63)的制备
Figure 682260DEST_PATH_IMAGE401
步骤1: 3-(2-氰基丙烷-2-基)-5-甲基苯甲酸 (中间体B)的制备
Figure 283005DEST_PATH_IMAGE402
在0℃下向3-(氰基甲基)-5-甲基-苯甲酸甲酯 (3.45 g, 18.23 mmol)在THF (40mL)中的溶液添加NaH (4.38 g, 109.40 mmol, 60%纯度)和在25℃ 下搅拌0.5小时。然后在0℃下将MeI (12.94 g, 91.17 mmol, 5.68 mL)添加至该混合物。在25℃下搅拌该混合物16小时。在0℃下用柠檬酸水溶液 (50 mL)淬灭该反应混合物并用EA (100 mL x 2)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=1/0至1/1)，并然后在真空下浓缩以提供作为黄色油的中间体B (1.5 g, 7.38 mmol, 40.48%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 204.1. 1H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ = 13.08 (br s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.60 (s,1H), 2.40 (s, 3H), 1.69(s, 6H) ppm。
步骤2: 3-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙烷-2-基)-5-甲基苯甲酸 (中间体C)的制备
Figure 808665DEST_PATH_IMAGE403
在0℃下向中间体B (1.5 g, 7.38 mmol)在MeOH (30 mL)中的溶液添加NiCl2•6H2O (4.39 g, 18.45 mmol)和NaBH4 (2.79 g, 73.81 mmol)和在30℃下搅拌2小时。然后将二碳酸二叔丁酯 (4.83 g, 22.14 mmol, 5.09 mL)添加至该混合物并搅拌另外的16小时。用MeOH/H2O=1/1(30 mL)稀释该反应混合物，过滤并浓缩以除去MeOH并然后用EA (40mL x2)萃取。丢弃有机层并采用1M HCl调节水相至pH=4并然后用EA (50 mL x2)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供粗物质。通过反相 (0.1% FA条件)纯化该粗物质，然后浓缩洗脱物以除去ACN并用EA (40 mL x2)萃取，经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供作为白色固体的中间体C (550 mg, 1.79mmol, 24.24%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+ Na]+= 330.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ= 12.77 (br s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 6.74-6.71 (m,1H), 3.12 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H), 1.32-1.22 (m, 15H) ppm。
步骤3: (2-甲基-2-(3-甲基-5-((2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酰基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体E)的制备
Figure 153058DEST_PATH_IMAGE404
向中间体C (150 mg, 487.99 μmol)和2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (根据实施例3中的方法制备) (169.25 mg, 487.99 μmol, HCl)在DMF (2mL)中的溶液添加DIEA (315.34 mg, 2.44 mmol, 424.98 μL)，然后将EDCI (140.32 mg,731.98 μmol)和HOBt (79.12 mg, 585.59 μmol)添加至该混合物。在30℃下搅拌该混合物16小时。向该反应混合物添加H2O (0.5 mL) 并形成白色沉淀物。通过过滤收集沉淀物，用CH3CN (5 mL)洗涤滤饼并在高真空下干燥以提供作为白色固体的中间体E (210 mg,350.15 μmol, 71.75%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 600.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.44 (s, 1H), 8.88 - 8.86 (m, 1H), 8.68 - 8.67 (m, 2H), 8.30 (s,1H), 8.00 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.77-7.75 (m, 3H), 7.59 (s, 1H),7.59-7.55 (m, 2H), 7.36 (s, 1H), 6.72-6.69(m, 1H), 4.20 (d, J = 5.6 Hz, 2H),3.16 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 1.34-1.24 (m, 15H) ppm。
步骤4: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-5-甲基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 63)的制备
Figure 651036DEST_PATH_IMAGE405
在25℃下搅拌中间体E (210 mg, 350.15 μmol)在HCl/二氧杂环己烷 (4 M, 5mL)中的溶液1小时。通过过滤收集沉淀物；用MTBE (5 mL)洗涤滤饼并然后冻干以提供作为黄色固体的化合物 63 (169.39 mg, 310.95 μmol, 88.80%收率, 98.41%纯度, HCl)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 500.1. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ = 8.92 - 8.90 (m, 2H),8.52 - 8.47 (m, 3H), 8.20 - 8.15 (m, 1H), 7.94 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.82 -7.80 (m, 1H), 7.69 - 7.67(m, 3H), 7.51 (s, 1H), 4.36 (d, J = 5.6 Hz, 2H),3.25 (s, 2H), 2.46 (d, J = 2.0 Hz, 3H), 1.48 (s, 6H) ppm。
实施例71. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 64)的制备
Figure 157103DEST_PATH_IMAGE406
步骤1: 3-(2-氰基丙烷-2-基)苯甲酸甲酯 (中间体B)的制备
Figure 435638DEST_PATH_IMAGE407
在0℃下向3-(氰基甲基)苯甲酸甲酯 (5.00 g, 28.54 mmol)在无水 THF (50mL)中的溶液添加NaH (2.85 g, 71.35 mmol, 60%纯度)。在0℃下搅拌该混合物0.5小时。然后添加 MeI (10.13 g, 71.35 mmol, 4.44 mL)。在0℃下搅拌该混合物1.5小时。将该反应混合物倾倒入水 (50 mL)中，然后用EA (50 mL×2)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩以提供残余物。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (ISCO；20g SepaFlash 硅胶快速柱, 以40 mL/min的0~30% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液) 以提供作为无色油的中间体B (2.5 g, 10.68 mmol, 37.41%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=204.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ= 8.08-8.07 (m, 1H), 7.95-7.93 (m, 1H), 7.83-7.81 (m, 1H), 7.63-7.58 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 1.72 (s, 6H) ppm。
步骤2: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酸甲酯 (中间体C)的制备
Figure 318143DEST_PATH_IMAGE408
在冰浴下向中间体B (1.00 g, 4.92 mmol)在MeOH (10 mL)中的溶液添加NiCl2.6H2O (2.92 g, 12.30 mmol)和NaBH4 (3.72 g, 98.41 mmol)。在30℃下搅拌该反应混合物17小时和然后用EA (50 mL)稀释并过滤以除去固体。将有机层倾倒入饱和NaHCO3水溶液 (50 mL)中，然后通过EA (50 mL x 4)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩以提供作为黄色油的中间体C (800 mg, 3.38 mmol, 68.65%收率)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 208.1。
步骤3: 3-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酸甲酯 (中间体D)的制备
Figure 670627DEST_PATH_IMAGE409
向中间体C (300.00 mg, 1.45 mmol)在DCM (3 mL)中的溶液添加DMAP (35.37mg, 289.48 μmol)和Boc2O (631.78 mg, 2.89 mmol, 665.03 μL)。在30℃下搅拌该反应混合物17小时。将该反应混合物倾倒入水 (10 mL)中，然后用EA (10 mL×2)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩以提供作为黄色油的粗产物中间体D(300 mg, 370.87 μmol, 25.62%收率)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H-56]+ = 252.1。
步骤4: 3-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酸 (中间体E)的制备
Figure 347596DEST_PATH_IMAGE410
向中间体D (300.00 mg, 370.87 μmol)在THF (2 mL)中的溶液添加H2O (1 mL)、MeOH (1 mL)和NaOH (29.67 mg, 741.74 μmol)。在30℃下搅拌该反应混合物2小时。用1MHCl水溶液将该反应混合物调节至pH =7。通过反相HPLC (FA)纯化该混合物以提供作为黄色油的中间体E (100 mg, 285.56 μmol, 77.00%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H-56]+ =238.1。
步骤5: (2-甲基-2-(3-((2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酰基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体G)的制备
Figure 847848DEST_PATH_IMAGE411
向中间体E (90 mg, 306.79 μmol)在DMF (1 mL)中的溶液添加EDCI (73.52 mg,383.49 μmol)、HOBt (51.82 mg, 383.49 μmol)和DIPEA (99.13 mg, 766.98 μmol,133.59 μL)。在30℃下搅拌该反应混合物5分钟。然后添加2-氨基-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺 盐酸盐 (88.67 mg, 255.66 μmol)。在30℃下搅拌该反应混合物17小时。将该反应混合物倾倒入水 (10 mL)中，形成白色固体，过滤白色固体。并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体G (100 mg, 129.76 μmol, 50.75%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 586.2。
步骤6: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 64)的制备
Figure 534044DEST_PATH_IMAGE412
在25℃下搅拌中间体G (100 mg, 170.73 μmol)在HCl/EtOAc (1 mL)中的溶液3小时。浓缩该反应混合物以提供黄色残余物。采用DMSO (3 mL)溶解该残余物，然后通过制备型HPLC纯化 (Xtimate C18 150x25 mmx5 um；流动相:[水(0.05% 氢氧化铵 v/v)-ACN]；B%: 29%-59%, 1 min), 浓缩, 然后冻干以提供作为灰白色固体的化合物 64 (34.28 mg,70.59 μmol, 41.35%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 486.3. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ= 8.93-8.91 (m, 1H), 8.70-8.65 (m, 2H), 8.30 (s, 1H), 8.01 (d, J = 8.0 Hz,1H), 7.88 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.78-7.73 (m, 3H), 7.72 (s, 1H), 7.61-7.60(m, 1H), 7.56-7.52 (m, 1H), 7.47-7.40 (m, 1H), 4.20 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 2.71(s, 2H), 1.27 (s, 6H) ppm。
实施例72. (S)-3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丙烷-2-基)苯甲酰胺 (化合物 65)的制备
Figure 741034DEST_PATH_IMAGE413
步骤1: (S)-(1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 854484DEST_PATH_IMAGE414
向4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-胺 (根据实施例16中的方法制备) (200 mg,789.51 μmol)和(2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基) 丙酸 (224.07 mg, 1.18 mmol)在DCM (20mL)中的溶液添加EEDQ (390.48 mg, 1.58 mmol)，在30℃下搅拌该混合物16小时。用H2O(10 mL)稀释该反应混合物并用EA (10 mL x 2)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。将该残余物在MTBE (5 mL)中制浆，过滤并在真空下干燥以提供作为黄色固体的中间体C (180 mg, 424.01 μmol, 53.71%收率) 。LCMS (ESI) m/z[M+H]+ =425.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 12.31 (br s, 1H), 8.68-8.66 (m, 2H),8.30 (s, 1H), 8.01 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.76-7.74 (m, 4H), 7.60-7.59 (m, 1H),7.20 (m, 1H), 4.30-4.20 (m, 1H), 2.46-2.45 (m, 3H), 1.39 (s, 9H) ppm. 手性SFC_外消旋体 (EW9897-424-P1A_3): Rt=1.704,2.354min, ee值 =8.27%, OJ-3_5CM_MEOH(DEA)_5_40_3ML_AT35.M. 手性SFC (EW9897-424-P1A1_1): Rt=1.702min, ee值 =100%, OJ-3_5CM_MEOH(DEA)_5_40_3ML_AT35.M
步骤2: (S)-2-氨基-N-(4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)丙酰胺 (中间体D)的制备
Figure 779715DEST_PATH_IMAGE415
在30℃下搅拌中间体C (180 mg, 424.01 μmol)在HCl/二氧杂环己烷 (4 M, 5mL)中的溶液2小时。在真空下浓缩该反应混合物以提供作为黄色固体的中间体D (220 mg,粗物质, HCl盐)，其直接用于接下来的步骤。1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 12.90 (br s,1H), 9.01 (br d, J = 6.4 Hz, 2H), 8.59-8.42 (m, 6H), 8.16 (br d, J = 8.0 Hz,1H), 8.02-7.99 (m, 2H), 7.73-7.71 (m, 1H), 4.05-3.98 (m, 1H), 1.58-1.45 (m,3H) ppm。
步骤3: (S)-(2-甲基-2-(3-((1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丙烷-2-基)氨基甲酰基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体F)的制备
Figure 63410DEST_PATH_IMAGE416
向中间体D (170 mg, 471.10 μmol, HCl盐)在DMF (2 mL)中的溶液添加3-[2-(叔丁氧基羰基氨基)-1,1-二甲基-乙基]苯甲酸 (根据实施例55中的方法制备) (138.20mg, 471.10 μmol)和DIEA (304.42 mg, 2.36 mmol, 410.27 μL)，然后将EDCI (135.46mg, 706.64 μmol)和HOBt (76.39 mg, 565.32 μmol)添加至该混合物。在30℃下搅拌该混合物16小时。用H2O (2 mL)稀释该反应混合物并用EA (2 mL x 2)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相 (0.1% FA条件)纯化该反应并冻干以提供作为白色固体的中间体F (40 mg, 66.70 μmol, 14.16%收率)。1H NMR (400MHz, MeOD) δ = 8.61-8.60 (m, 2H), 8.31 (s, 1H), 8.03 (d, J = 8.0 Hz, 1H),7.95 (s, 1H), 7.79-7.77 (m, 2H), 7.69-7.58 (m, 2H), 7.63-7.53 (m, 3H), 7.56-7.43 (m, 1H), 4.81-4.77 (m, 2H), 4.58 (s, 2H), 1.62 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.35(s, 15H) ppm. 手性SFC (EW9897-432-P1A_1): Rt=2.006min, ee值 =97.46%, AS-3-MeOH (DEA)-5-40-3mL-35T.lcm. 手性SFC_外消旋体 (EW9897-432-P1B_5): Rt=1.704,1.991min, ee值 =32.80%, AS-3-MeOH (DEA)-5-40-3mL-35T.lcm
步骤4: (S)-3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(1-氧代-1-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)丙烷-2-基)苯甲酰胺 (化合物 65)的制备
Figure 390486DEST_PATH_IMAGE417
在30℃下搅拌中间体F (40 mg, 66.70 μmol)在HCl/二氧杂环己烷 (4 M, 2 mL)中的溶液2小时。浓缩该反应混合物以除去溶剂以提供残余物。通过反相 (0.1% FA条件)纯化该残余物并冻干以提供作为白色固体的化合物 65 (19.85 mg, 35.48 μmol, 53.20%收率, FA盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =500.1. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ = 8.61-8.60(m, 2H), 8.53 (s, 1H), 8.32-8.31 (m, 1H), 8.01-7.98 (m, 2H), 7.97-7.79 (m,1H), 7.78- 7.76 (m, 2H), 7.58-7.56 (m, 2H), 7.55-7.53 (m, 3H), 4.83-4.77 (m,1H), 3.22 (s, 2H), 1.62-1.60 (m, 3H), 1.52-1.43 (m, 6H) ppm. 手性SFC_外消旋体(EW9897-435-P1A_13): Rt=1.814, 3.136min, ee值 =7.98%, AD-3-IPA(DEA)-40-3ML-7MIN-35T.lcm. 手性SFC (EW9897-435-P1B_3): Rt=1.779 min, ee值 =100%, AD-3-IPA(DEA)-40-3ML-7MIN-35T.lcm
实施例73. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 66)的制备
Figure 674837DEST_PATH_IMAGE418
步骤1: N-[2-[[4-[3-(2,6-二甲基-4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 821784DEST_PATH_IMAGE419
将N-[2-[[4-(3-溴苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (根据实施例2中的方法制备) (1 g, 2.43 mmol)、(2,6-二甲基-4-吡啶基)硼酸 (549.25 mg,3.64 mmol)、二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (158.08 mg, 242.54 μmol)、K3PO4(1.54 g, 7.28 mmol)在二氧杂环己烷 (18 mL)和H2O (2 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在80℃下在N2 气氛下搅拌该混合物2小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=1/1至0/1), 然后在真空下浓缩该级分以提供作为黄色固体的中间体C (0.96 g, 2.19 mmol, 90.26%收率)。LCMS(ESI) m/z= [M+H]+ = 439.2. 1H NMR (400MHz, MeOD) δ = 8.26 (s, 1H) 7.97 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.54-7.50 (m, 2H), 7.42 (s, 2H), 3.99(s, 2H), 2.57 (s, 6H), 1.48 (s, 9H) ppm。
步骤2: 2-氨基-N-[4-[3-(2,6-二甲基-4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (中间体D)的制备
Figure 912100DEST_PATH_IMAGE420
在25℃下搅拌中间体C (0.96 g, 2.19 mmol)在HCl/MeOH (4 M, 20 mL)中的混合物2小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。
在25℃下用MTBE: MeOH=20:1 (20 mL)研磨该残余物0.5h，然后通过过滤收集固体，用MTBE (10 mL)洗涤并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体D (900 mg, 粗物质, HCl)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ = 339.3。
步骤3: (2-(3-((2-((4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)苯基)-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体F)的制备
Figure 93683DEST_PATH_IMAGE421
向中间体D (100 mg, 266.75 μmol, HCl盐)在DCM (1 mL)中的溶液添加3-[2-(叔丁氧基羰基氨基)-1,1-二甲基-乙基]苯甲酸 (根据实施例55中的方法制备) (78.25mg, 266.75 μmol)和DIEA (206.85 mg, 1.60 mmol, 278.77 μL)，然后添加EDCI (76.70mg, 400.12 μmol)和HOBt (43.25 mg, 320.10 μmol)。在30℃下搅拌该混合物2小时。用H2O (2 mL)稀释该反应混合物并用EA (2 mL x 2)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相 (0.1% FA条件)纯化该残余物并浓缩以除去ACN，然后用EA (10 mLx2)萃取，经无水 Na2SO4干燥有机层，过滤并浓缩以提供作为白色固体的中间体F (85 mg, 138.49 μmol, 51.92%收率)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ = 614.3。
步骤4: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 66)的制备
Figure 548935DEST_PATH_IMAGE422
在30℃下搅拌中间体F (85 mg, 138.49 μmol)在HCl/EA (4 M, 5 mL)中的溶液0.5小时。在真空下浓缩该反应混合物。通过反相 (0.1% FA条件)纯化该残余物并冻干以提供作为灰白色固体的化合物 66 (30.92 mg, 58.93 μmol, 42.55%收率)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ = 514.3. 1H NMR (400MHz, MeOD) δ = 8.39 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.02-8.00 (m, 2H), 7.88 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.70-7.68 (m, 2H), 7.59-7.55 (m, 3H),7.46 (s, 2H), 4.36 (s, 2H), 3.27 (s, 2H), 2.60 (s, 6H), 1.51 (s, 6H) ppm。
实施例74. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 67)的制备
Figure 448758DEST_PATH_IMAGE423
步骤1: 7-溴-2-甲基异喹啉-1(2H)-酮 (中间体H)的制备
Figure 77185DEST_PATH_IMAGE424
在25℃下向7-溴-2H-异喹啉-1-酮 (22 g, 98.19 mmol)和Cs2CO3 (47.99 g,147.29 mmol)在DMA (400 mL)中的溶液添加MeI (20.91 g, 147.29 mmol, 9.17 mL)。在60℃下搅拌该混合物4小时。将该反应混合物倾倒入冰水 (500 mL)中。在0℃下用H2O (500mL)研磨粗产物10分钟，然后过滤并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体H (23 g,96.61 mmol, 98.39%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 240.0. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 8.55 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.68 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.38-7.36 (m, 1H),7.09-7.07 (m, 1H), 6.44 (d, J=7.2 Hz, 1H), 3.60 (s, 3H) ppm。
步骤2: 2-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)异喹啉-1(2H)-酮 (中间体B)的制备
Figure 113274DEST_PATH_IMAGE425
将中间体H (23 g, 96.61 mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷 (26.99 g, 106.27 mmol)、AcOK(28.44 g, 289.82 mmol)和Pd(dppf)Cl2 (3 g, 4.10 mmol)在二氧杂环己烷 (300 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在80℃下在N2 气氛下搅拌该混合物2小时。添加水(20 mL)并用EA (50 mL x 2)萃取该反应混合物。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为棕色固体的中间体B (30 g, 粗物质)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =286.3。
步骤3: (2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 739428DEST_PATH_IMAGE426
将N-[2-[(4-溴噻唑-2-基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (300 mg,892.31 μmol)、中间体B (381.66 mg, 1.34 mmol)、二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁(29.08 mg, 44.62 μmol)和K3PO4 (568.22 mg, 2.68 mmol)在二氧杂环己烷 (3 mL)和H2O(0.5 mL)中的混合物脱气和然后在N2下加热至100℃持续2小时。用H2O (2 mL)和EA (2 mL)稀释该反应混合物，然后过滤，和用EA (2 mL)洗涤滤饼并在真空下干燥以提供作为灰色固体的中间体C (200 mg, 479.11 μmol, 53.69%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =415.1。
步骤4: 2-氨基-N-(4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)乙酰胺 (中间体D)的制备
Figure 860967DEST_PATH_IMAGE427
向中间体C (200 mg, 482.54 μmol)在MeOH (1 mL)中的溶液添加HCl/二氧杂环己烷 (4 M, 2 mL)。在25℃下搅拌该混合物1小时。用MTBE (10 mL)稀释该反应混合物，然后过滤，和用MTBE (2 mL)洗涤滤饼并在真空下干燥以提供作为灰色固体的中间体D (180mg, 粗物质, HCl盐)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =315.2。
步骤5: (2-甲基-2-(3-((2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体E)的制备
Figure 230769DEST_PATH_IMAGE428
向3-[2-(叔丁氧基羰基氨基)-1,1-二甲基-乙基]苯甲酸 (根据实施例55中的方法制备) (90.31 mg, 307.85 μmol)、EDCI (59.02 mg, 307.85 μmol)、HOBt (41.60 mg,307.85 μmol)和DIEA (198.94 mg, 1.54 mmol, 268.11 μL)在DCM (2 mL)中的溶液添加中间体D (90 mg, 256.54 μmol, HCl盐)。在25℃下搅拌该混合物16小时。向该反应混合物添加饱和柠檬酸 (5 mL) 并用EA (3 mL x 3)萃取。用盐水 (3 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色固体的中间体E (150 mg, 粗物质)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =590.3。
步骤6: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 67)的制备
Figure 449261DEST_PATH_IMAGE429
在25℃下在N2 气氛下搅拌中间体E (150 mg, 254.37 μmol)在TFA (0.3 mL)和DCM (1.5 mL)中的混合物1小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过制备型HPLC纯化残余物 (柱: Luna C18 150x25 5u；流动相: [水(0.075% TFA)-ACN]；B%: 20%-50%, 9 min)。在减压下浓缩该级分以除去CH3CN，用饱和NaHCO3调节至pH = 8并用EA (20mL x 5)萃取。用盐水 (30 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供固体。用MTBE (1 mL)研磨该固体10分钟，然后过滤并用MTBE (1 mL)洗涤滤饼并在真空下干燥以提供作为黄色固体的化合物 67 (7.8 mg, 15.60 μmol, 6.13%收率)。LCMS(ESI) m/z [M+H]+ = 490.3. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ = 8.89 (d, J = 1.6 Hz, 1H),8.24-8.22 (m, 1H), 7.97-7.96 (m, 1H), 7.79 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.68-7.62 (m,2H), 7.54 (s, 1H), 7.51-7.47 (m, 1H), 7.36 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.70 (d, J =7.2 Hz, 1H), 4.34 (s, 2H), 3.64 (s, 3H), 2.99-2.89 (m, 2H), 1.40 (s, 6H) ppm。
实施例75. (S)-3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(3-甲氧基-1-((4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)苯甲酰胺 (化合物 68)的制备
Figure 246315DEST_PATH_IMAGE430
步骤1: (S)-2-氨基-3-甲氧基-N-(4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)丙酰胺 (中间体B)的制备
Figure 855151DEST_PATH_IMAGE431
向N-[1-(甲氧基甲基)-2-[[4-[3-(2-甲基-4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (200 mg, 426.83 μmol)在二氧杂环己烷 (1 mL)中的混合物添加HCl/二氧杂环己烷 (4 M, 1.07 mL)，和然后在25℃下搅拌该混合物1小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供作为白色固体的中间体B (450 mg, 粗物质, HCl盐)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ = 369.2。
步骤2: (S)-(2-(3-((3-甲氧基-1-((4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体D)的制备
Figure 763064DEST_PATH_IMAGE432
将中间体B (130 mg, 321.06 μmol, HCl盐)、3-[2-(叔丁氧基羰基氨基)-1,1-二甲基-乙基]苯甲酸 (根据实施例55中的方法制备) (141.28 mg, 481.59 μmol)、DIEA(124.48 mg, 963.17 μmol, 167.76 μL)、HOBt (86.76 mg, 642.11 μmol)和EDCI(123.09 mg, 642.11 μmol)在DMF (6 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在25℃下在N2 气氛下搅拌该混合物12小时。用H2O (3mL)稀释该反应混合物，和用EA (3 mL x 3)萃取。用盐水 (6 mL x 1)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过制备型HPLC纯化残余物 (碱性条件) 并浓缩以除去ACN，然后用EA (3 mL x 3)萃取，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为灰白色胶的中间体D (130 mg,161.06 μmol, 50.16%收率)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ = 644.4。
步骤3: (S)-3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(3-甲氧基-1-((4-(3-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)苯甲酰胺 (化合物 68)的制备
Figure 836063DEST_PATH_IMAGE433
向中间体D (121.89 mg, 189.33 μmol)在二氧杂环己烷 (1 mL)中的混合物添加HCl/二氧杂环己烷 (4 M, 473.34 μL)，和然后在25℃下搅拌该混合物1小时。在减压下浓缩该反应混合物。通过制备型HPLC纯化残余物 (中性条件) 并冻干以提供作为白色固体的化合物 68 (24 mg, 44.14 μmol, 23.32%收率)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ = 544.3. 1HNMR (400MHz, DMSO+D2O) δ = 8.52 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.00 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.80-7.71 (m, 3H), 7.64 (s, 1H), 7.62-7.53 (m,3H), 7.46-7.41 (m, 1H), 5.01-4.90 (m, 1H), 3.82-3.75 (m, 2H), 3.33 (s, 3H),2.72 (s, 2H), 2.55 (s, 3H), 1.27 (s, 6H) ppm. SFC: AD-RH-0-30-1ML.lcm, Rt =8.647 min, 100% ee值。
实施例76. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 69)的制备
Figure 804019DEST_PATH_IMAGE434
步骤1: (2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 900151DEST_PATH_IMAGE435
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸 (4.10 g, 23.41 mmol)、DIEA (6.05 g, 46.82mmol, 8.15 mL)和HATU (8.90 g, 23.41 mmol)在DCM (40 mL)中的溶液添加4-[3-(1-甲基吡唑-3-基)苯基]噻唑-2-胺 (4 g, 15.61 mmol)，在30℃下搅拌该混合物2小时。在减压下浓缩该该混合物以提供残余物。通过反相(FA)纯化该残余物并冻干以提供作为棕色固体的中间体C (2 g, 4.44 mmol, 28.45%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =414.1。
步骤2: 2-氨基-N-(4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)乙酰胺 (中间体D)的制备
Figure 611755DEST_PATH_IMAGE436
在30℃下搅拌中间体C (2 g, 4.84 mmol)在4 M HCl/二氧杂环己烷 (20 mL)中的溶液1小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。用MTBE (50.0 mL)研磨该残余物，然后过滤并在减压下浓缩以提供作为棕色固体的中间体D (2 g, 粗物质, HCl盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =313.9. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 12.80 (s, 1H), 8.51(s, 3H), 8.39 (s, 1H), 7.82-7.72 (m, 4H), 7.47-7.43 (m, 1H), 6.74-6.73 (m,1H), 3.93-3.90 (m, 5H) ppm。
步骤3: (2-甲基-2-(3-((2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体F)的制备
Figure 742522DEST_PATH_IMAGE437
向3-[2-(叔丁氧基羰基氨基)-1,1-二甲基-乙基]苯甲酸 (根据实施例55中的方法制备) (80 mg, 272.71 μmol)、DIEA (176.23 mg, 1.36 mmol, 237.50 μL)和HATU(155.54 mg, 409.06 μmol)在DCM (1 mL)中的溶液添加中间体D (95.40 mg, 272.71 μmol, HCl盐)，在30℃下搅拌该混合物1小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。用水 (10 mL)稀释该残余物并用EtOAc (10 mL x3)萃取。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为浅黄色油的中间体F (120 mg, 粗物质), 其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 589.6。
步骤4: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 69)的制备
Figure 943696DEST_PATH_IMAGE438
在30℃下搅拌中间体F (120 mg, 203.83 μmol)在 M HCl/二氧杂环己烷 (2 mL)中的溶液1小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过制备型HPLC纯化残余物(柱: Luna C18 150x25 5u；流动相: [水(0.075%TFA)-ACN]；B%: 15%-45%, 9 min) 并冻干以提供作为黄色固体的化合物 69 (26.64 mg, 44.21 μmol, 21.69%收率, TFA盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =489.3. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ = 8.34-8.32 (m, 1H),8.00-7.98 (m, 1H), 7.85 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.72-7.68 (m, 2H), 7.63 (d, J =1.8 Hz, 1H), 7.58-7.54 (m, 1H), 7.46-7.41 (m, 2H), 6.67 (d, J = 1.8 Hz, 1H),4.34 (s, 2H), 3.95 (m, 3H), 3.25 (s, 2H), 1.50 (m, 6H) ppm。
实施例77. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-4-甲基-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 70)的制备
Figure 261545DEST_PATH_IMAGE439
步骤1: 4-溴-3-(溴甲基)苯甲酸甲酯 (中间体B)的制备
Figure 776840DEST_PATH_IMAGE440
向4-溴-3-甲基-苯甲酸甲酯 (4 g, 17.46 mmol)在CHCl3 (15 mL)中的溶液添加AIBN (286.74 mg, 1.75 mmol)和NBS (3.42 g, 19.21 mmol)。在90℃下搅拌该混合物24小时。在25℃下通过另外的水10 mL淬灭该反应混合物，并用乙酸乙酯 (10 mL * 3)萃取。用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化该残余物 (SiO2, 石油醚: 乙酸乙酯 = 5:1) 并浓缩以提供作为白色固体的中间体B (3.6 g, 11.69 mmol, 66.94%收率)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.14(d, J=2.0 Hz, 1H) , 7.84 (dd, J=8.4Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.69 (d, J=8.4 Hz, 1H) ,4.65 (s, 2H), 3.95 (s, 3H) ppm。
步骤2: 4-溴-3-(氰基甲基)苯甲酸甲酯 (中间体C)的制备
Figure 762113DEST_PATH_IMAGE441
在0℃下向中间体B (1.5 g, 4.87 mmol)在CH3CN (15 mL)中的溶液添加 TMSCN(724.83 mg, 7.31 mmol, 914.03 μL)和TBAF (1 M, 7.31 mL)。在25℃下搅拌该混合物2小时。将该反应混合物倾倒入水 (60 mL)中，形成粉红色沉淀物。过滤该混合物并用水洗涤滤饼并在真空下干燥以提供作为粉红色固体的中间体C (1.6 g, 粗物质)。1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 8.20 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.91 (dd, J=8.4Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.73(d, J=8.4 Hz, 1H) , 3.96 (s, 3H), 3.91 (s, 2H) ppm。
步骤3: 3-(氰基甲基)-4-甲基苯甲酸甲酯 (中间体D)的制备
Figure 134189DEST_PATH_IMAGE442
将中间体C (1.5 g, 5.90 mmol)、甲基硼酸 (1.06 g, 17.71 mmol)、Cs2CO3(5.77 g, 17.71 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (431.98 mg, 590.37 μmol)在二氧杂环己烷 (10mL)和H2O (3 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在90℃下在N2 气氛下搅拌该混合物3小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2,石油醚: 乙酸乙酯 = 3:1) 并浓缩以提供作为黄色油的中间体D (1 g, 5.29 mmol,89.52%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 190.0. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 8.04 (s,1H), 7.96 (dd, J=8.0Hz, 1.6 Hz, 1H), 7.33 (d, J=8.0 Hz, 1H), 3.97-3.91 (m,3H) ,3.73 (s, 2H), 2.45 (s, 3H) ppm。
步骤4: 3-(2-氰基丙烷-2-基)-4-甲基苯甲酸甲酯 (中间体E)的制备
Figure 939334DEST_PATH_IMAGE443
在0℃下向中间体D (0.4 g, 2.11 mmol)在THF (6 mL)中溶液的添加NaH(253.69 mg, 6.34 mmol, 60%纯度)。在0℃下搅拌该混合物30分钟。添加MeI (1.50 g,10.57 mmol, 658.04 μL)并在25℃下搅拌该混合物2小时。在25℃下通过另外的水 (10mL)淬灭该反应混合物，并用乙酸乙酯 (10 mL * 3)萃取。用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2,石油醚: 乙酸乙酯 = 3:1)和以提供作为白色固体的中间体E (0.16 g, 736.43 μmol,34.84%收率) 。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.00 (d, J=1.6 Hz, 1H) , 7.90 (dd, J=8.0Hz, 1.6 Hz, 1H) , 7.32 (d, J=8.0 Hz, 1H) , 3.93 (s, 3H) , 2.73 (s, 3H),1.83 (s, 6H) ppm。
步骤5: 3-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙烷-2-基)-4-甲基苯甲酸甲酯(中间体F)的制备
Figure 992740DEST_PATH_IMAGE444
在0℃下向中间体E (0.15 g, 690.41 μmol)在MeOH (5 mL)中的溶液添加NiCl2.6H2O (410.26 mg, 1.73 mmol)和NaBH4 (261.18 mg, 6.90 mmol)。在0℃下搅拌该混合物1小时。添加Boc2O (226.02 mg, 1.04 mmol, 237.92 μL)和在25℃下搅拌该混合物17小时。在25℃下通过另外的水 (10 mL)淬灭该反应混合物，并用乙酸乙酯 (10 mL * 3)萃取。用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的中间体F (0.26 g, 粗物质)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。LCMS(ESI) m/z [M+Na]+ = 344.3。
步骤6: 3-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙烷-2-基)-4-甲基苯甲酸 (中间体G)的制备
Figure 832520DEST_PATH_IMAGE445
向中间体F (0.25 g, 777.82 μmol)在MeOH (2 mL)和H2O (2 mL)中的溶液添加LiOH.H2O (97.91 mg, 2.33 mmol)。在25℃下搅拌该混合物2小时。将该反应混合物倾倒入水 (10 mL)中，并用乙酸乙酯 (10 mL * 3)萃取。丢弃有机层并采用1N HCl 溶液调节水层的pH至4并用乙酸乙酯 (10 mL * 3)萃取。用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机相，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的中间体G (0.2 g, 650.65 μmol, 83.65%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+Na]+ = 330.0. 1H NMR (400MHz, DMSO) δ = 12.76 (br s,1H), 7.88 (s, 1H), 7.67 (br d, J=7.6 Hz, 1H) , 7.23 (br d, J=7.6 Hz,1H), 6.78(br s, 1H) , 3.28 (s, 2H) , 2.61-2.60 (m, 3H),1.42-1.26 (m, 15H) ppm。
步骤7: (2-甲基-2-(2-甲基-5-((2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体I)的制备
Figure 375497DEST_PATH_IMAGE446
向中间体G (57.99 mg, 188.66 μmol)在DCM (2 mL)中的溶液添加2-氨基-N-[4-[3-(1-甲基吡唑-3-基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (60 mg, 171.51 μmol, HCl盐)、DIPEA(66.50 mg, 514.52 μmol, 89.62 μL)和HATU (78.25 mg, 205.81 μmol)。在20℃下搅拌该混合物2小时。浓缩该反应混合物以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=1/1) 以提供作为黄色固体的中间体I (53 mg, 87.93 μmol, 51.27%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 603.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ= 12.48 (brs, 1H) ,8.86-8.85 (m, 1H), 8.40 (s, 1H) , 7.86-7.62 (m, 6H), 7.46-7.45 (m, 1H) , 7.24(d, J=8.0 Hz, 1H) ,6.85-6.68 (m, 2H), 4.20-4.19 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 2.62-2.56 (m, 3H),1.41-1.27 (m, 15H) ppm。
步骤8: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-4-甲基-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 70)的制备
Figure 933518DEST_PATH_IMAGE447
向中间体I (40 mg, 66.36 μmol)在DCM (2 mL)中的溶液添加TFA (22.70 mg,199.09 μmol, 14.74 μL)。在20℃下搅拌该混合物1小时。浓缩该反应混合物以提供残余物。通过制备型HPLC纯化残余物 (柱: Luna C18 150*25 5u；流动相: [水(0.075%TFA)-ACN]；B%: 18%-48%, 9 min) 并冻干以提供作为白色固体的化合物 70 (35.73 mg, 57.94μmol, 87.31%收率, TFA盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 503.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO)δ= 12.52 (s, 1H), 8.93-8.92 (m, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.82 (br d,J=8.0 Hz, 1H), 7.78-7.70 (m, 4H), 7.64 (br s, 2H) , 7.45 (m, 1H), 7.33 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.73 (d, J=2.0 Hz, 1H) , 4.22-4.21 (m, 2H) , 3.91 (s, 3H), 3.22-3.21 (m, 2H) , 2.56 (s, 3H), 1.48 (s, 6H) ppm。
实施例78. 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-4-乙基-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 71)的制备
Figure 525036DEST_PATH_IMAGE448
步骤1: 4-溴-3-(氰基甲基)苯甲酸甲酯 (中间体B)的制备
Figure 484902DEST_PATH_IMAGE449
在0℃下向4-溴-3-(溴甲基)苯甲酸甲酯 (2 g, 6.49 mmol)在CH3CN (15 mL)中的溶液添加 TMSCN (966.44 mg, 9.74 mmol, 1.22 mL)和TBAF (1 M, 9.74 mL)。在25℃下搅拌该混合物2小时。将该反应混合物倾倒入水 (60 mL)中。形成粉红色沉淀物。过滤该混合物并用水洗涤滤饼并在真空下干燥以提供作为粉红色固体的中间体B (1.5 g, 粗物质)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。
步骤2: 3-(氰基甲基)-4-乙基苯甲酸甲酯 (中间体C)的制备
Figure 136463DEST_PATH_IMAGE450
将中间体B (0.6 g, 2.36 mmol)、三乙基硼烷 (1 M, 7.08 mL)、Cs2CO3 (2.31 g,7.08 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (172.79 mg, 236.15 μmol)在THF (2 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在80℃下在N2 气氛下搅拌该混合物1小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚: 乙酸乙酯 = 3:1) 并浓缩以提供作为黄色油的中间体C (0.44 g, 2.16 mmol, 91.68%收率) 。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 204.1. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 8.12-7.91 (m, 2H), 7.44-7.20 (m, 1H), 3.94(br s, 3H), 3.77 (br s, 2H), 2.76-2.75 (m, 2H), 1.39-1.22 (m, 3H) ppm。
步骤3: 3-(2-氰基丙烷-2-基)-4-乙基苯甲酸 (中间体D)的制备
Figure 981447DEST_PATH_IMAGE451
在0℃下向中间体C (429.65 mg, 2.11 mmol)在THF (6 mL)中的溶液添加NaH(422.81 mg, 10.57 mmol, 60%纯度)。在0℃下搅拌该混合物30分钟。添加MeI (2.40 g,16.91 mmol, 1.05 mL)并在25℃下搅拌该混合物16小时。在25℃下通过另外的水 (10 mL)淬灭该反应混合物，并用乙酸乙酯 (10 mL * 3)萃取。丢弃有机层并用1N HCl 溶液调节水层的pH至5并用乙酸乙酯 (10 mL * 3)萃取该混合物。用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机相，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的中间体D (0.32 g, 1.47 mmol,69.67%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+42]+ = 259.0. 1H NMR (400MHz, DMSO) δ = 13.04(br s, 1H), 7.95-7.84 (m, 2H), 7.49 (d, J=8.0 Hz, 1H), 2.97 (m, 2H), 1.77 (s,6H),1.29 (m, 3H) ppm。
步骤4: 3-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙烷-2-基)-4-乙基苯甲酸 (中间体E)的制备
Figure 376656DEST_PATH_IMAGE452
在0℃下向中间体D (0.3 g, 1.38 mmol)在MeOH (5 mL)中的溶液添加NiCl2.6H2O(820.51 mg, 3.45 mmol)和NaBH4 (522.36 mg, 13.81 mmol)。在0℃下搅拌该混合物1小时。添加Boc2O (452.04 mg, 2.07 mmol, 475.84 μL)并在20℃下搅拌该混合物 2小时。在25℃下通过另外的水 (20 mL)淬灭该反应混合物，过滤并用1N HCl 溶液调节滤液的pH至4。用乙酸乙酯 (20 mL * 3)萃取所得混合物。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的中间体E (0.22 g, 粗物质)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+Na]+ = 344.3。
步骤5: (2-(2-乙基-5-((2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)苯基)-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体G)的制备
Figure 191028DEST_PATH_IMAGE453
向中间体E (60.64 mg, 188.66 μmol)在DCM (2 mL)中的溶液添加2-氨基-N-[4-[3-(1-甲基吡唑-3-基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (60 mg, 171.51 μmol, HCl盐)、DIPEA(66.50 mg, 514.53 μmol, 89.62 μL)和HATU (78.25 mg, 205.81 μmol)。在20℃下搅拌该混合物16小时。浓缩该反应混合物以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=1/1) 并在真空下浓缩以提供作为黄色油的中间体G (52 mg, 粗物质)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 617.1。
步骤6: 3-(1-氨基-2-甲基丙烷-2-基)-4-乙基-N-(2-((4-(3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 (化合物 71)的制备
Figure 13491DEST_PATH_IMAGE454
向中间体G (50 mg, 81.07 μmol)在DCM (2 mL)中的溶液添加TFA (27.73 mg,243.20 μmol, 18.01 μL)。在20℃下搅拌该混合物2小时。浓缩该反应混合物以提供残余物。通过制备型HPLC纯化残余物 (柱: Phenomenex Synergi C18 150*25*10um；流动相:[水(0.1%TFA)-ACN]；B%: 24%-44%, 10 min) 并冻干以提供作为白色固体的化合物 71(21.87 mg, 33.01 μmol, 40.72%收率, TFA盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 517.1. 1HNMR (400 MHz, DMSO) δ= 12.50 (s, 1H), 8.89 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.86-7.78(m, 3H), 7.76 (d, J=2.4 Hz, 1H) , 7.73 (br d, J=7.6 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H),7.66 (br s, 2H), 7.39-7.50 (m, 2H), 6.73 (d, J=2.4 Hz, 1H), 4.22-4.21 (m,2H), 3.91 (s, 3H), 3.19-3.18 (m, 2H), 2.88-2.87 (m, 2H), 1.49 (s, 6H), 1.26-1.25 (m, 3H) ppm。
实施例79. 3-(1-(氨基甲基)环丙基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 72)的制备
Figure 342841DEST_PATH_IMAGE455
步骤1: 3-(1-氰基环丙基)苯甲酸甲酯 (中间体B)的制备
Figure 541741DEST_PATH_IMAGE456
将3-(氰基甲基)苯甲酸甲酯 (1 g, 5.71 mmol)在DMF (10 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在0℃下添加NaH (570.77 mg, 14.27 mmol, 60%纯度)。在0℃下在N2 气氛下搅拌该混合物0.5小时。添加1,2-二溴乙烷 (1.07 g, 5.71 mmol, 430.67 μL)。在25℃下搅拌该混合物3小时。在25℃下通过另外的水 (20 mL)淬灭该反应混合物，并然后用EA (50 mL * 2)萃取。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (ISCO；40 g SepaFlash 硅胶快速柱, 以60 mL/min的0~60% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液)并浓缩以提供作为黄色油的中间体B (500 mg, 2.48 mmol, 43.53%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=202.2. 1HNMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.97-7.95 (m, 1H), 7.88-7.87 (m, 1H), 7.60-7.57 (m,1H), 7.46-7.42 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 1.79-1.76 (m, 2H), 1.48-1.45 (m, 2H)ppm。
步骤2: 3-(1-(((叔丁氧基羰基)氨基)甲基)环丙基)苯甲酸甲酯 (中间体C)的制备
Figure 210620DEST_PATH_IMAGE457
在0℃下向中间体B (500 mg, 2.48 mmol)和NiCl2.6H2O (1.48 g, 6.21 mmol)在MeOH (5 mL)中的溶液添加NaBH4 (940.08 mg, 24.85 mmol)和然后搅拌该混合物1小时，然后添加Boc2O (1.08 g, 4.97 mmol, 1.14 mL)和Et3N (754.32 mg, 7.45 mmol, 1.04mL)。在25℃下搅拌该混合物1小时。添加4N HCl(10 mL)和水(10 mL)并用EA (50 mL * 2)萃取该反应混合物。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (ISCO；40 g SepaFlash 硅胶快速柱, 以50 mL/min的10~70% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液) 并浓缩以提供作为无色油的中间体C (600 mg, 1.59 mmol, 64.05%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H-56]+=250.2。
步骤3: 3-(1-(((叔丁氧基羰基)氨基)甲基)环丙基)苯甲酸 (中间体D)的制备
Figure 203983DEST_PATH_IMAGE458
向中间体C (200 mg, 530.51 μmol)在MeOH (1 mL)中的溶液添加NaOH (78.59mg, 1.96 mmol)在H2O (0.5 mL)中的溶液。在30℃下搅拌该混合物2.5小时。添加水(20mL)并用EA (50 mL)萃取该反应混合物。丢弃有机层并用4N HCl将水相调节至pH =4，并用EA (50 mL)萃取该反应混合物。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为无色油的中间体D (120 mg, 411.89 μmol, 77.64%收率)。LCMS(ESI) m/z= [M+Na]+ =314.2。
步骤4: ((1-(3-((2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酰基)苯基)环丙基)甲基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体F)的制备
Figure 20630DEST_PATH_IMAGE459
向中间体D (60.48 mg, 207.59 μmol)在DCM (2 mL)中的溶液添加EDCI (49.74mg, 259.49 μmol)、DIEA (89.43 mg, 691.97 μmol, 120.53 μL)和HOBt (35.06 mg,259.49 μmol)。然后添加2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (根据实施例3中的方法制备) (60 mg, 172.99 μmol, HCl盐)。在25℃下搅拌该混合物2小时。添加水(20 mL)并用EA (2*50 mL)萃取该反应混合物。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相HPLC (0.1% FA条件)纯化该粗产物并冻干以提供作为白色固体的中间体F (60 mg, 59.62 μmol, 34.46%收率)。LCMS(ESI) m/z= [M+H]+ =584.4。
步骤5: 3-(1-(氨基甲基)环丙基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 72)的制备
Figure 23221DEST_PATH_IMAGE460
向中间体F (60 mg, 102.79 μmol)在DCM (3 mL)中的溶液添加TFA (2 mL)。在25℃下搅拌该混合物0.5小时。在减压下浓缩该反应混合物以除去DCM和TFA。通过制备型HPLC纯化残余物 (TFA条件；柱: Phenomenex luna C18 150*25 10u；流动相: [水(0.1%TFA)-ACN]；B%: 5%-35%, 10 min) 并冻干以提供作为白色固体的化合物 72 (20.44 mg, 34.20μmol, 33.27%收率, TFA盐)。LCMS (ESI) m/z= [M+H]+ =484.2. 1H NMR (400MHz, MeOD)δ = 12.49 (s, 1H), 8.94-8.92 (m, 1H), 8.78 (s, 2H), 8.35 (s, 1H), 8.06 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.97 (s, 2H), 7.89 (s, 1H), 7.85-7.86 (m, 1H), 7.83-7.79 (m,2H), 7.74 (s, 3H), 7.65-7.61 (m, 1H), 7.58 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.49-7.46 (m,1H), 4.22 (d, J=5.6 Hz, 2H), 3.12 (d, J=5.6 Hz, 2H), 1.05-1.00 (m, 2H), 0.99-0.97 (m, 2H) ppm。
实施例80. 3-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 73)的制备
Figure 546606DEST_PATH_IMAGE461
步骤1: 2-(3-溴苯基)-2-甲基丙酸甲酯 (中间体B)的制备
Figure 710871DEST_PATH_IMAGE462
在0℃下向2-(3-溴苯基)乙酸甲酯 (10 g, 43.65 mmol)在THF (100 mL)中的溶液添加NaH (10.48 g, 261.93 mmol, 60%纯度)和搅拌0.5小时，然后在0℃下将MeI(30.98 g, 218.27 mmol, 13.59 mL)添加至该混合物。在30℃下搅拌该混合物4小时。在0℃下用NH4Cl水溶液 (200 mL)稀释该反应混合物并用EA (200 mL x 2)萃取。经无水Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相 (0.1% FA条件)纯化该残余物并浓缩以除去ACN。用EA (20 mL x 2)萃取该混合物，经无水 Na2SO4干燥有机层，过滤并浓缩以提供作为无色油的中间体B (4.4 g, 17.11 mmol, 39.20%收率)。LCMS(ESI) m/z [M+H]+=257.0/259.0. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.49-7.48 (m, 1H),7.37-7.27 (m, 1H), 7.26-7.25 (m, 1H), 7.22-7.20 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 1.57(s, 6H) ppm。
步骤2: (E)-2-甲基-2-(3-苯乙烯基苯基)丙酸甲酯 (中间体D)的制备
Figure 952497DEST_PATH_IMAGE463
向中间体B (2 g, 7.78 mmol)和苯乙烯 (1.62 g, 15.56 mmol)在DMF (20 mL)中的溶液添加TEA (1.57 g, 15.56 mmol, 2.17 mL)、三邻甲苯基磷烷 (473.50 mg, 1.56mmol)和Pd(OAc)2 (174.63 mg, 777.84 μmol)。在130℃下在N2下搅拌该混合物16小时。用H2O (20 mL)稀释该反应混合物并用EA (20 mL x 2)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=1/0至3:1) 并浓缩以提供作为黄色油的中间体D (1.3 g, 4.64 mmol, 59.61%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=281.1. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.54-7.52 (m, 2H),7.52-7.46 (m, 2H), 7.37-7.25 (m, 6H), 7.12 (s, 2H), 3.68 (s, 3H), 1.63 (s,6H) ppm。
步骤3: (E)-2-甲基-2-(3-苯乙烯基苯基)丙烷-1-醇 (中间体E)的制备
Figure 555516DEST_PATH_IMAGE464
在0℃下向中间体D (1.28 g, 4.57 mmol)在THF (5 mL)中的溶液添加LiAlH4/THF (1 M, 13.70 mL)和在25℃下搅拌2小时。通过添加 H2O (0.52 mL)淬灭这个反应混合物，和然后用15% NaOH 溶液 (1.56 mL)稀释。过滤该混合物并在减压下浓缩滤液以提供作为白色固体的中间体E (1.1 g, 4.36 mmol, 95.48%收率)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M-OH]+ =235.1. 1H NMR (400MHz, DMSO) δ = 7.62-7.60 (m, 2H),7.60 (s, 1H), 7.37-7.29 (m, 1H), 7.29-7.28 (m, 2H), 7.28-7.24 (m, 5H), 4.70-4.67 (m, 1H), 3.46 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 1.25 (s, 6H) ppm。
步骤4: 3-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酸 (中间体F)的制备
Figure 933408DEST_PATH_IMAGE465
在100℃下向中间体E (500 mg, 1.98 mmol)在ACN/H2O=1/1 (5 mL)中的溶液添加Oxone (2.44 g, 3.96 mmol)并搅拌2小时。冷却该反应混合物和用NaHCO3水溶液 (10mL)稀释，用EA (10 mL x 2)萃取。丢弃有机层并用1N HCl将水相调节至pH=4，然后用EA(20 mL x 2)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过制备型TLC (EA)纯化该残余物并浓缩以提供作为黄色固体的中间体F (30 mg,154.46 μmol, 7.80%收率)，其直接用于接下来的步骤。
步骤5: 3-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 73)的制备
Figure 534154DEST_PATH_IMAGE466
向中间体F (20 mg, 102.97 μmol)和2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (根据实施例3中的方法制备) (35.71 mg, 102.97 μmol, HCl盐)在DMF (1mL)中的溶液添加DIEA (66.54 mg, 514.86 μmol, 89.68 μL)，然后将EDCI (29.61 mg,154.46 μmol)和HOBt (16.70 mg, 123.57 μmol) 添加至该混合物。在30℃下搅拌该混合物16小时。在真空下浓缩这个反应混合物。通过反相纯化该残余物 (0.1% FA条件) 并冻干以提供作为白色固体的化合物 73 (21.51 mg, 40.39 μmol, 39.22%收率, FA盐)。LCMS(ESI) m/z [M+H]+ =487.3. 1H NMR (400MHz, DMSO) δ = 12.45 (br s, 1H), 8.92-8.91(m, 1H), 8.68 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 8.30 (s, 1H), 8.02 (d, J = 7.6 Hz, 1H),7.90 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.76-7.75 (m, 4H), 7.59-7.57 (m, 2H), 7.51-7.41(m, 1H), 4.71-4.68 (m, 1H), 4.21 (d, J =5.6 Hz, 2H), 3.47 (d, J = 5.2 Hz,2H), 1.26 (s, 6H) ppm。
实施例81. 3-(叔丁基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 74)的制备
Figure 997496DEST_PATH_IMAGE467
向2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (100 mg, 288.32 μmol, HCl盐)和3-叔丁基苯甲酸 (61.66 mg, 345.99 μmol)在DMF (1 mL)中的溶液添加EDCI (82.91 mg, 432.48 μmol)、HOBt (58.44 mg, 432.48 μmol)和DIEA (111.79 mg,864.97 μmol, 150.66 μL)，然后在5℃下搅拌该反应混合物2小时。向该反应混合物添加水(2 mL x 1)，然后过滤该混合物。用MeOH (5 mL x 1)研磨滤饼，过滤并冻干滤饼以提供作为白色固体的化合物 74 (34.81 mg, 73.16 μmol, 25.37%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=471.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 12.49 (s, 1H), 8.98-8.95 (m, 1H), 8.69-8.67 (m, 2H), 8.32-8.31 (m, 1H), 8.03-8.00 (m, 1H), 7.94-7.93 (m, 1H), 7.84(s, 1H), 7.77-7.76 (m, 3H), 7.74-7.71 (m, 1H), 7.62-7.58 (m, 2H), 7.44-7.41(m, 1H), 4.21-4.20 (d, J = 6Hz, 2H), 1.33 (s, 9H) ppm。
实施例82. 3-(2-氰基丙烷-2-基)-4,5-二甲基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 75)的制备
Figure 404207DEST_PATH_IMAGE468
步骤1: 4-溴-3-(溴甲基)-5-甲基苯甲酸甲酯 (中间体B)的制备
Figure 636605DEST_PATH_IMAGE469
在25℃下向4-溴-3,5-二甲基-苯甲酸甲酯 (2 g, 8.23 mmol)在CCl4 (10 mL)中的溶液添加NBS (1.46 g, 8.23 mmol)和AIBN (40.53 mg, 246.82 μmol)。在80℃下搅拌该反应混合物16小时。用DCM (3 mL x 3)萃取该反应混合物，浓缩合并的有机层以提供黄色油。通过快速硅胶层析法纯化该油 (ISCO®；120 g SepaFlash® 硅胶快速柱, 以85mL/min的0~10% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液) 并然后浓缩以提供作为白色固体的中间体B (1.9 g, 4.72 mmol, 57.38%收率, 80%纯度)。LCMS (ESI) m/z [81BrM+H]+=322.9.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.05 - 8.00 (m, 1H), 7.88 (d, J = 1.6 Hz, 1H),4.86 (s, 2H), 3.87 (s, 3H), 2.45 (s, 3H) ppm。
步骤2: 4-溴-3-(氰基甲基)-5-甲基苯甲酸甲酯 (中间体C)的制备
Figure 408252DEST_PATH_IMAGE470
在0℃下向中间体B (1.8 g, 5.59 mmol)在CH3CN (1 mL)中的溶液添加TMSCN(831.87 mg, 8.39 mmol, 1.05 mL)和TBAF (1 M, 8.39 mL)。在10℃下搅拌该反应混合物16小时和然后在30℃下搅拌另外的2小时。用水 (30 mL)稀释该反应混合物并用EA (15 mLx 2)萃取，经无水 Na2SO4干燥合并的有机层并浓缩以提供黄色残余物。用DCM (5 mL)溶解该残余物并通过快速硅胶层析法纯化 (ISCO®；40 g SepaFlash® 硅胶快速柱, 以40mL/min的0~25% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液), 浓缩以提供作为白色固体的中间体C(1 g, 3.39 mmol, 60.68%收率, 90.94%纯度)。LCMS (ESI) m/z [81BrM+H]+=269.9. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.96 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 4.19 (s, 2H), 3.90 -3.85 (m, 3H), 2.46 (s, 3H) ppm。
步骤3: 3-(氰基甲基)-4,5-二甲基苯甲酸甲酯 (中间体E)的制备
Figure 358890DEST_PATH_IMAGE471
在10℃下在N2下向中间体C (900 mg, 3.36 mmol)、甲基硼酸 (602.83 mg,10.07 mmol)和Cs2CO3 (3.28 g, 10.07 mmol)在二氧杂环己烷 (6 mL)和H2O (3 mL)中的溶液添加Pd(dppf)Cl2 (245.63 mg, 335.69 μmol)。在90℃下在N2下搅拌该混合物4小时。用水 (15 mL)稀释该反应混合物并用EA (15 mL x 3)萃取，经无水 Na2SO4干燥合并的有机层并浓缩以提供黑褐色残余物。用DCM (5 mL)溶解该残余物并通过快速硅胶层析法纯化(ISCO®；20 g SepaFlash® 硅胶快速柱, 以35 mL/min的0~25% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液), 浓缩以提供作为白色固体的中间体E (700 mg, 2.84 mmol, 84.62%收率,82.47%纯度)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=204.0. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.83(s, 1H), 7.75 (s, 1H), 4.11 (s, 2H), 3.84 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.25 (s, 3H)ppm。
步骤4: 3-(2-氰基丙烷-2-基)-4,5-二甲基苯甲酸 (中间体F)的制备
Figure 303712DEST_PATH_IMAGE472
在0℃下向中间体E (700 mg, 3.44 mmol)在THF (15 mL)中的溶液添加NaH(825.52 mg, 20.64 mmol, 60%纯度)。在0℃下搅拌该反应混合物30分钟，然后在0℃下添加MeI (2.44 g, 17.20 mmol, 1.07 mL, 5 eq)。在10℃下搅拌该反应混合物1.5小时。在0℃下添加更多的NaH (825.52 mg, 20.64 mmol, 60%纯度, 6 eq)。在0℃下搅拌30分钟后，在0℃下添加更多的MeI (2.44 g, 17.20 mmol, 1.07 mL, 5 eq)。然后在10℃下搅拌该混合物3小时。用H2O (30 mL)淬灭该反应混合物并搅拌30分钟并然后用EA (15 mL x 3)萃取，经无水Na2SO4,干燥合并的有机层，浓缩以提供黄色固体。用HCl (2 M)调节水相的pH至6，然后用EA (10 mL x 3)萃取，浓缩以提供黄色固体。将两批固体溶解于MeOH (5 mL)中并通过反相HPLC (FA)纯化并冻干以提供作为浅黄色固体的中间体F (450 mg, 1.65 mmol,48.02%收率, 79.75%纯度)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=218.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO+D2O) δ = 7.77 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 1.75 (s, 6H)ppm。
步骤5: 3-(2-氰基丙烷-2-基)-4,5-二甲基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 75)的制备
Figure 656196DEST_PATH_IMAGE473
在10℃下向中间体F (50 mg, 230.14 μmol, 1 eq)、EDCI (66.18 mg, 345.20 μmol)、HOBt (46.64 mg, 345.20 μmol)和DIEA (89.23 mg, 690.41 μmol, 120.26 μL)在DMF (0.5 mL)中的溶液添加2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (71.43mg, 230.14 μmol)。在30℃下搅拌该反应混合物4小时。将该反应混合物倾倒入水 (3 mL)中，形成浅黄色沉淀物,过滤该混合物以提供浅黄色固体。用PE/EA (1/1, 3 mL)研磨该固体，过滤并将固体分散至H2O (20 mL)中并冻干以提供作为灰白色固体的化合物 75(54.19 mg, 106.09 μmol, 46.10%收率, 99.77%纯度)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=510.1.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.47 (s, 1H), 8.95 - 8.94 (m, 1H), 8.69 - 8.66(m, 2H), 8.31 (s, 1H), 8.01 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.78 - 7.75(m, 4H), 7.73 (s, 1H), 7.63 - 7.57 (m, 1H), 4.20 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 2.52(s, 3H), 2.35 (s, 3H), 1.79 (s, 6H) ppm。
实施例83. 3-氰基-3-甲基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 (化合物 76)的制备
Figure 598745DEST_PATH_IMAGE474
步骤1: 6-溴-2,3-二氢-1H-茚-1-甲腈 (中间体B)的制备
Figure 36679DEST_PATH_IMAGE475
在0℃下向6-溴茚满-1-酮 (5 g, 23.69 mmol)和1-(异氰基甲基磺酰基)-4-甲基-苯 (6.94 g, 35.54 mmol)在DME (250 mL)和EtOH (10 mL)中的溶液添加tBuOK (5.32g, 47.38 mmol)。在25℃下搅拌该反应混合物16小时。将该反应混合物倾倒入水 (500 mL)中并用EA (400 mL x 2)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层并在真空下浓缩。通过硅胶柱层析法纯化该残余物 (PE~PE/EA=2/1) 并在真空下浓缩以提供作为白色固体的中间体B(3 g, 12.70 mmol, 53.60%收率, 94%纯度)。LCMS (ESI) m/z [81BrM+H]+=223.9. 1H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.59 (s, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.29 (d, J = 8.0 Hz, 1H),4.49 -4.47 (m, 1H), 3.02 - 2.93 (m, 1H), 2.92 - 2.82 (m, 1H), 2.58 - 2.52 (m,1H), 2.30 - 2.19 (m, 1H) ppm。
步骤2: 6-溴-1-甲基-2,3-二氢-1H-茚-1-甲腈 (中间体C)的制备
Figure 722875DEST_PATH_IMAGE476
在0℃下向中间体B (1 g, 4.50 mmol)在THF (10 mL)中的溶液添加NaH (216.12mg, 5.40 mmol, 60%纯度)和在0℃下搅拌该混合物 0.5小时。然后在0℃下添加CH3I(3.20 g, 22.51 mmol, 1.40 mL)。在25℃下搅拌该混合物2小时。用NH4Cl水溶液 (30 mL)稀释该反应，用EA (15 mL x 3)萃取。经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, PE:EA=50:1至10:1) 并在真空下浓缩以提供作为浅黄色固体的中间体C (800 mg, 3.05 mmol, 67.72%收率, 90%纯度) 。1H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.69 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.50 - 7.47 (m, 1H), 7.28(d, J = 8.0 Hz, 1H), 2.97 - 2.93 (m, 2H), 2.62 - 2.52 (m, 1H), 2.21 - 2.14(m, 1H), 1.63 (s, 3H) ppm。
步骤3: 3-氰基-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酸 (中间体D)的制备
Figure 992183DEST_PATH_IMAGE477
向中间体C (400 mg, 1.69 mmol)在DMSO (4 mL)中的混合物添加K2CO3 (351.21mg, 2.54 mmol)、H2O (61.04 mg, 3.39 mmol, 61.04 μL)、二环己基(3- 二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (103.73 mg, 169.41 μmol)和Pd(OAc)2 (38.03 mg, 169.41 μmol)，用CO吹扫三次，和然后在100℃下在CO (15 psi) 气氛下搅拌该混合物14小时。用H2O(10 mL)稀释该反应混合物，并然后用EA (5 mL x 2)萃取。丢弃有机层并用HCl水溶液将水相调节至pH=4并然后用EA (10 mL x 3)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相HPLC (FA)纯化该残余物并冻干以提供作为白色固体的中间体D (200 mg, 911.73 μmol, 53.82%收率, 91.73%纯度)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 202.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 13.70 - 12.34 (m, 1H), 7.95 (d, J = 1.2Hz, 1H), 7.90 - 7.88 (m, 1H), 7.44 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.09 - 3.01 (m, 2H),2.62 - 2.56 (m, 1H), 2.28 - 2.18 (m, 1H), 1.64 (s, 3H) ppm。
步骤4: 3-氰基-3-甲基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 (化合物 76)的制备
Figure 105632DEST_PATH_IMAGE478
向中间体D (63.82 mg, 317.15 μmol)在DCM (1 mL)中的溶液添加EDCI (82.91mg, 432.48 μmol)、HOBt (58.44 mg, 432.48 μmol)、DIEA (186.32 mg, 1.44 mmol,251.10 μL)和2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (根据实施例3中的方法制备) (100 mg, 288.32 μmol, HCl)。在25℃下搅拌该混合物2小时。将MeOH (1mL)添加至该混合物中，形成大量沉淀物，过滤该混合物并用MeOH (2 mL x 2)洗涤该固体并在真空下干燥以提供作为白色固体的化合物 76 (110 mg, 221.77 μmol, 76.92%收率, 99.51%纯度)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 494.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 13.10 -12.03 (m, 1H), 9.12 - 9.09 (m, 1H), 8.72 - 8.65 (m, 2H), 8.32 - 8.31 (m, 1H),8.06 - 7.99 (m, 2H), 7.91 - 7.89 (m, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.81 - 7.73 (m, 3H),7.66 - 7.56 (m, 1H), 7.45 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.24 - 4.22 (m, 2H), 3.08 -3.04 (m, 2H), 2.69 - 2.56 (m, 1H), 2.28 - 2.21 (m, 1H), 1.67 (s, 3H) ppm。
实施例84. N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-甲酰胺 (化合物 77)的制备
Figure 30863DEST_PATH_IMAGE479
步骤1: 3-(2-羟基丙烷-2-基)苯甲酸 (中间体B)的制备
Figure 255171DEST_PATH_IMAGE480
在0℃下向3-乙酰基苯甲酸 (100 mg, 609.17 μmol)在THF (4 mL)中的溶液逐滴添加MeMgBr (3 M, 1.02 mL)和然后在70℃下搅拌该反应混合物2小时。通过添加 HCl (2N) 溶液 (3 mL)淬灭该反应混合物 。用NaOH (4 N) 溶液 (4 mL)稀释上述溶液并用EtOAc(8 mL)萃取。丢弃有机层并通过添加 HCl (4 N) 溶液将水层酸化至pH=4，和然后用EtOAc(4 mL x 2)萃取。用盐水 (5 mL x 2)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为无色油的中间体B (93 mg, 464.48 μmol, 76.25%收率)。LCMS (ESI) m/z[M-OH]+ = 163.1。
步骤2: N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-甲酰胺 (化合物 77)的制备
Figure 644564DEST_PATH_IMAGE481
向中间体B (45 mg, 249.72 μmol)、2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (根据实施例3中的方法制备) (86.61 mg, 249.72 μmol, HCl盐)、DIEA(161.37 mg, 1.25 mmol, 217.49 μL)在DCM (2 mL)中的混合物添加HATU (104.45 mg,274.69 μmol)，和然后在25℃下在N2 气氛下搅拌该混合物2小时。在真空下浓缩该反应混合物。通过制备型HPLC纯化残余物 (TFA条件, 柱: Phenomenex luna C18 250 x 50 mm x10 μm；流动相: [水(0.1%TFA)-ACN]；B%: 22%-39%,7 min) 并冻干以提供作为白色固体的化合物 77 (27.71 mg, 47.24 μmol, 18.92%收率, TFA盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =473.0. 1H NMR (400MHz, DMSO) δ = 12.47 (s, 1H), 8.92-8.84 (m, 3H), 8.40 (s,1H), 8.12-8.08 (m, 3H), 8.02 (s, 1H), 7.88-7.86 (m, 2H), 7.74 (d, J=8.0 Hz,1H), 7.68-7.64 (m, 2H), 7.44-7.40 (m, 1H), 4.21 (d, J=6 Hz, 2H), 1.47 (s, 6H)ppm。
实施例85. N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-3-(1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)苯甲酰胺 (化合物 78)的制备
Figure 663335DEST_PATH_IMAGE482
步骤1: 2-(3-溴苯基)-1,1,1-三氟丙烷-2-醇 (中间体B)的制备
Figure 75862DEST_PATH_IMAGE483
在0℃下在N2下1-(3-溴苯基)乙酮 (1 g, 5.02 mmol, 662.25 μL)和TMS-CF3(857.26 mg, 6.03 mmol)在THF (10 mL)中的混合物添加TBAF (1 M, 100.48 μL)。在25℃下搅拌所得混合物2小时。用1N HCl (10 mL)淬灭该反应混合物。然后添加水 (30 mL)和EtOAc (30 mL)。分离这两层并用EtOAc (30 mL)萃取水层。用盐水洗涤合并的有机相，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, PE: EtOAc =80:1-30:1) 并浓缩以提供作为白色固体的中间体B (650 mg, 2.42 mmol, 48.09%收率)。1HNMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.75 (s, 1H), 7.51-7.49 (m, 2H), 7.29-7.25 (m, 1H),2.57 (s, 1H), 1.77-1.76 (m, 3H) ppm。
步骤2: 3-(1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)苯甲酸甲酯 (中间体E)的制备
Figure 103861DEST_PATH_IMAGE484
在-78℃下在N2下向中间体B (100 mg, 371.67 μmol)在THF (2 mL)中的溶液添加n-BμLi (2.5 M, 460.87 μL)和在-78℃下搅拌该混合物30分钟。然后添加氯甲酸甲酯(38.63 mg, 408.83 μmol, 31.67 μL)并在25℃下搅拌该混合物30分钟。用水 (10 mL)淬灭该混合物和然后用EtOAc (30 mL x 2)萃取。用盐水洗涤合并的有机相，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过制备型HPLC (FA条件)纯化残余物。用EtOAc (40 mL x 2)萃取洗脱物。用盐水洗涤合并的有机相，经无水 Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的中间体E (28 mg, 112.81 μmol, 30.35%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=249.0。
步骤3: 3-(1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)苯甲酸 (中间体E)的制备
Figure 344831DEST_PATH_IMAGE485
向中间体E (28 mg, 112.81 μmol)在THF (0.4 mL)、MeOH (0.4 mL)和H2O (0.2mL)中的混合物添加LiOH.H2O (14.20 mg, 338.44 μmol)和在25℃下搅拌该混合物3小时。用1N HCl调节该混合物的pH至 ~ 5和用水 (10 mL)稀释。然后用EtOAc (20 mL x 2)萃取该混合物。用盐水洗涤合并的有机相，经无水 Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩以提供作为黄色油的中间体E (24 mg, 102.49 μmol, 90.85%收率)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤 LCMS (ESI) m/z [M+H]+=235.0。
步骤4: N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-3-(1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)苯甲酰胺 (化合物 78)的制备
Figure 800083DEST_PATH_IMAGE486
向2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (根据实施例3中的方法制备) (34.07 mg, 98.22 μmol, HCl盐)和中间体E (23 mg, 98.22 μmol)在DCM (1 mL)中的混合物添加 EDCI (28.24 mg, 147.33 μmol)、HOBt (19.91 mg, 147.33 μmol)和DIEA (50.78 mg, 392.87 μmol, 68.43 μL)。在25℃下搅拌所得混合物2小时。在减压下除去溶剂。通过制备型HPLC纯化残余物 (柱: Phenomenex Synergi C18 150x25x10um；流动相: [水(0.1%TFA)-ACN]；B%: 18%-48%, 10 min) 并冻干以提供作为白色固体的化合物78 (11.10 mg, 17.33 μmol, 17.64%收率, TFA盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =527.0. 1HNMR (400MHz, DMSO) δ = 12.48 (s, 1H), 9.02-9.00 (m, 1H), 8.85-8.81 (m, 2H),8.40-8.38 (m, 1H), 8.13-8.07 (m, 4H), 7.92-7.85 (m, 3H), 7.79-7.77 (m, 1H),7.68-7.63 (m, 1H), 7.58-7.52 (m, 1H), 7.73 (s, 1H), 4.21 (d, J=5.6 Hz, 2H),1.73 (s, 3H) ppm。
实施例86. 3-(2-羟基丁烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 79)的制备
Figure 434327DEST_PATH_IMAGE487
步骤1: 2-((4-溴吡啶-2-基)氨基)-N-(4-苯基噻唑-2-基)乙酰胺 (中间体B)的制备
Figure 437DEST_PATH_IMAGE488
在0℃下在N2下向3-乙酰基苯甲酸 (100 mg, 609.17 μmol)在THF (2 mL)中的溶液添加EtMgBr (3 M, 1.02 mL)。在30℃下搅拌该混合物2小时。在0℃下通过另外的水 (20mL)淬灭该反应混合物，并然后用EA (50 mL x 2)萃取。丢弃有机层和用2M HCl将水相调节至pH = 4，和然后用EA (50 mL x 2)萃取该混合物。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4 干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为无色油的中间体B (85 mg, 437.63 μmol,71.84%收率)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。1H NMR (400MHz, DMSO) δ =12.79 (s, 1H), 8.03-8.02 (m, 1H), 7.78-7.75 (m, 1H), 7.64-7.61 (m, 1H), 7.43-7.39 (m, 1H), 4.94 (s, 1H), 1.70-1.65 (m, 2H), 1.42 (s, 3H), 0.68-0.65 (m,3H) ppm。
步骤2: 3-(2-羟基丁烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 79)的制备
Figure 302106DEST_PATH_IMAGE489
向中间体B (40 mg, 205.94 μmol)和2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (根据实施例3中的方法制备) (63.92 mg, 184.29 μmol, HCl盐)在DCM (2mL)中的溶液添加DIPEA (79.85 mg, 617.83 μmol, 107.62 μL)，和然后添加HATU(117.46 mg, 308.92 μmol)。在25℃下搅拌该混合物2小时。在减压下浓缩该反应混合物以除去DCM。用MeOH研磨粗产物以提供粗产物。通过反相HPLC纯化该粗产物 (0.1% FA条件)并冻干以提供作为白色固体的化合物 79 (30 mg, 56.33 μmol, 27.35%收率, FA盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 487.2. 1H NMR (400MHz, DMSO) δ = 12.44 (s, 1H), 8.89-8.87 (m, 1H) 8.68-8.66 (m, 2H), 8.30 (s, 1H), 8.01 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.96(s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.76-7.72 (m, 4H), 7.61-7.57 (m, 2H), 7.43-7.40 (m,1H), 4.93 (s,1H), 4.20 (d, J=6.0 Hz, 2H), 1.78-1.66 (m, 2H), 1.44 (s, 3H),0.71-0.67 (m, 3H) ppm。
实施例87. (R)-3-(2-羟基丁烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 80)和(S)-3-(2-羟基丁烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 81)的制备
Figure 990576DEST_PATH_IMAGE490
通过SFC (柱: DAICEL CHIRALPAK IC (250 mmx30mm, 10 um)；流动相: [0.1%NH3H2O MEOH]；B%: 55%-55%, 3.55 min；100 min)分离3-(1-羟基-1-甲基-丙基)-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]苯甲酰胺 (40 mg, 82.21 μmol)以提供产物1和产物2，和然后通过制备型HPLC(TFA条件；柱: Phenomenex Synergi C18 150x 25 x 10 μm；流动相: [水(0.1% TFA)-ACN]；B%: 21%-45%, 8 min)和反相 HPLC (0.1%FA条件)再次纯化产物1和产物2并冻干以提供作为白色固体的化合物 80 (5.14 mg,10.56 μmol, 12.85%收率)和作为白色固体和化合物 81 (1.35 mg, 2.77 μmol, 3.37%收率)。
化合物 80: LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 487.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ=8.90-8.87 (m, 1H) 8.68 (d, J=6.0 Hz, 2H), 8.42 (s, 1H), 8.31(s, 1H), 8.01 (d,J=8.0 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.77-7.72 (m, 4H), 7.61-7.58 (m,2H), 7.43-7.40 (m, 1H), 4.93 (s,1H), 4.20 (d, J=5.6 Hz, 2H), 1.74-1.70 (m,2H), 1.44 (s, 3H), 0.71-0.67 (m, 3H) ppm. SFC: IC-3-MeOH+CAN (DEA)-40-7min-3mL-35T.lcm；Rt: 2.757min, ee%=100%。
化合物 81: LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 487.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ=8.87 (s, 1H), 8.68 (d, J=6.0 Hz, 2H), 8.46 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.01 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.77-7.72 (m, 4H), 7.61-7.57 (m,2H), 7.43-7.39 (m, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.19 (d, J=5.2 Hz, 2H), 1.74-1.71 (m,2H), 1.44 (s, 3H), 0.71-0.67 (m, 3H) ppm. SFC: IC-3-MeOH+CAN (DEA)-40-7min-3mL-35T.lcm；Rt: 3.383min, ee%=100%。
实施例88. 3-(3-甲基-2-氧代吡咯烷-3-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 82)的制备
Figure 112116DEST_PATH_IMAGE491
步骤1: 2-(3-溴苯基)丙酸甲酯 (中间体B)的制备
Figure 481917DEST_PATH_IMAGE492
在-60℃下向2-(3-溴苯基)乙酸甲酯 (5 g, 21.83 mmol)在THF (50 mL)中的溶液添加LDA (2 M, 10.91 mL)。然后在-60℃下搅拌该混合物1小时。然后在-60℃下向该混合物添加MeI (2.79 g, 19.64 mmol, 1.22 mL)和然后在25℃下搅拌1小时。将该反应混合物倾倒入水 (50 mL)中并用EA (50 mL x 2)萃取，用盐水 (50 mL)洗涤有机层和经Na2SO4干燥和浓缩以提供粗产物。通过柱层析法纯化该粗产物 (SiO2, PE:EA=100:1至10:1) 并在真空下浓缩以提供作为无色油的中间体B (4.5 g, 18.01 mmol, 82.52%收率, 97.3%纯度)。LCMS (ESI) m/z [79BrM+H]+= 242.9. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.38 (s,1H), 7.32 (m, 1H), 7.18 - 7.09 (m, 2H), 3.64 - 3.57 (m, 4H), 1.42 (d, J = 7.2Hz, 3H) ppm。
步骤2: 2-(3-溴苯基)-3-氰基-2-甲基丙酸甲酯 (中间体D)的制备
Figure 638092DEST_PATH_IMAGE493
在0℃下向中间体B (2.5 g, 10.28 mmol)在DMF (50 mL)中的溶液添加NaH(822.64 mg, 20.57 mmol, 60%纯度)。然后在25℃下搅拌该混合物1小时。然后向该混合物添加2- 溴乙腈 (2.47 g, 20.57 mmol, 1.37 mL) 并在25℃下搅拌该溶液1小时。通过水(10 mL)淬灭该反应混合物和然后浓缩以提供粗产物。通过反相柱(FA)纯化该粗产物以提供作为无色油的中间体D (600 mg, 1.92 mmol, 18.69%收率)。LCMS (ESI) m/z [79BrM+H]+= 282.0. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.45 - 7.37 (m, 2H), 7.19 - 7.14 (m,2H), 3.67 (s, 3H), 3.03 - 2.90 (m, 1H), 2.86 -2.77 (m, 1H), 1.74 (s, 3H) ppm。
步骤3: 4-氨基-2-(3-溴苯基)-2-甲基丁酸甲酯 (中间体E)的制备
Figure 497464DEST_PATH_IMAGE494
在0℃下向中间体D (400 mg, 1.42 mmol)、NiCl2•6H2O (842.48 mg, 3.54 mmol)在MeOH (5 mL)中的溶液添加NaBH4 (536.38 mg, 14.18 mmol)。然后，在0℃下搅拌该混合物1小时。浓缩该反应混合物以提供粗产物。通过反相柱(FA)纯化该粗产物，调节洗脱物的pH至8并然后用EA (100 mL)萃取，在真空下浓缩有机层以提供作为无色油的中间体E (150mg, 263.66 μmol, 18.60%收率, 50.3%纯度)。LCMS (ESI) m/z [81BrM+H]+= 288.0。
步骤4: 3-(3-溴苯基)-3-甲基吡咯烷-2-酮 (中间体F)的制备
Figure 106299DEST_PATH_IMAGE495
向中间体E (150 mg, 524.17 μmol)在MeOH (1 mL)中的溶液添加K2CO3 (217.33mg, 1.57 mmol)。然后，在60℃下搅拌该混合物1小时。过滤该反应混合物并浓缩滤液以提供粗产物。通过反相(FA)纯化粗产物并冻干以提供作为白色固体的中间体F (70 mg,226.43 μmol, 43.20%收率, 82.2%纯度)。LCMS (ESI) m/z [81BrM+Na]+= 256.0. 1H NMR(400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.51 (m, 1H), 7.34 - 7.29 (m, 2H), 7.17 - 7.12 (m, 1H),3.37 - 3.19 (m, 2H), 2.43(m, 1H), 2.20 (m, 1H), 1.48 (s, 3H) ppm。
步骤5: 3-(3-甲基-2-氧代吡咯烷-3-基)苯甲酸 (中间体G)的制备
Figure 14213DEST_PATH_IMAGE496
向中间体F (60 mg, 236.11 μmol)、二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (14.46 mg, 23.61 μmol)、Pd(OAc)2 (2.65 mg, 11.81 μmol)、K2CO3 (48.95 mg,354.16 μmol)在DMSO (1 mL)中的溶液添加H2O (8.51 mg, 472.21 μmol, 8.51 μL)。然后，在100℃下在CO (15 psi)下搅拌该混合物16小时。在真空下浓缩该反应混合物。通过反相柱(FA)纯化该残余物以提供作为白色固体的中间体G (20 mg, 82.56 μmol, 34.97%收率, 90.5%纯度)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+= 220.1。
步骤6: 3-(3-甲基-2-氧代吡咯烷-3-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 82)的制备
Figure 24894DEST_PATH_IMAGE497
向中间体G (20 mg, 91.23 μmol)、2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (根据实施例3中的方法制备) (34.80 mg, 100.35 μmol, HCl)、EDCI (34.98mg, 182.45 μmol)、HOBt (24.65 mg, 182.45 μmol)在DMF (0.5 mL)中的溶液添加DIEA(58.95 mg, 456.13 μmol, 79.45 μL)。然后，在25℃下搅拌该混合物0.5小时。浓缩该反应混合物以提供粗产物。通过反相柱(FA)纯化该粗产物并冻干以提供作为白色固体的化合物82 (21.38 mg, 38.34 μmol, 42.03%收率, 100%纯度, FA)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=512.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.47 (br s, 1H), 8.97 (m, 1H), 8.74 -8.63 (m, 2H), 8.32 (s, 1H), 8.02 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.88 -7.83 (m, 2H), 7.81 - 7.74 (m, 4H), 7.64 - 7.58 (m, 2H), 7.50 - 7.42 (m, 1H),4.22 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.29 - 3.26 (m, 1H), 3.19 - 3.11 (m, 1H), 2.44 (m,1H), 2.25 - 2.14 (m, 1H), 1.45 (s, 3H) ppm。
实施例89. (E)-3-(1-氨基-1-(羟基亚氨基)-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 83)和3-(1-氨基-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 84)的制备
Figure 55167DEST_PATH_IMAGE498
步骤1: 3-(1-氰基-1-甲基-乙基)苯甲酸 (中间体B)的制备
Figure 151299DEST_PATH_IMAGE499
在0℃下向3-(氰基甲基)苯甲酸甲酯 (5 g, 28.54 mmol)在THF (50 mL)中的溶液添加NaH (3.42 g, 85.62 mmol, 60%纯度)并在25℃下搅拌0.5小时。然后在0℃下添加MeI (12.15 g, 85.62 mmol, 5.33 mL)。在25℃下搅拌该混合物16小时。在0℃下用H2O(50 mL)淬灭该反应混合物并在25oC下搅拌1小时并然后用EA萃取 (50 mL)。丢弃有机层并用1N HCl将水相调节至pH=5，然后用EA (50 mL x 2)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供作为无色油的中间体B (5 g, 26.43 mmol, 92.59%收率)，其直接用于接下来的步骤。1H NMR (400MHz, CDCl3) δ= 8.20 -8.10(m, 1H), 8.10-8.08(m, 1H), 7.81-7.79(m, 1H), 7.56-7.52 (m, 1H), 1.84-1.75 (m, 6H)
步骤2: 3-(2-氰基丙烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (中间体D)的制备
Figure 862903DEST_PATH_IMAGE500
向2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (根据实施例3中的方法制备) (250 mg, 720.81 μmol, HCl盐)和中间体B (150.02 mg, 792.89 μmol)在DCM (2mL)中的溶液添加EDCI (207.27 mg, 1.08 mmol)、HOBt (146.09 mg, 1.08 mmol)和DIPEA(465.78 mg, 3.60 mmol, 627.74 μL)。在25℃下搅拌该反应混合物16小时。向该反应混合物添加MeOH (2 mL)，形成沉淀物并过滤该混合物。用MeOH (2 mL)洗涤滤饼并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体D (250 mg, 460.99 μmol, 63.96%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 482.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 12.50 (s, 1H), 9.09-9.07 (m, 1H),8.73-8.63 (m, 2H), 8.31 (s, 1H), 8.06-7.99 (m, 2H), 7.89 (d, J = 8.0 Hz, 1H),7.84 (s, 1H), 7.79-7.71 (m, 4H), 7.59-7.57 (m, 2H), 4.23 (d, J = 5.6 Hz, 2H),1.74 (s, 6H) ppm。
步骤3: (E)-3-(1-氨基-1-(羟基亚氨基)-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 83)和3-(1-氨基-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 84)的制备
Figure 728091DEST_PATH_IMAGE501
向中间体D (50 mg,103.83 μmol)在EtOH (0.5 mL)中的溶液添加羟胺 (27.44mg, 415.31 μmol, 50%纯度)。在50℃下搅拌该反应混合物16小时。添加更多的羟胺(13.72 mg, 415.31 μmol)。在50℃下搅拌该反应混合物另外的24小时。在真空下浓缩该反应混合物。将该残余物溶解于DMSO (1 mL)中并通过反相快速(FA)纯化并冻干以得到作为白色固体的化合物 83 (6 mg, 10.50 μmol, 10.11%收率, FA盐) 和作为白色固体的化合物 84 (FG-A1541A) (2 mg, 3.30 μmol, 3.18%收率, FA盐)。
化合物 83: LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 515.1. 1H NMR (400MHz, DMSO) δ =9.14 (br s, 1H), 8.91-8.89 (m, 1H), 8.71-8.65 (m, 2H), 8.31-8.30 (m, 1H),8.20 (s, 1H), 8.01 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.79-7.73(m, 5H), 7.63-7.57 (m, 1H), 7.53-7.48 (m, 1H), 7.46-7.38 (m, 1H), 5.09 (s,2H), 4.21 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 1.47 (s, 6H) ppm。
化合物 84: LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 500.3. 1H NMR (400MHz, DMSO) δ =8.93-8.91 (m, 1H), 8.70-8.66 (m, 2H), 8.42 (s, 1H), 8.31-8.30 (m, 1H), 8.01(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.91-7.87 (m, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.80-7.72 (m, 5H),7.63-7.57 (m, 1H), 7.54-7.49 (m, 1H), 7.47-7.42 (m, 1H), 6.91 (br d, J = 11.2Hz, 2H), 4.20 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 1.48 (s, 6H) ppm。
实施例90. 3-羟基-3-甲基-N-((S)-4-(甲硫基)-1-氧代-1-((4-苯基噻唑-2-基)氨基)丁烷-2-基)-2-氧代吲哚啉-5-甲酰胺 (化合物 85)的制备
Figure 866948DEST_PATH_IMAGE502
步骤1: N-[(1S)-3-甲基硫烷基-1-[(4-苯基噻唑-2-基)氨基甲酰基]丙基]-2,3-二氧代-吲哚啉-5-甲酰胺 (中间体C)的制备
Figure 512693DEST_PATH_IMAGE503
向2,3-二氧代吲哚啉-5-甲酸 (49.89 mg, 261.00 μmol)、DIPEA (122.66 mg,949.09 μmol, 165.31 μL)、HOBt (48.09 mg, 355.91 μmol)和EDCI (68.23 mg, 355.91μmol)在DMF (1.5 mL)中的混合物添加(S)-2-氨基-4-(甲硫基)-N-(4-苯基噻唑-2-基)丁酰胺 (100 mg, 237.27 μmol)，然后在30℃下搅拌该反应混合物2小时。用H2O (10 mL)稀释该反应混合物并用EA (20 mL x 3)萃取。经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, DCM : MeOH=20:1至10:1) 并浓缩以提供作为红色固体的中间体C (30 mg, 41.83 μmol, 17.63%收率)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=481.1。
步骤2: 3-羟基-3-甲基-N-((S)-4-(甲硫基)-1-氧代-1-((4-苯基噻唑-2-基)氨基)丁烷-2-基)-2-氧代吲哚啉-5-甲酰胺 (化合物 85)的制备
Figure 27988DEST_PATH_IMAGE504
在N2下在30℃下向中间体C (15 mg, 31.21 μmol)在甲苯 (0.2 mL)中的混合物添加三甲基铝 (2 M, 31.21 μL)，然后在70℃下搅拌该反应混合物2小时。通过添加 H2O(30.0 mL)淬灭该反应混合物，然后用EA (20 mL x 3)萃取。经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过制备型HPLC纯化残余物 (柱: Waters Xbridge150x25 5u；流动相: [水(0.05% 氢氧化铵 v/v)-ACN]；B%: 22%-52%, 10 min) 并冻干以提供作为白色固体的化合物 85 (4.72 mg, 9.50 μmol, 30.45%收率)。LCMS (ESI) m/z[M+H]+=497.2. 1H NMR (400MHz, MeOD-d4) δ =7.96 (s, 1H), 7.90-7.87 (m, 3H),7.40-7.36 (m, 3H), 7.31-7.26 (m, 1H), 6.98 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.92 (m, 1H),2.71-2.64 (m, 2H), 2.30-2.22 (m, 2H), 2.14 (s, 3H), 1.55 (d, J=2.4 Hz, 3H)ppm。
实施例91. 3-(2-氨基丙烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 86)的制备
Figure 747682DEST_PATH_IMAGE505
步骤1: 3-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙烷-2-基)苯甲酸甲酯 (中间体B)的制备
Figure 57441DEST_PATH_IMAGE506
将N-[1-(3-溴苯基)-1-甲基-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (1 g, 3.18 mmol)、Pd(OAc)2 (35.72 mg, 159.13 μmol)、K2CO3 (659.76 mg, 4.77 mmol)、MeOH (203.95 mg,6.37 mmol, 257.57 μL)和二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (97.43 mg,159.13 μmol)在DMSO (10 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在100℃下在CO(50 psi)下搅拌该混合物16小时。将该反应混合物倾倒入水 (20 mL)中，用EA (20 mL x3)萃取该溶液，用盐水 (50 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥并过滤。浓缩滤液以提供残余物。通过反相 HPLC (0.1% FA条件)纯化滤液。用EA (5 mL)萃取该溶液，用(10 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥并过滤。浓缩滤液以提供作为黄色油的中间体B (400 mg,1.36 mmol, 42.77%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H-56]+ =238.2。
步骤2: 3-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙烷-2-基)苯甲酸 (中间体C)的制备
Figure 190482DEST_PATH_IMAGE507
向中间体B (150 mg, 511.32 μmol)在MeOH (2 mL)和H2O (1 mL)中的溶液添加NaOH (30.68 mg, 766.98 μmol)，在30℃下搅拌该反应混合物1小时。用1 N HCl 溶液将该反应混合物调节至pH=6，用EA (5 mL x 3)萃取该溶液，用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥并过滤。浓缩滤液以提供作为白色固体的中间体C (140 mg, 488.67 μmol, 95.57%收率)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+Na]+ =302.2。
步骤3: (2-(3-((2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酰基)苯基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯 (中间体E)的制备
Figure 243889DEST_PATH_IMAGE508
向中间体C (140 mg, 501.20 μmol)和2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (根据实施例3中的方法制备) (86.92 mg, 250.60 μmol, HCl盐)在DCM (2mL)中的溶液添加HATU (114.34 mg, 300.72 μmol)和DIEA (161.94 mg, 1.25 mmol,218.25 μL)，在30℃下搅拌该混合物1.5小时。用EA (5 mL x 3)萃取该反应混合物，用盐水(10 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥并过滤。浓缩滤液以提供作为白色固体的中间体E(140 mg, 210.14 μmol, 83.86%收率)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =572.3。
步骤4: 3-(2-氨基丙烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 86)的制备
Figure 83669DEST_PATH_IMAGE509
在30℃下搅拌中间体E (130 mg, 195.13 μmol)在HCl/二氧杂环己烷 (2 mL)中的混合物1小时。浓缩该反应混合物以提供残余物。通过制备型HPLC纯化残余物 (柱:Phenomenex Synergi C18 150x25x10um；流动相: [水(0.225%FA)-ACN]；B%: 4%-34%, 10min) 并冻干以提供作为白色固体的化合物 86 (18.47 mg, 35.68 μmol, 18.29%收率,FA盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ =472.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 9.01-9.00 (m,1H), 8.67-8.66 (m, 2H), 8.33-8.29 (m, 2H), 8.08 (br s, 1H), 8.00 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.82-7.71 (m, 6H), 7.61-7.56 (m, 1H), 7.49-7.45 (m, 1H), 4.21 (br d,J = 6.0 Hz, 2H), 1.51-1.47 (m, 6H) ppm。
实施例92. 3-(2-氰基丙烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 87)的制备
Figure 564329DEST_PATH_IMAGE510
步骤1: 3-(2-氰基丙烷-2-基)苯甲酸甲酯 (中间体B)的制备
Figure 122349DEST_PATH_IMAGE511
在0℃下向3-(氰基甲基)苯甲酸甲酯 (1 g, 5.71 mmol)在无水 THF (10 mL)中的溶液添加NaH (570.83 mg, 14.27 mmol, 60%纯度)。在0℃下搅拌该混合物0.5小时。然后添加MeI (2.03 g, 14.27 mmol, 888.41 μL)。在0℃下搅拌该混合物1.5小时。将该反应混合物倾倒入水 (50 mL)中，然后用EA (50 mL×2)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩以提供残余物。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (ISCO；20 gSepaFlash 硅胶快速柱, 以40 mL/min的0~30% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液)并浓缩以提供作为黄色油的中间体B (900 mg, 3.85 mmol, 67.49%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=204.1. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 8.14-8.10 (m, 1H), 8.01-7.99 (m, 1H), 7.76-7.69 (m, 1H), 7.49-7.47 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 1.77 (s, 6H) ppm。
步骤2: 3-(2-氰基丙烷-2-基)苯甲酸 (中间体C)的制备
Figure 776184DEST_PATH_IMAGE512
向中间体B (100 mg, 492.04 μmol)在THF (1 mL)中的溶液添加 H2O (0.5 mL)、EtOH (0.5 mL)和NaOH (39.36 mg, 984.07 μmol)。在30℃下搅拌该反应混合物2小时。用水 (5mL)稀释该反应混合物，然后通过EA (10 mL x 1)洗涤。通过1M HCl将水相酸化至pH=3，然后通过EA (10 mL×2)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干燥, 过滤并浓缩以提供作为黄色油的中间体C (60 mg, 251.40 μmol, 51.09%收率)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=190.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 8.07-8.06 (m,1H), 7.92-7.90 (m, 1H), 7.79-7.75 (m, 1H), 7.61-7.54 (m, 1H), 1.71 (s, 6H)ppm。
步骤3: 3-(2-氰基丙烷-2-基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 (化合物 87)的制备
Figure 470471DEST_PATH_IMAGE513
向中间体C (60 mg, 251.40 μmol)在DMF (2 mL)中的溶液添加EDCI (60.24 mg,314.25 μmol)、HOBt (42.46 mg, 314.25 μmol)、DIPEA (81.23 mg, 628.51 μmol,109.47 μL)和2-氨基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]乙酰胺 (根据实施例3中的方法制备) (72.66 mg, 209.50 μmol, HCl盐)。在30℃下搅拌该反应混合物17小时。用水(10 mL)研磨该反应混合物。过滤该悬浮液以提供白色固体。将固体溶解至DMSO (2 mL)中并通过反相HPLC (FA)纯化并冻干以提供作为灰白色固体的化合物 87 (30.23 mg, 56.48μmol, 26.96%收率, FA盐)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+ = 482.4. 1H NMR (400MHz, DMSO) δ= 12.31 (br s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.67-7.58 (m, 3H), 7.51 (s, 1H), 7.41-7.36(m, 1H), 7.33-7.27 (m, 1H), 7.02-6.95 (m, 1H), 6.56 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.66(s, 2H), 4.10 (d, J=5.6 Hz, 2H), 3.81 (br s, 4H), 3.16 (br s, 4H) ppm。
实施例93. 2-氨基-N-(4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)乙酰胺盐酸盐的制备
Figure 387611DEST_PATH_IMAGE514
步骤1: 6-氟吡啶-2-羰基氯的制备
Figure 167348DEST_PATH_IMAGE515
在0℃下向6-氟吡啶-2-甲酸 (24 g, 170.09 mmol)和DMF (124.32 mg, 1.70mmol, 130.86 uL)在DCM (240 mL)中的混合物添加(COCl)2 (107.95 g, 850.46 mmol,74.45 mL)，然后在25℃下搅拌该反应混合物0.5小时。在真空下浓缩该混合物以提供作为白色固体的中间体B (27 g, 粗物质)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。
步骤2: 2-氯-1-(6-氟-2-吡啶基)乙酮的制备
Figure 624874DEST_PATH_IMAGE516
在0℃下向中间体B (27 g, 169.23 mmol)在二氧杂环己烷 (300 mL)中的混合物逐滴添加TMSCHN2 (2 M, 169.23 mL)，然后在25℃下搅拌该反应混合物10小时。用HCl/二氧杂环己烷 (4 M, 300mL)淬灭该反应混合物并在25℃下搅拌2小时。然后在真空下浓缩混合物以提供残余物，用NaHCO3 (450 mL)稀释该残余物，用EA (300 mL*3)萃取。用盐水(200 mL * 2)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为白色固体的中间体C (29 g, 粗物质)，其直接用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ =174.1。
步骤3: 4-(6-氟-2-吡啶基)噻唑-2-胺的制备
Figure 439247DEST_PATH_IMAGE517
在25℃下搅拌中间体C (29 g, 167.08 mmol)、硫脲 (12.72 g, 167.08 mmol)在MeOH (250 mL)和H2O (250 mL)中的混合物10小时。用NaHCO3 (100 mL)稀释该混合物，然后在真空下浓缩以除去MeOH，然后过滤以提供粗产物。在25℃下用PE (100 mL)研磨该残余物10分钟，过滤并在真空中干燥该固体以提供作为白色固体的中间体D (27 g, 83%收率)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 195.8。
步骤4: N-[2-[[4-(6-氟-2-吡啶基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯的制备
Figure 261709DEST_PATH_IMAGE518
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸 (26.92 g, 153.68 mmol)、HATU (58.43 g,153.68 mmol)和DIEA (66.20 g, 512.25 mmol, 89.23 mL)在DCM (250 mL)中的溶液添加中间体D (25 g, 128.06 mmol)。在25℃下搅拌该反应混合物4小时。在真空下浓缩该反应混合物，然后用水 (200 mL)稀释并用EtOAc (300 mL * 4)萃取。用盐水 (300 mL * 2)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。在25℃下用MeOH (50mL)研磨粗产物15分钟，然后过滤以提供滤饼，用MTBE (50 mL*2)洗涤滤饼，在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体E (25 g, 55%收率)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 352.9.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.35 (s, 1H), 8.10 - 8.04 (m, 1H), 7.85 - 7.82(m, 2H), 7.17 - 7.10 (m, 2H), 3.88 - 3.81 (m, 2H), 1.39 (s, 8H) ppm。
步骤5: N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯的制备
Figure 528742DEST_PATH_IMAGE519
向(顺)-2,6-二甲基吗啉 (16.34 g, 141.89 mmol)、DIEA (11.00 g, 85.13mmol, 14.83 mL)在DMSO (200 mL)中的溶液添加中间体E (10 g, 28.38 mmol)。在密封管中在120℃下搅拌该反应混合物2小时。在真空下浓缩该反应混合物，然后用水 (600 mL)稀释并用EtOAc (300 mL * 3)萃取。用盐水 (200 mL * 2)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (石油醚/乙酸乙酯=50/1至1/1)，在真空下浓缩该级分以提供粗产物。在25℃下用MeOH (30 mL)研磨粗产物15分钟，过滤并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体F (6.4 g, 76%收率)。LCMS (ESI) m/z:[M+H]+ = 448.1。
步骤6: 2-氨基-N-[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]乙酰胺盐酸盐的制备
Figure 462063DEST_PATH_IMAGE520
在25℃下搅拌中间体F (3.6 g, 8.04 mmol)在HCl/二氧杂环己烷 (4 M, 72.00mL)中的溶液1小时。在真空下浓缩该混合物以提供作为粗产物的残余物，和在25℃下用MTBE (100 mL)研磨粗产物15分钟，过滤并在真空下干燥以提供作为白色固体的标题化合物 (4.4 g, 粗物质, HCl盐)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 348.0. 1H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ= 8.17 (s, 1H), 8.11 - 8.07 (m, 1H), 7.54 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.36(d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.08 (d, J= 8.8 Hz, 4H), 3.85 - 3.81 (m, 2H), 2.98 -2.92 (m, 2H), 1.30 (d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm。
实施例94. 3-(羟甲基)-3-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-甲酸的制备
Figure 130942DEST_PATH_IMAGE521
步骤1: 5-溴-2-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-甲酸乙酯的制备
Figure 124306DEST_PATH_IMAGE522
向5-溴-2-羟基-苯甲醛 (10 g, 49.75 mmol)和乙氧基乙烷；三氟硼烷；氟化氢(805.57 mg, 4.97 mmol, 682.69 uL)在DCM (25 mL)中的溶液添加2-重氮乙酸乙酯(9.08 g, 79.60 mmol)/DCM (25 mL)。在30℃下搅拌该混合物0.5小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供作为棕色液体的中间体B (15 g, 粗物质)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。
步骤2: 5-溴苯并呋喃-3-甲酸乙酯的制备
Figure 878635DEST_PATH_IMAGE523
在20℃下搅拌中间体B (15 g, 52.25 mmol)在H2SO4 (67.97 g, 679.19 mmol,36.94 mL, 98%纯度)中的混合物1小时。用DCM (200 mL)稀释该反应混合物和用固体Na2CO3(50 g)中和。然后过滤该悬浮液，并在减压下浓缩滤液以提供残余物。通过反相 (0.1% FA)纯化该残余物并在减压下浓缩以提供作为浅黄色固体的中间体C (5.5 g, 39%收率)。1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.82 (s, 1H), 8.06 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.60 - 7.57 (m, 1H), 4.38 - 4.32 (m, 2H), 1.36 - 1.32 (m, 3H)ppm。
步骤3: 5-溴-2,3-二氢苯并呋喃-3-甲酸甲酯的制备
Figure 8790DEST_PATH_IMAGE524
在20℃下向中间体C (5 g, 18.58 mmol)在MeOH (250 mL)中的溶液添加Mg(2.38 g, 97.92 mmol)。在30℃下搅拌该混合物4小时。用1N HCl (50 mL)淬灭该反应混合物，然后用水 (200 mL) 稀释并用EtOAc (200 mL * 2)萃取。用盐水 (200 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相 (0.1% FA)纯化该残余物并在减压下浓缩以提供作为浅黄色油的中间体D (3 g, 63%收率)。LCMS (ESI) m/z:[81BrM+H]+ = 259.0. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.46 - 7.45 (m, 1H), 7.36 -7.33 (m, 1H), 6.81 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.80 - 4.69 (m, 2H), 4.56 - 4.52 (m,1H), 3.72 (s, 3H) ppm。
步骤4: 5-溴-3-甲基-2H-苯并呋喃-3-甲酸甲酯的制备
Figure 532175DEST_PATH_IMAGE525
在N2下在0℃下向中间体D (2500 mg, 9.72 mmol)和MeI (1.38 g, 9.72 mmol,605.40 uL)在DMF (45 mL)中的溶液添加t-BuOK (1 M, 14.59 mL)，然后在0℃下搅拌该混合物1小时。通过添加 1 N HCl (30 mL)淬灭该反应混合物，和然后用水 (100 mL)稀释并用MTBE (100 mL * 2)萃取。用盐水 (100 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法 (SiO2, PE/EA=6:1)纯化该反应混合物并在减压下浓缩以提供作为浅黄色油的中间体E(800 mg, 28%收率)。LCMS (ESI) m/z: [BrM+H]+=271.0. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.43 - 7.72 (m, 1H), 7.29 - 7.27 (m, 1H),6.70 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.07 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.27 (d, J = 9.2 Hz, 1H),3.76 (s, 3H), 1.61 (s, 3H) ppm。
步骤5: 5-溴-3-甲基-2H-苯并呋喃-3-甲酸的制备
Figure 962019DEST_PATH_IMAGE526
向中间体E (800 mg, 2.95 mmol)在MeOH (8 mL)和水(8 mL)中的溶液添加NaOH(236.07 mg, 5.90 mmol)。在30℃下搅拌该混合物2小时。在减压下浓缩该反应混合物以除去MeOH。然后用水 (30 mL)稀释该残余物和用1 N HCl 酸化至pH 4.0，然后用EtOAc (50mL * 3)萃取。经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。该残余物不经进一步纯化即用于接下来的步骤。中间体F (800 mg, 粗物质) 作为浅黄色固体，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.46 (d, J = 2.0Hz, 1H), 7.31 - 7.28 (m, 1H), 6.71 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.05 (d, J = 8.8 Hz,1H), 4.28 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 1.64 (s, 3H) ppm。
步骤6: (5-溴-3-甲基-2H-苯并呋喃-3-基)甲醇的制备
Figure 203645DEST_PATH_IMAGE527
在0℃下在N2下向中间体F (800 mg, 3.11 mmol)在THF (8 mL)中的溶液添加BH3-THF (1 M, 4.67 mL)，然后在30℃下搅拌该混合物2小时。将该反应混合物倾倒入1N HCl(20 mL)中和用水 (50 mL)稀释并用EtOAc (100 mL * 2)萃取。用盐水 (100 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为浅黄色油的中间体G (740 mg,98%收率)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。LCMS (ESI) m/z: [81BrM+H]+ =245.0。
步骤7: 3-(羟甲基)-3-甲基-2H-苯并呋喃-5-甲酸的制备
Figure 478768DEST_PATH_IMAGE528
向中间体G (740 mg, 3.04 mmol)、Pd(OAc)2 (34.17 mg, 152.20 umol)和二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (186.38 mg, 304.41 umol)在DMSO (15mL)和水(1 mL)中的溶液添加K2CO3 (631.06 mg, 4.57 mmol)和在100℃下在CO (15 psi)下搅拌4小时。用水 (100 mL)稀释该反应混合物并用MTBE (100 mL * 2)萃取。水相用1 NHCl酸化至pH 4.0 并用EtOAc (100 mL * 2)萃取。用盐水 (100 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为浅黄色固体的3-(羟甲基)-3-甲基-2H-苯并呋喃-5-甲酸 (500 mg, 粗物质)，其不经进一步纯化即使用。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+=209.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.50 (s, 1H), 7.77 - 7.74 (m, 2H), 6.81(d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.05 - 5.02 (m, 1H), 4.56 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.19 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 3.47 - 3.42 (m, 2H), 2.54 (s, 1H), 1.28 (s, 3H) ppm。
实施例95. 3-(羟甲基)-3-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-甲酸的制备
Figure 184556DEST_PATH_IMAGE529
步骤1: 3-(3-溴苯基)四氢呋喃-3-醇的制备
Figure 519723DEST_PATH_IMAGE530
在-70℃下在N2下向1,3-二溴苯 (4 g, 16.96 mmol, 2.04 mL)在THF (40 mL)中的溶液逐滴添加n-BuLi (2.5 M, 6.78 mL)。在-70℃下搅拌该混合物30分钟和然后在-70℃下逐滴添加四氢呋喃-3-酮 (1.46 g, 16.96 mmol)在THF (3 mL)中的溶液。在-70℃下搅拌该混合物1 h。将该反应混合物倾倒入饱和NH4Cl 溶液 (50 mL)中。用EA (30 mL*3)萃取该溶液，经Na2SO4干燥合并的有机层并在真空下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (PE:EA=5:1, Rf=0.3, SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至5/1)。在真空下浓缩该溶液以提供作为无色油的中间体B (4 g, 73%收率)。LCMS (ESI) m/z: [81BrM-18]+= 227.0.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ= 7.69 - 7.68 (m, 1H), 7.50 - 7.42 (m, 2H), 7.35 -7.28 (m, 1H), 5.55 - 5.38 (m, 1H), 4.01 - 3.97 (m, 2H), 3.81 - 3.70 (m, 2H),2.27 - 2.20 (m, 1H), 2.13 - 2.08 (m, 1H) ppm。
步骤2: 3-(3-羟基四氢呋喃-3-基)苯甲酸的制备
Figure 248644DEST_PATH_IMAGE531
在CO 气氛 (15 psi)下向中间体B (300 mg, 1.23 mmol)在DMSO (3 mL)中的溶液添加二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (75.56 mg, 123.41 umol)、Pd(OAc)2 (27.71 mg, 123.41 umol)、K2CO3 (255.84 mg, 1.85 mmol)、H2O (44.46 mg,2.47 mmol, 44.46 uL)。在100℃下在CO 气氛 (15 psi)下搅拌该混合物16小时。用MeOH(3 mL)稀释该反应混合物。过滤该混合物并用MeOH (3 mL*3)洗涤并在减压下浓缩以提供残余物。通过反相HPLC (0.1% FA条件)纯化该残余物。用EA (20 mL*3)萃取该溶液。用盐水(30 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为白色固体的3-(羟甲基)-3-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-甲酸 (100 mg, 39%收率)。LCMS (ESI) m/z: [M-17]+ = 191.1。
实施例96. 3-(1-羟乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酸的制备
Figure 327459DEST_PATH_IMAGE532
步骤1: 6-溴-2,3-二氢-1H-茚-1-甲酸的制备
Figure 887753DEST_PATH_IMAGE533
向6-溴-2,3-二氢-1H-茚-1-甲腈 (1 g, 4.50 mmol)在EtOH (60 mL)中的溶液添加KOH (20 g, 178.24 mmol, 20 mL, 50%纯度)，在100℃下搅拌该混合物16小时。浓缩该混合物以提供溶液，用MTBE (100 mL)萃取溶液，用1N HCl调节水相至pH=3，用EA (100 mL*3)萃取该溶液，用盐水 (200 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供作为黄色油的中间体B (1.09 g, 100%收率)。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 13.12 -11.89 (m, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.38 - 7.35 (m, 1H), 7.21 (d, J = 8.0 Hz, 1H),4.03 - 3.99 (m, 1H), 2.91 - 2.79 (m, 2H), 2.28 - 2.22 (m, 2H) ppm。
步骤2: 6-溴-N-甲氧基-N-甲基-2,3-二氢-1H-茚-1-甲酰胺的制备
Figure 659400DEST_PATH_IMAGE534
向中间体B (1.09 g, 4.52 mmol)和N-甲氧基甲胺 (485.13 mg, 4.97 mmol)在DCM (10 mL)中的溶液添加EDCI (1.04 g, 5.43 mmol)、HOBt (733.12 mg, 5.43 mmol)和DIEA (2.92 g, 22.61 mmol, 3.94 mL)，在30℃下搅拌该混合物16小时。浓缩该反应混合物以提供残余物。通过反相HPLC (0.1% FA条件)纯化该残余物。用EA (20 mL *3)萃取该溶液，经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并浓缩以提供作为黄色油的中间体C (900 mg, 70%收率)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 283.9. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.38 (s, 1H),7.31 -7.29 (m, 1H), 7.11 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.46 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 3.78(s, 3H), 3.28 (s, 3H), 3.16 - 3.02 (m, 1H), 2.90 - 2.88 (m, 1H), 2.46 - 2.25(m, 2H) ppm。
步骤3: 1-(6-溴茚满-1-基)乙酮的制备
Figure 610038DEST_PATH_IMAGE535
在0℃下向中间体C (800 mg, 2.82 mmol)在THF (1 mL)中的溶液添加MeMgBr (3M, 1.13 mL)，在30℃下搅拌该混合物1小时。将该反应混合物倾倒入NH4Cl (10 mL)中，用EA (10 mL *3)萃取该溶液，用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供作为黄色油的中间体D(600 mg, 89%收率)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 239.1. 1HNMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.41 (s, 1H), 7.34 - 7.32 (m, 1H), 7.13 - 7.11(m,1H), 4.09 - 4.05 (m, 1H), 3.05 - 2.92 (m, 1H), 2.90 - 2.83 (m, 1H), 2.37 -2.32 (m, 2H), 2.21 (s, 3H) ppm。
步骤4: 1-(6-溴-2,3-二氢-1H-茚-1-基)乙醇的制备
Figure 492544DEST_PATH_IMAGE536
在0℃下向中间体D (600 mg, 2.51 mmol)在MeOH (6 mL)中的溶液添加NaBH4(189.87 mg, 5.02 mmol)，在0℃下搅拌该混合物1小时。将该反应混合物倾倒入NH4Cl (10mL)中，用EA (10 mL)萃取该溶液，用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供残余物。该残余物与另一批合并。通过反相HPLC (0.1% FA条件)纯化该粗产物。用EA (20 mL *3)萃取该溶液，经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并浓缩以提供作为黄色油的中间体E (380 mg, 1.58 mmol, 62.80%收率, N/A纯度)。
LCMS (ESI) m/z: [M-17]+= 223.1. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.57 (s,1H), 7.41 (s, 1H), 7.30 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.11 - 7.08 (m, 1H), 4.25 - 3.89(m, 1H), 3.25 - 3.14 (m, 1H), 2.95 - 2.76 (m, 2H), 2.25 - 1.85 (m, 2H), 1.95- 1.84 (m, 1H), 1.26 - 1.22 (m, 3H) ppm。
步骤5: 3-(1-羟乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酸的制备
Figure 907345DEST_PATH_IMAGE537
向中间体E (300 mg, 1.24 mmol)在DMSO (3 mL)中的溶液添加二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (76.18 mg, 124.42 umol)、Pd(OAc)2 (27.93 mg,124.42 umol)、K2CO3 (343.90 mg, 2.49 mmol)和H2O (2.24 mg, 124.42 umol, 2.24uL)，在100℃下搅拌该混合物2小时。过滤该反应混合物以提供溶液。通过反相 HPLC (0.1%FA条件)纯化该溶液。用EA (10 mL *3)萃取该溶液，经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并浓缩以提供作为黄色油的3-(1-羟乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酸(50 mg, 19%收率)。LCMS(ESI) m/z: [M-17]+= 189.2。
实施例97. 4-氰基-4-甲基色满-6-甲酸的制备
Figure 849893DEST_PATH_IMAGE538
步骤1: 6-溴色满-4-甲腈的制备
Figure 287827DEST_PATH_IMAGE539
在0℃下向6-溴色满-4-酮 (50 g, 220.21 mmol)和1-(异氰基甲基磺酰基)-4-甲基-苯 (64.49 g, 330.32 mmol)在DME (2500 mL)和EtOH (100 mL)中的溶液添加tBuOK(54.36 g, 484.47 mmol)。在25℃下搅拌该反应混合物16小时。将该反应混合物倾倒入水(2 L)中并用NH4Cl (56.9 g, 1.1 eq的tBuOK)调节至pH=6~7。在真空下浓缩该混合物以除去 DME和EtOH。用EA (1.5 L *2)萃取水相。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层并在真空下浓缩。通过快速硅胶层析法 (PE~PE/EA=20/1)纯化该残余物，由PE/EA=35/1收集所需的点。在真空下浓缩该级分。用MTBE (150 mL)研磨与另一批合并的残余物。过滤该固体并在真空下浓缩以提供作为白色固体的中间体B (40 g, 34%收率)。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ =7.43 - 7.42 (m, 1H), 7.33 - 7.31 (m, 1H), 6.76 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.36 -4.30 (m, 1H), 4.26 - 4.21 (m, 1H), 4.01 - 3.98 (m, 1H), 2.35 - 2.31 (m, 2H)ppm。
步骤2: 6-溴-4-甲基-色满-4-甲腈的制备
Figure 708444DEST_PATH_IMAGE540
在0℃下向中间体B (25 g, 105.01 mmol)在THF (250 mL)中的溶液添加NaH(8.40 g, 210.01 mmol, 60%纯度)。在0℃下搅拌该反应混合物0.5小时。然后添加MeI(74.52 g, 525.03 mmol, 32.69 mL)。在25℃下搅拌该反应混合物2小时。用NH4Cl水溶液(800 mL)稀释该反应混合物，用EA (800 mL*3)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以得到残余物。通过快速硅胶层析法 (PE:EA=1:0至5:1)纯化该残余物，在减压下浓缩该级分以得到作为浅黄色固体的中间体C (18 g, 66%收率)。1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 7.69 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.41 - 7.38 (m, 1H), 6.83 (d, J =8.8 Hz, 1H), 4.33 - 4.25 (m, 1H), 4.24 - 4.15 (m, 1H), 2.41 - 2.35 (m, 1H),2.17 - 2.11 (m, 1H), 1.75 (s, 3H) ppm。
步骤3: 4-氰基-4-甲基-色满-6-甲酸的制备
Figure 181014DEST_PATH_IMAGE541
将中间体C (8.5 g, 33.72 mmol)、二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (2.06 g, 3.37 mmol)、K2CO3 (6.99 g, 50.57 mmol)、Pd(OAc)2 (756.95 mg, 3.37mmol)和H2O (1.22 g, 67.43 mmol, 1.22 mL)在DMSO (85 mL)中的混合物脱气并用CO吹扫三次，和然后在100℃下在CO (15 psi) 气氛下搅拌该混合物14小时。过滤与另一批合并的反应混合物以移除黑色固体，和然后用水 (60 mL)稀释，用EA (60 mL*2)萃取。丢弃有机层，和用HCl水溶液将水相调节至pH=4，形成大量沉淀物，过滤该混合物并在真空中干燥该固体以提供白色固体。用水 (40 mL*2)洗涤白色固体，过滤并在真空下干燥以提供作为白色固体的4-氰基-4-甲基-色满-6-甲酸 (12 g, 76%收率)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+=218.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.02 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.81 - 7.78(m, 1H), 6.95 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.40 - 4.24 (m, 2H), 2.46 - 2.40 (m, 1H),2.24 - 2.17 (m, 1H), 1.76 (s, 3H) ppm。
实施例98. 3-氰基-3-(羟甲基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酸的制备
Figure 28884DEST_PATH_IMAGE542
步骤1: 6-溴-2,3-二氢-1H-茚-1-甲腈的制备
Figure 954115DEST_PATH_IMAGE543
在0℃下向6-溴茚满-1-酮 (50 g, 236.91 mmol)和1-(异氰基甲基磺酰基)-4-甲基-苯 (69.38 g, 355.36 mmol)在DME (2500 mL)和EtOH (100 mL)中的溶液添加t-BuOK(53.17 g, 473.81 mmol)。在25℃下搅拌该反应混合物16小时。该反应混合物变得浑浊。将该反应混合物（每批）倾倒入水 (2000 mL)中并用EA (2000 mL *2)萃取。在真空下浓缩合并的有机层（含水）以除去DME&EtOH。然后用EA (500 mL)稀释，用盐水 (500 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并在真空下浓缩。通过硅胶柱层析法纯化该残余物 (1000 g的100# 硅胶, PE~PE/EA=20/1, 从PE/EA=30/1中收集的所需的点)。在真空下浓缩该级分 并用MTBE (100mL)研磨以提供作为白色固体的中间体B (58 g, 55%收率)。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ= 7.58 (s, 1H), 7.42 - 7.40 (m, 1H), 7.16 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.12 - 4.08(m, 1H), 3.10 - 3.00 (m, 1H), 2.97 - 2.86 (m, 1H), 2.65 - 2.55 (m, 1H), 2.43- 2.37 (m, 1H) ppm。
步骤2: 6-溴-1-(羟甲基)-2,3-二氢-1H-茚-1-甲腈的制备
Figure 178423DEST_PATH_IMAGE544
在0~10℃下向中间体B (2 g, 9.01 mmol)在THF (10 mL)中的溶液添加NaH(720.46 mg, 18.01 mmol, 60%纯度)。在25℃下搅拌该反应混合物0.5小时。然后在25℃下添加多聚甲醛 (313.62 mg, 10.81 mmol)。在25℃下搅拌该反应混合物2小时。将该反应混合物倾倒入饱和NH4Cl水溶液 (100 mL)中并用EA (100 mL *3)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层并在真空下浓缩。通过快速硅胶层析法 (PE~PE/EA=3/1)纯化该残余物。在真空下浓缩该级分以提供作为无色油的中间体C (2 g, 85%收率)。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.62 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.51 - 7.48 (m 1H), 7.28 (d, J = 8.0 Hz,1H), 5.76 - 5.73 (m, 1H), 3.69 - 3.59 (m, 2H), 2.94 - 2.91 (m, 2H), 2.42 -2.37 (m, 2H) ppm。
步骤3: 3-氰基-3-(羟甲基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酸的制备
Figure 239920DEST_PATH_IMAGE545
将中间体C (2 g, 7.93 mmol)、二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (485.71 mg, 793.31 umol)、Pd(OAc)2 (178.11 mg, 793.31 umol)、K2CO3 (3.29 g,23.80 mmol)和H2O (285.91 mg, 15.87 mmol, 285.91 uL)在DMSO (30 mL)中的混合物脱气并用CO吹扫三次，和然后在100℃下在CO (15 Psi) 气氛下搅拌该混合物14小时。过滤该反应混合物并用EA (200 mL) & H2O (200 mL)洗涤。分离有机层并丢弃。用HCl (2M)调节水相至pH=4 并然后用EA (150 mL *3)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以得到残余物。通过反相快速(FA)纯化该残余物。浓缩该级分以除去MeCN 并冻干以提供作为白色固体的3-氰基-3-(羟甲基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酸(1 g, 54%收率) 。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 218.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 14.06 - 12.13(m, 1H), 7.98 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.91 - 7.88 (m, 1H), 7.43 (d, J = 7.6 Hz,1H), 5.75 - 5.72 (m, 1H), 3.64 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 3.04 - 3.01 (m, 2H), 2.45- 2.41 (m, 2H) ppm。
实施例99. 3-((反)-4-羟基四氢呋喃-3-基)苯甲酸的制备
Figure 914484DEST_PATH_IMAGE546
步骤1: 反-4-(3-溴苯基)四氢呋喃-3-醇的制备
Figure 327010DEST_PATH_IMAGE547
在-70℃下向1,3-二溴苯 (5 g, 21.20 mmol, 2.55 mL)在THF (50 mL)中的溶液添加n-BuLi (2.5 M, 8.48 mL)，在-70℃下搅拌该混合物30分钟，然后在-70℃下向该溶液添加3,6-二氧杂双环[3.1.0]己烷 (912.33 mg, 10.60 mmol)和BF3•Et2O (3.01 g, 21.20mmol, 2.62 mL)，在-70℃下搅拌该混合物2小时。将该反应混合物倾倒入NH4Cl (50 mL)中，用EA (50 mL *3)萃取该溶液，用盐水 (100 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供残余物。通过反相HPLC (0.1% FA条件)纯化该粗产物。用EA (30 mL *3)萃取该溶液，经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并浓缩以提供作为黄色油的中间体B (1 g, 39%收率)。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.36 - 7.28 (m, 2H), 7.15 - 7.09 (m, 2H),4.34 - 4.20 (m, 2H), 4.07 - 4.00 (m, 1H), 3.85 - 3.83 (m, 1H), 3.74 - 3.72(m, 1H), 3.20 - 3.18 (m, 1H) ppm。
步骤2: 3-((反)-4-羟基四氢呋喃-3-基)苯甲酸的制备
Figure 355009DEST_PATH_IMAGE548
向中间体B (200.00 mg, 822.72 umol)在DMSO (1 mL)中的溶液添加二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (25.19 mg, 41.14 umol)、Pd(OAc)2 (18.47mg, 82.27 umol)、K2CO3 (170.56 mg, 1.23 mmol)和H2O (29.64 mg, 1.65 mmol, 29.64uL)，在CO (15 psi)下在100℃下搅拌该混合物 16小时。将该反应混合物倾倒入水 (5 mL)中，用1N HCl调节该溶液至pH=4，用EA (5 mL *3)萃取该溶液，用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供残余物。通过反相HPLC (0.1% FA条件)纯化该粗产物。用EA (20 mL)萃取该溶液，经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并浓缩以提供作为黄色油的3-((反)-4-羟基四氢呋喃-3-基)苯甲酸(40 mg, 22%收率)。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 8.07 - 7.96 (m, 2H), 7.58 - 7.52 (m, 1H), 7.50 - 7.43 (m, 1H), 4.46(d, J = 3.6 Hz, 1H), 4.40 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.19 - 4.12 (m, 1H), 3.98 (d,J = 5.6, 1H), 3.86 (d, J = 3.2, 1H), 3.43 - 3.42 (m, 1H) ppm。
实施例100. 3-(1-氟-3-羟基环丁基)苯甲酸的制备
Figure 536592DEST_PATH_IMAGE549
步骤1: 3-(苄氧基)-1-(3-溴苯基)环丁醇的制备
Figure 788582DEST_PATH_IMAGE550
在-70℃下在N2 气氛下向1-溴-3-碘-苯 (10 g, 35.35 mmol, 4.50 mL)在THF(200 mL)中的溶液添加n-BuLi (2.5 M, 15.55 mL)，在搅拌30分钟后添加3-苄氧基环丁酮(7.47 g, 42.42 mmol)并在25℃下搅拌1小时。用饱和 NH4Cl水溶液(1 mL)淬灭该混合物，用EA (5 mL *3)萃取并浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至1/100) 并浓缩以提供作为棕色油的中间体B (8 g, 61%收率) 。1H NMR(400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.53 - 7.52 (m, 1H), 7.36 - 7.27 (m, 4H), 7.27 (s, 3H),7.19 - 7.12 (m, 1H), 4.39 (s, 2H), 3.84 - 3.77 (m, 1H), 2.89 - 2.70 (m, 2H),2.42 - 2.36 (m, 2H) ppm。
步骤2: 1-(3-(苄氧基)-1-氟环丁基)-3-溴苯的制备
Figure 688405DEST_PATH_IMAGE551
在-70℃下在N2 气氛下向中间体B (4 g, 12.00 mmol)在DCM (80 mL)中的溶液添加DAST (9.67 g, 60.02 mmol, 7.93 mL)。然后在-70℃下搅拌该混合物1小时。用饱和NH4Cl 水溶液(30 mL)淬灭该混合物并用EA (100 mL *3)萃取，浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至30/1) 并浓缩以提供作为棕色油的中间体C (3.5 g, 70%收率) 。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.51 - 7.43 (m, 1H),7.35 - 7.34 (m, 1H), 7.32 - 7.27 (m, 2H), 7.26 - 7.13 (m, 4H), 4.41 (s, 2H),4.40 - 4.34 (m, 1H), 2.87 - 2.75 (m, 2H), 2.52 - 2.30 (m, 2H) ppm。
步骤3: 3-(3-(苄氧基)-1-氟环丁基)苯甲酸的制备
Figure 254515DEST_PATH_IMAGE552
在25℃下向中间体C (2.3 g, 6.86 mmol)在DMSO (20 mL)和H2O (10 mL)中的溶液添加二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (420.09 mg, 686.14 umol)、K2CO3 (1.42 g, 10.29 mmol)、Pd(OAc)2 (77.02 mg, 343.07 umol)，然后将该混合物脱气并用CO吹扫三次，和然后在100℃下在CO 气氛 (15 psi)下搅拌该混合物16小时。过滤该混合物。通过制备型HPLC (柱: Shim-pack C18 150*25*10um；流动相: [水(0.2%FA)-ACN]；B%:44%-74%, 10min) 纯化滤液并浓缩以提供作为白色固体的中间体D (1.8 g, 79%收率)。LCMS (ESI) m/z: [M+18]+= 318.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 13.49 -12.53 (m, 1H), 8.03 - 7.88 (m, 2H), 7.70 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.63 - 7.51 (m,1H), 7.36 (d, J = 4.4 Hz, 4H), 7.33 - 7.27 (m, 1H), 4.47 (s, 2H), 4.46 - 4.40(m, 1H), 3.04 - 2.82 (m, 2H), 2.71 - 2.54 (m, 2H) ppm。
步骤4: 3-(1-氟-3-羟基环丁基)苯甲酸的制备
Figure 556184DEST_PATH_IMAGE553
向中间体D (450 mg, 1.50 mmol)在DCM (5 mL)中的溶液添加DDQ (680.27 mg,3.00 mmol)。在25℃下搅拌该悬浮液16小时。用饱和Na2SO3水溶液 (5 mL)洗涤该混合物，用EA (10 mL *3)萃取并浓缩以提供残余物。通过反相(FA)纯化该残余物以提供作为棕色油的3-(1-氟-3-羟基环丁基)苯甲酸 (100 mg, 22%收率)。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ =8.24 - 8.14 (m, 1H), 8.08 - 8.07 (m, 1H), 7.77 - 7.66 (m, 1H), 7.60 - 7.49(m, 1H), 4.87 - 4.83 (m, 1H), 4.38 - 4.22 (m, 1H), 3.15 - 2.96 (m, 2H), 2.86- 2.67 (m, 1H), 2.66 - 2.47 (m, 1H) ppm。
实施例101. 2-羟基-2',3'-二氢螺[环戊烷-1,1'-茚]-6'-甲酸的制备
Figure 916758DEST_PATH_IMAGE554
步骤1: 2-(2-溴-4-甲氧基苯基)乙醇的制备
Figure 38297DEST_PATH_IMAGE555
在0℃下在N2下向2-(2-溴-4-甲氧基-苯基)乙酸 (24 g, 97.93 mmol)在THF(200 mL)中的溶液添加BH3 .THF (1 M, 293.79 mL)。在25℃下搅拌该反应混合物12小时。通过添加MeOH (300 mL)淬灭该反应混合物，在减压下浓缩所得混合物。将该残余物再次溶解在EA (300 mL)中。用水 (100 mL *3)洗涤所得溶液。经无水 Na2SO4干燥有机相，过滤并在减压下浓缩以提供作为无色油的中间体B (27 g, 粗物质)。LCMS (ESI) m/z: [M-17]+=215.0. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.20 - 7.15 (m, 1H), 7.14 - 7.09 (m, 1H),6.85 - 6.79 (m, 1H), 3.85 (m, 1H), 3.84 - 3.81 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 2.97(m, 2H) ppm。
步骤2: 中间体3 2-溴-1-(2-碘乙基)-4-甲氧基苯的制备
Figure 408099DEST_PATH_IMAGE556
在0℃下在N2下向PPh3 (32.69 g, 124.63 mmol)和咪唑 (8.48 g, 124.63 mmol)在DCM (200 mL)中的溶液逐份添加I2 (31.63 g, 124.63 mmol, 25.10 mL) (苛性放热)。然后在0℃下在N2下逐滴添加中间体B (24 g, 103.86 mmol)在DCM (30 mL)中的溶液。在0℃下搅拌该反应混合物3小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至10/1) 以提供作为无色油的中间体C (33.3g, 94%收率)。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.15 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.12 - 7.09 (m, 1H), 6.83 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.39 - 3.31(m, 2H), 3.28 - 3.19 (m, 2H) ppm。
步骤3: N-(2-(2-溴-4-甲氧基苯乙基)环戊叉基)环己胺的制备
Figure 298695DEST_PATH_IMAGE557
在0℃下在N2下向中间体C (14.54 g, 87.98 mmol)在THF (200 mL)中的溶液逐滴添加LDA (2 M, 43.99 mL)。在0℃下搅拌该反应混合物30分钟。冷却该混合物至-5℃并在-5℃下逐滴添加N-环己基环戊亚胺(25 g, 73.32 mmol)在THF (25 mL)中的溶液。在-5℃下搅拌该反应混合物1小时。用饱和NH4Cl (200 mL)淬灭该反应混合物。用EA (200 mL *3)萃取所得混合物。将有机相与另一批合并。经Na2SO4干燥合并的有机相，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的中间体D (41 g, 粗物质)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 378.1。
步骤4: 2-(2-溴-4-甲氧基苯乙基)环戊酮的制备
Figure 95749DEST_PATH_IMAGE558
在25℃下向中间体D (41 g, 108.37 mmol)在THF (150 mL)和H2O (30 mL)中的溶液添加草酸 (14.64 g, 162.55 mmol, 792.93 uL)。在25℃下搅拌该反应混合物2小时。用水 (200 mL)淬灭所得混合物并用DCM (250 mL *3)萃取。采用饱和NaHCO3 (100 mL *3)洗涤合并的有机相。经Na2SO4干燥有机相，过滤并在减压下浓缩。通过柱层析法纯化该粗产物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至5/1, Rf=0.29) 以提供粗物质。通过反相 HPLC(0.1% FA条件)纯化该粗物质。在减压下浓缩分离的溶液和通过饱和NaHCO3调节至pH~8。用EA (200 mL *3)萃取所得溶液。经Na2SO4干燥合并的有机相，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的中间体E (7 g, 23.55 mmol, 50.00%收率)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+=297.1. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.06 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.73 (d, J =2.8 Hz, 1H), 6.74 - 6.69 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 2.67 (m, 2H), 2.30 - 2.18 (m,2H), 2.12-1.90 (m, 4H), 1.80 - 1.62 (m, 1H), 1.56-1.47 (m, 2H) ppm。
步骤5: 6'-甲氧基-2',3'-二氢螺[环戊烷-1,1'-茚]-2-酮的制备
Figure 91868DEST_PATH_IMAGE559
在25℃下在N2下向中间体E (2 g, 6.73 mmol)在THF (200 mL)中的溶液添加Cs2CO3 (6.58 g, 20.19 mmol)、Pd(PPh3)2Cl2 (472.36 mg, 672.98 umol)。在100℃下搅拌该反应混合物12小时。将该反应混合物与另一批合并。添加水 (200 mL)。用EA (200 mL *3)萃取所得混合物。经Na2SO4干燥合并的有机相，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化该残余物 (石油醚/乙酸乙酯=10/1至2/1) 以提供作为黄色油的中间体F (1g, 69%收率)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 217.1. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.16(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.80 - 6.75 (m, 1H), 6.58 (d,J =2.4 Hz, 1H), 3.80 - 3.77 (s, 3H), 3.05 - 2.97 (m, 1H), 2.94 - 2.86 (m,1H), 2.53 - 2.33 (m, 3H), 2.30 - 2.14 (m, 3H), 2.07 - 1.97(m, 2H) ppm。
步骤6: 6'-羟基-2',3'-二氢螺[环戊烷-1,1'-茚]-2-酮的制备
Figure 265361DEST_PATH_IMAGE560
在-78℃下在N2下向中间体F (200 mg, 924.75 umol)在DCM (10 mL)中的溶液逐滴添加BBr3 (463.34 mg, 1.85 mmol, 178.21 uL)。然后在0℃下搅拌该反应混合物3小时。用饱和NH4Cl (20 mL)淬灭该反应混合物。用EA (10 mL *3)萃取所得混合物。经Na2SO4干燥合并的有机相，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的中间体G (200 mg, 粗物质)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 203.1. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 6.98 (d, J =8.0 Hz, 1H), 6.56 (m, 1H), 6.39 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 2.92 - 2.82 (m, 1H),2.82 - 2.72 (m, 1H), 2.43 - 2.19 (m, 3H), 2.14 - 2.00 (m, 3H), 1.95 - 1.83(m, 2H) ppm。
步骤7: 三氟甲磺酸2-氧代-2',3'-二氢螺[环戊烷-1,1'-茚]-6'-基酯的制备
Figure 276042DEST_PATH_IMAGE561
在0℃下在N2下向中间体G (200 mg, 988.88 umol)在DCM (4 mL)中的溶液添加吡啶 (117.33 mg, 1.48 mmol, 119.72 uL)。然后在0℃下逐滴添加三氟甲磺酸三氟甲基磺酰基酯 (418.50 mg, 1.48 mmol, 244.74 uL)。在0℃下搅拌该反应混合物1小时。用饱和NaHCO3淬灭该反应混合物。用EA (10 mL *3)萃取所得混合物。经Na2SO4干燥合并的有机相，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的中间体H (330 mg, 粗物质)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 335.1. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.22 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.02(m, 1H), 6.83 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 3.05 - 2.96 (m, 1H), 2.93 - 2.83 (m, 1H),2.47 - 2.29 (m, 3H), 2.17-2.07 (m, 3H), 2.02 - 1.95 (m, 2H) ppm。
步骤8: 2-氧代-2',3'-二氢螺[环戊烷-1,1'-茚]-6'-甲酸的制备
Figure 243998DEST_PATH_IMAGE562
在25℃下向中间体H (230 mg, 687.98 umol)在DMSO (3 mL)中的溶液添加Pd(OAc)2 (15.45 mg, 68.80 umol)、K2CO3 (285.25 mg, 2.06 mmol)、二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (8.42 mg, 13.76 umol)、H2O (24.79 mg, 1.38 mmol,24.79 uL)。然后在100℃下在CO 气氛 (15 psi)下搅拌该反应混合物2小时。将该反应混合物与另一批合并。用水 (3 mL)稀释所得混合物并用MTBE (5 mL *3)萃取。用1N HCl 溶液将水相调节至pH=6并用EA (10 mL *3)萃取。经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色固体的中间体I (160 mg, 粗物质)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+=231.1. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.89 (m, 1H), 7.69 (m, 1H), 7.27 (m, 1H),3.11 - 3.02 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 2.44 - 2.28 (m, 3H), 2.28 - 2.21 (m, 1H),2.18 - 2.07 (m, 2H), 2.01 -1.91 (m, 3H) ppm。
步骤9: 2-羟基-2',3'-二氢螺[环戊烷-1,1'-茚]-6'-甲酸的制备
Figure 340130DEST_PATH_IMAGE563
在25℃下向中间体I(60 mg, 260.58 umol)在THF (2 mL)中的溶液添加NaBH4(49.29 mg, 1.30 mmol)，在25℃下搅拌该反应混合物 1小时。用饱和NH4Cl (10 ml)淬灭该反应混合物并通过1N HCl调节至pH~5。用EA (10 mL *3)萃取所得混合物。经Na2SO4干燥合并的有机相，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的2-羟基-2',3'-二氢螺[环戊烷-1,1'-茚]-6'-甲酸 (60 mg, 粗物质)。LCMS (ESI) m/z: [M-17]+=214.9. 1H NMR (400MHz, 氯仿-d) δ = 7.36 - 7.28 (m, 2H), 7.15 - 7.09 (m, 2H), 4.34 - 4.20 (m,2H), 4.07 - 4.00 (m, 1H), 3.85 - 3.83 (m, 1H), 3.74 - 3.72 (m, 1H), 3.20 -3.18 (m, 1H) ppm。
实施例102. 2,3,4,5-四氢苯并[b]硫杂䓬-8-甲酸 1,1-二氧化物的制备
Figure 786155DEST_PATH_IMAGE564
步骤1: 4-(3-溴苯基)硫烷基丁酸乙酯的制备
Figure 651343DEST_PATH_IMAGE565
在0℃下向3-溴苯硫醇 (10 g, 52.89 mmol, 5.46 mL)在DMF (40 mL)中的混合物添加NaH (3.17 g, 79.33 mmol, 60%纯度)。在0℃下搅拌该混合物30分钟，然后添加4-溴丁酸乙酯 (12.38 g, 63.47 mmol, 9.10 mL)。将该混合物温热至30℃ 并搅拌16小时。通过添加饱和 NH4Cl 溶液 (10 mL)淬灭该反应，然后倾倒入水 (400 mL)中。用EA (50mL*3)萃取该混合物。用水 (30 mL*1)和盐水 (30 mL*1)洗涤合并的有机层，然后经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的中间体B (8.3 g, 52%收率)，其不经进一步纯化即直接用于接下来的步骤。
步骤2: 8-溴-3,4-二氢-2H-1-苯并硫杂䓬-5-酮的制备
Figure 790200DEST_PATH_IMAGE566
在150℃下向预热的 PPA (10 mL)添加中间体B (6 g, 19.79 mmol)。在150℃下搅拌该混合物0.5小时。将该反应混合物 (50 mL)倾倒至冰上和然后用DCM (10 mL*3)萃取。用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过柱层析法纯化残余物 (PE: EA =20:1~3:1)并在真空下浓缩洗脱物以提供作为黄色油的中间体C (2.6 g, 51%收率)。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.72 (d, J = 8.4 Hz, 1H),7.67 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.40 - 7.38 (m, 1H), 3.07 - 2.98 (m, 2H), 3.02 -2.98 (m, 2H), 2.32 - 2.26 (m, 2H) ppm。
步骤3: 8-溴-2,3,4,5-四氢-1-苯并硫杂䓬-5-醇的制备
Figure 373628DEST_PATH_IMAGE567
在0℃下向中间体C (2.5 g, 9.72 mmol)在THF (50 mL)中的混合物逐份添加NaBH4 (1.84 g, 48.61 mmol)。将该混合物温热至30℃并在30℃下搅拌2小时。通过添加饱和 NH4Cl 溶液 (10 mL)淬灭合并的反应混合物和然后倾倒入水 (300 mL)中。用EA (50mL*3)萃取该混合物。用盐水 (30 mL)洗涤合并的有机层，经无水 Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为浅黄色固体的中间体D (2.2 g, 87%收率)，其不经进一步纯化即直接用于接下来的步骤。
1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 7.57 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.37 - 7.33(m, 1H), 7.33 - 7.28 (m, 1H), 2.73 - 2.70 (m, 1H), 2.58 - 2.47 (m, 2H), 2.12- 1.90 (m, 4H), 1.70 - 1.66 (m, 1H) ppm。
步骤4: 中间体6 8-溴-2,3,4,5-四氢-1-苯并硫杂䓬的制备
Figure 13557DEST_PATH_IMAGE568
在0℃下向中间体D (2.1 g, 8.10 mmol)在DCM (30 mL)中的混合物添加三乙基硅烷 (2.83 g, 24.31 mmol, 3.88 mL)和TFA (4.62 g, 40.52 mmol, 3.00 mL)。将该混合物温热至30℃并在30℃下搅拌2小时。通过添加饱和 NH4Cl 溶液 (3 mL)淬灭该反应和然后倾倒入水 (30 mL)中。用DCM (15 mL*3)萃取该混合物。用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机相，经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为浅黄色油的中间体E (1.2 g,61%收率)，其不经进一步纯化即直接用于接下来的步骤。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ =7.60 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.23 - 7.18 (m, 1H), 6.98 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 2.93- 2.85 (m, 2H), 2.69 - 2.61 (m, 2H), 2.05 - 1.94 (m, 2H), 1.61 (d, J = 4.4Hz, 2H) ppm。
步骤5: 中间体7 2,3,4,5-四氢-1-苯并硫杂䓬-8-甲酸的制备
Figure 998830DEST_PATH_IMAGE569
向中间体E (500 mg, 2.06 mmol)在DMSO (5 mL)中的混合物添加Pd(OAc)2(9.23 mg, 41.12 umol)、二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (50.36 mg,82.25 umol)、H2O (74.09 mg, 4.11 mmol, 74.09 uL)和K2CO3 (426.28 mg, 3.08 mmol)。采用CO吹扫该混合物三次并在100℃下在CO (15 psi)下搅拌2小时。添加水 (50 mL)并用EA (10 mL*3)萃取该混合物。用盐水 (5 mL)洗涤合并的有机相，经无水 Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的中间体F (410 mg, 96%收率)，其不经进一步纯化即直接用于接下来的步骤。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 8.22 (d, J = 1.6 Hz, 1H),7.87 - 7.85 (m, 1H), 7.26 - 7.23 (m, 1H), 3.10 - 3.02 (m, 2H), 2.75 - 2.68(m, 2H), 2.11 - 2.02 (m, 2H), 1.69 (s, 2H) ppm。
步骤6: 2,3,4,5-四氢苯并[b]硫杂䓬-8-甲酸 1,1-二氧化物的制备
Figure 308589DEST_PATH_IMAGE570
向中间体F (200 mg, 960.26 umol)在MeOH (2 mL)中的混合物逐滴添加Oxone(1.18 g, 1.92 mmol)在H2O (2 mL)中的混合物。在30℃下搅拌该混合物16小时。通过饱和Na2SO3 溶液 (5 mL)淬灭合并的反应混合物 (两批)，然后倾倒入水 (50 mL)中。用EA (10mL*3)萃取该混合物。通过盐水 (5 mL*1)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为浅黄色油的2,3,4,5-四氢苯并[b]硫杂䓬-8-甲酸 1,1-二氧化物(450mg, 粗物质)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 240.9. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 8.70(d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.16 - 8.14 (m, 1H), 7.35 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.34 -3.11 (m, 4H), 2.23 (s, 2H), 1.78 (d, J = 2.4 Hz, 2H) ppm。
实施例103. 发明化合物的制备
类似于用于制备化合物 13的那些使用标准的化学操作和程序制备表4中的以下化合物。
表4.
# 名称 LC-MS(m/z) 1H NMR
185 3-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-(2-甲基-2H-1,2,3-三唑-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 491.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.51(s, 1H), 8.97 -8.87 (m, 1H), 8.45-8.37 (m, 1H), 8.27 (s, 1H),7.96 -7.85 (m, 2H), 7.83 -7.69 (m, 3H),7.63 -7.48 (m, 2H), 7.46 -7.37(m, 1H), 4.71 (d, J = 5.6 Hz, 1H),4.23 (s, 3H), 4.21 (d,J = 6.0 Hz,2H), 3.47 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 1.28(s, 6H) ppm
197 2-氧代-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-2',3'-二氢螺[环戊烷-1,1'-茚]-6'-甲酰胺 523.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ =12.64-12.19 (m, 1H), 8.85 (m,1H), 8.72-8.65 (m, 2H), 8.31 (m,1H), 8.02 (m, 1H), 7.84 (s, 1H),7.79-7.74 (m, 4H), 7.65-7.57 (m,2H), 7.36 (d, J = 8.0Hz, 1H),4.19 (m, 2H), 2.97 (m, 2H), 2.44(m, 2H), 2.31-2.21 (m, 2H), 2.18-2.09 (m, 2H), 2.05-1.92 (m,2H) ppm
209 3-(2-氨基-1,1-二甲基-乙基)-N-[2-[[4-[3-[3-(氨基甲基)苯基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]苯甲酰胺 514.5 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.95-8.92 (m, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.90-7.87 (m, 2H), 7.75-7.70 (m, 3H),7.63-7.61(m, 1H),7.54-7.52 (m, 3H),7.44-7.41 (m, 2H), 7.36-7.34 (m,1H), 4.20 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.81(s, 2H), 2.70 (s, 2H), 1.27 (s,6H) ppm
210 (R)-2-氨基-3,3-二甲基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 498.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ = 8.86(d, J = 5.4 Hz, 2H), 8.48 (s,1H), 8.37 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 8.18(d, J = 8.0 Hz,1H), 7.89 (d, J =7.6 Hz, 1H), 7.83 -7.80 (m, 2H),7.69 -7.65 (m, 1H), 7.63 (s, 1H),7.41 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.33 (s,2H), 3.78-3.74 (m, 1H), 3.53-3.44(m, 1H), 3.07 -3.02 (m, 1H), 1.45(s, 3H), 1.36 (s, 3H) ppm
250 (S)-2-氨基-3,3-二甲基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 498.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ =8.85 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 8.46(s, 1H), 8.35 (s, 2H), 8.17(d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.88 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.83 -7.81 (m, 2H),7.68 -7.62 (m, 2H), 7.41 (d, J =8.4 Hz, 1H), 4.33 (s, 2H), 3.78 -3.74 (m, 1H), 3.52 -3.46(m, 1H),3.08 -3.02 (m, 1H), 1.45 (s, 3H),1.36 (s, 3H) ppm
111 N-(2-((4-(3'-(乙酰胺基甲基)-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)苯甲酰胺 591.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.50(s, 1H), 9.30 -9.27 (m, 1H), 8.40-8.37 (m, 2H), 8.27 (d, J = 8.0 Hz,1H), 8.17 (s,1H), 8.05 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.90 (d, J = 8.0 Hz,1H), 7.84 -7.77 (m, 2H), 7.60 -7.51(m, 4H), 7.47 -7.43 (m, 1H), 7.28(d, J= 7.6 Hz, 1H), 4.34 (d, J =5.6 Hz, 2H), 4.25 (d, J = 5.6 Hz,2H), 3.53 -3.46 (m, 1H), 1.88 (s,3H), 1.18 (d, J = 7.2 Hz, 6H) ppm
225 (4R)-4-(氨基甲基)-N-[2-[[4-[3-(2,6-二甲基-4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-4-甲基-四氢化萘-6-甲酰胺 539.9 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ = 8.44-8.41 (m, 2H), 8.29 (s, 1H), 8.01(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.92 (d, J =1.6 Hz, 1H),7.75 -7.71 (m, 2H),7.58 -7.55 (m, 2H), 7.46 (s, 2H),7.30 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.35(s, 2H), 3.42 (d, J = 13.2Hz, 1H), 3.17 (d, J= 13.2 Hz,1H), 2.93 -2.91 (m, 2H), 2.60(s, 6H), 1.96 -1.94 (m, 3H), 1.80-1.76 (m, 1H), 1.44 (s, 3H) ppm
251 (4S)-4-(氨基甲基)-N-[2-[[4-[3-(2,6-二甲基-4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-4-甲基-四氢化萘-6-甲酰胺 539.9 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ 8.41(s, 2H), 8.30 (s, 1H), 8.01 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 1.6 Hz,1H), 7.74 -7.68 (m,2H), 7.58 -7.55 (m, 2H), 7.46 (s, 2H), 7.30(d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.35 (s,2H), 3.42 (d, J = 13.6 Hz, 1H),3.17 (d, J = 13.2Hz, 1H), 2.93 -2.89 (m, 2H), 2.60 (s, 6H), 1.96-1.93 (m, 3H), 1.80 -1.76 (m, 1H),1.44 (s, 3H) ppm
226 (S)-1-(羟甲基)-1-甲基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-2,3-二氢-1H-茚-4-甲酰胺 499.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.68(d, J = 6.0 Hz, 2H), 8.56 -8.53 (m, 1H), 8.31 (s, 1H),8.01 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.84 (s,1H), 7.77 (d, J = 6.0 Hz, 3H),7.60-7.58 (m, 1H), 7.49 -7.47 (m,1H), 7.32 -7.31 (m, 1H), 7.27 -7.25(m, 1H), 4.76 -4.73 (m,1H), 4.18-4.16 (m, 2H), 3.39 -3.38 (m, 2H),3.08 -3.03 (m, 2H), 2.16 -2.10(m, 1H), 1.70 -1.65 (m, 1H), 1.21(s, 3H) ppm
197 (R)-1-(羟甲基)-1-甲基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-2,3-二氢-1H-茚-4-甲酰胺 499.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.68(d, J = 6.0 Hz, 2H), 8.54 -8.53 (m, 1H), 8.31 (s, 1H),8.01 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.84 (s,1H), 7.77 (d, J = 6.0 Hz, 3H),7.61-7.60 (m, 1H), 7.48 (d, J = 7.2Hz, 1H), 7.34 -7.30 (m, 1H), 7.27 -7.25 (m, 1H), 4.76 -4.73(m, 1H),4.18 (d, J = 5.6Hz, 2H), 3.38 -3.37(m, 2H), 3.08 -3.03 (m, 2H),2.14 -2.10 (m, 1H), 1.70 -1.65(m, 1H), 1.20 (s, 3H) ppm
227 (3S)-N-[2-[[4-[3-(2,6-二甲基嘧啶-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-(羟甲基)-3-甲基茚满-5-甲酰胺 528.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6 + D2O) δ =8.60 (s, 1H), 8.03 -8.00 (m, 2H),7.74 (s, 1H), 7.65 (d, J = 12.0 Hz,3H), 7.60 -7.56 (m,1H), 7.28 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 4.17 (s, 2H), 3.36(s, 2H), 2.87 -2.83 (m, 2H), 2.62(s, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.18 -2.08(m, 1H), 1.76-1.65 (m, 1H), 1.19(s, 3H) ppm
228 (3R)-N-[2-[[4-[3-(2,6-二甲基嘧啶-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-(羟甲基)-3-甲基-茚满-5-甲酰胺 528.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6 + D2O) δ =8.64 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.04(d, J = 2.0 Hz, 2H), 7.77 (s,1H), 7.70 -7.64 (m, 3H),7.60 -7.56(m, 1H), 7.28 (d, J = 8.4 Hz,1H), 4.16 (s, 2H), 3.36 (s, 2H),2.88 -2.84 (m, 2H), 2.63 (s, 3H),2.48 (s, 3H), 2.20 -2.11 (m, 1H),1.75 -1.68 (m, 1H), 1.21 (s, 3H)ppm
113 N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-3-((1,1,1-三氟丙烷-2-基)磺酰基)苯甲酰胺 574.8 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.52(s, 1H), 9.34 -9.31 (m, 1H), 8.68-8.67 (m, 2H), 8.46 -8.45 (m, 1H),8.34 -8.31 (m,2H), 8.14 (d, J = 8.0Hz, 1H), 8.01 (d, J = 7.6 Hz,1H), 7.89 -7.85 (m, 2H), 7.77 -7.75(m, 3H), 7.62 -7.58 (m, 1H), 5.06-4.98(m, 1H), 4.25 (d, J = 6.0 Hz,2H), 1.46 (d, J = 6.8 Hz, 3H) ppm
114 3-((1-氨基丙烷-2-基)磺酰基)-N-(2-((4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 563.9 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.54(br s, 1H), 9.37 -9.34 (m, 1H),8.42 -8.41 (m, 1H), 8.35 -8.31(m, 2H), 8.13 -8.12(m, 2H), 8.08-8.02 (m, 3H), 7.90 -7.86 (m, 1H),7.85 (s, 1H), 7.78 (d, J = 7.6Hz, 1H), 7.69 -7.59 (m, 3H), 4.26(d, J = 6.0Hz, 2H), 3.72 -3.67 (m,1H), 3.25 -3.20 (m, 1H), 3.01 -2.95(m, 1H), 2.57 (s, 6H), 1.29 -1.26(m, 3H)
115 (S)-3-((1-羟基丙烷-2-基)磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 537.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.51(s, 1H), 9.29-9.26 (m, 1H),8.67 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 8.38-8.24 (m, 3H), 8.06 -8.00 (m, 2H),7.84 -7.75 (m, 5H), 7.61 -7.58 (m,1H), 4.99 -4.96 (m, 1H), 4.25 (d,J = 5.6 Hz, 2H), 3.74 -3.69 (m,1H), 3.51 -3.43 (m, 2H), 1.24 -1.21 (m, 3H) ppm
116 (R)-3-((1-羟基丙烷-2-基)磺酰基)-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺 537.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.48(s, 1H), 9.29 -9.26 (m, 1H), 8.68-8.67 (m, 2H), 8.38 -8.24 (m, 3H),8.04 -8.00 (m,2H), 7.84 -7.76 (m,5H), 7.75 -7.59(m, 1H), 4.99 -4.96 (m, 1H), 4.24 (d, J = 5.6 Hz,2H), 3.73 -3.71 (m, 1H), 3.51 -3.42 (m,2H), 1.24 (d, J = 6.8 Hz,3H) ppm
231 (S)-N-(2-((4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-8-(羟甲基)-8-甲基-5,6,7,8-四氢化萘-2-甲酰胺 541.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ = 8.27(s, 1H), 7.98 (d, J = 7.6Hz, 1H),7.91 (d, J = 1.6Hz, 1H), 7.69 -7.59(m, 2H),7.57 -7.50 (m, 2H), 7.42(s, 2H), 7.19 (d, J = 8.0Hz, 1H),4.31 (s, 2H), 3.73 (d, J =11.2Hz, 1H), 3.55 (d, J = 11.2Hz,1H),2.83 (d, J = 6.4 Hz, 2H),2.57 (s, 6H), 2.12 -2.01 (m, 1H),1.93 -1.74 (m, 2H), 1.62 -1.52 (m,1H), 1.30 (s, 3H) ppm
232 (R)-N-(2-((4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-8-(羟甲基)-8-甲基-5,6,7,8-四氢化萘-2-甲酰胺 541.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ = 8.27(s, 1H), 8.02 -7.96 (m, 1H), 7.91(d, J = 1.6Hz, 1H), 7.66 (d, J =7.2Hz, 1H),7.63 -7.62 (m, 1H),7.56 -7.50 (m, 2H), 7.42 (s, 2H),7.19 (d, J = 8.0Hz, 1H), 4.31 (s,2H), 3.73 (d, J = 11.2 Hz,1H), 3.55(d, J = 11.2Hz, 1H), 2.83 (d, J =6.4Hz, 2H), 2.58 (s, 6H), 2.12 -2.02 (m, 1H), 1.94 -1.76 (m, 2H),1.61 -1.52 (m,1H), 1.30 (s, 3H) ppm
130 2-甲基-1,1-二氧代-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]-3H-1,2-苯并硫氮杂䓬-8-甲酰胺 545.9 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.57-12.48 (m, 1H), 9.31 -9.30 (m, 1H),8.69 -8.67 (m, 2H), 8.43 (d, J =2.0 Hz, 1H),8.38 (s, 1H), 8.34 -8.31 (m, 1H), 8.18 -8.15 (m, 1H),8.02 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.85 (s,1H), 7.78 -7.76 (m, 3H), 7.62 -7.58 (m,1H), 6.72 (d, J = 12.8 Hz,1H), 6.13 -6.08 (m, 1H), 4.24 -4.21 (m, 4H), 2.57 (s, 3H) ppm
131 2-甲基-1,1-二氧代-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]-4,5-二氢-3H-1,2-苯并硫氮杂䓬-8-甲酰胺 547.9 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.50(s, 1H), 9.22 -9.20 (m, 1H), 8.68-8.67 (m, 2H), 8.31 -8.30 (m, 2H),8.07 -8.00 (m,2H), 7.84 (s, 1H),7.77 -7.75 (m, 3H), 7.61 -7.59(m, 2H), 4.22 (d, J = 5.6 Hz, 2H),3.66 -3.61 (m, 2H), 3.23 (s, 2H),2.57 (s,3H), 1.79 -1.76 (m, 2H) ppm
233 N-[2-[[4-[3-(3-氰基苯基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-(羟甲基)-3-甲基-茚满-5-甲酰胺 523.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.35-12.28 (m, 1H), 8.83 -8.80 (m, 1H),8.25 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 8.09 (d,J = 7.6 Hz,1H), 7.97 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.87 -7.83 (m, 2H), 7.73-7.69 (m, 4H), 7.59 -7.55 (m, 1H),7.28 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.77 -4.76(m, 1H), 4.18 (d, J = 5.6 Hz,2H), 3.37 (s, 2H), 2.89 -2.86 (m,2H), 2.20 -2.16 (m, 1H), 1.76 -1.69(m, 1H), 1.23 (s, 3H) ppm
129 1,1-二氧代-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]-2,3,4,5-四氢-1苯并硫杂䓬-8- 甲酰胺 533.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.24-9.22 (m, 1H), 8.69 (d, J = 6.0Hz,2H), 8.44 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.32(s, 1H),8.12 (d, J = 6.0Hz, 1H),8.02 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.85 (s,1H), 7.77 (d, J = 6.0Hz, 3H), 7.65-7.56 (m, 2H),4.23 (d, J= 5.6Hz,2H), 3.45 -3.39 (m, 2H), 3.18 (d, J= 5.6Hz, 2H), 2.17 -2.07 (m, 2H),1.89 -1.59 (m, 2H) ppm
242 3- [1-(羟甲基)-1-甲基-丙基]-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]苯甲酰胺 501.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ =8.85 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 8.48-8.47 (m, 1H), 8.41 -8.35 (m,2H), 8.19 -8.17 (m,1H), 7.96 -7.86(m, 2H), 7.76 -7.74 (m, 1H), 7.69-7.65 (m, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.61 -7.57 (m, 1H), 7.48 -7.43 (m, 1H),4.33 (s,2H), 3.77 -3.69 (m, 1H),3.61 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 1.90 -1.85 (m, 1H), 1.68 -1.63 (m, 1H),1.38 (s, 3H), 0.73 -0.69 ( m, 3H)ppm
243 (1S)-1-(氨基甲基)-1-甲基-N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]茚满-4-甲酰胺 498.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ = 8.85(d, J = 6.8 Hz, 2H), 8.47 (s,1H), 8.34 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 8.18(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.90 -7.88(m, 1H), 7.70 -7.62 (m, 3H), 7.44 -7.36 (m, 2H), 4.32 (s, 2H), 3.28-3.24 (m, 2H), 3.15 (d, J = 5.2 Hz,2H),2.26 -2.16 (m, 1H), 2.06 -1.96 (m, 1H), 1.40 (s, 3H) ppm
245 3-(2-氨基-1,1-二甲基-乙基)-N-[2-[[4-[3-(2,6-二甲基-4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-4,5-二甲基-苯甲酰胺 542.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.50(br s, 1H), 8.93 -8.91 (m, 1H),8.45 (s, 1H), 8.19 (s, 2H), 8.15(d, J = 7.6 Hz, 1H),7.93 (d, J =7.6 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.80(s, 2H), 7.75 -7.67 (m, 3H), 4.20(d, J = 5.2 Hz, 2H), 3.21(d, J = 5.6 Hz, 2H), 2.77(s,6H), 2.39 (s, 3H), 2.31 (s,3H), 1.49 (s, 6H) ppm
122 3-异丙基磺酰基-N-[2-[[4-[3-(2-甲氧基-6-甲基-嘧啶-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代乙基] 苯甲酰胺 566.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ = 8.71-8.69 (m, 1H), 8.47 -8.45 (m, 1H),8.30 -8.28 (m, 1H), 8.14 -8.06 (m,3H),7.84 -7.79 (m, 1H), 7.60 -7.54(m, 3H), 4.38 (s, 2H), 4.13 (s,3H), 3.46 -3.39 (m, 1H), 2.55 (s,3H), 1.31 (d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm
123 3-异丙基磺酰基-N-[2-[[4-[3-(6-甲氧基-2-甲基-嘧啶-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]苯甲酰胺 566.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.55(s, 1H), 9.35 -9.26 (m, 1H), 8.73-8.67 (m, 1H), 8.43 -8.37 (m, 1H),8.32 -8.24 (m, 1H),8.13 -8.02 (m,3H), 7.87 -7.79 (m, 2H), 7.62 -7.54 (m, 1H), 7.35 (s, 1H), 4.30 -4.22(m, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.54 -3.48 (m, 1H),2.63 (s, 3H), 1.21 -1.19 (d, J = 6.8Hz, 6H) ppm
248 N-[2-氧代-2-[[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]乙基]-3-三甲基甲硅烷基-苯甲酰胺 487.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.81-12.11 (m, 1H), 8.98 -8.95 (m, 1H),8.69 -8.67 (m, 2H), 8.31 (d, J =1.6 Hz, 1H),8.05 (s, 1H), 8.02 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 7.91 -7.88 (m,1H), 7.84 (s, 1H), 7.77 -7.75 (m,3H), 7.71 (d, J = 7.2 Hz, 1H),7.62 -7.58 (m, 1H), 7.51 -7.47 (m,1H), 4.22 (d, J = 6.0 Hz, 2H),0.30 (s, 9H) ppm
124 N-[2-[[4-[3-[2-(氨基甲基)-4-吡啶基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-异丙基磺酰基-苯甲酰胺 550.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.50(s, 1H), 9.01-8.99(m, 1H), 8.73 (d,J = 5.2Hz, 1H), 8.38 (s, 2H),8.33 (s, 1H), 8.05 (d, J = 7.6Hz,1H), 7.94 (d, J = 15.2Hz, 2H),7.85 -7.81 (m, 3H), 7.71 (s, 2H),7.67 -7.62 (m, 2H), 7.54 -7.48(m, 1H), 4.30 (d, J = 5.2Hz, 2H),3.13 (d, J = 6.0Hz, 2H), 2.53 -2.52(m, 1H), 1.40 (s, 6H) ppm
127 3-异丙基磺酰基-N-[2-[[4-[3-(6-甲基嘧啶-4-基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代乙基] 苯甲酰胺 536.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.58(s, 1H), 9.31 -9.30(m, 1H),9.14 (d, J=1.2 Hz, 1H), 8.80 (s,1H), 8.39 (s, 1H) , 8.28 (d, J=7.6Hz, 1H),8.17-8.03(m, 4H) , 7.89-7.76(m, 2H), 7.63 -7.61(m, 1H),4.26 (d, J=5.6Hz, 2H), 3.55-3.49(m, 1H), 2.56 (s, 3H), 1.20(d, J=6.8 Hz, 6H) ppm
274 (S)-4-(二氟甲基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟色满-6-甲酰胺 575.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40(s, 1H), 8.91 - 8.90 (m, 1H), 8.23- 8.14 (m, 1H), 7.95 (d, J = 8.8Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.46 (s,1H), 7.37 - 7.31 (m, 1H), 7.31 -7.23 (m, 1H), 7.08 (d, J = 8.8 Hz,1H), 6.99 - 6.63 (m, 2H), 4.51 -4.37 (m, 1H), 4.29 - 4.12 (m, 3H),3.81 - 3.68 (m, 2H), 3.63 (d, J =10.8 Hz, 2H), 2.47 - 2.35 (m, 2H),2.32 - 2.27 (m, 2H), 1.19 (s, 3H),1.17 (s, 3H) ppm
275 (R)-4-(二氟甲基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟色满-6-甲酰胺 575.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.42(s, 1H), 8.91 - 8.90 (m, 1H), 8.18(s, 1H), 7.95 (d, J = 8.8 Hz, 1H),7.63 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.38 -7.32 (m, 1H), 7.31 - 7.22 (m,1H), 7.07 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.98- 6.65 (m, 2H), 4.51 - 4.40 (m,1H), 4.27 - 4.15(m, 3H), 3.79 -3.56 (m, 4H), 2.46 - 2.35 (m,2H), 2.32 - 2.27 (m, 2H), 1.19 (s,3H), 1.17 (s, 3H) ppm
276 (R)-N-(2-((4-(3-(氮杂环丁烷-1-基)-5-氟苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-(二氟甲基)-4-氟异色满-6-甲酰胺 535.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.59- 12.23 (m, 1H), 9.06 - 9.02 (m,1H), 8.20 (s, 1H), 7.99 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.41 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J =10.0 Hz, 1H), 6.88 - 6.53 (m, 2H),6.19 - 6.14 (m, 1H), 4.95 - 4.75(m, 2H), 4.30 - 4.09 (m, 4H), 3.89- 3.84 (m, 4H), 2.38 - 2.29 (m,2H) ppm
277 (S)-N-(2-((4-(3-(氮杂环丁烷-1-基)-5-氟苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-(二氟甲基)-4-氟异色满-6-甲酰胺 535.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.62- 12.30 (m, 1H), 9.06 - 9.02 (m,1H), 8.20 (s, 1H), 7.99 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.41 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 6.97 (d, J =10.0 Hz, 1H), 6.87 - 6.54 (m, 2H),6.20 - 6.10 (m, 1H), 4.95 - 4.74(m, 2H), 4.30 - 4.10 (m, 4H), 3.89- 3.84 (m, 4H), 2.38 - 2.30 (m,2H) ppm
285 3-((R)-3-(二氟甲基)四氢呋喃-3-基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 571.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, MeOD-d4) δ = 7.95- 7.83 (m, 2H), 7.60 - 7.49 (m,3H), 7.41 - 7.36 (m, 2H), 7.28(m, 1H), 6.94 (m, 1H), 6.20 - 5.86(m, 1H), 4.48 (d, J = 9.2 Hz,1H), 4.34 - 4.30 (m, 2H), 4.07 (m,1H), 4.00 (m, 1H), 3.97 - 3.89(m, 1H), 3.82 (m, 2H), 3.58 (d, J =10.8 Hz, 2H), 2.66 (m, 1H), 2.48 -2.34 (m, 3H), 1.24 (d, J = 6.0 Hz,6H) ppm
286 3-((S)-3-(二氟甲基)四氢呋喃-3-基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 571.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, MeOD-d4) δ = 7.91- 7.85 (m, 2H), 7.56 - 7.51 (m,3H), 7.40 - 7.35 (m, 2H), 7.30 -7.25 (m, 1H), 6.93 (m, 1H), 6.20 -5.86 (m, 1H), 4.48 (d, J = 9.2Hz, 1H), 4.32 (s, 2H), 4.11 - 4.04(m, 1H), 4.03 - 3.98 (m, 1H),3.94 (m, 1H), 3.87 - 3.77 (m, 2H),3.58 (d, J = 10.4 Hz, 2H), 2.71 -2.61 (m, 1H), 2.48 - 2.41 (m, 1H),2.37 (m, 2H), 1.24 (d, J = 6.0 Hz,6H) ppm
287 (S)-4-氰基-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酰胺 545.3 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.42(s, 1H), 9.06-9.04 (m, 1H), 8.09(d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.84-7.82(m, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.45 (s,1H), 7.35 - 7.23 (m, 3H), 6.94-6.93 (m, 1H), 4.21-4.19 (m, 2H),4.06 (d, J = 4.0 Hz, 2H), 3.77 -3.67 (m, 2H), 3.62 (d, J = 11.6 Hz,2H), 3.50 (d, J = 12.4 Hz, 1H),3.20 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 2.31-2.25 (m, 2H), 1.74 (s, 3H), 1.17(d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm
288 (R)-N-(2-((4-(3-(氮杂环丁烷-1-基)-5-氟苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-氰基-1,3-二甲基吲哚啉-5-甲酰胺 505.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.58- 12.22 (m, 1H), 8.69 - 8.66 (m,1H), 8.82 - 8.59 (m, 1H), 7.85(d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.80 - 7.78(m, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.96 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 1.6 Hz,1H), 6.70 (d, J = 8.4 Hz, 1H),6.16 - 6.13 (m, 1H), 4.15 - 4.13(m, 2H), 3.88 - 3.82 (m, 5H), 3.40(s, 1H), 2.82 (s, 3H), 2.34 -2.30 (m, 2H), 1.69 (s, 3H) ppm
289 (S)-N-(2-((4-(3-(氮杂环丁烷-1-基)-5-氟苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-氰基-1,3-二甲基吲哚啉-5-甲酰胺 505.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.39(s, 1H), 8.68 - 8.67 (m, 1H), 7.88- 7.76 (m, 2H), 7.66 (s, 1H),7.00 - 6.92 (m, 1H), 6.78 - 6.74(m, 1H), 6.70 (d, J = 8.4 Hz,1H), 6.16 - 6.13 (m, 1H), 4.14 -4.12 (m, 2H), 3.90 - 3.80 (m,5H), 3.41 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 2.82(s, 3H), 2.33 - 2.29 (m, 2H), 1.68(s, 3H) ppm
290 3-((R)-2-(二氟甲基)四氢呋喃-2-基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 571.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40(s, 1H), 8.98-8.96 (m, 1H), 7.99(s, 1H), 7.87 (d, J = 7.7 Hz,1H), 7.68 - 7.57 (m, 2H), 7.56 -7.48 (m, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.38- 7.30 (m, 1H), 7.30 - 7.21 (m,1H), 6.94-6.93 (m, 1H), 6.36 -5.89 (m, 1H), 4.20 (d, J = 5.6 Hz,2H), 4.07 - 3.97 (m, 1H), 3.94 -3.91 (m, 1H), 3.78 - 3.67 (m,2H), 3.67 - 3.56 (m, 2H), 2.46 -2.44 (m, 1H), 2.32 - 2.18 (m,3H), 2.08 - 1.97 (m, 1H), 1.87 -1.74 (m, 1H), 1.17 (d, J = 6.4 Hz,6H) ppm
291 3-((S)-2-(二氟甲基)四氢呋喃-2-基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 571.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40(s, 1H), 8.98-8.96 (m, 1H), 7.99(s, 1H), 7.87 (d, J = 7.6 Hz,1H), 7.68 - 7.57 (m, 2H), 7.55 -7.48 (m, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.38- 7.30 (m, 1H), 7.30 - 7.21 (m,1H), 6.94 - 6.93 (m, 1H), 6.32 -5.94 (m, 1H), 4.19 (d, J = 5.6 Hz,2H), 4.02 - 4.00 (m, 1H), 3.94 -3.92 (m, 1H), 3.78 - 3.66 (m,2H), 3.66 - 3.55 (m, 2H), 2.46 -2.44 (m, 1H), 2.32 - 2.18 (m,3H), 2.09 - 1.96 (m, 1H), 1.85 -1.75 (m, 1H), 1.17 (d, J = 6.4 Hz,6H) ppm
306 3-(2-(二氟甲基)四氢呋喃-2-基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 571.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.68- 11.99 (m, 1H), 8.98 - 8.96 (m,1H), 8.44 (s, 1H), 7.99 (s, 1H),7.87 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.68 -7.58 (m, 2H), 7.56 - 7.48 (m,1H), 7.45 (s, 1H), 7.38 - 7.30 (m,1H), 7.30 - 7.22 (m, 1H), 6.94 -6.93 (m, 1H), 6.27 - 5.99 (m, 1H),4.20 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.02 -4.00 (m, 1H), 3.97 - 3.88 (m, 1H),3.77 - 3.67 (m, 2H), 3.66 - 3.58(m, 2H), 2.48 - 2.43 (m, 1H),2.32 - 2.17 (m, 3H), 2.09 - 1.97(m, 1H), 1.86 - 1.76 (m, 1H),1.17 (d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm
307 (R)-4-(二氟甲基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟异色满-6-甲酰胺 575.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.42(s, 1H), 9.05 - 9.02 (m, 1H), 8.19(s, 1H), 7.99 (d, J=8.0 Hz, 1H),7.62 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.40(d, J=8.4 Hz, 1H), 7.35 - 7.31(m, 1H), 7.30 - 7.23 (m, 1H), 6.94- 6.92 (m, 1H), 6.71 - 6.56 (m,1H), 4.92 - 4.76 (m, 2H), 4.24 -4.13 (m, 4H), 3.71 (d, J = 8.0 Hz,2H), 3.61 (s, 2H), 2.32 - 2.25 (m,2H), 1.17 (d, J=6.4 Hz, 6H) ppm
308 (S)-4-(二氟甲基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟异色满-6-甲酰胺 575.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.42(s, 1H), 9.05 - 9.02 (m, 1H), 8.19(s, 1H), 7.99 (d, J=8.0 Hz, 1H),7.62 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.40(d, J=8.4 Hz, 1H), 7.35 - 7.31(m, 1H), 7.30 - 7.23 (m, 1H), 6.94- 6.92 (m, 1H), 6.71 - 6.56 (m,1H), 4.92 - 4.76 (m, 2H), 4.24 -4.13 (m, 4H), 3.71 (d, J = 8.0 Hz,2H), 3.61 (s, 2H), 2.32 - 2.25 (m,2H), 1.17 (d, J=6.4 Hz, 6H) ppm
310 4-氰基-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酰胺 545.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.44(s, 1H), 9.79 - 9.49 (m, 1H), 9.16- 9.13 (m, 1H), 8.21 (d, J = 1.2Hz, 1H), 7.94 - 7.92(m, 1H), 7.62(s, 1H), 7.50 - 7.43 (m, 2H),7.36 - 7.22 (m, 2H), 6.94 - 6.92(m, 1H), 4.39 (d, J = 3.6 Hz,2H), 4.23 - 4.21 (m, 2H), 4.02 (d,J = 13.2 Hz, 1H), 3.64-3.60 (m,5H), 2.31 - 2.24 (m, 2H), 1.87 (s,3H), 1.17 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
317 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-((1s,3s)-1-氟-3-羟基-3-甲基环丁基)苯甲酰胺 553.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, MeOD) δ = 8.09 -8.02 (m, 1H), 7.95 - 7.86 (m, 1H),7.74 - 7.67 (m, 1H), 7.57 - 7.50(m, 2H), 7.40 - 7.32 (m, 2H), 7.30- 7.22 (m, 1H), 6.96 - 6.89 (m,1H), 4.31 (s, 2H), 3.87 - 3.74 (m,2H), 3.61 - 3.53 (m, 2H), 2.97 -2.71 (m, 4H), 2.41 - 2.29 (m, 2H),1.24 (s, 3H), 1.22 (m, 6H) ppm
319 (S)-N-((R)-1-((4-(3-(氮杂环丁烷-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺 495.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.44(s, 1H), 8.85 (d, J = 6.8 Hz, 1H),8.25 (s, 1H), 7.92 (d, J = 8.0 Hz,1H), 7.55 (s, 1H), 7.27 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.20 (d, J = 4.8 Hz,2H), 6.95 (s, 1H), 6.46 - 6.26 (m,1H), 4.90 - 4.77 (m, 1H), 4.77 -4.65 (m, 2H), 4.13 - 4.00 (m, 1H),3.88 - 3.78 (m, 5H), 2.37 - 2.24(m, 2H), 1.76 - 1.61 (m, 3H), 1.48(d, J = 6.8 Hz, 3H) ppm
326 4-(二氟甲基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-羟基异色满-6-甲酰胺 573.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.41(s, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.17 (s,1H), 7.92 - 7.79 (m, 1H), 7.62(s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.36 - 7.32(m, 1H), 7.30 - 7.23 (m, 2H),6.94 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.34 -5.97 (m, 2H), 4.80 (d, J = 1.6Hz, 2H), 4.20 (d, J = 6.0 Hz, 2H),4.12 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.73 -3.71 (m, 2H), 3.68 - 3.57 (m,3H), 2.33 - 2.23 (m, 2H), 1.18 (d,J = 6.0 Hz, 6H) ppm
328 (R)-N-(2-((4-(3-(6-氧杂-1-氮杂螺[3.3]庚烷-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氰基-4-甲基异色满-6-甲酰胺 530.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 10.89 -10.41 (m, 1H), 7.98 (d, J = 1.6 Hz,1H), 7.82 - 7.73 (m, 1H), 7.45 -7.28 (m, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.23(m, 1H), 7.19 (d, J = 8.0 Hz,1H), 7.16 - 7.14 (m, 1H), 7.12 -7.05 (m, 1H), 6.74 (m, 1H), 5.32(m, 2H), 4.88 - 4.82 (m, 2H), 4.78(d, J = 8.0 Hz, 2H), 4.40 - 4.31(m, 2H), 4.13 (d, J = 11.2 Hz, 1H),3.97 - 3.89 (m, 1H), 3.71 (m, 2H),2.53 (m, 2H), 1.73 (s, 3H) ppm
329 4-(二氟甲基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟异色满-6-甲酰胺 575.1 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.42(s, 1H), 9.05 - 9.02 (m, 1H), 8.19(s, 1H), 7.99 (d, J=8.0 Hz, 1H),7.62 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.40(d, J=8.4 Hz, 1H), 7.35 - 7.31(m, 1H), 7.30 - 7.23 (m, 1H), 6.94- 6.92 (m, 1H), 6.71 - 6.56 (m,1H), 4.96 - 4.73 (m, 2H), 4.32 -4.07 (m, 4H), 3.78 - 3.67 (m, 2H),3.63 - 3.60 (m, 2H), 2.31 - 2.26(m, 2H), 1.17 (d, J=6.4 Hz, 6H)ppm
332 (S)-N-(2-((4-(3-(氮杂环丁烷-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺 481.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43(br s, 1H), 9.06 - 9.03 (m, 1H),8.20 (s, 1H), 7.89 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.28 (d, J =8.4 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 4.8 Hz,2H), 6.95 (s, 1H), 6.39 - 6.36 (m,1H), 4.88 - 4.83 (m, 1H), 4.76 -4.70 (m, 1H), 4.27 - 4.15 (m, 2H),4.11 - 4.04 (m), 3.89 - 3.79 (m,5H), 2.36 - 2.28 (m, 2H), 1.71 -1.65 (m, 3H) ppm
342 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(3-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 524.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.48(s, 1H), 9.07 (m, 1H), 8.13 (d, J=1.2 Hz, 1H), 7.88 (m, 1H), 7.62(s, 1H), 7.38 - 7.33 (m, 1H), 7.32- 7.27 (m, 2H), 7.09 (s, 1H),6.55 (m, 1H), 4.95 - 4.79 (m, 2H),4.31 (m, 4H), 4.26 - 4.19 (m,3H), 3.87 (d, J=11.6 Hz, 1H), 1.70(s, 3H) ppm
345 3-(3-(二氟甲基)四氢呋喃-3-基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 571.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.16- 11.95 (m, 1H), 8.73 - 8.65 (m,1H), 7.93 - 7.84 (m, 2H), 7.59 -7.48 (m, 3H), 7.45 (s, 1H), 7.34 -7.30 (m, 1H), 7.29 - 7.24 (m,1H), 6.93 - 6.88 (m, 1H), 6.34 (s,1H), 6.22 - 6.18 (m, 1H), 6.07 -6.05 (m, 1H), 4.33 (d, J = 9.2 Hz,1H), 4.23 (d, J = 5.6 Hz, 2H),4.01- 3.94 (m, 2H), 3.88 - 3.82 (m,1H), 3.74 (m, 2H), 3.62 - 3.57 (m,2H), 2.57 - 2.54 (m, 1H), 2.37(s, 1H), 2.35 - 2.32 (m, 2H), 1.19(d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
347 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(2-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-4-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 547.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.52(s, 1H), 9.08 (m, 1H), 8.23 - 8.10(m, 2H), 7.93 (s, 1H), 7.88 (m,1H), 7.33 - 7.22 (m, 2H), 7.16 (m,1H), 4.93 - 4.80 (m, 2H), 4.30 -4.13 (m, 5H), 3.92 - 3.84 (m, 1H),3.65 (m, 2H), 2.43 (m, 2H), 1.73- 1.67 (m, 3H), 1.18 (d, J=6.0 Hz,6H) ppm
348 (R)-N-(2-((4-(3-(1-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氰基-4-甲基异色满-6-甲酰胺 530.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.07(m, 1H), 8.12 (d, J = 1.6 Hz, 1H),7.89 - 7.85 (m, 1H), 7.57 (s, 1H),7.29 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.26 -7.16 (m, 2H), 6.96 (d, J = 1.6Hz, 1H), 6.43 - 6.39 (m, 1H), 4.99- 4.76 (m, 2H), 4.46 (m, 2H),4.28 - 4.18 (m, 3H), 4.11 (d, J =9.6 Hz, 2H), 3.91 - 3.83 (m, 3H),2.89 (m, 2H), 1.69 (s, 3H) ppm
351 (4R)-4-氰基-4-甲基-N-(2-((4-(3-(2-甲基氮杂环丁烷-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)异色满-6-甲酰胺 502.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.42(s, 1H), 9.08 - 9.04 (m, 1H), 8.12(d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 - 7.85(m, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.29 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 4.8 Hz,2H), 6.98 (s, 1H), 6.45 - 6.42 (m,1H), 4.93 - 4.81 (m, 2H), 4.24 -4.20 (m, 3H), 4.13 - 4.07 (m, 1H),3.91 - 3.85 (m, 2H), 3.55 - 3.52(m, 1H), 2.41 - 2.37 (m, 1H), 2.06- 1.96 (m, 1H), 1.69 (s, 3H), 1.44(d, J = 6.0 Hz, 3H) ppm
356 N-(2-((4-(3-(氮杂环丁烷-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺 481.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.44(s, 1H), 9.06 - 9.03 (m, 1H), 8.19(s, 1H), 7.89 (d, J = 8.0 Hz, 1H),7.56 (s, 1H), 7.28 (d, J = 8.0 Hz,1H), 7.20 (d, J = 5.2 Hz, 2H),6.95 (s, 1H), 6.39 - 6.35 (m, 1H),4.88 - 4.83 (m, 1H), 4.76 - 4.70(m, 1H), 4.22 - 4.19 (m, 2H), 4.11- 4.04 (m, 1H), 3.89 - 3.79 (m,5H), 2.36 - 2.28 (m, 2H), 1.71 -1.65 (m, 3H) ppm
362 N-(2-((4-(3-(氮杂环丁烷-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(3-(二氟甲基)氧杂环丁烷-3-基)苯甲酰胺 499.4 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.43(s, 1H), 8.99 (s, 1H), 7.89 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.61 -7.50 (m, 2H), 7.42 (d, J = 7.6 Hz,1H), 7.20 (d, J = 4.8 Hz, 2H),6.95 (s, 1H), 6.71 - 6.40 (m, 1H),6.37 - 6.37 (m, 1H), 4.96 - 4.92(m, 4H), 4.20 (d, J = 5.6 Hz, 2H),3.84 - 3.81 (m, 4H), 2.35 - 2.26(m, 2H) ppm
363 4-(氰基甲基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 560.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.41(br s, 1H), 8.95 - 8.88 (m, 1H),8.02 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.78 -7.73 (m, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.45(s, 1H), 7.36 - 7.31 (m, 1H),7.29 - 7.24 (m, 1H), 7.20 (d, J =8.0 Hz, 1H), 6.96 - 6.89 (m, 1H),4.87 - 4.75 (m, 2H), 4.21 (d, J =5.6 Hz, 2H), 3.82 (d, J = 11.6 Hz,1H), 3.77 - 3.68 (m, 2H), 3.68 -3.57 (m, 3H), 3.01 - 2.86 (m, 2H),2.33 - 2.24 (m, 2H), 1.35 (s,3H), 1.17 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
364 (R)-N-(2-((4-(3-(氮杂环丁烷-1-基)-5-氟苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氰基-4-甲基异色满-6-甲酰胺 506.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.73- 12.22 (m, 1H), 9.08 - 9.05 (m,1H), 8.12 (d, J = 0.8 Hz, 1H),7.87 - 7.85 (m, 1H), 7.68 (s, 1H),7.29 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.97(d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.77 (s, 1H),6.17 - 6.13 (m, 1H), 4.97 - 4.77(m, 2H), 4.31 - 4.16 (m, 3H), 3.91- 3.80 (m, 5H), 2.36 - 2.29 (m,2H), 1.69 (s, 3H) ppm
367 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-乙基-3H-1l4-苯并[d]异噻唑-6-甲酰胺 1-氧化物 554.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.47(s, 1H), 9.30 - 9.27 (m, 1H), 8.73(s, 1H), 8.34 - 8.32 (m, 1H), 7.89(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H),7.45 (s, 1H), 7.35 - 7.25 (m,2H), 6.95 - 6.92 (m, 1H), 5.04 -5.00 (m, 1H), 4.87 (d, J = 17.2Hz, 1H), 4.31 - 4.23 (m, 3H), 4.10- 4.06 (m, 1H), 3.74 - 3.60 (m,4H), 2.32 - 2.26 (m, 2H), 1.17 -1.10 (m, 9H) ppm
368 (R)-3-氰基-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1,3-二甲基吲哚啉-5-甲酰胺 545.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 7.90 -7.82 (m, 2H), 7.54 (s, 1H), 7.41 -7.34 (m, 2H), 7.31 - 7.23 (m,1H), 6.94-6.92 (m, 1H), 6.67 (d, J=9.2 Hz, 1H), 4.28 (s, 2H), 3.90 -3.76 (m, 3H), 3.59 (d, J=10.4 Hz,2H), 3.47 (d, J=9.2 Hz, 1H), 2.89(s, 3H), 2.43 - 2.30 (m, 2H), 1.73(s, 3H), 1.24 (d, J=6.0 Hz, 6H)ppm
369 (S)-3-氰基-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1,3-二甲基吲哚啉-5-甲酰胺 545.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.35(br s, 1H), 8.68 - 8.66 (m, 1H),7.85 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.80 -7.88 (m, 1H), 7.60 (s, 1H),7.44 (s,1H), 7.35 - 7.30 (m, 1H), 7.29 -7.22 (m, 1H), 6.93 - 6.90 (m, 1H),6.70 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.20 -4.11 (m, 2H), 3.84 (d, J=9.6 Hz,1H), 3.72 - 3.70 (m, 2H), 3.61(d, J=10.4 Hz, 2H), 3.41 (d, J=9.6Hz, 1H), 2.82 (s, 3H), 2.35 - 2.22(m, 2H), 1.68 (s, 3H), 1.16 (d, J=6.0 Hz, 6H) ppm
372 (R)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-(羟甲基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 551.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.39(s, 1H), 8.91 - 8.88 (m, 1H), 7.89(s, 1H), 7.70 - 7.68 (m, 1H),7.62 - 7.61 (m, 1H), 7.44 (s, 1H),7.32 - 7.31 (m, 1H), 7.28 - 7.26(m, 1H), 7.13 (d, J=8.0 Hz, 1H),6.93 (d, J=8.0 Hz, 1H), 4.89 (t,J=5.6 Hz, 1H), 4.74 - 4.73 (m, 2H),4.18 (d, J=6.0 Hz, 2H), 3.94 (d,J=11.6 Hz, 1H), 3.72 - 3.71 (m,2H), 3.62 (d, J=11.6 Hz, 2H), 3.56- 3.55(m, 1H), 3.40 (d, J=11.2Hz, 2H), 2.31 - 2.26 (m, 2H), 1.18- 1.16 (m, 9H) ppm
373 (S)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-(羟甲基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 551.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.39(s, 1H), 8.91 - 8.88 (m, 1H), 7.89(d, J=1.6 Hz, 1H), 7.69 7.68 (m,1H), 7.61 (s, 1H), 7.44 (s, 1H),7.32 - 7.31 (m, 1H), 7.28 - 7.26(m, 1H), 7.13 (d, J=8.0 Hz, 1H),6.93 ( d, J=9.6 Hz, 1H), 4.89 (t,J=5.6 Hz, 1H), 4.74 - 4.73 (m, 2H),4.18 (d, J=5.6 Hz, 2H), 3.94 (d,J=11.2 Hz, 1H), 3.72 - 3.70 (m,2H), 3.62 (d, J=10.4 Hz, 2H), 3.56(d, J=5.2 Hz, 1H), 3.39 (s, 2H),2.31 - 2.26 (m, 2H), 1.18 - 1.16(m, 9H) ppm
374 4-氰基-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-(羟甲基)异色满-6-甲酰胺 562.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.71- 12.13 (m, 1H), 9.06 - 9.03 (m,1H), 8.05 (s, 1H), 7.88 - 7.86(m, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.45 (s,1H), 7.34 - 7.24 (m, 3H), 6.94 -6.92 (m, 1H), 5.99 - 5.89 (m, 1H),4.91 - 4.79 (m, 2H), 4.31 - 4.17(m, 3H), 4.04 (d, J = 11.2 Hz, 1H),3.86 - 3.82 (m, 1H), 3.76 - 3.68(m, 3H), 3.65 - 3.59 (m, 2H), 2.31- 2.26 (m, 2H), 1.18 (s, 3H), 1.17(s, 3H) ppm
383 2-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-5-氟异烟酰胺 526.3 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.42(s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.64 (d, J=1.2 Hz, 1H), 7.63 - 7.61 (m, 2H),7.44 (s, 1H), 7.34 - 7.32 (m, 1H),7.28 - 7.24 (m, 1H), 6.93 (d, J=8.0 Hz, 1H), 4.23 (d, J=5.6 Hz,2H), 3.73 - 3.69 (m, 2H), 3.62(d, J=11.2 Hz, 2H), 2.29 - 2.26 (m,2H), 1.33 (s, 9H), 1.17 (d, J=6.4Hz, 6H) ppm
390 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(3-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 518.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.45(br s, 1H), 9.08 - 9.05 (m, 1H),8.13 (s, 1H), 7.88 - 7.86 (m,1H), 7.57(s, 1H), 7.30 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.25 - 7.19 (m, 2H),6.98 (s, 1H), 6.43 - 6.41 (m, 1H),4.94 - 4.81 (m, 2H), 4.38 - 4.31(m, 1H), 4.26 - 4.19 (m, 3H), 4.09- 4.07 (m, 2H), 3.88 - 3.86 (m,1H), 3.64 - 3.61 (m, 2H), 3.26(s, 2H), 1.70 (s, 3H) ppm
392 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-((1r,3r)-3-羟基-1-甲基环丁基)苯甲酰胺 535.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ= 12.40(s, 1H), 9.02 - 8.91 (m, 1H), 7.85(s, 1H), 7.76 - 7.69 (m, 1H),7.62 (s, 1H), 7.55 - 7.39 (m, 3H),7.37 - 7.23 (m, 2H), 7.00 - 6.89(m, 1H), 5.08 - 5.00 (m, 1H), 4.25- 4.15 (m, 2H), 3.96 - 3.86 (m,1H), 3.78 - 3.70 (m, 2H), 3.68 -3.58 (m, 2H), 2.82 - 2.70 (m, 2H),2.35 - 2.24 (m, 2H), 2.08 - 1.97(m, 2H), 1.43 (s, 3H), 1.23 - 1.14(m, 6H) ppm
393 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-((1s,3s)-3-羟基-1-甲基环丁基)苯甲酰胺 535.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6)δ = 12.46 -12.37 (m, 1H), 8.97 - 8.89 (m, 1H),7.73 - 7.67 (m, 2H), 7.64 - 7.61(m, 1H), 7.48 -7.39 (m, 2H), 7.37 -7.31 (m, 2H), 7.30 - 7.24 (m,1H), 6.98 - 6.88 (m, 1H), 5.01 -4.95 (m, 1H), 4.36 - 4.27 (m,1H), 4.24 - 4.09(m, 2H), 3.78 -3.69 (m, 2H), 3.66 - 3.59 (m, 2H),2.34 - 2.26 (m, 2H), 2.16 - 2.06(m, 2H), 1.39 - 1.32 (m, 3H), 1.22- 1.12 (m, 6H) ppm
396 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)硫代色满-7-甲酰胺 1,1-二氧化物 555.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.24(m, 1H), 8.36 (d, J = 1.6 Hz, 1H),8.07 - 8.03 (m, 1H), 7.62 (s, 1H),7.52 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.45 (s,1H), 7.36 - 7.30 (m, 1H), 7.30 -7.23 (m, 1H), 6.95 - 6.91 (m, 1H),4.20 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.76 -3.68 (m, 2H), 3.64 - 3.60 (m, 2H),3.59 - 3.55 (m, 2H), 3.08 (m,2H), 2.38 - 2.33 (m, 2H), 2.32 -2.26 (m, 2H), 1.17 (d, J = 6.4 Hz,6H) ppm
403 (S)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(羟甲基)-1,3-二甲基吲哚啉-5-甲酰胺 550.3 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.35(s, 1H), 8.51-8.50 (m, 1H), 7.71 -7.60 (m, 2H), 7.62 (s, 1H), 7.54(d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H),7.37 - 7.31 (m, 1H), 7.31 - 7.22(m, 1H), 6.95 - 6.94 (m, 1H), 6.49(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.95-4.92(m, 1H), 4.13 (d, J = 5.6 Hz, 2H),3.79 - 3.68 (m, 2H), 3.63 (d, J =11.2 Hz, 2H), 3.48 (d, J = 9.2 Hz,1H), 3.37 (s, 2H), 3.00 (d, J =9.2 Hz, 1H), 2.79 (s, 3H), 2.33 -2.22 (m, 2H), 1.27 (s, 3H), 1.18(d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm
404 (R)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(羟甲基)-1,3-二甲基吲哚啉-5-甲酰胺 550.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.35(s, 1H), 8.51-8.50 (m, 1H), 7.67 -7.65 (m, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.54(d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H),7.37 - 7.31 (m, 1H), 7.31 - 7.23(m, 1H), 6.95 (d, J = 2.0 Hz, 1H),6.49 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.95-4.92 (m, 1H), 4.13 (d, J = 5.6 Hz,2H), 3.78 - 3.68 (m, 2H), 3.63(d, J = 11.2 Hz, 2H), 3.48 (d, J =9.2 Hz, 1H), 3.38 - 3.36 (m, 2H),3.00 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 2.79 (s,3H), 2.29 (t, J = 11.2 Hz, 2H),1.27 (s, 3H), 1.18 (d, J = 6.0Hz, 6H) ppm
407 (R)-N-(2-((4-(3-(氮杂环丁烷-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氰基-4-甲基异色满-6-甲酰胺 488.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.06(d, J=5.6 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H),7.87 (m, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.29(s, 1H), 7.23 - 7.17 (m, 2H), 6.95(s, 1H), 6.40 - 6.33 (m, 1H),4.95 - 4.79 (m, 2H), 4.28 - 4.15(m, 3H), 3.88 - 3.80 (m, 5H),2.35 - 2.27 (m, 2H), 1.69 (s, 3H)ppm
414 (S)-N-((S)-1-((4-(3-(氮杂环丁烷-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)-3-(羟甲基)-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 491.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.38(d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.60 (d, J =6.4 Hz, 1H), 8.40 (s,1H) ,7.73 -7.71 (m, 2H), 7.54 (s, 1H), 7.26(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.20 (d, J =4.8 Hz, 2H), 6.94 (s, 1H), 6.37 -6.35 (m, 1H), 4.74 - 4.66 (m,2H), 3.84 - 3.81 (m, 4H), 3.37 (s,2H), 2.88 - 2.85 (m, 2H), 2.35 -2.28 (m, 2H), 2.21 - 2.14 (m,1H), 1.75 - 1.68 (m, 1H), 1.46 (d,J = 7.2 Hz, 3H), 1.23 (s, 3H) ppm
416 (S)-N-(2-((4-(3-(氮杂环丁烷-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氰基-4-甲基色满-6-甲酰胺 488.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43( s, 1H), 8.92 - 8.91 (m, 1H), 8.08(d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.81 - 7.79(m, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.20 (d, J =4.8 Hz, 2H), 7.02 - 6.87 (m, 2H),6.46 - 6.28 (m, 1H), 4.45 - 4.07(m, 4H), 3.84 - 3.80 (m, 4H),2.44 - 2.40 (m, 1H), 2.36 - 2.27(m, 2H), 2.21 - 2.20 (m, 1H),1.79 (s, 3H) ppm
417 (R)-3-氰基-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-甲酰胺 532.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.39(s, 1H), 8.90 - 8.86 (m, 1H), 8.09(d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.91 - 7.88(m, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.45 (s,1H), 7.37 - 7.31 (m, 1H), 7.30 -7.24 (m, 1H), 7.05 (d, J = 8.8 Hz,1H), 6.95 - 6.91 (m, 1H), 5.01(d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.55 (d, J =9.6 Hz, 1H), 4.20 - 4.17 (m, 2H),3.77 - 3.67 (m, 2H), 3.62 (d, J =10.8 Hz, 2H), 2.32 - 2.25 (m, 2H),1.77 (s, 3H), 1.17 (d, J = 6.4Hz, 6H) ppm
418 3-(3-氰基氧杂环丁烷-3-基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 532.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.44(s, 1H), 9.16 - 9.07 (m, 1H), 8.16- 8.12 (m, 1H), 8.00 - 7.92 m,1H), 7.84 - 7.78 (m,1H), 7.68 -7.61 (m, 2H), 7.48 - 7.44 (m,1H), 7.36 - 7.31 (m, 1H), 7.30 -7.24 (m, 1H), 6.98 - 6.91 (m,1H), 5.24 - 5.20 (m, 2H),4.99 -4.94 (m, 2H), 4.31 - 4.18 (m, 2H),3.77 - 3.69 (m, 2H), 3.67 - 3.58(m, 2H), 2.33 - 2.25 (m, 2H), 1.22- 1.13 (m, 6H) ppm
419 3-(3-(二氟甲基)氧杂环丁烷-3-基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 557 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 10.62 -10.12 (m, 1H), 7.72 - 7.66 (m, 1H),7.54 (s, 1H), 7.45 - 7.39 (m, 1H),7.30 (s, 1H), 7.26 - 7.19 (m, 3H),7.07 (s, 1H), 7.01 - 6.95 (m,1H), 6.84 - 6.78 (m, 1H), 6.31 -5.99 (m, 1H), 4.97 - 4.90 (m,4H), 4.31 - 4.23 (m, 2H), 3.79 -3.67 (m, 2H), 3.45 - 3.38 (m,2H), 2.42 - 2.33 (m, 2H), 1.21 -1.16 (m, 6H) ppm
424 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-((顺)-4-羟基四氢呋喃-3-基)苯甲酰胺 537.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40(br s, 1H), 8.88 - 8.86 (m, 1H),7.82 (s, 1H), 7.75 (d, J = 7.6Hz, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.48 - 7.39(m, 3H), 7.34 - 7.32 (m, 1H),7.28 - 7.24 (m, 1H), 6.94 - 6.92(m, 1H), 4.92 (d, J = 4.8 Hz,1H), 4.39 - 4.36 (m, 1H), 4.19 (d,J = 5.6 Hz, 2H), 4.10 - 4.06 (m,1H), 4.02 - 3.96 (m, 2H), 3.74 -3.69 (m, 3H), 3.62 (d, J = 11.6 Hz,2H), 3.39 - 3.37 (m, 1H), 2.31 -2.26 (m, 2H), 1.17 (d, J = 6.0 Hz,6H) ppm
427 2-((R)-2-氰基-1-羟基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)异烟酰胺 535.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ= 12.45(br s, 1H), 9.36 - 9.33 (m, 1H),8.79 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.97(s, 1H), 7.82 - 7.80 (m, 1H), 7.63(s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.35 -7.25 (m, 2H), 6.95 - 6.92 (m, 1H),5.67 - 5.64 (m, 1H), 4.25 (d, J =5.6 Hz, 2H), 3.90 - 3.61 (m, 6H),2.32 - 2.26 (m, 2H), 1.68 (s, 3H),1.18 (d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm
432 (S)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-(2-((4-(3-(6-甲基吡嗪-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 514 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.11(s, 1H), 8.83 - 8.81 (m, 1H), 8.67(s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.06 -8.01 (m, 2H), 7.80 (s, 1H), 7.72 -7.69 (m, 2H), 7.61 - 7.57 (m,1H), 7.28 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.77(s, 1H), 4.20 (d, J = 5.6 Hz,2H), 3.38 (s, 2H), 2.89 - 2.86 (m,2H), 2.60 (s, 3H), 2.21 - 2.15 (m,1H), 1.74 - 1.71 (m, 1H), 1.24 (s,3H) ppm
434 2-(叔丁基)-N-((S)-1-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-3-羟基-1-氧代丙烷-2-基)异烟酰胺 538.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ= 8.64(d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.92 (s,1H), 7.66 - 7.64 (m, 1H), 7.54 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.39 - 7.35 (m,2H), 7.28 - 7.25 (m, 1H), 6.94 -6.91 (m, 1H), 4.91 - 4.88 (m,1H), 4.04 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.85- 3.77 (m, 2H), 3.58 (d, J = 10.8Hz, 2H), 2.39 - 2.33 (m, 2H),1.41- 1.39 (m, 9H), 1.24 (d, J =6.0 Hz, 6H) ppm
435 2-(叔丁基)-N-((S)-1-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)异烟酰胺 522.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, MeOD) δ = 8.63 (d,J = 5.2 Hz, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.64- 7.62 (m, 1H), 7.55 (d, J = 1.2Hz, 1H), 7.38 - 7.36 (m, 2H), 7.29- 7.25 (m, 1H), 6.93 (d, J = 8.4Hz, 1H), 4.85 - 4.78 (m, 1H), 3.83- 3.79 (m, 2H), 3.58 (d, J = 12.0Hz, 2H), 2.39 - 2.33 (m, 2H), 1.60(d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.41 (s,9H), 1.24 (d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm
436 2-(叔丁基)-N-((S)-1-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-3-甲氧基-1-氧代丙烷-2-基)异烟酰胺 552.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, MeOD) δ = 8.64 (d,J = 5.2 Hz, 1H), 7.91 - 7.90 (m,1H), 7.64 - 7.63 (m, 1H), 7.54(s, 1H), 7.39 -7.36 (m, 2H), 7.29 -7.25 (m, 1H), 6.94 - 6.92 (m,1H), 5.00 (s, 1H), 3.91 - 3.79 (m,4H), 3.58 (d, J = 10.8 Hz, 2H),3.44 (s, 3H), 2.39 - 2.33 (m, 2H),1.41 (s, 9H), 1.24 (d, J = 6.4 Hz,6H) ppm
437 (R)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-羟基-4-甲基异色满-6-甲酰胺 537.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ= 12.63- 12.15 (m, 1H), 8.93 - 8.90 (m,1H), 8.14 (s, 1H), 7.74 - 7.71 (m,1H), 7.62 (s, 1H), 7.46 (s, 1H),7.37 - 7.31 (m, 1H), 7.31 - 7.24(m, 1H), 7.14 (d, J = 8.0 Hz, 1H),6.98 - 6.90 (m, 1H), 5.31 (s,1H), 4.83 - 4.68 (m, 2H), 4.27 -4.12 (m, 2H), 3.82 - 3.55 (m,6H), 2.33 - 2.26 (m, 2H), 1.44 (s,3H), 1.18 (d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm
438 (S)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-羟基-4-甲基异色满-6-甲酰胺 537.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ= 12.39(s, 1H), 8.92 - 8.89 (m, 1H), 8.13(d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.73 - 7.70(m, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.45 (s,1H), 7.36 - 7.31 (m, 1H), 7.30 -7.24 (m, 1H), 7.13 (d, J = 8.0 Hz,1H), 6.94 - 6.91 (m, 1H), 5.30(s, 1H), 4.82 - 4.68 (m, 2H), 4.20- 4.17 (m, 2H), 3.78 - 3.56 (m,6H), 2.32 - 2.25 (m, 2H), 1.43(s, 3H), 1.17 (d, J = 6.4 Hz, 6H)ppm
443 5-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)烟酰胺 508.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.71- 12.01 (m, 1H), 9.19-9.16 (m, 1H),8.90 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.82 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 8.24 - 8.25 (m,1H), 7.63 (s, 1H), 7.46 (s, 1H),7.36 - 7.31 (m, 1H), 7.30 - 7.23(m, 1H), 6.95 - 6.92 (m, 1H),4.23 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.78 -3.67 (m, 2H), 3.63 (d, J = 10.4 Hz,2H), 2.32 - 2.26 (m, 2H), 1.37 (s,9H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
444 4-氰基-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-(羟甲基)色满-6-甲酰胺 562.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40(s, 1H), 8.92 - 8.90 (m, 1H), 8.05(d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.83 - 7.81(m, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.45 (s,1H), 7.33 - 7.27 (m, 2H), 6.98 -6.93 (m, 2H), 5.91 - 5.89 (m, 1H),4.30 - 4.27 (m, 2H), 4.19 - 4.17(m, 2H), 3.98 - 3.94 (m, 1H), 3.78- 3.70 (m, 3H), 3.64 - 3.61 (m,2H), 3.47 - 3.41 (m, 1H), 2.42 -2.36 (m, 1H), 2.33 - 2.26 (m, 2H),1.18 (d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm
实施例104. 发明化合物的制备
类似于用于制备化合物 14的那些使用标准的化学操作和程序制备表5中的以下化合物。
表5.
# 名称 LC-MS(m/z) 1H NMR
136 N-[2-[[4-[3-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-4-羟基-4-甲基色满-6-甲酰胺 537.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ = 8.46 (brs, , 1H), 8.17 (s, 1H), 7.75-7.73 (m,1H), 7.56 (s, 1H), 7.41 - 7.36 (m, 2H),7.30-7.28 (m, 1H), 6.96-6.95 (m, 1H),6.87 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.42 - 4.34(m, 1H), 4.33 - 4.26 (m, 3H), 3.91 - 3.77(m, 2H), 3.63 - 3.56 (m, 2H), 2.43 -2.33 (m, 2H), 2.16 - 2.05 (m, 2H), 1.66(s, 3H), 1.26 (d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm
252 (S)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-(羟甲基)-4-甲基色满-8-甲酰胺 551.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.30 (brs, 1H), 8.69-8.65(m, 1H), 7.69-7.66(m,1H), 7.62 (s, 1H), 7.50-7.47(m, 1H), 7.44(s, 1H), 7.36 -7.30 (m, 1H), 7.30 -7.22(m, 1H), 7.01 -6.88 (m, 2H), 4.92-4.88(m,1H), 4.40 -4.27 (m, 2H), 4.23 (d, J=5.6 Hz, 2H), 3.78 -3.67 (m, 2H), 3.62 (d,J= 10.8Hz, 2H), 3.57-3.53(m, 1H), 3.47-3.43(m, 1H), 2.32-2.26(m, 2H), 2.19 -2.06(m, 1H), 1.71-1.64(m, 1H), 1.25 (s,3H), 1.17 (d, J= 6.0Hz, 6H) ppm
138 (R)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-(羟甲基)-4-甲基色满-8-甲酰胺 551.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.31 (brs, 1H), 8.70-8.66(m, 1H), 7.70-7.67(m,1H), 7.63 (s, 1H), 7.51-7.48(m, 1H), 7.45(s, 1H), 7.37 -7.31 (m, 1H), 7.31 -7.24(m, 1H), 7.03 -6.90 (m, 2H), 4.92-4.89(m,1H), 4.40 -4.28 (m, 2H), 4.24 (d, J=5.6Hz, 2H), 3.77 -3.68 (m, 2H), 3.63 (bd, J= 11.6 Hz, 2H), 3.58-3.54(m, 1H),3.48-3.44(m, 1H), 2.32-2.26(m, 2H), 2.17-2.09 (m, 1H), 1.72-1.65(m, 1H), 1.26(s, 3H), 1.18 (d, J = 6.0Hz, 6H) ppm
139 N-[2-[[4-[3-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-2-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)吡啶-4-甲酰胺 524.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 (brs, 1H), 9.23-9.21 (m, 1H), 8.68 (d, J=4.8 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.62-7.60(m,2H), 7.45 (s, 1H), 7.34-7.32 (m,1H), 7.28-7.26 (m, 1H), 6.96-6.94(m, 1H), 4.68-4.65 (m, 1H), 4.23 (d, J=5.6 Hz, 2H), 3.71-3.70 (m, 2H), 3.67 -3.60 (m, 2H), 3.59 (d, J= 5.2 Hz, 2H),2.31-2.26 (m, 2H), 1.29 (s, 6H), 1.18(d,J= 6.0 Hz, 6H) ppm
143 (R)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-5-(羟甲基)-5-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-3-甲酰胺 536.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.01 -8.98(m, 1H), 8.83 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.03(d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.46(s,1H), 7.36 -7.31 (m, 1H), 7.30 -7.23(m, 1H), 6.93 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.89(s, 1H), 4.19 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.77-3.69 (m,2H), 3.63 (d, J = 11.2 Hz, 2H),3.44 -3.40 (m, 2H), 3.01 -2.91 (m, 2H),2.32 -2.26 (m, 2H), 2.23 -2.13 (m, 1H),1.85 -1.74 (m,1H), 1.26 (s, 3H), 1.19(s, 3H), 1.17 (s, 3H) ppm
144 (S)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-5-(羟甲基)-5-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-3-甲酰胺 536.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 9.03 -9.00 (m, 1H), 8.82(d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 2.0 Hz,1H), 7.62 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.36 -7.31 (m, 1H), 7.30 -7.23 (m, 1H), 6.94 -6.92 (m, 1H), 4.89 -4.86 (m, 1H), 4.20(d, J =5.6 Hz, 2H), 3.76 -3.67 (m, 2H),3.62 (d, J = 10.4 Hz, 2H), 3.45 -3.39(m, 2H), 3.00 -2.92 (m, 2H), 2.31 -2.25(m, 2H), 2.21 -2.13 (m, 1H), 1.81 -1.79(m, 1H), 1.25 (s, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.16(s, 3H) ppm
146 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基色满-8-甲酰胺 546.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.33 (s,1H), 8.66-8.62(m, 1H), 7.80-7.77(m,1H), 7.70-7.62(m, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.44(s, 1H), 7.37 -7.30 (m, 1H), 7.30 -7.23(m, 1H), 7.12-7.08(m, 1H), 6.94-6.91(m,1H), 4.53 -4.34 (m, 2H), 4.23 (d, J=5.6 Hz, 2H), 3.78 -3.67 (m, 2H), 3.62 (d,J= 11.6Hz, 2H), 2.46-2.44(m, 1H), 2.32-2.20 (m, 3H), 1.79 (s, 3H), 1.17 (d, J=6.4Hz, 6H) ppm
148 (S)-4-氰基-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基色满-8-甲酰胺 546.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.33 (s,1H), 8.67-8.63(m, 1H), 7.81-7.78(m,1H), 7.71-7.69(m, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.45(s, 1H), 7.37 -7.31 (m, 1H), 7.31 -7.24(m, 1H), 7.13-7.09(m, 1H), 6.95-6.92(m,1H), 4.57 -4.35 (m, 2H), 4.24 (d, J=5.6Hz, 2H), 3.80 -3.68 (m, 2H), 3.63 (d,J= 10.4Hz, 2H), 2.49 -2.45 (m, 1H),2.37 -2.19 (m, 3H), 1.80 (s, 3H), 1.18(d, J= 6.4Hz, 6H) ppm
149 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(3-(氟甲基)氧杂环丁烷-3-基)苯甲酰胺 539.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 8.07 -7.67(m, 2H), 7.58 -7.34 (m, 5H), 7.32 -7.23(m, 1H), 6.98 -6.87 (m, 1H),5.07 -4.89(m, 2H), 4.84 -4.57 (m, 4H), 4.31 (s,2H), 3.87 -3.75 (m, 2H), 3.60 -3.51 (m,2H), 2.44 -2.28 (m, 2H), 1.24 (d,J=6.4Hz, 6H) ppm.
150 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-((1r,3r)-1-氟-3-羟基环丁基)苯甲酰胺 539.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (s,1H), 9.05 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.97 (s,1H), 7.89 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.69 -7.59(m, 2H), 7.59 -7.51 (m, 1H), 7.46 (s,1H), 7.37 -7.24 (m, 2H), 6.94 (d, J = 7.6Hz, 1H), 5.43 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.56-4.45 (m,1H), 4.21 (d, J = 5.6 Hz, 2H),3.75 -3.68 (m, 2H), 3.63 (d, J = 11.6Hz, 2H), 2.92 -2.82 (m, 2H), 2.48 -2.38(m, 2H), 2.30 (d, J= 11.2 Hz, 2H), 1.18(d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm
151 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-((1s,3s)-1-氟-3-羟基环丁基)苯甲酰胺 539.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.33 (s,1H), 8.99 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.93 -7.80 (m, 2H), 7.61 -7.53 (m, 2H), 7.52 -7.45(m, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.32 -7.24(m, 1H), 7.24 -7.17 (m, 1H), 6.87 (d, J =7.6 Hz, 1H), 5.38 (d, J = 6.0 Hz, 1H),4.14 (d, J =5.6 Hz, 2H), 3.96 -3.83 (m,1H), 3.70 -3.62 (m, 2H), 3.56 (d, J =11.2Hz, 2H), 2.96 -2.85 (m, 2H), 2.55 -2.50 (m, 2H), 2.23(d, J = 11.2 Hz, 2H),1.11 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
156 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-((3S,4R)-4-羟基四氢呋喃-3-基)苯甲酰胺 537.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.47 -12.37 (m, 1H), 8.93 -8.90 (m, 1H), 7.84-7.75 (m, 2H), 7.61 (s, 1H), 7.46 -7.44(m,3H), 7.34 -7.32 (m, 1H), 7.28 -7.24(m, 1H), 6.94 -6.91 (m, 1H), 5.33 -5.32(m, 1H), 4.28 -4.24 (m, 1H), 4.20 -4.16(m, 3H),4.01 -3.96 (m, 1H), 3.78 -3.70(m, 3H), 3.69 -3.56 (m, 3H), 3.22 (s,1H), 2.31 -2.26 (m, 2H), 1.18 -1.13 (m,6H) ppm
157 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-((3R,4S)-4-羟基四氢呋喃-3-基)苯甲酰胺 537.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.74 -12.37 (m, 1H), 8.93 -8.90 (m, 1H), 8.49-8.32 (m, 1H), 7.82 -7.75 (m, 2H), 7.75 -7.61 (s, 1H), 7.45 -7.42 (m, 3H), 7.34-7.32 (m, 1H), 7.28 -7.24 (m, 1H), 6.97 -6.91 (m, 1H), 5.34 -5.30 (m, 1H), 4.29-4.24(m, 1H), 4.20-4.16 (m, 3H), 4.00 -3.96 (m, 1H), 3.78 -3.69 (m, 3H), 3.63-3.52 (m, 3H), 3.26 -3.24 (m, 1H), 2.31 -2.25 (m,2H), 1.18 -1.14 (m, 6H) ppm
165 (R)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-(羟甲基)-4-甲基色满-6-甲酰胺 551.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.49 -12.16 (m, 1H), 8.76 -8.73 (m, 1H), 7.88(d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.67 -7.59 (m, 2H),7.45 (s, 1H), 7.36 -7.31 (m, 1H), 7.30-7.23 (m, 1H), 6.93 (d, J = 8.0 Hz, 1H),6.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.90 -4.88(m, 1H),4.25 -4.12 (m, 4H), 3.77 -3.67(m,2H), 3.62 (d, J = 11.6 Hz, 2H),3.57 -3.53 (m, 1H), 3.48 -3.44 (m,1H), 2.31 -2.26 (m, 2H),2.10 -2.04 (m,1H), 1.66 -1.60 (m, 1H), 1.26 (s, 3H),1.18 (s, 3H), 1.17 (s, 3H) ppm
166 (S)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-(羟甲基)-4-甲基色满-6-甲酰胺 551.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.63 -12.15 (m, 1H), 8.75 (s, 1H), 7.88 (s,1H), 7.67 -7.59 (m, 2H), 7.45 (s, 1H),7.36 -7.31 (m, 1H), 7.30 -7.23 (m, 1H),6.93 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.81 (d, J =8.4 Hz, 1H), 4.90 -4.88 (m, 1H), 4.26 -4.12 (m, 4H),3.73 (d, J = 6.4 Hz, 2H),3.62 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 3.58 -3.45(m, 2H), 2.31 -2.26 (m, 2H), 2.13 -2.04(m, 1H), 1.69 -1.59(m,1H), 1.26 (s,3H), 1.18 (s, 3H), 1.17 (s, 3H) ppm
168 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(3-(羟甲基)氧杂环丁烷-3-基)苯甲酰胺 537.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (s,1H), 8.98 -8.90 ( m, 1H), 8.13 (s, 1H),7.81 -7.75 ( m, 1H), 7.69 -7.65 (m, 1H),7.62 (s, 1H), 7.53 -7.42 (m, 2H), 7.36-7.30 (m, 2H), 7.30 -7.23 (m, 1H), 6.97-6.90 (m, 1H), 4.81 -4.70 (m, 4H),4.19 (d,J=6.0 Hz, 2H), 3.79 -3.66(m, 5H), 3.64 -3.59 (m, 2H), 2.33 -2.25 (m, 2H), 1.17 (d, J=6.0 Hz, 6H) ppm
170 (R)-5-氰基-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-5-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-3-甲酰胺 531.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 8.99 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.38 (d, J = 2.0 Hz, 1H),7.54 (s, 1H), 7.41 -7.34 (m, 2H),7.28 -7.24 (m, 1H), 6.94 -6.91 (m, 1H), 4.34(s, 2H), 3.88 -3.75 (m, 2H), 3.57 (d, J= 10.8 Hz, 2H), 3.23 -3.19 (m, 2H), 2.79-2.72 (m, 1H), 2.45 -2.29 (m, 3H), 1.75(s, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.23 (s, 3H) ppm
253 (S)-5-氰基-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-5-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-3-甲酰胺 531.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 8.98 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.37 (d, J = 1.6 Hz, 1H),7.53 (s, 1H), 7.39 -7.34 (m, 2H),7.30 -7.23 (m, 1H), 6.93 (d, J = 8.0 Hz, 1H),4.34 (s, 2H), 3.88 -3.76 (m, 2H), 3.57(d, J = 11.6 Hz, 2H), 3.22 -3.18 (m, 2H),2.80 -2.71 (m, 1H), 2.41 -2.32 (m, 3H),1.74 (s,3H), 1.24 (s, 3H), 1.23 (s, 3H)ppm
171 (S)-4-氰基-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 546.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.42 (s,1H), 9.07 -9.04(m, 1H), 8.12 (d, J=1.6Hz, 1H), 7.88 -7.85(m,1H), 7.62(s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.32-7.26(m,3H), 6.94 -6.93(m, 1H), 4.92-4.81 (m,2H), 4.23-4.20(m, 3H), 3.87(d, J=11.6Hz, 1H), 3.77 -3.71(m, 2H), 3.62 (d,J=10.8 Hz, 2H), 2.31-2.26 (m, 2H), 1.69(s, 3H), 1.17 (d, J=6.0Hz, 6H) ppm
254 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 546.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.42 (s,1H), 9.06 (s, 1H), 8.12 (d, J=1.6Hz, 1H), 7.88 -7.85(m, 1H), 7.62(s,1H), 7.45 (s, 1H), 7.32-7.26(m, 3H),6.93 (d, J=5.6 Hz, 1H), 4.92-4.81(m,2H), 4.23-4.20(m, 3H), 3.87 (d, J=11.6Hz,1H), 3.77 -3.71(m, 2H), 3.62 (d, J=10.5Hz, 2H), 2.31-2.26(m, 2H), 1.69 (s, 3H),1.17 (d, J=6.0Hz, 6H)
172 (4R)-4-氰基-N-[2-[[4-[3-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-4-甲基-色满-6-甲酰胺 546.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (s,1H), 8.95 -8.92 (m, 1H), 8.09 (d, J =1.6 Hz, 1H), 7.82 -7.79 (m, 1H), 7.62(s,1H), 7.45 (s, 1H), 7.37-7.31 (m,1H), 7.30 -7.23 (m, 1H), 7.03 -6.88(m, 2H), 4.41 -4.33 (m, 1H), 4.32 -4.23(m, 1H), 4.22 -4.12 (m, 2H), 3.76 -3.66(m, 2H), 3.62 (d, J = 11.2 Hz, 2H),2.45 -2.41 (m, 1H), 2.32 -2.17 (m, 3H),1.80 (s, 3H), 1.18 (s, 3H),1.16 (s, 3H)ppm
255 (4S)-4-氰基-N-[2-[[4-[3-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-4-甲基-色满-6-甲酰胺 546.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.42 (s,1H), 8.95 -8.92 (m, 1H), 8.09 (d, J =2.0 Hz, 1H), 7.82 -7.79 (m, 1H), 7.62(s,1H), 7.45 (s, 1H), 7.36 -7.31 (m,1H), 7.29 -7.24 (m, 1H), 6.99 -6.91(m, 2H), 4.41 -4.22 (m, 2H), 4.21 -4.13(m, 2H), 3.77 -3.66 (m, 2H), 3.62 (d, J =10.8 Hz, 2H), 2.45 -2.41 (m, 1H), 2.33-2.15 (m, 3H), 1.80 (s, 3H), 1.18 (s,3H), 1.16 (s, 3H) ppm
183 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(3-氟氧杂环丁烷-3-基)苯甲酰胺 525.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 (s,1H), 9.09 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.11 (s,1H), 7.96 (d, J = 8.0 Hz,1H), 7.80 -7.71m, 1H), 7.68 -7.57 (m, 2H), 7.46 (s,1H), 7.37 -7.22 (m, 2H), 6.95-6.92 (m,1H), 5.10 -4.90 (m, 4H), 4.23 (d, J=6.0 Hz, 2H), 3.74-3.70 (m, 2H), 3.67 -3.56 (m, 2H), 2.32-2.26 (m, 2H), 1.18(d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm
184 N-(2-((4-(3-((2R,6S)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)苯甲酰胺 523.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.44 (s,1H), 9.03 -9.02 (m, 1H), 8.17 (s, 1H),7.90 -7.76 (m, 2H),7.63 (s, 1H), 7.54 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.37 -7.21 (m, 2H), 6.95-6.94 (m, 1H), 6.51 (s,1H), 4.84 -4.79 (m, 2H), 4.77-4.72 (m,2H), 4.21 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.74-3.71(m, 2H), 3.64-3.61 (m, 2H), 2.29 (d, J= 11.2 Hz, 2H), 1.18 (d, J = 6.4 Hz, 6H)ppm
186 (1R,2S)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2-羟基-2',3'-二氢螺[环戊烷-1,1'-茚]-6'-甲酰胺 561.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.38 -12.37 (m, 1H), 8.78 -8.73 (m, 1H), 7.84(s, 1H), 7.69 -7.67 (m, 1H), 7.61 (s,1H),7.44 (s, 1H), 7.34 -7.32 (m, 1H),7.28 -7.24 (m, 2H), 6.94 -6.91 (m, 1H),4.48 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.17 (d, J =5.6 Hz, 2H),3.78 -3.77 (m, 1H), 3.74 -3.69 (m, 2H), 3.62 (d, J = 12.0 Hz,2H), 2.90 -2.82 (m, 2H), 2.32 -2.28(m, 2H), 2.19 -2.14 (m,1H), 2.04 -1.99 (m, 1H), 1.93 -1.87 (m, 2H), 1.80-1.77 (m, 1H), 1.61 -1.59 (m, 2H), 1.24 -1.23 (m, 1H), 1.17 (d, J = 6.4 Hz,6H)ppm
256 (1S,2R)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2-羟基-2',3'-二氢螺[环戊烷-1,1'-茚]-6'-甲酰胺 561.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.46 -12.29 (m, 1H), 8.77 -8.74 (m, 1H), 7.84(s, 1H), 7.69 -7.67 (m, 1H), 7.61 (s,1H),7.44 (s, 1H), 7.34 -7.32 (m, 1H),7.28 -7.24 (m, 2H), 6.94 -6.91 (m, 1H),4.48 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.17 (d, J =5.6 Hz, 2H),3.78 (d, J = 1.6 Hz, 1H),3.74 -3.69 (m, 2H), 3.62 (d, J = 11.2Hz, 2H), 2.92 -2.84 (m, 2H), 2.32 -2.28(m, 2H), 2.19 -2.16 (m, 1H), 2.02 -1.98(m, 1H), 1.95 -1.86 (m, 2H), 1.80 -1.77(m, 1H), 1.63 -1.56 (m,2H), 1.23 (s,1H), 1.17 (d, J = 6.4Hz, 6H) ppm
188 (1R,2R)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2-羟基-2',3'-二氢螺[环戊烷-1,1'-茚]-6'-甲酰胺 561.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.39 (brs, 1H), 8.84 -8.83 (m, 1H), 7.73 -7.67 (m, 2H), 7.62 (s, 1H), 7.46 (s,1H),7.36 -7.32 (m, 1H), 7.27 (d, J =3.2Hz, 2H), 6.94 (d, J = 8.0Hz, 1H),4.71 (d, J = 5.2Hz, 1H), 4.21 -4.14 (m,2H),4.09 -4.03 (m, 1H), 3.76 -3.70 (m,2H), 3.65 -3.60 (m, 2H), 2.94 -2.81 (m,2H), 2.47 -2.43 (m, 1H), 2.30 (d, J =11.2Hz,2H), 2.01 (d, J = 4.4, 1H), 1.83 -1.66 (m, 5H), 1.62 -1.53 (m, 1H), 1.18(d, J = 6.0Hz, 6H) ppm
189 (1S,2S)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2-羟基-2',3'-二氢螺[环戊烷-1,1'-茚]-6'-甲酰胺 561.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.53 -12.25 (m, 1H), 8.84 -8.82 (m, 1H), 7.76-7.66 (m, 2H), 7.62 (s, 1H), 7.45 (s,1H), 7.36 -7.31 (m, 1H), 7.27 (d, J =7.6Hz, 2H), 6.94 (d, J = 1.6,Hz, 1H),4.71 (d, J = 5.2Hz, 1H), 4.18 (d,J =5.6Hz, 2H), 4.05 (d, J = 5.2Hz, 1H), 3.76-3.70 (m, 2H), 3.63 (d, J = 11.8Hz,2H), 2.92 -2.83 (m, 2H), 2.46 -2.43(m,1H), 2.33 -2.30 (m, 2H), 2.05 -1.96 (m,1H), 1.84 -1.68 (m, 5H), 1.61 -1.54 (m,1H), 1.18 (d, J = 6.0Hz, 6H) ppm
195 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2-氧代-2',3'-二氢螺[环戊烷-1,1'-茚]-6'-甲酰胺 559.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.38 (s,1H), 8.88-8.78 (m, 1H), 7.76 (m, 1H),7.66-7.56 (m, 2H),7.45 (s, 1H), 7.38-7.32(m, 2H), 7.30-7.24 (m, 1H), 6.94 (m,1H), 4.18 (m, 2H), 3.76-3.69(m, 2H),3.63 (d, J = 10.8 Hz, 2H), 2.97 (m,2H), 2.44 (m, 2H), 2.32-2.21 (m,4H), 2.17-2.08 (m, 2H), 2.04-1.95 (m,2H), 1.18 (d, J = 6.4Hz, 6H) ppm
196 N-(2-((4-(3-(氮杂环丁烷-1-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(叔丁基)苯甲酰胺 449.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.44 (s,1H), 8.95-8.94 (m, 1H), 7.94-7.93 (m,1H), 7.77 -7.67 (m, 1H), 7.64 -7.54 (m,2H), 7.43-7.22 (m, 1H), 7.21 (d, J =4.8 Hz, 2H), 6.96 (s, 1H), 6.39-6.38 (m,1H), 4.19 (d, J = 5.6Hz, 2H),3.84-3.83 (m, 4H),2.38 -2.28 (m, 2H),1.33 (s, 9H) ppm
198 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)-5-氟苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟-3-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酰胺 559.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.42 (s,1H), 9.08 -8.85 (m, 1H), 7.91 -7.85 (m,1H), 7.84 -7.78 (m, 1H), 7.74 (s, 1H),7.31 -7.19 (m, 2H), 7.09 (d, J = 9.2Hz, 1H), 6.76 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 4.80-4.73 (m, 1H), 4.18 (d, J = 5.6 Hz,2H),3.73 -3.64 (m, 4H), 3.58 (d, J = 5.6Hz, 2H), 2.39 -2.27 (m, 2H), 1.31 (s,6H), 1.17 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
199 4-氯-N-[2-[[4-[3-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-氟-苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)苯甲酰胺 575.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.48 -12.41 (m, 1H), 9.03 -9.01 (m, 1H), 7.96(d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.74 -7.72 (m, 2H),7.51 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H),7.09 -7.07 (m, 1H), 6.76 (d, J = 12.4 Hz,1H), 4.79 -4.76 (m, 1H), 4.18 (d, J =5.6Hz, 2H), 3.77 (d, J = 5.6 Hz, 2H),3.70 -3.66 (m, 4H), 2.57 -2.56 (m, 2H),1.40 (s, 6H), 1.17 (d, J = 6.0 Hz, 6H)ppm
200 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟-3-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酰胺 541.1 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 8.00 -7.95(m, 1H), 7.85 -7.79 (m, 1H), 7.57 -7.53(m, 1H), 7.40 -7.35 (m, 2H),7.30 -7.24(m, 1H), 7.21 -7.11 (m, 1H), 6.96 -6.89(m, 1H), 4.30 (s, 2H), 3.86 -3.79 (m,2H), 3.76 (s, 2H), 3.58 (d, J = 10.4Hz,2H), 2.41 -2.32 (m, 2H), 1.41 (s, 6H),1.24 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
202 4-叔丁基-N-[2-[[4-[3-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]吡啶-2-甲酰胺 508.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (s,1H), 9.10-9.07(m, 1H), 8.60(d, J =5.2Hz, 1H), 8.05 (d, J = 1.6Hz,1H),7.67-7.65(m, 1H), 7.62 (s, 1H),7.45 (s, 1H), 7.34(d, J=8.0 Hz,1H),7.29-7.25(m, 1H), 6.95-6.92(m, 1H),4.25(d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.74-3.70 (m, 2H),3.62 (d, J = 11.2Hz, 2H), 2.29-2.27(m,2H), 1.33 (s, 9H), 1.17(d, J = 6.0Hz,6H)ppm
205 2-(叔丁基)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)异烟酰胺 508.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (brs, 1H), 9.24-9.21 (m, 1H), 8.68 (d, J=4.8 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.62-7.61(m,2H), 7.45 (s, 1H), 7.34-7.32 (m,1H), 7.28-7.24 (m, 1H), 6.94-6.93(m, 1H), 4.23 (d, J= 5.6 Hz, 2H), 3.73-3.69 (m, 2H), 3.63 (d, J= 11.2 Hz, 2H),2.31-2.26 (m, 2H), 1.35 (s, 9H), 1.18 (d,J= 6.4 Hz, 6H) ppm
128 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3,4,5-四氢苯并[b]硫杂䓬-8-甲酰胺 1,1-二氧化物 569.5 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.53 -12.28 (m, 1H), 9.19-9.17(m, 1H), 8.43(d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.12-8.09(m, 1H),7.65 -7.55 (m, 2H), 7.45 (d, J= 2.0Hz,1H), 7.36 -7.32 (m, 1H), 7.30 -7.24 (m,1H), 6.95-6.92(m, 1H), 4.22 (d, J=5.6Hz, 2H), 3.78 -3.67 (m, 2H), 3.63 (d,J= 10.2Hz, 2H), 3.46 -3.39 (m, 2H),3.22 -3.15 (m, 2H), 2.33 -2.23 (m, 2H),2.16 -2.08 (m, 2H), 1.76 (s, 2H), 1.18(d, J= 6.0Hz, 6H) ppm
217 3-叔丁基-N-[2-[[4-[3-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]苯甲酰胺 507.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.38 (s,1H), 8.93 -8.91(m, 1H), 7.93-7.92(m,1H), 7.72 (d, J = 7.2Hz, 1H), 7.63 -7.61(m, 2H), 7.44-7.42(m, 2H), 7.36 -7.32(m, 1H), 7.8-7.26(m, 1H), 6.94-6.90 (m,1H), 4.20-4.18(m, 2H), 3.73-3.69 (m,2H), 3.62 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 2.29-2.26(m, 2H), 1.32(s, 9H), 1.17 (d, J =6.0Hz, 6H) ppm
218 (R)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(羟甲基)-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 535.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.81 -8.78(m, 1H), 7.72 -7.69 (m, 2H), 7.61 (s,1H), 7.45 (s, 1H), 7.34 -7.33 (m, 1H),7.28 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.94 (d, J =7.2 Hz, 1H), 4.78 -4.76 (m, 1H), 4.18 (d,J = 5.6 Hz, 2H), 3.74 -3.70 (m, 2H),3.63 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 3.39 (d, J =4.8 Hz, 2H), 2.90 -2.86 (m, 2H), 2.32-2.27 (m, 2H), 2.20 -2.17 (m, 1H),1.77 -1.71(m, 1H), 1.24 (s, 3H),1.18 (s, 3H), 1.17 (s, 3H) ppm
219 (S)-N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(羟甲基)-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 535.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.81 -8.78(m, 1H), 7.70 -7.69 (m, 2H), 7.61 (s,1H), 7.47 (s, 1H), 7.34 -7.33 (m, 1H),7.28 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.94 (d, J =7.6 Hz, 1H), 4.78 -4.76 (m, 1H), 4.18 (d,J = 5.2 Hz, 2H), 3.74 -3.70 (m, 2H),3.63 (d, J = 11.6Hz, 2H), 3.38 (s, 2H),2.88 -2.86 (m, 2H), 2.32 -2.27(m, 2H),2.22 -2.17 (m, 1H), 1.77 -1.71(m, 1H),1.24 (s, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.17( s,3H) ppm
238 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-4-甲基苯甲酰胺 537.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.42 -12.26 (m, 1H), 12.47 -12.24 (m, 1H),8.85 -8.76 (m, 1H), 8.47 -8.36 (m, 1H),7.85(d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.67 -7.57 (m,2H), 7.45 (s, 1H), 7.36 -7.32 (m, 1H),7.30 -7.24 (m, 1H), 7.21 (d, J = 8.0Hz, 1H), 6.99 -6.88 (m, 1H), 4.70 (d, J =5.4 Hz, 1H), 4.17 d, J = 5.8 Hz, 2H),3.75 -3.69 (m, 2H), 3.63 (d, J = 5.6 Hz,4H), 2.53 -2.53(m, 3H), 2.33 -2.25 (m,1H), 1.35 (s, 6H), 1.18 (d, J = 6.1 Hz,6H) ppm
244 4-氯-N-[2-[[4-[3-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)苯甲酰胺 557.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.39 (s,1H), 9.00 -8.97(m, 1H), 7.96(d, J=2.0Hz, 1H), 7.75 -7.73(m, 1H),7.61(s,1H), 7.50 (d, J=8.4Hz, 1H), 7.44(s, 1H),7.36 -7.31 (m, 1H), 7.30 -7.24 (m, 1H),6.94 -6.93(m, 1H), 4.76-4.73(m, 1H), 4.18(d, J=6.0Hz, 2H), 3.77 (d, J=6.0Hz,2H), 3.74-3.71(m, 2H), 3.62 (d, J=12.0Hz, 2H), 2.32 -2.26 (m,2H), 1.41 (s,6H), 1.17 (d, J=6.0Hz, 6H) ppm
247 3-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)-N-[2-[[4-[3-(4-羟基-1-哌啶基)苯基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]苯甲酰胺 509.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ = 8.13 (s,1H), 8.02 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.97-7.97(m, 1H), 7.74 (d, J = 7.6Hz, 1H), 7.64-7.57(m, 3H), 7.53-7.50 (m, 1H), 7.46-7.42(m, 1H), 4.32 (s, 2H), 4.11-4.06(m,1H), 3.90-3.84(m, 2H), 3.62-3.56(m, 4H),2.26-2.19(m, 2H), 2.04-1.97(m, 2H),1.35(s, 6H) ppm
125 N-(2-((4-(3-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(异丙基磺酰基)-4-甲基苯甲酰胺 571.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.41(s,1H), 9.20-9.17(m, 1H), 8.38 (d, J=2.0Hz, 1H), 8.14-8.11(m, 1H), 7.63-7.61(m, 2H), 7.45 (s, 1H), 7.34-7.31 (m, 1H), 7.28-7.24 (m, 1H),6.94-6.92(m, 1H), 4.21 (d, J = 5.6Hz,2H), 3.75-3.68(m, 2H), 3.62 (d, J =11.6Hz, 2H), 3.53 (s, 1H), 2.68(s, 3H),2.32-2.26 (m, 2H), 1.19-1.16(m, 12H)ppm
126 3-异丙基磺酰基-N-[2-[[4-(3-吗啉代苯基)噻唑-2-基]氨基]-2-氧代乙基] 苯甲酰胺 529.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.56 -12.37 (m, 1H), 9.29 -9.26 (m, 1H), 8.42-8.35 (m, 1H), 8.27 (d, J = 8.0 Hz, 1H),8.05 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.90 -7.76(m, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.41-7.34 (m, 1H), 7.32 -7.22 (m, 1H), 6.94-6.91 (m,1H), 4.23 (d, J = 5.6 Hz, 2H),3.85 -3.71 (m, 4H), 3.56 -3.46 (m, 1H),3.19 -3.12 (m, 4H), 1.19 (d, J = 6.8 Hz,6H) ppm
实施例105. 发明化合物的制备
类似于用于制备化合物 67的那些使用标准的化学操作和程序制备表6中的以下化合物。
表6.
# 名称 LC-MS(m/z) 1H NMR
147 3-(1-氰基环丁基)-N-(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 498.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.77 -12.38 (m, 1H), 9.10-9.08(m, 1H), 8.83(d, J= 1.8 Hz, 1H), 8.23-8.20(m,1H), 8.01-7.96 (m, 1H), 7.93 -7.88 (m, 1H), 7.79(s, 1H), 7.72 (d, J=8.4Hz, 1H), 7.69 -7.65 (m, 1H), 7.62 -7.56 (m, 1H), 7.49(d, J= 7.6Hz, 1H), 6.68 -6.61 (m, 1H),4.24 (d, J= 5.6Hz, 2H), 3.53 (s, 3H),2.84 -2.75 (m, 2H), 2.73 -2.67 (m, 2H),2.34-2.32(m, 1H), 2.10 -2.00 (m, 1H)ppm
173 (R)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-(2-((4-(4-甲基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 493.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.34 (brs, 1H), 8.79 -8.77 (m, 1H), 7.71 -7.68 (m, 2H), 7.40 (s, 1H), 7.28 (d,J = 7.6 Hz,1H), 7.20 (d, J = 2.0 Hz, 1H),7.13 -7.10 (m, 1H), 6.70 (d, J = 8.4Hz, 1H), 4.78 -4.75 (m, 1H), 4.25 -4.23(m, 2H), 4.16 (d, J= 5.6 Hz, 2H), 3.37(d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.26 -3.24 (m, 2H),2.88 -2.86 (m, 5H), 2.21 -2.14 (m, 1H),1.76 -1.68 (m, 1H),1.23 (s, 3H) ppm
174 (S)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-(2-((4-(4-甲基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 493.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.33 (brd, J = 5.6 Hz, 1H), 8.80 -8.77 (m, 1H),7.74 -7.68 (m, 2H), 7.40 (s, 1H), 7.28 -7.26(m, 1H), 7.20 (d, J = 2.0 Hz, 1H),7.13 -7.10 (m, 1H), 6.70 (d, J = 8.4 Hz,1H), 4.78 -4.76 (m, 1H), 4.25 -4.23 (m,2H),4.16 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.38 -3.36(m, 2H), 3.26 -3.24 (m, 2H), 2.88 (s,5H), 2.21 -2.14 (m, 1H), 1.76 -1.68 (m,1H), 1.23(s, 3H) ppm
175 (R)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-(2-((4-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 476.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 (s,1H), 8.82 -8.80(m, 1H), 8.21 (s, 1H),8.08 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.81 -7.80 (m,1H), 7.74 -7.70 (m, 2H), 7.68 (d, J=8.4Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.29 (d, J=7.6Hz,1H), 4.79-4.77 (m, 1H),4.20-4.18(m,2H), 3.88 (s, 3H), 3.39-3.38 (m, 2H),2.94 -2.83 (m, 2H), 2.23 -2.13 (m, 1H),1.77-1.72 (m, 1H), 1.25 (s, 3H) ppm
257 (S)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-(2-((4-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 476.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.82 (s,1H), 8.21 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.80-7.79 (m, 1H), 7.75 - 7.58 (m, 4H), 7.29-7.28 (m, 1H), 4.93 - 4.62 (m, 1H),4.20-4.19 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.37 -3.32 (m, 2H), 2.88-2.87 (m, 2H), 2.19-2.18 (m, 1H), 1.74-1.73 (m, 1H), 1.24 (s,3H) ppm
176 (R)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 505.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.53-12.38(m, 1H), 8.81 -8.78(m, 1H), 8.46 (d, J=1.6Hz, 1H), 7.98 -7.96(m, 1H), 7.71-7.66(m, 3H), 7.35 (d, J= 8.0Hz, 1H), 7.28(d, J= 7.6Hz, 1H), 4.78 -4.75(m, 1H),4.17 (d, J= 6.0Hz, 2H), 3.58 -3.55(m,2H), 3.38 (d, J= 5.6 Hz, 2H), 3.04(s,3H), 3.01 -2.98(m, 2H), 2.90-2.86(m,2H), 2.21-2.15(m, 1H), 1.76 -1.69(m, 1H),1.23 (s, 3H) ppm
258 (S)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 505.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.49 (brs, 1H), 8.82 (t,J=5.6 Hz, 1H), 8.46 (d,J=1.9 Hz, 1H), 7.98 (dd,J=2.0, 7.9 Hz,1H), 7.73 - 7.66 (m, 3H), 7.35 (d,J=8.0Hz, 1H), 7.28 (d,J=7.6 Hz, 1H), 4.78 (t,J=5.4 Hz, 1H), 4.17 (d,J=5.8 Hz, 2H),3.57 (t,J=6.7 Hz, 2H), 3.37 (br d,J=6.4Hz, 2H), 3.05 (s, 3H), 3.00 (t,J=6.6Hz, 2H), 2.91 - 2.85 (m, 2H), 2.22 - 2.14(m, 1H), 1.72 (td,J=8.1, 12.7 Hz, 1H),1.23 (s, 3H) ppm
177 (R)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 503.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.52(brs, 1H), 8.83-8.80(m, 2H), 8.22-8.19(m, 1H), 7.78(s, 1H), 7.71-7.69(m,3H), 7.49 (d, J= 7.2Hz, 1H), 7.28 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.63 (d, J= 7.6Hz, 1H),4.80-4.76(m, 1H), 4.19 (d, J= 5.6Hz, 2H),3.52(s, 3H), 3.38-3.37(m, 2H), 2.90-2.86(m, 2H), 2.21-2.15(m, 1H), 1.76-1.69(m, 1H), 1.23(s, 3H) ppm
181 (S)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 503.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.52 (s,1H), 8.82-8.80(m, 2H), 8.22 -8.20(m,1H), 7.78 (s, 1H), 7.71-7.69 (m, 3H),7.48 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.28 (d, J=7.6Hz, 1H), 6.63 (d, J=7.2 Hz, 1H),4.78 -4.75(m, 1H), 4.19 (d, J=6.0Hz, 2H),3.52(s,3H), 3.38 (d, J=6.0Hz, 2H),2.89-2.86(m, 2H), 2.20-2.15(m, 1H), 1.76-7.71(m, 1H), 1.23(s, 3H) ppm
178 (R)-3-(羟甲基)-N-(2-((4-(咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 461.9 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.60 -12.35 (m, 1H), 8.89 -8.77 (m, 1H), 8.58(d, J = 7.2 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H),7.95 (s,1H), 7.83 (s, 1H), 7.76 -7.67 (m, 2H), 7.59 (d, J = 0.8Hz, 1H), 7.48 -7.39 (m, 1H), 7.28 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 4.77 (s, 1H), 4.20(d, J= 5.6 Hz, 2H), 3.38 (s, 2H), 2.93 -2.85(m, 2H), 2.23 -2.14 (m, 1H), 1.78 -1.68(m, 1H), 1.24 (s, 3H) ppm
259 (S)-3-(羟甲基)-N-(2-((4-(咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 461.9 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.46 (s,1H), 8.86 - 8.79 (m, 1H), 8.61 - 8.56(m, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.95(s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.74 - 7.67 (m,2H), 7.60 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.47 -7.40 (m, 1H), 7.28 (d, J = 8.0 Hz, 1H),4.81 - 4.73 (m, 1H), 4.20 (d, J = 5.8 Hz,2H), 3.38 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 2.94 -2.83 (m, 2H), 2.23 - 2.14 (m, 1H), 1.78 -1.68 (m, 1H), 1.24 (s, 3H) ppm
179 (R)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-(2-((4-(1-甲基-1H-吲唑-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 476.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.47 (s,1H), 8.83 -8.82(m, 1H), 8.11 (s, 1H),8.04 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.82-7.67 (m,5H), 7.28 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.79-4.77(m, 1H), 4.19 (d, J = 5.6 Hz, 2H),4.07 (s, 3H), 3.38 (d, J = 6.4Hz, 2H),2.93-2.81(m, 2H), 2.25-2.12 (m, 1H),1.77-1.69 (m, 1H), 1.24 (s, 3H) ppm
261 (S)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-(2-((4-(1-甲基-1H-吲唑-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 476.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.62 -12.12 (m, 1H), 8.83 - 8.80 (m, 1H),8.11 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.81 - 7.77(m, 1H), 7.75 - 7.69 (m, 4H), 7.29 -7.27 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.78 - 4.76(m, 1H), 4.19 - 4.18 (d, J = 5.6 Hz,2H), 4.07 (s, 3H), 3.38 - 3.37 (d, J =4.8 Hz, 2H), 2.94 - 2.81 (m, 2H), 2.21- 2.15(m, 1H), 1.81 - 1.65 (m, 1H), 1.24(s, 3H) ppm
180 (R)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-(2-((4-(1-甲基-2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 505.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.84-8.81(m, 1H), 7.76 -7.65 (m, 3H), 7.62 -7.53(m, 2H), 7.29-7.27(m, 2H),4.79 (s, 1H),4.19-4.17(m, 2H), 4.13 -4.05 (m, 1H),3.38 (s, 1H), 3.17 (s, 3H), 2.91-2.87(m,4H),2.59-2.57(m, 2H), 2.26 -2.11 (m,1H), 1.75-1.71(m, 1H), 1.24 (s, 3H) ppm
260 (S)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-(2-((4-(1-甲基-2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 505.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.69 -11.99 (m, 1H), 8.81-8.80 (m, 1H), 7.75- 7.65 (m, 3H), 7.61 - 7.53 (m, 2H),7.28-7.27 (m, 2H), 4.78-4.77 (m, 1H),4.18 -4.17(m, 2H), 4.14 - 4.05 (m, 1H),3.38-3.37 (m, 3H), 3.18-3.17 (m, 1H),2.89-2.88 (m, 4H), 2.57-2.56 (m, 2H),2.26 - 2.13 (m, 1H), 1.73-1.72 (m, 1H),1.24 (s, 3H) ppm
实施例106. (S)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(羟甲基)-3-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-甲酰胺 (化合物 133)和(R)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(羟甲基)-3-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-甲酰胺 (化合物 132)的制备
Figure 379313DEST_PATH_IMAGE571
向2-氨基-N-[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]乙酰胺盐酸盐 (200 mg, 520.98 umol)、3-(羟甲基)-3-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-甲酸(162.71 mg, 781.46 umol)和HATU (297.14 mg, 781.46 umol)在DCM (3 mL)中的溶液添加DIEA (336.66 mg, 2.60 mmol, 453.72 uL)。在30℃下搅拌该混合物2小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。用MeOH (3.0 mL)和MTBE (3.0 mL)研磨该残余物，通过过滤收集固体并在减压下浓缩以提供灰白色固体。通过SFC分离粗产物 (柱: DAICELCHIRALCEL OD(250mm*30mm,10um)；流动相: [0.1%NH3H2O IPA]；B%: 40%- 40%,3.55min；150min) 以提供峰1和峰2。在减压下浓缩峰1并冻干以提供作为灰白色固体的化合物 133(27.53 mg, 9.7%收率)。在减压下浓缩峰2并冻干以提供作为白色固体的化合物 132(39.55 mg, 14%收率)。
化合物 133:
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 538.2。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ= 12.35 (s, 1H), 8.72 - 8.69 (m, 1H), 7.76- 7.72 (m, 3H), 7.71 - 7.60 (m, 1H), 7.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.83 - 6.78(m, 2H), 5.07 - 5.04 (m, 1H), 4.57 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.26 - 4.14 (m, 5H),3.65 - 3.61 (m, 2H), 3.60 - 3.42 (m, 2H), 2.44 - 2.38 (m, 2H), 1.31 (s, 3H),1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm。
手性SFC: OD-3-IPA (DEA)-40-3ML-35T.lcm；Rt= 1.614 min
化合物 132:
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 538.2。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ= 12.35 (s, 1H), 8.72 - 8.69 (m, 1H), 7.76- 7.73 (m, 3H), 7.62 - 7.60 (m, 1H), 7.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.83 - 6.78(m, 2H), 5.07 - 5.04 (m, 1H), 4.57 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.26 - 4.14 (m, 5H),3.65 - 3.61 (m, 2H), 3.60 - 3.42 (m, 2H), 2.44 - 2.38 (m, 2H), 1.30 (s, 3H),1.18 (d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm。
手性SFC: OD-3-IPA (DEA)-40-3ML-35T.lcm；Rt= 2.052 min。
实施例107. 发明化合物的制备
类似于用于制备化合物 133和化合物 132的那些使用标准的化学操作和程序制备表7中的以下化合物。
表7.
# 名称 LC-MS(m/z) 1H NMR
134 N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-[(3S)-3-羟基四氢呋喃-3-基]苯甲酰胺 538.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.55 -12.25 (m, 1H), 8.95 - 8.93 (m, 1H),8.03 (s, 1H), 7.79 - 7.76 (m, 2H), 7.69(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.64 - 7.60 (m,1H), 7.48 - 7.44 (m, 1H), 7.25 (d, J =7.2 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H),5.52 (s, 1H), 4.25 (br d, J = 11.6 Hz,2H), 4.19 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.04 -4.01 (m, 2H), 3.84 - 3.77 (m, 2H), 3.66 -3.59 (m, 2H), 2.44 - 2.38 (m, 2H), 2.31- 2.27 (m, 1H), 2.18 - 2.12 (m, 1H), 1.18(d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
140 (3S)-N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-[(1S)-1-羟乙基]茚满-5-甲酰胺 536.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 -12.36 (m, 1H), 8.79 - 8.74 (m, 1H),8.47 - 8.46 (m, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.76(s, 1H), 7.71 - 7.60 (m, 2H), 7.29 -7.24 (m, 2H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H),4.73 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 4.25 (br d, J= 13.2 Hz, 2H), 4.16 (br d, J = 6.0 Hz,2H), 3.85 - 3.81 (m, 1H), 3.66 - 3.59(m, 2H), 3.20 - 3.14 (m, 1H), 2.94 - 2.79(m, 2H), 2.44 - 2.38 (m, 2H), 2.12 -2.06 (m, 1H), 1.88 - 1.83 (m, 1H), 1.18(d, J = 6.0 Hz, 6H), 1.02 (d, J = 6.4Hz, 3H) ppm
141 (3R)-N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-[(1S)-1-羟乙基]茚满-5-甲酰胺 536.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.38 (brs, 1H), 8.80 - 8.77 (m, 1H), 7.83 (s,1H), 7.77 (s, 1H), 7.69 (d, J = 8.0 Hz,1H), 7.65 - 7.61 (m, 1H), 7.29 - 7.25(m, 2H), 6.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.52(d, J = 4.8 Hz, 1H), 4.26 (br d, J =11.6 Hz, 2H), 4.18 (d, J = 5.6 Hz, 2H),4.01 - 3.97 (m, 1H), 3.67 - 3.59 (m,2H), 3.17 - 3.13 (m, 1H), 2.96 - 2.88 (m,1H), 2.84 - 2.77 (m, 1H), 2.45 - 2.39(m, 2H), 2.09 - 2.04 (m, 2H), 1.19 (d, J= 6.0 Hz, 6H), 1.10 (d, J = 6.0 Hz, 3H)ppm
142 (3S)-N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-[(1R)-1-羟乙基]茚满-5-甲酰胺 536.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.45 -12.24 (m, 1H), 8.79 - 8.76 (m, 1H),7.81 - 7.76 (m, 2H), 7.68 - 7.59 (m, 2H),7.28 -7.24 (m, 2H), 6.79 (d, J = 8.8Hz, 1H), 4.52 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 4.25(br d, J = 11.6 Hz, 2H), 4.16 (d, J =6.0 Hz, 2H), 4.01 -3.95 (m, 1H), 3.64 -3.60 (m, 2H), 3.16 - 3.13 (m, 1H), 2.95- 2.87 (m, 1H), 2.83 - 2.75 (m, 1H), 2.43- 2.37 (m, 2H), 2.08 - 2.02(m, 2H),1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 1.09 (d, J =6.0 Hz, 3H) ppm
145 N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-2-氟-5-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)苯甲酰胺 542.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (s,1H), 8.60 - 8.51 (m, 1H), 7.80 - 7.77(m, 1H), 7.71 (dd, J = 2.5, 7.2 Hz, 1H),7.66 - 7.60 (m, 1H), 7.59 - 7.54 (m,1H), 7.28 - 7.21 (m, 2H), 6.81 (d, J =8.4 Hz, 1H), 4.26 (br d, J = 11.7 Hz,2H), 4.22 (br d, J = 5.9 Hz, 2H), 3.68 -3.59 (m, 2H), 3.43 (s, 2H), 2.42 (br s,2H), 1.24 (s, 6H), 1.19 (d, J = 6.1 Hz,6H) ppm
152 (R)-3-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 531.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.58 -12.21 (m, 1H), 8.99 (t, J = 5.8 Hz,1H), 8.00 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.87 (dd,J = 1.6, 7.9 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H),7.62 (dd, J = 7.5, 8.4 Hz, 1H), 7.45 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 7.2 Hz,1H), 6.80 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.25 (brd, J = 11.2 Hz, 2H), 4.20 (dd, J = 1.9,5.7 Hz, 2H), 3.68 - 3.57 (m, 2H), 3.13 -2.97 (m, 2H), 2.65 - 2.57 (m, 1H), 2.41(dd, J = 10.6, 12.7 Hz, 2H), 2.24 (td, J= 7.2, 13.1 Hz, 1H), 1.66 (s, 3H), 1.18(d, J = 6.2 Hz, 6H) ppm
262 (S)-3-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 531.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.41 (s,1H), 8.99 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 7.99 (d,J = 1.1 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 1.5, 7.9Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.61 (dd, J =7.5, 8.4 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 7.8 Hz,1H), 7.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.79 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 4.30 - 4.16 (m, 4H),3.69 - 3.56 (m, 2H), 3.05 (br t, J =7.0 Hz, 2H), 2.63 - 2.60 (m, 1H), 2.41(dd, J = 10.8, 12.7 Hz, 2H), 2.24 (td,J = 7.2, 13.1 Hz, 1H), 1.65 (s, 3H), 1.17(d, J = 6.2 Hz, 6H), 1.03 (d, J = 6.1Hz, 1H) ppm
153 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基色满-6-甲酰胺 547.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.41 (s,1H), 8.94 - 8.92 (m, 1H), 8.09 (d, J =2.0 Hz, 1H), 7.82 - 7.77 (m, 2H), 7.64 -7.62 (m, 1H), 7.26 (d, J = 7.2 Hz, 1H),6.96 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.80 (d, J =8.4 Hz, 1H), 4.39 - 4.33 (m, 1H), 4.31- 4.22 (m, 3H), 4.21 - 4.16 (m, 2H), 3.68- 3.58 (m, 2H), 2.45 - 2.38 (m, 3H),2.24 - 2.17 (m, 1H), 1.80 (s, 3H), 1.19(s, 3H), 1.17 (s, 3H) ppm
159 (R)-3-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(羟甲基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 547.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.91 -11.88 (m, 1H), 8.99 - 8.96 (m, 1H),7.98 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.88 - 7.86 (m,1H), 7.77 (s, 1H), 7.64 - 7.60 (m, 1H),7.43 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.26 (d, J =7.2 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H),5.80 - 5.72 (m, 1H), 4.29 - 4.17 (m, 4H),3.73 - 3.57 (m, 4H), 3.05 - 3.01 (m,2H), 2.48 - 2.38 (m, 4H), 1.19 (s, 3H),1.17 (s, 3H) ppm
160 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-((3R,4S)-4-羟基四氢呋喃-3-基)苯甲酰胺 538.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (brd, J = 1.6 Hz, 1H), 8.94 - 8.91 (m,1H), 7.80 - 7.75 (m, 3H), 7.64 - 7.60 (m,1H), 7.46 - 7.42 (m, 2H), 7.25 (d, J =7.2 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H),5.32 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 4.29 - 4.23(m, 3H), 4.20 - 4.16 (m, 3H), 4.00 - 3.96(m, 1H), 3.78 - 3.63 (m, 1H), 3.62 -3.56 (m, 3H), 3.28 - 3.23 (m, 1H), 2.44 -2.38 (m, 2H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H)ppm
161 (3S)-N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-(羟甲基)茚满-5-甲酰胺 522.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.41 -12.32 (m, 1H), 8.79 - 8.77 (m, 1H),8.48 - 8.44 (m, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.76(s, 1H), 7.70 - 7.68 (m, 1H), 7.64 -7.60 (m, 1H), 7.30 (d, J = 8.0 Hz, 1H),7.25 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.80 (d, J =8.8 Hz, 1H), 4.78 - 4.75 (m, 1H), 4.25(br d, J = 11.6 Hz, 2H), 4.16 (br d, J= 6.0 Hz, 2H), 3.67 - 3.61 (m, 3H), 3.52- 3.49 (m, 1H), 3.25 - 3.22 (m, 1H),2.91 - 2.86 (m, 2H), 2.44 - 2.41 (m, 2H),2.20 - 2.16 (m, 1H), 1.90 - 1.85 (m,1H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
162 (3R)-N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-(羟甲基)茚满-5-甲酰胺 522.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.35 -12.12 (m, 1H), 8.80 - 8.77 (m, 1H),8.43 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.76 (s, 1H),7.70 - 7.68 (m, 1H), 7.64 - 7.60 (m,1H), 7.30 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.25 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.8 Hz,1H), 4.78 - 4.75 (m, 1H), 4.25 (br d, J =11.6 Hz, 2H), 4.16 (d, J = 5.6 Hz, 2H),3.66 - 3.60 (m, 3H), 3.51 - 3.49 (m, 1H),3.25 - 3.22 (m, 1H), 2.92 - 2.84 (m,2H), 2.44 - 2.38 (m, 2H), 2.22 - 2.13 (m,1H), 1.92 - 1.83 (m, 1H), 1.18 (d, J =6.4 Hz, 6H) ppm
182 N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-[1-(羟甲基)环丙基]苯甲酰胺 522.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (brd, J = 3.7 Hz, 1H), 8.97 - 8.82 (m,1H), 7.81 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.70 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 7.65 - 7.59 (m, 1H),7.50 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.43 - 7.36 (m,1H), 7.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.80 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 4.70 (t, J = 5.7 Hz,1H), 4.29 - 4.22 (m, 2H), 4.18 (br d, J= 5.6 Hz, 2H), 3.68 - 3.60 (m, 2H), 3.57(d, J = 5.6 Hz, 2H), 2.44 - 2.38 (m,2H), 1.18 (d, J = 6.2 Hz, 6H), 0.90 -0.85 (m, 2H), 0.81 - 0.76 (m, 2H) ppm
187 N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)苯甲酰胺 522.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (s,1H), 8.98 - 8.95 (m, 1H), 7.78 - 7.77(m, 3H), 7.64 - 7.60 (m, 1H), 7.50 - 7.42(m, 2H), 7.26 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.80(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.86 (d, J = 5.6 Hz,2H), 4.58 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.25 (brd, J = 12.0 Hz, 2H), 4.20 (br d, J = 5.6Hz, 2H), 3.64 - 3.61 (m, 2H), 2.44 -2.38 (m, 2H), 1.66 (s, 3H), 1.18 (br d, J= 6.0 Hz, 6H) ppm
223 (R)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(羟甲基)-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 536.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.36 (brs, 1H), 8.88 - 8.68 (m, 1H), 7.76 (s,1H), 7.72 - 7.67 (m, 2H), 7.64 - 7.59 (m,1H), 7.30 - 7.22 (m, 2H), 6.79 (d, J =8.4 Hz, 1H), 4.79 - 4.73 (m, 1H), 4.25(br d, J = 11.6 Hz, 2H), 4.16 (d, J =5.6 Hz, 2H), 3.68 - 3.59 (m, 2H), 3.37(br d, J = 5.6 Hz, 2H), 2.91 - 2.84 (m,2H), 2.45 - 2.38 (m, 2H), 2.22 - 2.14 (m,1H), 1.77 - 1.68 (m, 1H), 1.23 (s, 3H),1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
224 (3S)-N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-(羟甲基)-3-甲基-茚满-5-甲酰胺 536.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.54 -12.26 (m, 1H), 8.92 - 8.66 (m, 1H),7.76 (s, 1H), 7.73 - 7.68 (m, 2H), 7.65 -7.59 (m, 1H), 7.31 - 7.23 (m, 2H),6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.79 - 4.73 (m,1H), 4.25 (br d, J = 11.6 Hz, 2H), 4.17(d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.68 - 3.58 (m, 2H),3.38 (br d, J = 5.6 Hz, 2H), 2.92 -2.84 (m, 2H), 2.45 - 2.38 (m, 2H), 2.23 -2.14 (m, 1H), 1.78 - 1.68 (m, 1H), 1.23(s, 3H), 1.18 (d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm
237 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-4-甲基苯甲酰胺 538.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.59 -12.19 (m, 1H), 8.82 (t, J = 5.7 Hz,1H), 7.85 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.78 (s,1H), 7.67 - 7.59 (m, 2H), 7.26 (d, J =7.2 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 8.1 Hz, 1H),6.81 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.83 - 6.78(m, 1H), 4.71 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.26(br d, J = 12.2 Hz, 2H), 4.17 (br d, J= 5.7 Hz, 2H), 4.20 - 4.14 (m, 1H), 3.63(br d, J = 5.5 Hz, 4H), 2.54 - 2.53 (m,3H), 2.43 - 2.39 (m, 2H), 1.35 (s, 5H),1.36 (br s, 1H), 1.19 (d, J = 6.2 Hz,6H) ppm
241 4-氯-N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)苯甲酰胺 558.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 (brs, 1H), 9.03 (t,J=5.9 Hz, 1H), 7.96 (d,J=2.0 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.74 (dd,J=2.0, 8.3 Hz, 1H), 7.62 (dd,J=7.4, 8.4Hz, 1H), 7.51 (d,J=8.3 Hz, 1H), 7.25 (d,J=7.4 Hz, 1H), 6.80 (d,J=8.6 Hz, 1H),4.78 (t,J=5.3 Hz, 1H), 4.26 (br d,J=11.5Hz, 2H), 4.18 (d,J=5.8 Hz, 2H), 3.77(d,J=5.4 Hz, 2H), 3.63 (ddd,J=2.5, 6.3,10.2 Hz, 2H),2.44 - 2.38 (m, 2H), 1.41(s, 6H), 1.18 (d,J=6.1 Hz, 6H) ppm
271 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-甲基异色满-6-甲酰胺 522.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.32 (s,1H), 8.88 - 8.85 (m, 1H), 7.77 (s, 1H),7.73 - 7.66 (m, 2H), 7.69 - 7.60(m, 1H),7.29 - 7.25 (m, 2H), 6.80 (d, J = 8.4Hz, 1H), 4.83 - 4.80 (m, 1H), 4.26 (d, J= 11.2 Hz, 2H), 4.18 (d, J = 6.0 Hz,2H), 4.09 - 4.04 (m, 1H), 3.75 - 3.71 (m,1H), 3.66 - 3.61 (m, 2H), 3.03 - 2.88(m, 1H), 2.76 - 2.71 (m, 1H), 2.45 - 2.39(m, 2H), 1.47 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.19(d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm
272 (R)-4-(二氟甲基)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟色满-6-甲酰胺 576.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (s,1H), 8.89 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.94(d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.62 -7.60 (m, 1H), 7.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H),7.07 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.98 - 6.64 (m,2H), 4.50 - 4.35 (m, 1H), 4.32 - 4.08(m, 5H), 3.64 - 3.61 (m, 2H), 2.44 - 2.38(m, 4H), 1.19 (s, 3H), 1.17 (s, 3H) ppm
273 (S)-4-(二氟甲基)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟色满-6-甲酰胺 576.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.91 - 8.88(m, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.94 (d, J = 8.8Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.64 - 7.60 (m,1H), 7.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.06 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 6.97 - 6.61 (m, 2H),4.52 - 4.38 (m, 1H), 4.29 - 4.16 (m,5H), 3.68 - 3.56 (m, 2H), 2.46 - 2.35 (m,4H), 1.19 (s, 3H), 1.17 (s, 3H) ppm
282 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4,4-二甲基异色满-6-甲酰胺 536.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.48 -12.34 (m, 1H), 8.94 - 8.91 (m, 1H),7.95 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H),7.73 - 7.57 (m, 2H), 7.26 (d, J = 7.2Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.81(d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.31- 4.16 (m, 4H), 3.69 - 3.56 (m, 4H), 2.43- 2.38 (m, 2H), 1.34 - 1.23 (m, 6H),1.19 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
296 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1,3,4,5-四氢苯并[c]氧杂䓬-7-甲酰胺 522.4 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.38 (s, 1H),8.87 - 8.85 (t, J=5.7 Hz, 1H), 7.77 -7.73 (m, 2H), 7.67 - 7.60 (m, 2H), 7.31(d, J=8.0 Hz, 1H), 7.25 (d, J=7.2 Hz,1H), 6.80 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.65 (s,2H), 4.25 (d, J=11.2 Hz, 2H), 4.17 (d,J=6.0 Hz, 2H), 3.97 - 3.94 (m, 2H), 3.63- 3.61 (m, 2H), 3.04 - 3.01 (m, 2H),2.41 (br d, J=2.0 Hz, 2H), 1.75 - 1.73(m, 2H), 1.18 (d, J=6.0 Hz, 6H) ppm
300 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)螺[异色满-4,3'-氧杂环丁烷]-6-甲酰胺 550.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.45 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 9.10 (m, 1H), 8.47 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.84 - 7.74 (m, 2H), 7.65-7.63 (m, 1H), 7.27 (d, J = 7.2 Hz, 1H),7.19 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.81 (d, J =8.4 Hz, 1H), 4.80 (d, J = 6.4 Hz, 2H),4.75 (s, 2H), 4.59 (d, J = 6.4 Hz, 2H),4.30 - 4.20 (m, 4H), 4.16 (s, 2H), 3.73- 3.57 (m, 2H), 2.45-2.39 (m, 2H), 1.19(d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm
304 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(3-氟-4-羟基四氢呋喃-3-基)苯甲酰胺 556.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.41 (s,1H), 9.03 - 9.00 (m, 1H), 8.01 (s, 1H),7.92 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H),7.66 - 7.60 (m, 2H), 7.56 - 7.52 (m,1H), 7.26 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.80 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 5.58 (d, J = 5.2 Hz,1H), 4.37 - 4.11 (m, 8H), 3.82 (d, J =9.2 Hz, 1H), 3.65 - 3.60 (m, 2H), 2.44- 2.38 (m, 2H), 1.21 - 1.14 (m, 6H) ppm
318 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(6-氟-2-氧杂螺[3.3]庚烷-6-基)苯甲酰胺 566.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.42 (s,1H), 9.07 - 9.01 (m, 1H), 7.95 (s, 1H),7.90 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H),7.66 - 7.60 (m, 2H), 7.58 - 7.53 (m,1H), 7.26 (d, J=7.2 Hz, 1H), 6.81 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.73 (s, 2H), 4.57 (s,2H), 4.26 (d, J=11.6 Hz, 2H), 4.21 (d, J=5.6 Hz, 2H), 3.67 - 3.60 (m, 2H), 3.00- 2.91 (m, 2H), 2.87 - 2.78 (m, 2H), 2.42(d, J=2.0 Hz, 2H), 1.19 (d, J=6.0 Hz,6H) ppm
320 (R)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 522.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.92 - 8.85(m, 1H), 8.46 (s, 0.5H), 7.81 (s, 1H),7.75 (s, 1H), 7.71 - 7.66 (m, 1H), 7.65 -7.58 (m, 1H), 7.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H),7.14 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.79 (d, J =8.4 Hz, 1H), 4.81 - 4.65 (m, 2H), 4.25(d, J = 11.6 Hz, 2H), 4.17 (d, J = 5.6Hz, 2H), 3.93 - 3.86 (m, 1H), 3.64 -3.57 (m, 3H), 2.98 - 2.88 (m, 1H), 2.45 -2.36 (m, 2H), 1.26 (d, J = 7.2 Hz, 3H),1.18 (d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm
321 (S)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 522.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.94 - 8.87(m, 1H), 8.45 (s, 0.3H), 7.82 (s, 1H),7.77 (s, 1H), 7.73 - 7.59 (m, 2H), 7.26(d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 8.0Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.81 -4.68 (m, 2H), 4.26 (d, J = 11.6 Hz,2H), 4.18 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.95 -3.88 (m, 1H), 3.66 - 3.58 (m, 3H), 3.03- 2.87 (m, 1H), 2.46 - 2.38 (m, 2H), 1.27(d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.19 (d, J = 6.4Hz, 6H) ppm
338 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3,4,5-四氢苯并[b]氧杂䓬-7-甲酰胺 522.3 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.37 (s,1H), 8.79 - 8.76 (m, 1H), 7.76 - 7.74(m, 2H), 7.66 - 7.64 (m, 1H), 7.64 - 7.62(m, 1H), 7.26 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.01(d, J = 8.4Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz,1H), 4.26 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 4.16(d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.00 - 3.97 (m, 2H),3.63 - 3.62 (m, 2H), 2.82 - 2.79 (m,2H), 2.44 - 2.38 (m, 2H), 1.91 - 1.89 (m,2H), 1.69 - 1.62 (m, 2H), 1.18 (d, J =6.4 Hz, 6H) ppm
346 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 522 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (brs, 1H), 9.00 - 8.82 (m, 1H), 7.79 (d, J= 17.2 Hz, 2H), 7.73 - 7.57 (m, 2H), 7.25(d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 8.0Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.74(d, J = 7.6 Hz, 2H), 4.32 - 4.15 (m,4H), 3.95 - 3.85 (m, 1H), 3.70 - 3.55 (m,3H), 2.94 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 2.45 -2.38 (m, 2H), 1.26 (d, J = 6.8 Hz, 3H),1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
349 (R)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)螺[异色满-4,2'-氧杂环丁烷]-6-甲酰胺 550.5 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.41 (brs, 1H), 9.15 - 9.06 (m, 1H), 8.47 (s,1H), 7.83 - 7.81 (m, 1H), 7.77 (s, 1H),7.63 - 7.61 (m, 1H), 7.26 (d, J = 7.2Hz, 1H), 7.18 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.80(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.78 - 4.56 (m,4H), 4.30 - 4.18 (m, 4H), 4.14 - 4.07 (m,1H), 3.98 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.63 -3.62 (m, 2H), 2.96 - 2.85 (m, 1H), 2.75 -2.63 (m, 1H), 2.44 - 2.38 (m, 2H), 1.18(d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
350 (S)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)螺[异色满-4,2'-氧杂环丁烷]-6-甲酰胺 550.5 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.44 (brs, 1H), 9.11 - 9.08 (m, 1H), 8.47 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.83 - 7.81 (m, 1H), 7.78(s, 1H), 7.63 - 7.61 (m, 1H), 7.27 -7.25 (m, 1H), 7.18 (d, J = 8.0 Hz, 1H),6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.75 - 4.58(m, 4H), 4.29 - 4.21 (m, 4H), 4.10 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 3.98 (d, J = 11.6 Hz,1H), 3.67 - 3.59 (m, 2H), 2.95 - 2.86 (m,1H), 2.72 - 2.64 (m, 1H), 2.44 - 2.38(m, 2H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
357 3-((1S,3S)-1,3-二氟环丁基)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 542.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.42 (s,1H), 9.07 (m, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.92(d, J = 8.0Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.70 -7.48 (m, 3H), 7.26 (d, J = 7.2 Hz, 1H),6.81 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.27 - 5.00 (m,1H), 4.26 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 4.22(d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.64-3.62 (m, 2H),3.26 - 3.11 (m, 2H), 3.01 - 2.79 (m,2H), 2.45-2.39 (m, 2H), 1.19 (d, J = 6.0Hz, 6H) ppm
358 3-((1R,3R)-1,3-二氟环丁基)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 542.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.55 -12.26 (m, 1H), 9.08 (m, 1H), 8.00 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 7.6 Hz, 1H),7.77 (s, 1H), 7.70 - 7.54 (m, 3H), 7.26(d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.8 Hz,1H), 5.67 - 5.36 (m, 1H), 4.25 (d, J =11.6 Hz, 2H), 4.21 (d, J = 5.6 Hz, 2H),3.67 - 3.59 (m, 2H), 3.18 - 2.99 (m,2H), 2.97 - 2.77 (m, 2H), 2.44-2.38 (m,2H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
360 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)螺[色满-4,2'-氧杂环丁烷]-6-甲酰胺 550.5 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (s,1H), 8.93 (m, 1H), 8.39 (d, J=2.0 Hz,1H), 7.83 - 7.73 (m, 2H), 7.63 (m, 1H),7.27 (d, J=7.2 Hz, 1H), 6.83 (m, 2H),4.68 - 4.56 (m, 2H), 4.32 - 4.16 (m, 6H),3.68 - 3.60 (m, 2H), 3.06 - 2.95 (m,1H), 2.72 - 2.63 (m, 1H), 2.43 - 2.23 (m,4H), 1.19 (d, J=6.0 Hz, 6H) ppm
366 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)异色满-6-甲酰胺 508.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.41 (br s,1H), 8.89 - 8.86 (m, 1H), 7.77 (s, 1H),7.72 - 7.66 (m, 2H), 7.62 - 7.60 (m, 1H),7.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.15 (d, J =7.6 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.8 Hz, 1H),4.73 (s, 2H), 4.26 - 4.23 (m, 2H), 4.17- 4.16 (m, 2H), 3.91 - 3.90 (m, 2H), 3.69- 3.56 (m, 2H), 2.85 - 2.83 (m, 2H),2.43 - 2.38 (m, 2H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz,6H) ppm
370 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)色满-6-甲酰胺 508.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.26 (brs, 1H), 8.77 - 8.66 (m, 1H), 7.79 -7.74 (m, 1H), 7.70 - 7.59 (m, 3H), 7.30 -7.20 (m, 1H), 6.82 - 6.79 (m, 2H), 4.30- 4.23 (m, 2H), 4.22 - 4.17 (m, 2H), 4.17- 4.11 (m, 2H), 3.69 - 3.58 (m, 2H),2.83 - 2.75 (m, 2H), 2.42 - 2.33 (m, 2H),1.92 - 1.90 (m, 2H), 1.23 - 1.18 (m,6H) ppm
376 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)螺[异色满-4,2'-氧杂环丁烷]-6-甲酰胺 550.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 (s,1H), 9.08 - 9.05 (m, 1H), 8.46 (d, J =1.6 Hz, 1H), 7.83 - 7.81 (m, 1H), 7.76(s, 1H), 7.64 - 7.60 (m, 1H), 7.26 (d,J = 7.2 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 8.0 Hz,1H), 6.80 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.77 -4.59 (m, 4H), 4.29 - 4.19 (m, 4H), 4.10(d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.98 (d, J = 11.6Hz, 1H), 3.70 - 3.56 (m, 2H), 2.95 - 2.85(m, 1H), 2.72 - 2.65 (m, 1H), 2.44 -2.38 (m, 2H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H)ppm
381 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)螺[色满-4,3'-氧杂环丁烷]-6-甲酰胺 550.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (s,1H), 8.95 - 8.92 (m, 1H), 8.40 (d, J =2.0 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.73 - 7.71(m, 1H), 7.64 - 7.60 (m, 1H), 7.26 (d,J = 7.2 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 8.4 Hz,1H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.83 (d,J = 6.0 Hz, 2H), 4.56 (d, J = 6.0 Hz,2H), 4.26 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 4.19(d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.17 - 4.12 (m, 2H),3.68 - 3.58 (m, 2H), 2.44 - 2.38 (m,2H), 2.35 - 2.30 (m, 2H), 1.19 (s, 3H),1.17 (s, 3H) ppm
384 1-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-甲基异色满-7-甲酰胺 547.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 (s,1H), 9.08 - 9.04 (m, 1H), 8.03 (d, J =1.2 Hz, 1H), 7.88 - 7.86 (m, 1H), 7.77(s, 1H), 7.64 - 7.60 (m, 1H), 7.39 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 7.2 Hz,1H), 6.80 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.27 -4.20 (m, 5H), 3.94 - 3.88 (m, 1H), 3.65 -3.62 (m, 2H), 3.11 -3.10 (m, 1H), 2.85- 2.81 (m, 1H), 2.41 - 2.38 (m, 2H), 1.94(s, 3H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
385 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4,4-二氟异色满-6-甲酰胺 544.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.42 (brs, 1H), 9.21 - 9.05 (m, 1H), 8.25 (s,1H), 8.03 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.77 (s,1H), 7.68 - 7.54 (m, 1H), 7.41 (d, J =8.4 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H),6.79 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.89 (s, 2H),4.29 - 4.15 (m, 6H), 3.66 - 3.59 (m, 2H),2.43 - 2.38 (m, 2H), 1.17 (d, J = 6.0Hz, 6H) ppm
395 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-异丙基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-6-甲酰胺 551.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, MeOD) δ = 7.68 (s, 1H),7.63 - 7.55 (m, 1H), 7.42 - 7.32 (m,2H), 7.16 - 7.15 (m, 1H), 6.80 - 6.70 (m,2H), 5.17 (s, 2H), 4.31 - 4.20 (m, 7H),3.80 - 3.68 (m, 2H), 2.51 - 2.45 (m, 2H),1.26 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 1.22 (d, J =6.4 Hz, 6H)) ppm
405 rac-4-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)色满-6-甲酰胺 533.1 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, MeOD) δ = 7.94 (d, J =1.2 Hz, 1H), 7.84 - 7.78 (m, , 1H),7.68 (s, 1H), 7.62 - 7.55 (m, 1H), 7.35(d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 8.8Hz, 1H), 6.73 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.39 -4.32 (m, 3H), 4.30 - 4.21 (m, 4H), 3.79- 3.68 (m, 2H), 2.53 - 2.44 (m, , 2H),2.43 - 2.28 (m, 2H), 1.26 (d, J = 6.4Hz, 6H) ppm
409 (S)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺 540.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.42 (s,1H), 9.06 (m, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.89(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.62(m, 1H), 7.32 - 7.22 (m, 2H), 6.80 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 4.90 - 4.81 (m, 1H),4.77 - 4.68 (m, 1H), 4.32 - 4.17 (m,4H), 4.13 - 4.01 (m, 1H), 3.90 - 3.77 (m,1H), 3.69 - 3.56 (m, 2H), 2.41 (m, 2H),1.75 - 1.63 (m, 3H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz,6H) ppm
410 (R)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,2-二氟螺[环丙烷-1,4'-异色满]-6'-甲酰胺 570.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 (s,1H), 8.97-8.95 (m, 1H), 7.86 - 7.74 (m,2H), 7.67 - 7.59 (m, 2H), 7.28-7.26 (8,2H), 6.81 (d, J=8.8 Hz, 1H), 5.00 -4.85 (m, 2H), 4.28 - 4.25 (m, 2H), 4.22 -4.20 (m, 2H), 3.98 - 3.92 (m, 1H), 3.89- 3.83 (m, 1H), 3.68 - 3.59 (m, 2H), 2.42(br s, 3H), 1.95 - 1.87 (m, 1H), 1.19 -1.17 (m, 6H) ppm
411 (S)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,2-二氟螺[环丙烷-1,4'-异色满]-6'-甲酰胺 570.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 (s,1H), 8.97 - 8.95 (m, 1H), 7.86 - 7.74(m, 2H), 7.67 - 7.59 (m, 2H), 7.28 - 7.26(8, 2H), 6.81 (d, J=8.8 Hz, 1H), 5.00 -4.85 (m, 2H), 4.28-4.25 (m, 2H), 4.22 -4.20 (m, 2H), 3.98 - 3.92 (m, 1H), 3.89- 3.83 (m, 1H), 3.68 - 3.59 (m, 2H), 2.42(s, 3H), 1.95 - 1.87 (m, 1H), 1.19 -1.17 (m, 6H) ppm
412 (R)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺 540.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.45 (br s,1H), 9.09 - 9.06 (m, 1H), 8.20 (s, 1H),7.89 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H),7.63 - 7.61 (m, 1H), 7.28 - 7.25 (m,2H), 6.81 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.91 -4.69 (m, 2H), 4.31 - 4.18 (m, 4H), 4.08- 4.06 (m, 1H), 3.93 - 3.77 (m, 1H), 3.64- 3.60 (m, 2H), 2.44 - 2.39 (m, 2H),1.75 - 1.62 (m, 3H), 1.19 (d, J = 6.0 Hz,6H) ppm
413 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-((顺)-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-3-基)苯甲酰胺 552.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 -12.36 (m, 1H), 8.95 - 8.92 (m, 1H),7.89 (s, 1H), 7.77 - 7.74 (m, 2H), 7.64 -7.57 (m, 2H), 7.46 - 7.42 (m, 1H), 7.25(d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz,1H), 5.33 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 4.33 -4.18 (m, 5H), 4.05 (d, J = 8.4 Hz, 1H),3.87 - 3.81 (m, 2H), 3.64 - 3.61 (m,2H), 3.55 - 3.52 (m, 1H), 2.44 - 2.38 (m,2H), 1.32 - 1.31 (s, 3H), 1.18 (d, J =6.4 Hz, 6H) ppm
420 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 547 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.45 (d, J=6.0 Hz, 1H), 9.09 (d, J=6.8 Hz, 1H),8.13 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.92 - 7.87 (m,1H), 7.78 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.63 -7.62 (m, 1H), 7.31 - 7.26 (m, 2H), 6.82(d, J=8.0 Hz, 1H), 4.92 - 4.85 (m, 2H),4.27 - 4.22 (m, 5H), 3.89 - 3.84 (m, 1H),3.63 (s, 2H), 2.44 (d, J=12.4 Hz, 2H),1.70 (d, J=6.8 Hz, 3H), 1.18 -1.17 (m,6H) ppm
421 (S)-4-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 547 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.44 (s,1H), 9.09 - 9.06 (m, 1H), 8.12 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.88 - 7.86 (m, 1H), 7.77(s, 1H), 7.62 - 7.60 (m, 1H), 7.30 -7.24 (m, 2H), 6.80 (d, J=8.8 Hz, 1H),4.92 - 4.85 (m, 2H), 4.27 - 4.20 (m,5H), 3.86 (d, J=11.6 Hz, 1H), 3.63 - 3.61(m, 2H), 2.41 - 2.38 (m, 2H), 1.69 (s,3H), 1.18 (d, J=6.0 Hz, 6H) ppm
425 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-((反)-4-羟基四氢呋喃-3-基)苯甲酰胺 538.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ= 12.53 -12.24 (m, 1H), 8.95 - 8.82 (m, 1H),7.82 (s, 1H), 7.76 - 7.74 (m, 2H), 7.64 -7.60 (m, 1H), 7.48 - 7.46 (m, 1H), 7.43- 7.39 (m, 1H), 7.25 (d, J = 7.6 Hz, 1H),6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.92 (d, J =4.8 Hz, 1H), 4.39 - 4.36 (m, 1H), 4.25(d, J = 12.8 Hz, 2H), 4.18 (d, J = 5.6Hz, 2H), 4.10 - 4.06 (m, 1H), 4.02 - 3.97(m, 2H), 3.74 - 3.71 (m, 1H), 3.66 -3.58 (m, 3H), 2.41 (s, 2H), 1.18 (d, J =6.0 Hz, 6H) ppm
426 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-((顺)-1-氟-3-甲氧基环丁基)苯甲酰胺 554.1 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.57 -12.29 (m, 1H), 9.22 - 8.97 (m, 1H),7.97 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.93 - 7.86 (m,1H), 7.79 (s, 1H), 7.67 - 7.60 (m, 2H),7.59 - 7.53 (m, 1H), 7.32 - 7.20 (m, 1H),6.85 - 6.76 (m, 1H), 4.37 - 4.15 (m,5H), 3.69 - 3.60 (m, 2H), 3.23 (s, 3H),2.98 - 2.81 (m, 2H), 2.47 - 2.37 (m,4H), 1.18 (s, 6H) ppm
441 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-((R)-3-氟四氢呋喃-3-基)苯甲酰胺 540.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ= 9.06 - 9.03(m, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.90 (d, J = 7.6Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.68 (d, J = 7.6Hz, 1H), 7.64 - 7.60 (m, 1H), 7.58 -7.54 (m, 1H), 7.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H),6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.29 - 4.04(m, 7H), 3.97 - 3.85 (m, 1H), 3.66 - 3.59(m, 2H), 2.62 - 2.59 (m, 2H), 2.44 -2.38 (m, 2H), 1.18 (d, J = 6.4 Hz, 6H)ppm
406 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)螺[环丙烷-1,4'-异色满]-6'-甲酰胺 534.4 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ= 12.40 (br s,1H), 8.90 - 8.87 (m, 1H), 7.77 (s, 1H),7.66 - 7.59 (m, 2H), 7.31 (d, J=1.2 Hz,1H), 7.25 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.14 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.80 (d, J=8.4 Hz, 1H),4.85 (s, 2H), 4.25 (br d, J=11.2 Hz,2H), 4.16 (d, J=6.0 Hz, 2H), 3.67 (s,2H), 3.67 - 3.62 (m, 2H), 2.44 - 2.39(m, 2H), 1.18 (d, J=6.0 Hz, 6H), 1.10 -1.04 (m, 2H), 0.99 - 0.91 (m, 2H) ppm
134 N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-[(3S)-3-羟基四氢呋喃-3-基]苯甲酰胺 538.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.55 -12.25 (m, 1H), 8.95 - 8.93 (m, 1H),8.03 (s, 1H), 7.79 - 7.76 (m, 2H), 7.69(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.64 - 7.60 (m,1H), 7.48 - 7.44 (m, 1H), 7.25 (d, J =7.2 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H),5.52 (s, 1H), 4.25 (br d, J = 11.6 Hz,2H), 4.19 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.04 -4.01 (m, 2H), 3.84 - 3.77 (m, 2H), 3.66 -3.59 (m, 2H), 2.44 - 2.38 (m, 2H), 2.31- 2.27 (m, 1H), 2.18 - 2.12 (m, 1H), 1.18(d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
140 (3S)-N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-[(1S)-1-羟乙基]茚满-5-甲酰胺 536.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 -12.36 (m, 1H), 8.79 - 8.74 (m, 1H),8.47 - 8.46 (m, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.76(s, 1H), 7.71 - 7.60 (m, 2H), 7.29 -7.24 (m, 2H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H),4.73 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 4.25 (br d, J= 13.2 Hz, 2H), 4.16 (br d, J = 6.0 Hz,2H), 3.85 - 3.81 (m, 1H), 3.66 - 3.59(m, 2H), 3.20 - 3.14 (m, 1H), 2.94 - 2.79(m, 2H), 2.44 - 2.38 (m, 2H), 2.12 -2.06 (m, 1H), 1.88 - 1.83 (m, 1H), 1.18(d, J = 6.0 Hz, 6H), 1.02 (d, J = 6.4Hz, 3H) ppm
141 (3R)-N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-[(1S)-1-羟乙基]茚满-5-甲酰胺 536.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.38 (brs, 1H), 8.80 - 8.77 (m, 1H), 7.83 (s,1H), 7.77 (s, 1H), 7.69 (d, J = 8.0 Hz,1H), 7.65 - 7.61 (m, 1H), 7.29 - 7.25(m, 2H), 6.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.52(d, J = 4.8 Hz, 1H), 4.26 (br d, J =11.6 Hz, 2H), 4.18 (d, J = 5.6 Hz, 2H),4.01 - 3.97 (m, 1H), 3.67 - 3.59 (m,2H), 3.17 - 3.13 (m, 1H), 2.96 - 2.88 (m,1H), 2.84 - 2.77 (m, 1H), 2.45 - 2.39(m, 2H), 2.09 - 2.04 (m, 2H), 1.19 (d, J= 6.0 Hz, 6H), 1.10 (d, J = 6.0 Hz, 3H)ppm
142 (3S)-N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-[(1R)-1-羟乙基]茚满-5-甲酰胺 536.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.45 -12.24 (m, 1H), 8.79 - 8.76 (m, 1H),7.81 - 7.76 (m, 2H), 7.68 - 7.59 (m, 2H),7.28 -7.24 (m, 2H), 6.79 (d, J = 8.8Hz, 1H), 4.52 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 4.25(br d, J = 11.6 Hz, 2H), 4.16 (d, J =6.0 Hz, 2H), 4.01 -3.95 (m, 1H), 3.64 -3.60 (m, 2H), 3.16 - 3.13 (m, 1H), 2.95- 2.87 (m, 1H), 2.83 - 2.75 (m, 1H), 2.43- 2.37 (m, 2H), 2.08 - 2.02(m, 2H),1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 1.09 (d, J =6.0 Hz, 3H) ppm
145 N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-2-氟-5-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)苯甲酰胺 542.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (s,1H), 8.60 - 8.51 (m, 1H), 7.80 - 7.77(m, 1H), 7.71 (dd, J = 2.5, 7.2 Hz, 1H),7.66 - 7.60 (m, 1H), 7.59 - 7.54 (m,1H), 7.28 - 7.21 (m, 2H), 6.81 (d, J =8.4 Hz, 1H), 4.26 (br d, J = 11.7 Hz,2H), 4.22 (br d, J = 5.9 Hz, 2H), 3.68 -3.59 (m, 2H), 3.43 (s, 2H), 2.42 (br s,2H), 1.24 (s, 6H), 1.19 (d, J = 6.1 Hz,6H) ppm
152 (R)-3-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 531.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.58 -12.21 (m, 1H), 8.99 (t, J = 5.8 Hz,1H), 8.00 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.87 (dd,J = 1.6, 7.9 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H),7.62 (dd, J = 7.5, 8.4 Hz, 1H), 7.45 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 7.2 Hz,1H), 6.80 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.25 (brd, J = 11.2 Hz, 2H), 4.20 (dd, J = 1.9,5.7 Hz, 2H), 3.68 - 3.57 (m, 2H), 3.13 -2.97 (m, 2H), 2.65 - 2.57 (m, 1H), 2.41(dd, J = 10.6, 12.7 Hz, 2H), 2.24 (td, J= 7.2, 13.1 Hz, 1H), 1.66 (s, 3H), 1.18(d, J = 6.2 Hz, 6H) ppm
262 (S)-3-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 531.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.41 (s,1H), 8.99 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 7.99 (d,J = 1.1 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 1.5, 7.9Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.61 (dd, J =7.5, 8.4 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 7.8 Hz,1H), 7.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.79 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 4.30 - 4.16 (m, 4H),3.69 - 3.56 (m, 2H), 3.05 (br t, J =7.0 Hz, 2H), 2.63 - 2.60 (m, 1H), 2.41(dd, J = 10.8, 12.7 Hz, 2H), 2.24 (td,J = 7.2, 13.1 Hz, 1H), 1.65 (s, 3H), 1.17(d, J = 6.2 Hz, 6H), 1.03 (d, J = 6.1Hz, 1H) ppm
153 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基色满-6-甲酰胺 547.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.41 (s,1H), 8.94 - 8.92 (m, 1H), 8.09 (d, J =2.0 Hz, 1H), 7.82 - 7.77 (m, 2H), 7.64 -7.62 (m, 1H), 7.26 (d, J = 7.2 Hz, 1H),6.96 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.80 (d, J =8.4 Hz, 1H), 4.39 - 4.33 (m, 1H), 4.31- 4.22 (m, 3H), 4.21 - 4.16 (m, 2H), 3.68- 3.58 (m, 2H), 2.45 - 2.38 (m, 3H),2.24 - 2.17 (m, 1H), 1.80 (s, 3H), 1.19(s, 3H), 1.17 (s, 3H) ppm
159 (R)-3-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(羟甲基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 547.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.91 -11.88 (m, 1H), 8.99 - 8.96 (m, 1H),7.98 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.88 - 7.86 (m,1H), 7.77 (s, 1H), 7.64 - 7.60 (m, 1H),7.43 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.26 (d, J =7.2 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H),5.80 - 5.72 (m, 1H), 4.29 - 4.17 (m, 4H),3.73 - 3.57 (m, 4H), 3.05 - 3.01 (m,2H), 2.48 - 2.38 (m, 4H), 1.19 (s, 3H),1.17 (s, 3H) ppm
160 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-((3R,4S)-4-羟基四氢呋喃-3-基)苯甲酰胺 538.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (brd, J = 1.6 Hz, 1H), 8.94 - 8.91 (m,1H), 7.80 - 7.75 (m, 3H), 7.64 - 7.60 (m,1H), 7.46 - 7.42 (m, 2H), 7.25 (d, J =7.2 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H),5.32 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 4.29 - 4.23(m, 3H), 4.20 - 4.16 (m, 3H), 4.00 - 3.96(m, 1H), 3.78 - 3.63 (m, 1H), 3.62 -3.56 (m, 3H), 3.28 - 3.23 (m, 1H), 2.44 -2.38 (m, 2H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H)ppm
161 (3S)-N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-(羟甲基)茚满-5-甲酰胺 522.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.41 -12.32 (m, 1H), 8.79 - 8.77 (m, 1H),8.48 - 8.44 (m, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.76(s, 1H), 7.70 - 7.68 (m, 1H), 7.64 -7.60 (m, 1H), 7.30 (d, J = 8.0 Hz, 1H),7.25 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.80 (d, J =8.8 Hz, 1H), 4.78 - 4.75 (m, 1H), 4.25(br d, J = 11.6 Hz, 2H), 4.16 (br d, J= 6.0 Hz, 2H), 3.67 - 3.61 (m, 3H), 3.52- 3.49 (m, 1H), 3.25 - 3.22 (m, 1H),2.91 - 2.86 (m, 2H), 2.44 - 2.41 (m, 2H),2.20 - 2.16 (m, 1H), 1.90 - 1.85 (m,1H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
162 (3R)-N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-(羟甲基)茚满-5-甲酰胺 522.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.35 -12.12 (m, 1H), 8.80 - 8.77 (m, 1H),8.43 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.76 (s, 1H),7.70 - 7.68 (m, 1H), 7.64 - 7.60 (m,1H), 7.30 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.25 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.8 Hz,1H), 4.78 - 4.75 (m, 1H), 4.25 (br d, J =11.6 Hz, 2H), 4.16 (d, J = 5.6 Hz, 2H),3.66 - 3.60 (m, 3H), 3.51 - 3.49 (m, 1H),3.25 - 3.22 (m, 1H), 2.92 - 2.84 (m,2H), 2.44 - 2.38 (m, 2H), 2.22 - 2.13 (m,1H), 1.92 - 1.83 (m, 1H), 1.18 (d, J =6.4 Hz, 6H) ppm
182 N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-[1-(羟甲基)环丙基]苯甲酰胺 522.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (brd, J = 3.7 Hz, 1H), 8.97 - 8.82 (m,1H), 7.81 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.70 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 7.65 - 7.59 (m, 1H),7.50 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.43 - 7.36 (m,1H), 7.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.80 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 4.70 (t, J = 5.7 Hz,1H), 4.29 - 4.22 (m, 2H), 4.18 (br d, J= 5.6 Hz, 2H), 3.68 - 3.60 (m, 2H), 3.57(d, J = 5.6 Hz, 2H), 2.44 - 2.38 (m,2H), 1.18 (d, J = 6.2 Hz, 6H), 0.90 -0.85 (m, 2H), 0.81 - 0.76 (m, 2H) ppm
187 N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)苯甲酰胺 522.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (s,1H), 8.98 - 8.95 (m, 1H), 7.78 - 7.77(m, 3H), 7.64 - 7.60 (m, 1H), 7.50 - 7.42(m, 2H), 7.26 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.80(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.86 (d, J = 5.6 Hz,2H), 4.58 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.25 (brd, J = 12.0 Hz, 2H), 4.20 (br d, J = 5.6Hz, 2H), 3.64 - 3.61 (m, 2H), 2.44 -2.38 (m, 2H), 1.66 (s, 3H), 1.18 (br d, J= 6.0 Hz, 6H) ppm
223 (R)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(羟甲基)-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 536.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.36 (brs, 1H), 8.88 - 8.68 (m, 1H), 7.76 (s,1H), 7.72 - 7.67 (m, 2H), 7.64 - 7.59 (m,1H), 7.30 - 7.22 (m, 2H), 6.79 (d, J =8.4 Hz, 1H), 4.79 - 4.73 (m, 1H), 4.25(br d, J = 11.6 Hz, 2H), 4.16 (d, J =5.6 Hz, 2H), 3.68 - 3.59 (m, 2H), 3.37(br d, J = 5.6 Hz, 2H), 2.91 - 2.84 (m,2H), 2.45 - 2.38 (m, 2H), 2.22 - 2.14 (m,1H), 1.77 - 1.68 (m, 1H), 1.23 (s, 3H),1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
224 (3S)-N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-(羟甲基)-3-甲基-茚满-5-甲酰胺 536.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.54 -12.26 (m, 1H), 8.92 - 8.66 (m, 1H),7.76 (s, 1H), 7.73 - 7.68 (m, 2H), 7.65 -7.59 (m, 1H), 7.31 - 7.23 (m, 2H),6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.79 - 4.73 (m,1H), 4.25 (br d, J = 11.6 Hz, 2H), 4.17(d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.68 - 3.58 (m, 2H),3.38 (br d, J = 5.6 Hz, 2H), 2.92 -2.84 (m, 2H), 2.45 - 2.38 (m, 2H), 2.23 -2.14 (m, 1H), 1.78 - 1.68 (m, 1H), 1.23(s, 3H), 1.18 (d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm
237 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-4-甲基苯甲酰胺 538.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.59 -12.19 (m, 1H), 8.82 (t, J = 5.7 Hz,1H), 7.85 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.78 (s,1H), 7.67 - 7.59 (m, 2H), 7.26 (d, J =7.2 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 8.1 Hz, 1H),6.81 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.83 - 6.78(m, 1H), 4.71 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.26(br d, J = 12.2 Hz, 2H), 4.17 (br d, J= 5.7 Hz, 2H), 4.20 - 4.14 (m, 1H), 3.63(br d, J = 5.5 Hz, 4H), 2.54 - 2.53 (m,3H), 2.43 - 2.39 (m, 2H), 1.35 (s, 5H),1.36 (br s, 1H), 1.19 (d, J = 6.2 Hz,6H) ppm
241 4-氯-N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)苯甲酰胺 558.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 (brs, 1H), 9.03 (t,J=5.9 Hz, 1H), 7.96 (d,J=2.0 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.74 (dd,J=2.0, 8.3 Hz, 1H), 7.62 (dd,J=7.4, 8.4Hz, 1H), 7.51 (d,J=8.3 Hz, 1H), 7.25 (d,J=7.4 Hz, 1H), 6.80 (d,J=8.6 Hz, 1H),4.78 (t,J=5.3 Hz, 1H), 4.26 (br d,J=11.5Hz, 2H), 4.18 (d,J=5.8 Hz, 2H), 3.77(d,J=5.4 Hz, 2H), 3.63 (ddd,J=2.5, 6.3,10.2 Hz, 2H),2.44 - 2.38 (m, 2H), 1.41(s, 6H), 1.18 (d,J=6.1 Hz, 6H) ppm
271 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-甲基异色满-6-甲酰胺 522.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.32 (s,1H), 8.88 - 8.85 (m, 1H), 7.77 (s, 1H),7.73 - 7.66 (m, 2H), 7.69 - 7.60(m, 1H),7.29 - 7.25 (m, 2H), 6.80 (d, J = 8.4Hz, 1H), 4.83 - 4.80 (m, 1H), 4.26 (d, J= 11.2 Hz, 2H), 4.18 (d, J = 6.0 Hz,2H), 4.09 - 4.04 (m, 1H), 3.75 - 3.71 (m,1H), 3.66 - 3.61 (m, 2H), 3.03 - 2.88(m, 1H), 2.76 - 2.71 (m, 1H), 2.45 - 2.39(m, 2H), 1.47 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.19(d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm
272 (R)-4-(二氟甲基)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟色满-6-甲酰胺 576.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (s,1H), 8.89 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.94(d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.62 -7.60 (m, 1H), 7.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H),7.07 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.98 - 6.64 (m,2H), 4.50 - 4.35 (m, 1H), 4.32 - 4.08(m, 5H), 3.64 - 3.61 (m, 2H), 2.44 - 2.38(m, 4H), 1.19 (s, 3H), 1.17 (s, 3H) ppm
273 (S)-4-(二氟甲基)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟色满-6-甲酰胺 576.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.91 - 8.88(m, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.94 (d, J = 8.8Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.64 - 7.60 (m,1H), 7.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.06 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 6.97 - 6.61 (m, 2H),4.52 - 4.38 (m, 1H), 4.29 - 4.16 (m,5H), 3.68 - 3.56 (m, 2H), 2.46 - 2.35 (m,4H), 1.19 (s, 3H), 1.17 (s, 3H) ppm
282 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4,4-二甲基异色满-6-甲酰胺 536.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.48 -12.34 (m, 1H), 8.94 - 8.91 (m, 1H),7.95 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H),7.73 - 7.57 (m, 2H), 7.26 (d, J = 7.2Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.81(d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.31- 4.16 (m, 4H), 3.69 - 3.56 (m, 4H), 2.43- 2.38 (m, 2H), 1.34 - 1.23 (m, 6H),1.19 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
296 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1,3,4,5-四氢苯并[c]氧杂䓬-7-甲酰胺 522.4 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.38 (s, 1H),8.87 - 8.85 (t, J=5.7 Hz, 1H), 7.77 -7.73 (m, 2H), 7.67 - 7.60 (m, 2H), 7.31(d, J=8.0 Hz, 1H), 7.25 (d, J=7.2 Hz,1H), 6.80 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.65 (s,2H), 4.25 (d, J=11.2 Hz, 2H), 4.17 (d,J=6.0 Hz, 2H), 3.97 - 3.94 (m, 2H), 3.63- 3.61 (m, 2H), 3.04 - 3.01 (m, 2H),2.41 (br d, J=2.0 Hz, 2H), 1.75 - 1.73(m, 2H), 1.18 (d, J=6.0 Hz, 6H) ppm
300 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)螺[异色满-4,3'-氧杂环丁烷]-6-甲酰胺 550.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.45 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 9.10 (m, 1H), 8.47 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.84 - 7.74 (m, 2H), 7.65-7.63 (m, 1H), 7.27 (d, J = 7.2 Hz, 1H),7.19 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.81 (d, J =8.4 Hz, 1H), 4.80 (d, J = 6.4 Hz, 2H),4.75 (s, 2H), 4.59 (d, J = 6.4 Hz, 2H),4.30 - 4.20 (m, 4H), 4.16 (s, 2H), 3.73- 3.57 (m, 2H), 2.45-2.39 (m, 2H), 1.19(d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm
304 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(3-氟-4-羟基四氢呋喃-3-基)苯甲酰胺 556.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.41 (s,1H), 9.03 - 9.00 (m, 1H), 8.01 (s, 1H),7.92 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H),7.66 - 7.60 (m, 2H), 7.56 - 7.52 (m,1H), 7.26 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.80 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 5.58 (d, J = 5.2 Hz,1H), 4.37 - 4.11 (m, 8H), 3.82 (d, J =9.2 Hz, 1H), 3.65 - 3.60 (m, 2H), 2.44- 2.38 (m, 2H), 1.21 - 1.14 (m, 6H) ppm
318 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(6-氟-2-氧杂螺[3.3]庚烷-6-基)苯甲酰胺 566.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.42 (s,1H), 9.07 - 9.01 (m, 1H), 7.95 (s, 1H),7.90 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H),7.66 - 7.60 (m, 2H), 7.58 - 7.53 (m,1H), 7.26 (d, J=7.2 Hz, 1H), 6.81 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.73 (s, 2H), 4.57 (s,2H), 4.26 (d, J=11.6 Hz, 2H), 4.21 (d, J=5.6 Hz, 2H), 3.67 - 3.60 (m, 2H), 3.00- 2.91 (m, 2H), 2.87 - 2.78 (m, 2H), 2.42(d, J=2.0 Hz, 2H), 1.19 (d, J=6.0 Hz,6H) ppm
320 (R)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 522.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.92 - 8.85(m, 1H), 8.46 (s, 0.5H), 7.81 (s, 1H),7.75 (s, 1H), 7.71 - 7.66 (m, 1H), 7.65 -7.58 (m, 1H), 7.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H),7.14 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.79 (d, J =8.4 Hz, 1H), 4.81 - 4.65 (m, 2H), 4.25(d, J = 11.6 Hz, 2H), 4.17 (d, J = 5.6Hz, 2H), 3.93 - 3.86 (m, 1H), 3.64 -3.57 (m, 3H), 2.98 - 2.88 (m, 1H), 2.45 -2.36 (m, 2H), 1.26 (d, J = 7.2 Hz, 3H),1.18 (d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm
321 (S)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 522.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.94 - 8.87(m, 1H), 8.45 (s, 0.3H), 7.82 (s, 1H),7.77 (s, 1H), 7.73 - 7.59 (m, 2H), 7.26(d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 8.0Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.81 -4.68 (m, 2H), 4.26 (d, J = 11.6 Hz,2H), 4.18 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.95 -3.88 (m, 1H), 3.66 - 3.58 (m, 3H), 3.03- 2.87 (m, 1H), 2.46 - 2.38 (m, 2H), 1.27(d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.19 (d, J = 6.4Hz, 6H) ppm
338 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3,4,5-四氢苯并[b]氧杂䓬-7-甲酰胺 522.3 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.37 (s,1H), 8.79 - 8.76 (m, 1H), 7.76 - 7.74(m, 2H), 7.66 - 7.64 (m, 1H), 7.64 - 7.62(m, 1H), 7.26 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.01(d, J = 8.4Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz,1H), 4.26 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 4.16(d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.00 - 3.97 (m, 2H),3.63 - 3.62 (m, 2H), 2.82 - 2.79 (m,2H), 2.44 - 2.38 (m, 2H), 1.91 - 1.89 (m,2H), 1.69 - 1.62 (m, 2H), 1.18 (d, J =6.4 Hz, 6H) ppm
346 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 522 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (brs, 1H), 9.00 - 8.82 (m, 1H), 7.79 (d, J= 17.2 Hz, 2H), 7.73 - 7.57 (m, 2H), 7.25(d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 8.0Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.74(d, J = 7.6 Hz, 2H), 4.32 - 4.15 (m,4H), 3.95 - 3.85 (m, 1H), 3.70 - 3.55 (m,3H), 2.94 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 2.45 -2.38 (m, 2H), 1.26 (d, J = 6.8 Hz, 3H),1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
349 (R)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)螺[异色满-4,2'-氧杂环丁烷]-6-甲酰胺 550.5 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.41 (brs, 1H), 9.15 - 9.06 (m, 1H), 8.47 (s,1H), 7.83 - 7.81 (m, 1H), 7.77 (s, 1H),7.63 - 7.61 (m, 1H), 7.26 (d, J = 7.2Hz, 1H), 7.18 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.80(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.78 - 4.56 (m,4H), 4.30 - 4.18 (m, 4H), 4.14 - 4.07 (m,1H), 3.98 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.63 -3.62 (m, 2H), 2.96 - 2.85 (m, 1H), 2.75 -2.63 (m, 1H), 2.44 - 2.38 (m, 2H), 1.18(d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
350 (S)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)螺[异色满-4,2'-氧杂环丁烷]-6-甲酰胺 550.5 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.44 (brs, 1H), 9.11 - 9.08 (m, 1H), 8.47 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.83 - 7.81 (m, 1H), 7.78(s, 1H), 7.63 - 7.61 (m, 1H), 7.27 -7.25 (m, 1H), 7.18 (d, J = 8.0 Hz, 1H),6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.75 - 4.58(m, 4H), 4.29 - 4.21 (m, 4H), 4.10 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 3.98 (d, J = 11.6 Hz,1H), 3.67 - 3.59 (m, 2H), 2.95 - 2.86 (m,1H), 2.72 - 2.64 (m, 1H), 2.44 - 2.38(m, 2H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
357 3-((1S,3S)-1,3-二氟环丁基)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 542.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.42 (s,1H), 9.07 (m, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.92(d, J = 8.0Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.70 -7.48 (m, 3H), 7.26 (d, J = 7.2 Hz, 1H),6.81 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.27 - 5.00 (m,1H), 4.26 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 4.22(d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.64-3.62 (m, 2H),3.26 - 3.11 (m, 2H), 3.01 - 2.79 (m,2H), 2.45-2.39 (m, 2H), 1.19 (d, J = 6.0Hz, 6H) ppm
358 3-((1R,3R)-1,3-二氟环丁基)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 542.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.55 -12.26 (m, 1H), 9.08 (m, 1H), 8.00 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 7.6 Hz, 1H),7.77 (s, 1H), 7.70 - 7.54 (m, 3H), 7.26(d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.8 Hz,1H), 5.67 - 5.36 (m, 1H), 4.25 (d, J =11.6 Hz, 2H), 4.21 (d, J = 5.6 Hz, 2H),3.67 - 3.59 (m, 2H), 3.18 - 2.99 (m,2H), 2.97 - 2.77 (m, 2H), 2.44-2.38 (m,2H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
360 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)螺[色满-4,2'-氧杂环丁烷]-6-甲酰胺 550.5 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (s,1H), 8.93 (m, 1H), 8.39 (d, J=2.0 Hz,1H), 7.83 - 7.73 (m, 2H), 7.63 (m, 1H),7.27 (d, J=7.2 Hz, 1H), 6.83 (m, 2H),4.68 - 4.56 (m, 2H), 4.32 - 4.16 (m, 6H),3.68 - 3.60 (m, 2H), 3.06 - 2.95 (m,1H), 2.72 - 2.63 (m, 1H), 2.43 - 2.23 (m,4H), 1.19 (d, J=6.0 Hz, 6H) ppm
366 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)异色满-6-甲酰胺 508.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.41 (br s,1H), 8.89 - 8.86 (m, 1H), 7.77 (s, 1H),7.72 - 7.66 (m, 2H), 7.62 - 7.60 (m, 1H),7.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.15 (d, J =7.6 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.8 Hz, 1H),4.73 (s, 2H), 4.26 - 4.23 (m, 2H), 4.17- 4.16 (m, 2H), 3.91 - 3.90 (m, 2H), 3.69- 3.56 (m, 2H), 2.85 - 2.83 (m, 2H),2.43 - 2.38 (m, 2H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz,6H) ppm
370 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)色满-6-甲酰胺 508.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.26 (brs, 1H), 8.77 - 8.66 (m, 1H), 7.79 -7.74 (m, 1H), 7.70 - 7.59 (m, 3H), 7.30 -7.20 (m, 1H), 6.82 - 6.79 (m, 2H), 4.30- 4.23 (m, 2H), 4.22 - 4.17 (m, 2H), 4.17- 4.11 (m, 2H), 3.69 - 3.58 (m, 2H),2.83 - 2.75 (m, 2H), 2.42 - 2.33 (m, 2H),1.92 - 1.90 (m, 2H), 1.23 - 1.18 (m,6H) ppm
376 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)螺[异色满-4,2'-氧杂环丁烷]-6-甲酰胺 550.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 (s,1H), 9.08 - 9.05 (m, 1H), 8.46 (d, J =1.6 Hz, 1H), 7.83 - 7.81 (m, 1H), 7.76(s, 1H), 7.64 - 7.60 (m, 1H), 7.26 (d,J = 7.2 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 8.0 Hz,1H), 6.80 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.77 -4.59 (m, 4H), 4.29 - 4.19 (m, 4H), 4.10(d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.98 (d, J = 11.6Hz, 1H), 3.70 - 3.56 (m, 2H), 2.95 - 2.85(m, 1H), 2.72 - 2.65 (m, 1H), 2.44 -2.38 (m, 2H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H)ppm
381 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)螺[色满-4,3'-氧杂环丁烷]-6-甲酰胺 550.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.40 (s,1H), 8.95 - 8.92 (m, 1H), 8.40 (d, J =2.0 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.73 - 7.71(m, 1H), 7.64 - 7.60 (m, 1H), 7.26 (d,J = 7.2 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 8.4 Hz,1H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.83 (d,J = 6.0 Hz, 2H), 4.56 (d, J = 6.0 Hz,2H), 4.26 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 4.19(d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.17 - 4.12 (m, 2H),3.68 - 3.58 (m, 2H), 2.44 - 2.38 (m,2H), 2.35 - 2.30 (m, 2H), 1.19 (s, 3H),1.17 (s, 3H) ppm
384 1-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1-甲基异色满-7-甲酰胺 547.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 (s,1H), 9.08 - 9.04 (m, 1H), 8.03 (d, J =1.2 Hz, 1H), 7.88 - 7.86 (m, 1H), 7.77(s, 1H), 7.64 - 7.60 (m, 1H), 7.39 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 7.2 Hz,1H), 6.80 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.27 -4.20 (m, 5H), 3.94 - 3.88 (m, 1H), 3.65 -3.62 (m, 2H), 3.11 -3.10 (m, 1H), 2.85- 2.81 (m, 1H), 2.41 - 2.38 (m, 2H), 1.94(s, 3H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz, 6H) ppm
385 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4,4-二氟异色满-6-甲酰胺 544.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.42 (brs, 1H), 9.21 - 9.05 (m, 1H), 8.25 (s,1H), 8.03 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.77 (s,1H), 7.68 - 7.54 (m, 1H), 7.41 (d, J =8.4 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H),6.79 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.89 (s, 2H),4.29 - 4.15 (m, 6H), 3.66 - 3.59 (m, 2H),2.43 - 2.38 (m, 2H), 1.17 (d, J = 6.0Hz, 6H) ppm
395 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-异丙基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-6-甲酰胺 551.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, MeOD) δ = 7.68 (s, 1H),7.63 - 7.55 (m, 1H), 7.42 - 7.32 (m,2H), 7.16 - 7.15 (m, 1H), 6.80 - 6.70 (m,2H), 5.17 (s, 2H), 4.31 - 4.20 (m, 7H),3.80 - 3.68 (m, 2H), 2.51 - 2.45 (m, 2H),1.26 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 1.22 (d, J =6.4 Hz, 6H)) ppm
405 rac-4-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)色满-6-甲酰胺 533.1 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, MeOD) δ = 7.94 (d, J =1.2 Hz, 1H), 7.84 - 7.78 (m, , 1H),7.68 (s, 1H), 7.62 - 7.55 (m, 1H), 7.35(d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 8.8Hz, 1H), 6.73 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.39 -4.32 (m, 3H), 4.30 - 4.21 (m, 4H), 3.79- 3.68 (m, 2H), 2.53 - 2.44 (m, , 2H),2.43 - 2.28 (m, 2H), 1.26 (d, J = 6.4Hz, 6H) ppm
409 (S)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺 540.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.42 (s,1H), 9.06 (m, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.89(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.62(m, 1H), 7.32 - 7.22 (m, 2H), 6.80 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 4.90 - 4.81 (m, 1H),4.77 - 4.68 (m, 1H), 4.32 - 4.17 (m,4H), 4.13 - 4.01 (m, 1H), 3.90 - 3.77 (m,1H), 3.69 - 3.56 (m, 2H), 2.41 (m, 2H),1.75 - 1.63 (m, 3H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz,6H) ppm
410 (R)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,2-二氟螺[环丙烷-1,4'-异色满]-6'-甲酰胺 570.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 (s,1H), 8.97-8.95 (m, 1H), 7.86 - 7.74 (m,2H), 7.67 - 7.59 (m, 2H), 7.28-7.26 (8,2H), 6.81 (d, J=8.8 Hz, 1H), 5.00 -4.85 (m, 2H), 4.28 - 4.25 (m, 2H), 4.22 -4.20 (m, 2H), 3.98 - 3.92 (m, 1H), 3.89- 3.83 (m, 1H), 3.68 - 3.59 (m, 2H), 2.42(br s, 3H), 1.95 - 1.87 (m, 1H), 1.19 -1.17 (m, 6H) ppm
411 (S)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,2-二氟螺[环丙烷-1,4'-异色满]-6'-甲酰胺 570.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 (s,1H), 8.97 - 8.95 (m, 1H), 7.86 - 7.74(m, 2H), 7.67 - 7.59 (m, 2H), 7.28 - 7.26(8, 2H), 6.81 (d, J=8.8 Hz, 1H), 5.00 -4.85 (m, 2H), 4.28-4.25 (m, 2H), 4.22 -4.20 (m, 2H), 3.98 - 3.92 (m, 1H), 3.89- 3.83 (m, 1H), 3.68 - 3.59 (m, 2H), 2.42(s, 3H), 1.95 - 1.87 (m, 1H), 1.19 -1.17 (m, 6H) ppm
412 (R)-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺 540.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.45 (br s,1H), 9.09 - 9.06 (m, 1H), 8.20 (s, 1H),7.89 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H),7.63 - 7.61 (m, 1H), 7.28 - 7.25 (m,2H), 6.81 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.91 -4.69 (m, 2H), 4.31 - 4.18 (m, 4H), 4.08- 4.06 (m, 1H), 3.93 - 3.77 (m, 1H), 3.64- 3.60 (m, 2H), 2.44 - 2.39 (m, 2H),1.75 - 1.62 (m, 3H), 1.19 (d, J = 6.0 Hz,6H) ppm
413 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-((顺)-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-3-基)苯甲酰胺 552.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 -12.36 (m, 1H), 8.95 - 8.92 (m, 1H),7.89 (s, 1H), 7.77 - 7.74 (m, 2H), 7.64 -7.57 (m, 2H), 7.46 - 7.42 (m, 1H), 7.25(d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz,1H), 5.33 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 4.33 -4.18 (m, 5H), 4.05 (d, J = 8.4 Hz, 1H),3.87 - 3.81 (m, 2H), 3.64 - 3.61 (m,2H), 3.55 - 3.52 (m, 1H), 2.44 - 2.38 (m,2H), 1.32 - 1.31 (s, 3H), 1.18 (d, J =6.4 Hz, 6H) ppm
420 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 547 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.45 (d, J=6.0 Hz, 1H), 9.09 (d, J=6.8 Hz, 1H),8.13 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.92 - 7.87 (m,1H), 7.78 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.63 -7.62 (m, 1H), 7.31 - 7.26 (m, 2H), 6.82(d, J=8.0 Hz, 1H), 4.92 - 4.85 (m, 2H),4.27 - 4.22 (m, 5H), 3.89 - 3.84 (m, 1H),3.63 (s, 2H), 2.44 (d, J=12.4 Hz, 2H),1.70 (d, J=6.8 Hz, 3H), 1.18 -1.17 (m,6H) ppm
421 (S)-4-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 547 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.44 (s,1H), 9.09 - 9.06 (m, 1H), 8.12 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.88 - 7.86 (m, 1H), 7.77(s, 1H), 7.62 - 7.60 (m, 1H), 7.30 -7.24 (m, 2H), 6.80 (d, J=8.8 Hz, 1H),4.92 - 4.85 (m, 2H), 4.27 - 4.20 (m,5H), 3.86 (d, J=11.6 Hz, 1H), 3.63 - 3.61(m, 2H), 2.41 - 2.38 (m, 2H), 1.69 (s,3H), 1.18 (d, J=6.0 Hz, 6H) ppm
425 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-((反)-4-羟基四氢呋喃-3-基)苯甲酰胺 538.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ= 12.53 -12.24 (m, 1H), 8.95 - 8.82 (m, 1H),7.82 (s, 1H), 7.76 - 7.74 (m, 2H), 7.64 -7.60 (m, 1H), 7.48 - 7.46 (m, 1H), 7.43- 7.39 (m, 1H), 7.25 (d, J = 7.6 Hz, 1H),6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.92 (d, J =4.8 Hz, 1H), 4.39 - 4.36 (m, 1H), 4.25(d, J = 12.8 Hz, 2H), 4.18 (d, J = 5.6Hz, 2H), 4.10 - 4.06 (m, 1H), 4.02 - 3.97(m, 2H), 3.74 - 3.71 (m, 1H), 3.66 -3.58 (m, 3H), 2.41 (s, 2H), 1.18 (d, J =6.0 Hz, 6H) ppm
426 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-((顺)-1-氟-3-甲氧基环丁基)苯甲酰胺 554.1 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.57 -12.29 (m, 1H), 9.22 - 8.97 (m, 1H),7.97 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.93 - 7.86 (m,1H), 7.79 (s, 1H), 7.67 - 7.60 (m, 2H),7.59 - 7.53 (m, 1H), 7.32 - 7.20 (m, 1H),6.85 - 6.76 (m, 1H), 4.37 - 4.15 (m,5H), 3.69 - 3.60 (m, 2H), 3.23 (s, 3H),2.98 - 2.81 (m, 2H), 2.47 - 2.37 (m,4H), 1.18 (s, 6H) ppm
441 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-((R)-3-氟四氢呋喃-3-基)苯甲酰胺 540.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ= 9.06 - 9.03(m, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.90 (d, J = 7.6Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.68 (d, J = 7.6Hz, 1H), 7.64 - 7.60 (m, 1H), 7.58 -7.54 (m, 1H), 7.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H),6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.29 - 4.04(m, 7H), 3.97 - 3.85 (m, 1H), 3.66 - 3.59(m, 2H), 2.62 - 2.59 (m, 2H), 2.44 -2.38 (m, 2H), 1.18 (d, J = 6.4 Hz, 6H)ppm
406 N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)螺[环丙烷-1,4'-异色满]-6'-甲酰胺 534.4 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ= 12.40 (br s,1H), 8.90 - 8.87 (m, 1H), 7.77 (s, 1H),7.66 - 7.59 (m, 2H), 7.31 (d, J=1.2 Hz,1H), 7.25 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.14 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.80 (d, J=8.4 Hz, 1H),4.85 (s, 2H), 4.25 (br d, J=11.2 Hz,2H), 4.16 (d, J=6.0 Hz, 2H), 3.67 (s,2H), 3.67 - 3.62 (m, 2H), 2.44 - 2.39(m, 2H), 1.18 (d, J=6.0 Hz, 6H), 1.10 -1.04 (m, 2H), 0.99 - 0.91 (m, 2H) ppm
实施例108. 3-异丙基磺酰基-N-[2-[[4-[6-(6-甲基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]苯甲酰胺 (化合物 117)的制备
Figure 495037DEST_PATH_IMAGE572
步骤1: (Z)-1-(6-溴-2-吡啶基)-3-羟基-丁-2-烯-1-酮的制备
Figure 334817DEST_PATH_IMAGE573
在-78℃下向丙酮 (1.75 g, 30.09 mmol, 2.21 mL)在THF (85 mL)中的溶液添加LiHMDS (1 M, 30.09 mL)，然后在-78℃下搅拌该混合物1小时。添加6-溴吡啶-2-甲酸甲酯 (5.0 g, 23.14 mmol)在THF (30 mL)中的溶液。将该混合物温热至25℃ 并搅拌11小时。用水 (100 mL)淬灭该混合物，用EA (100 mL*3)萃取，分离有机层并浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (石油醚/乙酸乙酯=1/0至1/1)。浓缩洗脱物以提供作为棕色固体的中间体B (3.0 g, 51%收率)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 242.0. 1H NMR (400MHz, 氯仿-d) δ = 15.39 (s, 1H), 7.88 - 7.86 (m, 1H), 7.54 (d, J = 7.6 Hz,1H), 7.45 - 7.42 (m, 1H), 6.65 (s, 1H), 2.11 (s, 3H) ppm。
步骤2: 4-(6-溴-2-吡啶基)-6-甲基-嘧啶的制备
Figure 815477DEST_PATH_IMAGE574
在微波下在180℃下搅拌中间体B (1.0 g, 4.13 mmol)在甲酰胺(11.30 g,250.88 mmol, 10 mL)中的混合物3小时。将该混合物与另一批合并。用水 (5 mL)洗涤该混合物并用EA (10 mL*3)萃取，分离有机层并浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物(SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至1/1)，浓缩洗脱物以提供作为棕色固体的中间体C (800mg, 35%收率)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 250.0. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 9.15(d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.46 - 8.44 (m, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.73 (d, J = 7.6 Hz,1H), 7.59 (m, 1H), 2.64 (s, 3H) ppm。
步骤3: 4-[6-(1-乙氧基乙烯基)-2-吡啶基]-6-甲基-嘧啶的制备
Figure 107918DEST_PATH_IMAGE575
在25℃下在氮气气氛下向中间体C (600 mg, 2.40 mmol)在甲苯 (6 mL)中的溶液添加三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷 (1.30 g, 3.60 mmol, 1.21 mL)和Pd(PPh3)4(554.46 mg, 479.82 umol)。然后将该混合物加热至100℃ 并搅拌12小时。向该混合物添加饱和 KF水溶液 (10 mL)并搅拌1小时，然后用EA (10 mL*3)萃取，分离有机层并浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (石油醚/乙酸乙酯=100/1至1/1)，浓缩洗脱物以提供作为棕色固体的中间体D (500 mg, 82%收率)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 242.1. 1HNMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 9.07 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.33 (m, 1H), 8.25 (d, J= 0.4 Hz, 1H), 7.83 - 7.71 (m, 2H), 5.57 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 4.37 (d, J =1.6 Hz, 1H), 3.95 (m, 2H), 2.57 (s, 3H), 1.40 (m, 3H) ppm。
步骤4: 2-溴-1-[6-(6-甲基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]乙酮的制备
Figure 965015DEST_PATH_IMAGE576
在25℃下搅拌中间体D (400 mg, 1.66 mmol)和NBS (354.06 mg, 1.99 mmol)在THF (2 mL)和H2O (0.2 mL)中的混合物0.5小时。用水 (2 mL)洗涤该混合物并用EA (5mL*3)萃取，分离有机层并浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至1/1)，浓缩洗脱物以提供作为白色固体的中间体E (400 mg, 74%收率)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 292.0. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ = 9.20 (s, 1H),8.75 - 8.73 (m, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.22 - 8.20 (m, 1H), 8.11 - 8.04 (m, 1H),4.96 (s, 2H), 2.70 (s, 3H) ppm。
步骤5: 4-(6-(6-甲基嘧啶-4-基)吡啶-2-基)噻唑-2-胺的制备
Figure 393723DEST_PATH_IMAGE577
在25℃下向中间体E (300 mg, 1.03 mmol)在EtOH (3 mL)中的添溶液加硫脲(85.99 mg, 1.13 mmol)。然后将该混合物加热至70℃并搅拌1小时。用水 (3 mL)洗涤该混合物并用EA (5 mL*3)萃取，分离有机层并浓缩以提供作为白色固体的中间体F (320 mg,粗物质)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 270.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.19 (d,J = 1.2 Hz, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.43 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 4.4 Hz,2H), 7.77 (s, 1H), 2.64 (s, 3H) ppm。
步骤6: N-[2-[[4-[6-(6-甲基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯的制备
Figure 45284DEST_PATH_IMAGE578
在25℃下向中间体F (250 mg, 928.25 umol)在DMF (2.5 mL)中的溶液添加HATU(705.90 mg, 1.86 mmol)和DIEA (359.90 mg, 2.78 mmol, 485.04 uL)，然后添加2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸 (325.22 mg, 1.86 mmol)并在25℃下搅拌1小时。用水 (5 mL)洗涤该混合物并用EA (10 mL*3)萃取，分离有机层并浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (石油醚/乙酸乙酯=100/1至1/10), 浓缩洗脱物以提供作为白色固体的中间体G(350 mg, 80%收率)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 427.1. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ =9.19 (s, 1H), 8.41 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.05 - 7.99 (m, 1H),7.97 - 7.91 (m, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.26 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H),4.15 (s, 2H), 2.68 (s, 3H), 1.52 (s, 9H) ppm。
步骤7: 2-氨基-N-(4-(6-(6-甲基嘧啶-4-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)乙酰胺 盐酸盐的制备
Figure 90600DEST_PATH_IMAGE579
在25℃下搅拌中间体G (350 mg, 820.65 umol)在HCl/二氧杂环己烷 (4 M, 5mL)中的混合物30分钟。浓缩该混合物以提供作为棕色固体的中间体H (290 mg, 粗物质)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 327.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO-6) δ = 9.22 (d, J = 1.2Hz, 1H), 8.54 - 8.53 (m, 1H), 8.42 - 8.38 (m, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.17 - 8.11(m, 1H), 8.11 - 8.06 (m, 1H), 3.95 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 2.65 (s, 3H) ppm。
步骤8: 3-异丙基磺酰基-N-[2-[[4-[6-(6-甲基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]苯甲酰胺 (化合物 117)的制备
Figure 485810DEST_PATH_IMAGE580
在25℃下向中间体H (100 mg, 275.61 umol)在DMF (1 mL)中的溶液添加3-异丙基磺酰基苯甲酸 (根据FG-A796中的方法制备) (74.32 mg, 325.59 umol)、HATU (190.45mg, 500.88 umol)、DIEA (161.84 mg, 1.25 mmol, 218.11 uL)。然后在25℃下搅拌该混合物1小时。用水 (5 mL)洗涤该混合物并用EA (5 mL*3)萃取，分离有机层并浓缩以提供残余物。通过制备型HPLC (柱: Phenomenex Synergi C18 150*30mm*4um；流动相: [水(0.05%HCl)-ACN]；B%: 38%-58%, 12min)纯化残余物并冻干以提供作为黄色固体的化合物117 (20 mg, 13%收率)。LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 537.2. 1H NMR (400 MHz, 甲醇-d4)δ = 9.48 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.63 - 8.61 (m, 1H), 8.46 (d, J =1.6 Hz, 1H), 8.46 - 8.39 (m, 1H), 8.33 - 8.22 (m, 3H), 8.13-8.10 (m, 1H),7.82 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.40 (s, 2H), 3.50 - 3.39 (m, 1H), 2.91 (s, 3H),1.32 (s, 3H), 1.30 (s, 3H) ppm。
实施例109. 发明化合物的制备
类似于用于制备化合物 117的那些使用标准的化学操作和程序制备在表8中的以下化合物。
表8.
# 名称 LC-MS(m/z) 1H NMR
154 3-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-((4-(6-(2-甲基-2H-1,2,3-三唑-4-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 492.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.57 -12.46 (m, 1H), 8.96 -8.92 (m, 1H), 8.39(s, 1H), 8.04 (s, 1H), 8.03 -7.97 (m,1H),7.94 -7.90 (m, 2H), 7.85 -7.82 (m,1H), 7.74 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.57 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.45 -7.39 (m, 1H),4.74-4.70 (m,1H), 4.26 (s, 3H), 4.21 (d,J = 5.6 Hz, 2H), 3.47 (d, J = 4.8 Hz,2H), 1.28 (s, 6H) ppm
155 3-(羟甲基)-3-甲基-N-(2-((4-(6-(2-甲基-2H-1,2,3-三唑-4-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 504.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.50 (s,1H), 8.85 -8.81 (m, 1H), 8.39 (s, 1H),8.04 (s, 1H), 8.02 -7.97 (m, 1H), 7.94 -7.89 (m, 1H), 7.85 -7.82 (m, 1H), 7.75-7.69 (m, 2H), 7.29 (d, J = 8.0 Hz, 1H),4.80 -4.76 (m, 1H), 4.26 (s, 3H), 4.20(d, J = 5.6Hz, 2H), 3.39 (d, J = 5.2 Hz,2H), 2.91 -2.87 (m, 2H), 2.23 -2.16 (m,1H), 1.78 -1.70 (m, 1H), 1.24 (s, 3H) ppm
163 (R)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-(2-((4-(6-(6-甲基吡嗪-2-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 515.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.50 (s,1H), 9.57 (s, 1H), 8.84 -8.82(m, 1H),8.64 (s, 1H), 8.29 (d, J=6.8 Hz, 1H),8.18(s, 1H), 8.08-8.02(m, 2H), 7.76 -7.68(m, 2H), 7.28 (d, J=7.6Hz, 1H), 4.20 (d,J=5.6Hz, 2H), 3.39 -3.38 (m, 2H),2.88-2.86(m, 2H), 2.61 (s, 3H), 2.26-2.17(m,1H), 1.76 -7.71(m, 1H), 1.24 (s, 3H)ppm
164 (S)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-(2-((4-(6-(6-甲基吡嗪-2-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 515.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.48 (d, J=16.8Hz, 1H), 9.56(s, 1H), 8.84 -8.82(m, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.28 -8.27(m, 1H),8.18 (s, 1H), 8.08-8.02(m, 2H), 7.72-7.71(m, 2H), 7.28 (d, J=7.6 Hz, 1H), 4.78-4.76(m, 1H), 4.20(d, J=5.6Hz, 2H),3.38 (d, J=6.0 Hz, 2H), 2.89-2.86(m, 2H),2.61 (s, 3H), 2.20-2.16(m, 1H), 1.74 -1.72(m,1H), 1.23 (s, 3H) ppm
167 (R)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-(2-氧代-2-((4-(6-(吡嗪-2-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 501.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.79 (d, J= 1.6Hz, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.80 -8.74(m, 2H), 8.31-8.29(m, 1H), 8.20 (s, 1H),8.15 -8.03 (m, 2H), 7.76 -7.68 (m, 2H),7.29 (d, J = 7.6Hz, 1H), 4.91 -4.69 (m,1H), 4.20 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.39 (s,2H), 2.96 -2.82 (m, 2H), 2.25 -2.13 (m,1H), 1.77-1.70(m, 1H), 1.25 (s, 3H) ppm
169 (S)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-(2-氧代-2-((4-(6-(吡嗪-2-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)乙基)-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 501.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.56-12.51(m, 1H), 9.78 (d, J=1.2Hz, 1H), 8.84(s, 1H), 8.78-8.77 (m, 1H), 8.76 -8.75(m,1H), 8.30 -8.29(m, 1H), 8.21 (s, 1H),8.10-8.08 (m, 1H), 8.06-8.05(m, 1H),7.72-7.71(m, 2H), 7.29 (d, J=7.6 Hz,1H), 4.80 -4.78(m, 1H), 4.20 (d, J=5.6Hz, 2H), 3.38 (d, J=6.4 Hz, 2H), 2.89-2.86(m, 2H), 2.21-2.17(m, 1H), 1.76 -1.71 (m, 1H), 1.23(s, 3H) ppm
190 (S)-N-(2-((4-(2'-羟基-5'-甲基-[2,3'-联吡啶]-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(羟甲基)-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 530.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.59 -12.49 (m, 1H), 12.32 -11.82 (m, 1H),8.85 (d, J = 5.6Hz, 1H), 8.65 -8.55 (m,2H), 8.10 (s, 1H), 8.06 -7.92 (m, 2H),7.76 -7.69 (m, 2H), 7.44 (s, 1H), 7.29(d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.21 (d, J =5.6Hz, 2H),3.39 -3.39 (m, 2H), 2.92 -2.86(m, 2H), 2.22 (d, J = 7.6Hz, 1H), 2.19(s, 3H), 1.78 -1.69 (m, 1H), 1.24 (s, 3H)ppm
263 (R)-N-(2-((4-(2'-羟基-5'-甲基-[2,3'-联吡啶]-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(羟甲基)-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 530.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.49 (s,1H), 11.84 (d, J = 0.8Hz, 1H), 8.84 (d,J = 5.2Hz, 1H), 8.60 (d, J = 7.6 Hz, 1H),8.52 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H),7.96 -7.82 (m, 2H), 7.76 -7.66 (m, 2H),7.36 (s, 1H), 7.29 (d, J = 8.0Hz,1H),4.86 -4.70 (m, 1H), 4.20 (d, J = 5.6 Hz,2H), 3.39 (s, 2H), 2.92 -2.87 (m, 2H),2.23 -2.15 (m, 4H), 1.77 -1.73(m, 1H),1.24 (s, 3H) ppm
191 (S)-N-(2-((4-(2'-羟基-[2,3'-联吡啶]-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(羟甲基)-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 516.5 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.57 (s,1H), 12.25 (s, 1H), 8.86-8.85(m, 1H),8.71-8.69(m, 1H), 8.60 -8.58(m, 1H),8.08-7.98(m, 3H), 7.73-7.65(m, 3H),7.29 (d, J=7.6Hz, 1H), 6.53 -6.51(m,1H), 4.21 (d, J=5.6Hz,2H), 3.41-3.35 (m,2H), 2.90-2.87(m, 2H), 2.20-2.17(m, 1H),1.75-1.69(m, 1H), 1.24 (s, 3H) ppm
264 (R)-N-(2-((4-(2'-羟基-[2,3'-联吡啶]-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-(羟甲基)-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-5-甲酰胺 516.5 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.57 (s,1H), 12.25 (s, 1H), 8.86-8.85(m, 1H),8.71-8.69(m, 1H), 8.60 -8.58(m, 1H),8.08-7.98(m, 3H), 7.73-7.65(m, 3H),7.29 (d, J=7.6Hz, 1H), 6.53 -6.51(m,1H), 4.21 (d, J=5.6Hz,2H), 3.41-3.35 (m,2H), 2.90-2.87(m, 2H), 2.20-2.17(m, 1H),1.75-1.69(m, 1H), 1.24 (s, 3H) ppm
192 (3S)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-[2-[[4-[6-(1-甲基吡唑-3-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]茚满-5-甲酰胺 503.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.48 (s,1H), 8.85 -8.82 (m, 1H), 7.95 (s, 1H),7.92 -7.88 (m, 1H), 7.84 -7.82 (m, 2H),7.80 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.72 -7.69(m, 2H), 7.28 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.95(d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.80 -4.77 (m,1H), 4.19 (d, J =5.6 Hz, 2H), 3.93 (s,3H), 3.38 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.89 -2.86 (m, 2H), 2.21 -2.15 (m, 1H), 1.76 -1.69 (m, 1H), 1.23 (s, 3H) ppm
265 (3R)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-[2-[[4-[6-(1-甲基吡唑-3-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]茚满-5-甲酰胺 503.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.86 -8.83(m, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.92 -7.88 (m,1H), 7.84 -7.82 (m, 2H), 7.80 (d, J =2.0Hz, 1H), 7.72 -7.69 (m, 2H), 7.28(d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 2.4 Hz,1H), 4.82 -4.75 (m, 1H), 4.19 (d, J =6.0 Hz, 2H),3.93 (s, 3H), 3.37 (s, 2H),2.90 -2.86 (m, 2H), 2.22 -2.21 (m, 1H),2.18 -2.15 (m, 1H), 1.76 -1.68 (m, 1H),1.23 (s, 3H) ppm
201 3-(2-氨基-1,1-二甲基-乙基)-4-甲基-N-[2-[[4-[6-(6-甲基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]苯甲酰胺 516.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.17 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 9.04 -8.95 (m, 1H), 8.49(d, J = 0.8 Hz, 1H), 8.43 -8.29 (m, 2H),8.20 (s, 1H), 8.16 -8.04 (m, 2H), 7.84(d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.69 (m, 1H), 7.26(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.23 -4.18 (m,2H), 3.06 -2.96 (m, 2H), 2.61 (s, 3H),2.55 -2.52 (m, 3H), 1.41 (s, 6H) ppm
203 (3R)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-[2-[[4-[6-(6-甲基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]茚满-5-甲酰胺 515.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.56 (s,1H), 9.21 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.89 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 8.54(s, 1H), 8.39 (d, J=7.6 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.17 -8.06(m, 2H), 7.77 -7.66 (m, 2H), 7.29 (d, J =8.0 Hz, 1H), 4.21 (d, J = 5.6Hz, 2H),3.39 (d, J=5.6, 2H), 2.95 -2.85 (m, 2H),2.64 (s, 3H), 2.22-2.15 (m, 1H), 1.79 -1.70 (m, 1H), 1.24 (s, 3H) ppm
204 (3S)-3-(羟甲基)-3-甲基-N-[2-[[4-[6-(6-甲基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]茚满-5-甲酰胺 515.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.53 (s,1H), 9.18 (d,J = 1.2 Hz, 1H), 8.85 (d,J = 5.6 Hz, 1H), 8.50 (s,1H), 8.39 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.17 -8.05(m, 2H), 7.75 -7.68 (m, 2H), 7.29 (d, J =8.0 Hz, 1H), 4.78 (d, J = 5.6 Hz, 1H),4.21 (d, J= 5.6 Hz, 2H), 3.39 (d, J = 6.0Hz, 2H), 2.93 -2.85 (m, 2H), 2.63 (s,3H), 2.23 -2.16 (m, 1H), 1.77-1.70 (m,1H),1.25 (s, 3H) ppm
206 3-(2-氨基-1,1-二甲基-乙基)-4-甲基-N-[2-[[4-[6-(2-甲基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]苯甲酰胺 516.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.57 (s,1H), 9.04 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.95 (d,J = 5.2 Hz, 1H), 8.45 (d, J = 5.2 Hz,1H),8.43-8.36 (m, 1H), 8.15 (s, 1H),8.14-8.08 (m, 2H), 7.91 (s, 3H), 7.87 (d,J = 1.2 Hz, 1H), 7.77-7.72 (m, 1H),7.31 (d, J = 8.0Hz, 1H), 4.21 (d, J = 5.6Hz, 2H), 3.22-3.13 (m, 2H),2.77 (s,3H), 2.55 (s, 3H), 1.49 (s, 6H) ppm
207 (S)-8-(羟甲基)-8-甲基-N-(2-((4-(6-(6-甲基嘧啶-4-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-5,6,7,8-四氢化萘-2-甲酰胺 529.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.17 (s,1H), 8.83 -8.63 (m, 1H), 8.50 (s, 1H),8.39 -8.32 (m, 1H),8.18 -8.04 (m, 3H),7.88 (s, 1H), 7.66 -7.56 (m, 1H), 7.21-7.12 (m, 1H), 4.75 (d, J = 5.6 Hz, 1H),4.13 (d, J = 3.6 Hz, 2H),3.53-3.43 (m,2H), 2.76 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.62 (s,3H), 2.05 -1.93 (m, 1H), 1.82 -1.67 (m,2H), 1.49 -1.39 (m, 1H), 1.22 (s, 3H) ppm
208 (R)-8-(羟甲基)-8-甲基-N-(2-((4-(6-(6-甲基嘧啶-4-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-5,6,7,8-四氢化萘-2-甲酰胺 529.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.53 (s,1H), 9.18 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.94 -8.83 (m, 1H), 8.50 (s,1H), 8.39 (d, J =7.2 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.17 -8.06(m, 2H), 7.88 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.62(d, J =8.0 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 8.4Hz,1H), 4.74 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 4.20 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 3.54-3.41 (m, 1H), 2.76(d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.62 (s, 3H), 2.02 -1.95(m, 1H), 1.86 -1.64 (m, 2H), 1.49 -1.41 (m, 1H), 1.22 (s, 3H) ppm
211 (4S)-4-(羟甲基)-4-甲基-N-[2-[[4-[6-(2-甲基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]四氢化萘-6-甲酰胺 529.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.55 (s,1H), 8.91 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 8.46 -8.36 (m, 2H), 8.20 -8.05 (m, 3H), 7.88(d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.63 -7.61 (m, 1H),7.16 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.20 (d, J =5.6 Hz, 2H), 3.52 (d, J = 10.8 Hz, 1H),3.42 (s, 1H),2.74 (s, 5H), 2.03 -1.93 (m,1H), 1.85 -1.62 (m, 2H), 1.49 -1.38 (m,1H), 1.22 (s, 3H) ppm
212 (4R)-4-(羟甲基)-4-甲基-N-[2-[[4-[6-(2-甲基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]四氢化萘-6-甲酰胺 529.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.52 (s,1H), 8.90 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.89 -8.84 (m, 1H), 8.45 -8.35 (m, 2H), 8.19 -8.06(m, 3H), 7.88 (d, J = 1.6 Hz, 1H),7.64 -7.62 (m, 1H), 7.16 (d, J = 8.0 Hz,1H), 4.73 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 4.21 (d,J = 5.6 Hz, 2H),3.54 -3.50 (m, 2H), 2.76-2.72 (m, 5H), 2.05 -1.93 (m, 1H), 1.87-1.64 (m, 2H), 1.48 -1.40 (m, 1H), 1.22(s, 3H) ppm
214 (S)-N-(2-((4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-8-(羟甲基)-8-甲基-5,6,7,8-四氢化萘-2-甲酰胺 515.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.50 (s,1H), 8.90 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.84 -8.83 (m, 1H), 8.45 -8.34 (m, 2H), 8.17 -8.08 (m, 3H), 7.77 -7.68 (m, 2H), 7.29(d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.78 -4.75(m, 1H),4.21 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.39 (d, J =6.0 Hz,2H), 2.98 -2.83 (m, 2H), 2.75 (s,3H), 2.20 -2.18 (m, 1H), 1.75 -1.73 (m,1H), 1.25 (s, 3H) ppm
215 (R)-N-(2-((4-(3-(2,6-二甲基吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-8-(羟甲基)-8-甲基-5,6,7,8-四氢化萘-2-甲酰胺 515.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.51 (s,1H), 8.90 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.84 -8.83 (m, 1H), 8.44 -8.36 (m, 2H), 8.24 -8.02 (m, 3H), 7.76 -7.68 (m, 2H), 7.29(d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.78 -4.75(m, 1H),4.21 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.39 (d, J =6.0 Hz, 2H), 2.95 -2.85 (m, 2H), 2.75 (s,3H), 2.24 -2.15 (m, 1H), 1.75 -1.73 (m,1H), 1.25 (s, 3H) ppm
110 3-异丙基磺酰基-4-甲基-N-[2-[[4-[6-(6-甲基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]苯甲酰胺 551.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.59 (s,1H), 9.26 -9.24 (m, 1H), 9.17 (d, J =1.2 Hz, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.38 -8.37 (m,2H), 8.21 (s, 1H), 8.15 -8.06 (m, 3H),7.64 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.24 (d, J =4.0 Hz, 2H), 3.58 -3.49 (m, 1H), 2.68(s, 3H), 2.61(s, 3H), 1.19 (d, J = 6.8Hz, 6H) ppm
216 4-氯-3-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)-N-[2-[[4-[6-(6-甲基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]苯甲酰胺 537.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.60 -12.53 (m, 1H), 9.17 (d, J = 8.0 Hz,1H), 9.08 -9.05 (m, 1H), 8.49 (s, 1H),8.39 -8.36 (m, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.13-8.06 (m, 2H), 7.97 (d, J = 2.0 Hz, 1H),7.76 -7.73 (m, 1H), 7.52 (d, J = 8.4Hz, 1H), 4.79 (s,1H), 4.21 (d, J = 5.2Hz, 2H), 3.76 (s, 2H), 2.61 (s, 3H),1.41 (s, 6H) ppm
266 (3S)-3-氰基-3-甲基-N-[2-[[4-[6-(6-甲基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]茚满-5-甲酰胺 510.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.17 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 9.02 (d, J = 5.6 Hz,1H), 8.50 (s, 1H), 8.38 (d, J= 7.2 Hz,1H), 8.20 (s, 1H), 8.15 -8.06 (m, 2H),8.02 (s, 1H), 7.89 (d, J = 1.6 Hz, 1H),7.46 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.23 (d, J =4.0Hz, 2H), 3.07 (d, J = 7.2 Hz, 2H),2.70 -2.65 (m, 1H), 2.62 (s, 3H), 2.28-2.23 (m, 1H), 1.68 (s, 3H) ppm
267 (3R)-3-氰基-3-甲基-N-[2-[[4-[6-(6-甲基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]茚满-5-甲酰胺 510.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.18 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 9.01 (d, J = 5.6 Hz,1H), 8.56 -8.46 (m, 1H),8.38 (d, J = 7.2Hz, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.16 -8.07 (m,2H), 8.02 (s, 1H), 7.95 -7.83 (m, 1H),7.46 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.23 (d, J =3.6Hz, 2H), 3.07 (d, J = 7.2 Hz, 2H),2.69 -2.66 (m, 1H), 2.63 (s, 3H), 2.31-2.20 (m, 1H), 1.68 (s, 3H) ppm
268 (3S)-3-氰基-3-甲基-N-[2-[[4-[6-(2-甲基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]茚满-5-甲酰胺 510.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.57 (s,1H), 9.06 -9.04 (m, 1H), 8.90 (d, J =5.2 Hz, 1H), 8.40 -8.37 (m, 2H), 8.14 -8.13(m, 1H), 8.11 -8.08 (m, 2H), 8.01(d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.88 -7.87 (m, 1H),7.46 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.23 -4.21(m, 2H), 3.06 -3.04 (m, 2H), 2.73 (s,3H), 2.63 -2.50 (m, 1H), 2.26 -2.23 (m,1H), 1.66 (s, 3H) ppm
249 (3R)-3-氰基-3-甲基-N-[2-[[4-[6-(2-甲基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]茚满-5-甲酰胺 510.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.84 (d, J= 5.2Hz, 1H), 8.36 (d, J = 5.2 Hz, 2H),8.08 (d, J = 3.2 Hz, 3H), 7.93 (s,1H),7.83 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.45 (d, J =8.0 Hz, 1H), 4.20 (s, 2H), 3.05 -3.02 (m,2H), 2.70 (s, 3H), 2.62 -2.58 (m, 1H),2.25 -2.20 (m, 1H), 1.63 (s, 3H) ppm
222 3-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)-N-[2-[[4-[6-(2-甲基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代乙基]苯甲酰胺 502.9 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.53 (s,1H), 8.95 -8.89 (m, 2H), 8.41 -8.37 (m,2H), 8.15 -8.10 (m, 3H), 7.92 (s, 1H),7.74 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.58 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.44 -7.42 (m, 1H), 4.73 -4.70 (m, 1H), 4.23 (d, J = 5.6 Hz, 2H),3.47 (d, J =5.2 Hz, 2H), 2.75 (s, 3H),1.28 (s, 6H) ppm
230 3-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)-N-[2-[[4-[6-(6-甲基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]苯甲酰胺 503.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.56 -12.53 (m, 1H), 9.18 (s, 1H), 8.94 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 8.50 (s,1H), 8.39 (d, J =6.0 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.17 -8.06(m, 2H), 7.92 (s, 1H), 7.74 (d, J = 7.6Hz, 1H), 7.58 (d, J = 8.0 Hz, 1H),7.46-7.39 (m, 1H), 4.77 -4.65 (m, 1H), 4.22(d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.47 (d, J = 4.8Hz, 2H), 2.63 (s, 3H), 1.28 (s, 6H)ppm.
118 N-[2-[[4-[6-(6-氰基-2-吡啶基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-异丙基磺酰基-苯甲酰胺 547.0 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.58 (brs, 1H), 9.33 -9.30 (m, 1H), 8.90 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.33 -8.31(m, 1H),8.30 -8.24 (m, 2H), 8.16 -8.04(m, 5H), 7.86 -7.81 (m, 1H), 4.27 (d, J =5.6 Hz, 2H), 3.54 -3.47 (m, 1H), 1.20(d, J = 6.8 Hz, 6H) ppm
119 3-异丙基磺酰基-N-[2-[[4-[6-(2-甲氧基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]苯甲酰胺 553.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.60 (s,1H), 9.35 -9.30 (m, 1H), 8.82 (d, J =4.8 Hz, 1H), 8.40 -8.37 (m, 2H), 8.30 -8.27(m, 1H), 8.22 (d, J = 5.2 Hz, 1H),8.16 -8.05 (m, 4H), 7.86 -7.81 (m, 1H),4.27 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.05 (s, 3H),3.55 -3.48 (m,1H), 1.20 (d, J = 6.8 Hz,6H) ppm
121 3-异丙基磺酰基-N-[2-[[4-[6-(2-甲氧基嘧啶-4-基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]苯甲酰胺 537.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.87 (d, J= 4.0 Hz, 1H), 8.46 -8.30 (m, 3H), 8.24(d, J = 6.4 Hz, 1H), 8.14 -8.01 (m, 4H),7.84-7.80 (m, 1H), 4.24 (s, 2H), 3.49 -3.41 (m, 1H), 2.73 (s, 3H), 1.17 (d, J =6.0 Hz, 6H) ppm
实施例110. 发明化合物的制备
类似于用于制备化合物 17的那些使用标准的化学操作和程序制备在表9中的以下化合物。
表9.
# 名称 LC-MS(m/z) 1H NMR
269 (S)-4-氰基-8-氟-N-(2-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 481.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.62 -12.30 (m, 1H), 9.18 (m, 1H), 8.03 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.70 (m, 1H), 7.66 (s,1H), 7.52 - 7.44 (m, 2H), 7.34 (m, 1H),6.93 - 6.87 (m, 1H), 5.07 - 4.80 (m, 2H),4.28 - 4.19 (m, 3H), 3.88 (d, J = 11.6Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 1.71 (s, 3H) ppm
270 (R)-4-氰基-8-氟-N-(2-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 481.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.76 -12.26 (m, 1H), 9.18 (m, 1H), 8.04 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.71 (m, 1H), 7.67 (s,1H), 7.53 - 7.45 (m, 2H), 7.35 (m, 1H),6.97 - 6.85 (m, 1H), 5.04 - 4.77 (m, 2H),4.29 - 4.20 (m, 3H), 3.89 (d, J = 11.6Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 1.71 (s, 3H) ppm
278 (S)-5-氟-N-(2-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-5-甲基-1,3,4,5-四氢苯并[c]氧杂䓬-7-甲酰胺 470.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.44 (m,1H), 9.00 - 9.00 (m, 1H), 8.06 (d, J =1.6 Hz, 1H), 7.80 - 7.77 (m, 1H), 7.67(s, 1H), 7.51 - 7.44 (m, 2H), 7.40 -7.30 (m, 2H), 6.92 - 6.89 (m, 1H), 4.91 -4.68 (m, 2H), 4.20 (d, J = 5.2 Hz, 2H),4.06 - 3.90 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.44 -2.35 (m, 1H), 2.23 - 1.99 (m, 1H), 1.77(d, J = 23.2 Hz, 3H) ppm
279 (R)-5-氟-N-(2-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-5-甲基-1,3,4,5-四氢苯并[c]氧杂䓬-7-甲酰胺 470.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.44 (s,1H), 9.02 - 8.99 (m, 1H), 8.06 (d, J =1.6 Hz, 1H), 7.80 - 7.78 (m, 1H), 7.67(s, 1H), 7.54 - 7.44 (m, 2H), 7.39 -7.29 (m, 2H), 6.92 - 6.90 (m, 1H), 4.89 -4.67 (m, 2H), 4.20 (d, J = 4.4 Hz, 2H),4.08 - 3.88 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.43 -2.35 (m, 1H), 2.20 - 2.04 (m, 1H), 1.77(d, J = 23.2 Hz, 3H) ppm
280 (R)-8-氟-4-羟基-N-(2-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 472.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.67 -12.20 (m, 1H), 9.09 - 8.98 (m, 1H),8.46 (s, 1H), 8.01 (d, J = 1.2 Hz, 1H),7.66 (s, 1H), 7.55 (m, 1H), 7.51 - 7.44(m, 2H), 7.34 (m, 1H), 6.90 (m, 1H), 6.57(s, 1H), 5.46 (s, 1H), 4.87 - 4.68 (m,2H), 4.28 - 4.10 (m, 2H), 3.80 (s, 3H),3.72 - 3.66 (m, 1H), 3.62 - 3.56 (m,1H), 1.49 - 1.37 (m, 3H) ppm
303 (S)-4-氟-4-甲基-N-(2-氧代-2-((4-苯基噻唑-2-基)氨基)乙基)异色满-6-甲酰胺 426.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.46 (s,1H), 9.08 - 9.05 (m, 1H), 8.19 (s, 1H),7.91 - 7.87 (m, 3H), 7.64 (s, 1H), 7.45 -7.41 (m, 2H), 7.34 - 7.27 (m, 2H), 4.87- 4.83 (m, 1H), 4.75 - 4.70 (m, 1H), 4.22- 4.17 (m, 2H), 4.15 - 4.04 (m, 1H),3.88 - 3.79 (m, 1H), 1.70 - 1.65 (m, 3H)ppm
309 (S)-4-氟-N-((S)-1-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 470.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.46 (s,1H), 8.88 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 8.26 (s,1H), 7.93 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.67 (s,1H), 7.52 - 7.46 (m, 2H), 7.37 - 7.26(m, 2H), 6.91-6.89 (m, 1H), 4.92 - 4.82(m, 1H), 4.78 - 4.68 (m, 2H), 4.08 (m,1H), 3.91 - 3.82 (m, 1H), 3.81 (s, 3H),1.79 - 1.62 (m, 3H), 1.49 (d, J = 7.2Hz, 3H) ppm
311 4-氰基-N-(2-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酰胺 462.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.49 (s,1H), 9.77 - 9.56 (m, 1H), 9.17 (s, 1H),8.22 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.95 - 7.93 (m,1H),7.67 (s, 1H), 7.52 - 7.44 (m, 3H),7.39 - 7.31 (m, 1H), 6.92 - 6.90 (m, 1H),4.40 (d, J = 3.6 Hz, 2H), 4.24 - 4.22(m, 2H), 4.05 - 4.01 (m, 1H), 3.81 (s,3H), 3.67 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 1.88(s, 3H) ppm
312 (S)-4-氟-N-(2-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 456.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, MeOD-d4) δ = 8.22 (s,1H), 7.90-7.89 (m, 1H), 7.51 - 7.46 (m,2H), 7.41 (s, 1H), 7.34 - 7.25 (m, 2H),6.90-6.87 (m, 1H), 4.86 - 4.77 (m, 2H),4.34 (s, 2H), 4.14 - 4.04 (m, 1H), 3.96 -3.87 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 1.82 - 1.65(m, 3H) ppm
313 4-羟基-N-(2-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 454.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 (s,1H), 8.91 (m, 1H), 8.13 (d, J = 1.6 Hz,1H), 7.72 (m, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.52 -7.44 (m, 2H), 7.34 (m, 1H), 7.13 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.90 (m, 1H), 5.30 (s,1H), 4.81 - 4.68 (m, 2H), 4.19 (m, 2H),3.80 (s, 3H), 3.71 - 3.57 (m, 2H), 1.43(s, 3H) ppm
314 (S)-N-(2-((4-(3-氰基-5-氟苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺 469.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.56 (s,1H), 9.11 (m, 1H), 8.21 (d, J = 12.8Hz, 2H), 8.06 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.00(s, 1H), 7.89 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.83(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 8.0 Hz,1H), 4.89 - 4.81 (m, 1H), 4.77 - 4.68(m, 1H), 4.28 - 4.15 (m, 2H), 4.08 (m,1H), 3.91 - 3.76 (m, 1H), 1.78 - 1.57(m, 3H) ppm
315 (S)-N-(2-((4-(3-氰基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺 451.1 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.51 ( s,1H), 9.09 - 9.06(m, 1H), 8.35 - 8.31(m, 1H), 8.26 - 8.19 (m, 2H), 7.92 - 7.86(m, 2H), 7.82 - 7.78 (m, 1H), 7.69 -7.63 (m, 1H), 7.29 (d, J = 8.0 Hz, 1H),4.89 - 4.80 (m, 1H), 4.77 - 4.69 (m,1H), 4.25 - 4.20 (m, 2H), 4.12 - 4.03 (m,1H), 3.90 - 3.78 (m, 1H), 1.72 - 1.65 (m,3H) ppm
316 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(3-氟-5-(氧杂环丁烷-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 507.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.60 -12.39 (m, 1H), 9.08 - 9.07 (m, 1H),8.12 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.87 - 7.79 (m,3H), 7.65 - 7.62 (m, 1H), 7.29 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.21 - 7.19 (m, 1H), 5.80 -5.76 (m, 1H), 4.88 - 4.79 (m, 2H), 4.72- 4.70 (m, 1H), 4.59 - 4.50 (m, 1H), 4.24- 4.20 (m, 3H), 3.86 (d, J = 11.6 Hz,1H), 3.07 - 3.00 (m, 1H), 2.59 - 2.56 (m,1H), 1.69 (s, 3H) ppm
322 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(3-氟苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 451 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.80 -12.38 (m, 1H), 9.10 - 9.08 (m, 1H),8.12 (s, 1H), 7.88 - 7.85 (m, 1H), 7.77 -7.75 (m, 2H), 7.69 (br d, J = 10.4 Hz,1H), 7.51 - 7.45 (m, 1H), 7.29 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.19 - 7.13 (m, 1H), 4.93- 4.81 (m, 2H), 4.28 - 4.20 (m, 3H), 3.86(br d, J = 11.6 Hz, 1H), 1.69 (s, 3H)ppm
323 (R)-4-氰基-4-甲基-N-(2-氧代-2-((4-苯基噻唑-2-基)氨基)乙基)异色满-6-甲酰胺 433.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.46 (brs, 1H), 9.09 - 9.06 (m, 1H), 8.13 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.92 - 7.86 (m, 3H), 7.64(s, 1H), 7.46 - 7.41 (m, 2H), 7.35 -7.28 (m, 2H), 4.93 - 4.81 (m, 2H), 4.24 -4.21 (m, 3H), 3.86 (d, J = 11.6 Hz,1H), 1.69 (s, 3H) ppm
324 (S)-5-氟-N-(2-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-5-甲基-2,3,4,5-四氢苯并[b]氧杂䓬-7-甲酰胺 470.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 10.82 - 10.36(m, 1H), 7.98 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.87(m, 1H), 7.44 - 7.37 (m, 2H), 7.35 - 7.29(m, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.09 (d, J = 7.6Hz, 2H), 6.88 (m, 1H), 4.45 (d, J = 4.8Hz, 2H), 4.44 - 4.39 (m, 1H), 3.85 (s,3H), 3.70 - 3.60 (m, 1H), 2.29 - 2.15 (m,2H), 2.11 - 1.98 (m, 1H), 1.94 - 1.83(m, 1H), 1.75 - 1.68 (m, 3H) ppm
325 (R)-5-氟-N-(2-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-5-甲基-2,3,4,5-四氢苯并[b]氧杂䓬-7-甲酰胺 470.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 10.78 - 10.32(m, 1H), 7.98 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.87(m, 1H), 7.47 - 7.36 (m, 2H), 7.35 - 7.29(m, 1H), 7.19 - 7.13 (m, 1H), 7.12 -7.04 (m, 2H), 6.93 - 6.83 (m, 1H), 4.50 -4.44 (m, 2H), 4.44 - 4.39 (m, 1H), 3.85(s, 3H), 3.72 - 3.59 (m, 1H), 2.32 - 2.14(m, 2H), 2.11 - 1.98 (m, 1H), 1.95 -1.83 (m, 1H), 1.75 - 1.68 (m, 3H) ppm
327 (S)-N-((R)-1-((4-(3-(二氟甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-3-甲氧基-1-氧代丙烷-2-基)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺 520.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.89 - 8.87(m, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.24 (s, 1H),8.12 (s, 1H), 8.08 - 8.06 (m, 1H), 7.93 -7.91 (m, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.62 - 7.56(m, 1H), 7.54 - 7.49 (m, 1H), 7.29 - 7.26(m, 1H), 7.24 - 6.92 (m, 1H), 4.99 -4.98 (m, 1H), 4.90 - 4.67 (m, 2H), 4.14 -4.00 (m, 1H), 3.90 - 3.73 (m, 3H), 3.33(s, 3H), 1.75 - 1.62 (m, 3H) ppm
333 (R)-4-氰基-N-(1-((4-(3-(二氟甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基甲酰基)环丙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 509.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.53 -12.21 (m, 1H), 9.16 (s, 1H), 8.21 -8.16 (m, 1H), 8.14 - 8.08 (m, 1H), 8.07 -8.02 (m,1H), 7.97 - 7.92 (m, 1H), 7.78- 7.72 (m, 1H), 7.58 - 7.53 (m, 1H), 7.52- 7.47 (m, 1H), 7.30 (d, J = 8.0 Hz,1H), 7.20 - 6.90 (m,1H), 4.94 - 4.82 (m,2H), 4.25 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.85(d, J = 11.2 Hz, 1H), 1.71 (s, 3H), 1.64- 1.55 (m, 2H), 1.31 - 1.20 (m, 2H) ppm
334 (S)-4-氟-N-((R)-1-((4-(3-氟-5-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 488.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.48 (s,1H), 8.87 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 8.25 (s,1H), 7.92 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.79 (s,1H), 7.37 - 7.23 (m, 3H), 6.81-6.77 (m,1H), 4.90 - 4.80 (m, 1H), 4.78 - 4.66 (m,2H), 4.11-4.04 (m, 1H), 3.90 - 3.76 (m,4H), 1.74 - 1.61 (m, 3H), 1.49 (d, J =7.2 Hz, 3H)ppm
335 (R)-4-氰基-8-甲氧基-N-(2-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 493.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 10.80 (s,1H), 7.44 (s, 1H), 7.39 - 7.37 (m, 3H),7.33 - 7.31 (m, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.16(s, 1H), 6.89 - 6.87 (m, 1H), 4.84 -4.73 (m, 2H), 4.32 - 4.29 (m, 2H), 4.07(d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.88 (d, J = 11.2Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 1.72(s, 3H) ppm
336 (R)-4-氰基-N-(2,2-二氟-1-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基甲酰基)环丙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 525.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.51 (s,1H), 9.40 (br s, 1H), 8.18 (d, J = 2.4Hz, 1H), 7.93 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.72(s, 1H), 7.49 - 7.43 (m, 2H), 7.35 -7.28 (m, 2H), 6.88 (m, 1H), 4.96 - 4.81(m, 2H), 4.24 (d, J = 11.2 Hz, 1H),3.89 - 3.83 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 2.93 -2.81 (m, 1H), 2.27 - 2.15 (m, 1H), 1.70(d, J = 5.2 Hz, 3H) ppm
337 (S)-4-氟-N-(2-((4-(3-氟-5-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 474.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.47 (s,1H), 9.06 (m, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.89(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.35 -7.24 (m, 3H), 6.79 (m, 1H), 4.91 - 4.78(m, 1H), 4.77 - 4.69 (m, 1H), 4.26 - 4.15(m, 2H), 4.07 (m, 1H), 3.91 - 3.76 (m,4H), 1.74 - 1.63 (m, 3H) ppm
339 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(7-氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 495.4 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 (s,1H), 9.08 - 9.05 (m, 1H), 8.12 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.87 - 7.86(m, 1H), 7.63 (s,1H), 7.39 - 7.35 (m, 2H), 7.29 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.16 (s, 2H), 4.92 - 4.81(m, 2H), 4.26 - 4.17 (m, 3H), 3.86 (d,J=11.2 Hz, 1H), 1.69 (s, 3H) ppm
341 (S)-N-(2-((4-(3-(二氟甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺 476.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.53 -12.48 (m, 1H), 9.08 - 9.06 (m, 1H),8.20 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.08 (d, J =7.6 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 8.0 Hz, 1H),7.77 (s, 1H), 7.59 - 7.57 (m, 2H), 7.29(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.26 - 7.09 (m,1H), 4.88 - 4.75 (m, 2H), 4.23 - 4.20 (m,2H), 4.08 (m, 1H), 4.05 - 3.83 (m, 1H),1.71 - 1.66 (m, 3H) ppm
344 3-(3-(二氟甲基)氧杂环丁烷-3-基)-N-(2-((4-(3-(二氟甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)苯甲酰胺 494.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, MeOD) δ = 8.51 (d, J =2.8 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 8.05 (d, J =7.2 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 8.0 Hz, 1H),7.75 (s, 1H), 7.60 - 7.45 (m, 4H), 7.41(d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.96 - 6.62 (m, 1H),6.50 - 6.17 (m, 1H), 5.09 - 5.00 (m,4H), 4.33 (s, 2H) ppm
352 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(7-氟-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 493.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 -12.39 (m, 1H), 9.07 (d, J = 5.6 Hz,1H), 8.12 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.89 -7.85 (m, 1H), 7.64 - 7.51 (m, 3H), 7.32 -7.26 (m, 1H), 4.94 - 4.81 (m, 2H), 4.73 -4.65 (m, 2H), 4.27 - 4.18 (m, 3H), 3.91- 3.84 (m, 1H), 3.31 - 3.27 (m, 2H), 1.72- 1.67 (m, 3H) ppm
353 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(4-氟-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 493.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.64 -12.22 (m, 1H), 9.08 - 9.5 (m, 1H), 8.12(s, 1H), 7.88 - 7.85 (m, 1H), 7.70 (s,1H), 7.3 - 7.28 (m, 1H), 7.22 - 7.21(m, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.95 - 4.79 (m,2H), 4.66 - 4.62 (m, 2H), 4.28 - 4.15(m, 3H), 3.88 - 3.85 (dm, 1H), 3.24 -3.22 (m, 2H), 1.69 (s, 3H) ppm
359 (R)-4-氰基-4-甲基-N-(2-((4-(3-((反)-氧杂环丁烷-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)异色满-6-甲酰胺 489.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.50 (s,1H), 9.09 - 9.07 (m, 1H), 8.13 (d, J =1.2 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.88 - 7.80(m, 2H), 7.68 (s, 1H), 7.47 - 7.42 (m,1H), 7.37- 7.35 (m, 1H), 7.29 (d, J = 8.4Hz, 1H), 5.80 - 5.75 (m, 1H), 4.92 -4.85 (m, 2H), 4.71 - 4.70 (m, 1H), 4.57 -4.55 (m, 1H), 4.24 - 4.22 (m, 3H), 3.87(d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.03 - 2.99 (m,1H), 2.61 - 2.60 (m, 1H), 1.69 (s, 3H)ppm
361 (R)-4-氰基-4-甲基-N-(2-((4-(3-((4R)-4-甲基氧杂环丁烷-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)异色满-6-甲酰胺 503.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, MeOD-d4) δ = 12.49 (s,1H), 9.08 - 9.05(m, 1H), 8.12 (d, J =2.0 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.88 - 7.81(m, 2H), 7.66 (s, 1H), 7.46 - 7.42 (m,1H), 7.35 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.30 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 5.67- 5.63 (m, 1H), 4.96- 4.81 (m, 3H), 4.24 - 4.21 (m, 3H), 3.88- 3.85 (m, 1H), 2.62 - 2.56 (m, 2H),1.69 (s, 3H), 1.48 (d, J = 6.0 Hz, 3H)ppm
365 (R)-4-氰基-4-甲基-N-(2-((4-(3-氧杂环丁烷-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)异色满-6-甲酰胺 489.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.50 (s,1H), 9.09 - 9.06 (m, 1H), 8.13 (d, J =1.2 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.88 - 7.85(m, 2H), 7.68 (s, 1H), 7.45 - 7.41 (m,1H), 7.37 - 7.35 (m, 1H), 7.29 (d, J =8.0 Hz, 1H), 5.80 - 5.76 (m, 1H), 4.88- 4.85 (m, 2H), 4.74 - 4.68 (m, 1H), 4.58- 4.53 (m, 1H), 4.24 - 4.21 (m, 3H),3.87 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.04 - 2.98(m, 1H), 2.60 - 2.58 (m, 1H), 1.69 (s,3H) ppm
371 (R)-4-氰基-4-甲基-N-(2-((4-(3-(氧杂环丁烷-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)异色满-6-甲酰胺 489.5 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.49 (s,1H), 9.08 - 9.07 (m, 1H), 8.12 (d, J =1.6 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.87 - 7.82(m, 2H), 7.68 (s, 1H), 7.47 - 7.43 (m,1H), 7.37 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.29 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 5.80 - 5.76 (m, 1H),4.88 - 4.85 (m, 2H), 4.72 - 4.68 (m, 1H),4.58 - 4.53 (m, 1H), 4.24 - 4.21 (m,3H), 3.87 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.05 -2.98 (m, 1H), 2.58 - 2.55 (m, 1H), 1.69(s, 3H) ppm
375 N-(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)螺[异色满-4,2'-氧杂环丁烷]-6-甲酰胺 517.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.56 (s,1H), 9.10 - 9.09 (m, 1H), 8.82 (d, J =1.6 Hz, 1H), 8.47 (d, J = 1.6 Hz, 1H),8.22 - 8.20 (m, 1H), 7.82 - 7.78 (m,1H), 7.78 (s, 1H), 7.71 (d, J = 8.4 Hz,1H), 7.48 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.19 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 7.2 Hz,1H), 4.79 - 4.59 (m, 4H), 4.30 - 4.17(m, 2H), 4.11 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.98(d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.53 (s, 3H),2.96 - 2.86 (m, 1H), 2.74 - 2.67 (m, 1H)ppm
377 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(3-氟-5-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 481.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.48 (s,1H), 9.08 - 9.06 (m, 1H), 8.12 (s, 1H),7.92 - 7.73 (m, 2H), 7.39 - 7.18 (m, 3H),6.80 - 6.77 (m, 1H), 5.03 - 4.74 (m,2H), 4.31 - 4.10 (m, 3H), 3.89 - 3.84 (m,1H), 3.82 (s, 3H), 1.69 (s, 3H) ppm
379 (R)-N-(2-((4-(3-(1-乙酰基氮杂环丁烷-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氰基-4-甲基异色满-6-甲酰胺 530.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, MeOD) δ = 8.12 (d, J =1.6 Hz, 1H), 7.97 - 7.92 (m, 1H), 7.90- 7.85 (m, 1H), 7.82 - 7.77 (m, 1H), 7.45- 7.43 (m, 1H), 7.42 - 7.37 (m, 1H),7.32 - 7.24 (m, 2H), 4.68 - 4.61 (m, 3H),4.45 - 4.38 (m, 1H), 4.32 (s, 2H), 4.30- 4.24 (m, 1H), 4.19 (d, J = 11.6 Hz,1H), 4.08 - 4.01 (m, 1H), 3.98 - 3.88(m, 2H), 1.93 (s, 3H), 1.75 (s, 3H) ppm
382 N-(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)螺[色满-4,3'-氧杂环丁烷]-6-甲酰胺 517.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.84 -12.22 (m, 1H), 8.96 - 8.93 (m, 1H),8.82 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.41 (d, J =2.0 Hz, 1H), 8.22 - 8.19 (m, 1H), 7.79(s, 1H), 7.75 - 7.68 (m, 2H), 7.48 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 8.8 Hz,1H), 6.63 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.83 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 4.56 (d, J = 6.0 Hz,2H), 4.21 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.18 -4.10 (m, 2H), 3.53 (s, 3H), 2.35 - 2.30(m, 2H) ppm
388 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(3-((S)-2,2-二氟环丙基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 509.4 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.47 (s,1H), 9.09 - 9.06 (m, 1H), 8.13 (d, J =1.2 Hz, 1H), 7.88 - 7.86 (m, 1H), 7.81 -7.78 (m, 2H), 7.68 (s, 1H), 7.41 - 7.38(m, 1H), 7.30 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.25(d, J = 7.6Hz, 1H), 4.93 - 4.81 (m,2H), 4.24 - 4.19 (m, 3H), 3.88 (d, J =11.6 Hz, 1H), 3.09 - 3.02 (m, 1H), 2.02- 1.94 (m, 2H), 1.69 (s, 3H) ppm
389 (S)-4-氟-4-甲基-N-(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)异色满-6-甲酰胺 507.1 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.70 -12.45 (m, 1H), 9.14 - 9.01 (m, 1H),8.89 - 8.78 (m, 1H), 8.29 - 8.15 (m, 2H),7.95 - 7.85 (m, 1H), 7.83 - 7.76 (m,1H), 7.75 - 7.68 (m, 1H), 7.55 - 7.43 (m,1H), 7.35 - 7.23 (m, 1H), 6.71 - 6.56(m, 1H), 4.91 - 4.82 (m, 1H), 4.80 - 4.68(m, 1H), 4.30 - 4.15 (m, 2H), 4.14 -4.02 (m, 1H), 3.91 - 3.78 (m, 1H), 3.58 -3.49 (m, 3H), 1.79 - 1.61 (m, 3H) ppm
391 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(3-((R)-2,2-二氟环丙基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 509.3 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.46 (s,1H), 9.08 - 9.07 (m, 1H), 8.12 (d, J =1.2 Hz, 1H), 7.88 - 7.85 (m, 1H), 7.80 -7.78 (m, 2H), 7.68 (s, 1H), 7.40 - 7.36(m, 1H), 7.30 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.25(d, J = 7.6Hz, 1H), 4.92 - 4.81 (m,2H), 4.24 - 4.21 (m, 3H), 3.88 (d, J =11.6 Hz, 1H), 3.08 - 3.05 (m, 1H), 2.01- 1.94 (m, 2H), 1.69 (s, 3H) ppm
394 4-氰基-N-(2-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-1,4-二甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-甲酰胺 476.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.39 (brs, 1H), 8.69 - 8.67 (m, 1H), 7.89 (s,1H), 7.74 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.66 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.5 - 7.47 (m, 2H), 7.37- 7.32 (m, 1H), 6.91 (d, J = 8.4 Hz, 1H),6.72 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.16 (s, 2H),3.81 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 3.41 (s, 2H),2.97 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 2.30 - 2.28(m, 1H), 2.08 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 1.72(s, 3H) ppm
397 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(6-甲氧基吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 464.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.50 (s,1H), 9.09 (m, 1H), 8.13 (d, J = 1.6 Hz,1H), 7.87 (m, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.81 -7.76 (m, 1H), 7.54 (d, J = 7.2 Hz, 1H),7.29 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.77 (d, J =8.0 Hz, 1H), 4.95 - 4.79 (m, 2H), 4.23(m, 2H), 4.21 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.87(d, J = 11.5 Hz, 1H), 1.69 (s, 3H) ppm
398 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(3-(二氟甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 483.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.59 -12.43 (m, 1H), 9.09 (m, 1H), 8.12 (s,2H), 8.07 (br d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.87(m, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.62 - 7.56 (m,1H), 7.55 - 7.49 (m, 1H), 7.29 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.25 - 6.94 (m, 1H), 4.96- 4.79 (m, 2H), 4.29 - 4.22 (m, 2H), 4.22- 4.16 (m, 1H), 3.87 (d, J = 11.6 Hz,1H), 1.69 (s, 3H) ppm
399 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(4-氟-3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 481.1 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.55 -12.46 (m, 1H), 9.16 - 9.01 (m, 1H),8.16 - 8.09 (m, 1H), 7.93 - 7.83 (m, 1H),7.71 - 7.61 (m, 2H), 7.52 - 7.44 (m,1H), 7.34 - 7.21 (m, 2H), 4.96 - 4.81 (m,2H), 4.28 - 4.16 (m, 3H), 3.97 - 3.81(m, 4H), 3.31 - 3.30 (m, 1H), 1.70 (s,3H) ppm
400 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(2-甲氧基吡啶-4-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 464.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.51 -12.39 (m, 1H), 9.11 - 9.08 (m, 1H),8.22 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H),7.99 (s, 1H), 7.88 (d, J = 8.0 Hz, 1H),7.48 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.30 - 7.27 (m,2H), 4.93 - 4.81 (m, 2H), 4.27 - 4.19(m, 3H), 3.88 - 3.85 (m, 4H), 1.69 (s,3H) ppm
401 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 463.2 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.46 (s,1H), 9.08 - 9.06 (m, 1H), 8.12 (d, J =1.2 Hz, 1H), 7.88 - 7.85 (m, 1H), 7.67(s, 1H), 7.51 - 7.42 (m, 2H), 7.38 -7.25 (m, 2H), 6.90 - 6.88 (m, 1H), 5.00 -4.77 (m, 2H), 4.30 - 4.13 (m, 3H), 3.86(d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 1.69(s, 3H) ppm
402 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(2-氟-3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 481.1 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.50 (s,1H), 9.11 - 9.07 (m, 1H), 8.12 (d, J =1.6 Hz, 1H), 7.88 - 7.85 (m, 1H), 7.59 -7.51 (m, 2H), 7.28 (d, J = 8.0 Hz, 1H),7.24 - 7.18 (m, 1H), 7.18 - 7.11 (m, 1H),4.94 - 4.75 (m, 2H), 4.26 - 4.12 (m,3H), 3.87 (s, 3H), 3.84 (s, 1H), 1.68 (s,3H) ppm
415 4-氰基-N-(2-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-甲酰胺 462.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.37 (brs, 1H), 8.61 - 8.58 (m, 1H), 7.86 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.60 - 7.57(m, 1H), 7.50 - 7.45 (m, 2H), 7.36 -7.33 (m, 1H), 6.91 - 6.88 (m, 1H), 6.78(s, 1H), 6.57 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.18- 4.12 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.40 - 3.32(m, 2H), 2.23 - 2.16 (m, 1H), 2.01 -1.94 (m, 1H), 1.71 (s, 3H) ppm
422 (S)-4-氰基-N-(2-((4-(3-(3-氟氧杂环丁烷-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基色满-6-甲酰胺 507 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.50 (s,1H), 8.95 - 8.92 (m, 1H), 8.10 - 8.08(m, 2H), 7.95 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.82 -7.77 (m, 2H), 7.56 - 7.49 (m, 2H), 6.96(d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.03 (d, J = 8.8 Hz,1H), 4.98 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 4.92(d, J=8.4 Hz, 1H), 4.40 - 4.33 (m, 1H),4.30 - 4.24 (m, 1H), 4.22 - 4.13 (m,2H), 2.46 - 2.41 (m, 1H), 2.24 - 2.17 (m,1H), 1.79 (s, 3H) ppm
423 (S)-4-氰基-4-甲基-N-(2-((4-(3-(氧杂环丁烷-3-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)色满-6-甲酰胺 489.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.46 (brs, 1H), 8.94 - 8.91 (m, 1H), 8.09 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.82 - 7.79(m, 2H), 7.68 (s, 1H), 7.44 - 7.40 (m,1H), 7.33 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.96 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 4.99 - 4.96 (m, 2H),4.67 - 4.63 (m, 2H), 4.39 - 4.24 (m, 3H),4.19 - 4.13 (m, 2H), 2.46 - 2.42 (m,1H), 2.24 - 2.17 (m, 1H), 1.79 (s, 3H)ppm
428 (S)-4-氰基-N-(2-((4-(3-((R)-2,2-二氟环丙基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基色满-6-甲酰胺 509 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.48 -12.40 (m, 1H), 8.95 - 8.92 (m, 1H),8.09 (d, J = 2.0Hz, 1H), 7.82 - 7.80 (m,3H), 7.68 (s, 1H), 7.45 - 7.38 (m, 1H),7.25 (d, J =8.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 8.4Hz, 1H), 4.36 - 4.17 (m, 4H), 3.08 -3.05 (m, 1H), 2.46 - 2.42 (m, 1H), 2.21 -2.19 (m, 1H), 2.01 - 1.97 (m, 2H), 1.19(s, 3H) ppm
429 (S)-4-氰基-N-(2-((4-(3-((S)-2,2-二氟环丙基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基色满-6-甲酰胺 509 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.50 -12.39 (m, 1H), 8.95 - 8.92 (m, 1H),8.09 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.82 - 7.80 (m,3H), 7.68 (s, 1H), 7.42 - 7.38 (m, 1H),7.25 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J =8.8Hz, 1H), 4.36 - 4.17 (m, 4H), 3.08 -3.05 (m, 1H), 2.47 - 2.43 (m, 1H), 2.21 -2.19 (m, 1H), 2.01 - 1.95 (m, 2H), 1.79(s, 3H) ppm
431 (S)-4-氰基-N-(2-((4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基色满-6-甲酰胺 463 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.44 (s,1H), 8.99 - 8.82 (m, 1H), 8.09 (d, J =2.0 Hz, 1H), 7.86 - 7.77 (m, 1H), 7.66(s, 1H), 7.53 - 7.42 (m, 2H), 7.39 -7.27 (m, 1H), 7.00 - 6.84 (m, 2H), 4.41 -4.12 (m, 4H), 3.80 (s, 3H), 2.46 - 2.41(m, 1H), 2.27 - 2.13 (m, 1H), 1.80 (s,3H) ppm
433 (S)-4-氰基-4-甲基-N-(2-((4-(2-甲基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)色满-6-甲酰胺 514.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.54 (brs, 1H), 8.95 - 8.93 (m, 1H), 8.82 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 8.22 - 8.19 (m, 1H), 8.09(d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.83 - 7.81 (m,1H), 7.78 (s, 1H), 7.71 (d, J = 8.4 Hz,1H), 7.48 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.97 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 7.2 Hz,1H), 4.36 - 4.19 (m, 4H), 3.52 (s, 3H),2.46 - 2.42 (m, 1H), 2.23 - 2.18 (m, 1H),1.80 (s, 3H) ppm
440 (S)-4-氰基-4-甲基-N-(2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)色满-6-甲酰胺 510 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.49 (br s,1H), 9.03 - 8.87 (m, 1H), 8.74 - 8.63(m, 2H), 8.31 (s, 1H), 8.10 (d, J = 2.0Hz, 1H), 8.02 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.86- 7.73 (m, 5H), 7.65 - 7.53 (m, 1H), 6.97(d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.42 - 4.15 (m,4H), 2.48 - 2.40 (m, 1H), 2.26 - 2.16 (m,1H), 1.80 (s, 3H). ppm
442 (S)-4-氰基-N-(2-((4-(3-(二氟甲基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基色满-6-甲酰胺 483.1 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.49 (br s,1H), 8.95 - 8.93 (m, 1H), 8.18 - 8.02(m, 3H), 7.85 - 7.73 (m, 2H), 7.64 - 7.47(m, 2H), 7.27 - 6.91 (m, 2H), 4.42 -4.25 (m, 2H), 4.23 - 4.11 (m, 2H), 2.45 -2.42 (m, 1H), 2.25 - 2.21 (m, 1H), 1.81(s, 3H) ppm
305 (R)-N-(2-((4-(3-(3-氧杂双环[4.1.0]庚烷-6-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氰基-4-甲基异色满-6-甲酰胺 529.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.61 -12.28 (m, 1H), 9.08 - 9.07 (m, 1H),8.13 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.92 - 7.80 (m,2H), 7.71 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.66 (s,1H), 7.36 - 7.35 (m, 1H), 7.30 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 7.6 Hz, 1H),4.96 - 4.79 (m, 2H), 4.28 - 4.17 (m, 3H),4.02 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 3.92 - 3.78(m, 2H), 3.53 - 3.42 (m, 2H), 2.13 - 1.95(m, 2H), 1.70 (s, 3H), 1.44 - 1.34 (m,1H), 1.04 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 0.91 -0.89 (m, 1H) ppm
340 (R)-4-氰基-4-甲基-N-(2-((4-(3-(4-甲基氧杂环丁烷-2-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)异色满-6-甲酰胺 503.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.48 (s,1H), 9.08 (m, 1H), 8.13 (d, J = 1.6 Hz,1H), 7.94 (s, 1H), 7.90 - 7.76 (m, 2H),7.66 (s, 1H), 7.51 - 7.41 (m, 1H), 7.41- 7.34 (m, 1H), 7.29 (d, J = 8.0 Hz, 1H),5.63 (m, 1H), 5.03 - 4.72 (m, 3H), 4.36- 4.09 (m, 3H), 3.86 (d, J = 11.6 Hz,1H), 3.05 (m, 1H), 2.17 (m, 1H), 1.69(s, 3H), 1.39 (d, J = 6.0 Hz, 3H) ppm
281 (S)-4-(2-(2-(4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)哌啶-1-甲酸甲酯 490.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.02 - 8.99(m, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.87 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.27 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.79(s, 1H), 6.04 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.88- 4.81 (m, 1H), 4.78 - 4.68 (m, 1H), 4.20- 3.97 (m, 5H), 3.89 - 3.78 (m, 1H),3.59 (s, 3H), 2.94 - 2.75 (m, 3H), 1.91(d, J = 10.8 Hz, 2H), 1.74 - 1.62 (m,3H), 1.52 - 1.42 (m, 2H) ppm
283 (S)-3-(2-(2-((S)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)哌啶-1-甲酸乙酯 505.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.31 (s,1H), 9.04 - 9.01 (m, 1H), 8.18 (s, 1H),7.89 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.29 (d, J =8.0 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.87 - 4.83(m, 1H), 4.75 - 4.70 (m, 1H), 4.24 - 4.20(m, 1H), 4.17 - 4.15 (m, 2H), 4.10 -4.02 (m, 3H), 3.97 - 3.95 (m, 1H), 3.88 -3.79 (m, 1H), 2.81 - 2.70 (m, 3H), 2.06- 2.03 (m, 1H), 1.71 - 1.58 (m, 5H), 1.51- 1.40 (m, 1H), 1.20 (m, 3H) ppm
284 (S)-3-(2-(2-((R)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)哌啶-1-甲酸乙酯 505.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.30 (s,1H), 9.03 - 9.00 (m, 1H), 8.18 (s, 1H),7.88 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.28 (d, J =8.4 Hz, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.87 - 4.82(m, 1H), 4.74 - 4.69 (m, 1H), 4.23 - 4.19(m, 1H), 4.16 - 4.11 (m, 2H), 4.10 -4.01 (m, 3H), 3.97 - 3.90 (m, 1H), 3.88 -3.76 (m, 1H), 2.82 - 2.70 (m, 3H), 2.07- 2.02 (m, 1H), 1.70 - 1.60 (m, 5H), 1.50- 1.40 (m, 1H), 1.19 (m, 3H) ppm
297 (S)-4-氟-4-甲基-N-(2-氧代-2-((4-(四氢-2H-吡喃-4-基)噻唑-2-基)氨基)乙基)异色满-6-甲酰胺 434.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, MeOD-d4) δ = 8.18 (s,1H), 7.88-7.85 (m, 1H), 7.25 (d, J =8.0 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 0.8 Hz, 1H),4.88-4.87 (m, 1H), 4.82 - 4.75 (m, 1H),4.28 (s, 2H), 4.11 - 4.03 (m, 1H), 4.03 -3.97 (m, 2H), 3.93 - 3.82 (m, 1H),3.57-3.51 (m, 2H), 2.93-2.84 (m, 1H),1.96 - 1.87 (m, 2H), 1.83 - 1.66 (m,5H) ppm
301 (S)-3-(2-(2-((R)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)哌啶-1-甲酸甲酯 491.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.31 (brs, 1H), 9.03 - 9.01 (m, 1H), 8.18 (s,1H), 7.88 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.28 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.86 -4.82 (m, 1H), 4.74 - 4.73 (m, 1H), 4.26 -4.18 (m, 1H), 4.16 - 4.14 (m, 2H), 4.10- 4.03 (m, 1H), 3.99 - 3.90 (m, 1H), 3.88- 3.78 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 2.85 -2.70 (m, 3H), 2.05 (d, J = 12.4 Hz, 1H),1.70 - 1.57 (m, 5H), 1.50 - 1.44 (m,1H) ppm
302 (S)-3-(2-(2-((S)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)哌啶-1-甲酸甲酯 491.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.31 (brs, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.18 (s, 1H),7.88 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.28 (d, J =7.6 Hz, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.86 - 4.83(m, 1H), 4.78 - 4.74 (m, 1H), 4.23 - 4.22(m, 1H), 4.15 (s, 2H), 4.10 - 4.04 (m,1H), 3.96 - 3.95 (m, 1H), 3.88 - 3.79 (m,1H), 3.60 (s, 3H), 2.80 - 2.71 (m, 3H),2.06 - 2.03 (m, 1H), 1.75 - 1.57 (m, 5H),1.47 - 1.44 (m, 1H) ppm
354 (R)-3-(2-(2-((S)-4-氰基-4-甲基异色满-6-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)哌啶-1-甲酸甲酯 498.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d<sub>6</sub>) δ = 12.34 (s,1H), 9.07 - 9.03 (m, 1H), 8.12 (d, <i>J</i> =1.2 Hz, 1H), 7.88 - 7.85 (m, 1H), 7.29(d, <i>J</i> = 8.4 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.95- 4.79 (m, 2H), 4.31 - 4.12 (m, 4H), 4.03- 3.83 (m, 2H), 3.61 (s, 3H), 2.91 -2.65 (m, 3H), 2.05 (d, <i>J</i> = 12.0 Hz,1H), 1.76 - 1.57 (m, 5H), 1.54 - 1.39 (m,1H) ppm
355 (R)-3-(2-(2-((R)-4-氰基-4-甲基异色满-6-甲酰胺基)乙酰胺基)噻唑-4-基)哌啶-1-甲酸甲酯 498.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.33 (s,1H), 9.07 - 9.03 (m, 1H), 8.11 (d, J =1.6 Hz, 1H), 7.88 - 7.85 (m, 1H), 7.29(d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.96- 4.78 (m, 2H), 4.30 - 4.12 (m, 4H), 4.05- 3.81 (m, 2H), 3.61 (s, 3H), 2.92 -2.65 (m, 3H), 2.11 - 1.98 (m, 1H), 1.78 -1.57 (m, 5H), 1.54 - 1.39 (m, 1H) ppm
294 (R)-N-(2-((4-(3-((1R,6S)-3-氧杂双环[4.1.0]庚烷-6-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氰基-4-甲基异色满-6-甲酰胺 529.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.68 -12.36 (m, 1H), 9.08 (m, 1H), 8.13 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.90 - 7.81 (m, 2H), 7.74- 7.70 (m, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.36 (m,1H), 7.30 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.24 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 4.98 - 4.80 (m, 2H),4.27 - 4.19 (m, 3H), 4.05 - 3.99 (m, 1H),3.90 - 3.79 (m, 2H), 3.52 - 3.41 (m,2H), 2.12 - 2.04 (m, 1H), 2.03 - 1.96 (m,1H), 1.70 (s, 3H), 1.42 - 1.35 (m, 1H),1.04 (m, 1H), 0.91 (m, 1H) ppm
295 (R)-N-(2-((4-(3-((1S,6R)-3-氧杂双环[4.1.0]庚烷-6-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氰基-4-甲基异色满-6-甲酰胺 529.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.73 -12.11 (m, 1H), 9.08 (m, 1H), 8.18 -8.10 (m, 1H), 7.92 - 7.82 (m, 2H), 7.75 -7.69 (m, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.38 - 7.33(m, 1H), 7.30 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.24(d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.97 - 4.79 (m,2H), 4.28 - 4.18 (m, 3H), 4.07 - 3.97 (m,1H), 3.91 - 3.79 (m, 2H), 3.47 (m, 2H),2.12 - 2.04 (m, 1H), 2.03 - 1.97 (m, 1H),1.70 (s, 3H), 1.39 (s, 1H), 1.04 (m,1H), 0.91 (m, 1H) ppm
实施例111. (S)-N-(2-((4-(6-(二氟甲基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺 (化合物 343)的制备
Figure 424816DEST_PATH_IMAGE581
步骤1: 2-(二氟甲基)-6-(1-乙氧基乙烯基)吡啶 (中间体A)的制备
Figure 512857DEST_PATH_IMAGE582
在25℃下在N2下向2-溴-6-(二氟甲基)吡啶 (1 g, 4.81 mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷 (5.21 g, 14.42 mmol, 4.87 mL)在二氧杂环己烷 (10 mL)中的混合物添加Pd(PPh3)2Cl2 (337.45 mg, 480.76 umol)，在100℃下在N2下搅拌该混合物12小时。用饱和KF (200 mL)淬灭该反应混合物，过滤。用EA (50 mL *2)洗涤滤饼。用EA (50 mL *2)萃取滤液，经无水 Na2SO4干燥合并的有机层并浓缩以提供作为黑褐色油的中间体A (2.7 g,3.64 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+=200.1。
步骤2: 2-溴-1-[6-(二氟甲基)-2-吡啶基]乙酮 (中间体B)的制备
Figure 779891DEST_PATH_IMAGE583
在25℃下向中间体A (2.2 g, 2.96 mmol)在THF (8 mL)和H2O (2 mL)中的混合物添加NBS (2.11 g, 11.85 mmol)和在25℃下搅拌该混合物1小时。用水(50 mL) 稀释该反应混合物并用EA (20 mL *2)萃取，经无水 Na2SO4干燥合并的有机层并浓缩以提供棕色油。通过快速硅胶层析法纯化该油 (ISCO®；40 g SepaFlash® 硅胶快速柱, 以35 mL /min的0 ~ 30 % 乙酸乙酯 / 石油醚梯度的洗脱液)。浓缩洗脱物以提供作为黄色油的中间 体B (900 mg, 2.84 mmol)。
LCMS (ESI)m/z: [M+H]+=250.0。
1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.21 - 8.19 (m, 1H), 8.07 - 8.03 (m, 1H),7.89 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.82 - 6.54 (m, 1H), 4.84 (s, 2H) ppm。
步骤3: 4-[6-(二氟甲基)-2-吡啶基]噻唑-2-胺 (中间体C)的制备
Figure 978791DEST_PATH_IMAGE584
在25℃下向中间体B (900 mg, 2.84 mmol)在EtOH (10 mL)中的混合物添加硫脲(324.35 mg, 4.26 mmol)，在80℃下搅拌该混合物2小时。用水 (20 mL)稀释该反应混合物和用饱和NaHCO3调节pH至7，然后用EA(10 mL *3)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层并浓缩以提供黄色油。用MeOH (3 mL)溶解所述油并倾倒入水 (10 mL)中。浓缩该混合物以除去MeOH。形成黄色沉淀物。过滤该混合物以提供作为黄色固体的中间体C (600 mg, 2.58mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+=228.0。
1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.03 - 7.99 (m, 1H), 7.96 - 7.94 (m, 1H),7.56 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.17 (s, 2H), 7.07 - 6.80 (m, 1H)ppm。
步骤4: N-[2-[[4-[6-(二氟甲基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯 (中间体D)的制备
Figure 116511DEST_PATH_IMAGE585
在25℃下向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸 (462.56 mg, 2.64 mmol)、HATU (1.25g, 3.30 mmol)和DIEA (853.15 mg, 6.60 mmol, 1.15 mL)在DCM (5 mL)中的混合物添加中间体C (500 mg, 2.20 mmol)并在25℃下搅拌该混合物12小时。用水 (20 mL)稀释该反应混合物并用DCM (10 mL *2)萃取，浓缩合并的有机层以提供黄色油。通过快速硅胶层析法纯化该油 (ISCO®；20 g SepaFlash® 硅胶快速柱, 以35 mL / min的0 ~ 60 % 乙酸乙酯 / 石油醚梯度的洗脱液)。浓缩洗脱物以提供作为黄色油的中间体D (700 mg, 1.56mmol) 。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+=385.0。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 9.80 - 9.76 (m, 1H), 8.04 (d, J = 8.0 Hz,1H), 7.91 - 7.80 (m 1H), 7.80 (s, 1H), 7.57 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.82 - 6.54(m, 1H), 5.21 - 5.19 (m, 1H), 4.77 - 4.76 (m, 1H), 4.10 (br s, 2H), 1.51 (s,9H) ppm。
步骤5: 2-氨基-N-[4-[6-(二氟甲基)-2-吡啶基]噻唑-2-基]乙酰胺 (中间体E)的制备
Figure 375454DEST_PATH_IMAGE586
在25℃下搅拌中间体D (700 mg, 1.56 mmol)在HCl / 二氧杂环己烷 (4 M, 7mL)中的混合物1小时。浓缩该反应混合物以提供作为浅黄色固体的中间体E (600 mg,1.38 mmol, HCl) 。
LCMS (ESS) m/z: [M+H]+=285.1。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.90 (s, 1H), 8.53 (br s, 2H), 8.13 -8.06 (m, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.65 - 7.63 (m, 1H), 7.12 - 6.85 (m, 1H), 3.94 -3.90 (m, 2H) ppm。
步骤6: (S)-N-(2-((4-(6-(二氟甲基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺的制备
Figure 129783DEST_PATH_IMAGE587
在25℃下向(4S)-4-氟-4-甲基-异色满-6-甲酸 (50 mg, 237.87 umol), HOBt(43.83 mg, 324.36 umol)、EDCI (62.18 mg, 324.36 umol)和DIEA (83.84 mg, 648.73umol, 113.00 uL)在DMF (0.5 mL)中的混合物添加中间体E (93.80 mg, 216.24 umol,HCl)和搅拌该混合物3小时。用水 (5 mL)稀释该反应混合物并用EA (3 mL x 3)萃取，浓缩合并的有机层以提供黄色油。通过制备型HPLC纯化所述油 (UniSil 3 - 100 C18 UItra(150*25 mm*3 um)；流动相: [水(0.225% FA) - ACN]；B% : 38% - 68%, 7.5 min)。浓缩洗脱物以除去ACN 并冻干以提供作为白色固体的(S)-N-(2-((4-(6-(二氟甲基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺 (化合物 343) (21.48mg, 42.54 umol) 。
LCMS (ESI) m/z；[M+H]+ = 477.2。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.55 (s, 1H), 9.07 (br s, 1H), 8.20 (brs, 1H), 8.09 (bd, J = 2.8 Hz, 2H), 7.88 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 7.64 - 7.63 (m,1H), 7.29 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.12 - 6.84 (m, 1H), 4.87 - 4.80 (m, 1H), 4.74- 4.71 (m, 1H), 4.22 (br s, 2H), 4.07 - 4.04 (m, 1H), 3.88 - 3.79 (m, 1H),1.71 (d, J=20.4 Hz, 3H) ppm。
手性SFC: Cellucoat-MeOH (DEA)-40-3mL-35T.lcm；Rt = 0.907 min。
实施例112. 发明化合物的制备
类似于用于制备本文中所述的化合物的那些使用标准的化学操作和程序制备在表10中的以下化合物。
表10.
# 名称 LC-MS(m/z) 1H NMR
292 (R)-N-(2-((4-(6-((1R,6S)-3-氧杂双环[4.1.0]庚烷-6-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氰基-4-甲基异色满-6-甲酰胺 530.6 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ = 8.13 (d,J= 1.6 Hz, 1H), 7.90 - 7.85 (m, 1H),7.81 - 7.77 (m, 1H), 7.76 (s, 1H),7.75- 7.70 (m, 1H), 7.29-7.22 (m, 2H),4.91 (d, J = 4.0 Hz, 2H), 4.33 (s, 2H),4.20 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.09 - 4.03(m, 1H), 3.96 - 3.90 (m, 2H), 3.69 -3.63 (m, 1H), 3.53 - 3.46 (m, 1H), 2.68- 2.62 (m, 1H), 2.17 - 2.09 (m, 1H),1.86 - 1.80 (m, 1H), 1.76 (s, 3H), 1.43- 1.37 (m, 1H), 1.06 - 1.02 (m, 1H)ppm
293 (R)-N-(2-((4-(6-((1S,6R)-3-氧杂双环[4.1.0]庚烷-6-基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氰基-4-甲基异色满-6-甲酰胺 530.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ = 8.13 (s,1H), 7.89-7.86 (m, 1H), 7.81 - 7.77 (m,1H), 7.76 (s, 1H), 7.75 - 7.69 (m,1H), 7.29-7.22 (m, 2H), 4.90 (d, J =3.6 Hz, 2H), 4.33 (s, 2H), 4.20 (d, J =11.2 Hz, 1H), 4.10 - 4.02 (m, 1H), 3.96- 3.90 (m, 2H), 3.71 - 3.61 (m, 1H),3.53 - 3.46 (m, 1H), 2.68 - 2.62 (m,1H), 2.16 - 2.09 (m, 1H), 1.87 - 1.80(m, 1H), 1.76 (s, 3H), 1.41-1.37 (m,1H), 1.06-1.02 (m, 1H) ppm
330 (S)-4-氟-N-(2-((4-(2-(1-羟基环丙基)吡啶-4-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 483 <sup>1</sup>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.59 (brs, 1H), 9.09 - 9.07 (m, 1H), 8.44 (d,J = 5.2 Hz, 1H), 8.26 - 8.19 (m, 2H),7.95 (s, 1H), 7.89 (d, J = 8.0 Hz,1H), 7.61 - 7.59 (m, 1H), 7.29 (d, J =8.0 Hz, 1H), 6.18 (s, 1H), 4.89 - 4.70(m, 2H), 4.28 - 4.16 (m, 2H), 4.11 -4.04 (m, 1H), 3.89 - 3.79 (m, 1H),1.72- 1.65 (m, 3H), 1.25 - 1.23 (m,2H), 1.10 (br d, J = 3.2 Hz, 2H) ppm
378 (S)-4-氰基-N-(2-((4-(6-((R)-2,2-二氟环丙基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基色满-6-甲酰胺 510.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.46 (brs, 1H), 8.95 - 8.92(m, 1H), 8.09 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.87 - 7.80 (m, 4H),7.40 - 7.39 (m, 1H), 6.97 (d, J = 8.8Hz, 1H), 4.36 - 4.35 (m, 1H), 4.28 -4.27 (m, 1H), 4.21 - 4.19 (m, 2H),3.23 - 3.21 (m, 1H), 2.47 - 2.42 (m,2H), 2.22 - 2.00 (m, 1H), 2.00 - 1.96(m, 1H), 1.80 (s, 3H) ppm
380 (S)-4-氰基-N-(2-((4-(6-((S)-2,2-二氟环丙基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基色满-6-甲酰胺 510.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.49 (s,1H), 8.98 - 8.90 (m, 1H), 8.10 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.93 - 7.73 (m, 4H),7.40 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.97 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 4.41 - 4.34 (m, 1H),4.32 - 4.25 (m, 1H), 4.25 - 4.17 (m,2H), 3.26 - 3.19 (m, 1H), 2.46 - 2.42(m, 2H), 2.25 - 2.19 (m, 1H), 2.05 -2.00 (m, 1H), 1.81 (s, 3H) ppm
386 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(6-((S)-2,2-二氟环丙基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 510.3 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.59 -12.42 (m, 1H), 9.10 - 9.06 (m, 1H),8.12 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.91 - 7.79(m, 4H), 7.39 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.29(d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.94 - 4.79 (m,2H), 4.30 - 4.16 (m, 3H), 3.86 (d, J =11.2 Hz, 1H), 3.24 - 3.18 (m, 1H), 2.43(s, 1H), 2.06 - 1.97 (m, 1H), 1.69(s, 3H) ppm
387 (R)-4-氰基-N-(2-((4-(6-((R)-2,2-二氟环丙基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基异色满-6-甲酰胺 510.4 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d<sub>6</sub>) δ = 12.50 (s,1H), 9.10 - 9.06 (m, 1H), 8.12 (s,1H), 7.92 - 7.80 (m, 4H), 7.39 (d, <i>J</i> =8.0 Hz, 1H), 7.29 (d, <i>J</i> = 8.4 Hz,1H), 4.95 - 4.80 (m, 2H), 4.27 - 4.16(m, 3H), 3.86 (d, <i>J</i> = 11.6 Hz, 1H),3.24 - 3.18 (m, 1H), 2.44 (s, 1H), 2.07- 1.97 (m, 1H), 1.69 (s, 3H) ppm
439 (S)-4-氰基-N-(2-((4-(6-环丙基吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基色满-6-甲酰胺 474.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, MeOD) δ = 8.10 (d, J =2.0 Hz, 1H), 7.83 - 7.80 (m, 1H),7.77 - 7.74 (m, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.66- 7.62 (m, 1H), 7.13 - 7.06 (m, 1H),6.95 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.42 - 4.34(m, 2H), 4.30 (s, 2H), 2.52 - 2.41 (m,1H), 2.26 - 2.17 (m, 1H), 2.15 - 2.05(m, 1H), 1.84 (s, 3H), 1.11 - 0.93 (m,4H) ppm
430 (S)-4-氰基-N-(2-((4-(6-(二氟甲基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-甲基色满-6-甲酰胺 484.1 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.61 (s,1H), 9.02 - 8.99 (m, 1H), 8.17 - 8.15(m, 3H), 7.95 (s, 1H), 7.89 - 7.86 (m,1H), 7.72 - 7.69 (m, 1H), 7.05 - 6.91(m, 2H), 4.46 - 4.26 (m, 4H), 2.51 -2.49 (m, 1H), 2.28 - 2.25 (m,1H),1.87 (s, 3H) ppm
331 (S)-N-(2-((4-(6-(二氟甲基)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟-4-甲基异色满-6-甲酰胺 477.2 <sup>1</sup>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.55 (s,1H), 9.07 (br s, 1H), 8.20 (br s,1H), 8.09 (bd, J = 2.8 Hz, 2H), 7.88(d, J = 2.0 Hz, 2H), 7.64 - 7.63 (m,1H), 7.29 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.12 -6.84 (m, 1H), 4.87 - 4.80 (m, 1H),4.74- 4.71 (m, 1H), 4.22 (br s, 2H),4.07 - 4.04 (m, 1H), 3.88 - 3.79 (m,1H), 1.71 (d, J=20.4 Hz, 3H) ppm
实施例113. 中间体的制备
中间体1和2: (R)-4-氰基-8-氟-4-甲基异色满-6-甲酸和(S)-4-氰基-8-氟-4-甲基异色满-6-甲酸的制备
Figure 866795DEST_PATH_IMAGE588
步骤1: 5-溴-3-氟-2-甲基-苯甲酸甲酯 (中间体A)的制备
Figure 390181DEST_PATH_IMAGE589
在0℃下在N2下向3-氨基-5-溴-2-甲基-苯甲酸甲酯 (11 g, 45.07 mmol)在DCM(100 mL)中的溶液逐份添加nitridooxonium；四氟硼酸盐 (6.84 g, 58.59 mmol)。在0℃下搅拌该混合物1小时。然后添加邻二甲苯 (250 mL)并将该溶液缓慢加热至80℃并在80℃下搅拌1小时以除去DCM。然后将该溶液缓慢加热至130℃并在130℃ 下搅拌3小时。将该反应混合物倾倒入水 (200 mL)中并用EA (100 mL*3)萃取。用盐水 (200 mL)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物(SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=50/1至10/1)。在真空下浓缩该级分以提供作为黄色油的中间体 A (10 g, 40.48 mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.83 (s, 1H), 7.37 - 7.34 (m, 1H), 3.91(s, 3H), 2.44 (d, J = 2.4 Hz, 3H) ppm。
步骤2: 5-溴-2-(溴甲基)-3-氟-苯甲酸甲酯 (中间体B)的制备
Figure 882342DEST_PATH_IMAGE590
向中间体A (10 g, 40.48 mmol)和NBS (7.20 g, 40.48 mmol)在CCl4 (100 mL)中的混合物添加AIBN (664.65 mg, 4.05 mmol)。在80℃下搅拌该混合物16小时。将该反应混合物倾倒入水 (100 mL)中并用EA (100 mL *3)萃取。用盐水 (150 mL)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=20/1至10/1)。在真空下浓缩该级分以提供作为黄色油的中间体B (9.8 g, 30.07mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.94 - 7.93 (m, 1H), 7.83 - 7.82 (m, 1H),7.46 - 7.44 (m, 1H), 7.37 - 7.36 (m, 1H), 4.95 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 3.97 (s,3H), 3.91 (s, 2H), 2.44 (d, J = 2.4 Hz, 2H) ppm。
步骤3: 6-溴-8-氟-4-氧代-异色满-3-甲酸甲酯 (中间体C)的制备
Figure 858388DEST_PATH_IMAGE591
在0℃下在N2下向中间体B (9.8 g, 30.07 mmol)和2-羟基乙酸甲酯 (5.42 g,60.13 mmol, 4.63 mL)在DMF (60 mL)中的混合物缓慢添加NaH (2.40 g, 60.13 mmol,60%纯度)。在25℃下搅拌该混合物30分钟。用饱和NH4Cl (200 mL)淬灭该反应混合物并用EtOAc (100 mL*2)萃取。用盐水 (200 mL)洗涤合并的有机相，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, PE/ EtOAc=10/1~3/1)。在真空下浓缩该级分以提供作为白色固体的中间体C (5 g, 16.50 mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 10.26 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.31 - 7.29(m, 1H), 5.06 (s, 2H), 3.93 (s, 3H) ppm
步骤4: 6-溴-8-氟-异色满-4-酮 (中间体D)的制备
Figure 399091DEST_PATH_IMAGE592
向中间体C (1.8 g, 5.94 mmol)在EtOH (18 mL)中的混合物添加HCl (12 M, 36mL)。在130℃下搅拌该混合物1小时。用水 (200 mL)稀释该混合物和然后过滤。在真空下干燥滤饼以提供作为黄色固体的中间体D (1.3 g, 5.31 mmol)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.97 - 7.94 (m, 1H), 7.85 (d, J = 1.6Hz, 1H), 4.91 (s, 2H), 4.41 (s, 2H) ppm。
步骤5: 6-溴-8-氟-异色满-4-甲腈 (中间体E)的制备
Figure 42562DEST_PATH_IMAGE593
在0℃下向中间体D (100 mg, 408.09 umol)、1-(异氰基甲基磺酰基)-4-甲基苯(119.51 mg, 612.13 umol)和EtOH (150.40 mg, 3.26 mmol, 190.86 uL)在DME (4 mL)中的混合物添加t-BuONa (86.28 mg, 897.79 umol)。在25℃下搅拌该混合物16小时。将该反应混合物倾倒入水 (60 mL)中并用EtOAc (60 mL*2)萃取。用盐水 (60 mL)洗涤合并的有机相，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, PE/EtOAc=30/1~8/1)。在真空下浓缩该级分以提供作为黄色固体的中间体E (55 mg, 214.78umol) 。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.83 (s, 1H), 7.37 - 7.34 (m, 1H), 3.91(s, 3H), 2.44 (d, J = 2.4 Hz, 3H) ppm。
步骤6: 6-溴-8-氟-4-甲基-异色满-4-甲腈 (中间体F)的制备
Figure 770871DEST_PATH_IMAGE594
在0℃下在N2下向中间体E (50 mg, 195.26 umol)在DMF (1 mL)中的混合物添加NaH (15.62 mg, 390.52 umol, 60%纯度)。在0℃下搅拌该混合物30分钟。然后添加MeI(138.57 mg, 976.29 umol, 60.78 uL)。在25℃下搅拌所得混合物2小时。将该反应混合物倾倒入水 (15 mL)中并用EtOAc (15 mL *2)萃取。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机相，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, PE/EtOAc=30/1~5/1)。在真空下浓缩该级分以提供作为无色油的中间体F (35 mg, 129.58 umol) 。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.75 (s, 1H), 7.59 (m, 1H), 4.88 - 4.80(m, 1H), 4.77 - 4.69 (m, 1H), 4.19 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.80 (d, J = 11.6Hz, 1H), 1.66 (s, 3H) ppm。
步骤7: (R)-4-氰基-8-氟-4-甲基异色满-6-甲酸和(S)-4-氰基-8-氟-4-甲基异色满-6-甲酸 (中间体1和2)的制备
Figure 499792DEST_PATH_IMAGE595
向中间体F (30 mg, 111.07 umol)在DMSO (2 mL)中的混合物添加二环己基 (3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (13.60 mg, 22.21 umol)、K2CO3 (23.03 mg,166.61 umol)、H2O (20.01 mg, 1.11 mmol, 20.01 uL)和Pd(OAc)2 (2.49 mg, 11.11umol)。用CO吹扫所得混合物三次。在100℃下在CO (15 psi)下搅拌该混合物4小时。将该反应混合物倾倒入水 (20 mL)中并用EtOAc (20 mL)萃取。丢弃有机相。用1N HCl水溶液调节水层的pH至4并用EtOAc (20 mL*2)萃取。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机相，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过SFC分离残余物 (柱: DAICEL CHIRALPAK IC(250mm*30mm, 5um)；流动相: [0.1% NH3H2O ETOH]；B%: 20%-20%, 1.85min；76min)。在真空下浓缩该级分。用H2O (20 mL)稀释该残余物并冻干以提供作为黄色固体的中间体1 (25mg, 106.29 umol) 和作为黄色固体的中间体2 (25 mg, 102.45 umol)。
中间体3和4: (R)-4-(二氟甲基)-4-氟色满-6-甲酸和(S)-4-(二氟甲基)-4-氟色满-6-甲酸的制备
Figure 578607DEST_PATH_IMAGE596
步骤1: 6-溴-4-(二氟(苯基磺酰基)甲基)色满-4-醇 (中间体A)的制备
Figure 76584DEST_PATH_IMAGE597
在-78℃下向6-溴色满-4-酮 (3 g, 13.21 mmol), 二氟甲基磺酰基苯 (3.81 g,19.82 mmol, 2.82mL)在THF (30 mL)中的溶液添加LiHMDS (1 M, 26.43 mL)。然后在-78℃下搅拌该混合物2小时。将该反应混合物倾倒入饱和NH4Cl (50 mL)中并用EA (50 mL*2)萃取。用盐水 (50 mL)洗涤有机层和经Na2SO4干燥，浓缩以提供粗产物。通过快速硅胶层析法纯化该粗产物 (SiO2, PE : EA = 10 : 1至3 : 1)。浓缩洗脱物以得到作为黄色固体的中间体A (3.6 g, 7.73 mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.02 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.88 - 7.77 (m,1H), 7.73 - 7.61 (m, 3H), 7.34 - 7.33 (m,1H), 6.78 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.54- 4.26 (m, 2H), 3.74 (s, 1H), 3.19 - 3.02 (m, 1H), 2.59 - 2.42 (m, 1H) ppm。
步骤2: 6-溴-4-(二氟甲基)色满-4-醇 (中间体B)的制备
Figure 317073DEST_PATH_IMAGE598
向中间体A (3.5 g, 8.35 mmol)、Mg (3.04 g, 125.23mmol)在DMF (100 mL)中的溶液添加NaOAc / HOAc (8 M, 52.18 mL)。然后在25℃下搅拌该混合物2小时。将该反应混合物倾倒入水 (100 mL)中并用EA (100 mL*2)萃取。用盐水 (100 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供粗产物。通过快速硅胶层析法纯化该粗产物 (SiO2,PE : EA = 10 : 1至3 : 1)。浓缩洗脱物以得到作为无色油的中间体B (2 g, 6.45mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.51 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.29 - 7.26 (m,1H), 6.72 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.13 - 5.70 (m, 1H), 4.36 - 4.10 (m, 2H), 2.78(s, 1H), 2.33 - 2.18 (m, 1H), 2.06 - 1.98 (m, 1H) ppm。
步骤3: 6-溴-4-(二氟甲基)-4-氟色满 (中间体C)的制备
Figure 533290DEST_PATH_IMAGE599
在0℃下向中间体B (1.9 g, 6.81 mmol)在DCM (20 mL)中的溶液添加DAST(2.19g, 13.62 mmol, 1.80 mL)。然后在0℃下搅拌该混合物2小时。将该反应混合物倾倒入水 (50 mL)中并用DCM (20 mL*2)萃取。用盐水 (20 mL)洗涤有机层和经Na2SO4干燥，浓缩以提供粗产物。通过快速硅胶层析法纯化该粗产物 (SiO2, PE : EA = 10 : 1至5 : 1)以得到作为无色油的中间体C (1 g, 3.20 mmol) 。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.57 (s, 1H), 7.48 - 7.30 (m, 1H), 7.12 -6.79 (m, 1H), 6.42 - 5.92 (m, 1H), 4.55 - 4.13 (m, 2H), 2.65 - 2.24 (m, 2H)ppm。
步骤4: 4-(二氟甲基)-4-氟色满-6-甲酸 (中间体D)的制备
Figure 415796DEST_PATH_IMAGE600
向中间体C (700 mg, 2.49 mmol)在DMSO (10 mL)和H2O (2 mL)中的溶液添加Pd(OAc)2 (27.96 mg, 124.52 umol)、二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐(152.48 mg, 249.05 umol)和K2CO3 (516.32 mg, 3.74 mmol)。将该反应混合物脱气并用CO (15 psi)吹扫三次。然后在100℃下在CO (15 psi) 气氛下搅拌该混合物10小时。过滤该反应溶液以得到滤液。用H2O 20 mL稀释该溶液并用EA (20 mL*5)萃取。用盐水 (20 mL* 3)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (ISCO®；40 g SepaFlash® 硅胶快速柱, 以50 mL / min的0 ~100% 乙酸乙酯 / 石油醚梯度的洗脱液)。在减压下浓缩洗脱物以提供作为白色固体的中 间体D (520 mg, 2.07 mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.17 (s, 1H), 8.02 - 7.99 (m, 1H), 6.95 -6.92 (m, 1H), 6.40 - 5.96 (m, 1H), 4.50 - 4.34 (m, 1H), 4.31 - 4.18 (m, 1H),2.58 - 2.21 (m, 2H) ppm。
步骤5: (R)-4-(二氟甲基)-4-氟色满-6-甲酸和(S)-4-(二氟甲基)-4-氟色满-6-甲酸 (中间体3和4)的制备
Figure 768280DEST_PATH_IMAGE601
通过SFC分离采用条件(柱: DAICEL CHIRALPAK IG (250 mm*30 mm, 10 um)；流动相: [0.1% NH3H2O MEOH]；B% : 15% - 15%, 1.95 min；89 min)纯化中间体D (520 mg,2.11 mmol, 1 eq)以得到两个峰。在减压下浓缩峰1的洗脱液 (Rt = 0.839 min)以得到作为白色固体的中间体3 (250 mg, 1.02 mmol) 。在减压下浓缩峰2的洗脱液 (Rt = 0.936min) 以得到作为白色固体的中间体4 (255 mg, 1.04 mmol)。
中间体3：
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 247.0。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.16 (s, 1H), 7.99 (d, J = 8.8 Hz, 1H),6.92 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.34 - 6.00 (m,1H), 4.47 - 4.32 (m, 1H), 4.29 -4.15 (m, 1H), 2.53 - 2.17 (m, 2H) ppm。
手性SFC: IG-3_5CM_MEOH(DEA)_5_40_3ML_T35.M, Rt = 0.860 min
手性SFC: IG-3_5CM_MEOH(DEA)_5_40_3ML_T35.M, Rt = 0.842 min, 0.936 min(外消旋体)
中间体5和6: (S)-8-氟-4-羟基-4-甲基异色满-6-甲酸和(R)-8-氟-4-羟基-4-甲基异色满-6-甲酸的制备
Figure 710828DEST_PATH_IMAGE602
步骤1: 6-溴-8-氟-4-甲基-异色满-4-醇 (中间体A)的制备
Figure 538976DEST_PATH_IMAGE603
在-50℃下在N2下向6-溴-8-氟异色满-4-酮 (根据FG-A3574中的方法制备) (250mg, 1.02 mmol)和CeCl3 (125.73 mg, 510.11 umol, 32.07 uL)在THF (2.5 mL)中的混合物添加溴(甲基)镁 (3 M, 1.70 mL)。在25℃下搅拌该混合物2小时。将该混合物倾倒入水 (30 mL)中并用EtOAc (30 mL*3)萃取。用盐水 (50 mL)洗涤合并的有机相，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, PE/EtOAc=10/1~3/1)。在真空下浓缩该级分以提供作为浅黄色油的中间体A (210 mg, 804.33 umol) 。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.54 (s, 1H), 7.14 (m, 1H), 4.92 - 4.79(m, 1H), 4.74 - 4.62 (m, 1H), 3.86 - 3.77 (m, 1H), 3.76 - 3.65 (m, 1H), 2.34(s, 1H), 1.53 (s, 3H) ppm。
步骤2: (6-溴-8-氟-4-甲基-异色满-4-基)氧基-三甲基-硅烷 (中间体B)的制备
Figure 959593DEST_PATH_IMAGE604
在0℃下向中间体A (210 mg, 804.33 umol)在DCM (1 mL)中的溶液添加TMSCN(239.38 mg, 2.41 mmol, 301.87 uL)和三溴化铟 (57.03 mg, 160.87 umol)。然后在25℃下搅拌所得混合物2小时。将该混合物倾倒入水 (30 mL)中并用EtOAc (30 mL*3)萃取。用盐水 (50 mL)洗涤合并的有机相，经无水 Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, PE/EtOAc=30/1~8/1)。在真空下浓缩该级分以提供作为浅黄色油的中间体B (200 mg, 600.12 umol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.46 (s, 1H), 7.09 (m, 1H), 4.74 (s, 2H),3.75 (s, 2H), 1.53 (s, 3H), 0.07 - 0.04 (m, 9H) ppm。
步骤3: (S)-8-氟-4-羟基-4-甲基异色满-6-甲酸和(R)-8-氟-4-羟基-4-甲基异色满-6-甲酸 (中间体5和6)的制备
Figure 432162DEST_PATH_IMAGE605
将中间体B (200 mg, 600.12 umol)、Pd(OAc)2 (16.62 mg, 74.03 umol)、H2O(133.40 mg, 7.40 mmol, 133.40 uL)、二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基) 鏻;四氟硼酸盐 (90.67 mg, 148.09 umol)和K2CO3 (153.51 mg, 1.11 mmol)在DMSO (2 mL)中的混合物脱气并用CO吹扫三次。在100℃下在CO 气氛 (15 psi)下搅拌该混合物6小时。将该混合物倾倒入水 (20 mL)中并用EA (20 mL *2)萃取。丢弃有机层。通过HCl水溶液 (1 M)调节水相的pH至5并用EA (20 mL *2)萃取。用盐水 (30.0 mL)洗涤合并的有机物，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发滤液至干以提供粗物质。通过制备型HPLC (FA条件)纯化残余物。在真空下浓缩该级分以除去MeCN 并冻干。通过SFC分离残余物 (柱: DAICEL CHIRALPAK IG(250mm*30mm, 10um)；流动相: [0.1%NH3H2O ETOH]；B%: 30%-30%, 4min)。在真空下浓缩该级分。用水 (20 mL)稀释该残余物，通过HCl水溶液 (1M)调节PH至5并用EA (20 mL*2)萃取。用盐水 (30 mL)洗涤合并的有机物，经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩以提供作为黄色固体的中间体5 (20 mg, 88.42 umol, 14.73%收率)和作为黄色固体的中间体6 (20mg, 88.42 umol, 14.73%收率)。
中间体6:
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.00 (s, 1H), 7.48 (d, J = 9.6 Hz, 1H),5.49 (s, 1H), 4.91 - 4.66 (m, 2H), 3.71 - 3.65 (m, 1H), 3.59 - 3.53 (m, 1H),1.41 (s, 3H) ppm。
中间体7: 3-(3-(二氟甲基)四氢呋喃-3-基)苯甲酸的制备
Figure 280033DEST_PATH_IMAGE606
步骤1: 3-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)苯甲酸甲酯 (中间体A)的制备
Figure 939684DEST_PATH_IMAGE607
将3-溴苯甲酸甲酯 (4 g, 18.60 mmol)、2-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷 (5.86 g, 27.90 mmol)、K3PO4 (11.84 g, 55.80mmol)、二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (1.21 g, 1.86 mmol)和H2O (4 mL)在二氧杂环己烷 (40 mL)中的混合物脱气并用N2吹扫三次，和然后在80℃下在N2 气氛下搅拌该混合物2小时。用H2O (80 mL)稀释该反应混合物并用EA (60 mL *3)萃取。用盐水 (50 mL *3)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚 / 乙酸乙酯 = 100 / 1至10/1)。浓缩洗脱物以提供作为黄色油的中间体A (1.21 g, 5.54 mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.08 (m, 1H), 7.94 (d, J = 7.6 Hz, 1H),7.62 - 7.57 (m, 1H), 7.45 - 7.40 (m, 1H), 6.22 (m, 1H), 4.35 (m, 2H), 3.98 -3.93 (m, 5H), 2.59 - 2.54 (m, 2H) ppm。
步骤2: 3-(3,7-二氧杂双环[4.1.0]庚烷-6-基)苯甲酸甲酯 (中间体B)的制备
Figure 163992DEST_PATH_IMAGE608
向中间体A (500 mg, 2.29 mmol)在DCM (40 mL)中的溶液添加m-CPBA (1.09 g,5.04 mmol, 80%纯度)和Na2CO3 (582.76 mg, 5.50 mmol)。在25℃下搅拌该混合物16小时。向该反应混合物添加饱和Na2CO3水溶液(30 mL)，然后在减压下浓缩以除去DCM。用EA (30mL *3)萃取残余物。用盐水 (60 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的中间体B (758 mg, 粗物质)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。
步骤3: 3-(3-甲酰基四氢呋喃-3-基)苯甲酸甲酯 (中间体C)的制备
Figure 491068DEST_PATH_IMAGE609
向中间体B (536 mg, 2.29 mmol)在DCM (40 mL)中的溶液添加BF3•Et2O (5.76g, 40.59 mmol, 5.01 mL)。在25℃下搅拌该混合物15分钟。向该反应混合物添加饱和Na2CO3 (30 mL)，然后在减压下浓缩以除去DCM。用EA (30 mL *3)萃取残余物。用盐水 (60mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚 / 乙酸乙酯 = 50 / 1至5 / 1)。浓缩洗脱物以提供作为黄色油的中间体C (138 mg, 589.12 umol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 9.56 (s, 1H), 8.02 (m, 1H), 7.88 (m, 1H),7.52 - 7.45 (m, 1H), 7.40 - 7.36 (m, 1H), 4.69 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.03 -3.97 (m, 2H), 3.96 - 3.88 (m, 4H), 2.92 (m, 1H), 2.29 (m, 1H) ppm。
步骤4: 3-[3-(二氟甲基)四氢呋喃-3-基]苯甲酸甲酯 (中间体D)的制备
Figure 775419DEST_PATH_IMAGE610
在0℃下向中间体C (138 mg, 589.12 umol)在DCM (3 mL)中的溶液逐滴添加DAST (284.88 mg, 1.77 mmol, 233.51 uL)。在25℃下在N2 气氛下搅拌该混合物2小时。通过在0℃下逐滴添加饱和NaHCO3 (20 mL)淬灭该反应混合物并用DCM (15 mL *3)萃取。用盐水 (15 mL *2)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚 / 乙酸乙酯 = 30 / 1 ~ 3 / 1)。浓缩洗脱物以提供作为黄色油的中间体D (50 mg, 195.13 umol)。
1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.12 - 8.03 (m, 1H), 8.03 - 7.98 (m, 1H),7.93 (s, 1H), 7.46 - 7.44 (m, 1H), 6.16 - 5.60 (m, 1H), 4.50 (d, J = 9.2 Hz,1H), 4.14 - 4.06 (m, 1H), 3.99 - 3.92 (m, 6H), 2.64 (m, 1H), 2.42 - 2.31 (m,1H) ppm。
步骤5: 3-(3-(二氟甲基)四氢呋喃-3-基)苯甲酸 (中间体7)的制备
Figure 250263DEST_PATH_IMAGE611
向中间体D (50 mg, 195.13 umol)在THF (0.3 mL)、MeOH (0.3 mL)和H2O (0.3mL)中的溶液添加LiOH (9.35 mg, 390.25 umol)。在25℃下搅拌该混合物1小时。用H2O(10 mL)稀释该反应混合物并用EA (10 mL *3)萃取。丢弃合并的有机层并用HCl水溶液将水层调节至 pH=5，然后用EA (10 mL *3)萃取。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的中间体7 (40 mg)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 243.1。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.08 (m, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.75 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.54 - 7.49 (m, 2H), 6.04 - 5.74 (m, 1H), 4.52 (d, J = 9.2 Hz,1H), 4.16 - 4.12 (m, 1H), 4.01 - 3.93 (m, 2H), 2.66 (m, 1H), 2.42 (s, 1H)ppm。
中间体8: 2-(叔丁氧基羰基)-4-氰基-4-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸的制备
Figure 12682DEST_PATH_IMAGE612
步骤1: 5-溴-2-甲基-苯甲酸甲酯 (中间体A)的制备
Figure 194265DEST_PATH_IMAGE613
向5-溴-2-甲基-苯甲酸 (30 g, 139.51 mmol)在MeOH (210 mL)中的溶液添加H2SO4 (6 mL)。搅拌该反应混合物和在70℃下回流16小时。浓缩该反应以提供残余物。添加饱和NaHCO3 (200 mL)并然后添加Na2CO3固体以调节至pH=10。用EtOAc (200 mL *2)萃取该混合物。用盐水 (100 mL)洗涤合并的有机层，经无水 Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供作为黄色油的中间体A (32 g, 129.92 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [79BrM+H]+= 229.0。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.92 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.69 - 7.66(m, 1H), 7.31 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 2.46 (s, 3H) ppm。
步骤2: 5-溴-2-(溴甲基)苯甲酸甲酯 (中间体B)的制备
Figure 649517DEST_PATH_IMAGE614
向中间体A (32 g, 139.70 mmol)在CCl4 (320 mL)中的溶液添加NBS (27.35 g,153.66 mmol)和AIBN (2.29 g, 13.97 mmol)。在85℃下搅拌该反应混合物2小时。通过硅胶柱过滤该混合物 (100 g, SiO2)并用PE和EA (5/1, 600 mL)的混合物洗涤。蒸发溶剂以提供作为黄色油的中间体B (42 g, 121.38 mmol)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.99 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.82 - 7.80(m, 1H), 7.57 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.98 (s, 2H), 3.88 (s, 3H) ppm。
步骤3: 2-[[苄基-(2-乙氧基-2-氧代-乙基)氨基]甲基]-5-溴-苯甲酸甲酯 (中间体C)的制备
Figure 549340DEST_PATH_IMAGE615
向中间体B (42 g, 136.38 mmol)在DCM (420 mL)中的溶液添加2-(苄基氨基)乙酸乙酯 (31.62 g, 163.65 mmol)和DIEA (35.25 g, 272.76 mmol)。在25℃下搅拌该反应混合物12小时。将该反应混合物倾倒入水 (500 mL)中和用DCM (200 mL *2)萃取。用盐水(200 mL)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供残余物，其通过快速硅胶层析法纯化 (120 g 硅胶快速柱, 以100 mL/min的0~20% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液)。浓缩洗脱物以提供作为无色油的中间体C (42 g, 97.93 mmol) 。
LCMS (ESI) m/z: [81BrM+H]+= 421.9。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.82 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.73 - 7.72(m, 1H), 7.57 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.32 - 7.28 (m, 2H), 7.25 - 7.21 (m, 3H),4.08 - 4.03 (m, 4H), 3.81 (s, 3H), 3.69 (s, 2H), 3.17 (s, 2H), 1.19 - 1.15(m, 3H) ppm,
步骤4: 2-苄基-6-溴-4-氧代-1,3-二氢异喹啉-3-甲酸乙酯 (中间体D)的制备
Figure 505663DEST_PATH_IMAGE616
向EtOH (6.91 g, 149.89 mmol)在甲苯 (210 mL)的溶液中添加NaH (6.00 g,149.89 mmol, 60%纯度)。然后添加中间体C (42 g, 99.93 mmol)/甲苯 (210 mL)。在100℃下搅拌该反应混合物16小时。浓缩该反应混合物以除去甲苯。将残余物倾倒入水 (300mL)中并用EA (200 mL *3)萃取。用盐水 (100 mL)洗涤合并的有机层，经无水 Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供作为黄色固体的中间体D (38 g, 粗物质)。
LCMS (ESI) m/z: [81BrM+H]+= 390.0。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.88 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.40 - 7.39(m, 1H), 7.32 - 7.21 (m, 5H), 6.97 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.06 - 4.01 (m, 2H),3.60 - 3.40 (m, 5H), 1.26 - 1.17 (m, 3H) ppm。
步骤5: 2-苄基-6-溴-1,3-二氢异喹啉-4-酮 (中间体E)的制备
Figure 541753DEST_PATH_IMAGE617
在60℃下向中间体D (38 g, 97.87 mmol)在EtOH (200 mL)中的溶液添加HCl(12 M, 200 mL)。搅拌该反应混合物和在130℃下回流48小时。逐渐形成黄色固体。过滤热反应混合物以提供黄色固体。用MTBE (100 mL)研磨该黄色固体。搅拌该悬浮液10分钟并过滤以提供白色固体。将该固体溶解于饱和NaHCO3 (100 mL)和EA (100 mL)中，然后用Na2CO3 (s)将该混合物调节至pH=10。用EA (100 mL *2)萃取该混合物。用盐水 (100mL)洗涤合并的有机层，经无水 Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供作为黄色固体的中间体E (10 g,30.99 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [81BrM+H]+= 316.0。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.94 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.79 - 7.77(m, 1H), 7.39 - 7.32 (m, 5H), 7.32 - 7.28 (m, 1H), 3.78 (s, 2H), 3.74 (s,2H), 3.35 (s, 2H) ppm。
步骤6: 6-溴-2,3-二氢-1H-异喹啉-4-酮 (中间体F)的制备
Figure 167906DEST_PATH_IMAGE618
在0℃下向中间体E (4 g, 12.65 mmol)在DCE (60 mL)中的混合物添加氯甲酸1-氯乙酯 (5.43 g, 37.95 mmol)、DIPEA (1.63 g, 12.65 mmol)，在20℃下搅拌该混合物1小时。向该混合物添加MeOH (5 mL)，然后在60℃下搅拌1小时。浓缩该混合物以提供作为无色油的中间体F (3 g, 粗物质, HCl)，其直接用于接下来的步骤。
步骤7: 6-溴-4-氧代-1,3-二氢异喹啉-2-甲酸叔丁酯 (中间体G)的制备
Figure 555025DEST_PATH_IMAGE619
在20℃下向中间体F (3 g, 11.43 mmol)在THF (40 mL)和水(8 mL)中的混合物添加(Boc)2O (7.48 g, 34.29 mmol, 7.88 mL)和NaHCO3 (2.88 g, 34.29 mmol)，然后在20℃下搅拌该混合物15小时。向该混合物添加水 (10 mL)并用EA (5 mL *3)萃取，用盐水(10 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供残余物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=15/1至5/1) 以提供作为黄色固体的中间体G (3.2 g,9.81 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [79BrM-55]+= 270.0。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.20 - 8.15 (m, 1H), 7.72 - 7.65 (m, 1H),7.24 - 7.18 (m, 1H), 4.78 - 4.68 (s, 2H), 4.38 - 4.27 (s, 2H), 1.49 - 1.47(s, 9H) ppm。
步骤8: 6-溴-4-氰基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-甲酸叔丁酯 (中间体H)的制备
Figure 393668DEST_PATH_IMAGE620
在0℃下向中间体G (2.7 g, 8.28 mmol、1-(异氰基甲基磺酰基)-4-甲基-苯(2.42 g, 12.42 mmol)和EtOH (3.81 g, 82.78 mmol)在DME (60 mL)中的混合物逐份添加t-BuOK (1.86 g, 16.56 mmol)。在加料后， 将该混合物缓慢温热至20℃和在20℃下搅拌该混合物15小时。用水 (2 mL)稀释该混合物并用EA (5 mL *3)萃取。用盐水 (5 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供残余物。通过制备型TLC纯化该残余物(SiO2, PE: EA = 5:1) 以提供作为无色油的中间体H (1 g, 2.88 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [79BrM+H]+= 281.0。
步骤9: 6-溴-4-氰基-4-甲基-1,3-二氢异喹啉-2-甲酸叔丁酯 (中间体I)的制备
Figure 549843DEST_PATH_IMAGE621
在0℃下向中间体H (1 g, 2.97 mmol)在DMF (12 mL)中的混合物添加NaH(178.20 mg, 4.46 mmol, 60%纯度)。在0℃下搅拌该混合物10分钟和然后添加CH3I (1.27g, 8.91 mmol)。在25℃下搅拌所得混合物2小时。用水 (20 mL)淬灭该反应并用EA (15 mL*3)萃取该混合物。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供粗产物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=10/1至5/1) 以提供作为无色油的中间体I (650 mg, 1.85 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [79BrM-55]+= 295.0。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.69 - 7.61 (m, 1H), 7.46 - 7.41 (m, 1H),7.06 - 7.00 (m, 1H), 4.83 - 4.68 (m, 1H), 4.51 - 4.39 (m, 1H), 4.12 - 3.89(m, 1H), 3.83 - 3.61 (m, 1H), 1.67 (s, 3H), 1.51 (s, 9H) ppm。
步骤10: 2-(叔丁氧基羰基)-4-氰基-4-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸 (中间体8)的制备
Figure 346897DEST_PATH_IMAGE622
向中间体I (250 mg, 711.77 umol)在DMSO (3 mL)中的混合物添加二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (43.58 mg, 71.18 umol)、Pd(OAc)2 (7.99 mg,35.59 umol)、K2CO3 (147.56 mg, 1.07 mmol)、H2O (25.65 mg, 1.42 mmol)，用N2将该混合物脱气三次和在90℃下在CO (15 psi) 气氛下搅拌该混合物15小时。过滤该混合物并用水 (6 mL)稀释滤液。用EA (5 mL *3)萃取该混合物和用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供残余物。通过反相HPLC (0.1% FA条件)纯化该粗产物。冻干洗脱物以提供作为白色固体的中间体8 (80 mg, 252.88 umol) 。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.06 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.92 - 7.85(m, 1H), 7.42 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.80 - 4.55 (m, 2H), 4.13 - 3.96 (m, 1H),3.69 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 1.67 (s, 3H), 1.45 (s, 9H) ppm。
中间体9和10: (S)-3-氰基-1,3-二甲基吲哚啉-5-甲酸和(R)-3-氰基-1,3-二甲基吲哚啉-5-甲酸的制备
Figure 955733DEST_PATH_IMAGE623
步骤1: 3-((4-溴苯基)(甲基)氨基)-3-氧代丙酸甲酯 (中间体A)的制备
Figure 129226DEST_PATH_IMAGE624
在20℃下向4-溴-N-甲基-苯胺 (10 g, 53.75 mmol)、3-乙氧基-3-氧代-丙酸(8.52 g, 64.50 mmol)在CH3CN (150 mL)中的混合物添加[氯(二甲基氨基)亚甲基] -二甲基-铵；六氟磷酸盐 (22.62 g, 80.63 mmol)、1-甲基咪唑 (13.24 g, 161.25 mmol,12.85 mL)，在20℃下搅拌该混合物15小时。浓缩该混合物以得到粗产物，其用水 (10 mL)稀释和然后用DCM (15 mL *3)萃取，用盐水 (15 mL)洗涤合并的有机相，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供粗产物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=5/1至3/1)以提供作为白色固体的中间体A (13 g, 43.31 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 286.0。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.56 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.14 (d, J=8.4 Hz,2H), 4.13 (d, J=7.2 Hz, 2H), 3.29 (s, 3H), 3.21 (s, 2H), 1.29 - 1.15 (m, 3H)ppm。
步骤2: 3-((4-溴苯基)(甲基)氨基)-2-甲基-3-氧代丙酸甲酯 (中间体B)的制备
Figure 202224DEST_PATH_IMAGE625
在0℃下向中间体A (6 g, 19.99 mmol)在DMF (60 mL)中的混合物添加K2CO3(4.14 g, 29.99 mmol)，然后添加MeI (8.50 g, 59.92 mmol, 3.73 mL)并在20℃下搅拌所得混合物15小时。用水 (100 mL)稀释该反应并用EA (60 mL *3)萃取，用盐水 (50 mL)洗涤合并的有机相，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供粗产物。通过柱层析法纯化残余物(SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=5/1至3/1) 以提供作为黄色固体的中间体B (4 g, 12.73mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 300.0。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.57 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.18 - 7.11 (m,2H), 4.19 - 4.03 (m, 2H), 3.40 - 3.28 (m, 1H), 3.28 (s, 3H), 1.31 (d, J=7.2Hz, 3H), 1.27 - 1.21 (m, 3H) ppm。
步骤3: 5-溴-1,3-二甲基-2-氧代吲哚啉-3-甲酸乙酯 (中间体C)的制备
Figure 170180DEST_PATH_IMAGE626
在20℃下向中间体B (4 g, 12.73 mmol)在DMF (120 mL)中的混合物添加t-BuOK(2.86 g, 25.46 mmol)和乙酸铜(II)一水合物 (5.08 g, 25.46 mmol, 5.08 mL)，然后在100℃下搅拌该混合物1小时。滤掉混合物并用水 (150 mL)稀释滤液和然后用EA (50 mL *3)萃取，用盐水 (50 mL)洗涤合并的有机相，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供粗产物。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=5/1至3/1) 以提供作为黄色固体的中间 体C (2 g, 5.77 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 312.0。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.46 - 7.44 (m, 1H), 7.38 (d, J=2.0 Hz,1H), 6.75 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.23 - 4.09 (m, 2H), 3.26 - 3.19 (m, 3H), 1.66(s, 3H), 1.21 - 1.16 (m, 3H) ppm。
步骤4: 5-溴-1,3-二甲基吲哚啉-3-甲酸乙酯 (中间体D)的制备
Figure 266312DEST_PATH_IMAGE627
在0℃下向中间体C (2 g, 6.41 mmol)在THF (20 mL)中的混合物添加BH3.THF(1 M, 9.61 mL)和在60℃下搅拌该混合物2小时。在0℃下用MeOH (30 mL)缓慢淬灭该混合物和然后浓缩以提供粗产物。通过柱层析法纯化该粗产物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=10/1至3/1) 以提供作为无色油的中间体D (300 mg, 855.20 umol) 。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 298.0。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.34 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.23 - 7.20 (m,1H), 6.35 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.26 - 4.15 (m, 2H), 3.89 (d, J=9.2 Hz, 1H),3.19 - 3.12 (m, 1H), 2.78 - 2.72 (m, 3H), 1.54 (s, 3H), 1.33 - 1.25 (m, 3H)ppm。
步骤5: 5-溴-1,3-二甲基吲哚啉-3-甲酸 (中间体E)的制备
Figure 712337DEST_PATH_IMAGE628
在20℃下向中间体D (300 mg, 1.01 mmol)在MeOH (3 mL)和水(1 mL)中的混合物添加LiOH.H2O (126.66 mg, 3.02 mmol)和在20℃下搅拌该混合物15小时。在真空下除去MeOH以得到粗产物，其用水 (1 mL)稀释，和然后用1N HCl调节pH至3和用EA (5 mL *3)萃取，用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机相，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供作为白色固体的中间体E (220 mg, 700.42 umol)，其直接用于接下来的步骤。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 270.0。
步骤6: 5-溴-1,3-二甲基吲哚啉-3-甲酰胺 (中间体F)的制备
Figure 925929DEST_PATH_IMAGE629
在20℃下向中间体E (220 mg, 814.45 umol)在DMF (4 mL)中的混合物添加NH4Cl (435.66 mg, 8.14 mmol)、HATU (464.52 mg, 1.22 mmol)和DIPA (412.07 mg,4.07 mmol, 575.52 uL)，在20℃下搅拌该混合物15小时。添加水 (5 mL)并用EA (5 mL *3)萃取该混合物，用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供粗产物。通过制备型TLC纯化该残余物 (SiO2, PE: EA = 1:1) 以提供作为无色油的中间体F(210 mg, 468.16 umol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 269.0。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.29 (br d, J=2.0 Hz, 1H), 7.22 (d, J=2.0Hz, 1H), 6.44 (d, J=8.4 Hz, 1H), 3.84 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.10 (d, J=9.2 Hz,1H), 2.76 (s, 3H), 1.57 (s, 3H) ppm。
步骤7: 5-溴-1,3-二甲基吲哚啉-3-甲腈 (中间体G)的制备
Figure 64786DEST_PATH_IMAGE630
在0℃下向中间体F (210 mg, 780.27 umol)在DCM (3 mL)中的混合物添加Et3N(236.87 mg, 2.34 mmol, 325.81 uL)，然后缓慢添加 TFAA (409.70 mg, 1.95 mmol,271.33 uL)并在20℃下搅拌所得混合物4小时。用水 (5 mL)稀释该混合物并用DCM (5 mL*3)萃取。用饱和NaHCO3洗涤合并的有机相，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以得到残余物，其通过柱层析法纯化 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=10/1至5/1) 以提供作为无色油的中间体G(100 mg, 390.25 umol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 251.1。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.33 (d, J=2.0 Hz), 7.31 - 7.28 (m, 1H),6.42 (d, J=8.4 Hz, 1H), 3.70 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.32 (d, J=9.2 Hz, 1H), 2.77(s, 3H), 1.68 (s, 3H) ppm。
步骤8: 3-氰基-1,3-二甲基吲哚啉-5-甲酸 (中间体H)的制备
Figure 648214DEST_PATH_IMAGE631
在20℃下向中间体G (50 mg, 199.11 umol)在DMSO (1 mL)中的混合物添加二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (12.19 mg, 19.91 umol)、Pd(OAc)2 (2.24mg, 9.96 umol)、K2CO3 (41.28 mg, 298.66 umol)、H2O (7.17 mg, 398.21 umol, 7.17uL)。将该混合物脱气三次和然后在100℃下在CO (15 psi) 气氛下搅拌15小时。将该混合物与另一批合并。其用水 (3 mL)稀释并用EA (3 mL *3)萃取，用盐水 (5 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以得到粗产物，其通过反相 HPLC (0.1% FA条件)纯化。该溶液用DCM (5 mL*3)萃取，用盐水 (5 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供作为白色固体的中间体H (60 mg, 粗物质)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 217.6。
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 12.39 (br s, 1H), 7.85 - 7.76 (m, 2H),6.66 (d, J=8.4 Hz, 1H), 3.87 (d, J=10.0 Hz, 1H), 3.44 (d, J=10.0 Hz, 1H),2.83 (s, 3H), 1.68 (s, 3H) ppm。
步骤9: (S)-3-氰基-1,3-二甲基吲哚啉-5-甲酸和(R)-3-氰基-1,3-二甲基吲哚啉-5-甲酸 (中间体9和10)的制备
Figure 897930DEST_PATH_IMAGE632
中间体H (60 mg, 277.48 umol) 通过SFC条件分离 (柱: DAICEL CHIRALPAK IC(250mm*30mm,5um)；流动相: [0.1%NH3•H2O IPA]；B%: 20%-20%,5 min；85 min) 以提供作为白色固体的中间体9 (25 mg, 105.21 umol) 和作为白色固体的中间体10 (20 mg,65.67 umol) 。
中间体9:
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 217.1。
手性SFC: IC-3-IPA (DEA)-5-40-3mL-35T.lcm；Rt =1.517 min。
中间体10:
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 217.1。
手性SFC: IC-3-IPA (DEA)-5-40-3mL-35T.lcm；Rt =1.608 min。
中间体11: 5-羟基-5-甲基-1,3,4,5-四氢苯并[c]氧杂䓬-7-甲酸的制备
Figure 945520DEST_PATH_IMAGE633
步骤1: 2,4-二溴-1-(溴甲基)苯 (中间体A)的制备
Figure 255279DEST_PATH_IMAGE634
在0℃下向(2,4-二溴苯基)甲醇 (20 g, 75.21 mmol)和PPh3 (29.59 g, 112.81mmol)在THF (500 mL)中的溶液缓慢地逐滴添加四溴化碳 (37.41 g, 112.81 mmol)。在加料后，在25℃下搅拌该反应混合物2小时。浓缩该反应混合物。通过快速硅胶层析法 (PE)纯化该残余物。浓缩洗脱物以提供作为无色油的中间体A (23 g, 69.95 mmol)。
1H NMNR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.76 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.45 (m, 1H),7.33 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.66 - 4.45 (m, 2H) ppm。
步骤2: 2,4-二溴-1-((丁-3-烯-1-基氧基)甲基)苯 (中间体B)的制备
Figure 326003DEST_PATH_IMAGE635
在0℃下向丁-3-烯-1-醇 (7.57 g, 104.92 mmol, 9.03 mL)在THF (250 mL)中的溶液逐份添加NaH (4.20 g, 104.92 mmol, 60%纯度)。在0℃下搅拌该反应混合物30分钟。然后在0℃下将中间体A (23 g, 69.95 mmol)在THF (50 mL)中的溶液添加至该混合物。将该反应混合物温热至25℃并搅拌14小时。用饱和NH4Cl (100 mL)淬灭该反应混合物。用EA (300 mL *2)萃取该混合物。用盐水 (400 mL)洗涤有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过快速硅胶层析法 (PE)纯化该残余物。浓缩洗脱物以提供作为黄色油的中间体B(22 g, 68.75 mmol) 。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.70 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.48 - 7.42 (m,1H), 7.40 - 7.35 (m, 1H), 5.87 (m, 1H), 5.14 (m, 1H), 5.08 (m, 1H), 4.52 (s,2H), 3.61 (m, 2H), 2.42 (m, 2H) ppm。
步骤3: 7-溴-5-亚甲基-1,3,4,5-四氢苯并[c]氧杂䓬 (中间体C)的制备
Figure 379410DEST_PATH_IMAGE636
在100℃下在N2 气氛下搅拌中间体B (400 mg, 1.25 mmol)、Pd(PPh3)4 (144.44mg, 124.99 umol)和Ag2CO3 (413.59 mg, 1.50 mmol, 68.02 uL)在MeCN (16 mL)中的混合物3小时。过滤该反应混合物并浓缩滤液。通过快速硅胶层析法 (15% EA /PE)纯化该残余物。浓缩洗脱物以提供作为黄色油的中间体C (600 mg, 2.51 mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.47 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.34 (m, 1H),7.01 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.25 - 5.14 (m, 2H), 4.59 (s, 2H), 4.05 - 3.94 (m,2H), 2.65 - 2.54 (m, 2H) ppm。
步骤4: 7-溴-3,4-二氢苯并[c]氧杂䓬-5(1H)-酮 (中间体D)的制备
Figure 219190DEST_PATH_IMAGE637
在0℃下向中间体C (500 mg, 2.09 mmol)在THF (5 mL)和H2O (5 mL)中的溶液添加OsO4 (106.32 mg, 418.22 umol, 21.70 uL)。在0℃下搅拌该反应混合物30分钟。将NaIO4 (1.12 g, 5.23 mmol, 289.68 uL)添加至该混合物。在25℃下搅拌该混合物1小时。通过饱和Na2SO3 (100 mL)淬灭该反应并搅拌15分钟，然后用EA (20 mL *2)萃取。用盐水(20 mL)洗涤有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供残余物。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (PE至PE : EA = 1 : 1)。浓缩洗脱物以提供作为无色油的中间体D (340 mg,1.19 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [79BrM+H]+ = 241.0。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.98 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.59 (m, 1H),7.14 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.87 (s, 2H), 4.07 (m, 2H), 3.07 (m, 2H) ppm。
步骤5: 7-溴-5-甲基-1,3,4,5-四氢苯并[c]氧杂䓬-5-醇 (中间体E)的制备
Figure 90062DEST_PATH_IMAGE638
在0℃下向中间体D (300 mg, 1.24 mmol)和CeCl3 (153.36 mg, 622.20 umol,39.12 uL)在THF (3 mL)中的溶液添加MeMgBr (3 M, 1.24 mL)。在25℃下搅拌该混合物3小时。通过水 (2 mL)淬灭该反应 然后用EA (5 mL *3)萃取。浓缩有机层以提供残余物。通过反相HPLC (0.1% NH3•H2O)纯化该残余物。冻干洗脱物以提供作为无色油的中间体E (240mg, 911.56 umol) 。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.83 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.33 (m, 1H),6.97 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.84 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 14.4 Hz,1H), 4.20 - 4.12 (m, 1H), 3.97 (m, 1H), 2.24 (m, 1H), 2.05 - 1.96 (m, 1H),1.66 (s, 3H) ppm。
步骤6: 5-羟基-5-甲基-3,4-二氢-1H-2-苯并氧杂䓬-7-甲酸 (中间体11)的制备
Figure 382504DEST_PATH_IMAGE639
向中间体E (200.00 mg, 777.84 umol)在二氧杂环己烷 (2 mL)和H2O (0.4 mL)中的溶液添加 Pd(OAc)2 (8.73 mg, 38.89 umol)、二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (47.62 mg, 77.78 umol)和K2CO3 (215.00 mg, 1.56 mmol)。将该反应混合物脱气并用CO吹扫三次，和然后在100℃下在CO (15 psi) 气氛下搅拌该混合物10小时。过滤该反应溶液以得到残余物。通过反相 (0.1% FA)纯化该残余物。在减压下浓缩洗脱物以除去MeCN。冻干洗脱物以提供作为黄色固体的中间体11 (120 mg, 507.24 umol)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.73 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.73 -7.71(m, 1H), 7.23 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.92 - 4.57 (m, 2H), 4.10 -3.77 (m, 2H), 2.20 - 2.03 (m, 1H), 1.90 - 1.74 (m, 1H), 1.50 (s, 3H) ppm。
中间体12: (((3-氧杂双环[4.1.0]庚烷-6-基)硼烷叉基)-l3-氟烷基(fluoraneyl))氟化钾(III)的制备
Figure 239601DEST_PATH_IMAGE640
步骤1: 4,4,5,5-四甲基-2-(3-氧杂双环[4.1.0]庚烷-6-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷 (中间体A)的制备
Figure 933888DEST_PATH_IMAGE641
在-5℃下向2-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷 (5 g, 23.80 mmol)在氟苯 (50 mL)中的混合物缓慢添加二乙基锌 (1 M, 119.00mL)。搅拌该混合物5分钟和然后经5分钟添加溶解在氟苯中 (25 mL)的氯(碘)甲烷 (41.98g, 238.01 mmol, 17.28 mL)。在-5℃下搅拌该混合物10分钟，然后以同样的方式三次随后添加二乙基锌和氯碘甲烷。然后在30℃下搅拌该混合物16小时。将该反应混合物倾倒入饱和NH4Cl (400 mL)中并用MTBE (400 mL*2)萃取。用盐水 (400 mL)洗涤合并的有机相，经无水 Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, PE:EtOAc=100:1-10:1)以提供作为白色固体的中间体A (3 g, 13.39 mmol)。
步骤2: 3-氧杂双环[4.1.0]庚烷-6-基三氟硼酸钾 (中间体12)的制备
Figure 319870DEST_PATH_IMAGE642
在N2 气氛下向中间体A (1.45 g, 6.47 mmol)在MeCN (16 mL)和MeOH (16 mL)中的混合物添加溶解在H2O (5.6 mL)中的KF (1.50 g, 25.88 mmol, 606.29 uL)。在25℃下搅拌该混合物10分钟和然后添加(2R, 3R)-2,3-二羟基丁二酸 (1.94 g, 12.94 mmol,1.85 mL)，然后添加THF (0.7 mL)。在25℃下搅拌所得混合物2小时。通过过滤除去沉淀物和用MeCN (40 mL)洗涤。在真空下浓缩滤液和然后添加甲苯 (20 mL)。在真空下浓缩该混合物并用MTBE (20 mL)研磨该残余物。然后通过过滤收集沉淀物并在真空下干燥以提供作为白色固体的中间体12 (1.46 g)，其不经进一步纯化即直接用于接下来的步骤。
1H NMR (400MHz, D2O) δ = 3.97 - 3.82 (m, 2H), 3.56 - 3.44 (m, 1H),3.24 - 3.20 (m, 1H), 1.80 - 1.77 (m, 1H), 1.60 - 1.46 (m, 1H), 0.80 - 0.70(m, 1H), 0.51 - 0.48 (m, 1H), 0.12 (s, 1H) ppm。
中间体13和14: (S)-3-(2-(2-氨基乙酰胺基)噻唑-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯和(R)-3-(2-(2-氨基乙酰胺基)噻唑-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的制备
Figure 365186DEST_PATH_IMAGE643
步骤1: 5-(2-氨基噻唑-4-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯 (中间体A)的制备
Figure 760395DEST_PATH_IMAGE644
在25℃下在N2下向4-溴噻唑-2-胺 (10 g, 55.85 mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯 (根据FG-A2794中的方法制备) (17.27 g, 55.85 mmol)和K3PO4 (35.57 g, 167.56 mmol)在二氧杂环己烷 (80mL)和H2O (20 mL)中的混合物添加二叔丁基(环戊基)磷烷;二氯化钯;铁 (1.82 g, 2.79mmol)，在80℃下在N2下搅拌该混合物12小时。用水 (300 mL)稀释该反应混合物并用EA(150 mL *4)萃取，经无水 Na2SO4干燥合并的有机层并浓缩以提供棕色油。通过快速硅胶层析法纯化该油 (ISCO®；120 g SepaFlash® 硅胶快速柱, 以80 mL/min的0~100%乙酸乙酯/石油醚 ~ 10% 甲醇醚(Methanol ether)梯度的洗脱液), 浓缩洗脱物以提供作为棕色固体的中间体A (10.2 g, 33.22 mmol) 。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+=282.1。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 6.62 - 6.58 (m, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.99(s, 2H), 4.19 (s, 2H), 3.54 - 3.51 (m, 2H), 2.30 (s, 2H), 1.49 (s, 9H) ppm。
步骤2: 5-[2-[[2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙酰基]氨基]噻唑-4-基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸酯 (中间体B)的制备
Figure 309188DEST_PATH_IMAGE645
在25℃下向2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙酸 (11.20 g, 37.67 mmol)、HATU(21.49 g, 56.51 mmol)和DIEA (14.61 g, 113.02 mmol, 19.69 mL)在DCM (110 mL)中的混合物添加中间体A (10.6 g, 37.67 mmol)和搅拌该混合物2.5小时。用水 (200 mL)稀释该反应混合物并用DCM (100 mL *3)萃取，经无水 Na2SO4干燥合并的有机层并浓缩以提供棕色油。通过快速硅胶层析法纯化该油 (ISCO®；120gSepaFlash® 硅胶快速柱, 以100mL/min的0~50% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液), 浓缩洗脱物以提供作为黄色油的中间 体B (20 g, 28.54 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+=561.2。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 9.81 - 9.74 (m, 1H), 7.77 (d, J = 6.8 Hz,2H), 7.59 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 7.40 - 7.27 (m, 4H), 6.71 (s, 1H), 6.60 (s,1H), 5.63 - 5.62 (m, 1H), 4.51 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 4.24 - 4.21 (m, 3H), 4.12- 4.10 (m, 2H), 3.54 (s, 2H), 2.30 (s, 2H), 1.50 (s, 9H) ppm。
步骤3: 3-[2-[[2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)乙酰基]氨基]噻唑-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (中间体C)的制备
Figure 459547DEST_PATH_IMAGE646
将中间体B (10 g, 14.27 mmol)和Pd(OH)2 (5 g, 7.12 mmol, 20%纯度)在MeOH(100 mL)中的混合物脱气并用H2 (50 psi)吹扫，在25℃下在H2下搅拌该混合物18小时。过滤该反应混合物以除去Pd(OH)2/C, 浓缩滤液以提供黄色油。用MeOH (100 mL)溶解所述油和添加Pd(OH)2 (5 g, 7.12 mmol, 20%纯度)，然后脱气并用H2 (50 psi)吹扫，然后在25℃下在H2下再搅拌该混合物22小时。过滤该反应混合物以除去Pd(OH)2/C，浓缩滤液以提供黑色油。通过快速硅胶层析法纯化该油 (ISCO®；120 g SepaFlash® 硅胶快速柱, 以100mL/min的0~60% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液), 浓缩洗脱物以提供粗物质。其与另一批合并。通过快速硅胶层析法纯化该混合物 (ISCO®；120 g SepaFlash® 硅胶快速柱, 以50 mL/min的0~50% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液)，浓缩洗脱物以提供作为灰白色固体的中间体C (9 g, 15.85 mmol) 。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+=563.5。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 10.43 - 9.78 (m, 1H), 7.76 (d, J = 7.2 Hz,2H), 7.59 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 7.39 - 7.27 (m, 4H), 6.60 (s, 1H), 5.88 (s,1H), 4.48 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 4.23 - 4.15 (m, 3H), 4.08 - 4.06 (m, 1H), 2.83- 2.76 (m, 3H), 2.09 - 1.98 (m, 1H), 1.72 (d, J = 12.4 Hz, 2H), 1.63 - 1.51(m, 2H), 1.47 (s, 9H) ppm。
步骤4: 3-[2-[(2-氨基乙酰基)氨基]噻唑-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (中间体D)的制备
Figure 726580DEST_PATH_IMAGE647
在25℃下搅拌中间体C (8.5 g, 15.11 mmol)和哌啶 (6.90 g, 81.01 mmol, 8mL)在DMF (80 mL)中的混合物1小时。将该反应混合物倾倒入水 (300 mL)中，形成浅黄色沉淀物，过滤以除去残余物，用EA (80 mL *5)萃取滤液，用盐水 (100 mL *3)洗涤合并的有机层，浓缩合并的有机层以提供黄色固体。用 MTBE (100 mL)研磨该固体，过滤以提供灰白色固体。浓缩滤液以提供黄色油。通过反相 HPLC (FA)纯化所述油，浓缩以除去ACN和添加NaHCO3以调节Ph至8，然后用EA (20 mL *3)萃取，浓缩合并的有机层以提供灰白色固体。合并这两批固体以提供作为灰白色固体的中间体D (4.2 g, 12.34 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+=341.2。
1H NMR (400 MHz, MeOD-d4) δ = 6.77 (s, 1H), 4.22 (d, J = 11.2 Hz, 1H),4.00 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.50 (s, 2H), 2.89 - 2.75 (m, 3H), 2.10 - 2.07 (m,1H), 1.77 - 1.70 (m, 2H), 1.54 - 1.45 (m, 10H) ppm。
步骤5: (S)-3-(2-(2-氨基乙酰胺基)噻唑-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯和(R)-3-(2-(2-氨基乙酰胺基)噻唑-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯 (中间体13和14)的制备
Figure 659901DEST_PATH_IMAGE648
中间体D (4.2 g, 12.34 mmol) 通过手性SFC分离 (DAICEL CHIRALPAK IG (柱:DAICEL CHIRALPAK IG (250mm*30mm,10um)；流动相: [0.1%NH3•H2O MEOH]；B%: 35%-35%,3.05min；564min) 以提供作为灰白色固体的中间体13 (1.55 g, 4.55 mmol) 和作为灰白色固体的中间体14 (1.7 g, 4.94 mmol)。
中间体13:
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+=341.2。
1H NMR (400 MHz, MeOD-d4) δ = 6.76 (s, 1H), 4.22 (d, J = 12.4 Hz, 1H),4.00 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 3.51 (s, 2H), 2.89 - 2.73 (m, 3H), 2.09 - 2.07 (m,1H), 1.75 - 1.70 (m, 2H), 1.54 - 1.51 (m, 1H), 1.46 (s, 9H) ppm。
手性SFC: IG-3-MeOH (DEA)-5-40-3mL-35T.lcm；Rt= 2.016 min, ee% =91.38%。
中间体14:
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+=341.2。
1H NMR (400 MHz, MeOD-d4) δ = 6.77 (s, 1H), 4.22 (d, J = 12.4 Hz, 1H),4.00 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 3.51 (s, 2H), 2.89 - 2.76 (m, 3H), 2.09 - 2.06 (m,1H), 1.78 - 1.70 (m, 2H), 1.54 - 1.51 (m, 1H), 1.45 (s, 9H) ppm
手性SFC: IG-3-MeOH(DEA)-5-40-3mL-35T.lcm；Rt= 2.154 min, ee% =95.684%。
中间体15和16: (4S)-4-氰基-4-甲基-异色满-6-甲酸和(4R)-4-氰基-4-甲基-异色满-6-甲酸
Figure 328780DEST_PATH_IMAGE649
步骤1. 5-溴-2-(溴甲基)苯甲酸甲酯和5-溴-2-(二溴甲基)苯甲酸甲酯
将N-溴代琥珀酰亚胺 (130.5 g, 733 mmol)和AIBN (11.47 g, 69.8 mmol)添加至5-溴-2-甲基-苯甲酸甲酯 (160 g, 698 mmol)在CCl4 (1.6 L)中的混合物。在80℃下搅拌该混合物8小时。冷却该混合物至25℃ 并过滤。在真空下浓缩滤液获得作为黄色油的标题化合物的混合物 (215 g, 粗物质)，其直接用于接下来的步骤。
步骤2. 5-溴-2-(溴甲基)苯甲酸甲酯
在0℃下将二异丙基乙胺 (48.6 mL, 279 mmol)和1-乙氧基膦酰基氧基乙烷(36.0 mL, 279 mmol) 添加至5-溴-2-(溴甲基)苯甲酸甲酯和5-溴-2-(二溴甲基)苯甲酸甲酯 (215 g, 粗物质)在THF (1 L)中的混合物。在25℃下搅拌该混合物8小时。用水 (1L)稀释该混合物并用EA (1 L x 3)萃取。用盐水 (1 L)洗涤合并的有机相，经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。用PE:EA = 10:1 (1 L)溶解粗产物。通过短硅胶柱过滤该混合物和用PE:EA = 10:1 (2 L)洗涤。在真空下浓缩滤液获得作为黄色油的标题化合物 (210 g,682 mmol) 。
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 7.99 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.82-7.79 (m,1H), 7.56 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.88 (s, 3H) ppm。
步骤3. 6-溴-4-氧代-异色满-3-甲酸甲酯
在0℃下将氢化钠 (39 g, 974 mmol, 60%纯度)添加至5-溴-2-(溴甲基)苯甲酸甲酯 (150 g, 487 mmol)和2-羟基乙酸甲酯 (75 mL, 974 mmol)在DMF (1.5 L)中的混合物。在25℃下搅拌该混合物1小时。将该混合物倾倒入饱和NH4Cl (aq., 6 L)中，和然后用MTBE (3 L x 2)萃取。经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤，和在减压下浓缩获得作为棕色油的标题化合物 (140 g, 粗物质)，其直接用于接下来的步骤。
步骤4. 6-溴异色满-4-酮
在120℃下搅拌6-溴-4-氧代-异色满-3-甲酸甲酯 (140 g, 487 mmol)在EtOH(500 mL)和HCl (12 M, l L)中的混合物1小时。冷却该反应混合物至25℃并过滤。留下滤饼。用水 (2 L)稀释滤液并用MTBE (1.5 L x 2)萃取。经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤，并在减压下浓缩以提供棕色油。将棕色油与滤饼合并和然后在0℃下用EtOH (200 mL)研磨0.5小时。通过过滤收集固体，用EtOH (50 mL x 2)洗涤并在真空中干燥获得作为黄色固体的标题化合物 (50 g, 242 mmol)。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 8.17 (d, J = 20 Hz, 1H), 7.69-7.67 (m,1H), 7.13 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.85 (s, 2H), 4.37 (s, 2H) ppm。
步骤5. 6-溴-4-甲基-异色满-4-醇
在-50℃下将甲基溴化镁 (3 M 在THF中, 440 mL)逐滴添加至6-溴异色满-4-酮(100 g, 440 mmol)和CeCl3 (54.3 g, 220 mmol, 在马弗炉中在300℃下干燥3小时)在THF (2 L) 中的混合物中。将该混合物温热至20℃ 并搅拌1小时。将该反应混合物倾倒入水 (2 L)中和然后通过硅藻土过滤。然后采用EA (2L)洗涤硅藻土。分离滤液并用EA (1 Lx 2)萃取水层。用盐水 (2 L)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤，并在减压下浓缩以提供残余物。通过FCC纯化粗残余物 (洗脱液: PE:EA = 50:1至3:1) 获得作为浅黄色油的标题化合物 (105 g, 432 mmol)。
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 7.67 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.38-7.35 (m,1H), 6.99 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.35 (s, 1H), 4.71 - 4.58 (m, 2H), 3.68 - 3.59(m, 1H), 3.58 - 3.50 (m, 1H), 1.38 (s, 3H) ppm。
步骤6. 6-溴-4-甲基-异色满-4-甲腈
在0℃下将TMSCN (102.9 mL, 823 mmol)添加至6-溴-4-甲基-异色满-4-醇 (100g, 411 mmol)在DCM (2 L)中的溶液。然后添加InBr3 (29.2 g, 82.3 mmol)，并温热该混合物和在25℃下搅拌1小时。将该混合物倾倒入水 (2 L) 中并用DCM (1 L x 2)萃取。用盐水 (1 L)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤，和在减压下浓缩。通过FCC纯化粗残余物(洗脱液: PE:EA = 20:1至5:1) 获得作为白色固体的标题化合物 (55 g, 218 mmol)。
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 7.82 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.55-7.52 (m,1H), 7.13 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.83 - 4.68(m, 2H), 4.17 (d, J = 11.5 Hz, 1H),3.79 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 1.65 (s, 3H) ppm。
步骤7. (4S)-4-氰基-4-甲基-异色满-6-甲酸和(4R)-4-氰基-4-甲基-异色满-6-甲酸
将乙酸钯 (490 mg, 2.18 mmol)和K2CO3 (9.05 g, 65.4 mmol) 添加至6-溴-4-甲基-异色满-4-甲腈 (11 g, 43.6 mmol)和DCPP-2HBF4 (2.67 g, 4.36 mmol)在DMSO(110 mL)和H2O (5.5 mL)中的混合物。将该混合物脱气并用CO (g)吹扫三次，和然后在100℃下在CO (15 psi)的气氛下搅拌该混合物4小时。然后用EA (1 L x 2)萃取水层。用HCl(2N)酸化水相直到实现pH = 3。然后用EA (1 L x 3)萃取水层。用盐水 (1 L)洗涤合并的有机相，经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。在20℃下用EA (100 mL)研磨粗产物15分钟，然后通过过滤收集固体，用EA (50 mL)洗涤，和干燥获得作为白色固体的标题化合物 (30g, 138 mmol) 。通过SFC分离纯化立体异构体的混合物 (柱: DAICEL CHIRALPAK AD-H(250mm x 30mm, 5μm)；流动相: [0.1%NH3-H2O MEOH]；B%: 20%-20%, 3.52min；514min)。在减压下浓缩峰1以提供油。将所述油溶解于水 (200 mL)中。用HCl (2N)酸化该混合物至pH= 3并用EA (100 mL x 3)萃取。用盐水 (100 mL)洗涤合并的有机相，经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩获得作为灰白色固体的中间体1 (4.15 g, 19.1 mmol)。在减压下浓缩峰2以提供油。将所述油溶解于水 (200 mL)中。用HCl (2N)酸化该混合物至pH = 3并用EA(100 mL x 3)萃取。合并的有机相用盐水 (100 mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩获得作为灰白色固体的中间体2 (4.1 g, 18.9 mmol)。
中间体15: 手性SFC: AD-3_5CM_MEOH(DEA)_5_40_3ML_AT35.M；RT = 0.89 min
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 218.3。
1HNMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 13.17 (br s, 1H), 8.07 (d, J = 1.6 Hz,1H), 7.89-7.87 (m, 1H), 7.29 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.95 - 4.79 (m, 2H), 4.19(d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.88 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 1.67 (s, 3H) ppm。
中间体16: 手性SFC: AD-3_5CM_MEOH(DEA)_5_40_3ML_AT35.M；RT = 1.03 min
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 218.3。
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 13.17 (br s, 1H), 8.07 (d, J = 1.6 Hz,1H), 7.89-7.87 (m, 1H), 7.29 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.95 - 4.79 (m, 2H), 4.19(d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.88 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 1.67 (s, 3H) ppm。
中间体17和18: (4R)-4-羟基-4-甲基异色满-6-甲酸和(4S)-4-羟基-4-甲基异色满-6-甲酸
Figure 587723DEST_PATH_IMAGE650
步骤1: 将6-溴-4-甲基-异色满-4-醇 (1.00 g, 4.11 mmol)、dccp.2BF4 (252mg, 0.41 mmol)、K2CO3 (853 mg, 6.17 mmol)、Pd(OAc)2 (92.4 mg, 0.41 mmol)和H2O(1.48 mL, 82.3 mmol)在DMSO (10 mL)中的混合物脱气并用CO (g)吹扫三次。在100℃下在CO 气氛下搅拌该混合物14小时。过滤该反应混合物以除去黑色固体和然后用水 (60mL)稀释并用EA (60 mL x 2)萃取。丢弃有机层并用HCl水溶液调节水相至pH = 6。然后用EA (100 mL x 3)萃取该水溶液。用盐水 (200 mL x 2)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥，过滤，和在减压下浓缩获得作为浅黄色固体的标题化合物的混合物 (550 mg, 2.43mmol)。通过手性SFC分离立体异构体 (柱: DAICEL CHIRALPAK AD (250mm*30mm, 10μm)；流动相: [0.1%NH3•H2O IPA]；B%: 40%-40%,4.0 min；60 min)。收集所需级分并在减压下浓缩。用水稀释该产物，用HCl水溶液调节至pH = 4，然后用EA (80 mL x 3)萃取。经无水Na2SO4干燥合并的有机层，过滤，和在减压下浓缩获得作为黄色固体的中间体3 (260 mg,1.18 mmol)和作为黄色固体的中间体4 (240 mg, 1.04 mmol)。
中间体17: 手性SFC: AD-3_5CM_IPA (DEA)_5_40_3ML_AT35.M；RT = 1.537min。
LCMS (ESI) m/z: [M-18+H]+ = 191.1。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 13.19 - 12.40 (m, 1H), 8.15 (d, J = 1.6Hz, 1H), 7.75 - 7.73 (m, 1H), 7.13 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.34 (s, 1H), 4.82 -4.68 (m, 2H), 3.71 - 3.65 (m, 1H), 3.61 - 3.54 (m, 1H), 1.40 (s, 3H) ppm。
中间体18: 手性SFC: AD-3_5CM_IPA (DEA)_5_40_3ML_AT35.M；RT = 1.926 min。
LCMS (ESI) m/z: [M-17+H]+ = 191.1。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.86 (br s, 1H), 8.15 (d, J = 1.6 Hz,1H), 7.75 - 7.73 (m, 1H), 7.13 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.34 (s, 1H), 4.84 - 4.67(m, 2H), 3.73 - 3.62 (m, 1H), 3.62 - 3.53 (m, 1H), 1.40 (s, 3H) ppm。
中间体19和20: (4R)-4-氟-4-甲基-异色满-6-甲酸和(4S)-4-氟-4-甲基-异色满-6-甲酸
Figure 138790DEST_PATH_IMAGE651
步骤1. 6-溴-4-氟-4-甲基-异色满
在0℃下将DAST (52.2 mL, 395 mmol,)逐滴添加至中间体8 (32 g, 132 mmol)在DCM (320 mL)中的混合物。温热该混合物并在25℃下搅拌20分钟。将该混合物倾倒入冰水 (600 mL)中并用DCM (250 mL x 3)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤，并在真空下浓缩。通过FCC纯化该残余物 (洗脱液: PE:EA = 30:1) 获得作为黄色油的标题化合物 (24.5 g, 99.96 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [M-18+H]+ = 226.9。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.72 (s, 1H), 7.45 - 7.42 (m, 1H), 6.93(d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.84 - 4.74 (m, 1H), 4.73 - 4.64 (m, 1H), 4.06 - 4.00(m, 1H), 3.86 - 3.78 (m, 1H), 1.76 - 1.64 (m, 3H) ppm。
步骤2. (4R)-4-氟-4-甲基-异色满-6-甲酸和(4S)-4-氟-4-甲基-异色满-6-甲酸
在25℃下将乙酸钯 (687 mg, 3.06 mmol), dccp-2HBF4 (1.87 g, 3.06 mmol)、K2CO3 (6.34 g, 45.9 mmol)和H2O (7.50 mL)添加至6-溴-4-氟-4-甲基-异色满 (7.5 g,30.6 mmol)在DMSO (75 mL)中的溶液。采用CO (g)吹扫该混合物三次。将该混合物加热并在100℃下在CO (15 psi)的气氛下搅拌4小时。将该反应混合物倾倒入H2O (1.2 L)中并用EA (400 mL x 2)萃取。用1N HCl酸化水相至pH=5并用EA (300 mL x 3)萃取。用盐水 (300mL x 2)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩获得作为白色固体的标题化合物的混合物 (2.6 g, 12.2 mmol)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 13.42 - 12.67 (m, 1H), 8.13 (s, 1H),7.92 - 7.88 (m, 1H), 7.29 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.91 - 4.82 (m, 1H), 4.77 -4.68 (m, 1H), 4.10 - 4.01 (m, 1H), 3.89 - 3.76 (m, 1H), 1.70 - 1.58 (m, 3H)ppm。
通过SFC分离中间体19和20 (柱: DAICEL CHIRALPAK IG (250mm*30mm, 10μm)；流动相: [0.1%NH3-H2O MeOH]；B%: 20%-20%, 3.4min；2300min) 以提供两个峰。在减压下浓缩峰1以除去95% MeOH并倾倒至H2O (500 mL)中。用HCl (1N)酸化该混合物至pH=5并用EA (150 mL x 3)萃取。用盐水 (100 mL)洗涤合并的有机层，经无水 Na2SO4干燥，过滤，和在减压下浓缩以提供作为白色固体的中间体7 (1.06 g, 5.04 mmol)。在减压下浓缩峰2并倾倒至H2O (500 mL)中。用HCl (1N)酸化该混合物至pH=5并用EA (150 mL x 3)萃取。用盐水 (100 mL)洗涤合并的有机层，经无水 Na2SO4干燥，过滤，和在减压下浓缩以提供作为白色固体的中间体8 (1.07 g, 5.09 mmol)。
中间体19: 手性SFC: AD-3_5CM_MEOH (DEA)_5_40_3ML_AT35.M, RT = 0.819min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ= 13.08 (br s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.92 -7.88 (m, 1H), 7.29 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.90 - 4.81 (m, 1H), 4.78 - 4.68 (m,1H), 4.05 - 4.01 (m, 1H), 3.87 - 3.78 (m, 1H), 1.72 - 1.58 (m, 3H) ppm。
中间体20: 手性SFC: AD-3_5CM_MEOH (DEA)_5_40_3ML_AT35.M, RT = 0.903min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ= 13.31 - 12.88 (m, 1H), 8.13 (s, 1H),7.92 - 7.88 (m, 1H), 7.29 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.90 - 4.81 (m, 1H), 4.78 -4.68 (m, 1H), 4.08 - 4.01 (m, 1H), 3.89 - 3.77 (m, 1H), 1.72 - 1.58 (m, 3H)ppm。
中间体21和22: (R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-氰基-4-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-甲酸和(S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-氰基-4-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-甲酸
Figure 141381DEST_PATH_IMAGE652
步骤1. 6-溴-4-氧代-3,4-二氢喹啉-1(2H)-甲酸叔丁酯
在60℃下搅拌6-溴-2,3-二氢-1H-喹啉-4-酮 (2 g, 8.85 mmol)、Boc2O (3.86g, 17.7 mmol)、DMAP (108 mg, 0.88 mmol)和DIEA (3.1 mL, 17.7 mmol)在DCM (20 mL)中的混合物12小时。在减压下浓缩该混合物并然后倾倒入水 (5 mL)中。然后用EA (5mL x3)萃取该水溶液。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤，和在减压下浓缩。通过FCC纯化该残余物 (洗脱液: 0至12% EA/PE) 获得作为黄色油的标题化合物 (1.75 g, 5.37 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 326.0。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.89 - 7.88 (m, 1H), 7.75 (d, J = 1.2Hz, 2H), 4.11 - 4.07 (m, 2H), 2.79 - 2.75 (m, 2H), 1.51 (s, 9H) ppm。
步骤2.6-溴-4-氰基-3,4-二氢喹啉-1(2H)-甲酸叔丁酯
在0℃下将叔丁醇钾 (1.38 g, 12.26 mmol)添加至6-溴-4-氧代-3,4-二氢喹啉-1(2H)-甲酸叔丁酯(2 g, 6.13 mmol)和1-(异氰基甲基磺酰基)-4-甲基-苯 (1.80 g,9.20 mmol)在DME (100 mL)和EtOH (4 mL)中的混合物。在25℃下搅拌该混合物12小时。将该反应混合物倾倒入水 (5 mL)中并用EA (5 mL x 3)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤，和在减压下浓缩。通过FCC纯化该残余物 (洗脱液: 0至20% EA /PE) 获得作为黄色油的标题化合物 (900 mg, 2.67 mmol) 。
LCMS (ESI) m/z: [M-55]+ = 281.0。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.67 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.55 (d, J =2.4 Hz, 1H), 7.51 - 7.47 (m, 1H), 4.48 - 4.44 (m, 1H), 3.74 - 3.69 (m, 2H),2.21 - 2.15 (m, 2H), 1.48 (s, 9H) ppm。
步骤3. 6-溴-4-氰基-4-甲基-3,4-二氢喹啉-1(2H)-甲酸叔丁酯
在0℃下将氢化钠 (89 mg, 2.22 mmol, 60%纯度)缓慢添加至6-溴-4-氰基-3,4-二氢喹啉-1(2H)-甲酸叔丁酯 (500 mg, 1.48 mmol)在THF (5 mL)中的混合物。在0℃下搅拌该混合物0.5小时，然后添加 MeI (0.14 mL, 2.22 mmol)。将该反应混合物温热至25℃并搅拌2小时。用饱和NH4Cl (20 mL)淬灭该反应混合物并用EA (10 mL x 3)萃取。经无水Na2SO4干燥合并的有机层，过滤，和在减压下浓缩。通过FCC纯化所得油 (洗脱液: 0至50%EA /PE) 获得作为黄色油的标题化合物 (370 mg, 1.01 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [M-55]+=295.0
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.66 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.56 (d, J =2.0 Hz, 1H), 7.38 - 7.36 (m, 1H), 3.89 - 3.80 (m, 2H), 2.40 - 2.34 (m, 1H),2.04 - 2.00 (m, 1H), 1.73 (s, 3H), 1.53 (s, 9H) ppm。
步骤4.(R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-氰基-4-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-甲酸 &(S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-氰基-4-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-甲酸
在25℃下将乙酸钯 (11.8 mg, 0.053 mmol)和dccp.2HBF4 (64.5 mg, 0.11mmol) 添加至6-溴-4-氰基-4-甲基-3,4-二氢喹啉-1(2H)-甲酸叔丁酯 (370 mg, 1.05mmol)和K2CO3 (218 mg, 1.58 mmol)在DMSO (3 mL)和H2O (1 mL)中的混合物。将该混合物脱气并用CO (g, 15 psi)吹扫三次，和然后温热该混合物并在100℃下在CO (g)下搅拌12小时。过滤该反应混合物并通过反相 HPLC纯化滤液获得作为白色固体的标题化合物的混合物 (190 mg, 0.60 mmol)。通过手性SFC分离立体异构体 (DAICEL CHIRALPAK AD(250mm*30mm,10μm)；流动相: [0.1%NH3-H2O MEOH]；B%: 20%- 20%,1.75min；75min)以提供作为浅黄色固体的中间体21 (80 mg, 0.25 mmol)和作为浅黄色固体的中间体22 (90 mg,0.28 mmol)。
中间体21: LCMS (ESI) m/a: [M-55]+=261.1
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.96 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.80 - 7.78(m, 1H), 7.69 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 3.79 - 3.74 (m, 2H), 2.36 - 2.32 (m, 1H),2.07 - 2.05 (m, 1H), 1.71 (s, 3H), 1.47 (s, 9H) ppm。
手性SFC: AD-3_5CM_MEOH(DEA)_5_40_3ML_AT35.M, Rt =0.766 min。
中间体22: LCMS (ESI) m/a: [M-55]+=261.1
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.96 (br s, 1H), 7.81 - 7.78 (m, 1H),7.71 (br d, J = 8.8 Hz, 1H), 3.80 - 3.74 (m, 2H), 2.36 - 2.31 (m, 1H), 2.07 -2.04 (m, 1H), 1.71 (s, 3H), 1.48 (s, 9H) ppm。
手性SFC: AD-3_5CM_MEOH(DEA)_5_40_3ML_AT35.M. Rt =0.916 min。
中间体23: 螺[异色满-4,3'-氧杂环丁烷]-6-甲酸钠的制备
Figure 664766DEST_PATH_IMAGE653
步骤1: 6-溴异色满-4-甲腈 (中间体A)的制备
Figure 829031DEST_PATH_IMAGE654
在0℃下向6-溴异色满-4-酮 (100 mg, 440.42 umol)在DME (4 mL)中的溶液添加1- (异氰基甲基磺酰基)-4-甲基-苯 (128.98 mg, 660.63 umol)、EtOH (162.32 mg,3.52 mmol)和t-BuONa (93.12 mg, 968.93 umol)。然后在60℃下搅拌该混合物1小时。用水 (10 mL)稀释该混合物和用EA (10 mL *3)萃取。在真空下浓缩合并的有机相以提供残余物，其通过柱层析法纯化 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至1/1)。浓缩洗脱物以提供作为黄色固体的中间体A (1.0 g, 3.36 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [79BrM+H]+ = 238.0。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.59 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.46-7.44 (m,1H), 6.95 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.86 - 4.70 (m, 2H), 4.24 - 4.17 (m, 1H), 4.13- 4.01 (m, 2H) ppm。
步骤2: 6-溴异色满-4-甲酸甲酯 (中间体B)的制备
Figure 132974DEST_PATH_IMAGE655
在25℃下搅拌中间体A (600 mg, 2.52 mmol)在HCl/MeOH (4 M, 10.00 mL)中的混合物16小时。浓缩该混合物以提供残余物，其通过柱层析法纯化 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至2/1)。浓缩洗脱物以提供作为棕色油的中间体B (600 mg, 2.21 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [81BrM+H]+ = 273.0。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.44 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.38-7.36 (m,1H), 6.91 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.90 - 4.62 (m, 2H), 4.39-4.36 (m, 1H), 3.98-3.94 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.74 (m, 1H) ppm。
步骤3: 6-溴-4-(羟甲基)异色满-4-甲酸甲酯 (中间体C)的制备
Figure 673676DEST_PATH_IMAGE656
在25℃下向中间体B (550 mg, 2.03 mmol)在DMSO (6 mL)中的溶液添加NaHCO3(8.52 mg, 101.44 umol)和多聚甲醛 (33.52 mg, 1.12 mmol)。然后在25℃下搅拌该混合物12小时。用水 (5 mL)稀释该混合物和用EA (5 mL *3)萃取。在真空下浓缩合并的有机相以提供残余物，其通过反相纯化 (0.1% FA条件)。浓缩洗脱物以提供作为白色固体的中间 体C (550 mg, 1.28 mmol) 。
LCMS (ESI) m/z: [79BrM+H]+ = 301.0。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.51 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.38-7.36 (m,1H), 6.87 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.75 - 4.63 (m, 2H), 4.15 - 4.10 (m, 1H), 4.05- 4.00 (m, 1H), 4.00 - 3.93 (m, 1H), 3.42 (s, 3H) ppm。
步骤4: 6-溴-4-(对甲苯基磺酰基氧基甲基)异色满-4-甲酸甲酯 (中间体D)的制备
Figure 51568DEST_PATH_IMAGE657
在0℃下向中间体C (500 mg, 1.66 mmol)和吡啶 (788.02 mg, 9.96 mmol)在DCM (5 mL)中的溶液添加TosCl (1.27 g, 6.64 mmol)。然后在25℃下搅拌该混合物16小时。用水 (5 mL)洗涤该混合物和分离有机层并浓缩以提供残余物，其通过反相纯化 (0.1%FA条件)。在真空下浓缩洗脱物 以除去MeCN并冻干该残余物 以提供作为棕色固体的中间 体D (500 mg, 1.10 mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.85 - 7.74 (m, 2H), 7.45 (d, J = 2.0 Hz,1H), 7.43 - 7.33 (m, 3H), 6.91 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.72 (s, 2H), 4.42 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.29 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.24 - 4.12 (m, 2H), 3.75 (s, 3H),2.48 (s, 3H) ppm。
步骤5: 中间体4-甲基苯磺酸[6-溴-4-(羟甲基)异色满-4-基]甲酯 (中间体E)的制备
Figure 652314DEST_PATH_IMAGE658
在-70℃下向中间体D (440 mg, 966.36 umol)在THF (5.0 mL)中的溶液添加DIBALH (1 M)和搅拌该混合物10分钟。然后在0℃下搅拌该混合物80分钟。用水 (5 mL)稀释该混合物和用EA (5 mL *3)萃取。浓缩合并的有机相以提供残余物，其通过柱层析法纯化 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至1/1) 以提供作为棕色油的中间体E (380 mg,889.29 umol )。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.68 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.38 (d, J = 2.0Hz, 1H), 7.32 - 7.22 (m, 3H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.59 (s, 2H), 4.14(s, 2H), 3.88 - 3.78 (m, 1H), 3.77 - 3.63 (m, 3H), 2.38 (s, 3H) ppm。
步骤6: 6-溴螺[异色满-4,3'-氧杂环丁烷] (中间体F)的制备
Figure 177973DEST_PATH_IMAGE659
在25℃下向中间体E (250 mg, 585.06 umol)在THF (5 mL)中的溶液添加NaH(70.20 mg, 1.76 mmol, 60%纯度)。然后在25℃下搅拌该混合物12小时。用水 (5 mL)淬灭该混合物和用EA (5 mL *3)萃取。浓缩合并的有机层以提供残余物，其通过柱层析法纯化(SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=10/1至1/1) 以提供作为棕色油的中间体F (145 mg, 568.39umol)。
LCMS (ESI) m/z: [79BrM+H]+ = 255.0。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.97 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.31-7.28 (m,1H), 6.81 (d, J = 8.4Hz, 1H), 4.74 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 4.64 - 4.54 (m, 4H),4.09 (s, 2H) ppm。
步骤7: 螺[异色满-4,3'-氧杂环丁烷]-6-甲酸甲酯 (中间体G)的制备
Figure 522367DEST_PATH_IMAGE660
在25℃下向中间体F (130 mg, 509.59 umol)在DMSO (5 mL)和MeOH (2.5 mL)中的溶液添加二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (31.20 mg, 50.96 umol),K2CO3 (105.65 mg, 764.38 umol)和Pd(OAc)2 (5.72 mg, 25.48 umol)，然后将该混合物脱气并用CO吹扫三次。在100℃下在CO 气氛 (15 psi)下搅拌所得混合物16小时。过滤该混合物并用水 (30 mL)稀释滤液并用EA (5 mL *3)萃取，浓缩有机层以提供粗物质。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=10/1至5/1) 以提供作为白色固体的中间体 G (80 mg, 341.52 umol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 235.1。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.61 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.94-7.92 (m,1H), 7.09 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.91 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 4.81 (s, 2H), 4.70(d, J = 6.4 Hz, 2H), 4.23 (s, 2H), 3.98 (s, 3H) ppm。
步骤8: 螺[异色满-4,3'-氧杂环丁烷]-6-羰基氧钠 (中间体23)的制备
Figure 20344DEST_PATH_IMAGE661
在25℃下向中间体G (50 mg, 213.45 umol)在MeOH (2 mL)和H2O (2 mL)中的溶液添加NaOH (25.61 mg, 640.35 umol)。然后在25℃下搅拌该混合物2小时。冻干该混合物以提供作为白色固体的中间体23 (80 mg)，其直接用于接下来的步骤。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 243.1。
中间体24: 3-((顺)-1-氟-3-羟基-3-甲基环丁基)苯甲酸的制备
Figure 526412DEST_PATH_IMAGE662
步骤1: 3-苄氧基环丁醇 (中间体A)的制备
Figure 807876DEST_PATH_IMAGE663
在0℃下在N2下向3-苄氧基环丁酮 (29.7 g, 168.55 mmol)在MeOH (700 mL)中的混合物逐份添加NaBH4 (25.51 g, 674.19 mmol)。在25℃下搅拌该混合物2小时。在0℃下将该混合物倾倒入饱和NH4Cl (2000 mL)中并在真空下浓缩粗混合物以除去大部分MeOH。用乙酸乙酯 (1000 mL * 2)萃取水相。用盐水 (1000 mL)洗涤合并的有机相，用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩以提供作为浅黄色油的中间体A (30 g, 168.32 mmol)，其不经纯化即用于接下来的步骤。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.35-7.30 (m, 5H), 4.42(s, 2H), 3.92-3.90(m, 1H), 3.64-3.62 (m, 1H), 2.79 - 2.65 (m, 2H), 1.99 - 1.90 (m, 2H) ppm。
步骤2: (3-苄氧基环丁氧基)-叔丁基-二甲基-硅烷 (中间体B)的制备
Figure 690382DEST_PATH_IMAGE664
在0℃下在N2下向中间体A (30 g, 168.32 mmol)和咪唑 (17.19 g, 252.49mmol)在DCM (500 mL)中的混合物逐份添加TBSCl (38.06 g, 252.49 mmol, 30.94 mL)。在25℃下搅拌该混合物2小时。将该混合物倾倒入冰水 (2000 mL)中并用DCM (1500 mL*2)萃取。用盐水 (1000 mL*1)洗涤合并的有机相，经无水 Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过硅胶层析法纯化该残余物 (石油醚/乙酸乙酯=50/1) 并浓缩以提供作为浅黄色油的中间体B (49 g, 167.53 mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.34 - 7.28 (m, 5H), 4.48 - 4.37 (m, 2H),3.94 - 3.81 (m, 1H), 3.65 - 3.53 (m, 1H), 2.70 - 2.53 (m, 2H), 2.04 - 1.93(m, 2H), 0.90 (s, 9H), 0.07 (s, 6H) ppm。
步骤3: 3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基环丁醇 (中间体C)的制备
Figure 42865DEST_PATH_IMAGE665
在N2下向中间体B (49 g, 167.53 mmol)在 MeOH (1000 mL)中的溶液添加Pd(OH)2 (10 g, 7.12 mmol, 10%纯度)。在真空下将该悬浮液脱气和用H2吹扫三次。在H2 (50psi)下在60℃下搅拌该混合物16小时。通过硅藻土垫过滤该混合物并在真空下浓缩以提供作为黄色油的中间体C (34 g, 粗物质)，其不经纯化即直接使用。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 3.93 - 3.78 (m, 2H), 2.77 - 2.66 (m, 2H),1.94 - 1.83 (m, 2H), 0.90 - 0.87 (m, 9H), 0.05 - 0.03 (m, 6H) ppm。
步骤4: 3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基环丁酮 (中间体D)的制备
Figure 719834DEST_PATH_IMAGE666
在25℃下在N2下向中间体C (5 g, 24.71 mmol)在DCM (50 mL)中的混合物逐份添加TEMPO (38.85 mg, 247.08 umol)和1,3,5-三氯-1,3,5-三嗪烷-2,4,6-三酮 (5.74g, 24.71 mmol)。在25℃下搅拌该混合物10分钟。过滤该混合物并在真空下浓缩。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至20/1)以提供作为无色油的中间体D(2.7 g, 13.48 mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 4.71 - 4.53 (m, 1H), 3.34 - 3.00 (m, 4H),0.93 - 0.90 (m, 9H), 0.12 - 0.09 (m, 6H) ppm。
步骤5: 3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-1-甲基-环丁醇 (中间体E)的制备
Figure 157769DEST_PATH_IMAGE667
在-50℃下在N2下向中间体D (2.7 g, 13.48 mmol)和CeCl3 (1.66 g, 6.74mmol)在THF (27 mL)中的混合物逐滴添加MeMgBr (3 M, 13.48 mL)。在15℃下搅拌该混合物30分钟。将该混合物倾倒入NH4Cl水溶液 (100 mL)中并通过硅藻土过滤。用乙酸乙酯(50 mL * 2)萃取滤液。用无水 Na2SO4干燥合并的有机相，过滤并在真空下浓缩。通过柱层析法 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=1/0至3/1)纯化残余物。浓缩洗脱物以提供作为无色油的中间体E (2 g, 9.24 mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 3.95 - 3.88 (m, 1H), 2.50 - 2.38 (m, 1H),2.49 - 2.32 (m, 1H), 2.15 - 1.93 (m, 2H), 1.33 - 1.26 (m, 3H), 0.91 - 0.84(m, 9H), 0.07 - 0.00 (m, 6H) ppm。
步骤6: (3-(苄氧基)-3-甲基环丁氧基)(叔丁基)二甲基硅烷 (中间体F)的制备
Figure 906282DEST_PATH_IMAGE668
在0℃下在N2下向中间体E (1.93 g, 8.92 mmol)在THF (40 mL)中的混合物一次性添加NaH (535.09 mg, 13.38 mmol, 60%纯度)。在0℃下搅拌该混合物10分钟，然后在0℃下向该混合物添加BnBr (1.69 g, 9.90 mmol)。在25℃下搅拌该混合物20分钟。将该混合物倾倒入饱和NH4Cl (150 mL)中并用乙酸乙酯 (50 mL * 2)萃取。用盐水 (30 mL)洗涤合并的有机相，用无水 Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过硅胶层析法纯化该残余物(石油醚/乙酸乙酯=50/1, 10/1) 并浓缩以提供作为浅黄色油的中间体F (1.9 g, 6.20mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.42 - 7.29 (m, 5H), 4.41 (s, 2H), 4.05 -3.98 (m, 1H), 2.44 - 2.33 (m, 2H), 2.26 - 2.16 (m, 2H), 1.40 - 1.32 (m, 3H),0.93 - 0.90 (m, 9H), 0.09 - 0.05 (m, 6H) ppm。
步骤7: 3-苄氧基-3-甲基-环丁醇 (中间体G)的制备
Figure 113273DEST_PATH_IMAGE669
在0℃下在N2下向中间体F (1.5 g, 4.89 mmol)在THF (15 mL)中的混合物一次性添加TBAF (1 M, 9.79 mL)。在25℃下搅拌该混合物2小时。浓缩该混合物。通过硅胶层析法纯化该残余物 (石油醚/乙酸乙酯=20/1, 5/1) 并浓缩以提供作为浅黄色油的中间体G(1.2 g, 粗物质)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.37 - 7.28 (m, 5H), 4.41 (s, 2H), 4.12 -4.03 (m, 1H), 2.53 - 2.42 (m, 2H), 2.22 - 2.11 (m, 2H), 1.39 (s, 3H) ppm。
步骤8: 3-苄氧基-3-甲基-环丁酮 (中间体H)的制备
Figure 226722DEST_PATH_IMAGE670
在25℃下在N2下向中间体G (1.2 g, 6.24 mmol)在DCM (12 mL)中的混合物一次性添加TEMPO (6.16 mg, 39.17 umol)和1,3,5-三氯-1,3,5-三嗪烷-2,4,6-三酮 (909.88mg, 3.91 mmol)。在25℃下搅拌该混合物10分钟。过滤该混合物并在真空下浓缩。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至20/1)以提供作为无色油的中间体H(1.05 g, 5.52 mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.40 - 7.28 (m, 5H), 4.51 (s, 2H), 3.39 -3.20 (m, 2H), 3.04 - 2.88 (m, 2H), 1.67 (s, 3H) ppm。
步骤9: 3-苄氧基-1-(3-溴苯基)-3-甲基-环丁醇 (中间体I)的制备
Figure 151953DEST_PATH_IMAGE671
在-70℃下在N2下向1,3-二溴苯 (1.13 g, 4.81 mmol, 578.90 uL)在THF (10mL)中的混合物逐滴添加n-BuLi (2.5 M, 1.92 mL)。在-70℃下搅拌该混合物30分钟，然后在-70℃下向该混合物逐滴添加中间体H (915 mg, 4.81 mmol)/THF (2 mL)。在-70℃下搅拌该混合物30分钟。将该混合物倾倒入饱和NH4Cl (100 mL)中并用乙酸乙酯 (50 mL * 2)萃取。用盐水 (50 mL)洗涤合并的有机相，用无水 Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过硅胶层析法纯化该残余物 (石油醚/乙酸乙酯=30/1, 20/1) 并浓缩以提供作为无色油的中间体I (800 mg, 2.30 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 240.0。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.65 - 7.59 (m, 1H), 7.46 - 7.29 (m, 7H),7.27 - 7.23 (m, 1H), 4.50 (s, 2H), 2.63 (s, 4H), 1.39 (s, 3H) ppm。
步骤10: 1-((反)-3-(苄氧基)-1-氟-3-甲基环丁基)-3-溴苯和1-((顺)-3-(苄氧基)-1-氟-3-甲基环丁基)-3-溴苯 (中间体J1和J2)的制备
Figure 438578DEST_PATH_IMAGE672
在0℃下在N2下向中间体I (800 mg, 2.30 mmol)在DCM (8 mL)中的混合物逐滴添加DAST (557.03 mg, 3.46 mmol, 456.58 uL)。在25℃下搅拌该混合物30分钟。在0℃下将与另一批合并的混合物倾倒入饱和NaHCO3 (50 mL)中并用DCM (30 mL * 2)萃取。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机相，采用无水 Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过制备型TLC纯化该残余物 (石油醚/乙酸乙酯=10/1)以提供作为浅黄色油的中间体J1 (330 mg,944.92 umol)和作为浅黄色油的中间体J2 (250 mg, 715.85 umol)。
中间体J1:
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.62 (s, 1H), 7.47 - 7.42 (m, 1H), 7.41 -7.29 (m, 6H), 7.26 - 7.22 (m, 1H), 4.42 (s, 2H), 2.83 - 2.62 (m, 4H), 1.69(s, 3H) ppm。
中间体J2:
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.63 - 7.62 (m, 1H), 7.50 - 7.48 (m, 1H),7.42 - 7.35 (m, 5H), 7.33 - 7.27 (m, 2H), 4.49 (s, 2H), 3.04 - 2.88 (m, 2H),2.81 - 2.69 (m, 2H), 1.36 (s, 3H) ppm。
步骤11: (顺)-3-(3-溴苯基)-3-氟-1-甲基环丁醇 (中间体K)的制备
Figure 765654DEST_PATH_IMAGE673
在25℃下在N2下向中间体J2 (250.00 mg, 715.85 umol)在DCM (8 mL)和H2O(0.8 mL)中的混合物一次性添加DDQ (893.73 mg, 3.94 mmol)。在25℃下搅拌该混合物12小时。将该混合物倾倒入饱和NaHCO3 (50 mL)中并用DCM (30 mL * 2)萃取。用盐水 (20mL)洗涤合并的有机相，采用无水 Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过硅胶层析法 (石油醚/乙酸乙酯=10/1, 5/1)纯化该残余物并浓缩以提供作为浅黄色油的中间体K (170mg, 656.08 umol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.61 - 7.55 (m, 1H), 7.51 - 7.45 (m, 1H),7.38 - 7.33 (m, 1H), 7.31 - 7.28 (m, 1H), 2.82 - 2.70 (m, 4H), 1.35 (s, 3H)ppm。
步骤12: 3-((1s,3s)-1-氟-3-羟基-3-甲基环丁基)苯甲酸 (中间体24)的制备
Figure 50005DEST_PATH_IMAGE674
在N2下在25℃下向中间体K (160 mg, 617.49 umol)在DMSO (2 mL)中的溶液添加Pd(OAc)2 (6.93 mg, 30.87 umol)、K2CO3 (128.01 mg, 926.23 umol)、二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (37.81 mg, 61.75 umol)和H2O (22.25 mg, 1.23mmol)。在真空下将该悬浮液脱气并用CO吹扫几次。在CO (15 psi)下在100℃下搅拌该混合物12小时。将与另一批合并的混合物倾倒入水 (20 mL)中并用乙酸乙酯 (10 mL * 2)萃取。向水相添加HCl水溶液 (2M)以调节至pH=3。然后用乙酸乙酯 (10 mL * 2)萃取该混合物。用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机相，采用无水 Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩以提供作为黄色固体的中间体24 (120 mg, 535.17 umol)，其不经纯化即用于接下来的步骤。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.22 - 8.15 (m, 1H), 8.14 - 8.08 (m, 1H),7.74 - 7.66 (m, 1H), 7.58 - 7.50 (m, 1H), 2.95 - 2.77 (m, 4H), 1.36(s, 3H)ppm。
中间体25: 3-(6-氟-2-氧杂螺[3.3]庚烷-6-基)苯甲酸钠的制备
Figure 196952DEST_PATH_IMAGE675
步骤1: 6-(3-溴苯基)-2-氧杂螺[3.3]庚烷-6-醇 (中间体A)的制备
Figure 224951DEST_PATH_IMAGE676
在-70℃下向1,3-二溴苯 (200 mg, 847.80 umol)在THF (2 mL)中的溶液添加n-BuLi (2.5 M, 339.12 uL)。在-70℃下在N2下搅拌该混合物30分钟。在-70℃下添加2-氧杂螺[3.3]庚烷-6-酮 (95.06 mg, 847.80 umol)和在-70℃下在N2下搅拌该混合物1.5小时。用水 (20 mL)淬灭该反应混合物并用EtOAc (10 mL *3)萃取。用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机相，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=2/1)纯化残余物以提供作为黄色油的中间体A (0.16 g, 594.50 umol)。
LCMS (ESI) m/z: [79BrM+H]+ = 269.2。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.55 (m, 1H), 7.44 - 7.40 (m, 1H), 7.38- 7.35 (m, 1H), 7.32 - 7.29 (m, 1H), 5.61 (s, 1H), 4.67 (s, 2H), 4.53 (s,2H), 2.67 - 2.62 (m, 2H), 2.46 - 2.42 (m, 2H) ppm。
步骤2: 6-(3-溴苯基)-6-氟-2-氧杂螺[3.3]庚烷 (中间体B)的制备
Figure 468851DEST_PATH_IMAGE677
在0℃下向中间体A (0.15 g, 557.34 umol)在DCM (2 mL)中的溶液逐滴添加DAST (179.68 mg, 1.11 mmol)。在0℃下搅拌该混合物1小时。用水 (20 mL)淬灭该反应混合物并用EtOAc (10 mL *3萃取)。用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机相，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=3/1)纯化残余物以提供作为黄色油的中间体B (110 mg, 405.72 umol)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.63 - 7.54 (m, 2H), 7.46 - 7.35 (m,3H), 4.71 (s, 2H), 4.59 - 4.52 (m, 2H), 2.97 - 2.82 (m, 2H), 2.82 - 2.71 (m,2H) ppm。
步骤3: 3-(6-氟-2-氧杂螺[3.3]庚烷-6-基)苯甲酸甲酯 (中间体C)的制备
Figure 924103DEST_PATH_IMAGE678
将中间体B (100 mg, 368.83 umol), MeOH (118.17 mg, 3.69 mmol), Pd(OAc)2 (8.28 mg, 36.88 umol)和Xantphos (21.34 mg, 36.88 umol)在Et3N (3 mL)中的混合物脱气并用CO吹扫三次，和然后在70℃下在CO (15 psi) 气氛下搅拌该混合物3小时。在EtOAc (30 mL)和水(10 mL)之间分配该反应混合物。分离有机相，用水 (10 mL *3)洗涤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=1/1)纯化残余物以提供作为黄色油的中间体C (55 mg, 219.77 umol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 251.1。
1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.03 (m, 2H), 7.64 - 7.43 (m, 2H), 4.89 (s,2H), 4.72 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.01 - 2.80 (m, 4H) ppm。
步骤4: [3-(6-氟-2-氧杂螺[3.3]庚烷-6-基)苯甲酰基]氧基钠 (中间体24)的制备
Figure 823926DEST_PATH_IMAGE679
向中间体C (50 mg, 199.79 umol)在MeOH (1 mL)中的溶液添加NaOH (7.99 mg,199.79 umol)在H2O (1 mL)中的溶液。在20℃下搅拌该混合物1小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供作为黄色油的中间体25 (30 mg, 116.18 umol)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。
中间体26: 3-(3-(二氟甲基)氧杂环丁烷-3-基)苯甲酸的制备
Figure 390036DEST_PATH_IMAGE680
步骤1. 2-(3-溴苯基)丙二酸二甲酯
将2-吡啶甲酸 (7.31 g, 59.4 mmol)、CuI (5.65 g, 29.7 mmol)和Cs2CO3 (161g, 495 mmol)添加至1-溴-3-碘-苯 (31.5 mL, 247.43 mmol)和丙二酸二甲酯 (30.6 mL,267 mmol)在氮气吹扫的二氧杂环己烷 (1 L)中的混合物。在60℃下搅拌该混合物4.2小时。滤除固体，和在真空下浓缩滤液。将该混合物稀释在NH4Cl水溶液 (5%, 300 mL)中，并用EA (300 mL x 2)萃取。经无水Na2SO4干燥合并的有机相，过滤，并在真空下浓缩。通过FCC(洗脱液: PE:EA = 20:1)纯化该残余物获得作为浅黄色油的标题化合物 (70 g)。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ= 7.52 - 7.48 (m, 1H), 7.44 - 7.37 (m, 1H),7.30 - 7.25 (m, 1H), 7.18 - 7.12 (m, 1H), 4.53 (s, 1H), 3.69 (s, 6H) ppm。
步骤2. 2-(3-溴苯基)-2-(羟甲基)丙二酸二甲酯
将碳酸氢钠 (17.6 g, 209 mmol)添加至2-(3-溴苯基)丙二酸二甲酯 (120 g,418 mmol)在H2O (450 mL)和EtOH (900 mL)中的溶液。在0℃下逐滴添加甲醛 (156 mL,2.09 mol)并在0℃下搅拌该溶液1小时。将该反应混合物温热至20℃ 并搅拌6小时。浓缩该溶液以除去EtOH并用EA (300 mL x 3)萃取该混合物。经无水 Na2SO4干燥合并的有机相，过滤，并在真空下浓缩。通过FCC (洗脱液: PE:EA = 1:0至5:1)纯化该残余物获得作为浅黄色油的标题化合物 (85 g, 268 mmol)。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.43 - 7.35 (m, 2H), 7.18 - 7.12 (m, 2H),4.22 - 4.16 (m, 2H), 3.75 (s, 6H) ppm。
步骤3. 2-(3-溴苯基)-2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)丙二酸二甲酯
将咪唑 (54.7 g, 804 mmol)添加至2-(3-溴苯基)-2-羟基甲基)丙二酸二甲酯(85 g, 268 mmol)在DCM (1 L)中的溶液。将该溶液冷却至 5℃和添加TBSCl (46.0 mL,375 mmol)。将该混合物温热至20℃ 并搅拌2小时。通过添加水 (500 mL)淬灭该反应，和用DCM (500 mL x 2)萃取该混合物。经无水 Na2SO4干燥合并的有机相，过滤，并在真空下浓缩。通过FCC (洗脱液: PE:EA = 100:1)纯化该残余物获得作为浅黄色油的标题化合物(100 g, 232 mmol)。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.65 - 7.61 (m, 1H), 7.44 - 7.39 (m, 1H),7.32 - 7.28 (m, 1H), 7.20 - 7.15 (m, 1H), 4.28 (s, 2H), 3.75 (s, 6H), 0.85(s, 9H), 0.02 (s, 6H) ppm。
步骤4. 2-(3-溴苯基)-2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)丙烷-1,3-二醇
在-78℃下将2-(3-溴苯基)-2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)丙二酸二甲酯 (53 g, 123 mmol)在THF (200 mL)中的溶液逐滴添加至DIBAL-H (1 M, 737.15 mL)在THF (600 mL)中的溶液。在-78℃下搅拌溶液10分钟和使其经1小时温热至0℃。在0℃下搅拌该溶液20分钟。在0-5℃下通过添加冷1M HCl (4 L)淬灭该反应混合物。在5℃下搅拌该混合物20分钟并添加EA (1.5 L)。分离各相并然后用另外的EA (800 mL)萃取水相。过滤合并的有机相。经无水 Na2SO4干燥滤液，过滤，并在真空下浓缩。通过FCC (洗脱液: PE:EA= 10:1至1:1)纯化该残余物以获得作为浅黄色油的标题化合物 (28 g, 71.6 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [79BrM+H]+=374.9。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.51 - 7.49 (m, 1H), 7.36 - 7.27 (m, 2H),7.20 - 7.15 (m, 1H), 4.72 - 4.66 (m, 2H), 4.08 - 3.90 (m, 4H), 3.89 - 3.86(m, 2H), 0.84 - 0.80 (m, 9H), 0.03 - -0.02 (m, 6H) ppm。
步骤5. ((3-(3-溴苯基)氧杂环丁烷-3-基)甲氧基)(叔丁基)二甲基硅烷
在0℃下将三苯基膦 (112 g, 426 mmol)添加至2-(3-溴苯基)-2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)丙烷-1,3-二醇 (40 g, 107 mmol)在甲苯 (1 L)中的溶液。搅拌该混合物30分钟，和然后在0℃下 将Ziram (97.8 g, 320 mmol)添加至该混合物，然后逐滴添加DIAD (82.9 mL, 426 mmol)。在20℃下搅拌该混合物15小时。将PE (500 mL)添加至该混合物并滤除固体。在真空下浓缩滤液和通过FCC (洗脱液: PE:EA = 50:1)纯化该残余物以获得作为浅黄色油的标题化合物 (33 g, 72.0 mmol)。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.49 - 7.45 (m, 1H), 7.32 - 7.27 (m, 2H),7.08 - 7.03 (m, 1H), 4.99 - 4.94 (m, 2H), 4.87 - 4.78 (m, 2H), 4.06 (s, 2H),0.94 (s, 9H), 0.01 (s, 6H) ppm。
步骤6. (3-(3-溴苯基)氧杂环丁烷-3-基)甲醇
在0℃下将TBAF (1 M, 269 mL)添加至((3-(3-溴苯基)氧杂环丁烷-3-基)甲氧基)(叔丁基)二甲基硅烷 (64 g, 179 mmol)在THF (200 mL)中的溶液。在0℃下搅拌该混合物20分钟。将该混合物稀释在冰水 (2 L)中，并然后用EA (300 mL x 2)萃取。经无水Na2SO4干燥合并的有机相，过滤，并在真空下浓缩。通过FCC (洗脱液: PE:EA = 1:0至1:1)纯化该残余物获得作为白色固体的标题化合物 (28.4 g, 117 mmol)。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.47 - 7.42 (m, 1H), 7.30 - 7.27 (m, 1H),7.24 - 7.22 (m, 1H), 7.04 - 7.00 (m, 1H), 4.98 - 4.90 (m, 2H), 4.80 - 4.71(m, 2H), 4.04 (s, 2H), 1.76 (s, 1H) ppm。
步骤7. 3-(3-溴苯基)氧杂环丁烷-3-甲醛
在15℃下将戴斯-马丁试剂 (1.66 mL, 5.35 mmol)添加至(3-(3-溴苯基)氧杂环丁烷-3-基)甲醇 (1 g, 4.11 mmol)在DCM (20 mL)中的溶液。在15℃下搅拌该混合物0.5小时。通过添加碳酸氢钠水溶液 (5%, 30 mL)淬灭该反应。搅拌该混合物10分钟和然后滤除固体。用EA (10 mL x 2)萃取滤液和经无水 Na2SO4干燥合并的有机相，过滤，并在真空下浓缩。通过FCC (洗脱液: PE:EA = 1:0至3:1)纯化该残余物获得作为浅黄色油的标题化合物 (0.65 g, 2.70 mmol)。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 9.80 (m, 1H), 7.55 - 7.50 (m, 1H), 7.36 -7.31 (m, 1H), 7.28 - 7.26 (m, 1H), 7.06 - 7.01 (m, 1H), 5.21 - 5.14 (m, 2H),5.03 - 4.98 (m, 2H) ppm。
步骤8. 3-(3-溴苯基)-3-(二氟甲基)氧杂环丁烷
在-50℃下将DAST (0.99 mL, 7.47 mmol)逐滴添加至3-(3-溴苯基)氧杂环丁烷-3-甲醛 (0.6 g, 2.49 mmol)在DCM (10 mL)中的溶液。将该混合物温热至5℃并搅拌0.5小时。在冰冷碳酸氢钠水溶液 (5%, 100 mL)中稀释该溶液，和用DCM (20 mL x 2)萃取该混合物。经无水 Na2SO4干燥合并的有机相，过滤，并在真空下浓缩。通过FCC (洗脱液: PE:EA= 1:0至8:1)纯化该残余物获得作为浅黄色油的标题化合物 (0.64 g, 2.43 mmol)。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.54 - 7.49 (m, 1H), 7.32 - 7.28 (m, 1H),7.27 - 7.24 (m, 1H), 7.10 - 6.96 (m, 1H), 6.38 - 6.01 (m, 1H), 5.01 (s, 4H)ppm。
步骤9. 3-(3-(二氟甲基)氧杂环丁烷-3-基)苯甲酸 (中间体26)
将乙酸钯 (25.6 mg, 0.11 mmol)、dccp.2HBF4 (140 mg, 228 mmol)和碳酸钾(236 mg, 1.71 mmol) 添加至3-(3-溴苯基)-3-(二氟甲基)氧杂环丁烷 (0.3 g, 1.14mmol)在DMSO (2 mL)和水(1 mL)中的溶液。将该混合物脱气并用CO (g)冲洗三次。然后在CO 气氛 (15 psi)下在90℃下搅拌该混合物5小时。将水 (5 mL)添加至该混合物并用EA(3 mL x 3)萃取该混合物。经Na2SO4干燥合并的有机相，过滤，并在真空下浓缩获得作为浅红色油的标题化合物 (0.3 g, 粗物质)。
LCMS (ESI) m/z: [M-H]+=227.1。
中间体27: 3-(羟甲基)-1,3-二甲基吲哚啉-5-甲酸的制备
Figure 488442DEST_PATH_IMAGE681
步骤1: 3-(4-溴-N-甲基-苯胺基)-2-甲基-3-氧代-丙酸乙酯 (中间体A)的制备
Figure 114596DEST_PATH_IMAGE682
在20℃下向4-溴-N-甲基-苯胺 (500 mg, 2.69 mmol)、3-乙氧基-2-甲基-3-氧代-丙酸 (471.30 mg, 3.22 mmol)在CH3CN (6 mL)中的混合物添加[氯(二甲基氨基)亚甲基]-二甲基-铵;六氟磷酸盐 (1.13 g, 4.03 mmol)、1-甲基咪唑 (661.95 mg, 8.06mmol)，在20℃下搅拌该混合物15小时。浓缩该混合物以提供粗产物。向粗产物添加水 (10mL)，然后用DCM (10 mL * 3)萃取，用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供粗产物。通过柱层析法 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=5/1至3/1)纯化残余物以得到棕色油的中间体A (550 mg, 1.75 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 314/316。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = .61 - 7.53 (m, 2H), 7.17 - 7.12 (m, 2H),4.20 - 4.04 (m, 2H), 3.40-3.36 ( m, 1H),3.29 (s, 3H), 1.32-1.30 (m, 3H), 1.27- 1.21 (m, 3H) ppm。
步骤2: 5-溴-1,3-二甲基-2-氧代-吲哚啉-3-甲酸乙酯 (中间体B)的制备
Figure 236135DEST_PATH_IMAGE683
在20℃下向中间体A (6 g, 19.10 mmol)在DMF (70 mL)中的混合物添加t-BuOK(2.36 g, 21.01 mmol)和乙酸铜(II)一水合物 (4.58 g, 22.92 mmol)，然后在100℃下搅拌该混合物1小时。滤掉混合物和向滤液添加水 (150 mL)，然后用EA (50 mL * 3)萃取，用盐水 (50 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供粗产物。通过柱层析法(SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=5/1至3/1)纯化残余物以得到作为黄色固体的中间体B (2.2 g,6.70 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [79BrM+H]+ = 311.9。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.46 - 7.44 (m, 1H), 7.38 (d, J=2.0 Hz,1H), 6.75 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.23 - 4.08 (m, 2H), 3.24 (s, 3H), 1.66 (s, 3H),1.20-1.69 (m, 3H) ppm。
步骤3: (5-溴-1,3-二甲基-吲哚啉-3-基)甲醇 (中间体C)的制备
Figure 605937DEST_PATH_IMAGE684
在0℃下向中间体B (1.4 g, 4.48 mmol)在THF (20 mL)中的混合物添加BH3 .THF(1 M, 22.42 mL)，然后在70℃下搅拌该混合物3小时。在0℃下用MeOH (30 mL)缓慢淬灭该混合物，然后浓缩以提供粗产物。通过柱层析法 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=10/1至3/1)纯化该粗产物以得到作为无色油的中间体C (500 mg, 1.72 mmol, 38.30%收率)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 256/258。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.22 - 7.21 (m, 1H), 7.09 (d, J=2.0 Hz,1H), 6.34 (d, J=8.4 Hz, 1H), 3.65 - 3.54 (m, 2H), 3.44 (d, J=9.2 Hz, 1H),3.02 (d, J=9.2 Hz, 1H), 2.74 (s, 3H), 1.32 (s, 3H) ppm。
步骤4: 3-(羟甲基)-1,3-二甲基-吲哚啉-5-甲酸 (中间体27)的制备
Figure 824428DEST_PATH_IMAGE685
向中间体C (80 mg, 312.33 umol)在DMSO (1 mL)和H2O (0.5 mL)中的溶液添加Pd(OAc)2 (3.51 mg, 15.62 umol)、二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐(19.12 mg, 31.23 umol)和K2CO3 (64.75 mg, 468.50 umol)。将该反应混合物脱气和用N2吹扫3次，和然后在100℃下在CO (15 psi) 气氛下搅拌该混合物10小时。过滤该反应以提供残余物。通过反相 (FA条件)纯化溶液，并在减压下浓缩以除去MeCN，然后冻干以得到作为灰白色固体的中间体27 (50 mg, 158.19 umol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 222.0。
中间体28: 硫代色满-7-甲酸 1,1-二氧化物的制备
Figure 621483DEST_PATH_IMAGE686
步骤1: 3-(3-溴苯基)硫烷基丙酸甲酯 (中间体A)的制备
Figure 230319DEST_PATH_IMAGE687
向3-溴苯硫醇 (2.0 g, 10.58 mmol)在DMF (20 mL)中的溶液添加K2CO3 (2.92g, 21.16 mmol)，然后添加3-溴丙酸甲酯 (3.53 g, 21.16 mmol)并在60℃下搅拌该混合物2小时。将该混合物倾倒入水 (100 mL)中和用EtOAc (100 mL*2)萃取。在真空下浓缩合并的有机相以提供残余物，其通过柱层析法 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至5/1)纯化。在真空下浓缩洗脱物以提供作为棕色油的中间体A (2.8 g, 9.16 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [81BrM+H]+ = 277.0。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.51 (m, 1H), 7.38 - 7.32 (m, 1H), 7.31 -7.28 (m, 1H), 7.22 - 7.14 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.20 (m, 2H), 2.67 (m, 2H)ppm。
步骤2: 3-(3-溴苯基)硫烷基丙酸 (中间体B)的制备
Figure 138232DEST_PATH_IMAGE688
向中间体A (1.4 g, 5.09 mmol)在MeOH (5 mL)、H2O (5 mL)和THF (5 mL)中的溶液添加NaOH (610.51 mg, 15.26 mmol)。然后在25℃下搅拌该混合物1小时。用HCl水溶液 (20 mL, 1M)调节该混合物的pH至 5~6并浓缩以提供残余物，其通过反相 HPLC (0.1%FA条件)纯化。用EA (15 mL *3)萃取洗脱物和在真空下浓缩合并的有机相以提供作为白色固体的中间体B (700 mg, 2.51 mmol)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.67 - 11.97 (m, 1H), 7.52 (m, 1H),7.41 - 7.25 (m, 3H), 3.18 (m, 2H), 2.55 (m, 2H) ppm。
步骤3: 7-溴硫代色满-4-酮 (中间体C)的制备
Figure 148914DEST_PATH_IMAGE689
在25℃下将中间体B (1 g, 3.83 mmol)添加至H2SO4 (18.40 g, 183.85 mmol,98%纯度)。然后在25℃下搅拌该混合物0.5小时。将该混合物倾倒入冰水 (100 mL)中和用饱和NaHCO3调节pH至7~8。用EA (100 mL *3)萃取该混合物和浓缩合并的有机相以提供残余物，其通过柱层析法纯化 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至1/4) 以提供作为黄色油的中间体C (840 mg, 3.18 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [81BrM+H]+ = 244.9。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.85 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.66 (d, J =2.0 Hz, 1H), 7.43 - 7.40 (m, 1H), 3.35 - 3.32 (m, 2H), 2.92 - 2.87 (m, 2H)ppm。
步骤4: 7-溴硫代色满 (中间体D)的制备
Figure 179186DEST_PATH_IMAGE690
向中间体C (800 mg, 3.29 mmol)在TFA (10 mL)中的溶液添加Et3SiH (873.60mg, 7.51 mmol)。然后在80℃下搅拌该混合物2小时。用饱和NaHCO3调节该混合物的pH至 7~8和然后用EA (50 mL *3)萃取。浓缩合并的有机相以提供残余物，其通过柱层析法(SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至1/5)纯化并浓缩以提供作为无色油的中间体D (1.5 g,粗物质)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.20 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.12 - 7.08(m, 1H), 6.98 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.01 - 2.97 (m, 2H), 2.70 - 2.66 (m, 2H),1.98 - 1.91 (m, 2H) ppm。
步骤5: 硫代色满-7-甲酸 (中间体E)的制备
Figure 275318DEST_PATH_IMAGE691
在25℃下向中间体D (750 mg, 3.27 mmol)在H2O (5 mL)和DMSO (10 mL)中的溶液添加二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (200.40 mg, 327.32 umol)、K2CO3 (678.58 mg, 4.91 mmol)和Pd(OAc)2 (36.74 mg, 163.66 umol)。然后将该混合物脱气并用CO吹扫三次和在100℃下在CO 气氛(15 psi)下搅拌该混合物16小时。过滤该混合物并用EA (10 mL *2)洗涤滤液。用1M HCl调节水相的pH至6~7和用EA (50 mL *3)萃取。用盐水 (5 mL)洗涤有机层并在真空下浓缩以提供作为黄色固体的中间体E (600 mg, 2.91mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 195.1。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.57 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.54 - 7.50(m, 1H), 7.19 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.08 - 3.04 (m, 2H), 2.83 (m, 2H), 2.05 -1.99 (m, 2H) ppm。
步骤6: 1,1-二氧代-3,4-二氢-2H-硫色烯-7-甲酸 (中间体28)的制备
Figure 986923DEST_PATH_IMAGE692
向中间体E (300 mg, 1.54 mmol)在MeOH (2 mL)中的溶液逐滴添加Oxone (1.90g, 3.09 mmol)在H2O (2 mL)中的混合物。在30℃下搅拌该混合物3小时。通过饱和 Na2SO3溶液 (20 mL)淬灭该混合物和然后用水 (10 mL)稀释。用1M HCl调节该混合物的pH至 4~5和用EA (50 mL *3)萃取。通过盐水 (50 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为白色固体的中间体28 (170 mg, 751.39 umol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 227.1。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.25 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.06 - 8.03(m, 1H), 7.51 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.61 - 3.52 (m, 2H), 3.08 (m, 2H), 2.37 -2.30 (m, 2H) ppm。
中间体29: 1,1-二氟螺[环丙烷-2,4'-异色满]-6'-甲酸的制备
Figure 117690DEST_PATH_IMAGE693
步骤1: 6-溴-4-亚甲基异色满 (中间体A)的制备
Figure 318864DEST_PATH_IMAGE694
在-30℃下在N2下向甲基(三苯基)鏻;溴化物 (943.98 mg, 2.64 mmol)在THF (5mL)中的溶液逐滴添加n-BuLi (2.5 M, 1.15 mL)。在-30℃下搅拌该混合物1小时。在-30℃下在N2下逐滴添加6-溴异色满-4-酮 (根据中间体10B中的方法制备) (0.5 g, 2.20mmol)在THF (1mL)中的溶液。在20℃下搅拌该混合物16小时。用饱和NH4Cl (20 mL)淬灭该反应和用EtOAc (10 mL *3)萃取该混合物。用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，在真空下浓缩以提供残余物，其通过柱层析法 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=5/1)纯化以提供作为黄色油的中间体A (350 mg, 1.54 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [81BrM+H]+ = 227.1。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.73 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.28 (m, 1H), 6.84(d, J=8.0 Hz, 1H), 5.53 (s, 1H), 4.99 (s, 1H), 4.67 (s, 2H), 4.35 (s, 2H)ppm。
步骤2: 6'-溴-1,1-二氟螺[环丙烷-2,4'-异色满] (中间体B)的制备
Figure 636713DEST_PATH_IMAGE695
向中间体A (250 mg, 1.11 mmol)在THF (5 mL)中的溶液添加NaI (33.30 mg,222.14 umol)。在70℃下在N2下逐滴添加TMSCF3 (631.77 mg, 4.44 mmol)在THF (1 mL)中的溶液和然后在70℃下搅拌该混合物4小时。过滤所得混合物并用乙酸乙酯 (10 mL)洗涤滤饼。在真空下浓缩滤液以提供残余物，其通过柱层析法纯化 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=5/1) 以提供作为黄色油的中间体B (0.28 g, 1.02 mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.29 (m, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.86 (d, J=8.0Hz, 1H), 4.83 - 4.70 (m, 2H), 3.91 - 3.84 (m, 1H), 3.83 - 3.73 (m, 1H), 1.87- 1.72 (m, 1H), 1.54 - 1.49 (m, 1H) ppm。
步骤3: 1,1-二氟螺[环丙烷-2,4'-异色满]-6'-甲酸 (中间体29)的制备
Figure 152008DEST_PATH_IMAGE696
将中间体B (100 mg, 363.52 umol)、二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (22.26 mg, 36.35 umol)、H2O (32.75 mg, 1.82 mmol)、K2CO3 (75.36 mg,545.28 umol)和Pd(OAc)2 (8.16 mg, 36.35 umol)在DMSO (1 mL)中的混合物脱气并用CO吹扫三次，和然后在100℃下在CO (15 Psi) 气氛下搅拌该混合物16小时。在乙酸乙酯 (30mL)和1N HCl 溶液 (10 mL)之间分配该反应混合物。分离有机相，用水 (10 mL *3)洗涤并在减压下浓缩以提供作为黄色油的中间体29 (100 mg)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 241.0。
中间体30: 3-(3-羟基-1-甲基环丁基)苯甲酸的制备
Figure 137281DEST_PATH_IMAGE697
步骤1: 3-(3-溴苯基)-2,2-二氯-3-甲基环丁酮 (中间体A)的制备
Figure 506427DEST_PATH_IMAGE698
在10℃下向1-溴-3-异丙烯基-苯 (2 g, 10.15 mmol)和Cu-Zn (2.62 g, 20.30mmol)在DME (40 mL)中的混合物逐滴添加2,2,2-三氯乙烯基氯 (3.69 g, 20.30 mmol)和POCl3 (1.95 g, 12.69 mmol)在DME (10 mL)中的混合物，和然后在25℃下搅拌该混合物10小时。将该混合物添加至冰冷的H2O (200 mL)和EA (100 mL)中以淬灭该反应。然后用NaHCO3水溶液 (5% 100 mL)中和该混合物并滤除所形成的沉淀物。分离有机相和经Na2SO4干燥，过滤并浓缩至干以提供残余物。通过柱层析法 (SiO2, PE/EA=100:1)纯化残余物以提供作为浅黄色油的中间体A (2.3 g, 粗物质)。
步骤2: 3-(3-溴苯基)-3-甲基环丁酮 (中间体B)的制备
Figure 311572DEST_PATH_IMAGE699
向中间体A (2 g, 6.49 mmol)在AcOH (30 mL)中溶液的添加Zn (4.25 g, 64.94mmol)和在100℃下加热该混合物10小时。过滤掉固体并浓缩滤液至干以提供残余物。用H2O(30 mL)和EA (50 mL)稀释该残余物，并滤除固体。分离有机相和通过NaHCO3水溶液 (5%,30 mL)碱化。分离有机相和经Na2SO4干燥，和然后浓缩至干以提供作为浅黄色稠油的中间体 B (0.7 g, 粗物质)。
步骤3: 3-(3-溴苯基)-3-甲基环丁醇 (中间体C)的制备
Figure 364979DEST_PATH_IMAGE700
在-10℃下向中间体B (0.5 g, 2.09 mmol)在THF (10 mL)中的溶液逐滴添加DIBAL-H (1 M, 5.23 mL)和在-10℃下搅拌该混合物30分钟。在0℃下向该混合物逐滴添加H2O (30 mL)以淬灭该反应并用EA (30 mL *3)萃取该混合物。经Na2SO4干燥合并的有机相，过滤并浓缩至干以提供残余物，其通过柱层析法 (SiO2, PE/EA=0-1:1)纯化。浓缩洗脱物至干以提供作为浅黄色油的中间体C (0.48 g, 1.91 mmol)。
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ= 7.52 - 7.13 (m, 4H), 5.12 - 4.88 (m, 1H),2.73 - 2.64 (m, 1H), 2.48 - 2.37 (m, 1H), 2.09 - 1.92 (m, 2H), 1.41 - 1.30(m, 3H) ppm。
步骤4: 3-(3-羟基-1-甲基环丁基)苯甲酸 (中间体30)的制备
Figure 204759DEST_PATH_IMAGE701
向中间体C (0.4 g, 1.66 mmol)、二乙酰氧基钯 (37.24 mg, 165.89 umol)、二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (203.14 mg, 331.78 umol)在DMSO (3mL)和H2O (0.3 mL)中的混合物添加K2CO3 (343.90 mg, 2.49 mmol)，然后将该混合物脱气并用CO吹扫三次。在CO (15 psi)下在100℃下搅拌该混合物5小时。用H2O (30 mL)稀释该混合物和酸化该混合物至pH=3-4，然后用EA (6 mL *3)萃取该混合物。经Na2SO4干燥合并的有机相，过滤并浓缩至干以提供作为棕色稠油的中间体30 (0.4 g)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 207.1。
中间体31: 4-氰基-4-(羟甲基)异色满-6-甲酸的制备
Figure 685418DEST_PATH_IMAGE702
步骤1: 6-溴异色满-4-甲腈 (中间体A)的制备
Figure 305756DEST_PATH_IMAGE703
在-10℃下向6-溴异色满-4-酮 (根据FG-A2637A中的方法制备) (100 mg,440.42 umol)和1-(异氰基甲基磺酰基)-4-甲基-苯(128.98 mg, 660.63 umol)在DME (4mL)和EtOH (0.2 mL)中的溶液添加t-BuONa (42.33 mg, 440.42 umol)。然后在15分钟内使该混合物温热至60℃。在60℃下搅拌该反应混合物15分钟。在25℃下通过另外的水 (40mL)淬灭该反应混合物，并然后用EA (60 mL * 2)萃取。用盐水 (40 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过柱层析法 (SiO2, PE: EA =50:1至3:1)纯化残余物，在减压下浓缩该级分以得到作为灰白色固体的中间体A (260 mg,982.86 umol) 。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.59 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.46 - 7.44 (m,1H), 6.95 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.86 - 4.70 (m, 2H), 4.27 - 4.15 (m, 1H), 4.12- 4.02 (m, 2H) ppm。
步骤2: 6-溴-4-(羟甲基)异色满-4-甲腈 (中间体B)的制备
Figure 897274DEST_PATH_IMAGE704
向中间体A (260 mg, 1.09 mmol)和NaHCO3 (9.17 mg, 109.21 umol, 4.25 uL)在DMSO (3 mL)中的溶液添加多聚甲醛 (39.33 mg, 1.31 mmol)和在25℃下搅拌该混合物14小时。用水 (30 mL)稀释该反应混合物，用EA (30 mL * 3)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以得到残余物。通过快速硅胶层析法 (PE:EA=1:0至1:1)纯化该残余物，在减压下浓缩该级分以提供作为白色固体的中间体B (220 mg, 793.82umol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+=268.0。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.69 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.56 - 7.54(m, 1H), 7.14 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.91 - 5.88 (m, 1H), 4.74 (s, 2H), 4.18(d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.04 - 4.01 (m, 1H), 3.84 - 3.78 (m, 1H), 3.74 - 3.68(m, 1H) ppm。
步骤3: 4-氰基-4-(羟甲基)异色满-6-甲酸 (中间体31)的制备
Figure 857140DEST_PATH_IMAGE705
将中间体B (220 mg, 820.57 umol)、二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (50.24 mg, 82.06 umol)、K2CO3 (170.12 mg, 1.23 mmol)、Pd(OAc)2 (18.42 mg,82.06 umol)和H2O (1.04 g, 57.44 mmol)在DMSO (4 mL)中的混合物脱气并用CO吹扫三次，和然后在100℃下在CO 气氛下搅拌该混合物14小时。过滤该反应混合物以移除黑色固体，和然后用水 (20 mL)稀释，用EA (20 mL * 2)萃取。丢弃有机层并用HCl水溶液调节水相至pH=4，用EA (30 mL * 3)萃取，然后经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以得到残余物。通过反相HPLC (0.1% FA)纯化该残余物，然后在减压下浓缩该溶液以除去MeCN 并然后冻干以提供作为黄色固体的中间体31 (70 mg, 233.45 umol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 233.9。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 13.49 - 12.91 (m, 1H), 8.03 (d, J = 1.6Hz, 1H), 7.90 - 7.87 (m, 1H), 7.29 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.92 - 5.90 (m, 1H),4.85 (s, 2H), 4.25 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.02 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.74 (d,J = 5.2 Hz, 2H) ppm。
中间体32: 1-乙基-3H-1l4-苯并[d]异噻唑-6-甲酸 1-氧化物的制备
Figure 508701DEST_PATH_IMAGE706
步骤1: 4-甲基-3-硫烷基-苯甲酸 (中间体A)的制备
Figure 350755DEST_PATH_IMAGE707
在0℃下经0.5小时的时间向3-氨基-4-甲基-苯甲酸 (10 g, 66.15 mmol)在盐酸(12 M, 40 mL)和水(100 mL)中的溶液添加NaNO2 (4.79 g, 69.46 mmol)在水(100 mL)中的溶液，然后经0.5小时的时间将该混合物添加至乙氧基硫代羰基硫烷基钾 (12.73 g,79.38 mmol)和Na2CO3 (2 M, 109.15 mL)的搅拌混合物。在45℃下搅拌该混合物1小时。用1N HCl调节该反应混合物的pH至4并通过过滤收集所形成的沉淀物。在减压下干燥固体并然后溶解在EtOH (50 mL)和水(50 mL)中。然后添加KOH (14.85 g, 264.62 mmol)并在80℃下将该混合物回流4小时。在减压下浓缩该反应混合物以提供残余物。用1N HCl调节该反应混合物的pH至4和用水 (200 mL)稀释。然后用EtOAc (250 mL *2)萃取该混合物。用盐水(300 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供作为浅黄色固体的中间体A (12 g, 粗物质)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。
步骤2: 4-甲基-3-硫烷基-苯甲酸甲酯 (中间体B)的制备
Figure 745964DEST_PATH_IMAGE708
向中间体A (9 g, 53.50 mmol)在MeOH (130 mL)中的溶液添加H2SO4 (4.99 g,50.91 mmol)和在80℃下搅拌该混合物2小时。将该反应混合物与另一批合并。在减压下浓缩该该混合物以提供残余物。然后将该残余物倾倒入饱和NaHCO3 (200 mL)中和用EtOAc(200 mL *2)萃取。用盐水 (200 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物，其通过柱层析法 (SiO2, PE/EA=6:1)纯化。在减压下浓缩洗脱物以提供作为浅黄色油的中间体B (7.5 g, 41.15 mmol) 。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 183.1。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.00 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.61 (m, 1H),7.30 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.71 (s, 1H), 3.83 (s, 3H), 2.50 (s, 1H), 2.28 (s,3H) ppm。
步骤3: 3-乙基硫烷基-4-甲基-苯甲酸甲酯 (中间体C)的制备
Figure 560337DEST_PATH_IMAGE709
向中间体B (6 g, 32.92 mmo)和K2CO3 (13.65 g, 98.77 mmol)在DMF (60 mL)中的溶液添加碘乙烷 (5.65 g, 36.22 mmol)，在30℃下搅拌该混合物1小时。将该反应混合物与另一批合并。用水 (400 mL)稀释该混合物并用EtOAc (300 mL *2)萃取。用盐水 (300mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物，其通过柱层析法(SiO2, PE/EA=6:1)纯化。在减压下浓缩洗脱物以提供作为白色固体的中间体C (6.5 g,30.91 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 211.3。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.78 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.66 (m, 1H),7.35 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.01 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.27 (m,3H) ppm。
步骤4: 4-(溴甲基)-3-乙基硫烷基-苯甲酸甲酯 (中间体D)的制备
Figure 382799DEST_PATH_IMAGE710
在80℃下搅拌中间体C (3450 mg, 16.41 mmol)、NBS (2.92 g, 16.41 mmol)和AIBN (3.23 g, 19.69 mmol)在CCl4 (35 mL)中的混合物4小时。在减压下浓缩该反应混合物以除去CCl4 以提供残余物，其通过柱层析法 (SiO2, PE/EA=8:1)纯化。在减压下浓缩洗脱物以提供作为浅黄色油的中间体D (1 g, 粗物质)。
LCMS (ESI) m/z: [79BrM+H]+ = 287.0。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.85 - 7.74 (m, 2H), 7.45 (d, J = 2.0 Hz,1H), 7.43 - 7.33 (m, 3H), 6.91 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.72 (s, 2H), 4.42 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.29 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.24 - 4.12 (m, 2H), 3.75 (s, 3H),2.48 (s, 3H) ppm。
步骤5: 4-(叠氮基甲基)-3-乙基硫烷基-苯甲酸甲酯 (中间体E)的制备
Figure 712149DEST_PATH_IMAGE711
在20℃下向中间体D (1 g, 3.46 mmol)在丙酮 (10 mL)和H2O (2.5 mL)中的溶液添加NaN3 (269.76 mg, 4.15 mmol)，然后在20℃下搅拌该混合物2小时。用饱和Na2CO3碱化该反应混合物至pH 9-10。然后用水 (100 mL)稀释该混合物并用EtOAc (100 mL *2)萃取。用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以除去大部分EtOAc 以提供残余物 (大约5 mL)，用MeOH稀释该残余物以提供作为浅黄色液体的中间体E(800 mg, 粗物质)/MeOH (5 mL)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。
步骤6: 4-(叠氮基甲基)-3-乙基亚硫酰基-苯甲酸甲酯 (中间体F)的制备
Figure 911049DEST_PATH_IMAGE712
向中间体E (800 mg, 3.18 mmol)在MeOH (10 mL)中的溶液添加H2O2 (433.13mg, 3.82 mmol, 30%纯度)和在20℃下搅拌该混合物16小时。用饱和Na2SO3 (1 mL)淬灭该反应混合物，用水 (100 mL)稀释并用EtOAc (100 mL *2)萃取。用盐水 (100 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物，其通过柱层析法 (SiO2, PE/EA=1:1)纯化。在减压下浓缩洗脱物以提供残余物 (大约5 mL)，将残余物与甲苯 (50 mL *3)共沸以提供作为浅黄色液体的中间体F (500 mg, 1.83 mmol)/甲苯 (5 mL)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 268.0。
步骤7: 1-乙基-1-氧代-3H-1,2-苯并噻唑-6-甲酸甲酯 (中间体G)的制备
Figure 579928DEST_PATH_IMAGE713
在N2下向中间体F (500 mg, 1.87 mmol)在甲苯 (5 mL)中的溶液添加酞菁铁(II) (53.06 mg, 93.53 umol)，在100℃下搅拌该混合物2小时。用EtOAc/MeOH (20 mL,v/v=5:1)稀释该反应混合物，然后过滤并在减压下浓缩滤液以提供残余物。通过柱层析法(SiO2, EA)纯化残余物和在减压下浓缩洗脱物以提供作为浅黄色固体的中间体G (400mg, 1.67 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 240.1。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.57 (d, J = 0.4 Hz, 1H), 8.23 - 8.20(m, 1H), 7.78 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.85 - 4.81 (m, 1H), 4.69 - 4.65 (m, 1H),3.97 - 3.90 (m, 4H), 3.58 - 3.49 (m, 1H), 0.94 - 0.91 (m, 3H) ppm。
步骤8: 1-乙基-1-氧代-3H-1,2-苯并噻唑-6-甲酸 (中间体32)的制备
Figure 573292DEST_PATH_IMAGE714
向中间体G (100 mg, 417.90 umol)在水(0.5 mL)和MeOH (0.5 mL)中的溶液添加NaOH (40 mg, 1.00 mmol)，在30℃下搅拌该混合物2小时。用1 N HCl中和该反应混合物至pH 6.0 并在减压下浓缩以提供作为浅黄色油的中间体32 (94.14 mg)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 226.2。
中间体33: 4-(氰基甲基)-4-甲基异色满-6-甲酸的制备
Figure 327621DEST_PATH_IMAGE715
步骤1. 6-溴-4-甲基-异色满-4-甲酸
将氢氧化钾 (aq., 9M, 5.29 mL)添加至6-溴-4-甲基-异色满-4-甲腈 (1.2 g,4.76 mmol)在EtOH (12 mL)中的溶液。在90℃下搅拌该混合物5小时。用H2O (20 mL)稀释该反应混合物并用EA (30 mL x 3)萃取。丢弃合并的有机层和用1N HCl调节水相至pH =4。用EA (30 mL x 3)萃取水层。用盐水 (60 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩以获得作为黄色油的标题化合物 (800 mg, 2.95 mmol)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 13.11 - 12.45 (m, 1H), 7.52 (d, J = 2.0Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.03 (d, J =8.4 Hz, 1H), 4.75 - 4.62 (m,2H), 4.16 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.59 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 1.41 (s, 3H)。
步骤2. (6-溴-4-甲基-异色满-4-基)甲醇
在0℃下将6-溴-4-甲基-异色满-4-甲酸 (800 mg, 2.95 mmol)溶解于BH3 .THF (1M, 8.85)中并在25℃下搅拌所得混合物2小时。在20℃下通过添加1N HCl (25 mL)淬灭该反应混合物并搅拌30分钟。然后用水 (20 mL)稀释该混合物并用EA (50 mL x 2)萃取。用盐水 (50 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。通过FCC (洗脱液:DCM:MeOH = 100:1至10:1)纯化该残余物获得作为无色油的标题化合物 (400 mg, 1.56mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.47 (d, J = 2.0, 1H), 7.33 (d, J = 8.4Hz, 1H), 6.89 (d, J = 8.4 Hz, 1H),4.79 - 4.68 (m, 2H), 4.05 (d, J = 11.6 z,1H), 3.82 - 3.75 (m, 1H), 3.71 - 3.63 (m, 1H), 3.53 (d, J = 11.6 Hz, 1H),1.21 (s, 3H)。
步骤3. (6-溴-4-甲基-异色满-4-基)甲醇
在100℃下搅拌NaCN (146.20 mg, 2.98 mmol)在DMSO (2 mL)中的溶液 0.5小时。在25℃下将(6-溴-4-甲基-异色满-4-基)甲醇 (200 mg, 596.63 umol)添加至该混合物中。然后在120℃下搅拌该反应16小时。将其倾倒入水 (80 mL)中并用EA (40 mL * 3)萃取。用盐水 (40 mL)洗涤合并的有机层和然后经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过快速硅胶层析法 (ISCO®；12 g SepaFlash® 硅胶快速柱, 以50 mL/min的0~50% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液)纯化该残余物获得作为无色油的标题化合物 (130 mg, 488.48 umol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.50 (s, 1H), 7.42 - 7.32 (m, 1H), 6.90(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.90 - 4.65 (m, 2H), 3.93 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.58 (d,J = 11.6 Hz, 1H), 2.83 - 2.74 (m, 1H), 2.69 - 2.56 (m, 1H), 1.42 (s, 3H) ppm。
步骤4. 4-(氰基甲基)-4-甲基异色满-6-甲酸 (中间体33)
将中间体3 (130 mg, 488.48 umol)、二环己基 (3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (29.91 mg, 48.85 umol)、Pd(OAc)2 (10.97 mg, 48.85 umol)、H2O (17.60 mg,976.95 umol)和K2CO3 (101.27 mg, 732.72 umol)在DMSO (1.5 mL)中的混合物脱气并用CO吹扫三次，和然后在100℃下在CO (15 psi) 气氛下搅拌该混合物16小时。将该反应混合物倾倒入水 (80 mL)中并用EA (40 mL * 2)萃取。通过HCl水溶液 (1M)调节水相至pH=5并用EA (30 mL * 3)萃取，用盐水(30 mL)洗涤合并的有机层和然后经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供作为白色固体的中间体33 (90 mg)，其不经进一步纯化即直接用于接下来的步骤。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 232.0。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 13.27 - 12.73 (m, 1H), 8.06 (d, J = 1.2Hz, 1H), 7.87 - 7.70 (m, 1H), 7.20 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.91 - 4.71 (m, 2H),3.80 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.62 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.08 - 2.87 (m, 2H),1.33 (s, 3H) ppm。
中间体34: 3-(1-氟-3-羟基环丁基)苯甲酸的制备
Figure 392529DEST_PATH_IMAGE716
步骤1: 3-苄氧基-1-(3-溴苯基)环丁醇 (中间体A)的制备
Figure 915914DEST_PATH_IMAGE717
在-70℃下在N2下向1,3-二溴苯 (30 g, 127.17 mmol, 15.31 mL)在THF (1.2L)中的混合物逐滴添加n-BuLi (2.5 M, 50.87 mL)。在-70℃下搅拌该混合物30分钟，然后在-70℃下向该混合物逐滴添加3-苄氧基环丁酮 (22.41 g, 127.17 mmol)。在25℃下搅拌该混合物1.5小时。在0℃下将该混合物倾倒入饱和NH4Cl水溶液 (2000 mL)中并用乙酸乙酯 (1000 mL * 2)萃取。用盐水 (1000 mL)洗涤合并的有机相，用无水 Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过硅胶层析法 (石油醚/乙酸乙酯=50/1, 3/1)纯化该残余物并浓缩以提供作为黄色油的中间体A (25 g, 75.03 mmol) 。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.45 - 7.41 (m, 2H), 7.36 - 7.30 (m,7H), 4.41 (s, 2H), 3.88-3.84 (m, 1H), 2.75-2.72 (m, 2H), 2.36 - 2.33 (m, 2H)ppm。
步骤2: 1-(3-苄氧基-1-氟-环丁基)-3-溴-苯 (中间体B)的制备
Figure 80180DEST_PATH_IMAGE718
在-65℃下向中间体A (6.8 g, 20.41 mmol)在DCM (70 mL)中的溶液添加DAST(16.45 g, 102.03 mmol, 13.48 mL)。然后在-65℃下搅拌该反应混合物1小时。用饱和NaHCO3 水溶液(10 mL)稀释该反应混合物并用DCM (10 mL * 3)萃取。用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过快速硅胶层析法(ISCO®；20 g SepaFlash® 硅胶快速柱, 以35 mL/min的0~20% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液)纯化该残余物并在减压下浓缩以提供作为无色油的中间体B (5.6 g, 16.71mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.53 - 7.29 (m, 4H), 7.28 - 7.15 (m, 5H),4.46 - 4.35 (m, 3H), 2.91 - 2.75 (m, 2H), 2.54 - 2.31 (m, 2H) ppm。
步骤3: 3-(3-溴苯基)-3-氟-环丁醇 (中间体C)的制备
Figure 321805DEST_PATH_IMAGE719
在0℃下向中间体B (5.6 g, 16.71 mmol)在DCM (60 mL)和H2O (6 mL)中的溶液逐份添加DDQ (20.86 g, 91.88 mmol)。在25℃下搅拌该反应混合物12小时。在0℃下通过添加饱和NaHCO3 水溶液(100 mL)淬灭该反应混合物，并用乙酸乙酯 (100 mL * 3)萃取。用盐水 (100 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (ISCO®；120 g SepaFlash® 硅胶快速柱, 以100 mL/min的0~30% 乙酸乙酯/石油醚洗脱液的梯度) 并在减压下浓缩以提供作为红色油的中间 体C (3 g, 12.24 mmol)。
步骤4: 3-(1-氟-3-羟基-环丁基)苯甲酸 (中间体34)的制备
Figure 924825DEST_PATH_IMAGE720
在25℃下向中间体C (500 mg, 2.04 mmol)在DMSO (7 mL)和H2O (3.5 mL)中溶液的添加二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (124.91 mg, 204.01 umol),K2CO3 (422.94 mg, 3.06 mmol), Pd(OAc)2 (22.90 mg, 102.00 umol)，然后将该混合物脱气并用CO吹扫三次，和然后在100℃下在CO 气氛 (15 psi)下搅拌该混合物16小时。过滤该混合物。用EA (5 mL)萃取滤液，然后用HCl水溶液 (2 ml, 1 M)调节水相的pH至5~6，然后用EA (5 mL * 3)萃取，分离有机层并浓缩以提供作为棕色油的中间体34 (150 mg,499.52 umol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 211.1。
中间体35: 3-(3-氟-4-羟基四氢呋喃-3-基)苯甲酸的制备
Figure 302716DEST_PATH_IMAGE721
步骤1: 4-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]四氢呋喃-3-醇 (中间体A)的制备
Figure 903462DEST_PATH_IMAGE722
在0℃下向NaH (4.73 g, 118.15 mmol)在THF (90 mL)中的溶液添加四氢呋喃-3,4-二醇 (12.30 g, 118.15 mmol)在DMSO (42 mL)中的溶液，在30℃下搅拌该混合物2小时，然后在0℃下添加PMBCl (18.50 g, 118.15 mmol)在THF (30 mL)中的溶液，在30℃下搅拌该混合物16小时。将该反应混合物倾倒入水 (200 mL)中，用EA (200 mL * 3)萃取该溶液，用盐水 (200 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供残余物。通过柱层析法 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=10:1-5:1)纯化残余物，浓缩该溶液以提供作为黄色油的中间体A (20 g, 89.19 mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.27 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.97 - 6.83 (m,2H), 4.54 (s, 2H), 4.23 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 4.12 (m, 1H), 3.92 - 3.84 (m,2H), 3.81 (s, 3H), 3.77 - 3.69 (m, 2H) ppm。
步骤2: 4-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]四氢呋喃-3-酮 (中间体B)的制备
Figure 366804DEST_PATH_IMAGE723
向中间体A (18 g, 80.27 mmol)在DCM (180 mL)中的溶液添加Dess-Martin(102.13 g, 240.80 mmol)，在30℃下搅拌该混合物5小时。将该反应混合物倾倒入Na2S2O3溶液 (500 mL)中，用EA (500 mL *3)萃取该溶液，用NaHCO3 (1000 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供残余物。通过柱层析法 (SiO2, PE: EA=5:1.10:1-5:1)纯化残余物，浓缩该溶液以提供作为无色油的中间体B (2 g, 9.00 mmol)。
1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.29 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.93 - 6.86 (m,2H), 4.84 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.61 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.26 m, 1H), 4.06- 3.92 (m, 3H), 3.86 - 3.79 (m, 4H) ppm。
步骤3: 3-(3-溴苯基)-4-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]四氢呋喃-3-醇 (中间体C)的制备
Figure 773515DEST_PATH_IMAGE724
在-70℃下向1,3-二溴苯 (3.61 g, 15.30 mmol, 1.84 mL)在THF (36 mL)中的溶液添加n-BuLi (2.5 M, 6.12 mL)，在-70℃下搅拌该溶液30分钟，然后向该溶液添加中 间体B (1.7 g, 7.65 mmol)在THF (5 mL)中的溶液，在-70℃下搅拌该混合物2小时。将该反应混合物倾倒入NH4Cl (100 mL)溶液中，用EA (100 mL * 3)萃取该溶液，用盐水 (150mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供残余物。通过柱层析法 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=10:1-5:1)纯化残余物，浓缩该溶液以提供作为无色油的中间体C (1 g,2.64 mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.70 (m, 1H), 7.48 - 7.42 (m, 2H), 7.29 -7.23 (m, 1H), 7.12 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.88 - 6.84 (m, 2H), 4.46 - 4.36 (m,2H), 4.18 - 4.12 (m, 2H), 4.00 (s, 2H), 3.85 - 3.81 (m, 3H), 3.63 (s, 1H)ppm。
步骤4: 3-(3-溴苯基)-3-氟-4-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]四氢呋喃 (中间体D)的制备
Figure 5913DEST_PATH_IMAGE725
在0℃下向中间体C (500 mg, 1.32 mmol)在DCM (5 mL)中的溶液添加DAST(212.51 mg, 1.32 mmol)，在0℃下搅拌该混合物30分钟。将该混合物倾倒入NaHCO3 溶液(20 mL)中，用DCM (20 mL * 3)萃取该溶液，用盐水 (50 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供油。通过制备型TLC纯化该残余物 (SiO2, PE: EA=2:1)，用EA (20mL)研磨该固体，过滤该溶液并浓缩滤液以提供作为黄色油的中间体D (150 mg, 393.46umol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ =7.61 (m, 1H), 7.46 (m, 1H), 7.37 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.23 - 7.19 (m, 1H), 6.90 - 6.85 (m, 2H), 6.75 - 6.71 (m, 2H),4.15 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 4.12 - 4.06 (m, 2H), 4.05 - 3.97 (m, 2H), 3.96 -3.89 (m, 2H), 3.71 (s, 3H) ppm。
步骤5: 4-(3-溴苯基)-4-氟-四氢呋喃-3-醇 (中间体E)的制备
Figure 777560DEST_PATH_IMAGE726
向中间体D (100 mg, 262.31 umol)在DCM (3.5 mL)和H2O (0.35 mL)中的溶液添加DDQ (327.49 mg, 1.44 mmol)，在25℃下在N2下搅拌该混合物16小时。将该反应混合物倾倒入NaHCO3 溶液 (20 mL)中，用EA (20 mL *3)萃取该溶液，用盐水 (40 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供残余物。通过制备型TLC (SiO2, PE: EA=2:1)纯化该残余物，用EA (20 mL)研磨该固体，过滤该溶液并浓缩滤液以提供作为黄色油的中间体E (45 mg, 172.36 umol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.69 (m, 1H), 7.58 - 7.53 (m, 1H), 7.45 -7.41 (m, 1H), 7.35 - 7.29 (m, 1H), 4.41 - 4.29 (m, 2H), 4.29 - 4.17 (m, 2H),4.01 (d, J = 9.6 Hz, 1H) ppm。
步骤6: 3-(3-氟-4-羟基-四氢呋喃-3-基)苯甲酸 (中间体35)的制备
Figure 728199DEST_PATH_IMAGE727
向中间体E (45 mg, 172.36 umol)在DMSO (0.5 mL)中的溶液添加二环己基 (3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (10.55 mg, 17.24 umol)、Pd(OAc)2 (3.87 mg,17.24 umol)、K2CO3 (35.73 mg, 258.53 umol)和H2O (6.21 mg, 344.71 umol, 6.21uL)。在真空下将该悬浮液脱气并用CO吹扫几次。在CO (15psi)下在100℃下搅拌该混合物16小时。将该反应混合物倾倒入水 (10 mL)中，用MTBE (10 mL * 2)萃取该溶液。然后用HCl 溶液调节水相至pH=3，用EA (10 mL * 3)萃取该溶液，用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供作为黄色油的中间体35 (38 mg, 167.99 umol)。
中间体36: 5-氟-5-甲基-2,3,4,5-四氢苯并[b]氧杂䓬-7-甲酸的制备
Figure 610704DEST_PATH_IMAGE728
步骤1: 7-溴-5-甲基-2,3,4,5-四氢苯并[b]氧杂䓬-5-醇 (中间体A)的制备
Figure 25505DEST_PATH_IMAGE729
在0℃下向7-溴-3,4-二氢苯并[b]氧杂䓬-5(2H)-酮 (800 mg, 3.32 mmol)和CeCl3 (408.95 mg, 1.66 mmol, 104.32 uL)在THF (8 mL)中的溶液添加MeMgBr (3 M,3.32 mL)。在0℃下搅拌该混合物1小时，然后使其温热至25℃ 并搅拌另外的2小时。通过饱和NH4Cl (8 mL)淬灭该反应混合物，然后用EA (8 mL * 3)萃取。浓缩合并的有机物以得到残余物。通过快速硅胶层析法 (PE : EA = 1 : 0至1 : 1)纯化该残余物。浓缩洗脱物以提供作为黄色固体的中间体A (340 mg, 1.19 mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.71 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.30 - 7.27 (m,1H), 6.86 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.26 - 4.08 (m, 1H), 3.85 - 3.71 m, 1H), 2.30(s, 1H), 2.19 - 2.05 (m, 1H), 2.03 - 1.85 (m, 3H), 1.60 (s, 3H) ppm。
步骤2: 7-溴-5-氟-5-甲基-2,3,4,5-四氢苯并[b]氧杂䓬 (中间体B)的制备
Figure 968053DEST_PATH_IMAGE730
在-78℃下向中间体A (340 mg, 1.32 mmol)在DCM (4 mL)中的溶液添加DAST(1.07 g, 6.61 mmol, 873.54 uL)。在-78℃下搅拌该混合物2小时。在0℃下通过饱和NaHCO3 (5 mL)淬灭该反应并用EA (5 mL *3)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以提供作为无色油的中间体B (340 mg, 1.06 mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.64 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.30 (m, 1H),6.87 (m, 1H), 4.45 - 4.34 (m, 1H), 3.59 (m, 1H), 2.23 - 2.11 (m, 2H), 2.05 -1.80 (m, 2H), 1.76 - 1.63 (m, 3H) ppm。
步骤3: 5-氟-5-甲基-2,3,4,5-四氢苯并[b]氧杂䓬-7-甲酸 (中间体36)的制备
Figure 405988DEST_PATH_IMAGE731
向中间体B (340 mg, 1.31 mmol)、二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (80.34 mg, 131.22 umol)和K2CO3 (272.02 mg, 1.97 mmol)在DMSO (3 mL)和H2O(1.5 mL)中的混合物添加Pd(OAc)2 (14.73 mg, 65.61 umol)。在真空下将该悬浮液脱气并用CO气球吹扫几次。然后在100℃下在CO (15 psi)下搅拌该混合物12小时。通过饱和NH4Cl (3 mL)淬灭该反应混合物，然后用EA (5 mL *3)萃取。浓缩合并的有机物以得到残余物。通过反相HPLC (0.1% FA)纯化该残余物。冻干洗脱物以提供粗物质。通过SFC分离该粗物质。(柱: DAICEL CHIRALPAK AD-H (250 mm*30 mm, 5um)；流动相: [Neu-ETOH]；B% :25% - 25%, 2.9 min；80 min)。这获得作为白色固体的中间体36 (67 mg, 295.73 umol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+=225.1。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.31 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.98 (m, 1H),7.07 (m, 1H), 4.51 - 4.37 (m, 1H), 3.76 - 3.63 (m, 1H), 2.30 - 2.14 (m, 2H),2.13 - 1.86 (m, 2H), 1.79 - 1.66 (m, 3H) ppm。
手性SFC: AD-3-MeOH (DEA)-5-40-3mL-35T.lcm；Rt = 0.918 /0.990 min。
中间体37和38: (S)-4-氰基-8-甲氧基-4-甲基异色满-6-甲酸和(R)-4-氰基-8-甲氧基-4-甲基异色满-6-甲酸的制备
Figure 92184DEST_PATH_IMAGE732
步骤1: 5-溴-3-羟基-2-甲基-苯甲酸甲酯 (中间体A)的制备
Figure 364421DEST_PATH_IMAGE733
在0℃下向3-氨基-5-溴-2-甲基-苯甲酸甲酯 (40 g, 163.88 mmol)在10%H2SO4(400 mL)中的溶液逐滴添加NaNO3 (13.93 g, 163.88 mmol)在水(80 mL)中的溶液。在25℃下搅拌该混合物1小时和添加50% H2SO4 (400 mL)在水(400 mL)中的溶液，和然后在100℃下加热所得混合物1小时。在25℃下在夜间一些固体从该混合物中沉淀出来。过滤该混合物。用水 (200 mL)稀释滤饼并用EA (200 mL *2)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层并浓缩以提供作为棕色油的中间体A (50 g, 粗物质)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。
LCMS (ESI) m/z: [79BrM+H]+= 245.0。
步骤2: 5-溴-3-甲氧基-2-甲基-苯甲酸甲酯 (中间体B)的制备
Figure 477870DEST_PATH_IMAGE734
向中间体A (50 g, 204.02 mmol)在丙酮 (500 mL)中的溶液添加K2CO3 (140.99g, 1.02 mol)和MeI (144.79 g, 1.02 mol)。在25℃下搅拌该混合物2小时。过滤该混合物并浓缩滤液以除去丙酮。然后用饱和NH4Cl (300 mL)稀释该残余物并用EA (300 mL *2)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层并在真空下浓缩以提供残余物，其通过柱层析法(SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至1/1)纯化以提供作为无色油的中间体B (27.3 g,93.78 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [71BrM+H]+= 259.0。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.55 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 2.0Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 2.37 (s, 3H) ppm。
步骤3: 5-溴-2-(溴甲基)-3-甲氧基-苯甲酸甲酯 (中间体C)的制备
Figure 403101DEST_PATH_IMAGE735
向中间体B (27.3 g, 105.37 mmol)在CCl4 (273 mL)中的溶液添加NBS (18.75g, 105.37 mmol)和AIBN (1.73 g, 10.54 mmol)。在80℃下搅拌该混合物1小时。过滤该混合物并用水 (200 mL)稀释滤液。用DCM (200 mL *2)萃取该混合物。经无水 Na2SO4干燥合并的有机相并在真空下浓缩以提供残余物，其通过柱层析法 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=50/1至1/1)纯化。浓缩洗脱物以提供作为无色油的中间体C (32.8 g, 95.10 mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.67 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 2.0Hz, 1H), 4.98 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.93 (s, 3H) ppm。
步骤4: 5-溴-3-甲氧基-2-[(2-甲氧基-2-氧代-乙氧基)甲基]苯甲酸甲酯 (中间体D)的制备
Figure 627409DEST_PATH_IMAGE736
在0℃下在N2下向2-羟基乙酸甲酯 (17.48 g, 194.09 mmol)在DMF (310 mL)中的混合物添加NaH (7.76 g, 194.09 mmol, 60%纯度)并在25℃下搅拌该混合物30分钟。然后在0℃下缓慢添加溶解于 DMF (40 mL)中的中间体C (32.8 g, 97.04 mmol)和在25℃下搅拌该混合物12小时。用饱和NH4Cl (1 L)淬灭该混合物和用EtOAc (1 L *2)萃取。用盐水(1 L *2)洗涤合并的有机相，经无水 Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。通过柱层析法(SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=100/1至1/1)纯化残余物。浓缩洗脱物以提供作为无色油的中间 体D (24 g, 69.13 mmol)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.43 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.40 (d, J =2.0 Hz, 1H), 4.73 (s, 2H), 4.05 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.64 (s,3H) ppm。
步骤5: 6-溴-8-甲氧基-4-氧代-异色满-3-甲酸甲酯 (中间体E)的制备
Figure 954485DEST_PATH_IMAGE737
向中间体D (5 g, 14.40 mmol)在THF (50 mL)中的溶液添加t-BuOK (3.23 g,28.81 mmol)和在25℃下搅拌该混合物2小时。用水 (500 mL)稀释该混合物并用EA (500mL *2)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层并浓缩以提供作为黄色固体的中间体E (3.2g, 10.15 mmol)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。
步骤6: 6-溴-8-甲氧基-异色满-4-酮 (中间体F)的制备
Figure 35574DEST_PATH_IMAGE738
向中间体E (3.2 g, 10.15 mmol)在EtOH (32 mL)中的溶液添加HCl (12 M, 64mL)。在130℃下搅拌该混合物1小时。用水 (200 mL)稀释该混合物并过滤。在真空下干燥滤饼以提供作为白色固体的中间体F (2.4 g, 9.34 mmol)，其不经进一步纯化即用于接下来的步骤。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.57 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.51 (d, J =2.0 Hz, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.34 (s, 2H), 3.88 (s, 3H) ppm。
步骤7: 6-溴-8-甲氧基-4-甲基-异色满-4-醇 (中间体G)的制备
Figure 448100DEST_PATH_IMAGE739
在-50℃下在N2下向中间体F (2.4 g, 9.34 mmol)和CeCl3 (1.15 g, 4.67 mmol)在THF (24 mL)中的混合物逐滴添加MeMgBr (3 M, 15.56 mL)。在25℃下搅拌该反应混合物2小时。用水 (200 mL)淬灭该混合物并用EtOAc (200 mL *2)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机相，过滤并在真空下浓缩。通过快速硅胶层析法 (ISCO®；40 g SepaFlash® 硅胶快速柱, 0~100% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液)纯化该残余物。浓缩洗脱物以提供作为无色油的中间体G (1.8 g, 6.59 mmol)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.29 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.01 (d, J =1.6 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.59 - 4.46 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.60 - 3.58 (m,1H), 3.47 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 1.36 (s, 3H) ppm。
步骤8: 6-溴-8-甲氧基-4-甲基-异色满-4-甲腈 (中间体H)的制备
Figure 476099DEST_PATH_IMAGE740
在0℃下向中间体G (1.3 g, 4.76 mmol)在DCM (13 mL)中的溶液添加TMSCN(1.42 g, 14.28 mmol)和三溴化铟 (337.50 mg, 951.95 umol)。在25℃下搅拌该混合物2小时。用水 (50 mL)稀释该混合物并用DCM (50 mL *2)萃取。用无水 Na2SO4干燥合并的有机层并浓缩以提供残余物，其通过快速硅胶层析法纯化 (ISCO®；40g SepaFlash® 硅胶快速柱, 0~100% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液)。浓缩洗脱物以提供作为无色油的中间 体H (620 mg, 2.20 mmol)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.40 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.19 (d, J =1.6 Hz, 1H), 4.69 - 4.54 (m, 2H), 4.12 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H),3.74 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 1.62 (s, 3H) ppm。
步骤9: 4-氰基-8-甲氧基-4-甲基-异色满-6-甲酸 (中间体I)的制备
Figure 657682DEST_PATH_IMAGE741
向中间体H (620 mg, 2.20 mmol)在DMSO (6 mL)和H2O (198.00 mg, 10.99mmol)中的溶液添加二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (134.55 mg,219.75 umol)、K2CO3 (455.58 mg, 3.30 mmol)和Pd(OAc)2 (49.34 mg, 219.75 umol)，脱气并用CO吹扫三次，和然后在100℃下在CO (15 psi) 气氛下搅拌该混合物12小时。用水(40 mL)稀释该混合物并用DCM (40 mL *2)萃取。丢弃有机层。用1N HCl调节水相至pH=2并形成一些固体。过滤该混合物并在真空下干燥滤饼以提供作为白色固体的中间体I (330mg, 1.33 mmol)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.71 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.44 (d, J =1.2 Hz, 1H), 4.79 - 4.67 (m, 2H), 4.14 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H),3.83 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 1.65 (s, 3H) ppm。
步骤10: 8-((2-氧代-2-((4-(3-(吡啶-4-基)苯基)噻唑-2-基)氨基)乙基)氨基甲酰基)-2,3-二氢苯并[f][1,4]硫氮杂䓬-4(5H)-甲酸叔丁酯 1,1-二氧化物 (中间体37和38)的制备
Figure 175251DEST_PATH_IMAGE742
通过SFC (柱: DAICEL CHIRALPAK IC(250mm*30mm,5um)；流动相: [0.1%NH3•H2OMEOH]；B%: 25%-25%, 2.1min；69min)分离中间体I (450 mg, 1.82 mmol)在MeOH (5 mL)中的混合物。浓缩洗脱物以提供作为灰白色固体的中间体37 (140 mg, 528.07 umol)和作为白色固体的中间体38 (180 mg, 652.67 umol)。
中间体37:
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 248.1。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.70 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 4.78 - 4.67(m, 2H), 4.14 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 3.85 (s, 1H), 3.83 - 3.81 (m, 1H), 1.64(s, 3H) ppm。
手性SFC: IC-3_5CM_MEOH (DEA)_5_40_3ML_T35.M；Rt= 1.089 min。
中间体38:
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 248.1。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.68 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 4.77 - 4.65(m, 2H), 4.12 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.83 - 3.80 (m, 1H), 1.63(s, 3H) ppm。
手性SFC: IC-3_5CM_MEOH (DEA)_5_40_3ML_T35.M；Rt= 1. 192 min。
中间体39: 螺[色满-4,3'-氧杂环丁烷]-6-甲酸的制备
Figure 809495DEST_PATH_IMAGE743
步骤1: 中间体2 6-溴色满-4-甲酸甲酯 (中间体A)的制备
Figure 375605DEST_PATH_IMAGE744
向6-溴色满-4-甲腈 (根据FG-A2875中的方法制备) (2 g, 8.40 mmol)在MeOH(48 mL)中的溶液添加H2SO4 (21.02 g, 210.01 mmol, 98%纯度)。在100℃下搅拌该反应混合物14小时。在减压下浓缩该反应混合物以除去MeOH，和然后用Na2CO3水溶液调节至pH=6，用EA (150 mL * 3)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以得到残余物。通过快速硅胶层析法 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=1/0至3/1)纯化该残余物，在减压下浓缩该级分以得到作为白色固体的中间体A (1.5 g, 4.98 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [79BrM+H]+= 271.0。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.39 - 7.26 (m, 2H), 6.77 (d, J = 8.8Hz, 1H), 4.25 - 4.20 (m, 1H), 4.09 - 4.03 (m, 1H), 3.95 - 3.92 (m, 1H), 3.68(s, 3H), 2.23 - 2.13 (m, 1H), 2.11 - 1.98 (m, 1H) ppm。
步骤2: 6-溴-4-(羟甲基)色满-4-甲酸甲酯 (中间体B)的制备
Figure 677273DEST_PATH_IMAGE745
向中间体A (1.5 g, 5.53 mmol)和NaHCO3 (46.48 mg, 553.29 umol)在DMSO(15 mL)中的溶液添加多聚甲醛 (199.25 mg, 6.64 mmol)和在25℃下搅拌该混合物14小时。用水 (100 mL)稀释该反应混合物，用EA (100 mL *3)萃取。用盐水 (300 mL *2)洗涤合并的有机层，然后经无水 Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以得到残余物。通过快速硅胶层析法 (PE:EA=1:0至2:1)纯化该残余物，在减压下浓缩该级分以提供作为白色固体的中 间体B (1.55 g, 4.07 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 301.0。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.57 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.31 - 7.29(m, 1H), 6.76 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.30 - 5.27 (m, 1H), 4.25 - 4.20 (m, 1H),4.09 - 4.03 (m, 1H), 3.94 - 3.90 (m, 1H), 3.69 - 3.62 (m, 4H), 2.37 - 2.30(m, 1H), 2.03 - 1.94 (m, 2H) ppm。
步骤3: 6-溴-4-((甲苯磺酰氧基)甲基)色满-4-甲酸甲酯 (中间体C)的制备
Figure 365744DEST_PATH_IMAGE746
在0℃下向中间体B (1.3 g, 4.32 mmol)和吡啶 (2.05 g, 25.90 mmol)在DCM(10 mL)中的溶液添加TosCl (2.47 g, 12.95 mmol)。在25℃下搅拌该混合物14小时。用水(60 mL)稀释该反应混合物，用DCM (50 mL * 3)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以得到残余物。通过快速硅胶层析法 (PE:EA=1:0至3:1)纯化该残余物，在减压下浓缩该级分以提供作为白色固体的中间体C (1.25 g, 2.35 mmol)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.75 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.48 (d, J =8.0 Hz, 2H), 7.36 - 7.32 (m, 1H), 7.31 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 8.8Hz, 1H), 4.53 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.34 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.18 - 4.04 (m,2H), 3.60 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.34 - 2.26 (m, 1H), 2.03 - 1.92 (m, 1H)ppm。
LCMS (ESI) m/z: [M+H2O]+= 472.0。
步骤4: 4-甲基苯磺酸(6-溴-4-(羟甲基)色满-4-基)甲酯 (中间体D)的制备
Figure 487284DEST_PATH_IMAGE747
在-68℃下向中间体C (800 mg, 1.76 mmol)在THF (8 mL)中的溶液添加DIBAL-H(1 M, 5.27 mL)，然后在-68℃下搅拌该溶液10分钟，然后除去干冰-乙醇浴和在1小时内使该溶液达到0℃，然后在0℃下搅拌该溶液20分钟。用1N HCl (4 mL)淬灭该反应混合物，然后用水 (40 mL)稀释，用EA (40 mL * 3)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以得到残余物。通过快速硅胶层析法 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯 = 1/0至3/1)纯化该残余物，在减压下浓缩该级分以提供作为白色固体的中间体D (650 mg, 1.37mmol, 77.92%收率) 。
LCMS (ESI) m/z: [M+H2O]+= 444.0。
步骤5: 6-溴螺[色满-4,3'-氧杂环丁烷] (中间体E)的制备
Figure 857085DEST_PATH_IMAGE748
向中间体D (450 mg, 1.05 mmol)在THF (25 mL)中的溶液添加NaH (126.36 mg,3.16 mmol, 60%纯度)。在25℃下搅拌该混合物12小时。用H2O (100 mL)稀释该反应混合物，用EA (100 mL * 3)萃取。经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以得到残余物。通过快速硅胶层析法 (SiO2, 石油醚/乙酸乙酯=1/0至2/1, Rf=0.6)纯化该残余物，在减压下浓缩该级分以提供作为白色固体的中间体E (140 mg, 460.87 umol)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.90 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.32 - 7.30(m, 1H), 6.74 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.71 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.52 (d, J = 6.0Hz, 2H), 4.10 - 4.04 (m, 2H), 2.28 - 2.22 (m, 2H) ppm。
步骤6: 螺[色满-4,3'-氧杂环丁烷]-6-甲酸 (中间体39)的制备
Figure 13260DEST_PATH_IMAGE749
将中间体E (140 mg, 548.79 umol)、二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (33.60 mg, 54.88 umol)、K2CO3 (113.77 mg, 823.18 umol)、Pd(OAc)2 (12.32mg, 54.88 umol)和H2O (19.78 mg, 1.10 mmol)在DMSO (3 mL)中的混合物脱气并用CO吹扫三次，和然后在100℃下在CO 气氛下搅拌该混合物14小时。过滤该反应混合物以移除黑色固体，和然后用水 (20 mL)稀释，用EA (20 mL *2)萃取。丢弃有机层并用HCl水溶液调节水相至pH=6，用EA (30 mL * 3)萃取，然后经无水 Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在减压下浓缩以得到残余物。通过反相HPLC (0.1% FA)纯化该残余物，然后在减压下浓缩该溶液以除去MeCN并然后冻干以提供作为白色固体的中间体39 (50 mg, 215.24 umol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 221.1。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 13.13 - 12.37 (m, 1H), 8.37 (d, J = 2.0Hz, 1H), 7.75 - 7.72 (m, 1H), 6.84 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.70 (d, J = 6.0 Hz,2H), 4.59 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.17 - 4.11 (m, 2H), 2.31 - 2.27 (m, 2H) ppm。
中间体40: 1-氰基-1-甲基异色满-7-甲酸的制备
Figure 872631DEST_PATH_IMAGE750
步骤1: 7-溴异色满-1-甲腈 (中间体A)的制备
Figure 481467DEST_PATH_IMAGE751
在N2下向DDQ (511.39 mg, 2.25 mmol)在TMSCN (558.72 mg, 5.63 mmol)中的混合物添加7-溴异色满 (400 mg, 1.88 mmol)。在80℃下搅拌该混合物1小时。用DCM (50mL)稀释该反应混合物和然后用饱和NaHCO3 (50 mL*3)、盐水(50 mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。通过柱层析法 (SiO2, PE/EA=30/1至5/1)纯化残余物和浓缩洗脱物以提供作为白色固体的中间体A (300 mg, 1.26 mmol)。
步骤2: 7-溴-1-甲基-异色满-1-甲腈 (中间体B)的制备
Figure 389380DEST_PATH_IMAGE752
在0℃下在N2下向中间体A (160 mg, 672.04 umol)在DMF (2 mL)中的混合物添加NaH (53.76 mg, 1.34 mmol, 60%纯度)。在25℃下搅拌该混合物30分钟和然后在0℃下添加CH3I (476.94 mg, 3.36 mmol)。在25℃下搅拌该混合物1小时。将该反应混合物倾倒入NH4Cl 溶液 (20 mL)中和用EA (20.0 mL*3)萃取。用盐水 (30 mL)洗涤合并的有机物，经Na2SO4干燥，过滤并将滤液蒸发至干。通过柱层析法纯化残余物 (SiO2, PE/EA=30/1至2/1) 并浓缩以提供作为白色固体的中间体B (120 mg, 475.99 umol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.45 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.43 - 7.40 (m,1H), 7.06 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.25 - 4.20 (m, 1H), 4.07 - 4.01 (m, 1H), 3.06- 2.99 (m, 1H), 2.68 - 2.63 (m, 1H), 1.91 (s, 3H) ppm。
步骤3: 1-氰基-1-甲基-异色满-7-甲酸 (中间体40)的制备
Figure 400062DEST_PATH_IMAGE753
将中间体B (130 mg, 515.65 umol)、H2O (46.46 mg, 2.58 mmol)、K2CO3(106.90 mg, 773.48 umol)、Pd(OAc)2 (5.79 mg, 25.78 umol)和二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (31.57 mg, 51.57 umol)在DMSO (2 mL)中的混合物脱气并用CO吹扫三次，和然后在100℃下在CO 气氛 (15 psi)下搅拌该混合物1小时。将该混合物倾倒入水 (30 mL)中并用EA (20.0 mL*2)萃取，丢弃合并的有机物，用1M HCl调节水相的pH至5，和然后用EA (20.0 mL*2)萃取。用盐水 (30.0 mL)洗涤合并的有机物，经Na2SO4干燥，过滤并将滤液蒸发至干以提供作为白色固体的中间体40 (90 mg, 397.75 umol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.06 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.02 - 7.99 (m,1H), 7.29 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.28 - 4.24 (m, 1H), 4.14 - 4.07 (m, 1H), 3.22- 3.13 (m, 1H), 2.81 - 2.76 (m, 1H), 1.97 (s, 3H) ppm。
中间体41: 螺[异色满-4,2'-氧杂环丁烷]-6-甲酸锂的制备
Figure 368018DEST_PATH_IMAGE754
步骤1: 2-(6-溴-4-羟基异色满-4-基)乙酸乙酯 (中间体A)的制备
Figure 526467DEST_PATH_IMAGE755
在-65℃下在N2 气氛下向乙酸乙酯 (620.86 mg, 7.05 mmol, 689.84 uL)在THF(1mL)中的溶液添加LiHMDS (1 M, 6.61 mL)。在-65℃下搅拌该混合物15分钟。在-65℃下添加6-溴异色满-4-酮 (根据中间体10B中的方法制备) (1 g, 4.40 mmol)在THF (2 mL)中的溶液。在-65℃下搅拌该混合物2小时。通过饱和NH4Cl水溶液 (50 mL)淬灭该反应混合物和通过EA (50 mL*2)萃取。用盐水 (50 mL)洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩以提供残余物。通过快速硅胶层析法 (40 g 硅胶快速柱, 以50 mL/min的0~30% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液)纯化该残余物。浓缩洗脱物以提供作为无色油的中间体A (1g, 3.17 mmol)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.67 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.41 - 7.39(m, 1H), 7.01 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.64 (s, 1H), 4.73 - 4.56 (m, 2H), 4.06(d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.02 - 3.93 (m, 2H), 3.52 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 2.83 -2.74 (m, 1H), 2.69 - 2.59 (m, 1H), 1.11 - 1.07 (m, 3H) ppm。
步骤2: 2-(6-溴-4-羟基异色满-4-基)乙酸 (中间体B)的制备
Figure 238071DEST_PATH_IMAGE756
将LiOH.H2O (266.30 mg, 6.35 mmol)在THF (5 mL)、H2O (2.5 mL)和MeOH (2.5mL)中的混合物添加至乙基 中间体A (1 g, 3.17 mmol)。在25℃下搅拌该反应混合物1小时。将该反应混合物倾倒入水 (50 mL)中和用1M HCl水溶液调节至pH=4。通过EA (50 mL*2)萃取该混合物。用盐水 (50 mL)洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩以提供作为黄色油的中间体B (900 mg, 2.82 mmol)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.69 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.40 - 7.38(m, 1H), 7.01 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.72 - 4.57 (m, 2H), 4.09 (d, J = 11.2 Hz,1H), 3.50 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 2.68 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 2.53 (br s, 1H)ppm。
步骤3: 6-溴-4-(2-羟乙基)异色满-4-醇 (中间体C)的制备
Figure 103259DEST_PATH_IMAGE757
在0℃下在N2 气氛下向中间体B (900 mg, 3.13 mmol)在THF (9 mL)中的溶液添加BH3-Me2S (10 M, 1.25 mL)。在25℃下搅拌该反应混合物13小时。将该反应混合物倾倒入饱和NaHCO3水溶液 (100mL)中和通过EA (50mL*3)萃取。用盐水 (50mL)洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空下浓缩以提供残余物。通过快速硅胶层析法 (40 g硅胶快速柱, 以50 mL/min的0~50% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液)纯化该残余物。浓缩洗脱物以提供作为无色油的中间体C (850 mg, 2.80 mmol)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.63 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.40 - 7.38(m, 1H), 7.01 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.36 (s, 1H), 4.71 - 4.56 (m, 2H), 4.43 -4.40 (m, 1H), 3.85 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.55 - 3.42 (m, 3H), 1.92 - 1.88 (m,2H) ppm。
步骤4: 4-甲基苯磺酸2-(6-溴-4-羟基异色满-4-基)乙酯 (中间体D)的制备
Figure 242116DEST_PATH_IMAGE758
在0℃下向中间体C (850 mg, 3.11 mmol)在THF (8 mL)中的溶液添加Et3N(629.84 mg, 6.22 mmol, 866.35 uL)和TosCl (652.66 mg, 3.42 mmol)。在50℃下搅拌该反应混合物14小时。将该反应混合物倾倒入水 (50 mL)中和通过EA (50mL*3)萃取。用盐水 (50 mL)洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩以提供作为黄色油的中间 体D (1.3 g, 粗物质)。
LCMS (ESI) m/z: [81BrM+H2O]+= 446.0
步骤5: 6-溴螺[异色满-4,2'-氧杂环丁烷] (中间体E)的制备
Figure 887861DEST_PATH_IMAGE759
向中间体D (1.3 g, 3.04 mmol)在THF (50 mL)中的溶液添加t-BuOK (1.02 g,9.13 mmol)。在25℃下搅拌该反应混合物2小时。将该反应混合物倾倒入水 (200 mL)中和通过EA (100mL*2)萃取。用盐水 (100 mL)洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空下浓缩。通过快速硅胶层析法 (40 g 硅胶快速柱, 以50 mL/min的0~30% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液)纯化该残余物。浓缩洗脱物以提供作为浅黄色油的中间体E (600mg, 2.00 mmol) 。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.05 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.49 - 7.46(m, 1H), 7.04 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.68 - 4.52 (m, 4H), 4.06 (d, J = 11.6 Hz,1H), 3.90 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 2.85 - 2.82 (m, 1H), 2.69 - 2.57 (m, 1H) ppm。
步骤6: 螺[异色满-4,2'-氧杂环丁烷]-6-甲酸甲酯 (中间体F)的制备
Figure 403156DEST_PATH_IMAGE760
向中间体E (300 mg, 1.18 mmol)在DMSO (3 mL)和MeOH (1 mL)中的溶液添加Pd(OAc)2 (13.20 mg, 58.80 umol), K2CO3 (243.79 mg, 1.76 mmol)、二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (72.00 mg, 117.60 umol)。在60℃下在CO (15 psi) 气氛下搅拌该反应混合物17小时。将该反应混合物倾倒入水 (30 mL)中和通过EA (10 mL*3)萃取。用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空下浓缩。通过快速硅胶层析法纯化该残余物 (20 g 硅胶快速柱, 以30 mL/min的0~30% 乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脱液)。浓缩洗脱物以提供作为浅黄色油的中间体F (230 mg, 972.05 umol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+= 235.1
1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.44 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.87 - 7.85 (m,1H), 7.22 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.78 - 4.69 (m, 2H), 4.65 - 4.61 (m, 2H), 4.14(d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.92 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 2.87 - 2.82(m, 1H), 2.72 - 2.67 (m, 1H) ppm。
步骤7: 螺[异色满-4,2'-氧杂环丁烷]-6-甲酸锂 (中间体41)的制备
Figure 122850DEST_PATH_IMAGE761
将LiOH.H2O (71.66 mg, 1.71 mmol)/H2O (0.5 mL)添加至中间体F (200 mg,853.80 umol)在THF (2 mL)中的溶液。在25℃下搅拌该反应混合物3小时。将该混合物倾倒入40mL 去离子水中并冻干以提供作为白色固体的中间体41 (180 mg, 801.01 umol)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.41 (s, 1H), 7.79 - 7.77 (m, 1H), 6.93(d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.71 - 4.53 (m, 4H), 4.06 - 3.92 (m, 2H), 2.84 - 2.81(m, 1H), 2.66 - 2.61 (m, 1H) ppm。
中间体42: 3-((反)-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-3-基)苯甲酸的制备
Figure 432609DEST_PATH_IMAGE762
步骤1: 4-(3-溴苯基)四氢呋喃-3-醇 (中间体A)的制备
Figure 565650DEST_PATH_IMAGE763
在-70℃下向1,3-二溴苯 (20 g, 84.78 mmol, 10.20 mL)在THF (200 mL)中的溶液添加n-BuLi (2.5 M, 33.91 mL)，在-70℃下搅拌该混合物30分钟，然后在-70℃下向该溶液添加3,6-二氧杂双环[3.1.0]己烷 (3.65 g, 42.39 mmol)和BF3.Et2O (12.03 g,84.78 mmol, 10.46 mL)。在-70℃下搅拌该混合物2小时。将该反应混合物倾倒入NH4Cl(300 mL)中，用EA (300 mL*3)萃取该溶液，用盐水 (500 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供残余物。通过反相HPLC (0.1% FA条件)纯化该粗产物。用EA (30mL*3)萃取该溶液，经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并浓缩以提供作为黄色油的中间体A(3.8 g, 15.29 mmol)。
LCMS (ESI) m/z: [79BrM-18+H]+ = 225.1。
步骤2: 4-(3-溴苯基)四氢呋喃-3-酮 (中间体B)的制备
Figure 619056DEST_PATH_IMAGE764
在0℃下向中间体A (3.8 g, 15.63 mmol)在DCM (80 mL)中的溶液添加三氯异氰脲酸 (3.63 g, 15.63 mmol)和TEMPO (24.58 mg, 156.32 umol)。在30℃下搅拌该混合物16小时。将该反应混合物倾倒入水 (200 mL)中，用DCM (100 mL*3)萃取该溶液，用盐水(200 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供残余物。通过反相HPLC(0.1% FA条件)纯化该残余物。用EA (100 mL*3)萃取该溶液，经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并浓缩以提供作为黄色油的中间体B (3.7 g, 15.35 mmol)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.36 - 7.32 (m, 2H), 7.18 (s, 2H), 4.58 -4.54 (m, 1H), 4.19 - 4.15 (m, 1H), 4.10 - 4.06 (m, 1H), 3.98 - 3.94 (m, 1H),3.60 - 3.56 (m, 1H) ppm。
步骤3: 4-(3-溴苯基)-4-甲基-四氢呋喃-3-酮 (中间体C)的制备
Figure 458836DEST_PATH_IMAGE765
向中间体B (2.5 g, 10.37 mmol)在t-BuOH (13 mL)中的溶液添加t-BuOK (1.22g, 10.89 mmol)。在30℃下搅拌该混合物30分钟，然后在0℃下添加MeI (2.94 g, 20.74mmol, 1.29 mL)。在30℃下搅拌所得溶液3小时。将该反应混合物倾倒入水 (40 mL)中，用EA (40 mL*3)萃取该溶液，用盐水 (100 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥该溶液，过滤并浓缩以提供残余物。通过反相HPLC (0.1% FA条件)纯化该粗产物。用EA (20 mL*3)萃取该溶液，经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并浓缩以提供作为棕色油的中间体C (340 mg,1.33 mmol)。
1H NMR (400 MHz, MeOD) δ = 7.60 - 7.59 (m, 1H), 7.46 - 7.36 (m, 2H),7.33 - 7.22 (m, 1H), 4.54 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.17 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.10(s, 2H), 1.47 (s, 3H) ppm。
步骤4: (顺)-4-(3-溴苯基)-4-甲基四氢呋喃-3-醇和(反)-4-(3-溴苯基)-4-甲基四氢呋喃-3-醇 (中间体D1和D2)的制备
Figure 939496DEST_PATH_IMAGE766
在0℃下向中间体C (340 mg, 1.33 mmol)在MeOH (4 mL)中的溶液添加NaBH4(100.84 mg, 2.67 mmol)。在30℃下搅拌该混合物2小时。将该反应混合物倾倒入水 (10mL)中，用EA (10 mL*3)萃取该溶液，用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供残余物。通过制备型HPLC ( 柱: Phenomenex Synergi C18 150*25*10um；流动相: [水(0.225%FA)-ACN]；B%: 30%-54%,12min)纯化残余物并冻干以提供作为无色油的中间体D1 (90 mg, 350.03 umol) 和作为无色油的中间体D2 (80 mg, 311.13 umol)。
LCMS (ESI) m/z: [79BrM-18+H]+ = 239.0。
中间体D1: 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ = 7.41 - 7.40 (m, 1H), 7.37 - 7.35(m, 1H), 7.29 - 7.18 (m, 2H), 4.36 - 4.17 (m, 3H), 3.94 (d, J = 7.6 Hz, 1H),3.80 - 3.80 (m, 1H), 1.29 (s, 3H) ppm。
中间体D2: 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ = 7.58 - 7.57 (m, 1H), 7.38 - 7.36(m, 2H), 7.28 - 7.15 (m, 1H), 4.33 - 4.32 (m, 1H), 4.12 (d, J = 8.4 Hz, 1H),3.97 - 3.95 (m, 1H), 3.89 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 3.68 - 3.67 (m, 1H), 1.37 (s,3H) ppm。
步骤5: 3-((反)-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-3-基)苯甲酸 (中间体42)的制备
Figure 497517DEST_PATH_IMAGE767
向中间体D1 (90 mg, 350.03 umol)在DMSO (1 mL)中的溶液添加二环己基(3-二环己基磷鎓基丙基)鏻;四氟硼酸盐 (21.43 mg, 35.00 umol)、Pd(OAc)2 (7.86 mg,35.00 umol)、K2CO3 (72.56 mg, 525.04 umol)和H2O (12.61 mg, 700.05 umol, 12.61uL)。在100℃下搅拌该混合物3小时。过滤该反应混合物以提供溶液。通过反相HPLC (0.1%FA条件)纯化该粗产物。用EA (20 mL*3)萃取该溶液，用盐水 (50 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供作为无色油的中间体42(45 mg, 173.11 umol)。
LCMS (ESI) m/z: [M-18+H]+ = 205.3。
实施例114. (S)-4-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟异色满-6-甲酰胺和(R)-4-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟异色满-6-甲酰胺(化合物 298和299)的制备
Figure 148422DEST_PATH_IMAGE768
步骤1: 4-氧代异色满-6-甲酸 (中间体A)的制备
Figure 842709DEST_PATH_IMAGE769
向6-溴异色满-4-酮 (200 mg, 880.84 umol)在DMSO (2 mL)中的溶液添加H2O(0.2 mL)、Pd(OAc)2 (19.78 mg, 88.08 umol)、二环己基(3- 二环己基磷鎓基丙基) 鏻;四氟硼酸盐 (107.86 mg, 176.17 umol)和K2CO3 (182.61 mg, .32 mmol)。在100℃下在CO(15 psi) 气氛下搅拌该反应混合物16小时。将该反应混合物倾倒入HCl水溶液 (1M,20mL)中，和然后通过EA (20 mL *3)萃取。用盐水 (20mL)洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩以提供残余物。通过快速硅胶层析法 (20 g 硅胶快速柱, 以30 mL /min的0 ~ 70% 乙酸乙酯 / 石油醚梯度的洗脱液)纯化该残余物。浓缩洗脱物以提供作为白色固体的中间体A (150 mg, 772.76 umol) 。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+=193.1。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 13.31 (br s, 1H), 8.41 (d, J = 1.6 Hz,1H), 8.19 - 8.16 (m, 1H), 7.54 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.98 (s, 2H), 4.41 (s,2H) ppm。
步骤2: N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-4-氧代-异色满-6-甲酰胺 (中间体B)的制备
Figure 759849DEST_PATH_IMAGE770
向中间体A (97.61 mg, 507.95 umol)和2-氨基-N-[4-[6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-溶液基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]乙酰胺 (根据FG-A1656中的方法制备) (130 mg,338.63 umol, HCl)在DMF (2 mL)中的溶液添加EDCI (129.83 mg, 677.27 umol)、HOBt(91.51 mg, 677.27 umol)和DIEA (131.30 mg, 1.02 mmol, 176.95 uL)。在25℃下搅拌该反应混合物17小时。向该反应混合物添加水 (10mL)。形成白色固体。过滤该悬浮液以提供黄色固体。在10 mL PE /EA = 5 / 1中研磨该固体。过滤该混合物以提供作为黄色固体的中间体B (40 mg, 72.09 umol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+=522.2。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.43 (s, 1H), 9.21 - 9.20 (m, 1H),8.47 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.17 - 8.16 (m, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.63 - 7.61 (m,1H), 7.54 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 8.4 Hz,1H), 4.98 (s, 2H), 4.43 (s, 2H), 4.27 - 4.23 (m, 2H), 4.21 (d, J = 6.0 Hz,2H), 3.66 - 3.59 (m, 2H), 2.44 - 2.41 (m, 2H), 1.17 (s, 6H) ppm。
步骤3: 4-氰基-N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-4-三甲基甲硅烷基氧基异色满-6-甲酰胺 (中间体C)的制备
Figure 539586DEST_PATH_IMAGE771
向中间体B (20 mg, 38.34 umol)在DMF (0.5 mL)中的溶液添加TMSCN (11.41mg, 115.03 umol, 14.39 uL)。在25℃下搅拌该反应混合物17小时。将该反应混合物倾倒入水 (10mL)中，和然后通过EA (10 mL *2)萃取。用盐水 (10 mL)洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干燥, 过滤并浓缩以提供作为黄色固体的中间体C，其直接用于接下来的步骤。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+=621.2。
步骤4: 4-氰基-N-[2-[[4-[6-[(顺)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-2-吡啶基]噻唑-2-基]氨基]-2-氧代-乙基]-4-氟异色满-6-甲酰胺 (中间体D)的制备
Figure 997113DEST_PATH_IMAGE772
在-40℃下向中间体C (350 mg, 563.79 umol)在DCM (17.5 mL)中的溶液添加DAST (1.82 g, 11.28 mmol, 1.49 mL)。在-40℃下搅拌该反应混合物1小时。用饱和NaHCO3 (30 mL)淬灭该反应并用乙酸乙酯 (20 mL *2)萃取。用盐水 (20 mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供残余物。通过制备型HPLC (柱:Phenomenex Gemini-NX C18 75*30 mm*3 um；流动相: [水(0.225% FA) - ACN]；B% : 35%- 65%, 7 min)纯化残余物。在减压下浓缩洗脱物以除去MeCN，然后冻干以提供作为白色固体的中间体D (150 mg, 272.43 umol)。
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 551.1。
步骤5: (S)-4-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟异色满-6-甲酰胺和(R)-4-氰基-N-(2-((4-(6-((顺)-2,6-二甲基吗啉代)吡啶-2-基)噻唑-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-4-氟异色满-6-甲酰胺 (化合物298和299)的制备
Figure 811485DEST_PATH_IMAGE773
采用条件 (柱: DAICEL CHIRALPAKAD (250 mm*30 mm, 10 um)；流动相: [0.1%NH3•H2O ETOH]；B% : 50% - 50%, 3.3 min)通过SFC分离来纯化中间体D (0.15 g, 272.43umol)。浓缩峰1的洗脱液并冻干以提供作为灰白色固体的化合物 298 (33.18 mg, 59.55umol)和浓缩峰2的洗脱液并冻干以提供作为灰白色固体的化合物 299 (32.14 mg, 57.94umol)。
化合物 298:
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 551.1。
1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.45 (s, 1H), 9.34 - 9.15 (m, 1H), 8.30(s, 1H), 8.09 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.67 - 7.58 (m, 1H), 7.47(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.03- 4.81 (m, 2H), 4.64 - 4.37 (m, 2H), 4.32 - 4.17 (m, 4H), 3.65 - 3.62 (m,2H), 2.45 - 2.39 (m, 2H), 1.20 (s, 3H), 1.18 (s, 3H) ppm。
手性SFC: AD-3-EtOH (DEA)-50-3mL-35T.lcm；Rt = 1.056 min。
化合物 299:
LCMS (ESI) m/z: [M+H]+ = 551.1。
1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12.51 (s, 1H), 9.30 (m, 1H), 8.35 (s,1H), 8.21 - 8.10 (m, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.69 - 7.67(m, 1H), 7.52 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.32 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.09 - 4.88 (m,2H), 4.67 - 4.44 (m, 2H), 4.36 - 4.27 (m, 4H), 3.73 - 3.65 (m, 2H), 2.51 -2.45 (m, 2H), 1.25 (s, 3H), 1.24 (s, 3H) ppm。
手性SFC: AD-3-EtOH (DEA)-50-3mL-35T.lcm；Rt =1.331 min,。
实施例115. BRM和BRG-1的ATP酶催化活性的测定
通过使用ADP-Glo™ (Promega, V9102)的体外生化测定来测量BRM或BRG-1的ATP酶催化活性。一旦反应完成，就分两步进行ADP-Glo™激酶测定。第一步是耗尽反应中任何未消耗的ATP。第二步是将反应产物ADP转化为ATP，所述ATP将被萤光素酶用来产生发光，并被发光读取器(诸如Envision)检测到。
检测反应混合物(10 μL)含有30 nM的BRM或BRG-1、20 nM的鲑鱼精子DNA(来自Invitrogen，UltraPure™鲑鱼精子DNA溶液，目录号15632011)和ATP酶检测缓冲液中的400μM ATP，该缓冲液由20 mM Tris、pH 8、20 mM MgCl2、50 mM NaCl、0.1%吐温-20和1 mM新鲜DTT(Pierce™ DTT(二硫苏糖醇)，目录号20290)组成。通过将2.5 μL ATP酶溶液加入到2.5μL ATP/DNA溶液中，在低体积白色Proxiplate-384 plus板(PerkinElmer，目录号6008280)上起始反应，并在室温下温育1小时。然后加入试剂盒中提供的5 μL ADP-Glo™试剂，反应物在室温下温育40分钟。然后加入试剂盒中提供的10 μL激酶检测试剂，以将ADP转化为ATP，并且反应物在室温下温育60分钟。最后，用读板光度仪(诸如Envision)收集发光测量值。
BRM和BRG-1是从纯度大于90%的前五种昆虫细胞系合成的。由本文描述的ATP酶催化活性测定获得的以下化合物的IP50数据如表11所示。
表11. ATP酶催化活性
Figure 633947DEST_PATH_IMAGE774
Figure 900981DEST_PATH_IMAGE775
Figure 99881DEST_PATH_IMAGE776
Figure 831076DEST_PATH_IMAGE777
Figure 824440DEST_PATH_IMAGE778
Figure 578770DEST_PATH_IMAGE779
Figure 315781DEST_PATH_IMAGE780
Figure 901483DEST_PATH_IMAGE781
Figure 331328DEST_PATH_IMAGE782
Figure 572953DEST_PATH_IMAGE783
Figure 848077DEST_PATH_IMAGE784
Figure 553865DEST_PATH_IMAGE785
“+” 表示> 5 μM的抑制效果；“++” 表示1-5 μM的抑制效果；“+++” 表示0.1-1 μM的抑制效果；“++++”表示<0.1 μM的抑制效果。
实施例116. 化合物A的合成
BRG1/BRM抑制剂化合物A具有以下结构：
Figure 889031DEST_PATH_IMAGE786
。
化合物A如以下方案1中所示合成。
方案1. 化合物A的合成
Figure 617953DEST_PATH_IMAGE787
化合物A存在的情况下的BRM或BRG-1的ATP酶催化活性通过使用ADP-Glo™(Promega, V9102)的体外生化测定来测量。一旦反应完成，就分两步进行ADP-Glo™激酶测定。第一步是耗尽反应中任何未消耗的ATP。第二步是将反应产物ADP转化为ATP，所述ATP将被萤光素酶用来产生发光，并被发光读取器(诸如Envision)检测到。
检测反应混合物(10 μL)含有30 nM的BRM或BRG1、20 nM的鲑鱼精子DNA(来自Invitrogen，UltraPure™鲑鱼精子DNA溶液，目录号15632011)和ATP酶检测缓冲液中的400μM ATP，该缓冲液由20 mM Tris、pH 8、20 mM MgCl2、50 mM NaCl、0.1%吐温-20和1 mM新鲜DTT(Pierce™ DTT(二硫苏糖醇)，目录号20290)组成。通过将2.5 μL ATP酶溶液加入到2.5μL ATP/DNA溶液中，在低体积白色Proxiplate-384 plus板(PerkinElmer，目录号6008280)上起始反应，并在室温下温育1小时。然后加入试剂盒中提供的5 μL ADP-Glo™试剂，反应物在室温下温育40分钟。然后加入试剂盒中提供的10 μL激酶检测试剂，以将ADP转化为ATP，并且反应物在室温下温育60分钟。最后，用读板光度仪(诸如Envision)收集发光测量值。
BRM和BRG1是从纯度大于90%的前五种昆虫细胞系合成的。在试验中发现化合物A对BRM的IP50为10.4纳米，对BRG1的IP50为19.3纳米。
实施例117. BRG1/BRM ATP酶抑制对葡萄膜黑素瘤和血液学瘤细胞株生长的影响
程序：将葡萄膜黑素瘤细胞系(92-1、MP41、MP38、MP46)、前列腺癌细胞系(LNCAP)、肺癌细胞系(NCI-H1299)和永生化胚胎肾细胞系(HEK293T)铺板到96孔板中，该孔板具有生长培养基(见表10)。BRG1/BRM ATP酶抑制剂化合物A溶解在DMSO中，并在铺板时以0-10微摩尔的浓度梯度加入细胞中。细胞在37摄氏度温育3天。处理三天后，从细胞中取出培养基，向细胞中加入30微升TrypLE (Gibco)10分钟。从平板上分离细胞，并加入170微升生长培养基重新悬浮。对来自两个DMSO处理的对照孔的细胞进行计数，并且将在实验开始铺板的最初数量的细胞重新铺板到含有新鲜化合物的平板上，在37摄氏度下再保持四天。在第7天，如上所述收获细胞。在第3天和第7天，通过添加细胞滴度glo (Promega)来测量相对细胞生长，并在Envision读板仪(Perkin Elmer)上测量发光。使用Graphpad Prism计算每种细胞系生长被抑制50%的化合物浓度(GI50)，并绘制如下。对于多发性骨髓瘤细胞系(OPM2、MM1S、LP1)、ALL细胞系(TALL1、JURKAT、RS411)、DLBCL细胞系(SUDHL6、SUDHL4、DB、WSUDLCL2、PFEIFFER)、AML细胞系(OCIAML5)、MDS细胞系(SKM1)、卵巢癌细胞系(OV7、TYKNU)、食管癌细胞系(KYSE150)、横纹肌样瘤细胞系(RD、G402、G401、HS729、A204)、肝癌细胞系(HLF、HLE、PLCRPF5)和肺癌细胞系(SW1573、NCIH2444)，实施上述方法并进行以下修改：将细胞铺板于96孔板中，第二天，将BRG1/BRM ATP酶抑制剂化合物A溶解在DMSO中，并以0-10微摩尔的浓度梯度加入细胞中。在第3天和第7天细胞分裂时，将细胞分裂到新的96孔板中，并在重新铺板后4小时加入新鲜化合物。
表12列出了测试的细胞系和使用的生长培养基。
表12. 细胞系和生长培养基
Figure 696767DEST_PATH_IMAGE788
结果：如图1所示，葡萄膜黑素瘤和血液学癌细胞系对BRG1/BRM抑制比其他受试细胞系更敏感。葡萄膜黑素瘤和血液学癌细胞系的抑制维持到第7天。
实施例118. 葡萄膜黑素瘤细胞系中BRG1/BRM抑制剂与临床PKC和MEK抑制剂的比较
程序：葡萄膜黑素瘤细胞系，92-1或MP41，在生长培养基的存在下，在96孔板中铺板(见表6)。BAF ATP酶抑制剂(化合物A)，PKC抑制剂(LXS196；MedChemExpress)，或MEK抑制剂(司美替尼；Selleck Chemicals)溶解在DMSO中，并在铺板时以0至10微摩尔的浓度梯度加入到细胞中。细胞在37摄氏度温育3天。处理三天后，用细胞滴定度发光仪(Promega)测量细胞生长，在Envision读板仪(Perkin Elmer)上读取发光。
结果：如图2A和图2B所示，化合物A显示出与临床PKC和MEK抑制剂相当的葡萄膜黑素瘤细胞生长抑制作用。此外，发现化合物A比临床PKC和MEK抑制剂导致更快的抑制开始。
实施例119. 化合物B的合成
BRG1/BRM抑制剂化合物B具有以下结构：
Figure 257061DEST_PATH_IMAGE789
。
化合物B以如下方案2中所示合成。
方案2. 化合物B的合成
Figure 28708DEST_PATH_IMAGE790
向(2S)-2-氨基-4-甲基硫烷基-N-[4-[3-(4-吡啶基)苯基]噻唑-2-基]丁酰胺(2g, 4.75 mmol, HCl盐)和1-甲基磺酰基吡咯-3-甲酸(898.81 mg, 4.75 mmol)在DMF (20mL)中的混合物加入EDCI (1.37 g, 7.13 mmol)、HOBt (962.92 mg, 7.13 mmol)和DIEA(2.46 g, 19.00 mmol, 3.31 mL)，并在25℃下搅拌该混合物3小时。将该混合物倾倒入H2O(100 mL)中并通过过滤收集沉淀物。在MeOH (20 mL)中研磨该固体并通过过滤收集沉淀物。将该固体溶解于DMSO (10 mL)中，然后将该混合物倾倒入MeOH (50 mL)中并通过过滤收集所形成的沉淀物，并冻干以提供作为白色固体的化合物B (2.05 g, 3.66 mmol,77.01%收率)。LCMS (ESI) m/z [M+H]+=555.9. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.49 (s,1H), 8.68-8.66 (m, 2H), 8.46 (d, J=7.2 Hz, 1H), 8.31-8.30 (m, 1H), 8.02-8.00(m, 1H), 7.94-7.96 (m, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.73-7.74 (m, 3H), 7.61-7.57 (m,1H), 7.31-7.29 (m, 1H), 6.79-6.77 (m, 1H), 4.74-4.69 (m, 1H), 3.57 (s, 3H),2.67-2.53 (m, 2H), 2.13-2.01 (m, 5H)。SFC: AS-3-MeOH (DEA)-40-3mL-35T.lcm, t =0.932 min, ee%=100%。
实施例120. BRG1/BRM ATP酶抑制对葡萄膜黑素瘤、血液学癌、前列腺癌、乳腺癌和尤文肉瘤细胞系生长的影响
程序：还如上所述用化合物B测试了实施例112中上述的所有细胞系。此外，还对以下细胞系进行了如下测试。简而言之，对于尤文氏肉瘤细胞系(CADOES1，RDES，SKES1)、视网膜母细胞瘤细胞系(WERIRB1)、ALL细胞系(REH)、AML细胞系(KASUMI1)、前列腺癌细胞系(PC3，DU145，22RV1)、黑素瘤细胞系(SH4，SKMEL28，WM115，COLO829，SKMEL3，A375)、乳腺癌细胞系(MDAMB415，CAMA1，MCF7，BT474，HCC1419，DU4475，BT549)、B-ALL细胞系(SUPB15)、CML细胞系(K562、MEG01)、伯基特淋巴瘤细胞系(RAMOS2G64C10、DAUDI)、套细胞淋巴瘤细胞系(JEKO1、REC1)、膀胱癌细胞系(HT1197)和肺癌细胞系(SBC5)，实施上述方法并进行以下修改：将细胞铺板于96孔板中，第二天，将BRG1/BRM ATP酶抑制剂化合物B溶解在DMSO中，并以0-10微摩尔的浓度梯度加入细胞中。在第3天和第7天细胞分裂时，将细胞分裂到新的96孔板中，并在重新铺板后4小时加入新鲜化合物。
表13列出了测试的细胞系和使用的生长培养基。
表13
Figure 979347DEST_PATH_IMAGE791
结果：如图3所示，葡萄膜黑素瘤、血液学癌、前列腺癌、乳腺癌和尤因肉瘤细胞系对BRG1/BRM抑制比其他受试细胞系更敏感。葡萄膜黑素瘤、血液学癌、前列腺癌、乳腺癌和尤因肉瘤细胞系的抑制维持到第7天。
其他实施方案
虽然已经结合本发明的特定实施方案描述了本发明，但是应当理解，本发明能够进行进一步的修改，并且本申请旨在覆盖本发明的任何变化、使用或修改，这些变化、使用或修改通常遵循本发明的原理，并且包括在本发明所属领域的已知或习惯实践范围内的对本公开的偏离，并且可以应用于上文阐述的基本特征，并且在权利要求的范围内。
其他实施方案在权利要求中。

Claims (225)

1.具有以下结构的化合物：
Figure DEST_PATH_IMAGE001
其中m为0、1、2、3或4；
n为0、1、2、3或4；
R1 为任选取代的C3-C6 支化烷基，或R1与R2 以及它们所连接的原子组合形成5-至7-元环；
各R2 独立地为卤素、羟基、硫醇、任选取代的C1-C6 烷基、任选取代的C1-C6 杂烷基或任选取代的氨基，或一个R2与另一R2 以及它们所连接的原子组合形成5-至7-元环；
R3和R5 独立地为氢或任选取代的C1-C6 烷基；
R4 为氢、任选取代的C1-C6 烷基、任选取代的C1-C6 杂烷基、任选取代的C1-C6烷基C6-C10芳基或任选取代的C1-C6烷基C2-C9 杂芳基；
Het 为5-或6-元杂环；
R6 为氢、卤素、氰基、任选取代的C1-C6 烷氧基、任选取代的C1-C6 杂烷基、羧基、任选取代的酰胺、任选取代的C2-C9 杂芳基、任选取代的C2-C9 杂环基或任选取代的C6-C10 芳基；和
R7 为氰基、卤素、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基,
或其药学上可接受的盐。
2.如权利要求1所述的化合物，其中R3 为氢。
3.如权利要求1或2所述的化合物，其中R5 为氢。
4.如权利要求1至3任一项所述的化合物，其中R4 为氢。
5.如权利要求1至3任一项所述的化合物，其中R4 为任选取代的C1-C6 杂烷基。
6.如权利要求5所述的化合物，其中R4为
Figure 104366DEST_PATH_IMAGE002
或
Figure DEST_PATH_IMAGE003
。
7.如权利要求1至3任一项所述的化合物，其中R4 为任选取代的C1-C6 烷基。
8.如权利要求7所述的化合物，其中R4 为甲基。
9.如权利要求1至8任一项所述的化合物，其中Het为
Figure 959190DEST_PATH_IMAGE004
。
10.如权利要求1至8任一项所述的化合物，其中Het为
Figure DEST_PATH_IMAGE005
。
11.如权利要求1至10任一项所述的化合物，其中R1为异丙基、
Figure 738927DEST_PATH_IMAGE006
、
Figure DEST_PATH_IMAGE007
或
Figure 134136DEST_PATH_IMAGE008
。
12.如权利要求1至11任一项所述的化合物，其中m为0。
13.如权利要求1至11任一项所述的化合物，其中m为1。
14.如权利要求1至11任一项所述的化合物，其中m为2。
15.如权利要求13或14所述的化合物，其中至少一个R2 为任选取代的C1-C6 烷基或卤素。
16.如权利要求15所述的化合物，其中R2 为甲基。
17.如权利要求13或14所述的化合物，其中R2 为任选取代的C1-C6 杂烷基。
18.如权利要求17所述的化合物，其中R2为
Figure DEST_PATH_IMAGE009
。
19.如权利要求1至10任一项所述的化合物，其中R1与R2 以及它们所连接的原子组合形成5-至7-元环。
20.如权利要求19所述的化合物，其中所述化合物具有如下式Ia的结构：
Figure 135459DEST_PATH_IMAGE010
。
21.如权利要求13或14所述的化合物，其中R2 为任选取代的氨基。
22.如权利要求21所述的化合物，其中R2为–NH2。
23.如权利要求1至22任一项所述的化合物，其中n为0。
24.如权利要求1至22任一项所述的化合物，其中n为1。
25.如权利要求24所述的化合物，其中至少一个R7 为氰基。
26.如权利要求1至25任一项所述的化合物，其中R6 为氢。
27.如权利要求1至25任一项所述的化合物，其中R6 为氰基。
28.如权利要求1至25任一项所述的化合物，其中R6 为任选取代的C1-C6 杂烷基。
29.如权利要求28所述的化合物，其中R6为
Figure DEST_PATH_IMAGE011
或
Figure 957922DEST_PATH_IMAGE012
。
30.如权利要求1至25任一项所述的化合物，其中R6 为羧基。
31.如权利要求1至25任一项所述的化合物，其中R6 为任选取代的C2-C9 杂芳基。
32.如权利要求31所述的化合物，其中R6为
Figure DEST_PATH_IMAGE013
Figure 162638DEST_PATH_IMAGE014
Figure DEST_PATH_IMAGE015
Figure 361538DEST_PATH_IMAGE016
。
33.如权利要求1至25任一项所述的化合物，其中R6 为任选取代的C2-C9 杂环基。
34.如权利要求33所述的化合物，其中R6为
Figure DEST_PATH_IMAGE017
或
Figure 30417DEST_PATH_IMAGE018
。
35.如权利要求1至25任一项所述的化合物，其中R6为C6-C10 芳基。
36.如权利要求35所述的化合物，其中R6为3,5-二氰基-苯基、3-羟甲基-5-氰基-苯基、3-氰基-苯基、3-羟甲基-5-三氟甲基-苯基、3-氯-苯基、3,5-二氯-苯基、3-氨基甲基-苯基、
Figure DEST_PATH_IMAGE019
或4-氨基甲基-苯基。
37.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物为表1a中的化合物12-47或表1b中的化合物110-129的任一个。
38.具有以下结构的化合物：
Figure 210732DEST_PATH_IMAGE020
其中o为0、1、2、3或4；
p为0、1、2、3、4或5；
R8和R9 独立地为氢或任选取代的C1-C6 烷基，或R9与R10 以及它们所连接的原子组合形成5-至8-元环；
各R10 独立地为卤素、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基，或R10与R9 以及它们所连接的原子组合形成5-至8-元环；
R11和R13 独立地为氢或任选取代的C1-C6 烷基；
R12 为氢、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基；
Het 为任选取代的C2-C9 杂芳基；和
各R14 独立地为任选取代的酰胺、氰基、任选取代的C1-C6 杂烷基、羧基、任选取代的C2-C9 杂芳基、任选取代的C2-C9 杂环基或任选取代的C6-C10 芳基；
或其药学上可接受的盐。
39.如权利要求38所述的化合物，其中R11 为氢。
40.如权利要求38或39所述的化合物，其中R13 为氢。
41.如权利要求38至40任一项所述的化合物，其中R12 为氢。
42.如权利要求38至41任一项所述的化合物，其中R8 为任选取代的C1-C6 烷基。
43.如权利要求42所述的化合物，其中R8 为甲基。
44.如权利要求38至43任一项所述的化合物，其中R9 为任选取代的C1-C6 烷基。
45.如权利要求44所述的化合物，其中R9 为甲基。
46.如权利要求38至45任一项所述的化合物，其中o为0。
47.如权利要求38至43任一项所述的化合物，其中R9与R10 以及它们所连接的原子组合形成5-至8-元环。
48.如权利要求47所述的化合物，其中所述化合物具有以下式IIa的结构：
Figure DEST_PATH_IMAGE021
其中虚线为任选的双键。
49.如权利要求38至48任一项所述的化合物，其中Het为
Figure 965061DEST_PATH_IMAGE022
。
50.如权利要求38至49任一项所述的化合物，其中p为1。
51.如权利要求38至50任一项所述的化合物，其中至少一个R14 为任选取代的酰胺。
52.如权利要求51所述的化合物，其中R14为
Figure DEST_PATH_IMAGE023
。
53.如权利要求38至50任一项所述的化合物，其中R14 为羧基。
54.如权利要求38至50任一项所述的化合物，其中R14 为任选取代的C2-C9 杂芳基。
55.如权利要求54所述的化合物，其中R14为
Figure 702073DEST_PATH_IMAGE024
Figure DEST_PATH_IMAGE025
Figure 163141DEST_PATH_IMAGE026
Figure DEST_PATH_IMAGE027
。
56.如权利要求38所述的化合物，其中所述化合物为表2a中化合物1-11或表2b中的化合物130或131中的任一个。
57.具有以下结构的化合物：
Figure 592986DEST_PATH_IMAGE028
其中E 为氢、羟基、氨基、氰基、任选取代的C1-C6 烷基、任选取代的C1-C6 羟烷基、任选取代的C1-C6 氨基烷基、任选取代的甲硅烷基、任选取代的C2-C9 杂环基或任选取代的C3-C8环烷基；
D 为任选取代的C6-C10 芳基或任选取代的C2-C9 杂芳基；
R19和R21 独立地为氢或任选取代的C1-C6 烷基；
各R20 独立地为氢、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基，或两个R20 基团与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基；
Het 为任选取代的C2-C9 杂芳基；
A 为任选取代的C6-C10 芳基或任选取代的C2-C9 杂芳基；和
R23 独立地为氢、氰基、任选取代的C1-C6 烷基、任选取代的C1-C6 烷氧基、任选取代的酰胺、任选取代的C1-C6 杂烷基、任选取代的C3-C8 环烷基、任选取代的C2-C9 杂芳基、任选取代的C2-C9 杂环基或任选取代的C6-C10 芳基，或R23与R22 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C2-C9 杂环基；
或其药学上可接受的盐。
58.如权利要求57所述的化合物，其中E 为氢。
59.如权利要求57所述的化合物，其中E 为羟基。
60.如权利要求57所述的化合物，其中E为-NH2。
61.如权利要求57所述的化合物，其中E 为氰基。
62.如权利要求57所述的化合物，其中E 为任选取代的C1-C6 烷基。
63.如权利要求62所述的化合物，其中任选取代的C1-C6 烷基为叔丁基。
64.如权利要求57所述的化合物，其中E 为任选取代的C1-C6 羟烷基。
65.如权利要求64所述的化合物，其中任选取代的C1-C6 羟烷基为
Figure DEST_PATH_IMAGE029
、
Figure 834611DEST_PATH_IMAGE030
、
Figure DEST_PATH_IMAGE031
或
Figure 293756DEST_PATH_IMAGE032
。
66.如权利要求57所述的化合物，其中E 为任选取代的C1-C6 氨基烷基。
67.如权利要求66所述的化合物，其中任选取代的C1-C6 氨基烷基为
Figure DEST_PATH_IMAGE033
或
Figure 937226DEST_PATH_IMAGE034
。
68.如权利要求57所述的化合物，其中E 为任选取代的甲硅烷基。
69.如权利要求68所述的化合物，其中任选取代的甲硅烷基为三甲基甲硅烷基。
70.如权利要求57所述的化合物，其中E 为任选取代的C2-C9 杂环基。
71.如权利要求70所述的化合物，其中任选取代的C2-C9 杂环基为
Figure DEST_PATH_IMAGE035
,
Figure 272393DEST_PATH_IMAGE036
,
Figure DEST_PATH_IMAGE037
,
Figure 938998DEST_PATH_IMAGE038
,
Figure DEST_PATH_IMAGE039
或
Figure 17812DEST_PATH_IMAGE040
。
72.如权利要求57所述的化合物，其中E 为任选取代的C3-C8 环烷基。
73.如权利要求72所述的化合物，其中任选取代的C3-C8 环烷基为
Figure DEST_PATH_IMAGE041
、
Figure 702740DEST_PATH_IMAGE042
、
Figure DEST_PATH_IMAGE043
或
Figure 474387DEST_PATH_IMAGE044
。
74.如权利要求57至73任一项所述的化合物，其中D 为任选取代的C6-C10 芳基。
75.如权利要求74所述的化合物，其中任选取代的C6-C10 芳基为任选取代的C6-C10 单环芳基。
76.如权利要求75所述的化合物，其中任选取代的C6-C10 单环芳基为
Figure DEST_PATH_IMAGE045
,
Figure 425026DEST_PATH_IMAGE046
,
Figure DEST_PATH_IMAGE047
,
Figure 245214DEST_PATH_IMAGE048
或
Figure DEST_PATH_IMAGE049
。
77.如权利要求74所述的化合物，其中任选取代的C6-C10 芳基为任选取代的C6-C10 多环芳基。
78.如权利要求77所述的化合物，其中任选取代的C6-C10 多环芳基为
Figure 597698DEST_PATH_IMAGE050
,
Figure DEST_PATH_IMAGE051
,
Figure 540246DEST_PATH_IMAGE052
,
Figure DEST_PATH_IMAGE053
,
Figure 165131DEST_PATH_IMAGE054
,
Figure DEST_PATH_IMAGE055
,
Figure 585748DEST_PATH_IMAGE056
或
Figure DEST_PATH_IMAGE057
。
79.如权利要求57至73任一项所述的化合物，其中D 为任选取代的C2-C9 杂芳基。
80.如权利要求79所述的化合物，其中任选取代的C2-C9 杂芳基为任选取代的C2-C9 单环杂芳基。
81.如权利要求80所述的化合物，其中任选取代的C2-C9 单环杂芳基为
Figure 58318DEST_PATH_IMAGE058
或
Figure DEST_PATH_IMAGE059
。
82.如权利要求79所述的化合物，其中任选取代的C2-C9 杂芳基为任选取代的C2-C9 多环杂芳基。
83.如权利要求82所述的化合物，其中任选取代的C2-C9 多环杂芳基为
Figure 109451DEST_PATH_IMAGE060
,
Figure DEST_PATH_IMAGE061
Figure 34681DEST_PATH_IMAGE062
Figure DEST_PATH_IMAGE063
Figure 258989DEST_PATH_IMAGE064
Figure DEST_PATH_IMAGE065
。
84.如权利要求57至83任一项所述的化合物，其中Het为
Figure 507437DEST_PATH_IMAGE066
。
85.如权利要求57至84任一项所述的化合物，其中至少一个R20 为氢。
86.如权利要求57至85任一项所述的化合物，其中R20 为任选取代的C1-C6 杂烷基。
87.如权利要求86所述的化合物，其中任选取代的C1-C6 杂烷基为
Figure DEST_PATH_IMAGE067
。
88.如权利要求57至84任一项所述的化合物，其中R20 为任选取代的C1-C6 烷基。
89.如权利要求88所述的化合物，其中任选取代的C1-C6 烷基为甲基。
90.如权利要求57至89任一项所述的化合物，其中r为0。
91.如权利要求57至90任一项所述的化合物，其中A 为任选取代的C6-C10 芳基。
92.如权利要求91所述的化合物，其中任选取代的C6-C10 芳基为
Figure 791788DEST_PATH_IMAGE068
或
Figure DEST_PATH_IMAGE069
。
93.如权利要求57至90任一项所述的化合物，其中A 为任选取代的C6-C10 杂芳基。
94.如权利要求93所述的化合物，其中任选取代的C6-C10 杂芳基为
Figure 204315DEST_PATH_IMAGE070
,
Figure DEST_PATH_IMAGE071
Figure 169997DEST_PATH_IMAGE072
。
95.如权利要求57至94任一项所述的化合物，其中R23 为氢。
96.如权利要求57至94任一项所述的化合物，其中R23 为氰基。
97.如权利要求57至94任一项所述的化合物，其中R23 为任选取代的C1-C6 烷基。
98.如权利要求97所述的化合物，其中任选取代的C1-C6 烷基为甲基。
99.如权利要求57至94任一项所述的化合物，其中R23 为任选取代的C3-C8 环烷基。
100.如权利要求99所述的化合物，其中任选取代的C3-C8 环烷基为
Figure DEST_PATH_IMAGE073
。
101.如权利要求57至94任一项所述的化合物，其中R23 为任选取代的C1-C6 杂烷基。
102.如权利要求101所述的化合物，其中任选取代的C1-C6 杂烷基为
Figure 351579DEST_PATH_IMAGE074
。
103.如权利要求57至94任一项所述的化合物，其中R23 为任选取代的C2-C9 杂芳基。
104.如权利要求103所述的化合物，其中任选取代的C2-C9 杂芳基为
Figure DEST_PATH_IMAGE075
,
Figure 541252DEST_PATH_IMAGE076
Figure DEST_PATH_IMAGE077
Figure 630955DEST_PATH_IMAGE078
Figure DEST_PATH_IMAGE079
。
105.如权利要求57至94任一项所述的化合物，其中R23 为任选取代的C2-C9 杂环基。
106.如权利要求105所述的化合物，其中任选取代的C2-C9 杂环基为
Figure 197066DEST_PATH_IMAGE080
,
Figure DEST_PATH_IMAGE081
, 或
Figure 436417DEST_PATH_IMAGE082
。
107.如权利要求57至94任一项所述的化合物，其中R23 为任选取代的C6-C10 芳基。
108.如权利要求107所述的化合物，其中任选取代的C6-C10 芳基为3,5-二-氰基-苯基、3-羟甲基-5-三氟甲基-苯基、3-氯-苯基、3-氰基-苯基、3,5-二-氯-苯基、3-氨基甲基-苯基或3-羟甲基-5-氰基-苯基。
109.如权利要求57至94任一项所述的化合物，其中R23与R22 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C2-C9 杂环基。
110.具有以下结构的化合物：
Figure DEST_PATH_IMAGE083
其中q和r独立地为0、1、2、3或4；
R15 为任选取代的C1-C6 烷基或卤素，或R15与R17 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基；
R16 为任选取代的C1-C6 烷基、任选取代的C1-C6 全氟烷基，或R16与R18 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基，或R16与R15 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基；
R17 为氰基、任选取代的氨基、羟基、任选取代的C1-C6 烷基、任选取代的C1-C6 羟烷基、任选取代的C1-C6 氨基烷基或
Figure 796991DEST_PATH_IMAGE084
，或R17与R18 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基；
X1为O或–N-OH；
各R18 独立地为卤素、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基，或R18与R16 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基，或R18与R17 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基；
R19、R21、R24和R25 独立地为氢或任选取代的C1-C6 烷基；
R20 为氢、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基；
Het 为任选取代的C2-C9 杂芳基；和
各R22 独立地为羟基、卤素、任选取代的C1-C6 烷基或任选取代的C1-C6 杂烷基，或R22与R23 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C2-C9 杂环基；
R23 独立地为氢、氰基、任选取代的C1-C6 烷氧基、任选取代的酰胺、任选取代的C1-C6杂烷基、任选取代的C2-C9 杂芳基、任选取代的C2-C9 杂环基或任选取代的C6-C10 芳基，或R23与R22 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C2-C9 杂环基；
或其药学上可接受的盐。
111.如权利要求110所述的化合物，其中r为0或1。
112.如权利要求110或111所述的化合物，其中R19 为氢。
113.如权利要求110至112任一项所述的化合物，其中R21 为氢。
114.如权利要求110至113任一项所述的化合物，其中Het为
Figure DEST_PATH_IMAGE085
。
115.如权利要求110至114任一项所述的化合物，其中R20 为氢。
116.如权利要求110至114任一项所述的化合物，其中R20 为任选取代的C1-C6 杂烷基。
117.如权利要求116所述的化合物，其中R20为
Figure 184110DEST_PATH_IMAGE086
。
118.如权利要求110至114任一项所述的化合物，其中R20 为任选取代的C1-C6 烷基。
119.如权利要求118所述的化合物，其中R20 为甲基。
120.如权利要求110至119任一项所述的化合物，其中q为0。
121.如权利要求110至119任一项所述的化合物，其中q为1。
122.如权利要求110至119任一项所述的化合物，其中q为2。
123.如权利要求121或122所述的化合物，其中各R18 为任选取代的C1-C6 烷基。
124.如权利要求123所述的化合物，其中各R18 为甲基或乙基。
125.如权利要求121或122所述的化合物，其中R18与R16 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基。
126.如权利要求125所述的化合物，其中R18与R16 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基。
127.如权利要求126所述的化合物，其中所述化合物具有以下结构：
Figure DEST_PATH_IMAGE087
。
128.如权利要求125所述的化合物，其中R18与R16 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C2-C9 杂环基。
129.如权利要求128所述的化合物，其中所述化合物具有以下结构：
Figure 740863DEST_PATH_IMAGE088
。
130.如权利要求121或122所述的化合物，其中R18与R17 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基。
131.如权利要求130所述的化合物，其中所述化合物具有以下结构：
Figure DEST_PATH_IMAGE089
。
132.如权利要求110至124、130或131任一项所述的化合物，其中R16 为任选取代的C1-C6烷基。
133.如权利要求132所述的化合物，其中R16 为甲基或乙基。
134.如权利要求133所述的化合物，其中R16 为甲基。
135.如权利要求110至124、130或131任一项所述的化合物，其中R16 为任选取代的C1-C6全氟烷基。
136.如权利要求135所述的化合物，其中R16 为三氟甲基。
137.如权利要求110至124、130或131任一项所述的化合物，其中R16与R15 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基或任选取代的C2-C9 杂环基。
138.如权利要求137所述的化合物，其中R16与R15 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C3-C8 环烷基。
139.如权利要求138所述的化合物，其中所述化合物具有以下结构：
Figure 631458DEST_PATH_IMAGE090
。
140.如权利要求137所述的化合物，其中R16与R15 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C2-C9 杂环基。
141.如权利要求140所述的化合物，其中所述化合物具有以下结构：
Figure DEST_PATH_IMAGE091
。
142.如权利要求110至137任一项所述的化合物，其中R15 为任选取代的C1-C6 烷基。
143.如权利要求142所述的化合物，其中R15 为甲基。
144.如权利要求110至124或132至143任一项所述的化合物，其中R17 为氰基。
145.如权利要求110至124或132至143任一项所述的化合物，其中R17 为任选取代的氨基。
146.如权利要求145所述的化合物，其中R17为–NH2。
147.如权利要求110至124或132至143任一项所述的化合物，其中R17 为羟基。
148.如权利要求110至124或132至143任一项所述的化合物，其中R17 为任选取代的C1-C6 烷基。
149.如权利要求148所述的化合物，其中R17 为甲基、乙基或异丙基。
150.如权利要求149所述的化合物，其中R17 为甲基。
151.如权利要求149所述的化合物，其中R17 为乙基。
152.如权利要求149所述的化合物，其中R17 为异丙基。
153.如权利要求110至124或132至143任一项所述的化合物，其中R17 为任选取代的C1-C6 羟烷基。
154.如权利要求153所述的化合物，其中R17为–CH2OH。
155.如权利要求110至124或132至143任一项所述的化合物，其中R17 为任选取代的C1-C6 氨基烷基。
156.如权利要求155所述的化合物，其中R17为–CH2NH2。
157.如权利要求110至124或132至143任一项所述的化合物，其中R17为
Figure 428513DEST_PATH_IMAGE092
。
158.如权利要求157所述的化合物，其中X1为O。
159.如权利要求157所述的化合物，其中X1为–N-OH。
160.如权利要求157至159任一项所述的化合物，其中R24 为氢。
161.如权利要求157至160任一项所述的化合物，其中R25 为氢。
162.如权利要求110至161任一项所述的化合物，其中R23 为氢。
163.如权利要求110至161任一项所述的化合物，其中R23 为氰基。
164.如权利要求110至161任一项所述的化合物，其中R23 为任选取代的C1-C6 杂烷基。
165.如权利要求164所述的化合物，其中R23为
Figure DEST_PATH_IMAGE093
。
166.如权利要求110至161任一项所述的化合物，其中R23 为任选取代的C2-C9 杂芳基。
167.如权利要求166所述的化合物，其中R23为
Figure 975032DEST_PATH_IMAGE094
Figure DEST_PATH_IMAGE095
Figure 148524DEST_PATH_IMAGE096
Figure DEST_PATH_IMAGE097
。
168.如权利要求110至161任一项所述的化合物，其中R23 为任选取代的C2-C9 杂环基。
169.如权利要求168所述的化合物，其中R23为
Figure 159206DEST_PATH_IMAGE098
。
170.如权利要求110至161任一项所述的化合物，其中R23 为任选取代的C6-C10 芳基。
171.如权利要求170所述的化合物，其中R23为3,5-二-氰基-苯基、3-羟甲基-5-三氟甲基-苯基、3-氯-苯基、3-氰基-苯基、3,5-二-氯-苯基或3-羟甲基-5-氰基-苯基。
172.如权利要求110至171任一项所述的化合物，其中r为0。
173.如权利要求110至171任一项所述的化合物，其中R23与R22 以及与它们所连接的碳组合形成任选取代的C2-C9 杂环基。
174.如权利要求173所述的化合物，其中所述化合物具有以下结构：
Figure DEST_PATH_IMAGE099
。
175.如权利要求57或110所述的化合物，其中所述化合物为表3a中的化合物48-109、表3b中的化合物132-268、或表3c中的化合物269-444中的任一个。
176.一种药物组合物，其包含权利要求1至175任一项所述的化合物和药学上可接受的赋形剂。
177.一种降低细胞中的BAF复合物的活性的方法，所述方法包括使所述细胞与有效量的如权利要求1至175中任一项所述的化合物或如权利要求176所述的药物组合物接触。
178.如权利要求177所述的方法，其中所述BAF复合物在癌细胞中。
179.一种治疗有需要的受试者的BAF复合物相关病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1至175中任一项所述的化合物或如权利要求176所述的药物组合物。
180.如权利要求179所述的方法，其中所述BAF复合物相关病症是癌症或病毒感染。
181.一种抑制BRM的方法，所述方法包括使细胞与有效量的如权利要求1至175中任一项所述的化合物或如权利要求176所述的药物组合物接触。
182.如权利要求181所述的方法，其中所述细胞是癌细胞。
183.一种治疗有需要的受试者的BRG1功能丧失性突变相关病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1至175中任一项所述的化合物或如权利要求176所述的药物组合物。
184.如权利要求183所述的方法，其中所述BRG1功能丧失性突变相关病症是癌症。
185.一种诱导细胞的细胞凋亡的方法，所述方法包括使所述细胞与有效量的如权利要求1至175中任一项所述的化合物或如权利要求176所述的药物组合物接触。
186.如权利要求185所述的方法，其中所述细胞是癌细胞。
187.一种治疗有需要的受试者的癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1至175中任一项所述的化合物或如权利要求176所述的药物组合物。
188.如权利要求178、180、182、184、186和187中任一项所述的方法，其中所述癌症是非小细胞肺癌、结肠直肠癌、膀胱癌、原发不明癌症、神经胶质瘤、乳腺癌、黑素瘤、非黑素瘤皮肤癌、子宫内膜癌、食道胃癌、胰腺癌、肝胆管癌、软组织肉瘤、卵巢癌、头颈癌、肾细胞癌、骨癌、非霍奇金淋巴瘤、小细胞肺癌、前列腺癌、胚胎肿瘤、生殖细胞瘤、宫颈癌、甲状腺癌、唾液腺癌、胃肠神经内分泌肿瘤、子宫肉瘤、胃肠道间质瘤、CNS癌症、胸腺肿瘤、肾上腺皮质癌、阑尾癌、小肠癌或阴茎癌。
189.如权利要求178、180、182、184、186和187中任一项所述的方法，其中所述癌症是非小细胞肺癌、结肠直肠癌、膀胱癌、原发不明癌症、神经胶质瘤、乳腺癌、黑素瘤、非黑素瘤皮肤癌、子宫内膜癌或阴茎癌。
190.如权利要求178、180、182、184、186和187中任一项所述的方法，其中所述癌症是非小细胞肺癌。
191.如权利要求178、180、182、184、186和187中任一项所述的方法，其中所述癌症是软组织肉瘤。
192.一种治疗有需要的受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1至175中任一项所述的化合物或如权利要求176所述的药物组合物。
193.一种减少有需要的受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌的肿瘤生长的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1至175中任一项所述的化合物或如权利要求176所述的药物组合物。
194.一种抑制受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌的转移进展的方法，所述方法包括施用有效量的如权利要求1至175中任一项所述的化合物或如权利要求176所述的药物组合物。
195.一种抑制受试者的黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌的转移定殖的方法，所述方法包括施用有效量的如权利要求1至175中任一项所述的化合物或如权利要求176所述的药物组合物。
196.一种降低黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌细胞中的BRG1和/或BRM的水平和/或活性的方法，所述方法包括使所述细胞与有效量的如权利要求1至175中任一项所述的化合物或如权利要求176所述的药物组合物接触。
197.如权利要求196所述的方法，其中所述细胞在受试者体内。
198.如权利要求192至197中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌是转移性的。
199.如权利要求192至198中任一项所述的方法，其中所述方法还包括向所述受试者施用抗癌疗法或使所述细胞与抗癌疗法接触。
200.如权利要求199所述的方法，其中所述抗癌疗法是化学治疗剂或细胞毒性剂、免疫疗法、外科手术、放射疗法、热疗法或光凝固法。
201.如权利要求200所述的方法，其中所述抗癌疗法是外科手术。
202.如权利要求200所述的方法，其中所述抗癌疗法是化学治疗剂或细胞毒性剂。
203.如权利要求202所述的方法，其中所述化学治疗剂或细胞毒性剂是抗代谢药、抗有丝分裂剂、抗肿瘤抗生素、天冬酰胺特异性酶、双膦酸盐、抗肿瘤药、烷化剂、DNA修复酶抑制剂、组蛋白脱乙酰酶抑制剂、皮质类固醇、去甲基化剂、免疫调节剂、janus相关激酶抑制剂、磷酸肌醇3-激酶抑制剂、蛋白酶体抑制剂或酪氨酸激酶抑制剂。
204.如权利要求202或203所述的方法，其中所述一种或多种化学治疗剂或细胞毒性剂是达卡巴嗪、替莫唑胺、顺铂、曲奥舒凡、福莫司汀、IMCgp100、CTLA-4抑制剂、PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂、有丝分裂原活化蛋白激酶抑制剂和/或蛋白激酶C抑制剂。
205.如权利要求200至204中任一项所述的方法，其中所述抗癌疗法和如权利要求1至175中任一项所述的化合物或如权利要求176所述的药物组合物在彼此之间的28天内并且各自以一起有效治疗所述受试者的量施用。
206.如权利要求192至205中任一项所述的方法，其中所述受试者或癌症具有和/或已被鉴定为具有BRG1功能丧失性突变。
207.如权利要求192至205中任一项所述的方法，其中所述受试者或癌症具有和/或已被鉴定为具有BRM功能丧失性突变。
208.如权利要求192至207中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌对一种或多种化学治疗剂或细胞毒性剂的施用没有响应或在一种或多种化学治疗剂或细胞毒性剂的施用后进展。
209.如权利要求192至208中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌对一种或多种化学治疗剂具有抗性或被预测为对一种或多种化学治疗剂具有抗性。
210.如权利要求208或209所述的方法，其中所述一种或多种化学治疗剂或细胞毒性剂是达卡巴嗪、替莫唑胺、顺铂、曲奥舒凡、福莫司汀、IMCgp100、CTLA-4抑制剂、PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂、有丝分裂原活化蛋白激酶抑制剂和/或蛋白激酶C抑制剂。
211.如权利要求192至210中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌是黑素瘤。
212.如权利要求211所述的方法，其中所述黑素瘤是葡萄膜黑素瘤。
213.如权利要求211所述的方法，其中所述黑素瘤是粘膜黑素瘤。
214.如权利要求211所述的方法，其中所述黑素瘤是皮肤黑素瘤。
215.如权利要求192至210中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌是血液学癌。
216.如权利要求215所述的方法，其中所述血液学癌是多发性骨髓瘤、大细胞淋巴瘤、急性T细胞白血病、急性骨髓性白血病、骨髓异常增生综合征、免疫球蛋白Aλ骨髓瘤、弥漫性混合型组织细胞和淋巴细胞淋巴瘤、B细胞淋巴瘤、急性淋巴母细胞白血病、弥漫性大细胞淋巴瘤或非霍奇金淋巴瘤。
217.如权利要求192至210中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌是前列腺癌。
218.如权利要求192至210中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌是乳腺癌。
219.如权利要求218所述的方法，其中所述乳腺癌是ER阳性乳腺癌、ER阴性乳腺癌、三阳性乳腺癌或三阴性乳腺癌。
220.如权利要求192至210中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌是骨癌。
221.如权利要求220所述的方法，其中所述骨癌是尤文氏肉瘤。
222.如权利要求192至210中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌、骨癌、肾细胞癌或血液学癌是肾细胞癌。
223.如权利要求222所述的方法，其中所述肾细胞癌是小眼转录因子(MITF)家族易位性肾细胞癌。
224.一种治疗有需要的受试者的病毒感染的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1至175中任一项所述的化合物或如权利要求176所述的药物组合物。
225.如权利要求224所述的方法，其中所述病毒感染是被逆转录病毒科、嗜肝DNA病毒科、黄病毒科、腺病毒科、疱疹病毒科、乳头瘤病毒科、细小病毒科、多瘤病毒科、副粘病毒科或披膜病毒科的病毒感染。
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