CN103550406A - 一种禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂，其由下述重量百分比原料制成：牛至油1-30%,表面活性剂10-40%，助表面活性剂1-20%，川楝素1-20%，绿茶提取物1-20%，香菇多糖1-20%，原花青素0.1-10%，余量为水，上述原料的重量百分比之和为100％。该口服纳米乳制剂将牛至油与纯天然植物提取物配合，组方健康、合理、安全性高且兼具保健与治疗的双重效果，抗球虫疗效显著。

Description

一种禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂及其制备方法

技术领域

本发明属于禽用药物技术领域，具体涉及一种禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂及其制备方法。

背景技术

现有研究表明：川楝素、绿茶提取物、香菇多糖等具有驱虫效果，而市场上也有牛至油用做驱虫的辅料，但是这些药物虽然口服后能从胃肠道吸收，但吸收不完全。另外药物的溶出速率慢，生物利用度差，再加上川楝素、绿茶提取物、香菇多糖作用缓慢，使得川楝素、绿茶提取物、香菇多糖等和牛至油的药效无法得到充分利用。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明目的在于提供一种禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂及其制备方法，该口服纳米乳制剂稳定性好、渗透性高、溶解度好且生物利用度高，抗球虫疗效显著。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂，其由下述重量百分比原料制成：

牛至油 1−30%，

表面活性剂 10−40%，

助表面活性剂 1−20%，

川楝素 1−20%，

绿茶提取物 1−20%，

香菇多糖 1−20%，

原花青素 0.1−10%，

余量为水，上述原料的重量百分比之和为100％。

进一步的，所述的禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂可以由下述重量百分比原料制成：

牛至油 5−20%，

表面活性剂 15−40%，

助表面活性剂 1−15%，

川楝素 1−15%，

绿茶提取物 1−15%，

香菇多糖 1−15%，

原花青素 0.1−3%，

余量为水。

具体的，所述的禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂优选由下述重量百分比原料制成：

牛至油 11%，

表面活性剂 32%，

助表面活性剂 7%，

川楝素 6%，

绿茶提取物 8%，

香菇多糖 7%，

原花青素 0.3%，

余量为水。

所述表面活性剂为聚氧乙烯40氢化蓖麻油（RH40）、蓖麻油聚氧乙烯醚40（EL40）、吐温80和泊洛沙姆188中的任意一种，或者前述的任意一种与Span80组成的混合物。这些表面活性剂对人体低毒、安全、无刺激。

所述助表面活性剂可以为无水乙醇、1,2-丙二醇、聚乙二醇400（PEG400）和丙三醇中的一种或两种以上。

所述禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂的制备方法，其包括如下步骤：按比例取牛至油、表面活性剂和助表面活性剂在室温（25℃）条件下搅拌均匀；然后向其中加入溶有川楝素、绿茶提取物、香菇多糖和原花青素的水溶液，混匀即可。在制作过程中，随着溶有川楝素、绿茶提取物、香菇多糖和原花青素的水溶液的缓慢加入，体系黏稠度逐渐增大，当加入水溶液的量使体系由油包水变为水包油型纳米乳时，体系粘稠度从最粘稠的状态变稀，此时产生的即是无色或淡黄色透明的禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂。本发明原料也可根据需要经胶囊包封或经冻干粉技术等处理后口服使用。

川楝素、绿茶提取物、香菇多糖和原花青素均可选用普通市售产品。本发明中，川楝素购自陕西汇能达生物科技有限公司，绿茶提取物购自西安源森生物科技有限公司产品，香菇多糖购自上海康舟真菌多糖有限公司产品，原花青素购自西安瑞林生物科技有限公司产品。

纳米乳（nanoemulsion）又称微乳（microemulsion），是由水、油、表面活性剂和助表面活性剂等自发形成粒径为1～100nm的热力学稳定、各向同性、透明或半透明的均相分散体系。一般来说，纳米乳分为三种类型，即水包油型纳米乳(O/W)、油包水型纳米乳(W/O)以及双连续型纳米乳(B.C)。1943年由Hoar和Schulman首次发现并报道了这一分散体系。直到1959年，Schulman才提出“microemulsion”这一概念。此后，纳米乳的理论和应用研究获得了迅速的发展。目前，纳米乳化技术已渗透到日用化工、精细化工、石油化工、材料科学、生物技术以及环境科学等领域，成为当今国际上具有巨大应用潜力的研究领域。纳米乳具有许多其它制剂无可比拟的优点：①为各向同性的透明液体，属热力学稳定系统，经热压灭菌或离心也不能使之分层；②工艺简单，制备过程不需特殊设备，可自发形成，纳米乳粒径一般为1～100nm；③黏度低，可减少注射时的疼痛；④具有缓释和靶向作用；⑤提高药物的溶解度，减少药物在体内的酶解，可形成对药物的保护作用并提高胃肠道对药物的吸收，提高药物的生物利用度。

川楝素：为川楝树根皮及树皮提取出的有效成分，能使体内肠寄生虫体自发尖动加强，出现间歇性剧烈收缩，致虫体失掉附着能力而驱使排出体外。驱虫治癣，用于虫积湿癣，有效率在98%以上。

绿茶提取物：其中的重要成分茶多酚能明显降低高脂血症的血清总胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白胆固醇含量，同时具有恢复和保护血管内皮功能的作用。茶多酚可阻断脂质过氧化过程，提高机体内酶的活性，从而起到抗突变、抗癌症的功效。茶多酚可抑制肿瘤细胞DNA的合成，诱使突变的DNA断裂，因而可抑制肿瘤细胞的合成率，进一步抑制肿瘤的生长增殖。茶多酚能杀灭肉毒杆菌及孢子，抑制细菌外毒素的活性，对引起腹泻、呼吸道和皮肤感染的各种病原菌有抗菌作用。茶多酚对引起化脓性感染、烧伤、外伤的金黄色葡萄球菌、变型杆菌有明显的抑制作用。茶多酚还具有改善肝功能和利尿作用，因而对生物碱中毒有较好的抗解作用。茶多酚通过提高人体免疫球蛋白总量并使其维持在高水平，刺激抗体活性的变化，从而提高总体免疫能力，并可促进自身调理功能。

香菇多糖：现代药理学研究表明香菇多糖可防止化学因素或病毒引起的致癌作用，抑制肿瘤的转时，它还能增强宿主对不同细菌、寄生虫起抵抗作用。香菇多糖也能恢复或加强宿主对淋巴细胞、激素及其他生物活性因子的反应，通过刺激免疫活性细胞的成熟、分化和繁殖使机体的淋巴细胞大量增加，从而提高机体的免疫功能。

原花青素：其中的单宁对真菌、细菌和酵母等微生物具有毒害作用，机理可能涉及抑制微生物的胞外酶系，剥夺微生物必须的底物，通过抑制氧化磷酸化作用而直接作用于微生物的代谢以及剥夺微生物的铁、锌等离子环境。但是许多微生物可以克服单宁的毒害，采用的机制主要有合成能与单宁形成复合物的聚合物、氧化、降解以及合成铁载体等，使单宁解毒。

牛至油：主要活性成分是酚醛萜烯如香芹酚、百里酚和P-伞花烃。如今香芹酚已用作抗感染和驱虫的药物。它也可用于伤风、感冒、咽痛、耳痛、肺部感染、感染性疾病、关节炎、肌肉痉挛、头痛、大肠杆菌、肝炎、病毒性肺炎、脑膜炎、莱姆病、过敏症、支气管炎、腹泻、牙龈炎、鼻窦炎、哮喘、湿疹、神经炎、踝关节曲折、前列腺癌、寄生虫病、银屑病、溃疡、蚊虫叮咬、胃炎和霉菌病等。而百里酚可用作驱虫剂和防腐剂。

本发明在药物中加入刺激性小的助表面活性剂（如乙醇、1,2-丙二醇、丙三醇或聚乙二醇400），除了助溶作用外，还可以调整表面活性剂的亲水亲油平衡值（HLB），使得油水界面张力进一步降低，增大界膜的油水性和刚性。助表面活性剂掺入到界面膜中，促进曲率半径很小膜的形成，扩大纳米乳的乳区面积。

本发明复方牛至油纳米乳制剂通过口服给药，极大的提高了牛至油的溶解度，减少药物在体内的首过效应，促进牛至油的胃肠道吸收，并创新性地将水溶性药物和脂溶性药物有机的结合起来，提高了药物的治疗能力。牛至油为脂溶性植物油，人体对药物的转运及吸收极其困难，纳米乳基质为牛至油提供良好的溶解环境，口服时可经淋巴吸收，克服首过效应和分子通过胃肠道时的屏障。通过加入牛至油，另一方面还提高了川楝素、绿茶提取物、香菇多糖和原花青素的抗虫能力，治疗效果更佳。该口服纳米乳制剂组方健康、合理、安全性高、并且兼具保健与治疗的双重效果，显著增强了抗球虫效果，延长其药物的半衰期，减少了给药次数，无耐药反应，通过现代制药技术进行制备，疗效好，禽类口服给药，使用方便，且制备方法简单、耗能低。

与现有技术相比，本发明复方牛至油口服纳米乳制剂具有以下优点：

1）本发明复方牛至油口服纳米乳制剂为均匀、透明的纳米乳体系。

2）本发明复方牛至油口服纳米乳制剂药物分布均匀，体系透明、渗透性高，溶解度好，有较低的表面张力，具有良好的流动性，服用方便。

3）本发明复方牛至油口服纳米乳制剂给药后迅速被网状内皮细胞吞噬，使药物迅速起效，并维持恒定的血药浓度及药理效应，提高药物的生物利用度，增强药效、减少药物的用量和使用次数，用于治疗球虫病疗效显著，可极大提高雏鸡存活率。

4）本发明复方牛至油口服纳米乳制剂制备方法简单，药效稳定，耗能低。

具体实施方式

以下通过具体实施例来说明本发明的技术方案，但本发明的保护范围并不局限于此。

实施例 1

一种禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂，其由下述比例原料制成：牛至油11g、蓖麻油聚氧乙烯醚40（EL40）32g、无水乙醇7g、川楝素6g、绿茶提取物8g、香菇多糖7g、原花青素0.3g和水28.7g。

所述禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂的制备方法，其包括如下步骤：按比例取牛至油、表面活性剂和助表面活性剂在室温（25℃）条件下搅拌均匀；然后向其中缓慢滴入溶有川楝素、绿茶提取物、香菇多糖和原花青素的水溶液，混匀即可。

实施例 2

一种禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂，其由下述比例原料制成：牛至油7.5g、EL40 26g、1,2-丙二醇12g、川楝素5g、绿茶提取物3g、香菇多糖8g、原花青素0.6g和水37.9g。

所述禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂的制备方法参照实施例1。

实施例 3

一种禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂，其由下述比例原料制成：牛至油9.5g、聚氧乙烯40氢化蓖麻油（RH40）、25g、丙三醇18g、川楝素8g、绿茶提取物7g、香菇多糖6g、原花青素0.5g和水26g。

所述禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂的制备方法参照实施例1。

实施例 4

一种禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂，其由下述比例原料制成：牛至油10.2g、RH 40 35g、无水乙醇5g、川楝素6g、绿茶提取物3g、香菇多糖5.4g、原花青素0.4g和水35g。

所述禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂的制备方法参照实施例1。

实施例 5

一种禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂，其由下述比例原料制成：牛至油8.7g、吐温80 20g、丙三醇 15g、川楝素3g、绿茶提取物5g、香菇多糖5.8g、原花青素0.5g和水42g。

所述禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂的制备方法参照实施例1。

实施例 6

一种禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂，其由下述比例原料制成：牛至油9.1g、吐温80 30g、PEG400 6g、川楝素5g、绿茶提取物5g、香菇多糖5.4g、原花青素1.1g和水38.4g。

所述禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂的制备方法参照实施例1。

实施例 7

一种禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂，其由下述比例原料制成：牛至油9.1g、RH 40 14g、吐温80 16g、丙三醇2g、1,2-丙二醇4g、川楝素5g、绿茶提取物5g、香菇多糖5.4g、原花青素1.1g和水38.4g。

所述禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂的制备方法参照实施例1。

为了进一步验证本发明禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂对鸡球虫病的治疗效果，特进行如下试验例。

本试验选取自然发病的鸡球虫病病例进行治疗试验，结合临床症状、鸡球虫病的卵囊排出率和饲料报酬等指标，对本发明口服纳米乳制剂的治疗效果进行评价，并用市售产品鸡球虫散作为对照。

试验动物

某县某镇某种鸡场疑似球虫病鸡，雏鸡约30日龄，病鸡精神沉郁，羽毛蓬松，头卷缩，食欲减退，嗉囊内充满液体，鸡冠和可视粘膜贫血、苍白，逐渐消瘦，病鸡常排红色胡萝卜样粪便。经症状观察、粪便镜检和解剖检查，确诊为鸡球虫病患病鸡，根据小肠浆膜散在的出血点和肿胀的盲肠，诊断为混合球虫感染，共200只，全部患病雏鸡供试验用。

试验药物

实施例1所述禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂，鸡球虫散（购自山东泰安海纳药业有限公司）。

试验动物的处理

试验鸡接回后，随机分为两组（即试验组和对照组），每组各100只，组内分为5个重复。分组完毕，试验组雏鸡喂给4g/L的实施例1口服纳米乳制剂饮水，对照组雏鸡喂给625g/L的鸡球虫散饮水，以5d为一个疗程。疗效判定标准如下：

鸡群主要临床症状未见减轻，12h内血便排出无变化，粪便多量卵囊检出，判定为无效。

鸡群主要临床症状消失，12h内排出多量血便（血便记分1分以上，不包括1分），粪便少量卵囊排出判定为有效。

鸡群主要临床症状消失，12h内排出少量（血便记分1以下，包括1分）粪便无卵囊检出判定为显效。

鸡群主要临床症状消失，12h内血便停止，粪便中无卵囊检出，判定为治愈。

检测指标

（1）平均增重：给药前，对各组雏鸡逐只称重作为初重，试验结束时称重作为末重，两者差值与组内存活雏鸡数之比即为平均增重。

（2）血便记分：用药后24h即开始进行血便记分，按血便程度不同划分5个等级：粪便正常不带血，记0分；粪便中带有少量血，记为1分；粪便中带有较多量血记为2分；粪便中带有较多量血，其他是白色粘液或1/3是血，记3分；全部为血便或2/3是血，其它为白色粘液，记4分。

（3）存活率：试验结束各组存活雏鸡数与组内容量雏鸡数比值。

（4）卵囊排出率：未分组前，记录鸡群前1d粪便中卵囊排出情况。给药后每隔24h收集各组粪便，充分混匀后进行克粪便卵囊计数，直至试验结束。

（5）饲料转化率：试验过程中，饲喂前对各组饲料进行称重，试验结束时收集各组剩余饲料，计算试验过程中饲料消耗量；试验结束，停饲8h后对各组存活雏鸡空腹称重，计算各组总增重，随后计算各组的饲料报酬。

试验结果

1 临床症状

患病鸡喂药后约18h，各组临床症状和血便明显减轻，血便记分见表2。试验组于给药后第3天在粪便中观察到盲肠芯样排出物，对照组于给药后第4天在粪便中检出盲肠芯样物。给药后第4天两组鸡血便均停止，其中试验组无明显临床症状表现，但对照组仍有较明显的临床症状。给药后第5天两组鸡临床症状消失，无血便。第6日停药。试验期间，试验组共死亡雏鸡3只，对照组死亡雏鸡16只。

2平均增重

如表1，试验组和对照组鸡用药前组间平均体重无显著差异（P＞0.05），表明随机分组是正确的；治疗结束，两组平均增重无显著差异（P＞0.05）。

3 血便记分

如表2所示，用药后，试验组和对照组鸡均能显著减轻血便；并且用药后24h，试验组血便记分显著（P＜0.05）低于对照组；用药后第96h，试验组和对照组血便停止。

4 死亡率

试验组和对照组鸡存活率显著高于对照组（P＜0.05），见表3。

5 卵囊排出

用药后（见表4）试验组和对照组鸡均明显促进卵囊排出，且用药后第1天，一试验组卵囊排出显著低于对照组（P＜0.05）；用药后第4天试验组粪便中无卵囊检出，对照组第6天，粪便中无卵囊检出。

6 饲料转化率

表5可见，试验组和对照组鸡饲料报酬无明显差异。

上述临床试验表明，试验组鸡4g/L饮水在用药后第4天即显效，第5天治愈。用药后第2天，试验组鸡血便记分显著低于对照组（P＜0.05）；用药后第3天，试验组鸡粪便中发现盲肠芯排出，说明本发明复方牛至油口服纳米乳制剂比鸡球虫散更能促进盲肠芯排出，暗示盲肠蠕动作用增强，利于有毒物质排出，促进机体疾病转归。试验组鸡存活率显著高于对照组，表明本发明复方牛至油口服纳米乳制剂的疗效较鸡球虫散更显著，更能提高雏鸡的存活率，从而减少由于雏鸡死亡造成的经济损失。

综上，4g/L本发明复方牛至油口服纳米乳制剂饮水对自然病例鸡球虫病治疗效果显著且用量少，可显著提高雏鸡存活率，降低卵囊排出，促进盲肠芯排出，减轻球虫病对小肠黏膜的损害，利于短时间内雏鸡生产能力的恢复。

Claims (6)

1.一种禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂，其特征在于，由下述重量百分比原料制成：

牛至油 1−30%，

表面活性剂 10−40%，

助表面活性剂 1−20%，

川楝素 1−20%，

绿茶提取物 1−20%，

香菇多糖 1−20%，

原花青素 0.1−10%，

余量为水，上述原料的重量百分比之和为100％。

2.如权利要求1所述的禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂，其特征在于，由下述重量百分比原料制成：

牛至油 5−20%，

表面活性剂 15−40%，

助表面活性剂 1−15%，

川楝素 1−15%，

绿茶提取物 1−15%，

香菇多糖 1−15%，

原花青素 0.1−3%，

余量为水。

3.如权利要求2所述的禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂，其特征在于，由下述重量百分比原料制成：

牛至油 11%，

表面活性剂 32%，

助表面活性剂 7%，

川楝素 6%，

绿茶提取物 8%，

香菇多糖 7%，

原花青素 0.3%，

余量为水。

4.如权利要求1至3任一所述的禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂，其特征在于：所述表面活性剂为聚氧乙烯40氢化蓖麻油、蓖麻油聚氧乙烯醚40、吐温80和泊洛沙姆188中的任意一种或与Span80组成的混合物。

5.如权利要求1至3任一所述的禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂，其特征在于：所述助表面活性剂为无水乙醇、1,2-丙二醇、聚乙二醇400和丙三醇中的一种或两种以上。

6.权利要求1至3任一所述禽用抗球虫复方牛至油口服纳米乳制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：按比例取牛至油、表面活性剂和助表面活性剂在室温条件下搅拌均匀；然后向其中加入溶有川楝素、绿茶提取物、香菇多糖和原花青素的水溶液，混匀即可。