CN103536698B - 一种中药组合物在制备治疗血管性痴呆的药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种中药组合物在制备治疗血管性痴呆药物中的药物新应用，所述中药组合物的原料药组成为：钩藤170-510重量份、川芎150-450重量份、麻黄80-240重量份、细辛80-240重量份、制附子80-240重量份、白芍100-300重量份、羌活80-240重量份、独活50-150重量份、防风80-240重量份、地黄80-240重量份、当归80-240重量份、鸡血藤250-750重量份、桃仁100-300重量份、红花100-300重量份、白芷80-240重量份。所述中药组合物，对脑慢性低灌注血管性痴呆、多发性脑梗死血管性痴呆、皮层下缺血性血管性痴呆具有良好的疗效，可改善患者的学习记忆能力及行为能力。

Description

一种中药组合物在制备治疗血管性痴呆的药物中的应用

技术领域

本发明涉及一种中药组合物的药物新用途，具体地说是一种中药组合物在制备治疗血管性痴呆的药物中的新应用。

背景技术

血管性痴呆，指因脑血管疾病所致的严重认知功能障碍综合征，可以是这些血管本身的病变，也可以是颅外大血管及心脏的病变，间接影响脑内血管，供血不足而致脑组织缺血缺氧性改变，最终使大脑功能全面衰退。其病因主要可以分为：脑动脉闭塞导致的多发性梗死和脑组织容积减少、缺血和缺氧性低灌注、皮质下白质病变、出血性病变、各种类型的炎症性脑血管病。

目前，西医对血管性痴呆的治疗，采用的药物无外乎脑血循环促进剂、脑代谢激活剂、钙离子拮抗剂、神经生长因子、神经营养因子或胆碱酯酶抑制剂中的一种或多种。但是，上述药物在治疗血管性痴呆时，通常伴有一定的副作用，同时，其中一些药物或疗效不理想或价格过高。

发明内容

为此，本发明提供了一种中药组合物用于制备治疗血管性痴呆的药物中的新用途，所述中药组合物的原料药组成为：

进一步的，所述组合物的原料药优选为：

进一步的，所述血管性痴呆是指脑慢性低灌注血管性痴呆。

所述血管性痴呆是指多发性脑梗死血管性痴呆。

所述血管性痴呆是指皮层下缺血性血管性痴呆。

所述治疗作用是指改善学习记忆能力及行为能力。

所述中药组合物加入常规辅料按照常规工艺制成临床上可接受的胶囊剂、片剂、丸剂、颗粒剂。

本发明所述药物组合物制成丸剂时的药品名称为正天丸，其原料药处方、制备方法及质量检测方法均明确记载于中国专利CN1931276A和CN1895438A中，本发明所涉及的药物组合物可参照上述两篇专利文献中记载的方案进行。本发明所述药用剂量只需参照现有记载的正天丸的剂型效果即可。

本发明所述方案具有如下优点：

本发明所公开的现有药物组合物具有改善或治疗血管性痴呆，包括但不限于脑慢性低灌注血管性痴呆、多发性脑梗死血管性痴呆、皮层下缺血性血管性痴呆的作用及效果，且实验证明对于改善患者的学习记忆能力及行为能力具有疗效。

下述实验例证明本发明所述方案的技术效果。

实验例

实验一本发明的中药组合物对脑慢性低灌注血管性痴呆大鼠的药效学研究

1实验目的

本研究旨在评价本发明的中药组合物对慢性低灌注血管性痴呆大鼠的作用。

2实验材料

2.1实验动物

成年健康SD大鼠，雄性，体重(200±50)g，购自北京维通利华公司。饲养于室内通风柜内，恒温(22±2)℃，自然昼夜，自由食水。

2.2受试药物

实施例1得到的丸剂，粉碎，过100目筛，临用前以蒸馏水按所需浓度配制成水溶液。冰箱保存，用时提前取出，恢复至接近室温，摇匀，备用。

2.3实验试剂

0.9％生理盐水(河北天成药业有限公司，批号：10032403)；水合氯醛(天津市光复精细化工研究所生产，批号：20101114，以生理盐水配制成10％的水合氯醛溶液，备用)，喜得镇组(甲磺酸双氢麦角毒碱片)，天津华津制药厂生产，批号：100381；青霉素注射液，华北制药股份有限公司产品，批号：F1008310；硫酸庆大霉素注射液，河南天方药业股份有限公司产品，批号：101230320。

2.4实验仪器及器械

常规手术器械。

3实验方法

3.1造模方法

采用持久性双侧颈总动脉结扎无菌操作，手术时用10％水合氯醛400mg/kg(0.3mL/kg)，腹腔注射麻醉后仰卧，保证大鼠手术期间有自主呼吸；待翻正反射消失后，将大鼠仰卧位固定，颈前部去毛，消毒后沿正中线切开，分离双侧颈总动脉，用1号线将其永久结扎，以确保动脉血流阻断；缝合颈部肌肉和皮肤，用青霉素钠涂抹伤口。术后连用3d青霉素钠40U/只肌肉注射以预防感染，送至通风条件良好的笼内饲养。空白对照组不做任何处理。

3.2动物分组

将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、喜得镇组，本发明的中药组合物的低剂量组、中剂量组、高剂量组，共6组，每组10只。

3.3给药的方法

实施例1得到的粉末水溶液，高、中、低剂量组分别为6.4g/kg(3.2g/kg*2次)、3.2g/kg、1.6g/kg，配制药液浓度分别为0.32g/ml、0.32g/ml及0.16g/ml。浸膏组i.g.阳性对照组i.g.喜得镇水溶液，剂量为0.5mg/kg(浓度为0.05mg/ml)，均连续给药30天。正常对照组和模型组每天i.g.等体积(1ml/100g体重)生理盐水。

3.4检测指标

3.4.1行为学检测

①观测指标：逃避潜伏期和穿越平台次数。逃避潜伏期，主要用于测试大鼠的学习能力，逃避潜伏期越短，其学习能力越强。穿越平台次数，主要用于测试大鼠记忆能力，穿越平台次数越多，其记忆能力越强。于末次给药后用Morris水迷宫检测以上两项指标。②定位航行实验：用于测定逃避潜伏期。连续4d，每只大鼠每天从4个不同的象限入水进行训练各1次，记录在60s内大鼠从入水到爬上平台所需时间，此即为逃避潜伏期。训练中，大鼠在60s内未找到平台，由实验者用棒将其引上台，并让其站立10s。逃避潜伏期记为60s。大鼠从平台处下来休息10s之后，再按序由1个入水点入水进行下1次实验。取其平均值。③空间探索实验：用于测定穿越平台次数。第5天撤出平台任选1个入水点将大鼠放入水槽，上下午各1次，记录60s内穿越平台所在象限的次数。

3.4.2抗氧化酶活性测定

大鼠取血后，迅速断头取脑。在冰盘上将每个脑组织行正中矢状切分，在冰盘上取出一侧大脑电子天平称重，按1∶9(每克脑组织加9ml冷生理盐水)，在冰浴中用玻璃匀浆器碾磨制成10％脑组织匀浆，将匀浆分为数分，-80℃低温冰箱保存。丙二醛(MDA)含量测定用硫代巴比妥酸(TBA)法，超氧化物歧化酶(SOD)活性测定用黄嘌呤氧化酶法，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性测定用二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)法，组织蛋白定量采用考马斯亮蓝法。SOD、MDA、GSH-Px及蛋白定量测试盒均由南京建成生物工程研究所提供。

3.5统计方法

数据用SPSS11.5统计软件处理，以均数±标准差表示，单因素方差分析(one-way-ANOVA)统计，组间两两比较采用LSD法和SNK法。以P＜0.05为差异有显著意义。

4结果

4.1行为学结果

表1水迷宫定位航行实验

﹡p<0.05与模型组比较 #p<0.05与对照组比较 ﹡﹡p<0.01与模型组比较

表2空间探索实验

﹡p<0.05与模型组比较 #p<0.05与对照组比较

4.2各组脑组织SOD比较

表3脑组织超氧化物歧化酶比较

﹡p<0.05与模型组比较 #p<0.05与对照组比较

4.2各组脑组织MDA比较

表4脑组织丙二醛比较

4.2各组脑组织GSH-px比较

表5脑组织谷胱甘肽过氧化物酶比较

﹡p<0.05与模型组比较 #p<0.05与对照组比较 ﹡﹡p<0.01与模型组比较

5结论

从以上结果可以看出，在定位航行实验中，本发明的中药组合物低、中、高剂量组对大鼠的记忆功能均有所改善，且随药物剂量的增加呈现一定的趋势，与模型组比较有显著性差异，在空间探索实验中，模型组穿越目标区域次数明显少于对照组且有统计学差异，而本发明的中药组合物低、中、高剂量组的表现也明显好于模型组，与模型组比较有显著性差异，在氧化应激的指标的检测中，本发明的中药组合物显示了一定的抗氧化活性。

实验二本发明的中药组合物对多发性脑梗死血管性痴呆大鼠的药效学研究

1实验目的

本研究旨在评价本发明的中药组合物对多发性脑梗死血管性痴呆大鼠的作用。

2实验材料

2.1实验动物

成年健康SD大鼠，雄性，体重(300±20)g，购自北京维通利华公司。饲养于室内通风柜内，恒温(22±2)℃，自然昼夜，自由食水。

2.2受试药物

实施例1的丸剂，粉碎，过100目筛，临用前以蒸馏水按所需浓度配制成水溶液。冰箱保存，用时提前取出，恢复至接近室温，摇匀，备用。

2.3实验试剂

0.9％生理盐水(河北天成药业有限公司，批号：10032403)；水合氯醛(天津市光复精细化工研究所生产，批号：20101114，以生理盐水配制成10％的水合氯醛溶液，备用)，喜得镇(甲磺酸双氢麦角毒碱片)，天津华津制药厂生产，批号：100381；青霉素注射液，华北制药股份有限公司产品，批号：F1008310；硫酸庆大霉素注射液，河南天方药业股份有限公司产品，批号：101230320。

2.4实验仪器及器械

常规手术器械。

3实验方法

3.1造模方法

同种大鼠左心室内采血，于37℃温箱内干燥，研碎后用200Lm筛孔过筛，应用时取血栓栓子1mg加生理盐水0.3ml，摇匀成混悬液。10％水化氯醛按35mg/100g体重腹腔麻醉，颈正中切开皮肤，剥离胸骨舌骨肌、肩胛舌骨肌与胸骨乳突肌，暴露颈总动脉、颈外动脉与颈内动脉，暂时夹闭颈总动脉，于颈外动脉逆行插管注入栓子溶液0.3ml，推注同时开放颈总动脉，使栓子通过颈内动脉进入颅内至大脑各动脉，造成多发性脑梗塞，然后结扎颈外动脉，缝合皮肤。

3.2动物分组

将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、喜得镇组、本发明的中药组合物的低剂量组、中剂量组、高剂量组，共6组，每组10只。

3.3给药的方法

实施例1的丸剂粉末水溶液，高、中、低剂量组分别为6.4g/kg(3.2g/kg*2次)、3.2g/kg、1.6g/kg，配制药液浓度分别为0.32g/ml、0.32g/ml及0.16g/ml。浸膏组i.g.阳性对照组i.g.喜得镇水溶液，剂量为0.5mg/kg(浓度为0.05mg/ml)，均连续给药30天。正常对照组和模型组每天i.g.等体积(1ml/100g体重)生理盐水。

3.4检测指标

3.4.1行为学检测

①观测指标：逃避潜伏期和穿越平台次数。逃避潜伏期，主要用于测试大鼠的学习能力，逃避潜伏期越短，其学习能力越强。穿越平台次数，主要用于测试大鼠记忆能力，穿越平台次数越多，其记忆能力越强。于末次给药后用Morris水迷宫检测以上两项指标。②定位航行实验：用于测定逃避潜伏期。连续4d，每只大鼠每天从4个不同的象限入水进行训练各1次，记录在60s内大鼠从入水到爬上平台所需时间，此即为逃避潜伏期。训练中，大鼠在60s内未找到平台，由实验者用棒将其引上台，并让其站立10s。逃避潜伏期记为60s。大鼠从平台处下来休息10s之后，再按序由1个入水点入水进行下1次实验，取其平均值。③空间探索实验：用于测定穿越平台次数。第5天撤出平台任选1个入水点将大鼠放入水槽，上下午各1次，记录60s内穿越平台所在象限的次数。

3.4.2抗氧化酶活性测定

大鼠取血后，迅速断头取脑。在冰盘上将每个脑组织行正中矢状切分，在冰盘上取出一侧大脑电子天平称重，按1∶9(每克脑组织加9ml冷生理盐水)，在冰浴中用玻璃匀浆器碾磨制成10％脑组织匀浆，将匀浆分为数分，-80℃低温冰箱保存。丙二醛(MDA)含量测定用硫代巴比妥酸(TBA)法，超氧化物歧化酶(SOD)活性测定用黄嘌呤氧化酶法，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性测定用二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)法，组织蛋白定量采用考马斯亮蓝法。SOD、MDA、GSH-Px及蛋白定量测试盒均由南京建成生物工程研究所提供。

3.5统计方法

数据用SPSS11.5统计软件处理，以均数±标准差表示，单因素方差分析(one-way-ANOVA)统计，组间两两比较采用LSD法和SNK法。以P＜0.05为差异有显著意义。

4结果

4.1行为学结果

表1水迷宫定位航行实验

﹡p<0.05与模型组比较 #p<0.05与对照组比较 ﹡﹡p<0.01与模型组比较

表2空间探索实验

﹡p<0.05与模型组比较 #p<0.05与对照组比较

4.2.1各组脑组织SOD比较

表3脑组织超氧化物歧化酶比较

4.2.2各组脑组织MDA比较

表4脑组织丙二醛比较

4.2.3各组脑组织GSH-px比较

表5脑组织谷胱甘肽过氧化物酶比较

5结论

实验结果表明，在定位航行实验中，模型组逃避潜伏期明显高于对照组，且喜得镇组和本发明的中药组合物的低、中、高剂量组明显低于模型组，在空间探索实验中也验证了这一趋势，模型组穿越目标区域次数明显少于对照组且两组比较有显著性差异，喜得镇组和本发明的中药组合物的低、中、高剂量组穿越次数明显好于模型组，且呈一定的量效关系，且中、高剂量组优于喜得镇组。

实验三本发明的中药组合物对去大脑皮层血管性痴呆大鼠的药效学研究

1实验目的

本研究旨在评价本发明的中药组合物对去大脑皮层血管性痴呆大鼠的作用。

2实验材料

2.1实验动物

成年健康SD大鼠，雄性，体重(200±50)g，购自北京维通利华公司。饲养于室内通风柜内，恒温(22±2)℃，自然昼夜，自由食水。

2.2受试药物

实施例1的丸剂，粉碎，过100目筛，临用前以蒸馏水按所需浓度配制成水溶液。冰箱保存，用时提前取出，恢复至接近室温，摇匀，备用。

2.3实验试剂

0.9％生理盐水(河北天成药业有限公司，批号：10032403)；水合氯醛(天津市光复精细化工研究所生产，批号：20101114，以生理盐水配制成10％的水合氯醛溶液，备用)喜得镇(甲磺酸双氢麦角毒碱片)，天津华津制药厂生产，批号：100381；青霉素注射液，华北制药股份有限公司产品，批号：F1008310；硫酸庆大霉素注射液，河南天方药业股份有限公司产品，批号：101230320。

2.4实验仪器及器械

常规手术器械。

3实验方法

3.1造模方法

10％水合氯醛(400mg/kg体重)麻醉下打开左侧颅骨，暴露硬脑膜，用虹膜剪剪开硬脑膜，露出软脑膜，在解剖显微镜下，用沾生理盐水的棉签轻轻擦拭左侧皮层血管，至软脑膜在镜下见不到血管为止。

3.2动物分组

将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、喜得镇组、本发明的中药组合物的低剂量组、中剂量组、高剂量组，共6组，每组10只。

3.3给药的方法

实施例1的丸剂材粉末水溶液，高、中、低剂量组分别为6.4g/kg(3.2g/kg*2次)、3.2g/kg、1.6g/kg，配制药液浓度分别为0.32g/ml、0.32g/ml及0.16g/ml。浸膏组i.g.阳性对照组i.g.喜得镇水溶液，剂量为0.5mg/kg(浓度为0.05mg/ml)，均连续给药30天。正常对照组和模型组每天i.g.等体积(1ml/100g体重)生理盐水。

3.4检测指标

3.4.1行为学检测

①观测指标：逃避潜伏期和穿越平台次数。逃避潜伏期，主要用于测试大鼠的学习能力，逃避潜伏期越短，其学习能力越强。穿越平台次数，主要用于测试大鼠记忆能力，穿越平台次数越多,其记忆能力越强。于末次给药后用Morris水迷宫检测以上两项指标。②定位航行实验：用于测定逃避潜伏期。连续4d，每只大鼠每天从4个不同的象限入水进行训练各1次，记录在60s内大鼠从入水到爬上平台所需时间，此即为逃避潜伏期。训练中，大鼠在60s内未找到平台，由实验者用棒将其引上台，并让其站立10s。逃避潜伏期记为60s。大鼠从平台处下来休息10s之后，再按序由1个入水点入水进行下1次实验，取其平均值。③空间探索实验：用于测定穿越平台次数。第5天撤出平台任选1个入水点将大鼠放入水槽，上下午各1次，记录60s内穿越平台所在象限的次数。

3.4.2抗氧化酶活性测定

大鼠取血后，迅速断头取脑。在冰盘上将每个脑组织行正中矢状切分，在冰盘上取出一侧大脑电子天平称重，按1：9(每克脑组织加9ml冷生理盐水)，在冰浴中用玻璃匀浆器碾磨制成10％脑组织匀浆，将匀浆分为数分，-80℃低温冰箱保存。丙二醛(MDA)含量测定用硫代巴比妥酸(TBA)法，超氧化物歧化酶(SOD)活性测定用黄嘌呤氧化酶法，SOD、MDA、NO，AchE及蛋白定量测试盒均由南京建成生物工程研究所提供。

3.5统计方法

数据用SPSS11.5统计软件处理，以均数±标准差表示，单因素方差分析(one-way-ANOVA)统计，组间两两比较采用LSD法和SNK法。以P＜0.05为差异有显著意义。

4结果

4.1行为学结果

表1水迷宫定位航行实验

#p<0.05与对照组比较 *p<0.05与模型组比较

表2空间探索实验

#p<0.05与对照组比较 ﹡p<0.05与模型组比较

4.2.1各组脑组织SOD比较

表3脑组织超氧化物歧化酶比较

##p<0.01与对照组比较 *p<0.05与模型组比较 **p<0.01与模型组比较

4.2.2各组脑组织MDA比较

表4脑组织丙二醛比较

*p<0.05与模型组比较 **p<0.01与模型组比较

4.2.3各组脑组织NO比较

表5脑组织一氧化氮比较

#p<0.05与对照组比较 *p<0.05与模型组比较

表6脑组织乙酰胆碱酯酶比较

##p<0.01与对照组比较 **p<0.01与模型组比较

5结论

实验结果表明模型组大鼠找到平台时间明显长于对照组，二者比较差异显著，而本发明的中药组合物的低、中、高剂量组的逃避潜伏期也明显短于模型组有统计学差异。在SOD方面，模型组与对照组差异显著，且喜得镇组和本发明的中药组合物的中、高剂量组与模型组比较有显著性差异。NO方面，模型组与对照组差异显著，且喜得镇组和本发明的中药组合物的低、中、高剂量组与模型组比较有显著性差异。AchE方面，模型组与对照组差异显著，且喜得镇组和本发明的中药组合物的低、高剂量组与模型组比较有显著性差异。

由此说明，本发明的中药组合物对脑慢性低灌注血管性痴呆、多发性脑梗死血管性痴呆、皮层下缺血性血管性痴呆具有良好的疗效，可改善患者的学习记忆能力及行为能力。

具体实施方式

实施例1

【处方】

【制法】

以上15味原料药，红花粉碎成细粉，过筛；钩藤粉碎成粗粉，用75％乙醇浸渍二次，每次24小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成稠膏，70℃以下减压干燥，粉碎成细粉；药渣与其余白芍等十三味，加水煎煮二次，每次2小时，同时收集馏出的挥发油，水煎液滤过，滤液浓缩成稠膏，干燥，粉碎成细粉；挥发油用7倍量β-环糊精包合，与上述干膏粉、红花细粉混合均匀，加入羧甲淀粉钠24g，微晶纤维素8g，制成丸剂，干燥，分装。每袋5g，即得。

实施例2

【处方】

【制法】

以上15味原料药，红花粉碎成细粉，过筛；钩藤粉碎成粗粉，用75％乙醇浸渍二次，每次24小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成稠膏，70℃以下减压干燥，粉碎成细粉；药渣与其余白芍等十三味，加水煎煮二次，每次2小时，同时收集馏出的挥发油，水煎液滤过，滤液浓缩成稠膏，干燥，粉碎成细粉；挥发油用7倍量β-环糊精包合，与上述干膏粉、红花细粉混合均匀，用90％乙醇制粒，干燥，制成1000粒，即得。

实施例3

【处方】

【制法】

以上15味原料药，红花粉碎成细粉，过筛；钩藤粉碎成粗粉，用75％乙醇浸渍二次，每次24小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成稠膏，70℃以下减压干燥，粉碎成细粉；药渣与其余白芍等十三味，加水煎煮二次，每次2小时，同时收集馏出的挥发油，水煎液滤过，滤液浓缩成稠膏，干燥，粉碎成细粉；挥发油用7倍量β-环糊精包合，与上述干膏粉、红花细粉混合均匀，加入羧甲淀粉钠2g，用90％乙醇制粒，干燥，以微晶纤维素调节总量至500g，压片，制成1000片，即得。

实施例4

【处方】

【制法】

以上15味原料药，红花粉碎成细粉，过筛；钩藤粉碎成粗粉，用75％乙醇浸渍二次，每次24小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成稠膏，70℃以下减压干燥，粉碎成细粉；药渣与其余白芍等十三味，加水煎煮二次，每次2小时，同时收集馏出的挥发油，水煎液滤过，滤液浓缩成稠膏，干燥，粉碎成细粉；挥发油用7倍量β-环糊精包合，与上述干膏粉、红花细粉混合均匀，用乙醇制粒，干燥，装入胶囊，制成500粒，即得。

显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。

Claims (7)

1.一种中药组合物用于制备治疗血管性痴呆药物的应用，所述中药组合物的原料药组成为：

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述中药组合物的原料药组成为：

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述血管性痴呆是指脑慢性低灌注血管性痴呆。

4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述血管性痴呆是指多发性脑梗死血管性痴呆。

5.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述血管性痴呆是指皮层下缺血性血管性痴呆。

6.一种权利要求1中所述中药组合物用于制备改善学习记忆能力及行为能力药物的应用。

7.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述中药组合物加入常规辅料按照常规工艺制成临床上可接受的胶囊剂、片剂、丸剂、颗粒剂。