CN103554229B - 固相合成布舍瑞林的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种固相合成布舍瑞林的方法，由乙胺基载体树脂和Fmoc-Pro-OH出发，得到Fmoc-Pro-EtNH-supporting？Resin，然后依次偶联布舍瑞林的其它的保护氨基酸，裂解去除supporting？Resin，得到全保护肽，全保护肽经氢化脱保护、纯化，得到布舍瑞林。本发明所述的方法，省去了多肽乙胺基化的步骤，在简化产品合成工艺的操作方面，提供工艺稳定性方面，提供产品总体收率，降低成本方面都有较大突破。因此本发明的是提供一种高收率、低成本、反应条件温和、环境污染小、有利于实现产业化的布舍瑞林固相合成方法。
Description
技术领域
本发明涉及一种布舍瑞林的合成方法，尤其涉及一种纯度高、高收率的合成布舍瑞林的方法。
背景技术
布舍瑞林（Buserelin）是一种水溶性多肽类药物，为下丘脑分泌的天然促性腺激素释放激素（GnRH/LHRH）类似物，可促进黄体生成激素LH、促卵胞生成激素FSH和性激素分泌增加，药理效应为LHRH的20-170倍，长期给予布舍瑞林可以抑制绒促性素的生成，并抑制卵巢和睾丸类固醇的生成。布舍瑞林的主要临床应用包括姑息治疗激素依赖的前列腺癌（D期）、乳腺癌、无需手术治疗的子宫内膜异位症等疾病的治疗。
布舍瑞林结构为Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(tBU)-Leu-Arg-Pro-NH-Et，现有的合成布舍瑞林的方法主要有两种：
第一种是片段缩合法，即将布舍瑞林拆分成几个片段（如两个）分别合成，所合成的各个裸肽片段在液相条件下进行偶联，如CN101735308A公开的4+5片段合成方法，先合成五片段Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-OH和四片段D-Ser(tBU)-Leu-Arg-Pro-NHEt，然后缩合得到布舍瑞林。这种片段缩合方法的缺陷非常明显，工艺操作繁琐；更重要的是，片段偶联过程中，多肽发生消旋反应的现象比较严重；另外且最终收率较低。
第二种是全序列部分保护合成方法，即在固相合成过程中，对部分氨基酸侧链进行保护，并最终在液相中实现乙氨基化，此工艺虽然实现在固相载体上的全序列合成，但是由于采用的是部分保护，所以合成过程中引入的杂质较多，出产品的质量很差，纯化过程中较难分离，很难得到高质量的产品，且综合收率不高。
CN101935339A公开了一种全保护合成布舍瑞林的方法，固相合成布舍瑞林后，裂解去除树脂，然后将全保护肽经过乙氨基化、裂解脱除保护基的步骤得到布舍瑞林，该方法无论是乙氨基化过程，在冰水浴条件下进行，不适于工业化操作。WO2008/044890公开了一种合成布舍瑞林的方法，分别合成Pro-NH-Et和Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(tBU)-Leu-Arg-OH，然后偶联、去除保护基获得布舍瑞林；该方法先通过氨基酸偶联获得肽链，之后先脱除树脂，然后再偶联氨基酸Pro-NH-Et，实际操作过程中，工艺变化非常繁琐。
发明内容
针对现有技术中合成布舍瑞林的方法产率低、纯度低、和操作繁琐的问题，本发明提供了一种新的合成布舍瑞林的方法。
本发明提供了一种固相合成布舍瑞林的方法，步骤包括：
步骤1，提供如结构式（I）乙胺基载体树脂EtNH-SupportingResin；
步骤2，以所述乙胺基载体树脂为固相合成多肽树脂，偶联Fmoc-Pro-OH，脱除保护基，得到NH2-Pro-EtN-SupportingResin；
步骤3，NH2-Pro-EtN-SupportingResin与Fmoc-Arg(PG1)-OH偶联得到NH2-Arg(PG1)-Pro-NEt-SupportingResin；其中，PG1为Arg侧链保护基团；
步骤4，依次偶联布舍瑞林肽链中的其它氨基酸，得到Pyr-His(PG6)-Trp(PG5)-Ser(PG4)-Tyr(PG3)-D-Ser(tBU)-Leu(PG2)-Arg(PG1)-Pro-NEt-SupportingResin；其中，PG1至PG6分别独立的为氨基酸侧链保护基团，或者不存在；
步骤5，酸性条件下进行裂解脱除载体树脂，得到全保护肽：
Pyr-His(PG6)-Trp(PG5)-Ser(PG4)-Tyr(PG3)-D-Ser(tBU)-Leu(PG2)-Arg(PG1)-Pro-NHEt；
步骤6，所述全保护肽通过氢化反应脱除PG1至PG6，得到布舍瑞林。
在本发明所述的方法中，所述载体树脂中的polymer可以是任意用于固相合成多肽的树脂聚合物中的一种或几种，并优选为聚苯乙烯、苯乙烯-苯二乙烯交联树脂、聚丙烯酰胺、聚乙烯-乙二醇树脂等，并优选为聚苯乙烯（PS）。
在本发明所述的方法中，步骤1中所述合成的载体树脂EtNH-SupportingResin中，乙胺基取代度优选为0.8-1.0mmol/g，即可以含有部分未取代乙胺基的载体树脂。
其中，所述EtNH-SupportingResin的合成方法优选为：
乙氨钠CH3-CH2-NH-Na+与结构式（II）所示载体树脂（SupportingResin）反应制备，其中X为卤素，如Cl、Br、I。
其中，所述载体树脂（II）最优选为CTC树脂。
其中，CH3-CH2-NH-Na+与载体树脂反应优选为无水条件下进行。
其中，CH3-CH2-NH-Na+与载体树脂反应的步骤更优选为：将氨基钠NH2Na溶液加入到溶胀的载体树脂中，5-40℃反应2-12h，反应后的树脂洗涤后与碘乙烷5-30℃反应2-12h。
反应式如下：
其中，X、Y分别独立选自卤素，如Cl、Br、I。
其中，NH2Na溶液所用溶剂与反应溶剂均可以独立地是四氢呋喃、甲苯、乙醚、二氯甲烷、乙氰中的任意一种或几种的混合溶剂。
其中，CH3-CH2-NH-Na+与载体树脂反应的反应温度优选为5-35℃，更优选为10-30℃，更优选为10-20℃，更优选为10-15℃。
其中，CH3-CH2-NH-Na+与载体树脂反应的反应时间更优选为4-10h，更优选为6-8h，更优选为6-7h。
本发明所述的方法中，步骤2中偶联Fmoc-Pro-OH反应中，优选为在缩合剂存在下进行，所述缩合剂可以是任意能够用于促进羧酸与胺缩合的缩合剂，如碳二亚胺类缩合剂、鎓盐类缩合剂、有机磷类缩合剂、以及其它缩合剂等中的任意一种或几种的组合。其中：
碳二亚胺类缩合剂如二环己基碳二亚胺（DCC）、二异丙基碳二亚胺（DIC）、1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亚胺（EDCI）等；
鎓盐类缩合剂如O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-二(二甲胺基)碳鎓六氟磷酸盐（HATU）、O-(苯并三氮唑-1-基)-二(二甲胺基)碳鎓六氟磷酸盐（HBTU）、O-(5-氯苯并三氮唑-1-基)-二(二甲胺基)碳鎓六氟磷酸盐HCTU、O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-二(四氢吡咯基)碳鎓六氟磷酸盐（HAPyU）、O-(苯并三氮唑-1-基)-二(四氢吡咯基)碳鎓六氟磷酸盐（HBPyU）、O-(苯并三氮唑-1-基)-二(二甲胺基)碳鎓四氟硼酸盐（TBTU）、O-(N-丁二酰亚胺基)-二(二甲胺基)碳鎓四氟硼酸盐（TSTU）、O-(N-endo-5-降崁烯-2,3-二碳二酰亚胺基)-二(二甲胺基)碳鎓四氟硼酸盐（TNTU）、苯并三氮唑-1-基氧-三(二甲胺基)鏻鎓六氟磷酸盐（BOP）、苯并三氮唑-1-基氧-三(四氢吡咯基)鏻鎓六氟磷酸盐（PyBOP）、7-氮杂苯并三氮唑-1-基氧-三(四氢吡咯基)鏻鎓六氟磷酸盐PyAOP等；
有机磷类缩合剂如二苯基磷酰氯（DPP-Cl）、氰代磷酸二乙酯（DECP）、叠氮化磷酸二苯酯（DPPA）、硫代二甲基磷酰基叠氮（MPTA）、二(2-氧-3-唑烷基)磷酰氯（BOP-Cl）等；
其它缩合剂如三苯基磷-多卤代甲烷、三苯基磷-六氯丙酮、三苯基磷-NBS（NBS：N-溴代丁二酰亚胺）等。
本发明所述的方法中，步骤2中偶联Fmoc-Pro-OH反应中，还可以加入活化剂，可用于碳二亚胺类缩合剂的活化剂包括4-N,N-二甲基吡啶（DMAP）、4-吡咯烷基吡啶（4-PPY）、1-羟基苯并三氮唑（HOBt）、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑（HOAt）、（N-羟基琥珀酰亚胺）HOSu、N-羟基邻苯二甲酰亚胺（NHPI）、N-羟基-5-降冰片烯-2,3-二甲酰亚胺NHNI、五氟苯酚（PFPOH）中的任意一种或几种的组合。
本发明所述的方法中，步骤2中偶联Fmoc-Pro-OH反应中，还可以加入碱性物质，可以是有机碱和/或无机碱，更优选为有机碱，所述无机碱如NaHCO3、Na2CO3、NaOH、K2CO3、KOH、KH2PO4等，所述有机碱优选为有机胺类物质，如三乙胺、N-甲基吗啉（NMM）、二异丙基乙胺（DIEA）等。
本发明所述的方法中，步骤2中偶联Fmoc-Pro-OH反应中，可以是在溶剂中进行，所述溶剂可以优选为二氯乙烷、乙醚、四氯化碳、甲苯等中的任意一种或几种的混合物。
本发明所述的方法中，步骤2中偶联Fmoc-Pro-OH反应中，反应温度优选为10-50℃，更优选为15-40℃，更优选为20-35℃，更优选为25-30℃。
本发明所述的方法中，步骤2中偶联Fmoc-Pro-OH反应中，反应时间优选为≥5h，更优选为5-24h，更优选为5-18h，更优选为6-12h，更优选为8-10h。
本发明所述的方法中，步骤2中偶联Fmoc-Pro-OH反应中，优选为Fmoc-Pro-OH与乙胺基载体树脂摩尔比可以是1∶1，或者Fmoc-Pro-OH过量，并优选为(1-10)∶1，更优选为(2-8)∶1，更优选为(3-6)∶1，如4∶1、5∶1。
本发明所述的方法中，步骤2得到的NH2-Pro-EtN-SupportingResin中，Pro取代度优选为0.6-0.9mmol/g。
本发明上述的方法中，步骤5所述酸性条件优选为在三氟乙酸存在条件下，更优选为体积百分比为1-5%三氟乙酸溶液，其中，三氟乙酸溶液体积百分比浓度更优选为1.5-4%（v/v），更优选为2-3%（v/v）。
其中所述三氟乙酸溶液的溶剂优选为二氯甲烷。
本发明所述的方法中，步骤6的氢化反应中，优选为在加氢催化剂存在下进行，所述加氢催化剂可以是选自铂、钯、镍、钴、钌、铑、铱、锇催化剂中的任意一种或几种的混合物。
优选地，所述催化剂为Pt/C催化剂，其中，所述催化剂中，Pt质量含量优选为5-20%，如8%、10%、15%等。
本发明所述的方法中，步骤6的氢化反应优选为在溶剂中进行，所述溶剂可以是任意能够溶解Pyr-His(PG6)-Trp(PG5)-Ser(PG4)-Tyr(PG3)-D-Ser(tBU)-Leu(PG2)-Arg(PG1)-Pro-NEt-CTCResin、而不使催化剂丧失催化活性的溶剂，如甲醇、乙醇、丙醇等。
本发明上述的方法中，His(PG6)、Trp(PG5)、Ser(PG4)、Tyr(PG3)、Leu(PG2)、Arg(PG1)分别优选为His(Trt)、Trp、Ser(Bzl)、Tyr(Bzl)、Leu、Arg(NO2)。
本发明第二个方面是提供一种用于固相合成布舍瑞林的载体树脂，所述载体树脂结构如下：
其中，polymer可以是任意用于固相合成多肽的树脂聚合物，并优选为聚苯乙烯、苯乙烯-苯二乙烯交联树脂、聚丙烯酰胺、聚乙烯-乙二醇树脂等，并优选为聚苯乙烯。
其中，所述合成的载体树脂EtNH-SupportingResin中，取代度优选为0.8-1.0mmol/g。
应当理解的是，本发明上述方法中，在没有特别说明的情况下，各个优选实施例均可以由本领域技术人员不受限制的进行任意组合，并且其组合也包含在本发明内容中。
本发明所述的固相合成布舍瑞林的方法，所有的合成过程都集中在固相载体上完成，采用全保护合成，最终通过氢化的手段去除不必要的侧链保护基，这一工艺可以将因活性侧链参与偶联反应而引入的杂质降至最少，且省略了乙胺化的过程，大大降低了操作的繁琐性，提供了产品收率，大大降低了产品的生产成本。
因此，本发明提供了一种高收率、低成本、反应条件温和、环境污染小、有利于实现产业化的布舍瑞林固相合成方法。
附图说明
图1为本发明一种实施例中固相合成布舍瑞林方法的合成路线图；
图2为本发明所述方法制备的布舍瑞林的MS谱图。
具体实施方式
实施例1
参照图1，本实施例固相合成布舍瑞林的方法如下：
步骤1，乙胺基CTC树脂的制备，合成路线如下：
CTC（I-1）树脂在二氯甲烷（DCM，20mlDCM/gCTC树脂）中溶胀3h以上，然后用质量浓度1%的TEA的DCM溶液洗涤。
氨基钠、DCM按照1∶3重量比缓缓加入到置有溶胀CTC树脂的容器中，密封，干冷处理20min，室温下反应6-4h。DCM、甲醇和乙氰（ACN）洗涤。
加入碘乙烷的乙腈（10mlACN/gCTC树脂）溶液，反应7-8h。
甲醇、DMF洗涤，得到乙氨基CTC树脂（II-1），记为EtNH-CTCResin。步骤2，偶联氨基酸Pro
1eqEtNH-CTCResin与4eqFmoc-Pro-OH，在3.5eqBOP和8eqNMM存在下，25-30℃反应10小时，得到Fmoc-Pro-EtN-CTCResin。
20%哌啶溶液中，DMF存在下，脱除保护基Fmoc，反应温度为20-25℃，反应时间为30min。得到NH2-Pro-EtN-CTCResin。
步骤3，偶联氨基酸Arg(NO2)
加入3eqFmoc-Arg(NO2)-OH，在3eqDIC+1.5eqNMM+3eqHOBT存在下进行偶联反应，具体操作可以参考现有固相合成多肽的技术。
然后采用步骤2中同样的方法脱除保护基Fmoc，得到NH2-Arg(NO2)-Pro-EtN-CTCResin。
步骤4，偶联其它氨基酸
采用与步骤3相同的方法，根据布舍瑞林的肽链结构，依次加入Fmoc-Leu-OH、Fmoc-D-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Tyr(Bzl)-OH、Fmoc-Ser(Bzl)-OH、Fmoc-Trp-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Pyr-OH、Fmoc-Trp–OH，依次偶联第三至第九个氨基酸（3-9AA）：Leu、D-Ser(tBu)、Tyr(Bzl)、Ser(Bzl)、Trp、His(Trt)、和Pyr。
得到全保护的9肽树脂Pyr-His(Trt)-Trp-Ser(Bzl)-Tyr(Bzl)-D-Ser(Bzl)-Leu-Arg(NO2)-Pro-NEt-CTCResin。
步骤5，去除CTC树脂
2%（v/v）三氟乙酸（TFA）的DCM溶液中，搅拌30min，过滤，去除树脂，滤液用10%（v/v）NMM/DCM溶液中和，减压浓缩。
得到全保护肽Pyr-His(Trt)-Trp-Ser(Bzl)-Tyr(Bzl)-D-Ser(Bzl)-Leu-Arg(NO2)-Pro-NHEt。
步骤6，氢化脱除保护基
全保护肽溶于甲醇中，通入H2，压力保持为2.5MPa，以10%（v/v）Pt/C为催化剂，反应24h，脱除D-Ser(Bzl)之外的其它各氨基酸的侧链保护基，过滤，滤液浓缩至干，得到Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(Bzl)-Leu-Arg-Pro-NHEt粗产品粉末。
将粗产品粉末溶于甲醇中，加入冷乙醚沉淀，离心分离，真空干馏，得到布舍瑞林粗产品，纯度88%，然后通过反相高效液相色谱纯化，得到高纯度布舍瑞林，纯度99.5%，总体收率为39%。
所得布舍瑞林MS谱图见图2，与布舍瑞林肽链结构相符。
实施例2
本实施例固相合成布舍瑞林的方法如下：
步骤1，制备乙氨基CTC树脂，记为EtNH-CTCResin。
步骤2，偶联氨基酸Pro
1eqEtNH-CTCResin与3eqFmoc-Pro-OH，在3eqBOP和9eqNMM存在下，25-30℃反应15小时，得到Fmoc-Pro-EtN-CTCResin。
脱除保护基Fmoc，得到NH2-Pro-EtN-CTCResin。
步骤3，偶联氨基酸Arg(NO2)
加入3eqFmoc-Arg(NO2)-OH，在3eqDIC+1eqNMM+2eqHOBT存在下进行偶联反应，具体操作可以参考现有固相合成多肽的技术。
然后脱除保护基Fmoc，得到NH2-Arg(NO2)-Pro-EtN-CTCResin。
步骤4，偶联其它氨基酸
依次偶联第三至第九个氨基酸（3-9AA）：Leu、D-Ser(tBu)、Tyr(Bzl)、Ser(Bzl)、Trp、His(Trt)、和Pyr。
得到Pyr-His(Trt)-Trp-Ser(Bzl)-Tyr(Bzl)-D-Ser(Bzl)-Leu-Arg(NO2)-Pro-NEt-CTCResin。
步骤5，去除CTC树脂
DCM存在下，2%三氟乙酸（TFA）溶液中，裂解反应去除CTC树脂。
脱除CTC树脂后，得到Pyr-His(Trt)-Trp-Ser(Bzl)-Tyr(Bzl)-D-Ser(Bzl)-Leu-Arg(NO2)-Pro-NHEt。
步骤6，氢化脱除保护基
甲醇溶液中，通入H2，压力保持为3.0MPa，以10%Pt/C为催化剂，反应24h，脱除D-Ser(Bzl)之外的其它各氨基酸的侧链保护基，真空干馏得到Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(Bzl)-Leu-Arg-Pro-NHEt粗产品粉末。
将粗产品粉末溶于甲醇中，加入冷乙醚沉淀，离心分离，真空干馏，得到布舍瑞林粗产品，纯度86%，然后通过反相高效液相色谱纯化，得到高纯度布舍瑞林，纯度98%，总体收率为39%。
实施例3
本实施例固相合成布舍瑞林的方法如下：
步骤1，制备乙氨基CTC树脂，记为EtNH-CTCResin。
步骤2，偶联氨基酸Pro
1eqEtNH-CTCResin与5eqFmoc-Pro-OH，在4eqBOP和8eqNMM存在下，25-30℃反应15小时，得到Fmoc-Pro-EtN-CTCResin。
脱除保护基Fmoc，得到NH2-Pro-EtN-CTCResin。
步骤3，偶联氨基酸Arg(NO2)
加入3eqFmoc-Arg(NO2)-OH，在3eqDIC+2eqNMM+2eqHOBT存在下进行偶联反应，具体操作可以参考现有固相合成多肽的技术。
然后脱除保护基Fmoc，得到NH2-Arg(NO2)-Pro-EtN-CTCResin。
步骤4，偶联其它氨基酸
依次偶联第三至第九个氨基酸（3-9AA）：Leu、D-Ser(tBu)、Tyr(Bzl)、Ser(Bzl)、Trp、His(Trt)、和Pyr。
得到Pyr-His(Trt)-Trp-Ser(Bzl)-Tyr(Bzl)-D-Ser(Bzl)-Leu-Arg(NO2)-Pro-NEt-CTCResin。
步骤5，去除CTC树脂
DCM存在下，2%(v/v)三氟乙酸（TFA）溶液中，裂解反应去除CTC树脂。
脱除CTC树脂后，得到Pyr-His(Trt)-Trp-Ser(Bzl)-Tyr(Bzl)-D-Ser(Bzl)-Leu-Arg(NO2)-Pro-NHEt。
步骤6，氢化脱除保护基
乙醇溶液中，通入H2，压力保持为2.0MPa，以Pd/C为催化剂，脱除D-Ser(Bzl)之外的其它各氨基酸的侧链保护基，真空干馏得到Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(Bzl)-Leu-Arg-Pro-NHEt粗产品粉末。
将粗产品粉末溶于甲醇中，加入冷乙醚沉淀，离心分离，真空干馏，得到布舍瑞林粗产品，纯度87%，然后通过反相高效液相色谱纯化，得到高纯度布舍瑞林，纯度98.5%，总体收率为38.5%。
本发明所提供的固相合成布舍瑞林的方法，固相载体树脂上形成乙胺基，脱除树脂后乙胺基保留在肽链上，因此，省去了现有技术中合成肽链后的乙胺基化反应，或者脱除载体树脂后重新偶联含乙胺基氨基酸Pro-NHEt的步骤。因此，本发明在简化产品合成工艺的操作方面，提供工艺稳定性方面，提供产品总体收率，降低成本方面都有较大突破。
以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。
Claims (7)
1.一种固相合成布舍瑞林的方法，其特征在于，步骤包括：
步骤1，提供如结构式(I)乙胺基载体树脂EtNH-SupportingResin；
其中，polymer为任意可用于固相合成多肽的树脂聚合物中的一种或几种；
其中，所述载体树脂中，乙胺基取代度为0.8-1.0mmol/g；
步骤2，以所述乙胺基载体树脂为固相合成多肽树脂，偶联Fmoc-Pro-OH，脱除保护基，得到NH2-Pro-EtN-SupportingResin；
其中，偶联Fmoc-Pro-OH反应中，反应温度为10-50℃，Fmoc-Pro-OH与乙胺基载体树脂摩尔比为(1-10)∶1；
步骤3，NH2-Pro-EtN-SupportingResin与Fmoc-Arg(PG1)-OH偶联得到NH2-Arg(PG1)-Pro-EtN-SupportingResin；其中，PG1为Arg侧链保护基团；
步骤4，依次偶联布舍瑞林肽链中的其它氨基酸，得到Pyr-His(PG6)-Trp(PG5)-Ser(PG4)-Tyr(PG3)-D-Ser(tBU)-Leu(PG2)-Arg(PG1)-Pro-EtN-Supporting
Resin；其中，PG1至PG6分别独立的为氨基酸侧链保护基团，或者不存在；
步骤5，酸性条件下进行裂解脱除载体树脂，得到：
Pyr-His(PG6)-Trp(PG5)-Ser(PG4)-Tyr(PG3)-D-Ser(tBU)-Leu(PG2)-Arg(PG1)-Pro-EtNH；
步骤6，通过氢化反应脱除PG1至PG6，得到布舍瑞林。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述乙胺基载体树脂EtNH-SupportingResin中的polymer为聚苯乙烯。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，结构式为(I)的所述乙胺基载体树脂EtNH-SupportingResin制备方法为：将氨基钠NH2Na溶液加入到溶胀的载体树脂(II)中，5-40℃反应2-12h，反应后的树脂洗涤后与碘乙烷5-30℃反应2-12h；
反应式如下：
其中，X选自Cl、Br、I；
Y为I。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2中偶联Fmoc-Pro-OH反应，在缩合剂存在下进行，所述缩合剂选自碳二亚胺类缩合剂、鎓盐类缩合剂、有机磷类缩合剂、以及其它任意能够用于促进羧酸与胺缩合的缩合剂中的任意一种或几种的组合。
5.根据权利要求1、4中任意一项所述的方法，其特征在于，步骤2得到的NH2-Pro-EtN-SupportingResin，Pro取代度为0.6-0.9mmol/g。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤5中酸条件为三氟乙酸存在条件下。
7.一种用于固相合成布舍瑞林的载体树脂，其特征在于，所述载体树脂为结构式(I)所示的乙胺基载体树脂
其中，polymer为任意可用于固相合成多肽的树脂聚合物中的一种或几种；
其中，所述载体树脂中，乙胺基取代度为0.8-1.0mmol/g。
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