CN103471896A - 革兰染色液质控品制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及生物医疗技术领域，特别是一种革兰染色液质控品制备方法，包含以下步骤：第一步，将革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌2株标准菌株分别装在2支试管中，放在冰箱中冷冻、干燥保存；第二步，从冰箱中取出该2株标准菌株，分别加入生理盐水，将该革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌溶解，制备成菌悬液；第三步，向该菌悬液中加入无菌生理盐水；然后，分别向该菌悬液中加入2株标准菌株，放在震荡器上混匀；第四步，取出该混匀后的菌悬液，稀释，然后滴在玻片上；第五步，将该玻片放在室温下自然干燥；第六步，将干燥的该玻片涂面朝上，放在酒精灯火焰上来回通过，固定菌膜。本发明具有节省时间、操作简单、提高了工作人员的工作效率，能够检测染色液的质量、对工作人员起到监督作用的特点。

Description

革兰染色液质控品制备方法
技术领域
    本发明属于生物医疗技术领域，特别涉及革兰染色液质控品制备方法。
背景技术
革兰染色法是细菌学中很重要的鉴别染色法，1884年由丹麦医师创立。细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液煤染后，用酒精脱色，在一定条件下，有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类：不被脱色的为革兰氏阳性菌、脱色的为革兰氏阴性菌。为观察方便，脱色后再用一种红色染料进行复染，阳性菌仍为紫色，阴性菌则被染上红色。
革兰氏染色法一般包括：初染、媒染、脱色、复染四个步骤，具体操作方法是：细菌涂片标本的制作和固定，用草酸铵结晶紫染1分钟后水洗；加碘液覆盖涂面染1分钟后水洗，并用吸水纸吸去水分；加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，30秒后水洗，吸去水分；稀番红染色液或沙黄染10秒后，自来水冲洗，干燥，镜检。
革兰染色四步法效果很好，但操作比较复杂，工作人员每操作一次就要做一次细菌涂片标本，浪费时间，并且工作效率低，对染色液质量、染色时间长短、工作人员操作技术熟练程度都有很高的要求，但是目前市场没有任何一款预先制好的细菌涂片标本，供工作人员工作时直接拿来使用。
因此，生物医疗技术领域急需一种节省时间、操作简单、提高工作人员工作效率、能够检测染色液的质量、对工作人员起到监督作用的革兰染色液质控品制备方法。
发明内容
本发明的革兰染色液质控品制备方法，技术方案如下：
革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，包含以下步骤：
第一步，将革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌2株标准菌株分别装在2支试管中，放在冰箱中冷冻、干燥保存；
第二步，从冰箱中取出该2株标准菌株，分别加入生理盐水，将该革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌溶解，制备成菌悬液；
第三步，向该菌悬液中加入无菌生理盐水；然后，分别向该菌悬液中加入2株标准菌株，放在震荡器上混匀；
第四步，取出该混匀后的菌悬液，稀释，然后滴在玻片上；
第五步，将该玻片放在室温下自然干燥；
第六步，将干燥的该玻片涂面朝上，放在酒精灯火焰上来回通过，固定菌膜。
如上的革兰染色液质控品制备方法，其中，该革兰氏阳性菌为1种菌。
如上的革兰染色液质控品制备方法，其中，该革兰氏阳性菌为2种以上菌的混合物。
如上的革兰染色液质控品制备方法，其中，该革兰氏阴性菌为1种菌。
如上的革兰染色液质控品制备方法，其中，该革兰氏阴性菌为2种以上菌的混合物。
如上的革兰染色液质控品制备方法，其中，该革兰氏阳性菌为球菌。
如上的革兰染色液质控品制备方法，其中，该革兰氏阳性菌为杆菌。
如上的革兰染色液质控品制备方法，其中，该革兰氏阳性菌为球菌和杆菌的混合物。
如上的革兰染色液质控品制备方法，其中，该革兰氏阴性菌为球菌或者杆菌。
如上的革兰染色液质控品制备方法，其中，该革兰氏阴性菌为球菌和杆菌的混合物。     
本发明的有益效果是：
1．通过制备好的革兰染色液质控品与新制作的涂片同时进行初染、媒染、脱色、复染的过程，可以检测出染色液是否过期。
2．通过制备好的革兰染色液质控品与新制作的涂片同时进行初染、媒染、脱色、复染的过程，能够对操作人员的操作步骤、熟练程度进行监督和检验。
3．本发明操作简单、节省时间。
4．本发明提高了操作人员的工作效率，从而提高了经济效益，具有更加广泛的适用性。
具体实施方式
为了使本发明的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体示例，进一步阐述本发明。
本发明的具体实施步骤如下： 
第一步，将革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌分别装在2支试管中，标为试样1和试样2，放在冰箱中冷冻、干燥保存；
第二步，从冰箱中取出试样1和试样2，分别向试样1和试样2中加入生理盐水（例如0.5ml），将革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌溶解，制备成菌悬液；
第三步，重新拿取试管，标为试样3；首先，向试样3中加入无菌生理盐水，可以是加入1ml；然后，分别向试样3中加入试样1和试样2的菌悬液，例如加入0.01ml，放在震荡器上混匀；
第四步，从试样3中取出稀释后的菌悬液，例如0.1ml，滴在玻片上；
第五步，将玻片放在室温下自然干燥；
第六步，将干燥的玻片涂面朝上，放在酒精灯火焰上来回通过，例如通过三次，固定菌膜。
革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都为1种菌或2种以上菌的混合物。
革兰氏阳性菌为球菌或杆菌、球菌与杆菌的混合物。
革兰氏阴性菌为球菌或杆菌、球菌与杆菌的混合物。
如上对本发明的描述中，每种试剂或者成分的具体组分均可以变化。
下面举例2组具体实施例，对本发明进行详细说明：
实施例一：首先，采用大肠埃希菌作为革兰氏阴性菌，装在试管1里面，金黄色葡萄球菌作为革兰氏阳性菌，装在试管2里面，试管1与试管2都放在冰箱中冷冻、干燥保存；然后，从冰箱中取出试样1和试样2，分别向试样1和试样2中加入0.6ml生理盐水，将大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌溶解，制备成菌悬液；再重新拿取试管，标为试样3，向试样3中加入2ml无菌生理盐水，进一步地，分别向试样3中加入0.02ml试样1和试样2的菌悬液，放在震荡器上混匀；最后，从试样3中取出0.2ml稀释后的菌悬液，滴在玻片上，滴好的玻片放在室温下自然干燥，将干燥好的玻片涂面朝上，放在酒精灯火焰上来回通过4次，固定菌膜。
实施例二：首先，采用脑膜炎双球菌作为革兰氏阴性菌，装在试管1里面，炭疽杆菌作为革兰氏阳性菌，装在试管2里面，试管1与试管2都放在冰箱中冷冻、干燥保存；然后，从冰箱中取出试样1和试样2，分别向试样1和试样2中加入0.4ml生理盐水，将脑膜炎双球菌和炭疽杆菌溶解，制备成菌悬液；再重新拿取试管，标为试样3，向试样3中加入0.8ml无菌生理盐水，进一步地，分别向试样3中加入0.15ml试样1和试样2的菌悬液，放在震荡器上混匀；最后，从试样3中取出0.15ml稀释后的菌悬液，滴在玻片上，滴好的玻片放在室温下自然干燥，将干燥好的玻片涂面朝上，放在酒精灯火焰上来回通过4次，固定菌膜。
本发明的有益效果是：
1．通过制备好的革兰染色液质控品与新制作的涂片同时进行初染、媒染、脱色、复染的过程，可以检测出染色液是否过期。
2．通过制备好的革兰染色液质控品与新制作的涂片同时进行初染、媒染、脱色、复染的过程，能够对操作人员的操作步骤、熟练程度进行监督和检验。
3．本发明操作简单、节省时间。
4．本发明提高了操作人员的工作效率，从而提高了经济效益，具有更加广泛的适用性。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等同物界定。

Claims (10)

1.革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，包含以下步骤：
第一步，将革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌2株标准菌株分别装在2支试管中，放在冰箱中冷冻、干燥保存；
第二步，从冰箱中取出该2株标准菌株，分别加入生理盐水，将该革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌溶解，制备成菌悬液；
第三步，向该菌悬液中加入无菌生理盐水；然后，分别向该菌悬液中加入2株标准菌株，放在震荡器上混匀；
第四步，取出该混匀后的菌悬液，稀释，然后滴在玻片上；
第五步，将该玻片放在室温下自然干燥；
第六步，将干燥的该玻片涂面朝上，放在酒精灯火焰上来回通过，固定菌膜。
2.如权利要求1所述的革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，该革兰氏阳性菌为1种菌。
3.如权利要求1所述的革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，该革兰氏阳性菌为2种以上菌的混合物。
4.如权利要求1所述的革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，该革兰氏阴性菌为1种菌。
5.如权利要求1所述的革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，该革兰氏阴性菌为2种以上菌的混合物。
6.如权利要求1所述的革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，该革兰氏阳性菌为球菌。
7.如权利要求1所述的革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，该革兰氏阳性菌为杆菌。
8.如权利要求1所述的革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，该革兰氏阳性菌为球菌和杆菌的混合物。
9.如权利要求1所述的革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，该革兰氏阴性菌为球菌或者杆菌。
10.如权利要求1所述的革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，该革兰氏阴性菌为球菌和杆菌的混合物。
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