CN103497233A

CN103497233A - 一种硼替佐米的制备方法

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Publication number: CN103497233A
Application number: CN201310460019.XA
Authority: CN
Inventors: 袁淑杰; 王丽娜; 杨新春; 张道旭; 王�忠; 李金花; 戚亮; 葛京城; 李郑武; 高晶; 宋紫玉; 户巧芬
Original assignee: HARBIN PHARMACEUTICAL GROUP TECHNOLOGY CENTER
Current assignee: Harbin Pharmaceutical Group Holding Co ltd; HARBIN PHARMACEUTICAL GROUP TECHNOLOGY CENTER
Priority date: 2013-09-30
Filing date: 2013-09-30
Publication date: 2014-01-08
Anticipated expiration: 2033-09-30
Also published as: CN103497233B

Abstract

本发明涉及一种硼替佐米的制备方法，该方法包括以异丁基硼酸为其实原料，经过硼酸的保护、氯取代硼酸临位碳上的氢、氯被硅基保护的氨基取代、氨基脱保护、与N-Boc-L-苯丙氨酸缩合、氨基脱保护、与吡嗪-2-甲酸缩合、硼酸酯脱保护等8步合成反应及1步重结晶，得到硼替佐米终产品。

Description

一种硼替佐米的制备方法

技术领域

本发明涉及一种抗肿瘤药物化合物的制备方法，特别涉及硼替佐米的制备方法，属于医药技术领域。

背景技术

硼替佐米，化学名为:[)1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧-3-苯基-2-[(吡嗪甲酰)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸

结构式

分子式:C_1gH₂₅BN₄O₄

分子量:384.24

硼替佐米是由一家美国制药公司开发的用于抑制蛋白酶体(proteaSome)，迎而干扰细胞内NF-κB讯号传导途径。由于NF-κB在肿瘤细胞内扮演着肿瘤血管生成的重要角色，干扰NF-κB活化的过程，间接或直接促成肿瘤细胞的死亡。

硼替佐米着重于药物和多发性骨髓瘤细胞内转录因子NF-κB关系的原因，是因为NF-κB的活性在大部分免疫细胞以及癌细胞中很活跃，会启动许多与细胞周期及抗凋亡因子产生有关的基因。在正常情况下细胞内多余的NF-iκB会在细胞质中和另一种抑制性蛋白质iκB结合，而无法迎入细胞核中表现其功能。但在癌细胞中，受到磷酸化的iκB会和泛素(ubiquitin)结合而被蛋白酶体所辨识及分解，因此N卜κB就可以迎入细胞核中，迎一步启动许多与细胞周期迎展及抗凋亡因子产生有关的基因，使肿瘤细胞得以增殖。但当使用蛋白解体抑制剂(bortezomib)抑制蛋白酶体的功能后，减少iκB被蛋白解体破坏的程度，因此在细胞质内的NF-κB就会一直处于和iκB结合的状态，无法迎入细胞核中发挥其转录功能，因而抑制癌细胞的生长，并促迎其死亡。

临床研究指出，一群对治疗没有反应或己经复发的骨髓瘤病患，接受硼替佐米的治疗，有35%对硼替佐米有反应，而且其中有10%的患者属于完全或接近完全的缓解(非常有效)。如此的反应率具有高度意义，因为后期疾病的患者或对其他治疗无反应的骨髓瘤患者，有完全缓解的很罕见。鉴于两个第二期临床试验的证据显示，PS-341确实具备持续性的疗效反应，促使美国食品药品监督管理局(FDA)在2003年5月快速审查通过准许其用于治疗己接受过至少两种处方而表现出疾病恶化的多发性骨髓瘤，之后更迎一步同意使用于所有多发性骨髓瘤病人。目前国内尚无获得生产批文的公司，良好的市场前景引起了很多企业对该品种的关注，加大对该产品研发的力度。

目前硼替佐米的合成路线都是通过(lS，2S，3R，5S)-蒎烷二醇1-三氟乙酸铵-3-甲基丁烷-1-硼酸盐作为起始原料，经3-4步化学合成制得。在合成方面，由于合成原料(1S，2S，3R，5S)-蒎烷二醇1-三氟乙酸铵-3-甲基丁烷-1-硼酸盐的价格过高，导致合成成本较高。目前硼替佐米纯化的方法主要是通过硅胶柱层析，另升也有文献报道使用制备液相分离的方法。硅胶柱层析虽然是一个很好的纯化方法，但不适于大规模生产，因为其吸附力过强会导致产品损失降低产率，而且所需溶剂和硅胶量大，大大增加的产品的成本。制备液相分离虽然分离效率高，但同样对产品有一定吸附，并且需定期更换液相柱，大大增加了产品的成本。

发明内容

本发明的目的是对现有的硼替佐米合成路线及纯化技术迎行优化，解决硼替佐米制备工艺中存在的一些问题，提供一种成本低、收率高、操作简便、有利于实现产业化的硼替佐米制备工艺。

本发明提供一种硼替佐米制备方法，该方法包括下列步骤:

(1)将异丁基硼酸在(+)-蒎烷二醇的作用下得到(15，3R，5S)-蒎烷二醇-3-甲基丙烷-1-硼酸醋(中间体1)，反应如下:

本反应中采用的溶剂选自正己烷、正庚烷、石油醚、环己烷中的一种或一种以上的混合物，更优选正己烷。本反应中采用的硼酸保护基选自(+)-蒎烷二醇、异丙醇或新戊二醇中的一种，更优选(+)-蒎烷二醇。本反应中的反应温度为40-90C，更优选正己烷回流温度，即68℃。

(2)将(1S，3R，5S)-蒎烷二醇-3-甲基丁烷-1-硼酸醋在LDA、二氯甲烷和ZnCl₂的作用下得到(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-1-氯-3-甲基丁烷-1-硼酸醋(中间体2)，反应如下:

本反应中采用溶剂选自四氢吠哺、环己烷、2-甲基四氢吠哺中的一种或一种以上，更优选四氢吠哺;本反应中反应温度为-85--50℃，更优选-78--65C。本反应中(1S，3R，5S)-蒎烷二醇-3-甲基丁烷-1-硼酸醋、LDA、二氯甲烷和ZnCl_，的投料比例为1:2.5:0.8:2至1:1.5:0.4:1.2，更优选1:2:0.4:1.5。本反应中LDA的滴加温度为-85℃--50℃，更优选-78--65℃。

(3)将(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-1-氯-3-甲基丁烷-1-硼酸醋在LHMDS作用下得到(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-1-六甲基硅基氨基-3-甲基丁烷-1-硼酸醋(中间体3)，反应如下:

本反应中所选用的试剂选自正己烷、甲苯、甲基叔丁基醚及四氢吠哺中的一种或一种以上的混合物，更优选四氢吠哺。本反应中反应温度为-85--50℃，更优选-78--65℃。本反应中(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-1-氯-3-甲基丁烷-1-硼酸醋与LHMDS投料比例为1:2至1:1.1，更优选1:1.3。本反应中LHMDS的滴加温度为-85--50℃，更优选-78--65℃。

(4)将(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-1-六甲基硅基氨基-3-甲基丁烷-1-硼酸醋在三氟乙酸的作用下脱掉硅基保护，得到(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-1-三氟乙酸铵-3-甲基丁烷-1-硼酸醋(中间体4)，反应如下:

本反应中采用的溶剂选自异丙醚、二氯甲烷、四氢吠哺、乙醚、甲基叔丁基醚、乙酸乙醋、庚烷、环己烷、甲基环己烷、甲苯中的一种或一种以上的混合物，更优选异丙醚。本反应中脱硅基保护的化学试剂选自三氟乙酸、氯化氢乙酸乙醋溶液、氯化氢二氯甲烷溶液、氯化氢四氢吠哺溶液、氯化氢异丙醚溶液、氯化氢甲基叔丁基醚溶液中的一种，更优选三氟乙酸。本反应中反应温度为-30～20℃，更优选-5-0℃。

(5)将(15，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-1-三氟乙酸铵-3-甲基丁烷-1-硼酸醋在DIEA做碱、TBTU为缩合剂的条件下，与N-Boc-L-苯丙氨酸发生缩合，得到(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-N-叔丁氧谈基-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸-硼酸醋(中间体5)，反应如下:

本反应中采用的溶剂选自二氯甲烷、二氯甲烷、四氢吠哺、乙酸乙醋、甲苯中的一种，更优选二氯甲烷。本反应中DIEA/TEA/2-甲基吡啶/吡啶的滴加温度为-30-15℃，更优选-15--5℃。本反应中所用的碱选自DIEA、TEA、2-甲基吡啶或吡啶中的一种，更优选DIEA。(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-1-三氟乙酸铵-3-甲基丁烷-1-硼酸醋、DIEA/TEA/2-甲基吡啶/吡啶、TBTU、N-Boc-L-苯丙氨酸的投料比为1:1.8:2.2:1.5到1:1.1:1.5:1.1，更优选1:1.5:2:1.2。

(6)将(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-N-叔丁氧谈基-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸醋在氯化氢乙酸乙醋溶液的作用下得到(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸醋-盐酸盐(中间体6)，反应如下:

本反应中的溶剂选自乙酸乙醋、二氯甲烷、四氢吠哺中的一种或一种以上的混合物，更优选二氯甲烷。本反应中所用的酸选自氯化氢气体、氯化氢乙酸乙醋溶液、氯化氢二氯甲烷溶液、氯化氢四氢吠哺溶液的一种或一种以上的混合物，更优选氯化氢气体;本反应中反应温度为-10-35℃，更优选30-35℃。

(7)将(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸醋-盐酸盐在DIEA做碱、TBTU为缩合剂的条件下，与吡嗪-2-甲酸发生缩合，得到(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-N-(2-吡嗪谈基)-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸醋(中间体7)，反应如下:

本反应中的溶剂选自二氯甲烷、二氯甲烷、四氢吠哺、乙酸乙醋、甲苯中的一种，更优选二氯甲烷。本反应中DIEA/TEA/2-甲基吡啶/吡啶的滴加温度为-30-15℃，更优选-5-0℃。本反应中所用的碱选自DIEA、TEA、2-甲基吡啶或吡啶中的一种或一种以上的混合物，更优选DIEA。本反应中(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸醋-盐酸盐DIEA/TEA/2-甲基吡啶/吡啶、TBTU、吡嗪-2-甲酸的投料比为1:2:2.5:1.8至1:1.2:1.2:1.1，更优选1:1.5:2:1.2。

(8)将(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-N-(2-吡嗪谈基)-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸醋，在稀盐酸和异丁基硼酸的作用下得到硼替佐米粗品。

本反应中溶剂选自甲醇、正庚烷、正己烷、环己烷、石油醚、乙醇中的一种或一种以上的混合物，更优选甲醇与正庚烷混合液(v/v=1:1)。本试验中滴加稀盐酸的温度为-30-30℃，更优选5-10℃。本反应中(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-N-(2-吡嗪谈基)-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸醋、异丁基硼酸的投料比为1:2～1:1.1，更优选1:1.2。

(9)硼替佐米粗品经重结晶得到硼替佐米终产品。

本反应中溶剂选自乙酸乙醋、四氢吠哺、丙酮、正庚烷中的一种或一种以上的混合物，更优选丙酮。本反应中干燥温度为25-50℃，更优选30-40℃;本反应中打浆温度为10-30℃，更优选15～20℃。

以下通过实验数据迎一步说明本发明的有益效果。

1.为了优化中间体1反应参数，设计的实验方案对反应溶剂、保护基、反应时间、反应温度四个参数迎行了考察(见表1)。实验结果表明:

(1)反应溶剂的选择

正己烷、正庚烷、石油醚、环己烷作为反应溶剂时均能获得较好收率，且达反应平衡时收率基本一致。从运营成本考虑，正己烷与石油醚的成本相对更低，从残留溶剂考虑，石油醚为混合物，不易做溶剂残留分析，最终选择使用正己烷作为反应溶剂。

(2)保护基的选择

(+)-蒎烷二醇、异丙醇、新戊二醇作为硼酸保护基时均能获得较好收率，且反应平衡时收率基本一致。

由于硼替佐米1位手性碳为R构型，为使后续反应能够更有选择性的迎行，选择的保护基在空间上需要占据硼酸的β位，并且占据位置的分子要足够大，通过对比以上三个保护基的空间构型，最终选择(+)-蒎烷二醇作为保护基。

最终选定中间体1反应溶剂为正己烷，反应时间为5.5-6小时，反应温度为60-70℃，硼酸保护基为(+)-蒎烷二醇。

表1中间体1保护基、试剂、反应时间及反应温度筛选

2.中间体5后处理方法的设计

多数文献对硼替佐米中间体的纯化多数为柱层析分离，另有报道用制备液相分离，但这大大增加了硼替佐米成品的成本，为使中间体5的纯化更符合工业生产条件，以更低的运营成本生产，所以对后处理条件迎行优化。

多数文献选择的后处理方法为反应液水洗后，直接用氯化钠洗涤、干燥、过滤，另有用氯化铵溶液洗涤、干燥、过滤的步骤，以上两种后处理方式均不能对产品中缩合剂分解后产生的杂质迎行有效去除。经过多次后处理条件摸索，选择用水、1%磷酸溶液、2%碳酸钾溶液、氯化钠溶液分别洗涤、干燥、过滤的步骤，对产品迎行后处理，选择此种后处理方法的原因如下:

因反应中选用的缩合剂为TBTU，在参与反应过程中，生成物为HOBt和酰胺类化合物，该两种物质在有机酸水溶液中溶解度较好，初步对稀盐酸、稀磷酸、稀硫酸及氯化铵水溶液四种酸性溶液筛选。稀盐酸与稀硫酸均可使少量中间体的硼酸保护基水解掉;氯化铵饱和水溶液可洗掉微量的副产物，无法达到纯化的目的;1%磷酸溶液的使用，既可以洗掉TBTU分解产生的副产物，又不会对硼酸保护基造成影响，同时还可以使过量的DIEA成磷酸盐洗涤掉。

最终选择1%磷酸溶液、2%碳酸钾溶液、饱和氯化钠溶液洗涤的方式迎行后处理，避免了柱层析纯化或制备液相纯化造成的成本高，不易产业化的问题。

3.硼替佐米的精制工艺的筛选

硼替佐米结构中含有硼酸结构，多数文献报道的纯化方式为柱层析，柱层析的优点是纯化效率高，杂质含量少，但缺点无疑是硅胶柱对产品的吸附造成收率低，成本高，不易产业化。另有少数文献报道对硼替佐米使用制备液相分离的方法，虽然纯度高，但收率低、耗费制备柱、成本高，也不易产业化。基于以上原因，在硼替佐米精制过程中选择重结晶方法完成对产品的精制。

为了选择有效的的重结晶溶剂，设计了试验方案对乙酸乙醋，正庚烷、丙酮迎行比对，最终选择使用乙酸乙醋作为重结晶溶剂，产品纯度可达99.7%以上，产品质量符合质量标准要求。具体实验结果如表2所示:

表2硼替佐米重结晶溶剂的筛选

有益效果

本发明通过技术优化，提供了一种原料来源易得、反应选择性高、操作简便、生产效率高、纯化方便、运行成本低、适合于工业化生产的硼替佐米的制备方法。同时重结晶很好的解决了硼替佐米在纯化过程中损失大等问题，实验得到的产品含量在99.7%以上，符合质量标准的要求。

具体实施方式

实施例1(15，3R，55)-蒎烷二醇-3-甲基丙烷-1-硼酸醋的制备

向反应瓶中加入异丁基硼酸(99g，968mn01)，(+)-蒎烷二醇(150g，880mmol)，干燥正己烷1500ml，加热回流反应5.5h。反应停止后降至室温，用水洗涤2次，饱和食盐水洗。无水硫酸钠搅拌干燥过夜后过滤，滤液减压浓缩得到无色透明液体2(205g，98.8%)。

实施例2(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-1-氯-3-甲基丁烷-1-硼酸醋的制备

氮气保护下，向四颈瓶中加入化合物2(205g，866mn01)，无水四氢吠哺(1500ml)，无水二氯甲烷(3510ml)，降温至-58℃。氮气保护下加入LDA溶液，滴毕保温30min。40min内加入无水ZnCl₂的无水THF溶液保温2h，加入10%氯化铵水溶液(1500ml)，缓慢升至室温，搅拌30min。加入7500ml石油醚分液萃取，有机相用质量分数5%的稀硫酸溶液1500ml洗涤，饱和氯化铵(2000m1)洗，水(2000m1)洗，饱和食盐水(2000m1)洗涤，加入无水硫酸钠搅拌干燥过夜，滤液减压浓缩得到黄棕色透明液体3(277g，粗品)。

实施例3(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-1-六甲基硅基氨基-3-甲基丁烷-1-硼酸醋的制备

氮气保护下，向三颈瓶中加入化合物3(277已粗品)，无水四氢吠哺(1590ml)，降温至-58℃。氮气保护下加入六甲基二硅基胺基锂LHMDS溶液，滴毕保温20mim。缓慢升至室温过夜反应。减压浓缩，浓缩物溶于干燥正己烷(6330ml)中，室温搅拌5h。硅藻土抽滤，正己烷洗涤3次，滤液减压浓缩得棕色油状物4(330g)。

实施例4(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-1-三氟乙酸铵-3-甲基丁烷-1-硼酸醋的制备

向反应瓶中加入化合物4(330g，806mm01)，异丙醚(2000m1)。冷至-10℃。-20℃～-15℃下滴加三氟乙酸(280g，2.6mol)，滴完后5℃～l0℃搅拌3h。反应结束后，抽滤，异丙醚(330m1)洗涤，30℃真空干燥得类白色固体5(180已475mmol)。

实施例5(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-N-叔丁氧谈基-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸-硼酸醋

依次将化合物5(150g，396mmol)、TBTU(140g,436mmol)、N-BOC-L-苯基丙氨酸(116g，436mmol)和二氯甲烷(1.6L)加到一起后充氮保护，降温到-20℃～-15℃。缓慢滴加N，N-二异丙基乙胺(154g，1.2mol)，加毕，-15℃～-10℃搅拌2～2.5小时，随后用水(1.6L，2)、1%的磷酸溶液(1.6L，2)、2%碳酸钾溶液(1.6L，2)和饱和氯化钠溶液(1.6L)洗涤。有机层加入无水硫酸钠干燥(400g)，过滤，二氯甲烷洗涤，滤液真空下除去有机溶剂至干，得化合物6(240g，粗品)。

实施例6(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸醋-盐酸盐的制备

将化合物6(240g，粗品)和二氯甲烷(1480m1)混合到降温至0℃，搅拌下通入HCl气体，直到反应结束。40℃浓缩至干，加入正庚烷(1.6L)，开启搅拌，控制温度25℃以下搅拌30～35分钟，过滤，得滤饼。滤饼再用正庚烷(1.6L)溶液打浆洗涤一次。过滤，滤饼30～40℃真空干燥。得化合物7(140g，312mmol)。

实施例7(1S，2R，3R，5S)-蒎烷二醇-N-(2-吡嗪谈基)-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸醋的制备

依次将化合物7(140g,312mmol)、吡嗪-2羧酸(43.5g，349mmol)、TBTU(112g，349mmol)和二氯甲烷(1400ml)加入一起后充氮保护，降温到-15℃～10℃。缓慢滴加N，N-二异丙基乙胺(140g，1.lmol)，加毕，20℃～30℃搅拌过夜，随后用水(1.4L，2)、1%的磷酸溶液(1.4L，2)、2%碳酸钾溶液(1.4L，2)和饱和氯化钠溶液(1.4L)洗涤。有机层加入无水硫酸钠干燥(300g)，过滤，二氯甲烷洗涤(200m1)，滤液真空下除去有机溶剂至干，得化合物8(180g，粗品)。

实施例8硼替佐米粗品的制备

依次将化合物8(180g，粗品)、甲醇(1100m1)、正庚烷(1100m1)和异丁基硼酸(67g，657mnol)加入一起后充氮保护，降温到-5℃～0℃，加入lN的盐酸(840m1)。加完后体系的温度升到30～40℃。搅拌反应17～18小时。停止搅拌，静置分层，弃去正庚烷层。加入正庚烷(1000m1)搅拌分层，水层再用正庚烷重复上次操作一次。

水层加入乙酸乙醋(1000ml)、2mol/L氢氧化钠溶液(840ml)、搅拌5分钟，静置分层，弃乙酸乙醋层。水层加入乙酸乙醋(1000m1)，搅拌分层。取水层，加入乙酸乙醋(1000m1)、浓盐酸(74m1)，搅拌5～10分钟，静置分层。收集乙酸乙醋层，水层再用乙酸乙醋重复萃取两次。

合并乙酸乙醋层，加入饱和氯化钠溶液(1000ml)搅拌分层。二氯甲烷层加入无水硫酸钠(200g)搅拌干燥半小时。过滤，乙酸乙醋(200m1)洗涤干燥，合并滤液，减压浓缩至干，将丙酮(600ml)，加入到lL反应瓶中，开启搅拌，加入浓缩后产品，25℃打浆搅拌3h，过滤，滤饼用丙酮(200ml)洗涤，滤饼30～40℃真空干燥，得白色硼替佐米粗品(80g)。

实施例9硼替佐米的精制

加热乙酸乙醋至60℃，加入粗品(80g)，至完全溶解，加入活性炭(2g)，搅拌2分钟后趁热过滤，滤饼用乙酸乙醋洗涤，滤液在搅拌器搅拌下自然降至室温，搅拌至大量固体析出后，再继续搅拌3小时。过滤、滤饼用乙酸乙醋洗涤，滤饼30～40℃真空干燥，得白色硼替佐米终产品(50g,62.5%)，纯度99.7%。

Claims

1.一种硼替佐米的制备方法，其特征在于该方法包含下列步骤：

（1)将异丁基硼酸在（+)-蒎烷二醇的作用下得到（1S,3R,5S)-蒎烷二醇-3-甲基丙烷-1-硼酸酯；

（2)将（1S,3R,5S)-蒎烷二醇-3-甲基丁烷-1-硼酸酯在LDA、二氯甲烷和ZnCl2的作用下得到（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-1-氯-3-甲基丁烷-1-硼酸酯；

（3)将（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-1-氯-3-甲基丁烷-1-硼酸酯在LHMDS作用下得到（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-1-六甲基硅基氨基-3-甲基丁烷-1-硼酸酯；

（4)将（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-1-六甲基硅基氨基-3-甲基丁烷-1-硼酸酯在脱硅基保护的化学试剂的作用下脱掉硅基保护，得到（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-1-三氟乙酸铵-3-甲基丁烷-1-硼酸酯；

（5)将（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-1-三氟乙酸铵-3-甲基丁烷-1-硼酸酯在碱、TBTU为缩合剂的条件下，与N-Boc-L-苯丙氨酸发生缩合，得到（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-N-叔丁氧羰基-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸-硼酸酯；

（6)将（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-N-叔丁氧羰基-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸酯在酸溶液的作用下得到（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸酯-盐酸盐；

（7)将（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸酯-盐酸盐在碱、TBTU为缩合剂的条件下，与吡嗪-2-甲酸发生缩合，得到（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-N-（2-吡嗪羰基)-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸酯；

（8)将（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-N-（2-吡嗪羰基)-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸酯，在稀盐酸和异丁基硼酸的作用下得到硼替佐米粗品；

（9)硼替佐米粗品经溶剂溶解，析晶，打浆，过滤，干燥得到硼替佐米终产品。

2.根据权利要求1的硼替佐米制备方法，其特征在于：步骤（1)中采用的溶剂选自：正己烷、正庚烷、石油醚、环己烷中的一种或一种以上的混合物；步骤（1)中需要加入硼酸保护基，选自：（+)-蒎烷二醇、异丙醇或新戊二醇的一种；步骤（1)的反应温度为40～90℃。

3.根据权利要求1的硼替佐米制备方法，其特征在于：步骤（2)中采用溶剂选自：四氢呋喃、环己烷、2-甲基四氢呋喃中的一种或一种以上；步骤（2)中反应温度为-85～-50℃；步骤（2)中（1S,3R,5S)-蒎烷二醇-3-甲基丁烷-1-硼酸酯、LDA、二氯甲烷和ZnCl₂的投料比例为1:2:4:1.5；步骤（2)中LDA的滴加温度为-85℃～-50℃。

4.根据权利要求1的硼替佐米制备方法，其特征在于：步骤（3)中采用溶剂选自：正己烷、甲苯、甲基叔丁基醚及四氢呋喃中的一种或一种以上的混合物；步骤（3)中反应温度为-85～-50℃；步骤（3)中（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-1-氯-3-甲基丁烷-1-硼酸酯与LHMDS投料比例为1:1.3；步骤（3)中LHMDS的滴加温度为-85～-50℃。

5.根据根据权利要求1的硼替佐米制备方法，其特征在于：步骤（4)中采用的溶剂选自：异丙醚、二氯甲烷、四氢呋喃、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、庚烷、环己烷、甲基环己烷、甲苯中的一种或一种以上的混合物；步骤（4)中脱硅基保护的化学试剂选自：三氟乙酸、氯化氢乙酸乙酯溶液、氯化氢二氯甲烷溶液、氯化氢四氢呋喃溶液、氯化氢异丙醚溶液、氯化氢甲基叔丁基醚溶液中的一种；步骤（4)中反应温度为-30～20℃。

6.根据根据权利要求1的硼替佐米制备方法，其特征在于：步骤（5)中采用的溶剂选自：二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃、乙酸乙酯、甲苯中的一种；步骤（5)中碱的滴加温度为-30～15℃；步骤（5)中所用的碱选自：DIEA、TEA、2-甲基吡啶或吡啶；（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-1-三氟乙酸铵-3-甲基丁烷-1-硼酸酯、碱、TBTU、N-Boc-L-苯丙氨酸的投料比为1：1.5：2：1.2。

7.根据根据权利要求1的硼替佐米制备方法，其特征在于：步骤（6)中的溶剂选自：乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃中的一种或一种以上的混合物；步骤（6)中所用的酸选自：氯化氢气体、氯化氢乙酸乙酯溶液、氯化氢二氯甲烷溶液、氯化氢四氢呋喃溶液的一种或一种以上的混合物；步骤（6)中反应温度为-10～35℃。

8.根据根据权利要求1的硼替佐米制备方法，其特征在于：步骤（7)中的溶剂选自：二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃、乙酸乙酯、甲苯中的一种；步骤（7)中碱的滴加温度为-30～15℃；步骤（7)中所用的碱选自：、DIEA、TEA、2-甲基吡啶或吡啶中的一种或一种以上的混合物；步骤（7)中（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸酯-盐酸盐、碱、TBTU、吡嗪-2-甲酸的投料比为1：1.5：2：1.2。

9.根据根据权利要求1的硼替佐米制备方法，其特征在于：步骤（8)中溶剂选自：甲醇、正庚烷、正己烷、环己烷、石油醚、乙醇中的一种或一种以上的混合物；步骤（8)中滴加稀盐酸的温度为-30～30℃；步骤（8)中（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-N-（2-吡嗪羰基)-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸酯、异丁基硼酸的投料比为1：1.2；步骤（9)中重结晶溶剂选自：乙酸乙酯、四氢呋喃、丙酮、正庚烷中的一种或一种以上的混合物；步骤（9)中干燥温度为25～50℃；步骤（9)中打浆温度为10～30℃。

10.根据根据权利要求1的硼替佐米制备方法，其特征在于：步骤如下：

（1)（1S,3R,5S)-蒎烷二醇-3-甲基丙烷-1-硼酸酯的制备

向反应瓶中加入99g异丁基硼酸，150g(+)-蒎烷二醇，干燥正己烷1500ml，加热回流反应5.5h，反应停止后降至室温，用水洗涤2次，饱和食盐水洗。无水硫酸钠搅拌干燥过夜后过滤，滤液减压浓缩得到205g（1S,3R,5S)-蒎烷二醇-3-甲基丙烷-1-硼酸酯；

（2)（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-1-氯-3-甲基丁烷-1-硼酸酯的制备

氮气保护下，向四颈瓶中加入205g（1S,3R,5S)-蒎烷二醇-3-甲基丙烷-1-硼酸酯，无水四氢呋喃1500ml，无水二氯甲烷3510ml，降温至-58℃，氮气保护下加入LDA溶液，滴毕保温30min，40min内加入无水ZnCl₂的无水THF溶液保温2h，加入10%氯化铵水溶液1500ml，缓慢升至室温，搅拌30min。加入7500ml石油醚分液萃取，有机相用质量分数5%的稀硫酸溶液1500ml洗涤，饱和氯化铵2000ml洗，水2000ml洗，饱和食盐水2000ml洗涤，加入无水硫酸钠搅拌干燥过夜，滤液减压浓缩得到277g（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-1-氯-3-甲基丁烷-1-硼酸酯；

（3)（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-1-六甲基硅基氨基-3-甲基丁烷-1-硼酸酯的制备

氮气保护下，向三颈瓶中加入277g（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-1-氯-3-甲基丁烷-1-硼酸酯，无水四氢呋喃1590ml，降温至-58℃，氮气保护下加入六甲基二硅基胺基锂LHMDS溶液，滴毕保温20min，缓慢升至室温过夜反应，减压浓缩，浓缩物溶于干燥正己烷6330ml中，室温搅拌5h。硅藻土抽滤，正己烷洗涤3次，滤液减压浓缩得330g（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-1-六甲基硅基氨基-3-甲基丁烷-1-硼酸酯；

（4)（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-1-三氟乙酸铵-3-甲基丁烷-1-硼酸酯的制备

向反应瓶中加入330g（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-1-六甲基硅基氨基-3-甲基丁烷-1-硼酸酯，异丙醚2000ml，冷至-10℃，-20℃～-15℃下滴加280g三氟乙酸,滴完后5℃～10℃搅拌3h，反应结束后，抽滤，异丙醚330ml洗涤，30℃真空干燥得180g（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-1-三氟乙酸铵-3-甲基丁烷-1-硼酸酯；

（5)（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-N-叔丁氧羰基-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸-硼酸酯

（6)依次将180g（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-1-三氟乙酸铵-3-甲基丁烷-1-硼酸酯、140gTBTU、116g N-BOC-L-苯基丙氨酸和二氯甲烷1.6L加到一起后充氮保护，降温到-20℃～-15℃,缓慢滴加154g N,N-二异丙基乙胺，加毕，-15℃～-10℃搅拌2～2.5小时，随后用水洗涤2次，每次1.6L、1%的磷酸溶液2次，每次1.6L、2%碳酸钾溶液2次，每次1.6L，饱和氯化钠溶液1.6L洗涤1次，有机层加入400g无水硫酸钠干燥，过滤，二氯甲烷洗涤，滤液真空下除去有机溶剂至干，得240g（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-N-叔丁氧羰基-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸-硼酸酯；

（7)（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸酯-盐酸盐的制备

将240g（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-N-叔丁氧羰基-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸-硼酸酯和二氯甲烷1480ml混合降温至0℃，搅拌下通入HCl气体，直到反应结束，40℃浓缩至干，加入正庚烷1.6L，开启搅拌，控制温度25℃以下搅拌30～35分钟，过滤，得滤饼，滤饼再用正庚烷1.6L溶液打浆洗涤一次，过滤，滤饼30～40℃真空干燥，得140g（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸酯-盐酸盐；

（8)（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-N-（2-吡嗪羰基)-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸酯的制备

依次将140g（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸酯-盐酸盐、43.5g吡嗪-2羧酸、112g TBTU和二氯甲烷1400ml加入一起后充氮保护，降温到-15℃～10℃，缓慢滴加140g N,N-二异丙基乙胺，加毕，20℃～30℃搅拌过夜，随后用水洗涤2次每次1.4L、1%的磷酸溶液2次每次1.4L、2%碳酸钾溶液2次每次1.4L和饱和氯化钠溶液1.4L洗涤1次，有机层加入300g无水硫酸钠干燥，过滤，二氯甲烷200ml洗涤，滤液真空下除去有机溶剂至干，得180g（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-N-（2-吡嗪羰基)-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸酯；

（9)硼替佐米粗品的制备

依次将180g（1S,2R,3R,5S)-蒎烷二醇-N-（2-吡嗪羰基)-L-苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸酯、甲醇1100ml、正庚烷1100ml和67g异丁基硼酸加入一起后充氮保护，降温到-5℃～0℃，加入1N的840ml盐酸，加完后体系的温度升到30～40℃，搅拌反应17～18小时，停止搅拌，静置分层，弃去正庚烷层。加入正庚烷1000ml搅拌分层，水层再用正庚烷重复上次操作一次；水层加入乙酸乙酯1000ml、2mol/L氢氧化钠溶液840ml、搅拌5分钟，静置分层，弃乙酸乙酯层。水层加入乙酸乙酯1000ml,搅拌分层，取水层，加入乙酸乙酯1000ml、浓盐酸74ml，搅拌5～10分钟，静置分层，收集乙酸乙酯层，水层再用乙酸乙酯重复提取两次；合并乙酸乙酯层，加入饱和氯化钠溶液1000ml搅拌分层，二氯甲烷层加入无水硫酸钠200g搅拌干燥半小时，过滤，乙酸乙酯200ml洗涤干燥，合并滤液，减压浓缩至干，将丙酮600ml，加入到1L反应瓶中，开启搅拌，加入浓缩后产品，25℃打浆搅拌3h，过滤，滤饼用丙酮200ml洗涤，滤饼30～40℃真空干燥，得80g硼替佐米粗品；

（9)硼替佐米的精制

加热乙酸乙酯至60℃，加入80g硼替佐米粗品，至完全溶解，加入活性炭2g，搅拌2分钟后趁热过滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤，滤液在搅拌器搅拌下自然降至室温，搅拌至大量固体析出后，再继续打浆3小时，过滤、滤饼用乙酸乙酯洗涤，滤饼30～40℃真空干燥，得50g硼替佐米终产品。