CN103501783A - 用于治疗阿尔茨海默病的方法和药物产品 - Google Patents

Abstract

本发明提供用于治疗阿尔茨海默型认知障碍(例如，延迟发病)的含有低剂量吡格列酮的药物产品。还提供其制备方法。还提供用于治疗阿尔茨海默病的方法，其包括给药具有低剂量吡格列酮的药物产品。该方法可包括基于受治疗者年龄和TOMM40 523基因型确定受治疗者是否存在发展成阿尔茨海默病的风险。

Description

用于治疗阿尔茨海默病的方法和药物产品

相关申请

根据35U.S.C.§119(e)本申请要求美国临时专利申请的No.61/431,370(2011年1月10日提交)的权益。

技术领域

本发明涉及用于治疗存在发展成阿尔茨海默病的风险的受治疗者的方法和药物产品。

背景技术

阿尔茨海默病是神经退行性疾病并且是痴呆最通常的诱因。该疾病相对于正常的老年化表现为逐渐但发展性的记忆、思维技能和行为的衰退加快(Reitz等人，2011 Nat Rev Neurol 7:137-152)。最终，患者不能识别熟悉的人或进行最简单的作业。目前在美国(US)，阿尔茨海默病排在至死原因的第六位。

该疾病有两个主要类型：家族型阿尔茨海默病，其通常由三个基因(APP、PSEN1或PSEN2)中的一个的显性突变导致。这种疾病类型是罕见的，并且是破坏性疾病，在中年出现发病。第二种以及更为常见的疾病类型是散发性或迟发性阿尔茨海默病(下文称为“阿尔茨海默病”或“AD”)。阿尔茨海默病的发病通常发生在62岁之后。

随着世界人口和人类寿命的增加，因此全世界范围内受阿尔茨海默病影响的人的数量也在增加。在2010，在评估的痴呆的全球性花费中，阿尔茨海默病的花费占据高达80%的情况，为6040亿美金，其超过了美国GDP的1%(Wimo and Prince 2010 World Alzheimer Report 2010:The Global EconomicImpact of Dementia1-93)。在美国护理阿尔茨海默病患者的费用预计会从2010年的1.72亿美金增加至2050年的1.07万亿美金(Alzheimer's Association."Changing the Trajectory of Alzheimer's Disease:A National Imperative(2010)")。

目前，已经批准的治疗该疾病的极少的药物提供了一些症状上的减轻，但是其通常仅在相对短的阶段，并且该治疗不会改变疾病进展的过程(Alzheimer's Association."Changing the Trajectory of Alzheimer's Disease:ANational Imperative(2010)")。急需延迟疾病发病的疗法、降低疾病进展的速率的疗法、或者可以实现上述两者的疗法。可以实现这些目标的任一疗法会降低患有疾病的个体的数量，或降低患有晚期和衰弱期疾病的个体的数量(Brookmeyer等人，2007Alzheimers Dement 3:186-191)。由于在2015年突破性疗法的实用化，计划如果将阿尔茨海默病的发病延迟5年，则预计在2050年具有该病的1350万美国人中的43%将不会具有该疾病，并且具有晚期的疾病的人会更少。

阿尔茨海默病的主要风险因素是年龄，该疾病的患病率随着年龄增加而增加(约10%的个体超过65岁以及约50%的个体超过85岁)。超过65岁之后，每5年疾病的发生率增加一倍，并且在超过65岁的每100,000个人中，每年确诊约1275个新病例(Querfurth et al.,2010NEJM362:4)。男性和女性均受到阿尔茨海默病的影响，但是在全球范围内女性通常占病例的更高的百分比(约60%-40%)，这可能是由于女性的寿命更长。患有阿尔茨海默病的患者在诊断后平均趋向于生存约3-9年。

之前，将APOE的ε4等位基因与发展成阿尔茨海默病的风险增大相关联(Pericak-Vance等人，1991Am J Hum Genet 48:1034-1050;Martin等人，2000Am J Hum Genet 67:383-394;Roses等人，美国专利6,027,896和5,716,828)。该关系是拷贝数依赖型的(Yoshizawa等人，1994Ann Neurol36:656-659)。也就是说，在较年轻的年龄，具有两个APOE4等位基因的携带者发展成迟发性阿尔茨海默病(LOAD)的可能性高于仅具有一个APOE4等位基因的携带者(Corder等人，1993 Science 261,921-3)。

但是APOE4等位基因仅占迟发的阿尔茨海默病的遗传性风险的约50%。一个解释是APOE4仅作为附近的连锁不平衡的一些物质的替代标志物起作用。另外，考虑到最近发现的APOE4在线粒体毒性中的机理作用，APOE4的副作用可能会被其附近编码的另一个基因产品消除或加剧(Chang等人，2005 Proc Natl Acad Sci U S A 102:18694-18699)。

阿尔茨海默病的症状主要通过认知缺陷表示，包括记忆衰退、语言功能障碍和视觉空间技能的认知缺陷；可跨越职业和社会组成的功能衰退(例如，日常生活的活动)；以及包括抑郁、焦虑、侵略性和精神病的行为症状也会随着疾病发展的严重性出现。

目前，阿尔茨海默病的明确诊断需要临床上发现符合AD的认知缺陷，以及符合AD的脑疾病的尸体解剖确认。术语AD痴呆是用于描述由于阿尔茨海默病的病理生理学的痴呆。术语“可能的阿尔茨海默病”用于表示当受治疗者在生命中表现出阿尔茨海默病的临床特征以及当痴呆的其他可能生物诱因(例如帕金森氏病或中风)被排除。

目前已存在一些诊断可能的阿尔茨海默病的本领域所接受的方法。通常，组合使用这些方法。这些方法包括确定个体进行日常活动的能力，以及确认行为和个性的变化。AD型痴呆也通常由遗忘表现(记忆缺陷)或语言、视觉空间或执行能力缺陷来表征。认知能力/衰退可以通过本领域接受的方法来确认，该方法包括但不限于，评估全面认知的验证方法(例如，改良的简易精神状态检查（Mini Mental State Examination）(3MS-E))，以及评估具体范围例如视觉和非文字记忆的验证方法(例如，分别为Brief VisuospatialMemory Test(修改的)(BVMT-R)以及Hopkins Verbal Learning Test(修改的)(HVLT-R))、评估语言的验证方法(例如，Generative Verbal Fluency Test(GVFT))和评估执行能力以及注意力的验证方法(例如，Digit Span Test(DST))。由于AD导致的痴呆还通常由隐藏性的发病和认知表现变差的病史来确定。

最近，由国家研究所老龄化-阿尔茨海默协会工作组(National Institute ofAging-Alzheimer’s Association workgroup)更新了‘可能的阿尔茨海默病’的标准(McKhann等人，2011 Alzheimers Dement 7:263-269)。该工作组建议针对首先显示出阿尔茨海默病痴呆的核心临床特征的人，与该疾病相关的生物标志物的证据可能会增加诊断的确定性。

考虑到在美国超过450万人将会单独地患阿尔茨海默病(这个数字将随着人口老化而持续增长)，以及考虑到随着阿尔茨海默病的发展，阿尔茨海默病的残酷和无情的退行性和退缩性特性，与对罹患阿尔茨海默病的人的护理相关的高费用，对于能够延迟阿尔茨海默病的发病的有效的医学疗法存在真实和紧急的需求。

发明简述

本发明提供包括低剂量吡格列酮的组合物，该组合物对于治疗轻度认知障碍(例如，阿尔茨海默型认知障碍)是有用的。在一些实施方式中，治疗包括延迟轻度认知障碍的发病。在一些实施方式中，治疗包括延迟在认知正常的受治疗者中轻度认知障碍的发病。在一些实施方式中，延迟包括延迟情节记忆衰退的开始。

在一些实施方式中，治疗包括延迟在人受治疗者中轻度认知障碍的发病，该人受治疗者存在在接下来的5-7年中发展成认知障碍的风险增大，所述风险基于受治疗者年龄或基于受治疗者年龄和TOMM40rs10524523基因型。

在一些实施方式中，低剂量吡格列酮以单元剂型给药，例如具有从0.5、1、1.5或2至6、8、10或12毫克吡格列酮或其药学上可接受的盐的单元剂型。

还提供低剂量吡格列酮在制备用于治疗轻度认知障碍(例如，阿尔茨海默型认知障碍)的药物制剂中的用途。在一些实施方式中，该药物制剂为片剂。在一些实施方式中，该药物制剂为胶囊。在一些实施方式中，该药物制剂为囊片。在一些实施方式中，该药物制剂为液体。在一些实施方式中，该药物制剂为固体或半固体。

还提供包括治疗认知减退的低剂量吡格列酮的组合物。

进一步提供治疗在需要该治疗的人受治疗者中轻度认知障碍(例如，阿尔茨海默型认知障碍)的方法，其包括向所述受治疗者给药低剂量吡格列酮。在一些实施方式中，治疗包括延迟轻度认知障碍的发病。在一些实施方式中，治疗包括延迟在认知正常的受治疗者中轻度认知障碍的发病。在一些实施方式中，延迟包括延迟情节记忆衰退的开始。

在一些实施方式中，受治疗者存在在接下来的5-7年中发展成阿尔茨海默型认知障碍的风险增大，所述风险基于受治疗者年龄，或基于受治疗者年龄和rs10524523('523)基因型。

在一些实施方式中，受治疗者至少50、55、60、62、68或70岁。

在一些实施方式中，受治疗者为白种人受治疗者。在一些实施方式中，受治疗者为非白种人受治疗者。

在一些实施方式中，受治疗者不具有一个或两个APOE2等位基因。

在一些实施方式中，低剂量吡格列酮以单元剂型给药，例如具有从0.5、1、1.5或2至6、8、10或12毫克吡格列酮的单元剂型。在一些实施方式中，给药每天一次。

在一些实施方式中，吡格列酮以提供约0.15μg·h/mL-约3.6μg·h/mL的AUC的剂量给药。在一些实施方式中，吡格列酮以提供0.12μg·h/mL-4.5μg·h/mL的AUC的剂量给药。在一些实施方式中,吡格列酮以提供0.12μg·h/mL-3.4μg·h/mL的AUC的剂量给药。

还提供治疗需要该治疗的人受治疗者中认知减退的方法，其包括向所述受治疗者给药低剂量吡格列酮。

还进一步提供确定在预先确定的年龄或年龄段在人受治疗者中发展成阿尔茨海默型认知障碍的风险增大的方法，其包括：

检测来自所述受治疗者的生物样品的所述受治疗者的'523基因型，其中，将'523的每个等位基因分为：

(a)短型(S，少于19T残基)；

(b)长型(L，19-29残基)；或者

(c)非常长型(VL，30或更多残基)；以及

通过所述'523基因型来确定所述受治疗者在所述预先确定的年龄或年龄范围是否存在发展成阿尔茨海默型认知障碍的风险增大，其中：

(1)年龄大于约62和L,L或L,VL表示风险增大；

(2)年龄大于约62和VL,VL不表示风险增大；

(3)年龄大于约74和S,L表示风险增大；

(4)年龄大于约77和S,S表示风险增大；以及

(5)年龄大于约76和S,VL表示风险增大。

在一些实施方式中，确定还包括：检测来自所述受治疗者的生物样品的所述受治疗者的APOE基因型，其中，在所述基因型中存在APOE2等位基因表示受治疗者不存在风险增大。

还提供确定是否向人受治疗者给药低剂量吡格列酮以治疗阿尔茨海默型认知障碍的方法，其包括：

检测来自所述受治疗者的生物样品的受治疗者的'523基因型，其中，将每个等位基因分为：

(a)短型(S，少于19T残基)；

(b)长型(L，19-29残基)；或者

(c)非常长型(VL，30或更多残基)；以及

通过所述'523基因型和所述人受治疗者的年龄来确定是否向所述受治疗者给药低剂量吡格列酮以治疗阿尔茨海默型认知障碍，其中：

(1)年龄大于约62和L,L或L,VL表示治疗；

(2)年龄大于约62和VL,VL不表示治疗；

(3)年龄大于约74和S,L表示治疗；

(4)年龄大于约77和S,S表示治疗；以及

(5)年龄大于约76和S,VL表示治疗。

在一些实施方式中，所述确定还包括：检测来自所述受治疗者的生物样品的所述受治疗者的APOE基因型，其中，在所述基因型中存在APOE2等位基因不表示治疗。

在上述方法或组合物的一些实施方式中，受治疗者具有正常的认知。

还提供延迟阿尔茨海默病的发病的方法，其中，该方法包括(a)检测在存在发展成阿尔茨海默病的风险的受治疗者中TOMM40基因的变体，以及(b)对检测具有TOMM40变体存在风险的受治疗者给药包含有效的低剂量吡格列酮或吡格列酮盐的药物产品以延迟阿尔茨海默病的发病。例如，本发明设计(a)在存在发展成阿尔茨海默病风险的受治疗者中，检测TOMM40基因的变体，例如长型poly-T等位基因(多于19个胸苷残基)，以及(b)对检测具有TOMM40基因的长型poly-T等位基因变体存在风险的受治疗者(其可以是例如处于正常认知状态)给药有效量的低剂量吡格列酮或吡格列酮盐药物产品以延迟阿尔茨海默病的发病。

还提供延迟在存在发展成阿尔茨海默病风险的受治疗者中向阿尔茨海默病发展的一个或多个阶段的发病的方法，所述阶段诸如轻度认知障碍阶段、遗忘型轻度认知障碍阶段、临床前阿尔茨海默病阶段和/或前驱性阿尔茨海默病阶段，其中，该方法包括：(a)检测在存在发展成阿尔茨海默病的风险的受治疗者中TOMM40基因的变体，诸如长型poly-T等位基因(多于19个胸苷残基)；以及(b)向检测到TOMM40变体的存在风险的受治疗者给药含有有效量的低剂量吡格列酮或吡格列酮盐的药物产品以延迟向阿尔茨海默病发展的一个或多个阶段(包括任何认知障碍或其他阶段)的发病，以延迟在存在风险的受治疗者中的阿尔茨海默病的发病。应当理解根据本发明的方法，在检测到TOMM40变体和/或治疗时，存在风险的受治疗者可以处于正常的认知状态或向阿尔茨海默病发展的状态中的任一个状态。

上述简述不是用来描述本发明的每个公开的实施方式或每个实现方式。下述说明更具体地列举说明实例性实施方式。在整个发明的数个部分，通过实施例说明给出了指导，实施例可以多种组合的形式利用。在每个例子中，描述的项目仅作为代表性的类型并应当不作为排除性的项目来解释。

附图简要说明

图1表示在相对于载体对照的多个PIO剂量的大鼠脑的fMRI图像。上面显示处于基线的组平均fMRI信号；下面表示在治疗第7天的组平均fMRI信号。该分析显示低至0.04mg/kg/天剂量的吡格列酮HCl导致大鼠脑的深皮层下结构中的代谢变化。

图2表示针对每种TOMM40523基因型，阿尔茨海默型认知障碍发病时的年龄的图。Y轴表示不具有认知障碍的存活百分比，X轴表示年龄。从Duke Bryan ADRC群N=438例受治疗者获得数据，106例诊断为认知障碍，332例为认知正常的。针对每种基因型的N：L,L:23；L,VL:54；S,L:72；S,S:100；S,VL:138；VL,VL:51。

图3示出表示针对具有S,L523基因型的个体，阿尔茨海默型认知障碍发病时的年龄的曲线。Y轴表示不具有认知障碍的存活百分比，X轴表示年龄。该曲线在74岁(垂直线)开始显示陡的斜率。在74岁或以上的年龄开始实验的具有S,L523基因型的个体存在在接下来的5年中发展成认知障碍的高风险。从Duke Bryan ADRC群N=72例受治疗者获得的数据，23例诊断为具有认知障碍，49例为认知正常的。

图4示出表示针对523L,L基因型，阿尔茨海默型认知障碍发病时的年龄的曲线。Y轴表示不具有CI的存活百分比，X轴表示年龄。从Duke BryanADRC群N=23例受治疗者获得的数据，11例诊断为具有CI，12例为认知正常的。

图5示出表示针对523L,VL基因型，阿尔茨海默型认知障碍发病时的年龄的曲线。Y轴表示不具有CI的存活百分比，X轴表示年龄。从Duke BryanADRC群N=54例受治疗者获得的数据，24例诊断为具有CI，30例为认知正常的。

图6示出表示针对523S,L基因型，阿尔茨海默型认知障碍发病时的年龄的曲线。Y轴表示不具有CI的存活百分比，X轴表示年龄。从Duke BryanADRC群N=72例受治疗者获得的数据，23例诊断为具有CI，49例为认知正常的。

图7示出表示针对523S,S基因型，阿尔茨海默型认知障碍发病时的年龄的曲线。Y轴表示不具有CI的存活百分比，X轴表示年龄。从Duke BryanADRC群N=100例受治疗者获得的数据，20例诊断为具有CI，80例为认知正常的。

图8示出表示针对523S,VL基因型，阿尔茨海默型认知障碍发病时的年龄的曲线。Y轴表示不具有CI的存活百分比，X轴表示年龄。从Duke BryanADRC群N=138例受治疗者获得的数据，22例诊断为具有CI，116例为认知正常的。

图9示出表示针对523VL,VL基因型，阿尔茨海默型认知障碍发病时的年龄的曲线。Y轴表示不具有CI的存活百分比，X轴表示年龄。从Duke BryanADRC群N=51例受治疗者获得的数据，6例诊断为具有CI，45例为认知正常的。

发明详述

为了举例说明并提供对本发明的更为完整的理解和其多个出现的优点，关于新方法和组合物提供下述详细的描述和实施例。

在一个方面，本发明涉及用于给药需要治疗的受治疗者（例如人患者）的药物组合物，即药物产品，其包括低剂量吡格列酮或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体，以延迟阿尔茨海默病的发病或治疗在该患者中阿尔茨海默病。当本发明可以多种不同的形式实施时，本文讨论的数个用于理解本发明的具体的实施方式被认为仅作为本发明的原理的例子，并不用于限制本发明至所描述或举例说明的实施方式。

I.定义

如在本发明的说明书和所附的权利要求中使用的，单数形式“一”（“a”、“an”）和“该”（“the”）可以交换使用并且除非在上下文中明确指出，意在包括复数形式并且落入每个含义中。还如本文所使用的，“和/或”是指并且包括一个和多个所列举的项目的任何和全部可能的组合，以及当被解释成二者之一(“或”)时无组合。

如在本文中使用的，“至少一种”是意在表示“一种或多种”所列举的元素。

除非另外说明，单数词形式意在包括复数词形式，并且同样适当时在本文中可交换使用，并且落入每个含义内。

除非另外说明，所有术语的大写形式或非大写形式的落入每个含义内。

除非另外指出，应当理解在说明书和权利要求中使用的表示质量、比例、以及成分的数量性质、反应条件等的所有数值可以被设计为能够在所有情况下被术语“约”修饰。

除非另外说明，本文的全部份、百分比、比例等以重量计。

如在本文中所使用的，“生物等效性(bioequivalence)”或“生物等效的(bioequivalent)”是指：药学上等效且在以同样的摩尔剂量或相似的量给药之后它们的生物利用度(吸收的速率和程度)达到如下程度的低剂量吡格列酮制剂或药物产品，所述程度即它们的治疗效果(安全性和功效)基本相同。换言之，生物等效性或生物等效的表示在下述方面不存在明显的不同：当以相同的摩尔剂量在相似的条件下给药时，在吡格列酮作用的位点来自该制剂的吡格列酮变为可以利用时的速率和程度，例如在吡格列酮可以离开该制剂时的速率，以及在吡格列酮可以被吸收和/或在作用位点影响阿尔茨海默病变为可利用时的速率。换言之，来自相同的摩尔剂量，(相同盖伦形式的)两种吡格列酮药物产品的生物利用度具有高度的相似性，它们不会产生治疗效果方面的临床相关的差异，或者不良反应，或者不会产生上述两者。如同(a)美国食品和药品监督管理局(FDA)、(b)联邦法规汇编(the Code of FederalRegulations("C.F.R."))第21条、(c)加拿大卫生部(Health Canada)、(d)欧洲医药品管理局(European Medicines Agency(EMEA))和/或日本厚生劳动省所定义和/或使用的那样，在本文中也使用术语“生物等效性”以及“药学等效性”和“治疗等效性”。因此，应当理解本发明预计低剂量吡格列酮制剂或药物产品与本发明的其他低剂量吡格列酮制剂或药物产品可以是生物等效的。以举例的方式，第一低剂量吡格列酮制剂或药物产品与第二低剂量吡格列酮制剂或药物产品是生物等效的，根据本发明，当测量第一低剂量吡格列酮制剂或药物产品的至少一个药物代谢动力学参数，诸如Cmax、Tmax、AUC等时，并当其与第二低剂量吡格列酮制剂或药物产品的相同的药物代谢动力学参数相比时，变化不多于约±25%。

如在本文中所使用的，“生物利用度”或“生物可利用”通常表示吡格列酮进入系统循环的吸收的速率和程度，更具体地为意在反映在作用位点吡格列酮变为可利用或从药物产品被吸收并在作为位点吡格列酮变为可利用时的速率和程度的速率或测量值。换言之，以举例的方式，从较低剂量强度的本发明制剂中吸收的吡格列酮的程度和速率如在系统循环中的吡格列酮的时间-浓度曲线所表示。

以进一步举例的方式，生物利用度是进入系统循环且在作用位点可利用的治疗活性药物的程度的测量值。其以字母F表示。

关于绝对生物利用度，绝对生物利用度是对通过非静脉给药(即口服、直肠、经皮、皮下给药)之后进入系统循环的活性药物的生物利用度(作为曲线下的面积或AUC来评估)与通过静脉给药后的相同药物的生物利用度进行比较。绝对生物利用度是通过非静脉给药吸收的药物与相同药物相应的静脉给药吸收药物的比例。如果使用不同的剂量，则比较必须是剂量均一化的；因此每个AUC通过除以相应给药的剂量来校正。

为了确定药物的绝对生物利用度，必须进行药物代谢动力学研究来获得在静脉(IV)和非静脉给药之后的血浆药物浓度与时间的图。绝对生物利用度是非静脉给药曲线下剂量校正的面积(AUC)除以静脉给药曲线下的剂量校正的面积（AUC）。例如，用于计算通过口服途径(po)给药的药物F的公式如下给出：

因此，通过静脉途径提供的药物具有的绝对生物利用度为1(F=1)，而通过其他途径提供的药物的绝对生物利用度通常小于1。

关于相对生物利用度，其测量一定药物当与相同药物的另一制剂(通常是公认的标准或通过不同的途径给药)进行比较时的生物利用度(作为曲线下的面积或AUC来评估)。当标准包括静脉给药药物，已知相对生物利用度为绝对生物利用度。

如本文所使用的，术语“药学上等效性”或“药学上等效的”是指在相同的剂型中含有相同量的吡格列酮的本发明的低剂量吡格列酮制剂或药物产品(但不必须含有相同的非活性成分)，通过相同的给药的途径满足特性、强度、质量和纯度，包括效力以及当可应用时的含量均匀性和/或稳定性的相同或相当的药典或其他现行标准。因此，应当理解本发明预计低剂量吡格列酮制剂或药物产品与根据本发明使用的其他低剂量吡格列酮制剂或药物产品是药学上等效的。

如本文所使用的，术语“治疗等效性或治疗上等效的”是指如下那些低剂量吡格列酮制剂或药物产品：(a)当根据本发明使用吡格列酮药物产品以延迟阿尔茨海默病发病时产生相同的临床效应和安全性的低剂量吡格列酮制剂或药物产品，以及(b)为药学上等效的低剂量吡格列酮制剂或药物产品，例如它们在相同的剂型中含有吡格列酮，它们具有相同的给药途径；以及它们具有相同的吡格列酮强度。换言之，治疗等效性是指化学当量的本发明的较低剂量强度的吡格列酮制剂(即当在相同的剂量方案中给药相同的个体时在相同的剂型中含有相同量的吡格列酮)会提供基本上相同的效应和毒性。

在本文中使用的“阿尔茨海默病”、“阿尔茨海默病”或“AD”是随着时间认知功能逐渐受损的疾病，其包括具有出现轻度认知障碍(MCI)的症状的前痴呆阶段，以及痴呆阶段，在该阶段在社会或职业功能方面存在显著的衰退。参见Albert等人，2011 Alzheimer's&Dementia7:270-279;McKhann等人，2011 Alzheimer's&Dementia 7:263-269。

虽然报道了与阿尔茨海默病相关的多个生物标记，但没有一个被美国食品药品监督管理局认定为用于诊断或预测阿尔茨海默病的有效的或合格的生物标记。从临床的角度来看，始终存在的并且是阿尔茨海默病的诊断所需的标志特征是认知障碍。

认知障碍的征兆可包括但不限于：脑功能诸如语言、记忆(例如，情节的)、知觉、情绪性行为或个性、认知技能(例如，计算、抽象思维、判断)出现困难。可以从患者、从熟悉患者的知情人、从观察患者的熟练的医生或他们的组合来获得确定。

“轻度认知障碍”或“MCI”是指在一个或多个认知领域，认知能力的下降超过考虑人的年龄或教育的预期。认知领域包括记忆、执行功能(例如，解决问题、计划或推理)、注意力(例如，简单的和分散性注意力)、视觉空间能力以及语言(例如，命名、流畅性、表达性讲话、理解力)。MCI的症状可包括：难以分辨正确的词或名字；当介绍新人时难以记住名字；明显更难进行社会或工作安排方面的任务；忘记刚刚读过的材料；丢失或乱放贵重物品；在计划或管理方面的问题增加；难以掌握新技能；注意力不足；以及焦虑增加。轻度认知障碍是症状充分满足现行接受的MCI标准，但症状还不满足痴呆诊断标准的阶段。但患有MCI的人可以保持功能完整和独立。如果进行正式、标准化的认知测试，患有MCI的人通常评分为1-1.5标准偏差低于年龄和教育程度调节的他们的同类人的平均值。应当注意到不是所有的MCI都会导致痴呆或阿尔茨海默病。

在本文中使用的“阿尔茨海默型认知障碍”或“CIAT”是指与其中阿尔茨海默型可能引起的与特征一致的认知障碍，因此可以认为是MCI的亚类。命名，“阿尔茨海默型认知障碍”、“由于阿尔茨海默病产生的轻度认知障碍(由AD导致的MCI)”或“遗忘型轻度认知障碍(aMCI)”是指阿尔茨海默病的症状的、前痴呆阶段。按照使用神经心理学测试和个体的认知功能的临床评估来确定由于AD导致的CIAT或MCI。通常，在患有发展成AD的MCI的人(aMCI)中情节记忆受损。但是，存在也会发展成阿尔茨海默病的非典型的MCI-具有非健忘表现的MCI-。认知功能的逐渐退化为罹患由AD导致的MCI的人提供额外的证据。

存在多个神经心理学评估，尤其是那些测试情节记忆的评估(即，学习和保持新信息的能力)，这些评估对于诊断由于AD导致的MCI是有用的，或者对于患有在近几年中可能发展成AD的MCI的患者是有用的。情节记忆的测试可评估即时和/或延迟回忆，诸如词汇表学习测试。另外，应当排除认知障碍的另外的病因，诸如退行性(例如，帕金森)、包括微小梗塞的血管事件、抑郁、创伤、药物合并症。已经提出了多个用于研究的生物标记，这些生物标记也可以用于支持通过确认存在与AD一致的病理或如果需要监测疾病的发展的由于AD导致的MCI的临床诊断。参见例如Albert等人，2011 Alzheimer's&Dementia 7:270-279。

根据本发明，可以通过本领域接受的任何认知评估方法来确定认知障碍，评估方法包括但不限于：全面认知的评估(例如，Modified Mini MentalState Examination(3MS-E))，以及具体区域的评估诸如视觉和非文字记忆的评估(例如，分别为Brief Visuospatial Memory Test(修改的)(BVMT-R)以及Hopkins Verbal Learning Test(修改的)(HVLT-R))、语言评估(例如，GenerativeVerbal Fluency Test(GVFT))以及执行功能和注意力的评估(例如，Digit SpanTest(DST))。

可能会检测或不会检测到生理学改变。“生理学改变”是指例如，出现如下至少一种：改变的功能连接、脑萎缩、脑中降低的突触活性、脑中增加的淀粉样蛋白累积、脑中降低的线粒体功能或增加的线粒体功能障碍、脑中的神经纤维缠结的神经形成、以及与阿尔茨海默病的任何其他症状相关的改变。可以指示阿尔茨海默病的生理学改变包括但不限于：脑中的代谢减退、改变的功能连接、脑中增加的β-淀粉样蛋白和或CSF，以及CSF中的tau和phospho-tau。

如本文中所使用的“发病”是指在受治疗者中出现与诊断的阿尔茨海默病相关或一致的临床症状或如本文所定义的发展成阿尔茨海默型痴呆(例如CIAT)的阶段。

如本文中所使用的，在符合阿尔茨海默病的阶段的发病或发展中“延迟”是指增加从第一时间点到符合阿尔茨海默病的发病或恶化(诸如，阿尔茨海默型认知障碍)之间的时间。例如，如本文所定义的，阿尔茨海默病发病的延迟是指在存在发展成阿尔茨海默病风险的受治疗者中，在正常认知的受治疗者被确定为存在发展成阿尔茨海默病的高风险之后，阿尔茨海默病的发病与在其自然的时间框架发生相比，延迟了至少六个月、1年、1¹/₂年、2年、2¹/₂年、3年、3¹/₂年、4年、4¹/₂年、5年、5¹/₂年、6年、6¹/₂年、7年、7¹/₂年、或8年或更长，以及优选3年-8年，以及更优选5年。以进一步举例的方式，可能发展成阿尔茨海默病的认知障碍的发展的延迟或痴呆发展的延迟是指相对于其自然的时间框架，认知减退的速率放慢。通过使用适当的统计分析可以进行确定。

“第一时间点”包括例如，如本文所教导的开始低剂量吡格列酮治疗。

在一些实施方式中，符合阿尔茨海默病的认知障碍的发病的延迟可以通过，例如进行本文所描述的任何认知评估或通过满足已接受的针对阿尔茨海默型认知障碍的诊断标准来确定。除了进行认知表现的评估之外，如果需要还可以测定符合阿尔茨海默病病理的其他生物标记的变化，包括例如通过磁共振成像（MRI）或在脑区域之间的功能连接的变化的测定值测定的脑萎缩的速率、脑代谢或神经活性的评估、脑中的淀粉样蛋白的累积、通过BOLD-fMRI信号检测的脑生理学、脑的线粒体功能、脑的线粒体增生、生病的神经元、脑中的神经纤维缠结、CSF中的淀粉样蛋白、CSF中的Tau或phospho-Tau等。

如本文所使用的“诊断”或“预测”是指使用信息(例如，来自其他分子测试的基因信息或数据、来自生物样品的生物或化学信息、征兆和症状、体检发现、认知表现结果等)来预测最可能的结果、时间表和/或对于针对给定的疾病、症状或病况的特定的治疗的响应，基于与具有共同的核苷酸序列、症状、征兆、家族病史、或考虑患者健康状态相关的其他数据、或受治疗者痛苦的确认，例如具有轻度认知障碍(MCI)(例如，阿尔茨海默型认知障碍)的大量个体的比较。

如本文所使用的“生物样品”是指含有例如所关注的核酸、蛋白质或其他生物或化学物质的材料。含有核酸(例如DNA)的生物样品包括头发、皮肤、面颊拭子和生物体液例如血液、血清、血浆、唾液、淋巴液、精液、阴道粘液、粪便、尿液、脊髓液等。从这些样品分离DNA是本领域技术人员所熟知的。

根据一些实施方式的“受治疗者”是如下个体，其基因型或单倍型待确定并结合个体的状况(例如，疾病或病症状态)和/或对候选药物或治疗的响应来记录。

如本文所使用的“受治疗者”优选但不必须限定为人受治疗者。受治疗者可以是男性或女性，以及可以是任何种族或种类，包括但不限于：白人、非洲裔美国人、非洲人、亚洲人、西班牙裔人、印度人等。受治疗者可以为任何年龄，包括刚出生、新生儿、婴儿、儿童、青少年、成年人和老年人。如本文所使用的受治疗者可以包括动物、特别是哺乳动物，诸如狗、猫、牛、山羊、马、绵羊、猪、啮齿动物(例如大鼠和小鼠)、兔类动物、灵长类动物(包括非人灵长类)等，其可根据本发明的方法来治疗或筛选动物药物或开发目的的药物。根据本发明的一些实施方式的受治疗者包括需要治疗处理以延迟阿尔茨海默病的发病的患者、人或其他。

如本文所使用的“基因”是指含有调节RNA产物生物合成信息的DNA片段，包括启动子、外显子、内含子和控制表达的其他未翻译区域。

如本文所使用的“遗传风险因子”表示与病况、疾病或病症的增加的易感性相关联的遗传标志物。还可以指与选择的药物或所关注的治疗的特定响应相关联的遗传标志物。如本文中所使用的“相关联”是指两个或更多个特征一起出现通常多于预期的碰巧单独出现。相关联的例子涉及称为HLA的白细胞表面的特征(HLA表示人白细胞抗原)。特定的HLA型，HLA型B-27与包括强直性脊柱炎的多种疾病的风险增大相关联。在具有HLAB-27的人中出现强直性脊柱炎的可能性是通常人群的87倍。

可以使用“预后的”标志物来预测病症或疾病的可能的过程，其包括但不限于：预测病症或疾病发病可能的年龄、预测病症或疾病的发展的过程和/或速率等。其可包括基因型和/或包括受治疗者年龄的其他变项。

由遗传风险因子导致的“存在发展病症的风险增大”的受治疗者是具有病症的遗传易感性的易患病症的个体和/或与不存在遗传风险因子的受治疗者相比更可能发展病症。“存在风险增大”的受治疗者也可以是在较年轻的阶段容易发展疾病的受治疗者。

如本文所使用的，“存在发展成阿尔茨海默病的风险”的受治疗者包括基于下述中的一个或多个更可能发展成阿尔茨海默病的个体：年龄；rs10524523基因型；APOE基因型等。

如本文所使用的“多态性”是指在基因组的DNA中特定的基因座存在两种或更多种不同功能的核苷酸序列。多态性可以用作遗传标志物并且也可被称作基因变体。多态性包括核苷酸取代、插入、删除和微卫星序列，以及可以但不必须导致在基因表达或蛋白质功能方面可检测的差异。多态位点是基因座中的核苷酸位置，在人群中的至少一个个体中该位置核苷酸序列与参考序列不同。

如本文所使用的“删除/插入多态性”或“DIP”是相对于另外的序列，在一个版本的序列中插入一个或多个核苷酸。如果已知哪个等位基因表示次要等位基因，当次要等位基因具有一个或多个核苷酸的删除时，使用术语“删除”，当次要等位基因具有另外的一个或多个核苷酸时，使用术语“插入”。当存在多种形式或长度并且哪个是次要等位基因不明显时，也可以使用术语“删除/插入多态性”。例如，针对本文所描述的poly-T多态性，观察到了多态性的多个长度。

如本文所使用的“单倍型”是指在个体的至少一个染色体上所携带的基因变体或变体的组合。单倍型通常包括多个邻接的多态基因座。如本文所使用的单倍型的所有部分在染色体或单倍体DNA分子的相同拷贝上出现。相反不存在的证据，假设单倍型表示可能在减数分裂的过程中传递到一起的多个基因座的组合。每个人针对任何给定遗传基因座均携带一对单倍型，由来自双亲的同源染色体遗传的序列构成。这些单倍型针对给定的基因座可以是相同的或可以表示两个不同的基因变体。研究单倍体型是用于确定个体中一个或多个单倍体的过程。研究单倍体型可包括使用家族谱系、分子学技术和/或统计推断。

如本文所使用的“变体”或“基因变体”是指在人群中发现的单倍型的具体的亚型，该具体形式与相同的单倍型的其他形式在所关注的基因区域中至少一个，以及通常是多于一个的变体位点或核苷酸中不同。在基因不同的等位基因之间不同的这些变体位点上的序列被称为“基因序列变体”、“等位基因”或“变体”。术语“可选择形式”是指通过具有至少一个且通常多于一个在基因序列中的变体位点可以与其他等位基因区分的等位基因。“变体”包括具有单一核苷酸多态性(SNPs)和删除/插入多态性(DIPs)的亚型。存在变体的参考是指特定的变体，即在特定的多态位点而不仅是基因中存在任何变化的位点的特定的核苷酸。

如本文所使用的“亚型”是指基因、mRNA、cDNA或由其编码的蛋白质的特别形式，并与其他形式通过其特别的序列和/或结构来区分。例如，载脂蛋白E的ApoE4亚型与ApoE2或ApoE3亚型区分（opposed）。

在本发明的上下文中的术语“基因型”是指基因的特别的等位基因型，其可以通过存在于核酸序列中的一个或多个特定位点的一个或多个特定核苷酸来确定。基因型还可以表示在一个或多个多态基因座存在的一对等位基因。对于二倍体生物，例如人，两个单倍型构成基因型。基因分型是用于确定个体基因型的任何方法，例如通过核酸扩增、DNA测序、抗体结合或其他化学分析(例如，确定长度)方法。得到的基因型可以是不确定的(unphased)，意思是相对于从一个双亲染色体或另一个双亲染色体所派生的，该发现的序列是未知的。

如本文所使用的“治疗”是指向患有疾病或存在发展疾病的患者提供有益的任何形式的措施，包括改善患者的病况(例如，一个或多个症状)、延迟疾病的发病或发展等。治疗可包括任何药物、药物产品、方法、程序、生活方式的改变或尝试对受治疗者健康的特定方面产生变化而导入的其他调节(即，针对具体的疾病、病症或病况)。

如本文所使用的“药物”或“药物物质”是指活性成分，诸如化学成分或生物成分，或化学成分和/或生物成分的组合，其适合于给药至受治疗者以延迟阿尔茨海默病的发病或发展。根据本发明，药物或药物物质是吡格列酮或其药学上可接受的盐。

如本文所使用的术语“药物产品”与术语“医药”、“药物”、“治疗干预”或“药剂产品”是同义词。最优选的，药物产品是由政府机构批准的可以用于根据本发明的方法。根据本发明的药物产品含有低剂量吡格列酮。

“疾病”、“病症”以及“病况”是通常本领域所认知的，并且在通常被认为是异常和/或不期望的个体或患者中标明出现征兆和/或症状。基于病理学改变可以对疾病或病况进行诊断和分类。疾病或病况可选自在标准教科书中列出的疾病类型，所述教科书诸如Harrison's Principles of Internal Medicine,1997或Robbins Pathologic Basis of Disease,1998。

如本文所使用的“线粒体功能障碍”是指在一个细胞或多个细胞中的线粒体的任何有害的异常。本领域中目前已知AD和发展成AD的阶段与线粒体功能障碍相关联。该线粒体功能障碍通过折中ATP生产、扰乱钙稳态以及增加氧化应激来引起细胞损伤和死亡。另外，线粒体损伤可以通过细胞色素c和其它促凋亡因子向细胞质中的释放引起的凋亡细胞死亡(综述，参见Wallace1999Science283:1482-1488;Schapira2006The Lancet368:70-82)。关于本文中发现的具体的实例，不希望被理论束缚，假设ApoE3和ApoE4亚型通过与TOMM40相互作用引起线粒体功能障碍。一些TOMM40变体可与ApoE3亚型协同作用以加速线粒体衰退。另外，在一些实施方式中，认为ApoE2亚型是保护线粒体抵抗线粒体功能障碍的。

如本文所使用的“短型”TOMM40rs10524523等位基因具有少于19个胸腺嘧啶(T)残基，以及“长型”TOMM40rs10524523等位基因具有19或更多的T残基。在一些实施方式中，长型等位基因可表示在一段时间(例如，5-7年的时间内)迟发性阿尔茨海默病的较高的发病风险。

rs10524523("523")等位基因，在TOMM40基因中的内含子polyT tract相对于长度是高度多态性基因，其可变的大小与迟发性AD的发病年龄分布相关。在523polyT的两个拷贝的每个上的T残基数量的测定，每个染色体上1个拷贝，可以通过包括523基因型的每个个体来进行，可以通过标准方法，例如Sanger测序或电泳分析来评估。

根据均聚物长度指定每个523polyT的类别名称：短型(Short)(S，均聚物长度小于19T残基)；长型(Long)(L，长度大于或等于19，但短于30)以及非常长型(Very Long)(VL，长度大于29T残基)。使用类别名称的六种不同的523基因型因此可以是：(S,S)、(VL,VL)、(S,L)、(VL,L)、(S,VL)、(L,L)。也参见Roses的美国专利申请公开No.2011/0166185，其以参考文献引入本文。

APOE基因型是针对AD发病年龄的已经良好确定的风险因子。APOEε4等位基因与523长型(L)等位基因强关联，因此具有523L,L基因型的个体通常(例如，98%的白人)具有APOEε4/ε4基因型。但是，523短型(S)和523非常长型(VL)等位基因可以与APOEε2或APOEε3等位基因相关联。相对于携带ε3等位基因的人，APOEε2等位基因与在较大年龄AD发病相关联(晚5-8年，比较APOEε2/ε3个体与APOEε3/ε3)。因此，在一些实施方式中，APOE可包括在确定中，以在合适的年龄段确定携带APOEε2等位基因的所有人处于低风险组。针对在APOE(ε/3/ε3)和APOE(ε3/ε4)基因型中携带APOEε3等位基因的个体，523基因型提供认知障碍的发病的年龄的更好的分辨。

在一些实施方式中，与具有一个拷贝的长型TOMM40rs10524523等位基因的受治疗者相比，或与具有两个拷贝的短型TOMM40rs10524523等位基因相比，具有两个拷贝的长型TOMM40rs10524523等位基因的受治疗者存在发展AD的更大的风险。在一些实施方式中，与具有两个拷贝的短型TOMM40rs10524523等位基因的受治疗者相比，具有一个拷贝的长型TOMM40rs10524523等位基因的受治疗者存在发展AD的更大的风险。基于TOMM40基因型，确定发展AD的风险或AD阶段的发病或症状应该根据其他风险因素诸如年龄、以及在一些实施方式中还可以包括APOE状态。在一些实施方式中，与具有一个或两个rs10524523长型等位基因拷贝的受治疗者相比，超过62岁的认知正常的具有两个非常长型TOMM40rs10524523等位基因拷贝的受治疗者存在发展AD的风险降低。

可以按照WO2010/019550或US2011/0166185(在此以参考文献将两篇专利文献整体引入)描述的来进行TOMM40基因变体的检测。

如本文所使用的，“存在发展成阿尔茨海默病风险的受治疗者”是指具有阿尔茨海默病的遗传易感性的易患阿尔茨海默病的受治疗者和/或与不存在遗传风险因子的受治疗者相比，在预定的年龄更容易发展成阿尔茨海默病。

如本文所述使用的“风险增大”是指从某一时间点可能在短时间内，例如5-7年内发展AD，所述时间点例如根据本文所描述的一些实施方案开始治疗，或者确定倾向患有阿尔茨海默病或确定阿尔茨海默病的症状的时间(例如通过分析下述中症状的任一种：脑萎缩、脑中的降低的突触活性、脑中增加的淀粉样蛋白的累积、脑中的降低的线粒体功能、脑中降低的增殖、生病的神经元、脑中神经纤维缠结的形成、CSF中的淀粉样蛋白以及CSF中的Tau和/或phospho-Tau)。

“风险增大”还可表示与对照受治疗者相比，个体可能在较年轻的年龄发展AD，即根据一些实施方式，与不具有长型rs10524523等位基因拷贝的个体相比，具有至少一个长型rs10524523等位基因拷贝的个体在较年轻的年龄存在发展AD的更高的风险。

可以通过画出一个或多个因子(例如，TOMM40523基因型)与年龄的图，来确定受治疗者被认为存在发展AD的风险增大的年龄，并且确定在哪一点风险的变化与年龄的变化最为相关(参见图2)。该点可为“大约”的具体年龄，表示该年龄与该点可以相差0.5、1、2、3或5年，该变化可能是基于获取额外的数据的图像的进一步优化或更高数据分辨率而得到的。

根据本发明有用的“给药”方法包括但但不限于，例如通过口服途径摄入、经鼻、直肠、吸入、局部或注射，诸如静脉、皮下、肌内、腹腔、颅内、脊柱注射。在本文的下述名称为“剂量和给药”的部分提供了给药的其他方法。

如本文所使用的“诊断”或“确认患者或受治疗者患有阿尔茨海默病”如本文所定义的是指确定个体是否罹患阿尔茨海默病或是否处于发展成阿尔茨海默病的阶段的过程。阿尔茨海默病的诊断可以基于例如，国家神经病、并发症和中风病-阿尔茨海默病研究所(National Institute of Neurological andCommunicative Disorders and Stroke-Alzheimer's Disease)和相关病症关联的标准。

“低剂量吡格列酮”是指吡格列酮或其药学上可接受的盐的量的范围在0.5mg-12mg，诸如0.5mg、0.75mg、1mg、1.25mg、1.5mg、1.75mg、2mg、2.25mg、2.5mg、2.75mg、3mg、3.25mg、3.5mg、3.75mg、4mg、4.25mg、4.5mg、4.75mg、5mg、5.25mg、5.5mg、5.75mg、6mg、6.25mg、6.5mg、6.75mg、7mg、7.25mg、7.5mg、7.75mg、8mg、8.25mg、8.5mg、8.75mg、9mg、9.25mg、9.5mg、9.75mg、10mg、10.25mg、10.5mg、10.75mg、11mg、11.25mg、11.5mg、11.75mg或12mg。另一方面，在本发明的在一些实施方式中，低剂量吡格列酮表示可以在受治疗者中提供约0.15μg·h/mL-约3.6μg·h/mL(±25%)范围的吡格列酮AUC的低剂量的吡格列酮或其药学上可接受的盐。例如，低剂量吡格列酮AUC可以在从0.12、0.37、或1.12-3.4或4.5μg·h/mL的范围。

如本文所使用的“对照受治疗者”表示未被诊断患有阿尔茨海默病的受治疗者和/或没有显示与阿尔茨海默病相关的任何可检测症状的受治疗者。如本文所定义的，“对照受治疗者”还表示不存在发展成阿尔茨海默病风险的受治疗者。

如本文所使用的“不存在发展成阿尔茨海默病风险的受治疗者”是指，例如不具有TOMM40rs10524523基因型的受治疗者，结合年龄和可能的其他因子诸如APOE状态，其表示该受治疗者与通常的人群或通常的人群所分选的部分相比，不太可能发展AD或AD的阶段或症状。

如本文所使用的术语“药学上可接受的盐”是指如下盐：在声医学判断(sound medical judgment)的范围内，当与受治疗者的肌肉接触时适合与吡格列酮一起使用而不具有异常毒性、刺激、过敏反应等，并且与合理的益处/风险比相匹配的盐，该受治疗者例如动物，包括哺乳动物、人和低等动物。本领域熟知药学上可接受的盐。例如S.M.Berge等人在J.PharmaceuticalSciences,66:1-19(1977)中详细地描述了药学上可接受的盐。可以在本发明的化合物的最后分离和纯化的过程中原位制备该盐，或者通过使游离碱与合适的有机酸反应分离。药学上可接受盐的实例包括但不限于：非毒性酸加成盐，其为与无机酸(诸如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸)或有机酸(诸如乙酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸)形成的盐，或通过使用本领域使用的其他方法(诸如离子交换)形成的。其他药学上可接受的盐包括但不限于：己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡糖酸盐、半硫酸盐（hemisulfate）、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、扑酸盐、果胶脂酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一烷酸盐、戊酸盐等。代表性的碱金属或碱土金属盐包括钠盐、锂盐、钾盐、钙盐、镁盐等。当适当时，其他药学上可接受的盐包括无毒性铵盐、季铵盐以及使用平衡离子形成的胺阳离子，所述平衡离子诸如卤离子、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、具有1-6个碳原子的烷基、磺酸根以及芳基磺酸根。

II.阿尔茨海默病

阿尔茨海默病的症状

阿尔茨海默病的常见症状包括但不限于：记忆丧失、难以进行熟悉的任务、语言存在问题、对于时间和位置迷失方向、差或降低的判断、抽象思考存在问题、乱放东西、情绪或行为改变、个性改变以及丧失能动性。这些症状随着时间逐渐出现并且通常(但不是总是)由情节记忆问题开始，然后出现其他严重影响人的正常功能(例如日常生活的活动)的认知缺陷。行为/性格的改变通常出现在疾病进程的晚些时候，随着人变得更为温和和严重受影响。这些典型的症状的一些例子如下所述。

记忆丧失

记忆丧失包括忘记最近获得的信息并且是痴呆的早期症状中最为常见的一种。人开始更容易忘记并随后难以回想该信息。记忆丧失包括偶尔忘记名字或约定。

难以进行熟悉的任务

患有痴呆的人通常发现难以进行计划或完成每天的任务。个体可能会丧失涉及准备饭菜、打电话或玩游戏的步骤的轨迹。难以进行熟悉的任务包括偶尔忘记你为什么进入屋子或你计划说什么。

语言存在问题

患有阿尔茨海默病的人通常忘记简单的词或替换通常的词，使得他们的讲话或书写难以理解。例如，他们可能无法想到牙刷而是代替地询问“用于我的嘴的东西”。语言存在问题包括偶尔忘记名字或约定。

对于时间和位置迷失方向

患有阿尔茨海默病的人会在他们自己家附近迷路，忘记他们在哪里以及他们要去哪里，并且忘记如何回家。所述术语时间和位置迷失方向包括忘记一周的日期或者他们准备去哪里。在一些患者中，混乱和有时伴随的激动以及行为问题在傍晚变得更为明显，该症状称为“日落综合症”。

差或降低的判断

患有阿尔茨海默病的人会穿着不适当，在温暖的日期穿多层衣服而在寒冷的日子穿很少的衣服。他们会表现出差的判断力，例如给推销员大量的钱。差或降低的判断包括不时发生有令人质疑的或值得商榷的决定。

抽象思考存在问题

有些患有阿尔茨海默病的人在进行复杂心理任务时具有异常的困难，例如忘记数字代表什么和应该如何使用它们。抽象思考存在问题包括发现平衡支票簿是较为困难的。

乱放东西

患有阿尔茨海默病的人会在异常的位置摆放东西；在冰箱中放铁在糖罐中放手表。乱放东西包括暂时将钥匙或钱包放错位置。

情绪或行为改变

一些患有阿尔茨海默病的人可能会显示出情绪的快速变化-从冷静到哭泣到愤怒-而没有明显的原因。情绪或行为改变包括偶尔感觉悲伤或忧郁。

个性改变

有痴呆的人的个性可能会发生显著地变化。他们可能会变得极度的迷惑或怀疑、害怕的或依赖家庭成员。人的个性会随着年龄有一定的改变。

丧失能动性

患有阿尔茨海默病的人可能会变得非常消极，坐在电视前数个小时，睡觉的时间比通常长或不希望进行常规的活动。丧失能动性包括对于工作或社会责任感到厌倦。

阿尔茨海默病的诊断和分期

阿尔茨海默病的临床诊断是通常涉及多个步骤(包括病史、身体和精神的状态测试、以及实验室测试)和手段的过程。对于后者，从1984年起，由美国国立神经疾病和卒中研究所(NINDS)/阿尔茨海默病和相关疾病协会(ADRDA)(Neurological Disorders and Stroke(NINDS)/Alzheimer’s Disease andrelated Disorders Association(ADRDA))，根据DSM-IV标准(用于临床实践和研究的主要标准)建立了诊断标准。两个标准均需要出现记忆功能障碍和认知障碍，尽管DSM标准规定认知障碍对于正常的功能具有反作用，而NINCDS/ADRDA标准没有这项规定。两套标准的特征均不认为AD的死前诊断是最终的诊断，因为到目前为止，直到病人死后没有方法可以用来评估针对特性AD特征的脑病理学。因此NINCDS/ADRDA标准认为死前诊断是“可能的”或“很可能的”，这取决于临床证据的力度，包括排除多个不同的诊断。

直到最近，可以将受治疗者发展成阿尔茨海默病的恶化过程表示为多个临床阶段。本文中使用的术语“阶段”通常是描述受治疗者能力如何从正常功能开始改变，例如从正常认知状态到阿尔茨海默病的改变。应当注意阶段是通常的指引，不同阶段中和/或不同阶段之间的症状可以变化非常大，以及不是每个受治疗者会在给定的阶段经历相同的症状或以相同的速率发展成阿尔茨海默病。例如，纽约大学医学院的Silberstein老年化和痴呆研究中心(New York University School of Medicine's Silberstein Aging and DementiaResearch Center)的Barry Reisberg,M.D.临床主任建立的七阶段框架，其包括：阶段1：无障碍；阶段2：非常轻微的衰退；阶段3：轻微衰退；阶段4：中度衰退；阶段5：中度严重衰退；阶段6：严重衰退；以及阶段7：非常严重衰退。在临床研究领域，基于心理测试手段例如简易精神状态检查(Mini-Mental State Examination)的评分，AD通常在一定程度上被松散地定义为“轻度”、“中等”或“严重”，其中，例如，轻度AD被认为为18-26，中度为11-17以及严重为10或更低(基于30分标准，更高的分数表示良好的认知功能)。

在2007年，Dubois等人提出对用于AD诊断的NINCDS/ADRDA标准进行修改以并入在本领域对于疾病发展的理解所增长的认识以及用于评估AD死前生物标志的新方法，包括脑成像(Dubois等人，2007Lancet Neurol6:734-746)。在该建议中，虽然具有支持性特征，死前诊断仍被认为是“可能的”AD，而“确定的”AD诊断留待病理组织学确认或基因证据(染色体1、14或21上的突变)。

在2011年，代表国家老龄化研究所/阿尔茨海默症协会研究圆桌会议的(the National Institute on Aging/Alzheimer’s Association Research Roundtable)工作组提出了针对NINCDS/ADRDA标准的类似的修改，以及建议标准建立MCI诊断和由MCI引起的AD的诊断(Albert等人，2011Alzheimers Dement7:270-279;McKhann等人，2011Alzheimers Dement7:263-269)。该工作组更新了所有引起痴呆和由AD引起的痴呆的标准。该工作组保留了利用AD病理生理方法的证据定义（designation）的很可能的AD痴呆(probable ADdementia)、可能的AD痴呆(possible AD dementia)、以及很可能或可能的AD痴呆(probable or possible AD dementia)。前两个定义意在用于所有的临床设置，而确定最后一个定义适合用于研究目的。该工作组认定阿尔茨海默病的进展是连续的，以及MCI和痴呆之间的区别是临床的评估是否对日常活动造成了显著的干扰。

“临床前(Preclinical)AD”涉及如下阶段：其症状充分满足目前所接受的临床前AD的标准(参见Dubois等人，如前)。通常来说，临床前AD是在AD的病理生理方法开始时长的症状前阶段。在受治疗者满足MCI的临床标准的几年前，可能会是非常微细的认知症状(Sperling等人，2011AlzheimersDement 7:280-292)。

“前驱(Prodromal)AD”涉及如下阶段：其症状满足目前所接受的前驱AD的标准(参见Dubois等人，如前)。根据本发明，前驱AD是通常包括MCI但没有痴呆的症状的前痴呆阶段，并且其特征在于症状还未严重到足够满足全部阿尔茨海默病诊断标准。在本文中前驱AD阶段也被称为发展的MCI阶段。

III.吡格列酮

吡格列酮是具有下述化学结构的噻唑烷二酮试剂：

吡格列酮盐酸盐是过氧化物酶体增殖物活化受体γ（PPARγ）的有效激动剂。在组织，例如脂肪组织、骨骼肌和肝脏中发现PPAR受体。

尽管不希望被理论束缚，但认为PPARγ激动剂吡格列酮可以保护不受至少一些涉及阿尔茨海默病(AD)的病理机理的影响或减轻至少一些涉及阿尔茨海默病(AD)的病理机理，例如在临床前阶段中观察到的代谢活性降低。

在第一次认知症状出现之前，相应于AD临床表现的病理生理变化可能开始数年或甚至数十年，在临床前阶段缓慢地发展。在一些实施方式中，在本文中教导的给药低剂量吡格列酮可保护不受这些改变的影响或减轻这些改变，从而延迟阿尔茨海默型认知障碍的发病。

在一些实施方式中，以有效量给药吡格列酮以保护或增加神经元线粒体功能，或扩展线粒体蓄积(mitochondrial reservoir)，以治疗例如延迟认知障碍或防止出现认知障碍(例如，阿尔茨海默型认知障碍)。在一些实施方式中，在显著的病理损伤发生和/或检测或诊断到认知障碍之前开始治疗。

认为线粒体功能障碍对在AD中观察到的脑内代谢减退(cerebralhypometabolism)起到重要的作用。在健康老龄化过程中脑代谢活性(主要是由于线粒体活性)降低并且出现非病理性脑萎缩(Curiati等人，2011Am JNeuroradiol32:560-565)，但是在前驱的症状上的早期发病(家族型)AD中，在轻度认知障碍(MCI)中，以及在迟发性阿尔茨海默病中出现代谢减退和萎缩(Reiman等人，1996N Engl J Med 334:752-758;Mosconi等人，2004Psychiatry Research:Neuroimaging130:141-151;Mosconi等人，2005 J NeurolNeurosurg Psychiatry 76:15-23;Mosconi等人，2006 J Nucl Med 47:1778-1786;Chételat等人，2008 Brain 131:60-71;Mosconi等人，2008 Annals of the NewYork Academy of Sciences 1147:180-195;Mosconi等人，2009 Neurology 72:513-520;Mosconi等人，2009Eur J Nucl Med Mol Imaging36:811-822;Villain等人，2010 Brain 133:3301-3314)。已经在AD患者的尸检海马中、在血小板和成纤维细胞中发现线粒体酶活性相对于认知正常的受治疗者而言降低(Mancuso等人2010 Adv Exp Med Biol 685:34-44)。

在AD病因中，线粒体功能的扰动的假说是非常早期的事件，可能在临床症状之前的数十年出现，并得到了良好的支持(Castellani等人，2002Journal of Neuroscience Research 70:357-360;Bubber等人，2005Annals ofNeurology 57:695-703;Beal 2007 Mitochondrial Biology:New Perspectives287:183-192;discussion 192-186;Liang等人，2008Physiological Genomics33:240-256;Liang等人，2008PNAS105:4441-4446;Jack等人，2009Brain132:1355-1365;Moreira等人，2010Biochimica et Biophysica Acta(BBA)-Molecular Basis of Disease1802:2-10;Swerdlow等人，2010J Alzheimers Dis20 Suppl 2:S265-279;Cunnane等人，2011 Nutrition 27:3-20)。在多个脑区域，在由于携带APOEε4而存在发展成AD的风险增大的年轻个体中，涉及线粒体功能的基因的表达发生改变(Conejero-Goldberg等人，2011 MolecularPsychiatry 16:836-847)，以及被确认由于疾病的家族史或携带至少一个APOEε4等位基因而存在发展成迟发性AD的风险增大的认知正常的人的脑中，在死后以及在生命过程中利用成像技术从生物化学方面检测到了相对降低的代谢活性(Small等人，1995 JAMA 273:942-947;Reiman等人，2005PNAS 102:8299-8302;Mosconi等人，2008Annals of the New York Academyof Sciences 1147:180-195;Langbaum等人，2010Arch Neurol67:462-468;Mosconi等人，2011 Journal of Alzheimer's Disease)。

人的脑与其他任何器官相比每克组织消耗更多的能量，其占据身体总能量支出的约五分之一。葡萄糖是脑代谢的主要能源，并且大部分细胞能量产生出现在线粒体中。神经元线粒体产生腺苷三磷酸(ATP)以给予突触的神经物质传递释放和吸收的能量，以保持离子梯度，并且给予线粒体和轴突运输的能量。线粒体也调节钙平衡和细胞凋亡，而功能失调的线粒体产生增加水平的毒性反应性氧物质(Mattson等人，2008 Neuron 60:748-766)。一些研究提出神经元还利用由在附近的星形胶质细胞中的葡萄糖氧化产生的乳酸(Pancani等人，2011 Cell Calcium5 0:548-558)。在神经元中乳酸盐最终还原为丙酮酸，然后，例如提供到线粒体中的氧化磷酸化途径中的葡萄糖产生ATP。

在一些实施方式中，可测量取决于给药的脑代谢活性的变化以确定吡格列酮的最佳的剂量和/或给药形式。可以使用本领域已知的专门的技术来测定脑代谢活性，包括功能性核磁共振成像(fMRI)，最为通常的方法是血氧水平依赖(BOLD)fMRI，以及[¹⁸F]-氟脱氧葡萄糖正电子发射断层扫描技术(FDG-PET)(Jack等人，2000Neurology55:484-490;Whitwell等人，2007 Brain130:1777-1786)。BOLD fMRI检测脱氧血红蛋白向氧合血红蛋白的转化率；在区域神经活性上的少量增加导致经由脑血管的氧传递的区域性需求增加，从而导致在区域中增加的fMRI信号。因此，BOLD提供了神经活性的间接但敏感的检测手段。可以通过FDG-PET计算来定量测量葡萄糖的摄取，以及葡萄糖的脑代谢速率(CMRglu)。

Cunnane等人综述了针对MCI和AD的FDG-PET研究的主要的文献，得出在AD患者脑萎缩的调整之后葡萄糖的全脑代谢速率(CMRg)减少约20-25%(Cunnane等人，如上)。在AD中最为统一的FDG-PET发现是在内嗅区皮质和海马体(最早受AD影响的两个区域)中降低的CMRglu，并随着疾病的进展发展至扣带回后部、颞区域、楔前叶和前额叶皮层(During等人，2011 Neurological Sciences 32:559-569;Filippi和Agosta 2011 Journal ofAlzheimers Disease 24:455-474)。在AD诊断之前，在认知减退的非常早期阶段也会出现降低的脑葡萄糖代谢，以及在MCI的AD-敏感脑区域中，随着认知减退代谢减退的大小和程度也会加重(Caselli等人，2008 Arch Neurol65:1231-1236;Nishi等人，2010J Neuroimaging 20:29-36;Chételat等人，2008,如上)。

纵向研究显示，对于从正常的认知发展到临床上诊断的遗忘的MCI的人而言，在认知衰退和已知优先受到AD影响的脑区域代谢减少之间存在关系。在整个研究保持稳定的认知的类似组人中没有发现该在脑的AD敏感区域的衰退(Caselli等人2008，如上；Chételat等人，2008，如上)。另外，认知正常但是存在AD风险的年轻的成年人以及中年个体(例如，具有AD的家族史、携带APOEε4、或者具有症状前早发性的个体、家族型AD)，与那些没有这些风险因素的个体相比，在AD病理敏感的脑区域具有降低的葡萄糖代谢(Small等人，1995，如上；Reiman等人，1996，如上；Reiman等人，2005，如上；Mosconi等人，2006，如上；Langbaum等人，2010，如上；Small等人，2000 PNAS 97:6037-6042;Reiman等人，2004 PNAS 101:284-289)。因此，在受AD影响的脑区域的降低的代谢可能是早期病理生理改变中的一个和/或是在那些存在发展该疾病风险的人中未来疾病的指标，并且与疾病的发展也存在关系。

如本领域所知的，使用血氧水平依赖(BOLD)对照的fMRI可以用来在任务(例如认知任务)过程中使神经元活性可视化并且检测神经元活性，以及使脑的静息状态的活性可视化，包括预设模式网络(default mode network(DMN))，其是该脑区域的网络，在清醒的静息状态是活动的但在任务过程中是不活动的(和Sperling 2008 Future Neurology 3:409-421;Huettel和Larry 2009 Encyclopedia of Neuroscience 273-281)。神经元活性增加代谢以及增加对于葡萄糖和氧的局部需求，这刺激血向脑的活跃区域流动。这是通过BOLD fMRI可视化的血液动力学响应(局部脑血流的产物，氧和脑血体积的脑代谢速率)，BOLD fMRI是广泛接受的神经元活性以及反射能量消耗的指标(

和Sperling 2008，如上；Wise和Preston 2010Drug Discovery Today 15:973-980;Reitz等人，2011Nat Rev Neurol 7:137-152)。

BOLD fMRI显示在那些存在AD风险的人中，任务-唤起的脑活性(task-evoked brain activity)被损害(compromise)，并随着AD发展进一步减少(Filippi和Agosta2011，如上)。一些使用的任务可能会挑战在疾病发展的早期损害的高级认知功能，包括情节和工作记忆。在内侧颞叶(MTL)BOLDfMRI信号最早变化，包括海马体，并与编码或恢复记忆所需的神经网络关联(

和Sperling2008，如上)。在存在发展成AD的风险增大的年轻和老年认知正常的个体中，降低的神经活性在MTL中也是可见的，尤其是在海马体区域(

和Sperling 2008，如上；Filippi和Agosta 2011，如上；Wu等人，2009J Cell Physiol 220:58-71;Jones等人，2011 Neurology 77:1524-1531)，后内侧皮质(posteromedial cortical)区域的BOLD fMRI信号的强度与认知正常的较老的受治疗者中的口头情节记忆特性相关，并且在从认知障碍发展成AD痴呆的受治疗者中降低(Pihlajamaki等人，2010 AlzheimerDisease & Associated Disorders 24:28-36)。除了在临床前、前驱和AD痴呆中，任务-唤起的脑活性改变之外，在静息状态的脑的fMRI和FDG-PET研究表示随着MCI和AD发展，脑具体区域间的功能连接明显改变(Reiman等人，1996，如上；Filippi and Agosta 2011，如上；Jin等人，2012Magnetic ResonanceImaging 30:48-61)。已经证明BOLD-fMRI是用于检测人脑和其他物种(例如大鼠)脑的功能连接的特别有效的方法。Biswal等人早在1995年就认识到通过fMRI检测，在功能上关联的脑区域，血流的低频波动和氧合存在时间上的关系(Biswal等人，1995Magn Reson Med 34:537-541)。这些时空-时间坐标上的波动甚至出现在没有涉及到任务中的脑，即处于休息的脑，该波动被认为反射自发的神经元活性或背景脑处理(background brainprocess)(Damoiseaux等人，2011Neurobiology of Aging;Yamasaki等人，2012Neurology Research International2012)。在AD中，在脑区域或高级认知过程需要的系统，包括在DMN和涉及注意力的系统中，注意到了改变的功能连接(Yamasaki等人，2012，如上)。针对AD和MCI患者，有报道称在具体脑区域-例如扣带回后部和颞叶皮层或海马体之间，以及在皮层下区域、丘脑和大量皮质区域之间-在DMN中存在降低的静息连接(restingconnectivity)(Wang等人，2011European Journal of Radiology)。相反，在AD和MCI中，在前额区域和DMN区域和脑的前部分之间，存在增加的静息态功能连接(Wang等人，2006NeuroImage 31:496-504;Zhang等人，2009 BehavBrain Res 197:103-108)。

迄今为止，预测哪些人更可能发展成这些病理生理变化，哪些可能导致认知障碍，以及最后导致阿尔茨海默病的能力还是不可行的。与年龄相关的TOMM40 rs10524523基因型，以及其他可能的因素用于作为确认哪个受治疗者存在发展成阿尔茨海默型认知障碍的风险的预后生物标记，并且提供了在该发展性和破坏性疾病的早期阶段干预的机会。

PPARγ是侵犯涉及AD病因的多个途径的配体-激活、核转录因子(Landreth等人，2008 Neurotherapeutics 5:481-489)。其生物学功能包括调节炎性基因表达以及调控葡萄糖和脂质体代谢，这两者在AD中均不正常。PPARγ对于线粒体功能和ATP生产也具有直接影响。AD研究中的许多设想领导者认为线粒体功能障碍在AD中观察到的脑内代谢减退中发挥非常重要的作用。

PPARγ受体由内源性配体激活，以及由大量药剂包括噻唑烷二酮(TZD)类药物激活。

吡格列酮上市是用于治疗2型糖尿病(Actos^TM)，及其通过增加组织、特别是肝脏、肌肉和脂肪组织的敏感性以影响胰岛素，来治疗2型糖尿病的标志胰岛素抵抗(Olefsky 2000 The Journal of Clinical Investigation 106:467-472)。T2DM和胰岛素抵抗是发展成AD的风险因素，携带APOEε4的糖尿病患者尤其存在风险(Irie等人，2008 Arch Neurol 65:89-93；

等人，2008 Neurology 71:1065-1071；Bruehl等人，2009 Journal of Clinical andExperimental Neuropsychology 32:487-493)。与对照脑相比尸检AD患者的脑具有显著低水平的胰岛素、胰岛素受体以及IRS-1mRNA，符合胰岛素抵抗或糖尿病表型导致一些人将AD认为3型糖尿病(Steen等人，2005 JAlzheimers Dis 7:63-80)。在整个人脑中发现的胰岛素受体在下丘脑、小脑和皮质中的浓度特别高，PPARγ和其共激活因子、视黄素X受体（RXR）也在脑中表达，包括在海马体和皮质中(Inestrosa等人，2005 Experimental CellResearch 304:91-104;Gofflot等人，2007 Cell 131:405-418;Morales-Garcia等人，2011 GLIA 59:293-307)。在星形胶质细胞和神经元中表达PPARγ受体，在来自AD患者的死后的脑溶解物中蛋白质水平下降～40%。

吡格列酮改善神经元的胰岛素抵抗(Liu等人，2010 European Journal ofPharmacology 629:153-158)，其低至1nM的浓度显著降低由于葡萄糖损失导致的细胞死亡，这可能是因为吡格列酮通过增加线粒体浓度和/或调节线粒体结构而得到对于不受低血糖影响的保护。该药物还增加NRF1、TFAM1(线粒体生物合成（biogenesis）所需转录因子)和UCP-2(线粒体改装所需的)的表达(Miglio等人，2009 Neurochemistry International 55:496-504)。

已经报道了吡格列酮在AD的转基因小鼠模型，以及在小鼠和大鼠的神经退行性疾病或脑损伤模型中的有益效果。报道的由吡格列酮治疗的有益效果包括降低AD转基因小鼠模型中的脑淀粉样蛋白斑块负担，改善脑葡萄糖的利用和脑血管功能，减少脑炎症，减少氧化应激，改善病理相关的记忆和学习能力缺失，以及增加成年动物中的神经再生(Heneka等人，2000 Journalof Neuroscience 20:6862-6867；Yan等人，2003 Journal of Neuroscience 23:7504-7509；Heneka等人，2005 Brain 128:1442-1453；Pathan等人，2006 LifeSci 79:2209-2216；Nicolakakis等人，2008 Journal of Neuroscience 28:9287-9296；Kaur等人，2009 Fundamental & Clinical Pharmacology 23:557-566；Roberts等人，2009 Experimental Neurology 216:459-470；Glatz等人，2010 Journal of Hypertension 28:1488-1497；Nicolakakis and Hamel 2011 JCereb Blood Flow Metab 31:1354-1370；Morales-Garcia等人，2011，如上；Zhang,Xu等人，2011，如上)。吡格列酮也改善认知和高胰岛素血症，并且在具有AD或轻度认知障碍的糖尿病患者的小型安慰剂-对照临床试验中改善区域脑血流(Hanyu等人，2009 Journal of the American Geriatrics Society 57:177-179；Hanyu等人，2010 J Am Geriatr Soc58:1000-1001；Sato等人，2010Neurobiology of Aging 32:1626-1633)。

吡格列酮的市售15mg、30mg和45mg剂量对于给药2型糖尿病是合适的，并且对于治疗该疾病是安全和有效的。已经将吡格列酮的糖尿病水平剂量用于阿尔茨海默病的小型临床实验中(Hanyu等人，2009 Journal of theAmerican Geriatrics Society 57:177-179;Hanyu等人，2010J Am Geriatr Soc 58:1000-1001;Sato等人，2010 Neurobiology of Aging 32:1626-1633)。另外，在最近的针对阿尔茨海默病的临床实验中使用了不同的噻唑烷二酮-罗格列酮-药物的2型糖尿病剂量(Risner等人，2006Pharmacogenomics Journal 6:246-254;Gold等人，2010Dementia and Geriatric Cognitive Disorders 30:131-146)。

但是，如果对于预期的患者人群以较低剂量就可以充分获得其所需的药效和功效，则优选限制对药物的暴露。通过这种方式，可以进一步降低少见或不通常的副作用的出现频率，从而提高安全性。

如本文所教导的，如在下述实施例中所示例的BOLD研究结果所证明的，令人惊奇地发现显著地低于用于治疗2型糖尿病使用的剂量的剂量(即，低剂量吡格列酮)可以得到改变脑代谢的结果，从而可以有效地治疗阿尔茨海默病，包括延迟认知减退的发病(即阿尔茨海默型认知障碍)。

V.给药的制剂和方式

本发明提供根据本发明方法有用的许多低剂量吡格列酮的药物产品制剂，包括但不限于低强度(low strength(LS)制剂、口腔崩解片剂(ODT)制剂、液体制剂、悬浮制剂、鼻制剂、口服的快速、改性、控释或延长释放制剂、经皮制剂、直肠制剂、局部制剂或者注射制剂。

(a)低强度(LS)制剂

本发明提供低剂量吡格列酮的LS制剂，例如如U.S.S.N.12/452,587和美国专利公开No.2010/0166853所描述的，在此将其全部并入作为参考。本发明的包衣制剂包括：包括药学上可接受的有机酸(在20℃不小于10mg/mL的水溶解度和在25℃不大于5的pK_a1(第一酸解离常数K_a1的负常用对数))的核，以及包括吡格列酮或其盐的包衣层。

本发明的包衣制剂可以是具有核和包衣层的单制剂，或各自具有核和包衣层的制剂的集合体。另外，本发明的包衣制剂可以是通过混合各自具有核和包衣层的制剂的集合体，与根据需要的添加剂并将混合物装入胶囊而制备的胶囊制剂。

另外，本发明的包衣制剂可以是通过混合各自具有核和包衣层的制剂的集合体与添加剂，并且对该混合物进行压塑成形而得到的片剂或囊片。

本发明的包衣制剂的核可仅由药学上可接受的有机酸(其具有在20℃不小于10mg/mL的水溶解度和在25℃不大于5的pK_a1)构成。另外，该核可以由药学上可接受的有机酸(其具有在20℃不小于10mg/mL的水溶解度和在25℃不大于5的pK_a1)和例如下述的添加剂等的组合物构成。

包含在本发明的包衣制剂的核中的有机酸是药学上可接受的有机酸，其具有在20℃不小于10mg/mL的水溶解度和在25℃不大于5的pK_a1。在20℃的水溶解度优选不小于50mg/mL，更优选不小于100mg/mL。在20℃的水溶解度优选不大于2000mg/mL。25℃的pK_a1优选不大于5，更优选不大于4。pK_a1优选不小于1。优选的有机酸具有在20℃不小于300mg/mL的水溶解度和在25℃不大于4的pK_a1。

有机酸的具体例子包括柠檬酸、酒石酸、苹果酸和抗坏血酸等中的一种或多种。有机酸可以是任何水合物和酸式盐。另外，所述有机酸优选为晶体形式，这是因为含有晶体有机酸的核的机械强度和化学稳定性在本发明的制剂的制造步骤中不会变差以及考虑到酸度。

在本说明书中，柠檬酸包括柠檬酸一水合物和无水柠檬酸。

作为有机酸，优选柠檬酸、酒石酸和苹果酸，以及柠檬酸(特别是无水柠檬酸)更为优选作为药物添加剂。

有机酸的平均粒度通常为100-1500μm，优选300-800μm。例如使用激光衍射颗粒分布测量装置(e.g.,SYNPATEC HELOS-RODOS颗粒分布测量装置)来测定平均粒度。

尽管核的平均粒度根据本发明的包衣制剂的种类会变化，通常为100-1500μm，优选为300-800μm。

本发明的包衣制剂的核可以用包括吡格列酮或其盐的包衣层所包覆。

尽管本发明的包衣制剂的核中的有机酸的含量根据有机酸等的种类会变化，通常每100重量份包衣制剂，为20-95重量份，优选40-80重量份。

关于用于本发明包衣制剂的吡格列酮或其盐，吡格列酮的盐的例子包括药学上可接受的盐，诸如与无机酸形成的盐、与有机酸形成的盐、与酸性氨基酸形成的盐等。

与无机酸形成的盐的优选的例子包括与盐酸、氢溴酸、硝酸、硫酸、磷酸等形成的盐。

与有机酸形成的盐的优选的例子包括与甲酸、乙酸、三氟乙酸、富马酸、草酸、酒石酸、马来酸、柠檬酸、琥珀酸、苹果酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸等形成的盐。

与酸性氨基酸形成的盐的优选的例子包括与天冬氨酸、谷氨酸等形成的盐。

另外，吡格列酮可以是无水物或水合物中的任何，吡格列酮可以进一步用同位素(例如，³H、¹⁴C、³⁵S、¹²⁵I)等标记。

吡格列酮或其药学上可接受的盐优选为吡格列酮盐酸盐。

吡格列酮或其药学上可接受的盐可以用通常本领域已知的稀释剂等稀释。

在本发明的包衣制剂中，将用作原料的吡格列酮和其盐的中值粒度优选为0.5-50μm。

通过使用这样的中值粒度，可以获得具有优异的溶解性的吡格列酮或其药学上可接受的盐的包衣制剂。

上述优选中值粒度的吡格列酮或其药学上可接受的盐用作原料。原料可包括通过在生产包衣制剂的过程中粉碎而得到的经粉碎的产品，或者通过与赋形剂(例如结晶纤维素)等一起粉碎得到的混合的粉碎产品。在本发明包衣制剂的制备过程中或者在制备之后的包衣制剂的保存过程中，通过吡格列酮或其盐的凝聚，吡格列酮或其药学上可接受的盐的中值粒度可以超出上述范围。使用制剂形成仪器，例如研钵、喷射磨、摆锤磨、筛网磨((P-3；ShowaKagaku Kikai Kosakusho Co.,Ltd.))等来进行粉碎。

如本文所使用的，中值粒度表示基于重量分布或数量分布将颗粒分成50%粗颗粒和50%细颗粒的粒度。可以通过例如激光衍射粒度分布测量装置(例如，SYNPATEC HELOS-RODOS颗粒分布测量装置)来测量中值粒度。

具有上述期望的中值粒度的吡格列酮或其药学上可接受的盐的分散度优选规定为含有不高于总量的10%的不大于0.1μm的颗粒，以及含有不高于总量的10%的不小于1000μm的颗粒。其下限通常规定为含有不小于总量的0.1%的不大于0.1μm的颗粒，以及含有不少于总量的0.1%的不小于1000μm的颗粒。

尽管本发明包衣制剂中的吡格列酮或其药学上可接受的盐的量随包衣制剂的剂型、剂量等而发生变化，但通常为每100重量份包衣制剂，吡格列酮或其药学上可接受的盐的量为0.01-30重量份，优选为0.5-25重量份，进一步优选为0.5-20重量份。

在本发明的包衣制剂中，吡格列酮和上述药学上可接受的有机酸的重量比优选为1:4-1:100，更优选为1:4-1:20，更优选为1:5-1:10。吡格列酮的重量表示相当于在吡格列酮药学上可接受的盐中吡格列酮的重量。

在本发明的包衣制剂中，所使用的包含吡格列酮或其盐的包衣层的量通常每100重量份的核为5-205重量份，优选10-100重量份，更优选20-90重量份。

本发明的包衣制剂优选在包衣层中含有纤维素或纤维素的衍生物。其中，优选纤维素的衍生物。

纤维素的衍生物是指其中纤维素分子的部分被其他原子或官能基取代。纤维素衍生物的例子包括低取代的羟丙基纤维素(L-HPC)、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、乙酸琥珀酸羟丙基甲基纤维素等。其中，优选低取代羟丙基纤维素。更优选具有5-16重量%含量的羟基丙氧基的低取代羟丙基纤维素(例如，LH-11、LH-21、LH-31、LH-22、LH-32、LH-20、LH-30、LH-33(商品名，由by Shin-Etsu Chemical Co.,Ltd.生产)等)等。

本发明的包衣制剂的包衣层中的纤维素或纤维素衍生物的含量通常每100重量份包衣层为0.5-70重量份，优选约2-约50重量份，更优选约2-约30重量份。

由于包衣层中含有纤维素或纤维素衍生物(优选纤维素衍生物)，本发明的包衣制剂具有构成包衣层的结构，其包括作为骨架的纤维素或纤维素衍生物并且保持在含水溶剂中，其中吡格列酮或其药学上可接受的盐溶解到在结构中的有机酸(溶液)中，得到含水溶液。结果，与传统的制剂相比，本发明的包衣制剂可显著地提高给药后的吡格列酮的最大血药浓度和AUC，并且显著地降低了AUC中的个体间相对标准偏差(inter-individual relativestandard deviation(RSD))。

另外，由于本发明的包衣制剂具有构成包衣层的结构，其包括作为骨架的纤维素或纤维素衍生物并且保持在含水溶剂中，其中吡格列酮或其药学上可接受的盐溶解到在结构中的有机酸(溶液)中，得到含水溶液，与传统的制剂相比，这样可以提高生物利用度。具体地，当向狗给该药制剂时，本发明的包衣制剂的生物利用度超过75%。

在本说明书中，生物利用度可以通过例如非静脉给药给定量的吡格列酮时的AUC除以静脉给药相同量的吡格列酮时的AUC来确定。例如，当准备计算口服本发明的低剂量吡格列酮快速释放药物产品的生物利用度时，公式可如下所示：

生物利用度(%)=(口服给药的AUC/静脉给药的AUC)x100。

当吡格列酮溶解在结构中得到水溶液时，可以提供与溶液给药所实现的相似的效果，溶液给药被期待提高最大血药浓度、AUC和生物利用度。

在此，本说明书中的含水溶剂包括水、KCl--HCl缓冲液(例如，pH2.0的KCl--HCl缓冲液)、McIlvaine缓冲液(例如，pH2.2、pH2.5或pH3.0的McIlvaine缓冲液)等。构成包衣层的结构，其包括作为骨架的纤维素衍生物并且保持在含水溶剂中具体的含义为，例如在浆法(Paddle Method)的条件(50rpm)下，结构优选在KCl--HCl缓冲液(pH2.0,900mL)中，更优选在浆法条件(50rpm)下，在McIlvaine缓冲液(pH2.2,900ml)中，进一步优选在浆法条件(50rpm)下，在McIlvaine缓冲液(pH2.5,900ml)中，尤其优选在浆法条件(50rpm)下，在McIlvaine缓冲液(pH3.0,900mL)中存在不少于10分钟。

除非特别说明，在本说明书中的浆法表示根据日本药典第14版，通常测试，溶解测试方法2的测定法。

本发明的包衣制剂可含有通常在制剂配制技术领域中使用的添加剂。该添加剂的例包子括赋形剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、着色剂、pH调节剂、表面活性剂、稳定剂、矫味剂、甜味剂、调味剂、助流剂、抗静电剂、遮光剂、抗氧化剂、还原剂、螯合剂等。这些添加剂以制剂配制技术领域通常使用的量使用。另外，这些添加剂可以以适合的比例的两种或更多种的混合物的形式使用。

赋形剂的例子包括糖类；结晶纤维素；淀粉诸如玉米淀粉、马铃薯淀粉、小麦淀粉、大米淀粉、部分预凝胶化的淀粉、预凝胶化的淀粉、多孔淀粉、糊精、羧甲基淀粉等；无水磷酸钙、沉淀的碳酸钙、硅酸钙、粉末纤维素、明胶、轻质无水硅酸、合成的硅酸铝、硅酸镁铝、氧化镁、磷酸钙、碳酸钙、硫酸钙。

糖类的例子包括糖、淀粉糖、乳糖、蜂蜜和糖醇。这些糖类中的两种或更多种可以以合适的比例的混合物的形式使用。

糖的例子包括蔗糖、白糖、偶联糖[coupling sugar(商品名)]、低聚果糖和帕拉金糖。

淀粉糖的例子包括葡萄糖、麦芽糖、粉末化的淀粉糖浆、淀粉糖浆、果糖和海藻糖。

乳糖的例子包括乳糖、异构化乳糖(乳酮糖)以及氢化乳糖(乳糖醇)。

蜂蜜的例子包括通常用于食用的各种蜂蜜。

糖醇的例子包括山梨糖醇、甘露糖醇(具体是D-甘露糖醇)、麦芽糖醇、氢化葡萄糖浆、木糖醇、还原的巴拉金糖以及赤藓糖醇。

糖类优选糖醇、淀粉糖和蔗糖，更优选甘露糖醇、海藻糖和蔗糖。其中，优选甘露糖醇和海藻糖。从抑制制剂的颜色变化的角度(具体是在保存条件下的颜色变化)来看，在本发明的包衣制剂中，包衣层优选含有甘露糖醇或海藻糖。

当糖类用于包衣制剂时，其含量例如每100重量份包衣制剂为5-90重量份，优选5-40重量份。

具体地，当本发明的包衣制剂包含甘露糖醇或海藻糖，甘露糖醇或海藻糖的含量优选每100重量份包衣制剂为5-40重量份，更优选5-30重量份。

结晶纤维素的例子包括CEOLUS KG801、KG802、PH101、PH102、PH301、PH302、PH-F20、RC-A591NF(商品名，由Asahi Kasei ChemicalsCorporation制备)，包括被称为微晶纤维素的结晶纤维素。

崩解剂的例子包括羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙(羧甲纤维素钙)、羧甲基淀粉钠、羧甲基纤维素钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮[优选，Kollidon CL、CL-M、CL-F、CL-SF(商品名，BASF JAPAN LTD.)；PolyplasdoneXL、XL-10、INF-10(商品名，ISP JAPAN LTD.)]、低取代羟丙基纤维素[优选具有5-16重量%含量的羟基丙氧基的低取代的羟丙基纤维素，诸如LH-11、LH-21、LH-31、LH-22、LH-32、LH-20、LH-30、LH-33(商品名，由Shin-EtsuChemical Co.,Ltd.生产)等]、羟丙基淀粉、玉米淀粉和部分预凝胶化淀粉。

当崩解剂用于本发明的包衣制剂时，崩解剂的含量例如每100重量份包衣制剂为0.5-50重量份，优选1-25重量份。

粘合剂的例子包括羟丙基纤维素[优选HPC-SSL、SL、L(商品名，NIPPONSODA CO.,LTD.)]、羟丙基甲基纤维素、聚维酮(聚乙烯基吡咯烷酮)、阿拉伯胶粉、蔗糖、明胶、支链淀粉、甲基纤维素、结晶纤维素、低取代羟丙基纤维素[优选具有含量5-16重量%的羟基丙氧基的低取代的羟丙基纤维素，诸如LH-11、LH-21、LH-31、LH-22、LH-32、LH-20、LH-30、LH-33(商品名，由Shin-Etsu Chemical Co.,Ltd.生产)等]、聚乙二醇、糊精、聚乙烯基醇和淀粉糊。其中，优选羟丙基纤维素。

当粘合剂用于本发明的包衣制剂时，粘合剂的含量例如每100重量份包衣制剂为0.01-50重量份，优选0.1-10重量份。

润滑剂的例子包括硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙、滑石、蔗糖脂肪酸酯、硬脂基富马酸钠、蜡、DL-亮氨酸、月桂基硫酸钠、月桂基硫酸镁、聚乙二醇和轻质无水硅酸(例如，AEROSIL)。其中优选硬脂酸镁。

着色剂的例子包括食用色素，诸如食用黄No.5(Sunset Yellow，与美国的食用黄No.6相同)、食用红No.2、食用蓝No.2等，食用色淀、黄氧化铁(氧化铁黄)、三氧化二铁(氧化铁红)、核黄素、核黄素有机酸酯(例如，核黄素丁酸酯)、核黄素磷酸盐或其碱金属盐或其碱土金属盐、酚酞、氧化钛、番茄红素、β-胡萝卜素。

pH调节剂的例子包括柠檬酸盐、磷酸盐、碳酸盐、酒石酸盐、富马酸盐、乙酸盐和氨基酸盐。

表面活性剂的例子包括月桂基硫酸钠、聚山梨酯80、聚氧乙烯(160)聚氧丙烯(30)、聚氧乙烯(196)聚氧丙烯(67)以及聚氧乙烯氢化蓖麻油60。

稳定剂的例子包括抗坏血酸钠、维生素E、乙二胺四乙酸四钠、烟酰胺、环糊精；碱土金属盐(例如，碳酸钙、氢氧化钙、碳酸镁、氢氧化镁、硅酸镁、铝酸镁)以及丁基羟基茴香醚。

矫味剂的例子包括抗坏血酸、(无水)柠檬酸、酒石酸和苹果酸。

甜味剂的例子包括阿斯巴甜、乙酰舒泛、奇甜蛋白、糖精钠和甘草酸二钾。其中，优选阿斯巴甜。

调味剂的例子包括薄荷醇、薄荷油、柠檬油和香兰素。

助流剂的例子包括轻质无水硅酸和水合二氧化硅。这里，轻质无水硅酸可以是任何含有水合二氧化硅(SiO₂nH₂O)(n为整数)作为主要成分的物质，作为其具体的例子，可以使用Sylysia320(商品名，FUJI SILYSIA CHEMICALLTD.)、AEROSIL200(商品名，NIPPON AEROSIL CO.,LTD.)等。

抗静电剂的例子包括滑石和轻质无水硅酸。

遮光剂的例子包括氧化钛。

抗氧化剂的例子包括二丁基羟基甲苯(BHT)、维生素E、维生素E酯(例如，维生素E乙酸酯)、抗坏血酸或其碱金属盐或其碱土金属盐、番茄红素、β-胡萝卜素。

还原剂的例子包括胱氨酸和半胱氨酸。

螯合剂的例子包括EDTA或其碱金属盐或其碱土金属盐。

本发明的包衣制剂可具有形成在核和包括吡格列酮或其盐的包衣层之间的中间层。使用这样的中间层，可以防止核中的有机酸对于包衣层中的吡格列酮或其盐的副作用(例如，吡格列酮的分解)，并且可以延长包衣制剂的耐久性。

本发明的包衣制剂的剂型通常为固体制剂。固体制剂的例子包括片剂、囊片、胶囊、粉末、颗粒和锭剂。其中，优选颗粒、胶囊和片剂。根据本发明也可以使用半固体制剂(诸如含有凝胶的包衣制剂)以及含有适当剂量的吡格列酮溶液的液体制剂。

对于固体制剂的形状没有特别限定，可以是圆形、椭圆形(caplet)、圆环形、长方形(oblong)等。

固体制剂可以用包衣剂包覆，并且可具有用于识别的标记和字母，以及进一步用于分开的划线。

包衣基质的例子包括糖包衣基质、含水膜包衣基质、肠溶膜包衣基质、持续释放膜包衣基质等。

作为糖包衣基质，使用蔗糖并可以组合使用选自滑石、沉淀的碳酸钙、明胶、阿拉伯胶、支链淀粉、巴西棕榈蜡等中的一种或多种。

含水膜包衣基质的例子包括纤维素聚合物，诸如羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素、甲基羟乙基纤维素等；合成聚合物，诸如聚乙烯醇缩乙醛二乙氨基乙酸酯、甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E[Eudragit E(商品名)]、聚乙烯基吡咯烷酮等；多糖，诸如支链淀粉等；等等。

肠溶膜包衣基质的例子包括纤维素聚合物，诸如羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、乙酸琥珀酸羟丙基甲基纤维素、羧甲基乙基纤维素、乙酸邻苯二甲酸纤维素等；丙烯酸聚合物，诸如甲基丙烯酸共聚物L[Eudragit L(商品名)]、甲基丙烯酸共聚物LD[Eudragit L-30D55(商品名)]、甲基丙烯酸共聚物S[Eudragit S(商品名)]等；天然存在的物质，诸如虫胶等；等等。

持续释放膜包衣基质的例子包括纤维素聚合物，诸如乙基纤维素、乙酸纤维素等；丙烯酸聚合物诸如甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物RS[Eudragit RS(商品名)]、丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯共聚物悬浮液[Eudragit NE(商品名)]等；等等。

上述包衣基质的两种或更多种可以以合适的比例的混合物的形式使用。另外，在包衣的过程中可以使用包衣添加剂。

包衣添加剂的例子包括遮光剂和/或着色剂诸如氧化钛、滑石、氧化铁等；增塑剂诸如聚乙二醇、柠檬酸三乙酯、蓖麻油、聚山梨酯等；等等。

本发明的包衣制剂可以使用上面提及的多种添加剂根据制剂配制技术领域通用的方法生产。

例如，本发明的包衣制剂可以如下制备：

(1)混合有机酸和得到含有有机酸的核所需要的添加剂，

(2)通过用吡格列酮或其盐和如果需要的添加剂包衣含有有机酸的核从而在该核的表面上形成包括吡格列酮或其盐的包衣层，以及

(3)根据需要干燥和筛分得到的经包衣的产物。

另外，本发明的包衣制剂还可以如下制备：根据需要在干燥和筛分之后通过混合经包衣的产物与添加剂，并压塑成型或将混合物填充到胶囊中。

在此，使用例如，制剂成形机诸如V-型混合器、转鼓式混合器、高速搅拌造粒机(FM-VG-10;POWREX CORPORATION)、全能捏合机(HataTekkosho,Co.,Ltd.)、流化床干燥器/造粒机(LAB-1,FD-3S,FD-3SN;POWREX CORPORATION)、箱式真空干燥器(Kusunoki Machinery Co.,Ltd.)、筛磨(P-3;Showa Kagaku Kikai Kosakusho Co.,Ltd.)、离心流化床造粒机(CF-mini,CF-260,CF-360;Freund Corporation)、干燥造粒机、喷涂干燥造粒机、旋转流化床造粒机(MP10;POWREX CORPORATION)等来进行混合(包括造粒、干燥、研磨等)。

对于包衣，可以使用例如，制剂制备机诸如离心流化床造粒机(CF-mini,CF-260,CF-360;Freund Corporation)、辊式造粒机(MP10;POWREXCORPORATION)、常规流化床包衣设备、wurster型包衣设备等，优选使用离心流化床造粒机。

进行压塑成型，例如，通过通常在0.3-35kN/cm²的压力下，使用单冲压片机(KIKUSUI SEISAKUSHO LTD.)、旋转压片机(KIKUSUISEISAKUSHO LTD.)、Auto-graph(Shimadzu Corporation)等进行冲压。

可以用于胶囊填充的胶囊的例子包括明胶胶囊、羟丙基甲基纤维素(HPMC)胶囊、支链淀粉胶囊等(优选羟丙基甲基纤维素(HPMC)胶囊)

caps、

caps和Xpress-fit^TMcaps。

通过下述方法或与其类似的方法来包衣上述含有有机酸的核：

1)包括向含有有机酸的核上喷涂吡格列酮或其盐与根据需要的添加剂(优选，赋形剂[优选结晶纤维素(可以省略)、糖类(优选甘露糖醇、海藻糖、蔗糖)]、崩解剂(优选L-HPC))，并喷涂粘合剂(优选羟丙基纤维素)在溶剂[例如，选自水、醇(例如，甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇)、丙酮和乙腈中的一种或多种；优选水或异丙醇]中的溶液的方法；

2)包括向含有有机酸的核上喷涂粘合剂(优选羟丙基纤维素)在溶剂[例如，选自水、醇(例如，甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇)、丙酮和乙腈中的一种或多种；优选水或异丙醇]中的溶液的方法，该溶液含有吡格列酮或其盐和根据需要的添加剂(优选，赋形剂[优选结晶纤维素(可以省略)、糖类(优选甘露糖醇、海藻糖、蔗糖)]、崩解剂(优选L-HPC))；

3)包括向含有有机酸的核上喷涂吡格列酮或其盐与根据需要的添加剂(优选，赋形剂[优选结晶纤维素(可以省略)、糖类(优选甘露糖醇、海藻糖、蔗糖)]、崩解剂(优选L-HPC)，以及粘合剂(优选羟丙基纤维素))，和例如甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮、乙腈；优选水或异丙醇]的方法;或者

4)包括向含有有机酸的核上喷涂吡格列酮或其盐与纤维素或纤维素衍生物[优选纤维素衍生物(更优选L-HPC)]，以及根据需要的添加剂(优选赋形剂[优选结晶纤维素(可以省略)、糖类(优选甘露糖醇、海藻糖、蔗糖)]，并喷涂粘合剂(优选羟丙基纤维素)在溶剂[例如，选自水、醇(例如，甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇)、丙酮和乙腈中的一种或多种；优选水或异丙醇]中的溶液(该溶液可以是分散液)的方法。

本发明的包衣制剂的核优选由至少一种选自柠檬酸、酒石酸、苹果酸和抗坏血酸[好优柠檬酸(尤其优选无水柠檬酸)]的有机酸构成。、

另外，在本发明的包衣制剂中包括吡格列酮或其盐的包衣层优选由吡格列酮或其盐(优选吡格列酮盐酸盐)、赋形剂[优选结晶纤维素(可以省略)、糖类(优选甘露糖醇、海藻糖、蔗糖；更优选甘露糖醇)]、崩解剂(优选L-HPC)以及粘合剂(优选羟丙基纤维素)构成，或其为由吡格列酮或其盐(优选吡格列酮盐酸盐)、赋形剂[优选结晶纤维素(可以省略)、糖类(优选甘露糖醇、海藻糖、蔗糖；更优选甘露糖醇)]、纤维素或纤维素衍生物(优选纤维素衍生物，更优选L-HPC)、以及粘合剂(优选羟丙基纤维素)构成的包衣层。

(b)口腔崩解片剂(ODT)制剂

本发明提供其中活性成分是吡格列酮或其药学上可接受的盐的口腔崩解片剂(例如，如USSN12/810,779(相当于US2010-0278390)所述，在此将其全部引入作为参考)。

使用本发明的制备方法，可以通过简单的步骤制备口腔崩解片剂，该口腔崩解片剂在口腔中快速崩解，其具有期望合适的硬度，并且其具有优异的储存稳定性，因为即使在高温和/或高湿度条件下，在没有任何包装时，其硬度仅少量减少且片剂的厚度少量增加。另外，使用本发明的制备方法，可以抑制在压片过程中出现的压片问题，例如加盖(capping)，以及与模具内壁粘接等。

如在本文中使用的，口腔崩解片剂或ODT表示在口腔中通过唾液迅速崩解的片剂。

本发明的口腔崩解片剂可包括(a)选自甘露糖醇(优选D-甘露糖醇)、乳糖(优选乳糖水合物)、木糖醇、蔗糖、赤藓糖醇和葡萄糖中的一种或多种糖类或糖醇(在本说明书中也称为组分(a))和(b)低取代羟丙基纤维素(在本说明书中也称为组分(b))。

作为组分(a)，优选甘露糖醇和乳糖。

组分(a)的含量优选制剂重量的50-95重量%，更优选70-90重量%。如下所述，组分(a)还可任选溶解在水等中并用作搅拌造粒的粘合溶液。上述组分(a)的含量还包括用作粘合溶液的量。当用作粘合溶液时，其量优选少于上述组分(a)的10重量%，更优选约2-5重量%。

组分(a)的糖类和糖醇的平均粒度优选不大于50μm，更优选为10-20μm。当平均粒度大于50μm，崩解时间可能延长。

上述组分(a)的糖类和糖醇的平均粒度表示在进行搅拌造粒之前原料初始的平均粒度，以及表示它们具有上述范围内的粒度，在后续的制备过程和制剂的储存过程中平均粒度可能变化。

具有上述范围内的平均粒度的组分(a)的糖类和糖醇是市售的。另外，可以利用通用的方法粉碎市售的产品以调节随后使用的粒度。

在一个实施方式中，本说明书中的平均粒度表示基于使用气流型分散器的干式方法测定的粒度分布中的50%累积粒度。

在本发明中，对于低取代羟丙基纤维素的级别等不需要特别限定，可以使用市售的产品。例如，可以使用具有约7.0-12.9重量%羟丙基含量的低取代羟丙基纤维素。

低取代羟丙基纤维素的含量优选为制剂重量的3-20重量%，更优选5-15重量%。

本发明的口腔崩解片剂优选含有(c)一种或多种糖或糖醇，选自粉末氢化麦芽糖淀粉糖浆、麦芽糖、麦芽糖醇、山梨糖醇和海藻糖(在本说明书中也称为组分(c))。组分(c)的存在还增加片剂的硬度。

作为组分(c)，优选粉末氢化麦芽糖淀粉糖浆和麦芽糖。

组分(c)的含量优选为制剂的重量的0.1-5重量%，更优选0.1-1重量%。

本发明的口腔崩解片剂基本上不含淀粉崩解剂(例如，玉米淀粉、羧甲基淀粉钠、大米淀粉、小麦淀粉、预凝胶化淀粉、部分预凝胶化淀粉等)。

本文中，本说明书中的基本上不含表示不存在不利影响制剂贮存稳定性的量。具体来说，淀粉崩解剂的含量优选不高于制剂重量的5重量%，更优选不高于制剂重量的3重量%，还更优选不高于制剂重量的1重量%。

本发明的口腔崩解片剂优选含有奇甜蛋白。奇甜蛋白的含量优选为制剂重量的0.1-5重量%，更优选为0.1-1重量%。奇甜蛋白是通常添加的用于掩盖活性成分的苦味的甜味剂。在本发明中，奇甜蛋白的存在在制备过程中提供了改善成型性的效果以及增加硬度。

除了上述组分，本发明的口腔崩解片剂还可含有通常用于固体制剂的添加剂。所述添加剂是例如赋形剂、除了淀粉崩解剂之外的崩解剂、粘合剂、润滑剂、流化剂、矫味剂、增甜剂、包衣剂、着色剂、调味剂等。对于这些添加剂的含量没有特别限定，可以适当选自在制药领域中通常使用的量。除了组分(a)和(b)之外，添加剂的总量(当含有组分(c)，除了组分(a)-(c)，添加剂的总量)优选不多于制剂重量的50重量%，更优选不多于制剂重量的25重量%。

本发明的口腔崩解片剂含有吡格列酮作为活性成分。活性成分的含量可基于用于临床应用的量适当地确定，优选不多于制剂重量的50重量%，更优选不多于制剂重量的25重量%。

本发明的口腔崩解片剂的特征在于通过如下制备方法制备，该方法包括通过搅拌造粒方法造粒含有上述组分(a)和(b)(优选上述组分(a)、(b)和(c))的组合物，以及压塑成型得到的造粒产物。在本发明中认为由于通过搅拌造粒造粒产物变成圆形，防止了在后续压塑成型步骤中的压片问题(尤其是，与模具内壁的粘接)。

下面详细地描述本发明的口腔崩解片剂的制备方法。

1.造粒步骤

混合上述组分(a)和(b)(优选上述组分(a)、(b)和(c))、任选的活性成分和/或任选的添加剂。添加剂例如为赋形剂(例如，滑石)、除了淀粉崩解剂之外的崩解剂(例如，交联聚维酮)、增甜剂、着色剂、调味剂等。首先可以将活性成分与赋形剂(例如滑石)混合，然后为了掩盖苦味等利用包衣剂包覆(例如，水性乙基纤维素分散剂、三醋酸甘油酯)。

通过搅拌造粒方法对上述混合物进行造粒。搅拌造粒方法还通常称为高速搅拌造粒方法。本文中，(高速)搅拌造粒方法是包括通过在造粒机器的底部旋转主叶片在混合的粉末上滴加或喷涂粘合剂溶液形成大颗粒，并通过在侧壁上的切碎器研磨颗粒以获得期望的颗粒粒度的方法(YoshihisaSAGAWA,Pharmaceutical Product Preparation Technique,CMC PublishingCO.,LTD.,published in2002,page 108)。

通过搅拌造粒方法的造粒可以使用被称为搅拌造粒机(也称为高速搅拌造粒机)(例如，高速混合器LFS-GS-2J(由Fukae Powtec生产)；VERTICALGRANULATOR(由POWREX CORPORATION生产)；NEW SPEEDKNEADER(由OKADA SEIKO CO.,LTD.生产)等)的设备来进行。对于主叶片和切碎器的旋转速度没有特别地限制，以及可适当地从搅拌造粒通常使用的范围中选择。具体地，向搅拌造粒机中的上述混合物中添加粘合剂溶液(例如，水或如果需要可以混合其他添加剂)，并对混合物进行造粒。当在本发明中添加奇甜蛋白时，尽管未具体限制，可以将奇甜蛋白添加到粘合溶液中。

2.压塑成型步骤

向在造粒步骤中得到的造粒产物中添加任选的活性成分和/或任选的添加剂(例如流化剂(例如，轻质无水硅酸)、润滑剂(例如硬脂酸镁、硬脂基富马酸钠、硬脂酸钙)、调味剂)，将该混合物进行混合并通过压片机等进行压塑成型。可以从片剂制备通常使用的范围中适当地选择压塑成型压力(压片压力)。尽管对于压力没有特别限定，优选不少于200kg。

如上述制备的本发明的口腔崩解片剂具有期望的适当的硬度，其在口腔中快速崩解，并且显示出优异的储存稳定性，即使不使用压片之后的加湿和干燥的繁琐的步骤，以及外部润滑系统的特殊的设施也可以简单地制备。

当片剂具有6-7mm的直径和约3mm的厚度时，本发明的口腔崩解片剂的硬度通常为3-6kg。在本说明书中的片剂的硬度是通过Schleuniger片剂硬度测试器(Dr.Schleuniger Pharmatron AG)检测的值。

尽管取决于制剂的形式、剂量等，本发明的口腔崩解制剂的崩解时间不同，通常在60秒内，优选在30秒内。

对于本发明的口腔崩解片剂的粒度和形式没有具体的限定，可以是具有切割线的带刻痕的片剂。

可以不用水而摄取本发明的口腔崩解片剂。

VI.用途

本发明的方法用于在存在发展成阿尔茨海默病风险的患者中延迟阿尔茨海默病的发病或延迟与阿尔茨海默病的发展有征兆的或相关联的病期。本发明还提供在存在发展成阿尔茨海默病的风险的患者中，用于延迟阿尔茨海默病、其症状的发病，或与阿尔茨海默病的发展有征兆的或相关联的病期的药剂。

除非另外说明，在本文中使用的任何技术和科学术语具有与本发明所属的领域中普通技术人员通常理解相同的含义。尽管在实施或检测本发明中可以使用与在本发明中描述的那些相似或相同的方法和材料，下面描述合适的方法和材料。本文中提到的全部公开、专利申请、专利和其他参考文献以全部内容引入作为参考文献。在发生冲突的情况下，可调节本说明书包括定义。另外，材料、方法和例子仅为示例性的不用于限制。

实施例

现在已概括地描述了本发明，通过参考下述实施例可以更容易地理解本发明，所述实施例以说明的方式提供，除非另外说明不用于限制本发明。

下述实施例仅以示例性的目的提供不用于限制本发明者要求的本发明的范围。

实施例1

低剂量吡格列酮颗粒1

混合吡格列酮HCl(228.1g)、甘露糖醇(ROQUETTE,335.8g)和L-HPC(LH-32Shin-Etsu Chemical Co.,Ltd.,115.0g)以获得撒粉。将羟丙基纤维素(HPC-SSL,NIPPON SODA CO.,LTD.,9.2g)溶解在纯净水(194.6g)中以获得粘合液体。向离心流化床造粒机(CF-360,Freund Corporation)中添加无水柠檬酸晶体(Jungbunzlauer,1380g)，并用撒粉包衣并同时喷涂粘合液体。在减压、40℃条件下干燥得到的颗粒18小时，并通过16目筛和42目筛对得到的颗粒进行筛分以获得16-42目(孔径0.355-1.00mm)范围的颗粒。在转鼓式混合器(60L,Showa Kagaku Kikai Kosakusho Co.,Ltd.)中，混合所述颗粒(7193.6g)与滑石(Matsumurasangyo Co.,Ltd.,3.2g)和轻质无水硅酸(AEROSIL,NIPPON AEROSIL,3.2g)以获得每450mg具有下述组分的吡格列酮盐酸盐颗粒

可以用合适的赋形剂稀释得到的组合物以获得期望的剂量，其包括本文中所描述的任何剂量，例如0.5mg、1.5mg、4.5mg和9.0mg。可以将期望的剂量配制成口服剂型，诸如胶囊、片剂或囊片中。

实施例2

低剂量吡格列酮颗粒2

混合吡格列酮HCl(9.90g)、甘露糖醇(ROQUETTE,186.2g)和L-HPC(LH-32Shin-Etsu Chemical Co.,Ltd.,39.96g)以获得撒粉。将羟丙基纤维素(HPC-SSL,NIPPON SODA CO.,LTD.,12.00g)溶解在纯净水中(340.2g)以获得粘合液体。向离心流化床造粒机(CF-260,Freund Corporation)中添加无水柠檬酸晶体(Jungbunzlauer,400.0g)，并用撒粉包衣同时喷涂粘合液体。在减压、40℃条件下干燥得到的颗粒18小时，并通过16目筛和42目筛对得到的颗粒进行筛分以获得16-42目(孔径0.355-1.00mm)范围的吡格列酮盐酸盐颗粒，其具有下述组分。

实施例3

低剂量吡格列酮胶囊

在玻璃瓶中，将实施例2中制备的低剂量吡格列酮颗粒2(39.96g)与滑石(Matsumurasangyo Co.,Ltd.,0.02g)和轻质无水硅酸(AEROSIL,NIPPONAEROSIL,0.02g)混合以获得每80mg具有下述组分的吡格列酮盐酸盐颗粒。将吡格列酮盐酸盐颗粒(80mg)填充到4号羟丙甲纤维素胶囊(Qualicaps Co.,Ltd.)中以获得具有下述组分的胶囊。

实施例4

吡格列酮液体制剂1

使用下述材料制备吡格列酮的液体制剂

材料：

柠檬酸,Sigma,C1857,lot089K0057

蒸馏水,Ice Mountain

HPMC,USP,Sigma,H-3785,lot122K0149

吡格列酮HCl,Takeda,lot345

聚乙二醇200,Sigma,P3015,lot098K0056

聚山梨酯80,NF,Spectrum,P0138,lot XV0879

丙二醇,USP/FCC,Fisher,P355,lot080676

蔗糖,USP,Sigma,S3929,lot086K0022

糖浆NF,Spectrum,SY105,lot XP0703

将约0.01496g吡格列酮HCl转移到50-mL刻度量筒中。添加0.69g的聚乙二醇200并与润湿的固体混合。添加1.51g的丙二醇，搅拌得到的混合物并且超声混合溶解固体。添加1.48g的聚山梨酯80并搅拌进行混合。添加0.50373g的柠檬酸并搅拌进行混合。一些柠檬酸固体保持未溶解。添加约10mL的蒸馏水并搅拌以进行混合/溶解固体。用蒸馏水稀释混合物至50mL并充分混合使得所有的固体溶解以制备具有下述约15mg/50mL或0.3mg/mL浓度的吡格列酮的液体。

在实施本发明的方法中，使用该实施例4的吡格列酮液体可将选定的低剂量吡格列酮给药受治疗者。例如，5mL或一茶匙可给药约1.5mg剂量的吡格列酮HCl，而15mL或一汤匙可给药约4.5mg剂量的吡格列酮HCl。两汤匙或约30mL的实施例4的吡格列酮液体可以给药每剂量约9mg的吡格列酮HCl。

实施例5

吡格列酮液体制剂2

使用下述材料制备吡格列酮液体制剂。

材料：

柠檬酸,Sigma,C1857,lot089K0057

蒸馏水,Ice Mountain

HPMC,USP,Sigma,H-3785,lot122K0149

吡格列酮HCl,Takeda,lot345

聚乙二醇200,Sigma,P3015,lot098K0056

聚山梨酯80,NF,Spectrum,P0138,lot XV0879

丙二醇,USP/FCC,Fisher,P355,lot080676

蔗糖,USP,Sigma,S3929,lot086K0022

糖浆NF,Spectrum,SY105,lot XP0703

将约0.01613g的吡格列酮HCl添加到50-mL的容量瓶中。添加1.0043g的柠檬酸。添加约25mL的蒸馏水并且搅拌该得到的混合物，对其进行超声以润湿固体。用蒸馏水稀释该混合物至约50mL的体积，充分混合然后超声1-2分钟使得所有固体溶解。

该实施例5的液体吡格列酮溶液具有下述约16.13mg/50mL或0.326mg/mL浓度的吡格列酮。

在使用该实施例5的液体吡格列酮溶液实施本发明的方法时，可以向受治疗者给药选定的低剂量吡格列酮。例如，5mL或一茶匙可给药约1.63mg剂量的吡格列酮HCl，而15mL或一汤匙可给药约4.89mg剂量的吡格列酮HCl。两汤匙或约30mL的实施例5的吡格列酮液体可以给药每剂量约9.78mg的吡格列酮HCl。

实施例6

吡格列酮悬浮制剂1

如下制备吡格列酮悬浮制剂。

制备吡格列酮HCl悬浮液A：悬浮介质为糖浆NF(糖浆NF的密度为1.30g/mL)。

将0.025g的吡格列酮HCl药物转移到玻璃研钵和研杵中。用约4滴悬浮介质润湿吡格列酮HCl并混合/研磨约1分钟以形成光滑均匀的糊状物。添加悬浮介质直到在研钵和研杵中的总重量为约1g。混合/研磨得到的混合物1分钟。添加另外的悬浮介质直到总重量为约8g。混合得到的混合物1分钟。添加更多悬浮介质直到总重量为约48g然后混合1分钟。添加悬浮介质直到悬浮液的总重量为130.04g并混合1分钟。将研钵中的混合物倾倒到4oz试剂瓶中。将瓶盖上瓶盖并通过手摇晃悬浮液约1分钟。

确定吡格列酮HCl的理论浓度：

25.60mg/130.04g=0.1969mg/g(HCl盐–不是游离碱)

25.60mg/100mL=0.2560mg/mL(HCl盐–不是游离碱)

在使用该实施例6的液体吡格列酮悬浮液1实施本发明的方法时，可以向受治疗者给药选定的低剂量吡格列酮。例如，5mL或一茶匙可给药约1.28mg剂量的吡格列酮HCl，而15mL或一汤匙可给药约3.84mg剂量的吡格列酮HCl。两汤匙或约30mL的实施例6的液体吡格列酮悬浮液1可以给药每剂量约7.68mg的吡格列酮HCl。

实施例7

吡格列酮悬浮制剂2

制备悬浮介质B：0.6%HPMC+10%蔗糖

0.6%HPMC溶液:

将1000mL蒸馏水转移到2-L Erlenmeyer烧瓶中。在恒速搅拌下，将水加热至60℃。称重6g HPMC并且均匀分散到加热的水中。持续加热混合物直到其刚好达到沸点。在恒速搅拌下，将混合物从热源上移开并放置到冰浴中。搅拌混合物直到其澄清并冷却到室温。

悬浮介质：(含有10%蔗糖的0.6%HPMC):

将80g蔗糖添加到1000-mL的玻璃瓶中。添加50mL蒸馏水并通过摇动混合混合物使得所有固体溶解。添加0.6%HPMC溶液直到总重量为800g。摇动混合物直到固体溶解。

溶液的密度为103.86g/100mL。

制备吡格列酮HCl悬浮液B：悬浮介质为0.6%HPMC+10%蔗糖

将0.025g的吡格列酮HCl药物转移到玻璃研钵和研杵中。用约4滴悬浮介质润湿吡格列酮HCl并且混合/搅拌约1分钟以形成光滑均匀的糊状物。添加悬浮介质直到研钵和研杵中的总重量为约1g。混合/研磨该混合物1分钟。另外添加悬浮介质直到总重量为约8g，然后混合1分钟。另外添加悬浮介质直到总重量为约20g，然后混合1分钟。

添加另外的悬浮介质直到总重量为约40g-50g，然后混合约1分钟。添加悬浮介质直到悬浮液的总重量为103.31g，并混合1分钟。将混合物从研钵中倾倒到4oz试剂瓶中。将瓶盖上瓶盖并通过手摇动悬浮液约1分钟。

确定吡格列酮HCl的理论浓度：

26.44mg/103.31g=0.25593mg/g(HCl盐–不是游离碱)

26.44mg/100mL=0.2644mg/mL(HCl盐–不是游离碱)

在使用该实施例7的液体吡格列酮悬浮液2实施本发明的方法时，可以向受治疗者给药选定的低剂量吡格列酮。例如，5mL或一茶匙可给药约1.322mg剂量的吡格列酮HCl，而15mL或一汤匙可给药约3.966mg剂量的吡格列酮HCl。两汤匙或约30mL的实施例7的液体吡格列酮悬浮液2可以给药每剂量约7.932mg的吡格列酮HCl。

实施例8

到目前为止，尚没有能力预测哪个人会更有可能发展会导致认知障碍并最终导致阿尔茨海默病的本文中所描述的那种病理生理变化。TOMM40rs10524523基因型与年龄以及可能的其他因素构成了确定哪个受治疗者在近5-7年内存在发展成阿尔茨海默型认知障碍的预后的生物标记，并因此提供了在该发展性的和破坏性的疾病的早期阶段医疗干预的机会。本发明的临床优点可通过下述的常规的临床研究来确定。另外，其本质的预期临床研究提供供了以确定预后的生物志物的正向预估值和负向预估值的充分数据，对其的理解需要在将生物标志物引入临床实践之前。

OPAL研究

rs10524523(523)是在APOE基因型的连锁不平衡(LD)中出现的polyT长度多态性，在LD区域的每个链上其与APOE基因型一起遗传。基本上，TOMM40单内含子变体随着polyT长度变化，较长类型变体与较短类型变体的发病年龄差约7年。基于正常受治疗者的现在的年龄，确定在接下来的5-7年中认知障碍和AD发病的“高风险”或“低风险”。

该研究通过结合基于存在与阿尔茨海默病发病相关的具体基因型的临床风险评估和临床表现，提供了确认在基于大量不同地区的人群中的受治疗者哪一个受治疗者存在在5-7年内AD发病的高风险的新型遗传学模型。该研究：

○使用在TOMM40-APOE LD区域中的TOMM40 rs10524523(523)polyT长度多态性，可能与APOE基因型关联，以预测认知障碍和阿尔茨海默病的发病年龄。具体地，以确认是否离散的阿尔茨海默病诊断测试可以将受治疗者分成阿尔茨海默病的“高风险”和“低风险”组；以及

○在通过阿尔茨海默病的TOMM40-APOE基因型确定的存在高风险的症状发生前的受治疗者中每天使用低剂量的PPARγ激动剂和安慰剂比较，持续60个月(5年)，以延迟与阿尔茨海默病相关的痴呆症状的发病。

对年龄在62-87岁的认知正常的受治疗者在接下来的5-7年内发展成AD的易感性进行评估，并测试吡格列酮对于AD发病的影响。针对下述的评估，考虑受治疗者的年龄和教育水平，认知正常的定义为计算在种群平均值的1.5标准差(SD)之内。低于阈值的分数被认为为认知障碍。下述认知评估用于评估在参加测试时和整个测试过程中的认知功能。

选择对于阿尔茨海默病的早期缺陷敏感的认知评估标准。这些评估标准用于ADAPT研究(1)，其是使用NSAID疗法在2004年进行的阿尔茨海默病预防研究。针对预防AD的激素替代疗法的女性健康初步研究中使用简易精神状态检查(Mini Mental examination)(2MS-E)(2)。因此，认知评估包括：

·改良的简易精神状态检查(3MS-E)

·短暂视觉空间记忆测试(Brief Visuospatial Memory Test)(修改)(BVMT-R)

·霍普金斯口语学习测试(Hopkins Verbal Learning Test)(修改)(HVLT-R)

·Rivermead行为记忆测试(RBMT)

·生成的言语流利性测试(Generative Verbal Fluency Test)(GVFT)

·数字广度测试(Digit Span Test)(DST)

参加研究是仅基于这些评估的分数。为了使研究随机化，对个体另外进行DNA检测，其包括APOE基因分型和523poly-T重复长度的测试以评估在接下来的5-7年内，处于发展成认知障碍或AD的“高风险”或“低风险”的风险状态。下述设计描述了研究方法。

研究设计前提

终点为1)由基于神经心理评估的分数的基线的认知测量值的变化，以及2)根据NINCDS-ADRDA标准(美国国立神经疾病和卒中研究所(NINCDS)和阿尔茨海默病和相关疾病协会(ADRDA)的阿尔茨海默病的诊断。这些被认为两个主要终点(two primary end points)或联合事件终点(combined event endpoint)。

抽样大小计算

针对基于上述终点的事件数据的时序检验(log-rank test of time)确定抽样大小的计算。假设在5年结束时，“高风险”组的转化率为20%，随后基于上述预防研究(3,4)的数据。需要374/组的抽样大小来检测在5%显著性水平和90%功效（power）上的转化率的50%改善(即从20%到10%)。在该计算中针对安慰剂和治疗组加入了5年内20%的下降率(drop out rate)。该抽样大小未针对多重比较进行调节。

进一步假设“低风险”组具有在一般人群中基于阿尔茨海默病的发病率的10%的转化率(4)。需要将该组与“高风险”安慰剂组进行比较的抽样大小还是374/组(具有90%的功效和5%显著水平)。

研究设计

诊断测试确定哪些患者存在转化为阿尔茨海默病或认知障碍的“高风险”(高风险)以及哪些患者存在转化的“低风险”(低风险)。诊断测试的结果对于研究者是屏蔽的，并使用中心随机来保持该屏蔽。任何设计的主要目标是：

确定该诊断测试是否可以区分“高风险”和“低风险”受治疗者，以及

评估治疗对于“高风险”患者的转化率的影响。

这些研究中收录的所有受治疗者是如上述所定义的认知正常的。

优选的研究设计

在该设计中，仅对“高风险”组进行随机化以获得安慰剂或治疗数据。其为简单的设计，例如，使用总抽样大小为1122个受治疗者。该设计可以对两个假定进行研究：第一个涉及通过比较来自安慰剂治疗的受治疗者的数据来诊断确定“高风险”和“低风险”组的能力；第二个涉及通过比较“高风险”分支的治疗组和安慰剂组的数据确定该治疗是否能够改善转化率。

可选择的设计1

在该设计中，添加了第4组以可以评估在“低风险”组中的治疗的效果。该设计可增加总抽样大小至1496个患者。

如果“低风险”组具有高于预期的转化率的转化率，则该设计可以提供有用的信息。但是，在考虑到对于“低风险”组的风险/益处时，针对该设计具有潜在性的关心。在“低风险”组中的受治疗者可能存在经历治疗的副作用并且对于它们的转化率没有预期的益处的风险。

可选择的设计2

该设计与优选的设计相同，除了保持不对“低风险”组进行治疗以作为观察组。该设计能够满足研究的目标但存在一些可能的缺点(pitfall)：

·不能屏蔽未治理的分支使得诊断检测的结果不会被屏蔽，

·如果受治疗者感觉到被观察但未接受“治疗”而不具有益处，在“低风险”组可能会有较高的下降率

·可能无法比较，如果存在“安慰剂”效果时可能成为问题(不像时间事件分析(time to event)但可能针对认知测试)。

抽样大小计算基于检测在5年结束时，转化率的10%的差异。数量的增加使得信号可以具有较少的差异更早地被检测。如果假设在“高风险”组的转化率为5%/年，然后3年之后，约15%受治疗者的可能会转化为阿尔茨海默病或显示认知障碍。假设该治疗可以提高该转化率50%，在治疗组中该期望的转化率为7.5%。为了检测具有90%功效和5%显著性的差异，需要每组559个受治疗者，使得优选设计的总抽样大小为1677。受治疗者人数的增加允许研究与每个TOMM40-APOE单倍型相关的家族年龄发病曲线。使用探索性分析来研究年龄影响，通过包括年龄作为Cox的成比例的风险时间事件分析(Cox's proportional hazards time to event analysis)中的协变量，从而允许对协变量的研究。一定百分比的受治疗者被确定为基于通过筛选的神经心理评估的具有轻度认知障碍(MCI)。该研究仅招募那些基于神经心理评估确定为认知正常的那些受治疗者。

参考文献

1)ADAPT Research Group:Cognitive Function Over Time in theAlzheimer's Disease Anti-inflammatory Prevention Trial(ADAPT)Results of aRandomized,Controlled Trial of Naproxen and Celecoxib:Archives ofNeurology,Vol65(No7),July2008

2)Stephen R.Rapp;Mark A.Espeland;Sally A.Shumaker et al:Effect ofEstrogen Plus Progestin on Global Cognitive Function in PostmenopausalWomen,The Women's Health Initiative Memory Study:2003;289(20):2663-2672JAMA

3)Curtis L.Meinert,John C.S.Breitner:Chronic disease long-term drugprevention trials:Lessons from the Alzheimer's Disease Anti-inflammatoryPrevention Trial(ADAPT):Alzheimer's&Dementia4(2008)S7-S14

4)Stephen Salloway,Stephan Correia:Alzheimer disease:Time toimprove its diagnosis and treatment:Cleveland Clinic Journal Of MedicineVolume76,Number1January2009

5)ADAPT Research Group:Cognitive Function Over Time in theAlzheimer's Disease Anti-inflammatory Prevention Trial(ADAPT)Results of aRandomized,Controlled Trial of Naproxen and Celecoxib:Archives ofNeurology,Vol65(No7),July2008

6)Stephen R.Rapp;Mark A.Espeland;Sally A.Shumaker et al:Effect ofEstrogen Plus Progestin on Global Cognitive Function in PostmenopausalWomen,The Women's Health Initiative Memory Study:2003;289(20):2663-2672JAMA

7)Curtis L.Meinert,John C.S.Breitner:Chronic disease long-term drugprevention trials:Lessons from the Alzheimer's Disease Anti-inflammatoryPrevention Trial(ADAPT):Alzheimer's&Dementia4(2008)S7-S14

8)Stephen Salloway,Stephan Correia:Alzheimer disease:Time toimprove its diagnosis and treatment:Cleveland Clinic Journal Of MedicineVolume76,Number 1 January 2009

实施例9

BOLD研究

本发明提供下述示例性剂量数据分析。

本发明提供响应于不同低剂量吡格列酮的药效学变化的检测。该药效学检测与和神经元活性关联的局部血氧合作用的变化相关，通过血氧水平依赖功能磁共振成像(BOLD fMRI)检测。

神经保护和线粒体生物合成是噻唑烷二酮的生理学效果。在一个实施方式中，受治疗者的吡格列酮治疗可以增加脑的活跃区域的代谢能力。代谢能力的变化可以使用BOLD fMRI观察到。

BOLD fMRI是广泛用于整个脑成像的非侵害性技术。该技术测量与神经元活性关联的局部血氧合作用的变化。

BOLD fMRI测定在脑中作为神经元活性的结果发现的氧合血红蛋白与脱氧血红蛋白的比例相对变化。由于神经元变为有活性的，细胞代谢也随之增加，并且血流的增加至增加的神经元活性的区域以满足这些代谢需求。该血液动力学响应的结果为氧合血红蛋白-脱氧血红蛋白的局部比率可检测的变化。氧合血红蛋白是抗磁性的并且脱氧血红蛋白是顺磁性的，通过BOLDfMRI检测该磁性上的差异。

BOLD信号反映按照神经元活性在脑血流(CBF)、脑血容量(CBV)和氧消耗的脑代谢率(CMRO₂)的复杂和不完整的理解的变化。触发多种BOLD信号的候选循环因素包括兴奋性神经元、联合神经元集合(mixed neuronalpopulation)、星形胶质细胞和轴突神经束或传代纤维（fibres of passage）(详细描述参见Lee等人，2010 Nature 465:788-792;Logothetis 2008 Nature 453:869-878;Logothetis等人，2001 Nature 412:150-157l;Raichle 2010 Cell 14:180-190，每篇文献通过以其全部内容引入本文作为参考文献)。

该研究利用健康、认知正常的、关注的高龄受治疗者，例如62-87岁。使用针对高分辨率结构和功能脑成像优化的扫描仪(例如先进的GE 3 Tesla扫描仪)进行BOLD fMRI扫描。

在一个实施方式中，该研究是使用每个队列接受不同吡格列酮剂量的多重队列的双盲研究。在另一个实施方式中，该研究是其中相同的队列接受多个不同药物剂量的一系列设计。用于显示作为暴露于吡格列酮的结果的神经元活性的变化的药学标志是BOLD信号的变化，特别是背外侧前额叶皮层和海马体中的BOLD信号变化，背外侧前额叶皮层和海马体与阿尔茨海默病中受损的高层次认知功能相关。

在至少三个情况下对每个受治疗者进行MRI扫描：

1.给药前(获得对于每个受治疗者的基线或对照值)；

2.接受第一剂量之后马上(2小时或Cmax的合适的时间)以检测急性暴露在药物下的结果；以及

3.药物暴露7天之后(当每个吡格列酮血清浓度为稳定状态并且应该显示出药物对线粒体功能的生理效应时)。

每天给药吡格列酮持续7天。

45mg的吡格列酮(用于治疗2型糖尿病的市售制剂)获得在血清中约3mM的Cmax(参见Ghosh等人，2007 Mol.Pharmacol 71:1695-1702)。

测试剂量包括：

a)0.5mg剂量-约33.3nM血清和约6.7nM脑

b)1.5mg剂量-约100nM血清和约20nM脑；

c)4.5mg剂量-约300nM血清和约50nM脑；

d)9mg剂量-约600nM血清和约120nM脑。

磁共振成像方法概要

一般参加者筛选方法

针对可在选择之前排除扫描的有黑金属植入筛选参加者。通知参加者禁食并且戒除咖啡因、烟草产品，并且在扫描之间运动2小时，在扫描前12小时避免饮酒以及摄入不必要的药物。在医生的批准下，要求服用刺激性药物的参加者不要服用刺激性药物至少24小时。获取两个呼吸样品以检测醇浓度。为了检测5个药物代谢物(精神兴奋剂、大麻、阿片类药物和镇静剂)获取尿样。对女性参加者进行尿妊娠测试，对于进行扫描的参加者该结果必须为阴性。

通常的扫描方法

向受治疗者提供进入MRI模拟器的机会以评估他们参加MRI阶段的舒适程度。然后给参加者装上心率(光体积扫描器)和血压监测的仪器，并且放置在扫描器中。使用枕和胶带的结合使头部的移动最小化。在获得定位扫描(localizer scan)之后，按照下述固定的顺序进行扫描步骤，总扫描时间为约60分钟。

结构性MRI。使用高分辨率MRI收集总体和局部灰质和白质以及CSF的测量值。

技术说明：使用具有快速扰相梯度回波(fast spoiled gradient-recall(FSPGR))的阵列空间敏感性编码技术(Array Spatial Sensitivity EncodingTechniques(ASSET))获得具有1mm等值体素(isometric voxel)的T1加权图像。针对白质和灰质之间的对比以及CSF来优化图像参数(TR/TE/翻转角=7.484ms/2.984ms/12°,256mm FOV,1mm狭缝（slice）,166切片,256x256矩阵,1Nex)。

灌注MRI。使用脉冲式动脉自旋标记(Pulsed Arterial Spin Labeling(PASL))来收集总体和局部静息脑血流的测量值。

技术说明：使用梯度回波平面成像(gradient echo-planar imaging(EPI))设备获得带有和不带标记的交错的图像。采集参数包括下述：视场(FOV)=22cm，矩阵=64x64，重复时间(TR)=3秒，回波时间(TE)=17毫秒，标记时间=1.6秒，延迟时间=.8秒，翻转角=90°。静息灌注扫描程序花费约6分钟，在此期间指示受治疗者躺下不动并且使他们头脑空白，但是保持他们的眼睛是睁开的并且保持清醒。按照从差到好的顺序获得与14个切片(具有2mm间隙的8mm厚度)相应的数据。

功能MRI(fMRI)。进行档案工作和情节记忆刺激示范以使用血氧水平依赖(BOLD)fMRI检测神经激活(neural activation)的方式，尤其是在背外侧前额叶皮层和海马体中，背外侧前额叶皮层和海马体与阿尔茨海默病中受损的高层次认知功能相关。

技术说明：使用反螺旋脉冲程序获得针对全脑覆盖的一组34个交错轴向功能切片(TR/TE/flip=2000/31/60;FOV=240mm;3.75x3.75x3.8mm体素;切片间间隔(interslice skip)=0)以减少磁敏感伪影。为了归一化和受治疗者平均，在68个轴向切片(TR/TE/flip=12.2/5.3/20，体素大小=1x1x1.9mm,FOV=240mm,切片间间隔=0)中会获得高分辨率三维自旋回声共平面(spin-echo co-planar)结构图像。

fMRI刺激示范工作记忆；细节参见Mattay等人，PNAS2003。情节记忆：细节参见Bookheimer等人，New England Journal of Medicine 2000。

实施例10

大鼠BOLD研究

低剂量吡格列酮穿透血脑屏障并且引起脑生理学的变化。

确定了低剂量吡格列酮HCl是否以足够的浓度穿透血脑屏障以引起脑的功能或分子变化。使用BOLD fMRI以检测横跨整个脑在静息态功能连接上的药物相关变化。

单独放置成年雄性Wistar大鼠(275±25g)，并且保持在12小时光亮、12小时黑暗的方案下。提供食物和水以使其自由进食。根据Guide for theCare and Use of Laboratory Animals(National Institutes of Health PublicationsNo.85-23,Revised 1985)出版的指南照顾动物。在第-3天前的约24小时，在研究的第3天和第6天测量动物体重。

将吡格列酮HCl(PIO)溶解在0.5mol/L柠檬酸(CA)中以获得浓度为0.32mg/10mL/kg的储备溶液。通过利用0.5mol/L CA适当地稀释储备溶液制备其他剂量从而获得10mL/kg的剂量强度。对照大鼠接受10ml/kg赋形剂。剂量浓度基于所提供的测试样品(即为HCl盐形式)的重量，并根据动物的最近的重量来调节剂量。通过口腔管饲法在每天的几乎相同的时间每天给药PIO溶液。在即将给药之前，使用异氟醚轻轻地麻醉动物以便于给药。

通过在MRI保持装置中每天放置15-90分钟，至少7天，在图像研究中使用的所用动物适应MRI保持装置，如之前所描述的(Zhang等人，2010JNeurosci Methods 189:186-196;Liang等人，2011 J Neurosci 31:3776-3783)。

在驯化阶段之后，将动物分配到平均体重匹配的1-7个治疗组中(参见表1)。每天在基本相同的时间，每天给药一次。在给药赋形剂之后的约2.5-3小时，在基线条件下(研究第-3天)对所有动物进行图像观察。3天之后(研究第1天)开始给药。在当天，取决于它们的组的分配，向所有动物给药赋形剂(CA)或PIO。在研究的第2天，在给药约2.5-3小时之后，对一赋形剂组和以0.08mg/kg/天PIO(急性组)治疗的一治疗组进行图像观察。对于所有组，给药持续总共7天。在研究的第7天，在给药最终剂量约2.5-3小时之后，对所有大鼠进行图像观察。

表1治疗组，每天PIO剂量和图像观察时间点

针对每个个体调节相关的AUC，进行在人的相应剂量的外推。在人中，7.5mg的剂量与2.8μg·h/mL的AUC相关联。在大鼠中，0.50mg/kg/天剂量的PIO HCl与7.11μg·h/mL的AUC相关联。这些计算结果显示在表2中。

表2大鼠和人-等量剂量，基于外推暴露

开始与图像观察相关的动物准备活动的以确保图像观察本身在给药之后约2.5-3小时进行。如前所述(Zhang等人，2010,同上)，在异氟醚麻醉的条件下准备定位受限制的动物。该步骤花费约10-15分钟，在该时间动物通常是完全清醒的。在清醒的动物上进行图像观察。

使用与BiospecBruker console(Bruker,Germany)连接以及安装有20G/cm磁场梯度的4.7T/40cm水平磁铁(Oxford,UK)进行所有MR实验。使用了由激发水质子自旋的容积线圈和接收MRI信号的表面线圈构成的双重1H射频(RF)线圈结构(Insight NeuroImaging Systems,Worcester,MA)；活性地调谐和解调容积和表面线圈以防止相互的线圈耦合。该双重线圈结构使得在大鼠脑中针对RF发射获得充分的RF场均匀性，同时保持由更小的接收线圈提供更高的信噪比(SNR)的优点。

使用具有如下参数的多切片快速自旋回波程序(RARE)首先获得了解剖图像：重复时间(TR)=2125ms;RARE因子=8;有效的回波时间(TE)=50ms;矩阵大小=256×256;视场(FOV)=3.2×3.2cm²;切片数量=18;切片厚度=1mm;n=8。基于解剖图像的几何学，使用具有下述参数的回波平面图像(EPI)获得了覆盖整个脑的多切片梯度回波图像：TR=1s;翻转角=60°;TE=30ms;矩阵大小=64×64;FOV=3.2×3.2cm²;切片数量=18;切片厚度=1mm。在图像获得过程中使大鼠休息。每次试验需要200体积；针对每只大鼠有9次试验。

使用医疗图像可视化和分析(Medical Image Visualization and Analysis(MIVA))、Statistical Parametric Mapping(SPM8)软件(Wellcome Department ofCognitive Neurology,London,UK)和Matlab(The Mathworks Inc.,Natick,MA,USA)进行fMRI数据的分析。首先针对运动校正数据(0.25mm的阈值)。进一步的数据预处理包括(a)切片扫描时间校正，(b)使用3D Gaussian滤波器(1-mm FWHM)空间平滑以说明由于移动和血管作用导致的信号的微小变化，以及(c)体素模式线性移除趋势校正(voxel-wise linear detrending)和频率的高通过滤(每个时间进程3个循环)以调节每次试验之间的扫描仪漂移(scanner drift)。然后将每个动物的结构和功能数据转移到嵌入到MIVA中的标准立体空间中以有利于功能数据的组分析。

使用相关的功能连接分析以分析静息状态功能连接性。首先，基于解剖图像，针对每个动物进行对比以及共同配准（align and coregister），以获得全面的分段的大鼠脑标准谱图。共同配准步骤可以提供在图像空间中每个种子关注的区域(ROI)的坐标(coordinate)。在共同配准(co-registration)和对比之后，根据它们的相应坐标获得在种子ROI的单独体素的fMRI时间进程。由种子ROI内部的全部像素通过区域性平均时间进程来构建针对每个种子区域的时间进程。全部的ROI时间进程为0.002-0.08Hz带通滤波器。滤波之后，计算ROI时间进程之间的Pearson交叉相关(CC)系数，并使用其定量功能连接的强度。

为了评估PIO对于横跨整个脑的功能连接的效果，我们将整个大鼠脑分成57个ROI。使用两个ROI时间进程之间的交叉相关系数来评估每对ROI之间的功能连接强度。针对每个rsfMRI试验评估总共57×56/2=1596功能连接。针对每个fMRI阶段的全部9次试验重复该方法，并且对于9次试验对于相关连接的连接强度取平均值。结果，针对每个rsfMRI扫描阶段，获得了1596个连接的连接强度。

对于每个连接(即每对ROI之间的连接)，然后计算对于图像观察天数、剂量和相互作用因素的重复的检测ANOVA。统计显著水平设置在P<0.005，未校正。

为了评估PIO对于个体神经通路的影响，使用了种子相关分析(seed-based correlational analysis)(Zhang等人，2010，同上)。选择海马体的CA1作为种子ROI。以基于体素的方式(voxel-by-voxel manner)计算与种子ROI功能连接的脑区域的空间模式。首先，获得种子ROI的局部平均的时间进程作为参考。然后计算每个体素的时间进程和参考时间进程之间的交叉相关系数。该相关系数表示该体素和种子之间的功能连接强度。针对每个fMRI试验构建种子ROI的连接图，然后对9次试验的图取平均以构建针对每个扫描阶段的连接图。最后，通过对在方法中在同一天图像观察的相同组的大鼠的连接图进行平均以获得合成的连接图(Zhang等人，2010，同上)。

图1提供了fMRI数据的例子，并说明即使在口服给药的最低剂量，快速释放的吡格列酮在脑的深皮质结构的中心区域的代谢中产生变化。这与细胞内线粒体作用一致。

结论

1.与赋形剂对照相比，存在剂量低至0.04mg/kg/天的PIO治疗诱导大鼠中的多个脑区域的变化的证据。该结果表示口服给药的低剂量PIO穿透血脑屏障。

2.剂量低至0.08mg/kg/天的PIO，早在24小时(在治疗开始之后检测的最早时间点)引起功能性变化。

图1所示，基于这些数据的外观，以0.32mg/kg/天剂量看来像是存在减弱的信号。但是，为了确认相比较于较低的剂量是否以该剂量存在实际的减弱效果而不是简单地反应动物受治疗者之间的内部生物学变异，要进一步进行检测。

实施例11

示范性风险测定

为了基于TOMM40 rs1054523(523)基因型、年龄和可能的APOE基因型确认具有正常的认知的受治疗者谁存在在接下来的5年内发展成阿尔茨海默型(也称为海马型)认知障碍的高风险，由一组438个来自Duke BryanADRC记忆健康和老龄化研究的前瞻性随访个体进行了发病年龄数据的研究。

表3总结了基于523和APOE基因型和年龄的示范性风险的分类。注意到似乎存在VL/VL,APOEε3/ε3受治疗者(年龄51-59岁之间死于(succumbto)阿尔茨海默病发病)的亚类(subset)。在表3中没有考虑这些受治疗者，其仅表示了在62岁之后认知正常的VL/VL携带者的低风险亚类。也考虑包括年轻的“高风险”VL/VL APOEε3/ε3受治疗者的扩展的风险分类。

表3在62-83岁针对523基因型确认为高风险的示范性年龄阈值

这些评估的示范性用途是明确的。使用表3按照如下方式对个体作出进入高风险或低风险组(可以不考虑种族)的评估：

1)具有(L,L)或(L,VL)的523基因型的个体被分配到高风险组，

2)具有(VL,VL)523的基因型(大于62岁)或具有(ε2/ε2)或(ε2/ε3)的APOE基因型的个体被分配到低风险组，

3)针对具有(S,S)、(S,VL)或(S,L)523基因型的个体，将个体目前的年龄与表3中的年龄进行比较来进行风险评估。

针对每个523基因型，研究了相应的认知障碍的发病年龄曲线以确认年龄，该曲线的斜率显示在5年窗口期发展成认知障碍的高风险。在相对平的渐进线之后出现曲线的较陡的部分，具有特征时间点(年龄)，在此观察到具体有认知障碍的个体的比例的快速增加(参见图2和图3)。

图3说明针对(S,L)523基因型，用于区别高风险和低风险分类的年龄的确定。曲线较陡的部分可以认为在约74岁开始，其相当于与具有该基因型但未表现出认知障碍的个体的90%水平相关的年龄。因此，74岁或更年长的个体可以被分配到本研究的高风险组，而比74岁年轻的个体可以被分配到低风险组。在图4-9中给出了针对剩余523基因型的认知障碍的示范性发病年龄曲线，其反映在上述表3的分配中。

应当理解，在本文中提供的图是用来解释以给出斜率变化发生的具体年龄，但如果收集了另外的数据，在不脱离本方法的一般性教导的条件下，可以对这些图进行更新以修改和/或优化年龄指定。

在本说明书中引用的专利的公开文本、专利文件、文章、摘要和其他出版物以其全部内容引入作为参考文献，如同每个单独引入。在冲突的情况下，以本说明书包括定义为准。在不脱离本发明的范围和精神的条件下，对本发明的各种修改和变化对于本领域技术人员而言是显而易见的。提供说明性实施方式和实施例仅作为例子不用来限制本发明的范围。本发明的范围仅通过下述权利要求限定。

Claims (81)

1.一种组合物，其包括用于治疗阿尔茨海默型认知障碍的低剂量吡格列酮。

2.根据权利要求1的组合物，其中所述治疗包括延迟阿尔茨海默型认知障碍的发病。

3.根据权利要求1的组合物，其中所述治疗包括延迟在人受治疗者中阿尔茨海默型认知障碍的发病，该人受治疗者存在在接下来的5-7年内发展成阿尔茨海默型认知障碍的风险增大，所述风险基于受治疗者年龄和rs10524523基因型。

4.根据权利要求1、权利要求2或权利要求3的组合物，其中所述低剂量吡格列酮以单元剂型给药。

5.根据权利要求4的组合物，其中所述单元剂型包括0.5-12毫克的吡格列酮。

6.根据权利要求4的组合物，其中所述单元剂型包括0.5-10毫克的吡格列酮。

7.根据权利要求4的组合物，其中所述单元剂型包括1.5-12毫克的吡格列酮。

8.根据权利要求4的组合物，其中所述单元剂型包括1.5-10毫克吡格列酮。

9.根据权利要求4的组合物，其中所述单元剂型包括0.5-8毫克吡格列酮。

10.根据权利要求4的组合物，其中所述单元剂型包括1.5-6毫克吡格列酮。

11.低剂量吡格列酮在制备用于治疗阿尔茨海默型认知障碍的药物制剂的用途。

12.根据权利要求11所述的用途，其中所述药物制剂是片剂。

13.根据权利要求11所述的用途，其中所述药物制剂是胶囊。

14.根据权利要求11所述的用途，其中所述药物制剂是囊片。

15.根据权利要求11所述的用途，其中所述药物制剂是液体。

16.根据权利要求11所述的用途，其中所述药物制剂是半固体。

17.根据权利要求11所述的用途，其中所述药物制剂是固体。

18.根据权利要求11-17中任一项所述的用途，其中所述吡格列酮以提供约0.15μg·h/mL-约3.6μg·h/mL的AUC的剂量给药。

19.一种组合物，其包括用于治疗认知减退的低剂量吡格列酮。

20.一种治疗需要该治疗的人受治疗者中的阿尔茨海默型认知障碍的方法，其包括向所述受治疗者给药低剂量吡格列酮。

21.根据权利要求20所述的方法，其中所述治疗包括延迟阿尔茨海默型认知障碍的发病。

22.根据权利要求20或21所述的方法，其中所述受治疗者存在在接下来的5-7年内发展成阿尔茨海默型认知障碍的风险增大，所述风险基于受治疗者年龄和rs10524523基因型。

23.根据权利要求20或21所述的方法，其中所述受治疗者存在在接下来的5-7年内发展成阿尔茨海默型认知障碍的风险增大，所述风险基于受治疗者的年龄。

24.根据权利要求20-23中任一项所述的方法，其中所述受治疗者至少50岁。

25.根据权利要求20-23中任一项所述的方法，其中所述受治疗者至少55岁。

26.根据权利要求20-23中任一项所述的方法，其中所述受治疗者至少60岁。

27.根据权利要求20-23中任一项所述的方法，其中所述受治疗者至少62岁。

28.根据权利要求20-23中任一项所述的方法，其中所述受治疗者至少68岁。

29.根据权利要求20-23中任一项所述的方法，其中所述受治疗者至少70岁。

30.根据权利要求20-29中任一项所述的方法，其中所述受治疗者是白种人受治疗者。

31.根据权利要求20-29中任一项所述的方法，其中所述受治疗者是非白种人受治疗者。

32.根据权利要求20-29中任一项所述的方法，其中所述受治疗者不具有一个或两个APOE2等位基因。

33.根据权利要求20-32中任一项所述的方法，其中，所述给药每天一次。

34.根据权利要求21-33中任一项所述的方法，其中所述延迟包括延迟情节记忆衰退的发病。

35.一种治疗需要该治疗的人受治疗者中认知减退的方法，其包括向所述受治疗者给药低剂量吡格列酮。

36.一种确定在预先确定的年龄或年龄段的人受治疗者中发展成阿尔茨海默型认知障碍的风险增大的方法，其包括：

检测来自所述受治疗者的生物样品的所述受治疗者的rs10524523基因型，其中，将rs10524523基因型的每个等位基因分为：

(a)短型(S，少于19T残基)；

(b)长型(L，19-29残基)；或者

(c)非常长型(VL，30或更多残基)；以及

由所述rs10524523基因型来确定所述受治疗者在所述预先确定的年龄或年龄段是否存在发展成阿尔茨海默型认知障碍的风险增大，其中：

(1)年龄大于约62和L,L或L,VL表示风险增大；

(2)年龄大于约62和VL,VL不表示风险增大；

(3)年龄大于约74和S,L表示风险增大；

(4)年龄大于约77和S,S表示风险增大；以及

(5)年龄大于约76和S,VL表示风险增大。

37.根据权利要求36所述的方法，其中所述确定还包括：检测来自所述受治疗者的生物样品的所述受治疗者的APOE基因型，其中，在所述基因型中存在APOE2等位基因表示所述受治疗者不存在风险增大。

38.一种确定是否向人受治疗者给药低剂量吡格列酮以治疗阿尔茨海默型认知障碍的方法，其包括：

检测来自所述受治疗者的生物样品的受治疗者的rs10524523基因型，其中，将每个等位基因分为：

(a)短型(S，少于19T残基)；

(b)长型(L，19-29残基)；或者

(c)非常长型(VL，30或更多残基)；以及

通过所述rs10524523基因型和所述人受治疗者的年龄来确定是否向所述受治疗者给药低剂量吡格列酮以治疗阿尔茨海默型认知障碍，其中：

(1)年龄大于约62和L,L或L,VL表示治疗；

(2)年龄大于约62和VL,VL不表示治疗；

(3)年龄大于约74和S,L表示治疗；

(4)年龄大于约77和S,S表示治疗；以及

(5)年龄大于约76和S,VL表示治疗。

39.根据权利要求38所述的方法，其中所述确定还包括：检测来自所述受治疗者的生物样品的所述受治疗者的APOE基因型，其中，在所述基因型中存在APOE2等位基因不表示治疗。

40.根据权利要求38或39所述的方法，其中所述受治疗者具有正常的认知。

41.一种延迟在存在发展成阿尔茨海默病的风险的受治疗者中的阿尔茨海默病发病的方法，其包括：

a.确定TOMM40基因的至少一个基因变体的存在，其中所述基因变体为rs10524523等位基因，以及其中存在所述至少一个基因变体表示发展成阿尔茨海默病的风险；以及

b.向所述受治疗者给药有效量的低剂量吡格列酮或其盐，从而在所述受治疗者中延迟阿尔茨海默病的发病。

42.一种延迟在存在发展成阿尔茨海默病的风险的受治疗者中的轻度认知障碍发病的方法，其包括：

a.确定TOMM40基因的至少一个基因变体的存在，其中所述基因变体为rs10524523等位基因，以及其中存在所述至少一个基因变体表示发展成阿尔茨海默病的风险；以及

b.向所述受治疗者给药有效量的低剂量吡格列酮或其盐，从而在所述受治疗者中延迟轻度认知障碍的发病。

43.一种延迟在存在发展成阿尔茨海默病的风险的受治疗者中的遗忘型轻度认知障碍发病的方法，其包括：

a.确定TOMM40基因的至少一个基因变体的存在，其中所述基因变体为rs10524523等位基因，以及其中存在所述至少一个基因变体表示发展成阿尔茨海默病的风险；以及

b.向所述受治疗者给药有效量的低剂量吡格列酮或其盐，从而延迟在所述受治疗者中遗忘型轻度认知障碍的发病。

44.一种延迟在存在发展成阿尔茨海默病的风险的受治疗者中的临床前阿尔茨海默病发病的方法，其包括：

a.确定TOMM40基因的至少一个基因变体的存在，其中所述基因变体为rs10524523等位基因，以及其中存在所述至少一个基因变体表示发展成阿尔茨海默病的风险；以及

b.向所述受治疗者给药有效量的低剂量吡格列酮或其盐，从而延迟在所述受治疗者中临床前阿尔茨海默病的发病。

45.一种延迟在存在发展成阿尔茨海默病的风险的受治疗者中的前驱性阿尔茨海默病发病的方法，其包括：

a.确定TOMM40基因的至少一个基因变体的存在，其中所述基因变体为rs10524523等位基因，以及其中存在所述至少一个基因变体表示发展成阿尔茨海默病的风险；以及

b.向所述受治疗者给药有效量的低剂量吡格列酮或其盐，从而延迟在所述受治疗者中前驱性阿尔茨海默病的发病。

46.一种延迟在存在发展成阿尔茨海默病的风险的受治疗者中的与阿尔茨海默病相关的生理变化开始的方法，其包括：

a.确定TOMM40基因的至少一个基因变体的存在，其中所述基因变体为rs10524523等位基因，以及其中存在所述至少一个基因变体表示发展成阿尔茨海默病的风险；以及

b.向所述受治疗者给药有效量的低剂量吡格列酮或其盐，从而延迟在所述受治疗者中与阿尔茨海默病相关的生理变化的开始。

47.根据权利要求41-46中任一项所述的方法，其中，以0.5mg-9mg/天的剂量给药吡格列酮。

48.根据权利要求41-46中任一项所述的方法，其中，以提供约0.15μg·h/mL-约3.6μg·h/mL的AUC的剂量给药吡格列酮。

49.根据权利要求41-46中任一项所述的方法，其中所述给药步骤包括：根据每天的治疗方案向所述受治疗者给药吡格列酮或其盐。

50.根据权利要求49所述的方法，其中所述给药步骤包括：向所述受治疗者给药作为药物制剂的吡格列酮或其盐。

51.根据权利要求50所述的方法，其中所述药物制剂为片剂。

52.根据权利要求50所述的方法，其中所述药物制剂为胶囊。

53.根据权利要求50所述的方法，其中所述药物制剂为囊片。

54.根据权利要求50所述的方法，其中所述药物制剂是液体。

55.根据权利要求50所述的方法，其中所述药物制剂是半固体。

56.根据权利要求50所述的方法，其中所述药物制剂是固体。

57.根据权利要求51所述的方法，其中所述片剂为口腔崩解片剂。

58.根据权利要求55所述的方法，其中所述半固体药物制剂选自：凝胶、乳剂、洗液、软膏、药膏和香膏的半固体药物制剂。

59.根据权利要求54所述的方法，其中所述给药步骤包括向受治疗者口服给药液体吡格列酮药物制剂。

60.根据权利要求54所述的方法，其中所述给药步骤包括向所述受治疗者注射液体吡格列酮药物制剂。

61.根据权利要求54所述的方法，其中所述给药步骤包括向所述受治疗者鼻内给药液体吡格列酮药物制剂。

62.根据权利要求55所述的方法，其中所述给药步骤包括：向所述受治疗者鼻内给药半固体吡格列酮药物制剂。

63.根据权利要求55所述的方法，其中所述给药步骤包括向所述受治疗者局部给药所述半固体吡格列酮药物制剂。

64.根据权利要求56所述的方法，其中所述药物制剂是粉剂。

65.根据权利要求56所述的方法，其中所述给药步骤包括向所述受治疗者局部给药所述固体吡格列酮药物制剂。

66.根据权利要求41-46中任一项所述的方法，其中所述受治疗者具有正常的认知。

67.根据权利要求41-46中任一项所述的方法，其中所述给药发生在当所述受治疗者小于60岁时。

68.根据权利要求41-46中任一项所述的方法，其中所述给药发生在所述受治疗者在60-70岁时。

69.根据权利要求41-46中任一项所述的方法，其中所述受治疗者具有长型TOMM40rs10524523等位基因的一个拷贝。

70.根据权利要求41-46中任一项所述的方法，其中所述受治疗者具有长型TOMM40rs10524523等位基因的两个拷贝。

71.根据权利要求41-46中任一项所述的方法，其中与对照受治疗者相比，所述受治疗者具有发展成阿尔茨海默病的风险增大。

72.根据权利要求71所述的方法，其中所述对照受治疗者携带包括长度上小于19个核苷酸的poly-T重复单元的TOMM40rs10524523等位基因的至少一个拷贝。

73.根据权利要求71所述的方法，其中所述对照受治疗者不具有包括长度上大于19或更多核苷酸的poly-T重复单元的TOMM40rs10524523等位基因的拷贝。

74.根据权利要求50-65所述的方法，其中所述药物制剂是生物等效性制剂。

75.根据权利要求50-65所述的方法，其中所述药物制剂是药学等效性制剂。

76.根据权利要求50-65所述的方法，其中所述药物制剂是治疗等效的制剂。

77.根据权利要求20、35和38所述的方法，其中所述单元剂量包括0.5-12mg吡格列酮。

78.根据权利要求20、35和38所述的方法，其中所述单元剂量包括0.5-10mg吡格列酮。

79.根据权利要求20、35和38所述的方法，其中所述单元剂量包括0.5-8mg吡格列酮。

80.根据权利要求20、35和38所述的方法，其中所述单元剂量包括1.5-6mg吡格列酮。

81.用于治疗阿尔茨海默型认知障碍的低剂量吡格列酮。

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