CN105941841A - 一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备方法。将干净水、淀粉物质、果蔬、含糖产品、糖蜜糖浆、纤维物质、饼粕豆类产品、食品加工副产品和营养辅料按比例混合，高温灭菌冷却，接入产柠檬酸菌种固体发酵若干小时后，制得柠檬酸固态发酵培养基湿基。将干净水、饲料原料、复合菌种液和复合酶混合后酶解发酵若干小时后，制得酵解饲料湿基。将柠檬酸固态发酵培养基湿基、酵解饲料湿基与饲用无机酸、有机酸盐、糖类、油脂、中草药和维生素中的一种或以上混合后烘干制得固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料。本发明制备的饲料含柠檬酸、蛋白质、粗纤维等养分，具有抗腹泻、适口性好、易消化等特点。

Description

一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备方法

技术领域

本发明属于饲料、酶制剂和微生物技术领域，具体涉及一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备方法。

背景技术

近几年来，食品安全和环境污染倍受各国各级政府广泛关注，事关百姓健康和生命安全。畜产品安全要求饲料无药残，环境保护要求饲料低污染。过去我们谈饲料是“有效、安全”，现在国家农业部一再强调'安全、有效、低污染”。众所周知，抗生素自问世以来，其用于畜禽防范疾病和刺激生长确实收到了良好的效果。但随着时间的推移，抗生素的缺陷暴露无遗：一是抗生素容易残留于肉、蛋和奶等畜禽产品中，造成人体肝、肾功能负担加重或发生癌变，危害人类健康；二是使畜产品风味下降；三是造成人类自身抗药性增加，并污染了土壤和水源等自然环境。因此，一些国家已明令禁止使用。1974年，欧共体禁止在饲料中使用青霉素、四环素，1998年12月禁止在饲料中使用螺旋霉素、杆菌肽锌、维吉尼亚霉素和肽乐霉素，1999年10月禁止在饲料中使用氯氟苄腺嘌呤(arprinocide)和异丙硝达唑(dinitolmide)。因此，使用柠檬酸、乳酸、延胡索酸、益生菌、低聚糖和活性小肽来替代或减少使用抗生素，生产绿色畜产品备受各国政府关注。

中国是人口大国，也是养殖业大国。2015年，畜牧业产值达3.2万亿元，肉类、禽蛋、牛奶和水产品产量分别达到8454万吨、2800万吨、3800万吨和5500万吨。伴随着养殖业的发展，饲料工业发展速度惊人。根据农业部统计数 据，2015年全国商业饲料产量达到2.18亿吨。其中，全价饲料1.79亿吨，浓缩饲料2151万吨，预混料640万吨，包括猪料产量8974万吨，禽料产量9000万吨，水产饲料5300万吨，牛羊饲料850万吨，兔貉宠物等饲料350万吨。

众所周知，饲料产品的开发、研制的难点在于乳仔猪饲料。如何提高幼龄畜禽饲料适口性、消化率和降低或减少抗营养因子成为近年来动物营养学家积极探讨的课题。就乳仔猪而言，其代谢机能旺盛，相对生长迅速，对日粮营养物质的要求高，但其消化道的功能不健全，消化道的重量和容积较小且发肓不完全，胃酸分泌不足，胃肠道微生物区系易变，消化酶系发肓不健全，消化酶分泌不足。乳仔猪蛋白质消化不良，蛋白质易在后肠产生一些腐败产物，尸胺、腐胺、组胺等，刺激肠粘膜，损害小肠绒毛膜，引起肠内容物渗透压升高，肠道脱水导致腹泻。对植物蛋白过敏，8周龄以前的仔猪，对植物蛋白易过敏引起肠粘膜受损，影响对养分的吸收，细菌容易入侵导致腹泻。因此，通过发酵、酶解等生物技术，开发营养高、易消化、适口性好、富含柠檬酸、乳酸、延胡索酸和益生菌、低聚糖、活性小肽的乳仔猪饲料是一件迫在眉睫和具有重要意义的大事。

饲用酸化剂作为一种可降低饲料在消化道中的pH值，为动物提供最适消化道环境的新型添加剂，已在国内外得到广泛应用。酸化剂被广泛应用于家禽、仔猪、肉牛、奶牛、羊等动物的饲料中。饲用酸化剂可提高日粮适口性，增加仔猪采食量，早期断奶仔猪使用延胡索酸使增重率提高了5.1％，料肉比降低6.5％。常用的酸化剂有柠檬酸、延胡索酸、乳酸、异位酸等有机酸和甲酸、丙酸、盐酸、磷酸等无机酸。不同的酸化剂各有其特点，但使用最广泛、效果较好的是柠檬酸、延胡索酸和复合酸。延胡索酸具有广谱杀菌和抑菌活性，如在饲料中加入0.2％～0.4％浓度的延胡索酸，可杀死葡萄球菌和链球菌；0.4％可 杀死大肠杆菌；2％以上浓度对产毒真菌具有杀灭和抑制作用。

目前，国内饲用酸化剂大多是发酵液经中和、酸解、脱色、离交和结晶等精制处理后的食品级有机酸的复配产品，其有机酸单一，酸味苦涩。食品级有机酸生产均要经过中和、酸解、脱色、离交或结晶生产工艺。中和与酸解是把有机酸分离纯化出来，二者均会产生大量的废水废液污染相当严重，耗能耗水，成本高。脱色是脱去维生素和色素等物质或营养，离交是脱去矿物元素，如钙、磷、镁、钠、钾、氯、硫、铁、铜、锌、锰、碘、钴、硒等。脱色和离交往往都会产生大量的废水、废液，污染重，成本高，并且会造成酸味苦涩。因此，饲用不中和、不酸解、不脱色、不离交的原味品将是未来发展的方向。然而，目前尚未发现不中和、不酸解、不脱色、不离交的有机酸发酵液直接复配的饲料产品。由于本专利有机酸的生产采取固态发酵吸附液体发酵的生产技术，发酵后无中和、酸解、脱色、离交和结晶等精制生产工艺。因此，本专利与食品级有机酸的生产工艺有着本质的区别。

固态发酵是指没有或几乎没有自由水存在下，在有一定湿度的水不溶性固态基质中，用一种或多种微生物的一个生物反应过程。广义上讲，固态发酵是指一类使用不溶性固体基质来培养微生物的工艺过程，既包括将固态悬浮在液体中的深层发酵，也包括在没有(或几乎没有)游离水的湿固体材料上培养微生物的工艺过程。多数情况下是指在没有或几乎没有自由水存在下，在有一定湿度的水不溶性固态基质中，用一种或多种微生物发酵的一个生物反应过程。狭义上讲，固态发酵是指利用自然底物做碳源及能源，或利用惰性底物做固体支持物，其体系无水或接近于无水的任何发酵过程。

目前，柠檬酸和乳酸等有机酸生产有固态发酵、液态浅盘发酵和深层发酵3种方法。柠檬酸固态发酵是以薯干粉、淀粉粕以及含淀粉的农副产品为原料， 配好培养基后，在常压下蒸煮，冷却至接种温度，高温灭菌冷却，接入种曲，装入曲盘，在一定温度和湿度条件下发酵。采用固态发酵生产柠檬酸，设备简单，操作容易。液态浅盘发酵多以糖蜜为原料，其生产方法是将灭菌的培养液通过管道转入一个个发酵盘中，高温灭菌冷却，接入菌种，待菌体繁殖形成菌膜后添加糖液发酵产酸。发酵时要求在发酵室内通入无菌空气。柠檬酸深层发酵生产柠檬酸的主体设备是发酵罐。微生物在这个密闭容器内繁殖与发酵。现多采用通用发酵罐。它的主要部件包括罐体、搅拌器、冷却装置、空气分布装置、消泡器，轴封及其他附属装置。

与固态发酵相比，柠檬酸和乳酸有机酸的液体深层发酵也有很多优点：一是发酵周期短，发酵产物有机酸含量高，发酵效率高；二是能够规模化、工业化和自动化生产；三是发酵控制简单，不容易染菌。因此，柠檬酸液体发酵将是未来有机酸规模化、工业化的方向。

与液体发酵相比，柠檬酸和乳酸有机酸的固态发酵也有很多优点：一是固态发酵培养基含水量少，废水废渣少，环境污染少，容易处理，消耗低，功能设备简易；二是培养基原料多为恬然基质或废渣，广泛低廉；三是设备技术简易，后处理方便。因此，柠檬酸固态发酵在实践中仍然是一种有效的生产方法。

因此，如何将有机酸固态与液体发酵生产结合起来是一个迫在眉睫的新课题。如何将固体发酵培养基作为液体发酵菌种是一个崭新的课题，如何将液体发酵培养基作为固体发酵菌种也是一个崭新的课题。

与乳酸发酵不同，柠檬酸既可以固体发酵高效生产，也可以液体深层发酵生产。柠檬酸固体发酵和液体发酵生产产酸率都比较高。一般来说，柠檬酸发酵比较粗放，容易染菌。如何控制染菌是一个多年困扰发酵企业的技术难题。本专利研究发现柠檬酸固态多菌发酵和彼此为种的生产技术可以大幅度减少发 酵染菌的难题。

此前，本专利申请人刘萱仪和孟龙曾经申报专利《一种果酸饲料添加剂的制备方法》(专利申请号：CN201510424595.8)和本专利申请人《一种畜禽酸化酵解饲料的制备方法》(专利申请号：CN201510997145.8)详尽阐述了酸化酵解饲料的制备方法。但这两项专利的制备方法存在如下缺陷：

一、两项专利均是将柠檬酸液体发酵液吸附混合到复合菌种固态发酵培养基湿基上。如何将柠檬酸固态发酵培养基湿基混合到复合菌种固态发酵培养基湿基上尚无人研究或报道。同时，该两项专利中的发酵菌缺乏醋酸、丙酸和丁酸发酵菌种。

二、两项专利固态发酵时的菌种均是复合菌种。在这些复合菌种中，缺乏柠檬酸发酵菌种，不会产生柠檬酸等相应的有机酸。

三、两项专利培养基原料均为含淀粉类产品，难以利用纤维和废渣废液，原料价格昂贵。

四、两项专利最后混配工艺中均没有涉及到添加中草药、维生素技术。

综上，柠檬酸固态发酵和复合菌种固态发酵技术既可有效防止污染杂菌，充分利用纤维和废渣废液，具有发酵设备投资小，污染小，耗水耗电少，对发展节粮型畜牧业意义重大，又可高效利用含淀粉原料，提高发酵效率，单位容积酸含量高，大幅度提高柠檬酸含量。因此，利用固态多菌产酸发酵技术来开发生产饲用酸化剂是十分必要的。

发明内容

本发明旨在克服上述固态发酵时均没有产生相对应的有机酸、有机酸含量偏低和含有大量非营养性载体白炭黑等不足，提供一种富含柠檬酸、蛋白质、粗纤维、粗脂肪、维生素和矿物元素等营养成分，具有抗腹泻、适口性好、营 养高、易消化和抗营养因子含量低等特点的固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备方法，包括以下步骤：

①、柠檬酸固态发酵培养基湿基的制备：

将干净水和淀粉物质、含糖产品、糖类糖蜜糖浆中的一种或多种和果蔬、纤维物质、饼粕豆类产品、食品加工副产品和营养辅料中的一种或多混合，高温灭菌冷却，接入产柠檬酸菌种固态发酵后，制得柠檬酸固态发酵培养基湿基；

②、酵解饲料湿基的制备：

将干净水、饲料原料、复合菌种液和复合酶混合后，酶解发酵后，制得酵解饲料湿基；

③、固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备：

将柠檬酸固态发酵培养基湿基、酵解饲料湿基与市售饲用无机酸、有机酸盐、糖类糖蜜糖浆、液体油脂、中草药和维生素中的一种或多种混合后，直接生产固态多菌柠檬酸固态发酵培养基湿基，或混合后烘干或分别烘干后混合制成固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料干基。

进一步地，所述淀粉物质为国家农业部饲料原料目录中含淀粉产品的一种或多种，为玉米、稻谷、碎米、小麦、面粉、燕麦、大麦、高粱、红薯、木薯、甘薯、土豆中一种或多种，或者上述饲淀粉物质的膨化产品中的一种或多种；

所述饲料原料为国家农业部饲料原料目录中饲料原料的一种或多种，为豆粕、棉粕、菜籽粕、花生粕、鱼粉、血粉、血浆蛋白质、血球蛋白、奶粉、乳糖、乳清粉、小麦谷朊粉、玉米蛋白粉、大米蛋白粉、DDGS、大豆、豌豆、红豆、玉米、稻谷、碎米、小麦、麸皮、米糠、面粉、燕麦、大麦、红薯、大豆分离蛋白、大豆浓缩蛋白、牧草粉、中草药、水果蔬菜、糖类糖蜜糖浆和食品 加工业副产品，或者上述饲料原料的的膨化产品中的一种或多种；

所述果蔬为国家农业部饲料原料目录中含水果、果渣、蔬菜产品的一种或多种，为苹果、葡萄、香蕉、苹果渣、葡萄渣、香蕉渣、萝卜、西红柿中一种或多种；

所述含糖产品为国家农业部饲料原料目录中含糖产品的一种或多种，为甘蔗、甜菜中一种或多种；

所述糖类糖类糖蜜糖浆为国家农业部饲料原料目录中糖类糖蜜糖浆的一种或多种，为蔗糖、葡萄糖、果糖、葡萄糖浆、麦芽糊精浆/粉、果葡糖浆/粉、麦芽糖浆/粉、低聚糖浆/粉、蔗糖糖蜜、甜菜糖蜜、大豆糖蜜中的一种或多种；

所述纤维物质为国家农业部饲料原料目录中纤维物质的一种或多种，为麸皮、米糠、牧草、青饲料、中草药、农作物秸秆、树叶竹叶中一种或多种；

所述饼粕豆类产品为国家农业部饲料原料目录中饼粕豆类产品的一种或多种，为豆粕、棉粕、菜籽粕、花生粕、芝麻粕、亚麻籽粕、葵花籽粕、大豆、豌豆、红豆，或者上述饼粕豆类产品的膨化产品中的一种或多种；

所述食品加工副产品为国家农业部饲料原料目录中食品加工副产品的一种或多种，为玉米蛋白粉、小麦谷朊粉、大米蛋白粉、DDGS、大豆分离蛋白、大豆浓缩蛋白、大豆皮、玉米皮、糖渣、醋渣、酸渣、酒糟、奶粉、乳糖、乳清粉，或者上述食品加工副产品的膨化产品中的一种或多种；

所述营养辅料为石粉、非蛋白含氮物、维生素、微量元素；

所述复合菌种液为国家农业部饲料原料目录中微生物产品的一种或多种，为乳酸菌种液、酵母菌种液、枯草芽孢杆菌种液、地衣芽孢杆菌种液、双歧杆菌种液、米曲霉种液、醋酸短杆菌种液、酪丁酸梭菌种液中的两者以上；

所述复合酶为国家农业部饲料原料目录中饲用酶制剂产品的一种或多种， 为蛋白酶、木聚糖酶、葡聚糖酶、甘露聚糖酶、果胶酶、液化酶、糖化酶、纤维素酶中的一种或多种；

所述市售饲用非发酵源有机酸为国家农业部饲料添加剂目录中非发酵性有机酸的一种或多种，主要为甲酸、苯甲酸、酒石酸、富马酸、山梨酸中的一种或多种；

所述市售饲用无机酸为国家农业部饲料添加剂目录中无机酸的一种或多种，为磷酸、盐酸、硫酸中的一种或多种；

所述有机酸盐为国家农业部饲料添加剂目录中有机酸盐的一种或多种，为甲酸钙、丙酸钠、丙酸钙、丁酸钠、苯甲酸钠、山梨酸钠、山梨酸钾、柠檬酸钾、柠檬酸钠、柠檬酸钙中的一种或多种；

所述液体油脂为国家农业部饲料原料目录中液体油脂的一种或多种，为大豆油及其乳化油、玉米油及其乳化油、棕榈油及其乳化油、米糠油及其乳化油、椰子油及其乳化油、鱼油和动物油及其乳化油、花生油及其乳化油、菜籽油及其乳化油、茶油及其乳化油和植物精油及其提取物中的一种或多种；

所述中草药为国家农业部中草药饲料原料和中草药兽药目录中中草药及其提取物中的一种或多种，为黄芪及其提取物、杜仲及其提取物、金银花及其提取物、山楂及其提取物、陈皮及其提取物、红花及其提取物中的一种或多种；

所述维生素为脂溶性维生素、维生素B和维生素C。

优选地，所述淀粉物质为玉米、稻谷、碎米、红薯、木薯、甘薯中的一种或多种；

所述饲料原料为国家农业部饲料原料目录中饲料原料的一种或多种，为豆粕、玉米蛋白粉、大米蛋白粉、DDGS、麸皮、米糠、食品加工业副产品，或者上述饲料原料的的膨化产品中的一种或多种；

所述复合菌种液为乳酸菌种液、酵母菌种液、枯草芽孢杆菌种液的及两种以上；

所述复合酶为木聚糖酶、葡聚糖酶、甘露聚糖酶、果胶酶中的一种或多种；

所述果蔬为苹果渣、葡萄渣、胡萝卜、西红柿中的一种或多种；

所述含糖产品为甘蔗；

所述糖类糖蜜糖浆为蔗糖、葡萄糖粉/浆、麦芽糊精浆/粉、蔗糖糖蜜、甜菜糖蜜、大豆糖蜜中的一种或多种；

所述纤维物质为麸皮、米糠、牧草粉、作物秸秆中的一种或多种；

所述饼粕豆类产品为豆粕、棉粕、菜籽粕、花生粕、大豆中的一种或多种，或者上述饼粕豆类产品的膨化产品中的一种或多种；

所述食品加工副产品为玉米蛋白粉、大米蛋白粉、DDGS、糖渣、醋渣、酸渣、酒糟中的一种或多种，或者上述食品加工副产品的膨化产品中的一种或多种；

所述营养辅料为石粉、非蛋白含氮物中的一种或多种；

所述复合菌种液为乳酸菌种液、酵母菌种液、枯草芽孢杆菌种液的中的两种及两种以上；

所述市售饲用非发酵源有机酸为甲酸、苯甲酸中的一种或多种；

所述市售饲用无机酸为磷酸；

所述有机酸盐为甲酸钙、丁酸钠、苯甲酸钠中的一种或多种；

所述液体油脂为大豆油及其乳化油、玉米油及其乳化油、棕榈油及其乳化油、米糠油及其乳化油中的一种或多种；

所述中草药为黄芪及其提取物；

所述维生素为维生素C。

进一步地，步骤①中柠檬酸固态发酵培养基湿基的制备条件如下：

干净水、淀粉物质、饼粕豆类产品、糖蜜糖浆、纤维物质、食品加工副产品、果蔬、含糖产品、产柠檬酸菌种和营养辅料的重量比为100：1～1000：0～500：0～500：0～1000：0～800：0～100：0～100：0～500：0～30；

产柠檬酸菌种发酵温度：3～60℃；

起始发酵pH：自然；

发酵类型：有氧发酵；

培养基含水量：15-90％；

发酵时间：2-480小时。

优选地，步骤①中柠檬酸固态发酵培养基湿基的制备条件如下：

干净水、淀粉物质、饼粕豆类产品、糖蜜糖浆、纤维物质、食品加工副产品、果蔬、含糖产品、产柠檬酸菌种和营养辅料的重量比为100：100～200：0～50：0～50：10～100：0～80：0～10：0～10：20～30：0.5～5；

产柠檬酸黑曲霉菌种发酵温度：24～28℃；

起始发酵pH：自然；

发酵类型：有氧发酵；

培养基含水量：40-60％；

发酵时间：96-132小时。

进一步地，步骤②中酵解饲料湿基的制备条件如下：

干净水、饲料原料、复合菌种液、复合酶的重量比为100：1～2400：1～200：0～50；

复合菌种发酵温度：3～60℃；

起始发酵pH：自然；

发酵类型：有氧发酵或厌氧发酵；

培养基含水量：20-80％；

发酵时间：8-360小时。

优选地，步骤②中酵解饲料湿基的制备条件如下：

干净水、饲料原料、复合菌种液、复合酶的重量比为100：150～380：20～30：0.1～1；

复合菌种发酵温度：25～30℃；

起始发酵pH：自然；

发酵类型：有氧发酵或厌氧发酵；

培养基含水量：20-60％；

发酵时间：42-60小时。

进一步地，步骤③中固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备条件如下：

柠檬酸固态发酵培养基湿基、酵解饲料湿基、市售饲用无机酸、有机酸盐、糖类糖蜜糖浆、液体油脂、中草药和维生素中的重量比为100：0～1000：0～800：0～500：0～500：0～500：0～200：0～200。

优选地，步骤③中固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备条件如下：

柠檬酸固态发酵培养基湿基、酵解饲料湿基、市售饲用无机酸、有机酸盐、糖类糖蜜糖浆、液体油脂、中草药和维生素中的重量比为100：0～50：0～40：0～30：0～30：0～30：0～5：0～5。

以上百分数均为质量百分数。

本发明的有益效果在于：本专利提供的固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料富含柠檬酸、蛋白质、粗纤维、粗脂肪、维生素和矿物元素等营养成分，具有抗腹泻、适口性好、营养高、易消化和抗营养因子含量低等特点。

具体实施方式

实施例1

一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备，包括以下步骤：

①、柠檬酸固态发酵培养基湿基的制备：

将80kg干净水、80kg稻谷、20kg蔗糖糖蜜、80kg麸皮和2kg石粉、1.8kg硝酸铵混合后，高温灭菌、冷却后制得固态发酵培养基，高温灭菌冷却，接入25kg柠檬酸菌种液，在22-26℃、发酵pH自然和持续补充20kg无菌水的条件下，开展有氧发酵120小时，制得302-305kg柠檬酸固态发酵培养基湿基；

②、酵解饲料湿基的制备：

将80kg干净水、85kg麸皮、20kg糖蜜和80kg玉米蛋白粉混合后，高温灭菌、冷却后制得固态发酵培养基，高温灭菌冷却，接入25kg复合菌种液和200g复合酶，在25-28℃、发酵pH自然的条件下，开展有氧发酵48-60小时，制得278-282kg酵解饲料湿基；

③、固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备：

将302-305kg柠檬酸固态发酵培养基湿基和278-282kg酵解饲料湿基混合后制得580-787kg固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料湿基，或烘干后混合制得或混合后烘干制得315-323kg异步柠檬酸酸化酵解饲料干基。

或将302-305kg柠檬酸固态发酵培养基湿基和278-282kg酵解饲料湿基、100kg苯甲酸、100kg乳酸混合后，制得780-787kg固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料湿基，或烘干后混合制得或混合后烘干制得515-523kg异步柠檬酸酸化酵解饲料干基。

实施例2

一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备，包括以下步骤：

①、柠檬酸固态发酵培养基湿基的制备：

将80kg干净水、120kg玉米、20kg糖蜜、40kg麸皮和2kg石粉、1.8kg硝酸铵混合后，高温灭菌、冷却后制得固态发酵培养基，高温灭菌冷却，接入25kg柠檬酸菌种液，在22-26℃、发酵pH自然和持续补充20kg无菌水的条件下，开展有氧发酵132小时，制得302-305kg柠檬酸固态发酵培养基湿基；

②、酵解饲料湿基的制备：

将80kg干净水、50kg麸皮、35kg豆粕、20kg糖蜜和80kg玉米蛋白粉混合后，高温灭菌、冷却后制得固态发酵培养基，高温灭菌冷却，接入25kg复合菌种液和混入300g复合酶，在25-28℃、发酵pH自然的条件下，开展有氧发酵48-60小时，制得278-282kg酵解饲料湿基；

③、固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备：

将302-305kg柠檬酸固态发酵培养基湿基和278-282kg酵解饲料湿基混合后制得580-787kg固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料湿基，或烘干后混合制得或混合后烘干制得315-323kg异步柠檬酸酸化酵解饲料干基。

或将302-305kg柠檬酸固态发酵培养基湿基和278-282kg酵解饲料湿基、100kg苯甲酸、100kg乳酸混合后，制得780-787kg固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料湿基，或烘干后混合制得或混合后烘干制得515-523kg异步柠檬酸酸化酵解饲料干基。

实施例3

一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备，包括以下步骤：

①、柠檬酸固态发酵培养基湿基的制备：

将160kg干净水、200kg木薯、40kg碎米、40kg糖蜜、80kg麸皮和4kg石粉、3.5kg硝酸铵混合后，高温灭菌、冷却后制得固态发酵培养基，高温灭菌冷 却，接入60kg柠檬酸菌种液，在24-26℃、发酵pH自然和持续补充40kg无菌水的条件下，开展有氧发酵132小时，制得610-620kg柠檬酸固态发酵培养基湿基；

②、酵解饲料湿基的制备：

将80kg干净水、55kg米糠、60kg豆粕、10kg糖蜜和60kg玉米蛋白粉混合后，高温灭菌、冷却后制得固态发酵培养基，高温灭菌冷却，接入25kg复合菌种液和混入150g复合酶，在25-28℃、发酵pH自然的条件下，开展有氧发酵48-60小时，制得275-280kg酵解饲料湿基；

③、固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备：

将610-620kg柠檬酸固态发酵培养基湿基和275-280kg酵解饲料湿基混合后制得885-900kg固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料湿基，或烘干后混合制得或混合后烘干制得505-510kg异步柠檬酸酸化酵解饲料干基。

或将610-620kg柠檬酸固态发酵培养基湿基、275-280kg酵解饲料湿基、100kg苯甲酸、100kg乳酸、50kg黄芪粉混合后，制得1135-1150kg固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料湿基，或烘干后混合制得或混合后烘干制得755-760kg异步柠檬酸酸化酵解饲料干基。

实施例4

一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备，包括以下步骤：

①、柠檬酸固态发酵培养基湿基的制备：

将80kg干净水、60kg甘薯、60kg稻谷、20kg糖蜜、60kg麸皮和2kg石粉、1.5kg硝酸铵混合后，高温灭菌、冷却后制得固态发酵培养基，高温灭菌冷却，接入20kg柠檬酸菌种液，在24-26℃、发酵pH自然和持续补充20kg无菌水的条件下，开展有氧发酵132小时，制得305-310kg柠檬酸固态发酵培养基湿基；

②、酵解饲料湿基的制备：

将100kg干净水、200kg米糠、120kg豆粕、30kg糖蜜和120kg玉米蛋白粉混合后，高温灭菌、冷却后制得固态发酵培养基，高温灭菌冷却，接入50kg复合菌种液和混入600g复合酶，在25-28℃、发酵pH自然的条件下，开展有氧发酵48-60小时，制得605-610kg酵解饲料湿基；

③、固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备：

将305-310kg柠檬酸固态发酵培养基湿基和605-610kg酵解饲料湿基混合后制得910-920kg固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料湿基，或烘干后混合制得或混合后烘干制得610-620kg异步柠檬酸酸化酵解饲料干基。

或将305-310kg柠檬酸固态发酵培养基湿基和605-610kg酵解饲料湿基、100kg苯甲酸、100kg磷酸、10kg维生素C粉混合后，制得1120-1130kg固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料湿基，或烘干后混合制得或混合后烘干制得820-630kg异步柠檬酸酸化酵解饲料干基。

实施例5

一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备，包括以下步骤：

①、柠檬酸固态发酵培养基湿基的制备：

将240kg干净水、150kg玉米、150kg稻谷、50kg糖蜜、60kg麸皮和5kg石粉、4.5kg硝酸铵混合后，高温灭菌、冷却后制得固态发酵培养基，高温灭菌冷却，接入20kg柠檬酸菌种液，在24-26℃、发酵pH自然和持续补充60kg无菌水的条件下，开展有氧发酵120小时，制得705-710kg柠檬酸固态发酵培养基湿基；

②、酵解饲料湿基的制备：

将150kg干净水、100kg米糠、100kg麸皮、50kg豆粕、30kg糖蜜和120kg 玉米蛋白粉混合后，高温灭菌、冷却后制得固态发酵培养基，高温灭菌冷却，接入50kg复合菌种液和混入280g复合酶，在25-28℃、发酵pH自然的条件下，开展有氧发酵48-60小时，制得585-590kg酵解饲料湿基；

③、固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备：

将705-710kg柠檬酸固态发酵培养基湿基和585-590kg酵解饲料湿基混合后制得1290-1300kg固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料湿基，或烘干后混合制得或混合后烘干制得735-740kg异步柠檬酸酸化酵解饲料干基。

或将705-710kg柠檬酸固态发酵培养基湿基和585-590kg酵解饲料湿基、100kg苯甲酸、100kg磷酸、10kg维生素C粉混合后，制得915-920kg固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料湿基，或烘干后混合制得或混合后烘干制得945-950kg异步柠檬酸酸化酵解饲料干基。

一、实施例1制备的柠檬酸酸化酵解饲料中主要活性物质含量，见下表1。

表1、实施例1制备的柠檬酸酸化酵解饲料产品中营养物质含量

二、实施例1制备的固态酸化和酵解饲料的饲喂育肥猪效果。

日粮中添加6kg、12kg柠檬酸酸化酵解饲料后，育肥猪的日增重和采食量分别比对照组提高了17.8％、8.1％和18.0％，料肉比分别比对照组降低了8.3％、12.0％。结果表明：柠檬酸酸化酵解饲料能够明显提高育肥猪的生产性能。

表2.柠檬酸酸化酵解饲料对育肥猪生产性能和肉品质的影响

三、实施例1制备的固态酸化和酵解饲料的饲喂肉鸡效果。

日粮中添加6kg、12kg柠檬酸酸化酵解饲料后，肉鸡的日增重和采食量分别比对照组提高了14.8％和10.6％，料肉比和热应激死亡率分别比对照组降低3.7％和90.4％。结果表明：柠檬酸酸化酵解饲料能够明显提高肉鸡的生产性能。

表3.柠檬酸酸化酵解饲料对夏季肉鸡生产性能的影响

四、实施例1制备的固态酸化和酵解饲料的饲喂奥尼罗非鱼效果。

日粮中日粮中添加5kg、10kg、15kg柠檬酸酸化酵解饲料饲喂8周后，奥尼罗非鱼特定生长率分别比对照组提高23.44％、29.69％和33.58％(见表4)，摄食量分别比对照组提高6.74％、7.39％和11.77％，饵料系数分别比对照组降低13.04％、16.67％和15.94％。结果表明：柠檬酸酸化酵解饲料能够明显提高奥尼罗非鱼的生长性能。

表4.柠檬酸酸化酵解饲料对奥尼罗非鱼生长性能的影响

注：特定生长率＝(W_t-W_o)/t×100，其中W_t为末重，W_o为初重，t为试验天数。

以上内容仅仅是对本发明所作的举例和说明，所属本技术领域的技术人员对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，只要不偏离发明的构思或者超越本权利要求书所定义的范围，均应属于本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

①、柠檬酸固态发酵培养基湿基的制备：

将干净水和淀粉物质、含糖产品、糖类糖蜜糖浆中的一种或多种和果蔬、纤维物质、饼粕豆类产品、食品加工副产品和营养辅料中的一种或多混合，高温灭菌冷却，接入产柠檬酸菌种固态发酵后，制得柠檬酸固态发酵培养基湿基；

②、酵解饲料湿基的制备：

将干净水、饲料原料、复合菌种液和复合酶混合后，酶解发酵后，制得酵解饲料湿基；

③、固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备：

将柠檬酸固态发酵培养基湿基、酵解饲料湿基与市售饲用无机酸、有机酸盐、糖类糖蜜糖浆、液体油脂、中草药和维生素中的一种或多种混合后，直接生产固态多菌柠檬酸固态发酵培养基湿基，或混合后烘干或分别烘干后混合制成固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料干基。

2.根据权利要求1所述的一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备方法，其特征在于，

所述淀粉物质为国家农业部饲料原料目录中含淀粉产品的一种或多种，为玉米、稻谷、碎米、小麦、面粉、燕麦、大麦、高粱、红薯、木薯、甘薯、土豆中一种或多种，或者上述饲淀粉物质的膨化产品中的一种或多种；

所述饲料原料为国家农业部饲料原料目录中饲料原料的一种或多种，为豆粕、棉粕、菜籽粕、花生粕、鱼粉、血粉、血浆蛋白质、血球蛋白、奶粉、乳糖、乳清粉、小麦谷朊粉、玉米蛋白粉、大米蛋白粉、DDGS、大豆、豌豆、红豆、玉米、稻谷、碎米、小麦、麸皮、米糠、面粉、燕麦、大麦、红薯、大豆分离蛋白、大豆浓缩蛋白、牧草粉、中草药、水果蔬菜、糖类糖蜜糖浆和食品加工业副产品，或者上述饲料原料的的膨化产品中的一种或多种；

所述果蔬为国家农业部饲料原料目录中含水果、果渣、蔬菜产品的一种或多种，为苹果、葡萄、香蕉、苹果渣、葡萄渣、香蕉渣、萝卜、西红柿中一种或多种；

所述含糖产品为国家农业部饲料原料目录中含糖产品的一种或多种，为甘蔗、甜菜中一种或多种；

所述糖类糖类糖蜜糖浆为国家农业部饲料原料目录中糖类糖蜜糖浆的一种或多种，为蔗糖、葡萄糖、果糖、葡萄糖浆、麦芽糊精浆/粉、果葡糖浆/粉、麦芽糖浆/粉、低聚糖浆/粉、蔗糖糖蜜、甜菜糖蜜、大豆糖蜜中的一种或多种；

所述纤维物质为国家农业部饲料原料目录中纤维物质的一种或多种，为麸皮、米糠、牧草、青饲料、中草药、农作物秸秆、树叶竹叶中一种或多种；

所述饼粕豆类产品为国家农业部饲料原料目录中饼粕豆类产品的一种或多种，为豆粕、棉粕、菜籽粕、花生粕、芝麻粕、亚麻籽粕、葵花籽粕、大豆、豌豆、红豆，或者上述饼粕豆类产品的膨化产品中的一种或多种；

所述食品加工副产品为国家农业部饲料原料目录中食品加工副产品的一种或多种，为玉米蛋白粉、小麦谷朊粉、大米蛋白粉、DDGS、大豆分离蛋白、大豆浓缩蛋白、大豆皮、玉米皮、糖渣、醋渣、酸渣、酒糟、奶粉、乳糖、乳清粉，或者上述食品加工副产品的膨化产品中的一种或多种；

所述营养辅料为石粉、非蛋白含氮物、维生素、微量元素；

所述复合菌种液为国家农业部饲料原料目录中微生物产品的一种或多种，为乳酸菌种液、酵母菌种液、枯草芽孢杆菌种液、地衣芽孢杆菌种液、双歧杆菌种液、米曲霉种液、醋酸短杆菌种液、酪丁酸梭菌种液中的两者以上；

所述复合酶为国家农业部饲料原料目录中饲用酶制剂产品的一种或多种，为蛋白酶、木聚糖酶、葡聚糖酶、甘露聚糖酶、果胶酶、液化酶、糖化酶、纤维素酶中的一种或多种；

所述市售饲用非发酵源有机酸为国家农业部饲料添加剂目录中非发酵性有机酸的一种或多种，主要为甲酸、苯甲酸、酒石酸、富马酸、山梨酸中的一种或多种；

所述市售饲用无机酸为国家农业部饲料添加剂目录中无机酸的一种或多种，为磷酸、盐酸、硫酸中的一种或多种；

所述有机酸盐为国家农业部饲料添加剂目录中有机酸盐的一种或多种，为甲酸钙、丙酸钠、丙酸钙、丁酸钠、苯甲酸钠、山梨酸钠、山梨酸钾、柠檬酸钾、柠檬酸钠、柠檬酸钙中的一种或多种；

所述液体油脂为国家农业部饲料原料目录中液体油脂的一种或多种，为大豆油及其乳化油、玉米油及其乳化油、棕榈油及其乳化油、米糠油及其乳化油、椰子油及其乳化油、鱼油和动物油及其乳化油、花生油及其乳化油、菜籽油及其乳化油、茶油及其乳化油和植物精油及其提取物中的一种或多种；

所述中草药为国家农业部中草药饲料原料和中草药兽药目录中中草药及其提取物中的一种或多种，为黄芪及其提取物、杜仲及其提取物、金银花及其提取物、山楂及其提取物、陈皮及其提取物、红花及其提取物中的一种或多种；

所述维生素为脂溶性维生素、维生素B和维生素C。

3.根据权利要求1或2所述的一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备方法，其特征在于，

所述淀粉物质为玉米、稻谷、碎米、红薯、木薯、甘薯中的一种或多种；

所述饲料原料为国家农业部饲料原料目录中饲料原料的一种或多种，为豆粕、玉米蛋白粉、大米蛋白粉、DDGS、麸皮、米糠、食品加工业副产品，或者上述饲料原料的的膨化产品中的一种或多种；

所述复合菌种液为乳酸菌种液、酵母菌种液、枯草芽孢杆菌种液的及两种以上；

所述复合酶为木聚糖酶、葡聚糖酶、甘露聚糖酶、果胶酶中的一种或多种；

所述果蔬为苹果渣、葡萄渣、胡萝卜、西红柿中的一种或多种；

所述含糖产品为甘蔗；

所述糖类糖蜜糖浆为蔗糖、葡萄糖粉/浆、麦芽糊精浆/粉、蔗糖糖蜜、甜菜糖蜜、大豆糖蜜中的一种或多种；

所述纤维物质为麸皮、米糠、牧草粉、作物秸秆中的一种或多种；

所述饼粕豆类产品为豆粕、棉粕、菜籽粕、花生粕、大豆中的一种或多种，或者上述饼粕豆类产品的膨化产品中的一种或多种；

所述食品加工副产品为玉米蛋白粉、大米蛋白粉、DDGS、糖渣、醋渣、酸渣、酒糟中的一种或多种，或者上述食品加工副产品的膨化产品中的一种或多种；

所述营养辅料为石粉、非蛋白含氮物中的一种或多种；

所述复合菌种液为乳酸菌种液、酵母菌种液、枯草芽孢杆菌种液的中的两种及两种以上；

所述市售饲用非发酵源有机酸为甲酸、苯甲酸中的一种或多种；

所述市售饲用无机酸为磷酸；

所述有机酸盐为甲酸钙、丁酸钠、苯甲酸钠中的一种或多种；

所述液体油脂为大豆油及其乳化油、玉米油及其乳化油、棕榈油及其乳化油、米糠油及其乳化油中的一种或多种；

所述中草药为黄芪及其提取物；

所述维生素为维生素C。

4.根据权利要求1所述的一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备方法，其特征在于，步骤①中柠檬酸固态发酵培养基湿基的制备条件如下：

干净水、淀粉物质、饼粕豆类产品、糖蜜糖浆、纤维物质、食品加工副产品、果蔬、含糖产品、产柠檬酸菌种和营养辅料的重量比为100：1～1000：0～500：0～500：0～1000：0～800：0～100：0～100：0～500：0～30；

产柠檬酸菌种发酵温度：3～60℃；

起始发酵pH：自然；

发酵类型：有氧发酵；

培养基含水量：15-90％；

发酵时间：2-480小时。

5.根据权利要求1或4所述的一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备方法，其特征在于，步骤①中柠檬酸固态发酵培养基湿基的制备条件如下：

干净水、淀粉物质、饼粕豆类产品、糖蜜糖浆、纤维物质、食品加工副产品、果蔬、含糖产品、产柠檬酸菌种和营养辅料的重量比为100：100～200：0～50：0～50：10～100：0～80：0～10：0～10：20～30：0.5～5；

产柠檬酸黑曲霉菌种发酵温度：24～28℃；

起始发酵pH：自然；

发酵类型：有氧发酵；

培养基含水量：40-60％；

发酵时间：96-132小时。

6.根据权利要求1所述的一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备方法，其特征在于，步骤②中酵解饲料湿基的制备条件如下：

干净水、饲料原料、复合菌种液、复合酶的重量比为100：1～2400：1～200：0～50；

复合菌种发酵温度：3～60℃；

起始发酵pH：自然；

发酵类型：有氧发酵或厌氧发酵；

培养基含水量：20-80％；

发酵时间：8-360小时。

7.根据权利要求1或6所述的一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备方法，其特征在于，步骤②中酵解饲料湿基的制备条件如下：

干净水、饲料原料、复合菌种液、复合酶的重量比为100：150～380：20～30：0.1～1；

复合菌种发酵温度：25～30℃；

起始发酵pH：自然；

发酵类型：有氧发酵或厌氧发酵；

培养基含水量：20-60％；

发酵时间：42-60小时。

8.根据权利要求1所述的一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备方法，其特征在于，步骤③中固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备条件如下：

柠檬酸固态发酵培养基湿基、酵解饲料湿基、市售饲用无机酸、有机酸盐、糖类糖蜜糖浆、液体油脂、中草药和维生素中的重量比为100：0～1000：0～800：0～500：0～500：0～500：0～200：0～200。

9.根据权利要求1或8所述的一种固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备方法，其特征在于，步骤③中固态多菌柠檬酸酸化酵解饲料的制备条件如下：

柠檬酸固态发酵培养基湿基、酵解饲料湿基、市售饲用无机酸、有机酸盐、糖类糖蜜糖浆、液体油脂、中草药和维生素中的重量比为100：0～50：0～40：0～30：0～30：0～30：0～5：0～5。