CN103483426A

CN103483426A - 一种氮杂环己肽的制备方法

Info

Publication number: CN103483426A
Application number: CN201210195654.5A
Authority: CN
Inventors: 袁建栋
Original assignee: Borui Bio-Medical Technology (jiangsu) Co Ltd
Current assignee: Borui Bio-Medical Technology (jiangsu) Co Ltd
Priority date: 2012-06-14
Filing date: 2012-06-14
Publication date: 2014-01-01

Abstract

本发明涉及一种氮杂环己肽或其药学上可接受的盐的制备方法，是通过式（V）所示的中间体制备得到的。所述的方法具有收率高，纯度高，适合工业化生产的优势。

Description

一种氮杂环己肽的制备方法

技术领域

本发明涉及一种氮杂环己肽或其药学上可接受的盐的制备方法。

背景技术

卡泊芬净（Caspofugin）是由Glarea Lozoyensis发酵产物合成而来的半合成脂肽(echinocandin)化合物，能够抑制许多丝状真菌和酵母细胞壁中的基本成分——β（1,3）-D-葡聚糖的合成，对许多种致病性曲霉菌属和念珠菌属真菌具有抗菌活性。

其结构式如下式I所示：

。

US5378804公开了以纽莫康定B0（Pneumocandin B0）为原料，通过五步反应合成卡泊芬净的方法，该方法合成的化合物无显著的立体选择性，获得卡泊芬净的产率也仅有6.3%。

CN1127515C公开了以纽莫康定B0（Pneumocandin B0）为原料，经过酰胺还原，与苯硫酚反应，再和乙二胺反应的方法制备卡泊芬净的方法，该方法相较于早期的合成方法缩短了反应步骤，然而苯硫酚是高毒性物质，小鼠的LD₅₀小于50mg/kg，生产过程中须采用特殊措施防范，无形中增加了生产成本，不适合于工业化生产。

因此，需要一种能够提高产率，降低成本，降低人员伤害，适合工业化生产卡泊芬净及其药用盐的方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种如式I所示的氮杂环己肽或其可接受的药用盐的制备方法，以克服现有技术中存在的卡泊芬净工业化生产困难的缺陷：

。

所述的方法包括步骤：

（1）还原下式化合物II：

得到下述式III所示的化合物：

。

所述的还原反应可以用硼烷化合物或金属硼化物为还原剂，在四氢呋喃、二甲硫醚、二苯基硫醚或1,4-氧硫杂环己烷溶剂中进行，所述的硼烷包括例如甲硼烷或BH₂Cl；所述的金属硼化物包括例如NaBH₄、KBH₄等。优选使用甲硼烷和二甲硫醚、二苄基硫醚、二苯基硫醚、四氢呋喃或1,4-氧硫杂环己烷的络合物，或BH₂Cl与二甲硫醚的络合物。

所述的式II化合物可以通过本领域熟知的方法制备，例如，采用US5021341中公开的方法：在富含作为主要碳源的甘露醇的营养基中培养Zalerion arboricola ATCC 20868获得。

（2）将式III所示的化合物与下述式IV所示的化合物反应制备获得式V所示的化合物：

；

。

其中所述的R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆相同或不同，分别选自H；C₁-C₆的烷基，优选C₁-C₄的烷基；芳基或任意取代的芳基，优选苯基、C₁-C₆的烷基取代的苯基、或卤素取代的苯基；卤素，优选Cl或Br；条件是R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆不同时为H。优选的式IV所示的化合物是对甲基苯硫酚、邻甲基苯硫酚、间甲基苯硫酚、对乙基苯硫酚、对丙基苯硫酚、4-苯基苯硫酚、2-苯基苯硫酚、2,4,6-三苯基苯硫酚。本发明以式IV所示的取代苯硫酚为原料，毒性显著低于苯硫酚，例如，对甲基苯硫酚的小鼠LD50为2.5g/kg，毒性远远低于苯硫酚。

更重要的是，本发明人意外的发现，苯硫酚为原料制备的硫醚化合物难以固化，即便通过柱层析，也难以从溶剂中直接析出固体，只能抽干溶剂得到泡沫状固体形式；但是当以取代苯硫酚为原料时，制备得到的中间体（式V化合物）容易固化和结晶，不需要经过柱层析，可直接从反应液中析出固体粗品，只需简单的重结晶过程，即可获得纯的中间体式V化合物；且得到的中间体具有更高的稳定性，更利于中间体和终产品的质量控制，利于工业化大生产。

所述的步骤（2）是在酸性条件下，将式III化合物与式IV化合物反应，所述的酸性条件是指任何中等强度的酸，例如包括但不限于甲苯磺酸、甲磺酸、樟脑磺酸、三氟醋酸或三氟甲磺酸；优选三氟醋酸或三氟甲磺酸。所述的反应溶剂为乙腈。乙腈中酸的浓度（重量/体积）为5-25%，优选7-15%。

所述的式IV化合物的使用量是1-5倍当量，优选2-3倍当量。

所述的反应温度-15℃至15℃，优选-10℃至0℃。

（3）将式V所示的化合物与1,2-乙二胺反应，制备获得式I所示的化合物。

所述的反应在-10℃至30℃进行，反应0.5-6小时；所述的反应在合适的溶剂，如甲醇、乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氟乙醇、二氯甲烷乙腈或水中，或任意两种溶剂的混合溶剂中进行，例如甲醇和水的混合溶剂，或乙醇和水的混合溶剂。

制备所得的卡泊芬净可进一步通过本领域常规方法和有机酸或无机酸成盐，制备得到式I化合物药学上可接受的盐，所述的酸包括盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸、顺丁烯二酸、柠檬酸、醋酸、琥珀酸、乙二酸、苹果酸、谷氨酸等，优选和醋酸反应制备形成卡泊芬净的醋酸盐。

本发明所述的制备卡泊芬净的方法可以由下述路线表示：

具体实施例

在下面的实施例中将对本发明进行更为详细的说明，但实施例并不用于限制本发明的范围。实施例中所有原料、试剂和设备除非另有说明，均可通过市售购买获得。所有比率、百分比、比例或份数是指按重量计算。

实施例1 式III所示的化合物的制备

。

将式II所示的化合物（100g）加入干燥的四氢呋喃（3L）中，经3A分子筛回流，干燥至水分小于10mol%，补充四氢呋喃至原体积，冰浴冷却。

缓慢滴加硼烷二甲硫醚络合物（68.6g），保持0℃下滴加。滴加完毕后，在冰浴条件下反应至完全（约4小时）。冰浴冷却混合物至0℃以下，缓慢滴加2N的盐酸溶液（200ml），搅拌2小时。然后通过反相色谱（C18）柱分离纯化（1:4的乙腈/水洗脱），收集合适的馏分，冷冻干燥得式III化合物的盐酸盐，64.6g，收率75%。

实施例2 式V-1所示的化合物及卡泊芬净的制备

。

（a）氮气保护下，将乙腈（600mL）冷却至-5℃，维持溶剂温度，将式III化合物（10g）和对甲基苯硫酚（3.2g，3倍当量加入），维持反应液温度不超过-10℃，加入三氟醋酸（48g，32.7mL），在-15℃至0℃条件下反应至反应完全（约2.5小时），缓缓加入冰水溶液（500ml），产生大量沉淀，过滤，甲醇重结晶，干燥，得11.2g产物（式V化合物的三氟醋酸盐），收率92.5%，HPLC纯度98%， ee值>98%。MS（ESI） 1156.4（M+H⁺）。

（b）室温条件下，将步骤（a）得到的式V-1化合物的三氟醋酸盐用100mL甲醇溶解，室温条件下缓慢滴加1,2-乙二胺（40mL），室温反应至完全。加入醋酸淬灭反应，水洗，调节PH至5-6，减压浓缩，析出固体，得卡泊芬净醋酸盐粗品，乙酸乙酯重结晶，得产品10.2g，收率95%，HPLC纯度99%，ee值>99%。

实施例3式V-2所示的化合物及卡泊芬净的制备

。

（a）氮气保护下，将乙腈（600mL）冷却至-5℃，维持溶剂温度，将式III化合物（10g）和邻甲基苯硫酚（3.2g，3倍当量加入），维持反应液温度不超过-10℃，加入三氟醋酸（48g，32.7mL），在-15℃至0℃条件下反应至反应完全（约2.5小时），缓缓加入冰水溶液（500ml），产生大量沉淀，过滤，甲醇重结晶，干燥，得11g产物（式V化合物的三氟醋酸盐），收率91.2%，HPLC纯度97.6%， ee值>98%。MS（ESI） 1156.4（M+H⁺）。

（b）室温条件下，将步骤（a）得到的式V-2化合物的三氟醋酸盐用100mL甲醇溶解，室温条件下缓慢滴加1,2-乙二胺（40mL），室温反应至完全。加入醋酸淬灭反应，水洗，调节PH至5-6，减压浓缩，析出固体，得卡泊芬净醋酸盐粗品，乙酸乙酯重结晶，的产品10g，收率93%，HPLC纯度99%，ee值>99%。

实施例4式V-3所示的化合物及卡泊芬净的制备

。

以对苯基苯硫酚为原料，采用实施例2的方法制备式V-3的化合物，HPLC纯度98.5%，ee值>98%。MS（ESI） 1218.6（M+H⁺）。进一步制备卡泊芬净醋酸盐，收率94.3%，HPLC纯度99%，ee值>99%。

实施例5式V-4所示的化合物及卡泊芬净的制备

。

以对乙基苯硫酚为原料，采用实施例2的方法制备式V-4的化合物，HPLC纯度98.3 %，ee值>98%。MS（ESI） 1170.6（M+H⁺）。进一步制备卡泊芬净醋酸盐，收率95.2%，HPLC纯度99%，ee值>99%。

实施例6 式V系列化合物的稳定性试验

实验条件：以苯硫醚中间体（式V-0）为对照（按照CN1127515C方法制备，0天时，HPLV纯度98.3%，ee93%）将化合物开口置于40℃下，空气湿度约为65%，放置3个月后，测定样品的含量、ee值。

。

3个月后稳定性试验结果为：

Claims

1.一种如式（I）所示的氮杂环己肽或其可药用的盐的制备方法，

所述的方法包括步骤：

还原下式化合物（II）：

,

得到下述式（III）所示的化合物：

;

将式（III）所示的化合物与下述式（IV）所示的化合物反应制备获得式（V）所示的化合物：

；

其中所述的R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆相同或不同，分别选自H，C₁-C₆的烷基，芳基或任意取代的芳基，或卤素；条件是R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆不同时为H；

将式（V）所示的化合物与1,2-乙二胺反应，制备获得式（I）所示的化合物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆相同或不同，分别选自H，C₁-C₄的烷基，芳基，芳基取代的芳基，或烷基取代的芳基；条件是R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆不同时为H。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的式（IV）化合物选自：对甲基苯硫酚、邻甲基苯硫酚、间甲基苯硫酚、对乙基苯硫酚、对丙基苯硫酚、4-苯基苯硫酚、2-苯基苯硫酚、或2,4,6-三苯基苯硫酚。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）所述的还原反应是以硼烷化合物或金属硼化物为还原剂。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤（1）所述的还原反应是以甲硼烷与二甲硫醚、二苄基硫醚、二苯基硫醚、四氢呋喃或1,4-氧硫杂环己烷的络合物，或BH₂Cl与二甲硫醚的络合物为还原剂。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的步骤（2）反应溶剂为乙腈。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的步骤（3）是在-10℃至30℃的温度下，在选自甲醇、乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氟乙醇、二氯甲烷乙腈或水中，或任意两种溶剂的混合溶剂中进行。

8.一种式（V）所示的化合物或其盐：

其中所述的R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆相同或不同，分别选自H，C₁-C₆的烷基，芳基或任意取代的芳基，或卤素；条件是R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆不同时为H。

9.根据权利要求8所述的化合物或其盐，其特性在于，所述的R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆相同或不同，分别选自H，C₁-C₄的烷基，芳基，芳基取代的芳基，或烷基取代的芳基；条件是R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆不同时为H。

10.根据权利要求9所述的化合物或其盐，是指：

；

；

；

；

或

所示的化合物或其盐。