CN103566016B - 一种熟地超微粉饮片及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种熟地超微粉饮片，所述熟地超微粉饮片的粒度为1-10μm，所含细菌数不超过10000cfu/g，霉菌或酵母菌数为不超过100cfu/g。本发明还提供了一种熟地超微粉饮片的制备方法以及所述熟地超微粉饮片的应用。本发明的熟地超微粉饮片满足口服固体药品微生物限度要求，较传统饮片极大地提高成分的溶出率和浸出率；本发明的熟地超微粉饮片的制备方法无需超低温处理过程，无需浸提，无高温处理过程，粉碎过程不会造成成分损坏或去除，适合于工业化大生产；本发明的熟地饮片的制备方法同时能够达到灭菌效果，为一种冷灭菌技术，避免了高温对中药成分的破坏，通过物理方法杀灭细菌，避免了化学气体及辐射污染。

Description

一种熟地超微粉饮片及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及中药领域，具体涉及一种熟地超微粉饮片及其制备方法和用途。

背景技术

熟地为玄参科植物地黄RehmanniaglutinosaLibosch.的块根经酒炖法或蒸法炮制加工而成。性甘，微温。归肝、肾经。有补血滋阴，益精填髓的功效。用于血虚萎黄，心悸怔忡，月经不调，崩漏下血，肝肾阴虚，腰膝酸软，骨蒸潮热，盗汗遗精，内热消渴，眩晕，耳鸣，须发早白。熟地黄中主要化学成分多糖、5-羟甲基糠醛、氨基酸等，有增强学习记忆能力、增强机体免疫力、抗衰老、抗氧化、抗焦虑、抗肿瘤等药理作用。其质量控制的量化指标成分5-羟甲基糠醛（5-HMF）可以增强红细胞变形性，在血液流变学和促进血液循环方面具有重要作用。

熟地黄的应用已有数千年的历史，但随着科学技术的进步，人民群众生活水平的提高以及中药资源有限等问题的出现，传统饮片的卫生状况差、起效较慢、活性成分利用率、煎煮麻烦、服用不便以及质量不稳定等缺点严重制约了中医临床的发展。

近10年来，由于人们对于天然药物的青睐，中药的需求大量增加，致使部分中药资源紧缺。由于中药超微粉可以显著提高药物的生物利用度，较小的给药剂量即可达到相当的疗效，因此中药微粉技术对有限中药资源的充分利用有一定的积极作用，可以在一定程度上提高药物药效，减少药材的用量。从目前已发表的学术论文来看，一般认为中药微粉技术能在节约药材用量、缩小用药体积的同时，可保证药物疗效，对有限的中药资源是一种保护。

此外，中药微粉化后可以影响粉体的流动性和可压性，影响制剂的外观，如软膏的均匀和细腻，影响制剂的内在质量，如胶囊和片剂中药物含量的准确性和均一性，以及混悬剂中粒子的分散稳定性，可以改变药物的给药途径等。

中药组成成分和结构复杂多样，可以用作药用资源的中药涉及天然植物、动物及矿物原料，以天然植物为多数，大多数中药在通常情况下是固体，一般以块状、粒状、结晶、无定形存在，表现出的物理性质主要有硬度、脆性、韧性等。中药饮片微粉化的主要方法为机械粉碎法，机械法设备有高速机械冲击式粉碎机、气流粉碎机、球磨机、振动磨等。

高速机械冲击式粉碎机粉碎，主要是通过打击、冲击和剪切作用达到粉碎目的，该方法的给料粒度要求小于10mm，产品细度为7～45μm；气流磨和气流粉碎机主要通过冲击和碰撞原理达到粉碎目的，其要求的给料粒度要求小于2mm，产品的细度为3～45μm；球麻机和振动磨等粉碎原理为摩擦、碰撞和剪切，一般产品细度为2～74μm，粒度范围比较广。

为避免物料在微粉化过程受热，多数研究者发明的方法以冷冻的方法进行，中国专利CN1213813C中公开了王志平发明的一种植物微粉的制备方法，将饮片粗粉碎粉末脱水，脱水后的粉末经过液氮冷冻（冷冻温度在-160～-180℃），等粗粉经冷冻变脆后，再以高速冷冻气流粉碎的情况下，植物粉末将进一步细化达到50～100nm。中国专利CN1111101A公开了周有维发明的山药超细微粉的生产方法是将物料先送入冷库在零下15℃预冻，处理后装盘送入真空超低温冷冻干燥机内，温度控制在零下35℃～45℃之间6～8小时。再经多级气流磨粉碎成超细微粉，这种超细微粉的细度可在250～1500目之间。

机械法进行物料粉碎时，在压缩、撞击、研磨、劈裂、截切等作用力的联合作用下，均存在机械能转变为热能，造成物料受热，以致药材的一些有效活性成分分解，或有的变动、变软，影响粉碎的正常进行。机械粉碎同时用冷冻的方法虽然可以有效避免机械粉碎过程中产生的高热量对药物成分的破坏，但这些致冷方法对设备要求较高，生产能耗大，需特别的生产环境，如以液氮等进行操作，存在较大安全隐患，较难进行产业化生产。

除了以机械粉碎法制备中药微粉外，还有通过将药材提取后，喷雾干燥，然后超微粉碎制备的方法。中国专利CN1391887A和CN1391846A中分别公开了孙多臣发明的刺五加和五味子超微粉的制作方法，主要有将中药饮片制成粗粉，加入到12倍重量的水中，加热到90℃进行浸提，并将浸提液过滤、浓缩，将过滤液浓缩，使其可溶固体物达到30～45%，干燥，将上述浓缩液喷雾干燥成粉末、以震动磨超微粉碎，将上述粉末用细胞破碎机方式磨成粉体粉粒径小于15微米的超微细粉末，从而使细胞壁破碎。

这种制备微粉的方法增加了高温浸提的过程，同时在浸提过滤过程中，滤出了不少药材成分，使得药物成分与原饮片成分存在较大差异，这种产品可能更趋向于中药浸膏微粉，而非微粉饮片，同时后期的超微粉碎过程同样也引入了机械粉碎方法的弊端。

因此，需要开发一种中药微粉饮片，使其不损失药物成分，能够达到理想的灭菌效果，具有较高的生物利用度，同时解决中药材在常温下超微粉碎大规模工业化生产的难题，从而加强药品质量的标准化，加快中药现代化的发展，实现与国际接轨，并推动传统中药行业进行技术创新和产业升级。

发明内容

因此，本发明的一个目的是提供一种熟地超微粉饮片，该熟地超微粉饮片满足无菌要求、药物成分不被破坏、无毒性物质残留，超微粉的比表面积大，分散性、吸附性、溶解性大，药物的溶出率和浸出率增大，生物利用度提高。

本发明的另一个目的是提供一种熟地超微粉饮片的制备方法，该方法快速高效、不破坏中药成分、使用范围广、适合于工业化大生产。该制备方法同时起到了为所述熟地饮片的灭菌的作用，为快速高效的冷灭菌技术，避免了高温对中药成分的破坏，通过物理方法杀灭细菌，避免了化学气体及辐射污染。

本发明的又一个目的是提供所述的熟地超微粉饮片在制备用于治疗血虚萎黄、心悸怔忡、月经不调、崩漏下血、肝肾阴虚、腰膝酸软、骨蒸潮热、盗汗遗精、内热消渴、眩晕、耳鸣和/或须发早白的药物中的应用。

本发明的再一个目的是提供所述的熟地超微粉饮片在制备用于增强学习记忆能力、增强机体免疫力、抗衰老、抗氧化、抗焦虑和/或抗肿瘤的药物中的应用。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一方面，本发明提供一种熟地超微粉饮片，所述熟地超微粉饮片的粒度为1-10μm，所含细菌数不超过10000cfu/g，霉菌或酵母菌数不超过100cfu/g。

优选地，所述熟地超微粉饮片水浴提取5分钟时的主成分毛蕊花糖苷溶出率为90%以上，浸出物得率为25%以上。

另一方面，本发明提供一种熟地超微粉饮片的制备方法，所述方法包括以下步骤：

（1）将熟地干燥，放冷；

（2）将干燥后的熟地粉碎，过筛，制得熟地细粉；

（3）将上步所得熟地细粉加水混合匀浆得初匀浆液；

（4）将初匀浆液进行高压微射流均质，得熟地超微粉饮片。

优选地，所述步骤（1）中使用真空微波干燥设备进行干燥；优选地，所述真空微波干燥设备的微波参数为真空度-0.70～-0.95MPa，微波功率1～5KW，温度40～60℃；优选地，干燥至含水量为5.5重量%以下。

优选地，所述步骤（3）中将熟地细粉与重量为5-20倍，优选6-10倍的水混合，使用高剪切乳化机进行匀浆，在匀浆速度为25,000rpm下，匀浆2-5分钟，优选3-5分钟；优选地，所述步骤（3）中所得的初匀浆液粒径小于50μm。

优选地，所述步骤（4）中采用超高压纳米均质机，在压力为200-400MPa下进行高压微射流均质；优选地，所述步骤（4）中匀浆循环次数为1-3次。

又一方面，本发明提供所述的熟地超微粉饮片在制备用于治疗血虚萎黄、心悸怔忡、月经不调、崩漏下血、肝肾阴虚、腰膝酸软、骨蒸潮热、盗汗遗精、内热消渴、眩晕、耳鸣和/或须发早白的药物中的应用。

再一方面，本发明提供所述的熟地超微粉饮片在制备用于增强学习记忆能力、增强机体免疫力、抗衰老、抗氧化、抗焦虑和/或抗肿瘤的药物中的应用。

微射流超微均浆技术是基于高压射流原理设计的一种新型的湿法超细粉碎方法，具有高裂解效能，而对细胞内仅止于最小限度的破坏等特点。微射流技术是一种连续冷超微粉碎及杀菌技术，其工作最高压力可达600MPa，利用超高压产生对以及压力释放时强烈剪切和高速撞击等联合作用处理物料，物料中的微生物受到强烈剪切、高速撞击、剧烈震荡、压力瞬间释放等动力作用使物料破碎，同时也使其中杂菌的细胞结构发生破坏和改变，从而失去或钝化其生物活性，也达到杀菌目的。

本发明的熟地超微粉饮片的制备方法具有以下特点：

1.速度快、时间短：微射流超微粉碎技术采用超音速粉碎方法，与以往的纯机械粉碎方法完全不同。粉碎过程速度快，瞬间即可完成，因而最大限度地保留粉体的生物活性成分，以利于制成所需的高质量产品。

2.对药物有较好的灭菌效果：由于微射流超微均浆技术的破碎强度在100-0.lμm之间，而常见的检测菌种如大肠杆菌大小为0.5×1-3μm，志贺氏菌为0.5-0.7×2-3μm，沙门氏菌0.6-0.9×1-3μm，金黄色葡萄球菌直径为0.8μm，霉菌菌丝直径为3-10μm，酵母菌直径为2-5μm，因此微射流超微均浆技术可以完全破碎药物中存在的微生物，使其失去活性。

3.微射流超微均浆技术是一种物理冷粉碎技术，主要以水为粉碎介质，将中药饮片全部进行粉碎，可完好地保存药材成分，无污染等优势。

本发明制备的熟地超微粉饮片可以达到理想的灭菌的效果，可以较传统饮片极大地提高成分的溶出率和浸出率，在临床使用时可以起到高效，速效的作用，而且可以减少临床使用量，节省药材资源；本发明的熟地超微粉饮片的制备方法基本克服了机械法超微粉碎的一些不足，解决了熟地药材在常温下超微粉碎大规模工业化生产的难题，微粉化过程中不会产生高热量，工艺简单，制备过程中物料只有一个物理超微粉碎过程，无需超低温处理过程，无需浸提，无高温处理过程，粉碎过程不会造成成分损坏或去除；本发明的熟地超微粉饮片的制备方法同时起到了为所述熟地饮片的灭菌的作用，为快速高效的冷灭菌技术，避免了高温对中药成分的破坏，通过物理方法杀灭细菌，避免了化学气体及辐射污染，可以提高微粉饮片的卫生指标。本发明对传统中药行业进行技术创新、提高中药饮片质量标准，节省药材资源以及产业升级具有积极的推动作用。

附图说明

以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：

图1超高压均质压力－微粉粒度分布图；

图2料液比－微粉粒度分布图；

图3循环次数－微粉粒度分布图；

图4超微粉与传统饮片中毛蕊花糖苷溶出率对比图；

图5超微粉与传统饮片中成分浸出率对比图。

具体实施方式

通过以下具体实施例，可以进一步了解本发明，但以下实施例不是对本发明的限定。

本发明实施例中所用的箱式微波真空干燥设备（型号：HWZ-5B-I，天水华圆制药设备有限责任公司）；Cutingmill粉碎机（德国ABMGreiffenberger）；高剪切乳化机（型号：SGX500，上海尚贵，）；超高压纳米均质机（型号：SPCH-10，德国STANSTEDFLUIDPOWERLTD.）；喷雾干燥机（型号：B-290，瑞士，BUCHI公司）；快速水分测定仪（型号MA35，Sartorius）。

实施例1

1物料预处理

1.1物料干燥

将熟地以真空微波干燥设备干燥，微波参数为真空度-0.70～-0.95MPa，微波功率1～5KW，温度40～60℃，干燥至含水量为5.5重量%以下，放冷。

1.2物料粉碎

将干燥后的熟地采用Cutingmill粉碎机粉碎成细粉，过筛，备用。

1.3初匀浆

1.3.1料液比考察

将熟地细粉按重量比分别为1:4，1:6，1:8，1:10，1:12加水混合，将高剪切乳化机的速度调为“F”（25,000rpm），匀浆5min，观察其浆液状态和测量粒度分布，以确保初匀浆后的物料粒粒径小于50μm，结果匀浆仪速度选择较高档位“F”时，物料浆液呈微旋窝状，药材粉能充分旋起，匀浆充分，无液滴飞溅。粒度分布结果见表1。

表1熟地粉不同料液比高剪切匀浆5min结果表（μm）

上述结果表明，料液比1：4时，物料较粘稠，不易匀浆，样品太稠对超高压纳米均质机易造成堵塞；料液比1：6时，粘稠度适宜，匀至一定粒度时可用于超高压微射流的处理；料液比为1：12时，粒度较1:6时无明显变化，但液体量过大，会加大微射流处理量和较难干燥。因此，本试验选择料液比为1：6-10。

1.3.2初匀浆时间考察：

取料液比为1:6的熟地细粉，将高剪切乳化机速度调整为“F”（25,000rpm)，分别匀浆2，3，5，8min测定匀浆不同时间后的粒度分布，结果见表2。

表2初匀浆不同时间粒度（μm）

其中D(0.1)、D(0.5)和D(0.9)为粒径分布特征值，见《中国药典》及《中国药品检验标准操作规程》2010版，例如D（0.9）含义是粒子体积累计分布图中90%处的粒径值，即有90%的粒子少于此值。由表2结果可知，匀浆2分钟时，粒径较细粉明显降低，D(0.9)从281.846减小到45.657，匀浆3分钟时粒度进一步减小，5min和3min粒度变化甚小，而且浆液温度明显升高，但自6～8min，样品开始发热成糊状，因此初匀浆选择3～5min。

2熟地超微粉制备工艺

2.1微射流压力

取料液比为1：6的初匀浆液300ml，在超高压纳米均质机中分别在微射流均质压力200，250，300，350，400MPa下处理，循环1次，取混悬浮溶液检查饮片粉粒度分布和检查微生物，结果见表3和图1。

表3不同压力处理结果表（μm）

由表3数据表明，熟地微粉的粒度与微射流压力大小有极大关系，随着压力增大，粒度降低，当压力在200MPa时，粒度约为2μm，压力到250MPa时，粒度约为1μm，压力大于200MPa时，微生物数明显降低，压力350MPa以上时，霉菌酵母菌数为0，表明超高压微射流处理后对熟地黄饮片有较好的灭菌效果。

2.2料液比的考察

将处理后的1:5，1:10，1:15，1:20初匀浆液以超高压纳米均质机处理，压力300MPa，循环一次，取混悬浮溶液检查饮片粉粒度，结果见表4。

表4不同料液比处理结果表（μm）

不同料液比与粒度分布图见图2。

由表4数据表明，在相同压力下，不同料液比时，粒度无明显变化，可知料液比对微粉化程度无明显影响。

2.3循环次数的考察

将初匀浆处理后的1:6的初匀浆液以超高压纳米均质机处理，压力300MPa，分别循环1，2和3次，取混悬浮溶液检查饮片超微粉粒度和微生物限度，结果见表5。

表5不同料液比处理结果表（μm）

不同循环次数与粒度变化图见图3。

由表5结果可知，熟地黄超微破碎随微射流循环次数的增加粒度而粒度变小，当循环1次时，粒度均小于10μm，循环2次和3次时，90%超微粉粒度约为5μm，同时随着循环次数的增加，细菌和霉菌酵母菌数也进一步减少，当循环2次和3次时，微生物数为0。

2.4采用喷雾干燥机干燥后制备得到熟地超微粉饮片的粒度为1-10μm，所含细菌数不超过10000cfu/g，霉菌或酵母菌数为不超过100cfu/g。

实施例2与传统饮片溶出率和浸出率的比较

1毛蕊花糖苷溶出率测定

1.1方法

按《中国药典》2010版第一部熟地项下的液相条件方法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈－0.1%醋酸溶液（16:84）为流动相；检测波长为334nm。理论板数按毛蕊花糖苷峰计算应不低于5000。

1.2对照品溶液制备

精密称取毛蕊花糖苷对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含10μg的溶液，即得。

1.3样品提取

精密称取熟地普通饮片（毛蕊花糖苷含量0.026重量%）和本发明实施例1中制得的熟地超微粉饮片约2.5g，置离心管中，精密加入20ml水，称定重量，浸泡30min，水浴放置5，10，15，20，30min，时时振摇，取出放冷，再次称定重量，以水补足减失的重量，摇匀，15,000rpm离心10min，倾取上清液，备用。

精密量取上述煎液2mL，置5mL量瓶中，加入乙腈－0.1%醋酸溶液（16:84）的溶液稀释至刻度，0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液作供试品溶液，取供试品溶液进样20μl，计算样品中毛蕊花糖苷溶出率，结果见图4。

2浸出物测定

精密量取“1.3”中上清液5mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，105℃干燥3小时，置干燥器中放冷30min，迅速称定重量，计算煎煮液中浸出物得率，结果见图5。

表6毛蕊花糖苷溶出率及浸出率结果表

由表6结果可知，煎煮5min时，传统饮片中毛蕊花糖苷溶出率仅47.48%，而超微粉样品溶出率高达94.78%，为传统饮片的约2.0倍；超微粉样品在5～30min过程中毛蕊花糖苷溶出率增长极少，表明5min时即达到最大溶出量，而传统饮片5～30min过程中持续增长，30min时为51.65%，基本达最大溶出量，可见传统饮片中毛蕊花糖苷溶出速率较为缓慢。

表6中结果亦表明，熟地黄超微粉样品中成分的浸出率和浸出速率均明显高于传统饮片，5min时饮片浸出率为14.05%，超微粉样品31.69%，为传统饮片的2.26倍；超微粉样品5min时成分已达到最大溶出量，5～30min浸出率基本维持不变，但传统饮片5～30min的过程中浸出物得率呈明显的上升趋势，表明其溶出过程缓慢，超微粉样品浸出速率明显高于传统饮片。

3结论

熟地黄经微射流技术超微粉化处理后，其有效成分溶出率和溶出速率均明显高于传统饮片。因此该法制备的熟地黄超微粉饮片在临床使用时必然可以起到提高疗效，速效的作用，而且可以减少临床使用量，节省地黄药材资源。

Claims (11)

1.一种熟地超微粉饮片，其特征在于，所述熟地超微粉饮片的粒度为1-10μm，所含细菌数不超过10000cfu/g，霉菌或酵母菌数不超过100cfu/g，其中，所述熟地超微粉饮片是通过包括以下步骤的方法制备的：

(1)将熟地干燥，放冷；

(2)将干燥后的熟地粉碎，过筛，制得熟地细粉；

(3)将上步所得熟地细粉加水混合匀浆得初匀浆液；

(4)将初匀浆液进行高压微射流均质，得熟地超微粉饮片；

其中，所述步骤(4)中采用超高压纳米均质机，在压力为200-400MPa下进行高压微射流均质。

2.根据权利要求1所述的熟地超微粉饮片，其特征在于，所述熟地超微粉饮片水浴提取5分钟时的主成分毛蕊花糖苷溶出率为90％以上，浸出物得率为25％以上。

3.根据权利要求1或2所述熟地超微粉饮片的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)将熟地干燥，放冷；

(2)将干燥后的熟地粉碎，过筛，制得熟地细粉；

(3)将上步所得熟地细粉加水混合匀浆得初匀浆液；

(4)将初匀浆液进行高压微射流均质，得熟地超微粉饮片；

其中，所述步骤(4)中采用超高压纳米均质机，在压力为200-400MPa下进行高压微射流均质。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其中，所述步骤(1)中使用真空微波干燥设备进行干燥。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其中，所述真空微波干燥设备的微波参数为真空度-0.70～-0.95MPa，微波功率1～5KW，温度40～60℃。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其中，所述步骤(1)中干燥至含水量为5.5重量％以下。

7.根据权利要求3至6中任一项所述的制备方法，其中，所述步骤(3)中将熟地细粉与重量为5-20倍的水混合，使用高剪切乳化机进行匀浆，在匀浆速度为25,000rpm下，匀浆2-5分钟。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其中，所述步骤(3)中将熟地细粉与重量为6-10倍的水混合。

9.根据权利要求7所述的制备方法，其中，所述步骤(3)中匀浆3-5分钟。

10.根据权利要求3至6中任一项所述的制备方法，其中，所述步骤(3)中所得的初匀浆液粒径小于50μm。

11.根据权利要求3至6中任一项所述的制备方法，其中，所述步骤(4)中高压微射流均质循环次数为1-3次。