CN103251636B

CN103251636B - 一种治疗念珠菌感染及其所引起疾病的药物及其制备方法

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Publication number: CN103251636B
Application number: CN201210035192.0A
Authority: CN
Inventors: 童微星; 阮约思; 陈培莹; 戴佳丽; 柳宏巧
Original assignee: Ningbo Institute of Technology of ZJU
Current assignee: Ningbo Institute of Technology of ZJU
Priority date: 2012-02-16
Filing date: 2012-02-16
Publication date: 2015-06-10
Anticipated expiration: 2032-02-16
Also published as: CN103251636A

Abstract

本发明涉及一种治疗念珠菌感染及其所引起疾病的药物及其制备方法，其特征在于是以阿萨茶皂素A为原料药，其中阿萨茶皂素A是从油茶籽粕中直接分离或者从茶皂素复合物中分离得到的一种单体物质，制备时以硬脂酸、硬脂酸甘油酯、麻油、甘油、三乙醇胺、羟苯乙酯和水为基质，其中硬脂酸、硬脂酸甘油酯和麻油作为油相，甘油、三乙醇胺、羟苯乙酯和水作为水相；将阿萨茶皂素A先溶解于水相中；再将水相与油相混合乳化成为乳膏剂。本发明的药物对于治疗念珠菌感染及其所引起的疾病具有良好疗效，可抑制或杀死浅部组织和深部组织器官内的念珠菌(假丝酵母菌)，使其感染所引发的炎症、溃烂等病症缓解或消失，并且使用安全无毒，同时制备工艺简单，易操作。

Description

一种治疗念珠菌感染及其所引起疾病的药物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种治疗念珠菌(假丝酵母菌)感染及其所引起的疾病的药物及其制备方法，该药物是从油茶籽(粕)中直接分离得到或者从茶皂素复合物中分离得到的一种单体化合物。

背景技术

真菌(fungus；eumycetes)是具有细胞核和细胞壁而不含叶绿素和质体的异养生物。种属很多，通常又分为三类，即酵母菌、霉菌和蕈菌(大型真菌)，它们归属于不同的亚门。

临床上仅侵犯人体皮肤的角蛋白组织、毛发、指(趾)甲等浅部组织的真菌称为浅部真菌，其感染称为“癣”，如头癣、脚癣、股癣、花斑癣等；而深部真菌可感染皮肤、粘膜、皮下组织，甚至全身的各种组织器官；有些真菌，如念珠菌(假丝酵母菌)既可引起浅部又能引起深部真菌病。

茶皂素(茶皂甙)是从油茶籽粕中提取的五环三萜类化合物，由糖体、甙元及有机酸组成。目前，国内所述的茶皂素是一类五环三萜类化合物的复合物；Toshiyuki Murakam等(Toshiyuki MURAKAMI,Junko NAKAMURA,Tadashi KAGEURA,etl.BioactiveSaponins and Glycosides.Ⅹ Ⅴ Ⅱ.1)Inhibitory Effect on Gastric Emptying and AcceleratingEffect on Gastrointestinal Transit of Tea Saponins:Structures of Assamsaponins F,G,H,I,and Jfrom the Seeds and Leaves of the Tea Plant,Chem.Pharm.Bull.2000,48(ll):1720-1725.)，从油茶中分离到近20种茶皂素的单体成分。朱一元等(朱一元，金继曙，赵丽华等.茶皂素体外抗真菌作用和治疗皮肤癣菌病的疗效观察，中国皮肤性病学杂志，1992，6(2)：73-74)研究表明，茶皂素有较好的抗菌作用，对浅表真菌感染具有治疗效果。但是，未有文献报道究竞是茶皂素中的哪一种成分起到抗菌作用，从而限制了茶皂素在药物开发中的应用。我们从油茶籽粕中直接分离或者从茶皂素复合物中分离得到了一种单体物质---阿萨茶皂素A(assamsaponin A)，研究发现阿萨茶皂素A具有治疗念珠菌(假丝酵母菌)感染及其所引起的疾病的良好疗效。

近年来深部真菌感染在临床上显著增多，各种免疫缺陷者的发病率更高，严重深部真菌感染的死亡率高，可达50％以上。深部真菌感染在临床上主要是念珠菌(假丝酵母菌)的感染，资料显示深部感染的真菌中念珠菌(假丝酵母菌)占到94.3，(杨来智，林广城等.深部真菌的临床分布及药敏结果分析,现代检验医学杂志，2005，20(5)：16-18.)，如今念珠菌(假丝酵母菌)已是美国第六位院内感染的常见致病菌、第四位院内血行感染的病原(张永信,深部真菌感染及抗真菌药的应用，上海医药，2004，25(8):341-343.)。近几年国内调查显示，由念珠菌(假丝酵母菌)等真菌引起的医院感染已上升到了17.45％。目前，治疗深部真菌感染的药物主要有多烯类、氟胞嘧啶和吡咯类药物，而这些物药都具有较大的毒副作用，如肝毒性、心率紊乱、心脏骤停、抑制骨髓造血、致畸等；所以，筛选天然低毒的抗念珠菌(假丝酵母菌)的新型药物具有十分重要的价值和意义。

发明内容

本发明所要解决的第一个技术问题是提供一种治疗念珠菌感染及其所引起疾病的药物，具有良好的抗念珠菌的性能，并且安全无毒。

本发明所要解决的第二个技术问题是提供一种治疗念珠菌感染及其所引起疾病的药物制备方法，以天然植物中提取，原料绿色无毒，制备工艺简单，制得的药物对于治疗念珠菌感染及其所引起的疾病的具有良好疗效。

本发明解决上述第一个技术问题所采用的技术方案为：一种治疗念珠菌感染及其所引起疾病的药物，其特征在于药物组分含有阿萨茶皂素A，其中阿萨茶皂素A是从油茶籽粕中直接分离或者从茶皂素复合物中分离得到的一种单体物质，其结构式如下：

作为优选，所述药物组分还有药物辅料，至少包括硬脂酸、硬脂酸甘油酯、麻油、甘油、三乙醇胺和羟苯乙酯，所述阿萨茶皂素A和这些药物辅料的质量份数为：

作为改进，所述药物的剂型为乳膏剂、栓剂、片剂、胶囊剂或注射剂。

最后，所述药物的剂型优选为乳膏剂。

本发明解决上述另一个技术问题所采用的技术方案为：一种治疗念珠菌感染及其所引起疾病的药物制备方法，其特征在于步骤为：

1)按以下组分的质量份数进行称量配比：

所述阿萨茶皂素A是从油茶籽粕中经过溶剂萃取和柱层析分离或者从茶皂素复合物中分离得到的一种单体物质；

2)以硬脂酸、硬脂酸甘油酯和麻油作为油相，甘油、三乙醇胺、羟苯乙酯和蒸馏水作为水相，将阿萨茶皂素A先溶解于水相中；

3)将水相与油相混合乳化成为乳膏剂。

作为改进，所述步骤2)的阿萨茶皂素A先溶解于水相中的具体过程为：取蒸馏水和阿萨茶皂素A，溶解后再加入甘油、三乙醇胺、羟苯乙酯，加热至55～65℃，使溶解。

最后，所述步骤3)的水相与油相混合乳化的具体过程为：将油相辅料硬脂酸、硬脂酸甘油酯和麻油，加热至75～85℃熔化，再冷到55～65℃时与步骤2)制得的水相混合并搅拌乳化，冷却至室温即可。

与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明是以从油茶籽粕中直接分离或者从茶皂素复合物中分离得到了的阿萨茶皂素A作为原料药，制作的药物对于治疗念珠菌感染及其所引起的疾病的具有良好疗效，可抑制或杀死浅部组织和深部组织器官内的念珠菌(假丝酵母菌)，使其感染所引发的炎症、溃烂等病症缓解或消失。本发明抗真菌效果好，使用安全无毒，并且制备工艺简单，易操作。

附图说明

图1是阿萨茶皂素A(assamsaponin A)的化学结构式；

图2是本发明实施例中纸片扩散法的抑菌试验结果，其中的1、2为假丝酵母菌CGMCC 2.2086的抑菌实验结果，3、4为假丝酵母菌CGMCC 2.3990的抑菌试验结果，①、②、③、④、⑤、⑥、⑦、⑧滤纸片的阿萨茶皂素A含量分别为0.4、0.3、0.2、0.15、0.1、0.05、0.025、0(对照组)mg。

具体实施方式

以下结合附图实施例对本发明作进一步详细描述。

一种治疗念珠菌感染及其所引起疾病的药物制备方法，具体步骤为：

配方：取阿萨茶皂素A 1g、硬脂酸2.4g，硬脂酸甘油酯0.8g，麻油4g，甘油2g，三乙醇胺0.3g，羟苯乙酯0.01g，蒸馏水10g。可以根据阿萨茶皂素A的用量按此比例缩小或放大；

工艺：取蒸馏水和阿萨茶皂素A，溶解后再加入甘油、三乙醇胺、羟苯乙酯，加热至60℃，使溶解；另取硬脂酸、硬脂酸甘油酯和麻油，加热至80℃熔化，再冷到60℃时与水相混合并搅拌乳化，冷却至室温即可。

下面对阿萨茶皂素A的抗念珠菌(假丝酵母菌)性能进行进一步分析。

阿萨茶皂素A在体外抗念珠菌(假丝酵母菌)的试验：本发明选用2株假丝酵母菌作为供试菌用滤纸片扩散法和微量稀释法试验阿萨茶皂素A的抗念珠菌(假丝酵母菌)效果以及其最低抑菌浓度。

滤纸片扩散法试验阿萨茶皂素A的抗念珠菌(假丝酵母菌)效果方法：将活化后的供试菌菌悬液用血细胞计数板将其浓度调至1～5×10⁶CFU·mL-1，用无菌棉签浸湿菌液，让棉签在试管壁上轻轻挤压，挤掉多余的酵母菌悬液，再用棉签的侧面在制备好的沙保氏琼脂培养平板上涂布试验菌。将涂好供试菌的平板划分区域，做好标注，再在每个区域内贴上直径为9mm的灭菌滤纸片；将阿萨茶皂素A溶液添加于滤纸片上，使每个滤纸片上阿萨茶皂素A含量分别为0.4、0.3、0.2、0.15、0.1、0.05、0.025、0(对照组)mg。倒置于37℃恒温培养箱内培养24～48小时，观察是否出现抑菌圈，并用游标卡尺测量抑菌圈大小。从图2和表1可以看到，阿萨茶皂素A对于假丝酵母菌CGMCC 2.2086和2.3990都具有抑制作用，当滤纸片中阿萨茶皂素A的含量达到0.2mg时，抑菌圈直径(d)均大于了14mm，表现出了明显的抑菌效果。

微量稀释法试验阿萨茶皂素A的抗念珠菌(假丝酵母菌)最低抑菌浓度方法：用微量移液器分别加入一定量的阿萨茶皂素A溶液到灭菌过的试管中，使阿萨茶皂素A的含量分别为0.5、0.4、0.3、0.25、0.2、0.1、0.05、0(对照)mg，用灭菌的纯水将各试管的液体补足至0.1mL；再将细胞浓度为1～5×10⁶CFU·mL^-1的菌悬液按1：2000的比例用灭菌好的沙保氏液体培养基进行稀释，混匀，分别取0.9mL加入到含有不同量的阿萨茶皂素A的试管内。摇匀后置于37℃恒温培养箱内静止培养48小时，观察有无菌体生长；不出现菌体生长的试管中的阿萨茶皂素A的最低含量为最低抑菌浓度。试实验结果表明，阿萨茶皂素A对于假丝酵母菌CGMCC2.2086的最低抑菌浓度为0.3mg·mL^-1，对于假丝酵母菌CGMCC2.3990的最低抑菌浓度为0.2mg·mL^-1。

表1滤纸片扩散法测试阿萨茶皂素A抗假丝酵母菌的结果

经病例试验，阿萨茶皂素A所制备的乳膏对皮肤念珠菌病指间糜烂(10例)、甲沟炎(5例)和甲床炎(5例)疗效显著，每天早、晚在患处各涂抹1次，7-10天即可治愈，无明显毒性反应和副作用。

Claims

1.一种治疗念珠菌感染及其所引起疾病的药物，其特征在于药物组分含有阿萨茶皂素A，其中阿萨茶皂素A是从油茶籽粕中直接分离或者从茶皂素复合物中分离得到的一种单体物质，其结构式如下

所述药物组分含有药物辅料，药物辅料至少包括硬脂酸、硬脂酸甘油酯、麻油、甘油、三乙醇胺和羟苯乙酯，所述阿萨茶皂素A和这些药物辅料的质量份数为：

2.根据权利要求1所述的药物，其特征在于所述药物其剂型为乳膏剂、栓剂、片剂、胶囊剂或注射剂。

3.根据权利要求2所述的药物，其特征在于所述药物其剂型为乳膏剂。

4.一种治疗念珠菌感染及其所引起疾病的药物制备方法，其特征在于步骤为：

1)按以下组分的质量份数进行称量配比：

3)将水相与油相混合乳化成为乳膏剂。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述步骤2)的阿萨茶皂素A先溶解于水相中的具体过程为：取蒸馏水和阿萨茶皂素A，溶解后再加入甘油、三乙醇胺、羟苯乙酯，加热至55～65℃，使溶解。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述步骤3)的水相与油相混合乳化的具体过程为：将油相辅料硬脂酸、硬脂酸甘油酯和麻油，加热至75～85℃熔化，再冷到55～65℃时与步骤2)制得的水相混合并搅拌乳化，冷却至室温即可。

7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述阿萨茶皂素A是从油茶籽粕中或者从茶皂素复合物中经过溶剂萃取和柱层析分离得到的一种单体物质。