CN103609870B - 以ddgs为主要蛋白质原料的大猪全发酵饲料制作方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种以DDGS为主要蛋白质原料的大猪全发酵饲料制作方法，它是将以DDGS为主要蛋白质原料大猪用配合饲料与液态菌种混合，混匀后装入密封容器，23-27℃培养，发酵47-50小时，待发酵过程结束后，即可将发酵物料直接进行大猪饲喂；其中液态菌种：大猪用配合饲料的重量百分比为：液态菌种50-60%，大猪用配合饲料40-50%。采用本发明的方法生产的饲料经过微生物发酵各常规营养成分和氨基酸都得到了不同程度的改善。发酵后饲料中的粗蛋白含量从16.68%提高到了17.13%，增加了2.70%。而粗纤维含量从发酵前的4.7%降低到3.3%，减少了29.8%。本发明的制作方法可以提高饲料的有效利用率，提高饲养动物的有效产出率。
Description
技术领域
本发明涉及一种微生物固态发酵技术，特别是涉及以DDGS为主要蛋白质原料的大猪全发酵饲料的制作方法。
背景技术
DDGS是利用谷物等原料在生产酒精过程中经过糖化、发酵、蒸馏除去酒精后，将酒糟醪液经固液分离后的滤渣与蒸发浓缩后的废水浓缩液混合干燥而制成的，具有较高的蛋白含量和营养价值，其中的未知生长因子、糖化物和酵母能提高饲料的消化吸收利用率，增强肠道有益菌繁殖，有助于动物充分利用饲料中的养分，且产量大、价格相对低廉，近年来逐渐成为一种蛋白饲料原料。然而DDGS潜在的霉菌毒素污染容易对动物健康和生产性能产生影响，且DDGS中高含量的纤维和非淀粉多糖会影响磷等矿物质离子的吸收、降低营养物质的利用率，以及其较差的适口性等限制了DDGS在饲料中的利用。
大猪的各器官、系统的功能都逐渐完善，尤其是消化系统有了很大发展，对各种饲料的消化吸收能力都有很大改善。同时由于猪是单胃杂食动物，对饲料粗纤维的利用率很有限。研究表明，随DDGS在育肥猪饲料中添加量的提高，能量摄入量减少，其增重速度和饲料利用率降低。利用微生物对DDGS进行发酵处理，通过微生物的代谢作用可以降解酒糟中的粗纤维和非淀粉多糖等，同时发酵过程大量繁殖的有益微生物，以及产生的大量的乳酸等有机酸和较低的pH值环境能起到对DDGS中的霉菌的抑制作用，发酵产生的乳酸、乙酸等有机酸使饲料具有酸香甜味，能很好改善DDGS适口性，能进一步提高DDGS在饲料中的添加量。目前国内未见以DDGS为主要蛋白质原料的大猪全发酵饲料的研究报道。
发明内容
为实现上述目的，本发明提供了以DDGS为主要蛋白质原料的大猪全发酵饲料的制作方法。利用本发明的方法生产的饲料可以提高饲料的有效利用率，提高饲养动物的有效产出率。本发明的技术方案概述如下：
一种以DDGS为主要蛋白质原料的大猪全发酵饲料制作方法，其特征在于按如下的步骤进行：
（1）冻干菌粉末的活化：量取0.9%的生理盐水10ml于试管内，经121℃灭菌20分钟冷却至34-38℃，将安珀瓶内的冻干菌粉在无菌状态下全部倒入0.9%的生理盐水中，震荡使其溶解，在34-38℃恒温箱中静止活化20-40分钟，活化后备用；所述的冻干菌粉末指的是：乳酸菌菌种（Bacillus Coagulan）购于中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌种保藏号（ACCC 10229）；
（2）液态菌种扩大培养：将步骤（1）活化后的菌种按培养基体积的10%接种于液体发酵培养基中，培养温度34-38℃，转速160-180 r/min，培养时间16-20h,得到液态菌种；其中所述的液体发酵培养基配方如下：酵母粉10 g/L，蛋白胨15 g/L，葡萄糖6 g/L，MgSO4·7H2O 0.2 g/L，MnSO4 0.05 g/L，K2HPO4 0.2 g/L；初始pH值7.25；
（3）以DDGS为主要蛋白质原料的大猪用配合饲料组成，以重量百分比计，其组成如下：玉米51.3%，小麦麸3.05%，玉米胚芽粕9.3%，DDGS 22.9%，棉籽粕2.2%，菜籽粕1.2%，米糠8.5%，稻壳粉0.1%，石粉1.15%，食盐0.3%；
（4）以DDGS为主要蛋白质原料的大猪全发酵饲料制作方法，其特征在于：将步骤（2）得到的液态菌种和步骤（3）的大猪用配合饲料混合，混匀后装入密封容器，23-27℃培养，发酵47-50小时，待发酵过程结束后，即可将发酵物料直接进行大猪饲喂；其中液态菌种：大猪用配合饲料的重量百分比为：液态菌种50-60%，大猪用配合饲料40-50%。
本发明所述的乳酸菌菌种（Bacillus Coagulan）购于中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌种保藏号（ACCC 10229）其活菌数为108-109cfu/g。
本发明更加详细的制作方法如下：
（1）冻干菌粉末的活化：
量取0.9%的生理盐水10ml于试管内，经121℃灭菌20分钟冷却至34-38℃，将安珀瓶内的冻干菌粉在无菌状态下全部倒入0.9%的生理盐水中，震荡使其溶解，在34-38℃恒温箱中静止活化20-40分钟，备用；所述的乳酸菌菌种（Bacillus Coagulan）购于中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌种保藏号（ACCC 10229）；其活菌数为108-109cfu/g。
（2）液态菌种扩大培养：
将步骤（1）活化的菌种按培养基体积的10%接种于液体发酵培养基中，培养温度34-38℃，转速160-180r/min，培养时间16-20h；所述的液体发酵培养基配方：酵母粉10 g/L，蛋白胨15 g/L，葡萄糖6 g/L，MgSO4·7H2O 0.2 g/L，MnSO4 0.05 g/L，K2HPO40.2 g/L；初始pH值7.25；
（3）一种以DDGS为主要蛋白质原料的大猪用配合饲料，其特征在于：以重量百分比计，包括以下组分：玉米51.3%，小麦麸3.05%，玉米胚芽粕9.3%，DDGS22.9%，棉籽粕2.2%，菜籽粕1.2%，米糠8.5%，稻壳粉0.1%，石粉1.15%，食盐0.3%；
（4）以DDGS为主要蛋白质原料的大猪全发酵饲料制作方法，其特征在于：将步骤（2）中液态菌种和步骤（3）中大猪用配合饲料（不灭菌），按重量份数计，液态菌种50-60%，大猪用配合饲料40-50%，混匀后装入密封容器，培养温度23-27℃，发酵时间47-50小时左右。待发酵过程结束后，即可将发酵物料直接进行大猪饲喂。
本发明进一步公开了以DDGS为主要蛋白质原料制备的大猪全发酵饲料的应用效果：
（1.1）试验动物选择：
选择日龄相近，初始体重在65kg左右，体重无显著差异的生长育肥猪48头，公母比为1:1，随机平分为对照组和处理组，每组为4个重复，每个重复6头猪。
（1.2）试验方法：
对照组饲喂基础配合饲料；发酵饲料组饲喂全发酵的基础配合饲料；自由采食。试验猪饲养在同一猪舍的不同栏内，各组的饲养管理和环境条件一致，按常规管理方法做好驱蚊、免疫、消毒工作、保持圈舍卫生。试验猪自由采食和饮水。预饲期5天，正式试验期28天。
（1.3）试验结果（33天）
发酵饲料降低育肥阶段的料重比2%（P<0.01），提高了饲料转化率，同时使肉品质得到改善，脂肪含量降低了28%。
本发明公开的以DDGS为主要蛋白质原料制备的大猪全发酵饲料所具有的积极效果在于：饲料发酵时间短（2天），且发酵所需设备简单，降低了饲料制作成本，具体见如下的试验情况：
表1发酵前后饲料中常规营养成分、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的含量（%）
表2 发酵前后饲料中氨基酸的含量（%）
| 测定项目 | 发酵前 | 发酵后 |
| 天冬氨酸 | 1.249 | 1.384 |
| 苏氨酸 | 0.682 | 0.746 |
| 丝氨酸 | 0.859 | 0.930 |
| 谷氨酸 | 3.296 | 3.597 |
| 甘氨酸 | 0.734 | 1.191 |
| 丙氨酸 | 1.220 | 1.471 |
| 半胱氨酸 | 0.335 | 0.310 |
| 缬氨酸 | 0.920 | 1.004 |
| 蛋氨酸 | 0.203 | 0.269 |
| 异亮氨酸 | 0.587 | 0.659 |
| 亮氨酸 | 2.074 | 2.235 |
| 酪氨酸 | 0.408 | 0.423 |
| 苯丙氨酸 | 0.813 | 0.880 |
| 赖氨酸 | 0.629 | 0.765 |
| 组氨酸 | 0.483 | 0.501 |
| 精氨酸 | 0.817 | 0.940 |
| 脯氨酸 | 1.306 | 1.560 |
| 合计 | 16.615 | 18.865 |
经过微生物发酵各常规营养成分和氨基酸都得到了不同程度的改善。发酵后饲料中的粗蛋白含量从16.68%提高到了17.13%，增加了2.70%。而粗纤维含量从发酵前的4.7%降低到3.3%，减少了29.8%。而酸性洗涤纤维和中性洗涤纤维，分别从32.81%、11.72%降低到了23.90%、10.97%，且中性洗涤纤维降低幅度较大，达到了27.16%，酸性洗涤纤维仅降低了6.40%。氨基酸总含量从发酵前16.615%提高到了18.865%，增加了13.54%，除半胱氨酸含量下降外，其余氨基酸的含量普遍增加，增加幅度介于3.25%～62.26%之间，甘氨酸增加幅度最大，发酵后增加了62.26%。猪的第一限制性氨基酸赖氨酸含量从0.629%增加到了0.765%，提高了21.62%；第二限制性氨基酸蛋氨酸从0.203%增加到0.269%，增加了3.25%；第三限制性氨基酸苏氨酸从0.682%增加到0.746%增加了9.38%。
3. 表 3 发酵前后饲料中理化指标的含量
表3所示，发酵前后饲料中干物质消化率变化不显著（P>0.05）。酶水解物能值从发酵前13.06MJ/ kg提高到13.70 MJ/ kg而总糖和还原糖含量分别从9.08%、1.47%降低到了4.65%、0.77%，下降幅度分别达到了48.79%和47.62%。发酵后饲料中消化能提高了4.91%。为发酵饲料中总酸含量为0.8%，而经过发酵后饲料中总酸含量提高到了1.5%，且饲料pH值从6.03降低到了4.54。
4. 表4 发酵前后饲料中微生物指标变化 cfu/g
从表4可以看出，同发酵前饲料相比发酵后饲料中的有益菌乳酸菌从7.35 x106 cfu/g增加到了7.33 x108 cfu/g。大肠杆菌总数下降了2个数量级。发酵前饲料中检测出霉菌总数为3.40 x102 cfu/g，发酵后饲料中霉菌总数为0。发酵前后饲料中均未检测出沙门氏菌。
具体实施方式：
下面结合实施例说明本发明，这里所述实施例的方案，不限制本发明，本领域的专业人员按照本发明的精神可以对其进行改进和变化，所述的这些改进和变化都应视为在本发明的范围内，本发明的范围和实质由权利要求来限定。本发明所用到的各种试剂（如酵母粉和蛋白胨）原料有市售，其它的原料来源: 玉米、小麦麸、玉米胚芽粕、DDGS，棉籽粕、菜籽粕、米糠、稻壳粉和石粉等均购买于天津市泰康饲料厂。
实施例1
（1）冻干菌粉末的活化：量取0.9%的生理盐水10ml于试管内，经121℃灭菌20分钟冷却至34℃，将安珀瓶内的冻干菌粉在无菌状态下全部倒入0.9%的生理盐水中，震荡使其溶解，在34℃恒温箱中静止活化20分钟，活化后备用。所述的冻干菌粉末指的是：乳酸菌菌种（Bacillus Coagulan）购于中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌种保藏号（ACCC 10229）。其活菌数为109cfu/g。
（2）液态菌种扩大培养：将步骤（1）活化后的菌种按培养基体积的10%接种于液体发酵培养基中，培养温度34℃，转速160r/min，培养时间16h。其中所述的液体发酵培养基配方如下：酵母粉10 g/L，蛋白胨15 g/L，葡萄糖6 g/L，MgSO4·7H2O 0.2 g/L，MnSO4 0.05 g/L，K2HPO40.2 g/L；初始pH值7.25；
（3）以DDGS为主要蛋白质原料的大猪用配合饲料，以重量百分比计，包括以下组分：玉米51.3%，小麦麸3.05%，玉米胚芽粕9.3%，DDGS22.9%，棉籽粕2.2%，菜籽粕1.2%，米糠8.5%，稻壳粉0.1%，石粉1.15%，食盐0.3%；
（4）以DDGS为主要蛋白质原料的大猪全发酵饲料制作方法，其特征在于：将步骤（2）中液态菌种和步骤（3）中不灭菌大猪用配合饲料，按重量份数计，液态菌种50%，大猪用配合饲料50%，混匀后装入密封容器，培养温度23℃，发酵时间47小时；
（5）待发酵过程结束后，即可将发酵物料直接进行大猪饲喂。
实施例2
（1）乳酸菌菌种（Bacillus Coagulan）购于中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌种保藏号（ACCC 10229）。其活菌数为108cfu/g。
冻干菌粉末的活化
量取0.9%的生理盐水10ml于试管内，经121℃灭菌20分钟冷却至36℃，将安珀瓶内的冻干菌粉在无菌状态下全部倒入0.9%的生理盐水中，震荡使其溶解，在36℃恒温箱中静止活化30分钟，备用。
液态菌种扩大培养
液体发酵培养基配方如下：酵母粉10 g/L，蛋白胨15 g/L，葡萄糖6 g/L，MgSO4·7H2O 0.2 g/L，MnSO40.05 g/L，K2HPO40.2 g/L；初始pH值7.25
将活化的菌种按培养基体积的10%接种于液体发酵培养基中，培养温度36℃，转速170r/min，培养时间18h。
（2）一种以DDGS为主要蛋白质原料的大猪用配合饲料，其特征在于：以重量百分比计，包括以下组分：玉米51.3%，小麦麸3.05%，玉米胚芽粕9.3%，DDGS22.9%，棉籽粕2.2%，菜籽粕1.2%，米糠8.5%，稻壳粉0.1%，石粉1.15%，食盐0.3%；
（3）以DDGS为主要蛋白质原料的大猪全发酵饲料制作方法，其特征在于：将步骤（1）中液态菌种和步骤（2）中大猪用配合饲料（不灭菌），按重量份数计，液态菌种55%，大猪用配合饲料45%，混匀后装入密封容器，培养温度25℃，发酵时间49小时。
（4）待发酵过程结束后，即可将发酵物料直接进行大猪饲喂。
实施例3
（1）乳酸菌菌种（Bacillus Coagulan）购于中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌种保藏号（ACCC 10229）。其活菌数为109cfu/g。
冻干菌粉末的活化
量取0.9%的生理盐水10ml于试管内，经121℃灭菌20分钟冷却至38℃，将安珀瓶内的冻干菌粉在无菌状态下全部倒入0.9%的生理盐水中，震荡使其溶解，在38℃恒温箱中静止活化40分钟，备用。
液态菌种扩大培养
液体发酵培养基配方如下：酵母粉10 g/L，蛋白胨15 g/L，葡萄糖6 g/L，MgSO4·7H2O 0.2 g/L，MnSO40.05 g/L，K2HPO40.2 g/L；初始pH值7.25
将活化的菌种按培养基体积的10%接种于液体发酵培养基中，培养温度38℃，转速180r/min，培养时间20h。
（2）一种以DDGS为主要蛋白质原料的大猪用配合饲料，其特征在于：以重量百分比计，包括以下组分：玉米51.3%，小麦麸3.05%，玉米胚芽粕9.3%，DDGS22.9%，棉籽粕2.2%，菜籽粕1.2%，米糠8.5%，稻壳粉0.1%，石粉1.15%，食盐0.3%；
（3）以DDGS为主要蛋白质原料的大猪全发酵饲料制作方法，其特征在于：将步骤（1）中液态菌种和步骤（2）中大猪用配合饲料（不灭菌），按重量份数计，液态菌种60%，大猪用配合饲料40%，混匀后装入密封容器，培养温度27℃，发酵时间50小时左右。
（4）待发酵过程结束后，即可将发酵物料直接进行大猪饲喂。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。
Claims (1)
1.一种以DDGS为主要蛋白质原料的大猪全发酵饲料制作方法，其特征在于按如下的步骤进行：
（1）冻干菌粉末的活化：量取0.9%的生理盐水10ml于试管内，经121℃灭菌20分钟冷却至34-38℃，将安瓿瓶内的冻干菌粉在无菌状态下全部倒入0.9%的生理盐水中，震荡使其溶解，在34-38℃恒温箱中静止活化20-40分钟，活化后备用；所述的冻干菌粉末指的是：乳酸菌菌种Bacillus Coagulan购于中国农业微生物菌种保藏管理中心，菌种保藏号ACCC 10229；
（2）液态菌种扩大培养：将步骤（1）活化后的菌种按培养基体积的10%接种于液体发酵培养基中，培养温度34-38℃，转速160-180 r/min，培养时间16-20h,得到液态菌种；其中所述的液体发酵培养基配方如下：酵母粉10 g/L，蛋白胨15 g/L，葡萄糖6 g/L，MgSO4·7H2O 0.2 g/L，MnSO4 0.05 g/L，K2HPO4 0.2 g/L；初始pH值7.25；
（3）以DDGS为主要蛋白质原料的大猪用配合饲料组成，以重量百分比计，其组成如下：玉米51.3%，小麦麸3.05%，玉米胚芽粕9.3%，DDGS 22.9%，棉籽粕2.2%，菜籽粕1.2%，米糠8.5%，稻壳粉0.1%，石粉1.15%，食盐0.3%；
（4）以DDGS为主要蛋白质原料的大猪全发酵饲料制做方法，将步骤（2）得到的液态菌种和步骤（3）的大猪用配合饲料混合，混匀后装入密封容器，23-27℃培养，发酵47-50小时，待发酵过程结束后，将发酵物料直接进行大猪饲喂；其中液态菌种：大猪用配合饲料的重量百分比为：液态菌种50-60%，大猪用配合饲料40-50%。
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